TW201907957A - 新穎之肽連接子與念珠藻素接合物，其製備方法及治療之用途 - Google Patents

新穎之肽連接子與念珠藻素接合物，其製備方法及治療之用途 Download PDF

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Abstract

本揭示文係關於式(I)之化合物：RCG1-L-P(I)其中RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學肌團；P係代表H、OH或活化O；而L係代表一特定的連接子。本揭示文亦關於念珠藻素酬載(cryptophycin payload)，以及念珠藻素接合物，含有彼等之組成物以及其治療用途，特別是作為抗癌劑。本揭示文亦關於製備這些接合物之方法。

Description

新穎之肽連接子與念珠藻素接合物，其製備方法及治療之用途
本揭示文係關於一新穎的肽連接子、新穎的念珠藻素酬載、新穎的念珠藻素接合物、含有彼等之組成物及其治療用途，例如用作為抗癌劑。本揭示文亦關於製備這些接合物的方法。
藉由酵素例如組織蛋白酶B(Cathepsin B)，在細胞的溶酶體中將這些連接子酵素性裂解。組織蛋白酶B(Cathepsin B)為一種屬於木瓜酶(papain)家族之半胱胺酸蛋白酶且在哺乳動物間為主要的溶酶體蛋白酶之一。其係涉及蛋白質週轉和維持細胞代謝以及數種其他的生理或病理過程，如，例如腫瘤發展。其在基因和蛋白層級上的過度表現已在腫瘤上驗證，增加的蛋白亦導致酵素活性增加。此項為數種化療劑之前藥取向(Int J Oncology 2013,42,373-383)以及抗體-藥物接合物(ADC)之可裂解連接子觀念的基礎(Bioconj Chem 2002,13,855-869)。就ADC，一種由纈胺酸-瓜胺酸(ValCit)序列連接對-胺基苯甲醇自分解基團所組成之常用的肽連接子(J Org Chem 2002,67,1866-1872)，如WO2011/001052之實例23中作為例示。結合一細胞毒性藥物，此完成的結構為相當疏水的，其就達到特定的藥物-抗體比率(DAR)，單體純度和ADC穩定性可能具挑戰性。事實上，儘管延伸接合優化，WO2011/00152之實例23無法成功地接合來提供滿足DAR和單體純度之ADC，亦即DAR>2及>95%的單體。
因為用於ADC的藥物-如微管蛋白(tubulin)或DNA結合劑-基本上為疏水性的，需要更親水性的胜肽連接子來增進酬載的溶解度-酬載為一包括細胞毒性藥物接合一連接子之化合物-及因而潛在地增其對抗 體接合物的反應性及後續ADC的穩定性。增加酬載溶解性應可增加DAR、單體純度和ADC穩定性，特別是就聚集傾向而言。
本揭示文係關於選自式(I)化合物之新穎的胜肽化合物：RCG1-L-P(I)其中■RCG1係代表對存在多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■P係代表一氫原子、-OH或活化O，其中該活化O係如下所定義。■L係代表式(II)之連接子： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表一氫原子時，則x=0或1，而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表一活化O時，則x=1而y=z=0，或x=y=z=1；■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自獨立地係選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，如-(CH2)n-形式，n為範圍從1至12及例如範圍從1至6之整數；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如氫原子或甲基基團；●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取 代的胺基酸AA ns 序列，其中經取代AA s 或非經取代AA ns 係如下所定義；●w係代表範圍從1至12，例如從1至6之整數，例如2或3；‧若(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s ，則L2係代表一單鍵、(C1-C6)烷基基、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、(C1-C6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-環己基基團、NA8-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基 -NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；‧若(AA)w係代表w個非經取代胺基酸AA ns 之序列，則L2係代表一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6) 烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；■A 7 係代表一直鏈或支鏈、飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-SO2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換；應了解，包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；■A 8 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團；■i係代表範圍從1至50，例如範圍從1至35之整數。
本揭示文進一步係關於式(IV)之念珠藻素酬載： 其中：■R 1 係代表一(C1-C6)烷基基團；■R 2 和R 3 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團；或另一種選擇R 2 和R 3 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基或(C3-C6)雜環烷基基團；■R 4 和R 5 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團或(C1-C6)烷基-NH(R12)基團或(C1-C6)烷基-OH基團或(C1-C6)烷基-SH基團或(C1-C6)烷基-CO2H基團；或另一種選擇R 4 和R 5 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基或(C3-C6)雜環烷基基團；■X係代表O或N(R6)；■R 6 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團；■R 7 和R 8 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團或(C1-C6)烷基-CO2H基團或(C1-C6)烷基-N(C1-C6)烷基2基團；或另一種選擇R 7 和R 8 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基基團或(C3-C6)雜環烷基基團；■R 9 係代表至少一苯基核的取代基，其各自相互獨立係由下列選出：氫原子、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵素原子、-NH2、-NH(C1-C6)烷基、-N(C1-C6)烷基2、-NH(C1-C6)環烷基或(C3-C6)雜環烷基；■R 10 係代表選自氫原子和(C1-C4)烷基基團之至少一苯基核的取代基；■Y係代表●-NR11-(C1-C6)烷基-，例如-NR11-(CH2)n-，如 ●-O-(C1-C6)烷基-，例如-O-(CH2)n-，如 ●-S-(C1-C6)烷基-，例如-S-(CH2)n-，如 Y係位於苯基核的鄰位(o)、間位(m)或對位(p)；■R 11 和R 12 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基，例如一氫原子或甲基基團；■n係代表範圍從1至6之整數；■L係如式(I)中所定義並代表一式(II)之連接子；■RCG1係代表在連接子末端的反應化學基團，RCG1係對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性。
本發明進一步係關於式(V)之接合物： 其中：■R 1 、R 2 、R 3 、R 4 、R 5 、R 6 、R 7 、R 8 、R 9 ,R 10 、R 11 和R 12 係如式(IV)中所定義；■X、Y和L係如式(IV)中所定義；■G係代表介於RCG1(存在連接子末端的反應性化學基團)及RCG2(存在抗體(Ab)上的正交反應性化學基團)之間的反應產物；■Ab係代表一抗體。
各取代基R 1 至R 12 亦採用如實例中所述的空間組態之一(例如R或S或另一種選擇Z或E)。
式(I)、(II)、(III)、(IV)和(V)之化合物可含有至少一個不對稱碳原 子。其因此可以鏡像異構物或非鏡像異構物的形式存在。這些鏡像異構物和非鏡像異構物以及其混合物，包括外消旋混合物構成本揭示文之部分。
式(I)、(II)、(IV)之化合物，包括該等作為例證之化合物，可以鹼或酸加成鹽形式存在，例如醫藥上可接受酸類之形式。例如，若這些化合物包括一SO3H官能基，則其可以SO3 -鹼金屬鹽類存在，例如SO3 -鈉鹽(SO3 - +Na)。
定義
在本揭示文之內文中，特定的術語係具有下列定義：●烯基基團：藉由從烯移除一個氫原子所得到的烴基基團。烯基可為直鏈或支鏈。可提及的實例包括乙烯基(-CH=CH2，亦稱為乙烯基(vinyl))及丙烯基(-CH2-CH=CH2，亦稱為烯丙基(allyl))。
●烷氧基基團：一-O-烷基基團，其中該烷基基團係如下所定義；●烷基基團：藉由從烷類移除一氫原子所得到的直鏈或支鏈飽和脂系烴基為基礎的基團。可提及的實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、戊基、新戊基、2,2-二甲基丙基和己基基團；●伸烷基基團：實驗式-CnH2n-之飽和二價基團，係藉由從烷類移除二個氫原子而得來。伸烷基基團可為直鏈或支鏈。可提及的實例包括亞甲基(-CH2-)、伸乙基(-CH2CH2-)、伸丙基(-CH2CH2CH2-)、伸丁基(-CH2CH2CH2CH2-)及伸己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH2-)基團或下列支 鏈基團、、、；例如，式-(CH2)n-之伸烷基基團，n係代表一個整數；在一範圍的數值內，包括上下限值(例如，「n範圍從1至6」或「範圍從1至6包括1和6之上下限值」類型的範圍)；●抗體：對生物標靶具親和力的抗體，例如單株抗體。抗體的官能基係指生物活性化合物如針對生物標靶之細胞毒性化合物。抗體可為單株、多株或多專一性；其亦可為抗體片段；其亦可為鼠科、嵌合、人源化或人類抗體。「抗體」可為天然或常規抗體，其中二條重鏈係藉 由雙硫鍵彼此連接且各重鏈係藉由雙硫鍵與輕鏈相連接(亦稱為「全長抗體」)。術語「常規(或全長)抗體」二者係指包括訊號胜肽(或前胜肽，若有的話)的形式，以及由分泌或蛋白分解處理鏈之後所得到的成熟形式。有二種形式的輕鏈λ(l)和κ(k)。有五種決定抗體分子之功能活性的主要重鏈(或同型)：IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。各鏈係含有不同的序列區。輕鏈係包括二個結構域或區，一可變區(VL)和一恆定區(CL)。重鏈係包括四個區，一可變區(VH)和三個恆定區(CH1、CH2和CH3，總稱為CH)。輕鏈(VL)和重鏈(VH)的可變區係決定結合辨識和抗源的專一性。輕鏈(CL)和重鏈(CH)的恆定區係賦予重要的生物性質，例如抗體鏈的聯結、分泌、經胎盤移動性、補體結合和與Fc受體(FcR)結合。Fv片段為免疫球蛋白之Fab片段的N-端部分且係由一輕鏈和一重鏈的可變部分所組成。抗體的專一性係屬於抗體結合位和抗原決定位之間的結構互補性。抗體結合位係由主要來自高變區或互補決定區(CDR)之殘基所組成。偶爾，來自非高變區或框架區(FR)的殘基影響整個區域結構及因此影響結合位。CDR係指共同定義天然免疫球蛋白結合位之天然Fv區的結合親和力和專一性之胺基酸序列。免疫球蛋白的輕鏈和重鏈各自具有三個CDR，分別稱為CDR1-L、CDR2-L、CDR3-L以及CDR1-H、CDR2-H、CDR3-H。常規的抗體抗原結合位因此係包括六個CDR，其係包含來自個重鏈和輕鏈V區的CDR組。
如文中所用，術語「抗體」係指常規(全長)抗體及其片段，以及單區抗體及其片段，例如單區抗體之可變重鏈。(常規)抗體的片段典型地係包括一部分的完整抗體，例如抗原結合區或完整抗體的可變區，並保留常規抗體的生物功能。此等片段的實例包括Fv、Fab、F(ab')2、Fab'、dsFv、(dsFv)2、scFv、sc(Fv)2、奈米抗體和雙抗體。
抗體的功能係指生物活性化合物作為生物標靶之細胞毒性化合物。
●芳基基團：含有範圍從5至10個碳原子之環狀芳香基團。芳基基團之實例包括苯基、甲苯基、二甲苯基、萘基；●生物標靶：抗原(或抗原的基團)，例如位於癌細胞或與該腫瘤有關的基質細胞之表面；這些抗原可為，例如，一生長因子受體、致 癌基因產物或突變的「腫瘤抑制」基因產物、血管新生相關的分子或黏附分子；●接合物：抗體-藥物接合物或ADC，亦即多肽，例如經由一連接子共價連接至少一細胞化合物之分子的抗體；●環烷基基團：在一所在的環狀結構中包括範圍從3至6個碳原子之環烷基基團。可提及的實例包括環丙基、環丁基、環戊基和環己基基團；●DAR(藥物-與-抗體比率)：經由連接子與抗體相連接的細胞毒性分子之平均數目；●鹵素：任何四種氟、氯、溴和碘之元素；●雜芳基基團：在所在的環中含有範圍從2至10個碳原子和範圍從1至5個雜原子，例如氮、氧或硫並與碳原子相連接形成該環之芳基基團。雜芳基基團之實例包括吡啶基、嘧啶基、噻吩基、咪唑基、三唑基、吲哚基、咪唑并吡啶基、吡唑基；●雜環烷基基團：在所在的環中含有範圍從2至8個碳原子和範圍從1至3個雜原子，例如氮、氧或硫並與碳原子相連接形成該環之環烷基基團。實例包括氮丙啶基、吡咯啶基、哌啶基、哌基、嗎福啉基、噻嗎福啉基、四氫呋喃基、四氫硫呋喃基、四氫哌喃基、氮呾基、氧呾基和哌喃基；●連接子：可將細胞毒性化合物與一多肽，例如抗體共價相連接以形成一接合物之原子或單鍵基群；●酬載(payload)：共價連接一連接子之細胞毒性化合物；●反應性化學基團：可促進或進行化學反應的原子基群；另外，如整篇本揭示文所述，SO3H官能基可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
縮寫
ADC：抗體-藥物接合物；ALK：(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，如-(CH2)n-形式，n為範圍從1至12之整數及舉例而言範圍從1至6；aq.：水溶液；Ar：氬；AUC：曲線下面積；BCN：(1α,8α,9β)-雙環[6.1.0]壬-4-炔-9-甲醇；CHCl3：氯仿；CH3CN：乙腈；CO2：二氧 化碳；CR：完全有效；crypto係指下式 之單元，crypto例如係指一實例之念珠藻素化合物，WO2011/001052中所述的D1-D8念珠藻素化合物之一或PCT/EP2016/076603中所述的下列D1-D19念珠藻素化合物之一：
■其中W係代表●(C1-C6)烷基-NH(R11)，例如(CH2)nNHR11； ●(C1-C6)烷基-OH，例如(CH2)nOH；●(C1-C6)烷基-SH，例如(CH2)nSH；●CO2H或C(=O)NH2；●(C1-C6)烷基-CO2H或(C1-C6)烷基-C(=O)NH2；或●(C1-C6)烷基-N3
W係位在苯基核之鄰位(o)、間位(m)或對位(p)；■R 11 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團；■n係代表範圍從1至6之整數；d：天；DAR：藥物-與-抗體比率(D1係指具有1之DAR的ADC，D2具有2之DAR的ADC等)；DBCO：二苯甲基環辛炔；DCC：N,N’-二環己基碳二亞胺；DCM：二氯甲烷；DIEA：N,N-二異丙基乙基胺；DMA：二甲基乙醯胺；DMAP：4-(二甲基胺基)吡啶；DMEM：杜氏修改依格爾培養基(Dulbecco's Modified Eagle Medium)；DMEM/F12：杜氏修改依格爾培養基營養素混合物F-12；DMF：二甲基甲醯胺；DMSO：二甲基亞碸；DPBS：杜氏磷酸鹽緩衝食鹽水；DSC：N,N'-二琥珀醯亞胺碳酸酯；EDC：1-(3-二甲基胺基丙基)-3-乙基碳二亞胺；EDTA：乙二胺四乙酸；EEDQ：N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二氫喹啉；ELSD：蒸發光散射檢測器；eq.：當量；ES：電噴灑；EtOAc：乙酸乙酯；Et2O：乙醚；Ex.：實例；FCS：胎牛血清；Fmoc：9-茀基甲氧基羰基；GI：導電基團；h：小時；H2O：水；Hal：鹵素；HATU：1-[雙(二甲基胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡錠3-氧化物六氟磷酸鹽；HCl：鹽酸；HEPES：4-(2-羥乙基)-1-哌乙磺酸；HIC：疏水作用層析；HOAt：1-羥基-7-氮雜苯并三唑；HOBt：1-羥基-苯并三唑；HPLC：高效液相層析；HRMS：高解析質譜；IC50：半數抑制濃度；i.e.：亦即；IEC：離子交換層析；iPrOH：2-丙醇；iPr2O：二異丙醚；i.v.：靜脈內MeCN：乙腈；MeOH：甲醇；MeTHF：2-甲基-四氫呋喃；MFCO：1-氟-2-環辛炔-1-羧酸；MgSO4：硫化鎂；min：分鐘；MsCl：甲磺醯氯；MTBE：甲基第三丁基醚；MTD：最大耐受劑量；NaH：氫化鈉；NaCl：氯化鈉；NaHCO3：碳酸氫鈉；n.d.：未測定；NHS： N-羥基琥珀醯亞胺；NMP：1-甲基-2-吡咯酮；NMR：核磁共振；PABA：對-胺基苯甲醇；PBS：磷酸鹽緩衝食鹽水；PEG：聚乙二醇；PNGase F：胜肽-N-糖苷酶F；ppm：百萬分之一；PR：部分有效；QS：足量，係指所需要的量；Q-Tof：四極桿飛行時間；quant.：定量產率；RCG：反應性化學基團；RT：室溫；sat.：飽和；s.c.：皮下；SCID：嚴重複合型免疫缺乏症；SEC：粒徑排阻層析；T3P：丙基膦酸酐；TBAF：四丁基氟化銨；TFA：三氟乙酸；TFS：無腫瘤存活者；THF：四氫呋喃；TLC：薄層層析；t1/2：半衰期；tR：滯留時間；UPLC：超效液相層析；UV：紫外線。
圖1：Ex.6對抗SCID小鼠中MDA-MB-231異種移植之活體內效用。
圖2：Ex.16、Ex.19、Ex.23和Ex.32對抗SCID小鼠中MDA-MB-231異種移植之活體內效用。
圖3：1.25mg/kg之Ex.16、Ex.19、Ex.23和Ex.32對抗SCID小鼠中MDA-MB-231異種移植之活體內效用。
圖4：Ex.26抗SCID小鼠中MDA-MB-231異種移植之活體內效用。
圖5：Ex.29抗SCID小鼠中MDA-MB-231異種移植之活體內效用。
圖6：Ex.35抗SCID小鼠中MDA-MB-231異種移植之活體內效用。
圖7：Ex.41抗SCID小鼠中MDA-MB-231異種移植之活體內效用。
本揭示文係關於選自式(I)化合物之新穎的胜肽化合物：RCG1-L-P(I)其中■RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■L係代表如下所定義之式(II)連接子；■P係代表一氫原子、-OH或活化O。
可提及的活化O之實例包括(O-NHS)、 其中陽離子係代表，例如鈉、鉀或鈣； 或、、基團，其中GI係代表至少一個導電基團，例如-NO2或鹵素原子(-Hal)，例如氟原子(-F)。其可為， 例如下列基團：或。
存在式(I)中的連接子L為式(II)： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0，或x=y=z=1； ■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自相互獨立地係選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n-形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如氫原子或甲基基團。
●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取代的胺基酸AA ns 序列，其中經取代AA s 或非經取代AA ns 係如下所定義；●w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3；‧若(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s ，則L2係代表：一單鍵、(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、(C1-C6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-環己基基團、NA8-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基 -(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；‧若(AA)w係代表w個非經取代胺基酸AA ns 之序列，則L2係代表：一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基 -(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；■A 7 係代表直鏈或支鏈、飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHCO-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換；應了解， 包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
■A 8 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團；■i係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至35。
根據一特別的實施例，本揭示文係關於式(I)之化合物：RCG1-L-P(I)其中■RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■P係代表一氫原子、-OH或活化O；■L係代表式(II)之連接子： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表一氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0，或x=y=z=1；■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 係各自相互獨立地選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n-形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團。
●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取代的胺基酸AA ns 序列；●w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3；‧若(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s ，則L2係代表一單鍵、(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、(C1-C6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-環己基基團、NA8-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷 基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；‧若(AA)w係代表w個非經取代胺基酸AA ns 之序列，則L2係代表一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基 -NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；■A 7 係代表一直鏈或支鏈、飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，應了解，包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；■A 8 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團；■i係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至35，■非經取代胺基酸AA ns 係指D或L構形之與下列相同或衍生自下列的天然或非天然胺基酸：丙胺酸(Ala)、β-丙胺酸、γ-胺基丁酸、2-胺 基-2-環己基乙酸、2-胺基-2-苯基乙酸、精胺酸(Arg)、天門冬醯胺酸(Asn)、天門冬胺酸(Asp)、瓜胺酸(Cit)、半胱胺酸(Cys)、α,α-二甲基-γ-胺基丁酸、β,β-二甲基-γ-胺基丁酸、麩醯胺酸(Gln)、麩胺酸(Glu)、甘胺酸(Gly)、高-半胱胺酸、硒半胱胺酸、高-硒半胱胺酸、組胺酸(His)、異白胺酸(Ile)、白胺酸(Leu)、離胺酸(Lys)、ε-乙醯基-離胺酸(AcLys)、甲硫胺酸(Met)、鳥胺酸(Orn)、苯丙胺酸(Phe)、proline(Pro)、絲胺酸(Ser)、蘇胺酸(Thr)、色胺酸(Trp)、酪胺酸(Tyr)和纈胺酸(Val)。
根據另外的特別實施例，本揭示文係關於式(I)之化合物：RCG1-L-P(I)其中■RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■P係代表一氫原子、-OH或活化O；■L係代表式(II)之連接子： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表一氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0，或x=y=z=1；■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自相互獨立地係代表選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n- 形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團。
●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取代的胺基酸AA ns 序列；●w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3；‧若(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s ，則L2係代表一單鍵、(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、(C1-C6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-環己基基團、NA8-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6) 烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；‧若(AA)w係代表w個非經取代胺基酸AA ns 之序列，則L2係代表一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基 基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；■A 7 係代表直鏈或支鏈、飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，應了解，包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；■A 8 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團； ■i係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至35，其中該經取代的胺基酸AA s 係具有式(VI)： 其中：●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，較 佳地T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-，或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-N+H(烷基)-、-N+(烷基)2-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，例如A 9 為 -[(CH2)2-O]4-CH3、-[(CH2)2-O]24-CH3、、 或-[(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外特別的實施例，本揭示文係關於式(I)之化合物：RCG1-L-P(I)其中■RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■P係代表一氫原子、-OH或活化O；■L係代表式(II)之連接子： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表一氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0，或x=y=z=1；■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自相互獨立地係選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n-形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團。
●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取代的胺基酸AA ns 序列；●w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3；‧若(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s ，則L2係代表一單鍵、(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、(C1-C6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-環己基基團、NA8-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基 -C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；‧若(AA)w係代表一w個非經取代胺基酸AA ns 之序列，則L2係代表一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基 -C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；■A 7 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、 -P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，應了解，包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；■A 8 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團；■i係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至35，其中該經取代胺基酸AA s 係具有式(VI)： 其中：●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，較 佳地T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-N+H(烷 基)-、-N+(烷基)2-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換， 例如A 9 為-[(CH2)2-O]4-CH3、-[(CH2)2-O]24-CH3、、 或-[(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外特別的實施例，本揭示文係關於式(I)之化合物：RCG1-L-P(I)其中■RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■P係代表一氫原子、-OH或活化O；■L係代表式(II)之連接子： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表一氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0或x=y=z=1；■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自相互獨立地係選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n-形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團。
●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取代的胺基酸AA ns 序列；●w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3；‧若(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s ，則L2係代表一單鍵、(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、(C1-C6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-環己基基團、NA8-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、 C(=O)-NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團； ‧若(AA)w係代表w個非經取代胺基酸AA ns 之序列，則L2係代表一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團； ■A 7 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，應了解，包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；■A 8 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團；■i係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至35，其中該經取代胺基酸AA s 係具有式(VI)： 其中：●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，較 佳地T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-； ●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-S-、-Se-、-O-、-N(烷基)-、-N+H(烷基)-、-N+(烷基)2-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，例如A 9 為- [(CH2)2-O]4-CH3,-[(CH2)2-O]24-CH3,, 或-[(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外特別的實施例，本揭示文係關於式(I)之化合物：RCG1-L-P(I)其中■RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■P係代表一氫原子、-OH或活化O；■L係代表式(II)之連接子： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表一氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0或x=y=z=1；■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自相互獨立地係選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n-之形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團.
●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取代的胺基酸AA ns 序列；●w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3；‧若(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s ，則L2係代表一單鍵、(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、(C1-C6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-CH(SO3H)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-環己基基 團、NA8-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-O(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-CH(SO3H)基團、NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、 C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；‧若(AA)w係代表w個非經取代胺基酸AA ns 之序列，則L2係代表一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基 -C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；■A 7 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，應了解，包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；■A 8 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團；■i係代表範圍從1至50之整數，例如例如範圍從1至35，其中該經取代胺基酸AA s 係具有式(VI)： 其中：●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，較 佳地T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、 -C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-Se-、-O-、-N(烷基)-、-N+H(烷基)-、-N+(烷基)2-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，例如A 9 為- [(CH2)2-O]4-CH3、-[(CH2)2-O]24-CH3、、 或-[(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外特別的實施例，本揭示文係關於式(I)之化合物：RCG1-L-P(I) 其中■RCG1係代表對多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■P係代表一氫原子、-OH或活化O；■L係代表式(II)之連接子： 其中：●L1為式(III)： 其中：■當P係代表一氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0或x=y=z=1；■J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自相互獨立地係選自CA1和N；■ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n-之形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團。
●(AA)w係代表經由胜肽鍵連接一起之w個經取代的AA s 或非經取代的胺基酸AA ns 序列；●w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3；●(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；●A 7 係如上所定義。
根據至少一實施例，(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 而L2係代表：-一(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)3基團；-一C(=O)-(C1-C6)烷基基團，例如a C(=O)-(CH2)3基團；或-一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 係如上所定義。
根據至少一實施例，(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 而L2係代表：-一(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)3基團；-一C(=O)-(C1-C6)烷基基團，例如C(=O)-(CH2)3基團；或-一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如a(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 為-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外的實施例，(AA)w含有w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團其中A 7 係如上所定義。
根據另外的實施例，(AA)w含有w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團其中A 7 係代表：-一C(=O)-[(CH2)2-O]a-CH3基團其中「a」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4、7和24，例如A 7 為一C(=O)-[(CH2)2-O]4-CH3基團、C(=O)-[(CH2)2-O]7-CH3基團或C(=O)-[(CH2)2-O]24-CH3基團；-一-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；或-一C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]a-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團其中「a」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4，例如A 7 為-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；根據至少一實施例，(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表：一NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、NA7-芳基基團、NA7-雜芳基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA7-芳基基團、C(=O)-NA7-雜芳基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、 C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
根據另外的實施例，(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、NA7-芳基、NA7-雜芳基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-芳基、C(=O)-NA7-雜芳基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
根據另外的實施例，(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基 -NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
根據另外的實施例，(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中A 7 和A 8 係如上所定義。
根據至少另外的實施例，(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係包括一代表下列的A 7 ：一C(=O)-[(CH2)2-O]4-CH3基團；C(=O)-[(CH2)2-O]7-CH3基團；C(=O)-[(CH2)2-O]24-CH3基團；C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據至少另外的實施例，(AA)w含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表：
或 L1可為下列其中之一(III1-5)： 其中：●J 1 、J 2 、J 3 和J 4 各自相互獨立地係選自CA1和N；●ALK係代表(C1-C12)伸烷基基團，例如(C1-C6)伸烷基，例如-(CH2)n- 之形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；●A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和A 6 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一氫原子或甲基基團。
AA係指胺基酸。胺基酸為示NH2-CHA10-COOH之化合物，其中A 10 係代表AA的側鏈。AA可為經取代AA s 或非經取代AA ns 胺基酸。
非經取代胺基酸AA ns 係指與下列相同或衍生自下列之構形D或L的天然或非天然胺基酸：丙胺酸(Ala)、β-丙胺酸、γ-胺基丁酸、2-胺基-2-環己基乙酸、2-胺基-2-苯基乙酸、精胺酸(Arg)、天門冬醯胺酸(Asn)、天門冬胺酸(Asp)、瓜胺酸(Cit)、半胱胺酸(Cys)、α,α-二甲基-γ-胺基丁酸、β,β-二甲基-γ-胺基丁酸、麩醯胺酸(Gln)、麩胺酸(Glu)、甘胺酸(Gly)、高-半胱胺酸、硒半胱胺酸、高-硒半胱胺酸、組胺酸(His)、異白胺酸(Ile)、白胺酸(Leu)、離胺酸(Lys)、ε-乙醯基-離胺酸(AcLys)、甲硫胺酸(Met)、鳥胺酸(Orn)、苯基丙胺酸(Phe)、脯胺酸(Pro)、絲胺酸(Ser)、蘇胺酸(Thr)、色胺酸(Trp)、酪胺酸(Tyr)和纈胺酸(Val)。
例如，AA ns 係代表丙胺酸(Ala)、瓜胺酸(Cit)、甘胺酸(Gly)、異白胺酸(Ile)、白胺酸(Leu)、離胺酸(Lys)、ε-乙醯基-離胺酸(AcLys)、苯基丙胺酸(Phe)、色胺酸(Trp)和纈胺酸(Val)。
經取代的胺基酸AA s 係具有式(VI)：
其中：●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，例 如T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、 -C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-，或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-，或-C(=O)NH-；●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-N+H(烷基)-、-N+(烷基)2-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，例如A 9 為[(CH2)2-O]4-CH3、 ●[(CH2)2-O]24-CH3、、、 或[(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據一特別的實施例，經取代胺基酸AA s 係具有式(VI)：
其中：●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，例 如T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-，或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-N+H(烷基)-、-N+(烷基)2-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自雜-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置 換，例如A 9 為[(CH2)2-O]4-CH3、[(CH2)2-O]24-CH3、、 [(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外特別的實施例，經取代胺基酸AA s 具有式(VI)： 其中：●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，例 如T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-或 -C(=O)NH-；●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-S-、-Se-、-O-、-N(烷基)-、-N+H(烷基)-、-N+(烷基)2-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，例如A 9 為 [(CH2)2-O]4-CH3、[(CH2)2-O]24-CH3、、 [(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括一SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外特別的實施例，經取代胺基酸AA s 係具有式(VI)：
其中： ●T係代表一飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，例 如T為或； ●U基團係代表一單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-或-O-P(=O)(OH)-O，例如U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF2-、-Se-、-O-、-N(烷基)-、-N+H(烷基)-、-N+(烷基)2-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O)2-、-NHS(=O)2-、-N(烷基)S(=O)2-、-S(=O)2NH-、-S(=O)2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH2、-NH烷基和-N(烷基)2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，例如A 9 為[(CH2)2-O]4-CH3、 [(CH2)2-O]24-CH3、，、 ，或[(CH2)2-O)]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H； 應了解，包括一SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
可提及的T之實例包括：
根據至少一實施例，經取代胺基酸AA s 係具有式(VI)，其中：●T係代表飽和或不飽和、直鏈或支鏈(C1-C8)三價烷基基團，例如 ●U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表一直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代C1-C160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-C(=O)NH-、-CH(OH)-、-CH(SO3H)-、-O-、-NH-或-C(=O)-，或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基之取代基取代的雜環烷基基團 所置換，例如A 9 為[(CH2)2-O]4-CH3、[(CH2)2-O)]24-CH3、 [(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據另外的實施例，經取代胺基酸AAs係具有式(VI)其中： ●T係代表或； ●U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表[(CH2)2-O]4-CH3、[(CH2)2-O]24-CH3、 [(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H；應了解，包括一SO3H官能基之各A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
根據再另外的實施例，經取代胺基酸AA s 具有式(VI)，其中： ●T係代表或； ●U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；●A 9 係代表-[(CH2)2-O]b-CH3其中「b」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4、7和24，如4或24。
(AA) w 序列係具有下式： 其中A 10 係代表上述經取代AA s 或非經取代AA ns 胺基酸其中之一的側鏈。
非經取代胺基酸(AA ns )w之序列的實例係如下：Gly-Gly、Phe-Lys、Val-Lys、Val-AcLys、Val-Cit、Phe-Phe-Lys、D-Phe-Phe-Lys、Gly-Phe-Lys、Ala-Lys、Val-Ala、Phe-Cit、Phe-Gly、Leu-Cit、Ile-Cit、Trp-Cit、Phe-Ala、Ala-Phe、Gly-Gly-Gly、Gly-Ala-Phe、Gly-Phe-Gly、Gly-Val-Cit、Gly-Phe-Leu-Cit(SEQ ID No.3)、Gly-Phe-Leu-Gly(SEQ ID No.4)、Ala-Leu-Ala-Leu(SEQ ID No.5)。
根據至少一實施例，非經取代胺基酸AA ns 之(AA ns )w序列係由下列列表選出：Gly-Gly、Phe-Lys、Val-Lys、Val-AcLys、Val-Cit、Phe-Phe-Lys、D-Phe-Phe-Lys、Gly-Phe-Lys、Ala-Lys、Val-Ala、Phe-Cit、Phe-Gly、Leu-Cit、Ile-Cit、Trp-Cit、Phe-Ala、Ala-Phe、Gly-Gly-Gly、Gly-Ala-Phe、Gly-Phe-Gly、Gly-Val-Cit、Gly-Phe-Leu-Cit(SEQ ID No.3)、Gly-Phe-Leu-Gly(SEQ ID No.4)和Ala-Leu-Ala-Leu(SEQ ID No.5)，例如Val-Ala和Val-Cit，例如Val-Ala。
根據至少另外的實施例，含有至少一個經取代胺基酸AA s 之(AA s )w序列係由下列選出：
或
在本揭示文標的之式(II)連接子L中，可提及的例如為下列化合物：
和
可提及的RCG1之實例包括：(i)一RaZa-C(=O)-反應性基團，其中：Z a 係代表一單鍵、-O-或-NH，例如-O-，及R a 係代表一氫原子、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環烷基、烯基、芳基、雜芳基或(C3-C7)雜環烷基基團。芳基基團、雜芳基基團及/或(C3-C7)雜環烷基基團可經1至5個選自鹵素原子(例如氟原子)、烷基基團、烷氧基基團、羥基基團、側氧基團、硝基基團和氰基基團之原子/基團取代； (ii)下列反應性基團之一：馬來醯亞胺基基團；鹵基乙醯胺基 基團，其中R 21 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例 如Me；Cl-；N3-；HO-；HS-；活化二硫化物，例如； H2N-；HC≡C-或活化C≡C，例如環辛炔基元，例如DBCO-胺 或BCN或MFCO；一O-烷基 羥基胺或Pictet-Spengler反應受質，例如Agarwal P.,et al.,Bioconjugate Chem 2013,24,846-851中所述之。
根據一特別的實施例，RCG1可為：(i)一RaZa-C(=O)-反應性基團，其中：Z a 係代表一單鍵、-O-或-NH，例如-O-，及R a 係代表一氫原子、(C1-C6)烷基、(C3-C7)環烷基、烯基、芳基、雜芳基或(C3-C7)雜環烷基基團。芳基基團、雜芳基基團及/或(C3-C7)雜環烷基基團可經1至5個選自鹵素原子(例如氟原子)、烷基基團、烷氧基基團、羥基基團、側氧基團、硝基基團和氰基基團之原子/基團取代； (ii)下列反應性基團之一：馬來醯亞胺基基團，其中R 21 係代表一氫原子(C1-C6)烷基基團，例如Me；Cl-；N3-；HO-；HS-； 活化二硫化物，例如；H2N-；HC≡C-或活化C≡C， 例如環辛炔基元，例如DBCO-胺或BCN或 MFCO；一O-烷基羥基胺或如Agarwal P.,et al.,Bioconjugate Chem 2013,24,846-851中所述之Pictet-Spengler反應受 質，例如。
例如，R a Z a -可代表HO-、CH3O-、CH2=CH-CH2O-、 (O-NHS)、其中陽離子係代表，例如鈉、鉀或銫，或 、、基團，其中 GI係代表至少一個導電基團，例如-NO2或鹵素原子，例如氟原子(F)。 其可為，例如，下列基團：或
另一類型的RaZa-C(=O)-基團係如下：。
例如，RCG1可選自該等描述於實例之一，亦即選自下列基團： COOH、和。
本揭示文進一步係關於式(IV)之念珠藻素酬載： 其中：■R 1 係代表一(C1-C6)烷基基團，■R 2 和R 3 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團；或另一種選擇R 2 和R 3 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基或(C3-C6)雜環烷基基團；■R 4 和R 5 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團或(C1-C6)烷基-NH(R12)基團或(C1-C6)烷基-OH基團或(C1-C6)烷基-SH基團或(C1-C6)烷基-C(=O)2H基團；或另一種選擇R 4 和R 5 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基或(C3-C6)雜環烷基基團；■X係代表O或N(R6)；■R 6 係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團；■R 7 和R 8 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團或(C1-C6)烷基-C(=O)2H基團或(C1-C6)烷基-N(C1-C6)烷基2基團；或另一種選擇R 7 和R 8 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基基團或(C3-C6)雜環烷基基團；■R 9 係代表至少一個苯基核的取代基，其各自相互獨立地係選自： 一氫原子、-OH、(C1-C4)烷氧基、鹵素原子、-NH2、-NH(C1-C6)烷基或-N(C1-C6)烷基2或-NH(C1-C6)環烷基或(C3-C6)雜環烷基基團；■R 10 係代表至少一個選自一氫原子和(C1-C4)烷基基團之苯基核的取代基；■Y係代表●-NR11-(C1-C6)烷基-，例如-NR11-(CH2)n-，如 ●-O-(C1-C6)烷基-，例如-O-(CH2)n-，如 ●-S-(C1-C6)烷基-，例如-S-(CH2)n-，如 Y係位於苯基核的鄰位(o)、間位(m)或對位(p)；■R 11 和R 12 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基，例如一氫原子或甲基基團；■n係代表範圍從1至6之整數；■L係如式(I)中所定義並代表如本揭示文中所定義的式(II)之連接子；■RCG1係代表一存在連接子L末端的反應性化學基團，RCG1係對存在多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性。RCG1係如上所定義。
各取代基R 1 至R 12 亦可採如實例中所述的空間組態之一(例如R或S或另一種選擇Z或E)。式(IV)之化合物可含有至少一個不對稱碳原子。其因此可以鏡像異構物或非鏡像異構物的形式存在。這些鏡像異構物和非鏡像異構物以及其混合物，包括外消旋混合物構成本揭示文之部分。
作為一實例，式(IV)之念珠藻素化合物可為WO2011/001052中所 述(例如D 1 -D 8 其中之一)或如上所提PCT/EP2016/076603(例如D 1 -D 19 其中之一)的式(I)念珠藻素化合物之一。
或念珠藻素化合物可為其中一實例中所述的同等單元。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中R 1 係代表一(C1-C6)烷基，例如甲基基團之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中R 2 和R 3 各自係代表一氫原子之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中R 2 和R 3 之一係代表一(C1-C6)烷基，例如甲基基團，而另一個係代表一氫原子之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中R 2 和R 3 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基基團，例如環丙基基團之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中各R 4 和R 5 係代表一(C1-C6)烷基，例如甲基基團之化合物所組成。。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中X係代表一氧原子，亦即O之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中X係代表NH之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中R 7 和R 8 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如異丁基基團或新戊基團之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中R 9 係代表二個選自甲氧基基團和氯原子之取代基，例如二個R 9 取代基為3-Cl和4-甲氧基之化合物所組成。例如，苯基核係包括二個在苯基核3和4位置上的取代基。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中R 10 係代表一氫原子之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中Y係位於苯基核對位之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中Y係代表NR11-(C1-C6)烷基，例如NR11-(C1-C3)烷基，例如NH-CH2之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L在w個胺基酸(AA)w序列中係包括至少一個經取代胺基酸AA s ，L1和L2係如式(II)中所定義之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L係包括w個非經取代的胺基酸AA ns 之序列，L1和L2係如式(II)中所定義之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 而L2係代表下列基團之化合物所組成：-一(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)3基團；-一C(=O)-(C1-C6)烷基基團，例如C(=O)-(CH2)3基團；或-一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 而L2係代表下列基團之化合物所組成：-一(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)3基團；-一C(=O)-(C1-C6)烷基基團，例如C(=O)-(CH2)3基團；或-一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 為-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 係代表：-一C(=O)-[(CH2)2-O]a-CH3基團，其中「a」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4、7和24，例如A 7 為C(=O)-[(CH2)2-O]4-CH3基團、C(=O)-[(CH2)2-O]7-CH3基團或a C(=O)-[(CH2)2-O]24-CH3基團；-一-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；或-一C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]a-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團，其中「a」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4，例如A 7 為-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)；在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、NA7-芳基、NA7-雜芳基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-芳基、C(=O)-NA7-雜芳基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基 -(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群較佳的化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、NA7-芳基、NA7-雜芳基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-芳基、C(=O)-NA7-雜芳基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基 -(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群更佳的化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、 A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群再更佳的化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群最佳的化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中A 7 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係包括代表下列基團之A 7 ：一C(=O)-[(CH2)2-O]4-CH3基團；C(=O)-[(CH2)2-O]7-CH3基團；C(=O)-[(CH2)2-O]24-CH3基團；C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代 的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：
或
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由包括在L中之(AA s )w序列係含有至少一個經取代胺基酸AA s ，(AA s )w係由下列列表中選出之化合物所組成：
或
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由下列結構(β環氧化合物構形)之化合物所組成： 其中：R 1 、R 2 、R 3 、R 4 、R 5 、R 6 、R 7 、R 8 、R 9 、R 10 、R 11 、R 12 、n、RCG 1 、X、Y和L係如式(IV)中所定義。
所有這些亞基群單獨或組合的係為本揭示文之部分。
根據至少一實施例，本揭示文係關於式(IV)之化合物，其中： -RCG1為COOH、或； -L係代表下列式(II)之化合物： 和
-Y為NR11-(C1-6)烷基，其中R 11 為一氫原子，例如Y為NH-CH2；-R 1 係代表一(C1-C6)烷基基團，例如甲基基團；-R 2 和R 3 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如甲基基團；-R 4 和R 5 各自相互獨立地係代表一(C1-C6)烷基基團，例如甲基基團；-R 7 和R 8 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一異丁基基團或新戊基基團，例如R 7 和R 8 其中之一係代表一(C1-C6)烷基基團，例如異丁基基團或新戊基基團，而另一個R 7 和R 8 係代表一氫原子；-X係代表一氧原子或NH；-R 9 係代表二個選自(C1-C4)烷氧基基團之取代基，例如甲氧基基團和鹵素原子，例如氯原子，例如R 9 係代表3-Cl和4-甲氧基；及-R 10 係代表一氫原子。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，特別可提及的為下列化合物： 和
本揭示文進一步係關於式(V)之接合物： 其中：■R 1 、R 2 、R 3 、R 4 、R 5 、R 6 、R 7 、R 8 、R 9 ,R 10 、R 11 和R 12 係如式(IV)中所定義；■X、Y和L係如式(IV)中所定義；■G係代表RCG1(存在式(II)連接子L末端的反應性化學基團)和RCG2(存在多肽(例如抗體(Ab))上的正交反應性化學基團)之間的反應產物； ■Ab係代表一抗體。
為了得到式(V)之接合物，式(IV)之念珠藻素酬載和抗體間的連接係藉由存在如上所定義之酬載上的反應性化學基團RCG1其對存在多肽(例如抗體)上的反應性基團RCG2具反應性之間的反應所產生。RCG1和RCG2之間的反應確保了式(IV)化合物藉由形成共價鍵與抗體相連接。在式(V)之接合物中，RCG1和RCG2部分可維持形成連接子和抗體間的連接。
可提及的RCG2之實例包括(Garnett M.C.,et al.,Advanced Drug Delivery Reviews 2001,53,171-216)：(i)由存在抗體表面之離胺酸殘基側鏈所攜帶的離胺酸ε-胺基基團；(ii)抗體重鏈和輕鏈的N-端胺基酸之α-胺基基團；(iii)絞鏈區之糖基團；(iv)由還原鏈內雙硫鍵所產生的半胱胺酸之硫醇或工程化半胱胺酸之硫醇；(v)由存在抗體表面之某些麩醯胺酸殘基之側鏈所攜帶的醯胺基團；(vi)使用甲醯化甘胺酸生產酵素所導入的醛基基團。
更新近地，已考量其他的接合方法，例如藉由突變導入半胱胺酸(Junutula J.R.,et al.,Nature Biotechnology 2008,26,925-932)，導入非天然胺基酸容許其他化學類型(Axup J.Y.,et al.,PNAS 2012,109,40,16101-16106)或抗體聚醣上的接合(Zhou Q.,et al.,Bioconjugate Chem. 2014,25,510-520)。使用半胱胺酸橋接二溴馬來醯亞胺(Behrens C.R.,et al.,Mol.Pharmaceutics 2015 3986-3998)和雙-碸試劑(Bryant P.,et al.,Mol.Pharmaceutics 2015 1872-1879)以交聯抗體亦有描述且應可施用於本揭示文。
用於抗體之定點修飾的另外方法係以使用例如細菌轉麩胺醯酶(Jeger S.,et al.,Angew.Chem.Int.Ed. 2010,49,9995-9997；Strop P.,et al.,Chem.Biol. 2013,20,161-167)或甲醯基甘胺酸生產酵素(Hudak J.E.,et al.,Angew.Chem.Int.Ed. 2012,51,4161-4165)之酵素性接合為基礎。就定點接合策略之評議，請參見Agarwal P.and Bertozzi C.R.,Bioconjugate Chem 2015,26,176-192。這些接合技術亦可應用於本揭示 文中所述的念珠藻素酬載。
亦可能以化學修飾多肽(例如抗體)，以導入新穎的反應性化學基團RCG2。熟習本項技術者已熟知如何在修試劑的幫助下導入例如活化二硫化物、硫醇、馬來醯亞胺、鹵基乙醯胺基、疊氮基、炔或環炔基團來修飾抗體(參見，特別是WO2005/077090第14頁和WO2011/001052)。修飾使得提升接合反應及使用更廣泛種類的RCG1基團成為可能。
例如，在其中RCG1為上述(ii)類之情況下，可能使用一適當的修飾劑化學性修飾抗體或導入一或多個非天然胺基酸以導入適當的官能基RCG2。例如：-當RCG1係代表一N-羥基琥珀醯亞胺酯時，則RCG2係代表一-NH2基團；-當RCG1係代表一馬來醯亞胺官能基、氯原子或活化二硫化物時，則RCG2可為SH基團；-當RCG1係代表一N3基團時，則RCG2可為一C≡CH官能基或活化的C≡C官能基，例如環辛炔基元；-當RCG1係代表一OH基團或NH2基團時，則RCG2可為羧酸或醯胺官能基；-當RCG1係代表一SH基團時，則RCG2可為馬來醯亞胺官能基、鹵基乙醯胺基官能基或活化的二硫化物官能基；-當RCG1係代表一C≡CH官能基或活化的C≡C官能基時，則RCG2可為N3基團；-當RCG1係代表一O-烷基羥基胺官能基或Pictet-Spengler反應受質時，則RCG2可為醛或酮官能基。
可提及的G之實例包括
例如，G係代表下列基團： 或，例如。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中R 1 係代表一(C1-C6)烷基，例如甲基基團之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中各R 2 和R 3 係代表一氫原子之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中R 2 和R 3 之一係代表一(C1-C6)烷基基團，例如甲基基團而另一個係代表一氫原子之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中R 2 和R 3 係與其相連接的碳原子共同形成一(C3-C6)環烷基基團，例如環丙基基團之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中各R 4 和R 5 係代表一(C1-C6)烷基基團，特別是甲基基團之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中X係代 表一氧原子，亦即O之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中X係代表NH之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中R 7 和R 8 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如異丁基基團或新戊基基團之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中R 9 係代表二個選自甲氧基基團和氯原子之取代基的化合物所組成。例如，苯基核係包括二個在苯基核3和4位置上的取代基。例如3-Cl和4-甲氧基。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中R 10 係代表一氫原子之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中Y係位於苯基核的對位之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中Y為NR11-(C1-C6)烷基，例如NR11-(C1-C3)烷基，例如NH-CH2之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L在w個胺基酸(AA)w序列中係包括至少一個經取代胺基酸AA s ，L1和L2係如式(II)中所定義之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L係包括一w個非經取代的胺基-酸AA ns 序列，L1和L2係如式(II)中所定義之化合物所組成。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 而L2係代表下列基團之化合物所組成：-一(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)3基團；-一C(=O)-(C1-C6)烷基基團，例如一C(=O)-(CH2)3基團；或-一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 而L2係代表下列基團之化合物所組成：-一(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)3基團；-一C(=O)-(C1-C6)烷基基團，例如a C(=O)-(CH2)3基團；或-一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如a(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 為-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團，例如(CH2)2-NA7-(CH2)2基團，其中A 7 係代表：-一C(=O)-[(CH2)2-O]a-CH3基團，其中「a」係代表範圍從1至50之整數，例如例如範圍從1至24，例如4、7和24，例如A 7 為一C(=O)-[(CH2)2-O]4-CH3基團、C(=O)-[(CH2)2-O]7-CH3基團或C(=O)-[(CH2)2-O]24-CH3基團；-一-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；或-一C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]a-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團，其中「a」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4，例如A 7 為-C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類， 如鈉鹽(SO3 - +Na)；在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、NA7-芳基、NA7-雜芳基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-芳基、C(=O)-NA7-雜芳基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團或C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基 -(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、NA7-芳基、NA7-雜芳基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-芳基、C(=O)-NA7-雜芳基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群較佳的化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基 -(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA7-(CH2CH2O)i(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基-(OCH2CH2)i基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中i、A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群再更佳的化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7基團、(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基、NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7基團、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7C(=O)-(C1-C6)烷基、C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-C(=O)NA7-(C1-C6)烷基基團，或a C(=O)-NA8-(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中A 7 和A 8 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群最佳的化合物係由其中 式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：一(C1-C6)烷基-NA7-(C1-C6)烷基基團；其中A 7 係如上所定義。
在本揭示文標的之式(IV)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係包括一代表下列各基之A7的化合物所組成：一C(=O)-[(CH2)2-O]4-CH3基團；C(=O)-[(CH2)2-O]7-CH3基團；C(=O)-[(CH2)2-O]24-CH3基團；C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；C(=O)-(CH2)2-C(=O)-NH-[(CH2)2-O]4-(CH2)2-C(=O)-NH-(CH2)2-SO3H基團；應了解，包括一SO3H官能基之各A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO3 - +Na)。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中式(II)之L中的(AA)w係含有至少一個經取代胺基酸AA s 及/或w個非經取代的胺基酸AA ns 而L2係代表下列基團之化合物所組成：
或
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由包括在L中的(AA)w序列係含有至少一個經取代胺基酸AA s 之化合物所組成，而(AA s )w係由下列列表中選出：
或
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由其中Ab為一抗-Epha2抗體之化合物所組成，例如，以SEQ ID NO：1(抗體hu2H11_R35R74之輕鏈)及以SEQ ID NO：2(抗體hu2H11_R35R74之重鏈)代表的hu2H11_R35R74抗體，其分別係相當於WO2011039724 A1中所代表的SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：18。
根據至少一實施例，本發明係關於式(V)化合物，其中：-Ab係代表一抗體；-G係代表：
- Y為一NR11-(C1-6)烷基基團，其中R 11 為一氫原子，例如Y為一NH-CH2基團；-L係代表： 及
-R 1 係代表一(C1-C6)烷基基團，例如甲基基團；-R 2 和R 3 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，如甲基 基團；-R 4 和R 5 各自相互獨立地係代表一(C1-C6)烷基基團，例如甲基基團；-R 7 和R 8 各自相互獨立地係代表一氫原子或(C1-C6)烷基基團，例如一異丁基基團或新戊基基團，例R 7 和R 8 之一係代表一(C1-C6)烷基基團，例如一異丁基基團或新戊基基團，而另一個R 7 和R 8 係代表一氫原子；-X係代表一氧原子或NH；- R 9 係代表二個選自(C1-C4)烷氧基基團，例如甲氧基和鹵素原子，例如氯原子之取代基，例如R 9 係代表3-Cl和4-甲氧基；及-R 10 係代表一氫原子.
在本揭示文標的之式(V)化合物中，一群化合物係由下列結構之化合物所組成(β環氧化物構形)： 其中：R 1 、R 2 、R 3 、R 4 、R 5 、R 6 、R 7 、R 8 、R 9 、R 10 、R 11 、R 12 、n、RCG 1 、X、Y和L係如式(IV)中所定義。
所有這些亞基群單獨或組合的係為本揭示文之部分。
在本揭示文標的之式(V)化合物中，可提及的為下列化合物： 和 其中Ab係如本揭示文之式(V)中所定義。
依照本揭示文，通式(I)、(II)、(III)、(IV)和(V)之化合物可藉由下列方法來製備。
製備式(II)之連接子 ● 製備具有提升的親水性之間隔物(spacer)
步驟(i)：使用烯丙基溴及鹼，例如，舉例而言碳酸銫，保護羧酸成為烯丙基酯；步驟(ii)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除Boc胺保護；步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下於丙烯酸第三丁酯上加入胺；步驟(iv)：在鹼，例如DIEA的存在下進行胺及活化羧酸(例如NHS酯或醯氯)之間的偶合； 步驟(v)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除第三丁基酯保護；步驟(vi)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯；步驟(vii)：與琥珀酸酐偶合；步驟(viii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯並與胺偶合。
流程1係描繪以Boc-β-Ala-OH(CAS編號[3303-84-2])開始之合成，但亦可適用於其他市售的範圍從3至10之Boc保護的胺基-烷基酸。預期此使用琥珀酸酐的合成亦可適用於戊二酸酐或市售的範圍從3至10之烷基二酸。
● 具有提升的親水性之間隔物和經典二肽之組合
步驟(i)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行肽偶合及在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺保護；步驟(ii)：就間隔物3，係在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯並將間隔物3和4與二肽偶合；步驟(iii)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除第三丁基 酯的保護；步驟(iv)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯並與胺偶合；步驟(v)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除Boc胺之保護。
流程2係描繪使用Val-Ala二肽的連接子合成，但亦可適用於其他二肽；描繪使用間隔物3或4的合成亦可適用於間隔物1或2；描繪使用Boc-單保護乙二胺之合成但亦可適用於其他市售的範圍從3至10之Boc-單保護二胺。
● 製備具有提升的親水性之二肽 ■ 以在其側鏈上帶有一羧酸基團的胺基酸為基礎，製備具有提升的親水性之二肽
步驟(i)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行羧酸和胺之間的肽偶合；步驟(ii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯；步驟(iii)：在鹼，例如碳酸氫鈉或DIEA的存在下進行NHS和胺之間的肽偶合；步驟(iv)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除第三丁基酯的保護；步驟(v)：使用偶合劑，例如T3P進行二肽與Boc-單保護乙二胺的肽偶合；步驟(vi)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除Boc胺 的保護；步驟(vii)：使用偶合劑，例如EEDQ進行二肽與對-胺基苯甲醇之肽偶合；步驟(viii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以對硝基苯基-氯甲酸酯處理將苯甲醇活化為對-硝基苯基碳酸酯；步驟(ix)：在鹼，例如DIEA的存在下形成活化醇和胺之間的胺甲酸酯。
流程3係描述以Val開始的二肽合成，但亦可適用於其他上列的胺基酸；其係描述使用L-Glu第三丁酯(CAS編號[45120-30-7])之合成，但亦可適用於在其側鏈上帶有一羧酸的其他胺基酸，例如L-Asp第三丁酯(CAS編號[4125-93-3])、D-Asp第三丁酯(CAS編號[148823-36-3])、D-Glu第三丁酯(CAS編號[25456-76-2])、2-胺基-己二酸1-第三丁酯(CAS編號[1245806-58-9])或2-胺基-庚二酸1-第三丁酯(CAS編號[1888498-03-0])。流程4係描述對-胺基苯甲醇(CAS編號[623-04-1])之二肽合成，但亦可適用於市售的其他胺基苯甲醇，例如4-(1-羥基乙基)-苯胺(外消旋(CAS編號[14572-89-5])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[210754-25-9])或(S)(CAS編號[500229-84-5]))、4-胺基-α,α-二甲基-苯-甲醇(CAS編號[23243-04-1])、4-胺基-α-甲氧基-α-甲基-苯甲醇(CAS編號[1379318-81-6])、4-胺基-α-甲基-α-三氟甲基-苯甲醇(CAS編號[851652-56-7])、2-胺基-苯甲醇(CAS編號[5344-90-1])、2-胺基-α-甲基-苯甲醇(外消旋(CAS編號[10517-50-7])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[3205-21-8])或(S)(CAS編號[3205-21-8]))、6-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[113293-71-3])、6-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1335054-83-5])、6-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1355225-85-2])、6-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[843646-03-8])、5-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[873651-92-4])、2-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[23612-57-9])、2-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(外消旋(CAS編號[869567-91-9])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[936718-01-3])或(S)(CAS編號[936718-00-2]))、2-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[914223-90-8])、2-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[213666-96-7])、3-胺基-4-吡啶甲醇(CAS編號 [152398-05-5])、3-胺基-α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[1242470-88-7])、3-胺基-α,α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[13357-81-8])、4-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[138116-34-4])、4-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[741223-49-4])、4-胺基-α,α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1339013-26-1])、3-胺基-2-吡啶甲醇(CAS編號[52378-63-9])、3-胺基-α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[954240-54-1])、3-胺基-α,α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[899438-57-4])；其係描述使用Boc-單保護乙二胺之合成，但亦可適用於市售n範圍從3至10之其他Boc-單保護胺。
■ 以在其側鏈上帶有一胺基基團的胺基酸為基礎，製備具有提升的親水性之二肽
或另一種選擇二肽5可依照流程6中所述的合成來製備。
步驟(i)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行羧酸和胺之間的肽偶合；步驟(ii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯；步驟(iii)：在鹼，例如碳酸氫鈉或DIEA的存在下進行NHS酯和 胺之間的肽偶合；步驟(iv)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除Boc胺的保護；步驟(v)：使用偶合劑，例如T3P進行二肽和Boc-單保護乙二胺之肽偶合；步驟(vi)：使用偶合劑，例如EEDQ進行二肽與對胺基苯甲醇之肽偶合；步驟(vii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以對-硝基苯基-氯甲酸酯處理將苯甲醇活化為對-硝基苯基碳酸酯；步驟(viii)：在鹼，例如DIEA的存在下形成活化醇和胺之間的胺甲酸酯。
流程5和6係描述以Val開始的二肽合成，但亦可適用於上列的其他胺基酸。流程5係描述使用側鏈上Boc-保護的L-Lys之合成(CAS編號[2418-95-3])但亦可適用於其側鏈上帶有一胺基基團之其他胺基酸，例如(S)-3-胺基-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸(CAS編號[73259-81-1])、(S)-3-胺基-2-(第三丁氧基羰基胺基)丙酸(CAS編號[76387-70-7])、(S)-4-胺基-2-(第三丁氧基羰基胺基)丁酸(CAS編號[25691-37-6])、(R)-4-胺基-2-(第三丁氧基羰基胺基)丁酸(CAS編號[80445-78-9])、在側鏈上Boc-保護的L-鳥胺酸(CAS編號[21887-64-9])、在側鏈上Boc-保護的D-鳥胺酸(CAS編號[159877-12-0])、在側鏈上Boc-保護的D-Lys(CAS編號[106719-44-2])、(2S)-2-胺基-7-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]胺基]庚酸(CAS編號[1142814-17-2])或(2R)-2-胺基-7-[[(1,1-二甲基乙氧基)羰基]胺基]庚酸(CAS編號[117833-90-6])。流程7係描述使用對胺基苯甲醇(CAS編號[623-04-1])之二肽合成，但亦可適用於其他市售的胺基苯甲醇，例如4-(1-羥基乙基)-苯胺(外消旋(CAS編號[14572-89-5])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[210754-25-9])或(S)(CAS編號[500229-84-5]))、4-胺基-α,α-二甲基-苯-甲醇(CAS編號[23243-04-1])、4-胺基-α-甲氧基-α-甲基-苯甲醇(CAS編號[1379318-81-6])、4-胺基-α-甲基-α-三氟甲基-苯甲醇(CAS編號[851652-56-7])、2-胺基-苯甲醇(CAS編號[5344-90-1])、2-胺基-α-甲基 -苯甲醇(外消旋(CAS編號[10517-50-7])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[3205-21-8])或(S)(CAS編號[3205-21-8]))、6-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[113293-71-3])、6-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1335054-83-5])、6-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1355225-85-2])、6-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[843646-03-8])、5-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[873651-92-4])、2-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[23612-57-9])、2-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(外消旋(CAS編號[869567-91-9])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[936718-01-3])或(S)(CAS編號[936718-00-2]))、2-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[914223-90-8])、2-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[213666-96-7])、3-胺基-4-吡啶甲醇(CAS編號[152398-05-5])、3-胺基-α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[1242470-88-7])、3-胺基-α,α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[13357-81-8])、4-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[138116-34-4])、4-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[741223-49-4])、4-胺基-α,α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1339013-26-1])、3-胺基-2-吡啶甲醇(CAS編號[52378-63-9])、3-胺基-α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[954240-54-1])、3-胺基-α,α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[899438-57-4])；其係描述使用Boc-單保護乙二胺之合成，但亦可適用於n範圍從3至10之其他市售的Boc-單保護二胺。
製備念珠藻素化合物
念珠藻素，就X=O可如WO2011/001052中所述，而就X=NH可如PCT/EP2016/076603中所述來製備。
製備Y=NH-CH 2 之新穎的式(IV)念珠藻素酬載 ● 製備帶有一提升親水性之間隔物的新穎念珠藻素酬載 ■ 無PABA基元
步驟(i)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行念珠藻素衍生物和二肽間的肽偶合；步驟(ii)：在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護； 步驟(iii)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行與間隔物1之肽偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物2偶合；步驟(iv)：使用催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀去除烯丙基酯的保護；步驟(v)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
另一種選擇，帶有一提升親水性之間隔物的新穎念珠藻素酬載亦可如流程9所述來製備。
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將連接子1的羧酸活化為NHS酯並與念珠藻素胺偶合；步驟(ii)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯 的保護；步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程8和9係描述使用C52之對-苯甲胺來合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用Val-Ala二肽之合成，但亦可適用於其他二肽；其係描述使用間隔物1或2之合成，但亦可適用於間隔物3或4。
■ 帶有PABA基元
流程10
步驟(i)：在偶合劑，例如EEDQ的存在下進行Fmoc-Val-Ala-OH和4-胺基苯甲醇之間的肽偶合；步驟(ii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以對-硝基苯基-氯甲酸酯處理將苯甲醇活化為對-硝基苯基碳酸酯；步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下形成活化醇和念珠藻素胺之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(iv)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行與間隔物1的肽偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物2偶合；步驟(v)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯的保護；步驟(vi)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。.
流程10係描述使用Val-Ala二肽之酬載合成，但亦可適用於其他二肽；其係描述使用對胺基苯甲醇(CAS編號[623-04-1])之合成，但亦可適用於其他市售的胺基苯甲醇化合物，例如4-(1-羥基乙基)-苯胺(外消旋(CAS編號[14572-89-5])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[210754-25-9])或(S)(CAS編號[500229-84-5]))、4-胺基-α,α-二甲基-苯-甲醇(CAS編號[23243-04-1])、4-胺基-α-甲氧基-α-甲基-苯甲醇(CAS編號[1379318-81-6])、4-胺基-α-甲基-α-三氟甲基-苯甲醇(CAS編號[851652-56-7])、2-胺基-苯甲醇(CAS編號[5344-90-1])、2-胺基-α-甲基-苯甲醇(外消旋(CAS編號[10517-50-7])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[3205-21-8])或(S)(CAS編號[3205-21-8]))、6-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[113293-71-3])、6-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1335054-83-5])、6-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1355225-85-2])、6-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[843646-03-8])、5-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[873651-92-4])、2-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[23612-57-9])、2-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(外消旋(CAS編號[869567-91-9])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[936718-01-3])或(S)(CAS編號[936718-00-2]))、2-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[914223-90-8])、2-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶 甲醇(CAS編號[213666-96-7])、3-胺基-4-吡啶甲醇(CAS編號[152398-05-5])、3-胺基-α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[1242470-88-7])、3-胺基-α,α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[13357-81-8])、4-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[138116-34-4])、4-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[741223-49-4])、4-胺基-α,α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1339013-26-1])、3-胺基-2-吡啶甲醇(CAS編號[52378-63-9])、3-胺基-α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[954240-54-1])、3-胺基-α,α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[899438-57-4])；其係描述使用C52之對苯甲胺之合成，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用間隔物1或2之合成，但亦可適用於間隔物3或4。
● 製備帶有一提升親水性之新穎的式(IV)念珠藻素酬載 ■ 無PABA基元
步驟(i)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行念珠藻素衍生物和二肽之間的肽偶合並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：與戊二酸酐偶合；在步驟(iii)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟；步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程11係描述使用C52之對苯甲胺合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽1之合成，但亦可適用於二肽5；其係描述使用戊二酸酐之合成，但亦可適用於琥珀酸酐或n範圍從 3至10之市售烷基二酸。
■ 帶有PABA基元
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成活化醇和念珠藻素胺之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：與戊二酸酐偶合；在步驟(iii)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟；步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程12係描述使用C52之對苯甲胺合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽6之合成，但亦可適用於二肽2。
● 製備帶有一具有提升親水性之間隔物和二肽的新穎式(IV)念珠藻素酬載 ■ 無PABA基元
步驟(i)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行念珠藻素衍生物和 二肽之間的肽偶合並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行與間隔物3的肽偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物4偶合；步驟(iii)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯的保護；在步驟(iv)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟；步驟(iv)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程13係描述使用C52之對苯甲胺合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽5之合成，但亦可適用於二肽1；其係描述使用間隔物3或4之合成，但亦可適用於間隔物1或2。
■ 帶有PABA基元
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成活化醇和念珠藻素胺之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：使用偶合劑，例如EDC和HOB進行與間隔物3的肽偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物4偶合；步驟(iii)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基 酯的保護；在步驟(iv)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟；步驟(iv)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程14係描述使用C52之對-苯甲胺合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽6之合成，但亦可適用於二肽2；其係描述使用間隔物3或4之合成，但亦可適用於間隔物1或2。
製備Y=O-CH2或S-CH2之新穎的式(IV)念珠藻素酬載 ● 製備帶有一提升親水性之間隔物的新穎念珠藻素酬載 ■ 無PABA基元
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成念珠藻素活化醇和胺之間的胺甲酸酯；步驟(ii)：在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(iii)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行與間隔物1的肽偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物2偶合； 步驟(iv)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯的保護；步驟(v)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程15係描述使用C52之活化的對-苯甲醇合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用Val-Ala二肽之合成，但亦可適用於其他二肽；其係描述使用Boc-單保護乙二胺之合成，但亦可適用於其他市售n範圍從3至10之Boc-單保護二胺；其係描述使用間隔物1或2之合成，但亦可適用於間隔物3或4。
另一種選擇，帶有一提升親水性之間隔物的新穎式(IV)念珠藻素酬載亦可如流程16中所述來製備。
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成念珠藻素活化醇和連接 子2之間的胺甲酸酯；步驟(ii)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯的保護；步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程16係描述使用C52之活化對-苯甲醇來合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物。
■ 帶有PABA基元
步驟(i)：在偶合劑，例如EEDQ之存在下進行Fmoc-Val-Ala-OH和4-胺基苯甲醇之間的肽偶合；步驟(ii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以對-硝基苯基-氯甲酸酯處理將苯甲醇活化為對-硝基苯基碳酸酯；步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下形成活化醇和Boc-單保護 乙二胺之間的胺甲酸酯；步驟(iv)：使用HCl(例如二烷之溶液)或TFA溶液去除Boc胺之保護；步驟(v)：在鹼，例如DIEA的存在下形成念珠藻素活化醇和胺之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(vi)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行與間隔物1的肽偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物2偶合；步驟(vii)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯的保護；步驟(viii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程17係描述使用Val-Ala二肽之合成，但亦可適用於其他二肽；其係描述使用對胺基苯甲醇(CAS編號[623-04-1])之合成，但亦可適用於其他市售的胺基苯甲醇化合物，例如4-(1-羥基乙基)-苯胺(外消旋(CAS編號[14572-89-5])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[210754-25-9])或(S)(CAS編號[500229-84-5]))、4-胺基-α,α-二甲基-苯-甲醇(CAS編號[23243-04-1])、4-胺基-α-甲氧基-α-甲基-苯甲醇(CAS編號[1379318-81-6])、4-胺基-α-甲基-α-三氟甲基-苯甲醇(CAS編號[851652-56-7])、2-胺基-苯甲醇(CAS編號[5344-90-1])、2-胺基-α-甲基-苯甲醇(外消旋(CAS編號[10517-50-7])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[3205-21-8])或(S)(CAS編號[3205-21-8]))、6-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[113293-71-3])、6-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1335054-83-5])、6-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1355225-85-2])、6-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[843646-03-8])、5-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[873651-92-4])、2-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[23612-57-9])、2-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(外消旋(CAS編號[869567-91-9])或鏡像純化合物(R)(CAS編號[936718-01-3])或(S)(CAS編號[936718-00-2]))、2-胺基-α-乙基-3-吡啶甲醇(CAS編號[914223-90-8])、2-胺基-α,α-二甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[213666-96-7])、3-胺基-4-吡啶甲醇(CAS編號[152398-05-5])、3-胺基-α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[1242470-88-7])、 3-胺基-α,α-甲基-4-吡啶甲醇(CAS編號[13357-81-8])、4-胺基-3-吡啶甲醇(CAS編號[138116-34-4])、4-胺基-α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[741223-49-4])、4-胺基-α,α-甲基-3-吡啶甲醇(CAS編號[1339013-26-1])、3-胺基-2-吡啶甲醇(CAS編號[52378-63-9])、3-胺基-α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[954240-54-1])、3-胺基-α,α-甲基-2-吡啶甲醇(CAS編號[899438-57-4])；其係描述使用Boc-單保護乙二胺之合成，但亦可適用於其他市售n範圍從3至10之Boc-單保護二胺；其係描述使用C52之活化對苯甲醇的合成，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用間隔物1或2之合成，但亦可適用於間隔物3或4。
● 製備帶有一提升親水性之二肽的新穎式(IV)念珠藻素酬載 ■ 無PABA基元
流程18
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成念珠藻素活化醇和二肽之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：與戊二酸酐偶合；在步驟(iii)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程18係描述使用C52之活化對苯甲醇合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽7之合成，但亦可適用於二肽3；其係描述使用戊二酸酐之合成，但亦可適用於琥珀酸酐或市售n範圍從3至10之烷基二酸。
■ 帶有PABA基元
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成念珠藻素活化醇和二肽之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：與戊二酸酐偶合；在步驟(iii)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟步驟(iii)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程19係描述使用C52之活化對-苯甲醇來合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽8之合成，但亦可適用於二肽4；其係描述使用戊二酸酐之合成，但亦可適用於琥珀酸酐或市售n範圍從3至10之烷基二酸。
● 製備帶有一提升親水性之間隔物和二肽的新穎式(IV)念珠藻素酬 載 ■ 無PABA基元
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成念珠藻素活化醇和二肽之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行與間隔物3的肽 偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物4偶合；步驟(iii)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯的保護；在步驟(iv)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟步驟(iv)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程20係描述使用C52之對苯甲胺來合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽7之合成，但亦可適用於二肽3；其係描述使用間隔物3或4之合成，但亦可適用於間隔物1或2。
■ 帶有PABA基元
步驟(i)：在鹼，例如DIEA的存在下形成念珠藻素活化醇和二肽之間的胺甲酸酯並在鹼，例如哌啶的存在下去除Fmoc胺的保護；步驟(ii)：使用偶合劑，例如EDC和HOBt進行與間隔物3的肽偶合，或在鹼，例如DIEA的存在下與間隔物4偶合；步驟(iii)：在催化劑，例如肆-(三苯基膦)鈀的存在下去除烯丙基酯的保護；在步驟(iv)之前可能需要另一個經取代胺基酸側鏈之去保護步驟； 步驟(iv)：在鹼，例如DIEA的存在下藉由以DSC處理將羧酸活化為NHS酯。
流程21係描述使用C52之對苯甲胺來合成酬載，但亦可適用於其他念珠藻素化合物；其係描述使用二肽8之合成，但亦可適用於二肽4；其係描述使用間隔物3或4之合成，但亦可適用於間隔物1或2。
製備式(V)之接合物
本發明之式(V)接合物可經由包括至少下列步驟之方法來製得：(i)使以下接觸並任其反應：-一視需要的抗體緩衝水溶液，視需要藉由修飾劑修飾，及-如本發明所定義之式(IV)念珠藻素酬載溶液，式(IV)之念珠藻素酬載的化學基團RCG1對於存在多肽(例如抗體)上的化學基團RCG2，特別是對存在抗體上的胺基基團具反應性，該化學基團RCG2已藉由修飾劑導入適當處，以便藉由形成共價鍵將式(IV)之念珠藻素酬載與抗體相連接；(ii)及然後視需要從式(IV)念珠藻素酬載中及/或從未反應的抗體及/或從任何可能已形成的聚集體，分離步驟(i)中所形成的式(V)接合物。
根據一實例變化，例如步驟(ii)中來自步驟(i)之式(V)接合物僅從未反應的式(IV)念珠藻素酬載及從任何所形成的聚集體中分離出，而任何未反應的抗體係留在溶液中。
接觸的功能為讓化學基團RCG1和RCG2反應，以便確保式(IV)之念珠藻素酬載與多肽，例如抗體藉由形成共價鍵相連接；例如■當RCG1係代表RaZa-C(=O)時，反應較佳地係發生在抗體的胺基官能基上，例如抗體之離胺酸(Lys)殘基側鏈上所攜帶的ε-胺基基團及抗體重鏈和輕鏈之N-端胺基酸的α-胺基基團。下式之接合物係在此情況下所得來：mAb-[NH-C(=O)-L*-Y-Crypto]d，其中L*係代表包括RCG1為RaZa-C(=O)基團而d係代表藥物-與-抗體比率或DAR之連接子L的片段；■當RCG1係代表一氯原子或馬來醯亞胺或鹵基乙醯胺基團時，抗體可包括硫醇化學基團； ■當RCG1係代表疊氮基團時，抗體可包括一C≡CH基團或活化的三鍵，例如環辛炔基團；■當RCG1係代表NH2基團時，反應可使用酵素性催化，發生在抗體的醯胺官能基上，例如抗體之麩醯胺酸(Gln)殘基側鏈上所攜帶的醯胺基團。下式之接合物係在此情況下所得來：mAb-[C(=O)-NH-L*-Crypto]d，其中L*係代表包括RCG1為NH2基團之連接子L的片段，而使得L係代表L*NH2基團及d係代表藥物-與-抗體比率或DAR；■當RCG1係代表一C≡CH基團或活化C≡C基團，例如環辛炔基元時，抗體可包括疊氮基團。
術語「聚集體」係指可能在二或多個抗體之間形成的聯結，抗體可能已藉由接合而經修飾。在廣泛的各種參數之影響下易於形成聚集體，例如高濃度的抗體溶液、溶液的pH、高剪力、嫁接藥物之數目及其疏水性質、溫度(參見J.Membrane Sci. 2008,318,311-316之導論中所引述的參考文獻)，然而其中某些影響並未明確闡述。在蛋白或抗體的情況下，可參考AAPS Journal,“Protein Aggregation and Bioprocessing”2006,8(3),E572-E579。聚集體含量可經由已知的技術，例如SEC來測定(參見這方面中Analytical Biochemistry 1993,212(2),469-480)。
抗體水溶液可以緩衝劑緩衝，例如磷酸鉀或緩衝劑的混合物，例如其後所述的緩衝劑。緩衝劑係依照抗體的性質而定。式(IV)之念珠藻素酬載係溶於極性有機溶劑，例如DMSO或DMA中。
反應一般係在範圍從20℃至40℃的溫度進行。反應時間可為範圍從1至24小時。抗體和式(IV)之念珠藻素酬載間的反應可藉由SEC以折射計及/或紫外線偵測器及/或HRMS來監測，以便測定其溫度的進展。若取代作用的溫度不足，則反應可能延長及/或可加入念珠藻素化合物。就有關特定狀況之進一步的詳情可參照實例部分。特別的實施例係描述於實例3、6、16、19、23、26、29、32、35和41中。
熟習本項技術者具有可用的各種層析技術供步驟(ii)之分離：接合物可例如藉由空間排阻層析(SEC)，藉由吸附層析(例如離子交換IEC)， 藉由疏水作用層析(HIC)，藉由親和層析，藉由混合載體上的層析例如陶瓷羥基磷灰石，或藉由HPLC來純化。亦可使用以透析或滲濾之純化。
步驟(i)或(ii)之後，接合物的溶液可進行超過濾及/或滲濾步驟(iii)。這些步驟之後，就此可得到接合物之水溶液。
抗體
抗體可為由鼠科、嵌合、人源化和人類抗體組成之群中選出的單株抗體。
在一實施例中，此抗體為單專一性抗體，亦即專一與單一標靶結合的抗體。另一種選擇，其可為多專一性抗體。
在一實施例中，此抗體為IgG抗體，例如IgG1、IgG2、IgG3或IgG4抗體。
根據本發明之抗體係專一與一標靶結合，藉此將作為細胞毒性化合物之生物活性化合物導向該標靶。如文中所用「專一結合」或「專一與...結合」或「結合」等等係指抗體或其抗原結合片段與一抗原形成一在生理狀況下相當穩定的複合物。專一結合其特徵可為至少約1x10-8M或更低的平衡解離常數(KD)(例如，較小的KD表示較緊密的結合)。測定二個分子是否為專一性結合已為本項技術所熟知且係包括，例如平衡透析、表面電漿共振等等。如文中所述，抗體已，例如使用表面電漿共振，例如BIACORETM，藉由其與標靶及/或標靶抗原的專一結合來定性。
標靶典型地係相當於表現在細胞表面的蛋白，例如表現在腫瘤細胞表面的蛋白。
在一實施例中，此標靶為EphA2受體。EphA2受體為一Ephrin受體，且亦稱為「Eph受體A2」或「上皮細胞受體蛋白-酪胺酸激酶」。專一與EphA2受體結合的抗體可能例如相當於WO2008/010101或WO2011/039724中所述的抗體之一。
抗體可視需要經修飾劑修飾用以提高如前述之念珠藻素酬載的連接。抗體特言之可為單株、多株或多專一性。其亦可為抗體片段。其亦可為鼠科、人類、人源化或嵌合抗體。用於本發明實例中的抗體 為hu2H11_R3574，一種抗EphA2受體之拮抗抗體。hu2H11_R3574的序列係以SEQ ID NO：1(抗體hu2H11_R35R74之輕鏈)及以SEQ ID NO：2(抗體hu2H11_R35R7之重鏈)代表，其分別係相當於WO2011039724 A1中所代表的SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：18。
接合物
一接合物一般係包括從約1至10個共價連接抗體的念珠藻素化合物(此項為嫁接度或「藥物-與-抗體比率」或「DAR」)。此數目會因抗體及念珠藻素化合物的性質，以及用於接合方法中的操作條件而不同(例如相對於抗體的念珠藻素化合物之同等物的數目，溶劑和任何共溶劑的性質)。讓抗體和念珠藻素化合物接觸產生了包括數種接合物的混合物，其個別地係藉由不同的DAR；視需要未反應的抗體；視需要聚集體來分辨彼此。DAR係在最終的溶液上測定因此係相當於平均DAR。DAR可從接合物的SEC-HRMS光譜去迴旋積來計算。DAR(HRMS)例如大於0.5，例如範圍從1至10，例如範圍從2至7。
此接合物可用作為抗癌劑。由於抗體的存在，接合物可對腫瘤細胞而非健康的細胞具高選擇性。此舉使其可將念珠藻素化合物導入其類似的環境中或直接導入其中。其可治療實體或血液癌症。接合物可單獨或與至少一種其他的抗癌劑組合使用。
接合物係調配為一般範圍濃度從1至10mg/mL之緩衝水溶液形式。此溶液可本身以灌注的形式注射或可再稀釋形成一灌注溶液。
實例
下列實例係描述依照本發明之特定化合物的製備。這些化合物並非限制性，而僅係說明本發明。
使用的分析方法 高效液相層析-質譜(LCMS) 方法A
於一Waters UPLC-SQD系統上以正電及/或負電電噴灑模式(ES+/-)得到光譜。層析條件係如下：管柱：ACQUITY BEH C18-1.7μm-2.1 x 50mm；溶劑：A：H2O(0.1%甲酸)，B：CH3CN(0.1%甲酸)；管柱溫度：50℃；流速：0.8mL/min； 梯度(2.5min)：從5至100%的B在1.8min內；2.4min：100%的B；2.45min：從100至5%的B在0.05min內。
方法B
於一Waters UPLC-SQD系統上以正電及/或負電電噴灑模式(ES+/-)得到光譜。層析條件係如下：管柱：ACQUITY BEH C18-1.7μm-2.1 x 50mm；溶劑：A：H2O(0.1%甲酸)，B：CH3CN(0.1%甲酸)；管柱溫度：50℃；流速：0.6mL/min；梯度(2min)：從5至50%的B於1min內；從50至100%的B於0.3min內；100%的B於0.15min之內；從100至5%的B於0.3min內及5%的B於0.25min之內。
方法C
於一Waters UPLC-SQD系統上以正電及/或負電電噴灑模式(ES+/-)得到光譜。層析條件係如下：管柱：ACQUITY BEH C18-1.7μm-2.1 x 50mm；溶劑：A：H2O(0.1%甲酸)，B：CH3CN(0.1%甲酸)；管柱溫度：50℃；流速：0.8mL/min；梯度(5min)：從5至100%的B於4.2min內；4.6min：100%的B；4.8min：5%的B。
方法D
於一Waters XeVo-Qtof系統上以正電電噴灑模式(ES+)得到光譜。層析條件係如下：管柱：ACQUITY BEH C18-1.7μm-2.1 x 100mm；溶劑：A：H2O(0.1%甲酸)，B：CH3CN(0.1%甲酸)；管柱溫度：45℃；流速：0.6mL/min；梯度(5.3min)：5%的B從0至0.3min，4min：100%的B；4.6min：100%的B；5.3min：5%的B。
方法E
於一Waters UPLC-SQD系統上以正電及/或負電電噴灑模式(ES+/-)得到光譜。層析條件係如下：管柱：ACQUITY BEH C18-1.7μm-2.1 x 50mm；溶劑：A：H2O(0.1%甲酸)，B：CH3CN(0.1%甲酸)；管柱溫度：45℃；流速：0.8mL/min；梯度(10min)；從5至100%的B於8.6min內；9.6min：100%的B；9.8min： 5%的B。
1H核磁共振(NMR)
1H NMR光譜係於Bruker Avance光譜儀上以DRX-300、DRX-400或DRX-500模型所得來。化學位移(δ)係以ppm表示。
粒徑排阻層析-高解析質譜(SEC-HRMS)
於Agilent HP1100機器和Waters BEH SEC 200 1.7μm(2.1 x 150mm)管柱上在30℃以0.5mL/min的流速及(A)25mM甲酸銨+1%甲酸/(B)CH3CN+0.1%甲酸70/30等位溶離15分鐘，進行層析分析。質譜係於Waters QTOF-II機器上以正電模式之電噴灑離子化(ES+)進行。質譜係以Waters MaxEnt1軟體去迴旋積。
分析式粒徑排阻層析(SEC)
此分析係在配置有感光二極體陣列偵測器和一Tosoh Bioscience TSKgel G3000 SWXL 5μm管柱(7.8×300mm)h之Waters Alliance HPLC系統或Hitachi Lachrom HPLC系統上，以0.5mL/min流速及以含0.2M的KCl、0.052M的KH2PO4、0.107M的K2HPO4和20%體積比的異丙醇之pH 7緩衝液等位溶離30分鐘所進行。
緩衝液
緩衝液A(pH 6.5)：NaCl(50mM)、磷酸鉀緩衝液(50mM)、EDTA(2mM)
緩衝液B(pH 6.5)：NaCl(140mM)、磷酸鉀和鈉(9.6mM)
DPBS(pH 7.2)：KCl(2.7mM)、NaCl(137mM)、KH2PO4(1.47mM)、Na2HPO4(8.10mM)
PBS(pH 7.4)：KH2PO4(1.06mM)、NaCl(155.17mM)、Na2HPO4-7H2O(2.97mM)
用於製備抗體-藥物接合物(ADC)之通用方法
將由96：4緩衝液A和1N HEPES之混合物所組成的抗體緩衝水溶液以過量(5至10當量)大約10mM的念珠藻素酬載之DMA溶液處理，使得最終的抗體濃度為3mg/mL而緩衝水溶液中的DMA百分比為20%。攪拌1至4小時後，以SEC-HRMS分析混合物並測定單體抗體群族中的DAR。若發現DAR不足(<3.5-4)，則以將混合物以 另一過量的(1至5當量)念珠藻素之DMA溶液於RT攪拌下另再處理2至4小時。使用以含有10至20% NMP之緩衝水液pH 6.5(緩衝液B或DPBS)預平衡過的Superdex 200 pg基質(HiLoad 16/60或26/60脫鹽管柱，GEHealthcare)，或以含有5至10% NMP之緩衝液pH 6.5(緩衝液B或DPBS)預平衡過的SephadexTM G25基質(Hiprep 26/10脫鹽管柱，GEHealthcare)，藉由凝膠過濾純化混合物。將含有單體接合抗體的溶離份聚集一起並於Amicon Ultra-15(10k或50k Ultracel membrane,Millipore)上濃縮至介於2和5mg/mL之間的濃度。然後進行A緩衝液交換或以適當緩衝液稀釋，將接合物調配於最終的緩衝液中。在緩衝液交換的情況下，請瞭解藉由凝膠過濾使用以最終緩衝水溶液預平衡過的SephadexTM G25基質(NAP-5,NAP-10,NAP-25/PD-10或Hiprep 26/10脫鹽管柱，GEHealthcare)，其組成和pH係適合各接合物。將接合物最後經由一Steriflip®過濾器元件(0.22μm Durapore® PVDF membrane,Millipore)過濾。藉由UV光譜或SEC-HPLC分析最終的接合物以測量接合物濃度，藉由SEC-HPLC用以測定單體純度及藉由SEC-HRMS用以從接合物質譜的去迴旋積測定DAR。
合成實例1至3：PEG4-Val-Ala-C52苯甲胺、PEG4-Val-Ala-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物1：3-((第三丁氧基羰基)胺基)丙酸烯丙酯
於Boc-β-Ala-OH(CAS編號[3303-84-2],2g,10.04mmol)之 DMF(50mL)溶液中加入碳酸銫(6.88g,21.09mmol)和烯丙基溴(965.52μL,11.05mmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。此時，將反應媒劑真空濃縮，然後以甲苯稀釋並真空濃縮數次。將粗產物以水稀釋(100mL)並以EtOAc萃取(3 x 300mL)。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於90g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到1.5g的化合物1(65%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.37(s,9 H)；2.45(t,J=6.9Hz,2 H)；3.17(q,J=6.9Hz,2 H)；4.54(m,2 H)；5.20(qd,J=1.5和10.6Hz,1 H)；5.29(qd,J=1.9和17.3Hz,1 H)；5.91(m,1 H)；6.85(廣t,J=6.9Hz,1 H).
化合物2：3-胺基丙酸烯丙酯2,2,2-三氟乙酸鹽
於化合物1(1.5g,6.54mmol)之DCM(30mL)溶液中加入TFA(5.09mL,65.42mmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。此時，將反應媒劑真空濃縮，然後以甲苯稀釋並真空濃縮二次得到1.6g的化合物2(quant.)。
化合物3：3-((3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)胺基)丙酸烯丙酯
於化合物3(1.6g,6.58mmol)之DMSO(15mL)溶液中加入DIEA(2.30mL,13.16mmol)和丙烯酸第三丁酯(973.49μL,6.58mmol)。將反應媒劑使用微波於60℃加熱1h。此時，將反應媒劑以H2O(10mL)稀釋並以EtOAc萃取。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於80g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到678mg的化合物3(40%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.39(s,9 H)；1.73(廣m,1 H)；2.29(t,J=6.9Hz,2 H)；2.44(t,J=6.9Hz,2 H)；2.68(t,J=6.9Hz,2 H)；2.73(t,J=6.9Hz,2 H)；4.53(m,2 H)；5.20(qd,J=1.5和10.6Hz,1 H)；5.30(qd,J=1.9和17.3Hz,1 H)；5.91(m,1 H).
化合物4：2,5,8,11-四氧代十四烷-14-酸第三丁酯
於氬氣下，將三乙二醇單甲基醚(CAS編號[112-35-6],3g,17.36mmol)和鈉(3.99mg,173.57μmol)之THF(9mL)混合物於50℃攪拌2h然後於RT攪拌至隔夜。此時，加入丙烯酸第三丁基(3.08ml, 20.83mmol)，於40℃攪拌2h然後於RT攪拌至隔夜。之後，將反應媒劑真空濃縮，然後以H2O稀釋並以EtOAc萃取。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於90g的矽膠上純化(梯度溶離庚烷/EtOAc)得到3.3g的化合物4(65%).
化合物5：2,5,8,11-四氧代十四烷-14-酸
於化合物4(2.5g,8.55mmol)之DCM(30mL)溶液中加入TFA(6.65mL,85.51mmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。此時，將反應媒劑真空濃縮，然後以甲苯稀釋並真空濃縮三次，得到3g的化合物5(quant.)。
化合物6：2,5,8,11-四氧代十四烷-14-醯基氯
於化合物5(800mg,3.39mmol)中加入亞硫醯氯(3.68mL,50.79mmol)。將反應媒劑於60℃加熱3h。冷卻後，將反應媒劑真空濃縮，以DCM稀釋DCM並真空濃縮二次，得到870mg的化合物6(quant.)。
化合物7：15-(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)-14-側氧-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸烯丙酯
在0℃，氬氣下，於化合物3(678mg,2.63mmol)和DIEA(533.21μL,3.16mmol)之DCM(10mL)溶液中加入化合物6(738.21mg,2.90mmol)之DCM(3mL)溶液。2h後，將反應媒劑以H2O(10mL)然後以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於上40g的矽膠純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到410mg的化合物7(33%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50/50構象混合物；1.39(s,4.5 H)；1.40(s,4.5 H)；2.39(t,J=7.2Hz,1 H)；2.47至2.60(部分遮蔽m,4 H)；2.66(t,J=7.2Hz,1 H)；3.23(s,1.5 H)；3.24(s,1.5 H)；3.38至3.65(m,18 H)；4.54(m,2 H)；5.19至5.34(m,2 H)；5.85至5.97(m,1 H).
化合物8：15-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸
將化合物7(150mg,315.41μmol)之DCM(3mL)溶液和TFA(236.66μL,3.15mmol)於RT攪拌至隔夜。此時，將反應媒劑真空 濃縮，以甲苯稀釋並真空濃縮三次得到130mg的化合物8(98%)。
化合物9：15-(3-((2,5-二側氧吡咯啶-1-基)氧基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸烯丙酯
於化合物8(130mg,309.92μmol)之THF(5mL)溶液中加入DIEA(104.53μL,619.83μmol)和DSC(97.21mg,371.90μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。此時，將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到107mg的化合物9(67%)。
化合物10：(9H-茀-9-基)甲基 ((2S)-1-(((2S)-1-((4-((2R,3S)-3-(1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺甲酸酯
於(3S,10R,16S,E)-16-((S)-1-((2R,3R)-3-(4-(胺基甲基)苯基)-環氧乙烷-2-基)乙基)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,150mg,214.82μmol)之DCM溶液中加入HOBt(31.93mg,236.31μmol)、EDC(41.83μL,236.31μmol)和Fmoc-Val-Ala-OH(CAS編號[150114-97-9],79.36mg,193.34μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h。然後加入H2O(20mL)並以DCM(2 x 15mL)萃取混合物。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到200mg的化合物10(85%)。
化合物11：(2S)-2-胺基 -N-((2S)-1-((4-((2R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1-側氧丙-2-基)-3-甲基丁醯胺
將化合物10(200mg,183.37μmol)溶於DCM(10mL)和哌啶(183.39μL,1.83mmol)之混合物於RT攪拌2h，將反應媒劑真空濃縮， 溶於DCM之後加入Et2O。將沉澱過濾，以Et2O清洗並乾燥，得到180mg的粗物質，將其於10g胺基-丙基修飾的矽膠上藉由快速層析純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到136mg的化合物11(85%)。
化合物12： 15-(3-(((2S)-1-(((2S)-1-((4-((2R,3S)-3-(1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸烯丙酯
於化合物11(60mg,69.09μmol)之THF(5mL)溶液中加入化合物9(42.82mg,82.91μmol)和DIEA(17.48μL,103.63μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h。此時，將其真空濃縮並藉由快速層析於10g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到60mg的化合物12(68%)。
RMN 1H(MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60/40構象混合物；0.78(d,J=7.0Hz,6 H)；0.80至0.87(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.24(分裂d,J=7.0Hz,3 H)；1.30(m,1 H)；1.51至1.63(m,2 H)；1.75至1.83(m,1 H)；1.95(m,1 H)；2.26(m,1 H)；2.30至2.73(m,8 H)；2.95至3.05(m,3 H)；3.23(s,3 H)；3.31(遮蔽m,1 H)；3.40至3.64(m,18 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=2.1Hz,1 H)；4.12至4.33(m,5 H)；4.53(m,1.2 H)；4.55(m,0.8 H)；4.91(m,1 H)；5.11(m,1 H)；5.21(m,1 H)；5.28(qd,J=1.9和17.3Hz,0.6 H)；5.31(qd,J=1.9和17.3Hz,0.4 H)；5.78(分裂d,J=15.7Hz,1 H)；5.85至5.95(m,1 H)；6.47(ddd,J=4.2,11.5和15.7Hz,1 H)；7.05(d,J=8.7Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.3和8.7Hz,1 H)；7.19至7.26(m,5 H)；7.28(d,J=2.3Hz,1 H)；7.94(d,J=9.2Hz,0.4 H)；8.04(m,1 H)；8.10(d,J=7.6Hz,0.6 H)；8.32(m,1 H)；8.35(d,J=8.2Hz,1 H).
實例1： 15-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1- 側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸
在氬氣下，於化合物12(60mg,47.25μmol)之DCM(5mL)溶液中加入肆(三苯基膦)鈀(0)(2.76mg,2.36μmol)和1,3-二甲基巴比妥酸(22.58mg,141.74μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h並真空濃縮。將粗產物藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到31mg的實例1(53%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.79(d,J=7.0Hz,6 H)；0.80至0.88(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.23(m,3 H)；1.31(m,1 H)；1.51至1.62(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.95(m,1 H)；2.27(m,1 H)；2.35至2.60(部分遮蔽m,6 H)；2.62至2.73(m,2 H)；2.93至3.06(m,3 H)；3.23(s,3 H)；3.28至3.35(遮蔽m,1 H)；3.36至3.65(m,18 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=2.0Hz,1 H)；4.11至4.34(m,5 H)；4.91(m,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.5Hz,1 H)；6.48(ddd,J=3.8,11.3和15.5Hz,1 H)；7.05(d,J=8.7Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.0和8.7Hz,1 H)；7.24(m,5 H)；7.29(d,J=2.0Hz,1 H)；7.95至8.18(m,2 H)；8.30至8.46(m,2 H)；12.27(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=615[M+2H]2+；m/z=1227[M-H]-；m/z=1229[M+H]+；tR=1.26min.
實例2：2,5-二側氧吡咯啶-1-基 15-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸酯
於實例1(30mg,24.39μmol)之THF(5mL)溶液中加入DSC(7.65mg,29.27μmol)和DIEA(9.88μL,58.54μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後真空濃縮並藉由快速層析於5g二醇修飾的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到17mg的實例2(53%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：70/30構象混合物；0.79 (d,J=7.0Hz,6 H)；0.80至0.87(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.21至1.34(m,4 H)；1.51至1.62(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.93(m,1 H)；2.27(m,1 H)；2.35至2.72(部分遮蔽m,6 H)；2.81(s大，4 H)；2.88至3.06(m,5 H)；3.23(s,3 H)；3.28至3.37(遮蔽m,1 H)；3.40至3.79(m,18 H)；3.81(s,3 H)；3.88(s,1 H)；4.13至4.33(m,5 H)；4.90(m,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.5Hz,1 H)；6.46(ddd,J=3.8,11.5和15.5Hz,1 H)；7.05(d,J=8.7Hz,1 H)；7,17(廣s,1 H)；7,24(m,5 H)；7,29(廣s,1 H)；7,94(d,J=8.8Hz,0.3 H)；8.06(m,1 H)；8.12(d,J=8.1Hz,0.7 H)；8.32(m,1 H)；8.36(d,J=8.1Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=663.5[M+2H]2+；m/z=1324[M-H]-；m/z=1326[M+H]+；m/z=1374[M-H+HCO2H]-；tR=1.3min.
實例3：hu2H11_R35-74-Ex2
使用前述之通用方法來製備實例3。將15mg的hu2H11_R35-74與55.2μL的9.1mM實例2之DMA(10eq.)溶液反應3h 30。於Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+10% NMP純化，於Amicon Ultra-15上濃縮，於Nap-10上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP緩衝液交換及於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到3.36mg的實例3為濃度2.24mg/mL，3.4的DAR(HRMS)，99.8%單體純度和22%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=149354(裸mAb)；m/z=150563(D1)；m/z=151774(D2)；m/z=152966(D3)；m/z=154169(D4)；m/z=155410(D5)；m/z=156623(D6)；m/z=157835(D7)；m/z=159051(D8).
合成實例4至6：磺酸基-Val-Ala-C52苯甲胺、磺酸基-Val-Ala-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物13：4-((3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)胺基)-4-側氧丁酸
將化合物3(958mg,3.72mmol)之DCM(5mL)和琥珀酸酐(752.65mg,7.45mmol)溶液於RT攪拌3h。將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於24g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到1.3g的化合物13(98%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50/50構象混合物；1.39(s,4.5 H)；1.40(s,4.5 H)；2.33至2.43(m,3 H)；2.45至2.55(部分遮蔽m,4 H)；2.69(t,J=7.5Hz,1 H)；3.40(t,J=7.5Hz,1 H)；3.45(t,J=7.5Hz,1 H)；3.53(t,J=7.5Hz,1 H)；3.59(t,J=7.5Hz,1 H)；4.53(m,1 H)；4.59(m,1 H)；5.19至5.35(m,2 H)；5.91(m,1 H)；12.06(廣m,1 H).
化合物14：2-(4-((3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)胺基)-4-側氧丁醯胺基)乙磺酸
將化合物13(1.3g,3.64mmol)之THF(12mL)和DSC(1.14g,4.36mmol)及DIEA(1.84mL,10.91mmol)之混合物於RT攪拌5h。之後，加入牛磺酸(718.75mg,5.46mmol)之水溶液(9mL)並將媒劑於RT攪拌至隔夜。此時，加入DSC(1.14g,4.36mmol)和DIEA(1.84mL,10.91mmol)並將媒劑於RT攪拌至隔夜此時，加入牛磺酸(2.4g,18.2mmol)之水溶液(5mL)並將反應媒劑於RT攪拌1h，然後濃縮並藉由快速層析於70g的C18-嫁接矽膠上純化(梯度溶離CH3CN/H2O)得到1.28g的化合物14(76%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50/50構象混合物；1.39(s,4.5 H)；1.40(s,4.5 H)；2.26(t,J=7.2Hz,2 H)；2.38(t,J=7.5Hz,1 H)；2.47至2.55(部分遮蔽m,6 H)；2.69(t,J=7.5Hz,1 H)；3.28(m,2 H)；3.40(t,J=7.5Hz,1 H)；3.44(t,J=7.5Hz,1 H)；3.52(t,J=7.5Hz,1 H)；3.58(t,J=7.5Hz,1 H)；4.53(m,1 H)；4.58(m,1 H)；5.19至5.35(m,2 H)；5.91(m,1 H)；7.70(t大，J=6.5Hz,1 H).
化合物15：3-(N-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-4-側氧基-4-((2-乙磺酸 基)-胺基)丁醯胺基)丙酸
將化合物14(300mg,645.81μmol)溶於DCM(5mL)和TFA(484.57μL,6.46mmol)之溶液於RT攪拌至隔夜。此時，加入TFA(250μL)。將反應媒劑攪拌數小時並真空濃縮，然後以甲苯稀釋並真空濃縮二次，得到260mg的化合物15(99%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50/50構象混合物；2.27(t,J=7.2Hz,2 H)；2.40(t,J=7.6Hz,1 H)；2.48至2.56(部分遮蔽m,6 H)；2.68(t,J=7.6Hz,1 H)；3.28(m,2 H)；3.40(t,J=7.6Hz,1 H)；3.46(t,J=7.6Hz,1 H)；3.50(t,J=7.6Hz,1 H)；3.59(t,J=7.6Hz,1 H)；4.54(m,1 H)；4.57(m,1 H)；5.18至5.35(m,2 H)；5.91(m,1 H)；7.65(廣t,J=6.5Hz,1 H).LCMS(D)：ES m/z=409[M+H]+；tR=1.49min.
化合物16：(4S,7S)-12-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯基)-7-異丙基-4-甲基-3,6,9,13,16-五側氧基-2,5,8,12,17-五氮雜十九烷-19-磺酸
氬氣下，於化合物15(28.22mg,69.09μmol)之DMF(3mL)溶液中加入DIEA(23.30μL,138.18μmol)、HOBt(9.72mg,69.09μmol)、EDC(12.49μL,69.09μmol)和化合物11(60mg,69.09μmol)之DMF(2mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。為了完成反應，係加入化合物15(28.22mg,69.09μmol)、DIEA(23.30μL,138.18μmol)、HOBt(9.72mg,69.09μmol)、EDC(12.49μL,69.09μmol)並將反應媒劑於RT攪拌1d。此時，將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於70g的C18-嫁接矽膠上純化(梯度溶離CH3CN/H2O)得到24mg的化合物16(24%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60/40構象混合物；0.79(d,J=7.0Hz,6 H)；0.80至0.87(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.23(d,J=7.0Hz,3 H)；1.30(m,1 H)；1.52至1.63(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.95(m,1 H)；2.27(m,3 H)；2.34至2.58(部分遮蔽m,6 H)；2.63至2.73(m,2 H)；2.93至3.03(m,3 H)； 3.25至3.59(部分遮蔽m,9 H)；3.81(s,3 H)；3.88(d,J=1.4Hz,1 H)；4.10至4.33(m,5 H)；4.53(m,1.2 H)；4.56(m,0,8 H)；4.91(m,1 H)；5.10(m,1 H)；5.20(m,1 H)；5.29(qd,J=1.8和17.3Hz,0.6 H)；5.31(qd,J=1.8和17.3Hz,0.4 H)；5.79(dd,J=1.8和15.4Hz,1 H)；5.90(m,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.8和15.4Hz,1 H)；7.05(d,J=8.7Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.4和8.7Hz,1 H)；7.24(m,5 H)；7.29(d,J=2.4Hz,1 H)；7.69(t,J=5.8Hz,1 H)；7.97(d,J=8.8Hz,0.4 H)；8.04(d,J=7.7Hz,0.4 H)；8.07(d,J=8.8Hz,0.6 H)；8.11(d,J=7.7Hz,0.6 H)；8.31(t,J=6.3Hz,1 H)；8.38(d,J=8.3Hz,1 H)；11.83(廣m,1 H).LCMS(D)：ES m/z=1256[M-H]-；tR=2.58min.
實例4：(4S,7S)-1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯基)-7-異丙基-4-甲基-3,6,9-三側氧基-12-(4-側氧基-4-((2-乙磺酸基)胺基)丁醯基)-2,5,8,12-四氮雜十五烷-15-酸
氬氣下，於化合物16(24mg,19.06μmol)之CH3CN(2mL)溶液中加入DMF(0.5mL)、1,3-二甲基巴比妥酸(9.11mg,57.19μmol)和肆(三苯基膦)鈀(0)(1.11mg,0.953μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h，然後真空濃縮並藉由快速層析於10g的C18-嫁接矽膠上純化(梯度溶離CH3CN/H2O)得到16mg的實例4(70%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60/40構象混合物；0.79(d,J=7.0Hz,6 H)；0.80至0.86(m,6 H)；0.99(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.24(d,J=7.0Hz,3 H)；1.31(m,1 H)；1.52至1.62(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.95(m,1 H)；2.21至2.31(m,3 H)；2.34至2.59(部分遮蔽m,8 H)；2.62至2.75(m,2 H)；2.94至3.05(m,3 H)；3.25至3.58(部分遮蔽m,7 H)；3.81(s,3 H)；3.88(d,J=1.9Hz,1 H)；4.09至4.33(m,5 H)；4.90(m,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.5Hz,1 H)；6.47(ddd,J=4.0,11.4和15.5Hz,1 H)；7.05(d,J=8.7Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.2和8.7Hz,1 H)；7.21至7.26(m,5 H)；7.29(d,J=2.2Hz,1 H)；7.69(m,1 H)；7.97(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.04(d,J=7.7Hz, 0.4 H)；8.08(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.12(d,J=7.7Hz,0.6 H)；8.31(t,J=6.5Hz,1 H)；8.38(d,J=8.2Hz,1 H)；12.2(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=609.5[M+2H]2+；m/z=1216[M-H]-；m/z=1218[M+H]+；tR=1.72min.
實例5：(4S,7S)-1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯基)-12-(3-((2,5-二側氧吡咯啶-1-基)氧基)-3-側氧丙基)-7-異丙基-4-甲基-3,6,9,13,16-五側氧基-2,5,8,12,17-五氮雜十九烷-19-磺酸
於氬氣下，將實例4(16mg,13.13μmol)之DMF(1mL)、DSC(4.12mg,15.75μmol)和DIEA(2.66μL,15.75μmol)的混合物於RT攪拌至隔夜。此時，將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於5g的C18-嫁接矽膠上純化(梯度溶離CH3CN/H2O)得到12.5mg的實例5(73%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60/40構象混合物；0.79(d,J=7,0Hz,6 H)；0.80至0.86(m,6 H)；0.99(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.23(d,J=7.0Hz,3 H)；1.31(m,1 H)；1.51至1.62(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.93(m,1 H)；2.21至2.31(m,3 H)；2.35至2.59(部分遮蔽m,6 H)；2.62至2.74(m,2 H)；2.81(廣s,4 H)；2.85至3.05(m,4 H)；3.20至3.68(部分遮蔽m,8 H)；3.81(s,3 H)；3.88(d,J=1.9Hz,1 H)；4.10至4.33(m,5 H)；4.90(m,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.5Hz,1 H)；6.46(ddd,J=4.0,11.4和15.5Hz,1 H)；7.05(d,J=8.7Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.2和8.7Hz,1 H)；7.21至7.26(m,5 H)；7.29(d,J=2.2Hz,1 H)；7.69(m,1 H)；7.97(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.05(d,J=7.7Hz,0.4 H)；8.08(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.12(d,J=7.7Hz,0.6 H)；8.31(t,J=6.5Hz,1 H)；8.38(d,J=8.2Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=658[M+2H]2+；m/z=1313[M-H]-；m/z=1315[M+H]+；tR=1.82min.
實例6：hu2H11_R35-74-Ex5
使用前述之通用方法來製備實例6。將15mg的hu2H11_R35-74 與42μL的10mM實例5之DMA(4eq.)溶液反應1h 20，然後連續加入42μL的10mM實例5之DMA(4eq.)溶液反應1h 20，53μL的10mM實例5之DMA(5eq.)溶液反應1h 30及最後42μL的10mM實例5之DMA(4eq.)溶液反應1h。在Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+20% NMP純化，於Amicon Ultra-15上濃縮，於PD-10上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP緩衝液交換及於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到3.33mg的實例6為濃度1.33mg/mL，4.05之DAR(HRMS)，99%單體純度及22%整體產率之無色清澈的溶液。
SEC-HRMS：m/z=150568(D1)；m/z=151768(D2)；m/z=152971(D3)；m/z=154172(D4)；m/z=155375(D5)；m/z=156574(D6)；m/z=157944(D7)；m/z=158984(D8).
合成實例7：磺酸基-Val-Ala-氮雜-crypto苯甲胺
化合物17：L-纈醯胺基-L-丙胺酸第三丁酯
於Fmoc-Val-OH(CAS編號[68858-20-8],3g,8.66mmol)之DCM(60mL)溶液中，於Ar下加入EDC(2.02g,12.99mmol)、HOBt(1.46g,10.40mmol)和L-丙胺酸第三丁酯鹽酸鹽(CAS編號[13404-22-3],1.61g,8.66mmol)。將反應媒劑於RT攪拌1d，以H2O(30mL)進行驟冷並以DCM(3 x 30mL)萃取。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮得到5g Fmoc-保護的二肽為白色固體(quant.)。於此中間物(5g,8.66mmol)之DCM(50mL)溶液中加入哌啶(8.64mL,86.63mmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h並真空濃縮。將粗產物以Et2O稀釋並過濾，得到1.77g的固體，將其進一步以二個連續的快速層析於120g和50g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到500mg的化合物17為白色固體(24%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.79(d,J=6.9Hz,3 H)；0.89(d,J=6.9Hz,3 H)；1.24(d,J=7.3Hz,3 H)；1.40(s,9 H)；1.62(廣s,2 H)；1.86(m,1 H)；2.95(d,J=5.2Hz,1 H)；4.15(m,1 H)；8.09(廣d,J=7.3Hz,1 H)。
化合物18：(5S,8S)-13-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-8-異丙基-2,2,5-三 甲基-4,7,10,14,17-五側氧基-3-氧雜-6,9,13,18-四氮雜二十烷-20-磺酸
於化合物15(250mg,612.1μmol)之DMF(6mL)溶液中，於Ar下，加入DIEA(309.7μL,1.84mmol)和DSC(163.34mg,612.1μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h，然後加入化合物17(149.56mg,612.1μL)之DMF(1mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌2h並藉由逆相層析於5μm C18管柱30 x 100mm上純化(梯度溶離MeCN+0.07% TFA/H2O+0.07% TFA)，得到215mg的化合物18為白色泡沫(55%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60/40構象混合物；0.84(d,J=6.9Hz 3 H)；0.87(d,J=6.9Hz,3 H)；1.12(d,J=7.3Hz,3 H)；1.39(s,9 H)；1.92(m,1 H)；2.20至2.70(部分遮蔽m,10 H)；3.28(m,2 H)；3.34至3.60(m,4 H)；4.10(m,1 H)；4.20(m,1 H)；4.53(td,J=1.6和5.5Hz,1.2 H)；4.57(td,J=1.6和5.5Hz,0.8 H)；5.20(m,1 H)；5.30(m,1 H)；5.90(m,1 H)；7.69(廣t,J=6.4Hz,1 H)；7.91(d,J=9.6Hz,0.4 H)；8.04(d,J=9.6Hz,0.6 H)；8.23(d,J=7.2Hz,0.4 H)；8.30(d,J=7.2Hz,0.6 H).
化合物19：(3-(N-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-4-側氧基-4-((2-乙磺酸基)胺基)-丁醯胺基)-丙醯基)-L-纈醯胺基-L-丙胺酸
於化合物18(215mg,338.72μmol)之DCM(5mL)溶液中加入TFA(508.3μL,6.77mmol)。將反應媒劑於RT攪拌1d，真空濃縮及與甲苯(3 x)共蒸發，得到200mg的化合物19為白色泡沫(quant.)。
化合物20：(4S,7S)-12-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,7S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-6,6,7-三甲基-3-新戊基-2,5,9,12-四側氧基-1-氧雜-4,8,11-三氮環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯基)-7-異丙基-4-甲基-3,6,9,13,16-五側氧基-2,5,8,12,17-五氮雜十九烷-19-磺酸
於化合物19(200mg,345.6μmol)之DMF(9mL)溶液中加入DSC(108mg,413.2μmol)和DIEA(200μL,1.185mmol)。將反應媒劑於RT攪拌6h，然後加入DSC(108mg,413.2μmol)和DIEA(200μL,1.185mmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後加入DSC(50mg,191.3μmol)和DIEA(100μL,592.5μmol)並於RT繼續攪拌1h。於3mL的 活化酯溶液中加入(3S,7S,10R,16S,E)-16-((S)-1-((2R,3R)-3-(4-(胺基甲基)苯基)環氧乙烷-2-基)乙基)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-6,6,7-三甲基-3-新戊基-1-氧雜-4,8,11-三氮雜環-十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其可如PCT/EP2016/076603中所述由(3S)-3-胺基-2,2-二甲基丁酸甲酯，[MFCD09256689],70mg,96.51μmol)、EDC(17μL,77.8μmol)和HOBt(19mg,124μmol)開始來合成)。將反應媒劑於RT攪拌1h，真空濃縮並藉由快速層析於10g的C18-修飾矽膠上純化(梯度溶離MeCN/H2O)得到30mg的化合物20為白色漆狀物(24%)。
RMN 1H(600MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.79至0.90.(m,15 H)；0.98(m,3 H)；1.00(s,3 H)；1.03(d,J=7.3Hz,3 H)；1.19(s,3 H)；1.24(split d,J=7.0Hz,3 H)；1.34(d,J=14.1Hz,1 H)；1.81(m,1 H)；1.91(m,1 H)；1.98(dd,J=9.3和14.1Hz,1 H)；2.25(m,3 H)；2.38(m,1 H)；2.50(部分遮蔽m,5 H)；2.60(m,1 H)；2.68(m,1 H)；2.91(m,1 H)；2.96(m,2 H)；3.25至3.58(部分遮蔽m,9 H)；3.80(s,3 H)；3.91(m,1 H)；4.00至4.35(m,6 H)；4.53(m,2 H)；5.03(m,1 H)；5.20(m,1 H)；5.30(m,1 H)；5.89(d,J=16.1Hz,1 H)；5.91(m,1 H)；6.44(ddd,J=5.0,10.5和16.1Hz,1 H)；7.03(d,J=8.7Hz,1 H)；7.19至7.28(m,5 H)；7.31(s,1 H)；7.69(m,1 H)；7.86(d,J=8.2Hz,1 H)；7.91(m,1 H)；7.95至8.17(m,2 H)；8.32(m,1 H)；8.39(m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=1283[M-H]-；m/z=1285[M+H]+；m/z=1307[M+Na]+；tR=1.93min.
實例7：(4S,7S)-1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,7S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-6,6,7-三甲基-3-新戊基-2,5,9,12-四側氧基-1-氧雜-4,8,11-三氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)-環氧乙烷-2-基)苯基)-7-異丙基-4-甲基-3,6,9-三側氧基-12-(4-側氧基-4-((2-乙磺酸基)胺基)丁醯基)-2,5,8,12-四氮雜十五烷-15-酸
於化合物20(30mg,23.33μmol)之DCM(2mL)和DMF(0.3mL)溶液中，於Ar下，加入肆(三苯基膦)鈀(0)(1.38mg,1.17μmol)和1,3-二甲基-巴比妥酸(11.15mg,69.99μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h並藉由逆相層析於1g的C18-修飾矽膠上純化(梯度溶離MeCN/H2O)得到 15mg的白色粉末，將其進一步於矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)，得到7mg的實例7為白色漆狀物(24%)。
合成實例8 & 9：PEG4-Val-Ala-PABA-C52苯甲胺和PEG4-Val-Ala-PABA-C52苯甲胺之NHS酯
化合物21：(9H-茀-9-基)甲基((S)-1-(((S)-1-((4-(羥基甲基)苯基)-胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺甲酸酯
於Fmoc-Val-Ala-OH(CAS編號[150114-97-9],1g,2.44mmol)之DCM(30mL)和MeOH(15mL)溶液中加入4-胺基苯甲醇(612mg,4.87mmol)和EEDQ(1.22g,4.87mmol)。將反應媒劑於RT攪拌24h然後加入另外的4-胺基苯甲醇(612mg,4.87mmol)和EEDQ(1.22g,4.87mmol)並繼續攪拌2h。然後將反應媒劑真空濃縮；將Et2O加到粗產物中，攪拌混合物並過濾，得到一棕色固體，將其以Et2O稀釋並將混合物於RT攪拌至隔夜。然後將其過濾並將沉澱乾燥，得到1.3g的化合物21為棕色固體(quant.)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.86(d,J=7.0Hz,3 H)；0.89(d,J=7.0Hz,3 H)；1.30(d,J=7.0Hz,3 H)；2.00(m,1 H)；3.91(m,1 H)；4.19至4.34(m,4 H)；4.43(d,J=5.7Hz,2 H)；5.08(t,J=5.7Hz,1 H)；7.23(d,J=7.9Hz,2 H)；7.31(t,J=7.9Hz,2 H)；7.40(m,3 H)；7.53(d,J=9.1Hz,2 H)；7.73(t,J=8.6Hz,2 H)；7.89(d,J=7.9Hz,2 H)；8.16(d,J=7.3Hz,1 H)；9.91(s,1 H).LCMS(A)：ES m/z=292；m/z=393；m/z=516[M+H]+；tR=1.21min.
化合物22：(9H-茀-9-基)甲基((S)-3-甲基-1-(((S)-1-((4-((((4-硝基苯氧基)羰基)-氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-1-側氧丁-2-基)胺甲酸酯
於化合物21(1.3g,2.52mmol)之DMF(10mL)溶液中，於Ar下，加入DIEA(2.55mL,15.13mmol)，將溶液冷卻至0℃，之後加入4-硝基苯基氯甲酸酯(1.57g,7.56mmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h。加入20mL的H2O溶並以EtOAc(10mL)萃取媒劑二次。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於120g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)，得到600mg的化合物22為固體(35%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.86(d,J=7.0Hz,3 H)；0.89(d,J=7.0Hz,3 H)；1.31(d,J=7.0Hz,3 H)；1.99(m,1 H)；3.91(m,1 H)；4.18至4.35(m,3 H)；4.43(m,1 H)；5.24(s,2 H)；7.31(t,J=7.9Hz,2 H)；7.35至7.44(m,5 H)；7.56(d,J=9.1Hz,2 H)；7.63(d,J=8.6Hz,2 H)；7.74(m,2 H)；7.88(d,J=7.9Hz,2 H)；8.19(d,J=7.3Hz,1 H)；8.31(d,J=9.1Hz,2 H)；10.07(s,1 H).
化合物23：4-((S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)丙醯胺基)苯甲基4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基胺甲酸酯
於(3S,10R,16S,E)-16-((S)-1-((2R,3R)-3-(4-(胺基甲基)苯基)環氧乙烷-2-基)乙基)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,100mg,143.2μmol)之THF(5mL)溶液中，於氬氣下，加入化合物22(117mg,171.9μmol)和DIEA(60.4μL,358μmol)。將反應媒劑於RT及Ar下攪拌至隔夜。然後加入哌啶(142.9μL,1.43mmol)並將反應媒劑於RT攪拌1h。真空濃縮後，將粗媒劑藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)，得到100mg的化合物23為白色固體(73%)。
化合物24： 15-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環-十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)-甲基)苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸烯丙基酯
於化合物23(100mg,98.3μmol)之THF(5mL)溶液中，於Ar下，加入化合物9(50.8mg,98.3μmol)和DIEA(24.9μL,147.4μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h，真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到128mg的化合物24為白色固體(91%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60：40構象混合物；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.84(d,J=7.0Hz,1.2 H)；0.86(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.88(d,J=7.0Hz,1.2 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.30(m,4 H)；1.57(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.95(m,1 H)；2.26(m,1 H)；2.40(m,2 H)；2.52至2.72 (m,6 H)；2.95至3.04(m,3 H)；3.22(s,3 H)；3.30(m,1 H)；3.38至3.63(m,18 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.15至4.28(m,4 H)；4.40(m,1 H)；4.51至4.57(m,2 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.98(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.20(m,1 H)；5.30(m,1 H)；5.80(d,J=16.0Hz,1 H)；5.91(m,1 H)；6.47(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.5和8.6Hz,1 H)；7.29至7.32(m,8 H)；7.58(m,2 H)；7.76(t,J=6.5Hz,1 H)；7.92(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.04(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.15(d,J=7.0Hz,0.4 H)；8.21(d,J=7.0Hz,0.6 H)；8.32(d,J=8.0Hz,1 H)；9.88(s,0.4 H)；9.93(s,0.6 H).LCMS(A)：ES m/z=677；m/z=1418[M+H]+；m/z=1462[M-H+HCO2H]-；tR=1.21min.
實例8： 15-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)-苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸
於化合物24(58mg,40.9μmol)之DCM(20mL)溶液中，於Ar下，加入1,3-二甲基嘧啶-2,4,6(1H,3H,5H)-三酮(19.5mg,122.6μmol)和肆(三苯基膦)鈀(0)(2.4mg,2.0μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h，真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到53mg的實例8為白色固體(94%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：構象混合物；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.86(m,6 H)；0.99(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.30(m,1 H)；1.38(m,3 H)；1.57(m,2 H)；1.79(m,1 H)；2.04(m,1 H)；2.10至2.59(部分遮蔽m,7 H)；2.69(m,2 H)；2.93至3.03(m,3 H)；3.22(s,3 H)；3.30(遮蔽m,1 H)；3.40至3.64(m,18 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.05至4.27(m,4 H)；4.36(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4,97(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.80 (d,J=16.0Hz,1 H)；5.90(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；6.46(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.5和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.68(m,2 H)；7.82(m,1 H)；8.40至8.65(m,2 H)；9.21(m,1 H)；10.20(s,1 H).LCMS(A)：ES m/z=637；m/z=1376[M-H]-；m/z=1378[M+H]+；tR=1.3min.
實例9：2,5-二側氧吡咯啶-1-基 15-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)-苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜十八烷-18-酸酯
於實例8(49mg,35.5μmol)之DMF(2mL)溶液中，於Ar下，加入DSC(13.9mg,53.3μmol)和DIEA(9.0μL,53.3μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。加入另外的DSC(13.9mg,53.3μmol)和DIEA(9.0μL,53.3μmol)並繼續攪拌8h。將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於10g經二醇修飾的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到20mg的實例9為白色固體(38%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：70：30構象混合物；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.,82(d,J=7.0Hz,2.1 H)；0.84(d,J=7.0Hz,0.9 H)；0.86(d,J=7.0Hz,2.1 H)；0.88(d,J=7.0Hz,0.9 H)；1.00(s,3 H)；1.05(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.27(m,1 H)；1.30(m,3 H)；1.57(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.95(m,1 H)；2.25(m,1 H)；2.40(m,1 H)；2.52至2.75(m,7 H)；2.80(s,4 H)；2.87至3.08(m,3 H)；3.22(s,3 H)；3.32(遮蔽m,1 H)；3.40至3.68(m,18 H)；3.80(s,3 H)；3.88(d,J=2.3Hz,1 H)；4.16至4.28(m,4 H)；4.38(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.97(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=16.0Hz,1 H)；6.46(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7,05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.5和8.6Hz,1 H)；7.20至7.31(m,8 H)；7.58(m,2 H)；7.78(t,J=6.0Hz,1 H)；7.94(d,J=9.0Hz,0.3 H)；8.08(d,J=9.0Hz,0.7 H)；8.19(d,J= 7.0Hz,0.3 H)；8.25(d,J=7.0Hz,0.7 H)；8.35(d,J=8.0Hz,1 H)；9.90(s,0.3 H)；9.95(s,0.7 H).LCMS(A)：ES m/z=698；m/z=1475[M+H]+；tR=1.35min.
合成實例10：PEG7-Val-Ala-PABA-C52苯甲胺
化合物25：2,5,8,11,14,17,20-五氧雜二十三烷-23-酸第三丁酯
於六乙二醇單甲基醚(926.0μL,3.24mmol)之THF(3mL)溶液中，於Ar下，加入Na(0.7mg,32.4μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h直到Na完全溶解，然後加入丙烯酸第三丁酯(570μL,3.89mmol)並繼續於RT攪拌至隔夜。然後將反應媒劑真空濃縮，以H2O稀釋及以EtOAc萃取(3 x)。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮。得到1.04g的化合物25為無色油狀物(76%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.40(s,9 H)；2.40(t,J=6.4Hz,2 H)；3.23(s,3 H)；3.43(m,2 H)；3.47至3.54(m,22 H)；3；59(t,J=6.4Hz,2 H).
化合物26：2,5,8,11,14,17,20-六氧雜二十三烷-23-酸
於化合物25(1.04g,2.45mmol)之DCM(15mL)溶液中加入TFA(1.84mL,24.5mmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，真空濃縮，以DCM稀釋並與甲苯(3 x)共蒸發，得到1g的化合物26為無色油狀物(quant.)。
化合物27：2,5,8,11,14,17,20-七氧雜二十三-23-醯基氯
於化合物26(400mg,1.09mmol)中加入MsC1(1.27mL,16.3mmol)；將反應媒劑於60℃加熱3h，真空濃縮，以DCM稀釋並真空濃縮(3x)，得到420mg的化合物27為無色油狀物(quant.)。
化合物28：24-(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)-23-側氧基-2,5,8,11,14,17,20-七氧雜-24-氮雜二十七烷-27-酸烯丙酯
於化合物3(200mg,777.2μmol)之DCM(5mL)溶液中加入DIEA(262μL,1.55mmol)。將反應媒劑於0℃冷卻並於0℃逐滴加入化合物27(360.8mg,932.7μmol)之DCM(2mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌1h並真空濃縮。將粗產物藉由二個連續的快速層析於12g和10g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)，得到72mg的化合物28(15%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50：50構象混合物；1.39(s,4.5 H)；1.40(s,4.5 H)；2.22至2.75(部分遮蔽m,6 H)；3.23(s,3 H)；3.38至3.63(m,30 H)；4.55(m,2 H)；5.19至5.36(m,2 H)；5.90 (m,1 H).
化合物29：24-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-23-側氧基-2,5,8,11,14,17,20-七氧雜-24-氮雜二十七烷-27-酸
於化合物28(72mg,118.5μmol)之DCM(3mL)溶液中加入TFA(100μL,1.33mmol)；將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後加入另外的TFA(100μL,1.33mmol)並繼續攪拌1d。將反應媒劑真空濃縮，以DCM稀釋並與甲苯(3 x)共蒸發，得到66mg的化合物29(quant.)。
化合物30：24-(3-((2,5-二側氧吡咯啶-1-基)氧基)-3-側氧丙基)-23-側氧基-2,5,8,11,14,17,20-七氧雜-24-氮雜二十七烷-27-酸烯丙酯
於化合物29(66mg,119.7μmol)之THF(2mL)溶液中，於Ar下，加入DIEA(20.2μL,119.9μmol)和DSC(34.4mg,131.6μmol)；將反應媒劑於RT攪拌4d，真空濃縮並藉由快速層析於900mg二醇修飾的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到35mg的化合物30(45%)。
化合物31： 24-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環-十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)-甲基)苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-23-側氧基-2,5,8,11,14,17,20-七氧雜-24-氮雜二十七烷-27-酸烯丙酯
於化合物23(45mg,44.2μmol)之THF(5mL)溶液中加入化合物30(28.7mg,44.2μmol)和DIEA(11.2μL,66.3μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，以H2O(10mL)稀釋並以EtOAc萃取(3 x 10mL)。將組合的有機層以鹽水清洗，以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到35mg的化合物31為白色固體(51%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60：40構象混合物；0.80(分裂d,J=6.8Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.84(d,J=7.0Hz,1.2 H)；0.86(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.88(d,J=7.0Hz,1；2 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.28(m,1 H)；1.30(m, 3 H)；1.56(m,2 H)；1.79(m,1 H)；1.95(m,1 H)；2.27(m,1 H)；2.35至2.60(部分遮蔽m,6 H)；2.62至2.73(m,2 H)；2.93至3.05(m,3 H)；3.23(s,3 H)；3.33(遮蔽m,1 H)；3.38至3.64(m,30 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.15至4.27(m,4 H)；4.38(m,1 H)；4.52至4.58(m,2 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.97(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.50(m,1 H)；5.30(m,1 H)；5.80(d,J=16.0Hz,1 H)；5.90(m,1 H)；6.47(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.15(dd,J=2.5和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.59(m,2 H)；7.78(t,J=6.5Hz,1 H)；7.95(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.07(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.18(d,J=7.0Hz,0.4 H)；8.27(d,J=7.0Hz,0.6 H)；8.36(d,J=8.0Hz,1 H)；9.90(s,0.4 H)；9.95(s,0.6 H).LCMS(A)：ES m/z=698；m/z=1552[M+H]+；m/z=1595[M-H+HCO2H]-；tR=1.39min.
實例10： 24-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)-苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-23-側氧基-2,5,8,11,14,17,20-七氧雜-24-氮雜二十七烷-27-酸
於化合物31(30mg,19.3μmol)之DCM(5mL)溶液中，於Ar下，加入二甲基巴比妥酸(9.24mg,58.0μmol)和肆(三苯基膦)鈀(0)(1.13mg,0.97μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h，然後真空濃縮並藉由二個連續的快速層析於5g和0.9g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到14mg的實例10為白色固體(50%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50：50構象混合物；0.78(分裂d,J=6.8Hz,6 H)；0.81至0.89(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.28(m,1 H)；1.30(d,J=7.0Hz,1.5 H)；1.32(d,J=7.0Hz,1.5 H)；1.51至1.62(m,2 H)；1.79(m,1 H)；1.96(m,1 H)；2.26(m,1 H)；2.33至2.60(部分遮蔽m,6 H)；2.61至2.73(m,2 H)；2.93至3.03(m,3 H)；3.22(s,3 H)；3.30(遮蔽m,1 H)； 3.38至3.62(m,30 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.12至4.29(m,4 H)；4.39(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.96(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.78(d,J=16.0Hz,1 H)；6.46(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7,16(dd,J=2.5和8,6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.59(m,2 H)；7.79(m,1 H)；8.04(m,0.5 H)；8.10(d,J=9.0Hz,0.5 H)；8.25至8.41(m,2 H)；9.95(s,0.5 H)；9.98(s,0.5 H)；12.20(m,1 H).LCMS(D)：ES m/z=769；m/z=1511[M+H]+；tR=3.16min.
合成實例11&12：PEG24-Val-Ala-PABA-C52苯甲胺和PEG24-Val-Ala-PABA-C52苯甲胺之NHS酯
化合物32：75-(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)-74-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75-氮雜七十八烷基-78-酸烯丙酯
於化合物3(45mg,174.9μmol)之THF(5mL)溶液中，於Ar下， 加入MEO-DPEG(24)-NHS(212.4mg,174.9μmol)和DIEA(44.2μL,262.3μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後真空濃縮並藉由快速層析於20g的矽膠上純化(梯度溶離DMC/MeOH)得到125mg的化合物32(60%)和MEO-DPEG(24)-NHS(40%)之混合物。將混合物以THF(3mL)稀釋，並加入15mg的化合物3和20μL的DIEA；將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後真空濃縮並藉由快速層析純化於12g的矽膠上純化，得到105mg的化合物32(44%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.40(s,9 H)；2.25至2.78(m,6 H)；3.22(s,3 H)；3.32至3.70(m,98 H)；4.52(m,2 H)；5.20(m,1 H)；5.30(m,1 H)；5.90(m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=679[M+2H]2+；m/z=1356[M+H]+；m/z=1400[M-H+HCO2H]-；tR=1.15min.
化合物33：75-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-74-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75-氮雜七十八烷-78-酸
於化合物32(105mg,77.4μmol)之DCM(2mL)溶液中加入TFA(116.2μL,1.55mmol)；將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後加入150μL的TFA並將反應另再進行一天。然後將反應媒劑真空濃縮，以DCM稀釋並與甲苯(3 x)共蒸發，得到110mg的粗產物，將其以RP-HPLC於5μm C18 SunFire管柱上純化(Waters,30 x 100mm，梯度溶離MeCN+0.07% TFA/H20+0.07% TFA)，得到60mg的化合物33(60%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50：50構象混合物；2.37至2.60(部分遮蔽m,6 H)；3.23(s,3 H)；3.32至3.44(部分遮蔽m,38 H)；3.47至3.52(m,58 H)；3.60(m,2 H)；4.54(m,2 H)；5.22(dm,J=10.5Hz,1 H)；5.30(dm,J=17.3Hz,1 H)；5,84至5,98(m,1 H)；12.32(廣m,1 H).
化合物34： 75-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧 雜-8,11-二氮雜環-十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)-甲基)苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-74-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75-氮雜七十八烷-78-酸烯丙酯
於化合物33(30mg,23.1μmol)之THF(5mL)溶液中，於Ar下，加入DIEA(11.7μL,69.2μmol)和DSC(6.03mg,23.1μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h，然後加入化合物23(23.5mg,23.1μmol)並繼續攪拌1h。將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化，得到23mg的化合物34(40%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60：40構象混合物：0.80(分裂d,J=6.8Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.84(d,J=7.0Hz,1.2 H)；0.86(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.88(d,J=7.0Hz,1.2 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.28(m,1 H)；1.30(d,J=7.0Hz,3 H)；1.51至1.62(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.96(m,1 H)；2.26(m,1 H)；2.38(m,1 H)；2.45至2.61(部分遮蔽m,5 H)；2.61至2.72(m,2 H)；2.93至3.05(m,3 H)；3.23(s,3 H)；3.32(遮蔽m,1 H)；3.40至3.77(m,98 H)；3.80(s.3 H)；3.88(d,J=2.3Hz,1 H；4.14至4.27(m,4 H)；4.39(m,1 H)；4.51至4.60(m,2 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.97(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.18至5.33(m,2 H)；5.78(d,J=16.0Hz,1 H)；5.90(m,1 H)；6.45(m,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.5和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.59(m,2 H)；7.77(t,J=6.5Hz,1 H)；7.95(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.07(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.19(d,J=7.0Hz,0.4 H)；8.25(d,J=7.0Hz,0.6 H)；8.36(d,J=8.0Hz,1 H)；9.90(s,0.4 H)；9.96(s,0.6 H).
實例11： 75-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)-苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2- 基)胺基)-3-側氧丙基)-74-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75-氮雜七十八烷-78-酸
於化合物34(37mg,161μmol)之DCM溶液中，於Ar下，加入1,3-二甲基巴比妥酸(5.13mg,32.2μmol)和肆(三苯基膦)鈀(0)(0.94mg,0.80μmol)；將反應媒劑於RT攪拌2h，然後真空濃縮並藉由快速層析於5g二醇修飾的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到16mg的實例11(44%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.77(d,J=7.0Hz,6 H)；0.80至0.90(m,6 H)；0,99(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.28(m,1 H)；1.30(d,J=7.0Hz,1.5 H)；1.32(d,J=7.0Hz,1.5 H)；1.52至1.61(m,2 H)；1.79(m,1 H)；1.98(m,1 H)；2.22至2.58(部分遮蔽m,7 H)；2.68(m,2 H)；2.92至3.04(m,3 H)；3.21(s,3 H)；3.30(部分遮蔽m,1 H)；3.37至3.67(m,98 H)；3.81(s,3 H)；3.88(s,1 H)；4.08至4.28(m,4 H)；4.39(m,1 H)；4.90(m,1 H)；4.98(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.80(d,J=16.0Hz,1 H)；6.48(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7.04(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(廣d,J=8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.57至7.67(m,2 H)；7.80(m,1 H)；8.20(m,1 H)；8.35至8.70(m,2 H)；10.08(m,1 H)；12.30(廣m,1 H).LCMS(D)：ES m/z=698；m/z=2259[M+H]+；tR=3.14min.
實例12：2,5-二側氧吡咯啶-1-基75-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)-胺甲醯基)氧基)甲基)苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-74-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75-氮雜七十八烷-78-酸酯
於實例11(16mg,7.1μmol)之DCM溶液中加入DIEA(1.2μL,7.1μmol)和DSC(1.8mg,7.1μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h，然後 真空濃縮並藉由快速層析於1.3g二醇修飾的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到5mg的實例12(30%)和實例11(70%)之混合物。
LCMS(D)：ES m/z=698；m/z=2356[M+H]+；tR=3.2min.
合成實例13：磺酸基-PEG4-Val-Ala-PABA-C52苯甲胺
化合物35：4-((3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)胺基)-4-側氧丁酸
於化合物3(100mg,388.6μmol)之DCM(5mL)溶液中加入琥珀酸酐(78.6mg,777.2μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到102mg的化合物35為無色油狀物(73%)。
化合物36：1-銨溶-15-側氧基-3,6,9,12-四氧雜-16-氮雜十八烷-18-磺酸酯
於15-(Boc-胺基)-4,7,10,13-四氧雜十五酸(500mg,1.3mmol)之THF(5mL)溶液中，於Ar下，加入DIEA(438.4μL,2.6mmol)和DSC(381.6mg,1.43mmol)。將反應媒劑於RT攪拌6h，然後加入50mg的DSC並於RT繼續攪拌至隔夜。此時，將牛磺酸(821.6mg,6.5mmol)和H2O(1mL)加到反應媒劑中。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，真空濃縮並藉由製備式LCMS於5μm C18 SunFire管柱上純化(Waters,30 x 100mm，梯度溶離MeCN+0.07% TFA/H2O+0.07% TFA)得到341mg的化合物36(70%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：2.28(t,J=6.5Hz,2 H)；2.60(m,2 H)；2.99(m,2 H)；3.32(m,2 H)；3.45至3.65(m,16 H)；7.77(廣m,4 H).IR光譜為KBr壓片；主要的吸收帶係以cm-1(reciprocal centimeter)表示：3000；1780；1648；1556；1200-1170；1200；1100；1040.
化合物37：24-(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)-4,20,23,27-四側氧基-7,10,13,16,28-五氧雜-3,19,24-三氮雜三十一-30-烯-1-磺酸酯
於化合物35(100mg,279.8μmol)之THF溶液中加入DIEA(141.6μL,839.4μmol)和DSC(73.1mg,279.8μmol)。將反應混合物於RT攪拌2h，然後加入化合物36(104.2mg,279.8μmol)之DMF和DIEA(141.6μL,839.4μmol)溶液。將反應媒劑於RT攪拌2h，真空濃縮並藉由製備式LCMS於5μm C18 SunFire管柱上純化(Waters,30 x 100mm，梯度溶離MeCN+0.07% TFA/H2O+0.07% TFA)得到118mg的化合物37(60%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50：50構象混合物；1.39(s,4.5 H)；1.40(s,4.5 H)；2.27(t,J=6.5Hz,2 H)；2.31(t,J=7.0Hz,2 H)；2.38(t,J=7.0Hz,1 H)；2.45至2.56(遮蔽m,6 H)；2.68(m,1 H)；3.18(q,J=6.0Hz,2 H)；3.29(m,2 H)；3.36至3.60(m,20 H)；4.51至4.59(m,2 H)；5.17至5.25(m,2 H)；5.85至5.95(m,1 H)；7.75(t,J=6.0Hz,1 H)；7.88(t,J=6.0Hz,1 H).
化合物38：24-(2-羧乙基)-4,20,23,27-四側氧基-7,10,13,16,28-五氧雜-3,19,24-三氮雜三十一-30-烯-1-磺酸酯
於化合物37(118mg,166.0μmol)之DCM(5mL)溶液中加入TFA(249μL,3.32mmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，真空濃縮，以DCM稀釋並與甲苯共蒸發(3 x)得到100mg的化合物38為無色油狀物(92%)。
化合物39：(2S,5S)-10-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯 甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)苯基)胺基)-5-異丙基-2-甲基-1,4,7,11,14,30-六側氧基-18,21,24,27-四氧雜-3,6,10,15,31-五氮雜三十三烷-33-磺酸
於化合物38(100mg,152.7μmol)之THF(3mL)和DMF(1mL)溶液中加入DIEA(77μL,458.2μmol)和DSC(39.9mg,152.7μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，之後加入化合物23(124mg,121.9μmol)之THF(1mL)和DMF(0.5mL)以及DIEA(100μL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌2h，真空濃縮並藉由逆相快速層析於75g C18-修飾的矽膠上純化(梯度溶離H2O/MeCN)得到60mg的化合物39為白色固體(24%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60：40構象混合物；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.84(d,J=7.0Hz,1.2 H)；0.86(d,J=7.0Hz,1.8 H)；0.88(d,J=7.0Hz,1.2 H)；0.99(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.28(m,1 H)；1.30(d,J=7.0Hz,3 H)；1.50至1.62(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.96(m,1 H)；2.20至2.55(部分遮蔽m,11 H)；2.61至2.75(m,2 H)；2.94至3.05(m,3 H)；3.10至3.65(部分遮蔽，27 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.13至4.28(m,4 H)；4.38(m,1 H)；4.53(m,1.2 H)；4.56(m,0.8 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.97(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.18至5.33(m,2 H)；5.80(d,J=16.0Hz,1 H)；5.90(m,1 H)；6.47(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.5和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.59(m,2 H)；7.72(t,J=6.5Hz,1 H)；7.79(t,J=6.0Hz,1 H)；7.89(t,J=6.5Hz,1 H)；7.95(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.08(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.19(d,J=7.0Hz,0.4 H)；8.25(d,J=7.0Hz,0.6 H)；8.36(d,J=8.0Hz,1 H)；9.90(s,0.4 H)；9.95(s,0.6 H).LCMS(D)：ES m/z=913；m/z=1654[M+H]+；tR=3.87min.
實例13： 24-(3-(((S)-1-(((S)-1-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲 醯基)氧基)甲基)-苯基)胺基)-1-側氧丙-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-3-側氧丙基)-4,20,23-三側氧基-1-磺酸基-7,10,13,16-四氧雜-3,19,24-三氮雜二十七烷-27-酸
於化合物39(60mg,36.3μmol)之DMF(5mL)溶液中加入1,3-二甲基巴比妥酸(17.3mg,108.8μmol)和肆(三苯基膦)鈀(0)(2.1mg,1.8μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，真空濃縮並藉由二個快速層析於30g和20g的C18-修飾矽膠上純化，得到二批6mg的實例13為白色固體(20%整體產率)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60：40構象混合物；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.81至0.89(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.28(m,1 H)；1.30(d,J=7.0Hz,3 H)；1.58(m,2 H)；1.80(m,1 H)；1.96(m,1 H)；2.21至2.58(部分遮蔽m,11 H)；2.69(m,2 H)；2.93至3.68(部分遮蔽m,28 H)；3.80(s,3 H)；3.88(d,J=2.3Hz,1 H)；4.11至4.28(m,4 H)；4.38(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.98(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=16.0Hz,1 H)；6.47(ddd,J=4.7,10.5和16.0Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.5和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.59(m,2 H)；7.72(t,J=6.5Hz,1 H)；7.79(t,J=6.0Hz,1 H)；7.89(t,J=6.5Hz,1 H)；7.97(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.08(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.19(d,J=7.0Hz,0.4 H)；8.25(d,J=7.0Hz,0.6 H)；8.36(d,J=8.0Hz,1 H)；9.90(s,0.4 H)；9.94(s,0.6 H)；12.15(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=807.5[M+2H]2+；m/z=1612[M-H]-；m/z=1614[M+H]+；tR=1.72min.
合成實例14至16：glut芳基-Val-PEG4Gln-C52苯甲胺、戊二醯基-Val-PEG4Gln-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物40：(S)-4-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-(第三丁氧基)-5-側氧戊酸
於H-Glu-OtBu(CAS編號[45120-30-7],959mg,4.7mmol)和NaHCO3(400mg,4.77mmol)之H2O(80mL)溶液中，於磁力攪拌下，逐 滴加入(S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)-羰基)胺基)-3-甲基丁酸酯(2g,4.6mmol)之THF(80mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。真空濃縮媒劑，然後加入飽和的NaHCO3水溶液(1L)，接著以Et2O萃取(2 x 250mL)，去除有機層。以適量的(QS)1N HCl水溶液酸化水層達到pH 2，並以DCM萃取(3 x 250mL)，將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮，得到2.05g化合物40(85%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.87(d,J=6.9Hz,3 H)；0.90(d,J=6.9Hz,3 H)；1.38(s,9 H)；1.73至2.02(m,3 H)；2.24至2.30(m,2 H)；3.90(dd,J=7.3和9.0Hz,1 H)；4.14(m,1 H)；4.19至4.32(m,3 H)；7.27至7.45(m,5 H)；7.75(t,J=7.6Hz,2 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H)；8.22(廣d,J=7.0Hz,1 H)；12.05(廣s,1 H).
化合物41：(S)-18-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-15-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-14-氮雜十九烷-19-酸第三丁酯
於化合物40(200mg,381μmol)之DCM(6mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入PEG4-NH2(CAS編號[85030-56-4],115mg,554.9μmol)、HOBt(82mg,606.8μmol)和EDC(100μL,565μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。將粗媒劑以快速層析於矽膠上純化二次(梯度溶離DCM/MeOH)得到190mg的化合物41(70%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.87(d,J=6.8Hz,3 H)；0.90(d,J=6.8Hz,3 H)；1.38(s,9 H)；1.72至1.93(m,2 H)；1.99(m,1 H)；2.14(t,J=7.8Hz,2 H)；3.18(m,2 H)；3.23(s,3 H)；3.37(t,J=6.0Hz,2 H)；3.41(m,2 H)；3.46至3.53(m,10 H)；3.92(dd,J=7.1和8.8Hz,1 H)；4.09(m,1 H)；4.17至4.34(m,3 H)；7.32(m,3 H)；7.41(t,J=7.6Hz,2 H)；7.70至7.81(m,3 H)；7.88(d,J=7.6Hz,2 H)；8.18(d,J=7.3Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=714[M+H]+；m/z=758[M-H+HCO2H]-；tR=1.41min.
化合物42：(S)-18-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-15-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-14-氮雜十九烷-19-酸
於化合物41(190mg,266μmol)中，於磁力攪拌下，加入4M的HCl之1,4-二烷溶液(5mL)。將反應媒劑於RT攪拌4h。此時，將 反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於15g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/NH4OH)得到70mg的化合物42(40%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.84(d,J=6.6Hz,3 H)；0.86(d,J=6.6Hz,3 H)；1.70至1.90(m,2 H)；2.01至2.15(m,3 H)；3.15(m,2 H)；3.23(s,3 H)；3.36(t,J=6.4Hz,2 H)；3.42(m,2 H)；3.45至3.53(m,10 H)；3.80(廣m,1 H)；3.83(dd,J=6.8和8.7Hz,1 H)；4.19至4.34(m,3 H)；7.33(m,2 H)；7.41(t,J=7.6Hz,2 H)；7.59(廣m,2 H)；7.73(d,J=7.6Hz,1 H)；7.76(d,J=7.6Hz,1 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H)；8.00(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=656[M-H]-；m/z=658[M+H]+；RT=1.19min.
化合物43：(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-N1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)-N5-(2,5,8,11-四氧雜十三烷-13-基)戊二醯胺
於(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,58mg,83μmol)之DMF(5mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入化合物42(70mg,106μmol)、HOBt(20mg,148μmol)和EDC(23μL,130μmol)。將反應媒劑於RT攪拌24h。此時，將哌啶(80μL,810μmol)加至媒劑中，並持續攪拌1h。然後將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於20g矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到60mg的化合物43(65%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.77(d,J=6.9Hz,3 H)；0.79(d,J=6.3Hz,6 H)；0.87(d,J=6.9Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=6.4Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.31(m,1 H)；1.52至1.63(m,2 H)；1.72至1.98(m,4 H)；2.05至2.15(m,2 H)；2.26(m,1 H)；2.62至2.73(m,2 H)；2.94至3.04(m,4 H)；3.18(q,J=5.9Hz,2 H)；3.23(s,3 H)；3.33(部分遮蔽m,1 H)；3.39(t,J=5.9Hz,2 H)；3.42(m,2 H)；3.47 至3.52(m,10 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=1.4Hz,1 H)；4.21至4.36(m,4 H)；4.91(dd,J=3.6和9.6Hz,1 H)；5.10(dd,J=5.5和11.8Hz,1 H)；5.79(d,J=15.3Hz,1 H)；6.46(ddd,J=3.8,11.6和15.3Hz,1 H)；7.05(d,J=8.5Hz,1 H)；7.17(dd,J=1.9和8.5Hz,1 H)；7.21至7.25(m,5 H)；7.28(d,J=1.9Hz,1 H)；7.89(t,J=5.5Hz,1 H)；8.07(m大，1 H)；8.37(d,J=8.0Hz,1 H)；8.45(t,J=5.9Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=558[M+2H]2+；m/z=1115[M+H]+；m/z=1159[M-H+HCO2H]-；tR=0.96min.
實例14：(18S,21S)-18-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-21-異丙基-15,20,23-三側氧基-2,5,8,11-四氧雜-14,19,22-三氮雜二十七烷- 27-酸
於化合物43(55mg,49.3μmol)之DMF(3mL)溶液中加入戊二酸酐(9mg,79μmol)，將反應媒劑於RT攪拌2h。此時，真空濃縮媒劑並藉由快速層析於10g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到38mg的實例14(62%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.81(splitd,J=6.6Hz,6 H)；0.85(d,J=6.3Hz,3 H)；0.87(d,J=6.3Hz,3 H)；0.98(s,3 H)；1.03(d,J=6.6Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.35(m,1 H)；1.52至2.34(m,15 H)；2.71(m,2 H)；2.89至3.02(m,3 H)；3.09至3.21(m,2 H)；3.23(s,3 H)；3.30至3.40(部分遮蔽m,3 H)；3.42(m,2 H)；3.46至3.51(m,10 H)；3.81(s,3 H)；3.87(s,1 H)；4.03至4.24(m,4 H)；4.37(m,1 H)；4.96(m,1 H)；5.11(m,1 H)；5.81(d,J=15.3Hz,1 H)；6.46(ddd,J=3.3,11.4和15.3Hz,1 H)；7.04(d,J=8.5Hz,1 H)；7.19(dd,J=1.9和8.5Hz,1 H)；7.22(d,J=8.3Hz,2 H)；7.27(d,J=8.3Hz,2 H)；7.30(d,J=1.9Hz,1 H)；7.32(m,1 H)；7.85至8.99(廣m,5 H)；12.12(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=615[M+2H]2+；m/z=1227[M-H]-；m/z=1229[M+H]+；tR=1.26min.
實例15：(18S,21S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基 18-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-21-異丙基-15,20,23-三側氧基-2,5,8,11-四氧雜-14,19,22-三氮雜二十七烷-27-酸酯
於實例14(32mg,26μmol)之DMF(3mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入DSC(8mg,31.2μmol)和DIEA(8.6μL,52μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。然後加入4mg的DSC並於RT持續攪拌1h。此時，將反應媒劑以MeTHF(10mL)稀釋，以H2O(5mL)清洗。以MeTHF(3 x 5mL)萃取水層。將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮。將媒劑藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到28mg的實例15(81%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.6Hz,6 H)；0.83(d,J=6.9Hz,3 H)；0.85(d,J=6.9Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=6.4Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.30(m,1 H)；1.52至1.64(m,2 H)；1.75至1.93(m,5 H)；1.98(m,1 H)；2.12(m,2 H)；2.22至2.34(m,3 H)；2.62至2.72(m,4 H)；2.81(s,4 H)；2.93至3.04(m,3 H)；3.18(q,J=6.0Hz,2 H)；3.23(s,3 H)；3.33(部分遮蔽m,1 H)；3.39(t,J=6.0Hz,2 H)；3.42(m,2 H)；3.47至3.52(m,10 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=1.6Hz,1 H)；4.15(dd,J=6.6和8.2Hz,1 H)；4.19至4.32(m,4 H)；4.91(dd,J=3.6和9.6Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.3Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.7,11.3和15.3Hz,1 H)；7.05(d,J=8.5Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.2和8.5Hz,1 H)；7.21至7.26(m,5 H)；7.28(d,J=2.2Hz,1 H)；7.85(t,J=6.0Hz,1 H)；7.92(d,J=8.2Hz,1 H)；8.08(d,J=7.7Hz,1 H)；8.32(t,J=6.0Hz,1 H)；8.37(d,J=8.0Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=1326[M+H]+；m/z=1348[M+Na]+；m/z=1370[M-H+HCO2H]-；tR=1.31min.
實例16：hu2H11_R35-74-Ex15
使用前述之通用方法來製備實例16。將28.8mg的hu2H11_R35-74與115.2μL的10.05mM實例15之DMA(6eq.)溶液反應2h30。於Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+10% NMP純化，於Amicon Ultra-15上濃縮，以緩衝液B pH 6.5最終濃度5%的NMP稀釋並於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到16.12mg的ADC，其係含有2.2%的殘餘實例14。將此批件於Amicon Ultra-15上濃縮並於Sephadex G25上純化，得到13.16mg的實例16為濃度1.4mg/mL，具有2.8之DAR(HRMS)、99.7%單體純度和43%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=149398(裸mAb)；m/z=150610(D1)；m/z=151822(D2)；m/z=153035(D3)；m/z=154248(D4)；m/z=155458(D5)；m/z=156672(D6)；m/z=1578881(D7).
合成實例17至19：戊二醯基-Val-葡萄糖Gln-C52苯甲胺、戊二醯基-Val-葡萄糖Gln-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物44：(2S,3S,4S,5R,6R)-2-(碘甲基)-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-3,4,5-三醇
於攪拌回流之甲基β-D-哌喃葡萄糖苷半水合物(CAS編號[7000-27-3],1g,4.67mmol)、咪唑(642mg,9.34mmol)和三苯基膦(2.47g,9.33mmol)的THF(50mL)溶液中逐滴加入碘(2.37g,9.33mmol)之THF(10mL)溶液。持續回流3h。於0℃冷卻後，將反應媒劑過濾，真空濃縮濾液。將混合物藉由快速層析純化於150g的矽膠上純化(梯度DCM/MeOH)得到1g的化合物44(63%)。
化合物45：(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(疊氮基甲基)-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-3,4,5-三醇
於化合物44(1g,3.29mmol)之DMF(10mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入NaN3(322mg,4.93mmol)。將反應媒劑於50℃加熱16h。此時，於RT冷卻後，真空濃縮媒劑並藉由快速層析於80g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到550mg的化合物45(76%)。
化合物46：(2R,3S,4S,5R,6R)-2-(胺基甲基)-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-3,4,5-三醇鹽酸鹽
將化合物45(550mg,2.51mmol)和三苯基膦(1.33g,5.02mmol)溶於1,4-二烷(12mL)及MeOH(3mL)之溶液於RT攪拌30min。此時，將水(1.5mL)加至反應媒劑中並於RT持續攪拌至隔夜。將粗媒劑真空濃縮，然後以DCM(10mL)和1N HCl水溶液(5mL)稀釋，以DCM(2 x 10mL)萃取水層。將水層真空濃縮，然後以MeOH稀釋並真空濃縮，得到560mg的化合物46(97%)。
化合物47：(S)-1-第三丁基5-(2,5-二側氧吡咯啶-1-基)2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)戊二酸酯
於化合物40(2g,3.81mmol)之THF(100mL)溶液中，於磁石攪拌下，連續加入DIEA(1.29mL,7.62mmol)、DSC(1.95g,7.62mmol)和DMF(20mL)。將反應媒劑於RT及Ar下攪拌至隔夜。真空濃縮後，將混合物藉由快速層析於150g的矽膠上純化(溶離DCM/EtOAc)得到1.67g的化合物47(71%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.89(d,J=6.8Hz,3 H)；0.91(d,J=6.8Hz,3 H)；1.39(s,9 H)；1.84至2.10(m,3 H)；2.65至2.77(m,2 H)；2.80(s,4 H)；3.88(dd,J=7.2和8.7Hz,1 H)；4.18至 4.31(m,4 H)；7.32(m,2 H)；7.41(m,3 H)；7.73(d,J=7.6Hz,1 H)；7.75(d,J=7.6Hz,1 H)；7.88(d,J=7.6Hz,2 H)；8.31(廣d,J=7.1Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=566；m/z=622[M+H]+；m/z=666[M-H+HCO2H]-；tR=1.49min.
化合物48：(S)-第三丁基2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-側氧基-5-((((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)戊酸酯
於化合物47(500mg,804μmol)之DMF(10mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入化合物46(185mg,805μmol)和DIEA(165μL,978μmol)。將反應媒劑於RT攪拌4h。此時，將37mg的化合物46和35μL的DIEA加至反應媒劑中，持續攪拌1h。然後真空濃縮媒劑並藉由快速層析於50g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到480mg的化合物48(85%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.87(d,J=6.7Hz,3 H)；0.89(d,J=6.7Hz,3 H)；1.38(s,9 H)；1.70至2.04(m.3 H)；2.19(t,J=7.9Hz,2 H)；2.86至2.98(m,2 H)；3.01至3.16(m,3 H)；3.35(s,3 H)；3.52(m,1 H)；3.92(dd,J=7.2和8.4Hz,1 H)；3.99(d,J=7.6Hz,1 H)；4.09(m,1 H)；4.16至4.36(m,3 H)；4.95(廣d,J=4.6Hz,1 H)；4.99(d,J=5.1Hz,1 H)；5.03(d,J=4.9Hz,1 H)；7.27至7.37(m,3 H)；7.41(t,J=7.6Hz,2 H)；7.75(分裂d,J=7.0Hz,2 H)；7.85(廣m,1 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H)；8.23(廣d,J=7.1Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=700[M+H]+；m/z=744[M-H+HCO2H]-；tR=1.22min.
化合物49：(S)-2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-側氧基-5-((((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)戊酸
於化合物48(480mg,686μmol)中，於磁力攪拌下，加入4M的HCl之1,4-二烷溶液(30mL)。將反應媒劑於RT攪拌4h。此時，真空濃縮媒劑並藉由快速層析於30g的矽膠上純化(elution DCM/MeOH/H2O)得到260mg的化合物49(59%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.83(d,J=6.6Hz,3 H)； 0.85(d,J=6.6Hz,3 H)；1.69至1.90(m,2 H)；2.01至2.15(m,3 H)；2.86至2.97(m,2 H)；2.99至3.16(m,3 H)；3.35(s,3 H)；3.51(m,1 H)；3.82(m,2 H)；3.99(d,J=7.8Hz,1 H)；4.20至4.33(m,3 H)；4.95(廣d,J=3.7Hz,1 H)；5.03(d,J=4.9Hz,1 H)；5.06(廣d,J=4.6Hz,1 H)；7.33(m,2 H)；7.40(t,J=7.6Hz,2 H)；7.52(廣d,J=6.4Hz,1 H)；7.61(廣d,J=9.3Hz,1 H)；7.73(d,J=7.6Hz,1 H)；7.76(d,J=7.6Hz,1 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H)；8.10(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=642[M-H]-；m/z=644[M+H]+；tR=1.01min.
化合物50：(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-N1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)-N5-(((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)戊二醯胺
於(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,110mg,157μmol)之DMF(6mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入化合物49(122mg,189μmol)、HOBt(34mg,252μmol)和EDC(43μL,236μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。然後將25mg的化合物49和25μL的EDC加至媒劑中，持續攪拌1h。此時，將哌啶(160μL,1.58mmol)加至媒劑中。2h後，真空濃縮媒劑並藉由快速層析於20g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到78mg的化合物50(45%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.76(d,J=6.9Hz,3 H)；0.79(d,J=6.3Hz,6 H)；0.87(d,J=6.9Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=6.6Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.30(m,1 H)；1.50至1.98(m,8 H)；2.12(m,2 H)；2.26(m,1 H)；2.68(m,2 H)；2.86至3.14(m,9 H)；3.32(部分遮蔽m,1 H)；3.38(s,3 H)；3.52(m,1 H)；3.81(s,3 H)；3.87(s,1 H)；4.01(d,J=7.4Hz,1 H)；4.20至4.36(m,4 H)；4.90(m,1 H)； 4.98(廣d,J=3.6Hz,1 H)；5.02(d,J=4.9Hz,1 H)；5.06(d,J=4.7Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.6Hz,1 H)；6.47(m,1 H)；7.05(d,J=8.5Hz,1 H)；7.17(廣d,J=8.5Hz,1 H)；7.21至7.26(m,5 H)；7.29(廣s,1 H)；7.90(m,1 H)；8.08(m大，1 H)；8.37(d,J=8.0Hz,1 H)；8.48(m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=551[M+2H]2+；m/z=1099[M-H]-；m/z=1101[M+H]+；m/z=1145[M-H+HCO2H]-；tR=0.9min.
實例17：5-(((S)-1-(((S)-1-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1,5-二側氧基-5-((((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)戊-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-5-側氧戊酸
於化合物50(77mg,69.9μmol)之DMF(4mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入戊二酸酐(14mg,125.8μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h。然後將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於10g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到54mg的實例17(64%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.80(d,J=6.0Hz,6 H)；0.86(d,J=6.6Hz,3 H)；0.88(d,J=6.6Hz,3 H)；0.99(s,3 H)；1.03(d,J=6.6Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.34(m,1 H)；1.53至1.85(m,6 H)；1.90至2.33(m,9 H)；2.65至2.76(m,2 H)；2.87至3.14(m,8 H)；3.32(部分遮蔽m,1 H)；3.35(s,3 H)；3.53(m,1 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=1.9Hz,1 H)；4.00(d,J=7.9Hz,1 H)；4.03至4.26(m,4 H)；4.33(m,1 H)；4.93(m,1 H)；5.02(廣m,3 H)；5.10(m,1 H)；5.80(d,J=15.3Hz,1 H)；6.46(ddd,J=3.5,11.0和15.3Hz,1 H)；7.05(d,J=8.5Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.2和8.5Hz,1 H)；7.22(d,J=8.2Hz,2 H)；7.26(d,J=8.2Hz,2 H)；7.30(m,2 H)；7.98至8.65(廣m,5 H).LCMS(A)：ES m/z=608[M+2H]2+；m/z=1213[M-H]-；m/z=1215[M+H]+；tR=1.15min.
實例18：2,5-二側氧吡咯啶-1-基5-(((S)-1-(((S)-1-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二 氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1,5-二側 氧基-5-((((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)甲基)胺基)戊-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-5-側氧戊酸酯
將實例17(45mg,37μmol)以甲苯稀釋並真空濃縮。然後於實例17溶於THF(5mL)、DCM(2mL)和DMF(1mL)之溶液中，於磁力攪拌下，加入DSC(11.4mg,44.4μmol)和DIEA(19μL,112.6μmol)。將反應媒劑於RT下攪拌3h。然後將DMF和DSC加到媒劑中直到反應完全。3h後，以水稀釋(5mL)媒劑並以MeTHF(3 x 10mL)萃取。將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮。將混合物藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到21mg的實例18(43%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.0Hz,6 H)；0.83(d,J=6.9Hz,3 H)；0.85(d,J=6.9Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=6.3Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.30(m,1 H)；1.52至1.63(m,2 H)；1.75至2.02(m,6 H)；2.09至2.34(m,5 H)；2.68(m,4 H)；2.81(s,4 H)；2.88至3.18(m,7 H)；3.32(部分遮蔽m,1 H)；3.38(s,3 H)；3.51(m,1 H)；3.81(s,3 H)；3.88(s,1 H)；4.01(d,J=7.7Hz,1 H)；4.16(dd,J=7.1和7.7Hz,1 H)；4.19至4.35(m,5 H)；4.90(m,1 H)；4.97(d,J=4.1Hz,1 H)；5.01(d,J=4.9Hz,1 H)；5.06(d,J=4.9Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.3Hz,1 H)；6.47(m,1 H)；7.05(d,J=8.5Hz,1 H)；7.17(d大，J=8.5Hz,1 H)；7.20至7.26(m,5 H)；7.28(廣s,1 H)；7.86(廣t,J=5.6Hz,1 H)；7.91(d,J=7.9Hz,1 H)；8.08(d,J=7.4Hz,1 H)；8.33(t,J=5.8Hz,1 H)；8.38(d,J=8.2Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=1310[M-H]-；m/z=1356[M-H+HCO2H]-；m/z=1312[M+H]+；m/z=656.5[M+2H]2+；tR=1.2min.
實例19：hu2H11_R35-74-Ex18
使用前述之通用方法來製備實例19。將29.02 mg的hu2H11_R35-74與116.6μL的10mM實例18之DMA(6eq.)溶液反應2h 30。於Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+10% NMP純化，於上Amicon Ultra-15濃縮，以緩衝液B pH 6.5最終濃度5%的NMP稀 釋及於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到23.1mg的實例19為濃度2.2mg/mL，具有2.8的DAR(HRMS)，99.9%單體純度和78%整體產率之無色清澈溶液。游離-藥物量係在1%的閥值以上：將ADC於Amicon Ultra-15上濃縮，於Sephadex G25上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP純化並於0.22μm PVDF過濾器上過濾，得到17.25 mg的實例19為濃度1.5mg/mL，具有2.25的DAR(HRMS)，99.7%單體純度和59%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=149405(裸mAb)；m/z=150602(D1)；m/z=151800(D2)；m/z=152997(D3)；m/z=154196(D4)；m/z=155393(D5)；m/z=156589(D6)；m/z=157791(D7).
合成實例20：戊二醯基-Val-麩醯胺酸Gln-C52苯甲胺
化合物51：(S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁酸酯
於Fmoc-Val-OH(CAS編號[68858-20-8],5g,14.44mmol)之THF(40mL)溶液中加入NHS(1.71g,14.44mmol)和DCC(2.98g,14.44mmol)。將反應媒劑於RT攪拌5h，然後加入0.2當量的NHS和DCC並於RT繼續攪拌4h。過濾媒劑，以THF(2 x 25mL)清洗固體二次並將濾液真空濃縮，得到6.5g的化合物51為白色蛋白霜狀物(quant.)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.03(d,J=6.9Hz,6 H)；2.20(m,1 H)；2.81(s,4 H)；4.18至4.39(m,4 H)；7.32(m,2 H)；7.42(m,2 H)；7,74(m,2 H)；7.90(d,J=7.6Hz,2 H)；8.12(d,J=8.5Hz,1 H).
化合物52：(S)-4-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-(第三丁氧基)-5-側氧戊酸
於H-Glu-OtBu(CAS編號[45120-30-7],3.14g,15.16mmol)和碳酸氫鈉(1.40g,16.46mmol)之H2O(60mL)溶液中加入化合物51(6.3g,14.43mmol)之THF(240mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌16h並真空濃縮。以H2O(700mL)稀釋粗產物，形成凝膠，將其攪拌15min然後以Et2O(200mL)萃取二次。以5N HCl將水懸浮液酸化至pH 3並以DCM(4 x 200mL)萃取。將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮。得到7.98g的化合物52為白色蛋白霜狀物(quant.)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.87(d,J=6.9Hz,3 H)；0.90(d,J=6.9Hz,3 H)；1.38(s,9 H)；1.77(m,1 H)；1.91(m,1 H)；1.98(m,1 H)；2.28(m,2 H)；3.90(dd,J=7.1和9.1Hz,1 H)；4.10至4.37(m,4 H)；7.32(m,2 H)；7.38(d,J=9.1Hz,1 H)；7.41(m,2 H)；7.73(m,2 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H)；8.20(d,J=7.5Hz,1 H)；12.21(廣m,1 H).
化合物53：(S)-1-第三丁基5-(2,5-二側氧吡咯啶-1-基)2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)戊二酸
於化合物52(500mg,953.1μmol)之THF(30mL)溶液中加入DIEA(320μL,1.9mmol)、DSC(498.3mg,1.91mmol)和DMF(6mL)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後將30mg的DSC加至媒劑中並繼續攪拌24h。將反應媒劑真空濃縮，與甲苯共蒸發二次並藉由快速層析於50g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到506mg的化合物53為白色油狀物(85%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.89(d,J=6.9Hz,3 H)；0.91(d,J=6.9Hz,3 H)；1.39(s,9 H)；1.75至2.11(m,3 H)；2.73(m,2 H)；2.80(s,4 H)；3.89(dd,J=7.3和9.1Hz,1 H)；4.20至4.38(m,4 H)； 7.32(m,2 H)；7.42(m,3 H)；7.75(m,2 H)；7.80(m,2 H)；8.31(d,J=7.5Hz,1 H).
化合物54：(2S,3R,4R,5R)-1-胺基-6-((第三丁基二苯基矽基)氧基)己-2,3,4,5-四醇
將D-麩醯胺酸(CAS編號[488-43-7],200mg,1.10mmol)溶於DMF(2mL)之懸浮液於0℃冷卻，然後加入咪唑(82.0mg,1.19mmol)和第三丁基氯二苯基矽烷(334.4mg,1.19mmol)。將反應媒劑於0℃攪拌1h，以H2O(20mL)進行驟冷並繼續攪拌10min。以EtOAc(3 x 50mL)萃取媒劑。將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮，與甲苯共蒸發二次並藉由逆相快速層析於31g的C18-修飾矽膠上純化(梯度溶離H2O/MeCN)得到218mg的化合物54為白色泡沫(47%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.00(s,9 H)；2.62(dd,J=6.3和12.7Hz,1 H)；2.74(dd,J=4.5和12.7Hz,1 H)；3.40(部分遮蔽m,1 H)；3.49(m,1 H)；3.55至3.72(m,3 H)；3.88(m,1 H)；4.48(廣m,4 H)；7.42(m,6 H)；7.69(m,4 H).
化合物55：(S)-第三丁基2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-(((2S,3R,4R,5R)-6-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,3,4,5-四羥基己基)胺基)-5-側氧戊酸酯
於化合物53(300mg,482.6μmol)之DMF(2mL)溶液中加入化合物54(214.6mg,511.5μmol)之DMF(3mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌1h，真空濃縮，與甲苯共蒸發(3 x)並藉由快速層析於25g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到270mg的化合物55為白色泡沫(60%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.87(d,J=6.9Hz,3 H)；0.90(d,J=6.9Hz,3 H)；0.99(s,9 H)；1.38(s,9 H)；1.80(m,1 H)；1.90(m,1 H)；1.98(m,1 H)；2.17(t,J=7.7Hz,2H)；3.03(m,1 H)；3.26(m,1 H)；3.49(m,1 H)；3.52至3.60(m,4 H)；3.83(m,1 H)；3.92(dd,J=7.3和9.2Hz,1 H)；4.08(m,1 H)；4.18至4.31(m,4 H)；4.33(d,J=6.4Hz,1 H)；4.63(d,J=5.8Hz,1 H)；4.78(d,J=4.7Hz,1 H)；7.31(m,2 H)；7.36(d,J=9.2Hz,1 H)；7.41(m,8 H)；7.67(m,4 H)；7.69至7.76 (m,3 H)；7.89(m,2 H)；8.23(d,J=7.5Hz,1 H).
化合物56：(S)-2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-5-(((2S,3R,4R,5R)-6-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,3,4,5-四羥基己基)胺基)-5-側氧戊酸
將化合物55以DCM稀釋，形成凝膠，將其於0℃冷卻，之後於0℃緩慢地加入1：1的DCM/TFA混合物。將反應媒劑於0℃攪拌30min，然後於RT攪拌5h，真空濃縮並與甲苯共蒸發(3 x)得到一白色固體，將其置於iPr2O中研磨，過濾，以Et2O(5mL)清洗二次，乾燥及最後藉由快速層析於15g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到149mg的化合物56為白色固體(59%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.84(d,J=6.8Hz,3 H)；0.86(d,J=6.8Hz,3 H)；0.99(s,9 H)；1.82(m,1 H)；1.90(m,1 H)；2.03至2.14(m,3 H)；3.00(m,1 H)；3.25(m,1 H)；3.48(m,1 H)；3.65(m,4 H)；3.82至3.92(m,3 H)；4.20至4.37(m,3 H)；4.40(d,J=6.0Hz,1 H)；4.45(d,J=6.0Hz,1 H)；4.80(m,1 H)；5.12(m,1 H)；7.32(m,2 H)；7.41(m,8 H)；7.55(m,2 H)；7.65至7.82(m,7 H)；7.89(d,J=8.0Hz,2 H).LCMS(A)：m/z=868[M-H]-；m/z=870[M+H]+；tR=1.55min.
化合物57：(S)-2-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-N5-((2S,3R,4R,5R)-6-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,3,4,5-四羥基己基)-N1-(4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環-十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)-戊二醯胺
於化合物56(67.3mg,77.3μmol)和(3S,10R,16S,E)-16-((S)-1-((2R,3R)-3-(4-(胺基甲基)苯基)環氧乙烷-2-基)乙基)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,45mg,64.5μmol)之DMF和DCM(10mL)溶液中加入HOBt(11.5mg,85.1μmol)和EDC(11.4mg,70.9μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h，然後以H2O(15mL)進行驟冷並繼續攪拌 10min。以DCM(3 x 20mL)萃取水層，將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到64mg Fmoc-保護的二肽-念珠藻素中間物為白色固體(64%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.76(d,J=6.8Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,3 H)；0.86(d,J=7.0Hz,3 H)；0.99(s,12 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.10(s,3 H)；1.30(m,1 H)；1.55(m,2 H)；1.80(m,2 H)；1.90(m,1 H)；2.00(m,1 H)；2.14(m,2 H)；2.26(m,1 H)；2.68(m,2 H)；2.92至3.08(m,4 H)；3.22至3.38(部分遮蔽m,2 H)；3.49(m,1 H)；3.58至3.69(m,4 H)；3.81(s,3 H)；3.82(m,1 H)；3.87(d,J=2.0Hz,1 H)；3.91(m,1 H)；4.18至4.38(m,9 H)；4.68(m,1 H)；4.82(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(廣d,J=16.0Hz,1 H)；6.47(ddd,J=4.7,10.516.0Hz,1 H)；7.05(d,J=8.0Hz,1H)；7.17(dd,J=2.58.0Hz,1 H)；7.20至7.27(m,5 H)；7.29(d,J=2.3Hz,1 H)；7.31(t,J=7.8Hz,2 H)；7.34至7.48(m,7 H)；7.65至7.79(m,9 H)；7.90(d,J=7.8Hz,2 H)；8.10(d,J=8.3Hz,1 H)；8.38(d,J=8.0Hz,1 H)；8.41(t,J=6.5Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=775[M+2H]2+；m/z=1549[M+H]+；m/z=1593[M-H+HCO2H]-；tR=1.78min.
於此中間物(62mg,40.0μmol)之DCM(8mL)溶液中加入哌啶(59.8μL,600.0μmol)。將反應媒劑於RT攪拌4h，真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到49mg的化合物57為白色漆狀物(92%)。
化合物58： (6R,7R,8R,9S,15S,18S)-15-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-6,7,8,9-四羥基-18-異丙基-2,2-二甲基-12,17,20-三側氧基-3,3-二苯基-4-氧雜-11,16,19-三氮雜-3-矽二十四烷-24-酸
於化合物57(23mg,17.3μmol)之DCM(3mL)溶液中加入戊二酸酐(2.22mg,19.1μmol)之DCM(2mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌3h， 部分真空濃縮(降至2mL)並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到17mg的化合物58為白色漆狀物(68%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.80(分裂d,J=6.8Hz,6 H)；0.6(分裂d,J=7.0Hz,6 H)；0.99(s,12 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.32(m,1 H)；1.52至1.60(m,2 H)；1.72至2.00(m,7 H)；2.08(m,1 H)；2.13(m,1 H)；2.20至2.37(m,3 H)；2.69(m,2 H)；2.92至3.07(m,4 H)；3.20(m,1 H)；3.30(遮蔽m,1 H)；3.45(m,1 H)；3.55至3.70(m,4 H)；3.80(s,3 H)；3.83(m,1 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.07至5.00(m,11 H)；5.10(m,1 H)；5.80(dd,J=2.0和15.8Hz,1 H)；6.47(m,1 H)；7.04(d,J=8.6Hz,1H)；7.18(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.28(m,5 H)；7.29(d,J=2.3Hz,1 H)；7.41(m,6 H)；7.68(m,4 H)；8.05(d,J=7.9Hz,1 H；8.23(t,J=6.5Hz,1 H)；8.30至8.60(m,3 H).LCMS(A)：ES m/z=721[M+2H]2+；m/z=1439[M-H]-；m/z=1441[M+H]+；tR=1.52min.
實例20：5-(((S)-1-(((S)-1-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1,5-二側氧基-5-(((2S,3R,4R,5R)-2,3,4,5,6-五羥基己基)-胺基)戊-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-5-側氧戊酸
將化合物57(46mg,31.9μmol)之THF(3mL)溶液於0℃冷卻，然後於0℃逐滴加入1M TBAF之THF溶液(35.1μL,35.1μmol)。將反應媒劑於0℃攪拌2h，以H2O(100μL)進行驟冷，攪拌10min並以DCM(5mL)萃取。將有機層以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮：LCMS分析顯示有殘餘的起始物存在。將粗產物溶於DCM(3mL)，於0℃冷卻溶液，之後於0℃逐滴加入1M TBAF之THF溶液(35.1μL,35.1μmol)。將反應媒劑於0℃攪拌3h，以H 2 O(100μL)進行驟冷，攪拌10min並以DCM(20mL)萃取。將有機層以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O至MeOH)然後藉由逆相快速層析於3g的C18-修飾矽膠上純化(梯度溶離H2O/MeCN)得到17mg的實例20為白色漆狀物(44%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.80(分裂d,J=6.8Hz,6 H)；0.6(分裂d,J=7.0Hz,6 H)；0.99(s,12 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.32(m,1 H)；1.52至1.60(m,2 H)；1.72至2.00(m,7 H)；2.08(m,1 H)；2.13(m,1 H)；2.20至2.37(m,3 H)；2.69(m,2 H)；2.92至3.07(m,4 H)；3.20(m,1 H)；3.30(遮蔽m,1 H)；3.45(m,1 H)；3.55至3.70(m,4 H)；3.80(s,3 H)；3.83(m,1 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.07至5.00(m,11 H)；5.10(m,1 H)；5.80(dd,J=2.0和15.8Hz,1 H)；6.47(m,1 H)；7.04(d,J=8.6Hz,1H)；7.18(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.28(m,5 H)；7.29(d,J=2.3Hz,1 H)；7.41(m,6 H)；7.68(m,4 H)；8.05(d,J=7.9Hz,1 H)；8.23(t,J=6.5Hz,1 H)；8.30至8.60(m,3 H).LCMS(A)：ES m/z=602[M+2H]2+；m/z=1201[M-H]-；m/z=1203[M+H]+；tR=1.1min.
合成實例21至23：戊二醯基-Val-PEG4Lys-C52苯甲胺、戊二醯基-Val-PEG4Lys-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物59：(S)-20-(( 第三丁氧基羰基)胺基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜二十一烷-21-酸
於(S)-6-胺基-2-((第三丁氧基羰基)胺基)己酸(CAS編號 [13734-28-6],73.9mg,300μmol)之THF(300μL)溶液中，於磁力攪拌下，加入2,5-二側氧吡咯啶-1-基2,5,8,11-四氧代十四烷-14-酸酯(CAS編號[622405-78-1],100mg,300μmol)、DIEA(53.3μL,300μmol)和H2O(100μL)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後真空濃縮。將粗媒劑藉由快速層析於5g的C18-嫁接矽膠上純化(梯度溶離H2O/CH3CN)得到81mg的化合物59(58%)。LCMS(B)：ES m/z=463[M-H]-；m/z=465[M+H]+；tR=0.86min.
化合物60：(S)-20-胺基-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜二十一烷-21-酸鹽酸鹽
於化合物59(150.6mg,324.2μmol)中，於磁力攪拌下，加入4M的HCl之1,4-二烷(1mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後真空濃縮。加入EtOA並將混合物真空濃縮得到156mg的化合物60(quant.)。
LCMS(B)：ES m/z=508[M-H]-；m/z=510[M+H]+；tR=1.23min.
化合物61：(S)-20-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜二十一烷-21-酸
於化合物60(130mg,275μmol)之水(0.5mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入NaHCO3(55.6mg,661μmol)，接著加入(S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁酸酯(CAS編號[130878-68-1],144.4mg,330.8μmol)之THF(1.5mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。然後將NaHCO3(30mg)、THF(500μL)、H2O(200μL)和(S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-胺基)-3-甲基丁酸酯(28mg)加到反應媒劑中。3h後，將媒劑真空濃縮，然後以H2O(20mL)及~2-3mL的飽和Na2CO3水溶液稀釋。以EtOAc(20mL)萃取水層二次。將組合的有機層以鹽水(20mL)清洗，以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮。將混合物藉由快速層析於15g的矽膠上純化(溶離劑85：1：0.5 v/v EtOAc/MeOH/H2O)。濃縮後，將粗產物以甲苯稀釋及真空濃縮，得到75.6mg的化合物61(40%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.85(d,J=7.1Hz,3 H)；0.87(d,J=7.1Hz,3 H)；1.21至1.40(m,4 H)；1.50至1.73(m,2 H)； 2.01(m,1 H)；2.27(t,J=6.6Hz,2 H)；2.98(m,2 H)；3.23(s,3 H)；3.41(m,2 H)；3.43至3.52(m,10 H)；3.57(t,J=6.6Hz,2 H)；3.88(m,1 H)；4.01(m,1 H)；4.19至4.34(m,3 H)；7.31(m,2 H)；7.38至7.46(m,3 H)；7.70至7.91(m,6 H)；12.51(m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=684[M-H]-；m/z=686[M+H]+；tR=1.2min.
化合物62：N-((S)-5-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-6-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-6-側氧己基)-2,5,8,11-四氧代十四烷-14-醯胺
於化合物61(70mg,102.1μmol)中，於磁力攪拌和Ar下，加入(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,76.2mg,109.1μmol)之THF(3mL)溶液，接著加入HOBt(17.7mg,131μmol)和EDC(23μL,131μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜。然後將哌啶(32.8μL,327.4μmol)加至媒劑中並持續攪拌4h 30。此時，將媒劑真空濃縮，以DMA稀釋並藉由快速層析於15g的C18-嫁接矽膠上純化(梯度溶離H2O/CH3CN)得到66mg的化合物62(53%)。
LCMS(B)：ES m/z=572；m/z=1187[M-H+HCO2H]-；tR=1.18min.
實例21：(20S,23S)-20-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-23-異丙基-14,22,25-三側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21,24-三氮雜二十九烷-29-酸
於化合物62(66mg,57.7μmol)之DMF(4mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入戊二酸酐(11.85mg,103.8μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h。此時，將媒劑真空濃縮並藉由快速層析於10g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到48.6mg的實例21(80%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.81(m,6 H)；0.85(d,J=7.5Hz,3 H)；0.87(d,J=7.5Hz,3 H)；0.98(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.10(s,3 H)；1.16至1.44(m,5 H)；1.55至1.79(m,7 H)；1.90至2.10(m,3 H)；2.14至2.29(m,3 H)；2.31(t,J=6.7Hz,2 H)；2.66至2.78(m,2 H)；2.85至2.99(m,4 H)；3.05(m,1 H)；3.23(s,3 H)；3.32(部分遮蔽m,1 H)；3.42(m,2 H)；3.44至3.51(m,10 H)；3.57(m,2 H)；3.81(s,3 H)；3.88(d,J=1.6Hz,1 H)；4.04至4.25(m,4 H)；4.35(m,1 H)；4.94(m,1 H)；5.10(m,1 H)；5.80(d,J=15.0Hz,1 H)；6.45(ddd,J=4.0,11.2和15.0Hz,1 H)；7.04(d,J=8.6Hz,1 H)；7.19(dd,J=1.7和8.6Hz,1 H)；7.22(d,J=8.4Hz,2 H)；7.28(d,J=8.4Hz,2 H)；7.30(d,J=1.7Hz,1 H)；7.32(廣m,1 H)；7.75至9.42(廣m,5 H)；12.06(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=629[M+2H]2+；m/z=1255[M-H]-；m/z=1257[M+H]+；tR=1.26min.
實例22：(20S,23S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基20-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-23-異丙基-14,22,25-三側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21,24-三氮雜二十九烷-29-酸酯
將甲苯(10mL)加至實例21(46mg,36.6μmol)中並真空濃縮，接著以THF(5mL)、DCM(2mL)和DMF(200μL)稀釋。然後加入DSC(11.5mg,43.9μmol)，接著加入DIEA(18.5μL,109.7μmol)。將反應媒劑於RT攪拌4h。此時，加入MeTHF(7mL)和H2O(3mL)並以MeTHF(5mL)萃取水層二次。將組合的有機層以H2O(3mL)清洗，以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮。將粗媒劑藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到33.3mg的實例22(67%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.6Hz,6 H)；0.83(d,J=7.1Hz,3 H)；0.84(d,J=7.1Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=6.9Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.20至1.43(m,5 H)；1.50至1.69(m,4 H)；1.76至1.87(m,3 H)；1.98(m,1 H)；2.21至2.35(m,5 H)；2.62至2.73(m,4 H)；2.81(s,4 H)；2.94至3.04(m,5 H)；3.23(s,3 H)；3.32 (部分遮蔽m,1 H)；3.42(m,2 H)；3.44至3.51(m,10 H)；3.58(t,J=6.4Hz,2 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=1.1Hz,1 H)；4.17(dd,J=7.3和7.8Hz,1 H)；4.21至4.31(m,4 H)；4.90(m,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.1Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.5,11.5和15.1Hz,1 H)；7.05(d,J=8.5Hz,1 H)；7.17(dd,J=1.6和8.5Hz,1 H)；7.20至7.25(m,5 H)；7.28(d,J=1.6Hz,1 H)；7.79(t,J=5.7Hz,1 H)；7.91(d,J=8.5Hz,1 H)；7.95(d,J=8.3Hz,1 H)；8.37(m,2 H).LCMS(C)：ES m/z=677.5[M+2H]2+；m/z=1354[M+H]+；m/z=1399[M-H+HCO2H]-；tR=4.41min.
實例23：hu2H11_R35-74-Ex22
使用前述之通用方法來製備實例23。將44.64mg的hu2H11_R35-74與209.2μL的10mM實例22之DMA(7eq.)溶液反應3h 30。於Superdex G25上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP純化及於Amicon Ultra-15上濃縮後，得到36.6mg的實例23為濃度1.83mg/mL，3.6的DAR(HRMS)，98.8%單體純度和82%整體產率之無色清澈溶液。游離-藥物量係在1%的閥值以上：將ADC於Amicon Ultra-15上濃縮，於Sephadex G25上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP純化並於0.22μm PVDF過濾器上過濾，得到32.6mg的實例23為濃度1.63mg/mL，具有3.3的DAR(HRMS)，98.3%單體純度和73%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=149411(裸mAb)；m/z=150649(D1)；m/z=151889(D2)；m/z=153129(D3)；m/z=154369(D4)；m/z=155608(D5)；m/z=156850(D6)；m/z=158091(D7)；m/z=159331(D8)；m/z=160583(D9).
合成實例24至26：戊二醯基-Val-PEG24Lys-C52苯甲胺、戊二醯基-Val-PEG24Lys-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物63：(S)-2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-6-((第三丁氧基羰基)胺基)己酸
於H-Lys(Boc)-OH(CAS編號[2418-95-3],310mg,1.26mmol)和NaHCO3(105mg,1.25mmol)溶於水(5mL)和THF(5mL)之溶液中，於磁力攪拌下，逐滴加入(S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁酸酯(CAS編號[68858-20-8],310mg,1.15mmol)之THF(15mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌3h。此時，將反應媒劑真空濃縮，然後以水(200mL)稀釋，以適量的5N HCl水溶液酸化並以DCM(2 x 200mL)萃取。將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾並真空濃縮，得到510mg的化合物63(53%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.85(d,J=6.8Hz,3 H)；0.87(d,J=6.8Hz,3 H)；1.20至1.39(m,4 H)；1.34(s,9 H)；1.48至1.73(m,2 H)；1.99(m,1 H)；2.86(m,2 H)；3.89(dd,J=7.7和8.4Hz,1 H)；4.08(m,1 H)；4.17至4.32(m,3 H)；6.72(廣m,1 H)；7.32(m,2 H)；7.38至7.46(m,3 H)；7.74(m,2 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H)；8.00(廣m,1 H)；12.54(廣s,1 H).LCMS(A)：ES m/z=344；m/z=468；m/z=566[M-H]-；m/z=568[M+H]+；tR=1.41min.
化合物64：(S)-2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-6-胺基己酸鹽酸鹽
於化合物63(340mg,599μmol)中加入4M HCl之1,4-二烷溶液。將反應媒劑於RT攪拌1h烷溶液。此時，將反應媒劑真空濃縮，接著加入Et2O及過濾。將得到的固體藉由快速層析於15g的矽膠上純化(溶離劑12：3：0.5 v/v/v DCM/MeOH/NH4OH)得到190mg的化合物64(63%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.83(d,J=6.6Hz,3 H)；0.85(d,J=6.6Hz,3 H)；1.21至1.70(m,6 H)；2.04(m,1 H)；2.71(t,J=7.1Hz,2 H)；3.84(dd,J=6.7和8.7Hz,1 H)；3.91(m,1 H)；4.18至4.35(m,3 H)；7.22(廣m,3 H)；7.33(m,2 H)；7.42(t,J=7.6Hz,2 H)；7.54(d,J=9.0Hz,1 H)；7.69(廣m,1 H)；7.74(m,2 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H).LCMS(A)：ES m/z=244；m/z=466[M-H]-；m/z=468 [M+H]+；tR=0.81min.
化合物65：(S)-80-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-74-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75-氮雜八十一烷-81-酸
於化合物64(130mg,258.0μmol)之THF(20mL)溶液中加入碳酸氫鈉(50mg,589.2μmol)之H2O溶液(8mL)和MEO-DPEG(24)-NHS(CAS編號[756525-94-7],400mg,329.4μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，部分真空濃縮然後以H2O(10mL)稀釋，以IR-120(H)Amberlite樹脂(CAS編號[78922-04-0])酸化至pH 3，過濾，真空濃縮並藉由連續三個快速層析於40g、25g和12g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到214mg的化合物65為白色漆狀物(53%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.86(d,J=7.0Hz,3 H)；0.89(d,J=7.0Hz,3 H)；1.22至1.40(m,4 H)；1.58(m,1 H)；1.67(m,1 H)；1.99(m,1 H)；2.28(t,J=6.6Hz,2 H)；2,99(m,2 H)；3.23(s,3 H)；3.40至3.70(m,92 H)；3.56(t,J=6.6Hz,2 H)；3.90(m,1 H)；4.08(廣m,1 H)；4.19至4.31(m,3 H)；7.31(廣t,J=7.8Hz,2 H)；7.41(廣t,J=7.8Hz,3 H)；7.73(t,J=7.8Hz,2 H)；7.76(m,1 H)；7.89(d,J=7.8Hz,2 H)；8.00(m,1 H)；12.53(m,1 H).LCMS(D)：ES m/z=794[M+H+Na]2+；m/z=1567[M+H]+；tR=2.9min.
化合物66：N-((S)-5-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-6-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)-胺基)-6-側氧己基)-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜七十四-74-醯胺
於(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,71mg,101.7μmol)之DMF(5mL)溶液 中加入化合物65(214mg,136.6μmol)之DMF溶液(5mL)、HOBt(22mg,156.3μmol)和EDC(27μL,152.5μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h，之後加入哌啶(91μL,915.3μmol)。於RT繼續攪拌1h 30，然後將反應媒劑真空濃縮並藉由連續二個快速層析於25g和12g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到58mg的化合物66為白色漆狀物(28%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.76(d,J=7.0Hz,3 H)；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.88(d,J=7.0Hz,3 H)；0.99(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.25至1.41(m,5 H)；1.51至1.70(m,4 H)；1.80(m,1 H)；1.93(m,1 H)；2.25(m,1 H)；2.28(t,J=6.7Hz,2 H)；2.55(廣m,2 H)；2.68(m,2 H)；2.99(m,5 H)；3.23(s,3 H)；3.32(遮蔽m,1 H)；3.40至3.55(m,92 H)；3.58(t,J=6.7Hz,2 H)；3.80(s,3 H)；3.88(d,J=2.3Hz,1 H)；4.20至4.35(m,4 H)；4.91(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.80(dd,J=2.0和15.8Hz,1 H)；6.46(ddd,J=4.7,10.5和15.8Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.4 et 8.6Hz,1 H)；7.22(m,5 H)；7.29(d,J=2.4Hz,1 H)；7.79(t,J=6.7Hz,1 H)；8.00(d,J=8.8Hz,1 H)；8.36(d,J=8.0Hz,1 H)；8.47(t,J=6.2Hz,1 H).LCMS(D)：ES m/z=1013[M+2H]2+；m/z=2025[M+H]+；tR=2.64/2.62min(85/15異構物混合物).
實例24：(80S,83S)-80-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-83-異丙基-74,82,85-三側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81,84-三氮雜八十九烷-89-酸
於化合物66(58mg,28.7μmol)之DCM(7mL)溶液中加入戊二酸酐(5.85mg,48.7μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到35mg的實例24為白色漆狀物(57%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,3 H)；0.84(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d, J=7.1Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.18至1.41(m,5 H)；1.50至1.75(m,6 H)；1.80(m,1 H)；1.98(m,1 H)；2.15至2.27(m,5 H)；2.30(t,J=6.7Hz,2 H)；2.69(m,2 H)；2.98(m,5 H)；3.23(s,3 H)；3.32(遮蔽m,1 H)；3.40至3.65(m,94 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2,3Hz,1 H)；4.14(m,1 H)；4.20至4.33(m,4 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.8Hz,1 H)；6.47(ddd,J=4.7,10.5和15.8Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.24(m,5 H)；7.29(d,J=2.4Hz,1 H)；7.80(t,J=6.0Hz,1 H)；7.86(d,J=8.8Hz,1 H)；7.92(d,J=8.0Hz,1 H)；8.37(m,2 H)；12.10(廣m,1 H).LCMS(D)：ES m/z=1069.5[M+2H]2+；m/z=2138[M+H]+；tR=2.96/2.93min(85/15異構物混合物).
實例25：(80S,83S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基80-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環-十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-83-異丙基-74,82,85-三側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81,84-三氮雜八十九烷-89-酸酯
於實例24(35mg,16.4μmol)之THF(3mL)溶液中加入DSC(4.28mg,16.4μmol)和DIEA(2.7μL,16.4μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到12.0mg的實例25為白色漆狀物(33%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,3 H)；0.84(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.15至1.40(m,5 H)；1.50至1.71(m,4 H)；1.75至1.86(m,3 H)；1.97(m,1 H)；2.18至2.32(m,5 H)；2.67(m,4 H)；2.80(s,4 H)；2.98(m,5 H)；3.22(s,3 H)；3.32(遮蔽m,1 H)；3.40至3.77(m,94 H)；3.80(s,3 H)；3.88(d,J=2.3Hz,1 H)；4.16(m,1 H)；4.20至4.32(m,4 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.78(dd,J=2.0和15.8Hz,1 H)；6.47(ddd,J=4.7,10.5和15.8Hz, 1 H)；7,05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.24(m,5 H)；7.29(d,J=2.4Hz,1 H)；7.79(t,J=6.0Hz,1 H)；7.90(d,J=8.8Hz,1 H)；7.94(d,J=8.0Hz,1 H)；8.36(m,2 H).LCMS(D)：ES m/z=746；m/z=2235[M+H]+；tR=3.08/3.06min(89/11異構物混合物).
實例26：hu2H11_R35-74-Ex25
使用前述之通用方法來製備實例26。將55.8mg的hu2H11_R35-74與261.6μL的10mM實例25之DMA(7eq.)溶液反應3h 15，然後加入131μL的10mM實例25之DMA(3.5eq.)反應5h 30。於4℃儲藏至隔夜，於Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+20% NMP純化，於Amicon Ultra-15上濃縮，於Sephadex G25上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP緩衝液交換及於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到33.35mg的實例26為濃度2.9mg/mL，具有3.9的DAR(HRMS)，100%單體純度和60%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=151487(D1)；m/z=153615(D2)；m/z=155740(D3)；m/z=157863(D4)；m/z=159981(D5)；m/z=162112(D6)；m/z=164240(D7)；m/z=166356(D8).
合成實例27至29：戊二醯基-Val-PEG24Lys-氮雜-crypto苯甲胺、戊二醯基-Val-PEG24Lys-氮雜-crypto苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物67：N-((S)-5-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-6-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,7S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-6,6,7-三甲基-3-新戊基-2,5,9,12-四側氧基-1-氧雜-4,8,11-三氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-6-側氧己基)-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜七十四-74-醯胺
於(3S,7S,10R,16S,E)-16-((S)-1-((2R,3R)-3-(4-(胺基甲基)苯基)-環氧乙烷-2-基)乙基)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-6,6,7-三甲基-3-新戊基-1-氧雜-4,8,11-三氮雜環-十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其可如中所述PCT/EP2016/076603中所述從(3S)-3-胺基-2,2-二甲基丁酸甲酯開始來合成，[MFCD09256689],75mg,103.4μmol)之DMF(5mL)溶液中加入化合物65(211mg,134.7μmol)之DMF(5mL)溶液、HOBt(21mg,155.4μmol)和EDC(20μL123.0μmol)。將反應媒劑於RT攪拌4h，之後加入哌啶(95μL,961.9μmol)；於RT繼續攪拌2h，然後將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於25g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到132mg的化合物67為無色油狀物(62%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.76(d,J=7.0Hz,3 H)；0.87(m,15 H)；1.00(s,3 H)；1.03(d,J=7.1Hz,3 H)；1.15至1.40(m,5 H)；1.18(s,3 H)；1.46至2.00(m,8 H)；2.25(m,1 H)；2.28(t,J=6.7Hz,2 H)；2.60(m,1 H)；2.69(dd,J=11.2和14,5Hz,1 H)；2.91(dd,J=2.3和7；5Hz,1 H)；2.92至3.04(m,4 H)；3.23(s,3 H)；3.34至3.77(m,95 H)；3.80(s,3 H)；3.88(d,J=2.3Hz,1 H)；4.08(m,2 H)；4.20至4.34(m,3 H)；5.04(m,1 H)；5.78(dd,J=2.0和15,8Hz,1 H)；6.44(ddd,J=4.7,10.5和15.8Hz,1 H)；7.02(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17至7.25(m,5 H)；7.32(d,J=2.4Hz,1 H)；7.78(t,J=6.0Hz,1 H)；7.85(d,J=8.0Hz,1 H)；7.92(d,J=7.0Hz,1 H)；8.00(d,J=8.8Hz,1 H)；8.40(t,J=7.5Hz,1 H)；8.46(t,J=6.0Hz,1 H).LCMS(D)：ES m/z=2051[M+H]+；tR=2.57/2.55min(異構物混合物95/5)。
實例27：(80S,83S)-80-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,7S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-6,6,7-三甲基-3-新戊基-2,5,9,12-四側氧基-1-氧雜 -4,8,11-三氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-83-異丙基-74,82,85-三側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81,84-三氮雜八十九烷-89-酸
於化合物67(132mg,64.3μmol)之DCM(10mL)溶液中加入戊二酸酐(9mg,78.9μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，真空濃縮並藉由二個連續快速層析於4g和12g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到71mg的實例27為白色漆狀物(51%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.80至0.90(m,18 H)；1.00(s,3 H)；1.03(d,J=7.1Hz,3 H)；1.15至1.42(m,5 H)；1.18(s,3 H)；1.51至1.74(m,4 H)；1.80(m,1 H)；1.98(m,2 H)；2.15至2.32(m,7 H)；2.60(m,1 H)；2.70(dd,J=11.2和14.5Hz,1 H)；2.91(dd,J=2.3和7.5Hz,1 H)；2.95(dd,J=3.4和14.5Hz,1 H)；3.00(m,2 H)；3.24(s,3 H)；3.40至3.67(m,95 H)；3,80(s,3 H)；3.90(d,J=2.3Hz,1 H)；4.00至4.34(m,6 H)；5.04(m,1 H)；5.80(dd,J=2.0和15.8Hz,1 H)；6.44(ddd,J=4.7,10.5和15.8Hz,1 H)；7.02(d,J=8.6Hz,1 H)；7,17至7,25(m,5 H)；7.32(d,J=2.4Hz,1 H)；7.80(t,J=6.0Hz,1 H)；7.86(d,J=8.6Hz,2 H)；7.92(t,J=6.5Hz,2 H)；8.37(t,J=6.0Hz,1 H)；8.41(t,J=7.5Hz,1 H)；12,00(m,1 H).LCMS(D)：ES m/z=722；m/z=2165[M+H]+；tR=2.95/2.92min(異構物混合物95/5).
實例28：2,5-二側氧吡咯啶-1-基(80S,83S)-80-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,7S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-6,6,7-三甲基-3-新戊基-2,5,9,12-四側氧基-1-氧雜-4,8,11-三氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-83-異丙基-74,82,85-三側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81,84-三氮雜八十九烷-89-酸酯
於實例27(33mg,15.2μmol)之THF(3mL)溶液中加入DSC(4mg,15.6μmol)和DIEA(2.55μL,15.4μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，然後加入DSC(1mg,3.9μmol)和DIEA(1μL,6.0μmol)。將反應媒劑於 RT攪拌2h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH/MeCN)得到11mg的實例28為白色漆狀物(32%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.80至0.90(m,18 H)；1.00(s,3 H)；1.03(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12至1.42(m,5 H)；1.19(s,3 H)；1.55(m,1 H)；1.65(m,1 H)；1.82(m,3 H)；1.96(m,2 H)；2.28(m,3 H)；2.67(m,4 H)；2.80(s,4 H)；2.91(dd,J=2.3和Hz,1 H)；2.95(dd,J=3.4和14.5Hz,1 H)；3.00(m,2 H)；3.23(s,3 H)；3.35至3.67(m,95 H)；3.80(s,3 H)；3.90(d,J=2.3Hz,1 H)；4.03至4.32(m,6 H)；5.03(m,1 H)；5.90(dd,J=2.0和15.8Hz,1 H)；6.44(ddd,J=4.7,10.5和15.8Hz,1 H)；7.03(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17至7.25(m,5 H)；7.32(d,J=2.4Hz,1 H)；7.79(t,J=6.0Hz,1 H)；7.85(d,J=8.7Hz,1 H)；7.90(d,J=8.7Hz,1 H)；7.93(m,2 H)；8.35(t,J=6.5Hz,1 H)；8.40(d,J=7.1Hz,1 H).
實例29：hu2H11_R35-74-Ex28
使用前述之通用方法來製備實例29。將44.64mg的hu2H11_R35-74與210μL的10mM實例28之DMA(7eq.)溶液反應2h，然後連續加入210μL的10mM實例28之DMA(7eq.)溶液反應2h30及90μL的10mM實例28之DMA(3eq.)溶液反應2h。於4℃儲存至隔夜，於Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+20% NMP純化，於Amicon Ultra-15上濃縮，於Sephadex G25上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP緩衝液交換及於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到30.1mg的實例29為濃度2.51mg/mL，具有4的DAR(HRMS)，98.4%單體純度和67%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=151502(D1)；m/z=153649(D2)；m/z=155798(D3)；m/z=157939(D4)；m/z=160100(D5)；m/z=162262(D6).
合成實例30至32：戊二醯基-Val-葡萄糖醛酸Lys-C52苯甲胺、戊二醯基-Val-葡萄糖醛酸Lys-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物68：(S)-2-((S)-2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)胺基)-3-甲基丁醯胺基)-6-((2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-羧醯胺基)己酸
於圓底燒瓶中，磁力攪拌下導入1-O-甲基-β-D-葡萄糖醛酸鈉鹽(CAS編號[58189-74-5],100mg,434μmol)，接著加入水(5mL)和適量的Amberlite(CAS編號[9037-24-5])達到pH 2，過濾媒劑。
於圓底燒瓶中，磁力攪拌下將NaHCO3(43mg,511μmol)之水溶液(5mL)加到化合物64(50mg,99μmol)之THF(4mL)溶液中；將反應媒劑於RT攪拌5min。然後，將上述的葡萄醣醛酸溶液加至反應媒劑中，接著加入4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三-2-基)-4-甲基嗎福啉鹽酸鹽N-水合物(CAS編號[3945-69-5],67mg,242μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後真空濃縮。將粗媒劑藉由快速層析於5g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到23mg的化合物68(35%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.84(d,J=6.7Hz,3 H)；0.86(d,J=6.7Hz,3 H)；1.13至1.42(m,4 H)；1.52至1.72(m,2 H)；2.05(m,1 H)；2.96至3.08(m,2 H)；3.14(m,1 H)；3.30(部分遮蔽m,1 H)；3.38(s,3 H)；3.53(m,1 H)；3.78至3.97(m,2 H)；4.09(dd,J=2.3和7.8Hz,1 H)；4.19至4.34(m,3 H)；5.01至5.08(廣m,1 H)；5.13(廣m,1 H)；5.27(m,1 H)；7.33(m,2 H)；7.42(t,J=7.6Hz,2 H)；7.52至7.62(廣m,2 H)；7.75(m,2 H)；7.89(d,J=7.6Hz,2 H)；7.93(廣m,1 H)；12.00(m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=656[M-H]-；m/z=658[M+H]+；tR=1.05min.
化合物69：(2S,3S,4S,5R,6R)-N-((S)-5-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-6-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)-環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-6-側氧己基)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-甲醯胺
於(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於 WO2011001052中，化合物77,90mg,129μmol)之溶液中，於磁力攪拌下，加入化合物68(135mg,205μmol)之DMF(5mL)溶液，接著加入HOBt(30mg,222μmol)和EDC(36μL,203μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h。此時，加入DMA(1mL)並繼續攪拌至隔夜。然後加入EDC(20μL)並將反應媒劑再攪拌2小時。然後將哌啶(12.9μL,129μmol)加到媒劑中。攪拌1h30後，將反應媒劑真空濃縮並藉由3個連續的快速層析於矽膠上純化(等位溶離40：5：0.5 v/v/v DCM/MeOH/H2O和12：3：0.5 v/v/v DCM/MeOH/NH4OH)得到47mg的化合物69(33%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.77至0.81(m,9 H)；0.88(d,J=6.6Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=6.6Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.20至1.71(m,9 H)；1.80(m,1 H)；1.93(m,1 H)；2.28(m,1 H)；2.62至2.73(m,2 H)；2.93至3.14(m,9 H)；3.28至3.36(部分遮蔽m,2 H)；3.39(s,3 H)；3.53(d,J=9.5Hz,1 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=1.7Hz,1 H)；4.09(m,1 H)；4.19至4.36(m,4 H)；4.91(m,1 H)；5.00至5.15(m,4 H)；5.79(d,J=15.9Hz,1 H)；6.48(m,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.1和8.6Hz,1 H)；7.20至7.25(m,5 H)；7.28(d,J=2.1Hz,1 H)；7.92(廣t,J=5.9Hz,1 H)；8.02(廣m,1 H)；8.35(d,J=7.8Hz,1 H)；8.46(廣t,J=6.2Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=558[M+2H]2+；m/z=1113[M-H]-；m/z=1115[M+H]+；m/z=1159[M-H+HCO2H]-；tR=0.9min.
實例30：5-(((S)-1-(((S)-1-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1-側氧基-6-((2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-羧醯胺基)己-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-5-側氧戊酸
於化合物69(47mg,42.1μmol)之DMF(4mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入戊二酸酐(8.5mg,74.5μmol)；將反應媒劑於RT攪拌2h。此時，將粗媒劑真空濃縮並藉由2個連續的快速層析於矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O和DCM/MeOH/NH4OH)得到17mg的實例30(33%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.81(splitd,J=6.4Hz,6 H)；0.84(d,J=6.6Hz,3 H)；0.86(d,J=6.6Hz,3 H)；0.98(s,3 H)；1.04(d,J=6.6Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.17至2.32(廣m,18 H)；2.66至2.74(m,2 H)；2.91至3.03(m,5 H)；3.10(m大，1 H)；3.18(t,J=8.8Hz,1 H)；3.28至3.36(部分遮蔽m,2 H)；3.37(s,3 H)；3.60(m,1 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=1.6Hz,1 H)；4.07(m,2 H)；4.14至4.26(m,3 H)；4.31(m,1 H)；4.92(m,1 H)；5.06至5.13(m,2 H)；5.35(m,2 H)；5.80(d,J=15.3Hz,1 H)；6.45(ddd,J=3.6,11.1和15.3Hz,1 H)；7.05(d,J=8.5Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.1和8.5Hz,1 H)；7.22(d,J=8.4Hz,2 H)；7.25(d,J=8.4Hz,2 H)；7.29(d,J=2.1Hz,1 H)；7.31(m,1 H)；7.77至8.81(m,5 H).LCMS(A)：ES m/z=1227[M-H]-；m/z=1229[M+H]+；m/z=615；tR=1.16min.
實例31：2,5-二側氧吡咯啶-1-基5-(((S)-1-(((S)-1-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺基)-1-側氧基-6-((2S,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-羧醯胺基)己-2-基)胺基)-3-甲基-1-側氧丁-2-基)胺基)-5-側氧戊酸酯
於實例30(14mg,11.4μmol)之DMF(3mL)溶液中，於磁力攪拌下，加入DSC(4.2mg,15.6μmol)和DIEA(6μL,34.5μmol)。將反應媒劑於RT攪拌4h。此時，將媒劑以MeTHF(10mL)稀釋及以H2O(5mL)清洗。以MeTHF(10mL)萃取水層，將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到3.5mg的實例31(23%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.6Hz,6 H)；0.82(d,J=7.1Hz,3 H)；0.84(d,J=7.1Hz,3 H)；0.99(s,3 H)；1.04(d,J=6.6Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.17至1.70(m,9 H)；1.77至1.87(m,3 H)；1.98(m,1 H)；2.23至2.32(m,3 H)；2.65至2.70(m,4 H)；2.81(s,4 H)；2.93至3.07(m,6 H)；3.15(m,1 H)；3.28至3.38(部分遮蔽m,2 H)；3.40(s,3 H)；3.53(d,J=9.6Hz,1 H)；3.81(s,3 H)；3.87(d,J=1.4 Hz,1 H)；4.09(d,J=7.7Hz,1 H)；4.17(dd,J=6.9和8.2Hz,1 H)；4.20至4.33(m,4 H)；4.90(dd,J=3.4和9.5Hz,1 H)；5.04(m,2 H)；5.10(m,1 H)；5.14(d,J=5.2Hz,1 H)；5.79(dd,J=0.8和15.3Hz,1 H)；6.47(m,1 H)；7.05(d,J=8.8Hz,1 H)；7.17(dd,J=1.6和8.8Hz,1 H)；7.20至7.25(m,5 H)；7.28(d,J=1.6Hz,1 H)；7.86至7.99(m,3 H)；8.37(m,2 H).LCMS(A)：ES m/z=1370[M-H+HCO2H]-；ES m/z=1326[M+H]+；m/z=663.5；tR=1.21min.
實例32：hu2H11_R35-74-Ex31
使用前述之通用方法來製備實例32。將27.9mg的hu2H11_R35-74與107μL的10.5mM實例31之DMA(6eq.)溶液反應2h 30，然後加入107μL的10.5mM實例31之DMA(6eq.)溶液反應4h 30。於Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+10% NMP純化，於Amicon Ultra-15上濃縮，以緩衝液B pH 6.5最終濃度5%的NMP稀釋及於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到16.7mg的實例32為濃度2.23mg/mL，具有3之DAR(HRMS)，100%單體純度和60%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=149407(裸mAb)；m/z=150619(D1)；m/z=151831(D2)；m/z=153044(D3)；m/z=154256(D4)；m/z=155468(D5)；m/z=156685(D6)；m/z=157899(D7)；m/z=159014(D8).
合成實例33至35：戊二醯基-Val-磺酸基PEG4Lys-C52苯甲胺、戊二醯基-Val-磺酸基PEG4Lys-C52苯甲胺之NHS酯和對應的ADC
化合物70：4,7,10,13-四氧雜十六烷-1,16-二酸二第三丁酯
於三乙二醇(5mL,37.5mmol)之THF(15mL)溶液中加入鈉(18mg,783.0μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，然後於5min內逐滴加入丙烯酸 第三丁酯(14mL,95.58mmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，然後以鹽水(300mL)進行驟冷並以EtOAc(300mL)萃取二次。將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於200g的矽膠上純化(梯度溶離庚烷/EtOAc)得到8.05g的化合物70為無色油狀物(53%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.40(s,18 H)；2.40(t,J=6.5Hz,4 H)；3.48(m,12 H)；3.58(t,J=6.5Hz,4 H).LCMS(A)：ES m/z=407[M+H]+；m/z=429[M+Na]+；tR=1.32min.
化合物71：4,7,10,13-四氧雜十六烷-1,16-二酸
於化合物70(8.05g,19.8mmmol)中加入甲酸(40mL,1.04mol)。將反應媒劑於RT攪拌1d，真空濃縮並與EtOAc(20mL)共蒸發，得到5.9g的化合物71為無色油狀物(quant.)。
RMN 1H(300MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：2.44(t,J=6.5Hz,4 H)；3.48(s,8 H)；3.50(s,4 H)；3.59(d,J=6.5Hz,4 H)；12.25(廣m,2 H)。
化合物72：3-側氧基-1-苯基-2,6,9,12,15-五氧雜十八烷-18-酸
於化合物71(5.9g,20.05mmol)之DMF(50mL)溶液中加入DIEA(3.6mL,20.67mmol)並於10min內逐滴加入苯甲基溴(2.43mL,20.05mmol)之DMF(50mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌20h，以1N HCl(500mL)進行驟冷並以EtOAc(200mL)萃取二次。將組合的有機層以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮及藉由2個連續的快速層析於400g和100g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到2.7g的化合物72為淡綠色油狀物(35%)。
RMN 1H(300MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：2.42(m,2 H)；2.60(t,J=6.5Hz,2 H)；3.47(s,6 H)；3.49(s,6 H)；3.59(m,2 H)；3.66(d,J=6.5Hz,2 H)；5.10(s,2 H)；7.29至7.41(m,5 H).
化合物73：2-胺基乙磺酸鈉
於牛磺酸(2g,15.98mmol)之H2O(30mL)溶液中加入碳酸氫鈉(1.34g,15.98mmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，然後真空濃縮。將粗產物溶於H2O(100mL)並凍乾，得到2.5g的化合物73為白色粉末(quant.)。
IR光譜為KBr壓片；主吸收帶係以cm-1(reciprocal centimeter)表示：1458；1344；1212；1184；1046；1037；742；737；598；576；533 & 523。
化合物74：3,18-二側氧基-1-苯基-2,6,9,12,15-五氧雜-19-氮雜二十一烷-21-磺酸鈉
於化合物72(1g,2.69mmol)之DMF(40mL)溶液中加入NHS(367mg,3.13mmol)和EDC(565μL,3.12mmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，然後加入化合物73(1.9g,12.91mmol)之H2O(20mL)溶液和碳酸氫鈉(219mg,2.61mmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，然後以Amberlite IR-120(H)(CAS編號[78922-04-0]酸化至pH 3，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於150g的矽膠上純化(DCM/MeOH/H2O)得到824mg的化合物74為無色固體(61%)。
LCMS(A)：ES m/z=490[M-H]-；m/z=492[M+H]+；tR=1.1min.
化合物75：1-羧基-15-側氧基-3,6,9,12-四氧雜-16-氮雜十八烷-18-磺酸鈉
將化合物74(820mg,1.60mmol)溶於8：2 MeOH/H2O(30mL)之溶液以0.22μm過濾並於10% Pd/C管匣上使用H-cube系統於20℃氫解。將反應媒劑真空濃縮，得到530mg的化合物75為黃色膠狀物(78%)。
RMN 1H(300MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：2.27(t,J=6.6Hz,2 H)；2.40(t,J=6.6Hz,2 H)；2.52(部分遮蔽m,2 H)；3.28(部分遮蔽m,2 H)；3.49(m,12 H)；3.59(m,4 H)；7.72(廣t,J=6.4Hz,1 H)；12.08(廣m,1 H).
化合物76：(5S,8S)-8-羧基-1-(9H-茀-9-基)-5-異丙基-3,6,14,29-四側氧基-2,17,20,23,26-五氧雜-4,7,13,30-四氮雜三十二-32-磺酸鈉
於化合物75(300mg,708.5μmol)之DMF(15mL)溶液中加入NHS(98mg,851.5μmol)和EDC(150μL,855.1μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，然後加入化合物64(416mg,825.4μmol)之DMF(15mL)溶液及碳酸氫鈉(180mg,2.13mmol)之H2O(10mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌1h，以Amberlit IR-120(H)(CAS編號[78922-04-0])酸化至pH 3，過濾，以DMF(5mL)清洗，真空濃縮並藉由快速層析於100g的矽膠上純 化(梯度溶離DCM/MeOH/乙酸)得到447mg的無色漆狀物。將此漆狀物溶於2：1 THF/H2O(120mL)，以0.1N HCl(約4mL)酸化至pH 3.3並真空濃縮，得到354mg的化合物76為白色半透明固體(57%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.86(d,J=7.0Hz,3 H)；0.89(d,J=7.0Hz,3 H)；1.20至1.41(m,4 H)；1.50至1.74(m,2 H)；1.98(m,1 H)；2.26(t,J=6.8Hz,2 H)；2.28(t,J=6.8Hz,2 H)；2.52(遮蔽m,2 H)；3.00(m,2 H)；3.28(部分遮蔽m,2 H)；3.45(m,12 H)；3.58(t,J=6.8Hz,4 H)；3.91(dd,J=7.0和9.2Hz,1 H)；4.14(m,1 H)；4.19至4.31(m,3 H)；7.32(m,2 H)；7,37(d,J=9.2Hz,1 H)；7.41(dt,J=1.0和7.8Hz,2 H)；7.75(m,3 H)；7.80(t,J=6.0Hz,1 H)；7.89(d,J=7.8Hz,2 H)；8.07(d,J=8.0Hz,1 H)；12.49(m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=849[M-H]-；m/z=851[M+H]+；tR=1.44min.
化合物77：(25S,28S)-28-胺基-25-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環-十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-29-甲基-4,19,27-三側氧基-7,10,13,16-四氧雜-3,20,26-三氮雜三十烷-1-磺酸鈉
於(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,106mg,151.8μmol)之DMF(5mL)溶液中加入化合物76(225mg,257.7μmol)之DMF(5mL)溶液、HOBt(30mg,213.1μmol)和EDC(40μL,226.0μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，然後加入哌啶(134μL,1.36mmol)並繼續攪拌2h。將反應媒劑真空濃縮並藉由2個連續的快速層析於50g和4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到73mg的化合物77為白色固體(36%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.91(d,J=7.0Hz,3 H)；0.93(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.18至1.45(m,5 H)；1.51至1.72(m,4 H)；1.80(m,1 H)；2.05(m,1 H)；2.23至2.35(m,5 H)；2.56(m,2 H)； 2.68(m,2 H)；2.95至3.04(m,5 H)；3.32(m,3 H)；3.48(m,12 H)；3.57(t,J=6.7Hz,2 H)；3.59(t,J=6.7Hz,2 H)；3.66(d,J=6.0Hz,1 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.20至4.36(m,4 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；5.12(m,1 H)；5.80(dd,J=2.0和15.2Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.3和15.2Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.24(m,5 H)；7.29(d,J=2.4Hz,1 H)；7.76(t,J=6.0Hz,1 H)；7.86(t,J=8.0Hz,1 H)；7.93(廣m,3 H)；8.38(d,J=8.0Hz,1 H)；8.49(d,J=8.0Hz,1 H)；8.59(t,J=6.0Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=655[M+2H]2+；m/z=1306[M-H]-；m/z=1308[M+H]+；tR=1.07min.
實例33：(25S,28S)-33-羧基-25-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環-十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-28-異丙基-4,19,27,30-四側氧基-7,10,13,16-四氧雜-3,20,26,29-四氮雜三十烷-1-磺酸鈉
於化合物77(73mg,54.9μmol)之DMF溶液中加入戊二酸酐(11mg,96.4μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(DCM/MeOH/H2O)得到40mg的實例33為白色漆狀物(50%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.81(s,9 H)；1.04(d,J=7.0Hz,3 H)；1.38(s,9 H)；1.50(dd,J=3.0和14.5Hz,1 H)；1.58(dd,J=9.1和14.5Hz,1 H)；2.38至2.48(部分遮蔽m,3 H)；4.04(m,1 H)；4.19(m,2 H)；4.30(m,1 H)；4.49(s,2 H)；4.91(m,1 H)；5.80(d,J=16.0Hz,1 H)；6.17(dd,J=8.4和16.0Hz,1 H)；6.43(d,J=16.0Hz,1 H)；6.70(m,1 H)；7.23至7.44(m,8 H)；7.68(m,2 H)；7.79(d,J=8.3Hz,1 H)；7.88(d,J=7.8Hz,2 H).LCMS(A)：ES m/z=712[M+2H]2+；m/z=1420[M-H]-；m/z=1422[M+H]+；tR=1.57min.
實例34：(25S,28S)-25-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜 -8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-34-((2,5-二側氧吡咯啶-1-基)氧基)-28-異丙基-4,19,27,30,34-五側氧基-7,10,13,16-四氧雜-3,20,26,29-四氮雜三十四烷-1-磺酸鈉
於實例33(3.57mg,2.47μmol)之DMA(93μL)溶液中加入NHS(27.2μL,2.72μmol)和EDC(111μL,2.22μmol)。將反應媒劑於RT攪拌48h：LCMS分析顯示預期的實例34存有95%其中有5%的殘餘實例33。將此溶液直接用於接合及製備實例35。
實例35：hu2H11_R35-74-Ex34
使用前述之通用方法來製備實例35。將11.16mg的hu2H11_R35-74與53μL的10mM實例34之DMA(7eq.)溶液反應2h 30，然後加入15μL的10mM實例34之DMA(2eq.)溶液反應2h 30。於PD-10和Nap-10管柱上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP純化後，得到9.5mg的實例34為濃度1.9mg/mL，具有3.8之DAR(HRMS)，97.5%單體純度和82%整體產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=149330(裸mAb)；m/z=150744(D1)；m/z=152147(D2)；m/z=153554(D3)；m/z=154959(D4)；m/z=156366(D5)；m/z=157771(D6)；m/z=159172(D7)；m/z=160578(D8).
合成實例36 & 37：戊二醯基-Val-PEG4Lys-PABA-C52苯甲胺和戊二醯基-Val-PEG4Lys-PABA-C52苯甲胺之NHS酯
化合物78：(9H-茀-9-基)甲基((20S,23S)-20-((4-(羥基甲基)苯基)胺甲醯基)-24-甲基-14,22-二側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21-二氮雜二十五烷-23-基)胺甲酸酯
於化合物61(180mg,257.2μmol)之MeCN(35mL)溶液中，於Ar下，加入DIEA(130μL,771.7μmol)、4-胺基苯甲醇(48mg,385.8μmol)、HOAt(41mg,295.8μmol)、HATU(147mg,385.8μmol)。將反應媒劑於RT攪拌17h，後加入MeOH(30mL)及矽氧，將混合物真空濃縮並藉由快速層析於30g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到94mg的化合物78為米色固體(46%)。
RMN 1H(300MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.85(d,J=7.0Hz,3 H)；0.88(d,J=7.0Hz,3 H)；1.18至1.45(m,4 H)；1.52至1.70(m,2 H)； 1.99(m,1 H)；2.27(m,2 H)；3.00(m,2 H)；3.22(s,3 H)；3.35至3.51(m,12 H)；3.55(t,J=6.8Hz,2 H)；3.90(dd,J=7.2和9.1Hz,1 H)；4.18至4.56(m,4 H)；4.42(d,J=5.9Hz,2 H)；5.07(t,J=5.9Hz,1 H)；7.22(d,J=8.9Hz,2 H)；7.31(dt,J=1.8和7.8Hz,2 H)；7.40(m,3 H)；7.53(d,J=8.9Hz,2 H)；7.73(m,3 H)；7.88(d,J=7.8Hz,2 H)；8.02(d,J=8.2Hz,1 H)；9.92(s,1 H).
化合物79：(9H-茀-9-基)甲基((20S,23S)-24-甲基-20-((4-((((4-硝基苯氧基)-羰基)氧基)甲基)苯基)胺甲醯基)-14,22-二側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21-二氮雜二十五烷-23-基)胺甲酸酯
於化合物78(94mg,118.9μmol)之DMF溶液中加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(112mg,357.1μmol)和DIEA(40μL,237.2μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，真空濃縮，以DCM(10mL)稀釋及以H2O(10mL)清洗。將有機層以MgSO4乾燥，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於12g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到55mg的化合物79為棕色固體(48%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.86(d,J=7.0Hz,3 H)；0.88(d,J=7.0Hz,3 H)；1.18至1.45(m,4 H)；1.55至1.77(m,2 H)；1.99(m,1 H)；2.27(t,J=6.8Hz,2 H)；3.00(m,2 H)；3.21(s,3 H)；3.40至3.52(m,12 H)；3.57(t,J=6.8Hz,2 H)；3.91(m,1 H)；4.20至4.41(m,4 H)；5.24(s,2 H)；7.31(t,J=7.8Hz,2 H)；7.35至7.48(m,5 H)；7.58(d,J=9.2Hz,2 H)；7.63(d,J=8.8Hz,2 H)；7.74(m,2 H)；7.80(t,J=6.0Hz,1 H)；7.90(d,J=7.8Hz,2 H)；8.10(d,J=8.0Hz,1 H)；8.32(d,J=9.2Hz,2 H)；10.12(s,1 H).LCMS(A)：ES m/z=956[M+H]+；m/z=978[M+Na]+；m/z=1000[M-H+HCO2H]-；tR=1.45min.
化合物80：4-((S)-20-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-14-側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15-氮雜二十一醯胺基)苯甲基4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16基)乙基)-環氧乙烷-2-基)苯甲基胺甲酸酯
於(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二 氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,19mg,27.2μmol)之DCM(2.5mL)溶液中加入化合物79(58mg,60.7μmol)之DCM溶液(2.5mL)和DIEA(15μL,86.6μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到38mg Fmoc-保護的中間物為無色漆狀物(92%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.79(d,J=6.7Hz,6 H)；0.86(d,J=7.0Hz,3 H)；0.88(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.03(d,J=7.0Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.20至1.45(m,5 H)；1.50至1.75(m,4 H)；1.80(m,1 H)；2.00(m,1 H)；2.27(m,3 H)；2.69(m,2 H)；2.92至3.04(m,5 H)；3.21(s,3 H)；3.32(遮蔽m,1 H)；3.35至3.51(m,12 H)；3.56(t,J=6.6Hz,2 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.2Hz,1 H)；3.91(dd,J=7.1和9.1Hz,1 H)；4.15至4.42(m,7 H)；4.90(dd,J=3.7和9.8Hz,1 H)；4.97(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.79(dd,J=2.0和15.2Hz,1 H)；6.48(ddd,J=3.8,11.1和15.2Hz,1 H)；7.04(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.34(m,10 H)；7.41(m,3 H)；7.58(d,J=8.6Hz,2 H)；7.70至7.80(m,4 H)；7.89(d,J=7.8Hz,2 H)；8.06(d,J=7.6Hz,1 H)；8.35(d,J=8.3Hz,1 H)；10.03(s,1 H).LCMS(A)：ES m/z=698；m/z=1514[M+H]+；m/z=1558[M-H+HCO2H]-；tR=1.56min.
於此中間物(35mg,23.1μmol)之DCM(5mL)溶液中加入哌啶(20μL,201.5μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h 30，然後加入DMF(1mL)並繼續攪拌1h 30。然後加入哌啶(2μL)；將反應媒劑於RT攪拌1h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到25mg的化合物80為無色漆狀物(83%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.7Hz,6 H)；0.82(d,J=7.0Hz,3 H)；0.89(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.22至1.48(m,5 H)；1.51至1.75(m,6 H)；1.80(m,1 H)；1.98(m,1 H)；2.28(m,3 H)；2.69(m,2 H)；2.92至3.05(m,7 H)；3.15(m,1 H)；3.21(s,3 H)；3.32(遮蔽m,1 H)；3.35 至3.51(m,12 H)；3.57(t,J=6.7Hz,2 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.2Hz,1 H)；4.19(d,J=6.4Hz,2 H)；4.23(ddd,J=3.9,8.3和11.8Hz,1 H)；4.43(m,2 H)；4.90(dd,J=3.7和9.8Hz,1 H)；4.98(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.80(dd,J=2.0和15.2Hz,1 H)；6.48(ddd,J=3.9,11.3和15.2Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.59(d,J=8.6Hz,2 H)；7.79(t,J=6.0Hz,1 H)；7.82(t,J=6.4Hz,1 H)；8.21(m,1 H)；8.39(d,J=8.3Hz,1 H)；10.13(s,1 H).LCMS(A)：ES m/z=646.5；m/z=1292[M+H]+；tR=1.05min.
實例36：(20S,23S)-20-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)-苯基)胺甲醯基)-23-異丙基-14,22,25-三側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21,24-三氮雜二十九烷-29-酸
於化合物80(25mg,19.3μmol)之DCM(5mL)溶液中加入戊二酸酐(4mg,19.3μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h 30，然後加入戊二酸酐(4mg,19.3μmol)和DMF(0.5mL)並繼續攪拌26h。將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到10mg的實例36為白色漆狀物(37%)。
實例37：(20S,23S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基20-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)-胺甲醯基)氧基)甲基)苯基)-胺甲醯基)-23-異丙基-14,22,25-三側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21,24-三氮雜二十九烷-29-酸酯
於實例36(10mg,7.11μmol)之THF(2mL)溶液中加入DSC(2mg,7.65μmol)和DIEA(1.2μL,7.26μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，真空濃縮並藉由2個連續的快速層析於0.6g和2g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到3.3mg的實例37為白色漆狀物(31%)。
合成實例38 & 39：戊二醯基-Val-PEG24Lys-PABA-C52苯甲胺和戊二 醯基-Val-PEG24Lys-PABA-C52苯甲胺之NHS酯
化合物81：(9H-茀-9-基)甲基((80S,83S)-80-((4-(羥基甲基)苯基)胺甲醯基)-84-甲基-74,82-二側氧2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81-二氮雜八十五烷-83-基)胺甲酸酯
於化合物65(360mg,229.8μmol)之MeCN(70mL)溶液中加入DIEA(77μL,456.6μmol)、4-胺基苯甲醇(43mg,342.2μmol)、HOAt(36mg,264.5μmol)和HATU(109mg,278.1μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，真空濃縮並藉由快速層析於25g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到307mg的化合物81為白色固體(80%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.85(d,J=7.0Hz,3 H)；0.88(d,J=7.0Hz,3 H)；1.21至1.42(m,4 H)；1.54至1.78(m,2 H)；1.99(m,1 H)；2.27(t,J=6.8Hz,2 H)；3.00(m,2 H)；3.22(s,3 H)；3.40至3.52(m,92 H)；3.54(t,J=6.8Hz,2 H)；3.91(dd,J=6.9和9.0Hz,1 H)；4.18至4.32(m,3 H)；4.39(m,1 H)；4.42(d,J=5.9Hz,2 H)；5.08(t,J=5.9Hz,1 H)；7.22(d,J=8.9Hz,2 H)；7.32(dt,J=1.2和7.8Hz,2 H)；7.41(m,3 H)；7.53(d,J=8.9Hz,2 H)；7.75(m,3 H)；7.89(d,J=7.8Hz,2 H)；8.02(d,J=8.2Hz,1 H)；9.92(s,1 H).LCMS(d)：ES m/z=827；m/z=1671[M+H]+；tR=2.94min.
化合物82：(9H-茀-9-基)甲基((80S,83S)-84-甲基-80-((4-((((4-硝基苯氧基)-羰基)氧基)甲基)苯基)胺甲醯基)-74,82-二側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81-二氮雜八十五烷-83-基)胺甲酸酯
於化合物81(300mg,179.4μmol)之DCM(10mL)溶液中加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(450mg,1.48mmol)和DIEA(60μL,361.2μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(80mg,263.1μmol)並繼續攪拌4h。此時，加入雙(4-硝基苯基)碳酸酯(80mg,263.1μmol)並繼續攪拌至隔夜。將反應媒劑真空濃縮並藉由快速層析於80g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到325mg的化合物82為白色漆狀物(98%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.86(d,J=7.0Hz,3 H)； 0.89(d,J=7.0Hz,3 H)；1.20至1.45(m,4 H)；1.58至1.76(m,2 H)；1.99(m,1 H)；2.27(t,J=6.8Hz,2 H)；3.00(m,2 H)；3.22(s,3 H)；3.40至3.70(m,94 H)；3.91(dd,J=7.2和9.1Hz,1 H)；4.19至4.32(m,3 H)；4.39(m,1 H)；5.24(s,2 H)；7.31(dt,J=1.2和7.8Hz,2 H)；7.40(m,4 H)；7.57(d,J=9.2Hz,2 H)；7,62(d,J=8.6Hz,2 H)；7.73(m,3 H)；7.89(d,J=7.8Hz,2 H)；8.07(d,J=7.8Hz,1 H)；8.31(d,J=9.2Hz,2 H)；10.10(s,1 H).LCMS(d)：ES m/z=827；m/z=1836[M+H]+；tR=3.38min.
化合物83：4-((S)-80-((S)-2-胺基-3-甲基丁醯胺基)-74-側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75-氮雜八十一烷醯胺基)-苯甲基4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基-胺甲酸酯
於(E)-(3S,10R,16S)-16-{(S)-1-[(2R,3R)-3-(4-胺基甲基-苯基)-環氧乙烷基]-乙基}-10-(3-氯-4-甲氧基-苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-2,5,9,12-四酮(其合成係描述於WO2011001052中，化合物77,79mg,113.1μmol)之DCM(5mL)溶液中加入化合物82(325mg,177.5μmol)之DCM溶液(5mL)和DIEA(63μL,365.6μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，然後加入化合物82(34mg，18.6μmol)並繼續攪拌4h。將反應媒劑真空濃縮並藉由2個連續的快速層析於25g的矽膠上及15g二醇修飾的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到152mg的粗產物，將其藉由逆相層析於10μm C18管柱250 x 40mm上純化(梯度溶離MeCN/H2O)得到78mg含16%化合物83之Fmoc-保護的中間物，為白色粉末(29%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.85(d,J=7.0Hz,3 H)；0.88(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.20至1.43(m,5 H)；1.50至1.74(m,4 H)；1.79(m,1 H)；1.99(m,1 H)；2.25(m,3 H)；2.68(m,2 H)；2.93至3.04(m,5 H)；3.22(s,3 H)；3.32(遮蔽m,2 H)；3.40至3.76(m,94 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.0Hz,1 H)；3.90(dd,J=7.5和9.1Hz,1 H)；4.19(d,J=6.5Hz,2 H)；4.20至4.33(m,4 H)；4.39(m,1 H)；4.90(dd,J=3.9和9.9Hz,1 H)；4.93(s,2 H)；5.11(m,1 H)；5.79(dd,J=1.8和15.2Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.4et15.2Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.36(m,10 H)；7.41(m,3 H)；7.48(d,J=8.6Hz,2 H)；7.70至7.80(m,5 H)；7.89(d,J=7.8Hz,2 H)；8.08(d,J=8.0Hz,1 H)；8.35(d,J=8.0Hz,1 H)；10.04(s,1 H).
於此中間物(75mg,31.3μmol)之DMF(5mL)溶液中加入哌啶(25μL,253.2μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h 30，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到58mg的化合物83為白色漆狀物(85%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.9Hz,9 H)；0.88(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.05(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.15至1.50(m,7 H)；1.52至1.73(m,4 H)；1.80(m,1 H)；1.93(m,1 H)；2.27(m,3 H)；2.69(m,2 H)；2.95至3.04(m,6 H)；3.23(s,3 H)；3.32(m,1 H)；3.40至3.55(m,92 H)；3.57(t,J=6.8Hz,2 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.2Hz,1 H)；4.20(d,J=6.5Hz,2 H)；4.24(ddd,J=3.9,8.2和12.0Hz,1 H)；4.42(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.98(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.8Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,6.0和11.5Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.31(m,8 H)；7.58(d,J=8.6Hz,2 H)；7.78(m,2 H)；8.10(d,J=8.6Hz,1 H)；8.36(d,J=8.1Hz,1 H)；10.10(s,1 H).LCMS(d)：ES m/z=725；m/z=1087[M+2H]2+；tR=1.07min.
實例38：(80S,83S)-80-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)-苯基)胺甲醯基)-83-異丙基-74,82,85-三側氧基-2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81,84-三氮雜八十九烷-89-酸
於化合物83(58mg,26.7μmol)之DCM(2mL)溶液中加入戊二酸酐(5.5mg,48.2μmol)。將反應媒劑於RT攪拌3h，真空濃縮並藉由2個連續的快速層析於4g和12g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到37mg的實例38為白色漆狀物(61%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.79(d,J=6.8Hz,6 H)；0.93(d,J=7.0Hz,3 H)；0.97(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.20至1.45(m,5 H)；1.51至1.75(m,6 H)；1.80(m,1 H)；2.00(m,1 H)；2.13至2.33(m,7 H)；2.69(m,2 H)；2.95至3.05(m,5 H)；3.23(s,3 H)；3.32(m,1 H)；3.40至3.58(m,94 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.2Hz,1 H)；4.15至4.38(m,4 H)；4.32(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.98(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.2Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.4和15.2Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.16(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.60(d,J=8.6Hz,2 H)；7.78(t,J=6.5Hz,1 H)；7.90(廣d,J=8.6Hz,2 H)；8.20(m,1 H)；8.38(d,J=8.6Hz,2 H)；10.08(m,1 H)；12.10(m,1 H).LCMS(d)：ES m/z=698；m/z=2287[M+H]+；tR=3.13min.
實例39：(80S,83S)-2,5-二側氧吡咯啶-1-基80-((4-((((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜-環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)氧基)甲基)苯基)胺甲醯基)-83-異丙基-74,82,85-三側氧基2,5,8,11,14,17,20,23,26,29,32,35,38,41,44,47,50,53,56,59,62,65,68,71-二十四氧雜-75,81,84-三氮雜八十九烷-89-酸酯
於實例38(29mg,12.7μmol)之THF(3mL)溶液中加入DSC(3.6mg,13.8μmol)和DIEA(2.1μL,12.9μmol)。將反應媒劑於RT攪拌20h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/iPrOH)得到6.9mg的實例39為無色漆狀物(23%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.79(d,J=6.8Hz,6 H)；0.93(d,J=7.0Hz,3 H)；0.97(d,J=7.0Hz,3 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7,1Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.13至1.42(m,5 H)；1.52至1.88(m,7 H)；1.98(m,1 H)；2.28(m,5 H)；2.53至2.72(m,4 H)；2.80(s,4 H)；2.96至3.05(m,5 H)；3.23(s,3 H)；3.32(m,1 H)；3.60至3.65(m,94 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.2Hz,1 H)；4.15至4.28(m,4 H)；4.33(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.98(s,2 H)；5.10(m,1 H)；5.79(d,J=15.8Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.4和15.2Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,8 H)；7.60(d,J=8.6Hz,2 H)；7.78(m,2 H)；7.90(d,J=8.5Hz,1 H)；8.07(m,2 H)；8.37(d,J=8.5Hz,2 H)；9.95(s,1 H).LCMS(D)：ES m/z=698；m/z=2384[M+H]+；tR=3.19min.
合成實例40 & 41：DBCO-戊二醯基-Val-PEG24Lys-PABA-C52苯甲胺和對應的ADC
化合物84：5-[[3-(11,12-二去氫二苯并[b,f]吖 -5(6H)-基)-3-側氧丙基]胺基]-5-側氧戊酸
於DBCO-胺(50mg,180.9μmol)之DCM(2mL)溶液中加入戊二酸酐(21.1mg,180.9μmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH)得到32.6mg的化合 物84(45%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：1.59(m,2 H)；1.81(m,1 H)；1.94(t,J=7.4Hz,2 H)；2.11(t,J=7.4Hz,2 H)；2.40(m,1 H)；2.91(m,1 H)；3.09(m,1 H)；3.62(d,J=14.2Hz,1 H)；5.13(d,J=14.2Hz,1 H)；7.38至7.53(m,6 H)；7.56至7.67(m,3 H)；12.05(廣m,1 H).
實例40：DBCO-戊二醯基-Val-PEG24Lys-PABA-C52苯甲胺
於化合物83(22mg,10.1μmol)之DCM(2mL)溶液中加入化合物84(5.14mg,13.2μmol)、EDC(1.8μL,10.1μmol)和HOBt(1.4mg,10.1μmol)。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，真空濃縮並藉由逆相層析於C18-修飾的5μm管柱150mm x 30mm上純化(梯度溶離MeCN/0.2N乙酸銨pH 5.6)得到9.2mg的實例40為白色粉末(36%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.80至0.90(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.05(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.20至1.41(m,5 H)；1.52至1.72(m,6 H)；1.75至2.00(m,5 H)；2.09(m,2 H)；2.27(m,3 H)；2.40(m,1 H)；2.68(m,2 H)；2.88至3.12(m,7 H)；3.23(s,3 H)；3.28至3.58(部分遮蔽m,95 H)；3.60(d,J=11.0Hz,1 H)；3.80(s,3 H)；3.88(d,J=2.0Hz,1 H)；4.11至4.28(m,4 H)；4.33(m,1 H)；4.90(dd,J=3.8和9.8Hz,1 H)；4.97(s,2 H)；5.04(d,J=11.0Hz,1 H)；5.11(m,1 H)；5.80(d,J=15.2Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.4和15.2Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.17(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.31(m,6 H)；7.32至7.50(m,6 H)；7.53至7.70(m,4 H)；7.80(m,3 H)；8.08(d,J=8.9Hz,1 H)；8.36(d,J=8.4Hz,1 H)；9.95(s,1 H).LCMS(D)：ES m/z=849[M+3H]3+；m/z=1273[M+2H]2+；tR=5.29min.
實例41：hu2H11_R35-74-Ex40
將194mg的hu2H11_R35-74於緩衝液A中與627μL 2,5-二側氧吡咯啶-1-基4-疊氮丁酸酯(CAS編號[943858-70-6])之22.0mM的DMA(10eq.)溶液反應，例如最終的抗體濃度為10.5mg/mL及緩衝液A中的DMA百分比為5%。於RT攪拌2h後，將混合物以凝膠過濾 使用以緩衝液A預平衡過的SephadexTM G25基質(Hiprep 26/10脫鹽管柱，GEHealthcare)純化。將含有單體修飾抗體之溶離份集中並經由Steriflip®過濾器元件過濾(0.22μm Durapore® PVDF膜，Millipore)，得到173mg，濃度5.75mg/mL，每個抗體具有5.2(HRMS)的連接子比率，97%單體純度和89%整體產率的修飾抗體。
使用前述之通用方法來製備實例41。將45mg的修飾hu2H11_R35-74與604μL的6.89mM實例40之DMA(14eq.)溶液反應4h 30，然後加入604μL的10mM實例40之DMA(14eq.)溶液並於RT持續攪拌至隔夜。於Superdex 200 pg上以緩衝液B pH 6.5+20% NMP純化，於Amicon Ultra-15上濃縮，於DP-10上以緩衝液B pH 6.5+5% NMP凝膠過濾及於0.22μm PVDF過濾器上過濾後，得到28mg的實例41為濃度1.6mg/mL，具有3.44之DAR(HRMS)，99.6%單體純度和62%產率之無色清澈溶液。
SEC-HRMS：m/z=152041(D1)；m/z=154678(D2)；m/z=157332(D3)；m/z=159992(D4)；m/z=162648(D5)；m/z=165303(D6)；m/z=168004(D7).
合成實例42：磺酸基-Val-PEG4Lys-C52苯甲胺
化合物85：2-(4-((3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)(3-(第三丁氧基)-3-側氧丙基)胺基)-4-側氧丁醯胺基)乙-1-磺酸鈉
於化合物13(0.958g,2.68mmol)之DMF(5mL)溶液中加入NHS(390.3mg,3.32mmol)和EDC(604.2μL,3.4mmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，然後於-20℃儲存2d。回到RT後，將反應媒劑於RT攪拌2h，然後加入EDC(60μL,340μmol)及NHS(20mg,170.3μmol)之DMF(3mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，然後加入化合物73(1.96g,13.3mmol)之H2O(10mL)溶液和碳酸氫鈉(225.2mg,2.68mmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h，以H2O(6mL)稀釋，以Amberlite IR-120(H)(CAS編號[78922-04-4])酸化至pH 3，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於矽膠純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到270mg的化合物85為無色泡沫(21%)。
RMN 1H(400MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50：50構象混合物；1.39(s,4.5 H)；1.40(s,4.5 H)；2.27(t,J=7.0Hz,4 H)；2.38(t,J=7.0Hz,2 H)；3.53(m,3 H)；2.68(t,J=7.0Hz,1 H)；3.25至3.61(m,6 H)；4.55至4.58(m,2 H)；5.18至5.36(m,2 H)；5.90(m,1 H)；7.70(t,J= 6.8Hz,1 H)；10.53(廣m,1 H).LCMS(A)：ES m/z=409；m/z=463[M-H]-；m/z=465[M+H]+；tR=1.13min.
化合物86：2-(4-((3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)(2-羧基乙基)胺基)-4-側氧丁醯胺基)-乙-1-磺酸鈉
於化合物85(60mg,123.3μmol)之DCM(4mL)溶液中加入TFA(100μL,1.25mmol)。將反應媒劑於RT攪拌2h，然後加入TFA(100μL,1.25mmol)並於RT繼續攪拌2d。然後加入TFA(50μL,0.625mmol)，將反應媒劑於RT攪拌，真空濃縮並與甲苯共蒸發(3 x)得到60mg的化合物86為無色漆狀物(quant.)。
化合物87：2-(4-((3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)(3-((2,5-二側氧吡咯啶-1-基)氧基)-3-側氧丙基)胺基)-4-側氧丁醯胺基)乙-1-磺酸鈉
於化合物86(52.94mg,123μmol)之DCM(5mL)溶液中加入EDAC(26.0μL,147.6μmol)、NHS(14.75mg,123μmol)和DMF(0.5mL)。將反應混合物攪拌4h，然後加入EDC(10μL,45.7μmol)並於RT持續攪拌至隔夜。將反應媒劑儲存於-20℃並直接用於合成化合物88。
化合物88：(20S,23S)-28-(2-烯丙基氧基-2-羧基乙基)-20-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-23-異丙基-14,22,25,29,32-五側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21,24,28,33-五氮雜三十五烷-35-磺酸鈉
於化合物62(50mg,43.7μmol)之DCM(4mL)溶液中，於Ar下，逐滴加入含化合物87(23.06mg,43.7μmol)之反應媒劑。將反應媒劑於RT攪拌15min，真空濃縮並藉由快速層析於15g的矽膠上純化(梯度溶離DMC/MeOH/H2O)得到26mg的化合物88為白色漆狀物(38%)。
實例42：(20S,23S)-28-(2-羧基乙基)-20-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-23-異丙基-14,22,25,29,32-五側氧基-2,5,8,11-四氧雜-15,21,24,28,33-五氮雜三十五 烷-35-磺酸鈉
於化合物88(14mg,9μmol)之THF溶液中加入雙甲酮(dimedone)(2.57mg,18.0μmol)和肆(三苯基膦)鈀(0)(5.3mg,4.5μmol)。將反應媒劑於RT攪拌1h，然後加入雙甲酮(2.57mg,18.0μmol)和肆(三苯基-膦)鈀(0)(5.3mg,4.5μmol)並於RT繼續攪拌至隔夜。此時，加入雙甲酮(2.57mg,18.0μmol)和肆(三苯基-膦)鈀(0)(5.3mg,4.5μmol)。將反應媒劑於RT攪拌4h，過濾，真空濃縮並藉由快速層析於4g的矽膠上純化(梯度溶離DCM/MeOH/H2O)得到7mg的實例42為白色漆狀物(51%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：50：50構象混合物；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.81(d,J=6.8Hz,6 H)；0.86(m,6 H)；1.00(s,3 H)；1.04(d,J=7.1Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.15至1.41(m,5 H)；1.53至1.70(m,4 H)；1.80(m,1 H)；2.00(m,1 H)；2.11至2.58(部分遮蔽m,13 H)；2.70(m,2 H)；2.92至3.05(m,5 H)；3.23(s,3 H)；3.25至3.58(部分遮蔽m,23 H)；3.81(s,3 H)；3.88(d,J=2.0Hz,1 H)；4.10至4.32(m,5 H)；4.91(dd,J=3.8和9.9Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.80(d,J=15.2Hz,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.4和15.2Hz,1 H)；7.06(d,J=8.6Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.20至7.32(m,6 H)；7.67至7.93(m,3 H)；8.18至8.60(m,4 H).LCMS(E)：ES m/z=747.5[M+2H]2+；m/z=1491[M-H]-；m/z=1493[M+H]+；tR=4.74min.
合成實例43：磺酸基-Val-葡萄糖Gln-C52苯甲胺
化合物89：(6S,9S)-14-(3-(烯丙基氧基)-3-側氧丙基)-6-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-9-異丙基-3,8,11,15,18-五側氧基-1-((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,7,10,14,19-五氮雜二十一烷-21-磺酸鈉
於化合物50(55mg,49.9μmol)之DMF(3mL)溶液中加入化合物87之DMF溶液(1.66mL為30mM,49.9μmol)。將反應媒劑於RT攪拌18h， 以0.45μm過濾，以DMF(0.8mL)清洗二次並藉由逆相層析於5μm C18管柱30 x 150mm上純化(梯度溶離MeCN/0.2N乙酸銨pH 5.6)得到19.8mg的化合物89為白色固體(26%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：60：40構象混合物；0.78(d,J=6.8Hz,6 H)；0.81(d,J=6.8Hz,6 H)；0.81至0.87(m,6 H)；0.99(s,3 H)；1.03(d,J=7.1Hz,3 H)；1.12(s,3 H)；1.30(m,1 H)；1.52至1.62(m,2 H)；1.80(m,3 H)；1.85至2.00(m,3 H)；2.10至2.30(m,5 H)；2.35至2.48(m,2 H)；2.53(m,6 H)；2.68(m,2 H)；2.88至3.15(m,9 H)；3.28(m,3 H)；3.38(m,3 H)；3.40至3.58(m,5 H)；3.80(s,3 H)；3.87(d,J=2.3Hz,1 H)；4.01(d,J=8.0Hz,1 H)；4.10至4.24(m,6 H)；4.55(m,1.2 H)；4.57(0.8 H)；4.91(dd,J=3.8 et 9.9Hz,1 H)；4.95(d,J=5.0Hz,1 H)；5.01(d,J=5.0Hz,1 H)；5.06(d,J=5.0Hz,1 H)；5.10(m,1 H)；5.18至5.35(m,2 H)；5.80(dd,J=2.0和15.2Hz,1 H)；5.92(m,1 H)；6.47(ddd,J=3.8,11.4和15.2Hz,1 H)；7.06(d,J=8.6Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.23(m,5 H)；7.29(d,J=2.4Hz,1 H)；7,69(t,J=6.8Hz,1 H)；7.88(t,J=6.8Hz,1 H)；7.98(d,J=9.0Hz,0.4 H)；8.04(d,J=7.0Hz,0.4 H)；8.08(d,J=9.0Hz,0.6 H)；8.14(d,J=7.0Hz,0.6 H)；8.32(t,J=7.0Hz,1 H)；8.38(d,J=8.0Hz,1 H).LCMS(A)：ES m/z=746.5[M+2H]2+；m/z=1490[M-H]-；m/z=1492[M+H]+；tR=1.4min.
實例43：(6S,9S)-14-(2-羧基乙基)-6-((4-((2R,3R)-3-((S)-1-((3S,10R,16S,E)-10-(3-氯-4-甲氧基苯甲基)-3-異丁基-6,6-二甲基-2,5,9,12-四側氧基-1,4-二氧雜-8,11-二氮雜環十六-13-烯-16-基)乙基)環氧乙烷-2-基)苯甲基)胺甲醯基)-9-異丙基-3,8,11,15,18-五側氧基-1-((2R,3S,4S,5R,6R)-3,4,5-三羥基-6-甲氧基四氫-2H-哌喃-2-基)-2,7,10,14,19-五氮雜二十一烷-21-磺酸鈉
於化合物89(19mg,12.6μmol)之DMF(1mL)溶液中加入巴比妥酸(5.94mg,37.7μmol)和肆(三苯基膦)鈀(0)(0.74mg,0.63μmol)之DMF(0.5mL)溶液。將反應媒劑於RT攪拌3h，然後加入巴比妥酸(5.94mg,37.7μmol)及肆(三苯基膦)鈀(0)(0.74mg,0.63μmol)之DMF(0.5mL) 溶液。將反應媒劑於RT攪拌至隔夜，以DMF稀釋，以0.45μm過濾並藉由逆相層析於5μm C18管柱30 x 150mm上純化(梯度溶離MeCN/0.2N乙酸銨pH 5.6)得到4.7mg的實例43為白色固體(25%)。
RMN 1H(500MHz,δ以ppm表示，DMSO-d6)：0.80(m,6 H)；0.85(m,6 H)；0.99(s,3 H)；1.03(d,J=7.3Hz,3 H)；1.11(s,3 H)；1.33(m,1 H)；1.58(m,2 H)；1.78(m,2 H)；1.90(m,2 H)；2.03至2.55(部分遮蔽m,11 H)；2.70(m,2 H)；2.90至3.58(部分遮蔽m,19 H)；3.18(s,3 H)；3.81(s,3 H)；3.88(s,1 H)；4.00至4.40(m,8 H)；4.90(m,1 H)；4.99(m,1 H)；5.80(d,J=15.2Hz,1 H)；6.46(ddd,J=3.8,11.4和15.2Hz,1 H)；7.05(d,J=8.6Hz,1 H)；7.18(dd,J=2.4和8.6Hz,1 H)；7.22(m,4 H)；7.29(d,J=2.4Hz,1 H)；7.31(m,1 H)；8.30至8.70(m,5 H).LCMS(A)：ES m/z=1448[M-H]-；m/z=1450[M+H]+；tR=1.58min.
就說明之目的，亦檢測下列二種衍生自WO2011/001052的接合物ADC1和ADC2，及下列一種PCT/EP2016/076603中所述的接合物ADC3。
物理化學結果
將式(V)之接合物進行穩定性研究，用以評估聚集作用(查看單體純度)和在移除用於調配物中的有機共溶劑後及在加速應力狀況下(於40℃加熱10天)，DAR之流失。
無NMP之穩定性
將儲存在10mM磷酸鹽140mM NaCl pH6.5 5% NMP之ADC於SEC管柱上過濾以移除NMP，調配於10mM磷酸鹽70mM NaCl 5%蔗糖pH6.5中並以HRMS和SEC HPLC分析，用以測定DAR和單體純度。
在40℃之磷酸鹽緩衝液中10天後的穩定性
將在10mM磷酸鹽70mM NaCl 5%蔗糖pH6.5中的ADC於40℃加熱10天的期間並以HRMS和SEC HPLC分析，用以測定DAR和單體純度。
以Cathepsin B處理式(V)接合物之後評估藥物的釋放
Cathepsin B之藥物釋放係於活體外藉由在pH 5的乙酸鹽緩衝液中於人類Cathepsin B(Calbiochem #219362,40μg/mL)的存在下於37℃將ADC(1.5μg/mL)培養24h並以UPLC-MS-SIR-DAD-ELSD來偵測藥物加以評估。以1st小時內的動力學為基準，24h動力學為基準的半衰期來測定斜率。
以人類Cathepsin B裂解式(V)之念珠藻素接合物，具有類似參照ADC之一的動力學。
藥理學結果
將式(V)之接合物進行藥理學檢測供測定其抗腫瘤效用。
以式(V)之接合物評估抑制MDA-MB-231細胞株之增生
將指數生長期的MDA-MB-231細胞以胰蛋白酶消化並懸浮於培養基中(DMEM/F12 Gibco #21331,10% FCS Gibco #10500-056,2nM麩醯胺酸Gibco #25030)。將細胞懸浮液以5000個細胞/孔種入Cytostar 96-孔培養盤(GE Healthcare Europe,#RPNQ0163)之含有血清的全培養基中。培養4h後，將10-7至10-12M遞減濃度之ADC的連續稀釋液加至孔槽中(每個濃度三重複)。將細胞於37℃在含5% CO2的環境中於ADC存在下培養3d。在第4天，於各孔槽中加入10μL的14C-胸腺嘧啶溶液(0.1μCi/孔，Perkin Elmer #NEC56825000)。在實驗開始的96h後以microbeta放射性計數器(Perkin Elmer)測量併入的14C-胸腺嘧啶。數據係以存活百分比的形式來表示，測定經ADC處理的細胞所得到降低的計數和對照孔槽細胞(僅以培養處理)所得到的計數之間的比率。在特定的實驗中，係在實驗開始時將濃度1μM之裸抗體加到孔槽中並如前述測量增生之抑制。
發現，式(V)之念珠藻素接合物以及ADC1和ADC2以範圍從19pM至67pM之IC50抑制MDA-MB-231細胞之增生，而單獨的ADC與ADC+裸抗體之選擇性比例係介於109至>1493之間。
在SCID小鼠中單一i.v.給藥後測定式(V)之接合物的MTD
以對個別小鼠在連續3天中不會引發15%失重或在1天中不會引發20%失重或死亡的最大劑量測定MTD。其係在3隻雌性SCID小鼠中以單一靜脈內(i.v.)團注後及在治療後28天的期間內評估。
受試的式(V)之念珠藻素接合物在SCID小鼠中展現範圍從30mg/kg至40mg/kg的MTD。
在單一i.v.給藥後評估式(V)之接合物對抗SCID小鼠中MDA-MB-23的活體內抗腫瘤活性
以3個劑量層級對抗雌性SCID小鼠中可測量的皮下(s.c.)植入之異種移植胸部MDA-MB-231，評估活體內抗腫瘤活性。對照組為未治療。以單一i.v.團注投予接合物，在各圖中以箭頭(▼)指出治療當天。
就評估接合物的抗腫瘤活性，係將動物每週稱重二次並以游標尺每週測量腫瘤二次。動物的體重係包括腫瘤重。腫瘤的體積係使用公式來計算團量(mm3)=[長(mm)×寬(mm)2]/2。主藥的療效終點為△T/△C，百分比中位數消退，部分和完全消(PR和CR)。各治療組(T)和對照組(C)之腫瘤體積變化係就各腫瘤藉由將特定觀察日的腫瘤體積減去治療第一天(階段天數)的腫瘤體積所計算。計算治療組的中位數△T及計算對照組的中位數△C。然後計算△T/△C比率並以百分比表示：△T/△C=(delta T/delta C)×100。
腫瘤消退的百分比係定義為治療組中在特定觀察日，與首次治療第一天(t0)之腫瘤體積相比所減少的腫瘤體積%。在特定的時間點及就各動物計算消退%。然後計算各組之中位數消退%。消退%(t時)=((體積t0-體積et)/體積t0)×100。若在開始治療時腫瘤體積減少至50%的腫瘤體積則定義為部分消退(PR)，當腫瘤體積無法測量(0mm3)時則為完全消退(CR)。無腫瘤存活(TFS)係定義為在研究結束時動物具有偵測不到的腫瘤(最後治療之後>100天)。
單一i.v.給藥後評估Ex.6之抗SCID小鼠中MDA-MB-231的活體內抗腫瘤活性
單一2.5mg/kg i.v.給藥後評估Ex.16、Ex.19、Ex.23和Ex.32之抗SCID小鼠中MDA-MB-231的活體內抗腫瘤活性
單一1.25mg/kg i.v.給藥後評估Ex.16、Ex.19、Ex.23和Ex.32之抗SCID小鼠中MDA-MB-231的活體內抗腫瘤活性
單一i.v.給藥後評估Ex.26之抗SCID小鼠中MDA-MB-231的活體內抗腫瘤活性
單一i.v.給藥後評估Ex.29之抗SCID小鼠中MDA-MB-231的活體內抗腫瘤活性
單一i.v.給藥後評估Ex.35之抗SCID小鼠中MDA-MB-231的活體內抗腫瘤活性
單一i.v.給藥後評估Ex.41之抗SCID小鼠中MDA-MB-231的活體內抗腫瘤活性
所有受試的本發明之念珠藻素ADC以及ADC2在範圍從1mg/kg至5mg/kg之劑量時展現抗腫瘤活性。
因此顯然本發明之化合物(V)具有抗腫瘤活性。
因此，在其另外的態樣中，本發明亦關於式(V)之念珠藻素接合物作為抗癌劑之用途。
因此，在其另外的態樣中，本發明亦關於式(V)之念珠藻素接合物用於製備醫藥品供治療癌症，例如乳癌之用途。
根據其另外的態樣，本發明係亦提供本發明之式(V)接合物供用於治療癌症。
根據其另外的態樣，本發明係亦提供包括至少一種式(V)接合物之醫藥品。
這些醫藥品係在治療上用於，特別是治療癌症，例如乳癌。
根據其另外的態樣，本發明係關於包括本發明之式(V)接合物作為有效成份之醫藥組成物。這些醫藥組成物係包括一有效劑量之至少一種本發明之式(V)接合物以及至少一種醫藥上接受賦形劑。
因此，根據另外的態樣，本發明係關於包括至少一種本發明之式(V)接合物以及至少一種醫藥上接受賦形劑的醫藥組成物。
依照醫藥形式和所希望的給藥方法，該等賦形劑係由熟習本項技術者已知的習用賦形劑中選出。
根據其另外的態樣，本發明亦提供治療上文所指之病變，例如癌 症，如乳癌的方法，其係包括投予病患一有效劑量之本發明式(V)接合物。
<110> SANOFI
<120> 新穎之肽連接子與念珠藻素接合物，其製備方法及治療之用途
<130> PR80291
<150> EP17305531
<151> 2017-05-10
<160> 5
<170> BiSSAP 1.3.6
<210> 1
<211> 238
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<220>
<223> 抗體hu2H11_R35R74之輕鏈
<220>
<223> 抗體hu2H11_R35R74之輕鏈
<400> 1
<210> 2
<211> 467
<212> PRT
<213> 智人
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<223> 抗體hu2H11_R35R74之重鏈
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<223> 可能的AAns
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<223> 可能的AAns
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<221> SITE
<222> 4
<223> Xaa代表瓜胺酸
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<212> PRT
<213> 人工序列
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<223> 可能的AAns
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<223> 可能的AAns
<400> 4
<210> 5
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<212> PRT
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<223> 可能的AAns
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<223> 可能的AAns
<400> 5

Claims (27)

  1. 一種式(I)之化合物：RCG1-L -P(I)，其中■ RCG1係代表對存在多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性之反應性化學基團；■ P係代表氫原子、-OH或活化O；■ L係代表式(II)之連接子： 其中：● L1為式(III)： 其中：■當P係代表氫原子時，則x=0或1而y=1及z=0；■當P係代表-OH時，則x=y=z=0；■當P係代表活化O時，則x=1而y=z=0或x=y=z=1；■ J 1 、J 2 、J 3 和 J 4 各自相互獨立地係選自CA 1和N；■ ALK係代表(C 1-C 12)伸烷基基團，例如(C 1-C 6)伸烷基，例如-(CH 2) n-形式，n為範圍從1至12之整數及例如範圍從1至6；■ A 1 、A 2 、A 3 、A 4 、A 5 和 A 6 各自相互獨立地係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基基團，例如氫原子或甲基基團，● (AA)w係代表經由胜肽鍵連接在一起之w個經取代 AA s 或非經取代胺基酸 AA ns 序列；● w係代表範圍從1至12之整數，例如從1至6，例如2或3； ‧若 (AA)w含有至少一個經取代胺基酸 AA s ，則 L2係代表單鍵、(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-O(C 1-C 6)烷基、(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、CH(SO 3H)-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-CH(SO 3H)基團、(C 1-C 6)烷基-環己基基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-O(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、C(=O)-CH(SO 3H)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-CH(SO 3H)基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-環己基基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-O(C 1-C 6)烷基、NA 8-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-CH(SO 3H)基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-O(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-CH(SO 3H)基團、NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、NA 7-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、NA 7-芳基、NA 7-雜芳基、(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、C(=O)-NA 7-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 7-芳基、C(=O)-NA 7-雜芳基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基 -NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團或C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基基團；‧若 (AA)w係代表w個非經取代的胺基酸 AA ns 序列，則 L2係代表NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、NA 7-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、NA 7-芳基、NA 7-雜芳基、(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、C(=O)-NA 7-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 7-芳基、C(=O)-NA 7-雜芳基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基 -C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團或C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基基團；■ A 7 係代表直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代的C 1-C 160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO 3H)-、-O-、-C(=O)-、-S(=O)-、-S(=O) 2-、-NHS(=O) 2-、-N(烷基)S(=O) 2-、-S(=O) 2NH-、-S(=O) 2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH 2、-NH烷基和-N(烷基) 2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，應了解，包括SO 3H官能基(function)之各 A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO 3 - +Na)；■ A 8 係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基基團，例如氫原子或甲基基團；■ i係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至35。
  2. 根據請求項1之式(I)化合物，其中該非經取代胺基酸 AA ns 之 (AA)w序列係由下列列表選出：Gly-Gly、Phe-Lys、Val-Lys、Val-AcLys、Val-Cit、Phe-Phe-Lys、D-Phe-Phe-Lys、Gly-Phe-Lys、Ala-Lys、Val-Ala、Phe-Cit、Phe-Gly、Leu-Cit、Ile-Cit、Trp-Cit、Phe-Ala、Ala-Phe、Gly-Gly-Gly、Gly-Ala-Phe、Gly-Phe-Gly、Gly-Val-Cit、 Gly-Phe-Leu-Cit、Gly-Phe-Leu-Gly和Ala-Leu-Ala-Leu，例如Val-Ala和Val-Cit，例如Val-Ala。
  3. 根據請求項1之式(I)化合物，其中該經取代胺基酸 AA s 係具有式(VI)： 其中：● T係代表飽和或不飽和，直鏈或支鏈(C 1-C 8)三價烷基基團，較 佳地T為 或 ； ● U基團係代表單鍵、-NHC(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O) 2-、-NHS(=O) 2-、-N(烷基)S(=O) 2-、-S(=O) 2NH-、-S(=O) 2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-，或-O-P(=O)(OH)-O，例如 U基團係代表-NH-C(=O)-，或-C(=O)NH-；● A 9 係代表直鏈或支鏈，飽和或不飽和，視需要經取代的C 1-C 160烴基鏈，其中視需要至少一個亞甲基單元係獨立地經-NH-C(=O)-、-N(烷基)C(=O)-、-C(=O)NH-、-C(=O)N(烷基)-、-NHC(=O)NH-、-NHC(=NH)NH-、-OC(=O)-、-C(=O)O-、-OC(=O)O-、-CH(OH)-、-CH(SO 3H)-、-CH(O烷基)-、-CHF-、-CF 2-、-S-、-Se-、-O-、-NH-、-N(烷基)-、-N +H(烷基)-、-N +(烷基) 2-、-C(=O)-、-OP(=O)-、-S(=O)-、-S(=O) 2-、-NHS(=O) 2-、-N(烷基)S(=O) 2-、-S(=O) 2NH-、-S(=O) 2N(烷基)-、-P(=O)(OH)-、-P(=O)(OH)O-、-O-P(=O)(OH)-、-O-P(=O)(OH)-O-或視需要經至少一個相同或不 同選自-OH、-O烷基、-烷基、鹵素原子、-NH 2、-NH烷基和-N(烷基) 2之取代基取代的雜環烷基基團所置換，例如 A 9 為 -[(CH 2) 2-O] 4-CH 3、-[(CH 2) 2-O] 24-CH 3、 、 或-[(CH 2) 2-O)] 4-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H；應了解，包括SO 3H官能基之各 A 9 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO 3 - +Na)。
  4. 根據請求項1之式(I)化合物，其中該經取代胺基酸 AA s 係具有如請求項3中所定義的式(VI)，其中； ● T係代表 或 ； ● U基團係代表-NH-C(=O)-或-C(=O)NH-；● A 9 係代表-[(CH2)2-O] b-CH 3，其中b係代表範圍從1至50，例如範圍從1至24之整數，例如4、7和24，例如4和24。
  5. 根據請求項1之式(I)化合物，其中含有至少一個經取代胺基酸 AA s 之 (AA s )w序列係由下列列表中選出： 或
  6. 根據請求項1之式(I)化合物，其中 (AA)w含有至少一個經取代胺基酸 AA s 且 L2係代表：-(C 1-C 6)烷基基團，例如-(CH 2) 3-基團；-C(=O)-(C 1-C 6)烷基基團，例如-C(=O)-(CH 2) 3-基團；或-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基基團，例如-(CH 2) 2-NA 7-(CH 2) 2-基團，其中 A 7 為-C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團；應了解，包括SO 3H官能基之各 A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO 3 - +Na)。
  7. 根據請求項1之式(I)化合物，其中 (AA)w含有w個非經取代的胺基酸 AA ns 及 L2係代表：(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基基團，例如-(CH 2) 2-NA 7-(CH 2) 2-基團，其中 A 7 係代表： - -C(=O)-[(CH 2) 2-O] a-CH 3基團其中「 a」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4、7和24，例如 A 7 為-C(=O)-[(CH 2) 2-O] 4-CH 3基團、-C(=O)-[(CH 2) 2-O] 7-CH 3基團或-C(=O)-[(CH 2) 2-O] 24-CH 3基團；- -C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團；或- -C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-[(CH 2) 2-O] a-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團，其中「 a」係代表範圍從1至50之整數，例如範圍從1至24，例如4，例如 A 7 為-C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-[(CH 2) 2-O] 4-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團；應了解，包括SO 3H官能基之各 A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO 3 - +Na)。
  8. 根據請求項1之式(I)化合物，其中 A 7 係代表-C(=O)-[(CH 2) 2-O] 4-CH 3基團；-C(=O)-[(CH 2) 2-O] 7-CH 3基團、-C(=O)-[(CH 2) 2-O] 24-CH 3基團；-C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團；-C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-[(CH 2) 2-O-] 4-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團；應了解，包括SO 3H官能基之各 A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO 3 - +Na)。
  9. 根據請求項1之式(I)化合物，其中 (AA)w含有至少一個經取代胺基酸 AA s 及/或w個非經取代的胺基酸 AA ns 而 L2係代表：NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、NA 7-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、NA 7-芳基、NA 7-雜芳基、(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、C(=O)-NA 7-(CH 2CH 2O) i(C 1-C 6)烷基、 C(=O)-NA 7-芳基、C(=O)-NA 7-雜芳基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7C(=O)-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-C(=O)NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基、C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-NA 7-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i基團或C(=O)-NA 8-(C 1-C 6)烷基-(OCH 2CH 2) i-NA 7-(C 1-C 6)烷基基團。
  10. 根據請求項1之式(I)化合物，其中 (AA)w含有至少一個經取代胺基酸 AA s 及/或w個非經取代的胺基酸 AA ns 而 L2係代表： 或
  11. 根據請求項1之式(I)化合物，其中 (AA)w含有至少一個經取代胺基酸 AA s 及/或w個非經取代的胺基酸 AA ns 而 L2係包括代表下列基團之 A 7 ：C(=O)-[(CH 2) 2-O] 4-CH 3基團；C(=O)-[(CH 2) 2-O] 7-CH 3基團； C(=O)-[(CH 2) 2-O] 24-CH 3基團；C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團；C(=O)-(CH 2) 2-C(=O)-NH-[(CH 2) 2-O] 4-(CH 2) 2-C(=O)-NH-(CH 2) 2-SO 3H基團；應了解，包括SO 3H官能基之各 A 7 可為鹽形式，例如鹼金屬鹽類，如鈉鹽(SO 3 - +Na)。
  12. 根據請求項1至11中任一項之式(I)化合物，其中該連接子 L係由下列列表中選出： 和
  13. 根據請求項1至12中任一項之式(I)化合物，其中 RCG1係由以下列表中選出：(i)R aZ a-C(=O)反應性基團，其中 Z a 係代表單鍵、-O-或-NH-，例如-O-，而 R a 係代表氫原子、(C 1-C 6)烷基、(C 3-C 7)環烷基基團、烯基基團、芳基、雜芳基基團或(C 3-C 7)雜環烷基基團，芳基基團、雜芳基基團及/或(C 3-C 7)雜環烷基基團視需要係經1至5個選自鹵素原子(例如氟原子)、烷基基團、烷氧基基團、羥基基團、側氧基團、硝基基團和氰基基團之原子/基團取代； (ii)下列反應性基團之一：馬來醯亞胺基 基團；鹵基乙醯胺 基 基團，其中 R 21 係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基基團， 例如Me；Cl-；N 3-；HO-；HS-；活化二硫化物，例如 ；H 2N-；HC≡C-基團或活化C≡C基團，例如環辛炔基元，例如DBCO- 胺 或BCN 或MFCO ；O- 烷基羥基胺或Pictet-Spengler反應受質，例如 ； 例如 RCG1係由下列列表中選出： -COOH， 和 。
  14. 一種式(IV)之念珠藻素酬載(cryptophycin payload)： 其中：■ R 1 係代表(C 1-C 6)烷基基團；■ R 2 和 R 3 各自相互獨立地係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基基團；或另一種選擇 R 2 和 R 3 係與其相連接的碳原子共同形成(C 3-C 6)環烷基或(C 3-C 6)雜環烷基基團；■ R 4 和 R 5 各自相互獨立地係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基基團或(C 1-C 6)烷基-NH(R 12)基團或(C 1-C 6)烷基-OH基團或(C 1-C 6)烷基-SH基團或(C 1-C 6)烷基-CO 2H基團；或另一種選擇 R 4 和 R 5 係與其相連接的碳原子共同形成(C 3-C 6)環烷基或(C 3-C 6)雜環烷基基團； ■ X係代表O或N(R 6)；■ R 6 係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基基團；■ R 7 和 R 8 各自相互獨立地係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基基團或(C 1-C 6)烷基-CO 2H基團或(C 1-C 6)烷基-N(C 1-C 6)烷基 2基團；或另一種選擇 R 7 和 R 8 係與其相連接的碳原子共同形成(C 3-C 6)環烷基基團或(C 3-C 6)雜環烷基基團；■ R 9 係代表至少一苯基核(phenyl nucleus)的取代基，其各自相互獨立係由下列選出：氫原子、-OH、(C 1-C 4)烷氧基、鹵素原子、-NH 2、-NH(C 1-C 6)烷基或-N(C 1-C 6)烷基 2或-NH(C 1-C 6)環烷基或(C 3-C 6)雜環烷基基團；■ R 10 係代表選自氫原子和(C 1-C 4)烷基基團之至少一苯基核的取代基；■ Y係代表●-NR 11-(C 1-C 6)烷基-，例如-NR 11-(CH 2) n-，如 ●-O-(C 1-C 6)烷基-，例如-O-(CH 2) n-，如 ●-S-(C 1-C 6)烷基-，例如-S-(CH 2) n-，如 Y係位於苯基核的鄰位( o)、間位( m)或對位( p)；■ R 11 和 R 12 各自相互獨立地係代表氫原子或(C 1-C 6)烷基，例如氫原子或甲基基團；■ n係代表範圍從1至6之整數；■ L係如請求項1之式(I)中所定義且係代表如請求項1至12中任一項所定義之式(II)連接子； ■ RCG1係代表在連接子 L末端的反應化學基團， RCG1係對存在多肽(例如抗體)上的化學基團具反應性。
  15. 根據請求項14之式(IV)念珠藻素酬載，其係具有下列結構： 其中：■ R 1 、R 2 、R 3 、R 4 、R 5 、R 6 、R 7 、R 8 、R 9 、R 10 、R 11 、R 12 、n、RCG 1 、X、Y和 L係如請求項14之式(IV)中所定義。
  16. 根據請求項14之式(IV)念珠藻素酬載，其係由下列列表中選出： 和
  17. 一種式(V)之接合物： 其中：■ R 1 、R 2 、R 3 、R 4 、R 5 、R 6 、R 7 、R 8 、R 9 ,R 10 、R 11 、R 12 、n、X、Y和 L係 如請求項14或15之式(IV)中所定義；■ G係代表介於如請求項13中所定義的 RCG1(存在如請求項1至12中任一項所定義的式(II)連接子 L末端的反應性化學基團)及 RCG2(存在多肽(例如抗體(Ab))上的正交反應性化學基團)之間的反應產物；及 ■ Ab係代表抗體。
  18. 請求項17之式(V)接合物，係具有下列結構： 其中：■ R 1 、R 2 、R 3 、R 4 、R 5 、R 6 、R 7 、R 8 、R 9 ,R 10 、R 11 、R 12 、n、X、Y、L、G、RCG1、RCG2和 Ab係如請求項17之式(V)中所定義。
  19. 根據請求項17或18之式(V)接合物，其中 RCG2係選自：(i)由存在抗體表面之離胺酸殘基側鏈所攜帶的離胺酸之ε-胺基基團；(ii)抗體重鏈和輕鏈的N-端胺基酸之α-胺基基團；(iii)絞鏈區之糖基團；(iv)由還原鏈內雙硫鍵所產生的半胱胺酸之硫醇或工程化半胱胺酸之硫醇；(v)由存在抗體表面之某些麩醯胺酸殘基之側鏈所攜帶的醯胺基團；(vi)使用甲醯化甘胺酸生產酵素所導入的醛基基團。
  20. 根據請求項17或18之式(V)接合物，其中：-當 RCG1係代表N-羥基琥珀醯亞胺酯時，則 RCG2係代表-NH 2基團；-當 RCG1係代表馬來醯亞胺官能基、鹵基乙醯胺官能基、氯原子或活化二硫化物時，則 RCG2係代表SH基團；-當 RCG1係代表N 3基團時，則 RCG2係代表C≡CH官能基或活化的C≡C官能基，例如環辛炔基元；-當 RCG1係代表OH基團或NH 2基團時，則 RCG2係代表羧酸或醯胺官能基；-當 RCG1係代表SH基團時，則 RCG2係代表馬來醯亞胺官能基、 鹵基乙醯胺基官能基或活化二硫化物官能基；-當 RCG1係代表C≡CH基團或活化的C≡C基團時，則 RCG2係代表N 3基團；-當 RCG1係代表O-烷基羥基胺官能基或Pictet-Spengler反應受質時，則 RCG2係代表醛或酮官能基。
  21. 根據請求項17至20中任一項之式(V)接合物，其中 G係選自： ；例如，G係代表下列基團： 或 ，例如 。
  22. 根據請求項17之式(V)接合物，其係由下列列表中選出： 和 其中Ab係代表抗體。
  23. 一種製備如請求項17至22中任一項所定義之式(V)接合物的方法，其係包括至少下列步驟：(i)使以下接觸並任其反應：-視需要的抗體緩衝水溶液，其視需要藉由修飾劑修飾，及-如請求項14至16中任一項所定義之式(IV)念珠藻素酬載溶液，式(IV)之念珠藻素酬載的化學基團 RCG1對於存在多肽(例如抗體) 上的化學基團 RCG2，特別是對存在抗體上的胺基基團具反應性，該化學基團 RCG2已藉由修飾劑導入適當處，以便藉由形成共價鍵將式(IV)之念珠藻素酬載與抗體相連接；(ii)及然後視需要從式(IV)念珠藻素酬載中及/或從未反應的抗體及/或從任何可能已形成的聚集體，分開步驟(i)中所形成的接合物。
  24. 一種醫藥品，其中其係包括至少一種根據請求項17至22中任一項之式(V)接合物。
  25. 一種醫藥組成物，其中其係包括至少一種根據請求項17至22中任一項之式(V)接合物以及至少一種醫藥上可接受賦形劑。
  26. 一種根據請求項17至22中任一項之式(V)接合物作為抗癌劑的用途。
  27. 根據請求項17至22中任一項之式(V)接合物，係用於治療癌症。
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US11951165B2 (en) 2016-12-30 2024-04-09 Vaxcyte, Inc. Conjugated vaccine carrier proteins
MA47223A (fr) 2016-12-30 2019-11-06 Sutrovax Inc Conjugués polypeptide-antigène avec des acides aminés non naturels
AU2018265333C1 (en) 2017-05-10 2023-08-17 Sanofi Peptidic linkers and cryptophycin conjugates, useful in therapy, and their preparation
CN111154133B (zh) * 2020-01-03 2022-07-12 万华化学集团股份有限公司 一种环氧树脂发泡剂，环氧树脂组合物及环氧发泡材料的制备方法和用途
WO2022022649A1 (zh) * 2020-07-30 2022-02-03 成都科岭源医药技术有限公司 一种双药链接组装单元及双药靶向接头-药物偶联物
CN115105607A (zh) * 2021-03-22 2022-09-27 成都科岭源医药技术有限公司 一种用于adc的双药-接头的制备方法及其用途
WO2023161291A1 (en) 2022-02-22 2023-08-31 Araris Biotech Ag Peptide linkers comprising two or more payloads

Family Cites Families (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0735819B1 (en) 1993-12-21 2001-07-11 University Of Hawaii Cryptophycins
IL128610A (en) * 1996-08-30 2004-07-25 Lilly Co Eli Cryptophycin compound and its use as a medicament for treating neoplasm
US20020128185A1 (en) 1998-02-25 2002-09-12 Chuan Shih Pharmaceutical compounds
US7230101B1 (en) 2002-08-28 2007-06-12 Gpc Biotech, Inc. Synthesis of methotrexate-containing heterodimeric molecules
US20050175619A1 (en) 2004-02-05 2005-08-11 Robert Duffy Methods of producing antibody conjugates
US8212083B2 (en) 2006-04-27 2012-07-03 Intezyne Technologies, Inc. Heterobifunctional poly(ethylene glycol) containing acid-labile amino protecting groups and uses thereof
WO2008010101A2 (en) 2006-07-18 2008-01-24 Sanofi-Aventis Antagonist antibody against epha2 for the treatment of cancer
FR2947269B1 (fr) * 2009-06-29 2013-01-18 Sanofi Aventis Nouveaux composes anticancereux
JP5538536B2 (ja) 2009-06-30 2014-07-02 アルカテル−ルーセント Ｗｌａｎ内の移動端末用のローミング方法、関連するアクセス・コントローラ、およびアクセス・ポイント・デバイス
AR078470A1 (es) 2009-10-02 2011-11-09 Sanofi Aventis Anticuerpos que se unen especificamente al receptor epha2
PL3057585T3 (pl) 2013-10-15 2020-12-28 Seagen Inc. Pegylowane elementy lek-łącznik do poprawy farmakokinetyki koniugatu ligand-lek
AU2014337317A1 (en) * 2013-10-15 2016-09-15 Sorrento Therapeutics Inc. Drug-conjugates with a targeting molecule and two different drugs
US10758636B2 (en) * 2013-11-12 2020-09-01 Centre For Probe Development And Commercialization Residualizing linkers and uses thereof
US10736974B2 (en) 2014-10-22 2020-08-11 The Johns Hopkins University Scaffolds and multifunctional intermediates for imaging PSMA and cancer therapy
EP3735990A1 (en) * 2014-12-09 2020-11-11 Abbvie Inc. Antibody drug conjugates with cell permeable bcl-xl inhibitors
SG11201708629VA (en) * 2015-04-21 2017-11-29 Abbvie Stemcentrx Llc Calicheamicin constructs and methods of use
TWI714661B (zh) * 2015-11-05 2021-01-01 法商賽諾菲公司 新穎念珠藻素化合物及接合物、其製備與其治療用途
CN108066772B (zh) * 2016-11-14 2021-07-13 中国科学院上海药物研究所 靶向tacstd2的抗体与药物偶联体(adc)分子
AU2018265333C1 (en) 2017-05-10 2023-08-17 Sanofi Peptidic linkers and cryptophycin conjugates, useful in therapy, and their preparation

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