WO1998014062A1 - INHIBITEUR DE CROISSANCE DE $i(THIOBACILLUS THIOOXIDANS) - Google Patents

INHIBITEUR DE CROISSANCE DE $i(THIOBACILLUS THIOOXIDANS) Download PDF

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concrete
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Terunobu Maeda
Atsunori Negishi
Yasuo Nogami
Tsuyoshi Sugio
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Hazama Corporation
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    • C04B2111/00948—Uses not provided for elsewhere in C04B2111/00 for the fabrication of containers

Definitions

  • the present invention relates to a Ciobacillus chooxydans growth inhibitor, and in particular, can be used to inhibit the growth of Ciobacillus chooxydans in a sewage treatment plant and prevent deterioration of a concrete structure or a concrete-made sewer pipe which comes into contact with sewage. It relates to a growth inhibitor.
  • a growth inhibitor Conventionally, there has been a problem that concrete structures in sewage treatment facilities and the like become gypsum and deteriorate. This degradation is generally due to the widespread presence of soil and water in the water, which is caused by the oxidation of Ciobacillus spp. It has been known. It is known that, depending on the type, this Ciobacillus genus Oxidizing bacterium exists not only in parts where structures come into contact with sewage, but also in aerial structures that do not come into contact with sewage in sewage treatment plants.
  • molybdenum, molybdenum ammonium, or a mixture of molybdenum ammonium and tungsten activates the growth of Ciobacillus novels (Thiobacillus novellus), but is known to inhibit the growth of tungsten alone.
  • molybdenum (M04 + ) which is known to activate the growth of the above thionocchinores novenoles, inhibits the growth of Tiobacillus thiooxidans.
  • An object of the present invention is to provide a growth inhibitor of Ciobacillus thioxidans that can sufficiently inhibit the growth of Ciobacillus thioxidans even under acidic conditions of pH 4 or less.
  • Another object of the present invention is to be able to sufficiently inhibit Ciobacillus thioxidans by adding a small amount to a structural material such as concrete in a sewage treatment plant or the like without substantially reducing the strength or the like of the structural material itself.
  • An object of the present invention is to provide an inhibitor of growth of Ciobacillus thioxidans.
  • JP-A-4-149053 that a specific metal or a specific metal oxide insoluble in water and soluble in sulfuric acid such as nickel is directly added to concrete or the like and mixed. Proposed a method to prevent structural materials from deteriorating due to the oxidizing bacteria of the genus Ciobacillus. Nevertheless, in the case of C. CHOIX, where the growing H region is in the neutral to acidic region from 2 to 6, it is sufficient for the structural material that comes into direct contact with sewage, etc., to be maintained at a pH close to neutrality. High growth inhibitory activity, but close to a sewage treatment plant, the surface of the structural material is not in direct contact with the sewage due to the influence of air sulfide etc.
  • Ciobacillus thioxidans growth inhibitor comprising at least one selected from the group consisting of tungsten powder and a tungsten compound.
  • At least one selected from the group consisting of tungsten powder and tungsten compound, and at least one selected from the group consisting of nickel powder and nickel oxide powder are included.
  • a C. tyoxidans growth inhibitor is provided.
  • Example 1 - is a graph showing the results of measurement of the influence of N a 2 W_ ⁇ 4 ⁇ the growth of the three strains.
  • Example 4-7 NBI carried out in Example 4-7 and Comparative Example 2 - N a for 3 strains washed cells element Iou oxidation activity 2 W 0 4 shows to graph the results of the measurement of the impact of.
  • FIG. 3 is a graph showing the results of measurement of the effect of Na 2 WO 4 on the element oxidation activity of NBI-13 washed cells performed in Comparative Examples 3 to 7. 4, NBI carried out in Example 8-9 and Comparative Example 8 - is a graph showing the results of measuring the effect of N a 2 W0 4 to oxygen activity - HSO 3 of membrane protein 3 strains.
  • FIG. 5 is a graph showing the results of measuring the effect of Na 2 WO 4 on each cell performed in Examples 10 to 14 and Comparative Examples 9 to 13.
  • FIG. 6 is a graph showing the results of measuring the effect of the NBI-13 washed cells on the element oxidation activity performed in Examples 15 to 20 and Comparative Examples 14 and 15.
  • FIG. 7 is a graph showing the results obtained by measuring the effect of the NBI-3 washed cells on the elementary oxidation activity performed in Examples 21 to 24.
  • the inhibitor of the present invention is an inhibitor that inhibits the growth of Ciobacillus thioxidans, which is known to cause deterioration of structural materials such as concrete, mortar, and polymer materials in sewage treatment facilities and the like.
  • Ciobacillus thioxidans which is known to cause deterioration of structural materials such as concrete, mortar, and polymer materials in sewage treatment facilities and the like.
  • it is also effective in the case where the surface of the structural materials is under acidic conditions of pH 4 or less due to the influence of air sulfide, etc., as well as the sewage treatment facilities. ⁇ It can inhibit the growth of chooxydans and prevent deterioration of structural materials.
  • Inhibitors of the present invention tungsten powder (W); W 28 0 58 , N a 2 W0 4, C a W0 4, C a W0 4 ⁇ H 2 O, C a W0 4 '2 H 2 0, or
  • the particle size when the active ingredient of the inhibitor of the present invention is a powder is not particularly limited.
  • the active ingredient when the active ingredient is mixed with a structural material such as concrete, the growth inhibitory action can be effectively exhibited, and the structural material can be molded.
  • a particle size that is sometimes blended at a desired position in the structural material is preferable.
  • the thickness is preferably from 0.05 to 0.2 mm. If the particle size exceeds 0.2 mm, the desired growth inhibitory action may be undesirably reduced.
  • a soluble metal compound in water or an organic solvent such as N a 2 W0 4 can also Rukoto used as a solution.
  • the effective concentration of the inhibitor of the present invention is preferably l / z mo 11 or more, particularly preferably 10 to 10 or more, with respect to the growth environment of Ciobacillus thioxidans.
  • it is necessary to add 0.01 to 0.01 parts by weight of cement in concrete or mortar. It is preferred to add -0.1 parts by weight and mix and mold. In particular, even with the addition and mixing of a small amount of 0.001 to 0.01 parts by weight, a sufficient growth inhibitory effect can be obtained, and the effect is remarkably maintained as compared with the conventional coating using a corrosion-resistant material. Can be done.
  • the inhibitor of the present invention may further contain at least one selected from the group consisting of nickel powder and nickel oxide powder. By containing these, the growth inhibition of C. cholesterol near neutrality can be improved.
  • the particle size of the nickel powder and the nickel oxide powder is not particularly limited, but is not limited to 0.1. It is preferably from 0.05 to 0.2 mm. These content ratios are preferably selected from the group consisting of tungsten powders and tungsten compounds. The content ratio of the tungsten content: nickel powder and / or nickel oxide powder is in the range of 0.1 to 1.0 by weight. .
  • the inhibitor of the present invention can be compounded in a concrete or the like by, for example, mixing a desired amount in a concrete composition and molding and curing by a known method.
  • the inhibitor raw material is a powder
  • it can be easily and evenly mixed into the concrete by a centrifugal molding method.
  • This centrifugal molding method can be performed in the same manner as a known method for producing a fume tube or the like, and a concrete having a desired inhibitor can be obtained by appropriately selecting the conditions for centrifugal molding. Can be.
  • the particle size of the inhibitor is important. If the particle size is too small, it may move together with the plunging water at the time of centrifugal molding and may be drained in some cases. If the particle size is too large, the particles may move to the outer surface side during centrifugal molding.
  • the inhibitor of the present invention can sufficiently inhibit the growth of Ciobacillus thioxidans even under acidic conditions of pH 4 or less.
  • the growth of Ciobacillus choxoxidans can be sufficiently inhibited for a long period of time, and the strength of the structural materials themselves can be substantially reduced. Absent.
  • Examples 1-3 and Comparative Example 1 Chio sulfate isocyanatomethyl Li um 0.2%, 0.03% yeast extract, (NH 4) 2 S 0 4 0.3%, M g S O4- 7 H 2 0 0.05%, K 2 HP 0 4 0.05%, KC 1 0.01%, C a ( ⁇ 3 ) 2 ⁇ 4 H 2 O 0 ⁇ 001% inorganic thiosulfate medium (pH 7.
  • Na 2 WO 4 exhibits an excellent activity of inhibiting the growth of Tiobacillus' thioxidans under the acidic condition of pH 2.5.
  • Example 2 2 particle size 1 0-5 0 N i powder density 1 0 0 mo 1/1 and a particle size 1 0 to 2 5 mu m of W 28 0 58 powder density 1 0 0 / mol / l (Example 23) or 5 (NH 4 ) 20 with a Ni powder concentration of 10 to 50 and a particle size of 10 to 25 ⁇ NB prepared in Example 1 by adding an aqueous solution of a mixture (Example 24) with 2 W0 3 powder concentration of 100 / zmol / l
  • the I-13 strain was cultured.
  • the growth amount of the NB I-3 strain over time was measured by the absorbance at 660 ⁇ m.
  • Fig. 7 shows the results.
  • Example 27 The aqueous solution of (Example 27) was added, and the ⁇ II-3 strain prepared in Example 1 was cultured. As a result of measuring the amount of the growth of the I-3 strain over time by absorbance at 660 nm, the number of NBI-3 strains was 0 in all the examples after 30 days.

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Description

明 細 書
チ ォバ チルス · チ ォォ キ シ ダ ン ス 生育阻害剤
枝術分野
本発明は、 チォバチルス · チォォキシダンス生育阻害剤に関し、 特 に、 下水処理施設におけるチォバチルス · チォォキシダンスの生育を 阻害して、 コンク リート構造物又は下水と接触するコンク リート製下 水管等の劣化防止に利用できる生育阻害剤に関する。 従来から下水処理施設等におけるコンク リート構造物が石膏化して 劣化することが問題となっている。 この劣化は、 一般に広く土壌 ' 水 中に存在し、 ィォゥ化合物の酸化と二酸化炭素を同化して成長するチ ォバチルス属ィォゥ酸化細菌が、 硫化水素を酸化し硫酸を生成するの が原因であることが知られている。 このチォバチルス属ィォゥ酸化細 菌は、 その種類によって、 構造物が下水と接触する部分だけでなく、 下水処理場の下水と接触しない気中の構造物にも存在することが知ら れている。
このよ うな構造物の劣化を防止する方法と しては、 従来から種々提 案がなされているが、 実際に実施されているのは、 構造物を耐蝕材料 でコーティングする方法が主流である。 しかし、 耐蝕材料によるコー ティングでは、 ピンホールや傷に弱く、 耐久性に問題があり、 しかも 小口径管の継手部等へのコーティングが困難となる。 また、 コス ト的 にも必ずしも有利とは言えない。
そこで、 耐蝕材料を構造物の表面にコーティングするのではなく、 二ッケル等の水に不溶性で硫酸に可溶性の特定の金属又は特定の金属 酸化物をコンク リ一ト等に直接添加混合することによって、 チォバチ ルス属ィォゥ酸化細菌による構造材の劣化を防止しうる方法 （特開平 4— 1 4 9 0 5 3号公報） が提案されている。 この方法は、 ニッケル 等がィォゥ酸化細菌のィォゥ酸化活性、 呼吸、 炭酸ガス固定活性を中 性付近において完全に防止し、 ィォゥ酸化細菌による劣化を十分に防 止できる優れた方法である。
しかし、 二ッケル等をコンク リートに配合して実際にィォゥ酸化細 菌の生育を阻害しコンク リートの劣化を防止するには、 セメント 1 0 0重量部に対してニッケル 0. 1重量部程度が配合されているのが現 状であり、 より少ない量の混合で優れたィォゥ酸化細菌の生育阻害効 果を示す阻害剤の開発が望まれている。
また、 モリ ブデン、 モリ ブデンアンモニゥム、 又はモルブデンアン モニゥムと タングステンとの混合物が、 チォバチルス 'ノベルス（Thio bacillus novellus)の生育を活性化するが、 タングステン単独では、 生育を阻害することが知られている（Journal of Bacteriology,第 153 卷，第 2号，（1983) William M.et al. "Sulfite Oxidase Activity in Th iobacillus novellus"p.941— 944)。 一方、 前記チオノくチノレス ·ノベノレ スの生育を活性化することが知られるモリブデン（M 0 4 + )が、 チォバ チルス'チォォキシダンス（Thiobacillus thiooxidans)に対しては逆 に生育を阻害すること も知られている（Chmical Abstracts,第 95卷，第 1号（July 6, 1981)pl27 (1081a))。 このよ うに、 同じチォバチスル属 ィォゥ酸化細菌であっても生育阻害作用は異なっている。 従って、 通 常、 チォバチルス'ノベルス等の生育 p H領域が 6〜 8の中性付近で あるィォゥ酸化細菌に対して効果が認められた生育阻害剤を、 チォバ チルス'ノベルス等が殆ど生育していない p H 2〜 6の酸性領域に使 用することはなく、 更に、 チォバチルス.チォォキシダンス等の生育 p H領域が 2〜 6のチォバチルス属ィォゥ酸化細菌に対して、 前記チ ォバチルス.ノベルスの生育阻害作用を示す物質が同じく生育阻害作 用を示すとは考えられていない。
即ち、 従来提案されている生育阻害剤が全てのチォバチルス属ィォ ゥ酸化細菌に対して有効に作用するとは限らないのが実情である。 発明の開示
本発明の目的は、 p H 4以下の酸性条件下においてもチォバチルス' チォォキシダンスの生育を十分阻害できるチォバチルス'チォォキシ ダンス生育阻害剤を提供することにある。
本発明の別の目的は、 下水処理施設等におけるコンク リート等の構 造材に微量配合することによりチォバチルス'チォォキシダンスを十 分阻害でき、 構造材自体の強度等を実質的に低下させることのないチ ォバチルス'チォォキシダンス生育阻害剤を提供することにある。
本発明者は、 特開平 4 一 1 4 9 0 5 3号公報において、 ニッケル等 の水に不溶性で硫酸に可溶性の特定の金属又は特定の金属酸化物をコ ンク リート等に直接添加混合することによって、 チォバチルス属ィォ ゥ酸化細菌による構造材の劣化を防止しうる方法を提案した。 しかし ながら、 生育 H領域が 2〜 6の中性付近から酸性領域であるチォバ チルス ·チォォキシダンスにおいては、 直接下水等と接触するよ うな 構造材が中性に近い p Hに保たれた箇所で十分な生育阻害活性が得ら れるが、 下水処理施設に近接し、 気中の硫化水素等の影響によって、 構造材表面が下水と直接接触していない p H 4以下の酸性となった環 境下では、 同じチォバチルス ·チォォキシダンスに対してであっても 生育阻害活性が低下することを確認した。 このよ うな同一細菌に対し てもその p H環境の相違により生育阻害効果が異なる理由は明らかで はないが、 前に提案したニッケル等は、 直接細菌自体に作用している ものではなく、 細菌の酵素と結合して生育阻害活性を発揮しているた めに、 酸性側では前記酵素との結合が十分でなく生育阻害活性が低下 するものと考えられる。 そこで、 酸性下におけるコンク リート等の劣 化原因であるチォバチルス ·チォォキシダンスに対して、 p H 4以下 の酸性下においても十分な生育阻害効果を示す物質を鋭意研究した結 果、 タングステン及びタングステン化合物が、 酸性領域に生育してい るチォバチルス ·チォォキシダンスに対して有効に生育阻害作用を示 すことを見い出し本発明を完成するに至った。
本発明によれば、 タングステン粉末及びタングステン化合物からな る群より選択される少なく と も 1種を含むチォバチルス'チォォキシ ダンス生育阻害剤が提供される。
また、 本発明によれば、 タングステン粉末及びタングステン化合物 からなる群より選択される少なく と も 1種と、 ニッケル粉末及びニッ ケル酸化物粉末からなる群より選択される少なく と も 1種とを含むチ ォバチルス.チォォキシダンス生育阻害剤が提供される。
i^i ffiの簡 な説明
図 1は、 実施例 1 〜 3及び比較例 1で行った N B I - 3株の生育に 对する N a 2 W〇4の影響を測定した結果を示すグラフである。
図 2は、 実施例 4〜 7及び比較例 2で行った N B I — 3株洗浄細胞 の元素ィォゥ酸化活性に対する N a 2 W 0 4の影響を測定した結果を示 すグラフである。
図 3は、 比較例 3〜 7で行った N B I 一 3株洗浄細胞の元素ィォゥ 酸化活性に対する N a 2 W O 4の影響を測定した結果を示すグラフであ る。 図 4は、 実施例 8〜 9及び比較例 8で行った N B I ― 3株の膜蛋白 の H S O 3—酸素活性に対する N a 2W04の影響を測定した結果を示す グラフである。
図 5は、 実施例 1 0〜 1 4及び比較例 9〜 1 3で行った各細胞に対 する N a 2WO4の影響を測定した結果を示すグラフである。
図 6は、 実施例 1 5〜 2 0及び比較例 1 4及び 1 5で行なった N B I 一 3株洗浄細胞の元素ィォゥ酸化活性に対する影響を測定した結果 を示すグラフである。
図 7は、 実施例 2 1〜 2 4で行なった N B I — 3株洗浄細胞の元素 ィォゥ酸化活性に対する影響を測定した結果を示すグラフである。
発明の好ま しい実施の餱搽
以下本発明を更に詳細に説明する。
本発明の阻害剤は、 下水処理施設等におけるコンク リート、 モルタ ル又は高分子材料等の構造材の劣化の原因となることが知られている、 チォバチルス'チォォキシダンスの生育を阻害する阻害剤であって、 下水に直接接触する構造材はもちろんのこと、 下水処理施設に近接し、 気中の硫化水素等の影響によって、 構造材の表面が p H 4以下の酸性 下という条件においても有効にチォバチルス ·チォォキシダンスの生 育を阻害し、 構造材の劣化を防止することができる。
本発明の阻害剤は、 タングステン粉末（W) ； W28058、 N a 2W04、 C a W04、 C a W04 · H2 O , C a W04 ' 2 H20、 又は
5 (ΝΗ4)20 · 1 2 W03 · n H20 (n = 0〜 5 ) 等のタングステン 化合物の少なく と も 1種を有効成分と して含有する。 この有効成分は、 酸性下、 特に p H 4以下の酸性下において、 チォバチルス *チォォキ シダンスの酵素と結合し、 細菌のィォゥの酸化、 呼吸、 炭酸ガスの固 定を阻害することによって、 チォバチルス ·チォォキシダンスの生育 を阻害すると考えられるが、 細菌の酵素とこれらの有効成分とがどの ように結合するかは不明である。
本発明の阻害剤の有効成分が粉末の場合の粒径は特に限定されない が、 例えばコンク リート等の構造材に配合した際に、 生育阻害作用を 有効に発揮させることができ、 且つ構造材成形時に構造材内の所望位 置に配合される粒径が好ましい。 具体的には 0. 0 0 5〜 0. 2 mm が望ましい。 前記粒径が 0. 2 mmを超える場合には所望の生育阻害 作用が低下する恐れがあるので好ましく ない。 また、 N a 2W04等の 水や有機溶媒に可溶な金属化合物を用いる場合には、 溶液と して用い ること もできる。
本発明の阻害剤の有効濃度は、 チォバチルス'チォォキシダンスの 生育環境に対して、 l /z m o 1 1以上、 特に 1 0〜： Ι Ο Ο μ ΐη ο 1 / 1 が好ましい。 例えば、 本発明の阻害剤を用いて、 コンク リート及 びモルタルのチォバチルス ·チォォキシダンスによる劣化を防止する には、 コンク リート又はモルタル中のセメント 1 0 0重量部に対して、 0. 0 0 0 1〜 0. 1重量部添加混合して成形するのが好ましい。 特 に 0. 0 0 0 1〜 0. 0 1重量部という少量の添加混合でも、 十分に 生育阻害効果が得られると共に、 従来の耐蝕材料によるコ ーティング に比して、 顕著にその効果を持続させることができる。
本発明の阻害剤には、 更にニッケル粉末及び二ッケル酸化物粉末か らなる群より選択される少なく とも 1種を含有させること もできる。 これらを含有させることにより、 中性付近におけるチォバチルス ·チ ォォキシダンスの生育阻害を向上させることができる。 ニッケル粉末 及び二ッケル酸化物粉末の粒径は特に限定されるものではないが、 0. 0 0 5〜0 . 2 m mが望ましい。 これらの含有割合は、 タングステン 粉末及びタングステン化合物からなる群より選択されるタングステン 含有物 ： 二ッケル粉末及び/又はニッケル酸化物粉末が重量比で 0 . 1〜1 . 0の範囲となる割合が望ましい。
本発明の阻害剤をコンク リート等に配合するには、 例えばコンク リ ート組成物中に所望量配合し、 公知の方法で成形、 硬化させる方法に より行う ことができる。 特に阻害剤原材料が粉末の場合には、 遠心成 形法によっても容易に、 且つ均等にコンク リート中に配合させること ができる。 この遠心成形法は、 公知のヒューム管等を作製する際の方 法と同様に行うことができ、 遠心成形の条件を適宜選択することによ り所望の阻害剤を有するコンク リー トを得ることができる。 また遠心 成形法においては、 阻害剤の粒径が重要であって、 粒子径が小さすぎ ると遠心成形時のプリ一ジング水と共に移動し、 場合によっては排水 される恐れがあり、 一方粒子径が大きすぎると遠心成形時に外面側に 移動する恐れがあるので前記好ましい粒子径の範囲で適宜選択するの が望ましい。
本発明の阻害剤は、 p H 4以下の酸性条件下においてもチォバチル ス ·チォォキシダンスの生育を十分阻害できる。 また、 下水処理施設 等におけるコンク リ一ト等の構造材に微量配合することによりチォバ チルス ·チォォキシダンスの生育を長期間にわたり十分阻害でき、 構 造材自体の強度等を実質的に低下させることがない。
実施例
以下実施例及び比較例により更に詳細に説明するが、 本発明はこれ らに限定されるものではない。
荬施例 1〜 3及び比較例 1 チォ硫酸ナト リ ウム 0.2%、 酵母エキス 0.03%、 (N H4) 2 S 04 0.3 %、 M g S O4- 7 H20 0.05%、 K2H P 04 0.05%, K C 1 0.01%、 C a (Ν Ο3) 2· 4 H2O 0 · 001 %を含むチォ硫酸無機塩培地 （ p H 7 .
0 ) 2 0 m 1 中に、 腐食コンク リート 1 . O gを接種し、 3 0 °Cの好 気条件下で保存した。 培地の p Hが 2 . 0に低下したところで、 培地 を交換しこの培養操作を 5回行った。 培養により得られたチォバチル ス'チォォキシダンスの黄色いコロニーを単離し、 この分離株を N B
1 _ 3株と した。
元素ィォゥ 1%、 (N H4) 2 S O 4 0.3%、 M g S 04· 7 H20 0.05%, K2H P O 4 0.05%, K C 1 0.01%, C a ( N O 3) 2 · 4 H 2 O 0.001% を含む元素ィォゥ無機塩培地 （ p H 2 . 5 ) 2 0 m l 中に N a 2W04 濃度 3 0 μ m o 1 / 1 (実施例 1 ) 、 3 0 0 m o l Z l (実施例 2 ) 又は Ι Ο Ο Ο μ ιη ο 1 / 1 (実施例 3 ) の水溶液を添加するか、 若し くはコン トロールと して添加せずに （比較例 1 ) Ν Β Ι — 3株の培養 を行った。 尚、 N a 2W04は、 p H 2 . 5において不溶性となってい る。 経時的な N B I ― 3株の増殖量を 6 6 0 n mの吸光度により測定 した。 結果を図 1に示す。
図 1 の結果より、 p H 2 . 5の酸性下において N a 2W04は、 優れ たチォバチルス'チォォキシダンス生育阻害活性を示すことが判る。
実 ¾例 4〜 7及び比齩例 2
マノメータ、 反応容器及び振盪装置を備えたワークブルグ検圧計の 反応槽に、 実施例 1 〜 3で培養した N B I - 3株の洗浄細胞 5 m g、 l3—ァラニン— S O 4 2一緩衝液 2 0 0 μ I ( ρ Η 3 . 0 ) 及び亜硫酸 ナト リ ウム 2 0 0 μ πι ο 1 を総容積 3 m 1 と して添加し、 更に、 N a 2W04 濃度 1 0 /z m o 1 / 1 (実施例 4 ) 、 1 0 0 /x m o \ / 1 (実施例 5 ) 、 1 0 0 0 /z m o 1 / 1 (実施例 6 ) 、 1 0 0 0 0 μ m ο 1 / 1 (実施例 7 ) の水溶液を添加するか、 若しくはコン ト口一 ルと して添加せずに （比較例 2 ) 、 経時的な酸素の吸収量を測定した。 この測定は、 センターゥエルに 0 . 2 m 1 の水酸化ナト リ ウムを入れ、 反応槽内の p Hを 3 . 0に調整しながら行った。 また、 ワークプルグ 検圧計のガス相は空気で 3 0 °Cに保持した。 結果を図 2に示す。
比較例 3 及び 4
N B I - 3株の洗浄細胞と して、 煮沸した細胞 （比較例 3 ) 若しく は洗浄しない細胞 （比較例 4 ) を用いた以外は、 比較例 2 と同様に測 定を行った。 結果を図 3に示す。
比較例 5〜 7
N a 2W04の代わりに、 2 0 0メ ッシュ以下のニッケル 1 0 0 0 μ m ο 1 / 1 (比較例 5 ) 、 Ι Ο Ο Ο Ο μ πι ο 1 / 1 (比較例 6 ) 又は 2 0 0 0 0 z m o 1 / 1 (比較例 7 ) を用いた以外は、 実施例 4〜 7 と同様に測定を行った。 結果を図 3に示す。
図 3の結果及び図 2の結果を比較すると、 N a 2W04の代わりに二 ッケルを用いた場合には、 同量の添加でチォバチルス ·チォォキシダ ンスの生育阻害効果が N a 2WO4のが極めて高いことが判る。
実施例 8〜 9及び比較例 8
マノメータ、 反応容器及び振遨装置を備えたワークプルグ検圧計の 反応槽に、 実施例 1 〜 3で培養した N B I - 3株の膜蛋白 1 m g、 M o P S /N a O H緩衝液 （ p H 7 . 0 ) 2 0 0 μ m o 1及び亜硫酸 ナト リ ウム 2 0 /z m o 1 を添加し、 更に、 N a 2W04 濃度 1 0 0 0 μ τη ο 1 / 1 (実施例 8 ) 又は 1 0 0 0 0 /z m o l / l (実施例 9 ) の水溶液を添加するか、 若しくはコン トロールと して添加せずに （比 較例 8 ) 、 経時的な酸素の吸収量を測定した。 測定は、 センタ一ゥェ ルに 0 . 2 m 1 の水酸化ナト リ ウムを入れ、 反応槽内の p Hを 7 . 0 に調整しながら行った。 また、 ワークプルグ検圧計のガス相は空気で 3 0 °Cに保持した。 結果を図 4に示す。
実施例 1 0〜 1 4及び比較例 9〜 1 3
元素ィォゥ 1%、 （N H4) 2 S O4 0.3%、 M g S 04· 7 H20 0.05%、 K 2 H P O 4 0.05 %、 K C 1 0.01%、 C a ( N O 3) 2 · 4 H 2 O 0.001 % を含む元素ィォゥ無機塩培地 （ p H 2 . 5 ) 2 O m l 中に、 水溶液と して N a 2W04 5 0 M m o 1 / 1 を添加し、 チォバチルス 'チォォキ シダンス ON106 (実施例 1 0 ) 、 チォバチルス.チォォキシダンス 0N10 7 (実施例 1 1 ) 、 チォバチルス ·チォォキシダンス IF013701 (実施例 1 2 ) 、 チォバチルス'チォォキシダンス JCM3867 (実施例 1 3 ) 又は N B I — 3株 （実施例 1 4 ) を添加するか、 若しくはコン ト ロールと して添加せずに （比較例 9〜 1 3 ) 各細胞の培養を行った。 1時間後 の各細胞の増殖量を 6 6 0 n mの吸光度により測定した。 結果を図 5 に示す。
図 5の結果より、 p H 2 . 5の酸性下において N a 2WO4は、 優れ たチォバチルス'チォォキシダンス生育阻害活性を示すことが判る。
実施例 1 5〜 2 0及び比較例 1 4及び 1 5
元素ィォゥ 1%、 （N H4) 2 S 04 0.3%、 M g S 04· 7 H20 0.05%、 K2H P 04 0·05%、 K C 1 0.01%、 C a ( N O 3) 2 ' 4 H 2 O 0.001% を含む元素ィォゥ無機塩培地 （p H 2 . 5 ) 2 0 m l 中に、 粒径 1 0 〜 5 0 μ πιのタングステン （W) 粉末濃度 1 0 0 /X m ο 1 / 1 (実施 例 1 5 ) 、 粒径 1 0〜 2 5 μ πιの C a W04 * 2 H20粉末濃度 1 0 0 μ τη o 1 / 1 (実施例 1 6 ) 、 粒径 1 0〜 2 5 mの C a W04粉末 濃度 1 0 0 z m o 1 1 (実施例 1 7 ) 、 粒径 1 0 ~ 2 5 μ mの W28058粉末濃度 1 0 0 m o 1 / 1 (実施例 1 8 ) 、 粒径 1 0〜 2 5 μ mの 5 (N H4) 20 ♦ 1 2 W03粉末濃度 1 0 0 ΠΙ Ο 1 / 1 (実 施例 1 9 ) 、 粒径 1 0〜 5 0の N i粉末濃度 Ι Ο Ο μ πι ο ΐ Ζ ΐ と粒 径 1 0〜 2 5 μ mの W28〇58粉末濃度 1 0 0 / m o l / l との混合物 (実施例 2 0 ) 又は粒径 1 0〜 5 0 μ πιの N i粉末濃度 1 0 0 m o 1 / 1 (比較例 1 4 ) の水溶液を添加する力 若しくはコン トロール と して添加せずに （比較例 1 5 ) 、 実施例 1で調整した N B I _ 3株 の培養を行った。 経時的な N B I - 3株の増殖量を 6 6 0 n mの吸光 度により測定した。 結果を図 6に示す。
図 6の結果より、 p H 2 . 5の酸性下においてタングステン及び各 種タングステン化合物は、 優れたチォバチルス'チォォキシダンス生 育阻害活性を示すことが判る。
実施例 2 1 〜 2 4
元素ィォゥ 1%、 (N H4) 2 S 04 0.3%、 M g S 04' 7 H2 O 0.05%、 K2H P 04 0.05%、 K C 1 0.01%、 C a ( N O 3) 2 ' 4 H 2 O 0.001% を含む元素ィォゥ無機塩培地 （p H 7 . 0 ) 2 0 m l 中に、 粒径 1 0 〜 2 5 mの W28058粉末濃度 1 0 0 μ m 0 1 / 1 (実施例 2 1 ) 、 粒径 1 0〜 5 0の N i粉末濃度 1 0 0 m 0 1 / 1 と粒径 1 0〜 5 0 μ mの W粉末濃度 1 0 0 / m o l Z l との混合物 （実施例 2 2 ) 、 粒 径 1 0〜 5 0の N i粉末濃度 1 0 0 m o 1 / 1 と粒径 1 0〜 2 5 μ mの W28058粉末濃度 1 0 0 / m o l / l との混合物 （実施例 2 3 ) 又は粒径 1 0〜 5 0の N i粉末濃度 1 0 0 /z m o l Z l と粒径 1 0〜 2 5 μ πιの 5 (N H4) 20 · 1 2 W03粉末濃度 1 0 0 /z m o l / l と の混合物 （実施例 2 4 ) の水溶液を添加し、 実施例 1で調整した N B I 一 3株の培養を行った。 経時的な NB I - 3株の増殖量を 6 6 0 η mの吸光度により測定した。 結果を図 7に示す。
図 7の結果より、 p H 7. 0においては、 ニッケルを含有させるこ とにより、 優れたチォバチルス ·チォォキシダンス生育阻害活性を示 すことが判る。
実施例 2 5〜 2 7
元素ィォゥ 1%、 （NH4)2 S O4 0.3%、 M g S 04· 7 H20 0.05%、 K2HP O4 0.05%、 KC 1 0.01%、 C a ( N O 3) 2 ' 4 H 2 O 0.001% を含む元素ィォゥ無機塩培地 （p H 2. 5 ) 2 0 m l 中に、 粒径 1 0 〜 5 0の N i粉末濃度 1 0 0 /X m o 1 / 1 と粒径 1 0〜 5 0 // 111の W 粉末濃度 1 0 0 μ m o 1 1 との混合物 （実施例 2 5 ) 、 粒径 1 0〜 5 0の N i粉末濃度 1 0 0 μ m o 1 / 1 と粒径 1 0〜 2 5 μ πιの W28 O 58粉末濃度 1 0 0 Z m o 1 1 との混合物 （実施例 2 6 ) 又は粒径 1 0 ~ 5 0の N i粉末濃度 1 0 0 μ ηι ο 1 / 1 と粒径 1 0〜 2 5 μ m の 5 (N H4) 20 · 1 2 W03粉末濃度 Ι Ο Ο μ πι ο ΐ Ζ ΐ との混合物
(実施例 2 7 ) の水溶液を添加し、 実施例 1で調整した Ν Β I — 3株 の培養を行った。 経時的な Ν Β I - 3株の増殖量を 6 6 0 n mの吸光 度により測定した結果、 3 0 日経過後のいずれの実施例においても N B I — 3株は 0であった。

Claims

請 求 の 範 囲
1)タングステン粉末及びタングステン化合物からなる群より選択され る少なく と も 1種を有効成分と して含むチォバチルス ·チォォキシ ダンス生育阻害剤。
2)タングステン化合物を、 W28058、 N a 2W04、 C a W04、
C a W04 ' H20、 C a W04 ' 2 H20、
5 (ΝΗ4)20 · 1 2 W03 · n H20 (n = 0〜 5 ) 及びこれらの混 合物からなる群より選択する請求の範囲 1に記載の阻害剤。
3)有効成分粉末の粒径が 0. 0 0 5〜 0. 2 mmである請求の範囲 1 に記載の生育阻害剤。
4)二ッケル粉末、 二ッケル酸化物粉末及びこれらの混合物からなる群 より選択されるニッケル類を更に含む請求の範囲 1に記載の阻害剤。
5)ニッケル類の粉末粒径が 0. 0 0 5〜 0. 2 mmである請求の範囲 4に記載の生育阻害剤。
(以下余白）
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