TWI487702B - Ｃ型肝炎病毒抑制劑 - Google Patents

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Description

C型肝炎病毒抑制劑
本發明大體上係有關抗病毒化合物，且更特定言之係有關可抑制由C型肝炎病毒(HCV)編碼之NS5A蛋白質之功能的化合物、包含該等化合物之組合物及抑制NS5A蛋白質之功能的方法。
HCV為一種主要的人類病原體，其在世界範圍內感染著估計1.7億人-大致為受1型人類免疫缺乏病毒感染之數目的五倍。相當大部分之該等HCV感染個體顯現嚴重的進行性肝病，包括硬化及肝細胞癌。
目前採用聚乙二醇化干擾素與病毒唑(ribavirin)之組合的HCV護理標準在獲得持續病毒反應方面成功率並非最佳且產生諸多副作用。因此，顯而易見且盼望已久，需要開發可有效解決該尚未得到滿足之醫學需要的治療劑。
HCV為一種正股RNA病毒。基於所推定之胺基酸序列之比較及5'非轉譯區之廣泛類似性，已將HCV分類為黃病毒(Flaviviridae )科中之一獨立屬。所有黃病毒科成員均具有包膜病毒粒子，該等病毒粒子含有經由轉譯單一、不間斷之開放閱讀框架編碼所有已知病毒特異性蛋白質的正股RNA基因組。
由於缺乏校正(proof-reading)能力的所編碼之RNA依賴性RNA聚合酶之錯誤率較高，因此在整個HCV基因組中於核苷酸及所編碼之胺基酸序列內發現顯著的異質性。已表徵至少六種主要基因型，且已描述50種以上亞型，其分佈在世界範圍內。HCV遺傳異質性之臨床意義已表明，在單一療法治療期間，易發生突變，因此，希望有其他治療選項供使用。基因型對發病機制及療法之可能的調節作用仍難以捉摸。
單股HCV RNA基因組之長度為約9500個核苷酸且具有編碼具有約3000個胺基酸之單一大聚合蛋白質的單一開放閱讀框架(ORF)。在受感染細胞中，該聚合蛋白質在多個位點處被細胞及病毒蛋白酶裂解而產生結構蛋白質及非結構(NS)蛋白質。在HCV之情況下，成熟非結構蛋白質(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A及NS5B)之產生係由兩種病毒蛋白酶來實現。咸信第一者為金屬蛋白酶，且其在NS2-NS3接面處裂解；第二者為含於NS3之N末端區域內的絲胺酸蛋白酶(在本文中亦稱為NS3蛋白酶)且其介導NS3下游之所有後續順式(在NS3-NS4A裂解位點處)與反式(對於剩餘NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位點而言)裂解。NS4A蛋白質似乎藉由充當NS3蛋白酶之輔因子及輔助NS3及其他病毒複製酶組分之膜定位而發揮多種功能。NS3-NS4A複合物之形成為可提高裂解事件之蛋白質水解效率的恰當蛋白酶活性所必需。NS3蛋白質亦展現核苷三磷酸酶及RNA解旋酶活性。NS5B(在本文中亦稱為HCV聚合酶)為複製酶複合物中之RNA依賴性RNA聚合酶，其涉及HCV及其他HCV蛋白質(包括NS5A)之複製。
需要可選擇性抑制HCV病毒複製且適用於治療HCV感染患者之化合物。詳言之，需要可有效抑制NS5A蛋白質之功能的化合物。HCV NS5A蛋白質例如描述於以下參考文獻中：S. L. Tan等人,Virology ,284:1-12(2001)；K.-J. Park等人,J. Biol. Chem .,30711-30718(2003)；T. L. Tellinghuisen等人,Nature ,435 ,374(2005)；R. A. Love等人,J. Virol ,83 ,4395(2009)；N. Appel等人,J. Biol. Chem .,281 ,9833(2006)；L. Huang,J. Biol. Chem .,280 ,36417(2005)；C. Rice等人,WO 2006093867。
在一態樣中，本發明提供一種式(I)化合物：
或其醫藥學上可接受之鹽，其中：n為0、1或2；X係選自氫、烯基、氰基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵基及雜環基；R1 係選自氫及鹵基；R2 係選自氫、烯基、氰基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵基及雜環基；或R1 與R2 連同其所連接之碳原子一起形成六員芳族環，視情況經一個鹵基取代；其限制條件為X及R2 中之至少一者係選自烯基、氰基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵基及雜環基；各R3 為烷基，其中該烷基可視情況與相鄰碳原子一起形成三員或四員稠合環或與其所連接之碳原子一起形成三員或四員螺環；其中該稠合環及該螺環視情況經一或兩個烷基取代；各R4 獨立地選自氫及-C(O)R5 ；及各R5 獨立地選自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環烷基、(NRc Rd )烯基及(NRc Rd )烷基。
在第一態樣之第一實施例中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R5 獨立地選自烷氧基、雜環基及(NRc Rd )烷基。
在第一態樣之第二實施例中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X為鹵基。在第一態樣之第三實施例中，R2 為鹵基。
在第一態樣之第四實施例中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1 與R2 連同其所連接之碳原子一起形成六員芳族環，視情況經一個鹵基取代。
在第一態樣之第五實施例中，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X為氫。
在第二態樣中，本發明提供一種組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。
在該第二態樣之第一實施例中，該組合物進一步包含至少一種具有抗HCV活性之其他化合物。在該第二態樣之第二實施例中，該等其他化合物中之至少一者為干擾素或病毒唑。在該第二態樣之第三實施例中，干擾素係選自干擾素α2B、聚乙二醇化干擾素α、複合干擾素、干擾素α2A及類淋巴母細胞干擾素τ。
在該第二態樣之第四實施例中，本發明提供一種組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽、醫藥學上可接受之載劑及至少一種具有抗HCV活性之其他化合物，其中該等其他化合物中之至少一者係選自介白素2、介白素6、介白素12、增加1型輔助T細胞反應之產生之化合物、干擾RNA、反義RNA、咪奎莫特(Imiqimod)、病毒唑、肌苷5'-單磷酸脫氫酶抑制劑、三環癸胺(amantadine)及金剛乙胺(rimantadine)。
在該第二態樣之第五實施例中，本發明提供一種組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽、醫藥學上可接受之載劑及至少一種具有抗HCV活性之其他化合物，其中該等其他化合物中之至少一者可有效抑制選自以下各者之標靶的功能以治療HCV感染：HCV金屬蛋白酶、HCV絲胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白質、HCV進入、HCV組裝、HCV釋放(egress)、HCV NS5A蛋白質及IMPDH。
在第三態樣中，本發明提供一種治療患者之HCV感染之方法，其包含向該患者投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在該第三態樣之第一實施例中，該方法進一步包含在投與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之前、之後或同時投與至少一種具有抗HCV活性之其他化合物。在該第三態樣之第二實施例中，該等其他化合物中之至少一者為干擾素或病毒唑。在該第三態樣之第三實施例中，干擾素係選自干擾素α2B、聚乙二醇化干擾素α、複合干擾素、干擾素α2A及類淋巴母細胞干擾素τ。
在該第三態樣之第四實施例中，本發明提供一種治療患者之HCV感染之方法，其包含向該患者投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，且在式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之前、之後或同時投與至少一種具有抗HCV活性之其他化合物，其中該等其他化合物中之至少一者係選自介白素2、介白素6、介白素12、增加1型輔助T細胞反應之產生之化合物、干擾RNA、反義RNA、咪奎莫特、病毒唑、肌苷5'-單磷酸脫氫酶抑制劑、三環癸胺及金剛乙胺。
在該第三態樣之第五實施例中，本發明提供一種治療患者之HCV感染之方法，其包含向該患者投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，且在式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之前、之後或同時投與至少一種具有抗HCV活性之其他化合物，其中該等其他化合物中之至少一者可有效抑制選自以下各者之標靶的功能以治療HCV感染：HCV金屬蛋白酶、HCV絲胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白質、HCV進入、HCV組裝、HCV釋放、HCV NS5A蛋白質及IMPDH。
本發明之其他態樣可包括本文中所揭示之實施例之適合的組合。
其他態樣及實施例可見於本文提供之說明中。
本文中對本發明之說明應理解為符合化學鍵結之規則及原理。在一些情況下，可能必需移除氫原子以在任何既定位置容納取代基。
應瞭解，本發明所涵蓋之化合物為彼等對於用作藥劑而言具有適當穩定性之化合物。
預期分子中特定位置處之任何取代基或變數之定義與其在該分子之他處的定義無關。舉例而言，當R1 及R2 均含有R4 基團時，則該兩個R4 基團可相同或不同。
本說明書中所引用之所有專利、專利申請案及參考文獻書目係以引用的方式全部併入本文中。在不一致之情況下，以本發明(包括定義)為準。
如本說明書中所用，以下術語具有如下指定之含義。
除非上下文明確另作規定，否則如本文中所用之單數形式「一」及「該」包括複數含義。
除非另作說明，否則本發明之所有芳基、環烷基及雜環基均可如其各自定義中之每一者中所述經取代。舉例而言，芳基烷基之芳基部分可如術語「芳基」之定義中所述經取代。
如本文中所用之術語「烯基」係指具有二至六個碳原子、含有至少一個碳-碳雙鍵之直鏈或支鏈基團。
如本文中所用之術語「烯氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之烯基。
如本文中所用之術語「烯氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之烯氧基。
如本文中所用之術語「烷氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之烷基。
如本文中所用之術語「烷氧基烷基」係指經一個、兩個或三個烷氧基取代之烷基。
如本文中所用之術語「烷氧基烷基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之烷氧基烷基。
如本文中所用之術語「烷氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之烷氧基。
如本文中所用之術語「烷基」係指源自含有一至六個碳原子之直鏈或支鏈飽和烴的基團。在本發明之化合物中，當R3 為烷基時，該烷基可視情況與相鄰碳原子形成三員或四員稠合環以提供如下所示之結構：
其中m係選自1及2，其中z為0、1或2，且其中Rs 為烷基；或其中該烷基可視情況與其所連接之碳原子一起形成三員或四員螺環，以提供如下所示之結構：
其中m係選自1及2；其中z為0、1或2，且其中Rs 為烷基。
如本文中所用之術語「烷基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之烷基。
如本文中所用之術語「烷基羰基氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之烷基羰基。
如本文中所用之術語「烷硫基」係指經由硫原子與母分子部分連接之烷基。
如本文中所用之術語「烷基磺醯基」係指經由磺醯基與母分子部分連接之烷基。
如本文中所用之術語「芳基」係指苯基或雙環稠環系統(其中該等環中之一者或兩者為苯基)。雙環稠環系統由與四至六員芳族或非芳族碳環稠合之苯基組成。本發明之芳基可經由基團中之任何可取代碳原子與母分子部分連接。芳基之代表性實例包括(但不限於)二氫茚基、茚基、萘基、苯基及四氫萘基。本發明之芳基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：烯基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、第二芳基、芳基烷氧基、芳基烷基、芳基羰基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、雜環基、雜環基烷基、雜環基羰基、羥基、羥基烷基、硝基、-NRx Ry 、(NRx Ry )烷基、側氧基及-P(O)OR2 ，其中各R係獨立地選自氫及烷基；且其中該芳基烷基及該雜環基烷基之烷基部分未經取代，且其中該第二芳基、該芳基烷基之芳基部分、該芳基羰基之芳基部分、該雜環基以及該雜環基烷基與該雜環基羰基之雜環基部分視情況另外經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基及硝基。
如本文中所用之術語「芳基烷氧基」係指經由烷氧基與母分子部分連接之芳基。
如本文中所用之術語「芳基烷氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之芳基烷氧基。
如本文中所用之術語「芳基烷基」係指經一個、兩個或三個芳基取代之烷基。該芳基烷基之烷基部分視情況另外經一或兩個獨立地選自以下之其他基團取代：烷氧基、烷基羰基氧基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、雜環基、羥基及-NRc Rd ，其中該雜環基視情況另外經一或兩個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、未經取代之芳基、未經取代之芳基烷氧基、未經取代之芳基烷氧基羰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、羥基、-NRx Ry 及側氧基。
如本文中所用之術語「芳基烷基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之芳基烷基。
如本文中所用之術語「芳基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之芳基。
如本文中所用之術語「芳基氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之芳基。
如本文中所用之術語「芳基氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之芳基氧基。
如本文中所用之術語「芳基磺醯基」係指經由磺醯基與母分子部分連接之芳基。
如本文中所使用之術語「羰基」係指-C(O)-。
如本文中所使用之術語「羧基」係指-CO2 H。
如本文中所使用之術語「氰基」係指-CN。
如本文中所用之術語「環烷基」係指具有三至七個碳原子及零個雜原子之飽和單環烴環系統。環烷基之代表性實例包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基及環己基。本發明之環烷基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、芳基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、雜環基、羥基、羥基烷基、硝基及-NRx Ry ，其中該芳基及該雜環基視情況另外經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、羥基及硝基。
如本文中所用之術語「(環烷基)烷基」係指經一個、兩個或三個環烷基取代之烷基
如本文中所用之術語「環烷基氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之環烷基。
如本文中所用之術語「環烷基氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之環烷基氧基。
如本文中所用之術語「環烷基磺醯基」係指經由磺醯基與母分子部分連接之環烷基。
如本文中所用之術語「甲醯基」係指-CHO。
如本文中所使用之術語「鹵基」係指Cl、Br、F或I。
如本文中所用之術語「鹵基烷氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之鹵基烷基。
如本文中所用之術語「鹵基烷氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之鹵基烷氧基。
如本文中所用之術語「鹵基烷基」係指經一個、兩個、三個或四個鹵素原子取代之烷基。
如本文中所用之術語「雜環基」係指含有一個、兩個、三個或四個獨立地選自氮、氧及硫之雜原子的四員、五員、六員或七員環。四員環具有零個雙鍵，五員環具有零至兩個雙鍵，且六員及七員環具有零個至三個雙鍵。術語「雜環基」亦包括如下雙環基團，其中雜環基環與另一單環雜環基或四至六員芳族或非芳族碳環稠合；以及橋接雙環基團，諸如7-氮雜雙環[2.2.1]庚-7-基、2-氮雜雙環[2.2.2]辛-2-基、2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基及2-氮雜雙環[2.2.2]辛-3-基。本發明之雜環基可經由基團中之任何碳原子或氮原子與母分子部分連接。雜環基之實例包括(但不限於)苯并噻吩基、呋喃基、咪唑基、吲哚啉基、吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異噁唑基、嗎啉基、噁唑基、氧雜環丁基、哌嗪基、哌啶基、吡唑基、吡啶基、吡咯啶基、吡咯并吡啶基、吡咯基、喹啉基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、噻唑基、噻吩基及硫代嗎啉基。本發明之雜環基視情況經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：烯基、烷氧基、烷氧基烷基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基羰基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、第二雜環基、雜環基烷基、雜環基羰基、羥基、羥基烷基、硝基、-NRx Ry 、(NRx Ry )烷基及側氧基，其中該芳基烷基及該雜環基烷基之烷基部分未經取代，且其中該芳基、該芳基烷基之芳基部分、該芳基羰基之芳基部分、該第二雜環基及該雜環基烷基與該雜環基羰基之雜環基部分視情況另外經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基及硝基。
如本文中所用之術語「雜環基烷氧基」係指經由烷氧基與母分子部分連接之雜環基。
如本文中所用之術語「雜環基烷氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之雜環基烷氧基。
如本文中所用之術語「雜環基烷基」係指經一個、兩個或三個雜環基取代之烷基。該雜環基烷基之烷基部分視情況另外經一或兩個獨立地選自以下之其他基團取代：烷氧基、烷基羰基氧基、芳基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、羥基及-NRc Rd ，其中該芳基視情況另外經一或兩個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、未經取代之芳基、未經取代之芳基烷氧基、未經取代之芳基烷氧基羰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基、羥基及-NRx Ry 。
如本文中所用之術語「雜環基烷基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之雜環基烷基。
如本文中所用之術語「雜環基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之雜環基。
如本文中所用之術語「雜環基氧基」係指經由氧原子與母分子部分連接之雜環基。
如本文中所用之術語「雜環基氧基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之雜環基氧基。
如本文中所用之術語「羥基」係指-OH。
如本文中所用之術語「羥基烷基」係指經一個、兩個或三個羥基取代之烷基。
如本文中所用之術語「羥基烷基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之羥基烷基。
如本文中所用之術語「硝基」係指-NO2 。
如本文中所用之術語「-NRc Rd 」係指經由氮原子與母分子部分連接之兩個基團Rc 及Rd 。Rc 及Rd 係獨立地選自氫、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺醯基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳基氧基羰基、芳基磺醯基、環烷基、環烷基氧基、環烷基氧基羰基、環烷基磺醯基、甲醯基、鹵基烷氧基羰基、雜環基、雜環基烷氧基羰基、雜環基烷基、雜環基烷基羰基、雜環基羰基、雜環基氧基羰基、羥基烷基羰基、(NRe Rf )烷基、(NRe Rf )烷基羰基、(NRe Rf )羰基、(NRe Rf )磺醯基、-C(NCN)OR'及-C(NCN)NRx Ry ，其中R'係選自烷基及未經取代之苯基，且其中該芳基烷基、該芳基烷基羰基、該雜環基烷基及該雜環基烷基羰基之烷基部分視情況另外經一個-NRe Rf 基團取代；且其中該芳基、該芳基烷氧基羰基、該芳基烷基、該芳基烷基羰基、該芳基羰基、該芳基氧基羰基及該芳基磺醯基之芳基部分、該雜環基以及該雜環基烷氧基羰基、該雜環基烷基、該雜環基烷基羰基、該雜環基羰基及該雜環基氧基羰基之雜環基部分視情況另外經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基及硝基。
如本文中所用之術語「(NRc Rd )烯基」係指
其中Rc 及Rd 係如本文中所定義，且各Rq 獨立地為氫或C1-3 烷基。
如本文中所用之術語「(NRc Rd )烷基」係指經一個、兩個或三個-NRc Rd 基團取代之烷基。該(NRc Rd )烷基之烷基部分視情況另外經一或兩個選自以下之其他基團取代：烷氧基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷硫基、芳基烷氧基羰基、羧基、環烷基、雜環基、雜環基羰基、羥基及(NRe Rf )羰基；其中該雜環基視情況另外經一個、兩個、三個、四個或五個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基及硝基。
如本文中所用之術語「-NRe Rf 」係指經由氮原子與母分子部分連接之兩個基團Re 及Rf 。Re 及Rf 係獨立地選自氫、烷基、未經取代之芳基、未經取代之芳基烷基、未經取代之環烷基、未經取代之(環烷基)烷基、未經取代之雜環基、未經取代之雜環基烷基、(NRx Ry )烷基及(NRx Ry )羰基。
如本文中所用之術語「(NRe Rf )烷基」係指經一個、兩個或三個-NRe Rf 基團取代之烷基。
如本文中所用之術語「(NRe Rf )烷基羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之(NRe Rf )烷基。
如本文中所用之術語「(NRe Rf )羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之-NRe Rf 基團。
如本文中所用之術語「(NRe Rf )磺醯基」係指經由磺醯基與母分子部分連接之-NRe Rf 基團。
如本文中所用之術語「-NRx Ry 」係指經由氮原子與母分子部分連接之兩個基團Rx 及Ry 。Rx 及Ry 係獨立地選自氫、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、未經取代之芳基、未經取代之芳基烷氧基羰基、未經取代之芳基烷基、未經取代之環烷基、未經取代之雜環基及(NRx' Ry' )羰基，其中Rx' 及Ry' 係獨立地選自氫及烷基。
如本文中所用之術語「(NRx Ry )烷基」係指經一個、兩個或三個-NRx Ry 基團取代之烷基。
如本文中所用之術語「(NRx Ry )羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之-NRx Ry 基團。
如本文中所用之術語「-NRx Ry 」係指經由氮原子與母分子部分連接之兩個基團Rx 及Ry 。Rx 及Ry 係獨立地選自氫及烷基。
如本文中所用之術語「(NRx' Ry' )羰基」係指經由羰基與母分子部分連接之-NRx' Ry' 基團。
如本文中所用之術語「側氧基」係指=O。
如本文中所用之術語「磺醯基」係指-SO2 -。
在本發明之化合物中存在不對稱中心。視對掌性碳原子周圍之取代基的構型而定，該等中心係以符號「R」或「S」表示。應瞭解，本發明涵蓋具有抑制NS5A之能力的所有立體化學異構形式或其混合物。化合物之個別立體異構物可由含有對掌性中心之市售原料以合成方式製備，或藉由製備對映異構產物之混合物繼而分離(諸如轉化為非對映異構物之混合物繼而分離或再結晶、層析技術或直接在對掌性層析管柱上分離對映異構物)來製備。特定立體化學之起始化合物可為市售的或可藉由此項技術中已知之技術來製備且解析。
本發明之某些化合物亦可以可分離之不同穩定構形形式存在。由於圍繞不對稱單鍵之限制性旋轉(例如由於位阻或環應力)所產生之扭轉不對稱性可允許分離不同構象異構物。本發明包括該等化合物之各構形異構物及其混合物。
本發明之化合物亦以互變異構物形式存在；因此，本發明亦涵蓋所有互變異構形式。
術語「本發明之化合物」及等效表述意欲涵蓋式(I)化合物及其醫藥學上可接受之對映異構物、非對映異構物及鹽。類似地，若上下文許可，則對中間物之提及意欲涵蓋其鹽。
本發明意欲包括存在於本發明化合物中之原子之所有同位素。同位素包括具有相同原子序數但具有不同質量數之原子。氫之同位素一般例如包括(但不限於)氘及氚。碳之同位素包括13 C及14 C。本發明之同位素標記之化合物可一般藉由熟習此項技術者已知之習用方法或藉由與本文描述類似之方法，使用適當的同位素標記之試劑代替其他情況下採用之未標記之試劑來製備。該等化合物具有多種潛在用途，例如在生物活性測定中作為標準物及試劑。在穩定的同位素之情況下，該等化合物可具有有利地改變生物學、藥理學或藥物動力學性質之潛能。
本發明之化合物可以醫藥學上可接受之鹽存在。如本文中所用之術語「醫藥學上可接受之鹽」表示本發明之化合物的水溶性或油溶性或可分散之鹽或兩性離子形式，其在正確之醫學判斷的範疇內適於與患者組織接觸使用而無過度毒性、刺激性、過敏性反應或其他問題或併發症，與合理之效益/風險比相符，且對於其所欲用途而言為有效的。該等鹽可在化合物之最終分離及純化期間加以製備或獨立地藉由使適合之氮原子與適合之酸反應來製備。代表性酸加成鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、硫酸氫鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽；二葡糖酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基乙烷磺酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、均三甲苯磺酸鹽、甲烷磺酸鹽、伸萘基磺酸鹽、菸鹼酸鹽、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過氧硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、丁二酸鹽、酒石酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、磷酸鹽、麩胺酸鹽、碳酸氫鹽、對甲苯磺酸鹽及十一烷酸鹽。可用於形成醫藥學上可接受之加成鹽之酸之實例包括諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸及磷酸之無機酸及諸如草酸、順丁烯二酸、丁二酸及檸檬酸之有機酸。
鹼加成鹽可在化合物之最終分離及純化期間，藉由使羧基與適合之鹼(諸如金屬陽離子之氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽)或與氨或有機一級、二級或三級胺反應來製備。醫藥學上可接受之鹽的陽離子包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂及鋁以及無毒胺陽離子，諸如銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲基苯胺、N-甲基哌啶、N-甲基嗎啉、二環己基胺、普魯卡因(procaine)、二苯甲基胺、N,N-二苯甲基苯乙基胺及N,N'-二苯甲基伸乙基二胺。適用於形成鹼加成鹽之其他代表性有機胺包括伸乙基二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌啶及哌嗪。
若有可能在用於療法時，可將治療有效量之式(I)化合物以及其醫藥學上可接受之鹽以化學原料之形式投與，亦可能以醫藥組合物形式提供活性成份。因此，本發明另外提供醫藥組合物，其包括治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑。如本文中所用之術語「治療有效量」係指足以展示有意義之患者益處(例如病毒負荷持續減少)之各活性組份的總量。當應用於單獨投與之個別活性成份時，該術語係指單獨該成份。當應用於組合時，該術語係指無論組合、連續抑或同時投與均產生治療效應之活性成份的組合量。式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽係如上所述。載劑、稀釋劑或賦形劑必須在與調配物之其他成份相容之意義上為可接受的且對其接受者無害。根據本發明之另一態樣，亦提供一種用於製備醫藥調配物之方法，其包括將式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與一或多種醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑混合。如本文中所用之術語「醫藥學上可接受」係指彼等化合物、物質、組合物及/或劑型在正確之醫學判斷的範疇內適於與患者組織接觸使用而無過度毒性、刺激性、過敏性反應或其他問題或併發症，並具有合理之效益/風險比，且可有效用於其計畫用途。
醫藥調配物可以每單位劑量含有預定量之活性成份的單位劑型來提供。本發明之化合物用於預防及治療HCV介導性疾病之單一療法中的典型劑量為每日每公斤體重約0.01毫克至約250毫克(「mg/kg」)發明之間、較佳為每日每公斤體重約0.05 mg至約100 mg發明之間。通常，本發明之醫藥組合物將每日投與約1次至約5次或者以連續輸注形式投與。該投藥可用作慢性或急性治療。可與載劑物質組合以產生單一劑型的活性成份之量將視以下因素而變化：所治療之病狀、病狀之嚴重性、投藥時間、投藥途徑、所用化合物之排泄速率、治療持續時間及患者之年齡、性別、重量及身體狀況。較佳單位劑量調配物為彼等含有如此處以上所述之日劑量或亞劑量或其適當一部分之活性成份的調配物。一般，治療先以大體上小於化合物之最佳劑量的小劑量開始。此後，以小幅增量增加劑量直至在該情況下達至最佳效應。一般而言，化合物最適宜以通常不會造成任何有害或不利副作用之情況下提供抗病毒有效結果的濃度來投與。
當本發明之組合物包含本發明之化合物與一或多種其他治療劑或預防劑之組合時，該化合物與該其他藥劑通常均以單一治療方案中通常所投與之劑量的約10%至150%之間且更佳為約10%與80%之間的劑量來提供。
醫藥調配物可適合於藉由任何適合之途徑來投與，例如藉由經口(包括口腔或舌下)、經直腸、經鼻、局部(包括口腔、舌下或經皮)、經陰道或非經腸(包括皮下、皮內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、病灶內、靜脈內或皮內注射或輸注)途徑來投與。該等調配物可藉由藥學技術中已知之任何方法(例如藉由使活性成份與載劑或賦形劑結合)來製備。經口投藥或藉由注射來投藥為較佳的。
適合於經口投與之醫藥調配物可以離散單位形式來提供，該等離散單位諸如膠囊或錠劑；粉末或顆粒；於水性或非水性液體中之溶液或懸浮液；可食用發泡劑或起泡劑；或水包油型液體乳液或油包水型乳液。
舉例而言，為以錠劑或膠囊之形式經口投與，可將活性藥物組份與口服、無毒、醫藥學上可接受之惰性載劑(諸如乙醇、甘油、水及其類似物)組合。粉末係藉由將化合物粉碎至適合之精細尺寸且與類似經粉碎之醫藥載劑(諸如可食性碳水化合物，例如澱粉或甘露糖醇)混合來製備。調味劑、防腐劑、分散劑及著色劑亦可存在。
膠囊係藉由如上所述製備粉末混合物且填充成型明膠外殼來製備。在填充操作之前可將諸如膠態二氧化矽、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固體聚乙二醇之助流劑及潤滑劑添加至粉末混合物中。當吞咽膠囊時亦可添加諸如瓊脂、碳酸鈣或碳酸鈉之崩解劑或增溶劑以改良藥物之可用性。
此外，在需要或必需時亦可將適合之黏合劑、潤滑劑、崩解劑及著色劑併入混合物中。適合之黏合劑包括澱粉、明膠、諸如葡萄糖或β-乳糖之天然糖、玉米甜味劑、諸如阿拉伯膠、黃蓍膠或海藻酸鈉之天然膠及合成膠、羧甲基纖維素、聚乙二醇及其類似物。該等劑型中所用之潤滑劑包括油酸鈉、氯化鈉及其類似物。崩解劑包括(但不限於)澱粉、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、三仙膠及其類似物。錠劑係例如藉由製備粉末混合物、進行粒化或乾壓、添加潤滑劑及崩解劑且壓製成錠劑來調配。粉末混合物係藉由將經適當粉碎之化合物與上述稀釋劑或鹼且視情況與黏合劑(諸如羧甲基纖維素、海藻酸鹽、明膠或聚乙烯基吡咯啶酮)、溶解遲延劑(諸如石蠟)、再吸收促進劑(諸如第四鹽)及/或吸收劑(諸如膨潤土、高嶺土或磷酸氫鈣)混合來製備。粉末混合物可藉由以黏合劑(諸如糖漿、澱粉糊、阿卡迪亞黏漿(acadia mucilage)或纖維素或聚合材料之溶液)濕潤且迫使其通過篩網來粒化。作為粒化之替代，可使粉末混合物通過壓錠機且結果為分裂成顆粒之不完全成型的小塊。可藉助於添加硬脂酸、硬脂酸鹽、滑石粉或礦物油來潤滑顆粒以防止黏著於錠劑成型模具。隨後將經潤滑之混合物壓製成錠劑。本發明之化合物亦可與自由流動性惰性載劑組合且直接被壓製成錠劑而無需經受粒化或乾壓步驟。可提供由蟲膠之密封塗層、糖或聚合材料之塗層及蠟之拋光塗層組成之透明或不透明塗層。可將染料添加至該等塗層中以區別不同單位劑量。
可以劑量單位形式製備諸如溶液、糖漿及酏劑之口服流體以便使給定數量含有預定量之化合物。糖漿可藉由將化合物溶解於經適當調味之水溶液中來製備，而酏劑係經由使用無毒媒劑來製備。亦可添加增溶劑及乳化劑(諸如乙氧基化異硬脂醇及聚氧化乙烯山梨糖醇醚)、防腐劑、調味添加劑(諸如薄荷油或天然甜味劑，或糖精或其他人工甜味劑)及其類似物。
若適當時，可將用於經口投與之劑量單位調配物微膠囊化。亦可例如藉由以聚合物、蠟或其類似物塗佈或包埋微粒物質來製備調配物以延長或維持釋放。
式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可以脂質體傳遞系統(諸如單層小微脂粒、單層大微脂粒及多層微脂粒)之形式投與。脂質體可由各種磷脂(諸如膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼)形成。
式(I)化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可藉由使用單株抗體作為個別載體來傳遞，其中該等化合物分子與該等單株抗體偶合。化合物亦可與作為可靶向藥物載體之可溶性聚合物偶合。該等聚合物可包括聚乙烯基吡咯啶酮、哌喃共聚物、聚羥基丙基甲基丙烯醯胺苯酚、聚羥基乙基天冬醯胺苯酚或經軟脂醯基殘基取代之聚氧化乙烯聚離胺酸。此外，可使化合物與一類適用於達成藥物之受控釋放的可生物降解聚合物(例如聚乳酸、聚ε己內酯、聚羥基丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二氫哌喃、聚氰基丙烯酸酯及水凝膠之交聯或兩性嵌段共聚物)偶合。
適合於經皮投與之醫藥調配物可以意欲與接受者表皮保持長時段之緊密接觸的離散貼片形式來提供。舉例而言，可大體上如Pharmaceutical Research 1986 ,3 (6),318所述，藉由離子導入療法由貼片傳遞活性成份。
適合於局部投與之醫藥調配物可調配為軟膏、乳膏、懸浮液、洗劑、粉末、溶液、糊劑、凝膠、噴霧劑、氣溶膠或油劑。
對於眼睛或其他外部組織(例如口及皮膚)之治療，調配物較佳以局部軟膏或乳膏形式使用。當調配於軟膏中時，活性成分可與石蠟或水可混溶性軟膏基質一起使用。或者，活性成分可與水包油乳膏基質或油包水基質一起調配於乳膏中。
適於局部投與眼睛之醫藥調配物包括滴眼劑，在滴眼劑中，活性成分溶解或懸浮於適合的載劑、尤其水性溶劑中。
適於局部投與口中之醫藥調配物包括含片、錠劑及漱口劑。
適合於經直腸投與之醫藥調配物可以栓劑或灌腸劑之形式來提供。
適合於經鼻投與之醫藥調配物(其中載劑為固體)包括粒徑例如在20微米至500微米範圍內之粗粒粉，其係以吸氣之方式，亦即經由鼻孔自緊挨鼻子固持之粉末容器快速吸入來投與。適合以鼻噴霧劑或滴鼻劑形式投與之調配物(其中載劑為液體)包括活性成份之水溶液或油溶液。
適合於藉由吸入投與之醫藥調配物包括細粒粉狀物或霧狀物，其可藉助於各種類型之定劑量加壓噴霧器、霧化器或吹入器來產生。
適合經陰道投與之醫藥調配物可呈子宮托、棉塞、乳膏、凝膠、糊劑、發泡劑或噴霧調配物之形式來提供。
適合非經腸投與之醫藥調配物包括可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑細菌劑及使調配物與預期接受者之血液呈等張性之溶質的水性及非水性無菌注射溶液；及可包括懸浮劑及增稠劑之水性及非水性無菌懸浮液。調配物可於單位劑量或多次劑量容器(例如密封安瓿及小瓶)中提供，且可儲存於冷凍乾燥(凍乾)條件下，其僅需在臨用前添加無菌液體載劑(例如注射用水)。可自無菌粉末、顆粒及錠劑製備臨時注射溶液及懸浮液。
應瞭解，除了上述特別述及之成份以外，所討論之調配物類型可包括此項技術中習知之其他藥劑，例如適合經口投與之彼等調配物可包括調味劑。
術語「患者」包括人類及其他哺乳動物。
術語「治療」係指：(i)在可能易患某種疾病、病症及/或病狀但尚未被診斷為患有該疾病、病症及/或病狀之患者中防止該疾病、病症或病狀出現；(ii)抑制該疾病、病症或病狀，亦即使其進展停滯；及(iii)緩解該疾病、病症或病狀，亦即使該疾病、病症及/或病狀消退。
本發明之化合物亦可與環孢素(cyclosporin)(例如環孢素A)一起投與。已在臨床試驗中顯示環孢素A具有抗HCV活性(Hepatology 2003 ,38 ,1282;Biochem. Biophys. Res. Commun. 2004 ,313 ,42;J. Gastroenterol. 2003 ,38 ,567)。
以下表1列出可與本發明之化合物一起投與之化合物的一些說明性實例。本發明之化合物可在組合療法中與其他抗HCV活性化合物一起投與，聯合或分別投與或藉由將化合物組合為組合物來投與。
本發明之化合物亦可用作實驗室試劑。化合物可能有助於為設計病毒複製檢定、驗證動物檢定系統及結構生物學研究提供研究工具以進一步增強對HCV疾病機制之認識。此外，本發明之化合物適用於例如藉由競爭性抑制來確定或測定其他抗病毒化合物之結合位點。
本發明之化合物亦可用於處理或預防物質之病毒污染，且因此降低與該等物質(例如血液、組織、外科儀器與衣服、實驗室儀器與衣服及血液收集或灌輸裝置與物質)接觸之實驗室或醫務人員或患者的病毒感染風險。
本發明意欲涵蓋具有式(I)之化合物，其係藉由合成過程或藉由代謝過程來製備，該等代謝過程包括彼等出現於人類或動物體內(活體內)之代謝過程或出現於活體外之過程。
本申請案中所用之縮寫，特別包括下文說明性實例中之縮寫，為熟習此項技術者所熟知。一些所用之縮寫如下：ca.為約；min或mins為分鐘；h或hr或hrs為小時；rt或RT為室溫或滯留時間(視情況而定)；Rt 為滯留時間；TFA為三氟乙酸；DMSO為二甲亞碸；Me為甲基；THF為四氫呋喃；t -Bu或t-Bu為第三丁基；EDCI為1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽；DMAP為4-二甲基胺基吡啶；DBU為1,8-二氮雜雙環十一-7-烯；Ph為苯基；DEA為二乙胺；Et為乙基；DMF為N,N-二甲基甲醯胺；OAc為乙酸根/乙酸酯基；HMDS為雙(三甲基矽烷)胺；pTsOH為對甲苯磺酸；iPr2 EtN、DIEA或DIPEA為二異丙基乙胺；EtOAc或EtOAc或EA為乙酸乙酯；Et3 SiH為三乙基矽烷；MeOH為甲醇；TMSCHN2 為三甲基矽烷基重氮甲烷；H-D-Ser-OBzl.HCl為D-絲胺酸苯甲基酯鹽酸鹽；EtOH為乙醇；Me2 S為二甲基硫醚；TEA或Et3 N為三乙胺；LiHMDS為雙(三甲基矽烷)胺基鋰；DIBAL為氫化二異丁基鋁；TBDMS-Cl為第三丁基二甲基矽烷基氯；i-PrOH為異丙醇；Boc、boc或BOC為第三丁氧基羰基；Cbz-Cl為氯甲酸苯甲酯；Bn為苯甲基；DEAD為偶氮二甲酸二乙酯；mCPBA為間氯過氧苯甲酸；DCM為二氯甲烷；TMSCN為氰化三甲基矽烷；ACN或MECN為乙腈；dpppe為1,5-雙(二苯基膦)戊烷；TMEDA為四甲基乙二胺；DMA為N,N-二甲基乙醯胺；MeOD為CD3 OD；Hex為己烷；NaOEt為乙醇鈉；MTBE為甲基第三丁基醚；NCS為N-氯丁二醯亞胺；Et2 O為乙醚；DME為1,2-二甲氧基乙烷；及EEDQ為N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉。
現在，本發明將結合某些實施例來描述，該等實施例不欲限制本發明之範疇。相反，本發明覆蓋申請專利範圍範疇內可包括之所有替代物、修改形式及等效物。因此，包括特定實施例之以下實例將說明本發明之一種實施，應瞭解，該等實例係出於說明某些實施例之目的，且呈現於此以提供咸信對本發明之程序及概念態樣之最適用且最容易理解之描述。
起始材料可自商業來源獲得，或用熟習此項技術者已知之已被認可之文獻方法製備。
常見CAP之合成 化合物分析條件
用與Waters MICROMASSZQ MS系統耦接之Shimadzu LC系統進行純度評估及低解析度質量分析。應注意，滯留時間在機器之間可能略有變化。除非另作說明，否則其他LC條件適用於本章節。
條件-MS-W1
管柱=XTERRA3.0×50 mm S7
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=2 min
終止時間=3 min
流速=5 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件-MS-W2
管柱=XTERRA3.0×50 mm S7
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件-MS-W5
管柱=XTERRA3.0×50 mm S7
起始%B=0
最終%B=30
梯度時間=2 min
終止時間=3 min
流速=5 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件-D1
管柱=XTERRAC18 3.0×50 mm S7
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件-D2
管柱=PHENOMENEXLuna 4.6×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件-M3
管柱=XTERRAC18 3.0×50 mm S7
起始%B==0
最終%B=40
梯度時間=2 min
終止時間=3 min
流速=5 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件I
管柱=PHENOMENEXLuna 3.0×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=2 min
終止時間=3 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件II
管柱=PHENOMENEXLuna 4.6×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=2 min
終止時間=3 min
流速=5 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件III
管柱=XTERRAC18 3.0×50 mm S7
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
Cap-1
(R)-2-(二甲基胺基)-2-苯基乙酸將10% Pd/C(2.0 g)於甲醇(10 mL)中之懸浮液添加至(R)-2-苯基甘胺酸(10 g，66.2 mmol)、甲醛(33 mL 37重量%水溶液)、1 N HCl(30 mL)及甲醇(30 mL)之混合物中，且暴露於H2 (60 psi)中3小時。經矽藻土(CELITE)過濾反應混合物，且在真空中濃縮濾液。將所得粗物質自異丙醇中再結晶以提供白色針狀之Cap-1之鹽酸鹽(4.0 g)。旋光度：-117.1°[c=9.95 mg/mL(於H2 O中)；λ=589 nm]。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz):δ7.43-7.34(m,5H),4.14(s,1H),2.43(s,6H)；LC(條件I): RT=0.25；LC-MS:[M+H]+ C10 H14 NO2 之分析計算值為180.10；實驗值為180.17；HRMS:[M+H]+ C10 H14 NO2 之分析計算值為180.1025；實驗值為180.1017。
(R)-2-(二乙基胺基)-2-苯基乙酸經數分鐘將NaBH3 CN(6.22 g，94 mmol)逐份添加至(R)-2-苯基甘胺酸(6.02 g，39.8 mmol)及甲醇(100 mL)之經冷卻(冰/水)混合物中且攪拌5分鐘。經10分鐘逐滴添加乙醛(10 mL)，且在相同冷卻溫度下繼續攪拌45分鐘且在環境溫度下攪拌約6.5小時。以冰水浴冷卻反應混合物回原溫度，以水(3 mL)處理且隨後藉由經約45分鐘逐滴添加濃鹽酸直至混合物之pH值為約1.5-2.0來淬滅反應。移除冷卻浴且繼續攪拌，同時添加濃鹽酸以維持混合物之pH值為約1.5-2.0。攪拌反應混合物隔夜，過濾以移除白色懸浮物，且在真空中濃縮濾液。將粗物質自乙醇再結晶以提供兩批亮白色固體狀之Cap-2之鹽酸鹽(第1批：4.16 g；第2批：2.19 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 10.44(1.00,br s,1H),7.66(m,2H),7.51(m,3H),5.30(s,1H),3.15(br m,2H),2.98(br m,2H),1.20(app br s,6H)。第1批：[α]25 -102.21°(c=0.357,H2 O)；第2批：[α]25 -99.7°(c=0.357,H2 O)。LC(條件I): RT=0.43 min；LC-MS:[M+H]+ C12 H18 NO2 之分析計算值為208.13；實驗值為208.26。
將乙醛(5.0 mL，89.1 mmol)及10% Pd/C(720 mg)於甲醇/H2 O(4 mL/1 mL)中之懸浮液依次添加至(R)-2-苯基甘胺酸(3.096 g，20.48 mmol)、1 N HCl(30 mL)及甲醇(40 mL)之經冷卻(約15℃)混合物中。移除冷卻浴且在H2 氣球下攪拌反應混合物17小時。再添加乙醛(10 mL，178.2 mmol)，且在H2 氣氛下繼續攪拌24小時[注意：在整個反應中視需要補充H2 之供應]。經矽藻土(CELITE)過濾反應混合物，且在真空中濃縮濾液。將所得粗物質自異丙醇再結晶以提供亮白色固體狀之(R)-2-(乙基胺基)-2-苯基乙酸之鹽酸鹽(2.846 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ14.15(br s,1H),9.55(br s,2H),7.55-7.48(m,5H),2.88(br m,1H),2.73(br m,1H),1.20(app t,J =7.2,3H)。LC(條件I): RT=0.39 min;>95%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C10 H14 NO2 之分析計算值為180.10；實驗值為180.18。將10% Pd/C(536 mg)於甲醇/H2 O(3 mL/1 mL)中之懸浮液添加至(R)-2-(乙基胺基)-2-苯基乙酸/HCl(1.492 g，6.918 mmol)、甲醛(20 mL於水中之37重量%)、1 N HCl(20 mL)及甲醇(23 mL)之混合物中。在H2 氣球下攪拌反應混合物約72小時，其中視需要補充H2 之供應。經矽藻土(CELITE)過濾反應混合物，且在真空中濃縮濾液。將所得粗物質自異丙醇(50 mL)再結晶以提供白色固體狀之Cap-3之鹽酸鹽(985 mg)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ10.48(br s,1H),7.59-7.51(m,5H),5.26(s,1H),3.08(app br s,2H),2.65(br s,3H),1.24(br m,3H)。LC(條件I): RT=0.39 min;>95%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C11 H16 NO2 之分析計算值為194.12；實驗值為194.18；HRMS:[M+H]+ C11 H16 NO2 之分析計算值為194.1180；實驗值為194.1181。
(R)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-苯基乙酸將ClCO2 Me(3.2 mL，41.4 mmol)經6分鐘逐滴添加至(R)-2-胺基-2-苯基乙酸第三丁酯/HCl(9.877 g，40.52 mmol)及二異丙基乙胺(14.2 mL，81.52 mmol)之經冷卻(冰/水)THF(410 mL)半溶液中，且在類似溫度下攪拌5.5小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物分配在水(100 mL)與乙酸乙酯(200 mL)之間。以1 N HCl(25 mL)及飽和NaHCO3 溶液(30 mL)洗滌有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾，且在真空中濃縮。用己烷濕磨所得無色油狀物，過濾且以己烷(100 mL)洗滌以提供白色固體狀之(R)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-苯基乙酸第三丁酯(7.7 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 7.98(d,J =8.0,1H),7.37-7.29(m,5H),5.09(d,J =8,1H),3.56(s,3H),1.33(s,9H)。LC(條件I): RT=1.53 min；約90%之均質性指數；LC-MS:[M+Na]+ C14 H19 NNaO4 之分析計算值為288.12；實驗值為288.15。
經7分鐘將TFA(16 mL)逐滴添加至上述產物之經冷卻(冰/水)CH2 Cl2 (160 mL)溶液中，且移除冷卻浴且攪拌反應混合物20小時。由於去保護仍不完全，故再添加TFA(1.0 mL)且再繼續攪拌2小時。在真空中移除揮發性組分且以乙醚(15 mL)及己烷(12 mL)處理所得油狀殘餘物以提供沈澱物。過濾沈澱物且以乙醚/己烷(約1:3比率；30 mL)洗滌且在真空中乾燥以提供鬆散白色固體狀之Cap-4(5.57 g)。旋光度：-176.9°[c=3.7 mg/mL(於H2 O中)；λ=589 nm]。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ12.84(br s,1H),7.96(d,J =8.3,1H),7.41-7.29(m,5H),5.14(d,J =8.3,1H),3.55(s,3H)。LC(條件I): RT=1.01 min;>95%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C10 H12 NO4 之分析計算值為210.08；實驗值為210.17；HRMS: [M+H]+ C10 H12 NO4 之分析計算值為210.0766；實驗值為210.0756。
將(R)-2-苯基甘胺酸(1.0 g，6.62 mmol)、1,4-二溴丁烷(1.57 g，7.27 mmol)及Na2 CO3 (2.10 g，19.8 mmol)於乙醇(40 mL)中之混合物在100℃下加熱21小時。冷卻反應混合物至環境溫度且過濾，且在真空中濃縮濾液。將殘餘物溶解於乙醇中且以1 N HCl酸化至pH值為3-4，且在真空中移除揮發性組分。將所得粗物質藉由逆相HPLC(水/甲醇/TFA)純化以提供半黏性白色泡沫狀之Cap-5之三氟乙酸鹽(1.0 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz)δ10.68(br s,1H),7.51(m,5H),5.23(s,1H),3.34(app br s,2H),3.05(app br s,2H),1.95(app br s,4H)；RT=0.30分鐘(條件I);>98%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C12 H16 NO2 之分析計算值為206.12；實驗值為206.25。Cap-6
藉由使用Cap-5之製備方法自(R)-2-苯基甘胺酸及1-溴-2-(2-溴乙氧基)乙烷合成Cap-6之三氟乙酸鹽。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz)δ12.20(br s,1H),7.50(m,5H),4.92(s,1H),3.78(app br s,4H),3.08(app br s,2H),2.81(app br s,2H)；RT=0.32分鐘(條件I)；>98%；LC-MS:[M+H]+ C12 H16 NO3 之分析計算值為222.11；實驗值為222.20；HRMS:[M+H]+ C12 H16 NO3 之分析計算值為：222.1130；實驗值為222.1121。
將對甲苯磺醯基氯(8.65 g，45.4 mmol)之CH2 Cl2 (200 mL)溶液逐滴添加至(S)-2-羥基-2-苯基乙酸苯甲酯(10.0 g，41.3 mmol)、三乙胺(5.75 mL，41.3 mmol)及4-二甲基胺基吡啶(0.504 g，4.13 mmol)之經冷卻(-5℃)CH2 Cl2 (200 mL)溶液中，同時保持溫度在-5℃與0℃之間。在0℃下攪拌反應物9小時，且隨後儲存於冷凍器(-25℃)中14小時。將其解凍至環境溫度且以水(200 mL)、1 N HCl(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌，乾燥(MgSO4 )，過濾且在真空中濃縮以提供黏性油狀之2-苯基-2-(甲苯磺醯基氧基)乙酸苯甲酯(16.5 g)，其在靜置之後固化。未檢驗產物之對掌性完整性且該產物不經進一步純化即用於下一步驟。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz)δ7.78(d,J =8.6,2H),7.43-7.29(m,10H),7.20(m,2H),6.12(s,1H),5.16(d,J =12.5,1H),5.10(d,J =12.5,1H),2.39(s,3H)。RT=3.00(條件III);>90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C22 H20 NaO5 S之分析計算值為419.09；實驗值為419.04。將2-苯基-2-(甲苯磺醯基氧基)乙酸苯甲酯(6.0 g，15.1 mmol)、1-甲基哌嗪(3.36 mL，30.3 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(13.2 mL，75.8 mmol)之THF(75 mL)溶液在65℃下加熱7小時。冷卻反應物至環境溫度且在真空中移除揮發性組分。將殘餘物分配在乙酸乙酯與水之間，且以水及鹽水洗滌有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且在真空中濃縮。將所得粗物質藉由急驟層析法(矽膠，乙酸乙酯)純化以提供橘褐色黏性油狀之2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-苯基乙酸苯甲酯(4.56 g)。對掌性HPLC分析(CHIRALCELOD-H)表明樣品為比率為38.2:58.7之立體異構物之混合物。如下實現立體異構物之分離：將產物溶解於120 mL乙醇/庚烷(1:1)中且注於(每次注射5 mL)對掌性HPLC管柱(Chiracel OJ,5 cm ID×50 cm L,20 μm)上，以85:15庚烷/乙醇在75 mL/min下溶離且在220 nm下監控。獲得黏性油狀之立體異構物-1(1.474 g)及立體異構物-2(2.2149 g)。1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.26,500 MHz) 7.44-7.40(m,2H),7.33-7.24(m,6H),7.21-7.16(m,2H),5.13(d,J =12.5,1H),5.08(d,J =12.5,1H),4.02(s,1H),2.65-2.38(app br s,8H),2.25(s,3H)。RT=2.10(條件III);>98%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C20 H25 N2 O2 之分析計算值為325.19；實驗值為325.20。將2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-苯基乙酸苯甲酯之任一立體異構物(1.0 g，3.1 mmol)之甲醇(10 mL)溶液添加至10% Pd/C(120 mg)於甲醇(5.0 mL)中之懸浮液中。將反應混合物在小心監控下暴露於氫氣氣球<50分鐘。完成反應之後，立即經矽藻土(CELITE)過濾催化劑且在真空中濃縮濾液以提供被苯基乙酸污染之棕褐色泡沫狀之Cap-7(867.6 mg；質量高於理論產量)。該產物不經進一步純化即用於下一步驟。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz)δ7.44-7.37(m,2H),7.37-7.24(m,3H),3.92(s,1H),2.63-2.48(app br s,2H),2.48-2.32(m,6H),2.19(s,3H)；RT=0.31(條件II);>90%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C13 H19 N2 O2 之分析計算值為235.14；實驗值為235.15；HRMS: [M+H]+ C13 H19 N2 O2 之分析計算值為235.1447；實驗值為235.1440。
如下所述，根據Cap-7之合成，藉由使用適當胺進行SN2 置換步驟(亦即對於Cap-8而言為4-羥基哌啶且對於Cap-9而言為(S)-3-氟吡咯啶)且使用改變之條件進行各自立體異構中間物之分離來進行Cap-8及Cap-9之合成。
藉由使用以下條件來實現中間物2-(4-羥基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸苯甲酯之立體異構分離：將化合物(500 mg)溶解於乙醇/庚烷(5 mL/45 mL)中。將所得溶液注於(每次注射5 mL)對掌性HPLC管柱(Chiracel OJ,2 cm ID×25 cm L,10 μm)上，以80:20庚烷/乙醇在10 mL/min下溶離，在220 nm下監控，以提供淡黃色黏性油狀之186.3 mg立體異構物-1及209.1 mg立體異構物-2。根據Cap-7之製備氫解該等苯甲酯以提供Cap-8：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz) 7.40(d,J =7,2H),7.28-7.20(m,3H),3.78(s 1H),3.46(m,1H),2.93(m,1H),2.62(m,1H),2.20(m,2H),1.70(m,2H),1.42(m,2H)。RT=0.28(條件II);>98%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C13 H18 NO3 之分析計算值為236.13；實驗值為236.07；HRMS:[M+H]+ C13 H18 NO3 之計算值為236.1287；實驗值為236.1283。
藉由使用以下條件來實現中間物2-((S)-3-氟吡咯啶-1-基)-2-苯基乙酸苯甲酯之非對映異構分離：將該酯(220 mg)在對掌性HPLC管柱(Chiracel OJ-H,0.46 cm ID×25 cm L,5μm)上以具有0.1% TFA之95% CO2 /5%甲醇在10巴壓力、70 mL/min流速及35℃之溫度下溶離來分離。濃縮各自立體異構物之HPLC溶離物，且將殘餘物溶解於CH2 Cl2 (20 mL)中且以水性介質(10 mL水+1 mL飽和NaHCO3 溶液)洗滌。乾燥(MgSO4 )有機相，過濾且在真空中濃縮以提供92.5 mg部分-1及59.6 mg部分-2。根據Cap-7之製備氫解該等苯甲酯以製備Cap-9a及Cap-9b。Cap-9a(非對映異構物-1；樣品由於用逆相HPLC使用H2 O/甲醇/TFA溶劑純化而為三氟乙酸鹽)：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,400 MHz) 7.55-7.48(m,5H),5.38(雙重多重峰(d of m)，J =53.7,1H),5.09(br s,1H),3.84-2.82(br m,4H),2.31-2.09(m,2H)。RT=0.42(條件I);>95%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C12 H15 FNO2 之分析計算值為224.11；實驗值為224.14；Cap-9b (非對映異構物-2):1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,400 MHz) 7.43-7.21(m,5H),5.19(雙重多重峰，J =55.9,1H),3.97(s,1H),2.95-2.43(m,4H),2.19-1.78(m,2H)。RT=0.44(條件I)；LC-MS:[M+H]+ C12 H15 FNO2 之分析計算值為224.11；實驗值為224.14。
向D-脯胺酸(2.0 g，17 mmol)及甲醛(2.0 mL於H2 O中之37重量%)於甲醇(15 mL)中之溶液中添加10% Pd/C(500 mg)於甲醇(5 mL)中之懸浮液。在氫氣氣球下攪拌混合物23小時。經矽藻土(CELITE)過濾反應混合物且在真空中濃縮以提供灰白色固體狀之Cap-10(2.15 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz) 3.42(m,1H),3.37(dd,J =9.4,6.1,1H),2.85-2.78(m,1H),2.66(s,3H),2.21-2.13(m,1H),1.93-1.84(m,2H),1.75-1.66(m,1H)。RT=0.28(條件II);>98%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C6 H12 NO2 之分析計算值為130.09；實驗值為129.96。
將(2S,4R)-4-氟吡咯啶-2-甲酸(0.50 g，3.8 mmol)、甲醛(0.5 mL於H2 O中之37重量%)、12 N HCl(0.25 mL)及10% Pd/C(50 mg)於甲醇(20 mL)中之混合物在氫氣氣球下攪拌19小時。經矽藻土(CELITE)過濾反應混合物，且在真空中濃縮濾液。將殘餘物自異丙醇再結晶以提供白色固體狀之Cap-11之鹽酸鹽(337.7 mg)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz) 5.39(dm,J =53.7,1H),4.30(m,1H),3.90(ddd,J =31.5,13.5,4.5,1H),3.33(dd,J =25.6,13.4,1H),2.85(s,3H),2.60-2.51(m,1H),2.39-2.26(m,1H)。RT=0.28(條件II);>98%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C6 H11 FNO2 之分析計算值為148.08；實驗值為148.06。
(S)-2-(甲氧基羰基胺基)丙酸將L-丙胺酸(2.0 g，22.5 mmol)溶解於10%碳酸鈉水溶液(50 mL)中，且向其中添加氯甲酸甲酯(4.0 mL)之THF(50mL)溶液。在環境條件下攪拌反應混合物4.5小時且在真空中濃縮。將所得白色固體溶解於水中且以1 N HCl酸化至pH值為約2-3。以乙酸乙酯(3×100 mL)萃取所得溶液，且乾燥(Na2 SO4 )合併之有機相，過濾，且在真空中濃縮以提供無色油狀物(2.58 g)。將500 mg該物質藉由逆相HPLC(H2 O/甲醇/TFA)純化以提供150 mg無色油狀之Cap-12。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz) 7.44(d,J =7.3,0.8H),7.10(br s,0.2H),3.97(m,1H),3.53(s,3H),1.25(d,J =7.3,3H)。
將L-丙胺酸(2.5 g，28 mmol)、甲醛(8.4 g，37重量%)、1N HCl(30 mL)及10% Pd/C(500 mg)於甲醇(30 mL)中之混合物在氫氣氣氛(50 psi)下攪拌5小時。經矽藻土(CELITE)過濾反應混合物且在真空中濃縮濾液以提供油狀之Cap-13之鹽酸鹽，其在真空下靜置之後固化(4.4 g；該質量高於理論產量)。該產物無需進一步純化即可使用。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5,500 MHz)δ12.1(br s,1H),4.06(q,J =7.4,1H),2.76(s,6H),1.46(d,J =7.3,3H)。
(R)-2-苯基-2-(哌啶-1-基)乙酸步驟1：在0℃下於甲醇中攪拌(R)-(-)-D-苯基甘胺酸第三丁酯(3.00 g，12.3 mmol)、NaBH3 CN(0.773 g，12.3 mmol)、KOH(0.690 g，12.3 mmol)及乙酸(0.352 mL，6.15 mmol)之混合物。向該混合物中經5分鐘逐滴添加戊二醛(2.23 mL，12.3 mmol)。在溫至環境溫度的同時攪拌反應混合物且在相同溫度下繼續攪拌16小時。隨後移除溶劑且將殘餘物分配在10% NaOH水溶液及乙酸乙酯。分離有機相，乾燥(MgSO4 )，過濾且濃縮至乾以提供透明油狀物。將該物質藉由逆相製備型HPLC(Primesphere C-18，30×100 mm；CH3 CN-H2 O-0.1% TFA)純化以得到透明油狀之中間物酯(2.70 g，56%)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ7.53-7.44(m,3H),7.40-7.37(m,2H),3.87(d,J =10.9 Hz,1H),3.59(d,J =10.9 Hz,1H),2.99(t,J =11.2 Hz,1H),2.59(t,J =11.4 Hz,1H),2.07-2.02(m,2H),1.82(d,J =1.82 Hz,3H),1.40(s,9H)。LC-MS: C17 H25 NO2 之分析計算值為275；實驗值為276(M+H)+ 。
步驟2：向中間物酯(1.12 g，2.88 mmol)於二氯甲烷(10 mL)中之經攪拌溶液中添加TFA(3 mL)。在環境溫度下攪拌反應混合物4小時且隨後濃縮至乾以得到淡黃色油狀物。將該油狀物使用逆相製備型HPLC(Primesphere C-18，30×100 mm；CH3 CN-H2 O-0.1% TFA)純化。合併適當溶離份且在真空中濃縮至乾。隨後將殘餘物溶解於最小量之甲醇中且施加於MCX LP萃取管(2×6 g)。以甲醇(40 mL)沖洗萃取管且隨後使用於甲醇(50 mL)中之2 M氨溶離所需化合物。合併含產物之溶離份且濃縮且將殘餘物溶解於水中。凍乾該溶液，提供淡黃色固體狀之標題化合物(0.492 g，78%)。1 H NMR(DMSO-d6 )δ7.50(s,5H),5.13(s,1H),3.09(br s,2H),2.92-2.89(m,2H),1.74(m,4H),1.48(br s,2H)。LC-MS: C13 H17 NO2 之分析計算值為219；實驗值為220(M+H)+ 。
步驟1： 2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向α-溴苯基乙酸(10.75 g，0.050 mol)、(S)-(-)-1-苯基乙醇(7.94 g，0.065 mol)及DMAP(0.61 g，5.0 mmol)於無水二氯甲烷(100 mL)中之混合物中一次性添加固體EDCI(12.46 g，0.065 mol)。在室溫下在Ar下攪拌所得溶液18小時，且隨後以乙酸乙酯稀釋，洗滌(H2 O×2、鹽水)，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮以得到淺黃色油狀物。將該油狀物急驟層析(SiO2 /己烷-乙酸乙酯，4:1)，提供白色固體狀之標題化合物(11.64 g，73%)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ7.53-7.17(m,10H),5.95(q,J =6.6 Hz,0.5H),5.94(q,J =6.6 Hz,0.5H),5.41(s,0.5H),5.39(s,0.5H),1.58(d,J =6.6 Hz,1.5H),1.51(d,J =6.6 Hz,1.5H)。
步驟2： (R)-2-(4-羥基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.464 g，1.45 mmol)於THF(8 mL)中之溶液中添加三乙胺(0.61 mL，4.35 mmol)，繼而添加碘化四丁基銨(0.215 g，0.58 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5分鐘且隨後添加4-甲基-4-羥基哌啶(0.251 g，2.18 mmol)於THF(2 mL)中之溶液。在室溫下攪拌混合物1小時且隨後在55-60℃(油浴溫度)下加熱4小時。隨後以乙酸乙酯(30 mL)稀釋經冷卻反應混合物，洗滌(H2 O×2，鹽水)，乾燥(MgSO4 )，過濾且濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法(0-60%乙酸乙酯-己烷)純化以首先提供白色固體狀之標題化合物之(S,R)-異構物(0.306 g，60%)且隨後提供亦為白色固體狀之相應(S,S)-異構物(0.120 g，23%)。(S,R)-異構物：1 H NMR(CD3 OD)δ7.51-7.45(m,2H),7.41-7.25(m,8H),5.85(q,J =6.6 Hz,1H),4.05(s,1H),2.56-2.45(m,2H),2.41-2.29(m,2H),1.71-1.49(m,4H),1.38(d,J =6.6 Hz,3H),1.18(s,3H)。LC-MS: C22 H27 NO3 之分析計算值為353；實驗值為354(M+H)+ 。(S,S)-異構物：1 H NMR(CD3 OD)δ7.41-7.30(m,5H),7.20-7.14(m,3H),7.06-7.00(m,2H),5.85(q,J =6.6 Hz,1H),4.06(s,1H),2.70-2.60(m,1H),2.51(dt,J =6.6,3.3 Hz,1H),2.44-2.31(m,2H),1.75-1.65(m,1H),1.65-1.54(m,3H),1.50(d,J =6.8 Hz,3H),1.20(s,3H)。LC-MS: C22 H27 NO3 之分析計算值為353；實驗值為354(M+H)+ 。
步驟3： (R)-2-(4-羥基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(4-羥基-4-甲基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.185 g，0.52 mmol)於二氯甲烷(3 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(1 mL)且在室溫下攪拌混合物2小時。隨後在真空中移除揮發物且將殘餘物藉由逆相製備型HPLC(Primesphere C-18，20×100 mm；CH3 CN-H2 O-0.1% TFA)純化以得到淺藍色固體狀之標題化合物(三氟乙酸鹽形式)(0,128 g，98%)。LC-MS: C14 H19 NO3 之分析計算值為249；實驗值為250(M+H)+ 。
步驟1：2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯基乙酯： 將2-氟苯基乙酸(5.45 g，35.4 mmol)、(S)-1-苯基乙醇(5.62 g，46.0 mmol)、EDCI(8.82 g，46.0 mmol)及DMAP(0.561 g，4.60 mmol)於CH2 Cl2 (100 mL)中之混合物在室溫下攪拌12小時。隨後濃縮溶劑且將殘餘物分配在H2 O-乙酸乙酯中。使各相分離且以乙酸乙酯(2×)反萃取水層。洗滌(H2 O、鹽水)合併之有機相，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法(BIOTAGE/0-20%乙酸乙酯-己烷)純化以提供無色油狀之標題化合物(8.38 g，92%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.32-7.23(m,7H),7.10-7.04(m,2),5.85(q,J =6.5 Hz,1H),3.71(s,2H),1.48(d,J =6.5 Hz,3H)。
步驟2： (R)-2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯：在0℃下向2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯基乙酯(5.00 g，19.4 mmol)於THF(1200 mL)中之溶液中添加DBU(6.19 g，40.7 mmol)且將溶液溫至室溫，同時攪拌30分鐘。隨後冷卻溶液至-78℃且添加CBr4 (13.5 g，40.7 mmol)於THF(100 mL)中之溶液，且將混合物溫至-10℃且在該溫度下攪拌2小時。以飽和NH4 Cl水溶液淬滅反應混合物，且分離各層。以乙酸乙酯(2×)反萃取水層且洗滌(H2 O、鹽水)合併之有機相，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮。向殘餘物中添加哌啶(5.73 mL，58.1 mmol)且在室溫下攪拌溶液24小時。隨後在真空中針對揮發物進行濃縮，且將殘餘物藉由矽膠層析法(BIOTAGE/0-30%乙醚-己烷)純化以提供黃色油狀之純的非對映異構物混合物(藉由1 H NMR測得比率為2:1)(2.07 g，31%)以及未反應之原料(2.53 g，51%)。進一步對非對映異構混合物進行層析(BIOTAGE/0-10%乙醚-甲苯)，提供無色油狀之標題化合物(0.737 g，11%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.52(ddd,J =9.4,7.6,1.8 Hz,1H),7.33-7.40(m,1),7.23-7.23(m,4H),7.02-7.23(m,4H),5.86(q,J =6.6 Hz,1H),4.45(s,1H),2.39-2.45(m,4H),1.52-1.58(m,4H),1.40-1.42(m,1H),1.38(d,J =6.6 Hz,3H)。LC-MS: C21 H24 FNO2 之分析計算值為341；實驗值為342(M+H)+ 。
步驟3 ：(R)-2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸：使(R)-2-(2-氟苯基)-2-(哌啶-1-基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯(0.737 g，2.16 mmol)及20% Pd(OH)2 /C(0.070 g)於乙醇(30 mL)中之混合物在室溫及大氣壓力(H2 氣球)下氫化2小時。隨後以Ar沖洗溶液，經矽藻土(CELITE)過濾且在真空中濃縮。此提供無色固體狀之標題化合物(0.503 g，98%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.65(ddd,J =9.1,7.6,1.5 Hz,1H),7.47-7.53(m,1H),7.21-7.30(m,2H),3.07-3.13(m,4H),1.84(br s,4H),1.62(br s,2H)。LC-MS: C13 H16 FNO2 之分析計算值為237；實驗值為238(M+H)+ 。
步驟1： (R)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯：向2-溴-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(1.50 g，4.70 mmol)於THF(25 mL)中之溶液中添加三乙胺(1.31 mL，9.42 mmol)，繼而添加碘化四丁基銨(0.347 g，0.94 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物5分鐘且隨後添加4-苯基-4-羥基哌啶(1.00 g，5.64 mmol)於THF(5 mL)中之溶液。攪拌混合物16小時且隨後以乙酸乙酯(100 mL)稀釋，洗滌(H2 O×2，鹽水)，乾燥(MgSO4 )，過濾且濃縮。將殘餘物在矽膠管柱(0-60%乙酸乙酯-己烷)上純化以提供非對映異構物之約2:1混合物(藉由1 H NMR判斷)。使用超臨界流體層析法(CHIRALCELOJ-H，30×250 mm；於CO2 中在35℃下之20%乙醇)執行該等異構物之分離以首先得到黃色油狀之標題化合物之(R)-異構物(0.534 g，27%)且隨後得到亦為黃色油狀之相應(S)-異構物(0.271 g，14%)。(S,R)-異構物：1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.55-7.47(m,4H),7.44-7.25(m,10H),7.25-7.17(m,1H),5.88(q,J =6.6 Hz,1H),4.12(s,1H),2.82-2.72(m,1H),2.64(dt,J =11.1,2.5 Hz,1H),2.58-2.52(m,1H),2.40(dt,J =11.1,2.5 Hz,1H),2.20(dt,J =12.1,4.6 Hz,1H),2.10(dt,J =12.1,4.6 Hz,1H),1.72-1.57(m,2H),1.53(d,J =6.5 Hz,3H)。LC-MS: C27 H29 NO3 之分析計算值為415；實驗值為416(M+H)+ ；(S,S)-異構物：H1 NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.55-7.48(m,2H),7.45-7.39(m,2H),7.38-7.30(m,5H),7.25-7.13(m,4H),7.08-7.00(m,2H),5.88(q,J =6.6 Hz,1H),4.12(s,1H),2.95-2.85(m,1H),2.68(dt,J =11.1,2.5 Hz,1H),2.57-2.52(m,1H),2.42(dt,J =11.1,2.5 Hz,1H),2.25(dt,J =12.1,4.6 Hz,1H),2.12(dt,J =12.1,4.6 Hz,1H),1.73(dd,J =13.6,3.0 Hz,1H),1.64(dd,J =13.6,3.0 Hz,1H),1.40(d,J =6.6 Hz,3H)。LC-MS: C27 H29 NO3 之分析計算值為415；實驗值為416(M+H)+ 。
以類似方式製備以下酯：
用於測定滯留時間之對掌性SFC條件：
條件I
管柱：CHIRALPAKAD-H管柱，4.62×50 mm，5 μm
溶劑：含0.1%DEA之90% CO2 -10%甲醇
溫度：35℃
壓力：150巴
流速：2.0 mL/min.
在220 nm下進行紫外線監測
進樣：1.0 mg/3mL甲醇
條件II
管柱：CHIRALCELOD-H管柱，4.62×50 mm，5 μm
溶劑：含0.1%DEA之90% CO2 -10%甲醇
溫度：35℃
壓力：150巴
流速：2.0 mL/min.
在220 nm下進行紫外線監測
進樣：1.0 mg/mL甲醇
Cap-17，步驟2：(R)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(4-羥基-4-苯基哌啶-1-基)-2-苯基乙酸(S)-1-苯基乙酯(0.350 g，0.84 mmol)於二氯甲烷(5 mL)中之溶液中添加三氟乙酸(1 mL)且在室溫下攪拌混合物2小時。隨後在真空中移除揮發物且將殘餘物藉由逆相製備型HPLC(Primesphere C-18，20×100 mm；CH3 CN-H2 O-0.1% TFA)純化以得到白色固體狀標題化合物(三氟乙酸鹽形式)(0.230 g，88%)。LC-MS: C19 H21 NO3 之分析計算值為311.15；實驗值為312(M+H)+ 。
以類似方式製備光學純形式之以下羧酸：
用於測定滯留時間之LC-MS條件：
條件I
管柱：PHENOMENEXLuna 4.6×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220
溶劑A=10%甲醇-90% H2 O-0.1% TFA
溶劑B=90%甲醇-10% H2 O-0.1% TFA
條件II
管柱：Waters-Sunfire 4.6×50 mm S5
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=2 min
流速=4 mL/min
波長=220
溶劑A=10%甲醇-90% H2 O-0.1% TFA
溶劑B=90%甲醇-10% H2 O-0.1% TFA
條件III
管柱：PHENOMENEX10 μ 3.0×50 mm
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=2 min
流速=4 mL/min
波長=220
溶劑A=10%甲醇-90% H2 O-0.1% TFA
溶劑B=90%甲醇-10% H2 O-0.1% TFA
Cap-18
步驟1：(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-溴乙酸乙酯。在0℃下在氬氣下向4-吡啶基乙酸乙酯(1.00 g，6.05 mmol)於無水THF(150 mL)中之溶液中添加DBU(0.99 mL，6.66 mmol)。將反應混合物經30分鐘溫至室溫且隨後冷卻至-78℃。向該混合物中添加CBr4 (2.21 g，6.66 mmol)且在-78℃下繼續攪拌2小時。隨後以飽和NH4 Cl水溶液淬滅反應反應混合物且分離各相。洗滌(鹽水)有機相，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮。將所得黃色油狀物立即藉由急驟層析法(SiO2 /己烷-乙酸乙酯，1:1)純化以提供略不穩定之黃色油狀之標題化合物(1.40 g，95%)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ8.62(dd,J =4.6,1.8 Hz,2H),7.45(dd,J =4.6,1.8 Hz,2H),5.24(s,1H),4.21-4.29(m,2H),1.28(t,J =7.1 Hz,3H)。LC-MS: C9 H10 BrNO2 之分析計算值為242,244；實驗值為243,245(M+H)+ 。步驟2：(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-(N,N-二甲基胺基)乙酸乙酯。在室溫下向(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-溴乙酸乙酯(1.40 g，8.48 mmol)於DMF(10 mL)中之溶液中添加二甲胺(於THF中2 M，8.5 mL，17.0 mmol)。在反應完成(藉由薄層層析法判斷)之後，在真空中移除揮發物且將殘餘物藉由急驟層析法(BIOTAGE，40+M SiO2 管柱；50%-100%乙酸乙酯-己烷)純化以提供淡黃色油狀之標題化合物(0.539 g，31%)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ8.58(d,J =6.0 Hz,2H),7.36(d,J =6.0 Hz,2H),4.17(m,2H),3.92(s,1H),2.27(s,6H),1.22(t,J =7.0 Hz)。LC-MS: C11 H16 N2 O2 之分析計算值為：208；實驗值為209(M+H)+ 。步驟3：(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-(N,N-二甲基胺基)乙酸：在室溫下向(R,S)-2-(4-吡啶基)-2-(N,N-二甲基胺基)乙酸乙酯(0.200 g，0.960 mmol)於THF-甲醇-H2 O(1:1:1，6 mL)之混合物中之溶液中添加粉狀LiOH(0.120 g，4.99 mmol)。
攪拌溶液3小時且隨後使用1 N HCl酸化至pH值為6。以乙酸乙酯洗滌水相且隨後凍乾以得到黃色固體狀之標題化合物之二鹽酸鹽(含有LiCl)。將產物按原樣用於後續步驟中。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ8.49(d,J =5.7 Hz,2H),7.34(d,J =5.7 Hz,2H),3.56(s,1H),2.21(s,6H)。以類似方式使用上述方法製備以下實例：
步驟1：(R,S)-2-(喹啉-3-基)-2-(N,N-二甲基胺基)-乙酸乙酯：將N,N-二甲基胺基乙酸乙酯(0.462 g，3.54 mmol)、K3 PO4 (1.90 g，8.95 mmol)、Pd(t-Bu3 P)2 (0.090 g，0.176 mmol)、3-溴喹啉及甲苯(10 mL)之混合物以Ar氣泡流脫氣15分鐘。隨後在100℃下加熱反應混合物12小時，之後冷卻至室溫且倒入H2 O中。以乙酸乙酯(2×)萃取混合物且滌(H2 O、鹽水)合併之有機相洗，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物首先藉由逆相製備型HPLC(Primesphere C-18，30×100 mm；CH3 CN-H2 O-5 mM NH4 OAc)純化且隨後藉由急驟層析法(SiO2 /己烷-乙酸乙酯，1:1)純化以提供橙色油狀之標題化合物(0.128 g，17%)。1 H NMR(400 MHz，CDCl3 )δ8.90(d,J =2.0 Hz,1H),8.32(d,J =2.0 Hz,1H),8.03-8.01(m,2H),7.77(ddd,J =8.3,6.8,1.5 Hz,1H),7.62(ddd,J =8.3,6.8,1.5 Hz,1H),4.35(s,1H),4.13(m,2H),2.22(s,6H),1.15(t,J =7.0 Hz,3H)。LC-MS: C15 H18 N2 O2 之分析計算值為258；實驗值為259(M+H)+ 。
步驟2：(R,S)2-(喹啉-3-基)-2-(N,N-二甲基胺基)乙酸：將(R,S)-2-(喹啉-3-基)-2-(N，N-二甲基胺基)乙酸乙酯(0.122 g，0.472 mmol)及6 M HCl(3 mL)之混合物在100℃下加熱12小時。在真空中移除溶劑以提供淡黃色泡沫狀之標題化合物之二鹽酸鹽(0.169 g，>100%)。該未經純化之物質不經進一步純化即可用於後續步驟中。LC-MS: C13 H14 N2 O2 之分析計算值為230；實驗值為231(M+H)+ 。
步驟1：(R)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯及(S)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯：向(R,S)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸(2.60 g，13.19 mmol)、DMAP(0.209 g，1.71 mmol)及(S)-1-苯基乙醇(2.09 g，17.15 mmol)於CH2 Cl2 (40 mL)中之混合物中添加EDCI(3.29 g，17.15 mmol)，且在室溫下攪拌混合物12小時。隨後在真空中移除溶劑且將殘餘物分配在乙酸乙酯-H2 O中。分離各層，以乙酸乙酯(2×)反萃取水層且洗滌(H2 O、鹽水)合併之有機相，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由矽膠層析法(BIOTAGE/0-50%乙醚-己烷)純化。然後將所得純非對映異構混合物藉由逆相製備型HPLC(Primesphere C-18，30×100 mm；CH3 CN-H2 O-0.1% TFA)分離以首先得到(R)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯乙酯(0.501 g，13%)且隨後得到(S)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸(S)-1-苯乙酯(0.727 g，18%)，兩者均為其三氟乙酸鹽形式。(S,R)-異構物：1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.65-7.70(m,1H),7.55-7.60(ddd,J =9.4,8.1,1.5 Hz,1H),7.36-7.41(m,2H),7.28-7.34(m,5H),6.04(q,J =6.5 Hz,1H),5.60(s,1H),2.84(s,6H),1.43(d,J =6.5 Hz,3H)。LC-MS: C18 H20 FNO2 之分析計算值為301；實驗值為302(M+H)+ ；(S,S)-異構物：1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.58-7.63(m,1H),7.18-7.31(m,6H),7.00(dd,J =8.5,1.5 Hz,2H),6.02(q,J =6.5 Hz,1H),5.60(s,1H),2.88(s,6H),1.54(d,J =6.5 Hz,3H)。LC-MS: C18 H20 FNO2 之分析計算值為301；實驗值為302(M+H)+ 。
步驟2：(R)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸：使(R)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯之三氟乙酸鹽(1.25 g，3.01 mmol)及20% Pd(OH)2 /C(0.125 g)於乙醇(30 mL)中之混合物在室溫及大氣壓力(H2 氣球)下氫化4小時。隨後以Ar沖洗溶液，經矽藻土(CELITE)過濾且在真空中濃縮。此得到無色固體狀之標題化合物(0.503 g，98%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.53-7.63(m,2H),7.33-7.38(m,2H),5.36(s,1H),2.86(s,6H)。LC-MS: C10 H12 FNO2 之分析計算值為197；實驗值為198(M+H)+ 。可以類似方式由(S)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氟苯基)乙酸((S)-1-苯基乙基)酯之三氟乙酸鹽獲得S-異構物。
使(R)-(2-氯苯基)甘胺酸(0.300 g，1.62 mmol)、甲醛(35%水溶液，0.80 mL，3.23 mmol)及20% Pd(OH)2 /C(0.050 g)之混合物在室溫及大氣壓力(H2 氣球)下氫化4小時。隨後以Ar沖洗溶液，經矽藻土(CELITE)過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由逆相製備型HPLC(Primesphere C-18，30×100 mm；CH3 CN-H2 O-0.1% TFA)純化以得到無色油狀之標題化合物(R)-2-(二甲基胺基)-2-(2-氯苯基)乙酸之三氟乙酸鹽(0.290 g，55%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.59-7.65(m,2H),7.45-7.53(m,2H),5.40(s,1H),2.87(s,6H)。LC-MS: C10 H12 ClNO2 之分析計算值為213；實驗值為214(M+H)+ 。
向(R)-(2-氯苯基)甘胺酸(1.00 g，5.38 mmol)及NaOH(0.862 g，21.6 mmol)於H2 O(5.5 mL)中之冰冷溶液中逐滴添加氯甲酸甲酯(1.00 mL，13.5 mmol)。在0℃下攪拌混合物1小時且隨後藉由添加濃鹽酸(2.5 mL)酸化。以乙酸乙酯(2×)萃取混合物且洗滌(H2 O、鹽水)合併之有機相，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮以得到黃橙色泡沫狀之標題化合物(R)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(2-氯苯基)乙酸(1.31 g，96%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.39-7.43(m,2H),7.29-7.31(m,2H),5.69(s,1H),3.65(s,3H)。LC-MS: C10 H10 ClNO4 之分析計算值為243；實驗值為244(M+H)+ 。
向2-(2-(氯甲基)苯基)乙酸(2.00 g，10.8 mmol)於THF(20 mL)中之懸浮液中添加嗎啉(1.89 g，21.7 mmol)，且在室溫下攪拌溶液3小時。隨後以乙酸乙酯稀釋反應混合物且以H2 O(2×)萃取。凍乾水相且將殘餘物藉由矽膠層析法(BIOTAGE/0-10%甲醇-CH2 Cl2 )純化以得到無色固體狀之標題化合物2-(2-(嗎啉基甲基)苯基)乙酸(2.22 g，87%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.37-7.44(m,3H),7.29-7.33(m,1H),4.24(s,2H),3.83(br s,4H),3.68(s,2H),3.14(br s,4H)。LC-MS: C13 H17 NO3 之分析計算值為235；實驗值為236(M+H)+ 。
使用對於Cap-41所述之方法類似地製備以下實例：
將HMDS(1.85 mL，8.77 mmol)添加至(R)-2-胺基-2-苯基乙酸對甲苯磺酸酯(2.83 g，8.77 mmol)於CH2 Cl2 (10 mL)中之懸浮液中且在室溫下攪拌混合物30分鐘。整份添加異氰酸甲酯(0.5 g，8.77 mmol)，繼續攪拌30分鐘。藉由添加H2 O(5 mL)淬滅反應且過濾所得沈澱物，以H2 O及正己烷洗滌，且在真空下乾燥。回收到白色固體狀之(R)-2-(3-甲基脲基)-2-苯基乙酸(1.5 g；82%)且其無需進一步純化即可使用。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 2.54(d,J =4.88 Hz,3H) 5.17(d,J =7.93 Hz,1H) 5.95(q,J =4.48 Hz,1H) 6.66(d,J =7.93 Hz,1H) 7.26-7.38(m,5H) 12.67(s,1H)。LC-MS: C10 H12 N2 O3 之分析計算值為208.08；實驗值為209.121(M+H)+ ；HPLC PHENOMENEXC-183.0×46 mm，0至100% B經2分鐘，1分鐘保持時間，A=90%水，10%甲醇，0.1% TFA，B=10%水，90%甲醇，0.1% TFA，RT=1.38 min，90%之均質性指數。
根據對於Cap-45a 所述之方法製備所需產物。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 0.96(t,J =7.17 Hz,3H) 2.94-3.05(m,2H) 5.17(d,J =7.93 Hz,1H) 6.05(t,J =5.19 Hz,1H) 6.60(d,J =7.63 Hz,1H) 7.26-7.38(m,5H) 12.68(s,1H)。LC-MS: C11 H14 N2 O3 之分析計算值為222.10；實驗值為223.15(M+H)+ 。HPLC XTERRAC-18 3.0×506 mm，0至100% B經2分鐘，1分鐘保持時間，A=90%水，10%甲醇，0.2% H3 PO4 ，B=10%水，90%甲醇，0.2% H3 PO4 ，RT=0.87 min，90%之均質性指數。
Cap-47
步驟1：(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸第三丁酯：向(R)-第三丁基-2-胺基-2-苯基乙酸酯(1.0 g，4.10 mmol)及許尼希氏鹼(1.79 mL，10.25 mmol)於DMF(40 mL)中之經攪拌溶液中經10分鐘逐滴添加二甲基胺甲醯基氯(0.38 mL，4.18 mmol)。在室溫下攪拌3小時之後，在減壓下濃縮反應物且將所得殘餘物溶解於乙酸乙酯中。以H2 O、1 N HCl水溶液及鹽水洗滌有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且在減壓下濃縮。獲得白色固體狀之(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸第三丁酯(0.86 g；75%)且其無需進一步純化即可使用。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 1.33(s,9H) 2.82(s,6H) 5.17(d,J =7.63 Hz,1H) 6.55(d,J =7.32 Hz,1H) 7.24-7.41(m,5H)。LC-MS: C15 H22 N2 O3 之分析計算值為278.16；實驗值為279.23(M+H)+ ；HPLC PHENOMENEXLUNA C-18 4.6×50 mm，0至100% B經4分鐘，1分鐘保持時間，A=90%水，10%甲醇，0.1% TFA，B=10%水，90%甲醇，0.1% TFA，RT=2.26 min，97%之均質性指數。步驟2：(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸第三丁酯(0.86 g，3.10 mmol)於CH2 Cl2 (250 mL)中之經攪拌溶液中逐滴添加TFA(15 mL)且在室溫下攪拌所得溶液3小時。隨後以EtOAC：己烷(5:20)之混合物使所需化合物自溶液沈澱出來，濾出且在減壓下乾燥。分離出白色固體狀之(R)-2-(3,3-二甲基脲基)-2-苯基乙酸(0.59 g；86%)且其無需進一步純化即可使用。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 2.82(s,6H) 5.22(d,J =7.32 Hz,1H) 6.58(d,J =7.32 Hz,1H) 7.28(t,J =7.17 Hz,1H) 7.33(t,J =7.32 Hz,2H) 7.38-7.43(m,2H) 12.65(s,1H)。LC-MS: C11 H14 N2 O3 之分析計算值為222.24；實驗值為223.21(M+H)+ 。HPLC XTERRAC-18 3.0×50 mm，0至100% B經2分鐘，1分鐘保持時間，A=90%水，10%甲醇，0.2% H3 PO4 ，B=10%水，90%甲醇，0.2% H3 PO4 ，RT=0.75 min，93%之均質性指數。
步驟1：(R)-2-(3-環戊基脲基)-2-苯基乙酸第三丁酯：向(R)-2-胺基-2-苯基乙酸鹽酸鹽(1.0 g，4.10 mmol)及許尼希氏鹼(1.0 mL，6.15 mmol)於DMF(15 mL)中之經攪拌溶液中經10分鐘逐滴添加異氰酸環戊酯(0.46 mL，4.10 mmol)。在室溫下攪拌3小時之後，在減壓下濃縮反應物且將所得殘餘物溶解於乙酸乙酯中。以H2 O及鹽水洗滌有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且在減壓下濃縮。獲得不透明油狀之(R)-2-(3-環戊基脲基)-2-苯基乙酸第三丁酯(1.32 g；100%)且其無需進一步純化即可使用。1 H NMR(500 MHz,CD3 Cl-D)δppm 1.50-1.57(m,2H) 1.58-1.66(m,2H) 1.87-1.97(m,2H) 3.89-3.98(m,1H) 5.37(s,1H) 7.26-7.38(m,5H)。LC-MS: C18 H26 N2 O3 之分析計算值為318.19；實驗值為319.21(M+H)+ ；HPLC XTERRAC-18 3.0×50 mm，0至100% B經4分鐘，1分鐘保持時間，A=90%水，10%甲醇，0.1% TFA，B=10%水，90%甲醇，0.1% TFA，RT=2.82 min，96%之均質性指數。
步驟2：(R)-2-(3-環戊基脲基)-2-苯基乙酸：向(R)-2-(3-環戊基脲基)-2-苯基乙酸第三丁酯(1.31 g，4.10 mmol)於CH2 Cl2 (25 mL)中之經攪拌溶液中逐滴添加TFA(4 mL)及三乙基矽烷(1.64 mL；10.3 mmol)，且在室溫下攪拌所得溶液6小時。在減壓下移除揮發性組分且使粗產物在乙酸乙酯/戊烷中再結晶以得到白色固體狀之(R)-2-(3-環戊基脲基)-2-苯基乙酸(0.69 g，64%)。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 1.17-1.35(m,2H) 1.42-1.52(m,2H) 1.53-1.64(m,2H) 1.67-1.80(m,2H) 3.75-3.89(m,1H) 5.17(d,J =7.93 Hz,1H) 6.12(d,J =7.32 Hz,1H) 6.48(d,J =7.93 Hz,1H) 7.24-7.40(m,5H) 12.73(s,1H)。LC-MS: C14 H18 N2 O3 之分析計算值為262.31；實驗值為263.15(M+H)+ 。HPLC XTERRAC-18 3.0×50 mm，0至100% B經2分鐘，1分鐘保持時間，A=90%水，10%甲醇，0.2% H3 PO4 ，B=10%水，90%甲醇，0.2% H3 PO4 ，RT=1.24 min，100%之均質性指數。
向2-(苯甲基胺基)乙酸(2.0 g，12.1 mmol)在甲酸(91 mL)中之經攪拌溶液中添加甲醛(6.94 mL，93.2 mmol)。在70℃下5小時之後，在減壓下濃縮反應混合物至20 mL且沈澱出白色固體。過濾之後，收集母液且在減壓下進一步濃縮，提供粗產物。藉由逆相製備型HPLC純化(XTERRA30×100 mm，在220 nm下偵測，流速35 mL/min，0至35% B經8分鐘；A=90%水，10%甲醇，0.1% TFA，B=10%水，90%甲醇，0.1% TFA)，提供無色蠟狀之三氟乙酸鹽形式的標題化合物2-(苯甲基(甲基)-胺基)乙酸(723 mg，33%)。1 H NMR(300 MHz,DMSO-d6 )δppm 2.75(s,3H) 4.04(s,2H) 4.34(s,2H) 7.29-7.68(m,5H)。LC-MS: C10 H13 NO2 之分析計算值為179.09；實驗值為180.20(M+H)+ 。
向3-甲基-2-(甲基胺基)丁酸(0.50 g，3.81 mmol)於水(30 mL)中之經攪拌溶液中添加K2 CO3 (2.63 g，19.1 mmol)及苯甲基氯(1.32 g，11.4 mmol)。在環境溫度下攪拌反應混合物18小時。以乙酸乙酯(30 mL×2)萃取反應混合物且在減壓下濃縮水層，提供粗產物，將其藉由逆相製備型HPLC(XTERRA30×100 mm，在220 nm下偵測，流速40 mL/min，20至80% B經6分鐘；A=90%水，10%甲醇，0.1% TFA，B=10%水，90%甲醇，0.1% TFA)純化以提供無色蠟狀之2-(苯甲基(甲基)胺基)-3-甲基丁酸之三氟乙酸鹽(126 mg，19%)。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 0.98(d,3H) 1.07(d,3H) 2.33-2.48(m,1H) 2.54-2.78(m,3H) 3.69(s,1H) 4.24(s,2H) 7.29-7.65(m,5H)。LC-MS: C13 H19 NO2 之分析計算值為221.14；實驗值為222.28(M+H)+ 。
(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸將Na2 CO3 (1.83 g，17.2 mmol)添加至L-纈胺酸(3.9 g，33.29 mmol)之NaOH(33 mL 1 M/H2 O，33 mmol)溶液中且以冰水浴冷卻所得溶液。經15分鐘逐滴添加氯甲酸甲酯(2.8 mL，36.1 mmol)，移除冷卻浴且在環境溫度下攪拌反應混合物3.25小時。以乙醚(50 mL，3×)洗滌反應混合物，且以冰水浴冷卻水相且以濃鹽酸酸化至1-2之pH值範圍，且以CH2 Cl2 (50 mL，3×)萃取。乾燥(MgSO4 )有機相且在真空中蒸發以提供白色固體狀之Cap-51(6 g)。主要旋轉異構物之1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz): 12.54(s,1H),7.33(d,J =8.6,1H),3.84(dd,J =8.4,6.0,1H),3.54(s,3H),2.03(m,1H),0.87(m,6H)。HRMS:[M+H]+ C7 H14 NO4 之分析計算值為176.0923；實驗值為176.0922。
(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸將DIEA(137.5 mL，0.766 mol)添加至(S )-2-胺基-3-甲基丁酸第三丁基酯鹽酸鹽(75.0 g，0.357 mol)於THF(900 mL)中之懸浮液中，且冷卻混合物至0℃(冰/水浴)。經45分鐘，逐滴添加氯甲酸甲酯(29.0 mL，0.375 mol)，移除冷卻浴且在周圍溫度下攪拌異質混合物3小時。在減壓下移除溶劑，且將殘餘物分配在EtOAc與水(各1 L)之間。用H2 O(1 L)及鹽水(1 L)洗滌有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且在減壓下濃縮。使粗材料通過矽膠塞(1 kg)，用己烷(4 L)及15:85 EtOAc/己烷(4 L)溶離，得到呈澄清油狀之(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸第三丁酯(82.0 g，產率99%)。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm) 7.34(d,J =8.6,1 H),3.77(dd,J =8.6,6.1,1 H),3.53(s,3 H),1.94-2.05(m,1 H),1.39(s,9 H),0.83-0.92(m,6 H)。13 C-NMR(126 MHz,DMSO-d6 ,δ=39.2 ppm) 170.92,156.84,80.38,60.00,51.34,29.76,27.62,18.92,17.95。LC-MS:[M+Na]+ 254.17。
將三氟乙酸(343 mL，4.62 mol)及Et3 SiH(142 mL，0.887 mol)依次添加至(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸第三丁酯(82.0 g，0.355 mol)於CH2 Cl2 (675 mL)中之溶液中，且在周圍溫度下攪拌混合物4小時。在減壓下移除揮發性組分，且用石油醚(600 mL)濕磨所得油狀物，得到白色固體，將其過濾且用己烷(500 mL)及石油醚(500 mL)洗滌。自EtOAc/石油醚再結晶得到呈白色片狀晶體之Cap-51(54.8 g，產率88%)。MP=108.5-109.5℃。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm) 12.52(s,1 H),7.31(d,J =8.6,1 H),3.83(dd,J =8.6,6.1,1 H),3.53(s,3 H),1.94-2.07(m,1 H),0.86(dd,J =8.9,7.0,6 H)。13 C NMR(126 MHz,DMSO-d6 ,δ=39.2 ppm) 173.30,156.94,59.48,51.37,29.52,19.15,17.98。LC-MS:[M+H]+ =176.11。C7 H13 NO4 之分析計算值：C,47.99;H,7.48;N,7.99。實驗值：C,48.17;H,7.55;N,7.99。旋光度：[α]D =-4.16(12.02 mg/mL；MeOH)。光學純度：>99.5% ee。注意：對Cap-51之甲酯衍生物進行光學純度評估，該甲酯衍生物係根據標準TMSCHN2 (苯/MeOH)酯化方案製備。HPLC分析條件：管柱，CHIRALPAKAD-H(4.6×250 mm，5 μm)；溶劑，95%庚烷/5% IPA(等度)；流速，1 mL/min；溫度，35℃；在205 nm下紫外線監測。
[注意：Cap-51亦可自Flamm購得。]Cap-52(與Cap-12相同)
(S)-2-(甲氧基羰基胺基)丙酸根據對於合成Cap-51所述之程序自L-丙胺酸合成Cap-52。出於表徵之目的，將一部分粗物質藉由逆相HPLC(H2 O/甲醇/TFA)純化以提供無色黏性油狀之Cap-52。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz): 12.49(br s,1H),7.43(d,J =7.3,0.88H),7.09(app br s,0.12H),3.97(m,1H),3.53(s,3H),1.25(d,J =7.3,3H)。Cap-53至Cap-64根據對於合成Cap-51所述之程序，同時作出所提及之改變(若存在時)自適當原料製備Cap-53至Cap-64。
將氯甲酸甲酯(0.65 mL，8.39 mmol)經5分鐘逐滴添加至Na2 CO3 (0.449 g，4.23 mmol)、NaOH(8.2 mL 1 M/H2 O，8.2 mmol)及(S)-2-胺基-3-羥基-3-甲基丁酸(1.04 g，7.81 mmol)之經冷卻(冰水)混合物中。攪拌反應混合物45分鐘，且隨後移除冷卻浴且再繼續攪拌3.75小時。以CH2 Cl2 洗滌反應混合物，且以冰水浴冷卻水相且以濃鹽酸酸化至1-2之pH值範圍。在真空中移除揮發性組分且將殘餘物溶解於MeOH/CH2 Cl2 之2:1混合物(15 mL)中且過濾，且旋轉蒸發(rotervape)濾液以提供白色半黏性泡沫狀之Cap-65(1.236 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ6.94(d,J =8.5,0.9 H),6.53(br s,0.1H),3.89(d,J =8.8,1H),2.94(s,3H),1.15(s,3H),1.13(s,3H)。
藉由使用對於合成Cap-65所述之程序自適當市售原料製備Cap-66及Cap-67。
1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ12.58(br s,1H),7.07(d,J =8.3,0.13H),6.81(d,J =8.8,0.67H),4.10-4.02(m,1.15H),3.91(dd,J =9.1,3.5,0.85H),3.56(s,3H),1.09(d,J =6.2,3H)。[注意：僅註明主要NH信號]。
1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 12.51(br s,1H),7.25(d,J =8.4,0.75H),7.12(br d,J =0.4,0.05H),6.86(br s,0.08H),3.95-3.85(m,2H),3.54(s,3H),1.08(d,J =6.3,3H)。[注意：僅註明主要NH信號]。
將氯甲酸甲酯(0.38 ml，4.9 mmol)逐滴添加至1 N NaOH(水溶液)(9.0 ml，9.0 mmol)、1 M NaHCO3 (水溶液)(9.0 ml，9.0 mol)、L-天冬胺酸β-苯甲酯(1.0 g，4.5 mmol)及二噁烷(9 ml)之混合物中。在環境條件下攪拌反應混合物3小時，且隨後以乙酸乙酯(50 ml，3×)洗滌。以12 N HCl酸化水層至pH值為約1-2，且以乙酸乙酯(3×50 ml)萃取。以鹽水洗滌合併之有機層，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮以提供淡黃色油狀之Cap-68(1.37 g；質量高於理論產量，且該產物無需進一步純化即可使用)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz):δ12.88(br s,1H),7.55(d,J =8.5,1H),7.40-7.32(m,5H),5.13(d,J =12.8,1H),5.10(d,J =12.9,1H),4.42-4.38(m,1H),3.55(s,3H),2.87(dd,J =16.2,5.5,1H),2.71(dd,J =16.2,8.3,1H)。LC(條件2): RT=1.90 min；LC-MS:[M+H]+ C13 H16 NO6 之分析計算值為282.10；實驗值為282.12。
將NaCNBH3 (2.416 g，36.5 mmol)分批添加至丙胺酸(1.338 g，15.0 mmol)之冰凍(約15℃)水(17 mL)/MeOH(10 mL)溶液中。數分鐘之後，經4分鐘逐滴添加乙醛(4.0 mL，71.3 mmol)，移除冷卻浴，且在環境條件下攪拌反應混合物6小時。再添加乙醛(4.0 mL)且攪拌反應物2小時。將濃鹽酸緩慢添加至反應混合物中直至pH值達至約1.5，且在40℃下加熱所得混合物1小時。在真空中移除大多數揮發性組分，且將殘餘物以DOWEX50WX8-100離子交換樹脂(以水洗滌管柱，且將化合物以藉由將18 ml NH4 OH與282 ml水混合來製備之稀NH4 OH溶離)純化以提供灰白色軟吸濕性固體狀之Cap-69(2.0 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ3.44(q,J =7.1,1H),2.99-2.90(m,2H),2.89-2.80(m,2H),1.23(d,J =7.1,3H),1.13(t,J =7.3,6H)。
Cap-70至Cap-74x根據對於合成Cap-69所述之程序藉由使用適當原料來製備Cap-70至Cap-74x。
將NaBH3 CN(1.6 g，25.5 mmol)添加至H-D-絲胺酸-OBzl HCl(2.0 g，8.6 mmol)之經冷卻(冰/水浴)的水(25 ml)/甲醇(15 ml)溶液中。經5分鐘逐滴添加乙醛(1.5 mL，12.5 mmol)，移除冷卻浴，且在環境條件下攪拌反應混合物2小時。以12 N HCl小心地淬滅反應且在真空中濃縮。將殘餘物溶解於水中且以逆相HPLC(MeOH/H2 O/TFA)純化以提供無色黏性油狀之(R)-2-(二乙胺基)-3-羥基丙酸苯甲酯之三氟乙酸鹽(1.9 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz):δ9.73(br s,1H),7.52-7.36(m,5H),5.32(d,J =12.2,1H),5.27(d,J =12.5,1H),4.54-4.32(m,1H),4.05-3.97(m,2H),3.43-3.21(m,4H),1.23(t,J =7.2,6H)。LC-MS(條件2): RT=1.38 min；LC-MS: [M+H]+ C14 H22 NO3 之分析計算值為252.16；實驗值為252.19。
Cap-75將NaH(0.0727 g，1.82 mmol，60%)添加至以上所製備之(R)-2-(二乙胺基)-3-羥基丙酸苯甲酯之三氟乙酸鹽(0.3019 g，0.8264 mmol)的經冷卻(冰-水)THF(3.0 mL)溶液中，且攪拌混合物15分鐘。添加甲基碘(56 μL，0.90 mmol)且繼續攪拌18小時，同時將浴解凍至環境條件。以水淬滅反應且裝載於經MeOH預調節(pre-conditioned)之MCX(6 g)管匣上，且以甲醇洗滌，繼而以2 N NH3 /甲醇進行化合物溶離。在真空中移除揮發性組分，提供被(R)-2-(二乙胺基)-3-羥基丙酸污染之黃色半固體狀之Cap-75(100 mg)。該產物無需進一步純化即可按原樣加以使用。
將NaCNBH3 (1.60 g，24.2 mmol)分批添加至(S)-4-胺基-2-(第三丁氧基羰基胺基)丁酸(2.17 g，9.94 mmol)之冰凍(約15℃)水/MeOH(各12 mL)溶液中。數分鐘之後，經2分鐘逐滴添加乙醛(2.7 mL，48.1 mmol)，移除冷卻浴，且在環境條件下攪拌反應混合物3.5小時。再添加乙醛(2.7 mL，48.1 mmol)且攪拌反應物20.5小時。在真空中移除大多數MeOH組分，且以濃鹽酸處理剩餘混合物直至其pH值達至約1.0，且隨後在40℃下加熱2小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物以4 M HCl/二噁烷(20 mL)處理且在環境條件下攪拌7.5小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物以DOWEX50WX8-100離子交換樹脂(以水洗滌管柱，且將化合物以由18 ml NH4 OH及282 ml水製備之稀NH4 OH溶離)純化以提供灰白色固體狀之中間物(S)-2-胺基-4-(二乙胺基)丁酸(1.73 g)。
將氯甲酸甲酯(0.36 mL，4.65 mmol)經11分鐘逐滴添加至Na2 CO3 (0.243 g，2.29 mmol)、NaOH(4.6 mL 1M/H2 O，4.6 mmol)及上述產物(802.4 mg)之經冷卻(冰水)混合物中。攪拌反應混合物55分鐘，且隨後移除冷卻浴且再繼續攪拌5.25小時。以等體積水稀釋反應混合物且以CH2 Cl2 (30 mL，2×)洗滌，且以冰水浴冷卻水相且以濃鹽酸酸化至2之pH值範圍。隨後在真空中移除揮發性組分且用MCX樹脂(6.0 g；以水洗滌管柱，且將樣品以2.0 M NH3 /MeOH溶離)將粗物質游離鹼化(free-based)以提供灰白色固體狀之不純的Cap-76(704 mg)。1 H NMR(MeOH-d4 ,δ=3.29 ppm,400 MHz):δ3.99(dd,J =7.5,4.7,1H),3.62(s,3H),3.25-3.06(m,6H),2.18-2.09(m,1H),2.04-1.96(m,1H),1.28(t,J =7.3,6H)。LC-MS:[M+H]+ C10 H21 N2 O4 之分析計算值為233.15；實驗值為233.24。
根據對於Cap-7所述之程序，藉由使用7-氮雜雙環[2.2.1]庚烷進行SN2 置換步驟，且藉由使用以下條件來實現中間物2-(7-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-7-基)-2-苯基乙酸苯甲酯之立體異構分離來進行Cap-77之合成：將該中間物(303.7 mg)溶解於乙醇中，且將所得溶液注於對掌性HPLC管柱(Chiracel AD-H管柱，30×250 mm，5 μm)上，以90% CO2 -10% EtOH在70 mL/min下及35℃之溫度下溶離，以提供124.5 mg立體異構物-1及133.8 mg立體異構物-2。根據Cap-7之製備將該等苯甲酯氫解以提供Cap-77：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ7.55(m,2H),7.38-7.30(m,3H),4.16(s,1H),3.54(app br s,2H),2.08-1.88(m,4H),1.57-1.46(m,4H)。LC(條件1): RT=0.67 min；LC-MS: [M+H]+ C14 H18 NO2 之分析計算值為232.13；實驗值為232.18。HRMS: [M+H]+ C14 H18 NO2 之分析計算值為232.1338；實驗值為232.1340。
將NaCNBH3 (0.5828 g，9.27 mmol)添加至(R)-2-(乙基胺基)-2-苯基乙酸之HCl鹽(Cap-3之合成中之中間物；0.9923 mg，4.60 mmol)及(1-乙氧基環丙氧基)三甲基矽烷(1.640 g，9.40 mmol)於MeOH(10 mL)中之混合物中，且用油浴在50℃下加熱該半非均質混合物20小時。再添加(1-乙氧基環丙氧基)三甲基矽烷(150 mg，0.86 mmol)及NaCNBH3 (52 mg，0.827 mmol)且再加熱反應混合物3.5小時。隨後冷卻至環境溫度且以濃鹽酸酸化至約2之pH值範圍，且過濾混合物且旋轉蒸發濾液。將所得粗物質溶解於i-PrOH(6 mL)中且加熱以實現溶解，且濾除未溶解部分且在真空中濃縮濾液。將約1/3之所得粗物質以逆相HPLC(H2 O/MeOH/TFA)純化以提供無色黏性油狀之Cap-78之三氟乙酸鹽(353 mg)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz;D2 O交換之後):δ7.56-7.49(m,5H),5.35(S,1H),3.35(m,1H),3.06(app br s,1H),2.66(m,1H),1.26(t,J =7.3,3H),0.92(m,1H),0.83-0.44(m,3H)。LC(條件1): RT=0.64 min；LC-MS:[M+H]+ C13 H18 NO2 之分析計算值為220.13；實驗值為220.21。HRMS:[M+H]+ C13 H18 NO2 之分析計算值為220.1338；實驗值為220.1343。
使臭氧鼓泡通過Cap-55(369 mg，2.13 mmol)之經冷卻(-78℃)CH2 Cl2 (5.0 mL)溶液約50分鐘直至反應混合物達到藍色色澤。添加Me2 S(10滴(吸管))，且攪拌反應混合物35分鐘。將-78℃浴替換為-10℃浴且再繼續攪拌30分鐘，且隨後在真空中移除揮發性組分以提供無色黏性油。將NaBH3 CN(149 mg，2.25 mmol)添加至上述粗物質及嗎啉(500 μL，5.72 mmol)之MeOH(5.0 mL)溶液中，且在環境條件下攪拌混合物4小時。冷卻至冰水溫度，且以濃鹽酸處理以使其pH值為約2.0，且隨後攪拌2.5小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物以MCX樹脂(MeOH洗滌；2.0 N NH3 /MeOH溶離)與逆相HPLC(H2 O/MeOH/TFA)之組合純化以提供含有未知量之嗎啉的Cap-79。
為耗盡嗎啉污染物，將上述物質溶解於CH2 Cl2 (1.5 mL)中且以Et3 N(0.27 mL，1.94 mmol)繼而乙酸酐(0.10 mL，1.06 mmol)處理，且在環境條件下攪拌18小時。添加THF(1.0 mL)及H2 O(0.5 mL)且繼續攪拌1.5小時。在真空中移除揮發性組分，且使所得殘餘物通過MCX樹脂(MeOH洗滌；2.0 N NH3 /MeOH溶離)以提供棕色黏性油狀之不純的Cap-79，其不經進一步純化即用於下一步驟。
將SOCl2 (6.60 mL，90.5 mmol)經15分鐘逐滴添加至(S)-3-胺基-4-(苯甲基氧基)-4-側氧基丁酸(10.04 g，44.98 mmol)及MeOH(300 mL)之經冷卻(冰-水)混合物中，移除冷卻浴且在環境條件下攪拌反應混合物29小時。在真空中移除大多數揮發性組分，且使殘餘物小心地分配在EtOAc(150 mL)與飽和NaHCO3 溶液之間。以EtOAc(150 mL，2×)萃取水相，且乾燥(MgSO4 )合併之有機相，過濾，且在真空中濃縮，提供無色油狀之(S)-2-胺基丁二酸1-苯甲酯4-甲酯(9.706 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ7.40-7.32(m,5H),5.11(s,2H),3.72(app t,J =6.6,1H),3.55(s,3H),2.68(dd,J =15.9,6.3,1H),2.58(dd,J =15.9,6.8,1H),1.96(s,2H)。LC(條件1): RT=0.90 min；LC-MS:[M+H]+ C12 H16 NO4 之分析計算值為238.11；實驗值為238.22。
將Pb(NO3 )2 (6.06 g，18.3 mmol)經1分鐘添加至(S)-2-胺基丁二酸1-苯甲酯4-甲酯(4.50 g，19.0 mmol)、9-溴-9-苯基-9H-茀(6.44 g，20.0 mmol)及Et3 N(3.0 mL，21.5 mmol)之CH2 Cl2 (80 mL)溶液中，且在環境條件下攪拌非均質混合物48小時。過濾混合物且以MgSO4 處理濾液且再次過濾，且濃縮最終濾液。對所得粗物質進行BIOTAGE純化(350 g矽膠，CH2 Cl2 溶離)以提供高黏性無色油狀之(S)-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁二酸1-苯甲酯4-甲酯(7.93 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):δ7.82(m,2H),7.39-7.13(m,16H),4.71(d,J =12.4,1H),4.51(d,J =12.6,1H),3.78(d,J =9.1,NH),3.50(s,3H),2.99(m,1H),2.50-2.41(m,2H，與溶劑部分重疊)。LC(條件1): RT=2.16 min；LC-MS: [M+H]+ C31 H28 NO4 之分析計算值為478.20；實驗值為478.19。
將LiHMDS(9.2 mL 1.0 M/THF，9.2 mmol)經10分鐘逐滴添加至(S)-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁二酸1-苯甲酯4-甲酯(3.907 g，8.18 mmol)之經冷卻(-78℃)THF(50 mL)溶液中且攪拌約1小時。將MeI(0.57 mL，9.2 mmol)經8分鐘逐滴添加至混合物中，且繼續攪拌16.5小時，同時將冷卻浴解凍至室溫。以飽和NH4 Cl溶液(5 mL)淬滅反應之後，在真空中移除大多數有機組分且將殘餘物在分配CH2 Cl2 (100 mL)與水(40 mL)之間。乾燥(MgSO4 )有機層，過濾且在真空中濃縮，且將所得粗物質以BIOTAGE(350 g矽膠；25% EtOAc/己烷)純化以提供3.65 g 3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁二酸1-苯甲酯4-甲酯之2S/3S及2S/3R非對映異構混合物(比率為約1.0:0.65(1 H NMR))。此時並未測定主要異構物之立體化學，且該混合物無需分離即可進行下一步驟。部分1 H NMR資料(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz)：主要非對映異構物，δ4.39(d,J =12.3,CH2 之1H),3.33(s,3H，與H2 O信號重疊),3.50(d,J =10.9,NH),1.13(d,J =7.1,3H)；次要非對映異構物，δ4.27(d,J =12.3,CH2 之1H),3.76(d,J =10.9,NH),3.64(s,3H),0.77(d,J =7.0,3H)。LC(條件1): RT=2.19 min；LC-MS:[M+H]+ C32 H30 NO4 之分析計算值為492.22；實驗值為492.15。
將氫化二異丁基銨(20.57 ml於己烷中1.0 M，20.57 mmol)經10分鐘逐滴添加至以上所製備之(2S)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁二酸1-苯甲酯4-甲酯(3.37 g，6.86 mmol)之經冷卻(-78℃)THF(120 mL)溶液中，且在-78℃下攪拌20小時。自冷卻浴移出反應混合物且迅速在攪拌下倒入約1 M H3 PO4 /H2 O(250 mL)中，且以乙醚(100 mL，2×)萃取混合物。以鹽水洗滌合併之有機相，乾燥(MgSO4 )，過濾且在真空中濃縮。製備粗物質之矽膠網且進行層析(25% EtOAc/己烷；重力溶離)以提供1.1 g被苯甲醇污染之無色黏性油狀之(2S,3S)-4-羥基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯及含有(2S,3R)立體異構物作為雜質的(2S,3R)-4-羥基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯。使後一樣品再經受相同管柱層析純化條件以提供750 mg白色泡沫狀之經純化物質。[注意：在上述條件下(2S,3S)異構物在(2S,3R)異構物之前溶離]。(2S,3S)異構物：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 7.81(m,2H),7.39-7.08(m,16H),4.67(d,J =12.3,1H),4.43(d,J =12.4,1H),4.21(app t,J =5.2,OH),3.22(d,J =10.1,NH),3.17(m,1H),3.08(m,1H),~2.5(m,1H,與溶劑信號重疊),1.58(m,1H),0.88(d,J =6.8,3H)。LC(條件1): RT=2.00 min；LC-MS:[M+H]+ C31 H30 NO3 之分析計算值為464.45；實驗值為464.22。(2S,3R)異構物：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 7.81(d,J =7.5,2H),7.39-7.10(m,16H),4.63(d,J =12.1,1H),4.50(app t,J =4.9,1H),4.32(d,J =12.1,1H),3.59-3.53(m,2H),3.23(m,1H),2.44(dd,J =9.0,8.3,1H),1.70(m,1H),0.57(d,J =6.8,3H)。LC(條件1): RT=1.92 min；LC-MS:[M+H]+ C31 H30 NO3 之分析計算值為464.45；實驗值為464.52。
基於針對藉由使用以下方案自各異構物製備之內酯衍生物進行的NOE研究來構成DIBAL還原產物之相對立體化學分配：將LiHMDS(50 μL 1.0 M/THF，0.05 mmol)添加至(2S,3S)-4-羥基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯(62.7 mg，0.135 mmol)之經冷卻(冰-水)THF(2.0 mL)溶液中，且在類似溫度下攪拌反應混合物約2 hr。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物分配在CH2 Cl2 (30 mL)、水(20 mL)及飽和NH4 Cl水溶液(1 mL)之間。乾燥(MgSO4 )有機層，過濾且在真空中濃縮，且對所得粗物質進行BIOTAGE純化(40 g矽膠；10-15% EtOAc/己烷)以提供無色固體薄膜狀之(3S,4S)-4-甲基-3-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)二氫呋喃-2(3H)-酮(28.1 mg)。類似於(3S,4R)-4-甲基-3-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)二氫呋喃-2(3H)-酮精製(2S,3R)-4-羥基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯。(3S,4S)-內酯異構物：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz),7.83(d,J =7.5,2H),7.46-7.17(m,11H),4.14(app t,J =8.3,1H),3.60(d,J =5.8,NH),3.45(app t,J =9.2,1H),~2.47(m,1H，與溶劑信號部分重疊),2.16(m,1H),0.27(d,J =6.6,3H)。LC(條件1): RT=1.98 min；LC-MS: [M+Na]+ C24 H21 NNaO2 之分析計算值為378.15；實驗值為378.42。(3S,4R)-內酯異構物：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz),7.89(d,J =7.6,1H),7.85(d,J =7.3,1H),7.46-7.20(m,11H),3.95(dd,J =9.1,4.8,1H),3.76(d,J =8.8,1H),2.96(d,J =3.0,NH),2.92(dd,J =6.8,3,NCH),1.55(m,1H),0.97(d,J =7.0,3H)。LC(條件1): RT=2.03 min；LC-MS: [M+Na]+ C24 H21 NNaO2 之分析計算值為378.15；實驗值為378.49。
將TBDMS-C1(48 mg，0.312 mmol)繼而咪唑(28.8 mg，0.423 mmol)添加至(2S,3S)-4-羥基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯(119.5 mg，0.258 mmol)之CH2 Cl2 (3 ml)溶液中，且在環境條件下攪拌混合物14.25小時。隨後以CH2 Cl2 (30 mL)稀釋反應混合物且以水(15 mL)洗滌，且乾燥(MgSO4 )有機層，過濾且在真空中濃縮。將所得粗物質以BIOTAGE(40 g矽膠；5% EtOAc/己烷)純化以提供被TBDMS基雜質污染之無色黏性油狀之(2S,3S)-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯(124.4 mg)。類似於(2S,3R)-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯精製(2S,3R)-4-羥基-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯。(2S,3S)-矽烷基醚異構物：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz),7.82(d,J =4.1,1H),7.80(d,J =4.0,1H),7.38-7.07(m,16 H),4.70(d,J =12.4,1H),4.42(d,J =12.3,1H),3.28-3.19(m,3H),2.56(dd,J =10.1,5.5,1H),1.61(m,1H),0.90(d,J =6.8,3H),0.70(s,9H),-0.13(s,3H),-0.16(s,3H)。LC(條件1,其中運行時間延長至4分鐘): RT=3.26 min；LC-MS:[M+H]+ C37 H44 NO3 Si之分析計算值為578.31；實驗值為578.40。(2S,3R)-矽烷基醚異構物：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz),7.82(d,J =3.0,1H),7.80(d,J =3.1,1H),7.39-7.10(m,16H),4.66(d,J =12.4,1H),4.39(d,J =12.4,1H),3.61(dd,J =9.9,5.6,1H),3.45(d,J =9.5,1H),3.41(dd,J =10,6.2,1H),2.55(dd,J =9.5,7.3,1H),1.74(m,1H),0.77(s,9H),0.61(d,J =7.1,3H),-0.06(s,3H),-0.08(s,3H)。
將氫氣氣球與(2S,3S)-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯(836 mg，1.447 mmol)及10% Pd/C(213 mg)於EtOAc(16 mL)中之混合物連接，且在室溫下攪拌混合物約21小時，其中視需要向氣球再充填H2 。以CH2 Cl2 稀釋反應混合物且經矽藻土墊(CELITE-545)過濾，且以EtOAc(200 mL)、EtOAc/MeOH(1:1混合物，200 mL)及MeOH(750 mL)洗滌該矽藻土墊。濃縮合併之有機相，且自所得粗物質製備矽膠網且進行急驟層析(EtOAc/i-PrOH/H2 O之8:2:1混合物)以提供白色鬆散固體狀之(2S,3S)-2-胺基-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基丁酸(325 mg)。類似於(2S,3R)-2-胺基-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基丁酸精製(2S,3R)-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基-2-(9-苯基-9H-茀-9-基胺基)丁酸苯甲酯。(2S,3S)-胺基酸異構物：1 H NMR(甲醇-d4 ,δ=3.29 ppm,400 MHz),3.76(dd,J =10.5,5.2,1H),3.73(d,J =3.0,1H),3.67(dd,J =10.5,7.0,1H),2.37(m,1H),0.97(d,J =7.0,3H),0.92(s,9H),0.10(s,6H)。LC-MS:[M+H]+ C11 H26 NO3 Si之分析計算值為248.17；實驗值為248.44。(2S,3R)-胺基酸異構物：1 H NMR(甲醇-d4 ,δ=3.29 ppm,400 MHz),3.76-3.75(m,2H),3.60(d,J =4.1,1H),2.16(m,1H),1.06(d,J =7.3,3H),0.91(s,9H),0.09(s,6H)。[M+H]+ C11 H26 NO3 Si之分析計算值為248.17；實驗值為248.44。
將水(1 mL)及NaOH(0.18 mL 1.0 M/H2 O，0.18 mmol)添加至(2S,3S)-2-胺基-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基丁酸(41.9 mg，0.169 mmol)及Na2 CO3 (11.9 mg，0.112 mmol)之混合物中，且超音波處理約1分鐘以實現反應物之溶解。隨後以冰水浴冷卻混合物，經30 s添加氯甲酸甲酯(0.02 mL，0.259 mmol)，且在類似溫度下持續劇烈攪拌40分鐘且隨後在環境溫度下劇烈攪拌2.7小時。以水(5 mL)稀釋反應混合物，以冰水浴冷卻且以1.0 N HCl水溶液(約0.23 mL)逐滴處理。進一步以水(10 mL)稀釋混合物且以CH2 Cl2 (15 mL，2×)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機相，過濾，且在真空中濃縮以提供灰白色固體狀之Cap-80a。類似於Cap-80b精製(2S,3R)-2-胺基-4-(第三丁基二甲基矽烷基氧基)-3-甲基丁酸。Cap-80a ：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz),12.57(br s,1H),7.64(d,J =8.3,0.3H),7.19(d,J =8.8,0.7H),4.44(dd,J =8.1,4.6,0.3H),4.23(dd,J =8.7,4.4,0.7H),3.56/3.53(兩個單峰，3H),3.48-3.40(m,2H),2.22-2.10(m,1H),0.85(s,9H),~0.84(d,0.9H，與t-Bu信號重疊),0.79(d,J =7,2.1H),0.02/0.01/0.00(三個重疊單峰，6H)。LC-MS: [M+Na]+ C13 H27 NNaO5 Si之分析計算值為328.16；實驗值為328.46。Cap-80b ：1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.24 ppm,400 MHz),6.00(br d,J =6.8,1H),4.36(dd,J =7.1,3.1,1H),3.87(dd,J =10.5,3.0,1H),3.67(s,3H),3.58(dd,J =10.6,4.8,1H),2.35(m,1H),1.03(d,J =7.1,3H),0.90(s,9H),0.08(s,6H)。LC-MS: [M+Na]+ C13 H27 NNaO5 Si之分析計算值為328.16；實驗值為328.53。粗產物無需進一步純化即可使用。
根據Falb等人，Synthetic Communications ,23,2839 (1993)所述之方案製備。
Cap-82至Cap-85根據對於Cap-51或Cap-13所述之程序自適當原料合成Cap-82至Cap-85。該等樣品展現類似於其立體異構物(亦即分別為Cap-4、Cap-13、Cap-51及Cap-52)之光譜。
(2S,3R)-3-甲氧基-2-(甲氧基羰基胺基)丁酸在0℃下向O-甲基-L-蘇胺酸(3.0 g，22.55 mmol)、NaOH(0.902 g，22.55 mmol)於H2 O(15 mL)中之混合物中逐滴添加ClCO2 Me(1.74 mL，22.55 mmol)。攪拌混合物12小時且使用1 N HCl酸化至pH值為1。以EtOAc(2×250 mL)水相及於CH2 Cl2 (250 mL)中之10% MeOH萃取且在真空中濃縮合併之有機相以提供無色油狀物(4.18 g，97%)，其具有足夠純度而適用於後續步驟。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ4.19(s,1H),3.92-3.97(m,1H),3.66(s,3H),1.17(d,J =7.7 Hz,3H)。LC-MS: C7 H13 NO5 之分析計算值為191；實驗值為190(M-H)- 。Cap-87
在0℃下向L-高絲胺酸(2.0 g，9.79 mmol)、Na2 CO3 (2.08 g，19.59 mmol)於H2 O(15 mL)中之混合物中逐滴添加ClCO2 Me(0.76 mL，9.79 mmol)。攪拌混合物48小時且使用1 N HCl酸化至pH值為1。以EtOAc(2×250 mL)萃取水相且在真空中濃縮合併之有機相以提供無色固體(0.719 g，28%)，其具有足夠純度而適用於後續步驟。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ4.23(dd,J =4.5,9.1 Hz,1H),3.66(s,3H),3.43-3.49(m,2H),2.08-2.14(m,1H),1.82-1.89(m,1H)。LC-MS: C7 H13 NO5 之分析計算值為191；實驗值為192(M+H)+ 。
將L-纈胺酸(1.0 g，8.54 mmol)、3-溴吡啶(1.8 mL，18.7 mmol)、K2 CO3 (2.45 g，17.7 mmol)及CuI(169 mg，0.887 mmol)於DMSO(10 mL)中之混合物在100℃下加熱12小時。冷卻反應混合物至室溫，倒入H2 O(約150 mL)中且以EtOAc(×2)洗滌。以少量H2 O萃取有機層且以6 N HCl酸化合併之水相至pH值為約2。將體積減少至約三分之一且添加20 g陽離子交換樹脂(Strata)。將漿液靜置20分鐘且裝載於陽離子交換樹脂(Strata)(約25 g)墊上。以H2 O(200 mL)、MeOH(200 mL)洗滌樹脂墊，且隨後以NH3 (於MeOH中3 M，2×200 mL)洗滌。在真空中濃縮適當溶離份且將殘餘物(約1.1 g)溶解於H2 O中，冷凍且凍乾。獲得泡沫狀之標題化合物(1.02 g，62%)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ8.00(s,br,1H),7.68-7.71(m,1H),7.01(s,br,1H),6.88(d,J =7.5 Hz,1H),5.75(s,br,1H),3.54(s,1H),2.04-2.06(m,1H),0.95(d,J =6.0 Hz,3H),0.91(d,J =6.6 Hz,3H)。LC-MS: C10 H14 N2 O2 之分析計算值為194；實驗值為195(M+H)+ 。
將L-纈胺酸(1.0 g，8.54 mmol)、5-溴嘧啶(4.03 g，17.0 mmol)、K2 CO3 (2.40 g，17.4 mmol)及CuI(179 mg，0.94 mmol)於DMSO(10 mL)中之混合物在100℃下加熱12小時。冷卻反應混合物至室溫，倒入H2 O(約150 mL)中且以EtOAc(×2)洗滌。以少量H2 O萃取有機層且以6 N HCl酸化合併之水相至pH值為約2。將體積減少至約三分之一且添加20 g陽離子交換樹脂(Strata)。將漿液靜置20分鐘且裝載於陽離子交換樹脂(Strata)(約25 g)墊上。以H2 O(200 mL)、MeOH(200 mL)洗滌樹脂墊，且隨後以NH3 (於MeOH中3 M，2×200 mL)洗滌。在真空中濃縮適當溶離份且將殘餘物(約1.1 g)溶解於H2 O中，冷凍且凍乾。獲得泡沫狀之標題化合物(1.02 g，62%)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)展示該混合物含有纈胺酸且純度不能估算。將該物質按原樣用於後續反應中。LC-MS: C9 H13 N3 O2 之分析計算值為195；實驗值為196(M+H)+ 。
根據對於製備Cap-1所述之方法製備Cap-90。粗物質係按原樣用於後續步驟。LC-MS: C11 H15 NO2 之分析計算值為193；實驗值為192(M-H)- 。Cap-91至Cap-116除非另作說明，否則根據用於製備Cap-51之方法製備以下Cap：
Cap-117至Cap-123為製備Cap-117至Cap-123，由商業來源獲得Boc胺基酸且藉由以於CH2 Cl2 中之25% TFA處理來去保護。在藉由LCMS判斷完全反應之後，在真空中移除溶劑，且根據對於Cap-51所述之程序將胺基酸之相應三氟乙酸鹽以氯甲酸甲酯胺甲醯基化。
根據對於Cap-51所述之程序將L-蘇胺酸第三丁酯之鹽酸鹽胺甲醯基化。以1 N HCl酸化粗反應混合物至pH值為約1且將混合物以EtOAc(2×50 mL)萃取。在真空中濃縮合併之有機相以得到無色油狀物，其在靜置時固化。在真空中濃縮水層且以EtOAc-CH2 Cl2 -MeOH(1:1:0.1)濕磨所得的產物與無機鹽之混合物，且隨後在真空中濃縮有機相以得到無色油狀物，其經LCMS證明為所需產物。合併兩批產物以得到0.52 g固體。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ4.60(m,1H),4.04(d,J =5.0 Hz,1H),1.49(d,J =6.3 Hz,3H)。LC-MS: C5 H7 NO4 之分析計算值為145；實驗值為146(M+H)+ 。
向Pd(OH)2 (20%，100 mg)、甲醛水溶液(37重量%，4 ml)、乙酸(0.5 mL)於甲醇(15 mL)中之懸浮液中添加(S)-4-胺基-2-(第三丁氧基羰基胺基)丁酸(1 g，4.48 mmol)。以氫氣沖洗反應物數次且在氫氣氣球下在室溫下攪拌隔夜。經矽藻土(CELITE)墊過濾反應混合物，且在真空中移除揮發性組分。將所得粗物質按原樣用於下一步驟。LC-MS: C11 H22 N2 O4 之分析計算值為246；實驗值為247(M+H)+ 。
該程序為用於製備Cap-51之程序的變體。在0℃下向3-甲基-L-組胺酸(0.80 g，4.70 mmol)於THF(10 mL)及H2 O(10 mL)中之懸浮液中添加NaHCO3 (0.88 g，10.5 mmol)。以ClCO2 Me(0.40 mL，5.20 mmol)處理所得混合物且在0℃下攪拌混合物。攪拌約2小時之後，LCMS展示無原料剩餘。以6 N HCl酸化反應物至pH值為2。
在真空中移除溶劑且將殘餘物懸浮於20 mL於CH2 Cl2 中之20% MeOH中。過濾混合物且濃縮以得到淡黃色泡沫(1.21 g)。LCMS及1 H NMR展示該物質為甲酯與所需產物之9:1混合物。將該物質溶解於THF(10 mL)及H2 O(10 mL)中，冷卻至0℃且添加LiOH(249.1 mg，10.4 mmol)。攪拌約1小時之後，LCMS展示無酯剩餘。因此，以6 N HCl酸化混合物且在真空中移除溶劑。LCMS及1 H NMR證實不存在酯。獲得被無機鹽污染之HCl鹽形式之標題化合物(1.91 g,>100%)。該化合物無需進一步純化即可按原樣用於後續步驟中。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.84,(s,1H),7.35(s,1H),4.52(dd,J =5.0,9.1 Hz,1H),3.89(s,3H),3.62(s,3H),3.35(dd,J =4.5,15.6 Hz,1H,由於溶劑而部分模糊),3.12(dd,J =9.0,15.6 Hz,1H)。LC-MS: C9 H13 N3 O4 之分析計算值為227.09；實驗值為228.09(M+H)+ 。
根據以上關於Cap-126之方法，由(S)-2-胺基-3-(1-甲基-1H-咪唑-4-基)丙酸(1.11 g,6.56 mmol)、NaHCO3 (1.21 g,14.4 mmol)及ClCO2 Me(0.56 mL,7.28 mmol)開始製備Cap-127。獲得被無機鹽污染之HCl鹽形式之標題化合物(1.79 g,>100%)。LCMS及1 H NMR展示存在約5%甲酯。粗混合物無需進一步純化即可按原樣加以使用。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.90(s,1H),7.35(s,1H),4.48(dd,J =5.0,8.6 Hz,1H),3.89(s,3H),3.62(s,3H),3.35(m,1H),3.08(m,1H)；LC-MS: C9 H13 N3 O4 之分析計算值為227.09；實驗值為228(M+H)+ 。
製備Cap-128
步驟1：製備(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)戊-4-炔酸苯甲酯(cj-27b)
在0℃下向cj -27a (1.01 g,4.74 mmol)、DMAP(58 mg,0.475 mmol)及iPr2 NEt(1.7 mL，9.8 mmol)於CH2 Cl2 (100 mL)中之溶液中添加Cbz-Cl(0.68 mL,4.83 mmol)。在0℃下攪拌溶液4小時，洗滌(1N KHSO4 、鹽水)，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮。將殘餘物藉由急驟管柱層析法(TLC 6:1己烷：EtOAc)純化以得到無色油狀之標題化合物(1.30 g,91%)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ7.35(s,5H),5.35(d,br,J =8.1 Hz,1H),5.23(d,J =12.2 Hz,1H),5.17(d,J =12.2 Hz,1H),4.48-4.53(m,1H),2.68-2.81(m,2H),2.00(t,J =2.5 Hz,1H),1.44(s,9H)。LC-MS: C17 H21 NO4 之分析計算值為303；實驗值為304(M+H)+ 。
步驟2：製備(S)-3-(1-苯甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸苯甲酯(cj-28)
在室溫下向(S)-2-(第三丁氧基羰基胺基)戊-4-炔酸苯甲酯(0.50,1.65 mmol)、抗壞血酸鈉(0.036 g,0.18 mmol)、CuSO4 -5H2 O(0.022 g,0.09 mmol)及NaN3 (0.13 g,2.1 mmol)於DMF-H2 O(5 mL,4:1)中之混合物中添加BnBr(0.24 mL,2.02 mmol)，且將混合物溫至65℃。在5小時之後，LCMS表明低轉化率。添加其他部分之NaN3 (100 mg)且繼續加熱12小時。將反應物倒入EtOAc及H2 O中且震盪。分離各層且以EtOAc萃取水層3次且洗滌(H2 O×3、鹽水)合併之有機相，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮。將殘餘物藉由急驟層析法(BIOTAGE,40+M，於CH2 Cl2 中之0-5% MeOH；TLC：於CH2 Cl2 中之3% MeOH)純化以提供淡黃色油狀物(748.3 mg，104%)，其在靜置後固化。NMR與所需產物一致但表明存在DMF。該物質無需進一步純化即可按原樣加以使用。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ7.84(s,1H),7.27-7.32(m,10H),5.54(s,2H),5.07(s,2H),4.25(m,1H),3.16(dd,J =1.0,5.3 Hz,1H),3.06(dd,J =5.3,14.7 Hz),2.96(dd,J =9.1,14.7 Hz,1H),1.31(s,9H)。LC-MS: C24 H28 N4 O4 之分析計算值為436；實驗值為437(M+H)+ 。
步驟3：製備(S)-3-(1-苯甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(甲氧基羰基胺基)丙酸苯甲酯(cj-29)
向(S)-3-(1-苯甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸苯甲酯(0.52 g,1.15 mmol)於CH2 Cl2 中之溶液中添加TFA(4 mL)。在室溫下攪拌混合物2小時。在真空中濃縮混合物以得到無色油狀物，其在靜置後固化。將該物質溶解於THF-H2 O中且冷卻至0℃。添加固體NaHCO3 (0.25 g,3.00 mmol)繼而添加ClCO2 Me(0.25 mL,3.25 mmol)。在攪拌1.5小時之後，以6N HCl酸化混合物至pH值為約2且隨後倒入H2 O-EtOAc中。分離各層且以EtOAc萃取水相兩次。洗滌(H2 O、鹽水)合併之有機層，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且在真空中濃縮以得到無色油狀物(505.8 mg,111%，NMR表明存在未經鑑別之雜質)，其在泵上靜置時固化。該物質無需進一步純化即可按原樣加以使用。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ7.87(s,1H),7.70(d,J =8.1 Hz,1H),7.27-7.32(m,10H),5.54(s,2H),5.10(d,J =12.7 Hz,1H),5.06(d,J =12.7 Hz,1H),4.32-4.37(m,1H),3.49(s,3H),3.09(dd,J =5.6,14.7 Hz,1H),2.98(dd,J =9.6,14.7 Hz,1H)。LC-MS: C21 H22 N4 O4 之分析計算值為394；實驗值為395(M+H)+ 。步驟4：製備(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)丙酸(Cap-128)
在大氣壓力下，在Pd-C(82 mg)存在下，於MeOH(5 mL)中使(S)-3-(1-苯甲基-1H-1,2,3-三唑-4-基)-2-(甲氧基羰基胺基)丙酸苯甲酯(502 mg,1.11 mmol)氫化12小時。經矽藻土(CELITE)過濾混合物，且在真空中濃縮。獲得被約10%甲酯污染之無色膠狀之(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-(1H-1,2,3-三唑-4-基)丙酸(266 mg,111%)。該物質無需進一步純化即可按原樣加以使用。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ12.78(s,br,1H),7.59(s,1H),7.50(d,J =8.0 Hz,1H),4.19-4.24(m,1H),3.49(s,3H),3.12(dd,J =4.8 Hz,14.9 Hz,1H),2.96(dd,J =9.9,15.0 Hz,1H)。LC-MS: C7 H10 N4 O4 之分析計算值為：214；實驗值為215(M+H)+ 。
步驟1：製備(S)-2-(苯甲基氧基羰基胺基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(cj-31)
將(S)-2-側氧基氧雜環丁烷-3-基胺基甲酸苯甲酯(0.67 g，3.03 mmol)及吡唑(0.22 g，3.29 mmol)於CH3 CN(12 mL)中之懸浮液在50℃下加熱24小時。冷卻混合物至室溫隔夜且過濾固體以提供(S)-2-(苯甲基氧基羰基胺基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(330.1 mg)。在真空中濃縮濾液且隨後以少量CH3 CN(約4 mL)濕磨以提供第二批產物(43.5 mg)。總產量為370.4 mg(44%)。熔點為165.5-168℃。文獻報導之熔點為168.5-169.5[Vederas等人，J .Am .Chem .Soc .,107,7105(1985)]。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.51(d,J =2.0,1H),7.48(s,J =1.5 Hz,1H),7.24-7.34(m,5H),6.23 m,1H),5.05(d,12.7 H,1H),5.03(d,J =12.7 Hz,1H),4.59-4.66(m,2H),4.42-4.49(m,1H)。LC-MS: C14 H15 N3 O4 之分析計算值為289；實驗值為290(M+H)+ 。步驟2：製備(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(Cap-129)
在大氣壓力下，在Pd-C(45 mg)存在下，於MeOH(5 mL)中使(S)-2-(苯甲基氧基羰基胺基)-3-(1H-吡唑-1-基)丙酸(0.20 g，0.70 mmol)氫化2小時。產物顯現不溶於MeOH，因此以5 mL H2 O及數滴6 N HCl稀釋反應混合物。經矽藻土(CELITE)過濾均質溶液，且在真空中移除MeOH。冷凍剩餘溶液且凍乾以得到黃色泡沫(188.9 mg)。將該物質懸浮於THF-H2 O(1:1，10 mL)中且隨後冷卻至0℃。向冷卻混合物中小心添加NaHCO3 (146.0 mg，1.74 mmol)(釋放CO2 )。氣體逸出停止(約15分鐘)之後，逐滴添加ClCO2 Me(0.06 mL，0.78 mmol)。攪拌混合物2小時且以6 N HCl酸化至pH值為約2且倒入EtOAc中。分離各層且以EtOAC(×5)萃取水相。洗滌(鹽水)合併之有機層，乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮以得到無色固體狀之標題化合物(117.8 mg，79%)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ13.04(s,1H),7.63(d,J =2.6 Hz,1H),7.48(d,J =8.1 Hz,1H),7.44(d,J =1.5 Hz,1H),6.19(app t,J =2.0 Hz,1H),4.47(dd,J =3.0,12.9 Hz,1H),4.29-4.41(m,2H),3.48(s,3H)。LC-MS: C8 H11 N3 O4 之分析計算值為213；實驗值為214(M+H)+ 。
Cap-130係藉由類似於Calmes,M.等人,Tetrahedron ,43(10),2285(1987)中所給之程序來醯基化市售(R)-苯基甘胺酸而製備。
步驟a：將二甲基胺甲醯基氯(0.92 mL，10 mmol)緩慢添加至(S)-2-胺基-3-甲基丁酸苯甲酯鹽酸鹽(2.44 g；10 mmol)及許尼希氏鹼(3.67 mL，21 mmol)於THF(50 mL)中之溶液中。在室溫下攪拌所得白色懸浮液隔夜(16小時)且在減壓下濃縮。將殘餘物分配在乙酸乙酯與水之間。以鹽水洗滌有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且在減壓下濃縮。將所得黃色油狀物藉由急驟層析法以乙酸乙酯：己烷(1:1)溶離來純化。在真空下濃縮所收集溶離份，提供2.35 g(85%)透明油狀物。1 H NMR(300 MHz,DMSO-d6 )δppm 0.84(d,J =6.95 Hz,3H),0.89(d,J =6.59 Hz,3H),1.98-2.15(m,1H),2.80(s,6H),5.01-5.09(m,J =12.44 Hz,1H),5.13(d,J =12.44 Hz,1H),6.22(d,J =8.05 Hz,1H),7.26-7.42(m,5H)。LC(條件1): RT=1.76 min；MS: [M+H]+ C16 H22 N2 O3 之分析計算值為279.17；實驗值為279.03。步驟b：向以上所製備之中間物(2.35 g；8.45 mmol)之MeOH(50 mL)溶液中添加Pd/C(10%；200 mg)且以N2 (3×)沖洗所得黑色懸浮液且置於1 atm H2 下。在室溫下攪拌混合物隔夜且經微纖維過濾器過濾以移除催化劑。隨後在減壓下濃縮所得透明溶液以獲得1.43 g(89%)白色泡沫狀之Cap-131，其無需進一步純化即可使用。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 0.87(d,J =4.27 Hz,3H),0.88(d,J =3.97 Hz,3H),1.93-2.11(m,1H),2.80(s,6H),3.90(dd,J =8.39,6.87 Hz,1H),5.93(d,J =8.54 Hz,1H),12.36(s,1H)。LC(條件1): RT=0.33 min；MS: [M+H]+ C8 H17 N2 O3 之分析計算值為189.12；實驗值為189.04。
根據對於Cap-131所述之方法自(S)-2-胺基丙酸苯甲酯鹽酸鹽製備Cap-132。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 1.27(d,J =7.32 Hz,3H),2.80(s,6H),4.06(qt,1H),6.36(d,J =7.32 Hz,1H),12.27(s,1H)。LC(條件1): RT=0.15 min；MS:[M+H]+ C6 H13 N2 O3 之分析計算值為：161.09；實驗值為161.00。
根據對於Cap-47所述之方法自(S)-2-胺基-3-甲基丁酸第三丁酯鹽酸鹽及氯甲酸2-氟乙酯製備Cap-133。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 0.87(t,J =6.71 Hz,6H),1.97-2.10(m,1H),3.83(dd,J =8.39,5.95 Hz,1H),4.14-4.18(m,1H),4.20-4.25(m,1H),4.50-4.54(m,1H),4.59-4.65(m,1H),7.51(d,J =8.54 Hz,1H),12.54(s,1H)。
根據對於Cap-51所述之方法自(S)-丙胺酸二乙酯及氯甲酸甲酯製備Cap-134。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 0.72-0.89(m,6H),1.15-1.38(m,4H),1.54-1.66(m,1H),3.46-3.63(m,3H),4.09(dd,J =8.85,5.19 Hz,1H),7.24(d,J =8.85 Hz,1H),12.55(s,1H)。LC(條件2): RT=0.66 min；LC-MS:[M+H]+ C9 H18 NO4 之分析計算值為204.12；實驗值為204.02。
使D-2-胺基-(4-氟苯基)乙酸(338 mg，2.00 mmol)、於乙醚中之1 N HCl(2.0 mL，2.0 mmol)及福馬林(37%，1 mL)於甲醇(5 mL)中之溶液在25℃下在10%鈀/碳(60 mg)上進行氣球氫化歷時16小時。隨後經CELITE過濾混合物以提供白色泡沫狀之Cap-135之HCl鹽(316 mg，80%)。1 H NMR(300 MHz,MeOH-d4 )δ7.59(dd,J =8.80,5.10 Hz,2H),7.29(t,J =8.6 Hz,2H),5.17(s,1H),3.05(v br s,3H),2.63(v br s,3H)；Rt =0.19 min(條件-MS-W5);95%之均質性指數；LRMS:[M+H]+ C10 H13 FNO2 之分析計算值為198.09；實驗值為198.10。
在氮氣下向1-苯甲基-1H-咪唑(1.58 g,10.0 mmol)於無水乙醚(50 mL)中之冷卻(-50℃)懸浮液中逐滴添加正丁基鋰(於己烷中2.5 M,4.0 mL,10.0 mmol)。在-50℃下攪拌20分鐘之後，用無水二氧化碳(通過燥石膏(Drierite))將反應混合物鼓泡10分鐘，隨後溫至25℃。過濾添加二氧化碳至反應混合物中後所形成之較重沈澱物以得到吸濕性、白色固體，將其溶解於水(7 mL)中，酸化至pH值=3，冷卻且在攪拌(scratch)下誘導結晶。過濾該沈澱物得到白色固體，將其懸浮於甲醇中，以1 N HCl/乙醚(4 mL)處理且在真空中濃縮。自水(5 mL)中凍乾殘餘物，提供白色固體狀之Cap-136之HCl鹽(817 mg,40%)。1 H NMR(300 MHz,DMSO-d6 )δ7.94(d,J =1.5 Hz,1H),7.71(d,J =1.5 Hz,1H),7.50-7.31(m,5H),5.77(s,2H)；Rt =0.51 min(條件-MS-W5);95%之均質性指數；LRMS: [M+H]+ C11 H12 N2 O2 之分析計算值為203.08；實驗值為203.11。
將1-氯-3-氰基異喹啉(188 mg,1.00 mmol；根據WO 2003/099274中之程序製備)(188 mg,1.00 mmol)、氟化銫(303.8 mg,2.00 mmol)、二氯化雙(三-第三丁基膦)鈀(10 mg,0.02 mmol)及2-(三丁基錫烷基)呋喃(378 μL,1.20 mmol)於無水二噁烷(10 mL)中之懸浮液在氮氣下在80℃下加熱16小時，隨後冷卻至25℃且在劇烈攪拌下以飽和氟化鉀水溶液處理1 h。將該混合物分配在乙酸乙酯與水之間，且分離有機相，以鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。以矽膠(以0%至30%乙酸乙酯/己烷溶離)純化殘餘物，提供白色固體狀之Cap-137，步驟a(230 mg,105%)，其可按原樣使用。Rt =1.95 min(條件-MS-W2);90%之均質性指數；LRMS:[M+H]+ C14 H8 N2 O之分析計算值為221.07；實驗值為221.12。
向Cap-137， 步驟a(110 mg,0.50 mmol)及過碘酸鈉(438 mg,2.05 mmol)於四氯化碳(1 mL)、乙腈(1 mL)及水(1.5 mL)中之懸浮液中添加水合三氯化釕(2 mg，0.011 mmol)。在25℃下攪拌混合物2小時且隨後分配在二氯甲烷與水之間。分離水層，再以二氯甲烷萃取兩次，且經Na2 SO4 乾燥合併之二氯甲烷萃取物，過濾且濃縮。以己烷濕磨殘餘物提供淺灰色固體狀之Cap-137(55 mg,55%)。Rt =1.10 min(條件-MS-W2);90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C11 H8 N2 O2 之分析計算值為200.08；實驗值為200.08。Cap-138至Cap-158合成策略：方法A：
向5-羥基異喹啉(根據WO 2003/099274中之程序製備)(2.0 g,13.8 mmol)及三苯基膦(4.3 g,16.5 mmol)於無水四氫呋喃(20 mL)中之經攪拌懸浮液中逐份添加無水甲醇(0.8 mL)及偶氮二甲酸二乙酯(3.0 mL，16.5 mmol)。在室溫下攪拌混合物20小時，隨後以乙酸乙酯稀釋且以鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。使殘餘物預吸收於矽膠上且進行純化(以40%乙酸乙酯/己烷溶離)，以提供淡黃色固體狀之Cap-138，步驟a(1.00 g,45%)。1 H NMR(CDCl3 ,500 MHz)δ9.19(s,1H),8.51(d,J =6.0 Hz,1H),7.99(d,J =6.0 Hz,1H),7.52-7.50(m,2H),7.00-6.99(m,1H),4.01(s,3H)；Rt =0.66 min(條件D2);95%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C10 H10 NO之分析計算值為160.08；實驗值為160.10。
在室溫下向Cap-138， 步驟a(2.34 g,14.7 mmol)於無水二氯甲烷(50 mL)中之經攪拌溶液中整份添加間氯過苯甲酸(77%,3.42 g,19.8 mmol)。攪拌20小時之後，添加粉狀碳酸鉀(2.0 g)且在室溫下攪拌混合物1小時，隨後過濾且濃縮以提供淺黃色固體狀之Cap-138，步驟b(2.15 g,83.3%)，其為足夠純的而可直接進行下一步驟。1 H NMR(CDCl3 ,400 MHz)δ8.73(d,J =1.5 Hz,1H),8.11(dd,J =7.3,1.7 Hz,1H),8.04(d,J =7.1 Hz,1H),7.52(t,J =8.1 Hz,1H),7.28(d,J =8.3 Hz,1H),6.91(d,J =7.8 Hz,1H),4.00(s,3H)；Rt =0.92 min,(條件-D1);90%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C10 H10 NO2 之分析計算值為176.07；實驗值為176.0。
在室溫下在氮氣下向Cap-138， 步驟b(0.70 g，4.00 mmol)及三乙胺(1.1 mL，8.00 mmol)於無水乙腈(20 mL)中之經攪拌溶液中添加氰化三甲基矽烷(1.60 mL，12.00 mmol)。在75℃下加熱混合物20小時，隨後冷卻至室溫，以乙酸乙酯稀釋且以飽和碳酸氫鈉溶液及鹽水洗滌，隨後經Na2 SO4 乾燥且針對溶劑進行濃縮。對殘餘物進行矽膠急驟層析(以5%乙酸乙酯/己烷至25%乙酸乙酯/己烷溶離)以提供白色結晶固體狀之Cap-138，步驟c(498.7 mg)以及自濾液中回收之223 mg額外的Cap-138，步驟c。1 H NMR(CDCl3 ,500 MHz)δ8.63(d,J =5.5 Hz,1H),8.26(d,J =5.5 Hz,1H),7.88(d,J =8.5 Hz,1H),7.69(t,J =8.0 Hz,1H),7.08(d,J =7.5 Hz,1H),4.04(s,3H)；Rt =1.75 min,(條件-D1);90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C11 H9 N2 O之分析計算值為185.07；實驗值為185.10。
以5 N氫氧化鈉溶液(10 mL)處理Cap-138， 步驟c(0.45 g,2.44 mmol)且在85℃下加熱所得懸浮液4小時，冷卻至25℃，以二氯甲烷稀釋且以1 N鹽酸酸化。 分離有機相，以鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，濃縮至1/4體積且過濾以提供黃色固體狀之Cap-138(0.44 g,88.9%)。1 H NMR(DMSO-d6 ,400 MHz)δ13.6(br s,1H),8.56(d,J =6.0 Hz,1H),8.16(d,J =6.0 Hz,1H),8.06(d,J =8.8 Hz,1H),7.71-7.67(m,1H),7.30(d,J =8.0 Hz,1H),4.02(s,3H)；Rt =0.70 min(條件-D1);95%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C11 H10 NO3 之分析計算值為204.07；實驗值為204.05。合成策略：方法B(來源於Tetrahedron Letters ,42,6707(2001))
向含有1-氯-6-甲氧基異喹啉(1.2 g,6.2 mmol；根據WO 2003/099274中之程序製備)、氰化鉀(0.40 g，6.2 mmol)、1,5-雙(二苯基膦基)戊烷(0.27 g,0.62 mmol)及乙酸鈀(II)(70 mg,0.31 mmol)於無水甲苯(6 mL)中之經氬氣脫氣之懸浮液的厚壁、螺旋蓋小瓶中添加N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(0.29 mL,2.48 mmol)。密封小瓶，在150℃下加熱22小時且隨後冷卻至25℃。以乙酸乙酯稀釋反應混合物，以水及鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物於矽膠上以5%乙酸乙酯/己烷至25%乙酸乙酯/己烷溶離來純化，以提供白色固體狀之Cap-139，步驟a(669.7 mg)。1 H NMR(CDCl3 ,500 MHz)δ8.54(d,J =6.0 Hz,1H),8.22(d,J =9.0 Hz,1H),7.76(d,J =5.5 Hz,1H),7.41-7.39(m,1H),7.13(d,J =2.0 Hz,1H),3.98(s,3H)；Rt =1.66 min(條件-D1)；90%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C11 H9 N2 O之分析計算值為185.07；實驗值為185.20。
根據對於Cap-138所述之程序，藉由以5 N NaOH鹼水解Cap-139， 步驟a來製備Cap-139。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ13.63(v br s,1H),8.60(d,J =9.3 Hz,1H),8.45(d,J =5.6 Hz,1H),7.95(d,J =5.9 Hz,1H),7.49(d,J =2.2 Hz,1H),7.44(dd,J =9.3,2.5 Hz,1H),3.95(s,3H)；Rt =0.64 min(條件-D1);90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C11 H10 NO3 之分析計算值為204.07；實驗值為204.05。
在25℃下在氮氣下向1,3-二氯-5-乙氧基異喹啉(482 mg,2.00 mmol；根據WO 2005/051410中之程序製備)、乙酸鈀(II)(9 mg,0.04 mmol)、碳酸鈉(223 mg,2.10 mmol)及1,5-雙(二苯基膦基)戊烷(35 mg,0.08 mmol)於無水二甲基乙醯胺(2 mL)中之經劇烈攪拌的混合物中添加N,N,N',N'-四甲基伸乙基二胺(60 mL,0.40 mmol)。10分鐘之後，加熱混合物至150℃，且隨後使用注射泵以1 mL份經18小時添加丙酮氰醇之儲備溶液(由4.34 mL DMA中之457 μL丙酮氰醇製備)。隨後將混合物分配在乙酸乙酯與水之間，且分離有機層，以鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物於矽膠上以10%乙酸乙酯/己烷至40%乙酸乙酯/己烷溶離來純化，以提供黃色固體狀之Cap-140， 步驟a(160 mg,34%)。Rt =2.46 min(條件-MS-W2);90%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C12 H9 ClN2 O之分析計算值為233.05；實驗值為233.08。
如以下關於製備Cap-141之程序中所述，藉由以12 N HCl酸水解Cap-140， 步驟a來製備Cap-140。Rt =2.24 min(條件-MS-W2);90%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C12 H11 ClNO3 之分析計算值為252.04；實驗值為252.02。
如關於製備Cap-140， 步驟a之程序(見上)中所述，自1-溴-3-氟異喹啉(使用J. Med. Chem .,13,613(1970)中所述之程序自3-胺基-1-溴異喹啉製備)製備Cap-141， 步驟a。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δ8.35(d,J =8.5 Hz,1H),7.93(d,J =8.5 Hz,1H),7.83(t,J =7.63 Hz,1H),7.77-7.73(m,1H),7.55(s,1H)；Rt =1.60 min(條件-D1);90%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C10 H6 FN2 之分析計算值為173.05；實驗值為172.99。
以12 N HCl(3 mL)處理Cap-141， 步驟a(83 mg,0.48 mmol)且在80℃下加熱所得漿液16小時，隨後冷卻至室溫且以水(3 mL)稀釋。攪拌混合物10分鐘且隨後過濾以提供灰白色固體狀之Cap-141(44.1 mg,47.8%)。以二氯甲烷稀釋濾液且以鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，且濃縮以提供額外Cap-141，其為足夠純的而可直接進行下一步驟(29.30 mg,31.8%)。1 H NMR(DMSO-d6 ,500 MHz)δ14.0(br s,1H),8.59-8.57(m,1H),8.10(d,J =8.5 Hz,1H),7.88-7.85(m,2H),7.74-7.71(m,1H)；Rt =1.33 min(條件-D1);90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C10 H7 FNO2 之分析計算值為192.05；實驗值為191.97。
如關於製備Cap-138， 步驟b及c 之兩步程序中所述，自N-氧化4-溴異喹啉製備Cap-142， 步驟a。Rt =1.45 min(條件-MS-W1);90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C10 H6 BrN2 之分析計算值為232.97；實驗值為233.00。
向Cap-142， 步驟a(116 mg，0.50 mmol)、磷酸三鉀(170 mg，0.80 mmol)、乙酸鈀(II)(3.4 mg,0.015 mmol)及2-(二環己基膦基)聯苯(11 mg,0.03 mmol)於無水甲苯(1 mL)中之經氬氣脫氣的懸浮液中添加嗎啉(61 μL，0.70 mmol)。在100℃下加熱混合物16小時，冷卻至25℃且經矽藻土(CELITE)過濾。於矽膠上以10%至70%乙酸乙酯/己烷溶離來純化殘餘物，提供黃色固體狀之Cap-142， 步驟b(38 mg,32%)，其可直接進行下一步驟。Rt =1.26 min(條件-MS-W1);90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C14 H14 N3 O之分析計算值為240.11；實驗值為240.13。
如關於Cap-138之程序所述，以5 N氫氧化鈉自Cap-142， 步驟b製備Cap-142。Rt =0.72 min(條件-MS-W1)；90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C14 H15 N2 O3 之分析計算值為259.11；實驗值為259.08。
向3-胺基-1-溴異喹啉(444 mg，2.00 mmol)於無水二甲基甲醯胺(10 mL)中之經攪拌溶液中整份添加氫化鈉(60%，未經洗滌，96 mg，2.4 mmol)。在25℃下攪拌混合物5分鐘，隨後添加2-溴乙醚(90%，250 μL，2.00 mmol)。再在25℃下攪拌混合物5小時且在75℃下攪拌72小時，隨後冷卻至25℃，以飽和氯化銨溶液淬滅反應且以乙酸乙酯稀釋。分離有機層，以水及鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。將殘餘物於矽膠上以0%至70%乙酸乙酯/己烷溶離來純化，提供黃色固體狀之Cap-143，步驟a(180 mg，31%)。Rt =1.75 min(條件-MS-W1);90%之均質性指數；LC-MS: [M+H]+ C13 H14 BrN2 O之分析計算值為293.03；實驗值為293.04。
向Cap-143， 步驟a(154 mg，0.527 mmol)於無水四氫呋喃(5 mL)中之冷(-60℃)溶液中添加正丁基鋰於己烷(2.5 M，0.25 mL，0.633 mmol)中之溶液。10分鐘之後，用無水二氧化碳將反應混合物鼓泡10分鐘，隨後以1 N HCl淬滅反應且溫至25℃。隨後以二氯甲烷(3×30 mL)萃取混合物且在真空中濃縮合併之有機萃取物。藉由逆相HPLC(MeOH/水/TFA)純化殘餘物，提供Cap-143(16 mg，12%)。Rt =1.10 min(條件-MS-W1);90%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C14 H15 N2 O3 之分析計算值為259.11；實驗值為259.08。
將1,3-二氯異喹啉(2.75 g，13.89 mmol)以小份添加至發菸硝酸(10 mL)及濃硫酸(10 mL)之冷(0℃)溶液中。在0℃下攪拌混合物0.5小時，隨後逐漸溫至25℃，同時攪拌16小時。隨後將混合物倒入含有碎冰及水之燒杯中且在0℃下攪拌所得懸浮液1小時，隨後過濾以提供黃色固體狀之Cap-144， 步驟a(2.73 g，81%)，其可直接使用。Rt =2.01 min(條件-D1);95%之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C9 H5 Cl2 N2 O2 之分析計算值為242.97；實驗值為242.92。Cap-144， 步驟b
將Cap-144， 步驟a(0.30 g，1.23 mmol)溶解於甲醇(60 mL)中且以氧化鉑(30 mg)處理，且使懸浮液在7 psi H2 下進行帕爾氫化(Parr hydrogenation)歷時1.5小時。隨後添加福馬林(5 mL)及額外氧化鉑(30 mg)，且使懸浮液在45 psi H2 下再進行帕爾氫化歷時13小時。隨後經矽藻土(CELITE)抽吸-過濾且濃縮至1/4體積。抽吸-過濾所得沈澱物提供黃色固體狀之標題化合物，對其進行矽膠急驟層析，以於己烷中之5%乙酸乙酯至於己烷中之25%乙酸乙酯溶離，提供淺黃色固體狀之Cap-144，步驟b(231 mg，78%)。Rt =2.36 min(條件-D1);95%之均質性指數；1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ8.02(s,1H),7.95(d,J =8.6 Hz,1H),7.57-7.53(m,1H),7.30(d,J =7.3 Hz,1H),2.88(s,6H)；LC-MS: [M+H]+ C11 H11 Cl2 N2 之分析計算值為241.03；實驗值為241.02。HRMS: [M+H]+ C11 H11 Cl2 N2 之分析計算值為241.0299；實驗值為241.0296。
根據對於製備Cap-139， 步驟a所述之程序自Cap-144， 步驟b製備Cap-144， 步驟c。 Rt= 2.19 min(條件-D1);95% 之均質性指數；LC-MS:[M+H]+ C12 H11 ClN3 之分析計算值為232.06；實驗值為232.03。HRMS:[M+H]+ C12 H11 ClN3 之分析計算值為232.0642；實驗值為232.0631。
根據對於Cap-141所述之程序製備Cap-144。Rt =2.36 min(條件-D1)；90%；LC-MS:[M+H]+ C12 H12 ClN2 O2 之分析計算值為238.01；實驗值為238.09。Cap-145至Cap-162除非另有說明，否則根據對於製備Cap-138(方法A)或Cap-139(方法B)所述之程序自適當1-氯異喹啉製備Cap-145至Cap-162，此如下文所概述。
向2-丁酮酸(1.0 g，9.8 mmol)於乙醚(25 ml)中之溶液中逐滴添加溴化苯基鎂(22 ml，於THF中1 M)。在約25℃下在氮氣下攪拌反應物17.5小時。以1 N HCl酸化反應物且以乙酸乙酯(3×100 ml)萃取產物。依次以水及鹽水洗滌合併之有機層，且經MgSO4 乾燥。在真空中濃縮之後，獲得白色固體。將固體自己烷/乙酸乙酯再結晶以提供白色針狀之Cap-163(883.5 mg)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz): 12.71(br s,1 H),7.54-7.52(m,2H),7.34-7.31(m,2H),7.26-7.23(m,1H),5.52-5.39(br s,1H),2.11(m,1H),1.88(m,1H),0.79(app t,J=7.4 Hz,3H)。
將2-胺基-2-苯基丁酸(1.5 g，8.4 mmol)、甲醛(14 mL，於水中37%)、1 N HCl(10 mL)及10% Pd/C(0.5 mg)於MeOH(40 mL)中之混合物暴露於帕爾瓶中50 psi下之H2 42小時。經CELITE過濾反應物且在真空中濃縮，將殘餘物溶解於MeOH(36 mL)中，且將產物以逆相HPLC(MeOH/H2 O/TFA)純化以提供白色固體狀之Cap-164之三氟乙酸鹽(1.7 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz) 7.54-7.47(m,5H),2.63(m,1H),2.55(s,6H),2.31(m,1H),0.95(app t,J=7.3 Hz,3H)。Cap-165
向2-胺基-2-茚滿甲酸(258.6 mg，1.46 mmol)及甲酸(0.6 ml，15.9 mmol)於1,2-二氯乙烷(7 ml)中之混合物中添加甲醛(0.6 ml，於水中37%)。在約25℃下攪拌混合物15分鐘，隨後在70℃下加熱8小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物溶解於DMF(14 mL)中且藉由逆相HPLC(MeOH/H2 O/TFA)純化以提供黏性油狀之Cap-165之三氟乙酸鹽(120.2 mg)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz): 7.29-7.21(m,4H),3.61(d,J=17.4 Hz,2H),3.50(d,J=17.4 Hz,2H),2.75(s,6H)。LC-MS: [M+H]+ C12 H16 NO2 之分析計算值為206.12；實驗值為206.07。
根據對於合成Cap-7a及Cap-7b所述之方法，自(1S,4S)-(+)-2-甲基-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷(2HBr)製備Cap-166a 及Cap-166b ，其例外之處為使用半製備型Chrialcel OJ管柱，20×250 mm，10 μm以85:15庚烷/乙醇混合物在10 mL/min溶離速率下溶離25分鐘來分離苯甲酯中間物。Cap-166b ：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz): 7.45(d,J=7.3 Hz,2H),7.27-7.19(m,3H),4.09(s,1H),3.34(app br s,1H),3.16(app br s,1H),2.83(d,J =10.1 Hz,1H),2.71(m,2H),2.46(m,1H),2.27(s,3H),1.77(d,J=9.8 Hz,1H),1.63(d,J=9.8 Hz,1H)。LC-MS:[M+H]+ C14 H19 N2 O2 之分析計算值為247.14；實驗值為247.11。
將外消旋Boc-1,3-二氫-2H-異吲哚甲酸(1.0 g，3.8 mmol)於20% TFA/CH2 Cl2 中之溶液在約25℃下攪拌4小時。在真空中移除所有揮發性組分。將所得粗物質、甲醛(15 mL，於水中37%)、1 N HCl(10 mL)及10% Pd/C(10 mg)於MeOH中之混合物暴露於帕爾瓶中之H2 (40 PSI)23小時。經CELITE過濾反應混合物且在真空中濃縮以提供黃色泡沫狀之Cap-167(873.5 mg)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,500 MHz) 7.59-7.38(m,4H),5.59(s,1H),4.84(d,J=14 Hz,1H),4.50(d,J=14.1 Hz,1H),3.07(s,3H)。LC-MS:[M+H]+ C10 H12 NO2 之分析計算值為178.09；實驗值為178.65。
根據對於製備Cap-167所述之程序自外消旋Boc-胺基茚滿-1-甲酸製備外消旋Cap-168。粗物質可按原樣使用。
將2-胺基-2-苯基丙酸鹽酸鹽(5.0 g，2.5 mmol)、甲醛(15 ml，於水中37%)、1 N HCl(15 ml)及10% Pd/C(1.32 g)於MeOH(60 mL)中之混合物置於帕爾瓶中且在氫氣(55 PSI)下震盪4日。經CELITE過濾反應混合物且在真空中濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中且藉由逆相製備型-HPLC(MeOH/水/TFA)純化以提供黏性半固體狀之Cap-169之三氟乙酸鹽(2.1 g)。1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.26 ppm,500 MHz): 7.58-7.52(m,2 H),7.39-7.33(m,3H),2.86(br s,3H),2.47(br s,3H),1.93(s,3H)。LC-MS:[M+H]+ C11 H16 NO2 之分析計算值為194.12；實驗值為194.12。
(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸向於水(15 ml)中之(S)-2-胺基-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸(505 mg；3.18 mmol；由Astatech獲得)中添加碳酸鈉(673 mg；6.35 mmol)，且冷卻所得混合物至0℃，且隨後經5分鐘逐滴添加氯甲酸甲酯(0.26 ml；3.33 mmol)。攪拌反應物18小時，同時將浴解凍至環境溫度。隨後將該反應混合物分配在1 N HCl與乙酸乙酯之間。移除有機層且將水層再以2份乙酸乙酯進一步萃取。以鹽水洗滌合併之有機層，經硫酸鎂乾燥，過濾且在真空中濃縮以提供無色殘餘物形式之Cap-170。1 H NMR(500 MHz,DMSO -d 6 )δppm 12.65(1 H,br s),7.44(1 H,d,J =8.24 Hz),3.77-3.95(3 H,m),3.54(3 H,s),3.11-3.26(2 H,m),1.82-1.95(1 H,m),1.41-1.55(2 H,m),1.21-1.39(2 H,m)；LC-MS: [M+H]+ C9 H16 NO5 之分析計算值為218.1；實驗值為218.1。
將2-(苯甲基氧基羰基胺基)-2-(氧雜環丁烷-3-亞基)乙酸甲酯(200 mg，0.721 mmol；Il Farmaco(2001),56,609-613)於乙酸乙酯(7 ml)及CH2 Cl2 (4.00 ml)中之溶液藉由氮氣鼓泡10分鐘來脫氣。隨後添加二碳酸二甲酯(0.116 ml，1.082 mmol)及Pd/C(20 mg，0.019 mmol)，且向反應混合物裝備氫氣氣球且在環境溫度下攪拌隔夜，此時TLC(95:5 CH2 Cl2 /MeOH：以由1 g Ce(NH4 )2 SO4 、6 g鉬酸銨、6 ml硫酸及100 ml水製得之著色劑來目測)表明完全轉化。經CELITE過濾反應物且濃縮。將殘餘物經由BIOTAGE(在25 Samplet上裝載二氯甲烷；在25S管柱上以二氯甲烷溶離3CV，隨後以0至5% MeOH/二氯甲烷溶離250 ml，隨後在5% MeOH/二氯甲烷下保持250 ml；9 ml溶離份)純化。收集含有所需物質之溶離份且濃縮，得到120 mg (81%)無色油狀之2-(甲氧基羰基胺基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯。1 H NMR(500 MHz,氯仿-d)δppm 3.29-3.40(m,J =6.71 Hz,1 H) 3.70(s,3 H) 3.74(s,3 H) 4.55(t,J =6.41 Hz,1 H) 4.58-4.68(m,2 H) 4.67-4.78(m,2 H) 5.31(br s,1 H)。LC-MS: [M+H]+ C8 H14 NO5 之分析計算值為204.2；實驗值為204.0。
向於THF(2 mL)及水(0.5 mL)中之2-(甲氧基羰基胺基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸甲酯(50 mg，0.246 mmol)中添加單水合氫氧化鋰(10.33 mg，0.246 mmol)。在環境溫度下攪拌所得溶液隔夜。TLC(1:1 EA/Hex；哈尼森著色劑(Hanessian stain)[1 g Ce(NH4 )2 SO4 ，6 g鉬酸銨，6 ml硫酸及100 ml水])表明約10%原料剩餘。再添加3 mg LiOH，且攪拌隔夜，此時TLC展示無原料剩餘。在真空中濃縮且置於高真空隔夜，提供55 mg無色固體狀之2-(甲氧基羰基胺基)-2-(氧雜環丁烷-3-基)乙酸鋰。1 H NMR(500 MHz,MeOD)δppm 3.39-3.47(m,1 H) 3.67(s,3 H) 4.28(d,J =7.93 Hz,1 H) 4.64(t,J =6.26 Hz,1 H) 4.68(t,J =7.02 Hz,1 H) 4.73(d,J =7.63 Hz,2 H)。
以下重氮化步驟係自Barton,A.等人,J .C .S .Perkin Trans I ,159-164(1982)修改而來：將NaNO2 (166 mg，2.4 mmol)於水(0.6 mL)中之溶液緩慢添加至2-胺基-5-乙基-1,3-噻唑-4-甲酸甲酯(186 mg，1.0 mmol)、CuSO4 ‧5H2 O(330 mg，1.32 mmol)、NaCl(260 mg，4.45 mmol)及H2 SO4 (5.5 mL)於水(7.5 mL)中之經攪拌的冷(0℃)溶液中。在0℃下攪拌混合物45分鐘，且溫至室溫，此時再攪拌1小時，隨後添加CuCl(118 mg)。再在室溫下攪拌該混合物16小時，隨後用鹽水稀釋，且用乙醚萃取兩次。合併有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮以得到呈橙色油狀之2-氯-5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(亦即Cap-172步驟a)(175 mg，85%)(80%純)，其直接用於下一反應中。Rt =1.99 min(條件-MD1)；LC-MS:[M+H]+ C7 H9 ClNO2 S之分析計算值為206.01；實驗值為206.05。
Cap-172向2-氯-5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(175 mg)於THF/H2 O/MeOH(20 mL/3 mL/12 mL)中之溶液中添加LiOH(305 mg，12.76 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，隨後濃縮減小體積，且用1 N HCl之乙醚溶液(25 mL)中和。用乙酸乙酯萃取殘餘物兩次，且合併有機層，經MgSO4 乾燥且蒸發以得到呈紅色固體狀之Cap-172(60 mg，74%)，其不經進一步純化即使用。1 H NMR(300 MHz,DMSO-d6 )δppm 13.03-13.42(1 H,m),3.16(2 H,q,J =7.4 Hz),1.23(3 H,t,J =7.5 Hz)。Rt =1.78 min(條件-MD1)；LC-MS:[M+H]+ C6 H7 ClNO2 S之分析計算值為191.99；實驗值為191.99。
以下重氮化步驟係自Barton，A.等人,J .C .S .Perkin Trans I ,159-164(1982)修改而來：將NaNO2 (150 mg，2.17 mmol)於水(1.0 mL)中之溶液逐滴添加至2-胺基-5-乙基-1,3-噻唑-4-甲酸甲酯(186 mg，1.0 mmol)於50% H3 PO2 (3.2 mL)中之經攪拌的冷(0℃)溶液中。在0℃下攪拌混合物1小時，且溫至室溫，此時再攪拌2小時。再冷卻至0℃後，用NaOH(85 mg)於水(10 mL)中之溶液緩慢處理該混合物。隨後，用飽和NaHCO3 溶液稀釋混合物，且用乙醚萃取兩次。合併有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮以得到呈橙色油狀之5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(亦即Cap-173步驟a)(134 mg，78%)(85%純)，其直接用於下一反應中。Rt =1.58 min(條件-MD1)；LC-MS:[M+H]+ C7 H10 NO2 S之分析計算值為172.05；實驗值為172.05。
Cap-173向5-乙基噻唑-4-甲酸甲酯(134 mg)於THF/H 2 O/MeOH(18 mL/2.7 mL/11 mL)中之溶液中添加LiOH(281 mg，11.74 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，隨後濃縮減小體積，且用1 N HCl之乙醚溶液(25 mL)中和。用乙酸乙酯萃取殘餘物兩次，且合併有機層，經MgSO4 乾燥且蒸發以得到呈橙色固體狀之Cap-173(90 mg，73%)，其不經進一步純化即使用。1 H NMR(300 MHz,DMSO-d6 )δppm 12.74-13.04(1 H,m),3.20(2 H,q,J =7.3 Hz),1.25(3 H,t,J =7.5 Hz)。Rt =1.27 min(條件-MD1)；LC-MS: [M+H]+ C6 H8 NO2 S之分析計算值為158.03；實驗值為158.04。
將三氟甲磺酸酐(5.0 g,18.0 mmol)逐滴添加至3-羥基吡啶甲酸甲酯(2.5 g,16.3 mmol)及TEA(2.5 mL,18.0 mmol)於CH2 Cl2 (80 mL)中之冷(0℃)溶液中。在0℃下攪拌混合物1小時，隨後溫至室溫，此時再攪拌1小時。隨後用飽和NaHCO3 溶液(40 mL)淬滅混合物且分離有機層，用鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥且濃縮以得到呈暗棕色油狀之3-(三氟甲基磺醯氧基)吡啶甲酸甲酯(亦即Cap-174步驟a)(3.38 g，73%)(>95%純)，其不經純化即直接使用。1 H NMR(300 MHz,CDCl3 )δppm 8.72-8.79(1 H,m),7.71(1 H,d,J =1.5 Hz),7.58-7.65(1 H,m),4.04(3 H,s)。Rt =1.93 min(條件-MD1)；LC-MS:[M+H]+ C8 H7 F3 NO5 S之分析計算值為286.00；實驗值為286.08。Cap-174向3-(三氟甲基磺醯氧基)吡啶甲酸甲酯(570 mg，2.0 mmol)於DMF(20 mL)中之溶液中添加LiCl(254 mg，6.0 mmol)、三丁基(乙烯基)錫烷(761 mg，2.4 mmol)及二氯化雙(三苯基膦)鈀(42 mg，0.06 mmol)。在100℃下加熱混合物隔夜，隨後在室溫下向反應混合物中添加飽和KF溶液(20 mL)。攪拌該混合物4小時，隨後經CELITE過濾，且用乙酸乙酯洗滌CELITE墊。隨後分離濾液水相且在真空中濃縮減小體積。用4 N HCk之二噁烷溶液(5 mL)處理殘餘物，且用甲醇萃取所得混合物，過濾且蒸發以得到呈綠色固體狀之Cap-174(260 mg)，其略受無機鹽污染但不經進一步純化即使用。1 H NMR(300 MHz,DMSO-d6 )δppm 8.21(1 H,d,J =3.7 Hz),7.81-7.90(1 H,m),7.09(1 H,dd,J =7.7,4.8 Hz),6.98(1 H,dd,J =17.9,11.3 Hz),5.74(1 H,dd,J =17.9,1.5 Hz),5.20(1 H,d,J =11.0 Hz)。Rt =0.39 min(條件-MD1)；LC-MS:[M+H]+ C8 H8 NO2 之分析計算值為150.06；實驗值為150.07。
向3-(三氟甲基磺醯氧基)吡啶甲酸甲酯(亦即Cap-174步驟a)(570 mg，2.0 mmol)、Cap-174製備中之中間物於DMF(20 mL)中之溶液中添加LiCl(254 mg，6.0 mmol)、三丁基(乙烯基)錫烷(761 mg，2.4 mmol)及二氯化雙(三苯基膦)鈀(42 mg，0.06 mmol)。在100℃下加熱混合物4小時，隨後在真空中移除溶劑。將殘餘物溶解於乙腈(50 mL)及己烷(50 mL)中，且用己烷洗滌所得混合物兩次。隨後分離乙腈層，經CELITE過濾且蒸發。利用急驟層析在Horizon儀器上純化殘餘物(用含25%乙酸乙酯之己烷己烷至含65%乙酸乙酯之己烷梯度溶離)，得到呈黃色油狀之3-乙烯基吡啶甲酸甲酯(亦即Cap-175步驟a)(130 mg，40%)。1 H NMR(300 MHz,CDCl3 )δppm 8.60(1 H,dd,J =4.6,1.7 Hz),7.94(1 H,d,J =7.7 Hz),7.33-7.51(2 H,m),5.72(1 H,d,J =17.2 Hz),5.47(1 H,d,J =11.0 Hz),3.99(3 H,s)。Rt =1.29 min(條件-MD1)；LC-MS: [M+H]+ C9 H10 NO2 之分析計算值為164.07；實驗值為164.06。
將鈀/碳(10%，25 mg)添加至3-乙烯基吡啶甲酸甲酯(120 mg，0.74 mmol)於乙醇(10 mL)中之溶液中。在室溫下在氫氣氛圍中攪拌懸浮液1小時，隨後經CELITE過濾，且用甲醇洗滌CELITE墊。濃縮濾液至乾燥，得到3-乙基吡啶甲酸甲酯(亦即Cap-175步驟b)，其直接用於下一反應中。Rt =1.15 min(條件-MD1)；LC-MS: [M+H]+ C9 H12 NO2 之分析計算值為166.09；實驗值為166.09。
Cap-175向3-乙基吡啶甲酸甲酯於THF/H2 O/MeOH(5 mL/0.75 mL/3 mL)中之溶液中添加LiOH(35 mg，1.47 mmol)。在室溫下攪拌混合物2天，隨後添加額外的LiOH(80 mg)。再處於室溫下24小時後，過濾混合物且在真空中移除溶劑。隨後用4 N HCl之二噁烷溶液(5 mL)處理殘餘物，且濃縮所得懸浮液至乾燥，得到呈黃色固體狀之Cap-175，其不經進一步純化即使用。1 H NMR(300 MHz,DMSO-d6 )δppm 8.47(1 H,dd,J =4.8,1.5 Hz),7.82-7.89(1 H,m),7.53(1 H,dd,J =7.7,4.8 Hz),2.82(2 H,q,J =7.3 Hz),1.17(3 H,t,J =7.5 Hz)。Rt =0.36 min(條件-MD1)；LC-MS: [M+H]+ C8 H10 NO2 之分析計算值為152.07；實驗值為152.10。
(S)-2-(4,4-二氟環己基)-2-(甲氧基羰基胺基)乙酸Cap-176步驟a
將1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-酮(15 g,96 mmol)於EtOAc(150 mL)中之溶液添加至2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(二甲氧基磷醯基)乙酸甲酯(21.21 g,64.0 mmol)於1,1,3,3-四甲基胍(10.45 mL,83 mmol)及EtOAc(150 mL)中之溶液中。在周圍溫度下攪拌所得溶液72小時，隨後用EtOAc(25 ml)稀釋。用1 N HCl(75 mL)、H2 O(100 mL)及鹽水(100 mL)洗滌有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且濃縮。經由BIOTAGE(5%至25% EtOAc/己烷；300 g管柱)純化殘餘物。隨後在真空下濃縮含產物之合併部分，且將殘餘物自己烷/EtOAc再結晶，得到對應於2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(1,4-二氧雜螺[4.5]癸-8-亞基)乙酸甲酯(6.2 g)之白色晶體。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d)δppm 7.30-7.44(5 H,m),6.02(1 H,br. s.),5.15(2 H,s),3.97(4 H,s),3.76(3 H,br. s.),2.84-2.92(2 H,m),2.47(2 H,t,J =6.40 Hz),1.74-1.83(4 H,m)。LC(條件OL1): Rt =2.89 min。LC-MS:[M+Na]+ C19 H23 NNaO6 之分析計算值為745.21；實驗值為745.47。
自烯烴Cap-176步驟a根據Burk,M.J.等人(J .Am .Chem .Soc .,117:9375-9376(1995))及其中之參考之方法製備酯Cap-176步驟b：在N2 氛圍下，在500 mL高壓瓶中裝入含烯烴Cap-176步驟a(3.5 g,9.68 mmol)之脫氣MeOH(200 mL)。隨後向該溶液中裝入四氟硼酸(-)-1,2-雙((2S,5S)-2,5-二甲基磷雜環戊基)乙烷(環辛二烯)銠(I)(0.108 g，0.194 mmol)，且用N2 (3×)上沖洗所得混合物且裝入H2 (3×)。在70 psi H2 下在周圍溫度下劇烈搖動溶液72小時。在減壓下移除溶劑且將剩餘殘餘物溶解於EtOAc中。隨後經矽膠塞過濾帶棕色溶液，且用EtOAc溶離。在真空下濃縮溶劑，得到對應於酯Cap-176步驟b(3.4 g)之澄清油狀物。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 -d)δppm 7.28-7.43(5 H,m),5.32(1 H,d,J =9.16 Hz),5.06-5.16(2 H,m),4.37(1 H,dd,J =9.00,5.04 Hz),3.92(4 H,t,J =3.05 Hz),3.75(3 H,s),1.64-1.92(4 H,m),1.37-1.60(5 H,m)。LC(條件OL1): Rt =1.95 min。LC-MS: [M+H]+ C19 H26 NO6 之分析計算值為364.18；實驗值為364.27。
將酯Cap-176步驟b(4.78 g,13.15 mmol)溶解於THF(15 mL)中，接著依次添加水(10 mL)、冰乙酸(26.4 mL，460 mmol)及二氯乙酸(5.44 mL，65.8 mmol)。在周圍溫度下攪拌所得混合物72小時，且藉由在劇烈攪拌下減緩添加固體Na2 CO3 淬滅反應直至不再有明顯的氣體釋放。將粗產物萃取於10%乙酸乙酯-二氯甲烷中，且合併有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且濃縮。經由BIOTAGE(0至30% EtOAc/Hex；25 g管柱)純化所得殘餘物，得到呈澄清油狀之酮Cap-176步驟c(3.86 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d)δppm 7.28-7.41(5 H,m),5.55(1 H,d,J =8.28 Hz),5.09(2 H,s),4.46(1 H,dd,J =8.16,5.14 Hz),3.74(3 H,s),2.18-2.46(5 H,m),1.96-2.06(1 H,m),1.90(1 H,ddd,J =12.99,5.96,2.89 Hz),1.44-1.68(2 H,m,J =12.36,12.36,12.36,12.36,4.77 Hz)。LC(條件OL1): Rt =1.66 min。LC-MS:[M+Na]+ C17 H21 NNaO5 之分析計算值為342.13；實驗值為342.10。
將DEOXO-FLUOR(3.13 ml，16.97 mmol)添加至酮Cap-176步驟c(2.71 g，8.49 mmol)於CH2 Cl2 (50 ml)中之溶液中，接著添加催化量之EtOH(0.149 ml，2.55 mmol)。在室溫下攪拌所得帶黃色溶液隔夜。藉由添加飽和NaHCO3 水溶液(25 mL)淬滅反應，且用EtOAc(3×75 mL)萃取混合物。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且乾燥，得到帶黃色油狀物。經由BIOTAGE層析(2%至15% EtOAc/Hex；90 g管柱)純化殘餘物且回收對應於二氟胺基酸二氟化物Cap-176步驟d(1.5 g)之白色固體。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d)δppm 7.29-7.46(5 H,m),5.34(1 H,d,J =8.28 Hz),5.12(2 H,s),4.41(1 H,dd,J =8.66,4.89 Hz),3.77(3 H,s),2.06-2.20(2 H,m),1.83-1.98(1 H,m),1.60-1.81(4 H,m),1.38-1.55(2 H,m)。19 F NMR(376 MHz,CDCl3 -d)δppm -92.15(1 F,d,J =237.55 Hz),-102.44(1 F,d,J =235.82 Hz)。LC(條件OL1): Rt =1.66 min。LC-MS: [2M+Na]+ C34 H42 F4 N2 NaO8 之分析計算值為705.28；實驗值為705.18。
將二氟化物Cap-176步驟d(4 g，11.72 mmol)溶解於MeOH(120 mL)中，且裝入Pd/C(1.247 g，1.172 mmol)。用N2 (3×)沖洗懸浮液，且將反應混合物置放在1 atm H2 (氣球)下。在周圍溫度下攪拌混合物48小時。隨後經CELITE塞過濾懸浮液，且在真空下濃縮得到油狀物，該油狀物對應於胺基Cap-176步驟e(2.04 g)且不經進一步純化即使用。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 3.62(3 H,s),3.20(1 H,d,J =5.77 Hz),1.91-2.09(2 H,m),1.50-1.88(7 H,m),1.20-1.45(2 H,m)。19 F NMR(376 MHz,DMSO-d6 )δppm -89.39(1 F,d,J =232.35 Hz),-100.07(1 F,d,J =232.35 Hz)。13 C NMR(101 MHz,DMSO-d6 )δppm 175.51(1 C,s),124.10(1 C,t,J =241.21,238.90 Hz),57.74(1 C,s),51.39(1 C,s),39.23(1 C,br. s.),32.02-33.83(2 C,m),25.36(1 C,d,J =10.02 Hz),23.74(1 C,d,J =9.25 Hz)。LC(條件OL2): Rt =0.95 min。LC-MS: [2M+H]+ C18 H31 F4 N2 O2 之分析計算值為415.22；實驗值為415.40。
將氯甲酸甲酯(1.495 mL，19.30 mmol)添加至胺基酸Cap-176步驟e(2 g，9.65 mmol)及DIEA(6.74 mL，38.6 mmol)於CH2 Cl2 (100 mL)中之溶液中。在室溫下攪拌所得溶液3小時，且在減壓下移除揮發性物質。經由BIOTAGE(0%至20% EtOAc/Hex；90 g管柱)純化殘餘物。回收在真空下靜置後固化且對應於胺基甲酸酯Cap-176步驟f之澄清油狀物(2.22 g)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 -d)δppm 5.27(1 H,d,J =8.55 Hz),4.39(1 H,dd,J =8.85,4.88 Hz),3.77(3 H,s),3.70(3 H,s),2.07-2.20(2 H,m),1.84-1.96(1 H,m),1.64-1.82(4 H,m),1.39-1.51(2 H,m)。19 F NMR(471 MHz,CDCl3 -d)δppm -92.55(1 F,d,J =237.13 Hz),-102.93(1 F,d,J =237.12 Hz)。13 C NMR(126 MHz,CDCl3 -d)δppm 171.97(1 C,s),156.69(1 C,s),119.77-125.59(1 C,m),57.24(1 C,br. s.),52.48(1 C,br. s.),52.43(1 C,s),39.15(1 C,s),32.50-33.48(2 C,m),25.30(1 C,d,J =9.60 Hz),24.03(1 C,d,J =9.60 Hz)。LC(條件OL1): Rt =1.49 min。LC-MS: [M+Na]+ C11 H17 F2 NNaO4 之分析計算值為288.10；實驗值為288.03。
(S)-2-(4,4-二氟環己基)-2-(甲氧基羰基胺基)乙酸將LiOH(0.379 g，15.83 mmol)於水(25 mL)中之溶液添加至胺基甲酸酯Cap-176步驟f(2.1 g，7.92 mmol)於THF(75 mL)中之溶液中，且在周圍溫度下攪拌所得混合物4小時。在真空下移除THF，且用1 N HCl溶液(2 mL)使剩餘水相酸化，然後用EtOAc(2×50 mL)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且濃縮，得到對應於Cap-176之白色泡沫體(1.92 g)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 12.73(1 H,s),7.50(1 H,d,J =8.78 Hz),3.97(1 H,dd,J =8.53,6.02 Hz),3.54(3 H,s),1.92-2.08(2 H,m),1.57-1.90(5 H,m),1.34-1.48(1 H,m),1.27(1H,qd,J =12.72,3.26 Hz)。19 F NMR(376 MHz,DMSO-d6 )δppm -89.62(1 F,d,J =232.35 Hz),-99.93(1 F,d,J =232.35 Hz)。LC(條件OL2): Rt =0.76 min。LC-MS: [M-H]+ C10 H14 F2 NO4 之分析計算值為250.09；實驗值為250.10。
將1,1,3,3-四甲基胍(0.985 mL，7.85 mmol)添加至2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(二甲氧基磷醯基)乙酸甲酯(2.0 g，6.0 mmol)於EtOAc(40 mL)中之經攪拌溶液中，且在室溫下在N2 下攪拌混合物10分鐘。隨後，添加二氫-2H-哌喃-3(4H)-酮[23462-75-1](0.604 g，6.04 mmol)，且在室溫下攪拌混合物16小時。隨後在冰箱中冷卻反應混合物10分鐘，且用檸檬酸水溶液(1.5 g於20 mL水中)中和。分配兩相，且用0.25 N鹽酸水溶液及鹽水洗滌有機層，隨後乾燥(MgSO4 )且濃縮成無色油狀物。將粗材料藉由急驟二氧化矽層析(負載溶劑：DCM，用EtOAc/己烷溶離，梯度為20%至30% EtOAc)純化，得到兩種異構產物：第一溶離產物為(Z)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(2H-哌喃-3(4H,5H,6H)-亞基)乙酸甲酯(490 mg)(白色固體)及第二產物為(E)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(2H-哌喃-3(4H,5H,6H)-亞基)乙酸甲酯(433 mg)(白色固體)。LC-MS滯留時間：1.398 min(Z異構物)及1.378 min(E異構物)；m/z 304.08(Z異構物)及304.16(E異構物)(MH-)。在裝備有PHENOMENEXLuna 10 u C18 3.0×50 mm管柱之Shimadzu LC-10AS液體層析儀上使用SPD-10AV UV-Vis偵測器在220 nM偵測波長下記錄LC資料。溶離條件採用：流速：4 mL/min，梯度：100%溶劑A/0%溶劑B至0%溶劑A/100%溶劑B，梯度時間：3 min，保持時間：1 min，及分析時間：4 min，其中溶劑A為5% MeOH/95% H2 O/10 mM乙酸銨且溶劑B為5% H2 O/95% MeOH/10 mM乙酸銨。使用用於LC之MICROMASSPlatform在電噴霧模式下測定MS資料。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)(Z異構物)δppm 7.30-7.44(m,5 H),6.18(br. s.,1 H),5.10-5.17(m,2 H),4.22(s,2 H),3.78(br. s.,3 H),2.93-3.02(m,2 H),1.80(dt,J =11.7,5.8 Hz,2 H),1.62(s,2 H)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)(E異構物)δppm 7.31-7.44(m,5 H),6.12(br. s.,1 H),5.13-5.17(m,2 H),4.64(br. s.,2 H),3.70-3.82(m,5 H),2.49(t,J =6.5 Hz,2 H),1.80(br. s.,2 H)。(注意：絕對區域選擇性化學由1 H NMR位移及耦合常數決定)。
將四氟硼酸(-)-1,2-雙((2S,5S)-2,5-二甲基磷雜環戊基)乙烷(環辛二烯)-銠(I)(28.2 mg，0.051 mmol)添加至(Z)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(2H-哌喃-3(4H,5H,6H)-亞基)乙酸甲酯(310 mg，1.015 mmol)於MeOH(10 mL)中之經攪拌溶液中，且依次用N2 及H2 真空沖洗該混合物，隨後在室溫下在H2 (60 psi)下攪拌反應物2天。濃縮反應混合物，且將殘餘物藉由急驟二氧化矽層析(負載溶劑：DCM，用含20% EtOAc之己烷溶離)純化，得到呈澄清無色油狀之(S)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯(204 mg)。LC-MS滯留時間：1.437 min；m/z 307.89(MH+)。在裝備有PHENOMENEXLuna 10u C18 3.0×50 mm管柱之Shimadzu LC-10AS液體層析儀上使用SPD-10AV UV-Vis偵測器在220 nM偵測波長下記錄LC資料。溶離條件採用：流速：4 mL/min，梯度：100%溶劑A/0%溶劑B至0%溶劑A/100%溶劑B，梯度時間：3 min，保持時間：1 min，及分析時間：4 min，其中溶劑A為5% MeOH/95% H2 O/10 mM乙酸銨且溶劑B為5% H2 O/95% MeOH/10 mM乙酸銨。使用用於LC之MICROMASSPlatform在電噴霧模式下測定MS資料。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)δppm 7.30-7.46(m,5 H),5.32(d,J =8.8 Hz,1 H),5.12(s,2 H),4.36(dd,J =8.9,5.6 Hz,1 H),3.84-3.98(m,2 H),3.77(s,3 H),3.28-3.37(m,1 H),3.23(dd,J =11.3,10.5 Hz,1 H),2.04-2.16(m,1 H),1.61-1.75(m,3 H),1.31-1.43(m,1 H)。另一立體異構物((E)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(2H-哌喃-3(4H,5H,6H)-亞基)乙酸甲酯)(360 mg，1.18 mmol)以類似方式還原，得到呈澄清油狀之(S)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯(214 mg)。LC-MS滯留時間：1.437 min；m/z 308.03(MH+)。在裝備有PHENOMENEXLuna 10u C18 3.0×50 mm管柱之Shimadzu LC-10AS液體層析儀上使用SPD-10AV UV-Vis偵測器在220 nM偵測波長下記錄LC資料。溶離條件採用：流速：4 mL/min，梯度：100%溶劑A/0%溶劑B至0%溶劑A/100%溶劑B，梯度時間：3 min，保持時間：1 min，及分析時間：4 min，其中溶劑A為5% MeOH/95% H2 O/10 mM乙酸銨且溶劑B為5%H2 O/95% MeOH/10 mM乙酸銨。使用用於LC之MICROMASSPlatform在電噴霧模式下測定MS資料。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)δppm 7.30-7.44(m,5 H),5.31(d,J =9.0 Hz,1 H),5.12(s,2 H),4.31(dd,J =8.7,6.9 Hz,1 H),3.80-3.90(m,2 H),3.77(s,3 H),3.37(td,J =10.8,3.5 Hz,1 H),3.28(dd,J =11.3,9.8 Hz,1 H),1.97-2.10(m,1 H),1.81(d,J =11.5 Hz,1 H),1.61-1.72(m,2 H),1.33-1.46(m,1 H)。
利用四氟硼酸(-)-1,2-雙((2R,5R)-2,5-二甲基磷雜環戊基)乙烷(環辛二烯)-銠(I)作為使個別立體異構物起始材料烯烴還原之氫化觸媒,以相同方式且以類似產率製備個別對映異構物Cap-177a步驟b(Cap-177c步驟b)及Cap-177b步驟b(Cap-177d步驟b)。
將10% Pd/C(69.3 mg,0.065 mmol)添加至(S)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯(200 mg，0.651 mmol)及二碳酸二甲酯[4525-33-1](0.104 mL，0.976 mmol)於MeOH(10 mL)中之溶液中。依次用N2 及H2 真空沖洗該反應混合物，隨後在室溫下在H2 (55 psi)下攪拌反應物5小時。經CELITE/二氧化矽墊過濾反應混合物，且濃縮濾液至無色油狀物。將粗油狀物藉由急驟二氧化矽層析(負載溶劑：DCM，用含30% EtOAc之己烷溶離)純化，得到呈無色油狀之產物(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯(132 mg)。LC-MS滯留時間：0.92 min；m/z 231.97(MH+)。在裝備有PHENOMENEXLuna 10u C18 3.0×50 mm管柱之Shimadzu LC-10AS液體層析儀上使用SPD-10AV UV-Vis偵測器在220 nM偵測波長下記錄LC資料。溶離條件採用：流速：4 mL/min，梯度：100%溶劑A/0%溶劑B至0%溶劑A/100%溶劑B，梯度時間：3 min，保持時間：1 min，及分析時間：4 min，其中溶劑A為5% MeOH/95% H2 O/10 mM乙酸銨且溶劑B為5% H2 O/95% MeOH/10 mM乙酸銨。使用用於LC之MICROMASSPlatform在電噴霧模式下測定MS資料。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)δppm 5.24(d,J =8.5 Hz,1 H),4.34(dd,J =8.9,5.6 Hz,1 H),3.84-3.97(m,2 H),3.77(s,3 H),3.70(s,3 H),3.29-3.38(m,1 H),3.23(dd,J =11.2,10.4 Hz,1 H),2.03-2.14(m,1 H),1.56-1.75(m,3 H),1.32-1.43(m,1 H)。以類似方式使另一非對映異構物((S)-2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯)轉化，得到呈澄清無色油狀之(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯。LC-MS滯留時間：0.99 min；m/z 231.90(MH+)。在裝備有PHENOMENEXLuna 10u C18 3.0×50 mm管柱之Shimadzu LC-10AS液體層析儀上使用SPD-10AV UV-Vis偵測器在220 nM偵測波長下記錄LC資料。溶離條件採用：流速：4 mL/min，梯度：100%溶劑A/0%溶劑B至0%溶劑A/100%溶劑B，梯度時間：3 min，保持時間：1 min，及分析時間：4 min，其中溶劑A為5% MeOH/95% H2 O/10 mM乙酸銨且溶劑B為5% H2 O/95% MeOH/10 mM乙酸銨。使用用於LC之MICROMASSPlatform在電噴霧模式下測定MS資料。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)δppm 5.25(d,J =8.0 Hz,1 H),4.29(dd,J =8.4,7.2 Hz,1 H),3.82-3.90(m,2 H),3.77(s,3 H),3.70(s,3 H),3.37(td,J =10.8,3.3 Hz,1 H),3.28(t,J =10.5 Hz,1 H),1.96-2.08(m,1 H),1.81(dd,J =12.9,1.6 Hz,1 H),1.56-1.72(m,2 H),1.33-1.46(m,1 H)。使用來自Cap-177a-d步驟b之適當起始材料，以類似方式且以類似產率製備個別對映異構物Cap-177a步驟c(Cap-177c步驟c)及Cap-177b步驟c(Cap-177d步驟c)。
在室溫下在攪拌下，向(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯(126 mg，0.545 mmol)於THF(4 mL)中之溶液中添加1 M LiOH(1.090 mL，1.090 mmol)於水中之溶液。在室溫下攪拌反應物3小時，用1 M HCl(1.1 mL)中和且用EtOAc(3×10 mL)萃取。乾燥有機物，過濾且濃縮，得到呈澄清無色油狀之(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸(Cap-177a)(125 mg)。LC-MS滯留時間：0.44 min；m/z 218.00(MH+)。在裝備有PHENOMENEXLuna 10u C18 3.0×50 mm管柱之Shimadzu LC-10AS液體層析儀上使用SPD-10AV UV-Vis偵測器在220 nM偵測波長下記錄LC資料。溶離條件採用：流速：4 mL/min，梯度：100%溶劑A/0%溶劑B至0%溶劑A/100%溶劑B，梯度時間：3 min，保持時間：1 min，及分析時間：4 min，其中溶劑A為5% MeOH/95% H2 O/10 mM乙酸銨且溶劑B為5% H2 O/95% MeOH/10 mM乙酸銨。使用用於LC之MICROMASSPlatform在電噴霧模式下測定MS資料。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)δppm 5.28(d,J =8.8 Hz,1 H),4.38(dd,J =8.7,5.6 Hz,1 H),3.96-4.04(m,1 H),3.91(d,J =11.0 Hz,1 H),3.71(s,3 H),3.33-3.41(m,1 H),3.24-3.32(m,1 H),2.10-2.24(m,1 H),1.74-1.83(m,1 H),1.63-1.71(m,2 H),1.35-1.49(m,1 H)。
以類似方式使另一非對映異構物((S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸甲酯)轉化，得到呈澄清無色油狀之(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸(Cap-177b)。LC-MS滯留時間：0.41 min；m/z 217.93(MH+)。在裝備有PHENOMENEXLuna 10u C18 3.0×50 mm管柱之Shimadzu LC-10AS液體層析儀上使用SPD-10AV UV-Vis偵測器在220 nM偵測波長下記錄LC資料。溶離條件採用：流速：4 mL/min，梯度：100%溶劑A/0%溶劑B至0%溶劑A/100%溶劑B，梯度時間：3 min，保持時間：1 min，及分析時間：4 min，其中溶劑A為5% MeOH/95% H2 O/10 mM乙酸銨且溶劑B為5% H2 O/95% MeOH/10 mM乙酸銨。使用用於LC之MICROMASSPlatform在電噴霧模式下測定MS資料。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d)δppm 6.18(br. s.,1 H),5.39(d,J =8.5 Hz,1 H),4.27-4.37(m,1 H),3.82-3.96(m,2 H),3.72(s,3 H),3.42(td,J =10.8,3.3 Hz,1 H),3.35(t,J =10.4 Hz,1 H),2.01-2.18(m,1 H),1.90(d,J =11.8 Hz,1 H),1.59-1.76(m,2 H),1.40-1.54(m,1 H)。
使用來自Cap-177a-d步驟c之適當起始材料，以類似方式且以類似產率製備個別對映異構物Cap-177a步驟c(Cap-177c)及Cap-177b(Cap-177d)。
向於氫化槽中之二乙酸(2S,3S,4S)-2-甲基-3,4-二氫-2H-哌喃-3,4-二酯(5 g，23.34 mmol)於20 mL MeOH中之溶液中添加Pd/C(150 mg，0.141 mmol)。在帕爾振盪器上在40 psi下氫化所得混合物1小時。隨後過濾混合物，且濃縮濾液以得到呈澄清油狀之Cap-178步驟a(5.0 g)，其在靜置時固化。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 4.85-4.94(1 H,m),4.69(1 H,t,J =9.46 Hz),3.88-3.94(1 H,m),3.44(1 H,td,J =12.21,1.83 Hz),3.36(1 H,dq,J =9.42,6.12 Hz),2.03-2.08(1 H,m),2.02(3 H,s),2.00(3 H,s),1.70-1.80(1 H,m),1.16(3 H,d,J =6.10 Hz)。
向Cap-178步驟a(5.0 g，23 mmol)於50 mL MeOH中之溶液中添加數滴甲醇鈉。在室溫下攪拌30分鐘後，添加甲醇鈉(0.1 mL，23.12 mmol)，且在室溫下攪拌溶液隔夜。隨後在真空下移除溶劑。用苯稀釋殘餘物且濃縮，得到呈黃色固體狀之相應二醇。將固體溶解於50 mL吡啶中，且在-35℃向該溶液中逐滴添加苯甲醯氯(2.95 mL，25.4 mmol)。在-35℃下攪拌所得混合物1小時，隨後在室溫下攪拌隔夜。用Et2 O稀釋混合物且用水洗滌。用EtOAc(2×)萃取水層。用MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，5%-15% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-178步驟b(4.5 g)，其在長期靜置後緩慢結晶。LC-MS: [M+Na]+ C13 H16 NaO4 之分析計算值為259.09；實驗值為259.0；1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 8.02-8.07(2 H,m),7.55-7.61(1 H,m),7.45(2 H,t,J =7.78 Hz),5.01(1 H,ddd,J =11.44,8.70,5.49 Hz),3.98(1 H,ddd,J =11.90,4.88,1.53 Hz),3.54(1 H,td,J =12.36,2.14 Hz),3.41(1 H,t,J =9.00 Hz),3.31-3.38(1 H,m),2.13-2.19(1 H,m),1.83-1.94(1 H,m),1.36(3 H,d,J =5.80 Hz)。
經15分鐘，向NaH(1.143 g，28.6 mmol)(60%於礦物油中)於6 mL CS2 中之混合物中逐滴添加含Cap-178步驟b(4.5 g，19 mmol)之40 mL CS2 。在室溫下攪拌所得混合物30分鐘。混合物變成淡橙色，且析出一些固體。隨後經20分鐘逐滴添加MeI(14.29 mL，229 mmol)。隨後在室溫下攪拌混合物隔夜。用飽和NH4 Cl溶液小心淬滅反應物。用EtOAc(3×)萃取混合物。用MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，6% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-178步驟c(3.13 g)。LC-MS:[M+Na]+ C15 H18 NaO4 S2 之分析計算值為349.05；實驗值為349.11；1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.94-8.00(2 H,m),7.50-7.58(1 H,m),7.41(2 H,t,J =7.78 Hz),5.96(1 H,t,J =9.46 Hz),5.28(1 H,ddd,J =11.37,9.38,5.49 Hz),4.02(1 H,ddd,J =11.98,4.96,1.68 Hz),3.54-3.68(2 H,m),2.48(3 H,s),2.31(1 H,dd),1.88-1.99(1 H,m),1.28(3 H,d)。Cap-178步驟d
在80℃下向Cap-178步驟c(3.13 g，9.59 mmol)及AIBN(120 mg，0.731 mmol)於40 mL苯中之混合物中添加氫化三正丁基錫(10.24 mL，38.4 mmol)。在回流溫度下攪拌所得混合物20分鐘，隨後冷卻至室溫。用乙醚稀釋混合物，且添加100 mL KF(10 g)，且劇烈攪拌混合物30分鐘。隨後分離兩個層，且用EtOAc(2×)萃取水相。用MgSO4 乾燥有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，用含3% Et3 N之己烷失活，且用含3% Et3 N之己烷沖洗以移除三丁基錫衍生物，隨後用15% EtOAc/Hex溶離)純化，得到呈澄清油狀之Cap-178步驟d(1.9 g)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.98-8.07(2 H,m),7.52-7.58(1 H,m),7.43(2 H,t,J =7.63 Hz),5.08-5.17(1 H,m),4.06(1 H,ddd,J =11.90,4.88,1.53 Hz),3.50-3.59(2 H,m),2.08-2.14(1 H,m),1.99-2.06(1 H,m),1.69-1.80(1 H,m),1.41-1.49(1 H,m),1.24(3 H,d,J =6.10 Hz)。
向Cap-178步驟d(1.9 g，8.63 mmol)於10 mL MeOH中之混合物中添加甲醇鈉(2 mL，4.00 mmol)(2 M於甲醇中)。在室溫下攪拌所得混合物5小時。在真空下移除溶劑。用飽和NH4 Cl溶液中和混合物，且用EtOAc(3×)萃取。用MgSO4 乾燥有機層且濃縮，得到呈澄清油狀之Cap-178步驟e(0.8 g)。該產物不經進一步純化即用於下一步驟中。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 4.01(1 H,ddd,J =11.80,5.02,1.76 Hz),3.73-3.83(1 H,m),3.36-3.46(2 H,m),1.92-2.00(1 H,m),1.88(1 H,m),1.43-1.56(1 H,m),1.23(3 H,d),1.15-1.29(1 H,m)。
將甲苯磺醯氯(2.63 g，13.77 mmol)添加至Cap-178步驟e(0.8 g，6.89 mmol)及吡啶(2.23 mL，27.5 mmol)於100 mL CH2 Cl2 中之溶液中。在室溫下攪拌所得混合物3天。隨後向該反應混合物中添加10 mL水，且在室溫下攪拌混合物1小時。分離兩個層，且用水及1 N鹽酸水溶液洗滌有機相。用MgSO4 乾燥有機相且濃縮，得到呈淡黃色固體狀之Cap-178步驟f(1.75 g)。該產物不經進一步純化即用於下一步驟中。[M+H]+ C13 H19 O4 S之分析計算值為271.10；實驗值為270.90；1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.79(2 H,d,J =8.24 Hz),7.34(2 H,d,J =7.93 Hz),4.53-4.62(1 H,m),3.94(1 H,ddd,J =12.13,4.96,1.83 Hz),3.29-3.41(2 H,m),2.45(3 H,s),1.90-1.97(1 H,m),1.79-1.85(1 H,m),1.64-1.75(1 H,m),1.38-1.48(1 H,m),1.17(3 H,d,J =6.10 Hz)。
Cap-178步驟g
在微波管中置放2-(二苯基亞甲基胺基)乙酸乙酯(1.6 g，5.92 mmol)及Cap-178步驟f(1.6 g，5.92 mmol)。添加10 mL甲苯。密封管且在N2 下逐滴添加LiHMDS(7.1 mL，7.10 mmol)(1 N於甲苯中)。在微波輻射下在100℃下加熱所得暗棕色溶液6小時。隨後向混合物中添加水，且用EtOAc(3×)萃取混合物。用鹽水洗滌合併之有機層，用MgSO4 乾燥且濃縮，得到呈橙色油狀之Cap-3步驟g(3.1 g)之非對映異構混合物。粗混合物不經分離即用於下一步驟中。LC-MS: [M+H]+ C23 H28 NO3 之分析計算值為366.21；實驗值為366.3。
向乙基Cap-178步驟g之非對映異構混合物於20 mL THF中之溶液中添加HCl(30 ml,60.0 mmol)(2 N水溶液)。在室溫下攪拌所得混合物小時。用EtOAc萃取混合物，且濃縮水層，得到呈橙色油狀之Cap-178步驟h之鹽酸鹽(1.9 g)。該鹽不經進一步純化即用於下一步驟中。LC-MS: [M+H]+ C10 H20 NO3 之分析計算值為202.14；實驗值為202.1。
在室溫下攪拌1.9 g Cap-178步驟h(鹽酸鹽)、DiPEA(4.19 mL，24.0 mmol)及氯甲酸甲酯(1.24 mL，16.0 mmol)於20 mL CH2 Cl2 中之溶液1小時。用CH2 Cl2 稀釋混合物且用水洗滌。用Na2 SO4 乾燥有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-20% EtOAc/Hex)純化，得到呈黃色油狀之Cap-178步驟i(1.1 g)。[M+Na]+ C12 H21 NNaO5 之分析計算值為282.13；實驗值為282.14；1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 5.16(1 H,br. s.),4.43-4.58(1 H,m),4.17-4.28(2 H,m),3.89-4.03(1 H,m),3.72-3.78(2 H,m),3.67-3.72(3 H,m),2.07-2.19(1 H,m),1.35-1.77(4 H,m),1.30(3 H,td,J =7.09,2.89 Hz),1.19(3 H,d,J =6.53 Hz)。
向Cap-178步驟i(1.1 g，4.2 mmol)於5 mL THF及2 mL水中之混合物中添加LiOH(6.36 mL，12.7 mmol)(2 N水溶液)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。隨後用1 N HCl水溶液中和混合物，且用EtOAc(3×)萃取。用MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮，得到呈澄清油狀之Cap-178步驟j(0.8g)。LC-MS: [M+H]+ C10 H18 NO5 之分析計算值為232.12；實驗值為232.1；1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 5.20(1 H,d,J =8.28 Hz),4.54(1 H,t,J =8.16 Hz),3.95-4.10(1 H,m),3.66-3.85(5 H,m),2.15-2.29(1 H,m),1.41-1.85(4 H,m),1.23(3 H,dd,J =6.53,1.76 Hz)。
向Cap-178步驟j(240 mg，1.04 mmol)、(S)-1-苯基乙醇(0.141 mL，1.142 mmol)及EDC(219 mg，1.14 mmol)於10 mL CH2 Cl2 中之溶液中添加DMAP(13.95 mg，0.114 mmol)。在室溫下攪拌所得溶液隔夜，且在真空下移除溶劑。將殘餘物溶解於EtOAc中，用水洗滌，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由層析(矽膠，0-15% EtOAc/己烷)純化，得到呈兩個非對映異構物之混合物之Cap-178步驟k。藉由對掌性HPLC(CHIRALPAKAS管柱，21×250 mm，10 μm)用90% 0.1%二乙胺/庚烷-10% EtOH以15 mL/min溶離來分離混合物，得到呈白色固體狀之Cap-178步驟k立體異構物1(第一個溶離)及Cap-178步驟k立體異構物2(第二個溶離)。不指定異構物之立體化學。
Cap-178步驟k立體異構物1(130 mg): LC-MS: [M+Na]+ C18 H25 NNaO5 之分析計算值為358.16；實驗值為358.16；1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.28-7.38(5 H,m),5.94(1 H,q,J =6.71 Hz),5.12(1 H,d,J =9.16 Hz),4.55(1 H,t,J =9.00 Hz),3.72-3.81(1 H,m),3.67(3 H,s),3.60-3.70(2 H,m),1.98-2.08(1 H,m),1.59(3 H,d,J =6.71 Hz),1.38-1.47(2 H,m),1.30(2 H,t,J =5.34 Hz),0.93(3 H,d,J =6.41 Hz)。
Cap-178，立體異構物1向Cap-178步驟k立體異構物1((S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((2S,4R)-2-甲基四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸)(150 mg，0.447 mmol)於10 mL EtOH中之溶液中添加Pd/C(20 mg，0.188 mmol)，且在帕爾振盪器上在40 psi下氫化混合物隔夜。隨後過濾混合物，且濃縮濾液，得到呈黏性白色固體狀之Cap-178，立體異構物1(100 mg)。LC-MS:[M+H]+ C10 H18 NO5 之分析計算值為232.12；實驗值為232.1；1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.14-5.27(1 H,m),4.51(1 H,t,J =8.39 Hz),3.90-4.07(1 H,m),3.60-3.83(5 H,m),2.06-2.27(1 H,m),1.45-1.77(4 H,m),1.21(3 H,d,J =6.41 Hz)。Cap-179(對映異構物-1及對映異構物-2)
將2,6-二甲基-4H-哌喃-4-酮(10 g，81 mmol)溶解於乙醇(125 mL)中，且添加Pd/C(1 g，0.94 mmol)。在室溫下在帕爾振盪器中在H2 (0.325 g，161 mmol)(70 psi)下氫化混合物12小時。經CELITE墊過濾觸媒，且用乙醇洗滌。真空濃縮濾液，且將殘餘物經由BIOTAGE(2%至25% EtOAc/Hex；160 g管柱)純化。分離澄清油狀物之兩個部分。第一溶離份對應於(2R,6S)-2,6-二甲基二氫-2H-哌喃-4(3H)-酮(1.8 g)，而第二溶離份對應於Cap-179步驟a(1.8 g)。(2R,6S)-2,6-二甲基二氫-2H-哌喃-4(3H)-酮資料：1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 3.69(2 H,ddd,J =11.29,5.95,2.29 Hz),2.24-2.36(2 H,m),2.08-2.23(2 H,m),1.18-1.34(6 H,m);13 C NMR(126 MHz,CDCl3 )δppm 206.96(1 C,br. s.),72.69(2 C,s),48.70(2 C,s),21.72(2 C,s)。
Cap-179步驟a資料：1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 3.69-3.78(1 H,m),3.36-3.47(2 H,m),2.10(1 H,br. s.),1.88(2 H,dd,J =12.05,4.73 Hz),1.19(6 H,d,J =6.10 Hz),1.10(2 H,q,J =10.70 Hz);13 C NMR(126 MHz,CDCl3 )δppm 71.44(2 C,s),67.92(1 C,s),42.59(2 C,s),21.71(2 C,s)。Cap-179步驟b
將DEAD(2.311 mL，14.59 mmol)逐滴添加至Cap-179步驟a(0.38 g，2.92 mmol)、4-硝基苯甲酸(2.195 g，13.14 mmol)及Ph3 P(3.83 g，14.59 mmol)於苯(25 mL)中之溶液中。偵測熱析出，且在周圍溫度下攪拌所得琥珀色溶液6小時。在減壓下移除溶劑，且將殘餘物經由BIOTAGE(0%至15% EtOAc/Hex；80 g管柱)純化。分離對應於Cap-179步驟b(0.77 g)之白色固體。LC-MS:[M]+ C14 H17 NO5 之分析計算值為279.11；實驗值為279.12。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 8.27-8.32(2 H,m),8.20-8.24(2 H,m),5.45(1 H,quin,J =2.82 Hz),3.92(2 H,dqd,J =11.90,6.10,6.10,6.10,1.53 Hz),1.91(2H,dd,J =14.80,2.29 Hz),1.57(3 H,dt,J =14.65,3.05 Hz),1.22(6 H,d,J =6.10 Hz)。
將LiOH(0.330 g，13.8 mmol)於水(8 mL)中之溶液添加至Cap-179步驟b(0.77 g，2.76 mmol)於THF(30 mL)中之溶液中，且在周圍溫度下攪拌所得混合物16小時。在減壓下移除THF，且再用水(20 mL)稀釋水層且用EtOAc(3×15 mL)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且在真空下濃縮。回收油狀殘餘物及白色固體。用己烷濕磨混合物，且濾出固體，得到對應於Cap-179步驟c之澄清油狀物(0.34 g)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 4.21(1 H,quin,J =2.82 Hz),3.87-3.95(2 H,m),1.72(1 H,br. s.),1.63(2 H,dd,J =14.34,2.14 Hz),1.39-1.47(2 H,m),1.17(6 H,d,J =6.41 Hz)。
在室溫下，將對甲苯磺醯氯(3.98 g，20.89 mmol)添加至Cap-179步驟c(1.36 g，10.5 mmol)及吡啶(3.38 mL，41.8 mmol)於CH2 Cl2 (150 mL)中之溶液中，且攪拌24小時，隨後濃縮成黃色油狀物。將剩餘殘餘物添加至吡啶(20 mL)及水(30 mL)中，且在周圍溫度下攪拌所得混合物11/2小時。用Et2 O(75 mL)萃取混合物，且用1 N鹽酸水溶液(4×50 mL)澈底洗滌分離之有機層。隨後乾燥(MgSO4 )有機層，過濾且濃縮。分離對應於Cap-179步驟d(2.2 g)之白色固體。LC-MS:[2M+H]+ C28 H41 O8 S2 之分析計算值為569.22；實驗值為569.3。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 7.80(2 H,d,J =8.28 Hz),7.35(2 H,d,J =8.03 Hz),4.89(1 H,quin,J =2.82 Hz),3.77-3.88(2 H,m),2.46(3 H,s),1.77(2 H,dd,J =14.93,2.89 Hz),1.36(2 H,ddd,J =14.31,11.54,2.76 Hz),1.13(6 H,d,J =6.27 Hz)。Cap-179步驟e
在室溫下，在密封微波小瓶中，將LiHMDS(4.30 mL，4.30 mmol)添加至Cap-179步驟d(1.02 g，3.59 mmol)及2-(二苯基亞甲基胺基)乙酸苯甲酯(1.181 g，3.59 mmol)於甲苯(25 mL)中之溶液中，隨後在100℃下在微波輻射下攪拌所得混合物5小時。用水(10 mL)淬滅反應物，用EtOAc萃取，用水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮。經由BIOTAGE層析(0%至6% EtOAc/Hex；80 g管柱)純化殘餘物且分離對應於Cap-179步驟e(1.2 g)之黃色油狀物。[2M+Na]+ C58 H62 N2 NaO6 之分析計算值為905.45；實驗值為905.42。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 7.64-7.70(4 H,m),7.29-7.44(29 H,m),7.06(4 H,dd,J =7.65,1.63 Hz),5.18(2 H,d,J =2.01 Hz),3.89(2 H,d,J =6.53 Hz),3.79-3.87(1 H,m),3.46(5 H,d quind,J =11.26,5.87,5.87,5.87,5.87,1.88 Hz),2.47(2 H,s),2.35-2.46(2 H,m),1.78(1 H,dd,J =14.81,3.01 Hz),1.62-1.65(1 H,m),1.61(2 H,s),1.36-1.43(3 H,m),1.19(7 H,d,J =6.27 Hz),1.14(11 H,dd,J =6.15,2.89 Hz),0.86-0.96(3 H,m)。Cap-179步驟f(對映異構物-1及對映異構物-2)
將Cap-179步驟e(2.08 g，4.71 mmol)溶解於THF(100 mL)，且用2 N HCl(9.42 mL，18.84 mmol)處理。在周圍溫度下攪拌所得澄清溶液4小時，隨後在減壓下移除THF。用己烷(3×20 mL)萃取剩餘水層，且在用H2 O(20 mL)稀釋之後，用1N NaOH鹼化水相至pH=10且用EtOAc(3×10 mL)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且在真空下濃縮。將所得殘餘物溶解於CH2 Cl2 (100 mL)中，且裝入DIEA(2.468 mL，14.13 mmol)及氯甲酸甲酯(0.401 mL，5.18 mmol)。在周圍溫度下攪拌所得溶液2小時。用水(10 mL)淬滅反應混合物，且在減壓下移除有機層。隨後用EtOAc(3×10 mL)萃取水層，且乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且濃縮。經由BIOTAGE(10% EtOAc/Hex；25 g管柱)純化殘餘物。回收對應於Cap-179步驟f(1.05 g)之澄清無色油狀物。LC-MS:[M+H]+ C18 H26 NO5 之分析計算值為336.18；實驗值為336.3。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.32-7.40(5 H,m),5.26(1 H,d,J =8.24 Hz),5.13-5.24(2 H,m),4.36(1 H,dd,J =8.85,4.88 Hz),3.68(3 H,s),3.32-3.46(2 H,m),2.02-2.14(1 H,m),1.52(1 H,d,J =12.82 Hz),1.32(1 H,d,J =12.51 Hz),1.11-1.18(6 H,m),0.89-1.07(2 H,m)。
研發對掌性SFC方法以藉由使用12%甲醇作為改質劑在CHIRALPAKAD-H管柱(30×250 mm，5 μm)(溫度=35℃，壓力=150巴，波長=210 nm，流速=70 mL/min，8 min，溶劑A=CO2 ，溶劑B=MeOH)上分離外消旋混合物。
兩種分離之異構物Cap-179步驟f(對映異構物-1)(第一個溶離)及Cap-179步驟f(對映異構物-2)(第二個溶離)展現與對應的混合物(參見上文)相同之分析資料。
Cap-179(對映異構物-1及對映異構物-2)在帕爾瓶中，將Cap-179步驟f(對映異構物-1)(0.35 g，1.044 mmol)溶解於MeOH(50 mL)中，且裝入Pd/C(0.111 g，1.044 mmol)。隨後，將懸浮液置放於帕爾振盪器中，且用N2 (3×)沖洗混合物，置放於40 psi H2 (2.104 mg，1.044 mmol)下，且在室溫下振盪2小時。經CELITE墊濾出觸媒，且在減壓下移除溶劑，得到對應於Cap-179對映異構物-1之琥珀色固體(0.25 g)。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 12.74(4 H,br. s.),7.35(4 H,d,J =6.10 Hz),3.85(4 H,br. s.),3.53(3 H,s),3.35(2 H,ddd,J =15.95,9.99,6.10 Hz),1.97(1 H,br. s.),1.48(2 H,t,J =13.28 Hz),1.06(6 H,d,J =6.10 Hz),0.82-1.00(2 H,m)類似地製備Cap-179對映異構物-2：1 H NMR(500 MHz,DMSO-d6 )δppm 12.50(1 H,br. s.),7.31(1 H,br. s.),3.84(1 H,t,J =7.32 Hz),3.53(3 H,s),3.29-3.41(2 H,m),1.99(1 H,s),1.48(2 H,t,J =14.34 Hz),1.06(6 H,d,J =6.10 Hz),0.95(1 H,q,J =12.21 Hz),0.87(1 H,q,J =11.80 Hz)。[注意：對映異構物之1 H NMR型態中之微小變化很可能由樣品濃度差異所致。]
Cap-180(外消旋混合物)
在室溫下，將甲苯磺醯氯(4.39 g，23.0 mmol)添加至Cap-179步驟a(1.50 g，11.5 mmol)及吡啶(3.73 mL，46.1 mmol)於CH2 Cl2 (50 mL)中之溶液中，且攪拌2天。用CH2 Cl2 稀釋反應物，依次用水及1 N HCl洗滌。乾燥(MgSO4 )有機層，且濃縮成黃色油狀物，經由BIOTAGE(5%至20% EtOAc/Hex；40 g管柱)純化。分離在真空下固化且對應於Cap-180步驟a之澄清油狀物(2.89 g)。LC-MS:[2M+Na]+ C28 H40 NaO8 S2 之分析計算值為591.21；實驗值為591.3。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.80(2 H,d,J =8.24 Hz),7.35(2 H,d,J =7.93 Hz),4.59(1 H,tt,J =11.37,4.96 Hz),3.36-3.46(2 H,m),2.46(3 H,s),1.91(2 H,dd,J =12.05,5.04 Hz),1.37(2 H,dt,J =12.67,11.52 Hz),1.19(6 H,d,J =6.10 Hz)。
在室溫下，將LiHMDS 1 N(7.09 mL，7.09 mmol)添加至Cap-180步驟a(1.68 g，5.91 mmol)及2-(二苯基亞甲基胺基)乙酸乙酯(1.579 g，5.91 mmol)於甲苯(30 mL)中之溶液中，隨後在85℃下攪拌所得混合物16小時。用水(50 mL)淬滅反應物，用EtOAc萃取，用水洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮。經由BIOTAGE(0%至15% EtOAc/Hex；40 g管柱)純化殘餘物。分離對應於Cap-180步驟b(外消旋混合物；0.64 g)之澄清帶黃色油狀物。LC-MS:[M+H]+ C24 H30 NO3 之分析計算值為380.22；實驗值為380.03。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 7.64-7.70(2 H,m),7.45-7.51(3 H,m),7.38-7.44(1 H,m),7.31-7.37(2 H,m),7.13-7.19(2 H,m),4.39(1 H,d,J =10.54 Hz),4.16-4.26(2 H,m),3.29-3.39(1 H,m),2.93-3.03(1 H,m),2.70(1 H,m,J =9.41,4.14 Hz),1.42-1.49(2 H,m),1.31-1.37(1 H,m),1.29(4 H,t,J =7.15 Hz),1.04(6 H,dd,J =7.78,6.27 Hz)。
將Cap-180步驟b(0.36 g，0.949 mmol)溶解於THF(10 mL)，且用2 N HCl(1.897 mL，3.79 mmol)處理。在周圍溫度下攪拌所得澄清溶液20小時，且在減壓下移除THF。用己烷(3×20 mL)萃取剩餘水層，且在用H2 O(20 mL)稀釋之後，用1 N NaOH鹼化水相至pH=10且用EtOAc(3×10 mL)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且在真空下濃縮。將所得殘餘物溶解於CH2 Cl2 (10.00 mL)中，且裝入DIEA(0.497 mL，2.85 mmol)及氯甲酸甲酯(0.081 mL，1.044 mmol)。在周圍溫度下攪拌所得溶液2小時，且用水(10 mL)淬滅反應混合物，且在減壓下移除有機層。用EtOAc(3×10 mL)萃取水層，且乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且濃縮。回收對應於Cap-180步驟c(0.21 g)之琥珀色油狀物，且其不經進一步純化即使用。LC-MS:[M+H]+ C13 H24 NO5 之分析計算值為273.17；實驗值為274.06。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 5.20(1 H,d,J =8.03 Hz),4.59(1 H,t,J =10.16 Hz),4.11-4.27(3 H,m),3.69-3.82(2 H,m),3.64(3 H,s),1.95-2.07(1 H,m),1.63(1 H,d,J =13.80 Hz),1.41(2 H,dd,J =8.03,4.02 Hz),1.31-1.37(1 H,m),1.26(3 H,t,J =7.15 Hz),1.16(1 H,d,J =6.27 Hz),1.12(6 H,dd,J =6.15,3.89 Hz)。
Cap-180(外消旋混合物)在0℃下，將Cap-180步驟c(0.32 g，1.2 mmol)溶解於THF(10 mL)中，且裝入LiOH(0.056 g，2.342 mmol)於水(3.33 mL)中之溶液。在室溫下攪拌所得溶液2小時。在減壓下移除THF，且用水(15 mL)稀釋剩餘殘餘物且用Et2 O(2×10 mL)洗滌。隨後用1 N HCl酸化水層至pH值為約2，且用EtOAc(3×15 mL)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且在真空下濃縮，得到呈白色泡沫體狀之Cap-180(外消旋混合物)(0.2 g)。LC-MS:[M+H]+ C11 H20 NO5 之分析計算值為246.13；實驗值為246.00。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 5.14(1 H,d,J =9.03 Hz),4.65(1 H,t,J =9.91 Hz),3.63-3.89(5 H,m),1.99-2.13(1 H,m),1.56-1.73(2 H,m),1.48-1.55(1 H,m),1.35-1.48(1 H,m),1.27(1 H,br. s.),1.17(6 H,d,J =6.02 Hz)。Cap-185(對映異構物-1及對映異構物-2)
在黑暗中，在1小時期間，向呋喃(1.075 mL，14.69 mmol)及鋅(1.585 g，24.24 mmol)於1 mL THF中之混合物中逐滴添加1,1,3,3-四溴丙-2-酮(8.23 g，22.03 mmol)及硼酸三乙酯(5.25 mL，30.8 mmol)於4 mL THF中之溶液。在黑暗中，在室溫下攪拌所得混合物17小時。冷卻所得暗棕色混合物至-15℃，且添加6 mL水。將混合物溫至0℃，且在此溫度下攪拌30分鐘。隨後過濾混合物且用乙醚洗滌。用水稀釋濾液，且用乙醚(3×)萃取。經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮，得到暗棕色油狀物。將暗棕色油狀物溶解於6 mL MeOH中，且將溶液逐滴添加至鋅(4.99 g，76 mmol)、氯化銅(I)(0.756 g，7.64 mmol)及氯化銨(5.4 g，101 mmol)於20 mL MeOH之混合物中。在添加期間，將反應溫度維持在15℃以下。隨後在室溫下攪拌混合物20小時，過濾，且用水稀釋濾液，且用CH2 Cl2 (3×)萃取。用MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-14%EtOAc/Hex)純化，得到呈白色固體狀之Cap-185步驟a(1.0 g)，其不久即變黃。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 6.24(2 H,s),5.01(2 H,d,J =4.88 Hz),2.73(2 H,dd,J =16.94,5.04 Hz),2.31(2 H,d,J =16.79 Hz)。
在-78℃下，經100分鐘，向Cap-185步驟a(240 mg，1.933 mmol)於2 mL THF中之溶液中逐滴添加三第二丁基硼氫化鋰(L-selectride)(3.87 mL，3.87 mmol)(1 M於THF中)。在-78℃下攪拌所得混合物1小時，隨後在室溫下攪拌隔夜。隨後冷卻混合物至0℃，依次逐滴添加4 mL 20% NaOH水溶液及2 mL H2 O2 (30%水溶液)。攪拌所得混合物1小時，隨後用6 N HCl(約5 mL)中和。用NaCl使水層飽和，且用CH2 Cl2 (3×)萃取。用MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-40% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-185步驟b(180 mg)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 6.49(2 H,s),4.76(2 H,d,J =4.27 Hz),3.99(1 H,t,J =5.77 Hz),2.29(2 H,ddd,J =15.18,5.65,4.02 Hz),1.70-1.78(2 H,m)。
將甲苯磺醯氯(544 mg，2.85 mmol)添加至Cap-185步驟b(180 mg，1.427 mmol)及吡啶(0.462 mL，5.71 mmol)於5mL CH2 Cl2 中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物2天。用CH2 Cl2 稀釋反應物，且用1 N HCl水溶液洗滌。用CH2 Cl2 (2×)萃取水層。用MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-15% EtOAc/Hex)純化，得到呈白色固體狀之Cap-185步驟c(210 mg)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.73(2 H,d,J =8.24 Hz),7.32(2 H,d,J =8.24 Hz),6.25(2 H,s),4.76(1 H,t,J =5.65 Hz),4.64(2 H,d,J =3.66 Hz),2.44(3 H,s),2.18(2 H,td,J =10.07,5.49 Hz),1.71(2 H,d,J =15.56 Hz)。
在微波管中裝入2-(二苯基亞甲基胺基)乙酸苯甲酯(1.5 g,4.57 mmol)及Cap-185步驟c(1.28 g，4.57 mmol)於5 mL甲苯中之溶液。密封管且在N2 下逐滴添加LiHMDS(5.5 mL，5.5 mmol)(1 N於甲苯中)。在微波中在100℃下加熱所得暗棕色溶液5小時。隨後向混合物中添加水及EtOAc。分離各層，且用EtOAc(2×)萃取水相。濃縮合併之有機層，得到呈外消旋混合物之Cap-185步驟d。粗混合物不經純化或分離即用於下一步驟中。LC-MS:[M+H]+ C29 H28 NO3 之分析計算值為438.21；實驗值為438.4。Cap-185步驟e
向Cap-185步驟d之外消旋混合物於30 mL THF中之溶液中添加HCl(20 mL)(2 N水溶液)。在室溫下攪拌所得混合物2小時。在根據TLC判斷反應已完成之後，分離兩個層。用EtOAc洗滌水層，用飽和NaHCO3 水溶液中和，隨後用EtOAc(3×)萃取。經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮，得到Cap-185步驟e。LC-MS:[M+H]+ C16 H20 NO3 之分析計算值為274.14；實驗值為274.12。
在室溫下攪拌粗Cap-185步驟e、DiPEA(1.24 mL，7.1 mmol)及氯甲酸甲酯(0.55 mL，7.1 mmol)於5 mL CH2 Cl2 中之溶液1小時。隨後用CH2 Cl2 稀釋混合物且用水洗滌。用Na2 SO4 乾燥有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-40% EtOAc/Hex)純化，得到700 mg外消旋混合物。隨後藉由對掌性HPLC(CHIRALPAKAD-H管柱，20×250 mm，5 μm)用88% CO2 -12% EtOH以70 mL/min溶離來分離混合物，得到呈白色固體狀之Cap-1步驟f之對映異構物-1(240 mg)及對映異構物-2(310 mg)。對映異構物-1：LC-MS:[M+H]+ C18 H22 NO5 之分析計算值為332.15；實驗值為332.3。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.30-7.40(5 H,m),6.03-6.16(2 H,m),5.09-5.26(3 H,m),4.65-4.74(2 H,m),4.33(1 H,dd,J =9.16,4.88 Hz),3.67(3 H,s),2.27-2.38(1 H,m),1.61-1.69(1 H,m),1.45-1.56(1 H,m),1.34(1 H,dd,J =13.43,5.19 Hz),1.07(1 H,dd,J =13.12,5.19 Hz)。對映異構物-2：LC-MS:[M+H]+ C18 H22 NO5 之分析計算值為332.15；實驗值為332.06。
Cap-185(對映異構物-1及對映異構物-2)在氮氣氛圍下，向含有Cap-185步驟f(對映異構物-2)(300 mg，0.905 mmol)於10 mL MeOH中之溶液的氫化瓶中添加Pd/C(15 mg，0.141 mmol)。在帕爾振盪器上在40 psi下氫化混合物3小時。隨後過濾混合物，且濃縮濾液，得到呈白色固體狀之Cap-185(對映異構物-2)(200 mg)。LC-MS:[M+H]+ C11 H18 NO5 之分析計算值為244.12；實驗值為244.2。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.33(1 H,br. s.),4.46(2 H,d),4.28(1 H,br. s.),3.68(3 H,s),2.35(1 H,br. s.),1.91-2.03(2 H,m),1.56-1.80(4 H,m),1.36-1.55(2 H,m)。[注意：Cap-185(對映異構物-1)可以類似方式獲得。]
向酯Cap-185步驟f(對映異構物-2)(150 mg，0.453 mmol)於4 mL MeOH中之溶液中添加NaOH(4 mL 1 N水溶液，4.00 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3小時。隨後在真空下移除甲醇，且用1 N HCl溶液中和殘餘物，且用EtOAc(3×)萃取。經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮，得到受一些苯甲醇污染之Cap-186(黏性白色固體；115 mg)。LC-MS:[M+H]+ C11 H16 NO5 之分析計算值為242.10；實驗值為242.1。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 6.10-6.19(2 H,m),5.36(1 H,d,J =8.85 Hz),4.75-4.84(2 H,m),4.28(1 H,dd,J =8.55,4.58 Hz),3.68(3 H,s),2.33-2.45(1 H,m),1.60-1.72(2 H,m),1.30-1.48(2 H,m)。
向Cap-178步驟e(2.2 g，18.94 mmol)、PPh3 (24.84 g，95 mmol)及4-硝基苯甲酸(14.24 g，85 mmol)於30 mL苯中之溶液中逐滴添加DEAD(42.9 mL，95 mmol)。在室溫下攪拌所得淡橙色溶液隔夜。隨後在真空下移除溶劑，且將殘餘物藉由急驟層析(矽膠，0-15% EtOAc/Hex)純化，得到呈白色固體狀之Cap-187步驟a(2.3 g)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 8.27-8.34(2 H,m),8.20-8.26(2 H,m),5.45(1 H,t,J =2.90 Hz),3.83-3.96(3 H,m),1.90-2.03(2 H,m),1.80-1.88(1 H,m),1.61-1.70(1 H,m),1.21(3 H,d,J =6.10 Hz)。
向Cap-187步驟a(2.3 g，8.67 mmol)於10 mL MeOH中之溶液中添加甲醇鈉(2.372 mL，8.67 mmol)(25%甲醇溶液)。在室溫下攪拌所得混合物3小時。添加水，且用EtOAc(5×)萃取混合物。用MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-15% EtOAc/Hex，隨後15-50% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-187步驟b(0.85 g)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 4.19-4.23(1 H,m),3.82-3.91(2 H,m),3.73-3.79(1 H,m),1.79-1.88(1 H,m),1.62-1.68(1 H,m),1.46-1.58(2 H,m),1.14(3 H,d,J =6.10 Hz)。
Cap-187根據關於Cap-178描述之程序，自Cap-187步驟b合成Cap-187之個別對映異構物。LC-MS:[M+H]+ C10 H18 NO5 之分析計算值為232.12；實驗值為232.1。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 5.26(1 H,d,J =7.78 Hz),4.32-4.43(1 H,m),4.07(1 H,dd,J =11.54,3.51 Hz),3.72(3 H,s),3.39-3.50(2H,m),2.08-2.23(1 H,m),1.54-1.68(1 H,m),1.38-1.52(1 H,m),1.11-1.32(5 H,m)。
向2,2-二甲基二氫-2H-哌喃-4(3H)-酮(2 g，15.60 mmol)於50 mL MeOH中之溶液中緩慢添加氫化硼鈉(0.649 g，17.16 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物3小時。隨後向混合物中添加1 N HCl水溶液直至其變至酸性pH值範圍內，隨後用EtOAc(3×)萃取。經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮，得到呈澄清油狀之Cap-188步驟a(1.9 g)。該產物不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 3.91-4.02(1 H,m),3.79-3.86(1 H,m),3.63(1 H,td,J =12.05,2.51 Hz),1.82-1.93(2 H,m),1.40-1.53(1 H,m),1.29-1.38(1 H,m),1.27(3 H,s),1.20(3 H,s)。
將對甲苯磺醯氯(5.56 g，29.2 mmol)添加至Cap-188步驟a(1.9 g，14.59 mmol)及吡啶(4.72 mL，58.4 mmol)於100 mL CH2 Cl2 中之溶液中。在室溫下攪拌所得混合物3天。向反應物中添加10 mL水，且再在室溫下攪拌混合物1小時。分離兩個層，且用水及1 N鹽酸水溶液洗滌有機相。經MgSO4 乾燥有機相且濃縮，得到呈淡黃色固體狀之兩個對映異構物之混合物。隨後藉由對掌性HPLC(CHIRALPAKAD管柱，21×250 mm，10 μm)用92% 0.1%二乙胺/庚烷-8% EtOH以15 mL/min溶離來分離混合物，得到Cap-188.1步驟b(1.0 g)及Cap-188.2步驟b(1.0 g)。不指定兩個對映異構物之絕對立體化學。Cap-188.1步驟b：LC-MS:[2M+Na]+ C28 H40 NaO8 S2 之分析計算值為591.21；實驗值為591.3。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.79(2 H,d,J =8.24 Hz),7.34(2 H,d,J =8.24 Hz),4.72-4.81(1 H,m),3.78(1 H,dt,J =12.44,4.16 Hz),3.53-3.61(1 H,m),2.45(3 H,s),1.75-1.86(2 H,m),1.61-1.71(1 H,m),1.52-1.60(1 H,m),1.22(3 H,s),1.14(3 H,s)。Cap-188.2步驟b：LC-MS:[2M+Na]+ C28 H40 NaO8 S2 之分析計算值為591.21；實驗值為591.3；Cap-188可根據關於Cap-178之製備描述之程序，自Cap-188.1步驟b及Cap-188.2步驟b合成Cap-188之四個對映異構物。Cap-188(立體異構物-1)：LC-MS:[M+Na]+ C11 H19 NNaO5 之分析計算值為268.12；實驗值為268.23。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.32(1 H,d,J =8.55 Hz),4.26-4.35(1 H,m),3.57-3.82(5 H,m),2.11-2.34(1 H,m),1.25-1.58(4 H,m),1.21(6 H,d,J =6.10 Hz)。Cap-188(立體異構物-2)：LC-MS:[M+H]+ C11 H20 NO5 之分析計算值為246.13；實驗值為246.1。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.25(1 H,d,J =8.55 Hz),4.33(1 H,dd,J =8.39,5.04 Hz),3.80(1 H,dd,J =11.90,3.97 Hz),3.62-3.76(4 H,m),2.20-2.32(1 H,m),1.52-1.63(1 H,m),1.27-1.49(3 H,m),1.22(6 H,d,J =14.04 Hz)。
向溴化苯基鎂(113 mL，340 mmol)(3 M於乙醚中)於100 mL乙醚中之溶液中逐滴添加外-2,3-環氧基降硼烷(25 g，227 mmol)於50 mL乙醚中之溶液。最初放熱之後，加熱混合物至回流隔夜。隨後冷卻反應物至室溫，且小心地用水(約10 mL)淬滅。用乙醚稀釋混合物，且用3 N HCl水溶液(約160 mL)洗滌。用乙醚(2×)萃取水層，且經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-18% EtOAc/Hex)純化，得到Cap-189步驟a(11 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 6.03-6.11(2 H,m),3.76(1 H,d,J =11.29 Hz),2.72-2.81(2 H,m),1.98(1 H,d,J =11.29 Hz),1.67-1.76(2 H,m),0.90-0.97(2 H,m)。
在-78℃下，向草醯氯(59.9 mL，120 mmol)於200 mL CH2 Cl2 中之溶液中添加DMSO(17.01 mL，240 mmol)於100 mL CH2 Cl2 中之溶液。攪拌混合物10分鐘，且依次添加Cap-189步驟a(11 g，100 mmol)於150 mL CH2 Cl2 中之溶液及Et3 N(72.4 mL，519 mmol)於30 mL CH2 Cl2 中之溶液。在-78℃下攪拌混合物30分鐘，隨後溫至室溫。添加水(150 mL)且在室溫下攪拌混合物30分鐘。隨後分離兩個層，且用CH2 Cl2 (2×)萃取水層。合併有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-5% EtOAc/Hex)純化，得到呈淡黃色油狀之Cap-189步驟b(5.3 g)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 6.50-6.55(2 H,m),2.78-2.84(2 H,m),1.92-1.99(2 H,m),1.17-1.23(2 H,m)。
將Cap-189步驟b(5.3 g，49.0 mmol)、單水合對甲苯磺酸(1.492 g，7.84 mmol)及乙二醇(4.10 mL，73.5 mmol)於100 mL苯中之混合物回流4小時，隨後在室溫下攪拌隔夜。將反應物分配在Et2 O與飽和NaHCO3 水溶液之間，且分離兩個層。用鹽水洗滌有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-6% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-189步驟c(5.2 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 6.20(2 H,t,J =2.13 Hz),3.90-3.97(2 H,m),3.81-3.89(2 H,m),2.54(2 H,m),1.89-1.99(2 H,m),0.95-1.03(2 H,m)。
冷卻Cap-189步驟c(5.2 g，34.2 mmol)於60 mL MeOH及50 mL CH2 Cl2 中之溶液至-78℃，且用臭氧氣體處理直至明顯的淡藍色。隨後用N2 向反應物鼓泡以移除過量臭氧氣體(藍色消失)且向反應物中添加氫化硼鈉(1.939 g，51.3 mmol)。隨後將反應物溫至0℃。向混合物中添加丙酮以淬滅過量氫化硼鈉。濃縮混合物，且將殘餘物藉由急驟層析(矽膠，100% EtOAc)純化，得到呈澄清油狀之Cap-189步驟d(5.0 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 3.99-4.09(4 H,m),3.68(4 H,m),2.17-2.29(2 H,m),1.92-2.10(2 H,m),1.77-1.88(2 H,m),1.57-1.70(2 H,m)。
向Cap-189步驟d(1 g，5.31 mmol)於20 mL CH2 Cl2 中之溶液中添加氧化銀(3.8 g)、p-Ts-Cl(1.215 g，6.38 mmol)及KI(0.176 g，1.063 mmol)。在室溫下攪拌所得溶液3天。隨後過濾混合物且濃縮濾液。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，60% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-189步驟e(0.79 g)。LC-MS: [M+Na]+ C16 H22 NaO6 S之分析計算值為365.10；實驗值為365.22。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 7.80(2 H,d,J =8.28 Hz),7.36(2 H,d,J =8.03 Hz),4.11-4.17(1 H,m),3.85-4.06(5 H,m),3.64-3.71(1 H,m),3.55-3.63(1 H,m),2.47(3 H,s),2.32-2.43(1 H,m),2.15-2.27(1 H,m),1.70-1.89(2 H,m),1.52-1.66(1 H,m),1.35-1.47(1 H,m)。
向Cap-189步驟e(2.2 g，6.43 mmol)於40 mL MeOH中之溶液中添加碳酸鉀(1.776 g，12.85 mmol)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。隨後用水及EtOAc稀釋混合物。分離兩個層。用EtOAc(2×)萃取水層。用鹽水洗滌合併之有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-15% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-189步驟f(0.89 g，5.23 mmol，81%)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 3.89-4.02(6 H,m),3.58(2 H,dd,J =10.79,2.51 Hz),1.69-1.89(6 H,m)。
向Cap-189步驟f(890 mg，5.23 mmol)於15 mL THF中之溶液中添加HCl(15 mL，45.0 mmol)(3 M水溶液)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。隨後用乙醚稀釋混合物，且分離兩個層。用乙醚(2×)萃取水相，且經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮，得到Cap-189步驟g(0.95 g，含有一些殘餘溶劑)。該產物不經純化即用於下一步驟中。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 3.95-4.00(2 H,m),3.85(2 H,d,J =10.68 Hz),2.21-2.28(2 H,m),1.99-2.04(2 H,m),1.90-1.96(2 H,m)。
在-20℃下，向(+/-)-苯甲氧基羰基-α-膦醯基甘胺酸三甲酯(1733 mg，5.23 mmol)於6 mL THF中之溶液中添加1,1,3,3-四甲基胍(0.723 mL，5.75 mmol)。在-20℃下攪拌所得淡黃色混合物1小時，且添加Cap-189步驟g(660 mg，5.23 mmol)於3 mL THF中之溶液，且隨後在室溫下攪拌混合物3天。隨後用EtOAc稀釋反應混合物，用0.1 N HCl水溶液洗滌。用EtOAc(2×)萃取水層，且經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，0-4%EtOAc/CH2 Cl2 )純化，得到960 mg外消旋混合物。藉由對掌性HPLC(CHIRALPAKAD管柱，21×250 mm，10 um)用90% 0.1%二乙胺/庚烷-10% EtOH以15 mL/min溶離來分離混合物，得到呈白色固體狀之Cap-189步驟h(對映異構物-1；300 mg)及Cap-189步驟h(對映異構物-2；310 mg)。Cap-189步驟h(對映異構物-1)：LC-MS:[M+H]+ C18 H22 NO5 之分析計算值為332.15；實驗值為332.2。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.29-7.41(5 H,m),6.00(1 H,br. s.),5.13(2 H,s),3.63-3.87(8 H,m),2.84(1 H,br. s.),1.84-2.02(2 H,m),1.63-1.84(2 H,m)。Cap-189步驟h(對映異構物-2)：LC-MS: [M+H]+ C18 H22 NO5 之分析計算值為332.15；實驗值為332.2。
在500 mL氫化瓶中，將N2 鼓泡經由Cap-189步驟h(對映異構物-2；290 mg，0.875 mmol)於10 mL MeOH中之溶液30分鐘。向該溶液中添加(S,S)-Me-BPE-Rh(9.74 mg，0.018 mmol)，且隨後在60 psi下使混合物氫化6天。濃縮混合物，且對掌性分析HPLC(CHIRALPAKOJ管柱)指示，存在少量剩餘起始材料及一種主要產物。隨後藉由對掌性HPLC(CHIRALPAKOJ管柱，21×250 mm，10 um)用70% 0.1%二乙胺/庚烷-30% EtOH以15 mL/min溶離來分離殘餘物，得到呈澄清油狀之Cap-189步驟i(150 mg)。LC-MS: [M+H]+ C18 H24 NO5 之分析計算值為334.17；實驗值為334.39。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 7.28-7.41(5 H,m),5.12-5.18(1 H,m),5.09(2 H,s),4.05(1 H,t,J =10.07 Hz),3.75(3 H,s),3.60-3.72(2 H,m),3.41-3.50(2 H,m),2.10(1 H,br. s.),1.72-1.99(6 H,m)。
在氮氣氛圍下，向氫化瓶中之Cap-189步驟i(150 mg，0.450 mmol)於10 mL MeOH中之溶液中添加二碳酸二甲酯(0.072 mL，0.675 mmol)及10% Pd/C(23.94 mg，0.022 mmol)。隨後在帕爾振盪器上在45 psi下使混合物氫化隔夜。過濾混合物，且濃縮濾液，得到呈澄清油狀之Cap-189步驟j(110 mg)。LC-MS:[M+H]+ C12 H20 NO5 之分析計算值為258.13；實驗值為258.19。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.08(1 H,d,J =9.16 Hz),4.03(1 H,t,J =10.07 Hz),3.75(3 H,s),3.60-3.72(5 H,m),3.46(2 H,t,J =10.38 Hz),2.11(1 H,br. s.),1.72-1.99(6 H,m)。Cap-189向Cap-189步驟j(110 mg，0.428 mmol)於2 mL THF及1 mL水中之混合物中添加LiOH(0.641 mL，1.283 mmol)(2 N水溶液)。在室溫下攪拌所得混合物隔夜。用1 N HCl水溶液中和混合物，且用EtOAc(3×)萃取。經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮，得到呈白色固體狀之Cap-189(100 mg)。LC-MS:[M+Na]+ C11 H17 NNaO5 之分析計算值為266.10；實驗值為266.21。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.10(1 H,d,J =9.16 Hz),4.02(1 H,t,J =10.07 Hz),3.62-3.78(5 H,m),3.49(2 H,d,J =10.68 Hz),2.07-2.22(2 H,m),1.72-1.98(6 H,m)。
在0℃下，向環庚-3-烯醇(2.93 g，34.8 mmol)及咪唑(5.22 g，77 mmol)於30 mL DMF中之混合物中添加第三丁基二甲基氯矽烷(6.30 g，41.8 mmol)。在室溫下攪拌所得無色混合物隔夜。隨後將己烷及水添加至混合物中，且分離兩個層。用EtOAc(2×)萃取水層，且用鹽水洗滌合併之有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，2% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-190步驟a(6.3 g)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.65(2 H,s),4.49-4.56(1 H,m),2.56(2 H,dd,J =15.26,7.02 Hz),2.27(2 H,dd,J =15.26,3.36 Hz),0.88(9 H,s),0.06(6 H,s)。
在0℃下，分5份向Cap-190步驟a(2.3 g，11.59 mmol)於40 mL CH2 Cl2 中之溶液中添加m-CPBA(5.60 g，16.23 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。隨後將己烷及水添加至混合物中，且分離兩個層。用50 mL 10% NaHSO3 水溶液及鹽水洗滌有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，3%-6% EtOAc/Hex)純化，得到呈澄清油狀之Cap-190步驟b(1.42 g)及其反式非對映異構物(0.53 g)。Cap-190步驟b(順式 ):1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 4.39-4.47(1 H,m),3.47(2 H,s),2.01-2.10(2 H,m),1.93-2.00(2 H,m),0.88(9 H,s),0.04(6 H,s)。Cap-190步驟b(反式 ):1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 4.04-4.14(1 H,m),3.47(2 H,s),2.41(2 H,dd,J =14.05,7.28 Hz),1.61(2 H,dd,J =14.18,6.90 Hz),0.87(9 H,s),0.03(6 H,s)。
在0℃下，向(S)-1,2'-亞甲基二吡咯啶(0.831 g，5.39 mmol)於15 mL苯中之溶液中逐滴添加正丁基鋰(4.90 mL，4.90 mmol)(1 M於己烷中)。溶液變成亮黃色。在0℃下攪拌混合物30分鐘，且隨後添加Cap-190步驟b(順式異構物；0.7 g，3.27 mmol)於10 mL苯中之溶液，且在0℃下攪拌所得混合物3小時。向混合物中添加EtOAc及飽和NH4 Cl水溶液，且分離兩個層。用水及鹽水洗滌有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，15%EtOAc/Hex)純化，得到呈淡黃色油狀之Cap-190步驟c(400 mg)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.84-5.98(2 H,m),4.53-4.69(2 H,m),2.63-2.73(1 H,m),1.51(1 H,dt,J =13.73,4.43 Hz),0.89(9 H,s),0.08(6 H,s)。
在0℃下，向Cap-190步驟c(400 mg，1.866 mmol)、MeI(1.866 mL，3.73 mmol)(2 M於第三丁基甲基醚)於5 mL THF中之溶液中添加NaH(112 mg，2.80 mmol)(60%於礦物油中)。將所得混合物溫至室溫且在室溫下攪拌隔夜。隨後用水淬滅反應，且用EtOAc(3×)萃取。用鹽水洗滌合併之有機層，經MgSO4 乾燥且濃縮。將粗產物藉由急驟層析(矽膠，5% EtOAc/Hex)純化，得到呈淡黃色油狀之Cap-190步驟d(370 mg)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.92-5.96(1 H,m),5.87-5.91(1 H,m),4.64-4.69(1 H,m),4.23-4.28(1 H,m),3.32(3 H,s),2.62-2.69(1 H,m),1.54(1 H,dt,J =13.12,5.49 Hz),0.89(9 H,s),0.07(5 H,d,J =1.83 Hz)。
向氫化瓶中之Cap-190步驟d(400 mg，1.751 mmol)於10mL EtOAc中之溶液中添加氧化鉑(IV)(50 mg，0.220 mmol)。在帕爾振盪器上在50 psi下使所得混合物氫化2小時。隨後經CELITE過濾混合物，且濃縮濾液，得到呈澄清油狀之Cap-190步驟e(400 mg)。LC-MS:[M+H]+ C12 H27 O2 Si之分析計算值為231.18；實驗值為231.3。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 4.10-4.17(1 H,m),3.65-3.74(1 H,m),3.27(3 H,s),1.43-1.80(6 H,m),0.90(9 H,s),0.09(6 H,s)。
向Cap-190步驟e(400 mg，1.736 mmol)於5 mL THF中之溶液中添加TBAF(3.65 mL，3.65 mmol)(1 N於THF中)。在數分鐘之後，混合物變成棕色，且在室溫下攪拌隔夜。在真空下移除揮發性組分，且將殘餘物藉由急驟層析(矽膠，0-25% EtOAc/Hex)純化，得到呈淡黃色油狀之Cap-190步驟f(105 mg)。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 4.25(1 H,br. s.),3.84-3.92(1 H,m),3.29(3 H,s),1.67-2.02(6 H,m)。
Cap-190隨後根據關於Cap-182描述之程序,自Cap-190步驟f合成Cap-190。LC-MS:[M+Na]+ C10 H17 NNaO5 之分析計算值為254.10；實驗值為254.3。1 H NMR(500 MHz,CDCl3 )δppm 5.25(1 H,d,J =8.55 Hz),4.27-4.41(1 H,m),3.81-3.90(1 H,m),3.69(3 H,s),3.26(3 H,s),2.46-2.58(1 H,m),1.76-1.99(3 H,m),1.64-1.73(1 H,m),1.40-1.58(1 H,m),1.22-1.38(1 H,m)。
在-78℃下在氮氣下，向二異丙基胺(3 ml，21.05 mmol)於THF(3 mL)中之溶液中添加正丁基鋰(2.5 M於己烷中；8.5 ml，21.25 mmol)。在-78℃下攪拌反應物10分鐘，隨後升至0℃後持續25分鐘。再冷卻反應物至-78℃，添加四氫-2H-哌喃-4-甲酸甲酯(3 g，20.81 mmol)於THF(3 mL)中之溶液。在-78℃下攪拌反應物15分鐘，隨後升至0℃後持續30分鐘。冷卻反應物至-78℃，添加甲基碘(1.301 ml，20.81 mmol)。添加之後，移除冷浴，且將反應物緩慢溫至約25℃，且攪拌22小時。添加乙酸乙酯及HCl水溶液(0.1 N)，且分離有機層，且用鹽水洗滌且乾燥(MgSO4 )，過濾，且真空濃縮。將殘餘物負載於用10%乙酸乙酯/己烷溶離之湯姆森矽膠柱體上，得到淡黃色油狀物(2.83 g)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 3.73-3.66(m,2H),3.66(s,3H),3.40-3.30(m,2H),1.95-1.93(dm,1H),1.92-1.90(dm,1H),1.43(ddd,J=13.74,9.72,3.89,2H),1.18(s,3H)。
在-78℃下在氮氣下，向Cap-191步驟a(3 g，18.96 mmol)於甲苯(190 mL)中之溶液中逐滴添加氫化二異丁基鋁(1.5 M於甲苯中；26.5 ml，39.8 mmol)。在-78℃下繼續攪拌反應物1.5小時，且移除浴且攪拌18小時。用MeOH(20 mL)淬滅反應。添加HCl(1 M，150 mL)，且用EtOAc(4×40 mL)萃取混合物。用鹽水洗滌合併之有機相，乾燥(MgSO4 )，過濾且真空濃縮。將殘餘物藉由急驟層析(矽膠，40%乙酸乙酯/己烷)純化，得到無色油狀物(1.36 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 3.77(dt,J=11.73,4.55,2H),3.69-3.60(m,2H),3.42(s,2H),1.71-1.40(bs,1H)1.59(ddd,J=13.74,9.72,4.39,2H),1.35-1.31(m,1H),1.31-1.27(m,1H),1.06(s,3H)。
在-78℃下在氮氣下，向DMSO(5.9 ml,83 mmol)於CH2 Cl2 (85 mL)中之溶液中添加草醯氯(3.8 ml，43.4 mmol)且攪拌40分鐘。隨後添加Cap-191步驟b(4.25 g，32.6 mmol)於CH2 Cl2 (42.5 mL)中之溶液。在-78℃下在氮氣下，繼續攪拌反應物2小時。用冷20% K2 HPO4 (水溶液)(10 mL)及水淬滅反應物。在約25℃下攪拌混合物15分鐘，用乙醚(50 mL)稀釋且分離各層。用乙醚(2×50 mL)萃取水層。用鹽水洗滌合併之有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且真空濃縮。將殘餘物溶解於CH2 Cl2 (4 mL)中，且用急驟層析(矽膠，用CH2 Cl2 溶離)純化，得到無色油狀物(2.1 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.49(s. 1H),3.80(dt,J=11.98,4.67,2H),3.53(ddd,J=12.05,9.41,2.89,2H),1.98(ddd,J=4.71,3.20,1.38,1H),1.94(ddd,J=4.71,3.20,1.38,1H),1.53(ddd,J=13.87,9.60,4.14,2H),1.12(s,3H)。
在氮氣下在約25℃下，向Cap 191c(2.5 g，19.51 mmol)於CHCl3 (20 mL)中之溶液中添加(R)-2-胺基-2-苯基乙醇(2.94 g，21.46 mmol)，且攪拌5小時。冷卻反應物至0℃，逐滴添加三甲基矽烷基氰化物(3.8 ml，30.4 mmol)。移除冷浴，且在約25℃下在氮氣下，攪拌反應物15.5小時。用3N HCl(20 mL)及水(20 mL)處理反應物，且用CHCl3 (3×50 mL)萃取產物。乾燥(NaSO4 )合併之有機層，過濾且真空濃縮。將殘餘物藉由急驟層析(矽膠，40%乙酸乙酯/己烷)純化，得到兩個非對映異構物：呈無色油狀之Cap-191步驟d1(非對映異構物1)，其在靜置後固化成白色固體(3 g)。
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 7.42-7.26(m,5H),5.21(t,J=5.77,1H),3.87(dd,J=8.53,4.52,1H),3.61-3.53(m,1H),3.53-3.37(m,5H),3.10(d,J=13.05,1H),2.65(d,J=13.05,1H),1.64-1.55(m,1H),1.55-1.46(m,1H),1.46-1.39(m,1H),1.31-1.23(m,1H),1.11(s,3H)。LC-MS:[M+H]+ C16 H23 N2 O2 之分析計算值為275.18；實驗值為275.20。呈淡黃色油狀之Cap-191步驟d2(非對映異構物2)(0.5 g)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 7.44-7.21(m,5H),4.82(t,J=5.40,1H),3.82-3.73(m,1H),3.73-3.61(m,3H),3.61-3.37(m,5H),2.71(dd,J=9.29,4.77,1H),1.72-1.55(m,2H),1.48-1.37(m,1H),1.35-1.25(m,1H),1.10(s,3H)。LC-MS:[M+H]+ C16 H23 N2 O2 之分析計算值為275.18；實驗值為275.20。
在0℃下在氮氣下，向Cap-191步驟d2(非對映異構物2)(0.4472 g，1.630 mmol)於CH2 Cl2 (11 mL)及MeOH(5.50 mL)中之溶液中添加四乙酸鉛(1.445 g，3.26 mmol)。攪拌反應物1.5小時，移除冷浴且繼續攪拌20小時。用磷酸鹽緩衝液(pH=7；6 mL)處理反應物且攪拌45分鐘。以CELITE過濾反應物，用CH2 Cl2 洗滌，且分離各層。用CH2 Cl2 (3×25 mL)萃取水層，且用鹽水洗滌合併之有機層，乾燥(MgSO4 )，過濾且真空濃縮。將殘餘物藉由急驟層析(矽膠，15%乙酸乙酯/己烷)純化，得到無色油狀之亞胺中間物(181.2 mg)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 8.55(d,J=1.00,1H),7.89-7.81(m,2H),7.61-7.46(m,3H),4.80(d,J=1.00,1H),3.74(tt,J=11.80,4.02,2H),3.62-3.46(m,2H),1.79-1.62(m,2H),1.46-1.30(m,2H),1.15(s,3H)。
將亞胺中間物溶解於6 N HCl(10 mL)且在90℃下加熱10天。自熱移除反應物，冷卻至室溫，且用乙酸乙酯(3×25 mL)萃取。真空濃縮水層，得到灰白色固體。將固體溶解於MeOH中，且負載於預處理MCX(6 g)柱體，用MeOH洗滌，接著用2 N NH3 /MeOH溶液溶離且真空濃縮，得到灰白色固體(79.8 mg)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 14.33-13.51(bs,1H),8.30(bs,3H),3.82-3.75(m,1H),3.70(dt,J=11.80,4.02,2H),3.58-3.43(m,2H),1.76-1.60(m,2H),1.47-1.36(m,1H),1.36-1.27(m,1H),1.08(s,3H)。LC-MS:[M+H]+ C8 H16 NO3 之分析計算值為174.11；實驗值為174.19。
Cap-191(對映異構物-1)在0℃下，向Cap-191步驟e(0.0669 g，0.386 mmol)及碳酸鈉(0.020 g，0.193 mmol)於氫氧化鈉(1 M水溶液，0.4 ml，0.40 mmol)中之溶液中逐滴添加氯甲酸甲酯(0.035 ml，0.453 mmol)。自冷浴移除反應物，且在約25℃下攪拌3小時。用乙醚(3×20 mL)洗滌反應物。用12 N HCl酸化水層(pH值為約1-2)，且用乙酸乙酯(2×20 mL)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾，且真空濃縮，得到呈無色膜狀之Cap-191(66.8 mg)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δppm 13.10-12.37(bs,1H),7.37(d,J=9.04,1H),4.02(d,J=9.29,1H),3.72-3.57(m,2H),3.56(s,3H),3.54-3.44(m,2H),1.65(ddd,J=13.61,9.72,4.27,1H),1.53(ddd,J=13.68,9.66,4.27,1H),1.41-1.31(m,1H),1.31-1.22(m,1H),1.00(s,3H)。LC-MS:[M+Na]+ C10 H17 NO5 Na之分析計算值為254.10；實驗值為254.11。
根據對於對映異構物Cap-191之製備描述之程序，自Cap-191步驟d1製備Cap-192(對映異構物-2)。
向2-(苯甲氧基羰基胺基)-2-(二甲氧基磷醯基)乙酸甲酯(1.45 g，4.2 mmol)於DCM中之溶液中添加DBU(0.70 ml，4.7 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘，接著添加1,3-二甲氧基丙-2-酮(0.5 g，4.2 mmol)於DCM中之溶液。在室溫下攪拌反應混合物18小時。將反應混合物裝入80 g矽膠柱體中，用含0-70% EtOAc之己烷之18分鐘梯度溶離，得到呈稠油狀之Cap-193步驟a(0.8 g)。1 H NMR(400 MHz,MeOD) ppm 7.23-7.43(5 H,m),4.99-5.18(2 H,m),4.16(2 H,s),4.06(2 H,s),3.66-3.78(3 H,s),3.26(3 H,s),3.23(3 H,s)。LC-MS:[M+Na]+ C16 H21 NNaO6 之分析計算值為346.14；實驗值為346.12。
在55 psi H2 下攪拌酯Cap-193步驟a(0.5 g)及四氟硼酸(+)-1,2-雙((2S,5S)-2,5-二乙基磷雜環戊基)苯(環辛二烯)銠(I)(0.1 g)於MeOH中之反應混合物18小時。濃縮反應混合物至乾燥。將殘餘物裝入25 g矽膠柱體中，且用含0-80%EtOAc之己烷之18分鐘梯度溶離，得到呈澄清油狀之Cap-193步驟b(0.49 g)。LC-MS:[M+Na]+ C16 H23 NNaO6 之分析計算值為348.15；實驗值為348.19。
在H2 下在室溫下，攪拌Cap 193步驟b(0.16 g)、二碳酸二甲酯(0.13 g)及10% Pd/C(0.026 g)於EtOAc中之反應混合物2小時。過濾反應混合物且濃縮，得到胺基甲酸甲酯Cap 193步驟c。LC-MS:[M+Na]+ C10 H19 NNaO6 之分析計算值為272.12；實驗值為272.07。Cap 193向酯Cap 193步驟c於THF(1 mL)及MeOH(0.25 mL)中之溶液中添加1 N NaOH(1 mL)。在室溫下攪拌反應混合物2小時。濃縮反應混合物，且用EtOAc及1 N HCl稀釋。用EtOAc萃取水相，且用飽和NaCl洗滌合併之有機相，經無水Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，得到Cap-193(0.082 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 ) 5.99(1 H,d,J =8.56 Hz),4.57(1 H,dd,J =8.56,3.27 Hz),3.67(3 H,s),3.49(2 H,d,J =4.28 Hz),3.45-3.44(2 H,m),3.26-3.35(6 H,m)。LC-MS:[M+Na]+ C9 H17 NNaO6 之分析計算值為258.11；實驗值為258.13。
將哌啶(1.0 mL，10 mmol)添加至(S)-2-(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基胺基)-4-甲氧基丁酸(0.355 g，1 mmol)於DMF(3 mL)中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物3小時。移除揮發物，且將殘餘物分配在飽和NaHCO3 (水溶液)(5 mL)與EtOAc(5 mL)之間。再用EtOAc及Et2 O洗滌水層。依次向水溶液中添加Na2 CO3 (212 mg，2.0 mmol)及氯甲酸甲酯(0.16 mL，2.0 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物16小時。用1 N HCl(水溶液)酸化反應混合物直至pH<7，隨後用EtOAc(2×10 mL)萃取。乾燥(MgSO4 )合併之有機層，過濾且濃縮。將殘餘物藉由急驟二氧化矽層析(EtOAc/己烷，梯度為20%至70%)純化，得到呈黏性無色油狀之(S)-4-甲氧基-2-(甲氧基羰基胺基)丁酸(Cap-194)(91.5 mg)。LC-MS滯留時間=0.61 min；m/z 214[M+Na]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 7.41(br. s.,1 H),5.74-6.02(m,1 H),4.32-4.56(m,1 H),3.70(s,3 H),3.54(t,J =5.0 Hz,2 H),3.34(s,3 H),1.99-2.23(m,2 H)。
實例部分
用與Waters Micromass ZQ MS系統耦接之Shimadzu LC系統(條件1)或與Waters PDA UV-Vis偵測及Waters ZQ MS耦接之Waters Acquity HPLC(條件2)進行低解析度質量分析。藉由採用以下條件得出滯留時間(Rt )，且應注意，滯留時間在儀器之間可略有變化：
條件1a
管柱=Phenomenex-Luna 4.6×30 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件1b
管柱=Waters Acquity BEH C18；1.7 μm；150×2.1
mm ID；(35℃)
保持10%B　0-1 min
10-50%B　0-25 min
50-98%B　25-33 min
保持98%B　32-35 min
98-10%B　35.0-35.5 min
保持10%B　35.5-40 min
流速=0.35 ml/min
波長=254 nm
溶劑A=含0.05% TFA之水
溶劑B=含0.05% TFA之CH3 CN
條件1c
管柱=Waters Acquity BEH C18；1.7 μm；
150×2.1 mm ID；(35℃)
保持10%B　0-1min
10-60%B　1-4 min
60-98%B　4-21 min
保持98%B　21-21.5 min
98-10%B　21.5-22 min
保持10%B　22-25 min
流速=0.35 ml/min
波長=315 nm
溶劑A=含0.05% TFA之水
溶劑B=含0.05% TFA之CH3 CN
條件2a
管柱=Waters Sunfire C18，4.6×150 mm，3.5 μm
起始%B=10
最終%B=50
梯度時間=20 min
終止時間=25至40 min不等
流速=1 mL/min
波長=220及254 nm
溶劑A=含0.1% TFA之5% CH3 CN/95% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之95% CH3 CN/5% H2 O
條件2b
管柱=Waters Xbridge phenyl，4.6×150 mm，3 μm
起始%B=10
最終%B=50
梯度時間=20min
終止時間=25至40 min不等
流速=1 mL/min
波長=220及254 nm
溶劑A=含0.1% TFA之5% CH3 CN/95% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之95% CH3 CN/5% H2 O
條件3
管柱=Phenomenex Luna C18(2)，3 u，150×4.6 mm
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=10 min
流速=1 mL/min
波長=220及256 nm
溶劑A=H2 O/CH3 CN(95:5)+0.05% TFA
溶劑B=H2 O/CH3 CN(5:95)+0.05% TFA
條件OL1
管柱=Phenomenex-Luna 3.0×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=4 min
終止時間=5 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件OL2
管柱=Phenomenex-Luna 50×2 mm 3 u
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=4 min
終止時間=5 min
流速=0.8 mL/min
溫箱溫度=40℃
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%乙腈/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%乙腈/10% H2 O
條件OL3
管柱=Waters Acquity BEH C18；1.7 μm；150×2.1
mm ID；(35℃)
保持10%B　0-1 min
10-60%B　1-4 min
60-98%B　4-21 min
保持98%B　21-21.5 min
98-10%B　21.5-22 min
保持10%B　22-25 min
流速=0.35 ml/min
波長=315 nm
溶劑A=含0.05% TFA之水
溶劑B=含0.05% TFA之CH3 CN
條件OL4a
管柱=Waters Sunfire C18，4.6×150 mm，3.5 μm
起始%B=10
最終%B=100
梯度時間=15 min
終止時間=18 min
流速=1 mL/min
波長=220及254 nm
溶劑A=含0.1% TFA之5% CH3 CN/95% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之95% CH3 CN/5% H2 O
條件OL4b
管柱=Waters Xbridge phenyl，4.6×150 mm，3 μm
起始%B=10
最終%B=50
梯度時間=15 min
終止時間=18 min
流速=1 mL/min
波長=220及254 nm
溶劑A=含0.1% TFA之5% CH3 CN/95% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之95% CH3 CN/5% H2 O
條件OL4c
管柱=Waters Acquity BEH C18；1.7 μm；50×2.1
mm ID；(35℃)
保持2%B　0-1 min
2-98%B　1-1.5 min
98%B　1.5-2.2 min
流速=0.8 ml/min
波長=2 nm
溶劑A=含0.05% TFA之水
溶劑B=含0.05% TFA之CH3 CN
條件OL5a
管柱=Phenomenex-Luna 3.0×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件OL5b
管柱=Phenomenex-Luna 3.0×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含10 mM NH4 OAc之5%甲醇/95% H2 O
溶劑B=含10 mM NH4 OAc之95%甲醇/5% H2 O
條件-D4
管柱=Phenomenex-Luna，3.0×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=3 min
終止時間=4 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件J4
管柱=Phenomenex-Luna 4.6×50 mm S10
起始%B=0
最終%B=100
梯度時間=4 min
終止時間=5 min
流速=4 mL/min
波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90% H2 O
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10% H2 O
條件PY1
管柱=PHENOMENEX，2.0×50 mm，3 μm
起始%B=0；最終%B=100
梯度時間=4 min；終止時間=5 min
流速=0.8 mL/min；波長=220 nm
溶劑A=含0.1% TFA之10%甲醇/90%水
溶劑B=含0.1% TFA之90%甲醇/10%水
溫箱溫度=40℃
根據專利WO 2004052850中關於對映異構物之合成描述之程序製備醯胺1a(.CH3 SO3 H)。
向裝備有氮氣入口、頂置式攪拌機、熱電偶及加熱罩之1L圓底燒瓶中裝入50 g(225 mmol)醯胺1a(.CH3 SO3 H)及250 mL異丙醇。隨後向所得漿料中裝入252 mL 23 wt% NaOEt之EtOH溶液(2.68 M，675 mmol，3.0當量)且在50℃下攪拌約1小時。向混合物中裝入12.2 mL(675 mmol，3當量)水且加熱至60℃。在60℃下攪拌所得漿料約18小時。冷卻漿料至室溫且向其中裝入250 mL水及98.2 g(450 mmol，2.0當量)二碳酸二第三丁酯。經由真空蒸餾移除乙醇及異丙醇，且冷卻水性混合物至0℃。用76 mL(456 mmol)6 M HCl水溶液中和混合物，同時維持內部溫度<5℃。用500 mL MTBE萃取產物，且用100 mL水洗滌增濃有機層。經由真空蒸餾濃縮澄清溶液至150 mL，且向所得漿料中裝入600 mL庚烷，同時維持內部溫度>45℃。經約30分鐘冷卻漿料至室溫，且在室溫下攪拌約2小時。過濾產物，用250 mL 4:1庚烷：MTBE洗滌且在70℃下真空乾燥，得到40.5 g(178 mmol，79%產率，205 nm下99.8 AP)之酸1b：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ12.48(s,1H),4.02-3.80(m,1H),3.45-3.15(m,1H),2.40-2.19(m,1H),2.19-2.0(m,1H),1.70-1.50(m,1H),1.50-1.20(m,9H),0.83-0.60(m,1H),0.33-0.55(m,1H)；13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ173.7,173.2,155.0,154.3,79.4,60.5,60.2,37.6,32.6,31.8,28.4,28.2,15.6,15.2,14.4；HRMS: C11 H18 NO4 (M+H;ESI+ )之計算值為228.1236。實驗值為228.1234。
在500 mL反應器中，將酯1b.1(市售，17.5 g，1.00當量)溶解於THF(87.5 mL)中。冷卻所得溶液至-75℃，且向其中裝入1.5 M DIBAL-H之甲苯溶液(61.3 ml，1.5當量)，同時將溫度維持在-70℃以下。在-70℃下攪拌所得溶液1小時。經10分鐘裝入三氟乙酸(2.3 mL，0.5當量)，將內部溫度維持在-70℃以下。隨後經15分鐘裝入三乙胺(51.3 mL，6當量)，將內部溫度維持在-70℃以下。經10分鐘裝入三氟乙酸酐(11.2 mL，1.3當量)，將內部溫度維持在-70℃以下。隨後經90分鐘將反應物溫至室溫，且經由反向添加至20 wt%單水合檸檬酸水溶液(96.6 g，1.5當量)中來淬滅，同時將溫度維持在15℃以下。在室溫下攪拌所得混合物2小時，隨後丟棄下水層。用70 mL飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌產物增濃之有機層兩次。裝入固體碳酸氫鈉(1.7 g，0.1 g/g實例146)，且在真空下，將溶液之溶劑換成純甲苯以提供呈2 L/kg甲苯之溶液形式的1b.2。
將1b.2(自實例151理論值為16.5 g)於33 mL甲苯中之溶液精密過濾至250 mL反應器中。隨後裝入三氟甲苯(50 mL)及氯碘甲烷(43.2 g，4.0當量)，且冷卻所得溶液至-20℃。裝入1.1 M二乙基鋅之甲苯溶液(111 mL，2.0當量)，同時將內部溫度維持在<-8℃。在-15℃至-20℃下，攪拌所得溶液14小時。將反應混合物溫至0℃，隨後經由反向添加至20 wt%檸檬酸水溶液(135.7 g，2.3當量)中來淬滅。用甲苯(82 mL)清洗反應器，且將清洗液添加至淬滅溶液中。攪拌所得雙相混合物20分鐘，隨後分離下水層並丟棄。依次用60 mL 13 wt% NaCl水溶液及60 mL飽和NaHCO3 洗滌增濃之有機物兩次。在真空下，將所得溶液之溶劑換成純IPA，提供呈10 L/kg IPA之溶液形式的1b.3。
向250 mL反應器中裝入1b.3(自酯1b.1之理論值為147 mL，14.7 g)於IPA中之溶液。將溶液溫至35℃，且添加固體氫氧化鈉(6.2 g，3.0當量)。在35℃下攪拌所得混合物隔夜。添加水(44 mL)且在真空下移除有機溶劑。添加MTBE(145 mL)，且用6 N HCl水溶液調節pH值為3.0。分離水層並丟棄。用60 mL水洗滌產物增濃之有機物，隨後經由添加等體積MTBE在真空下共沸乾燥。濃縮溶液至55 mL，且在50℃下攪拌30分鐘。經1小時冷卻溶液至室溫，在此期間，形成漿料。經90分鐘裝入庚烷(90 mL)且使所得漿料老化1小時。將固體收集於中玻璃粉上，且依次用22.5 mL 3:1庚烷：MTBE及22.5 mL庚烷洗滌。在50℃真空烘箱中乾燥黃褐色固體，提供5.48 g(46%)94.9 LCAP純之酸1b。在50℃下，將粗酸1b溶解於55 mL MTBE中。濃縮所得溶液至20 mL，且經1小時冷卻至室溫。隨後經90分鐘添加庚烷(33 mL)。將所得固體收集於中玻璃粉上，用庚烷(15 mL)洗滌，且在50℃真空烘箱中乾燥，提供4.45 g呈黃褐色粉狀之酸1b(98.8 AP，98.8%對掌性純，自酯1b.1為37%)。
向裝備有氮氣入口、頂置式攪拌機及熱電偶之250 mL圓底燒瓶中裝入20.0 g(88.0 mmol，2.11當量)酸1b、16.5 g(41.7 mmol，1當量)1,1'-(聯苯-4,4'-二基)雙(2-溴乙酮)、110 mL乙腈及55 mL四氫呋喃。隨後裝入二異丙基乙胺(15.1 mL，86.6 mmol，2.08當量)，同時將內部溫度維持在<25℃。在20-25℃下攪拌混合物約5小時，且裝入83 mL乙酸乙酯及90 mL 13 wt% NaCl水溶液。分離所得雙相混合物，且再用90 mL 13 wt% NaCl水溶液洗滌增濃之有機層。用20 mL四氫呋喃稀釋增濃之有機層，且用NaHCO3 及NaCl之水性混合物(45 mL 1 M NaHCO3 水溶液及45 mL 26% NaCl水溶液)洗滌。經由真空蒸餾將增濃之有機層之溶劑換成甲苯，至目標體積為約160 mL。所得酮酯1c之甲苯溶液直接用於下一步驟中。[注意：關於1,1'-(聯苯-4,4'-二基)雙(2-溴乙酮)之製備，參見方法專利申請案WO 2009/020825]。
向上述酮酯1c之甲苯溶液中裝入64.2 g(832.9 mmol，20.0當量)NH4 OAc，且在90-100℃下攪拌約18小時。冷卻至60℃且裝入255 mL 2:1 AcOH：水。分離所得雙相混合物，且用58 mL 1:1 AcOH：水洗滌甲苯層。合併增濃之水層，且經由真空蒸餾移除殘餘甲苯。用60 mL甲醇稀釋水溶液且加熱至50-60℃。裝入106 mL(1060 mmol，25.4當量)10 N NaOH，同時將內部溫度維持在<60℃。隨後冷卻所得漿料至室溫。過濾漿料，且依次用100 mL水及400 mL甲醇洗滌，得到26.1 g粗咪唑1d。隨後將濕的粗咪唑1d裝入500 mL裝備有氮氣入口、頂置式攪拌機及熱電偶之圓底燒瓶中。裝入165 mL N-甲基-2-吡咯啶酮，且加熱至50℃。向所得澄清溶液中裝入30 mL甲醇，且在50℃下攪拌約18小時。向所得漿料中再裝入130 mL甲醇，同時將內部溫度維持在>45℃。在50℃下攪拌漿料約30分鐘且冷卻至室溫。過濾漿料，且依次用90 mL 1:1甲醇：N-甲基-2-吡咯啶酮及200 mL甲醇洗滌固體。在70℃下真空乾燥固體，得到22.7 g(31.5 mmol，產率76%，在254 nm下為95 AP)咪唑1d：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ11.95(s,2H),7.89-7.76(d,4H),7.74-7.60(d,4H),7.50(s,2H)4.62(s,2H),3.55-3.30(m,2H),2.45-2.20(m,4H),1.70-1.59(m,2H),1.59-0.90(s,18H),0.83-0.69(m,2H),0.65-0.49(m,2H)；HRMS: C38 H45 N6 O4 (M+H;ESI+ )之計算值為649.3502，實驗值為649.3524。
實例1步驟e
向裝備有氮氣入口及頂置式攪拌機之250 mL圓底燒瓶中裝入7.0 g(10.8 mmol)咪唑1d、105 mL甲醇及3.7 mL(20.8 mmol，1.93當量)5.6 M HCl之異丙醇溶液。用炭處理所得溶液且過濾。用140 mL甲醇洗滌炭且與濾液合併。濃縮增濃之有機流至約70 mL且裝入裝備有氮氣入口、頂置式攪拌機及熱電偶之圓底燒瓶中。隨後向溶液中裝入14.75 mL(88.5 mmol，8.2當量)6 M HCl且在50℃下攪拌。在50℃下約12小時後，向混合物中裝入50 mL異丙醇，且在50℃下攪拌所得漿料1小時。冷卻漿料至室溫且老化約15小時。過濾產物且依次用35 mL 4:1異丙醇：甲醇及70 mL異丙醇洗滌。在55℃下在真空下乾燥固體，得到5.3 g(8.9 mmol，83%，在254 nm為99.8 AP)吡咯啶1e/4HCl：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )614.00-9.38(bs,8H),8.31(s,2H),8.06-7.96(d,4H),7.94-7.84(d,4H),5.05-4.89(dd,2H),3.55-3.42(m,2H),2.87-2.69(dt,2H),2.64-2.53(dd,2H),2.05-1.89(m,2H),1.17-0.98(m,2H),0.96-0.82(dd,2H)；13 C NMR(100 MHz,DMSO-d 6 )δ140.0,139.3,133.6,127.2,126.6,125.8,116.6,49.8,34.3,29.9,15.2,5.3；HRMS: C28 H29 N6 (M+H;ESI+ )之計算值為449.2454，實驗值為449.2470。
實例1步驟f
向裝備有氮氣入口、頂置式攪拌機及熱電偶之250 mL夾套反應器中裝入4.24 g(24.2 mmol，2.4當量)(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸、3.86 g(25.21 mmol，2.5當量)單水合1-羥基苯并三唑、4.55 g(23.73 mmol，2.35當量)1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽及60 mL乙腈。攪拌混合物約1小時，且向其中裝入6 g(10.1 mmol)吡咯啶1e/4HCl。冷卻所得漿料至10℃且向其中裝入7.92 mL(45.41 mmol，4.5當量)二異丙基乙胺。將混合物溫至室溫且攪拌約19小時。用36 mL 13 wt% NaCl水溶液洗滌所得有機溶液。向增濃之有機物中裝入12 mL乙腈且用36 mL含有13 wt% NaCl水溶液及1 M NaOH之水溶液洗滌。隨後向增濃之有機物中裝入12 mL甲醇且加熱至50℃。在2小時期間，添加水(60 mL)，且冷卻所得漿料至室溫且老化約2小時。過濾固體，用36 mL 1:1乙腈：水洗滌且在真空下乾燥。向裝備有氮氣入口、頂置式攪拌機及熱電偶之250 mL夾套反應器中裝入上述固體且用240 mL SDA3A級乙醇溶解。經由真空蒸餾濃縮溶液至約50 mL，且向其中裝入4.24 mL(23.19 mmol，2.30當量)5.47 M HCl之異丙醇溶液及額外的30 mL SDA3A乙醇。濃縮混合物至約50 mL，用40 mL SDA3A乙醇稀釋，且用炭處理。過濾炭且用90 mLSDA3A乙醇洗滌。合併增濃之濾液及洗滌液，且濃縮至40 mL。裝入16 mL乙酸乙酯且加熱至40℃。裝入60 mg醯胺1f/2HCl晶種，且在40℃下攪拌1小時。經1.5小時，再裝入68 mL乙酸乙酯，同時將內部溫度維持在40℃。在40℃下攪拌所得漿料約18小時，且冷卻至室溫。過濾漿料且用24 mL 3:1乙酸乙酯：SDA3A乙醇及30 mL乙酸乙酯洗滌。在真空下在50℃下乾燥固體，得到6.83 g(8.17 mmol，81%，在300 nm下99.5 AP)醯胺1f/2HCl：1 H NMR(600 MHz,DMSO-d 6 )δ15.51(s,2H),14.95(s,2H) 8.19(s,2H),8.05(d,4H),7.91(d,4H),7.25(d,2H),5.18(t,2H),4.44(t,2H),3.77(s,2H),3.55(s,6H),2.50(m,2H),2.39(m,2H),2.24(m,2H),1.91(m,2H),0.95(m,2H),0.92(d,6H),0.81(d,6H),0.75(s,2H)；13 C NMR(125 MHz,DMSO-d 6 )δ172.7,156.9,148.5,139.1,131.7,127.1,126.5,125.9,115.1,57.8,54.5,51.5,37.3,32.9,29.2,19.7,17.5,17.5,15.7；元素分析(就0.81%水進行修正)之計算值：C=59.86%,H=6.30%,N=13.29%,Cl=8.41%；實驗值：C=59.99%,H=6.27%,N=13.12%,Cl=8.42%。
醯胺1f/2HCl之晶種之製備：根據上述基本程序使用504 mg(0.8 mmol)吡咯啶1e.4HCl製備醯胺1f。反應完成後，用3 mL 13% NaCl水溶液、2×3 mL含有13% NaCl及1 M NaOH之水溶液及3 mL 13% NaCl水溶液洗滌增濃之乙腈溶液。濃縮增濃之有機物成殘餘物且用10 mL乙腈稀釋。過濾混濁的混合物且濃縮澄清濾液成殘餘物。用10 mLSDA3A乙醇稀釋殘餘物，且向其中裝入2.1 mL(1.9 mmol，2.4當量)0.88 M HCl之乙醇溶液。濃縮混合物成殘餘物且用1.8 mL異丙醇稀釋。加熱所得溶液至50℃且攪拌約18小時。冷卻所得漿料至室溫，過濾且用2:1丙酮：乙醇洗滌，得到476 mg(0.57 mmol，78%)醯胺1f/2HCl。[注意：(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸係自Flamma購得]
實例1及2 純化醯胺1f/2HCl之樣品(106.9 mg)(2 g MCX管柱；MeOH洗滌液；2 N NH3 /MeOH溶離)且在真空中乾燥。將NCS(0.0195 g，0.146 mmol)添加至所得材料之DMF(2.5 mL)溶液中，且用油浴在50℃下加熱16.5小時。在真空中移除大部分揮發性組分，且將殘餘物溶解於MeOH中，且進行逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna，30×100 mm S10 Axia)，得到實例-1(白色泡沫體；56.1 mg)及實例-2(白色泡沫體；22.3 mg)之三氟乙酸鹽。實例-1：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.50 ppm,400 MHz): 12.61(br s,1H),8.13(s,1H),7.93(d,J =8.5,2H),7.90-7.86(m,4H),7.82(d,J =8.5,2H),7.27(d,J =8.3,1H),7.17(d,J =8.5,1H),5.02-4.94(m,2H),4.44-4.38(m,1.80H),4.31(app br s,0.2H),3.75(m,1H),3.62(m,1H),3.55(s,3H),3.54(s,3H),2.56-2.50(『m』與溶劑信號部分重疊,1H),2.41-2.23(m,3H),2.17-2.09(m,1H),2.07-2.00(m,1H),1.97-1.91(m,1H),1.88-1.81(m,1H),1.01-0.81(m,15H),0.71(m,1H)。LC(條件2a及2b ): >95%均質性指數。LC-MS(條件1a ): Rt =1.80 min。LC-MS: [M+H]+ C42 H50 ClN8 O6 之分析計算值為797.35；實驗值為797.33。實例-2：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.50 ppm,400 MHz): 7.86(d,J =8.6,4H),7.80(d,J =8.5,4H),7.17(d,J =8.5,2H),4.96(dd,J =7.5,6.0,2H),4.40(app t,J =7.8,2H),3.61(m,2H),3.54(s,6H),2.33-2.23(m,4H),2.09-1.98(m,2H),1.90-1.82(m,2H),1.01-0.82(『m』及0.96 ppm及0.87 ppm處之兩個『d』重疊，其中分別為J =6.8及J =6.5；14H);0.71(m,1.7H),0.62(m,0.3H)。LC(條件2a及2b ): >95%均質性指數。LC/MS(條件1a ): Rt =2.79 min。LC/MS: [M+H]+ C42 H49 Cl2 N8 O6 之分析計算值為831.32；實驗值為831.26。
關於醯胺3a/2HCl之合成，參見方法專利申請案WO 2009/020825。
實例3 向醯胺3a(32 mg，0.043 mmol)於乙酸(2 mL)中之溶液中添加2當量1 M溴之乙酸溶液，且攪拌反應物30分鐘。再添加1當量溴(所形成之固體)，且用5% NaHCO3 中和反應物且用EtOAc(2×10 mL)萃取。用飽和Na2 S2 O3 溶液及鹽水洗滌合併之萃取物且濃縮。在高真空下乾燥殘餘物，得到實例3(41 mg)。LC/MS(條件J4): RT=3.54 min。LC/MS[M+H]+ C40 H49 Br2 N8 O6 之分析計算值為897.22；實驗值為897.28。
將二異丙基乙胺(100 ul，74.2 mg，0.574 mmol)添加至醯胺3a(197 mg，0.243 mmol)及N-氯丁二醯胺(39 mg，0.292 mmol)於乙腈(2 mL)中之混合物且攪拌隔夜。隨後向反應混合物中再添加一份N-氯丁二醯胺(66 mg，0.494 mmol)且攪拌直至由HPLC分析證實起始材料耗盡。隨後將粗反應混合物藉由逆相HPLC(溶劑A=H2 O/CH3 CN(95:5)+0.05% TFA；溶劑B=H2 O/CH3 CN(5:95)+0.05% TFA；管柱：Luna C18，5u，100×21.5 mm；流速：20 mL/min)純化，得到實例4(帶黃色非晶粉末，60 mg)及實例3(帶黃色非晶粉末，115 mg)之三氟乙酸鹽。實例5：LC/MS(條件3 ): Rt =6.13 min。1 H NMR(DMSO-d 6 ,TMS,600 MHz): 8.16(s,1H),7.95-7.91(m,7H),7.85(d,J =8.8,2H),7.35(d,J =8.4,1H),7.32(d,J =8.4,1H),5.19(t,J =7.3,1H),5.05(m,1H),4.15(t,J =7.7,1H),4.08(t,J =8.1,1H),3.88-3.81(m,4H),3.56(s,6H),2.43(m,1H),2.21-2.11(m,4H),2.08-2.05(m,2H),1.97(m,3H),0.91(d,J =6.5,3H),0.87(d,J =7.0,3H),0.85(d,J =7.0,3H),0.80(d,J =6.6,3H)。HRMS:[M+H]+ C40 H50 ClN8 O6 之計算值為773.3542；實驗值為773.3530。實例4：LC/MS(條件3 ): Rt =8.61 min。1 H NMR(DMSO-d 6 ,TMS,600 MHz): 7.89(d,J =8.3,4H),7.83(d,J =8.3,4H),7.33(d,J =8.4,2H),5.05(m,2H),4.09(t,J =8.3,2H),3.84-3.81(m,4H),3.56(s,6H),2.24-2.15(m,4H),2.00-1.95(m,6H),0.91(d,J =6.7,6H),0.87(d,J =6.6,6H)。HRMS:[M+H]+ C40 H49 Cl2 N8 O6 之計算值為807.3152；實驗值為807.3138。
向吡咯啶1e/4HCl(0.104 g，0.174 mmol)、HATU(0.133g，0.349 mmol)及Cap-193(0.082 g，0.349 mmol)於DMF中之混合物中添加DIEA(0.183 mL)。在室溫下攪拌反應混合物3小時。將反應混合物藉由製備型HPLC(Phenomenex AXIA 5 u管柱，0-90%B之35分鐘梯度。A=H2 O/CH3 CN/10 mM NH4 OAc,95:5。B=CH3 CN/H2 O/10 mM NH4 OAc 95:5)純化，得到實例6步驟a(0.064 g)。LC/MS:[M+H]]+ C46 H59 N8 O10 之分析計算值為883.43；實驗值為883.26。1 H NMR(400 MHz,MeOD) ppm 7.90(2 H,s),7.78-7.86(8 H,m),5.13(2 H,dd,J =9.2,6.9 Hz),4.96(2H,d,J =5.0 Hz),3.73-3.79(2 H,m),3.63(6 H,s),3.39-3.49(6 H,m),3.35(1H,d,J =4.8 Hz),3.32-3.34(1 H,m),3.30(6 H,s),3.15(6 H,s),2.66(2 H,dd,J =13.5,9.4 Hz),2.37-2.51(4 H,m),2.02-2.09(2 H,m),1.03-1.14(2 H,m),0.81-0.93(2 H,m)。
實例6及實例7向實例6步驟a(0.057 g)於DMF中之溶液中添加NCS(10.34 mg，0.077 mmol)。在60℃下加熱反應混合物3小時。將反應混合物藉由製備型HPLC(Phenomenex AXIA 5 u 30×100 mm管柱，0-100%B之20分鐘梯度。A=H2 O/CH3 OH/TFA 90:10:0.1。B=CH3 OH/H2 O/TFA 90:10:0.1)純化，得到實例6(0.022 g)及實例7(0.017 g)。實例6：LC(條件J5): Rt =3.46 min。LC/MS:[M+H]+ C46 H58 ClN8 O10 之分析計算值為917.39；實驗值為917.12。1 H NMR(400 MHz,MeOD ) ppm 7.87-7.91(1 H,m),7.77-7.86(8 H,m),5.14(1 H,dd,J =9.2,6.9 Hz),5.05(1 H,dd,J =8.1,6.3 Hz),4.96(2 H,t,J =5.7 Hz),3.73-3.79(1 H,m),3.67-3.72(1 H,m),3.57-3.66(6 H,m),3.32-3.51(8 H,m),3.29(6H,d,J =1.8 Hz),3.19(3 H,s),3.12-3.16(3 H,m),2.60-2.72(1 H,m),2.32-2.54(5 H,m),2.02(2 H,d,J =6.3 Hz),1.00-1.19(2 H,m),0.88(1 H,br. s.),0.82(1 H,br. s.)。實例7：LC(條件PY1): Rt =4.083 min。LC/MS:[M+H]+ C46 H56 Cl2 N8 O10 之分析計算值為951.35；實驗值為951.09。1 H NMR(400 MHz,MeOD ) ppm 7.74-7.84(8 H,m),5.05(2 H,t,J =7.2 Hz),4.95(2 H,d,J =5.5 Hz),3.66-3.72(2 H,m),3.63(6 H,s),3.37-3.53(8 H,m),3.30(6 H,s),3.19(6 H,s),2.32-2.51(6 H,m),1.92-2.06(2 H,m),1.08(2 H,dt,J =8.6,5.8 Hz),0.81(2 H,d,J =1.8 Hz)。
在50℃下加熱胺基甲酸酯1d(0.80 g，1.23 mmol)及NCS(0.214 g，1.603 mmol)於DMF(12 mL)中之溶液17小時。冷卻至周圍溫度後，在真空中移除揮發性組分。將殘餘物溶解於MeOH(36 mL)中，且藉由製備型HPLC(管柱：XTERRA，30×100 mm，S5；起始%B=50，最終%B=100；梯度時間=10 min；終止時間=12 min；流速=30 ml/min；波長=220：溶劑A=10% MeOH-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA)分離該兩種產物。用過量2 N NH3 /MeOH溶液中和兩個分離部分中之每一個，且真空濃縮以移除大部分甲醇，且將殘餘物分配在20% MeOH/CHCl3 與水之間。乾燥(MgSO4 )有機層，過濾且真空濃縮，得到氯化物(淡黃色泡沫體V1a-1；288.4 mg)及二氯化物V1a-2(淡黃色固體；400.4 mg)。氯化物V1a-1：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 12.62-12.60(m,1H),12.23(s,0.2H),11.92(s,0.8H),7.85-7.32(m,9H),4.68-4.42(m,2H),3.47-3.38(m,2H),2.40-2.35(m,2H),2.26-2.20(m,2H),1.71-1.58(m,2H),1.55-0.96(app br s,18H),0.82-0.69(m,2H),0.64-0.51(m,2H)。LC(V-條件1): Rt =2.44 min。LC/MS: [M+H]+ C38 H44 ClN6 O4 之分析計算值為683.31；實驗值為683.31。二氯化物V1a-2：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 12.62(s,2H),7.85(d,J =8.8,4H),7.82(d,J =8.9,4H),4.61-4.42(m,2H),3.53-3.38(m,2H),2.41-2.35(m,2H),2.27-2.20(m,2H),1.70-1.59(m,2H),1.53-0.94(app br s,18H),0.80-0.70(m,2H),0.64-0.53(m,2H)。LC(條件1a): Rt =2.89 min。
LC/MS: [M+H]+ C38 H43 Cl2 N6 O4 之分析計算值為717.27；實驗值為717.31。
向氯化物V1a-1(0.2741 g，0.401 mmol)於MeOH(1 mL)中之懸浮液中添加4 M HCl之二噁烷(4 mL)溶液。在室溫下攪拌混合物7小時，隨後在真空中移除揮發性組分，得到呈黃褐色固體狀之V1b之鹽酸鹽(231.7 mg)。該產物不經進一步純化即使用。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 13.51(br s,1H),10.53-10.30(m,2H),9.87-9.72(m,1H),8.02-7.85(m,9H),4.72-4.68(m,1H),4.65-4.53(m,1H),3.42-3.30(m,2H),2.68-2.37(『m』與溶劑信號部分重疊,4H),1.97-1.87(m,2H),1.16-1.07(m,2H),0.89-0.80(m,2H)。LC(條件1a): Rt =1.66 min。LC/MS:[M+H]+ C28 H28 ClN6 之分析計算值為483.21；實驗值為483.20。[注意：產物之確切鹽酸鹽含量未測定]。
實例V1 向氯化物V1b/4HCl(0.045 g，0.072 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基胺基)丁酸(0.025 g，0.157 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.075 mL，0.429 mmol)於DMF(1.5 mL)中之溶液中添加HATU(0.057 g，0.150 mmol)。在約25℃下攪拌反應混合物1小時。用MeOH(2.5 mL)稀釋且藉由製備型HPLC(管柱：XTERRA，30×100 mm，S5；起始%B=30，最終%B=90；梯度時間=10 min；終止時間=12 min；流速=30 ml/min；波長=220；溶劑A=10% MeOH-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA)純化產物，得到呈淡黃色固體狀之實例V1之三氟乙酸鹽(39.4 mg)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 14.80-14.36(br m,1.4H),12.58(app br s,0.6H),8.14(s,1H),7.94(d,J =8.5,2H),7.89(d,J =8.3,2H),7.87(d,J =8.4,2H),7.82(d,J =8.6,2H),7.38(d,J =7.8,0.9H),7.28(d,J =7.8,0.9H),7.07(app br s,0.1H),6.96(app br s,0.1H),5.02(dd,J =8.8,6.8,1H),4.96(dd,J =7.0,6.0,1H),4.50-4.39(m,2H),3.74-3.67(m,1H),3.59-3.48(m,7H),2.60-2.47(『m』與溶劑信號部分重疊,1H),2.42-2.22(m,3H),2.01-1.65(m,4H),1.65-1.52(m,2H),1.06-0.84(m,8H),0.83-0.77,(m,1H),0.74-0.66(m,1H)。LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC(條件1a): Rt =1.66 min。LC/MS:[M+H]+ C40 H46 ClN8 O6 之分析計算值為769.32；實驗值為769.35。
實例V2 自吡咯啶V1b/4HCl及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸根據關於實例V1之合成描述之程序製備實例V2(三氟乙酸鹽)。
自胺基甲酸酯V1a-2根據關於吡咯啶V1b之製備描述之程序製備呈鹽酸鹽形式之實例V3a。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 10.62-10.48(m,2H),9.92-9.75(m,2H),7.92(d,J =8.8,4H),7.89(d,J =9.1,4H),4.68-4.57(m,2H),3.40-3.31(m,2H),2.54-2.50(『m』與溶劑信號部分重疊,2H),2.46-2.39(m,2H),1.91-1.85(m,2H),1.16-1.07(m,2H),0.85-080(m,2H)。LC(條件1a): Rt =2.01 min。LC/MS:[M+H]+ C28 H27 Cl2 N6 之分析計算值為517.17；實驗值為517.06.。[注意：產物之確切鹽酸鹽含量未測定]。
實例V3 自吡咯啶V3a之鹽酸鹽根據關於實例V1之合成描述之程序製備實例V3(三氟乙酸鹽)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 12.59(v br s,~2H),7.86(d,J =8.5,4H),7.80(d,J =8.3,4H),7.46(app br s,0.13H),7.37(d,J =7.6,1.73H),6.97(app br s,0.14H),4.97-4.94(m,2H),4.52-4.35(m,2H),3.63-3.45(m,8H),2.36-2.23(m,4H),1.96-1.83(m,2H),1.82-1.67(m,2H),1.64-1.49(m,2H),1.13-0.82(m,8H),0.78-0.61(m,2H)。LC(條件2a及2b ):>95%均質性指數。LC(條件1a): Rt =2.66 min。LC/MS: [M+H]+ C40 H45 Cl2 N8 O6 之分析計算值為803.28；實驗值為803.28。
實例V4-V6 自吡咯啶V3a之鹽酸鹽及適當酸根據關於實例V1之合成描述之程序製備實例V4-V6(三氟乙酸鹽)。
向吡咯啶1e/4HCl(0.350 g，0.589 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(0.103 g，0.589 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸(0.128 g，0.589 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.720 mL，4.12 mmol)於DMF(3 mL)中之溶液中添加HATU(0.493 g，1.295 mmol)。在約25℃下攪拌反應混合物4小時，隨後用MeOH稀釋且藉由製備型HPLC(管柱：XTERRA，30×100 mm，S5；起始%B=30，最終%B=75；梯度時間=15 min；終止時間=15 min；流速=30 ml/min；波長=220；溶劑A=10% MeOH-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA)純化以自三種可能的產物中分離出產物V7a。將產物V7a溶解於MeOH中，且純化(6 g MCX柱體；MeOH洗滌液；2 N NH3 /MeOH溶離)且真空濃縮，得到黃褐色固體(103.2 mg)。LC(條件1a)：Rt =1.63 min。LC/MS:[M+H]+ C44 H53 N8 O7 之分析計算值為805.40；實驗值為805.49。
實例V7及V8 在50℃下加熱產物V7a(0.103 g，0.128 mmol)及NCS(0.022 g，0.167 mmol)於DMF(1.5 mL)中之溶液24小時。冷卻至周圍溫度後，用MeOH稀釋反應混合物且藉由製備型HPLC(管柱：XTERRA,30×100 mm，S5；起始%B=40，最終%B=100；梯度時間=15 min；終止時間=17 min；流速=30 ml/min；波長=220；溶劑A=10% MeOH-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA)純化以分離區域選擇性異構物V7及V8之混合物。將混合物溶解於MeOH中，且經受不同製備型HPLC純化條件(管柱：Waters-SunFire，30×100 mm，S5；起始%B=10，最終%B=50；梯度時間=20 min；終止時間=20 min；流速=30 ml/min；波長=220；溶劑A=10%乙腈-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90%乙腈-10% H2 O-0.1% TFA)，以分離兩種呈三氟乙酸鹽形式之區域選擇性異構物。實例V7(灰白色固體，17.3 mg)：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 14.52(app br s,太寬而不能積分),12.64(app br s,太寬而不能積分),8.14(s,1H),7.95-7.79(m,8H),7.26(兩個重疊之『d』,J =~8.6,1.70H),7.10(app br s,0.08H),6.98(app br s,0.22H),5.01-4.97(m,1H),4.96-4.92(m,1H),4.50-4.46(m,1H),4.43-4.40(m,1H),3.90-3.81(m,2H),3.79-3.72(m,1H),3.71-3.64(m,1H),3.54(app s,6H),3.31-3.18(m,2H),2.65-2.50(『m』與溶劑信號部分重疊,1H),2.45-2.19(m,3H),2.18-2.08(m,1H),2.04-1.89(m,2H),1.89-1.79(m,1H),1.69-1.59(m,1H),1.55-1.41(m,2H),1.38-1.23(m,1H),1.04-0.77(m,9H),0.74-0.67(m,1H)。LC(條件2a及2b ):>95%均質性指數。LC(條件1a): Rt =2.15 min。LC/MS: [M+H]+ C44 H51 Cl1 N8 O7 之分析計算值為839.36；實驗值為839.35。實例V8(灰白色固體,16.8 mg)：1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz):14.53(br s,太寬而不能積分),12.61(br s,太寬而不能積分),8.13(s,1H),7.94(d,J =8.3,2H),7.90(d,J =8.6,2H),7.85(d,J =8.5,2H),7.82(d,J =8.6,2H),7.36(d,J =8.8,~1H),7.17(d,J =8.5,~1H),5.00-4.94(m,2H),4.49(app t,J =7.7,1H),4.40(app t,J =7.9,1H),3.90-3.78(m,3H),3.65-3.59(m,1H),3.55(s,3H),3.54(s,3H),3.35-3.19(m,2H),2.64-2.50(『m』與溶劑信號部分重疊,1H),2.41-2.34(m,1H),2.33-2.22(m,2H),2.12-1.99(m,2H),1.99-1.90(m,1H),1.89-1.81(m,1H),1.52-1.27(m,4H),1.07-0.84(m,8H),0.84-0.77(m,1H),0.75-0.65(m,1H)。LC(條件2a及2b ): >95%均質性指數。LC(條件1a): Rt =2.15 min。LC/MS:[M+H]+ C44 H51 Cl1 N8 O7 之分析計算值為839.36；實驗值為839.38。
依次將Boc2 O(0.734 g，3.36 mmol)及DMAP(0.021 g，0.168 mmol)添加至吡咯啶1e/4HCl(2.00 g，3.36 mmol)及Et3 N(2.3 ml,16.82 mmol)於DMF(60 mL)中之混合物中，且在周圍條件下攪拌4.5小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物分配在1.0 N NaOH(20 mL)與20% MeOH/CHCl3 (50 mL)之間。用20% MeOH/CHCl3 (50 mL，2×)洗滌水相。乾燥(MgSO4 )合併之有機相且真空濃縮。自所得粗材料製備矽膠網狀物且經受BIOTAGE純化(160 g矽膠)，其中首先用EtOAc溶離管柱直至所有較高Rf 斑點(亦即雙-Boc衍生物1d；0.28 g)溶離出，隨後經2.5 L用5-10% MeOH/CH2 Cl2 溶離管柱以溶離殘餘雙-Bocx(接著為單-Boc V9a(0.81 g；含約1.1 mol當量Et3 N)。LC/MS: [M+H]+ C33 H37 N6 O2 之分析計算值為549.30；實驗值為549.45。
向胺基甲酸酯V9a(1 g，1.823 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸(0.400 g，1.841 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.65 mL，3.72 mmol)於DMF(8 mL)中之溶液中添加HATU(0.770 g，2.026 mmol)，且在約25℃下攪拌反應混合物3小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物溶解於20% MeOH/CHCl3 (250 mL)中，用水(3×40 mL)洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮。將殘餘物溶解於CHCl3 (4 mL)中，且負載於湯姆森矽膠柱體上，且用10% MeOH/EtOAc溶離，得到呈黃褐色泡沫體之產物V9b(1.15 g)。LC(條件1a): Rt =1.70 min；LC/MS: [M+H]+ C42 H50 N7 O6 之分析計算值為748.38；實驗值為748.40。
實例V9步驟c
在50℃下加熱V9b(0.9387 g，1.255 mmol)及NCS(0.335 g，2.51 mmol)於DMF(13 mL)中之溶液24.5小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物溶解於CH2 Cl2 (200 mL)中，依次用水(3×50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經MgSO4 乾燥，過濾且真空濃縮。將殘餘物溶解於CH2 Cl2 (6 mL)中，且經受矽膠純化(100%乙酸乙酯)，得到呈黃色固體狀之化合物V9c(720.7 mg)。LC(條件1a): Rt =3.19 min。LC/MS:[M+H]+ C42 H48 Cl2 N7 O6 之分析計算值為816.30；實驗值為816.35。
自胺基甲酸酯V9c根據關於V1b之合成描述之程序製備呈鹽酸鹽形式之吡咯啶V9d。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 10.49-10.38(m,1H),9.84-9.72(m,1H),7.90-7.81(m,8H),7.27(d,J =8.6,0.89H),6.99(app br s,0.11H),4.98-4.95(m,1H),4.65-4.55(m,1H),4.50-4.46(m,1H),3.90-3.80(m,2H),3.76-3.64(m,1H),3.54(s,3H),3.41-3.32(m,1H),3.32-3.19(m,2H),2.54-2.40(『m』與溶劑信號部分重疊,2H),2.36-2.24(m,2H),2.06-1.95(m,1H),1.94-1.78(m,2H),1.69-1.57(m,1H),1.55-1.40(m,2H),1.39-1.27(m,1H),1.17-1.07(m,1H),1.04-0.92(m,1H),0.88-0.78(m,1H),0.76-0.66(m,1H)。LC(條件1a): Rt =2.66 min；>95%均質性指數。LC/MS:[M+H]+ C37 H40 Cl2 N7 O4 之分析計算值為716.25；實驗值為716.28。
實例V9 自中間物V9d之鹽酸鹽及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)丁酸根據關於實例V1之合成描述之程序製備實例V9(三氟乙酸鹽)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 12.59(br s,~2H),7.87-7.77(m,8H),7.29/7.26(兩個部分重疊之『d』,J =8.6/7.8,1.82H),6.97(app br s,0.18H),4.97-4.93(m,2H),4.50-4.42(m,2H),3.90-3.81(m,2H),3.72-3.65(m,1H),3.60-3.46(m與兩個s重疊,s位於3.54及3.53處,7H),3.32-3.18(m,2H),2.38-2.18(m,4H),2.05-1.23(『m』之集合,9H),1.09-0.85(m,5H),0.76-0.59(m,2H)。LC(條件2a及2b ):>95%均質性指數。LC(條件1a): Rt =2.66 min。LC/MS:[M+H]+ C43 H49 Cl2 N8 O7 之分析計算值為859.31；實驗值為859.43。
實例V10-V16 自吡咯啶V9d之鹽酸鹽及適當酸根據關於實例V1之製備描述之程序製備實例V10-V16(三氟乙酸鹽)。實例V13-16額外需要逆相HPLC純化，該HPLC採用以下條件：管柱：Waters-SunFire，30×100 mm，S5；起始%B=10，最終%B=50；梯度時間=20 min；終止時間=20 min；流速=30ml/min；波長=220；溶劑A=10%乙腈-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90%乙腈-10% H2 O-0.1% TFA。
關於胺基甲酸酯GW1a之製備，參見專利申請案US 2009/0068140。
向胺基甲酸酯GQ1a(0.830 g，1.271 mmol)於DMF(9 mL)中之溶液中添加NCS(0.221 g，1.653 mmol)。在50℃下加熱反應混合物16小時。再添加NCS(0.1 g，0.75 mmol)且再繼續加熱4小時。冷卻至周圍溫度且分配在DCM與水(各20 mL)之間。用DCM(20 mL)萃取水層，且乾燥(Na2 SO4 )合併之有機相且真空濃縮。將所得粗材料溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)，得到呈淡黃色泡沫體之GW1b之三氟乙酸鹽(0.25 g)。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm，400 MHz): 7.82(app s,8H),4.95-4.85(『m』與溶劑信號部分重疊,2H),4.04(m,2H),2.36-2.14(m,6H),1.77(m,2H),1.50-1.20(『br s』與『d』重疊,24H)。LC(條件Ia): RT=3.0 min。LC/MS:[M+H]+ C38 H47 Cl2 N6 O4 之分析計算值為721.30；實驗值為721.32。
將4 N HCl之二噁烷溶液(10 mL)添加至胺基甲酸酯GW1b(0.29 g，0.306 mmol)中，且在室溫下攪拌反應混合物4小時。移除溶劑且在真空下乾燥隔夜，得到呈棕色固體狀之產物GW1c之鹽酸鹽(0.21 g)。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.85(d,J =8.6,4H),7.80(d,J =8.8,4H),4.95-4.85(m,2H),3.89-3.80(m,2H),2.58-2.31(m,6H),2.01-1.91(m,2H),1.50(d,6.5 Hz,6H)。LC(條件1a): RT=3.0 min。LC/MS:[M+H]+ C28 H31 Cl2 N6 之分析計算值為521.20；實驗值為521.20。
實例GW1-1互實例GW1-3 向GW1c之鹽酸鹽(150 mg，0.225 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸(57.6 mg，0.265 mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(48.0 mg，0.274 mmol)於DMF(10 mL)中之溶液中添加DIEA(0.236 mL，1.349 mmol)及HATU(176 mg，0.463 mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。在真空中移除大部分揮發性組分，且將殘餘物溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)以分離三種呈三氟乙酸鹽之產物。實例GW1-1(淡黃色泡沫體，25 mg)受未鑑別之雜質污染。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 8.05-7.93(m,1.54H),7.87-7.56(m,6.46H),5.42(br d,J =6.6,0.68H),4.97(m,1.32H),4.76-4.69(m,1.2H),4.31-4.14(m,2.8H),3.98-3.84(m,4H),3.68/3.67/3.63(三個『s』,6H),3.40-3.21(『m』與溶劑信號部分重疊,4H),2.72(m,0.7H),2.45-1.14(多個『m』與兩個『d』重疊，『d』在1.51及1.18處，其中分別為J =6.5及6.3；23.3H)。LC(條件2a及2b): >91.8%均質性指數。LC(條件1c): RT=6.22 min。LC/MS: [M+H]+ C46 H57 Cl2 N8 O8 之分析計算值為919.37；實驗值為919.9。實例GW1-2(淡黃色泡沫體，39 mg)；LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC(條件1a): RT=2.97 min。LC/MS: [M+H]+ C44 H55 Cl2 N8 O7 之分析計算值為877.36；實驗值為877.35。實例GW1-3(淡黃色泡沫體，22 mg)，LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC(條件1a): RT=3.07 min。LC/MS: [M+H]+ C42 H53 Cl2 N8 O6 之分析計算值為835.35；實驗值為835.34。
實例GW2
向胺基甲酸酯GWla(0.830 g，1.271 mmol)於DMF(9 mL)中之溶液中添加NCS(0.221 g，1.653 mmol)。在50℃下加熱反應混合物16小時。再添加NCS(0.1 g，0.75 mmol)且在50℃下再繼續加熱4小時。將混合物分配在DCM與水(各20 mL)之間。用DCM(20 mL)萃取水相，且經Na2 SO4 乾燥合併之相且真空濃縮。將所得粗產物溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)，得到呈淡黃色泡沫體之胺基甲酸酯GW2a(0.03 g)。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.76-7.64(m,8H),7.34(s,1H),5.10-4.65(與HOD信號重疊,m,2H),3.99(m,2H),2.31-2.01(m,6H),1.78-1.76(m,2H),1.55-1.15(app br m,24H)。LC(條件1a): RT=2.55 min。LC/MS:[M+H]+ C38 H48 ClN6 O4 之分析計算值為687.34；實驗值為687.39。
實例GW2步驟b
將4 N HCl之二噁烷溶液(10 mL)添加至胺基甲酸酯GW2a(0.19 g，0.208 mmol)中，且在室溫下攪拌4小時。移除溶劑且在真空下乾燥隔夜，得到呈棕色固體狀之吡咯啶GW2b之鹽酸鹽(0.16 g)。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 8.11(s,1H),7.95(d,J =8.5,2H),7.87(出現『d』,4H),7.82(d,J =8.8,2H),5.22(m,1H),4.92-4.83(與HOD信號重疊,m,1H),3.99(m,1H),3.84(m,1H),2.78-2.62(m,2H),2.57-2.31(m,4H),2.12-1.91(m,2H),1.55(d,J =6.8,3H),1.50(d,J =6.8,3H)。LC(條件Ia): RT=1.74 min。LC/MS:[M+H]+ C28 H32 ClN6 之分析計算值為487.24；實驗值為487.21。
實例GW2 向吡咯啶GW2b之鹽酸鹽(80 mg，0.126 mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(48.7 mg，0.278 mmol)於DMF(3 mL)中之溶液中添加DIEA(0.132 mL，0.758 mmol)及HATU(99 mg，0.260 mmol)，且在室溫下攪拌混合物1小時。在真空中移除大部分揮發性組分，且將殘餘物溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)，得到GW2之三氟乙酸鹽(淡黃色泡沫體；50 mg)。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 8.00-7.75(m,9H),5.71(app br m,0.2H),5.40(d,J =6.3,0.45 H),5.15-5.11(m,0.87H),500-4.96(m,0.92H),4.81-4.68(m,1.56H),4.26-4.03(m,2H),3.71/3.70/3.64/3.63(四個『s』,6H),2.77-1.87(m,9.24H),1.65-1.48(重疊之『m』與『d』,4.66 H),1.28(d,J =0.62H),1.17(d,J =6.3H,1.23H),1.06-0.82(m,12.15H)。LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC/MS(條件1a): RT=2.46 min。LC/MS[M+H]+ C42 H54 ClN8 O5 之分析計算值為801.39；實驗值為801.41。
實例GW2-1 自吡咯啶GW2b及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例GW2-1(三氟乙酸鹽)。
自(S)-5-側氧基吡咯啶-1,2-二甲酸1-第三丁酯2-甲酯根據Tetrahedon Letters ,2003,3203-3205中所述之程序製備上述三種酯。
將甲硼烷-甲硫醚複合物(5.44 mL，10.88 mmol)添加至酯GW3a-2(1.4 g，5.44 mmol)於THF(25 mL)中之溶液中，且在40℃下加熱反應混合物7小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物分配在EtOAc與水(各50 mL)之間。用EtOAc(30 mL)萃取水層，且經Na2 SO4 乾燥合併之有機相且真空濃縮。將所得無色油狀物藉由急驟層析(0-50% EtOAc/己烷)純化，得到呈無色油狀之酯GW3b(0.77 g)。1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.24 ppm,400 MHz): 4.29-4.18(m,1H),3.78-3.66(m,4H),2.99(app t,J =10.1,1H),2.43-2.97(m,1H),2.43-2.37(m,1H),2.30-2.18(m,1H),1.60-1.52(m,1H),1.47/1.42(兩個『s』,9H),1.08-1.05(m,3H)。實例GW3步驟c
向酯GW3b(1.69 g，6.95 mmol)於乙醇(10 mL)中之溶液中添加LiOH(0.250 g，10.42 mmol)於水(5.00 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌反應混合物5小時。在真空中蒸發有機溶劑，且用水(10 mL)稀釋殘餘物且用乙醚(10 mL)洗滌。於冰水浴中冷卻，且用1 N HCl酸化至約2之pH值範圍。隨後用EtOAc(20 mL，3×)萃取。經Na2 SO4 乾燥有機層且真空濃縮，得到呈無色油狀之酸GW3c，其在長時間暴露於高真空之後變成白色固體(1.38 g)。1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.24ppm,400 MHz): 4.39-4.22(m,1H),3.80-3.69(m,0.91H),3.59-3.35(m,0.18H),3.03-2.89(m,0.91H),2.51-2.22(m,2H),1.98-1.91(m,0.71H),1.68-1.60(0.29H),1.50/1.44(兩個『s』,9H),1.09(app m,3H)。
向GW3c(1.83 g，7.98 mmol)及1,1'-(聯苯-4,4'-二基)雙(2-溴乙酮)(1.581 g，3.99 mmol)於CH3 CN(30 mL)中之懸浮液中添加DIEA(1.436 mL，8.22 mmol)，且在室溫下攪拌混合物4小時。在真空中蒸發溶劑，且將殘餘物分配在EtOAc與水(各50 mL)之間。用飽和NaHCO3 (20 mL)洗滌有機層，經Na2 SO4 乾燥且真空濃縮，得到呈淡黃色固體狀之二酯GW3d(2.67 g)，其直接用於下一步驟中。
向二酮酯GW3d(2.67 g，3.85 mmol)於二甲苯(30 mL)中之溶液中添加乙酸銨(2.97 g，38.5 mmol)，且在140℃下加熱混合物6小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物分配在DCM(50 mL)與水(50 mL)之間。用飽和NaHCO3 (20 mL)洗滌有機層，經Na2 SO4 乾燥且真空濃縮。將所得粗材料用急驟層析(50-100% EtOAc/己烷，100% EtOAc-10% MeOH/EtOAc)純化，得到呈橙色固體狀之咪唑GW3e(1.3 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 12.21-11.87(三個寬單峰,2H),7.82-7.51(m,9.2H),7.30(m,0.6H),6.88-6.81(m,0.2H),4.9-4.67(m,1.81H),3.98-3.93(m,0.19H),3.77-3.54(m,2H),3.07-2.76(m,2H),2.43-2.04(m,4H),1.80-1.56(m,2H),1.41-1.33(m,8H),1.10-1.04(m,16H)。LC/MS(條件1a): RT=2.09 min。LC/MS[M+H]+ C38 H49 N6 O4 之分析計算值為653.38；實驗值為653.51。
將4 N HCl之二噁烷溶液(12.10 mL，48.4 mmol)添加至胺基甲酸酯GW3e(1.3 g，1.99 mmol)中，且在室溫下攪拌混合物5小時。在真空中移除揮發性組分，且在真空下乾燥產物隔夜，得到呈黃色固體狀之吡咯啶GW3f之鹽酸鹽(1.14 g)。1 H NMR(DMSO-d6 ,δ=2.5 ppm,400 MHz): 10.32(app br s,2H),9.79(app br s,2H),8.13(s,2H),8.02(d,J =8.3,4H),7.99(d,J =8.3,4H),5.01(br m,2H),3.47(br m,2H),3.05(br m,2H),2.62(m,2H),2.45(m,2H),2.21(m,2H),1.13(d,J =6.3,6H)。LC/MS(條件1a): RT=2.09 min。LC/MS[M+H]+ C28 H33 N6 之分析計算值為453.28；實驗值為453.17。
向吡咯啶GW3f之鹽酸鹽(1.14 g，1.905 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸(0.488 g，2.248 mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(0.407 g，2.324 mmol)於DMF(15 mL)中之懸浮液中添加DIEA(1.996 mL，11.43 mmol)。藉助於音波處理進行總溶解，隨後添加HATU(1.478 g，3.89 mmol)，且在室溫下攪拌反應混合物2小時。在真空中移除大部分揮發性組分，且將殘餘物溶解於MeOH中，且進行逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna，30×100 mm S10 Axia)，得到呈淡黃色泡沫體之三種產物之三氟乙酸鹽：GW3g-1(0.28 g)、GW3g-2(0.64 g)及GW3g-3(0.36 g)。產物GW3g-3：1 H NMR(DMSO,δ=2.5 ppm,400 MHz): 14.74(app br s,不可積分),8.16(s,2H),7.97(d,J =8.6,4H),7.88(d,J =8.3,4H),7.29(d,J =8.0,<2H),5.23(br m,0.1H),5.07(dd,J =10.6,7,1.9H),4.18(m,2H),4.09(m,2H),3.53(s,6H),3.39(m,2H),2.56-2.35(『m』與溶劑信號部分重疊,2H),1.95(m,2H),1.82(m,2H),1.13(d,J =6.3,6H),0.79(d,J =6.5,6H),0.76(d,J =6.5,6H)[注意：最後三個積分包括信號位於1.1-0.85 ppm區中次要旋轉異構物，亦即未拾取峰]。LC/MS(條件1a): RT=1.79 min。LC/MS[M+H]+ C42 H55 N8 O6 之分析計算值為767.42；實驗值為767.30。產物GW3g-1，LC/MS(條件Ia): RT=1.62 min。LC/MS[M+H]+ C46 H59 N8 O8 之分析計算值為851.45；實驗值為851.33。產物GW3g-2，LC/MS(條件1a): RT=1.70 min。LC/MS[M+H]+ C44 H57 N8 O7 之分析計算值為809.44；實驗值為809.30。
實例GW3 向GW3g-3/2TFA(160 mg，0.174 mmol)於DMF(2 mL)中之溶液中添加NCS(30.6 mg，0.229 mmol)。加熱混合物至50℃後維持5.5小時。將殘餘物溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)，得到呈淡黃色泡沫體之GW3之三氟乙酸鹽(40 mg)。[注意：對於類似情況，對呈游離鹼形式之起始材料進行氯化。]1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.88(s,1H),7.84-7.76(m,8H),5.19(dd,J =11.1,7.1,1H),4.98(dd,J =10.4,7.3,1H),4.32(m,1H),4.24-4.17(m,3H),3.63(s,3H),3.62(s,3H),3.40-3.33(m,2H),2.65(m,1H),2.50(m,2H),2.37(m,1H),1.99(m,2H),1.82(m,2H),1.22(d,J =6.3,2.85H),1.18(d,J =6.3,2.85H),1.09(m,0.3H),0.92-0.85(m,12H)。LC(條件2a及2b):>95%均質性指數。LC/MS(條件Ia): RT=2.32 min。LC/MS[M+H]+ C42 H54 ClN8 O6 之分析計算值為801.39；實驗值為801.25。
自GW3g-1根據關於實例GW3之製備描述之程序製備實例GW4(三氟乙酸鹽)。LC(條件2a及2b):>95%均質性指數。LC/MS(條件Ia): RT=2.17 min(條件1a)。LC/MS:[M+H]+ C46 H58 ClN8 O8 之分析計算值為885.41；實驗值為885.26。
向GW3g-2(565 mg,0.588 mmol)於DMF(2 mL)中之溶液中添加NCS(0.021 g，0.161 mmol)，且在50℃下加熱反應混合物17小時。在真空中移除大部分揮發性組分，且將殘餘物溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)，得到兩個分離部分(一個為GW5且第二個為GW6與GW7之混合物)。在真空中乾燥該等分離部分且得到淡黃色固體。分別將該兩個分離部分溶解於甲醇中，且經受逆相HPLC純化(ACN/TFA/水；Water-Sunfire 30×100 mm S5)，得到實例GW5、GW6及GW7之三氟乙酸鹽。實例GW5：1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.74(m,8H),5.02(m,2H),4.29-4.18(m,4H),3.90(m,2H),3.63(s,6H),3.41-3.33(m,4H),2.52(m,2H),2.39(brm,2H),2.01-1.79(m,4H),1.58-1.27(m,4H),1.18(d,J =6.5,5.63H),1.09(m,0.37H),0.93(d,J =6.8,3H),0.88(d,J =6.5,3H)。LC(條件2a及2b)：>95%均質性指數。LC/MS(條件1a): RT=2.81 min。LC/MS[M+H]+ C44 H55 Cl2 N8 O7 之分析計算值為877.36；實驗值為877.30。實例GW6：1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.86(s,1H),7.82-7.73(m,8H),5.19(dd,J =11,7,1H),4.98(dd,J =10.4,7.3,1H),4.33-4.19(m,4H),3.90(m,2H),3.67(m,0.35H),3.63/3.62(兩個重疊之『s』,5.65H),3.41-3.31(m,4H),2.65(m,1H),2.49(m,2H),2.38(m,1H),2.00-1.79(m,4H),1.57-1.27(m,4H),1.22/1.18(兩個重疊之『d』,分別為J =6.5/6.3,5.69H),1.09(m,0.31H),0.90/0.86(兩個重疊之『d』,J =6.8/6.8,6H)。LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC/MS(條件Ia): RT=2.25 min。LC/MS[M+H]+ C44 H56 ClN8 O7 之分析計算值為843.40；實驗值為843.24。實例GW7：1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.87-7.75(m,9H),5.19(dd,J =11.7.0,1H),4.99(dd,J =10.3,7.3,1H),4.38-4.17(m,4H),3.90(m,2H),3.64/3.62(兩個『s』,6H),3.41-3.26(『m』與溶劑信號部分重疊,4H),2.64(m,1H),2.50(m,2H),2.37(m,1H),2.03-1.79(m,4H),1.60-1.08(m,10H),0.92(d,J =6.8,3H),0.86(d,J =6.8,3H)。LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC/MS(條件1a): RT=2.24 min。LC/MS[M+H]+ C44 H56 ClN8 O7 之分析計算值為843.40；實驗值為843.24。
向GW3e(0.360 g，0.551 mmol)於DMF(9 mL)中之溶液中添加NCS(0.096 g，0.717 mmol)，且在50℃下加熱反應混合物15小時。用MeOH稀釋殘餘物，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)，得到呈淡黃色泡沫體之胺基甲酸酯GW8a之三氟乙酸鹽(20 mg)。亦分離GW3e之三氟乙酸鹽(60 mg)及單氯類似物(70 mg)。胺基甲酸酯GW8a：1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.83(app s,8H),4.95-4.79(『m』與溶劑信號部分重疊,2H),3.85-3.75(m,2H),3.14(m,2H),2.58-2.48(m,2H),2.44-2.30(m,2H),1.80-1.71(m,2H),1.43(s,6H),1.23(s,12H),1.14/1.12(兩個重疊之『s』,6H)。LC/MS(條件Ia): RT=2.98 min。LC/MS[M+H]+ C38 H47 ClN6 O4 之分析計算值為721.30；實驗值為721.39。
將4 N HCl之二噁烷溶液(3 mL)添加至GW8a之三氟乙酸鹽(55 mg，0.063 mmol)中，且在室溫下攪拌混合物5小時。在真空中移除溶劑，且在真空下乾燥殘餘物隔夜，得到呈棕色固體狀之吡咯啶GW8b之鹽酸鹽(50 mg)。LC/MS(條件Ia): RT=2.20 min。LC/MS[M+H]+ C28 H31 Cl2 N6 之分析計算值為521.20；實驗值為521.20。
實例GW8 向GW8b之鹽酸鹽(50 mg，0.075 mmol)於DMF(3 mL)中之懸浮液中添加(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(28.9 mg，0.165 mmol)、DIEA(0.079 mL，0.450 mmol)及HATU(58.7 mg，0.154 mmol)，且在室溫下攪拌混合物2小時。在真空中移除大部分揮發性組分，且將殘餘物溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10 Axia)，得到GW8之三氟乙酸鹽(淡黃色泡沫體；40 mg)。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.80-7.75(m,8H),5.01(dd,J =10.4,7.4,2H),4.26-4.17(m,4H),3.63(s,6H),3.38-3.33(m,2H),2.52-2.49(m,2H),2.45-2.33(m,2H),2.03-1.95(m,2H),1.87-1.79(m,2H),1.19(d,J =6.3,6H),0.92(d,J =6.8,6H),0.87(d,J =6.8,6H)。LC(條件2a及2b):>95%均質性指數。LC/MS(條件Ia): RT=2.89 min。LC/MS[M+H]+ C42 H53 Cl2 N8 O6 之分析計算值為835.35；實驗值為835.41。
實例GW9及實例GW 10
在-40℃(乾冰/丙酮浴)下，向GW3a-2(1.31 g，5.09 mmol)於THF(25 mL)中之溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(2.037 mL，6.11 mmol)。在相同溫度下攪拌2小時，隨後移除浴且再繼續攪拌1小時。添加乙酸(1 mL)、水(10 mL)及乙醚(50 mL)，振盪混合物且分離有機層。用水洗滌有機層，經Na2 SO4 乾燥且真空濃縮。將所得粗材料藉由急驟層析(5-95% EtOAc/己烷)純化，得到呈無色油狀之酯GW9a(0.6 g)。1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.24 ppm,400 MHz): 4.97(br d,J =8.3,1H),4.29(m,1H),3.74/3.73(重疊之『s』,3H),2.66(m,1H),2.27-2.22(m,0.21H),2.17(s,2.58H),2.10-2.02(m,1.22H),1.80-1.1.74(m,1H),1.43/1.40(重疊之『s』,9H),1.16(d,J =7.1,2.6H),1.05(d,J =6.8,0.4H)。
向酮GW9a(0.6 g，2.195 mmol)於DCM(15 mL)中之溶液中添加TFA(0.846 mL，10.98 mmol)，且在室溫下攪拌混合物7小時。在真空中移除揮發性組分，且在真空下乾燥隔夜，得到淡黃色油狀物(0.63 g)。將上述粗產物(0.5 g,1.8 mmol)於甲醇(20 mL)中之溶液添加至含有Pd/C(0.025 g，0.234 mmol)之500 mL帕爾振盪器瓶中。抽真空後且進行用氮氣重新填充(3×)，在60 psi下振盪混合物24小時。經濾紙過濾反應混合物，且在真空中移除揮發性組分，得到淡黃色油狀物(0.41 g)。向上述粗產物(0.48 g，1.77 mmol)於CH2 Cl2 (7 mL)中之溶液中添加DMAP(10.81 mg，0.088 mmol)、三乙胺(0.740 mL，5.31 mmol)。經15分鐘分數份添加二碳酸二第三丁酯(0.386 g，1.77 mmol)，且在室溫下攪拌混合物18小時。在真空中移除揮發性組分後，將粗材料藉由急驟層析(0-22% EtOAc/己烷)純化，得到兩個主要產物。第一個溶離的是GW9b-1(0.54 g)。1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.24 ppm,400 MHz)4.41/4.30(br m,1H),3.74(s,3H),3.48/3.33(br m,1H),2.37-2.22(m,0.2H),2.10-2.04(m,0.9H),1.98-1.19(m,0.9H),1.79(m,1H),1.46-1.32(m,12H),1.05/1.01/0.97(三個重疊之『d』,分別為J =6.8/6.6/6.3,3H)。第二個溶離的是GW9b-2,受未鑑別之雜質污染(0.48 g)。使用GW9b-2之潔淨分離部分獲得以下光譜資料：1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.24 ppm,400 MHz) 4.23-4.12(兩個重疊之『dd』,1H),4.00-3.85(兩個重疊之『m』,1H),3.72/3.71(重疊之『s』,3H),2.34-2.20(m,2H),1.69-1.55(1H),1.45/1.39(重疊之『s』,9H),1.13-1.01(m,3.13H),0.97(d,J =6.3,2.87H)。
向GW9b-1(3.73 g，14.50 mmol)於乙醇(40 mL)中之溶液中添加LiOH(0.417 g，17.39 mmol)於水(20.00 mL)中之溶液，且在室溫下攪拌混合物6小時。再添加LiOH(0.1 g，4.3 mmol)，且再繼續攪拌2小時。蒸發大部分有機組分，且用乙醚(20 mL)洗滌剩餘分離部分。用冰水浴冷卻水層，用1 N HCl酸化至pH值為2-3，用EtOAc(50 mL，4×)萃取，經Na2 SO4 乾燥且濃縮，得到無色油狀物，其在暴露於高真空之後變成白色固體(3.43 g)。藉助於使少量EtOAc處於回流條件之加熱槍，將固體溶解於少量EtOAc中。冷卻至室溫後，添加5滴己烷且在周圍溫度下靜置隔夜，得到呈白色針狀之酸GW9c，過濾且用己烷洗滌，在真空下乾燥(2.02 g)。1 H NMR(CDCl3 ,δ=7.24 ppm,400 MHz) 4.40(app dd,J =8.3,2.8,1H),3.30(br m,1H),2.50(br m,1H),2.01-1.93(m,1H),1.68-1.59(m,1H),1.52(s,9H),1.29(d,J =6.0,3H),1.07(d,J =6.8,3H)。實例GW9步驟d
自酸GW9c根據關於自酸GW3c製備前驅體GW3g描述之程序製備化合物GW9d(三氟乙酸鹽；淡黃色泡沫體)，其中例外為最終步驟採用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸。1 H NMR(MeOD,δ=3.30 ppm,400 MHz): 7.97-7.96(m,2H),7.88-7.82(m,8H),5.70(br d,J =6.7,0.6H),5.29(dd,J =10.3,1.2H),5.19-5.14(m,0.2H),~4.90(與HOD信號重疊,1H),4.38.(m,1H),4.12-4.06(m,2H),3.71/3.67/3.64(重疊之『s』,6H),2.73-2.68(m,0.6H),2.53-2.45(m,1.4H),2.35-2.18(m,2.5H),2.07-1.82(m,3.5H),1.53(d,J =6.8,3.6H),1.40(d,J =7.1,0.5H),1.30(d,J =7.1,1.9H),1.17-0.83(重疊之『d』之集合,18H)。LC(條件2a及2b):>95%均質性指數。LC/MS(條件Ia): RT=2.07 min。LC/MS[M+H]+ C44 H59 N8 O6 之分析計算值為795.46；實驗值為795.44。
實例GW9及實例GW 10向GW9d(三氟乙酸鹽；310 mg，0.328 mmol)於DMF(6 mL)中之溶液中添加NCS(62.5 mg，0.468 mmol)，且在50℃下加熱混合物9小時。在真空中移除大部分揮發性組分，且將殘餘物溶解於MeOH中，且經受逆相HPLC純化(MeOH/水/TFA；管柱：Phenomenex Luna,30×100 mm S10Axia)以分離單氯產物及二氯產物。將單氯產物用不同逆相HPLC條件(ACN/TFA/水，Water-Sunfire 30×100 mm S5)進一步純化。得到呈三氟乙酸鹽之實例GW9(淡黃色泡沫體；36 mg)及實例GW10(淡黃色泡沫體；60 mg)。實例GW9：1 H NMR(DMSO,δ=2.50 ppm,400 MHz): 12.71-12.64(br m,1H),8.10(br s,1H),7.95-7.83(m,8H),7.64-7.58(m,1.4H),7.51(d,J =8.6,0.6H),5.56(m,0.22H),5.33(m,0.33H),5.16(m,0.78H),5.04(m,0.67H),4.27-4.11(m,2H),3.93-3.86(『m』與H2 O信號重疊,2H),3.56-3.53(m,6H),2.62-1.64(『m』之集合,8H),1.50-0.75(『d』之集合,24H)。LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC/MS(條件Ia): RT=2.66 min。LC/MS[M+H]+ C44 H58 ClN8 O6 之分析計算值為829.42；實驗值為829.44。實例GW10：1 H NMR(DMSO,δ=2.50 ppm,400 MHz): 12.7(br m,2H),8.00-7.80(m,8H),7.63(m,0.76H),7.51(d,J =8.6,1.09H),7.08(m,0.09H),6.57(m,0.05H),5.33(d,J =6.3,0.74 H),5.05(app t,1.26H),4.25-4.12(m,2H),3.90-3.85(『m』與H2 O信號重疊,2H),3.58-3.49(m,6H),2.59-2.55(m,0.5H),2.33-2.13(m,2.7H),1.98-1.88(m,4.05H),1.71-1.63(m,0.75H),1.43(d,J =6.6,3.7H),1.18(d,J =6.3,2.05H),1.05-0.76(『d』之集合,18.25H)。LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC/MS(條件Ia): RT=3.29 min。LC/MS[M+H]+ C44 H57 Cl2 N8 O6 之分析計算值為863.38；實驗值為863.38。
實例GW 11及實例GW 12
根據關於實例GW9及實例GW10之製備描述之程序製備實例GW11及實例GW12，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)丁酸替代(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸。實例GW11(三氟乙酸鹽)：LC/MS(條件Ia): RT=2.57 min。LC/MS[M+H]+ C42 H54 ClN8 O6 之分析計算值為801.39；實驗值為801.38。實例GW12(三氟乙酸鹽)：LC/MS(條件Ia): RT=3.24 min。LC/MS[M+H]+ C42 H53 Cl2 N8 O6 之分析計算值為835.35；實驗值為835.31。
將吡咯啶1e/4HCl(455 mg，0.766 mmol)、(S)-2-(4,4-二氟環己基)-2-(甲氧基羰基胺基)乙酸(385 mg，1.532 mmol)、HATU(612 mg，1.609 mmol)及DIEA(0.803 mL，4.60 mmol)混合於DMF(30 mL)中，且在周圍溫度下攪拌所得黃色溶液3小時。在減壓下移除溶劑且將殘餘物再溶解於甲醇中且藉由製備型HPLC純化。(溶劑A：10%乙腈/90%水/10 mM NH4 OAc；溶劑B：90%乙腈/10%水/10 mM NH4 OAc；管柱：Sunfire Prep MS C18 30×150 mm S10；波長：220 nM；流速：40 ml/min；Gradient：10% B至75% B，30分鐘，保持時間為30分鐘)。回收對應於產物OL1a之灰白色固體(0.37 g，0.396 mmol)。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 11.67-12.26(2 H,m),7.80(4 H,d,J =7.93 Hz),7.67-7.76(1 H,m),7.65(4 H,d,J =8.24 Hz),7.54(2 H,s),7.23-7.35(2 H,m),5.07(2 H,dd,J =8.24,3.66 Hz),4.54(2 H,t,J =7.93 Hz),3.62(2 H,d,J =4.27 Hz),3.55(6 H,s),2.36(2 H,t,J =10.99 Hz),2.20-2.30(2 H,m),2.01(4 H,br. s.),1.57-1.85(9 H,m),1.19-1.53(6 H,m),0.92-1.08(2 H,m),0.71(2 H,br. s.)。LC(條件OL3): Rt =0.79 min。LC/MS: [M+H]+ C48 H55 F4 N8 O6 之分析計算值為915.42；實驗值為915.8。HPLC純度評估(條件OL4a)：Rt =23.12 min，均質性指數=98.4%。
實例OL1及實例OL2 將NCS(6.83 mg，0.051 mmol)添加至醯胺OL1a(39 mg，0.043 mmol)於DMF(2 mL)中之溶液，且加熱所得混合物至50℃後維持5小時。將反應混合物隨後藉由製備型HPLC純化。溶劑A：10%MeOH/90%水/0.1% TFA；溶劑B：90% MeOH/10%水/0.1% TFA；管柱：Sunfire Prep MS C18 30×100 mm 5u；波長：220 nM；流速：40 ml/min；梯度：0% B至75% B，30分鐘，保持時間為2分鐘。濃縮該等分離部分之後，分離實例OL1(15 mg)及實例OL2(16 mg)之三氟乙酸鹽。實例OL1：1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.11(1 H,s),7.74-8.00(8 H,m),7.40(1 H,d,J =8.55 Hz),7.28(1 H,d,J =8.24 Hz),4.91-5.05(2 H,m),4.48-4.59(2 H,m),3.74-3.87(2 H,m),3.62-3.71(1 H,m),3.55(3 H,s),3.54(3 H,s),2.19-2.43(6 H,m),1.66-2.07(19 H,m),1.56(1 H,d,J =10.38 Hz),1.26-1.48(5 H,m),0.89-1.02(2 H,m),0.81(1 H,s),0.70(1 H,br. s.)。LC(條件OL3): Rt =0.87 min。LC/MS:[M+H]+ C48 H54 ClF4 N8 O6 之分析計算值為949.38；實驗值為949.6。HPLC純度評估(條件OL4a): Rt =9.16 min，均質性指數=94.7%。實例OL2：1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 7.86(4 H,d,J =8.55 Hz),7.79(4 H,d,J =8.24 Hz),7.29(2 H,d,J =8.55 Hz),4.95(2 H,dd,J =8.55,4.88 Hz),4.52(2 H,t,J =7.63 Hz),3.67(2 H,t,J =4.58 Hz),3.54(6 H,s),2.21-2.40(4 H,m),2.01(4 H,br. s.),1.67-1.95(13 H,m),1.27-1.46(4 H,m),0.94-1.02(2 H,m),0.70(2 H,d)。LC(條件OL3): Rt =1.01 min。LC/MS:[M+H]+ C48 H53 Cl2 F4 N8 O6 之分析計算值為983.34；實驗值為983.7。HPLC純度評估(條件OL4a): Rt =12.25 min，均質性指數=94.7%。
實例OL3、實例OL4及實例OL5
將吡咯啶V9a(207 mg，0.377 mmol)、(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸(82 mg，0.377 mmol)、HATU(158 mg，0.415 mmol)及DIEA(0.132 mL，0.755 mmol)混合於DMF(5 mL)中，且在周圍溫度下攪拌所得黃色溶液3小時。將混合物藉由製備型HPLC純化。溶劑A：10% MeOH/90%水/0.1% TFA；溶劑B：90% MeOH/10%水/0.1% TFA；管柱：Sunfire Prep MS C18 30×100 mm 5u；波長：220 nM；流速：40 mil/min；梯度：20% B至80% B，30分鐘，保持時間為2分鐘。回收對應於胺基甲酸酯OL3a之三氟乙酸鹽之白色固體(0.19 g)[注意：除形式狀態以外，胺基甲酸酯OL3a與V9b相同]。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.18(1 H,br. s.),8.12(1 H,s),7.80-8.00(8 H,m),7.34(1 H,d,J =8.55 Hz),5.01(1 H,t,J =8.09 Hz),4.79-4.90(1 H,m),4.49(1 H,t,J =7.48 Hz),3.74-3.87(3 H,m),3.55(4 H,s),3.18-3.32(2 H,m),2.52-2.59(2 H,m),2.37(2 H,ddd,J =19.99,13.43,6.26 Hz),2.07(1 H,br. s.),1.92(1 H,dt,J =13.20,6.68 Hz),1.73(1 H,ddd,J =13.20,6.49,6.26 Hz),1.06-1.52(17 H,m),0.80(2 H,br. s.),0.74(1 H,br. s.)。LC(條件OL1): Rt =1.98 min。LC/MS: [M+H]+ C42 H50 N7 O6 之分析計算值為748.38；實驗值為748.52。
將胺基甲酸酯OL3a(0.19 g，0.195 mmol)溶解於CH2 Cl2 (15 mL)中，且向其中裝入4 N HCl之二噁烷溶液(3 mL，12.00 mmol)。在周圍溫度下攪拌所得懸浮液2小時，且在減壓下移除揮發物。回收對應於吡咯啶OL3b之鹽酸鹽(3×)之帶黃色固體(0.12 g)，其不經進一步純化即使用。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.14(1 H,s),7.83-8.01(10 H,m),7.34(1 H,d,J =8.55 Hz),5.06(1 H,t,J =7.93 Hz),4.73(1H,t,J =8.24 Hz),4.50(1 H,t,J =7.48 Hz),3.78-3.87(3 H,m),3.64-3.74(2 H,m),3.56(3 H,s),3.44-3.51(1 H,m),3.39-3.44(1 H,m),3.20-3.35(2 H,m),2.55-2.64(2 H,m),2.34-2.43(1 H,m),2.06-2.16(1 H,m),1.87-1.97(2 H,m),1.27-1.51(4 H,m),1.12(1 H,d,J =4.58 Hz),0.90-0.98(1 H,m),0.82-0.89(1 H,m),0.78(1 H,br. s.)。LC(條件OL2): Rt =2.51 min。LC/MS:[M+H]+ C37 H42 N7 O4 之分析計算值為648.33；實驗值為648.4。
將(S)-2-(4,4-二氟環己基)-2-(甲氧基羰基胺基)乙酸(87 mg，0.345 mmol)、吡咯啶OL3b之鹽酸鹽(3×)(261 mg，0.345 mmol)、HATU(144 mg，0.379 mmol)及DIEA(0.301 mL，1.724 mmol)混合於DMF(10 mL)中，且在周圍溫度下攪拌所得帶棕色溶液2小時。將樣品直接藉由製備型HPLC純化。溶劑A：10% MeOH/90%水/0.1% TFA；溶劑B：90% MeOH/10%水/0.1% TFA；管柱：Sunfire Prep MS C18 30×100 mm 5u；波長：220 nM；流速：40 mil/min；梯度：30% B至70% B，30分鐘，保持時間為2分鐘。回收對應於醯胺OL3c之三氟乙酸鹽(2×)之白色固體(132 mg，0.117 mmol，率產33.8%)。1 H NMR(500 MHz,DMSO -d 6 )δppm 11.68-12.18(2 H,m),7.78(3 H,t,J =8.39 Hz),7.73(1 H,d,J =9.46 Hz),7.66(4 H,d,J =8.55 Hz),7.54(2 H,dd,J =4.12,1.68 Hz),7.28(2 H,dd,J =19.68,8.39 Hz),5.08(2 H,ddd,J =8.39,4.12,3.97 Hz),4.46-4.58(2 H,m),3.82-3.94(2 H,m),3.61-3.67(2 H,m),3.54(6 H,d,J =1.53 Hz),3.24(2 H,t,J =11.29 Hz),2.33-2.41(2 H,m),2.21-2.31(2 H,m),1.91-2.08(4 H,m),1.75-1.89(6 H,m),1.58(1 H,d,J =13.43 Hz),1.40-1.52(2 H,m),1.26-1.40(3 H,m),0.97-1.07(2 H,m),0.67-0.79(2 H,m)。LC(條件OL1): Rt =1.94 min。LC/MS:[M+H]+ C47 H55 N8 O7 之分析計算值為881.42；實驗值為881.58。
實例OL3、實例OL4及實例OL5 將NCS(22.66 mg，0.170 mmol)添加至實例OL3c之三氟乙酸鹽(115 mg，0.131 mmol)於DMF(3 mL)中之溶液中，且加熱所得混合物至50℃後維持5小時。將混合物藉由製備型HPLC純化。溶劑A：05% MeCN/95%水/10 mM NH4 Ac；溶劑B：95% MeCN/5%水/10 mM NH4 Ac；管柱：Sunfire Prep MS C18 30×100 mm S10；波長：220 nM；流速：35 ml/min；梯度：10% B至100% B，30分鐘，保持時間為2分鐘。分離兩個分離部分，其中第一個溶離物對應於單氯化類似物(實例OL4及OL5)之混合物且第二個溶離物對應於雙氯化類似物(實例OL3)。濃縮對應的分離部分後，將混合物再溶解於甲醇中，且藉由製備型HPLC分離單氯化區域選擇性異構物。溶劑A：10%乙腈/90%水/0.1% TFA；溶劑B：90%乙腈/10%水/0.1% TFA；管柱：Phenomenex-Luna 21×100 mm S10；波長：220 nM；流速：25 ml/min；梯度：10%B至50%B，60分鐘，保持時間為2分鐘。分離呈三氟乙酸形式之對應於實例OL4及實例OL5之兩個分離部分，且其相對區域選擇性化學未測定。回收呈白色固體狀之實例OL3(36 mg)。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 12.55(2 H,d,J =1.22 Hz),7.87(4 H,d,J =8.24 Hz),7.78(4 H,d,J =7.02 Hz),7.27(2 H,dd,J =18.62,8.55 Hz),5.76(1 H,s),4.91-5.01(2 H,m),4.45-4.58(2 H,m),3.85(2 H,d,J =9.77 Hz),3.64-3.71(2 H,m),3.54(6 H,s),3.20-3.31(2 H,m),2.21-2.35(4 H,m),2.02(3 H,d,J =3.97 Hz),1.59-1.93(9 H,m),1.21-1.55(7 H,m),0.93-1.02(2 H,m),0.71(2 H,m)。LC(條件OL3): Rt =0.95 min。LC/MS:[M+H]+ C47 H53 Cl2 F2 N8 O7 之分析計算值為949.34；實驗值為949.8。HPLC純度評估(條件OL4b): Rt =11.10 min，均質性指數=100%。回收呈白色固體狀之實例OL4(10 mg)。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 14.62(1 H,br. s.),12.59(1 H,br. s.),8.12(1 H,br. s.),7.87(8 H,dd,J =19.38,8.09 Hz),7.80(2 H,d,J =7.63 Hz),7.40(1 H,d,J =8.85 Hz),7.26(1 H,d,J =8.24 Hz),5.00(1 H,t,J =7.93 Hz),4.95(1 H,dd,J =8.39,5.04 Hz),4.54(1 H,t,J =7.48 Hz),4.49(1 H,t,J =7.93 Hz),3.86(3 H,dd,J =11.44,2.59 Hz),3.79(1 H,br. s.),3.65-3.72(2 H,m),3.55(6 H,d,J =5.19 Hz),3.19-3.28(2 H,m),2.20-2.43(4 H,m),1.89-2.07(5 H,m),1.30-1.89(10 H,m),0.92-1.03(2 H,m),0.80(1 H,br. s.),0.72(1 H,br. s.)。LC(條件OL3): Rt =0.85 min。LC/MS:[M+H]+ C47 H54 ClF2 N8 O7 之分析計算值為915.38；實驗值為915.9。HPLC純度評估(條件OL4a): Rt =9.03 min，均質性指數=100%。回收呈白色固體狀之實例OL5(12 mg，產率7.96%)。1 H NMR(500 MHz,DMSO -d 6 )δppm 14.62(1 H,br. s.),12.59(1 H,br. s.),8.09(1 H,br. s.),7.87-7.98(4 H,m),7.84(2 H,d,J =8.24 Hz),7.80(2 H,d,J =8.24 Hz),7.35(1 H,d,J =8.24 Hz),7.29(1 H,d,J =8.55 Hz),4.91-5.03(2 H,m),4.51(2 H,ddd,- J =15.64,7.71,7.48 Hz),3.78-3.90(4 H,m),3.64-3.71(1 H,m),3.54(6 H,s),3.16-3.31(2 H,m),2.19-2.44(3 H,m),2.02(3 H,br. s.),1.64-1.95(7 H,m),1.27-1.54(6 H,m),0.96(2 H,dd,J =12.21,7.32 Hz),0.81(1 H,br. s.),0.70(1 H,br. s.)。LC(條件OL3): Rt =0.86 min。LC/MS:[M+H]+ C47 H54 ClF2 N8 O7 之分析計算值為915.38；實驗值為915.9。HPLC純度評估(條件OL4a)：Rt =8.11 min，質性指數=100%。
可以吡咯啶V1b/4HCl及Cap 179(對映異構物-1)為起始材料根據關於實例V1之合成描述之程序製備實例OL6(三氟乙酸鹽)。1 H NMR(400 MHz,DMSO -d 6 )δppm 8.11(1 H,br. s.),7.74-8.01(8 H,m),7.22-7.35(1 H,m),7.14(1 H,d,J =7.53 Hz),4.87-5.15(2 H,m),4.47(2 H,d,J =7.03 Hz),3.80(1 H,br. s.),3.65(1 H,br. s.),3.55(6 H,br. s.),3.36(4 H,br. s.),2.20-2.37(3 H,m),2.13(1 H,br. s.),1.90-2.05(2 H,m),1.85(1 H,br. s.),1.63-1.80(1 H,m),1.38-1.61(2 H,m),0.62-1.14(25 H,m)。LC(條件2a及2b): >95%均質性指數。LC(條件OL4c): Rt =0.85 min。LC/MS: [M+H]+ C50 H62 ClN8 O8 之分析計算值為937.44；實驗值為937.5。
經10分鐘，向(2S,2'S)-2,2'-(5,5'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-5,2-二基))二吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(500 mg，0.800 mmol)於AcOH(30 mL)中之溶液中逐滴添加溴(0.041 mL，0.800 mmol)之AcOH(0.8 mL)溶液。在室溫下攪拌所得反應混合物隔夜，用飽和NaHCO3 中和，隨後用CH2 Cl2 萃取。經MgSO4 乾燥有機層且真空濃縮。將所得粗材料藉由急驟層析(矽膠；依次為1:1 EtOAc/Hex及2:1 EtOAc/Hex)純化，得到呈白色固體狀之溴化物OL7a.1(200 mg)及二溴化物OL7a.2(140 mg)(注意：二溴化物首先自管柱中溶離)。
在室溫下攪拌環丙基酸(13.49 mg，0.157 mmol)、磷酸三鉀(90 mg，0.423 mmol)於水(0.03 mL)中之混合物15分鐘。隨後添加溴化物OL7a.1(85 mg，0.121 mmol)、乙酸鉛(II)(2.71 mg，0.012 mmol)、三環己基膦(6.8 mg，0.024 mmol)及甲苯(1 mL)，且在110℃下攪拌反應混合物隔夜。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物藉由製備型HPLC使用以下條件純化。管柱：WATERS-Sunfire OBD 19×100 mm S5；溶劑A=10% ACN-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% ACN-10% H2 O-0.1% TFA；起始%B=10；最終%B=75；流速=20 ml/min；梯度時間=20 min。得到呈淡黃色固體狀之偶合產物OL7b.1之三氟乙酸鹽(79 mg)。
用微波在110℃下加熱二溴化物OL7a.2(140 mg，0.179 mmol)、環丙基酸(40.0 mg，0.465 mmol)、乙酸鉛(II)(8.03 mg，0.036 mmol)、磷酸三鉀(266 mg，1.252 mmol)、三環己基膦(20.07 mg，0.072 mmol)於甲苯(1.5 mL)及水(0.05 mL)中之混合物1.5小時。LCMS顯示無反應。過濾混合物，且真空濃縮濾液，且將所得粗產物藉由製備型HPLC純化：管柱=WATERS-Sunfire OBD 19×100 mm S5；溶劑A=10% ACN-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% ACN-10% H2 O-0.1% TFA；起始%B=10。最終%B=70；流速=20 ml/min；梯度時間=20 min。獲得呈淡黃色固體狀之偶合產物OL7b.2之三氟乙酸鹽。
向以上製備之胺基甲酸酯OL7b(79 mg)於CH2 Cl2 (2 mL)中之溶液中添加HCl(2 mL，8.00 mmol)(4 N二噁烷溶液)，且在室溫下攪拌所得混合物30分鐘。在真空中移除揮發性組分，得到OL7c之鹽酸鹽(69 mg)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。
實例OL7向(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(20.09 mg，0.115 mmol)、吡咯啶OL7/4 HCl(35 mg，0.057 mmol)於DMF(1 mL)中之混合物中添加DiPEA(0.06 mL，0.34 mmol)及HATU(43.6 mg，0.115 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，隨後添加氨(2 mL，2 M甲醇溶液)，且再繼續攪拌1小時。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物藉由製備型HPLC純化：管柱=WATERS Sunfire C18 19×100 mm 5u；溶劑A=10% MeOH-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90%MeOH-10% H2 O-0.1% TFA；起始%B=10；最終%B=75；流速=25 ml/min；梯度時間=18 min。獲得呈灰白色固體狀之實例OL7之三氟乙酸鹽(24 mg)。Rt=1.68 min(條件OL5a)。(M+H)+ 779.47。1 H NMR(500 MHz,DMSO -d 6 )δppm 8.12(1 H,br. s.),7.97(4 H,dd,J =12.97,8.39 Hz),7.86-7.92(2 H,m),7.80(2 H,d,J =8.24 Hz),7.32(2 H,t,J =8.70 Hz),5.14(1 H,t,J =7.02 Hz),5.05(1 H,t,J =7.48 Hz),4.12(2H,t,J =6.71 Hz),3.76-3.92(4 H,m),3.54(6 H,s),2.39(2 H,d,J =6.10 Hz),1.95-2.21(9 H,m),1.08(2 H,d,J =8.24 Hz),0.84(7 H,t,J =7.17 Hz),0.79(6 H,d,J =6.41 Hz),0.67-0.74(1 H,m)實例OL8-OL14藉由採用適當的前驅體及關於實例OL7之製備描述之程序製備呈三氟乙酸鹽形式之實例OL8-OL14。
在140℃下在微波中，加熱溴化物OL7a.1(200 mg，0.284 mmol)、CsF(0.021 mL，0.568 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (19.71 mg，0.017 mmol)及2-烯丙基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環(0.107 mL，0.568 mmol)於THF(3 mL)中之混合物1小時。在真空中移除溶劑，且將殘餘物藉由製備型HPLC純化。管柱：Phenomenex Luna 10u(30×100 mm)；溶劑A=5% CH3 CN-95% H2 O-10 mm NH4 Oac；溶劑B=95% CH3 CN-5% H2 O-10 mm NH4 OAc；起始%B=30；最終%B=00；流速=25 ml/min；梯度時間=48 min。獲得呈白色固體狀之產物OL15a(90 mg)。
實例OL15根據關於實例OL7之合成描述之程序將胺基甲酸酯OL15a精製成實例OL15之三氟乙酸鹽。Rt=1.73 min(條件OL5a)。(M+H)+ 779.53。
自適當的前驅體根據關於實例OL15之合成描述之程序製備實例OL16(三氟乙酸鹽)。Rt=1.73 min(條件OL5a)。(M+H)+ 863.11。
在0℃下，向OL15a(70 mg，0.105 mmol)、二碘甲烷(0.102 mL，1.263 mmol)於甲苯(0.5 mL)中之溶液中快速添加二乙基鋅(1.263 mL，1.263 mmol)(1 M庚烷溶液)。在0℃下攪拌所得混合物1.5小時，隨後在室溫下攪拌4小時。向混合物中添加飽和NaHCO3 水溶液，且用CH2 Cl2 萃取混合物。經MgSO4 乾燥合併之有機層且濃縮。將殘餘物藉由製備型HPLC純化：管柱：Phenomenex Luna 10u(30×100 mm)；溶劑A=5% CH3 CN-95% H2 O-10 mm NH4 Oac；溶劑B=95% CH3 CN-5% H2 O-10 mm NH4 OAc；起始%B=30；最終%B=100；流速=25 ml/min；梯度時間=25 min。將所得材料(白色固體，40 mg)溶解於CH2 Cl2 (1 mL)中，且用HCl(1 mL，4.00 mmol)(4 N二噁烷溶液)處理。在室溫下攪拌混合物1小時。在真空中移除揮發性組分，得到產物(35 mg)，根據關於實例OL7之合成描述之程序使之與(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸偶合。將所獲得之粗殘餘物藉由製備型HPLC純化：管柱=WATERS Sunfire C18 19×100 mm 5u；溶劑A=10% MeOH-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA；起始%B=20；最終%B=85；流速=25 ml/min；梯度時間=27 min。分離兩個分離部分，其中第一個溶離物對應於實例OL18之三氟乙酸鹽(Rt=1.74 min(條件OL5a)。(M+H)+ 793.54)且第二個溶離物對應於實例OL17之三氟乙酸鹽(Rt=1.77 min(條件OL5a)。(M+H)+ 793.53)
在室溫下攪拌1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)-1H-吡唑(59.1 mg，0.284 mmol)、磷酸三鉀(121 mg，0.568 mmol)於水(0.2 mL)中之混合物15分鐘。隨後添加溴化物OL7a.1(100 mg，0.142 mmol)、Pd(Ph3 P)4 (9.85 mg，0.008 mmol)及DMF(2 mL)，且在130℃下在微波輻射下攪拌反應混合物40分鐘。在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物藉由製備型HPLC使用以下條件純化。管柱：Phenomenex Luna 10u(30×100 mm)；溶劑A=10% ACN-90% H2 O-10 mm NH4 OAc；溶劑B=90% ACN-10% H2 O-10 mm NH4 OAc；起始%B=10；最終%B=80；流速=25 ml/min；梯度時間=15 min。得到呈淡黃色固體狀之偶合產物OL19a(120 mg)。
向以上製備之胺基甲酸酯OL19a(120 mg)於CH2 Cl2 (1 mL)中之溶液中添加HCl(1 mL，4.00 mmol)(4 N二噁烷溶液)，且在室溫下攪拌所得混合物1小時。在真空中移除揮發性組分，得到OL19b之鹽酸鹽(87 mg)，其不經進一步純化即用於下一步驟中。實例OL19向(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-3-甲基丁酸(15.30 mg，0.087 mmol)、吡咯啶OL19b/4 HCl(30 mg，0.044 mmol)於DMF(1 mL)中之混合物中添加DiPEA(0.053 mL，0.306 mmol)及HATU(33.2 mg，0.087 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，在真空中移除揮發性組分，且將殘餘物藉由製備型HPLC純化：管柱=WATERS Atlantis OBD 30×100 mm 5u；溶劑A=10% MeOH-90% H2 O-0.1% TFA；溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA；起始%B=20；最終%B=75；流速=25 ml/min；梯度時間=25 min。獲得呈白色固體狀之實例OL19之三氟乙酸鹽(33 mg)。Rt=1.63 min(條件OL5a)。(M+H)+ 819.40。1 H NMR(500 MHz,DMSO-d 6 )δppm 8.13(1 H,s),7.88-7.96(2 H,m),7.78-7.88(4 H,m),7.57(1 H,br. s.),7.43-7.51(2 H,m),7.33(2 H,dd,J =8.39,3.51 Hz),6.42(1 H,br. s.),5.10-5.18(2 H,m),4.11(2 H,td,J =7.93,2.75 Hz),3.78-3.91(4 H,m),3.59-3.66(3 H,m),3.54(6 H,d,J =1.53 Hz),2.35-2.45(1 H,m),2.30(1 H,d,J =7.32 Hz),2.13-2.22(2 H,m),1.93-2.13(6 H,m),0.89(5 H,d,J =6.71 Hz),0.83(6 H,t,J =6.87 Hz),0.78(3 H,d,J =6.71 Hz)。實例OL20-OL25藉由採用適當的前驅體及關於實例OL19之製備描述之程序製備呈三氟乙酸鹽形式之實例OL20-OL25。
將二苯基磷醯基疊氮化物(17.09 mL，79 mmol)添加至6-溴-2-萘甲酸(16.5 g，65.7 mmol)、三乙胺(18.32 mL，131 mmol)及第三丁醇(7.54 mL，79 mmol)於甲苯(225 mL)中之溶液中，且在100℃下攪拌4小時。藉由旋轉蒸發移除揮發物，且將殘餘物溶解於EtOAc(500 mL)中，且用水及鹽水洗滌。濃縮後形成沈澱，藉由過濾分離且用1:1 Et2 O/Hex洗滌，得到實例DSTL-1步驟a(10.5 g)。濃縮母液後，分離第二次純度較小產物之收穫(9.8 g)；綜合產率(93%)。LC/MS(條件J4): RT=3.44 min。LC/MS[M+Na]+ C15 H16 BrNO2 之分析計算值為345.02；實驗值為345.03。
用乙酸(50 mL)稀釋實例DSTL-1步驟a(5 g，15.52 mmol)，且經20分鐘逐滴添加發菸硝酸(2.3 mL)。攪拌反應物2小時，且藉由過濾分離產物，分配在DCM與飽和NaHCO3 溶液之間。濃縮有機層，且獲得5.7 g實例DSTL-1步驟b(定量)。LC/MS(條件J4): RT=3.52 min。LC/MS[M+Na]+ C15 H15 BrN2 O4 之分析計算值為390.02.；實驗值為390.99。實例DSTL-1步驟c
將去水氯化錫(II)(3 g，16.34 mmol)添加至實例DSTL-1步驟b(2 g，5.47 mmol)於MeOH(100 mL)中之溶液中，且在70℃下攪拌溶液18小時。藉由旋轉蒸發移除溶劑，且在高真空下乾燥實例DSTL-1步驟c(假定理論值為1.25 g)。LC/MS(條件J4): RT=1.49 min。LC/MS[M+H]+ C10 H9 BrN2 之分析計算值為237.00；實驗值為236.96。
將HATU(2.085 g，5.48 mmol)添加至實例DSTL-1步驟c(1.25 g，5.48 mmol)、實例1步驟b(1.246 g，5.48 mmol)及休尼格鹼(Hunig's base)(7.09 g，54.8 mmol)於DMF(70 mL)中之溶液中，且攪拌反應混合物6小時，隨後分配在EtOAc(500 mL)與飽和NaHCO3 (150 mL)之間。藉由經由矽藻土過濾移除沈澱之錫鹽，且濃縮有機相，得到殘餘物，將殘餘物溶解於AcOH(100 mL)中，且在60℃下加熱18小時。藉由在高真空下旋轉蒸發移除溶劑，且將殘餘物溶解於CH2 Cl2 中，且用飽和NaHCO3 溶液洗滌。濃縮後，將粗產物裝載(DCM)於湯普森矽膠柱體(110 g)且進行梯度溶離；15-100% B，1 L，得到實例DSTL-1步驟d(420 mg，44%)。LC/MS(條件J4): RT=2.51 min。LC/MS[M+H]+ C21 H22 BrN3 O2 之分析計算值為430.10；實驗值為430.06。
自實例1步驟b根據專利申請案WO 2008/021927中關於去甲烷類似物之合成描述之程序製備實例DSTL-1步驟d.1。
向實例DSTL-1步驟d.1(560 mg，1.39 mmol)於DMF(15 mL)中之溶液中添加NCS(203 mg，1.52 mmol)。在50℃下加熱反應混合物16小時。用氮氣沖洗溶液以蒸發DMF，且將粗殘餘物裝載(DCM)於湯普森SiO2 管柱(80 g)且進行梯度溶離(BIOTAGE)。區段1：10-100% B，1.5 L。區段2：保持100% B 300 mL。(A/B己烷/EtOAc)。得到分離之實例DSTL-1步驟e(589.1 mg，產率92%)。LC/MS(條件-D4): RT=2.61 min。LC/MS[M+Na]+ C19 H22 ClN3 O2 之分析計算值為462.04；實驗值為462.07。
將肆(三苯基膦)鈀(76 mg，0.066 mmol)一次性添加至於螺旋蓋壓力容器中的實例DSTL-1步驟e(580 mg，1.32 mmol)、雙(頻那醇酯基)二硼(671 mg，2.64 mmol)及乙酸鉀(324 mg，3.30 mmol)於二噁烷(12 mL)溶液中之經攪拌懸浮液中。將反應混合物抽真空，且用氬氣(3×)沖洗並置放於預熱油浴(80℃)中且攪拌16小時。冷卻後，用EtOAc稀釋反應混合物，用飽和NaHCO3 溶液、鹽水洗滌且經Na2 SO4 乾燥。將粗殘餘物裝載(DCM)於湯普森SiO2 管柱(80 g)且進行梯度溶離(BIOTAGE)。區段1：5-100% B，1.5 L。區段2：保持100% B 300 mL。(A/B CH2 Cl2 /EtOAc)。得到呈黃色泡沫體之分離之實例DTSL-1步驟f(714.7 mg，95%)。LC/MS(條件-D4)：RT=2.69 min。LC/MS[M+H]]+ C25 H34 BClN3 O4 之分析計算值為486.24；實驗值為486.26。
在氬氣下，將肆(三苯基膦)鈀(27.0 mg，0.023 mmol)一次性添加至於螺旋蓋壓力容器中的實例DSTL-1步驟d(200 mg，0.467 mmol)、實例DSTL-1步驟f(250 mg，0.514 mmol)及NaHCO3 (196 mg，2.335 mmol)於DME(4 mL)及水(1 mL)之經脫氣溶液中的經攪拌懸浮液中。將溶液抽真空，且裝入氬氣(3×)並置放於預熱油浴(80℃)中且攪拌14小時。用EtOAc(10 mL)、THF(2 mL)及MeOH(1 mL)稀釋混合物，用鹽水洗滌且經Na2 SO4 乾燥。濃縮移除溶劑後，將殘餘物裝載於湯普森SiO2 管柱(80 g)且梯度溶離(BIOTAGE)。區段1：20-100% B，1.5 L。區段2：保持100% B 300 mL；A/B己烷/EtOAc。得到呈黃褐色固體狀之分離之DSTL-1步驟g(195.0 mg，52.6%)。LC/MS(條件-D4): RT=2.40 min。LC/MS[M+H]+ C40 H44 ClN6 O4 之分析計算值為707.31；實驗值為707.43。
將冷(0℃)4 N HCl之二噁烷(4 mL)添加至實例DSTL-1步驟g(65 mg，0.092 mmol)於MeOH(1 mL)中之經攪拌溶液中。在室溫下攪拌混合物3小時，濃縮，且置放於高真空下，提供呈橙褐色固體狀且呈四鹽酸鹽之DSTL-1步驟h。LC/MS(條件-D4): RT=1.63 min。LC/MS[M+H]+ C30 H28 ClN6 之分析計算值為507.21；實驗值為507.26。實例DSTL-1 自實例DSTL-1步驟h根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-1。藉由製備型HPLC(0-50% B)經25分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA)。得到呈白色固體狀之分離之實例DSTL-1(70.4 mg，67.7%)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 8.47(d,J =8.6 Hz,1H),8.44(s,1H),8.15(s,1H),8.13(s,1H),7.91(d,J =8.6 Hz,2H),7.85(d,J =8.6 Hz,2H),7.80(d,J =8.6 Hz,1H),5.34-5.31(m,1H),5.07(t,J =7.32 Hz,1H),4.61-4.58(m,2H),3.39-3.31(m,1H),3.75-3.72(m,1H),3.69(s,3H),3.68(s,3H),2.83-2.81(m,1H),2.64-2.59(mm,1H),2.49-2.48(m,2H),2.23-2.14(m,3H),2.05-2.03(m,1H),1.18-1.12(m,2H),1.05-0.92(m,13H),0.83-0.81(m,1H)。LC/MS(條件-D4): RT=2.24 min。LC/MS[M+H]+ C44 H50 ClN8 O6 之分析計算值為821.36；實驗值為821.54。
自實例DSTL-1步驟h根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-2，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸代替Cap-51。藉由製備型HPLC(0-50% B)經25分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈白色固體狀之分離之實例DSTL-2(18.0 mg)。LC/MS(條件-D4): RT=2.04 min。LC/MS[M+H]+ C48 H54 ClN8 O6 之分析計算值為905.38；實驗值為905.60。
將溴(0.079 mL，1.54 mmol)於AcOH(1 mL)中之溶液逐份添加至實例1步驟d(1.0 g，1.541 mmol)於AcOH(40 mL)中之經攪拌溶液中，且在室溫下攪拌混合物3小時。在真空中移除溶劑，且將殘餘物溶解於DCM中，且用飽和NaHCO3 溶液洗滌。再用DCM萃取水層兩次，且用鹽水洗滌合併之有機萃取物且乾燥(Na2 SO4 )。將殘餘物裝載(DCM)於湯普森矽膠柱體(160 g)且用30-100% B，2 L溶離。區段2：保持100% B，800 mL。A/B己烷/EtOAc。得到分離之3種組分；起始材料(303.6 mg)；實例DSTL-3步驟a(X=H；382.1 mg)；黃色固體。LC/MS(條件-D4): RT=2.21 min。LC/MS[M+H]+ C38 H44 BrN6 O4 之分析計算值為729.26；實驗值為729.28；實例DTSL-4步驟a(X=Br；287.2 mg)；淡黃色固體。LC/MS(條件-D4): RT=2.62 min。
LC/MS[M+H]+ C38 H43 Br2 N6 O4 之分析計算值為807.17；實驗值為807.33。
將實例DSTL-3步驟b及DSTL-4步驟b之產物分開進行進一步操作。如實例DSTL-1步驟h之程序中所述，進行保護基之脫除。X=H；實例DTSL-3步驟b：黃色固體，33.1 mg(97%純)；LC/MS(條件-D4): RT=1.49 min。LC/MS[M+H]+ C28 H28 BrN6 之分析計算值為529.16；實驗值為529.24。X=Br；實例DTSL-4步驟b：黃色固體，33 mg(96%純)；LC/MS(條件-D4): RT=1.82 min。LC/MS[M+H]+ C28 H27 Br2 N6 之分析計算值為607.07；實驗值為607.16。實例DSTL-3 自實例DSTL-3步驟b根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-3。藉由製備型HPLC(0-50%B)經30分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈白色固體狀之分離之實例DSTL-3(29.0 mg)。LC/MS(條件-D4): RT=2.07 min。LC/MS[M+H]+ C42 H50 BrN8 O6 之分析計算值為843.30；實驗值為843.39。
實例DSTL-4 自實例DSTL-4步驟b根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-4。藉由製備型HPLC(0-50%B)經30分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈白色固體狀之分離之實例DSTL-4(30.2 mg)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 7.82(s,8H),5.08-5.05(m,2H),4.58(app d,J =6.7 Hz,2H),3.76-3.74(m,2H),3.67(s,6H),2.57-2.52(m,2H),2.50-2.44(m,2H),2.22-2.17(m,2H),2.06-2.01(m,2H),1.12-1.08(m,2H),1.04(d,J =6.7 Hz,6H),0.95(d,J =6.7 Hz,6H),0.84-0.82(m,2H)。LC/MS(Cond-D4): RT=2.56 min。LC/MS[M+H]+ C42 H49 BrN8 O6 之分析計算值為921.31；實驗值為921.30。
在室溫下，將Accufluor(45-50%於礬土上)(345 mg，1.2 mmol)一次性添加至實例1步驟d(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(5,5'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-5,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯)(500 mg，0.77 mmol)於無水DMF(5 mL)中之經攪拌懸浮液中。將混合物置放於60℃之預熱油浴中且攪拌4小時，隨後在高真空下藉由旋轉蒸發移除溶劑。將粗產物裝載於湯普森90 g矽膠柱體，且用10-100%B，2 L溶離，且保持100% B，1 L(溶劑B=EtOAc；溶劑A=己烷)。運用第二梯度，用0-100%B，2 L溶離(溶劑B=甲醇；溶劑A=EtOAc)。收集三個分離部分：呈黃色固體狀之實例DSTL-5步驟a(X=F)(1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(5,5'-(聯苯-4,4'-二基)雙(4-氟-1H-咪唑-5,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯)(45.0 mg，7%)；呈黃色固體狀之實例DSTL-5步驟a(X=H)((1R,3S,5R)-3-(5-(4'-(2-((1R,3S,5R)-2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-基)聯苯-4-基)-4-氟-1H-咪唑-2-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(193 mg，32%)，及回收之起始材料(153 mg，24%)。實例DSTL-5步驟a X=F：將第一溶離化合物之樣品(約10 mg)藉由製備型HPLC(0-100% B)經30分鐘之梯度(40 ml/min)使用Phenomenex Luna管柱(30×100 mm，10u)進一步純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。分離得到淡黃色固體(4.6 mg)。LC/MS(條件-D4): RT=4.43 min。LC/MS[M+H]+ C38 H43 F2 N6 O4 之分析計算值為685.33；實驗值為685.38。
實例DSTL-5步驟a X=H：將第二溶離化合物之樣品(約15 mg)藉由製備型HPLC(0-100% B)經30分鐘之梯度(40 ml/min)使用Phenomenex Luna管柱(30×100 mm，10u)進一步純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。分離得到灰白色固體(11.2 mg)。LC/MS(條件-D4): RT=4.43 min。LC/MS[M+H]]+ C38 H44 FN6 O4 之分析計算值為667.34；實驗值為667.40。
將實例DSTL-5步驟a(X=F)及(X=H)之產物分開進行進一步操作。如實例DSTL-1步驟h之程序所述，進行保護基之脫除。實例DTSL-5步驟b(X=F)：黃色固體，23.4 mg；LC/MS(條件-D4): RT=2.89 min。LC/MS[M+H]+ C28 H27 F2 N6 之分析計算值為485.22；實驗值為485.25。實例DTSL-5步驟b(X=H)：18 mg(95%純)；LC/MS(條件-D4): RT=2.55 min。LC/MS[M+H]+ C28 H28 FN6 之分析計算值為467.25；實驗值為467.27。實例DSTL-5
自實例DSTL-5步驟b(X=H)根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-5。藉由製備型HPLC(0-50%B)經30分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈淺黃色固體狀之分離之實例DSTL-5(37.3 mg，39%)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 7.88(s,1 H),7.84(d,J =8.5 Hz,2H),7.80(d,J =8.5 Hz,2H),7.77(d,J =8.5 Hz,2H),7.68(d,J =8.5 ,2H),5.13(t,J =7.0 Hz,1H),5.04(t,J =6.1 Hz,1H),4.56(d,J =6.7 Hz,2H) 3.82(br. s,1H),3.68-3.67(m,7H),2.72-2.68(m,1H),2.51-2.43(m,3H),2.21-2.14(m,2H),2.09(br. s,1H),2.03(br. s,1H),1.15-1.09(m,2H),1.02(d,J =6.7 Hz,6H),0.94(t,J=7.0 Hz,6H),0.90(br. s,1H),0.81(br. s,1H)。LC/MS(條件-D4): RT=3.45 min。LC/MS:[M+H]+ C42 H50 FN8 O6 之分析計算值為781.39；實驗值為781.54。
自實例DSTL-5步驟b(X=H)根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-6，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸代替Cap-51。藉由製備型HPLC(0-50% B)經25分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95%H2 O-0.1% TFA。得到呈白色固體狀之分離之實例DSTL-6(37.1 mg，36%)。LC/MS(條件-D4): RT=3.17 min。LC/MS[M+H]+ C48 H54 FN8 O6 之分析計算值為865.41；實驗值為865.55。
自實例DSTL-5步驟b(X=F)根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-7，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸代替Cap-51。藉由製備型HPLC(0-50% B)經25分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95%H2 O-0.1% TFA。得到呈白色固體狀之分離之實例DSTL-7(14 mg，25%)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ)7.72(d,J =8.5 Hz,4H),7.64(d,J =8.5 Hz,4H),5.03(t,J =6.7 Hz,2H),4.63(d,J =7.6 Hz,2H),3.97-3.93(m,4H),3.72(br. s,2H),3.67(s,6H),3.42-3.37(m,4H),2.44-2.42(m,4H),2.02(br. s,4H),1.63-1.57(m,6H),1.46-1.43(m,2H),1.14-1.19(m,2H),0.80(br. s,2H)：LC/MS(條件-D4): RT=3.17 min。LC/MS[M+H]+ C46 H53 F2 N8 O6 之分析計算值為883.40；實驗值為883.57。
在室溫下，將Accufluor(45-50%於礬土上)(274 mg，0.92 mmol)一次性添加至實例GW1步驟a(2S,2'S,5S,5'S)-5,5'-(5,5'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-5,2-二基))雙(2-甲基吡咯啶-1-甲酸第三丁酯)(400 mg，0.6 mmol)於無水DMF(4 mL)中之經攪拌懸浮液中。將混合物置放於60℃之預熱油浴中且攪拌4小時，隨後再添加135 mg Accufluor，且在60℃下繼續攪拌16小時。藉由在高真空下旋轉蒸發移除溶劑，且將粗產物裝載於湯普森90 g矽膠柱體，且用10-100% B，2L溶離，且保持100% B，1 L(溶劑B=EtOAc；溶劑A=己烷)。運用第二梯度，用0-100%B，2 L溶離(溶劑B=甲醇；溶劑A=EtOAc)。收集三個分離部分：呈黃橙色固體狀之實例DSTL-8步驟a(X=F)(2S,2'S,5S,5'S)-5,5'-(5,5'-(聯苯-4,4'-二基)雙(4-氟-1H-咪唑-5,2-二基))雙(2-甲基吡咯啶-1-甲酸第三丁酯)(33 mg，5.1%)。LC/MS(條件-D4): RT=4.64 min。LC/MS[M+H]+ C38 H47 F2 N6 O4 之分析計算值為689.36；實驗值為689.50。呈黃橙色固體狀之實例DSTL-8步驟a(X=H)(2S,5S)-2-(5-(4'-(2-((2S,5S)-1-(第三丁氧基羰基)-5-甲基吡咯啶-2-基)-1H-咪唑-5-基)聯苯-4-基)-4-氟-1H-咪唑-2-基)-5-甲基吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(108.6 mg，17%)。LC/MS(條件-D4): RT=3.83 min。LC/MS[M+H]+ C38 H48 FN6 O4 之分析計算值為671.37；實驗值為671.48。及呈紅橙色固體狀之回收之起始材料(321.2 mg，80%)。
將實例DSTL-8步驟a(X=F)及(X=H)之產物分開進行進一步操作。如實例DSTL-1步驟h之程序所述，進行保護基之脫除。實例DTSL-8步驟b(X=F)：黃色固體，22.7 mg；LC/MS(條件-D4): RT=3.03 min。LC/MS[M+H]+ C28 H30 F2 N6 之分析計算值為489.26；實驗值為489.35。實例DTSL-8步驟b(X=H)：35 mg(95%純)；LC/MS(條件-D4): RT=2.63 min。LC/MS[M+H]+ C28 H31 FN6 之分析計算值為471.27；實驗值為471.33。實例DSTL-8 自實例DSTL-8步驟b(X=H)根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-5。藉由製備型HPLC(0-50% B)經30分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈淡桃色固體狀之分離之實例DSTL-8(31.9 mg，41%)。LC/MS(條件-D4): RT=3.66 min。LC/MS[M+H]+ C42 H54 FN8 O6 之分析計算值為785.42；實驗值為785.48。
自實例DSTL-8步驟b(X=H)根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-9，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸代替Cap-51。藉由製備型HPLC(0-50% B)經25分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且 A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈淺黃色固體狀之分離之實例DSTL-9(27.2 mg，32%)。LC/MS(條件-D4): RT=3.37 min。LC/MS[M+H]+ C46 H58 FN8 O8 之分析計算值為869.44；實驗值為869.54.
自實例DSTL-8步驟b(X=F)根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-10，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸代替Cap-51。藉由製備型HPLC(0-50%B)經25分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈淺黃色固體狀之分離之實例DSTL-10(13.8 mg，25%)。LC/MS(條件-D4): RT=4.28 min。LC/MS[M+H]+ C46 H57 F2 N8 O8 之分析計算值為887.43；實驗值為887.50。
實例DSTL -11
以與專利申請案20080213 US 10889A USCIP中化合物J5類似之方式進行DSTL-11步驟a之製備。LC/MS(條件-D4): RT=2.22 min。LC/MS[M+H]+ C22 H27 BrN3 O4 之分析計算值為476.12；實驗值為478.17。
將5 N氫氧化鈉(1.469 mL，7.4 mmol)添加至DSTL-11步驟a(1R,3S,5R)-3-(4-(4-溴苯基)-5-(乙氧基羰基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(1.75 g，3.7 mmol)於乙醇(40 mL)中之溶液中。在50℃下攪拌混合物16小時且再添加5 N NaOH(1.5 mL)。在60℃下攪拌混合物6小時，且再添加5 N NaOH(0.75 mL)且在60℃下繼續攪拌16小時。藉由旋轉蒸發移除乙醇，且將殘餘物溶解於乙酸乙酯中，且中和至pH=5(約20 mL 1 N HCl直至接近於pH=7，隨後用pH=5之磷酸鹽緩衝液中和)。分離有機層，用鹽水洗滌，乾燥且濃縮。得到呈白色固體狀之分離之實例DSTL-11步驟b(1.6 g，92%)。LC/MS(條件-D4): RT=1.78 min。LC/MS[M+H]+ C20 H22 BrN3 O4 之分析計算值為448.09；實驗值為447.97。
將CDI(0.58 g，3.57 mmol)一次性添加至DSTL-11步驟b 4-(4-溴苯基)-2-((1R,3S,5R)-2-(第三丁氧基羰基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-5-甲酸(1.6 g，3.57 mmol)於無水THF(30 mL)中之經攪拌溶液中。在50℃下攪拌混合物4小時，隨後冷卻至室溫且添加NH4 OH(濃)(4.96 mL，35.7 mmol)。先攪拌混合物16小時，用EtOAc稀釋，用飽和NaHCO3 溶液、鹽水洗滌且乾燥。將粗產物裝載於湯普森160 g矽膠柱體且用40-100% B，3 L溶離，接著保持在100% B，1 L。(溶劑B=EtOAc；溶劑A=己烷)。分離實例DSTL-11步驟c(1.76 g，99%)。LC/MS(條件-D4): RT=1.75 min。LC/MS[M+H]+ C20 H24 BrN4 O3 之分析計算值為449.10；實驗值為449.06。實例DSTL- 11步驟d
將2,4,6-三氯-1,3,5-三嗪(氰尿醯氯)(168 mg，0.91 mmol)一次性添加至實例DSTL-11步驟c(1R,3S,5R)-3-(4-(4-溴苯基)-5-胺甲醯基-1H-咪唑-2-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(903 mg，1.82 mmol)於無水DMF(4 mL)中之經攪拌溶液中。攪拌混合物2小時，隨後溫至50℃後維持16小時。再添加氰尿醯氯(20 mg)，且再在50℃下進一步攪拌混合物24小時，用EtOAc及水稀釋，且用飽和NaHCO3 溶液、鹽水洗滌有機層且乾燥(Na2 SO4 )。將粗產物裝載於湯普森90 g矽膠柱體，且用25-100%B，1.5 L溶離，接著保持在100% B，500 mL。(溶劑B=EtOAc；溶劑A=己烷)。得到呈黃褐色泡沫體之分離之實例DSTL-11步驟d(346 g，60%)。LC/MS(條件-D4): RT=3.93 min。LC/MS[M+H]+ C20 H22 BrN4 O2 之分析計算值為431.09；實驗值為431.01。
將肆(三苯基)鈀(45.8 mg，0.04 mmol)添加至於厚壁式有螺旋蓋管中之實例DSTL-11步驟d(1R,3S,5R)-3-(5-(4-溴苯基)-4-氰基-1H-咪唑-2-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(340 mg，0.79 mmol)、(1R,3S,5R)-3-(4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊環-2-基)苯基)-1H-咪唑-2-基)-2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-2-甲酸第三丁酯(393 mg，0.871 mmol)及NaHCO3 (333 mg，3.96 mmol)於DME(6 mL)及水(1.5 mL)中之經氬氣沖洗之懸浮液中。用氬氣沖洗反應混合物，密封且浸於預熱油浴(80℃)中且攪拌14小時。用EtOAc稀釋混合物，用飽和NaHCO3 溶液、鹽水洗滌且乾燥(Na2 SO4 )。將粗產物裝載於湯普森90 g矽膠柱體，且用35-100% B，1.5 L溶離，接著保持在100% B，0.5 L。(溶劑B=EtOAc；溶劑A=己烷)。得到呈淡黃色泡沫體之分離之實例DSTL-11步驟e(200 mg，36%)。將小樣品(約20 mg)藉由製備型HPLC(0% B-100% B，經25分鐘之梯度，40 ml/min)使用Phenomenex Gemini管柱(30×100 mm，10u)進行進一步純化，其中溶劑B=95% CH3 CN-5% H2 O-10 mM NH4 OAc且A=5% CH3 CN-95% H2 O-10 mM NH4 OAc。(12.9 mg)。LC/MS(條件-D4): RT=3.51 min。LC/MS[M+H]+ C39 H44 N7 O4 之分析計算值為674.35；實驗值為674.29。
如實例DSTL-1步驟h之程序所述，脫除保護基後獲得實例DSTL-11步驟f之產物。LC/MS(條件-D4): RT=2.36 min。LC/MS[M+H]+ C29 H28 N7 之分析計算值為474.24；實驗值為474.13。
實例DSTL -11自實例DSTL-11步驟f根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-11。藉由製備型HPLC(0-50% B)經30分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈灰白色固體狀之分離之實例DSTL-11(21.5 mg，31%)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 7.93-7.82(m,9 H),5.15-5.08(m,2H),4.58-4.56(m,2H),3.82(br. s,1H),3.72(br. s,1H) 3.67(s,6H),2.73-2.67(m,1H),2.50-2.46(m,3H),2.21-2.14(m,2H),2.09(br. s,1H),2.03(br. s,1H),1.14-1.10(m,2H),1.05-1.02(m,6H),0.97-0.93(m,6H),0.90(br. s,1H),0.83(br. s,1H)。LC/MS(條件-D4): RT=3.25 min。LC/MS[M+H]+ C43 H50 N9 O6 之分析計算值為780.39；實驗值為788.31。
自實例DSTL-11步驟f根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例DSTL-12，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸代替Cap-51。藉由製備型HPLC(0-50% B)經25分鐘之梯度(40 ml/min)使用Waters-SunFire管柱(30×100 mm，S5)實現純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% CH3 CN-95% H2 O-0.1% TFA。得到呈灰白色固體狀之分離之實例DSTL-12(26.7 mg，35%)。LC/MS(條件-D4): RT=2.98 min。LC/MS[M+H]+ C47 H54 N9 O8 之分析計算值為872.41；實驗值為872.35。
關於實例JLR-1步驟a之合成，參見方法專利申請案WO 2009/020825。
將1 M溴於AcOH(0.4 mL)中之溶液添加至實例JLR-1步驟a(250 mg，0.40 mmol)於乙酸(15 mL)中之溶液中，且攪拌3小時。將反應混合物傾入DCM(100 mL)上且用飽和NaHCO3 溶液及固體NaHCO3 處理直至pH=中性。濃縮有機相且在真空下乾燥。反應得到起始材料：單溴化物：二溴化物之1:1:1混合物，施用(DCM)於湯普森SiO2 管柱(25 g)後分離。梯度溶離(BIOTAGE)(15-100 %B，500 mL)得到實例JLR-1步驟b(180 mg)。LC/MS(條件J4): RT=2.75 min。LC/MS[M+H]+ C36 H44 BrN6 O4 之分析計算值為705.26；實驗值為705.22。
將4 N HCl於二噁烷中之溶液(4 mL)添加至實例JLR-1步驟b(38 mg，0.054 mmol)之MeOH(4 mL)溶液中且攪拌4小時。在真空下移除溶劑，且在高真空下乾燥四鹽酸鹽。LC/MS(條件J4): RT=1.75 min。LC/MS[M+H]+ C26 H28 BrN6 之分析計算值為503.16；實驗值為503.26。
實例JLR-1 自實例JLR-1步驟c根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例JLR-1。藉由製備型HPLC phenonmenex-Luna管柱(30×100 mm，S10)經25分鐘之梯度自15-100%B(40 ml/min)進行純化，其中溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA且A=5%MeOH-95%H2 O-0.1%TFA。LC/MS(條件J4)：RT=2.61 min。LC/MS[M+H]+ C40 H50 BrN8 O6 之分析計算值為819.31；實驗值為819.23。
將碘(162 mg，0.640 mmol)添加至實例JLR-1步驟a(400 mg，0.640 mmol)及NaHCO3 (161 mg，1.921 mmol)於二噁烷(15 mL)及水(15 mL)中之溶液中，且攪拌反應物6小時，用10% Na2 S2 O3 溶液(40 mL)淬滅且用EtOAc/THF(2:1)稀釋。濃縮有機相，且將粗產物施用(DCM)於湯普森矽膠管柱(40 g)且用35-100% B，1 L(A/B DCM/EtOAc)溶離，得到起始材料、二碘化物(255 mg)及實例JLR-2步驟a(46 mg，9%)之混合物。LC/MS(條件J4): RT=2.45 min。LC/MS[M+H]+ C36 H44 IN6 O4 之分析計算值為751.24；實驗值為751.18。
將4 N HCl於二噁烷中之溶液(5 mL)添加至JLR-2步驟a(46 mg，0.061 mmol)之MeOH(5 mL)溶液中且攪拌4小時。在真空下移除溶劑，且在高真空下乾燥四鹽酸鹽。LC/MS(條件J4): RT=1.70 min。LC/MS[M+H]+ C26 H28 IN6 之分析計算值為551.13；實驗值為551.09。實例JLR-2 自實例JLR-2步驟b根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例JLR-2。藉由半製備型HPLC；Dynamax 6A半製備型C8管柱；5%-95%B經30分鐘(20 ml/min)進行純化，其中溶劑B=90% CH3 CN-10% H2 O-1% NH4 OAc且A=5% CH3 CN-95% H2 O-1% NH4 OAc。LC/MS(條件J4): RT=2.35 min。LC/MS[M+H]+ C40 H50 IN8 O6 之分析計算值為865.29；實驗值為865.31。
將NCS(175 mg，1.310 mmol)添加至實例DSTL-1步驟d(510 mg，1.191 mmol)於DMF(10 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌18小時。藉由在高真空下旋轉蒸發移除溶劑，且將殘餘物裝載(DCM)於湯姆森矽膠柱體(80 g)。自25-100% B，750 mL(A/B Hex/EtOAc)進行梯度溶離，得到實例JLR-3步驟a(250 mg，46%)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 8.58(s,1H),8.39(d,J =8.6 Hz,1H),7.97(s,1H),7.93(d,J =7.6 Hz,1H),4.98(s,1H),3.70(s,1 H),2.76-2.71(m,1H),2.50-2.45(m,1H),1.86(s,1H),1.48/1.12(s,9H),0.96-0.92(m,1H),0.79-0.77(m,1H)。LC/MS(條件J4): RT=3.13 min。LC/MS[M+H]+ C21 H22 BrClN3 O2 之分析計算值為464.06；實驗值為464.05。
自實例DSTL-1步驟d.1根據專利申請案WO 2008/021927中關於其去甲烷類似物之製備描述之程序製備實例JLR-3步驟a.1。
自實例JLR-3步驟a及實例JLR-3步驟a.1根據關於實例DSTL-1步驟g之製備描述之程序製備實例JLR-3步驟b來得到實例JLR-3步驟b。LC/MS(條件J4): RT=2.72 min。LC/MS[M+H]+ C40 H44 ClN6 O4 之分析計算值為707.31；實驗值為707.44。
自實例JLR-3步驟b根據關於DSTL-3步驟a之製備描述之程序製備實例JLR-3步驟c來得到實例JLR-3步驟c。LC/MS(條件J4): RT=3.30 min。LC/MS[M+H]+ C40 H43 BrClN6 O4 之分析計算值為787.21；實驗值為787.34。
自實例JLR-3步驟c根據實例JLR-1步驟b之程序中描述之程序製備實例JLR-3步驟d。LC/MS(條件J4): RT=2.37 min。LC/MS[M+H]+ C30 H27 BrClN6 之分析計算值為587.12；實驗值為587.14。
實例JLR-3 自實例JLR-3步驟d根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例JLR-3。藉由製備型HPLC phenonmenex-Luna管柱(30×100 mm，S10)經18分鐘之梯度自15-100%B(40 ml/min)進行純化，其中溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% MeOH-95% H2 O-0.1% TFA。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 8.69-8.68(m,1H),8.52-8.50(m,1H),8.18-8.16(m,1H),7.98-7.96(m,1H),7.91-7.90(m,4H),5.34-5.34(m,1H),5.09-5.06(m,1H),4.62-4.58(m,2H),3.91(br s,1H),3.76(br s,1H)3.69(s,6H),2.77-2.73(m,1H),2.64-2.59(m,1H),2.51-2.48(m,2H),2.23-2.16(m,3H),2.06(br s,1H),1.17-1.12(m,2H),1.06-0.92(m,13H),0.83(m,1H)。LC/MS(條件J4): RT=3.14 min。LC/MS[M+H]+ C44 H4 BrClN8 O6 之分析計算值為901.27；實驗值為901.45。
將休尼格鹼(1.2 g，9 mmol)添加至2-溴-1-(4-溴苯基)乙酮(2.5 g，8.99 mmol)及(2S,5S)-1-(第三丁氧基羰基)-5-甲基吡咯啶-2-甲酸(1.9 g，8.29 mmol)於乙腈(75 mL)中之溶液中，且在24℃下攪拌6小時。濃縮反應混合物，且將殘餘物溶解於EtOAc中且用水洗滌。濃縮得到白色固體，其溶解於二甲苯(90 mL)。添加乙酸銨(4.23 g，70.4 mmol)，且在135℃下在螺旋蓋壓力容器中攪拌溶液3.5小時。用EtOAc(400 mL)稀釋反應混合物且用飽和NaHCO3 溶液洗滌且濃縮。將粗產物裝載(DCM)於80 g湯姆森矽膠柱體，且自15-100% B，1 L(A/B Hex/EtOAc)進行梯度溶離，得到實例JLR-4步驟a(產率未測定)。LC/MS(條件J4): RT=2.21 min。LC/MS[M+H]+ C19 H25 BrN3 O2 之分析計算值為406.12；實驗值為406.10。[注意：關於起始甲酸之合成，參見專利申請案US2009/0068140]
將NCS(161 mg，1.21 mmol)添加至實例JLR-4步驟a(700 mg，1.7 mmol)於DMF(10 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌18小時。再添加NCS(50 mg)，且繼續反應6小時，隨後藉由氮氣沖洗移除溶劑。將粗產物裝載(DCM)於40 g湯普森矽膠柱體，且自15-100% B，750 mL(A/B Hex/EtOAc)進行梯度溶離，得到實例JLR-4步驟b(580 mg，70%)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 7.62(appr s,4H),4.77(br. s,1H),4.03(br. s,1H),2.24(br s,2H),2.16-2.11(m,1H) 1.79(br. s,1H),1.47-1.25(m,12H)。LC/MS(條件J4): RT=3.33 min。LC/MS[M+H]+ C19 H24 BrClN3 O2 之分析計算值為440.08；實驗值為440.0。實例JLR-4步驟c
將EEDQ(1.67 g，6.75 mmol)添加至實例DSTL-1步驟c(1.6 g，6.75 mmol)及(2S,5S)-1-(第三丁氧基羰基)-5-甲基吡咯啶-2-甲酸(1.55 g，6.75 mmol)於DCM(100 mL)中之溶液中，且攪拌6小時。(注意：雙苯胺不完全可溶)。用DCM(1 vol)稀釋反應混合物且用一半飽和NaHCO3 溶液洗滌。濃縮得到固體(2.5 g)。LC/MS(條件J4): RT=3.07 min。LC/MS[M+H]+ C21 H27 BrN3 O3 之分析計算值為448.13；實驗值為448.11。將粗固體(2.5 g，5.58 mmol)溶解於AcOH(200 mL)中，且在60℃下攪拌18小時。在高真空下濃縮移除溶劑。將殘餘物溶解於DCM中，用飽和NaHCO3 溶液洗滌且濃縮。將殘餘物裝載(DCM)於80 g湯普森矽膠柱體且自15%至100% B，750 mL(A/B Hex/EtOAc)進行梯度溶離，得到實例JLR-4步驟c(2.6 g)。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 8.36-8.35(m,2H),8.0(d,J =9Hz,1H),7.91(dd,J =9,2 Hz,1H),7.87(d,J =9 Hz,1H),5.31-5.28(m,1H),4.17(br. s,1H),2.59-2.56(m,1H),2.39-2.31(m,2H) 1.86-1.83(m,1H),1.52-1.19(m,12H)。LC/MS(條件J4): RT=2.57 min。LC/MS[M+H]+ C21 H25 BrN3 O2 之分析計算值為430.12；實驗值為430.09。實例JLR-4步驟d
自實例JLR-4步驟c根據關於實例DSTL-1步驟f之製備描述之程序製備實例JLR-4步驟d。LC/MS(條件J4): RT=2.86 min。LC/MS[M+H]+ C27 H37 BN3 O4 之分析計算值為478.29；實驗值為478.25。
自實例JLR-4步驟d及實例JLR-4步驟b根據關於DSTL-1步驟g之製備描述之程序製備實例JLR-4步驟e來得到實例JLR-4步驟e。1 H NMR(MeOD,500 MHz,δ): 8.53(d,J =8.6 Hz,1H),8.49(s,1H),8.20(dd,J =8.6,2 Hz,2H),7.97(d,J =8.6 Hz,2H),7.92(d,J =8.6 Hz,2H),7.88(d,J =8.9 Hz,1H),5.32(t,J =6.4 Hz,1H),4.85(br. s,1H),4.20(br. s,1H),4.06(br. s,1H),2.59-2.58(m,1H),2.44-2.28(m,4H),2.19-2.15(m,1H),1.89-1.84(m,1H),1.83-1.79(m,1H),1.54-1.20(m,24H)。LC/MS(條件J4): RT=3.18 min。LC/MS[M+H]+ C40 H48 ClN6 O4 之分析計算值為711.34；實驗值為711.31。實例JLR-4步驟f
自實例JLR-4步驟e根據關於實例JLR-1步驟b之製備描述之程序製備實例JLR-4步驟f來得到實例JLR-4步驟f。LC/MS(條件J4): RT=2.19 min。LC/MS[M+H]+ C30 H32 ClN6 之分析計算值為511.24；實驗值為711.23。實例JLR-4 自實例JLR-4步驟f根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例JLR-4。藉由製備型HPLC Luna Axia管柱(30×100 mm，C18)經25分鐘之梯度自15-100%B(40 ml/min)進行純化，其中溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% MeOH-95% H2 O-0.1% TFA。LC/MS(條件J4): RT=3.12 min。LC/MS[M+H]+ C44 H54 ClN8 O6 之分析計算值為825.39；實驗值為825.31。
自實例實例JLR-4步驟f根據關於實例GW2之製備描述之程序製備實例JLR-5，其中例外為使用(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-(四氫-2H-哌喃-4-基)乙酸。藉由製備型HPLCLuna Axia管柱(30×100 mm，C18)經25分鐘之梯度自15-100%B(40 ml/min)進行純化，其中溶劑B=90% MeOH-10% H2 O-0.1% TFA且A=5% MeOH-95% H2 O-0.1% TFA。LC/MS(條件J4): RT=2.85 min。LC/MS[M+H]+ C48 H58 ClN8 O6 之分析計算值為909.41；實驗值為909.39。
將HATU(151 mg，0.40 mmol)添加至4,4'-雙(2-((1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)聯苯之鹽酸鹽(實例1e)(107 mg，0.18 mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸(cap-177a)(86 mg，0.40 mmol)於DMF(1.5 mL)及DIPEA(0.25 mL，1.4 mmol)中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物2小時。用MeOH稀釋反應混合物，且藉由製備型HPLC(含0.1% TFA緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈淡黃色固體狀之(S,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(148.5 mg)。LC/MS滯留時間=1.61 min；m/z=847[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.80-7.91(m,10 H),5.13(dd,J =9.3,7.0 Hz,2 H),4.79(d,J =8.3 Hz,2 H),3.84-3.97(m,2 H),3.70-3.80(m,4 H),3.68(s,6 H),3.52-3.63(m,2 H),3.34-3.42(m,2 H),2.61-2.75(m,2 H),2.43-2.54(m,2 H),1.98-2.15(m,4 H),1.67-1.84(m,4 H),1.48-1.65(m,4 H),0.98-1.16(m,2 H),0.77-0.93(m,2 H)。實例ZY1 將NCS(8.2 mg，0.061 mmol)添加至(S,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY1步驟a)(33 mg，0.031 mmol)於DMF(1 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1% TFA緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(S,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(5-氯-1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY1)(25 mg)。LC/MS滯留時間=1.92 min；m/z=458[M/2+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=95%水/5%甲醇/10 mM乙酸銨。溶劑B=5%水/95%甲醇/10 mM乙酸銨。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=2 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.77-7.85(m,8 H),5.03(dd,J =8.8,6.0 Hz,2 H),4.75-4.86(m,2 H),3.71-3.89(m,6 H),3.67(s,6 H),3.36-3.62(m,4 H),2.38-2.57(m,4 H),1.94-2.12(m,4 H),1.69-1.87(m,4 H),1.46-1.65(m,4 H),1.03-1.17(m,2 H),0.77-0.85(m,2 H)。
將HATU(140 mg，0.37 mmol)添加至4,4'-雙(2-((1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)聯苯之鹽酸鹽(實例1e)(100 mg，0.17 mmol)及(S)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸(cap-177b)(80 mg，0.37 mmol)於DMF(1.5 mL)及DIPEA(0.23 mL，1.3 mmol)中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物3小時。隨後用MeOH稀釋反應混合物，且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(R,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY2步驟a)(76.2 mg)。LC/MS滯留時間=1.53 min；m/z=847[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 7.75-7.96(m,10 H),5.13(dd,J =9.3,7.0 Hz,2 H),4.60(d,J =8.3 Hz,2 H),3.77-3.95(m,6 H),3.67(s,6 H),3.24-3.47(m,4 H),2.62-2.76(m,2 H),2.40-2.57(m,2 H),1.97-2.19(m,4 H),1.54-1.82(m,6 H),1.36-1.54(m,2 H),1.00-1.17(m,2 H),0.79-0.93(m,2 H)。
實例ZY2 將NCS(5.2 mg，0.039 mmol)添加至(R,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY2步驟a)(21 mg，0.020 mmol)於DMF(1 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。隨後用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1% TFA緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(R,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(5-氯-1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY2)(10.8 mg)。LC/MS滯留時間=1.92 min；m/z=458[M/2+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=95%水/5%甲醇/10 mM乙酸銨。溶劑B=5%水/95%甲醇/10 mM乙酸銨。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=2 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.76-7.87(m,8 H),5.04(dd,J =8.8,6.0 Hz,2 H),4.61(d,J =8.3 Hz,2 H),3.75-3.95(m,6 H),3.66(s,6 H),3.35-3.48(m,4 H),2.39-2.58(m,4 H),1.97-2.16(m,4 H),1.73-1.87(m,2 H),1.40-1.73(m,6 H),1.01-1.16(m,2 H),0.81(d,J =1.8 Hz,2 H)。
將HATU(82 mg，0.22 mmol)添加至4,4'-雙(2-((1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)聯苯之鹽酸鹽(實例1e)(58.3 mg，0.098 mmol)及(R)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸(cap 117c)(49 mg，0.23 mmol)於DMF(1 mL)及DIPEA(0.14 mL，0.79 mmol)中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物3小時。隨後用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(R,1R,1'R)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY3步驟a)(79.8 mg)。LC/MS滯留時間=1.63 min；m/z=847[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。
實例ZY3
將NCS(6.7 mg，0.050 mmol)添加至(R,1R,1'R)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY3步驟a)(27 mg，0.025 mmol)於DMF(1 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。隨後用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(R,1R,1'R)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(5-氯-1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY3)(15.8 mg)。LC/MS滯留時間=1.93 min；m/z=458[M/2+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=95%水/5%甲醇/10 mM乙酸銨。溶劑B=5%水/95%甲醇/10 mM乙酸銨。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=2 min。波長=220)。
將HATU(75 mg，0.20 mmol)添加至4,4'-雙(2-((1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)聯苯之鹽酸鹽(實例1e)(53.5 mg，0.090 mmol)及(R)-2-(甲氧基羰基胺基)-2-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙酸(cap117d)(45 mg，0.21 mmol)於DMF(1 mL)及DIPEA(0.13 mL，0.72 mmol)溶液中，且在室溫下攪拌混合物3小時。隨後用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(S,1R,1'R)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY4步驟a)(78.5 mg)。LC/MS滯留時間=1.57 min；m/z=847[M+H]+。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。
實例ZY4
將NCS(9.2 mg，0.069 mmol)添加至(S,1R,1'R)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY4步驟a)(37 mg，0.034 mmol)於DMF(1 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。隨後用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(S,1R,1'R)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(5-氯-1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY4)(25 mg)。LC/MS滯留時間=1.93 min；m/z=458[M/2+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=95%水/5%甲醇/10 mM乙酸銨。溶劑B=5%水/95%甲醇/10 mM乙酸銨。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=2 min。波長=220)。
將NCS(5.3 mg，0.039 mmol)添加至(S,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((S)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY1步驟a)(42.4 mg，0.039 mmol)的DMF(1 mL)溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。隨後用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈三氟乙酸鹽形式之實例ZY5(11.7 mg，白色固體)。LC/MS滯留時間=2.04 min；m/z=881[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.76-7.92(m,9 H),5.13(dd,J =9.2,6.9 Hz,1 H),5.04(dd,J =8.0,6.5 Hz,1 H),4.74-4.80(m,2 H),3.71-3.94(m,6 H),3.68(s,3 H),3.67(s,3 H),3.36-3.63(m,4 H),2.63-2.75(m,1 H),2.40-2.55(m,3 H),1.95-2.15(m,4 H),1.67-1.86(m,4 H),1.45-1.65(m,4 H),1.03-1.18(m,2 H),0.84-0.91(m,1 H),0.75-0.83(m,1 H)。
實例ZY6
將NCS(1.1 mg，8.4 μmol)添加至(R,1S,1'S)-2,2'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(2-側氧基-1-((R)-四氫-2H-哌喃-3-基)乙烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY2步驟a)(8.1 mg，8.4 μmol)的DMF(1 mL)溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。隨後用MeOH稀釋反應物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之實例ZY6之三氟乙酸鹽(2.2 mg)。LC/MS滯留時間=2.01 min；m/z=881[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.77-7.90(m,9 H),5.12(dd,J =9.2,6.9 Hz,1 H),5.05(dd,J =7.9,6.1 Hz,1 H),4.58-4.96(m,2 H),3.71-3.94(m,6 H),3.68(s,3 H),3.66(br .s.,3 H),3.34-3.46(m,4 H),2.64-2.75(m,1 H),2.40-2.54(m,3 H),1.96-2.16(m,4 H),1.40-1.85(m,8 H),1.04-1.18(m,2 H),0.84-0.92(m,1 H),0.79(m,1 H)。
實例ZY7
實例ZY7步驟a
將HATU(95 mg，0.25 mmol)添加至4,4'-雙(2-((1R,3S,5R)-2-氮雜雙環[3.1.0]己-3-基)-1H-咪唑-4-基)聯苯之鹽酸鹽(實例1e)(67.6 mg，0.114 mmol)及(S)-4-甲氧基-2-(甲氧基羰基胺基)丁酸(實例ZY7步驟a)(50 mg，0.26 mmol)於DMF(1 mL)及DIPEA(0.16 mL，0.91 mmol)中之溶液中，且在室溫下攪拌混合物3小時。用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(2S,2'S)-1,1'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(4-甲氧基-1-側氧基丁烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY7步驟a)(96.4 mg)。LC/MS滯留時間=1.53 min；m/z 795[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.78-7.97(m,10 H),5.16(dd,J =9.2,6.7 Hz,2 H),4.76-4.83(m,2 H),3.75-3.84(m,2 H),3.66(s,6 H),3.45-3.56(m,4 H),3.32(s,6 H),2.68(dd,J =13.4,9.4 Hz,2 H),2.42-2.53(m,2 H),2.01-2.23(m,4 H),1.80-1.95(m,2 H),1.05-1.18(m,2 H),0.78-0.98(m,2 H)。
實例ZY7
將NCS(9.7 mg，0.073 mmol)添加至(2S,2'S)-1,1'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(4-甲氧基-1-側氧基丁烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY7步驟a)(29 mg，0.036 mmol)於DMF(1 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之(2S,2'S)-1,1'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(5-氯-1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(4-甲氧基-1-側氧基丁烷-2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY7)(7.9 mg)。LC/MS滯留時間=2.51 min；m/z=863[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.82(s,8 H),5.07(dd,J =8.5,5.8 Hz,2 H),4.75-4.83(m,2 H),3.70-3.76(m,2 H),3.66(s,6 H),3.44-3.54(m,4 H),3.32(s,6 H),2.39-2.57(m,4 H),1.98-2.21(m,4 H),1.82-1.94(m,2 H),1.05-1.19(m,2 H),0.78-0.92(m,2 H)。
實 例ZY8
將NCS(5.6 mg，0.042 mmol)添加至(2S,2'S)-1,1'-((1R,1'R,3S,3'S,5R,5'R)-3,3'-(4,4'-(聯苯-4,4'-二基)雙(1H-咪唑-4,2-二基))雙(2-氮雜雙環[3.1.0]己烷-3,2-二基))雙(4-甲氧基-1-側氧基丁烷--2,1-二基)二胺基甲酸二甲酯之三氟乙酸鹽(實例ZY7步驟b)(33.3 mg，0.042 mmol)於DMF(1 mL)中之溶液中，且在50℃下攪拌混合物16小時。用MeOH稀釋反應混合物，過濾且藉由製備型HPLC(含0.1%三氟乙酸緩衝液之H2 O-MeOH)純化，得到呈白色固體狀之實例ZY8之三氟乙酸鹽(9.4 mg)。LC/MS滯留時間=1.99 min；m/z=829[M+H]+ 。(管柱：Phenonenex-Luna 3.0×50 mm S10。溶劑A=90%水：10%甲醇：0.1% TFA。溶劑B=10%水：90%甲醇：0.1% TFA。流速=4 mL/min。起始%B=0。最終%B=100。梯度時間=3 min。波長=220)。1 H NMR(400 MHz,MeOD )δppm 7.77-7.91(m,9 H),5.15(dd,J =9.2,6.7 Hz,1 H),5.07(t,J =7.0 Hz,1 H),4.77-4.83(m,2 H),3.76-3.83(m,1 H),3.68-3.75(m,1 H),3.66(s,6 H),3.44-3.56(m,4 H),3.33(s,6 H),2.63-2.75(m,1 H),2.41-2.56(m,3 H),1.97-2.23(m,4 H),1.80-1.95(m,2 H),1.06-1.19(m,2 H),0.87-0.96(m,1 H),0.84(m,1 H)。
生物學活性
在本發明中使用HCV複製子檢定，且如共同擁有之PCT/US2006/022197及O'Boyle等人，Antimicrob Agents Chemother . 49(4):1346-1353(2005年4月)中所述進行製備、執行及驗證。亦如所描述(Apath.com)，使用合併螢光素酶報導體之檢定方法。
使用HCV-neo複製子細胞及於NS5A區中含有抗性取代之複製子細胞測試當前所述之化合物家族。經測定，相對於針對野生型細胞之對應抑制效能，該化合物對含有突變之細胞的抑制活性有不同程度之減小。因此，本發明之化合物可有效抑制HCV NS5A蛋白質之功能，且應瞭解其組合之效力與先前於申請案PCT/US2006/022197及共同擁有之WO 04/014852中所述者相同。應瞭解，本發明之化合物可抑制HCV之多種基因型。表2展示本發明之代表性化合物針對HCV 1b基因型的EC50 (有效50%抑制濃度)值。在一個實施例中，本發明之化合物針對1a、1b、2a、2b、3a、4a及5a基因型具有抑制性。針對HCV 1b之EC50 值如下。針對HCV 1b之EC50 值如下：A=0.2 pM-<1 pM；B=1 pM-<10 pM；及C=10 pM-<100 pM；及D=100 pM-0.15 μM。
本發明化合物抑制HCV之機制可為除了NS5A抑制性以外附加之機制或為NS5A抑制性以外之不同機制。在一個實施例中，本發明之化合物抑制HCV複製子，且在另一實施例中，本發明之化合物抑制NS5A。
熟習此項技術者將顯而易知，本發明並不限於上述說明性實例，且其可在不背離其基本屬性之情況下以其他特定形式來實施。因此，適宜地，該等實例自各個方面而言皆應視為說明性而非限制性的，參考係針對隨附申請專利範圍而非上述實例而進行，且因此本發明意欲涵蓋在申請專利範圍之等效性意義及範圍內之所有變化。

Claims (20)

  1. 一種式(I)化合物， 或其醫藥學上可接受之鹽，其中：n為0、1或2；X係選自氫、烯基、氰基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵基及雜環基；R1 係選自氫及鹵基；R2 係選自氫、烯基、氰基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵基及雜環基；或R1 與R2 連同其所連接之碳原子一起形成六員芳族環，視情況經一個鹵基取代；其限制條件為X及R2 中之至少一者係選自烯基、氰基、環烷基、(環烷基)烷基、鹵基及雜環基；各R3 為烷基，其中該烷基可視情況與相鄰碳原子一起形成三員或四員稠合環或與其所連接之碳原子一起形成三員或四員螺環；其中該稠合環及該螺環視情況經一或兩個烷基取代；各R4 獨立地選自氫及-C(O)R5 ；及各R5 獨立地選自烷氧基、烷基、芳基烷氧基、芳基烷基、環烷基、雜環基、雜環烷基、(NRc Rd )烯基及 (NRc Rd )烷基，其中該Rc 及Rd 係獨立地選自氫、烯氧基羰基、烷氧基烷基羰基、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、烷基磺醯基、芳基、芳基烷氧基羰基、芳基烷基、芳基烷基羰基、芳基羰基、芳基氧基羰基、芳基磺醯基、環烷基、環烷基氧基、環烷基氧基羰基、環烷基磺醯基、甲醯基、鹵基烷氧基羰基、雜環基、雜環基烷氧基羰基、雜環基烷基、雜環基烷基羰基、雜環基羰基、雜環基氧基羰基、羥基烷基羰基、(NRe Rf )烷基、(NRe Rf )烷基羰基、(NRe Rf )羰基、(NRe Rf )磺醯基、-C(NCN)OR’及-C(NCN)NRx Ry ，其中該Re 及Rf 係獨立地選自氫、烷基、未經取代之芳基、未經取代之芳基烷基、未經取代之環烷基、未經取代之(環烷基)烷基、未經取代之雜環基、未經取代之雜環基烷基、(NRx Ry )烷基及(NRx Ry )羰基，其中該Rx 及Ry 係獨立地選自氫、烷氧基羰基、烷基、烷基羰基、未經取代之芳基、未經取代之芳基烷氧基羰基、未經取代之芳基烷基、未經取代之環烷基、未經取代之雜環基及(NRx’ Ry’ )羰基，其中該Rx’ 及Ry’ 係獨立地選自氫及烷基，其中該R’係選自烷基及未經取代之苯基，且其中該芳基烷基、該芳基烷基羰基、該雜環基烷基及該雜環基烷基羰基之烷基部分視情況另外經一個-NRe Rf 基團取代；且其中該芳基、該芳基烷氧基羰基、該芳基烷基、該芳 基烷基羰基、該芳基羰基、該芳基氧基羰基及該芳基磺醯基之芳基部分、該雜環基以及該雜環基烷氧基羰基、該雜環基烷基、該雜環基烷基羰基、該雜環基羰基及該雜環基氧基羰基之雜環基部分視情況另外經一個、兩個或三個獨立地選自以下之取代基取代：烷氧基、烷基、氰基、鹵基、鹵基烷氧基、鹵基烷基及硝基。
  2. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中各R5 獨立地選自烷氧基、雜環基及(NRc Rd )烷基。
  3. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X為鹵基。
  4. 如請求項3之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R2 為鹵基。
  5. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中R1 與R2 連同其所連接之碳原子一起形成六員芳族環，視情況經一個鹵基取代。
  6. 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中X為氫。
  7. 一種化合物，其係選自： 及 或其醫藥學上可接受之鹽。
  8. 一種化合物，其係選自： ； 或其醫藥學上可接受之鹽。
  9. 一種組合物，其包含如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽、及醫藥學上可接受之載劑。
  10. 如請求項9之組合物，其進一步包含至少一種具有抗HCV活性之其他化合物。
  11. 如請求項10之組合物，其中該等其他化合物中之至少一者為干擾素或病毒唑(ribavirin)。
  12. 如請求項11之組合物，其中該干擾素係選自干擾素α2B、聚乙二醇化干擾素α、複合干擾素、干擾素α2A及類淋巴母細胞干擾素τ。
  13. 如請求項10之組合物，其中該等其他化合物中之至少一者係選自介白素2、介白素6、介白素12、促進產生1型輔助T細胞反應之化合物、干擾RNA、反義RNA、咪奎莫特(Imiqimod)、病毒唑、肌苷5'-單磷酸脫氫酶抑制劑、三環癸胺(amantadine)及金剛乙胺(rimantadine)。
  14. 如請求項10之組合物，其中該等其他化合物中之至少一者可有效抑制選自以下之標靶的功能，以治療HCV感染：HCV金屬蛋白酶、HCV絲胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白質、HCV進入、HCV組裝、HCV釋放(egress)、HCV NS5A蛋白質及IMPDH。
  15. 一種如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療患者之HCV感染之藥物。
  16. 如請求項15之用途，其中該藥物進一步包含至少一種具有抗HCV活性之其他化合物，或該藥物係用於與該至少一種具有抗HCV活性之其他化合物相組合，在其之前、之後或與其同時使用。
  17. 如請求項16之用途，其中該等其他化合物中之至少一者為干擾素或病毒唑。
  18. 如請求項17之用途，其中該干擾素係選自干擾素α2B、聚乙二醇化干擾素α、複合干擾素、干擾素α2A及類淋巴母細胞干擾素τ。
  19. 如請求項16之用途，其中該等其他化合物中之至少一者係選自介白素2、介白素6、介白素12、促進產生1型輔助T細胞反應之化合物、干擾RNA、反義RNA、咪奎莫特、病毒唑、肌苷5'-單磷酸脫氫酶抑制劑、三環癸胺及金剛乙胺。
  20. 如請求項16之用途，其中該等其他化合物中之至少一者可有效抑制選自以下之標靶的功能，以治療HCV感染：HCV金屬蛋白酶、HCV絲胺酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解旋酶、HCV NS4B蛋白質、HCV進入、HCV組裝、HCV釋放、HCV NS5A蛋白質及IMPDH。
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Families Citing this family (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8329159B2 (en) * 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8303944B2 (en) * 2006-08-11 2012-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
RU2505539C2 (ru) 2008-12-23 2014-01-27 Эбботт Лэборетриз Антивирусные соединения
CN102264737A (zh) * 2008-12-23 2011-11-30 雅培制药有限公司 抗病毒化合物
US8394968B2 (en) 2009-02-17 2013-03-12 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20120178766A1 (en) 2009-03-23 2012-07-12 Sachin Sundarlal Chaudhari Furopyrimidinedione derivatives as trpai modulators
US20190127365A1 (en) 2017-11-01 2019-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of hepatitis c virus replication
SI2410844T1 (sl) 2009-03-27 2016-06-30 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitorji replikacije virusa hepatitisa C
US8796466B2 (en) 2009-03-30 2014-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TW201038559A (en) 2009-04-09 2010-11-01 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis C virus inhibitors
US8143414B2 (en) 2009-04-13 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
RU2541571C2 (ru) * 2009-04-15 2015-02-20 Эббви Инк. Противовирусные соединения
EP2430015B1 (en) 2009-05-12 2015-06-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds useful for the treatment of viral diseases
RS54386B8 (sr) 2009-05-13 2021-06-30 Gilead Pharmasset Llc Antiviralna jedinjenja
US8138215B2 (en) 2009-05-29 2012-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8211928B2 (en) 2009-05-29 2012-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2010138791A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Schering Corporation Antiviral compounds composed of three linked aryl moieties to treat diseases such as hepatitis c
WO2010138790A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Schering Corporation Antiviral compounds composed of three aligned aryl moieties to treat diseases such as hepatitis c
US8716454B2 (en) 2009-06-11 2014-05-06 Abbvie Inc. Solid compositions
US9394279B2 (en) 2009-06-11 2016-07-19 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
EA020031B1 (ru) 2009-06-11 2014-08-29 Эббви Бахамаз Лтд. Противовирусные соединения
US8937150B2 (en) 2009-06-11 2015-01-20 Abbvie Inc. Anti-viral compounds
MX2012000695A (es) 2009-07-16 2012-06-12 Vertex Pharma Análogos de bencimidazol para el tratamiento o la prevención de infecciones por flavivirus.
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CA2785488A1 (en) 2009-12-22 2011-07-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
JP2013515746A (ja) * 2009-12-24 2013-05-09 ヴァーテックス ファーマシューティカルズ、 インコーポレイテッド フラビウイルス感染症の治療又は予防のための類似体
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
EP2545060B1 (en) 2010-03-09 2015-11-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic silyl compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
JP2013522375A (ja) 2010-03-24 2013-06-13 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド フラビウイルス感染を処置または予防するためのアナログ
NZ605440A (en) 2010-06-10 2014-05-30 Abbvie Bahamas Ltd Solid compositions comprising an hcv inhibitor
BR112013004520A2 (pt) * 2010-08-26 2016-06-07 Univ Emory inibidores potentes e seletivos do virus da hepatite c
AU2011314168A1 (en) 2010-09-29 2013-04-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tetracycle derivatives and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
WO2012048421A1 (en) * 2010-10-14 2012-04-19 Boehringer Ingelheim International Gmbh Hepatitis c inhibitor compounds
EP2635571B1 (en) 2010-11-04 2015-08-12 Theravance Biopharma R&D IP, LLC Novel inhibitors of hepatitis c virus
EP2640719B1 (en) * 2010-11-17 2017-05-10 Gilead Pharmasset LLC Antiviral compounds
US8552047B2 (en) * 2011-02-07 2013-10-08 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2012122716A1 (en) 2011-03-17 2012-09-20 Merck Sharp & Dohme Corp. Tetracyclic xanthene derivatives and methods of use thereof for treatment of viral diseases
US9546160B2 (en) 2011-05-12 2017-01-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US10201584B1 (en) 2011-05-17 2019-02-12 Abbvie Inc. Compositions and methods for treating HCV
WO2013028953A1 (en) * 2011-08-24 2013-02-28 Glaxosmithkline Llc Combination treatments for hepatitis c
WO2013030750A1 (en) 2011-09-01 2013-03-07 Lupin Limited Antiviral compounds
US20150057246A1 (en) * 2011-09-14 2015-02-26 Michael P. Dwyer Silyl-containing heterocyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
EA026667B9 (ru) 2011-09-16 2017-07-31 Джилид Фармассет Ллс Фармацевтическая композиция для лечения вируса гепатита с
WO2013067267A1 (en) 2011-11-03 2013-05-10 Theravance, Inc. Rod -like hepatitis c virus inhibitors containing the fragement {2- [4- (bi phenyl - 4 - yl) - 1h - imidazo - 2 - yl] pyrrolidine - 1 - carbonlymethyl} amine
EA037883B1 (ru) 2011-11-16 2021-05-31 Джилид Фармассет Ллс Противовирусные соединения
US9034832B2 (en) 2011-12-29 2015-05-19 Abbvie Inc. Solid compositions
US9326973B2 (en) 2012-01-13 2016-05-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
IN2014MN01547A (zh) 2012-02-10 2015-05-08 Lupin Ltd
CN104302639B (zh) 2012-04-25 2017-03-29 施万生物制药研发Ip有限责任公司 作为c型肝炎病毒抑制剂的哌嗪‑哌啶化合物
WO2013163270A1 (en) 2012-04-25 2013-10-31 Theravance, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
US9079887B2 (en) * 2012-05-16 2015-07-14 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US20130309196A1 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
US20150252028A1 (en) * 2012-10-24 2015-09-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
WO2014110687A1 (en) 2013-01-16 2014-07-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Thiazolyl-substitued tetracyclic compounds and methods of use thereof for treatment of viral diseases
WO2014120981A1 (en) 2013-01-31 2014-08-07 Gilead Pharmasset Llc Combination formulation of two antiviral compounds
US11484534B2 (en) 2013-03-14 2022-11-01 Abbvie Inc. Methods for treating HCV
US9717712B2 (en) 2013-07-02 2017-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Combinations comprising tricyclohexadecahexaene derivatives for use in the treatment of hepatitis C virus
US20150023913A1 (en) 2013-07-02 2015-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
CN105517574B (zh) 2013-07-09 2019-01-18 百时美施贵宝公司 丙型肝炎病毒抑制剂的组合产品
CN105530933B (zh) 2013-07-17 2018-12-11 百时美施贵宝公司 用于治疗hcv的包含联苯衍生物的组合产品
JP2016529293A (ja) 2013-08-27 2016-09-23 ギリアド ファーマセット エルエルシー ２つの抗ウイルス化合物の組合せ製剤
CN103450071A (zh) * 2013-09-05 2013-12-18 南京工业大学 一种医药中间体2-氮杂双环[3.1.0]己烷-2,3-二碳酸叔丁酯的不对称合成方法
US20160311806A1 (en) * 2013-12-11 2016-10-27 Bristol-Myers Squibb Company 4,4'-biphenyldiyl-bis-(1 h-imidazolyl) derivatives as hepatitis hcv inhibitors
WO2015103490A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 Abbvie, Inc. Solid antiviral dosage forms
CN104860931A (zh) * 2014-02-21 2015-08-26 常州寅盛药业有限公司 丙肝病毒抑制剂及其制药用途
AU2015247706A1 (en) * 2014-04-15 2016-10-27 Cocrystal Pharma, Inc. Potent and selective inhibitors of hepatitis C virus
TWI721947B (zh) 2014-06-11 2021-03-21 美商基利法瑪席特有限責任公司 抗病毒化合物的固態形式
TWI703141B (zh) * 2015-03-12 2020-09-01 大陸商廣東東陽光藥業有限公司 作為丙型肝炎抑制劑的化合物及其在藥物中的應用
WO2017023631A1 (en) 2015-08-06 2017-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis c virus inhibitors
CN113045480A (zh) * 2019-12-27 2021-06-29 尚科生物医药（上海）有限公司 一种沙格列汀杂环中间体的差向异构体的制备方法
CN112679407B (zh) * 2021-03-17 2021-06-04 南京桦冠生物技术有限公司 一种手性5-取代脯氨酸类化合物的制备方法
AU2022279234A1 (en) 2021-05-21 2023-12-07 Gilead Sciences, Inc. Pentacyclic derivatives as zika virus inhibitors

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009102325A1 (en) * 2008-02-13 2009-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Imidazolyl biphenyl imidazoles as hepatitis c virus inhibitors

Family Cites Families (86)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10889A (en) 1854-05-09 Machineey pok
EP0679153A4 (en) 1993-01-14 1996-05-15 Magainin Pharma FINALLY MODIFIED AMINO ACIDS AND PEPTIDES.
US5654451B1 (en) 1993-01-14 2000-02-22 Magainin Pharma Amino acids and peptides having modified c-terminals and modified n-terminals
MY140680A (en) 2002-05-20 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis c virus inhibitors
WO2004005264A2 (en) 2002-07-05 2004-01-15 Axxima Pharmaceuticals Ag Imidazole compounds for the treatment of hepatitis c virus infections
US20050069522A1 (en) 2002-08-12 2005-03-31 Richard Colonno Combination pharmaceutical agents as inhibitors of HCV replication
US7420079B2 (en) 2002-12-09 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Methods and compounds for producing dipeptidyl peptidase IV inhibitors and intermediates thereof
US7135462B2 (en) 2003-11-20 2006-11-14 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
DE102004036971B4 (de) 2004-07-30 2009-07-30 Advanced Micro Devices, Inc., Sunnyvale Technik zur Bewertung lokaler elektrischer Eigenschaften in Halbleiterbauelementen
WO2006022442A1 (ja) 2004-08-24 2006-03-02 Santen Pharmaceutical Co., Ltd. ジヒドロオロテートデヒドロゲナーゼ阻害活性を有する新規複素環アミド誘導体
JP4717457B2 (ja) 2005-02-08 2011-07-06 株式会社島精機製作所 紡績糸の糸継ぎ方法および糸継ぎを含む編地
US7894996B2 (en) 2005-02-28 2011-02-22 The Rockefeller University Structure of the hepatitis C NS5A protein
US8143288B2 (en) 2005-06-06 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of HCV replication
PT1940786E (pt) 2005-09-16 2010-10-04 Arrow Therapeutics Ltd Derivados de bifenilo e sua utilização no tratamento de hepatite c
WO2007058384A1 (en) 2005-11-17 2007-05-24 Osaka University Method of suppressing replication of hepatitis c virus, inhibitor of replication of the virus and method of screening for the same
KR20080080395A (ko) 2005-12-21 2008-09-03 아보트 러보러터리즈 항바이러스 화합물
WO2007081517A2 (en) 2005-12-21 2007-07-19 Abbott Laboratories Anti-viral compounds
SG133452A1 (en) 2005-12-30 2007-07-30 Novartis Ag Peptide deformylase inhibitors for treatment of mycobacterial and other parasitic diseases
CA2653924A1 (en) 2006-05-30 2007-12-06 Arrow Therapeutics Limited Biphenyl derivatives and their use in treating hepatitis c
US9873667B2 (en) 2006-07-27 2018-01-23 Emisphere Technologies Inc. Arylsulfanyl compounds and compositions for delivering active agents
US8329159B2 (en) 2006-08-11 2012-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US20100158862A1 (en) 2006-08-11 2010-06-24 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US8303944B2 (en) 2006-08-11 2012-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7659270B2 (en) 2006-08-11 2010-02-09 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7759495B2 (en) 2006-08-11 2010-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TW200831084A (en) 2006-11-21 2008-08-01 Genelabs Tech Inc Anti-viral compounds
EP2094276A4 (en) 2006-12-20 2011-01-05 Abbott Lab ANTIVIRAL COMPOUNDS
US7728027B2 (en) 2007-08-08 2010-06-01 Bristol-Myers Squibb Company Process for synthesizing compounds useful for treating hepatitis C
US8629171B2 (en) 2007-08-08 2014-01-14 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline form of methyl ((1S)-1-((25)-2-(5-(4'-(2-((25)-1((2S)-2-((methoxycarbonyl)amino)-3-methylbutanoyl)-2-pyrrolidinyl)-1H-imidazol-2-yl)-1-pyrrolidinyl)carbonyl)-2-methylpropyl)carbamate dihydrochloride salt
MX2010008699A (es) 2008-02-12 2010-08-30 Bristol Myers Squibb Co Derivados heterociclicos como inhibidores de virus de la hepatitis c.
AU2008350327B2 (en) 2008-02-12 2013-09-12 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8147818B2 (en) 2008-02-13 2012-04-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7704992B2 (en) 2008-02-13 2010-04-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US7906655B2 (en) 2008-08-07 2011-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8383094B2 (en) 2008-10-01 2013-02-26 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2010062821A1 (en) 2008-11-28 2010-06-03 Glaxosmithkline Llc Anti-viral compounds, compositions, and methods of use
PE20150939A1 (es) 2008-12-03 2015-07-19 Presidio Pharmaceuticals Inc Inhibidores de la proteina no estructural 5a del virus de la hepatitis c
US9120779B2 (en) 2008-12-03 2015-09-01 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of HCV NS5A
CN102264737A (zh) 2008-12-23 2011-11-30 雅培制药有限公司 抗病毒化合物
WO2010091413A1 (en) 2009-02-09 2010-08-12 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Linked dibenzimidazole derivatives
WO2010096462A1 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Enanta Pharmaceuticals, Inc Linked diimidazole derivatives
TWI438200B (zh) 2009-02-17 2014-05-21 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
WO2010096777A1 (en) 2009-02-23 2010-08-26 Presidio Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of hcv ns5a
WO2010094977A1 (en) 2009-02-23 2010-08-26 Arrow Therapeutics Limited Novel biphenyl compounds useful for the treatment of hepatitis c
CA2753382C (en) 2009-02-27 2014-12-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
EP2410841A4 (en) 2009-03-27 2012-10-24 Presidio Pharmaceuticals Inc SUBSTITUTED BICYCLIC HCV INHIBITORS
PE20120773A1 (es) 2009-03-27 2012-07-19 Presidio Pharmaceuticals Inc Anillos triciclicos fusionados sustituidos como inhibidores del virus de hepatitis c
US8796466B2 (en) 2009-03-30 2014-08-05 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
TWI476190B (zh) 2009-03-30 2015-03-11 必治妥美雅史谷比公司 Ｃ型肝炎病毒抑制劑
TW201038559A (en) 2009-04-09 2010-11-01 Bristol Myers Squibb Co Hepatitis C virus inhibitors
US8143414B2 (en) 2009-04-13 2012-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
RU2541571C2 (ru) 2009-04-15 2015-02-20 Эббви Инк. Противовирусные соединения
AU2010240882B2 (en) 2009-04-24 2014-10-23 Janssen Sciences Ireland Uc Diaryl ethers
EP2430015B1 (en) 2009-05-12 2015-06-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds useful for the treatment of viral diseases
RS54386B8 (sr) 2009-05-13 2021-06-30 Gilead Pharmasset Llc Antiviralna jedinjenja
US8211928B2 (en) 2009-05-29 2012-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
US8138215B2 (en) 2009-05-29 2012-03-20 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2010138791A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Schering Corporation Antiviral compounds composed of three linked aryl moieties to treat diseases such as hepatitis c
WO2010138790A1 (en) 2009-05-29 2010-12-02 Schering Corporation Antiviral compounds composed of three aligned aryl moieties to treat diseases such as hepatitis c
EA020031B1 (ru) 2009-06-11 2014-08-29 Эббви Бахамаз Лтд. Противовирусные соединения
WO2010148006A1 (en) 2009-06-16 2010-12-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
WO2011004276A1 (en) 2009-07-06 2011-01-13 Pfizer Limited Hepatitis c virus inhibitors
MX2012000695A (es) 2009-07-16 2012-06-12 Vertex Pharma Análogos de bencimidazol para el tratamiento o la prevención de infecciones por flavivirus.
BR112012002508A2 (pt) 2009-08-07 2016-03-15 Tibotec Pharm Ltd derivados de feniletinila como inibidores de vírus de hepatite c
CN102471324B (zh) 2009-08-07 2014-12-17 泰博特克药品公司 作为丙型肝炎病毒抑制剂的双苯并咪唑衍生物
RU2012112824A (ru) 2009-09-03 2013-10-10 Тиботек Фармасьютикалз Производные бис-бензимидазола
CN102480971B (zh) 2009-09-04 2014-11-26 杨森制药公司 化合物
WO2011031934A1 (en) 2009-09-11 2011-03-17 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis c virus inhibitors
US9156818B2 (en) 2009-09-11 2015-10-13 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Hepatitis C virus inhibitors
US8415374B2 (en) 2009-10-12 2013-04-09 Bristol-Myers Squibb Company Combinations of hepatitis C virus inhibitors
WO2011050146A1 (en) 2009-10-23 2011-04-28 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
UA108211C2 (uk) 2009-11-04 2015-04-10 Янссен Рід Айрленд Бензімідазолімідазольні похідні
US20110269956A1 (en) 2009-11-11 2011-11-03 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110274648A1 (en) 2009-11-11 2011-11-10 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
US20110281910A1 (en) 2009-11-12 2011-11-17 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C Virus Inhibitors
EP2503881B1 (en) 2009-11-25 2015-05-13 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds and derivatives thereof useful for the treatment of viral diseases
EP2507232B1 (en) 2009-12-04 2019-03-20 National Health Research Institutes Proline derivatives
EP2512480A4 (en) 2009-12-14 2013-05-15 Enanta Pharm Inc HEPATITIS C-VIRUS HEMMER
BR112012014899A2 (pt) 2009-12-18 2017-03-14 Idenix Pharmaceuticals Inc composto, composição farmacêutica, método para tratar ou prevenir uma infecção por vírus de hepatite c em um sujeito, método para tratar , prevenir ou melhorar um ou mais sintomas de uma doença hepática ou distúrbio associado a uma infecção por vírus de hepatite c em um sujeito, método para inibir a replicação de um vírus em um hospedeiro, método para inibir a replicação de um vírus
WO2011075607A1 (en) 2009-12-18 2011-06-23 Intermune, Inc. Novel inhibitors of hepatitis c virus replication
CA2785488A1 (en) 2009-12-22 2011-07-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic compounds and methods of use thereof for the treatment of viral diseases
JP2013515746A (ja) 2009-12-24 2013-05-09 ヴァーテックス ファーマシューティカルズ、 インコーポレイテッド フラビウイルス感染症の治療又は予防のための類似体
US8362020B2 (en) 2009-12-30 2013-01-29 Bristol-Myers Squibb Company Hepatitis C virus inhibitors
WO2011091446A1 (en) 2010-01-22 2011-07-28 Glaxosmithkline Llc Chemical compounds
SG188957A1 (en) 2010-01-25 2013-05-31 Enanta Pharm Inc Hepatitis c virus inhibitors
JP2013518062A (ja) 2010-01-28 2013-05-20 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｃ型肝炎阻害化合物

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2009102325A1 (en) * 2008-02-13 2009-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Imidazolyl biphenyl imidazoles as hepatitis c virus inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
AR079634A1 (es) 2012-02-08
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