TW201934547A - 一種嘧啶類化合物、其製備方法及其醫藥用途 - Google Patents

Abstract

本發明涉及一種嘧啶類化合物、其製備方法及其醫藥用途。具體而言，本發明涉及一種通式(I)所示的嘧啶類化合物，及其製備方法，以及其作為細胞週期蛋白依賴性激酶7(CDK7)抑制劑的用途，特別是在預防和/或治療人類疾病包括癌症中的用途。其中，通式(I)中各基團的定義與說明書中的定義相同。

Description

一種嘧啶類化合物、其製備方法及其醫藥用途

本發明屬於醫藥領域，涉及一種新型的嘧啶類化合物、其製備方法及含有其的醫藥組成物，以及其作為選擇性細胞週期蛋白依賴性激酶7(CDK7)抑制劑在預防和/或治療人類疾病包括癌症中的用途。

腫瘤包括白血病是導致人類臨床死亡的重大疾病之一，每年全球有數百萬病人死於癌症。惡性腫瘤如肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、腸癌、卵巢癌、宮頸癌、食管癌、鼻咽癌、白血病和惡性淋巴瘤等死亡率極高。儘管癌症的遺傳篩查、分子診斷和精准醫療提高了對癌症病人的臨床早期發現、正確診斷和治療效果，但至今為止多數癌症特別是晚期、難治、復發和耐藥性惡性腫瘤仍沒有有效的方法與藥物可完全根除或治癒。臨床上急需特異性好、活性高、毒性小、無耐藥性產生的優質抗癌藥物。

癌症的發生、發展、轉移、惡化、復發及耐藥性產生與許多因素有關。哺乳動物細胞週期是一個高度有組織有次序和精確調控的細胞 有絲分裂過程，在這個過程中，細胞的遺傳物質複製並均等地分配給兩個增殖的子細胞中。細胞生長因子和細胞週期調控因子在細胞週期中起著重要作用。細胞週期調控因子是一類細胞內自身合成的蛋白質，各種細胞週期調控因子(蛋白)的異常活性往往引起正常細胞週期的異常，導致不同類型的疾病，例如當細胞增殖不受控時，引起細胞轉化即形成癌細胞。

細胞週期蛋白依賴性激酶(Cyclin Dependent Kinase，CDK)是一組絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶，和細胞週期蛋白(Cyclin)協同作用，是細胞週期進程和轉錄的關鍵調控因子。CDK可以和細胞週期蛋白結合形成異二聚體，其中CDK為催化伸基，細胞週期蛋白為調節伸基，不同的Cyclin-CDK複合物，藉由CDK活性磷酸化細胞中的不同受質，而實現對細胞週期不同時相的推進和轉化作用。至今為止已發現和鑒定出21個CDK基因(CDK1~CDK20，其中CDK11具有CDK11A和CDK11B兩個基因)和五個CDK類基因CDKL(CDKL1~CDKL5)，其中在這些CDK蛋白激酶功能結構域中，胺基酸序列具有高度的進化保守性。根據CDK作用機理和功能可分為直接細胞週期調控CDK(如CDK1、CDK2、CDK3、CDK4和CDK6)和轉錄功能CDK(如CDK7、CDK 8、CDK 9、CDK 11、CDK 12和CDK13)。直接細胞週期調控CDK直接調節進展細胞週期階段，其磷酸化作用受質為細胞週期相關蛋白。轉錄功能CDK藉由磷酸化RNA聚合酶II複合物來調節基因轉錄。臨床數據發現在不同類型惡性腫瘤和白血病病人樣本如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌或結腸癌和急性髓細胞白血病中，不同的CDK頻繁的發生基因突變、擴增和過表達，這些變異與癌症的發生、發展和/或維持惡性細胞表型以及病人存活期和耐藥性具有密切的關聯。同樣基礎研究發現CDK的異常能夠驅動腫瘤的發生， 抑制CDK能夠有效的抑制/消除腫瘤細胞的體內外生長。CDK已廣泛的被作為測試和應用癌症治療的良好靶標，特別是CDK4/6選擇性抑制劑帕博西尼(Palbociclib)、Ribociclib和Abemaciclib在臨床上的成功應用(Otto T等人(2017)Nat Rev Cancer 17(2)：93-115；Kwapisz D(2017)Breast Cancer Res Treat.166(1)：41-54；Vijayaraghavan S等人(2017)Target Oncol.2017 Dec 7；Ingham M等人(2017)J Clin Oncol.35(25)：2949-2959；Abou Zahr A等人(2017)Expert Opin Emerg Drugs.22(2)：137-148；O'Leary B等人(2016)Nat Rev Clin Oncol.13(7)：417-30；Coin F等人(2015)Mol Cell.59(4)：513-4；Pozo K等人(2016)Trends Cancer.2(10)：606-618)。近來研究發現CDK4/6和CDK5具有腫瘤免疫調節功能，選擇性抑制CDK4/6或CDK5可增強腫瘤免疫治療的效果，進一步的證明CDK是腫瘤治療的重要靶蛋白(Dorand RD等人(2016)Science.353(6297)：399-403；Goel S等人(2017)Nature.548(7668)：471-475；Deng J等人(2017)Cancer Discov.8(2)；216-33；Zhang J等人(2018)Nature.553(7686)：91-95)。

多年來，許多不同類型的CDK抑制劑已進行了廣泛的臨床前和臨床研究，但至今為止只有CDK4/6高選擇性抑制劑帕博西尼、Ribociclib和Abemaciclib成功地應用於雌性荷爾蒙受體陽性、HER2陰性的晚期或復發乳腺癌的臨床治療，帕博西尼和Ribociclib需要與來曲唑(Letrozole)聯合用藥，Abemaciclib可單獨或與氟維司瓊(Fulvestrant)聯合用藥。泛CDK抑制劑(第一代CDK抑制劑)如Alvocidib和Seliciclib為黃酮類化合物，Alvocidib與ATP競爭性地抑制CDK1、CDK2、CDK4和CDK6，IC₅₀值約為40nM；Seliciclib可抑制CDK5、Cdc2和CDK2， IC₅₀分別為0.2μM、0.65μM和0.7μM；但沒有顯示出有希望的臨床前和臨床研究中的抗腫瘤活性。第二代泛CDK抑制劑如Dinaciclib、AT7519、Milciclib、TG02、CYC065和RGB-286638能夠高活性的同時抑制多種CDK，儘管分別進入臨床試驗的不同期，但這些抑制劑單獨應用並沒有表現出良好的治療效果而呈現出高的臨床副作用。

CDK7在哺乳動物CDK中具有獨特性，能夠調節細胞週期和基因轉錄。在細胞質中，CDK7作為CDK激活酶(CAK)異三聚體複合物存在，能夠藉由磷酸化CDK1/2激活域保守殘基(T環)使CDK1/2完全被激活，這一過程是細胞週期進程所需的；在細胞核中，CDK7與RNA聚合酶(RNAP)II形成複合物，負責磷酸化RNAP II的C-末端結構域(CTD)，這是基因轉錄起始的必要步驟。CDK7的雙功能即CAK和CTD磷酸化能夠在細胞增殖、細胞週期和基因轉錄的關鍵方面發揮重要作用。越來越多的研究數據發現抑制人類CDK7激酶活性能夠抑制腫瘤細胞的體內外增殖。CDK7選擇性抑制劑有望作為新型潛在治療癌症的有效靶向藥物。近來CDK7高選擇性抑制劑SY-1365(THZ1)已進入人體臨床試驗，該化合物臨床前試驗呈現出良好的抗腫瘤活性，是一類潛在的新型CDK7抗腫瘤抑制劑(Lücking U等人(2017)Chem Med Chem.12(21)：1776-1793；Kwiatkowski N等人(2014)Nature.511(7511)：616-20)，但此化合物動物體內的穩定性(在小鼠血漿中T1/2為45分鐘)限制了其體內藥效。因此臨床急需更高效和毒副作用低CDK7抑制劑。

本發明人在長期CDK7新型選擇性抑制劑研發過程中，發現一種新型的嘧啶類化合物，其能夠有效的抑制CDK7表達陽性白血病細 胞MOLM-13的體外生長，其IC₅₀值可達次奈米莫耳濃度，有望開發為新型有效的抗腫瘤藥物。

本發明的目的是提供一種選擇性好、活性高、毒性低的新型可口服給藥的小分子化合物，其可以作為細胞週期蛋白依賴性激酶7(CDK7)抑制劑，用於預防和/或治療人類疾病包括癌症。

本發明涉及一種新型的嘧啶類化合物，其能夠有效的與CDK7共價結合，抑制CDK7表達陽性腫瘤細胞的體外生長，其IC₅₀值可達次奈米莫耳濃度。

因此，本發明提供一種通式(I)所示的化合物，

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽；其中：每一個R¹各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、-N(R^y)(R^z)、烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-NHC(O)R^x、-C(O)N(R^y)(R^z)、-OR^uOR^x、-OR^x或-OR^uN(R^y)(R^z)，其中該烷基、烯基、 炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R²和R³各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)，其中該烷基、烷氧基、環烷基和雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R⁴和R⁵各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)，其中該烷基、烷氧基、環烷基和雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；每一個R⁶各自獨立地選自Q基團；每一個R⁷各自獨立地選自-NHC(O)R和Q基團；R⁸和R⁹相同或不同且各自獨立地選自-NHC(O)R和Q基團；Q選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、-N(R^y)(R^z)、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代； R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基或-R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u選自伸烷基、伸烯基、或伸炔基；R^x選自氫、烷基、環烷基、芳基或者雜芳基，該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R^y和R^z各自獨立地選自氫、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；該烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成雜環基或雜芳基，該雜環基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；n為1至4的整數；m為1至4的整數；p為1至3的整數。

在本發明一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，其中：R⁸選自-NHC(O)R，R⁹選自Q基團；或者，R⁹選自-NHC(O)R，R⁸選自Q基團； 其中R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自氫、烷基或R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u、R^y、R^z、Q基團如通式(I)中所定義。

在本發明另一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，其中：R⁸選自-NHC(O)R，且R⁹選自Q基團；或者，R⁹選自-NHC(O)R，且R⁸選自Q基團；其中R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自氫、烷基或R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u選自C₁~C₆伸烷基；R^y和R^z各自獨立地選自氫、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成5~7員含氮雜環基，較佳嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、氮雜環庚烷基、四氫吡咯基，該5~7員含氮雜環基視需要進一步被選自鹵素、C₁~C₆烷基、C₁~C₆鹵烷基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆鹵烷氧基、C₃~C₇環烷基的一個或多個基團所取代；Q基團選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、C₃~C₇環烷基。

在本發明另一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，其中：每一個R⁷各自獨立地選自-NHC(O)R； 其中R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自氫、烷基或R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u選自C₁~C₆伸烷基；R^y和R^z各自獨立地選自氫、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成5~7員含氮雜環基，較佳嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、氮雜環庚烷基、四氫吡咯基，該5~7員含氮雜環基視需要進一步被選自鹵素、C₁~C₆烷基、C₁~C₆鹵烷基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆鹵烷氧基、C₃~C₇環烷基的一個或多個基團所取代。

在本發明另一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，其中：每一個R₁各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基、-NHC(O)R^x、-C(O)N(R^y)(R^z)、-OR^uOR^x、-OR^x，其中該C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基視需要進一步被選自鹵素、氰基、胺基、硝基、羥基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R^u選自C₁~C₆伸烷基；R^x選自氫、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基或者5~7員雜芳基，該C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基或者5~7員雜芳基視需要進一步被鹵素、羥基、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基的一個或多個基團所取代。

在本發明另一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物， 其中：R²和R³各自獨立地選自氫、鹵素、氰基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)，其中該烷基、烷氧基、環烷基和雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R^x、R^y、R^z如通式(I)所定義。

在本發明另一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，其中：R₂選自氫、烷基、環烷基、氰基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)；R₃選自氫；R^x選自氫、烷基、環烷基，該烷基、環烷基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基的一個或多個取代基所取代；R^y和R^z各自獨立地選自氫、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基的一個或多個取代基所取代；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成含氮雜環基或雜芳基，該雜環基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵代烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基中的一個或多個取代基所取代。

在本發明另一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，其中：R₄和R₅各自獨立地選自氫、鹵素、氰基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆鹵烷基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆鹵烷氧基。

在本發明另一個較佳的實施方案中，根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，其中：每一個R₆各自獨立地選自Q基團；Q選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、C₃~C₇環烷基。

本發明典型的化合物包括但不限於以下化合物：

或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽。

本發明另一方面提供根據本發明所述的通式(I)所示的化合物或其藥學上可接受的鹽的製備方法，其包括以下步驟：

將中間體化合物M3和苯胺類中間體化合物M4在適宜的溫度和適當的溶劑中，在酸催化下反應，得到通式(I)化合物；該溶劑較佳異丙醇、異戊醇、第二戊醇、二噁烷；該酸較佳鹽酸、硫酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸；R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、n、m、p如通式(I)中所定義。

本發明進一步涉及一種醫藥組成物，其含有治療有效量的根據本發明所述的通式(I)所示的化合物，以及藥學上可接受的載體。

本發明進一步涉及根據本發明所述的通式(I)所示的化合物或者包含其的醫藥組成物，在製備用於預防和/或治療哺乳動物包括人類癌症的藥物中的用途，該癌症包括但不限於，非實體瘤如白血病，實體瘤如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、結腸癌。

本發明進一步涉及一種預防和/或治療哺乳動物包括人類中癌症的方法，其包括向需要其的患者施用預防或治療有效量的根據本發明所述的通式(I)所示的化合物或者包含其的醫藥組成物，該癌症包括但不限於，非實體瘤如白血病，實體瘤如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、結腸癌。

本發明進一步涉及根據本發明所述的通式(I)所示的化合物或者包含其的醫藥組成物，其用作藥物。

本發明進一步涉及根據本發明所述的通式(I)所示的化合物或者包含其的醫藥組成物，其用作預防和/或治療癌症的藥物，該癌症包 括但不限於，非實體瘤如白血病，實體瘤如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌、結腸癌。

除非另有規定，本文使用的所有技術和科學術語具有與本領域技術人員的通常理解相同含義。所有專利、申請、公開的申請和其他出版物均以全部內容併入作為參考。倘若對於本文使用的術語有多個定義，除非另有說明，以本節中的為准。如果任何給定取代基的數量沒有規定，則可以存在一個或多個取代基。例如“鹵烷基”可以含有一個或多個相同或不同的鹵素。在本文的描述中，如果化學結構和化學名稱彼此矛盾時，則是以其化學結構為准。當在本文使用時，對於任何保護基團、胺基酸和其他化合物的縮寫，除非另有說明，以其常用的公認縮寫表示，或根據IUPAC-IUB Commission on Biochemical Nomenclature表示(參見Biochem.1972,77：942-944)。

除非有相反陳述，否則下列用在說明書和申請專利範圍第書中的術語具有下述含義。

術語“烷基”指飽和的脂族烴基團，包括1至20個碳原子的直鏈和支鏈基團。其包括碳數1~18、較佳碳數1~10、更佳碳數1~6、甚至更佳碳數1~4的直鏈或支鏈烷基。非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、己基、異己基、正庚基、異庚基、正辛基、異辛基、正壬基、正癸基等。本說明書中，“烷基”還包括碳數3~10、較佳碳數3~8、更佳碳數4~6的環狀烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、 環辛基、環壬基、環癸基、十氫萘基、降冰片烷、金剛烷基。烷基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、酮基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術語“伸烷基”指飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其具有2個從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳含有1至12個碳原子，更佳含有1至6個碳原子的伸烷基。伸烷基的非限制性實例包括但不限於亞甲基(-CH₂-)、1,1-伸乙基(-CH(CH₃)-)、1,2-伸乙基(-CH₂CH₂)-、1,1-伸丙基(-CH(CH₂CH₃)-)、1,2-伸丙基(-CH₂CH(CH₃)-)、1,3-伸丙基(-CH₂CH₂CH₂-)、1,4-伸丁基(-CH₂CH₂CH₂CH₂-)和1,5-伸戊基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂-)等。

術語“烯基”指由碳和氫原子組成的含有至少一個雙鍵的直鏈或支鏈的烴鏈基團，並藉由單鍵或雙鍵與分子的其餘部分連接。較佳具有2~10個碳原子，更佳具有2~6個碳原子，甚至更佳具有2~4個碳原子。非限制性實施例包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、戊二烯基、己烯基。烯基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、酮基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術語“伸烯基”指由碳和氫原子組成的含有至少一個雙鍵的直鏈或支鏈的烴鏈基團，其具有2個從母體的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，其藉由單鍵或雙鍵與分子的其餘部分連接。較佳具有2~10個碳原子，更佳具有2~6個碳原子，甚至更佳具有2~4個碳原子。非限制性實施例包括伸乙烯基、伸丙烯基、伸丁烯基、伸戊烯基、伸己烯基等。

術語“炔基”指由碳原子和氫原子組成的含有至少一個三鍵的直鏈或支鏈的烴鏈基團，並藉由單鍵或三鍵與分子的其餘部分連接。較佳具有2~10個碳原子，更佳具有2~6個碳原子，甚至更佳具有2~4個碳原子。非限制性實施例包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基。炔基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、酮基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術語“伸炔基”指由碳原子和氫原子組成的含有至少一個三鍵的直鏈或支鏈的烴鏈基團，其具有2個從母體的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，其藉由單鍵或三鍵與分子的其餘部分連接。較佳具有2~10個碳原子，更佳具有2~6個碳原子，甚至更佳具有2~4個碳原子。非限制性實施例包括伸乙炔基、伸丙炔基、伸丁炔基、伸戊炔基、伸己炔基等。

術語“環烷基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包括3至20個碳原子，較佳包括3至12個碳原子，更佳環烷基環包含3至10個碳原子，最佳環烷基環包含3至7個碳原子。單環環烷基的 非限制性實施例包含環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等，較佳環丙基、環己烯基。多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。環烷基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、酮基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術語“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包括3至20個環原子，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O)m(其中m是整數0至2)的雜原子，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳包括3至12個環原子，其中1~4個是雜原子，更佳雜環基環包含3至10個環原子，更佳雜環基環包含5至7個環原子。單環雜環基的非限制性實施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基、吡喃基、四氫呋喃基、氮雜環庚烷基等。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。雜環基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、酮基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術語“芳基”指具有共軛的π電子體系的全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)基團，較佳為5至10員，更佳5至7員，甚至更佳苯基和萘基，最佳苯基。芳基可以是完全芳香族的基團，例如苯基、萘基、蒽基、菲基等。芳基也可以含有芳香環與非芳香環的組合，例 如，茚、芴和苊等。所述芳基環可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，非限制性實施例包含：

芳基可以是取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術語“雜芳基”指包含1至4個雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基較佳為5至10員，更佳5至7員，甚至更佳為5員或6員，例如噻二唑基、吡唑基、噁唑基、噁二唑基、咪唑基、三唑基、噻唑基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。所述雜芳基環可以稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，其非限制性實例包括：

雜芳基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、 芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

“烷氧基”指-O-(烷基)和-O-(未取代的環烷基)，其中烷基、環烷基的定義如上所述。非限定性實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、環丙氧基、環丁氧基、環戊氧基、環己氧基等。烷氧基可以是視需要取代的或未取代的，當被取代時，取代基較佳為一個或多個以下基團，獨立地選自為烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、硫醇、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基、胺基、鹵烷基、羥烷基、羧基或羧酸酯基。

術語“鹵烷基”指其中一個或多個氫原子被鹵素取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。非限定性實例包括氯甲基、三氟甲基、1-氯-2-氟乙基、2,2-二氟乙基、2-氟丙基、2-氟丙-2-基、2,2,2-三氟乙基、1,1-二氟乙基、1,3-二氟-2-甲基丙基、2,2-二氟環丙基、(三氟甲基)環丙基、4,4-二氟環己基和2,2,2-三氟-1,1-二甲基-乙基。

術語“鹵烷氧基”指其中一個或多個氫原子被鹵素取代的烷氧基，其中烷氧基的定義如上所述。

術語“鹵素”包括氟、氯、溴和碘。

術語“胺基”指-NH₂。

術語“硝基”指-NO₂。

術語“氰基”指-CN。

術語“羥基”指-OH基團。

術語“羥烷基”指被羥基取代的烷基，其中烷基的定義如上所述。

術語“羥烷氧基”指被羥基取代的烷氧基，其中烷氧基的定義如上所述。

術語“醯基”指-C(O)R，其中R指烷基、環烷基、烯基、炔基，其中烷基、環烷基、烯基、炔基的定義如上所述。非限定性實例包括乙醯基、丙醯基、丁醯基、戊醯基、己醯基、乙烯醯基、丙烯醯基。

術語“醯胺基”指-NHC(O)R或-C(O)NH₂，其中R指烷基、烯基、炔基，其中烷基、烯基、炔基的定義如上所述。非限定性實例包括甲醯胺基、乙醯胺基、丙醯胺基、丁醯胺基、戊醯胺基、己醯胺基、乙烯醯胺基、丙烯醯胺基。

術語“酯基”指-C(O)OR，其中R指烷基或環烷基，其中烷基、環烷基的定義如上所述。非限定性實例包括乙酯基、丙酯基、丁酯基、戊酯基、環丙酯基、環丁酯基、環戊酯基、環己酯基。

本說明書中的“視需要取代”是指未取代或被一個或多個(例如2、3、4個)取代基取代。其中取代基選自下組：鹵素原子、烷基、烯基、炔基、鹵烷基、烷氧基、芳基、鹵芳基、芳氧基、芳烷基、芳烷基氧基、雜環基烷氧基、鹵芳基烷基氧基、烷基胺基、烷基醯基、氰基、或雜環基等。這些取代基還可以進一步被取代。例如，作為取代基的烷基還視需要被選自鹵素原子、羥基、烷氧基、烷基胺基、吡咯烷基、苯基、吡啶基、或鹵苯基中的一個或多個基團取代。作為取代基的雜環基還視需要被選自鹵素原子、烷基、烷氧基中的一個或多個基團取代。

“醫藥組成物”表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。

“聯合用藥”(Drug Combination)是指為了達到治療目的而採用的兩種或兩種以上藥物同時或先後應用。

本發明通式(I)所示的化合物的製備方法。

為了完成本發明化合物的目的，本發明主要採用如下合成路線與技術方案。

本發明化合物的合成主要分為三部分：

第一部分：中間體M3的合成

將吲哚類中間體M1和嘧啶類中間體M2，在適當的溫度和鹼的存在下，在催化劑催化下，在適當的溶劑中藉由取代反應得到中間體化合物M3；該鹼可以為例如氫化鈉、碳酸鉀、碳酸銫等，該溶劑可以為例如DMF、NMP等，該催化劑可以為例如1-羥基苯并三唑(HOBT)。

取代的嘧啶類中間體M2通常為商購可得。

第二部分：苯胺類中間體M4的合成

可以藉由以下方案2或方案3進行合成。

步驟1：苯胺類原料M5和羧酸類原料M6在適當的溫度和鹼性條件下，在縮合劑催化下，在適當的溶劑中藉由縮合反應得到中間體M7；該鹼可以為例如三乙胺、N-甲基嗎啉等，該溶劑可以為例如DCM、THF等，該縮合劑可以為例如HATU、HBTU、TBTU等；步驟2：將中間體M7的硝基還原為胺基，得到中間體M8；硝基的還原可以在例如鐵粉氯化銨體系或H₂/鈀碳體系下實現；步驟3：羧酸類原料M9在適當的溶劑中，在適合的氯化試劑和催化劑的作用下，反應生成醯氯，該溶劑可以為例如四氫映喃、二氯甲烷等，該氯化試劑可以為例如草醯氯、氯化亞碸、三氯氧磷等，該催化劑可以為例如DMF等；然後，將得到的醯氯與中間體M8在適當的溫度和鹼性條件下在適當的溶劑中藉由親核取代反應生成中間體M10，該鹼可以為例如三乙胺、吡啶、N-甲基嗎啉等，該溶劑可以為例如DCM、THF等； 步驟4：中間體M10在酸性條件下，在適當的溶劑中脫掉保護基，得到中間體M4，該酸性條件可以為例如三氟乙酸、鹽酸乙酸乙酯等，該溶劑可以為例如DCM、乙酸乙酯等。

步驟1：將中間體羧酸M11在適當的溶劑中，在適合的氯化試劑和催化劑的作用下，反應生成醯氯，該溶劑可以為例如四氫呋喃、二氯甲烷等，該氯化試劑可以為例如草醯氯、氯化亞碸、三氯氧磷等，該催化劑可以為例如DMF等；將得到的醯氯與中間體M8在適當的溫度和鹼性條件下，在適當的溶劑中，藉由親核取代反應生成中間體M12，該鹼可以為例如三乙胺、吡啶、N-甲基嗎啉等，該溶劑可以為例如DCM、THF、DMF等；步驟2：中間體M12在適當的溫度和鹼性條件下，在適當的溶劑中藉由取代反應得到中間產物M10；該鹼可以為例如碳酸鉀、碳酸銫等，該溶劑可以為例如DMF、NMP等； 步驟3：中間體M10在酸性條件下，在適當的溶劑中脫掉保護基，生成中間體M4，該酸性條件可以為例如三氟乙酸、鹽酸乙酸乙酯等，所述溶劑可以為例如DCM、乙酸乙酯等。

第三部分：藉由吲哚類中間體M3和苯胺類中間體M4合成通式(I)的化合物

將中間體M3和苯胺類中間體M4在適宜的溫度和適當的溶劑中，在酸催化下反應得通式(I)的化合物；該溶劑可以為例如異丙醇、異戊醇、第二戊醇、二噁烷等，該酸可以為例如鹽酸、硫酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸等。

其中，R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、n、m、p、R^u、R^z、R^y如通式(I)中所定義。

本發明通式(I)所示的化合物在藥學上可接受的鹽，可以為酸加成鹽或鹼加成鹽。酸可以為無機酸，包括但不限於：鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸；或可以為有機酸，包括但不限於：檸檬酸、馬來酸、草酸，甲酸、乙酸、丙酸、戊酸、乙醇酸、苯甲酸、富馬酸、三氟乙酸、琥珀酸、酒石酸、乳酸、谷胺酸、天門冬胺酸、水楊酸、丙酮酸、甲磺酸、苯磺酸、對苯磺酸。鹼可以為無機鹼，包括但不限於：氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鎂、氫氧化鈣；或可以為有機鹼，包括但不限於：氫氧化銨、三乙胺、N,N- 二苄基乙二胺、氯普魯卡因、膽鹼、胺、二乙醇胺和其他羥基烷基胺、乙二胺、N-甲基葡糖胺、普魯卡因、N-苄基苯乙胺、精胺酸或賴胺酸；或可以為鹼金屬鹽，包括但不限於：鋰、鉀和鈉鹽；或可以為鹼土金屬鹽，包括但不限於：鋇、鈣和鎂鹽；或可以為過渡金屬鹽，包括但不限於鋅鹽；或其他金屬鹽，包括但不限於：磷酸氫鈉和磷酸氫二鈉。

本發明另一方面將通式(I)所示的化合物或藥學上可接受的鹽製備成臨床上可使用的藥用組合物。根據臨床適應症，給藥途徑與方式，其藥用製劑包括但不限於口服製劑如片劑、凝膠劑、軟/硬膠囊、乳劑、分散性粉劑、顆粒劑、水/油懸乳劑；注射劑包括靜脈注射劑、肌肉注射劑、腹腔注射劑、直腸給藥栓劑、顱內注射劑，這些劑型可為水溶液也可為油類溶液；局部製劑包括霜劑、軟膏劑、凝膠劑、水/油溶液以及包合物製劑；吸入劑型包括細粉、液體氣溶膠以及適合於體內植入的各種劑型。

本發明的醫藥組成物可以根據需要加入藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。這些載體、稀釋劑或賦形劑應符合藥物製劑製備工藝規則，與活性成分相兼容。固體口服製劑的載體包括但不限於甘露醇、乳糖、澱粉、硬脂酸鎂、纖維素、葡萄糖、蔗糖、環糊精以及促進腸吸收分子載體維生素E-PEG1000。口服製劑可加入適當的著色劑、甜味劑、矯味劑及防腐劑。

本發明通式(I)所示的化合物或藥學上可接受的鹽，按0.01-100mg/kg單位劑量給予溫血動物。

本發明通式(I)所示的化合物或藥學上可接受的鹽，在上述癌症治療中，可單獨使用，或與臨床上常規使用的放射療法、化學療法、 免疫療法、腫瘤疫苗、融瘤病毒、RNAi、癌症輔助治療以及骨髓移植和幹細胞移植的一個或多個方法聯合治療，其中包括但不限於以下抗腫瘤類藥物和治療方法：

1)烷化劑如順鉑、順鉑、奧沙利鉑、苯丁酸氮芥、卡環磷醯胺，氮芥、美法侖、替莫唑胺、白消安、伸硝基脲類。

2)抗腫瘤抗生素類如阿黴素、博來黴素、多柔比星、道諾黴素、表柔比星、伊達比星、絲裂黴素C、放線菌素、光神黴素；抗有絲分裂藥如長春新鹼、長春鹼、長春地辛、長春瑞濱、紫杉醇、泰索帝、Polo激酶抑制劑。

3)抗代謝和抗葉酸劑如氟嘧啶、雷甲胺蝶呤、阿糖胞苷、阿紮胞苷、地西他濱、替曲塞、羥基脲、IDH1/IDH2突變株抑制劑。

4)拓撲異構酶抑制劑如表鬼臼毒素、喜樹鹼、伊立替康。

5)細胞生長抑制劑如抗雌激素/抗雄激素類藥物，如他莫昔芬、氟維司群、托瑞米芬、雷諾昔芬、屈諾昔芬、碘昔芬、比卡魯胺、氟他胺、尼魯米特、醋酸環丙孕酮；LHRH拮抗劑或LHRH激動劑如戈舍瑞林、亮丙瑞林、和布舍瑞林、孕激素類如醋酸甲地孕酮；芳香酶抑制劑如阿那曲唑、來曲唑、伏羅唑、伊西美坦、5a-還原酶抑制劑如非那雄胺。

6)抗侵襲劑如c-Src激酶家族抑制劑、金屬蛋白酶抑制劑、尿激酶纖溶酶原激活物受體功能的抑制劑或者類肝素酶的抗體。

7)生長功能的抑制劑如生長因子抗體和生長因子受體抗體如抗HER2抗體曲妥珠單抗、抗EGFR抗體帕尼單抗、抗EGFR抗體西妥昔單抗等；這種抑制劑還包括其它酪胺酸激酶抑制劑以及絲胺酸/蘇胺酸激酶的抑制劑如Ras/Raf信號傳導抑制劑，MEK和/或AKT激酶的細胞信號傳導抑制劑、c-kit抑制劑、abl激酶抑制劑、PI3激酶抑制劑、JAKs和STAT3抑制劑、FLT3激酶抑制劑、CSF-1R激酶抑制劑、IGF受體激酶抑制劑，極光激酶抑制劑，NTRKA/B/C激酶抑制劑。

8)抗血管生成劑如抑制血管內皮生長因子作用的藥劑貝伐珠單抗以及VEGF受體酪胺酸激酶抑制劑。

9)表觀遺傳學(epigenetics)抑制劑如組蛋白去乙醯化酶抑制劑(HDACi)、DNA甲基轉移酶抑制劑(DNMTi)、組蛋白乙醯轉移酶抑制劑、組蛋白去甲基化酶抑制劑、組蛋白甲基轉移酶抑制劑等。

10)聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制劑(PARPi)如奧拉帕利(Olaparib)、瑞卡帕尼(Rucaparib)和尼拉帕尼(Niraparib)。

11)腫瘤免疫治療法包括任何提高患者腫瘤細胞的免疫原性的體外和體內方法。如細胞因子IL-2、IL-4或者GM-CSF進行轉染；降低T細胞無效能的方法如抗PD-1/PD-L單抗；使用轉染的免疫細胞如細胞因子轉染的樹突狀細胞的方法；使用細胞因子轉染的腫瘤細胞系的方法；降低免疫抑制性細胞如調節性T細胞、髓源性抑制細胞、或表達吲哚胺2,3-脫氧酶的樹突狀細胞的功能方法；提高免疫細胞活性的激動劑如STING以及腫瘤相關抗原蛋白類或肽類組成的癌症疫苗的方法。

12)嵌合抗原受體T細胞免疫療(CART)。

13)腫瘤基因治療如CRISPR-Cas 9、RNAi、基因轉導。

實施例

以下結合實施例進一步描述本發明，但這些實施例並非限制本發明的範圍。

化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用(Bruker AVANCE-400)核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d6)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。

MS的測定用液相色譜質譜聯用儀(Thermo，Ultimate3000/MSQ)。

HPLC的測定使用高壓液相色譜儀(安捷倫1260 Infinity，Gemini C18 250×4.6mm，5u色譜管柱)。

薄層色譜法(TLC)使用的矽膠板HSGF245採用的規格是0.15mm~0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.9mm~1.0mm(煙臺黃海)。

管柱層析色譜法一般使用200~300目矽膠為載體(煙臺黃海矽膠)。

本發明的已知起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或購買自上海達瑞精細化學品有限公司、上海泰坦科技股份有限公司、上海潤捷化學試劑有限公司、TCI、Aldrich Chemical Company。實施例中未註明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照原料或 商品製造廠商所建議的條件。未注明具體來源的試劑，為市場購買的常規試劑。

實施例中無特殊說明，反應能夠均在氬氣氛或氮氣氛下進行。氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。

實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。

實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫，為20℃~30℃。

實施例1

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-[3-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基胺基)-苯基]-苯甲醯胺(化合物1)的製備

步驟1：1-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚的製備

將2,4-二氯嘧啶(7.15g，0.048mol)溶解於DMF(80ml)中，於室溫加入HOBT(1.0g,8mmol)和碳酸鉀(11g，0.08mol)，繼續室溫攪拌15分鐘。將吲哚(4.68g，0.04mol)(溶解於DMF中)慢慢滴加到反應體系中，滴畢升溫85℃反應6小時，TLC檢測反應完全。降溫到室溫，將反應液倒入水(200ml)中，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得到5.3g黃色固體狀的1-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚。

步驟2：(3-硝基-苯基)-胺基甲酸第三丁酯的製備

將間硝基苯胺(9.66g，0.07mol)和二碳酸二第三丁酯(46g，0.21mol)溶解於150mlTHF中，於室溫依次加入碳酸鉀(19.5g，0.14mol)和DMAP(4.27g，0.035mol)，加畢升溫60℃反應12小時。TLC檢測反應完全。降溫到室溫，將反應液倒入水(600ml)中，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到16.6g粗品(3-硝基-苯基)-胺基甲酸第三丁酯，無需純化，直接用於下一步反應。

步驟3：(3-胺基-苯基)-胺基甲酸第三丁酯的製備

將步驟2中所得產物(3-硝基-苯基)-胺基甲酸第三丁酯(16.6g，0.07mol)、還原鐵粉(15.68g，0.28mol)、氯化銨(26.2g，0.49mol)加入乙醇(120ml)/水(40ml)中，並將得到的混合物加熱至90℃，反應2h。將反應液冷卻至室溫後，緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(300ml)， 用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得到13.5g黃色固體狀的(3-胺基-苯基)-胺基甲酸第三丁酯。

步驟4：[3-(3-硝基-苯甲醯胺基)-苯基]-胺基甲酸第三丁酯的製備

步驟3得到的(3-胺基-苯基)-胺基甲酸第三丁酯(9g，0.0433mol)、間硝基苯甲酸(7.23g，0.0433mmol)、HATU(24.66g，0.0649mol)和N-甲基嗎啉(13.11g，0.13mol)溶解200ml二氯甲烷中，30℃反應6小時。TLC檢測反應完全，將反應液冷卻至室溫後，緩慢倒入水中(300ml)，用二氯甲烷萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得到15.2g粗品[3-(3-硝基-苯甲醯胺基)-苯基]-胺基甲酸第三丁酯。

步驟5：[3-(3-胺基-苯甲醯胺基)-苯基]-胺基甲酸第三丁酯的製備

將步驟4中所得產物[3-(3-硝基-苯甲醯胺基)-苯基]-胺基甲酸第三丁酯(15.2g，0.043mol)、還原鐵粉(9.7g，0.17mol)、氯化銨(16.2g，0.303mol)加入乙醇(100ml)/水(30ml)中，並將得到的混合物加熱至90℃，反應2h。將反應液冷卻至室溫後，緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(300ml)，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到15.5g黃色固體狀的[3-(3-胺基-苯甲醯胺基)-苯基]-胺基甲酸第三丁酯，無需純化，直接用於下一步反應。

步驟6：(E)-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯的製備

在氮氣氛下，將反式-4-二甲基胺基巴豆酸鹽酸鹽(6.1g，0.0367mol)加入到250ml三口瓶中，氮氣球換氣三次。用注射器加入超乾(無水)THF(150ml)和6滴DMF，冰水浴降溫到0-5℃。向體系中慢慢滴加草醯氯(3.9g，0.0306mol)，滴畢，移走冰水浴，升溫至室溫反應2小時。在氮氣氛下，於室溫，將步驟5中得到的[3-(3-胺基-苯甲醯胺基)-苯基]-胺基甲酸第三丁酯(10g，0.0306mol)(溶解於80ml超乾THF中)慢慢滴加到反應體系中，滴畢，繼續室溫反應1小時。TLC檢測仍有原料剩餘，將反應液緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(300ml)，用1mol/L稀氫氧化鈉水溶液調節PH在10左右，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到5.8g粗品(E)-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯。

步驟7：(E)-N-(3-胺基-苯基)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺的製備

將步驟6中所得產物(E)-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯(5.8g，0.0132mol)溶解於二氯甲烷(60ml)中，於室溫加入三氟乙酸(20ml)，加畢繼續室溫反應12小時。TLC檢測反應完全，將反應液減壓濃縮，殘餘物緩慢加入150ml水溶解，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機相棄去，水相用1mol/L稀氫氧化鈉水溶液調節PH至9-10，用乙酸乙酯萃取(60ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗 滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3g黃色固體狀的(E)-N-(3-胺基-苯基)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺，無需純化，直接用於下一步反應。

步驟8：(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-[3-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基胺基)-苯基]-苯甲醯胺的製備

將步驟1中所得產物1-(2-氯-嘧啶-4-基)-1H-吲哚(200mg，0.873mmol)、步驟7中所得產物(E)-N-(3-胺基-苯基)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(246mg，0.728mmol)和甲磺酸(209mg，2.18mmol)分散於異丙醇(20ml)中，將反應體系加熱至85℃反應12小時。TLC檢測原料仍有剩餘，將反應液冷卻到室溫，過濾，固體用少量乙酸乙酯洗滌。所得固體加入二氯甲烷/甲醇(50ml/5ml)溶解，加入0.2mol/L稀氫氧化鈉水溶液20ml調節PH至9-10，用二氯甲烷萃取(30ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到58mg白色固體狀的(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-[3-(4-吲哚-1-基-嘧啶-2-基胺基)-苯基]-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.38(s,1H),10.28(s,1H),9.78(s,1H),8.79-8.81(d,1H),8.49-8.50(d,1H),8.25(s,1H),8.17-8.18(m,2H),7.91-7.93(d,1H),7.62-7.66(m,2H),7.45-7.53(m,2H),7.38-7.40(m,1H),7.17-7.33(m,4H),6.76-6.83(m,2H),6.35-6.39(d,1H),3.25(m,2H),2.37(s,6H)。

LC-MS(ESI)：532.2(M+H)⁺。

實施例2

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物2)的製備

與實施例1中的製備方法相同，除了用4-甲氧基吲哚(TCI)代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.30(s,1H),10.29(s,1H),9.80(s,1H),8.49-8.50(d,1H),8.36-8.38(d,1H),8.25(s,1H),8.18(s,1H),8.06-8.07(d,1H),7.90-7.92(d,1H),7.63-7.65(d,1H),7.45-7.52(m,2H),7.37-7.39(m,1H),7.31-7.33(m,1H),7.16-7.24(m,2H),6.73-6.81(m,3H),6.29-6.33(d,1H),3.89(s,3H),3.07-3.08(d,2H),2.19(s,6H)。

LC-MS(ESI)：562.2(M+H)⁺。

實施例3

(E)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)苯甲醯胺(化合物3)的製備

步驟1：4-溴巴豆酸的製備

在氮氣氛下，將(E)-4-溴-2-丁烯酸甲酯(3g，0.0168mol)溶解於30mlTHF中，冰水浴冷卻至0-5℃，慢慢滴加氫氧化鋰水溶液10ml(960mg氫氧化鋰)，滴畢，保持溫度在0-5℃反應3小時。TLC檢測反應完全，加入50ml冰水，石油醚萃取(100ml×2)，有機相棄去。水相降溫到0℃左右，用濃鹽酸調節PH至1左右，二氯甲烷萃取(70ml×3)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得1.35g固體狀的4-溴巴豆酸。

步驟2：4-溴巴豆醯氯的製備

在氮氣氛下，將4-溴巴豆酸(1.35g，8.23mmol)溶解於20ml二氯甲烷中，於室溫加入3滴DMF，冰水浴冷卻至0-5℃，慢慢滴加草醯氯(2g，15.7mmol)，滴畢，升溫至室溫反應1小時。將反應液減壓濃縮，得1.5g黑色油狀的4-溴巴豆醯氯。

步驟3：(E)-{3-[3-(4-溴-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯的製備

在氮氣氛下，將-[3-(3-胺基-苯甲醯胺基)-苯基]-胺基甲酸第三丁酯(570mg，1.743mmol)(實施例1步驟5中製備)溶解於20m二氯甲烷中，冰水浴冷卻至0-5℃，慢慢滴加4-溴巴豆醯氯(381mg，2.1mmol，溶解於10mlDCM中)，滴畢，升溫至室溫反應0.5小時。TLC檢測反應完全，加入50ml冰水，二氯甲烷萃取(50ml×3)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得900mg固體狀的(E)-{3-[3-(4-溴-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯。無需純化，直接用於下一步反應。

步驟4：(E)-{3-[3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯的製備

將步驟3中得到的(E)-{3-[3-(4-溴-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯(900mg，1.743mmol，理論收率)和嗎啉(303mg，3.49mmol)溶解於20mDMF中，於室溫加入碳酸鉀(721mg，5.23mmol)，將反應體系加熱至60℃反應1小時。TLC檢測反應完全，降溫至室溫，將反應液倒入水(100ml)中，用乙酸乙酯萃取(50ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到490mg黃色固體狀的(E)-{3-[3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯。

步驟5：(E)-N-(3-胺基-苯基)-3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺的製備

將步驟4中得到的(E)-{3-[3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基}-胺基甲酸第三丁酯(490mg，1.02mmol)溶解於20m乙酸乙酯 中，於室溫加入鹽酸乙酸乙酯(20ml，2mol/L)，加畢，繼續室溫反應2小時，TLC檢測反應完全，將反應液緩慢倒入飽和碳酸氫鈉水溶液中(50ml)，用1mol/L稀氫氧化鈉水溶液調節PH至10左右，用乙酸乙酯萃取(50ml×3)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到120mg黃色固體狀的(E)-N-(3-胺基-苯基)-3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

步驟6：(E)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺的製備

將步驟5中所得產物(E)-N-(3-胺基-苯基)-3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(120mg，0.316mmol)、1-(2-氯-嘧啶-4-基)-4-甲氧基-1H-吲哚(123mg，0.474mmol)(實施例2中製備)和對甲苯磺酸(65mg，0.379mmol)溶解於異戊醇(10ml)中，將反應體系加熱至120℃反應12小時。TLC檢測原料仍有剩餘，將反應液冷卻至室溫，加入20ml甲基第三丁基醚，過濾，固體用少量甲基第三丁基醚洗滌。所得固體加入二氯甲烷/甲醇(50ml/5ml)溶解，加入0.2mol/L稀氫氧化鈉水溶液20ml調節PH至9-10，用二氯甲烷萃取(30ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到15mg白色固體狀的(E)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-嗎啉-4-基-丁-2-烯醯胺基)苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.38(br,1H),10.30(s,1H),9.80(s,1H), 8.49-8.50(d,1H),8.35-8.39(m,1H),8.25(s,1H),8.18(s,1H),8.06-8.07(d,1H),7.92-7.94(m,1H),7.64-7.66(d,1H),7.51-7.53(d,1H),7.45-7.49(t,1H),7.38-7.40(d,1H),7.28-7.32(t,1H),7.23-7.24(d,1H),7.16-7.20(t,1H),6.73-6.81(m,3H),6.34-6.38(d,1H),3.89(s,3H),3.63(m,4H),3.16(m,2H),2.42(m,4H)。

LC-MS(ESI)：604.2(M+H)⁺。

實施例4

(E)-4-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物4)的製備

與實施例2中的製備方法相同，除了用對硝基苯甲酸(TCI)代替實施例1步驟4中的間硝基苯甲酸，得到(E)-4-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.35(s,1H),10.13(s,1H),9.77(s,1H),8.49-8.51(d,1H),8.36-8.38(m,1H),8.24(s,1H),8.06-8.07(d,1H),7.94-7.96(d,2H),7.79-7.81(d,2H),7.49-7.51(m,1H),7.39-7.41(m,1H),7.28-7.32(t,1H),7.22-7.23(d,1H),7.15-7.20(t,1H),6.73-6.83(m,3H),6.30-6.34(d,1H),3.90(s,3H),3.10-3.11(d,2H),2.21(s,6H)。

LC-MS(ESI)：562.2(M+H)⁺。

實施例5

(E)-4-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-[3-(4-{4-[2-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-乙氧基]-吲哚-1-基}-嘧啶-2-基胺基)-苯基]-苯甲醯胺(化合物5)的製備

步驟1：4-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚的製備

將4-羥基吲哚(4g，0.03mol)和1-溴-2-氯乙烷(6.45g，0.045mol)溶解于2-丁酮(60ml)中，於室溫加入碳酸銫(20g，0.0615mol)，並將反應體系加熱至90℃反應16小時。TLC檢測仍有原料剩餘，降溫至室溫，將反應液緩慢倒入200ml水中，用乙酸乙酯萃取(100ml×3)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到4-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚2.1g。

步驟2：4-[2-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-乙氧基]-1H-吲哚的製備

將步驟1得到的產物4-(2-氯-乙氧基)-1H-吲哚(2.1g，0.01mol)和3-羥基-6-甲基吡啶(1.4g，0.013mol)溶解於DMF(30ml)中，於室溫加入碳酸銫(6.5g，0.02mol)，並將反應體系加熱至90℃反應2小時。TLC檢測反應完全，降溫至室溫，將反應液緩慢倒入100ml水，用乙酸乙酯萃取(60ml×3)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到1.5g黃色固體狀的4-[2-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-乙氧基]-1H-吲哚。

步驟3：(E)-4-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-[3-(4-{4-[2-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-乙氧基]-吲哚-1-基}-嘧啶-2-基胺基)-苯基]-苯甲醯胺的製備

與實施例1中的製備方法相同，除了用4-[2-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-乙氧基]-1H-吲哚代替實施例1步驟1中的吲哚，並用對硝基苯甲酸代替實施例1步驟4中的間硝基苯甲酸，得到(E)-4-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-[3-(4-{4-[2-(6-甲基-吡啶-3-基氧基)-乙氧基]-吲哚-1-基}-嘧啶-2-基胺基)-苯基]-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.41(s,1H),10.16(s,1H),9.79(s,1H),8.49-8.50(d,1H),8.40-8.42(d,1H),8.24(m,2H),8.06-8.07(d,1H),7.94-7.96(d,2H),7.79-7.81(d,2H),7.49-7.51(d,1H),7.38-7.40(m,2H),7.28-7.32(m,1H),7.16-7.23(m,3H),6.73-6.81(m,3H),6.31-6.35(d,1H),4.45(s,4H),3.14-3.15(d,2H),2.41(s,3H),2.23(s,6H)。

LC-MS(ESI)：683.2(M+H)⁺。

實施例6

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-乙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物6)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-乙氧基吲哚(TCI)代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-乙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.26(s,1H),10.26(s,1H),9.76(s,1H),8.48-8.49(d,1H),8.33-8.35(d,1H),8.237(s,1H),8.16(s,1H),8.04-8.05(d,1H),7.89-7.91(d,1H),7.62-7.63(d,1H),7.44-7.51(m,2H),7.36-7.38(m,1H),7.27-7.31(t,1H),7.21-7.22(d,1H),7.13-7.17(t,1H),6.71-6.81(m,3H),6.28-6.31(d,1H),4.13-4.18(q,2H),3.06-3.08(d,2H),2.18(s,6H),1.38-1.42(t,3H)。

LC-MS(ESI)：576.3(M+H)⁺。

實施例7

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-異丙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物7)的製備

步驟1：4-異丙氧基吲哚的製備

將4-羥基吲哚(5g，0.0376mol)、2-溴異丙烷(5.5g，0.045mol)和碳酸鉀(10.4g，0.075mol)混合於30mL DMF中，加入催化量的KI，80℃油浴反應1小時，TLC檢測反應完全。降溫至室溫，將反應液倒入水(100ml)中，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得黑色油狀物4.9g，無需純化，直接用於下一步反應。

步驟2：(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-異丙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺的製備

與實施例1中的製備方法相同，除了用4-異丙氧基吲哚代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-異丙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.41(s,1H),10.28(s,1H),9.79(s,1H),8.49-8.50(d,1H),8.32-8.35(d,1H),8.25(s,1H),8.20(s,1H),8.04-8.05(d,1H),7.92-7.94(d,1H),7.64-7.66(d,1H),7.45-7.52(m,2H),7.38-7.40(m,1H),7.29-7.33(t,1H),7.21-7.22(d,1H),7.13-7.17(t,1H),7.73-7.83(m,3H),6.36-6.39(d,1H),4.68-4.74(m,1H),3.28-3.29(d,2H),2.33(s,6H),1.32-1.34(d,6H)。

LC-MS(ESI)：590.2(M+H)⁺。

實施例8

(E)-N-{3-[4-(5,6-二甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物8)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用5,6-二甲氧基吲哚(TCI)代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-N-{3-[4-(5,6-二甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.46(s,1H),10.30(s,1H),9.76(s,1H),8.47-8.48(d,1H),8.24(s,1H),8.17(s,1H),8.15(s,1H),7.96-7.97(d,1H),7.92-7.94(m,1H),7.62-7.64(d,1H),7.52-7.54(d,1H),7.42-7.48(m,2H),7.27-7.31(t,1H),7.17-7.19(d,1H),7.14(s,1H),6.76-6.83(m,1H),6.69-6.70(d,1H),6.37-6.41(d,1H),3.79(s,3H),3.69(s,3H),3.36-3.37(m,2H),2.38s,6H)。

LC-MS(ESI)：592.3(M+H)⁺。

實施例9

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-(3-{4-[4-(3-甲氧基-丙氧基)-吲哚-1-基]-嘧啶-2-基胺基}-苯基)-苯甲醯胺(化合物9)的製備

與實施例7的製備方法相同，除了用1-溴-3-甲氧基丙烷(達瑞)代替實施例7步驟1中的2-溴異丙烷，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-(3-{4-[4-(3-甲氧基-丙氧基)-吲哚-1-基]-嘧啶-2-基胺基}-苯基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.30(s,1H),10.28(s,1H),9.79(s,1H),8.49-8.50(d,1H),8.35-8.37(d,1H),8.25(s,1H),8.18(s,1H),8.06-8.07(d,1H),7.91-7.93(d,1H),7.63-7.65(d,1H),7.51-7.53(d,1H),7.45-7.49(t,1H),7.38-7.40(d,1H),7.28-7.32(t,1H),7.22-7.23(d,1H),7.14-7.18(t,1H),6.72-6.82(m,3H),6.30-6.33(d,1H),4.14-4.17(t,2H),3.52-3.55(t,2H),3.27(s,3H),3.10-3.11(d,2H),2.21(s,6H),2.01-2.04(m,2H)。

LC-MS(ESI)：620.3(M+H)⁺。

實施例10

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-(3-{4-[4-(噻唑-2-基甲氧基)-吲哚-1-基]-嘧啶-2-基胺基}-苯基)-苯甲醯胺(化合物10)的製備

與實施例7的製備方法相同，除了用2-氯甲基噻唑(達瑞)代替實施例1步驟1中的2-溴異丙烷，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-(3-{4-[4-(噻唑-2-基甲氧基)-吲哚-1-基]-嘧啶-2-基胺基}-苯基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.29(s,1H),10.28(s,1H),9.81(s,1H),8.50-8.52(d,1H),8.43-8.45(d,1H),8.25(s,1H),8.18(s,1H),8.11-8.12(d,1H),7.91-7.93(m,1H),7.87-7.88(d,1H),7.79-7.80(d,1H),7.63-7.65(d,1H),7.51-7.53(d,1H),7.44-7.48(t,1H),7.38-7.40(d,1H),7.29-7.33(t,1H),7.24-7.25(d,1H),7.16-7.20(t,1H),6.89-6.91(d,1H),6.85-6.86(d,1H),6.75-6.82(m,1H)),6.29-6.33(d,1H),3.09-3.10(d,2H),2.20(s,6H)。

LC-MS(ESI)：645.3(M+H)⁺。

實施例11

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-氟-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物11)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-氟吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-氟-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.27(s,1H),10.26(s,1H),9.83(s,1H),8.63-8.65(d,1H),8.53-8.54(d,1H),8.23-8.25(m,2H),8.18(s,1H),7.89-7.91(d,1H),7.62-7.64(d,1H),7.45-7.52(m,2H),7.38-7.40(m,1H),7.22-7.33(m,3H),7.02-7.04(m,1H),6.91-6.92(d,1H),6.75-6.82(m,1H),6.29-6.32(d,1H),3.08-3.09(d,2H),2.20(s,6H)。

LC-MS(ESI)：550.2(M+H)⁺。

實施例12

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(6-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物12)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用6-氟吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(6-氟吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.30(s,1H),10.29(s,1H),9.87(s,1H),8.71-8.73(d,1H),8.50-8.541(d,1H),8.25(s,1H),8.19-8.20(d,1H),8.15(s,1H),7.91-7.93(d,1H),7.61-7.65(m,2H),7.52-7.54(d,1H),7.45-7.49(t,1H),7.40-7.42(m,1H),7.29--7.33(t,1H),7.25-7.26(d,1H),7.05-7.11(m,1H),6.84-6.85(d,1H),6.74-6.81(m,1H),6.29-6.33(d,1H),3.11-3.13(d,2H),2.22(s,6H)。

LC-MS(ESI)：550.2(M+H)⁺。

實施例13

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(7-氟-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物13)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用7-氟吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(7-氟-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.27(s,1H),10.25(s,1H),9.86(s,1H),8.58-8.60(d,1H),8.34(s,1H),8.19(s,1H),8.10-8.11(d,1H),7.90-7.92(d,1H),7.64-7.66(d,1H),7.46-7.53(m,3H),7.11-7.34(m,4H),6.99-7.02(t,1H),6.90-6.91(m,1H),6.76--6.82(m,1H),6.29-6.33(d,1H),3.09-3.10(d,2H),2.20(s,6H)。

LC-MS(ESI)：550.2(M+H)⁺。

實施例14

(E)-N-{3-[4-(4-二氟甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物14)的製備

步驟1：1-二氟甲氧基-2-甲基-3-硝基苯的製備

將二氟乙酸鈉(7.5g，0.049mol)和碳酸鉀(6.76g，0.049mol)混合於10mLDMF中，加入2mL水，室溫攪拌。將2-甲基-3-硝基苯酚(3g，0.02mol)溶於7mLDMF中，慢慢滴加到反應體系中，滴畢升溫至110℃反應4h，降溫至室溫，將反應液倒入1N NaOH水溶液(100ml)中，用乙酸乙酯萃取(100ml×1)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得到2.2g黑色油狀的1-二氟甲氧基-2-甲基-3-硝基苯。

步驟2：[2-(2-二氟甲氧基-6-硝基-苯基)-乙烯基]-二甲基-胺的製備

將步驟1中所得產物1-二氟甲氧基-2-甲基-3-硝基苯(2.2g,0.0108mol)溶於12ml DMF中，加入7ml DMF-DMA，加畢升溫至110℃反應20小時。降溫至室溫，將反應液倒入1N NaOH水溶液(100ml)中，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由管柱層析色譜法(沖提劑：石油醚/乙酸乙酯)純化，得到1g紅色油狀的[2-(2-二氟甲氧基-6-硝基-苯基)-乙烯基]-二甲基-胺。

步驟3：4-二氟甲氧基-1H-吲哚的製備

將步驟2中所得產物[2-(2-二氟甲氧基-6-硝基-苯基)-乙烯基]-二甲基-胺(500mg，1.94mmol)與鐵粉(500mg，8.93mmol)混合，於10ml冰乙酸中，120℃油浴反應2小時，TLC檢測反應完全，降溫至室溫，抽濾，濾液加入1N NaOH水溶液(100ml)中，用乙酸乙酯萃取(100ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮， 得到270mg粗品4-二氟甲氧基-1H-吲哚，無需純化，直接用於下一步反應。

步驟4：(E)-N-{3-[4-(4-二氟甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-二氟甲氧基-1H-吲哚代替實施例1步驟1中的吲哚，並用對硝基苯甲酸(TCI)代替實施例1步驟4中的間硝基苯甲酸，得到(E)-N-{3-[4-(4-二氟甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.28-10.29(m,2H),9.85(s,1H),8.70-8.72(d,1H),8.52-8.54(d,1H),8.23-8.25(m,2H),8.18(s,1H),7.89-7.91(d,1H),7.62-7.64(d,1H),7.45-7.53(m,2H),7.38-7.40(m,1H),7.25-7.43(m,3H),7.01-7.03(d,1H),7.84-7.85(d,1H),6.75-6.81(m,1H),6.28-6.32(d,1H),3.07-3.08(d,2H),2.19(s,6H)。

LC-MS(ESI)：598.2(M+H)⁺。

實施例15

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{2-甲氧基-5-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物15)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-甲氧基吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，並用4-甲氧基-3-硝基苯胺代替實施例1步驟2中的 間硝基苯胺，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{2-甲氧基-5-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.29(s,1H),9.65(s,1H),9.42(s,1H),8.45-8.47(d,1H),8.33(br,1H),8.23-8.24(d,1H),8.19(s,1H),8.13-8.04(d,1H),7.93-7.95(m,1H),7.66-7.68(d,1H),7.56-7.59(m,1H),7.46-7.50(t,1H),7.16-7.22(m,2H),7.08-7.10(d,1H),6.72-6.82(m,3H),6.28-6.32(d,1H),3.89(s,3H),3.86(s,3H),3.08-3.09(d,2H),2.19(s,6H)。

LC-MS(ESI)：592.2(M+H)⁺。

實施例16

(E)-N-{4-氯-3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物16)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-甲氧基吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，並用2-氯-5-硝基苯胺代替實施例1步驟2中的間硝基苯胺，得到(E)-N-{4-氯-3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO₃-d₆,400MHz)δ：10.73(s,1H),10.51(s,1H),9.30(s,1H),8.43-8.44(d,1H),8.23(s,1H),8.17(d,1H),7.94-8.01(m,2H),7.76-7.78(dd,1H),7.66-7.68(d,1H),7.54-7.56(d,1H),7.46-7.50(t,1H),7.19-7.21(d,1H),6.98-7.02(t,1H),6.81-6.88(m,1H),6.76-6.77(d,1H),6.68-6.70(d,1H),6.50- 6.54(d,1H),3.86(s,3H),3.76-3.77(d,2H),2.64(s,6H)。

LC-MS(ESI)：596.2(M+H)⁺。

實施例17

(E)-N-{2-氯-5-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物17)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-甲氧基吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，並用4-氯-3-硝基苯胺代替實施例1步驟2中的間硝基苯胺，得到(E)-N-{2-氯-5-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.30(s,1H),10.06(s,1H),9.98(s,1H),8.52-8.54(d,1H),8.34-8.36(m,1H),8.23(s,1H),8.17-8.18(d,1H),8.03-8.04(d,1H),7.93-7.95(d,1H),7.69-7.75(m,2H),7.47-7.51(m,2H),7.22-7.28(m,2H),6.73-6.82(m,3H),6.29-6.33(d,1H),3.89(s,3H),3.07-3.08(d,2H),2.19(s,6H)。

LC-MS(ESI)：596.2(M+H)⁺。

實施例18

(E)-4-氯-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物18)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-甲氧基吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，並用4-氯-3-硝基苯甲酸代替實施例1步驟4中的間硝基苯甲酸，得到(E)-4-氯-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.35(s,1H),9.91(s,1H),9.80(s,1H),8.50-8.51(d,1H),8.36(m,2H),8.25(s,1H),8.06-8.07(d,1H),7.80-7.82(d,1H),7.68-7.70(d,1H),7.51-7.53(d,1H),7.16-7.40(m,5H),6.69-6.85(m,3H),6.50-6.54(d,1H),3.90(s,3H),3.18-3.21(m,2H),2.28(s,6H)。

LC-MS(ESI)：596.2(M+H)⁺。

實施例19

(E)-2-氯-5-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物19)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用4-甲氧基吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，並用2-氯-5-硝基苯甲酸代替實施例1步驟4中的間 硝基苯甲酸，得到(E)-2-氯-5-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.54(s,1H),10.43(m,1H),9.81(s,1H),8.48-8.50(d,1H),8.37-8.39(d,1H),8.19(s,1H),8.06-8.07(d,1H),7.91(s,1H),7.76-7.78(m,1H),7.55-7.57(d,1H),7.50(s,1H),7.53(s,1H),7.28-7.36(m,2H),7.19-7.24(m,2H),6.76-6.83(m,3H),6.30-6.33(d,1H),3.90(s,3H),3.19-3.20(m,2H),2.27(s,6H)。

LC-MS(ESI)：596.2(M+H)⁺。

實施例20

(E)-N-{3-[4-(3-氰基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物20)的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用3-氰基吲哚(達瑞)代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-N-{3-[4-(3-氰基吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.41(s,1H),10.33(s,1H),10.00(s,1H),9.16(s,1H),8.85(br,1H),8.63-8.64(d,1H),8.29(s,1H),8.19(s,1H),7.91-7.93(d,1H),7.73-7.75(d,1H),7.65-7.67(d,1H),7.30-7.51(m,7H),6.76-6.83(m,1H),6.35-6.39(d,1H),3.31-3.32(m,2H),2.35(s,6H)。

LC-MS(ESI)：557.2(M+H)⁺。

實施例21

(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(化合物21)的製備

步驟1：1H-吲哚-3-碳醯氯的製備

3-吲哚甲酸(30g，0.186mol)於500ml二氯甲烷中室溫攪拌，未能完全溶解。加入0.5mlDMF，然後於室溫慢慢將草醯氯(71.0g，0.56mol)滴加其中。30分鐘後滴加完畢，繼續室溫反應2小時。TLC檢測反應完全，減壓濃縮，得粗品黃色固體狀的1H-吲哚-3-碳醯氯。產品無需純化，直接用於下一步反應。

步驟2：1H-吲哚-3-甲醯胺的製備

將步驟1中得到的1H-吲哚-3-碳醯氯(0.186mol，理論收率)加入至500mlDCM中，室溫攪拌30分鐘，不能完全溶解，為渾濁分散體系。在2L三口瓶中加入350ml氨水和200mlDCM，並強烈攪拌。於室溫將1H-吲哚-3-碳醯氯的二氯甲烷渾濁分散體系慢慢滴加到2L三口瓶中，20分鐘後滴畢，繼續室溫反應1小時。TLC檢測反應完全，過濾，固體用少量乙醇洗 滌，鼓風乾燥(60℃)8小時，得粗品20g黃色固體狀的1H-吲哚-3-甲醯胺。產品無需純化，直接用於下一步反應。

步驟3：(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺的製備

與實施例1的製備方法相同，除了用1H-吲哚-3-甲醯胺代替實施例1步驟1中的吲哚，得到(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.34(s,1H),10.33(s,1H),9.92(s,1H),8.85(s,1H),8.75(br,1H),8.60-8.61(d,1H),8.31(s,1H),8.25-8.26(d,1H),8.17(s,1H),7.91-7.93(d,1H),7.76(br,1H),7.63-7.64(d,1H),7.46-7.52(m,2H),7.15-7.40(m,6H),6.77-6.81(m,1H),6.32-6.35(d,1H),3.17(m,2H),3.07-3.08(d,2H),2.25(s,6H)。

LC-MS(ESI)：575.2(M+H)⁺。

實施例22

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[5-氟-4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物22)的製備

步驟1：1-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-甲氧基-1H-吲哚的製備

將2,4-二氯-5-氟嘧啶(1.25g，7.5mmol)溶解於DMF(30ml)中，於室溫加入HOBT(135mg,1mmol)和碳酸鉀(2g，15mmol)，繼續室溫攪拌15分鐘。將4-甲氧基吲哚(735m，5mol)慢慢滴加到反應體系中，加畢繼續室溫反應30分鐘，然後升溫至85℃反應4小時，TLC檢測反應完全。降溫至室溫，將反應液倒入水(150ml)中，室溫攪拌30分鐘，過濾，固體用50ml水洗滌，鼓風乾燥(60℃)8小時，得到860mg黃色固體狀的1-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-甲氧基-1H-吲哚。

步驟2：(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[5-氟-4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺的製備

將步驟1中所得產物1-(2-氯-5-氟-嘧啶-4-基)-4-甲氧基-1H-吲哚(180mg，0.65mmol)與(E)-N-(3-胺基-苯基)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(183mg，0.54mmol)(實施例1步驟7中製備)和對甲苯磺酸(134mg，0.78mmol)溶解於異戊醇(10ml)中，將反應體系加熱至120℃反應12小時。TLC檢測原料仍有剩餘，將反應液冷卻至室溫，加入20ml甲基第三丁基醚，過濾，固體用少量甲基第三丁基醚洗滌。所得固體加入二氯甲烷/甲醇(50ml/5ml)溶解，加入0.2mol/L稀氫氧化鈉水 溶液20ml調節PH至9-10，用二氯甲烷萃取(30ml×2)，有機相用飽和NaCl溶液洗滌兩次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，殘餘物藉由製備板分離(展開劑：二氯甲烷/甲醇)純化，得到10mg白色固體狀的(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[5-氟-4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.57(s,1H),10.26(s,1H),9.88(s,1H),8.67-8.68(d,1H),8.18(m,2H),7.94-7.96(m,2H),7.78(s,1H),7.65-7.67(d,1H),7.47-7.50(m,2H),7.35-7.36(m,1H),7.25-7.29(t,1H),7.16-7.20(t,1H),6.78-6.85(m,2H),6.73-6.75(d,1H),6.46-6.50(d,1H),3.90(s,3H),3.79(m,2H),2.67(s,6H)。

LC-MS(ESI)：580.2(M+H)⁺。

實施例23

(E)-N-{3-[5-氯-4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物23)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用2,4,5-三氯嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-N-{3-[5-氯-4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.41(s,1H),10.25(s,1H),10.11(s,1H),8.74(s,1H),8.17(s,1H),8.13(s,1H),7.92-7.94(m,1H),7.76-7.77(d,1H),7.62-7.64(d,1H),7.46-7.51(m,2H),7.41-7.43(d,1H),7.34-7.36(m,1H),7.23-7.27(t,1H),7.12-7.16(t,1H),6.79-6.83(m,1H),6.76-6.77(d,1H),6.67-6.69(d,1H),6.36-6.39(d,1H),3.90(s,3H),3.35(m,2H),2.39(s,6H)。

LC-MS(ESI)：596.2(M+H)⁺。

實施例24

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-5-甲基-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物24)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用2,4-二氯-5-甲基嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-5-甲基-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.30(s,1H),10.21(s,1H),9.78(s,1H),8.56(s,1H),8.17(s,1H),8.14(s,1H),7.92-7.93(d,1H),7.62-7.66(m,2H),7.54-7.56(m,1H),7.46-7.49(m,1H),7.30-7.33(m,2H),7.22(m,1H),7.12(m,1H),6.73-6.81(m,2H),6.64-6.66(d,1H),6.30-6.33(d,1H),3.90(s,3H),3.09-3.10(d,2H),2.20(s,6H),2.18(s,3H)。

LC-MS(ESI)：576.2(M+H)⁺。

實施例25

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[5-甲氧基-4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物25)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用2,4-二氯-5-甲氧基嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[5-甲氧基-4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.74(s,1H),10.23(s,1H),9.61(s,1H),8.53(s,1H),8.22(s,1H),8.17(s,1H),7.95-7.97(d,1H),7.87-7.88(d,1H),7.80-7.82(d,1H),7.65-7.67(m,1H),7.47-7.54(m,2H),7.28-7.30(m,1H),7.21-7.25(m,1H),7.12-7.16(t,1H),6.82-6.89(m,1H),6.73-6.74(m,1H),6.68-6.70(d,1H),6.53-6.57(d,1H),3.89(m,8H),2.72(s,6H)。

LC-MS(ESI)：592.2(M+H)⁺。

實施例26

(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-6-甲基-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺(化合物26)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用2,4-二氯-6-甲基嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-6-甲基-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.61(s,1H),10.28(s,1H),9.73(s,1H),8.28(m,2H),8.21(s,1H),8.05(s,1H),7.95-7.97(d,1H),7.67-7.69(d,1H),7.50-7.53(m,2H),7.15-7.35(m,4H),7.71-7.83(m,3H),6.50-6.54(d,1H),3.89(m,5H),2.77(s,6H),2.45(s,3H)。

LC-MS(ESI)：576.2(M+H)⁺。

實施例27

(E)-N-{3-[5-氯-4-(4-乙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物27)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用4-乙氧基吲哚(達瑞)代替實施例22步驟1中的4-甲氧基吲哚，並用2,4,5-三氯嘧啶(達瑞)代替實施 例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-N-{3-[5-氯-4-(4-乙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.43(s,1H),10.25(s,1H),10.11(s,1H),8.73(s,1H),8.18(br,1H),8.13(br,1H),7.92-7.94(m,1H),7.75-7.76(d,1H),7.63-7.65(d,1H),7.46-7.51(m,2H),7.40-7.42(d,1H),7.34-7.36(m,1H),7.23-7.27(t,1H),7.10-7.14(m,1H),6.75-6.83(m,2H),6.65-6.67(d,1H),6.37-6.41(d,1H),4.13-4.20(q,2H),3.37-3.39(m,2H),2.40(s,6H),1.39-1.43(t,3H)。

LC-MS(ESI)：610.2(M+H)⁺。

實施例28

(E)-N-{3-[5-氯-4-(4-異丙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺(化合物28)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用4-異丙氧基吲哚(實施例7中製備)代替實施例22步驟1中的4-甲氧基吲哚，並用2,4,5-三氯嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-N-{3-[5-氯-4-(4-異丙氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.48(s,1H),10.26(s,1H),10.12(s,1H),8.73(s,1H),8.19(s,1H),8.13(s,1H),7.93-7.95(m,1H),7.74-7.75(d,1H),7.63-7.65(d,1H),7.46-7.50(m,2H),7.39-7.41(d,1H),7.34-7.36(m,1H),7.23-7.27(t,1H),7.09-7.13(m,1H),6.77-6.84(m,1H),6.71-6.72(d,1H),6.66-6.68(d,1H),6.39-6.43(d,1H),4.70-4.73(m,1H),3.50-3.51(m,2H),2.48(s,6H),1.33-1.34(d,6H)。

LC-MS(ESI)：624.2(M+H)⁺。

實施例29

(E)-1-(5-氯-2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(化合物29)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用1H-吲哚-3-甲醯胺(實施例21步驟2中製備)代替實施例22步驟1中的4-甲氧基吲哚，並用2,4,5-三氯嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-1-(5-氯-2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.69(s,1H),10.30(s,1H),10.21(s,1H),8.82(s,1H),8.56(s,1H),8.25-8.26(m,1H),8.17(m,2H),7.94-7.96(m,1H),7.75-7.80(m,2H),7.64-7.66(d,1H),7.47-7.52(m,2H),7.12-7.38(m,5H),6.80-6.86(m,1H),6.51-6.55(d,1H),3.90-3.92(m,2H),2.74(s,6H)。

LC-MS(ESI)：609.1(M+H)⁺。

實施例30

(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-5-甲基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(化合物30)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用1H-吲哚-3-甲醯胺(實施例21步驟2中製備)代替實施例22步驟1中的4-甲氧基吲哚，並用2,4-二氯-5-甲基嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-5-甲基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.71(s,1H),10.27(s,1H),9.86(s,1H),8.63(s,1H),8.50(s,1H),8.27-8.28(d,1H),8.17-8.19(m,2H),7.95-7.97(m,1H),7.78(br,1H),7.65-7.72(m,2H),7.23-7.51(m,6H),7.09(br,1H),6.83-6.87(m,1H),6.51-6.55(d,1H),3.79(m,2H),2.67(s,6H),2.21(s,3H)。

LC-MS(ESI)：589.2(M+H)⁺。

實施例31

(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-5-甲氧基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(化合物31)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用1H-吲哚-3-甲醯胺(實施例21步驟2中製備)代替實施例22步驟1中的4-甲氧基吲哚，並用2,4-二氯-5-甲氧基嘧啶(達瑞)代替實施例22步驟1中的2,4-二氯-5-氟嘧啶，得到(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲基胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-5-甲氧基-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.73(s,1H),10.27(s,1H),9.71(s,1H),8.65(s,1H),8.62(s,1H),8.20-8.26(m,3H),8.07-8.09(d,1H),7.95-7.97(d,1H),7.83(br,1H),7.65-7.67(d,1H),7.47-7.51(m,2H),7.21-7.31(m,4H),7.10(br,1H),6.81-6.89(m,1H),6.52-6.56(d,1H),3.93(s,3H),3.80-3.82(d,2H),2.67(s,6H)。

LC-MS(ESI)：605.3(M+H)⁺。

實施例32

(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-5-氟-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺(化合物32)的製備

與實施例22的製備方法相同，除了用1H-吲哚-3-甲醯胺(實施例21步驟2中製備)代替實施例22步驟1中的4-甲氧基吲哚得到(E)-1-(2-{3-[3-(4-二甲胺基-丁-2-烯醯胺基)-苯甲醯胺基]-苯基胺基}-5-氟-嘧啶-4-基)-1H-吲哚-3-甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.28(s,1H),9.97(s,1H),8.76-8.77(d,1H),8.58-8.59(d,1H),8.25-8.28(m,2H),8.22(s,1H),8.16(s,1H),7.86-7.93(m,2H),7.63-7.65(d,1H),7.47-7.50(m,2H),7.25-7.39(m,4H),7.12(br,1H),6.77-6.85(m,1H),6.44-6.48(d,1H),2.63(s,6H)。

LC-MS(ESI)：593.3(M+H)⁺。

對照實施例1

對照化合物(3-(4-二甲基胺基-丁醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺)(ACA1180)的製備

(3-(4-二甲基胺基-丁醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺)的製備與實施例1中的製備方法相同，除了用4-甲氧基吲哚(TCI)代替實施例1步驟1中的吲哚，並用4-二甲基胺基丁酸鹽酸鹽代替實施例1步驟6中的反式-4-二甲基胺基巴豆酸鹽酸鹽，得到3-(4-二甲基胺基-丁醯胺基)-N-{3-[4-(4-甲氧基-吲哚-1-基)-嘧啶-2-基胺基]-苯基}-苯甲醯胺。

¹HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ：10.26(s,1H),10.21(s,1H),9.77(s,1H),8.49-8.50(d,1H),8.35-8.37(d,1H),8.23(s,1H),8.12(s,1H),8.05-8.06(d,1H),7.83-7.85(d,1H),7.62-7.64(d,1H),7.50-7.52(d,1H),7.43-7.47(t,1H),7.37-7.39(m,1H),7.28-7.32(m,1H),7.16-7.23(m,2H),6.79-6.80(d,1H),6.73-6.75(d,1H),3.90(s,3H),2.73(m,2H),2.51(s,6H),2.42(t,2H),1.87(m,2H)。

LC-MS(ESI)：564.2(M+H)+。

生物學評價

本發明化合物對MOLM13白血病細胞系體外生長抑制活性的測定

實驗材料與方法

1．MOLM13細胞系及細胞培養

MOLM13為人急性髓細胞樣白血病細胞系，CDK7表達陽性，細胞系來源於DMSZ。用RPMI1640(Gibco)加10%胎牛血清(Gibco)，1%雙抗，2mM穀胺醯胺培養基懸浮培養。

2．藥物處理

離心收集(1700rpm，3分鐘)對數生長期的MOLM-13懸浮細胞，棄上清，計數細胞。用RPMI1640培養基配製細胞濃度為每毫升2×10⁵細胞，接種到96孔板(Corning)，每孔100微升，37℃，5% CO₂培養過夜。第二天，加入待測化合物到培養細胞中，平行2孔。有機溶劑終濃度不超過千分之一，細胞繼續培養3~6天，MTT測定。

本發明化合物與對照化合物THZ1和THZ2(表1)分別用DMSO(Sigma)溶解，化合物純度達98%以上。化合物貯存濃度為10mM，-20℃保存，使用前對倍或者10倍系列稀釋。

3. MTT檢測及IC₅₀計算

MTT檢測試劑為Dojindo CCK8試劑盒，酶標測定儀為THERMO MULTISKAN FC儀。

將CCK8試劑直接加入到藥物處理和溶劑對照的懸浮細胞MOLM-13中，CCK8終濃度為10%，繼續培養1~4小時，當溶劑對照孔呈現暗黃色時，測OD450nm光吸收值(THERMO MULTISKAN FC儀)，按下列公式計算細胞生長率：細胞生長率%=100*(T-T₀)/(C-T₀)

T=藥物處理細胞孔光密度值-空白對照孔光密度值；T₀=藥物處理前細胞孔光密度值-空白對照孔光密度值；C=溶劑對照組細胞孔光密度-空白對照孔光密度值。藉由GraphPad Prism7軟件計算細胞生長50%抑制的藥物濃度即IC₅₀。試驗重複進行1至3次，並對數據進行生物學統計分析。

4. 實驗結果

表2總結本發明化合物抑制腫瘤細胞MOLM-13體外生長誘導細胞凋亡的IC₅₀濃度的測定結果。IC₅₀值越小，化合物活性越強。表中“*****”代表IC₅₀值<1nM；“****”代表IC₅₀值在1nM~<10nM範圍；“***”代表IC₅₀值在10nM~<100nM範圍；“**”代表IC₅₀值在100nM~<1000nM範圍；“*”代表IC₅₀值>1000nM；“-”代表無測定。

結論：結果顯示本發明化合物對MOLM-13具有高的生長抑制活性，IC₅₀值可達次奈米莫耳。

Claims (17)

1. 一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽， 其中：每一個R¹各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、-N(R^y)(R^z)、烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、-NHC(O)R^x、-C(O)N(R^y)(R^z)、-OR^uOR^x、-OR^x或-OR^uN(R^y)(R^z)，其中該烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R²和R³各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)，其中該烷基、烷氧基、環烷基和雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代； R⁴和R⁵各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)，其中該烷基、烷氧基、環烷基和雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；每一個R⁶各自獨立地選自Q基團；每一個R⁷為各自獨立地選自-NHC(O)R和Q基團；R⁸和R⁹相同或不同且各自獨立地選自-NHC(O)R和Q基團；Q選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、-N(R^y)(R^z)、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基，其中該烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基或-R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u選自伸烷基、伸烯基、或伸炔基；R^x選自氫、烷基、環烷基、芳基或者雜芳基，該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基的一個或多個取代基所取代；R^y和R^z各自獨立地選自氫、烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；該烷基、烷氧基、烯基、炔基、環烷基、芳基或雜 芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成含氮雜環基或雜芳基，該雜環基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；n為1至4的整數；m為1至4的整數；p為1至3的整數。
2. 如申請專利範圍第1項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：R⁸選自-NHC(O)R，且R⁹選自Q基團；或者，R⁹選自-NHC(O)-R，且R⁸選自Q基團；其中R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自氫、烷基或-R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u、R^y、R^z、Q基團如申請專利範圍第1項中所定義。
3. 如申請專利範圍第1或2項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽， 其中：R⁸選自-NHC(O)R，且R⁹選自Q基團；或者，R⁹選自-NHC(O)-R，且R⁸選自Q基團；其中R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自氫、烷基或R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u選自C₁~C₆伸烷基；R^y和R^z各自獨立地選自氫、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成5~7員含氮雜環基，該5~7員含氮雜環基視需要進一步被選自鹵素、C₁~C₆烷基、C₁~C₆鹵烷基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆鹵烷氧基、C₃~C₇環烷基的一個或多個基團所取代；Q基團選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、C₃~C₇環烷基。
4. 如申請專利範圍第3項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、氮雜環庚烷基、四氫吡咯基。
5. 如申請專利範圍第1至4項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：每一個R⁷各自獨立地選自-NHC(O)R； 其中R選自烯基、炔基、氰基，該烯基和炔基視需要進一步被選自氫、烷基或R^uN(R^y)(R^z)的一個或多個基團取代；R^u選自C₁~C₆伸烷基；R^y和R^z各自獨立地選自氫、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成5~7員含氮雜環基，該5~7員含氮雜環基視需要進一步被選自鹵素、C₁~C₆烷基、C₁~C₆鹵烷基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆鹵烷氧基、C₃~C₇環烷基的一個或多個基團所取代。
6. 如申請專利範圍第5項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、氮雜環庚烷基、四氫吡咯基。
7. 如申請專利範圍第1至6項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：每一個R₁各自獨立地選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基、-NHC(O)R^x、-C(O)N(R^y)(R^z)、-OR^uOR^x、-OR^x，其中該C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基視需要進一步被選自鹵素、氰基、胺基、硝基、羥基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R^u選自C₁~C₆伸烷基； R^x選自氫、C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基或者5~7員雜芳基，該C₁~C₆烷基、C₃~C₇環烷基或者5~7員雜芳基視需要進一步被鹵素、羥基、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基的一個或多個基團所取代。
8. 如申請專利範圍第1至7項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：R²和R³各自獨立地選自氫、鹵素、氰基、烷基、烷氧基、環烷基、雜環基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)，其中該烷基、烷氧基、環烷基和雜環基視需要進一步被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基所取代；R^x、R^y、R^z如申請專利範圍第1項所定義。
9. 如申請專利範圍第1至8項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：R₂選自氫、烷基、環烷基、氰基、-NHC(O)R^x或-C(O)N(R^y)(R^z)；R₃選自氫；R^x選自氫、烷基、環烷基，該烷基、環烷基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基的一個或多個取代基所取代； R^y和R^z各自獨立地選自氫、烷基、環烷基、雜環基、芳基或雜芳基；該烷基、環烷基、芳基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基、環烷基、雜環基的一個或多個取代基所取代；或者，R^y和R^z與它們所連接的氮原子一起形成含氮雜環基或雜芳基，該雜環基或雜芳基視需要進一步被選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、氰基、胺基、硝基、羥基、羥烷基中的一個或多個取代基所取代。
10. 如申請專利範圍第1至9項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：R₄和R₅各自獨立地選自氫、鹵素、氰基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆鹵烷基、C₁~C₆烷氧基、C₁~C₆鹵烷氧基。
11. 如申請專利範圍第1至10項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其中：每一個R₆各自獨立地選自Q基團；Q選自氫、鹵素、羥基、氰基、硝基、胺基、C₁~C₆烷基、C₁~C₆烷氧基、C₃~C₇環烷基。
12. 如申請專利範圍第1至11項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，其選自：
13. 一種申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽的製備方法，其包括以下步驟： 將中間體化合物M3和苯胺類中間體化合物M4在適宜的溫度和適當的溶劑中，在酸催化下反應，得到通式(I)化合物；R¹、R²、R³、R⁴、R⁵、R⁶、R⁷、R⁸、R⁹、n、m、p如申請專利範圍第1項中所定義。
14. 如申請專利範圍第13項所述的製備方法，其中該溶劑選自異丙醇、異戊醇、第二戊醇、二噁烷。
15. 如申請專利範圍第13項所述的製備方法，其中該酸選自鹽酸、硫酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、苯磺酸。
16. 一種醫藥組成物，其含有治療有效量的根據申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內 消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載體。
17. 一種申請專利範圍第1至12項中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其藥學上可接受的鹽或者申請專利範圍第16項所述的醫藥組成物的用途，其用在製備用於預防和/或治療哺乳動物包括人類中癌症的藥物，該癌症選自非實體瘤如白血病和實體瘤如皮膚癌、黑色素瘤、肺癌、胃癌、乳腺癌、胰腺癌、肝癌或結腸癌。