TWI474829B - 促進脂聯素產生之組合物 - Google Patents
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Description
本發明係關於一種促進脂聯素產生之組合物,更詳細而言為一種包含鮭魚魚白萃取物、啤酒酵母萃取物、鳥膠原蛋白(雞膠原蛋白)、含礦物質之酵母(含有Zn、Se、Cu)之脂聯素產生促進劑。
脂聯素(Adiponectin)係自包含244個胺基酸之脂肪組織所分泌出的激素,於1996年自人類脂肪組織中分離出。脂聯素係脂肪組織中之特異性分泌蛋白質(非專利文獻2),不僅於脂肪組織中存在亦大量存在於血液中(正常人為5~10μg/ml)(非專利文獻3)。已知於骨骼肌及肝臟中,藉由活化AMP(Adenosine MonoPhosphate,單磷酸腺苷)激酶(AMP-activated protein kinase:AMPK,單磷酸腺苷活化蛋白激酶),而促進脂肪之燃燒及糖之攝取。已知該脂聯素於小型脂肪細胞中大量地分泌,但若脂肪細胞肥大化,則其分泌量會減少。
脂聯素又作為抑制動脈硬化之好的脂肪細胞激素而為人所知。於脂肪細胞激素中,除上述好的脂肪細胞激素以外,亦存在PAI-1(Plasminogen Activator Inhibitor,纖溶酶原激活物抑制劑)、TNF-α(Tumor Necrosis Factor-α,腫瘤壞死因子α)等促進動脈硬化之壞的脂肪細胞激素。在正常狀態下,該等好的及壞的脂肪細胞激素之分泌量保持平衡。然而,若由於肥胖等導致脂肪細胞肥大化,則好的脂
肪細胞激素之分泌量會減少,另一方面,壞的脂肪細胞激素會過剩地分泌。其結果,認為會使兩者之平衡崩潰而成為2型糖尿病、動脈硬化症等生活習慣疾病發病之原因。
如此,認為脂聯素干預肥胖及肥胖所帶來之生活習慣疾病,且活化該脂聯素有效用於預防或治療生活習慣疾病。進而,亦已知脂聯素具有肝纖維化抑制效果。普遍認為脂聯素具有高血壓之改善、脂質代謝之改善、胰島素敏感性之改善、消炎作用、抑制肝纖維化、促進正常肝細胞增殖效果(專利文獻1)、消炎效果(專利文獻2)等多方面之作用(專利文獻2~5),並且使血液中之脂聯素濃度上升之藥品或食品飲料可顯示出具有對新陳代謝症候群之預防、改善作用。
於此種背景下,作為促進脂聯素產生之藥劑,已知有四氫噻唑衍生物。然而,該四氫噻唑衍生物存在伴隨有下痢、便秘、嘔吐等消化系統症狀或肝臟損傷等副作用之情形。
進而,提出有若干促進脂聯素產生之化合物或成分。例如,於專利文獻6中揭示有N-乙醯半胱胺酸增加脂肪細胞之脂聯素之發現量,並且夾竹桃麻素使血漿中之脂聯素濃度上升,且增加脂肪組織中之脂聯素之發現量。於專利文獻7中揭示有薑油化合物,並且於專利文獻8中揭示有蜀葵果實或其萃取物會增強脂聯素之產生。除該等以外亦期待促進產生優異之脂聯素之物質。因此,在新陳代謝症候群之對策成為社會問題之當前,要求開發一種具有促進並增
強脂聯素體內產生之作用之安全的物質。
[專利文獻1]日本專利特開2002-363094號公報
[專利文獻2]日本專利特開2000-256208號公報
[專利文獻3]日本專利第3018186號公報
[專利文獻4]美國專利申請公開第2002/0132773號
[專利文獻5]日本專利特開2005-325072號公報
[專利文獻6]日本專利特開2005-232059號公報
[專利文獻7]日本專利特開2006-45210號公報
[專利文獻8]日本專利特開2006-56836號公報
[非專利文獻1]馬場君江等,Foods&Food Ingredients Journal of Japan, 1998年,No.178, p.52-60
[非專利文獻2]Maeda K et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 221: 286 (1996)
[非專利文獻3]Arita Y et al. Biochem. Biophys. Res. Commun. 257: 79~83 (1999)
本發明之課題在於提供一種促進脂聯素之產生,且就副作用或毒性等安全性方面不存在問題而可口服攝取之組合物。
本發明者等人對各種食材中之脂聯素之產生進行研究,結果發現組合鮭魚魚白萃取物、啤酒酵母萃取物、鳥膠原蛋白(雞膠原蛋白)、含礦物質之酵母(含有Zn、Se、Cu)而調製之混合物顯示出優異之促進脂聯素產生之能力,從而完成本發明。
即,本發明係關於:[1]一種促進脂聯素產生之組合物,其特徵在於:其包含鮭魚魚白萃取物、啤酒酵母萃取物、雞膠原蛋白及含礦物質之酵母,且具有脂聯素產生促進作用;[2]如上述[1]之促進脂聯素產生之組合物,其中鮭魚魚白萃取物包含藉由對鮭魚魚白進行酵素處理而分解成寡核苷酸與寡肽之低分子成分;[3]如上述[1]或[2]之促進脂聯素產生之組合物,其中啤酒酵母萃取物含有50~80%之RNA;[4]如上述[1]至[3]中任一項之促進脂聯素產生之組合物,其中礦物質酵母於乾燥酵母中含有2~3%之鋅、0.3~0.5%之銅、0.01~0.02%之硒;及[5]如上述[1]至[4]中任一項之促進脂聯素產生之組合物,其中每100質量份之鮭魚魚白萃取物,包含啤酒酵母萃取物16~17質量份、雞膠原蛋白33~34質量份及含礦物質之酵母22~23質量份。
本發明之脂聯素產生促進劑,於以鮭魚魚白萃取物作為主成分,並單獨含有啤酒酵母萃取物、雞膠原蛋白、含礦物質之酵母時,未知產生脂聯素之能力,但藉由將該等混合而具有優異之脂聯素產生促進效果。本發明之脂聯素產
生促進劑有效用於改善、治療、或預防糖尿病、肥胖、動脈硬化症以及因該等所引起之症狀,例如糖尿病併發症(糖尿病視網膜病變症、糖尿病神經障礙、糖尿病性腎病等)、腦梗塞、心肌梗塞、腎硬化症等。
作為本發明之促進脂聯素產生之組合物,只要為包含鮭魚魚白萃取物、啤酒酵母萃取物、雞膠原蛋白及含礦物質之酵母,並具有脂聯素產生促進作用之組合物,則無特別限制,此處,所謂脂聯素產生促進作用係指促進糖類代謝、脂質代謝等作為重要調節因子之脂聯素之分泌,從而增加體內尤其是血液中之脂聯素量之作用。
作為上述鮭魚魚白萃取物,只要為可用作食品用者則無特別限制,但較佳為包含藉由對鮭魚魚白進行酵素處理而分解成寡核苷酸與寡肽之低分子成分者。特佳為含有20~70%之分子量1000~3000之寡核苷酸、寡肽之鮭魚魚白萃取物。此種鮭魚魚白萃取物,例如可自L.S.factory股份有限公司等獲取。
又,上述鮭魚魚白萃取物亦可依據日本專利特開2004-16143中所記載之方法而調製。即,自鮭魚之魚白中除去皮、筋、血管等後,進行純化並去除油分,繼而進行利用蛋白酶及核酸酶之處理。上述蛋白酶係以胰蛋白酶作為主體者。由於胰蛋白酶為具有較高之特異性之絲胺酸蛋白酶,且於精胺酸及離胺酸之羧基側選擇性水解肽鍵,故而適於含有較多精胺酸之魚精蛋白之水解。又,上述蛋白
酶,除胰蛋白酶以外,亦可包含其他蛋白酶,例如胰凝乳蛋白酶等。作為良好之蛋白酶,可列舉Novo Nordisk Bioindustry股份有限公司製造之蛋白酶。又,進行利用核酸酶之水解反應之溫度,為60~75℃之範圍,其中最佳為70℃。對蛋白酶處理及核酸酶處理之順序,並無特別限制,但較佳為首先進行利用蛋白酶之處理,繼而進行利用核酸酶之處理。
作為上述啤酒酵母萃取物,只要為可用作食品用者則無特別限制,但較佳為含有50~80%之RNA之啤酒酵母萃取物。此種啤酒酵母萃取物,例如可自L.S.factory股份有限公司等獲取。
作為上述鳥膠原蛋白(雞膠原蛋白),並無特別限制,可較佳地使用食品用之雞膠原蛋白,例如可較佳地列舉L.S.factory股份有限公司製造之雞膠原蛋白。
作為上述礦物質酵母,只要為提高礦物質含量之麵包酵母則無特別限制,但較佳為於乾燥酵母中含有2~3%之鋅者,其中可列舉於乾燥酵母中含有2~3%之鋅、0.3~0.5%之銅、0.01~0.02%之硒之礦物質酵母。此種礦物質酵母可自L.S.factory股份有限公司等獲取。又,可混合富含鋅之鋅酵母、富含銅之銅酵母、富含硒之硒酵母而調製此種礦物質酵母。富含各個礦物質之酵母可自L.S.factory股份有限公司等獲取。
又,作為本發明之促進脂聯素產生之組合物中之鮭魚魚白萃取物、啤酒酵母萃取物、雞膠原蛋白及含礦物質之酵
母之調配比例,可較佳地例示每100質量份之鮭魚魚白萃取物,包含啤酒酵母萃取物10~25質量份、較佳為16~17質量份,雞膠原蛋白25~40質量份、較佳為33~34質量份,及含礦物質之酵母15~30質量份、較佳為22~23質量份之組合物。
本發明之促進脂聯素產生之組合物,除可添加於藥學性上所容許之通常之載體、結合劑、穩定劑、賦形劑、稀釋劑、pH值緩衝劑、崩解劑、助溶劑、溶解助劑、等張劑等各種調劑用調配成分以外,亦可併用其他脂聯素產生促進劑等治療藥品。
本發明之促進脂聯素產生之組合物,可用作對用於治療或預防因脂聯素產生下降所引起之疾病的醫藥品、補充品、食品、飼料等,且投予量或攝取量,較佳為一名成人每天0.1~10g,更佳為0.5~5g。
作為可應用本發明之促進脂聯素產生之組合物的食品或食品原材料之種類,並無特別限制,例如可列舉:酸乳酪、優酪乳、果汁、牛奶、豆奶、酒類、咖啡、紅茶、煎茶、烏龍茶、運動飲料等各種飲料,或布丁、餅乾、麵包、蛋糕、果凍、煎餅等烘烤糕點,羊羹等日式糕點,冷凍甜點、口香糖等之麵包/糕點類,或烏龍麵、蕎麥麵等麵類,或魚板、火腿、魚肉香腸等摻有魚肉之製品,或味噌、醬油、沙拉醬、蛋黃醬、甜味劑等調味類,或乳酪、奶油等乳製品,或豆腐、蒟蒻、其他鹹烹海味、餃子、炸肉餅、涼拌菜等各種家常菜。又,於應用促進脂聯素產生
之組合物之食品或食品原材料中,視需要亦可進而調配維生素或礦物質等其他營養性成分。於本發明之促進脂聯素產生之組合物應用於食品或飼料之情形時,於食品或食品原材料、或者飼料或飼料原材料之包裝體或隨附之說明書中,可顯示具有脂聯素產生促進作用之主旨。
以下,利用實施例進而具體說明本發明,但本發明之技術範圍並不限定於該等例示。
將鮭魚魚白萃取物(L.S.factory股份有限公司製造之「Nuclegen」)60mg、啤酒酵母萃取物(L.S.factory股份有限公司製造之「啤酒酵母萃取RNA」)10mg、膠原蛋白(L.S.factory股份有限公司製造之「雞膠原蛋白」)20mg、含礦物質之酵母(L.S.factory股份有限公司製造之「混合礦物質酵母C」)13.5mg懸浮於PBS(Phosphate Buffered Saline,磷酸鹽緩衝鹽水)中,調製成2.5mg/ml後,利用φ0.45um之過濾器進行過濾。使用該濾液,以表1所示之試料濃度進行評價。
於含有10%胎牛血清之達爾伯克改良伊格爾培養基(CS-DMEM,Calf Serum-Dulbecco's Modified Eagle Media)中培養3T3-L1細胞(小鼠纖維細胞)直至達到密集之狀態(confluent,匯合)後,除去培養燒瓶內之培養基,利用PBS(-)沖洗2次。其後,添加0.1%胰蛋白酶-EDTA(Ethylene Diamine Tetraacetic Acid,乙二胺四乙酸)溶液並自燒瓶底面剝離細胞,並將該剝離細胞及0.1%胰蛋白酶-EDTA溶液轉移至離心管中。於其中添加等容量之10%CS-DMEM,並以1500rpm進行5分鐘之離心分離。其後,於10% FCS(Fatal Calf Serum,胎牛血清)-DMEM中使細胞均勻化,並播種至燒瓶中,放入CO2
培養箱中,並以5% CO2
之條件下,於37℃下進行培養。
於10% CS-DMEM中培養3T3-L1細胞,自達到密集之狀態(confluent)之日起2天後,將培養基更換為分化培養基1並進而培養2天。繼而,將培養基更換為分化培養基2並培養2天。於對脂肪細胞之分化誘導時,使用分化培養基1及分化培養基2。
分化培養基1為包含10% FBS、0.5mM異丁基-1-甲基黃嘌呤(IBMX,Isobutyl-1-Methylxanthine)、1μM地塞米松(DEX,Dexmethasone)、及10μg/ml胰島素之DMEM。分化培養基1之調製係藉由利用10% FCS-DMEM稀釋10mg/ml
胰島素、500mM之IBMX與1mM之DEX之混合液來進行。又,分化培養基2為包含10% FCS及1μM胰島素之DMEM。分化培養基2之調製係藉由利用10% FCS-DMEM稀釋10mg/ml胰島素來進行。
對脂肪細胞進行分化後,將培養基更換為0.1% BSA(Bovine Serum Albumin,牛血清蛋白)-DMEM並培養24小時。其後,添加混合物以分別成為0μg/ml(試料1)、50μg/ml(試料2)、250μg/ml(試料3),進而於37℃下培養48小時。收取培養上清液,使用脂聯素ELISA套組(大塚製藥股份有限公司)測定上清液中之脂聯素量。結果示於圖1,數值化者示於表2。
其結果,發現添加50μg/ml及250μg/ml與未添加(試料1)相比,濃度依賴性地增加脂聯素濃度。若將未添加時(對照)設為100%,則於添加混合物50μg/ml時培養上清液中所分泌之脂聯素濃度顯示為對照之126%,於250μg/ml時顯示為對照之183%。(顯著性水平為1%且具有顯著差異)。此時,以任意濃度均對存活率無影響。
以下述表3所示之比例,將鮭魚魚白萃取物(L.S.factory股份有限公司製造之「Nuclegen」)、啤酒酵母萃取物(L.S.factory股份有限公司製造之「啤酒酵母萃取RNA」)、膠原蛋白(L.S.factory股份有限公司製造之「雞膠原蛋白」)、含礦物質之酵母(L.S.factory股份有限公司製造之「混合礦物質酵母C」)進行調配,並添加其他維生素類,調製口服投予用之脂聯素產生促進劑(片劑)。
本發明之脂聯素產生促進劑促進糖類代謝、脂質代謝等作為重要調節因子之脂聯素的分泌,而增加體內尤其是血液中之脂聯素量。本發明之脂聯素產生促進劑,有效用於改善、治療、或預防糖尿病、肥胖、動脈硬化症以及因該等所引起之症狀,例如糖尿病併發症(糖尿病視網膜病變症、糖尿病神經損傷、糖尿病性腎病等)、腦梗塞、心肌梗塞、腎硬化症等。本發明之促進脂聯素產生之組合物(脂聯素產生促進劑)用作醫藥品、補充品、食品等。
圖1係表示使用本發明之促進脂聯素產生之組合物而測
定於脂肪細胞之培養上清液中所分泌之脂聯素濃度之結果的圖。
Claims (7)
- 一種促進脂聯素產生之組合物,其特徵在於:其包含鮭魚魚白萃取物、啤酒酵母萃取物、雞膠原蛋白及含礦物質之酵母,並具有脂聯素產生促進作用。
- 如請求項1之促進脂聯素產生之組合物,其中鮭魚魚白萃取物包含藉由對鮭魚魚白進行酵素處理而分解成寡核苷酸與寡肽之低分子成分。
- 如請求項1之促進脂聯素產生之組合物,其中啤酒酵母萃取物含有50~80%之RNA。
- 如請求項2之促進脂聯素產生之組合物,其中啤酒酵母萃取物含有50~80%之RNA。
- 如請求項1至4中任一項之促進脂聯素產生之組合物,其中礦物質酵母於乾燥酵母中含有2~3%之鋅、0.3~0.5%之銅、0.01~0.02%之硒。
- 如請求項1至4中任一項之促進脂聯素產生之組合物,其中相對於每100質量份之鮭魚魚白萃取物而包含啤酒酵母萃取物16~17質量份、雞膠原蛋白33~34質量份及含礦物質之酵母22~23質量份。
- 如請求項5之促進脂聯素產生之組合物,其中相對於每100質量份之鮭魚魚白萃取物而包含啤酒酵母萃取物16~17質量份、雞膠原蛋白33~34質量份及含礦物質之酵母22~23質量份。
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