TW201341386A - 唑並［１，５－ａ］嘧啶基化合物、包含其之組成物及其使用方法 - Google Patents

唑並［１，５－ａ］嘧啶基化合物、包含其之組成物及其使用方法 Download PDF

Info

Publication number
TW201341386A
TW201341386A TW102108283A TW102108283A TW201341386A TW 201341386 A TW201341386 A TW 201341386A TW 102108283 A TW102108283 A TW 102108283A TW 102108283 A TW102108283 A TW 102108283A TW 201341386 A TW201341386 A TW 201341386A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
group
compound
cyano
optionally substituted
substituted
Prior art date
Application number
TW102108283A
Other languages
English (en)
Inventor
Yingzhi Bi
Kenneth Gordon Carson
Giovanni Cianchetta
Michael Alan Green
Godwin Kumi
Alan Main
Yulian Zhang
Glenn Gregory Zipp
Original Assignee
Lexicon Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lexicon Pharmaceuticals Inc filed Critical Lexicon Pharmaceuticals Inc
Publication of TW201341386A publication Critical patent/TW201341386A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/002—Heterocyclic compounds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本文揭示具有以下化學式之唑並[1,5-a]嘧啶基化合物：□其中，本文中定義了R1、R2及R3。本文亦揭示包含該等化合物之組成物及其使用方法，使用方法為治療、管理及/或預防由銜接因子關聯激酶1活性介導之疾病及失調症。

Description

唑並[1,5-a]嘧啶基化合物、包含其之組成物及其使用方法 【相關案件的交叉引用】
本申請案主張2012年3月9日申請之美國臨時專利申請案第61/608,765號的權益，該案全文內容以引用之方式併入本文中。
本發明係關於唑並[1,5-a]嘧啶基化合物、包含其之組成物及其使用方法，該化合物用作為銜接因子關聯激酶1(adaptor associated kinase 1；AAK1)之抑製劑。
銜接因子關聯激酶1(AAK1)為絲胺酸/蘇胺酸激酶中之腎上腺素受體激酶1(Ark1)/蛋白激酶1(Prk1)家族中的成員。AAK1訊息核糖核酸(mRNA)存在於短及長兩種剪接形式。長形式佔多數，且在腦及心臟中高表達(Henderson 與Conner，Mol.Biol.Cell.2007，18，2698-2706)。AAK1富集於突觸體標本，並與培養細胞中的內吞結構共定位。AAK1調節披網格蛋白內吞作用，此調節為突觸小泡回收及受體介導內吞作用中之重要過程。AAK1與AP2複合物締合， 該AP2複合物為雜四聚體，該雜四聚體可將受體載物連接至網格蛋白衣被。網格蛋白與AAK1之結合可刺激AAK1激酶活性(Conner等人，Traffic 2003，4，885-890；Jackson等人，J.Cell.Biol.2003，163，231-236)。AAK1使AP-2的mu-2次單位磷酸化，此舉可促進mu-2與載物受體上之含酪胺酸排序基元結合(Ricotta等人，J.Cell Bio.2002，156，791-795；Conner與Schmid，J.Cell Bio.2002，156，921-929)。雖然受體攝取不必需實施Mu2磷酸化，但磷酸化可增強內化效率(Motely等人，Mol.Biol.Cell.2006，17，5298-5308)。
AAK1被認為是PC12細胞內的神經調節蛋白-1(Neuregulin-1)/人體表皮生長因子4(ErbB4)信號傳輸之抑製劑。經由RNA干擾介導的基因靜默或經由激酶抑製劑K252a之治療(該激酶抑製劑K252a抑制AAK1激酶活性)所致的AAK1表達缺失，會導致由Neuregulin-1誘發的神經突外生長增強。該等治療會導致ErbB4之表達增加及ErbB4在細胞質膜中或附近之積聚(Kuai等人，Chemistry and Biology 2011，18，891-906)。NRG1及ErbB4被公認為精神分裂症之易感性基因(Buonanno，Brain Res.Bull.2010，83，122-131)。該等兩種基因中之單核苷酸多態性(SNGs)與多種精神分裂症內生性表徵型相關聯(Greenwood等人，Am.J.Psychiatry 2011，168，930-946)。Neuregulin 1及ErbB4基因剔除小鼠模型已呈現與精神分裂症相關之形態變化及行為表型(Jaaro-Peled等人，Schizophrenia Bulletin 2010，36，301-313；Wen等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2010，107， 1211-1216)。此外，AAK1基因之內含子中的單核苷酸多形態與帕金森氏症發病開始的年齡相關聯(Latourelle等人，BMC Med.Genet.2009，10，98)。該等結果表明，對AAK1活性之抑制可用於精神分裂症、精神分裂症中之認知缺陷、帕金森氏症、躁鬱症，及阿茲海默症之治療。
本發明係部份關於AAK1抑製劑及該抑製劑之醫藥學上可接受之鹽，該AAK1抑製劑具有以下化學式： 其中：R1為R1A或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R1A取代；每一R1A獨立為之-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為之-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個氰基、鹵基或羥基取代；R2為-NR2AR2B，其中，R2A為氫且R2B為可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R2c取代；或R2A及R2B合併形成4至7員雜環，該4至7員雜環用一或更多個R2C取代；每一R2C獨立為之-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、 -C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；且R3為氫或C1-6烷基，該C1-6烷基用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者可選取代。
本發明之一個實施例含有醫藥組成物及劑型，該等醫藥組成物及劑型包含本文所揭示之化合物(即本發明之化合物)。
本發明之另一實施例含有在活體外及活體內兩者抑制銜接因子關聯激酶1(AAK1)之方法，該等方法包含以下步驟：將AAK1與本發明之化合物相接觸。
另一實施例含有治療及管理由AAK1活性介導之疾病及失調症的方法。該等疾病及失調症之實例公認包括阿茲海默症、躁鬱症、疼痛、帕金森氏症，及精神分裂症(包括精神分裂症中之認知缺陷)。
第1圖中圖示本發明之態樣，第1圖圖示了使用AAK1同型合子(-/-)基因剔除小鼠及其野生型(+/+)同窩幼畜在福馬林疼痛模型中獲取之結果。與AAK1同型合子(-/-)基因剔除小鼠之野生型(+/+)同窩幼畜相比，該等AAK1同型合子(-/-)基因剔除小鼠展示出對急性及緊張性疼痛反應兩者明顯減輕。
本發明部份基於對AAK1基因剔除小鼠呈現較高的疼痛耐受性之發現。彼發現促進研究工作，且該研究最終成功發現了AAK1抑製劑、包含其之組成物及其使用方法。
5.1. 定義
除非另有指示，否則用語「本發明之化合物」、「本揭示案之化合物」及類似物係指本文中所揭示之化合物。
除非另有指示，否則術語「烴基」意謂脂族或脂環部份，該部份具有全碳主鏈並由碳原子及氫原子組成。烴基之實例包括具有1個至20個、1個至12個、1個至6個及1個至4個碳原子之彼等烴基(分別稱作C1-20烴基、C1-12烴基、C1-6烴基及C1-4烴基)。特定實例包括烷基、烯基、炔基、芳基、苄基、環烷基、環烯基、環烷基烷基、環烯基烷基、萘基、苯基及苯乙基。
烷基部份之實例包括具有1個至20個、1個至12個、1個至6個、1個至4個及1個至3個碳原子之直鏈及支鏈部份(分別稱作C1-20烷基、C1-12烷基、C1-6烷基、C1-4烷基及C1-3烷基)。特定實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、第三丁基、異丁基、戊基、己基、異己基、庚基、4,4-二甲基戊基、辛基、2,2,4-三甲基戊基、壬基、癸基、十一基及十二基。
烯基部份之實例包括直鏈及支鏈C2-20烯基、C2-12烯基及C2-6烯基。特定實例包括乙烯基、烯丙基、1-丁烯基、2-丁烯基、異丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-甲基-1-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、1-己烯基、2-己烯基、 3-己烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、1-辛烯基、2-辛烯基、3-辛烯基、1-壬烯基、2-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、2-癸烯基及3-癸烯基。
炔基部份之實例包括直鏈及支鏈C2-20炔基、C2-12炔基及C2-6炔基。特定實例包括乙炔基及2-丙炔基(炔丙基)。
芳基部份之實例包括蒽基、薁基、茀基、茚滿、茚基、萘基、苯基及菲基。
環烷基部份之實例包括C3-12環烷基、C3-7環烷基、C4-6環烷基及C6環烷基。特定實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基及金剛烷基。
除非另有指示，否則術語「鹵基」含有氟基、氯基、溴基及碘基。
除非另有指示，否則術語「雜碳基」係指具有由一或更多個碳原子及一或更多個雜原子組成之主鏈的部份。特定雜原子為氮、氧及硫。雜碳基部份可視作烴基部份，其中至少一個碳原子、CH基團、CH2基團，或CH3基團置換為一或更多個雜原子及必要數目之氫原子以滿足原子價。雜碳基之實例包括2員至20員雜碳基部份、2員至12員雜碳基部份、2員至8員雜碳基部份、2員至6員雜碳基部份及2員至4員雜碳基部份，其中，數字範圍係指該部份中之碳原子、氮原子、氧原子及/或硫原子數目之總和。由此，術語「2至12員雜碳基」係指總共具有2個至12個碳原子、氮原子、氧原子及/或硫原子之雜碳基部份。特定雜碳基部份包括直鏈及支鏈雜烷基、雜烯基，及雜炔基，亦包括雜環及雜芳基。
雜烷基部份之實例包括2員至8員雜烷基部份、2員至6員雜烷基部份及2員至4員雜烷基部份。特定實例包括烷氧基、醯基(例如，甲醯基、乙醯基、苯甲醯基)、烷基胺基(例如，二(C1-3烷基)胺基)、芳基胺基、芳基肟基、胺基甲酸酯、碳醯胺基、烷基羰基、芳基羰基、胺基羰基、烷基胺基羰基、烷基硫基、芳基硫基、烷基亞磺醯基、芳基亞磺醯基、烷基磺醯基、芳基磺醯基、烷基磺醯基胺基及芳基磺醯基胺基。
除非另有指示，否則術語「雜環」係指環狀(單環狀或多環狀)雜碳基部份，該部份可為芳族基、部份為芳族基或非芳族基。雜環包括雜芳基。實例包括4員至10員雜環、4員至7員雜環、6員雜環及5員雜環。特定實例包括苯幷[1,3]間二氧雜戊烯基、2,3-二羥-苯幷[1,4]二氧嗪基、口辛啉基、呋喃基、乙內醯脲基、嗎啉基、氧環丁烷基、環氧乙基、六氫吡嗪基、六氫吡啶基、吡咯烷酮基、吡咯啶基、四氫呋喃基、四氫呱喃基、四氫吡啶基、四氫嘧啶基、四氫噻吩基、四氫噻喃基及戊丙醯胺基。由於術語「雜環」係指環，因此該環單獨存在且不含有諸如噁唑烷酮及咪唑啶酮之部份：該等部份視作被取代之雜環，即由氧基取代之雜環。
雜芳基部份之實例包括吖啶基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并異噻唑基、苯并異噁唑基、苯并喹唑啉基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、呋喃基、咪唑基、吲哚基、異噻唑基、異噁唑基、噁二唑基、噁唑基、呔嗪基、吡嗪基、吡唑基、嗒嗪基、吡啶基、嘧啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、 喹啉基、四唑基、噻唑基及三嗪基。
除非另有指示，否則術語「包括」(include)與「包括(但不限定於)」同義，且術語「包括」(includes)與「包括(但不限定於)」同義。類似地，術語「諸如」與術語「諸如(但不限定於)」同義。
除非另有指示，否則術語「manage(管理)」、「managing(管理)」及「management(管理)」含有預防特定疾病或失調症在已罹患該疾病或失調症之患者身上復發，及/或加長已罹患該疾病或失調症之患者的病癥緩解時間之意。該等術語含有調節疾病或失調症之閾值、發展及/或持續時間，或改變患者對疾病或失調症的反應方式之意。
除非另有指示，否則化合物之「治療有效劑量」係指在疾病或病癥之治療或管理中足以產生治療效果之劑量，或足以延遲或最小化疾病或病癥之一或更多個關聯症狀之劑量。化合物之「治療有效劑量」意謂在單用之情況下或在配合使用其他治療之情況下的治療劑之劑量，該劑量可在疾病或病癥之治療或管理中產生治療效果。術語「治療有效劑量」可含有改進整體治療、減輕或避免疾病或病癥之癥狀或病因，或增強另一治療劑之治療功效之劑量之意。
除非另有指示，否則術語「treat(治療)」、「treating(治療)」及「treatment(治療)」預期在患者罹患特定疾病或失調症時所發生之動作，該動作減輕疾病或失調症之嚴重程度，或阻礙或減緩疾病或失調症之進展。
除非另有指示，否則一列名詞前的一或更多個形容 詞係經組織用於修飾每一名詞。例如，用語「可選取代烷基、芳基，或雜芳基」與「可選取代烷基、可選取代芳基，或可選取代雜芳基」同義。
5.2. 化合物
本發明含有具有以下化學式之化合物： 及該等化合物中之醫藥學上可接受之鹽，其中：R1為R1A或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R1A取代；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；R2為-NR2AR2B，其中R2A為氫且R2B為可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R2C取代；或R2A及R2B合併形成4至7員雜環，該4至7員雜環可取代為一或更多個R2C；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或 2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；且R3為C1-6烷基，該C1-6烷基用為氰基、鹵基或羥基中之一或更多者可選取代。
在特定化合物中，R1為R1A。在一些化合物中，R1為可選取代C1-12烴基。在一些化合物中，R1為可選取代苯基。在一些化合物中，R1為可選取代2至12員雜碳基(例如，2員至8員雜碳基、2員至6員雜碳基、2員至6員雜碳基)。在一些化合物中，R1為可選取代吡啶基、噻吩或咪唑。
在特定化合物中，R1A為鹵基。在一些化合物中，R1A為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C，或C(O)N(R1C)2。在一些化合物中，R1A為-OR1C。
在特定化合物中，R1B為-N(R1C)2、-OR1C、鹵基。
在特定化合物中，R2A及R2B合併形成4至7員雜環，該4至7員雜環用一或更多個R2C可選取代。
在特定化合物中，R1C為氫。在一些化合物中，R1C為C1-12烴基(例如，諸如甲基、乙基、丙基之C1-6烴基、C1-4烴基)。在一些化合物中，R2C為-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2或-N(R2D)C(O)OR2D。
在特定化合物中，R2D為氫。
在特定化合物中，R2D為C1-12烴基(例如，諸如甲基、乙基、丙基之C1-6烴基、C1-4烴基)。
在特定化合物中，R3為氫。
本發明之一實施例含有具有以下化學式之化合物： 及該等化合物中之醫藥學上可接受之鹽，其中：A為環狀C1-12烴基或4至7員雜環；D為4至7員雜環；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；n為1-3；且m為0-3。
在特定化合物中，D不為六氫吡啶基。
在特定化合物中，R2C不為-N(R2D)2。
在特定化合物中，A不為苯基。
在特定化合物中，m為1。
在特定化合物中，m為2。
在特定化合物中，R2D不為乙基。
在特定化合物中，當D為六氫吡啶基、A為苯基，且R2C為-N(R2D)2時，R2D不為乙基。
在特定化合物中，D為六氫吡嗪或六氫吡啶。
在特定化合物中，n為1。
在特定化合物中，A為吡啶基、噻吩或咪唑。
特定化合物具有以下化學式： 其中X為CH或N。
本發明之另一實施例含有具有以下化學式之化合物： 及該等化合物之醫藥學上可接受之鹽，其中：X為CH或N；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至 12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；且m為0-3。
在特定化合物中，R2C不為可選取代苯基或吡啶基。
在特定化合物中，X為N且m為1或2。
特定化合物具有以下化學式：
特定化合物具有以下化學式：
特定化合物具有以下化學式：
其他化合物則具有以下化學式：
本發明之另一實施例含有具有以下化學式之化合物： 及該等化合物其中：X為CH或N；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用一或更多個R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；且m為0-3。
特定化合物具有以下化學式：
特定化合物具有以下化學式：
其他化合物則具有以下化學式：
在特定化合物中，R1A為鹵基。在一些化合物中，R1A為-OR1C。
在特定化合物中，R1C為可選取代C1-12烴基(例如，C1-6烴基、C1-4烴基)。
在特定化合物中，R2C為-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2或-N(R2D)C(O)OR2D。在一些化合物中，R2C為-C(O)R2D。
在特定化合物中，R2D獨立為氫或C1-12烴基(例如，C1-6烴基、C1-4烴基)。在一些化合物中，R2D為可選取代C1-12烴基，可選取代係用胺基、氰基、鹵基、羥基中之一或更多者取代。
本發明之化合物可具有一或更多個不對稱中心。除非另有指示，否則本發明含有化合物之全部立體異構體，以及該等立體異構體之混合物。化合物之個別立體異構體可利用市售之含有對掌性中心的起始物料合成製備；或經由製備鏡像異構產物之混合物，然後實施分離(諸如，轉化至非鏡像異構體之混合物，然後實施分離或再結晶)、層析技術，或在對掌層析柱上直接分離鏡像異構體來製備。具有特定立體化學特性之起始化合物可經購買獲取，或由該項技術者熟知之技術製成或分解獲取。
本揭示案之某些化合物亦可具有不同的穩定構形形式，該等形式可實施分離。由於圍繞不對稱單鍵之旋轉受到例如位阻或環應力之限制而致使的扭轉不對稱，可允許分離不同的構象異構體。本揭示案包括該等化合物之每一構形異構體及每一構形異構體的混合物。
本揭示案旨在包括本發明之化合物內所出現原子之全部同位素。同位素包括具有相同原子序數但不同原子質量數之彼等原子。藉由一般舉例(而非限制)，氫之同位素包括氘及氚。碳之同位素包括13C及14C。本發明之同位素標誌化合物一般情況下可藉由熟知該項技術者所熟知之習知技術來製備，或藉由與本文所描述之方法類似之方法，使用適當的無同位素標誌試劑代替所採用之無標誌試劑來製備。該等化合物可能有多種潛在用途，例如，在判定生物活性時用作標準及試劑。在穩定同位素之情況下，該等化合物可能有利地修改生物、制藥或藥物動力學之特性。
本揭示案之化合物可作為醫藥學上可接受之鹽存在。如本文中所使用之術語「醫藥學上可接受之鹽」表示本揭示案之化合物的鹽或兩性離子形式，該等形式之化合物具有水溶性或油溶性，或水分散性或油分散性；在充足理由之醫學判定範疇中，該等形式之化合物適合用於接觸患者的人體組織而不含過高毒性、刺激性、過敏反應或具有同等效益/風險比之其他問題或併發癥；且可有效用於該等形式之化合物之目標用途。鹽可在化合物之最終分離及純化期間或單獨經由使適合之氮原子與適合之酸產生反應來製備。代表性酸加成鹽包括乙酸鹽、己二酸鹽、海藻酸鹽、檸檬酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、酸式硫酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽；二葡糖酸鹽、二羥溴酸鹽、二羥氯酸鹽、二羥碘酸鹽、甘油磷酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、甲酸鹽、反丁烯二酸鹽、羥氯酸鹽、羥溴酸鹽、羥碘酸鹽、2- 羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、順丁烯二酸鹽、均三甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、伸萘基磺酸鹽、菸鹼酸鹽、2-萘磺酸鹽、草酸鹽、巴莫酸鹽、果膠酸鹽、過氧硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、苦味酸鹽、特戊酸鹽、丙酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、三氯乙酸鹽、三氟乙酸鹽、磷酸鹽、麩胺酸鹽、酸式碳酸鹽、對甲苯磺酸鹽及十一烷酸鹽。可使用以形成醫藥學上可接受之加成鹽的酸之實例包括諸如鹽酸、羥溴酸、硫酸及磷酸之無機酸，及諸如草酸、順丁烯二酸、丁二酸，及檸檬酸之有機酸。
在化合物之最終分離及純化期間，鹼加成鹽可藉由純化使羧基團與適合之鹼基(諸如，金屬陽離子之氫氧化物、碳酸鹽或酸式碳酸鹽)反應，或與氨或有機一級胺、二級胺或三級胺反應來製備。醫藥學上可接受之鹽的陽離子包括鋰、鈉、鉀、鈣、鎂及鋁，以及無毒的四級胺陽離子，諸如，銨、四甲銨、四乙銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、三乙胺、二乙胺、乙胺、三丁胺、吡啶、N,N-二甲苯胺、N-甲呱啶、N-甲嗎啉、二環己胺、丙胺卡因、二苄基胺、N,N-二苄基苯乙胺及N,N'-二苄基乙二胺。可用於形成鹼加成鹽之其他代表性有機胺包括乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、呱啶及六氫吡嗪。
本發明之特定化合物利用IC50抑制AAK1，該IC50經下文實例部份所描述之P81濾板檢定量測為低於0.1、0.01或0.001 μM。本發明之特定化合物利用IC50抑制AAK1，該IC50經下文實例部份所描述之HEK281基於細胞之檢定量測為低於0.1、0.01或0.001 μM。
5.3. 合成方法
本發明之化合物(亦即，本文中所揭示之化合物)可使用下文所描述之方法製備，及使用熟習有機化學之技術者所熟知之方法製備。特定化合物具有以下一般化學式： 其中，R1、R2及R3在本文中定義，並包括該等化合物之鹽。該等化合物可藉由下文所列出之方法來製備。
具有上文所示之化學式之化合物可藉由下文所列出之方法來製備。在方案1中，具有化學式1之化合物中的氯置換為胺以生成2。2經溴化後可產生3。或者，1可先溴化以產生4，然後實施胺置換以產生3。3與適宜之硼酸[R1B(OH)2]之鈴木耦合產生具有化學式5之化合物。
在方案2中，取代乙腈6與甲酸乙酯反應以產生7。7與水合肼縮合後生成8。8與1,3-二甲基嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮反應以產生9。9進一步與胺反應得出具有化學式5之化合物。
方案2
在方案3中，具有化學式10之化合物可經由使2與NIS(硫化鎳)反應來製備。10與2,2-二氟-2-(氟磺醯)乙酸甲酯反應以產生具有化學式11之化合物。
5.4. 使用方法
本發明之一個實施例含有在活體外及活體內兩者中之抑制銜接因子關聯激酶1(AAK1)之方法，該等方法包含以下步驟：將AAK1與本發明之化合物相接觸。
另一實施例含有治療及管理由AAK1活性介導之疾病及失調症的方法。由AAK1活性介導之疾病及失調症至少具有一個癥狀，該等疾病及失調症之嚴重度或表現受AAK1活性之影響。該等疾病及失調症之實例公認包括阿茲海默症、躁鬱症、疼痛、帕金森氏症及精神分裂症(包括精神分裂症中之認知缺陷)。特定方法包含以下步驟：向需要接受 治療之患者(人類或其他哺乳動物)給予治療或預防有效劑量之AAK1抑製劑(例如，本文所揭示之化合物)。
本發明之另一實施例含有一種治療或管理疾病或失調症之方法，該方法包含以下步驟：向需要接受治療之患者給予治療或預防有效劑量之AAK1抑製劑，其中疾病或失調症為阿茲海默症、躁鬱症、疼痛、帕金森氏症或精神分裂症(包括精神分裂症中之認知缺陷)。特定類型之疼痛包括慢性疼痛、急性疼痛及神經性疼痛。特定類型之神經性疼痛包括肌肉纖維疼痛及周邊神經病(例如，糖尿病神經病)。
當本發明之化合物用於治療或管理疾病或失調症時，最佳情況係作為醫藥組成物之內含部份給予患者，該醫藥組成物包含一或更多個醫藥學上可接受之載體、稀釋液或賦形劑。
醫藥組成物或調配物可呈現為單位劑型，該等單位劑型在每單位劑量內含有預定劑量的有效成份。在針對疾病之預防及治療的單藥治療時，本揭示案之化合物之通常給藥劑量水平在每日約0.01毫克/千克(「mg/kg」)與約250 mg/kg體重之間，最佳在每日約0.05 mg/kg與約100 mg/kg體重之間。通常，本揭示案之醫藥組成物每日將向患者給藥約1次至約5次，或者作為連續輸液。此類給藥方法可用於慢性治療或急性治療。可與載體物質合併以產生單次劑型之有效成份劑量將視所治療之病癥、病癥之嚴重度、給藥時間、給藥途徑、所採用化合物之排泄速率、治療持續時間，及患者之年齡、性別、體重及病癥而變化。較佳單位劑量調配物為含 有有效成份之每日劑量或亞劑量(如上文所列舉)或上述劑量之適宜部分之彼等調配物。治療初始時可給予遠少於化合物的最佳劑量之較少劑量。之後，可少量遞增劑量，直至在該等情況下達到最佳效果為止。一般而言，化合物在處於將大體產生療效且不引起任何有害或不利之副作用的濃度水平下給藥最為理想。
本發明之化合物可配合一或更多個添加治療劑或預防劑給藥。例如，在治療疼痛時，可能使用的添加劑包括免疫抑製劑及消炎劑。
適合用於本發明之方法及組成物之免疫抑製劑包括該項技術所熟知之彼等抑製劑。實例包括胺喋呤、硫唑嘌呤、環孢黴素A、D-青黴胺、金鹽、羥化氯喹、來氟米特、甲氨蝶呤、二甲胺四環素、雷帕黴素、硫氮磺胺吡啶、他克莫司(FK506)及該等抑製劑之醫藥學上可接受之鹽。特定免疫抑製劑為甲氨蝶呤。
額外實例包括腫瘤壞死因子抗體，例如，阿達木單抗、塞妥珠單抗、依那西普及英夫利西單抗。其他實例包括介白素-1阻斷劑，諸如，阿那白滯素。其他實例包括B抗體細胞(CD20)抗體，諸如，利妥昔單抗。其他實例包括T細胞活化阻斷劑，諸如，阿巴西普。
額外實例包括肌苷單磷酸去氫酶抑製劑，諸如，黴酚酸嗎啉乙酯(CellCept®)及黴酚酸(Myfortic®)。
適合用於本發明之方法及組成物之消炎藥包括該項技術熟知之彼等消炎藥。實例包括糖皮質素及非甾體抗炎藥 (NSAID)。
糖皮質素之實例包括醛固酮、倍氯米松、倍他米松、皮質酮、去氧皮質酮、地塞米松、氟氫可的松、氫化可的松、甲基強的松龍、去氫皮質醇、強的松、曲安西龍及該等糖皮質素之醫藥學上可接受之鹽。
NSAID之實例包括柳酸鹽(例如，阿司匹靈、阿洛潑林、貝諾酯、膽鹼柳酸鎂、二氟尼柳、費塞爾胺、柳酸甲酯、柳酸鎂、雙柳酸及該等柳酸鹽之醫藥學上可接受之鹽)、芳基烷酸(例如，雙氯芬酸、乙醯氯芬酸、阿西美辛、溴芬酸、依託度酸、吲哚美辛、萘丁美酮、舒林酸、托美丁及該等芳基烷酸之醫藥學上可接受之鹽)、芳基丙酸(例如，伊布洛芬、卡洛芬、芬布芬、非諾洛芬、氟比洛芬、酮洛芬、酮咯酸、洛索洛芬、萘普生、奧沙普秦、噻洛芬酸、舒洛及該等芳基丙酸之醫藥學上可接受之鹽)、芳基鄰胺基苯甲酸(例如，甲氯芬那酸、甲芬那酸及該等芳基鄰胺基苯甲酸之醫藥學上可接受之鹽)、吡唑啶衍生物(例如，阿紮丙酮、安乃近、羥基保泰松、苯基丁氮酮、磺吡酮及該等衍生物之醫藥學上可接受之鹽)、昔康類(例如，氯諾昔康、美洛昔康、吡羅昔康、替諾昔康及該等昔康類之醫藥學上可接受之鹽)、COX-2抑製劑(例如，塞來昔布、依託昔布、羅美昔布、帕瑞昔布、羅非昔布、伐地昔布，及該等抑製劑之醫藥學上可接受之鹽)及磺基苯胺類(例如，尼美舒利及該等黃基胺本之醫藥學上可接受之鹽)。
用於治療疼痛之其他藥劑(包括(但不限於)神經 性疼痛及發炎性疼痛)包括諸如普瑞巴林、利多卡因、度洛西汀、加巴噴丁、卡巴咪嗪、辣椒鹼及其他血清素/去甲腎上腺素/多巴胺再吸收抑製劑之藥劑，及鴉片劑(諸如，奧施康定、嗎啡鹼及可待因)。
在治療由諸如糖尿病、感染(例如，帶狀孢疹或HIV感染)或癌癥之已知疾病或病癥引發的疼痛時，本發明之化合物可配合專用於該潛伏疾病或病癥之一或更多個添加治療劑或預防劑來給藥。例如，本發明之化合物在用於治療糖尿病神經病時，可配合一或更多個抗糖尿病藥劑、降血糖藥劑、降血脂/降脂藥劑、抗肥胖藥劑、抗高血壓藥劑及食慾抑製劑來給藥。抗糖尿病藥劑之實例包括雙胍類藥物(例如，二甲雙胍、苯乙雙胍)、葡糖苷酶抑製劑(例如，醣祿、米格列醇)、胰島素(包括胰島素促分泌劑及胰島素敏化劑)、美格替耐(例如，諾和隆)、磺醯脲素類藥物(例如，格列美脲、格列本脲、甲磺吡脲、綠礦丙脲素及格列吡嗪)、縮二胍/格列本脲配合(例如，格列本脲二甲雙胍片)、噻唑烷二酮類藥物(例如，曲格列酮、梵帝雅及吡格列酮)、PPAR-α促效劑、PPAR-γ促效劑、PPAR α/γ雙促效劑、糖原磷酸化酶抑製劑、脂肪酸結合蛋白(aP2)抑製劑、胰高血糖素雷類肽-1(GLP-1)或具有GLP-1受體之其他促效劑、二肽基肽酶IV(DPP4)抑製劑及鈉葡糖共轉運體2(SGLT2)抑製劑(例如，達格列淨、坎格列淨及LX-4211)。
5.5. 醫藥組成物
醫藥調配物經調適可以任何適宜途徑給藥，例如， 口部(包括口腔或舌下)、直腸、鼻腔、局部(包括口腔、舌下，或經皮)、陰道，或腸胃外(包括皮下、皮內、肌肉內、關節內、滑膜內、胸骨內、鞘內、病灶內、靜脈內或真皮內注射或輸液途徑)途徑。該等調配物可利用製藥技術中所熟知之任何方法來製備，例如，使有效成份與一或更多個載體或一或更多個賦形劑發生締合。口服給藥或注射給藥較佳。
針對口服給藥調適之醫藥調配物可呈現為諸如膠囊或錠劑之離散單元；粉末或顆粒；水溶性溶液或懸浮液，或非水溶性溶液或懸浮液；食用泡劑或沫劑；或油水型液體乳液或水油型乳液。
例如，對於錠劑或膠囊形式之口服給藥，活性藥物成份可與口服、無毒醫藥學上可接受之惰性載體混合，諸如，乙醇、甘油、水等。藉由以下方法製備粉末：將化合物粉碎至適合顆粒細度，及將與類似之粉碎醫藥載體(諸如，可選擇之碳水化合物)混合成例如澱粉或甘露醇之粉末。亦可添加調味劑、防腐劑、離散劑及染色劑。
如上文所述，膠囊由製備粉末混合物並填充已成形之膠質鞘製成。在填充操作之前，可先將諸如矽膠、滑石粉、硬脂酸鎂、硬脂酸鈣或固態聚乙二醇之助流劑及潤滑劑添加至粉末混合物中。亦可添加諸如洋菜、碳酸鈣或碳酸鈉之崩解或助溶劑，以便在患者消化膠囊時增強藥物之可用性。
此外，當期望或需要時，亦可將適合之黏合劑、潤滑劑、崩解劑及染色劑併入混合物。適合之黏合劑包括澱粉、 膠質、諸如葡糖或β-乳糖之天然糖分、玉米甜味料、諸如阿拉伯膠、黃耆膠或海藻酸鈉之天然及合成膠質、羧甲基纖維素、聚乙二醇等。該等劑型中所使用之潤滑劑包括油酸鈉、氯化鈉等。粉碎劑包括(但不限於)澱粉、甲基纖維素、洋菜、膨潤土、三仙膠等。錠劑藉由例如製備粉末混合物、制粒或乾壓、添加潤滑劑及崩解劑，然後壓製成錠劑之步驟調配而成。藉由以下方法製備粉末混合物：如上文所述，將適當粉碎之化合物與稀釋液或基質混合，且選擇性地與諸如羧甲基纖維素之黏合劑、與藻酸鹽、膠質或聚乙烯吡咯啶酮、與諸如石蠟之阻滯溶液、與諸如四級鹽之再吸收促進劑及/或與諸如膨潤土、高嶺土或二磷酸鈣之吸收劑混合。可藉由以下方法將粉末混合物制粒：利用諸如糖漿、澱粉糊、紅菱沸石漿劑或纖維素溶液或聚合物原料溶液之黏合劑潤濕，及使用壓迫粉末混合物通過篩網。另一替代性制粒方法為：可將粉末混合物通過壓錠機中，但此舉會導致結塊成型不完全，並碎成顆粒。藉由添加硬酯酸、硬酯酸鹽、滑石粉或礦物油之方式，可潤滑顆粒以防止其黏在錠劑成型模具上。然後，經潤滑之混合物壓縮製成錠劑。本揭示案之化合物亦可與自由流動之惰性載體混合，並直接壓縮製成錠劑，無需經歷制粒或壓片步驟。可提供由蟲膠密封層構成之透明或不透明保護塗層、糖衣或聚合物原料層及石蠟拋光塗層。可向該等塗層添加染料，以區分不同單位劑量。
諸如溶液、糖漿及酒劑之口服液可以劑量單位形式來製備，以便給定份量含有預定量的化合物。可藉由在適當 調味之水溶性溶液中溶解化合物製備糖漿，而使用無毒媒液製備酒劑。亦可添加諸如乙氧基化異硬脂基醇及聚氧乙烯山梨糖醚之助溶劑及乳化劑、防腐劑、諸如薄荷油或天然甜味劑之香味添加劑，或糖精或其他人工甜味劑等。
在適當之情況下，口服給藥之劑量單位調配物可裝入微型膠囊中。調配物亦可在製備時藉由塗覆或將微粒物質嵌埋在聚合物、石蠟等中而延長或保持釋放時間。
具有化學式(I)之化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可使用脂質體給藥系統給藥，諸如，單層小微脂粒、單層大微脂粒及多層微脂粒。脂質體可利用多種磷脂質形成，例如，膽固醇、硬脂胺或磷脂醯膽鹼。
具有化學式(I)之化合物及其醫藥學上可接受之鹽亦可使用單株抗體作為單個載體以實施給藥，其中，化合物分子耦合至該等作為單個載體之單株抗體。化合物亦可與作為靶向藥物載體之可溶性聚合物耦合。該等聚合物可包括聚乙烯吡咯啶酮、吡喃複聚物、多羥丙基甲基丙酸烯胺酚、多羥乙基天冬胰島素胺酚或聚氧化乙烯聚離胺酸，該等聚合物由palitoyl殘基取代。而且，化合物可耦合至一類可生物降解之聚合物，該類聚合物可用於實現藥物之受控釋放，例如，聚乳酸、聚(ε-己內酯)、多羥丁酸、聚原酸酯、聚縮醛、聚二羥呱喃、聚氰基丙烯酸酯及交聯或兩親媒性嵌段複聚物水凝膠。
調適用於經皮給藥之醫藥調配物可呈現為離散貼片，該等貼片之目的為與接受治療者之表皮保持長時間的緊 密接觸。例如，有效成份可經由如Pharmaceutical Research 1986，3(6)，318中大體上描述之離子導入療法利用貼片給予患者。
調適用於局部給藥之醫藥調配物可調配為軟膏、乳霜、懸浮液、乳液、粉末、溶液、糊劑、凝膠、噴霧劑、氣溶膠或油脂。
調適用於直腸給藥之醫藥調配物可呈現為栓劑或灌腸劑。
調適用於鼻腔給藥之醫藥調配物中的載體為固體，該等調配物包括粗粉末，該粉末之粒徑在20微米至500微米範圍內，該調配物之給藥方式為吸入鼻粉，亦即通過鼻腔從舉至鼻部附近之粉末容器中快速吸入鼻粉。給藥方式為鼻腔噴霧劑或鼻腔滴劑之適合調配物中的載體為液體，該等調配物包括有效成份之水溶液或油溶液。
調適用於吸入給藥之醫藥調配物包括細粒塵或細粒霧，該等塵或霧可經由各類加壓定劑量氣溶膠、霧化器或吹入器產生。
調適用於陰道給藥之醫藥調配物可呈現為子宮托、棉塞、乳霜、凝膠、糊劑、泡劑或噴霧劑調配物。
調適用於腸胃外給藥之醫藥調配物包括水溶性無菌注射溶液及非水溶性無菌注射溶液，該等溶液可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及soutes，該soutes可使得該等調配物與接受治療之目標患者的血液有等張作用；及水溶性無菌懸浮液及非水溶性無菌懸浮液，該等懸浮液可包括懸浮劑及增 稠劑。調配物可盛放於單位劑量容器或多劑量容器中，例如，盛放於密封安瓶及玻璃小瓶中，且該等調配物可儲存在冷凍乾燥(凍乾)之條件下，僅需在使用之前添加無菌液體載體即可，例如，添加注射用水。臨時注射溶液及懸浮液可利用無菌粉末、顆粒及錠劑來製備。
應瞭解，除上文所特定提及之成份以外，調配物可包括所論述之調配物類型之相關技術中為人熟知的其他藥劑，例如，適合用於口服給藥之彼等調配物可包括調味劑。
5.6. 實例
本發明之某些態樣可藉由以下實例理解。
5.6.1. AAK1基因剔除小鼠
用於AAK1基因阻斷之同型合子小鼠(-/-)係使用兩種方法製備：基因捕獲及同源重組。
基因捕獲為一種隨機插入突變誘發之方法，該方法將報導體基因或可選標識基因之DNA編碼片段用作突變劑。基因捕獲載體設計用於以允許細胞剪接機制將載體編碼外顯子剪接至細胞訊息核糖核酸(mRNA)之方式整合至介入子或基因中。通常情況下，基因捕獲載體含有可選標識序列，該序列在強剪接受體序列之後，但先於促進序列。因此，當該等載體整合至基因中時，細胞剪接機制會從已捕獲基因將外顯子剪接至可選標識序列之5'末尾。通常，該等可選標識基因僅在基因之編碼載體整合至介入子中時表達。隨後，藉由選擇可在選擇性培養中生存之細胞來識別所導致之基因捕獲事件。
胚胎幹細胞(得自於衍生鼠株A129之Lex-1細胞)藉由涉及將至少一部份經基因工程處理之載體序列插入感興趣基因中之過程而發生突變，發生突變之胚胎幹細胞經顯微注射至胚囊內，隨後，該等胚囊導入假孕母體中，並使用既定方法形成胚胎。舉例而言，請參看「Mouse Mutagenesis」，1998，Zambrowicz等人編輯，Lexicon Press，The Woodlands，TX。隨後，所得的嵌合動物經繁殖以繁育出後代，該等後代能夠實現等位基因之生殖系傳遞，該等位基因在感興趣基因中含有經工程處理之突變。
亦利用同源重組培育出AAK1基因阻斷小鼠。在此情況下，鼠性AAK1基因之第二編碼外顯子(參看基因銀行登記號NM_177762)已藉由該項技術所熟知之方法移除。舉例而言，請參看美國專利第5,487,992號、第5,627,059號及第5,789,215號。
AAK1基因阻斷同型的合子小鼠(-/-)之研究結合了AAK1基因阻斷的異型合子小鼠(+/-)及野生型(+/+)同窩幼畜。在此分析中，小鼠經受醫學處理，該處理使用了設計用於評估哺乳類動物受試者之主要器官系統之功能的整套醫學診斷程序。同型合子(-/-)「基因剔除」小鼠之研究結合了其異型合子(+/-)及野生型(+/+)同窩幼畜。AAK1基因阻斷由南方分析確定。AAK1鼠性同系物之表達由RT-PCR在鼠腦、脊髓、眼、胸腺、脾臟、肺、腎、肝、骨骼肌、骨、胃、小腸及結腸、心臟、脂肪、哮喘疾病肺、LPS肺、血液、帶狀心臟、主動脈樹、前列腺及乳腺中偵測到；(5周初生，成熟，12 DPC， 產後3天(泌乳)，3天斷奶(早衰)，及7天斷奶(晚衰))。
使用福馬林爪子測試來測試AAK1同型合子(-/-)及其野生型(+/+)同窩幼畜，以便評估其急性及緊張性傷痛刺激反應。在該等測試中，使用了自動傷痛刺激分析器(購自聖地亞哥市加利福尼亞大學Ozaki實驗室)。測試開始30分鐘前，在每一小鼠左側後爪周圍放置金屬條。30分鐘馴化期後，在左側後爪脊背表面，皮下注射20 μl的5%福馬林。將小鼠單獨放入圓筒艙室內達45分鐘。電腦經由電磁場記錄每分鐘的腿部收縮次數、階段I內收縮總次數(急性階段=前8分鐘)，及階段II內之收縮次數(緊張性階段=20分鐘至40分鐘期間)。請參看Yaksh TL、Ozaki G、McCumber D、Rathbun M、Svensson C、Malkmus S、Yaksh MC。「An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay」J Appl Physiol.，2001；90：2386-402。
如第1圖所示，第1階段及第2階段之資料係使用同型合子(-/-)雌性小鼠(n=16)、野生型雌性(n=15)、同型合子(-/-)雄性小鼠(n=9)及野生型雄性小鼠(n=18)而獲得。在所有組及兩個階段內，AAK1同型合子(-/-)小鼠展示出的縮爪記錄次數大大少於其野生型(+/+)同窩幼畜。
5.6.2 [3-(4-胺甲基-苯基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-丁基-胺之合成
A部份 丁基-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基-胺
含5-氯-唑並[1,5-a]嘧啶[29274-24-](955.4 mg，6.2 mmol)的丁基胺[109-73-9](6.2 ml，62.7 mmol)溶液，由N2包覆下，在65℃下磁力攪拌達17小時，然後在鹽水(利用飽和水溶性酸式碳酸鈉將pH調整至10)與乙酸乙酯之間分隔。相分離萃取物經乾燥(MgSO4)後，用庚烷稀釋以析出丁基-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基-胺，該化合物為1.2 g黃色粉末，熔點為75℃至76℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 0.91(t,J=7.33 Hz,3 H)1.37(dq,J=15.00,7.29 Hz,2 H)1.47-1.59(m,2 H)3.24-3.34(m,2 H)5.94(d,J=1.52 Hz,1 H)6.22(d,J=7.58 Hz,1 H)7.35(br.s.,1 H)7.74(d,J=2.27 Hz,1 H)8.40(d,J=7.58 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 13.69、19.71、30.65、91.00、99.95、134.70、143.45、148.37、155.43。LRMS(ESI)m/z 191.1[(M+H)]+，為針對C10H14N4：190.25計算所得。
B部份 (3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-丁基-胺
將乙酸鈉[127-09-3](0.7 g，8.9 mmol)添加至含丁基-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基-胺(1.1 g，5.9 mmol)的冰醋酸(100 mL)溶液，且在環境溫度下攪拌，直至全部固體溶解。將溴[7726-95-6](0.3 ml，6.4 mmol)逐滴添加至在環境溫度下已緩衝5分鐘以上之乙酸反應溶液。完成溴的添加後，允許再 攪拌懸浮液達15分鐘，然後緩慢傾倒入500 mL攪拌水中。將飽和水溶性酸式碳酸鈉添加至已攪拌之懸浮液，直至上清液之pH值經pH試紙鑒定約為8，然後用乙酸乙酯萃取懸浮液。萃取物經乾燥(MgSO4)及急驟層析(矽膠經60%(v/v)乙酸乙酯/庚烷溶析)以產生1.2 g米白色固體，熔點為94℃至95℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 0.93(t,J=7.33 Hz,3 H)1.31-1.44(m,2 H)1.56(quin,J=7.20 Hz,2 H)3.31-3.38(m,2 H)6.28(d,J=7.58 Hz,1 H)7.61(t,J=5.05 Hz,1 H)7.85(s,1 H)8.42(d,J=7.58 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 13.67、19.64、30.53、76.99、100.87、135.14、143.03、145.13、156.09。LRMS(ESI)m/z 269.0/271.0[(M+H)]+，為針對C10H13BrN4：269.15計算所得。
C部份 [3-(4-胺甲基-苯基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-丁基胺
向盛放在50 mL圓底燒瓶中，與二氯甲烷[95464-05-4](117.2 mg，0.1 mmol)錯合之(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-丁基-胺(350.3 mg，1.3 mmol)、4-甲基苯基硼胺、氫氯酸鹽[75705-21-4](337.1 mg，1.8 mmol)、單水合三元磷酸鉀[27176-10-9](601.6 mg，2.6 mmol)及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)之混合物中添加含30%(v/v)水的1,2-二甲氧乙烷(25 mL)溶液內，並用磁力攪拌棒攪拌。 將反應罐裝入回流冷凝器，降低至環境溫度油浴中，然後對該系統實施10次抽真空/N2包覆，同時快速攪拌。經快速攪拌及N2包覆，反應加熱至85℃油浴溫度達17小時，然後冷卻，並在鹽水與乙酸乙酯之間分隔。相分離萃取物經乾燥(MgSO4)及蒸發以生成棕色油脂，該油脂經製備RP-HPLC純化後得到71.9 mg之[3-(4-胺甲基-苯基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-單乙酸丁基胺酯，呈白色固體狀，熔點為171-172℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 0.97(t,J=7.39 Hz,3 H)1.43(sxt,J=7.36 Hz,2 H)1.64(quin,J=7.17 Hz,2 H)3.43(q,J=6.47 Hz,2 H)3.71-3.84(m,2 H)6.29(d,J=7.50 Hz,1 H)7.34(m,J=8.16 Hz,2 H)7.62-7.71(m,1 H)8.05(m,J=7.94 Hz,2 H)8.32(s,1 H)8.46(d,J=7.50 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 13.03、14.11、19.63、29.11、30.33、44.34、45.62、103.75、124.02、124.14、126.95、127.86、131.85、135.07、137.50、141.15、141.36、144.46、155.50、172.52。LRMS(ESI)m/z 296.1[(M+H)]+，為針對C17H21N5：295.39計算所得。
5.6.3 (2-甲氧基-乙基)-{3-[4-(1H-四唑-5-基)-苯基]-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基}-胺之合成
A部份 N-(2-甲氧乙基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-胺
5-氯-唑並[1,5-a]嘧啶[29274-24-6](525.5 mg，3.4 mmol)與2-甲氧基乙基胺(3.0 ml，34.5 mmol)之混合物攪拌後經加熱至65℃達17小時，然後冷卻並在鹽水(利用飽和水溶性酸式碳酸鈉將pH值調整至8)與乙酸乙酯之間分隔。萃取物經乾燥(MgSO4)及蒸發後得到706.4 mg之淺黃色固體。LRMS(ESI)m/z 193.1[(M+H)]+，為針對C9H12N4O：192.22計算所得。
B部份 (3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-(2-甲氧基乙基)-胺
將乙酸鈉[127-09-3](457.6 mg，5.6 mmol)添加至含N-(2-甲氧乙基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-胺(706.4 mg，3.7 mmol)的冰醋酸(40 mL)溶液，並在環境溫度下攪拌，直至全部固體溶解。將溴[7726-95-6](0.2 ml，3.7 mmol)添加至環境溫度已緩衝之乙酸反應溶液，使反應持續2分鐘以上，然後將反應溶液緩慢傾倒入攪拌水(1L)。添加固態酸式碳酸鈉後，pH值增高，直至上清液之pH值經pH試紙鑒定為約8。析出產物經過濾隔離，用水清洗濾餅，並允許乾燥後生成819.6 mg白色粉末。LRMS(ESI)m/z 271.0/273.0[(M+H)]+，為針對C9H11BrN4O：271.12計算所得。
C部份 (2-甲氧基乙基)-{3-[4-(1H-四唑-5-基)-苯基]-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基}-胺
向盛放在50 mL圓底燒瓶中，並與二氯甲烷[95464-05-4](106.3 mg，0.1 mmol)錯合之(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-(2-甲氧基乙基)-胺(307.7 mg，1.1 mmol)、(4-(1H-四唑-5-基)苯基)硼酸[179942-55-3](259.6 mg，1.4 mmol)、三元單水合磷酸鉀[27176-10-9](522.4 mg，2.3 mmol)與[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)之混合物添加含30%(v/v)水的1,2-二甲氧乙烷(12 mL)溶液，並用磁力攪拌棒攪拌。將反應罐裝入回流冷凝器，降低至環境溫度油浴中，然後對該系統實施10次抽真空/N2包覆，同時快速攪拌。經快速攪拌及N2包覆，反應加熱至85℃油浴溫度達4小時，然後冷卻，用甲醇稀釋，並實施重力過濾。濾出液在矽膠上預先吸收並急驟層析(矽膠經含1% NH4OH之10%(v/v)甲醇/乙酸乙酯溶析)。預期層析殘液經合併、蒸發、再溶解於2-丙醇及重力過濾至攪拌庚烷以析出純化產物。(2-甲氧基乙基)-{3-[4-(1H-四唑-5-基)-苯基]-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基}-胺經過濾隔離得出96.3 mg的固體物質，該物質熔點為264℃至265℃(分解點)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 3.63(t,J=4.29 Hz,5 H)6.41(d,J=7.58 Hz,1 H)7.88(br.s.,1 H)8.04(m,J=8.59 Hz,2 H)8.31(m,J=8.34 Hz,2 H)8.47(s,1 H)8.53(d,J=7.58 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 40.69、58.48、70.48、100.86、103.75、119.86、125.23、127.61、135.97、137.08、142.42、145.63、156.60，LRMS(ESI)m/z 337.2[(M+H)]+，為針對C16H16N8O：336.36計算所得。
5.6.4 甲基-[2-(3-噻吩-2-基-唑並[1,5-a]嘧啶-5-胺基)乙基]-胺甲酸三級丁酯之合成
A部份 3-酮基-2-噻吩-2-基-丙腈
將噻吩-2-基-乙腈[20893-30-5](6.7 ml，62.6 mmol)添加至N2包覆之0℃攪拌溶液中，該溶液為含21重量%之乙氧化鈉(25.7 ml，68.9 mmol)的乙醇(100 mL)溶液。5分鐘後，添加甲酸乙酯[109-94-4](12.6 ml，156.7 mmol)，且將生成之溶液攪拌20分鐘。然後，移走冰浴並置換為加熱套。反應經加熱至回流，使回流持續2小時，冷卻，並蒸發以產生黃色固體。將粗產物溶解於水，將溶液冷凍至0℃並利用水溶性鹽酸酸化，以析出米白色粉末。產物經過濾隔離，用水清洗並乾燥以生成7.4 g。LRMS(ESI)m/z 152.0[(M+H)]+，為針對C7H5NOS：151.19計算所得。
B部份 4-噻吩-2-基-2H-吡唑-3-基胺
將水合肼[7803-57-8](4.8ml，99.0mmol)及乙酸[64-19-7](5.6 ml，97.8 mmol)先後添加至含3-酮基-2-噻吩-2-基-丙腈(7.4 g，49.0 mmol)之乙醇(100 mL)溶液。然後，將溶液加熱至回流，使回流持續2小時。冷卻反應經蒸發至乾燥，且將所產生之固體在水中濕磨。產物經過濾隔離，用水清洗並並乾燥以產生4-噻吩-2-基-2H-吡唑-3-基胺，該化合物為7.1 g的精細米白色粉末，熔點為183-184℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 2.51(s,1 H)7.01-7.10(m,2 H)7.27(dd,J=5.05,1.01 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 121.07、121.47、127.58、135.85。LRMS(ESI)m/z 166.0[(M+H)]+，為針對C7H7N3S：165.22計算所得。
C部份 3-噻吩-2-基-4H-唑並[1,5-a]嘧啶-5-酮
將含21重量%之乙氧化鈉的乙醇(32.7 ml，87.6 mmol)溶液緩慢添加至處於環境溫度且含4-噻吩-2-基-2H-吡唑-3-基胺(4.1 g，25.0 mmol)及1,3-二甲基嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮[874-14-6](3.9 g，27.5 mmol)之乙醇(217 mL)攪拌懸浮液。經添加處理後，固體溶解產生清澈的棕色溶液。將溶液加熱至回流，使回流持續2天，再經冷卻，然後傾倒入5%(w/v)之水溶性氯化銨中。乙醇蒸發盡後，將體積減少之產物溶液在冰浴中冷凍，同時攪拌，以析出3-噻吩-2-基-4H-唑並[1,5-a]嘧啶-5-酮，該化合物為3.2 g的紅棕色精細晶狀粉末，熔點為231-232℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 6.13(br.s.,1 H)7.10(dd,J=5.05,3.54 Hz,1 H)7.38-7.46(m,2 H)8.07(br.s.,1 H)8.51-8.73(m,1 H)12.06(br.s.,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 123.66、127.71、138.70、142.47。LRMS(ESI)m/z 218.0[(M+H)]+，為針對C10H7N3OS：217.25計算所得。
D部份 甲基-[2-(3-噻吩-2-基-唑並[1,5-a]嘧啶-5-胺基)-乙基]-胺甲酸三丁酯
將1,8-二氮雜環十一-7-烯(DBU)[6674-22-2](0.4 ml，2.5 mmol)添加至處於環境溫度之已攪拌混濁溶液，該溶液為含3-噻吩-2-基-4H-唑並[1,5-a]嘧啶-5-酮(354.3 mg，1.6 mmol)、(2-胺基乙基)-甲基-胺甲酸三丁酯[121492-06-6](852.2 mg，4.9 mmol)與(苯并三唑-1-氧基)三(二甲基胺基)六氟磷酸鏻(BOP)[56602-33-6](937.7 mg，2.1 mmol)之乙腈(16 mL)溶液。添加DBU後，混濁變清且溶液可攪拌長達2天，然後在鹽水與乙酸乙酯之間分隔。萃取物經乾燥(MgSO4)及急驟層析(矽膠(矽膠經10%(v/v)甲醇/乙酸乙酯溶析)。蒸發產物殘液後得到油脂，利用庚烷使該油脂結晶以產生甲基-[2-(3-噻吩-2-基-唑並[1,5-a]嘧啶-5-胺基)乙基]-胺甲酸三丁酯，該化合物為333.6 mg的黃色精細晶狀粉末，熔點為140℃至141℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm(存在旋轉異構物)1.16-1.28(m,5 H)1.37(br.s.,3 H)2.51(s,1 H)2.85(br.s.,3 H)3.47(br.s.,1 H)3.55(br.s.,3 H) 6.28(d,J=6.82 Hz,1 H)7.04(dd,J=5.05,3.54 Hz,1 H)7.30(dd,J=5.05,1.01 Hz,1 H)7.41(br.s.,1 H)7.80(br.s.,1 H)8.19(s,1 H)8.48(d,J=7.07 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 27.81、27.96、33.75、38.41、46.32、78.13、100.28、100.76、120.16、121.75、126.90、135.01、135.20、140.78、143.74、154.91、155.81。LRMS(ESI)m/z 374.1[(M+H)]+，為針對C18H23N5O2S：373.48計算所得。
5.6.5 異丙基(2-((3-(3-甲氧吡啶-4-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)乙基)(甲基)-胺基甲酸酯之合成
A部份 3-溴-5-氯-唑並[1,5-a]嘧啶
將乙酸鈉[127-09-3](24.1 g，293.9 mmol)添加至含5-氯-唑並[1,5-a]嘧啶[29274-24-6](30.1 g，195.7 mmol)之冰醋酸(395 mL)溶液，並允許在環境溫度下攪拌直至全部固體溶解。然後，準備冰浴，將溶液冷凍至0℃。將溴[7726-95-6](11.0 ml，214.7 mmol)逐滴添加至0℃之已緩衝乙酸反應溶液中達35分鐘以上，該溶液逐漸變為濃稠之攪拌懸浮液。溴添加完成後，允許再攪拌該懸浮液達15分鐘，然後將其緩慢傾倒入含焦亞硫酸鈉[7681-57-4]且已在冰浴中攪拌之水溶性(5% w/v)溶液(1 L)中。將固體氫氧化鈉[1310-73-2]顆粒添加至攪拌懸浮液，添加速率可維持內部溫 度低於40℃，直至上清液之pH值經pH試紙鑒定約為8。析出之產物經過濾隔離，用水清洗濾餅，並允許將其乾燥以生成39.8 g的淺黃色粉末，熔點為173℃至174℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 7.22(d,J=7.33 Hz,1 H)8.44(s,1 H)9.21(d,J=7.07 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 82.84、109.99、138.94、143.76、145.61、151.18。LRMS(ESI)m/z 231.8/233.8/235.8[(M+H)]+，為針對C6H3BrClN3：232.47計算所得。
B部份 三丁基(2-((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯
向465 mg(2.00 mmol)3-溴-5-氯唑並[1,5-a]嘧啶中添加三丁基(2-胺基乙基)(甲基)胺基甲酸酯(522 mg，3.00 mmol)、4 mL異丙醇及三乙胺(0.56 ml，4.00 mmol)。使用微波將所產生之混合物在140℃下加熱0.5小時。用EtOAc稀釋混合物，並用水及鹽水清洗。有機層經MgSO4乾燥，濃縮後在採用20%至100% EtOAc/Hex洗脫之矽膠柱上純化，以獲取607 mg(82%)的期望產物。
C部份 N1-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-N2-甲基乙烷-1,2-二胺
三丁氧基羰基可用以下方式除去：將600 mg(1.62 mmol)的三丁基(2-((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯溶解於4 mL DCM中，然後添加4 mL TFA，在室溫下攪拌0.5小時，並將混合物濃縮以100%產出率生成期望產物之TFA鹽(622 mg)。
D部份 異丙基(2-((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯
向溶解於20 mL DCM中之1.0當量胺(TFA鹽)(384 mg，1.000 mmol)添加3.0當量(368 mg，3.000 mmol)氯甲酸異丙酯、4.0當量三乙胺(404 mg，4.000 mmol)。將所產生之混合物在室溫下攪拌0.5小時，並用DCM(30 mL)稀釋，用水及鹽水清洗，經MgSO4乾燥，然後濃縮。粗殘液在採用1%至10% MeOH/DCM洗脫之矽膠(ISCO)中純化，以獲取期望產物(產出率為87%)。
E部份 異丙基(2-((3-(3-甲氧吡啶-4-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)乙基)(甲基)-胺基甲酸酯
向80 mg(0.22 mmol)異丙基(2-((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)乙基)(甲基)-胺基甲酸酯中添加(3-甲氧吡啶-4-基)二水合硼酸(56 mg，0.27 mmol)、K3PO4(143 mg，0.67 mmol)、PdCl2(PPh3)2(16.8 mg，0.022 mmol)、3 mL DME及1 mL水。該混合物在140℃下微波加熱0.5小時。冷 卻後，用EtOAc稀釋該混合物，並用水及鹽水清洗。有機層經MgSO4乾燥，再經濃縮，然後在PREP HPLC上純化，以按77%產出率生成期望產物(66.4 mg)。1H NMR(400 MHz,Acetone)δ ppm 2.87(br.s.,3 H)2.99(br.s.,3 H)3.58-3.71(m,2 H)3.73-3.82(m,2 H)4.09(s,3 H)4.82(td,J=6.25,2.91 Hz,1 H)6.45(br.s.,1 H)8.21(br.s.,1 H)8.35(s,1 H)8.43(d,J=6.06 Hz,1 H)8.58(s,1 H)8.77(br.s.,1 H)；LRMS(ESI)m/e 385.0[(M+H)+，為針對C19H24N6O3 384.0計算所得]。
5.6.6 (S)-三-丁基2-(((3-(4-(胺甲基)苯基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成
A部份 (S)-三丁基2-(((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯
在實例5.6.5中所描述之胺置換條件下，3-溴-5-氯唑並[1,5-a]嘧啶與(S)-三丁基2-(胺甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之反應生成74%之產物。
B部份 (S)-三丁基2-(((3-(4-(胺甲基)苯基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)-吡咯啶-1-羧酸酯
在實例5.6.5中所描述之相同條件下，(S)-三丁基2-(((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯與 (4-(胺甲基)苯基)硼酸之鈴木耦合可按73%產出率生成標題化合物。1H NMR(400 MHz，甲醇-d4)δ ppm 1.44(br.s.,9 H)1.90(dd,J=9.92,5.51 Hz,1 H)1.96-2.11(m,3 H)3.35-3.45(m,4 H)4.07-4.21(m,3 H)6.33(br.s.,1 H)7.46(d,J=8.38 Hz,2 H)8.19(br.s.,2 H)8.25-8.36(m,2 H)；LRMS(ESI)m/e 423.0[(M+H)+，為針對C23H30N6O2 422.0計算所得]。
5.6.7 (S)-三丁基2-(((3-(2-甲氧基苯基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成
在實例5.6.5中所描述之相同條件下，(S)-三丁基2-(((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯與(2-甲氧基苯基)硼酸之鈴木耦合可按68%產出率生成標題化合物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.50(s,9 H)1.85-2.12(m,4 H)3.40(dd,J=7.58,4.04 Hz,2 H)3.46-3.59(m,1 H)3.59-3.67(m,1 H)3.94(s,3 H)4.19(br.s.,1 H)6.07(d,J=7.07 Hz,1 H)6.99(d,J=7.58 Hz,1 H)7.06(td,J=7.45,1.01 Hz,1 H)7.15-7.22(m,1 H)8.14-8.28(m,1 H)8.45(d,J=6.82 Hz,1 H)8.51(s,1 H)；LRMS(ESI)m/e 424.0[(M+H)+，為針對C23H29N5O3 423.0計算得出]。
5.6.8 (S)-三丁基2-(((3-(三氯甲基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成
A部份 (S)-三丁基2-((唑並[1,5-a]嘧啶-5-胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯
在實例5.6.5中所描述之胺置換條件下，市售5-氯唑並[1,5-a]嘧啶與(S)-三丁基2-(胺甲基)吡咯啶-1-羧酸酯反應以按96%產出率生成產物。
B部份 (S)-三丁基2-(((3-吲哚唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯
將(S)-三丁基2-((唑並[1,5-a]嘧啶-5-胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯(790 mg，2.490 mmol)溶解於10 mL DMF中，并向其中添加NIS(617 mg，2.740 mmol)。在室溫下將此混合物攪拌4小時，再用10 mL水使其驟冷。然後，用50 mL EtOAc稀釋此混合物，分離出有機層，並用鹽水清洗兩次，再用MgSO4乾燥。有機層經濃縮，並在採用20%至100% EtOAc/Hex洗脫之矽膠上純化，獲得1.03 g(93%)米白色固體。
C部份 (S)-異丙基2-(((3-(三氯甲基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯
向溶解於2 mL DMF之221.5 mg(0.50 mmol)芳基碘化物添加2,2-二氟-2-(氟磺醯)乙酸甲酯(0.77g，4.00 mmol)、CuI(762 mg，2.00 mmol)、HMPA(0.41 ml，3.50 mmol)。在預加熱至90℃達0.75小時之油浴內攪拌此混合物。反應冷卻至室溫，並用NH4Cl飽和水溶性溶液驟冷。使用30 mL EtOAc萃取，再用鹽水清洗，並經MgSO4乾燥。所得產物經濃縮及在PREP HPLC上純化，以獲取81 mg(42%)期望產物。1H NMR(400 MHz，甲醇-d4)δ ppm 1.44(s,9 H)1.86-1.99(m,3 H)1.99-2.07(m,1 H)3.40(br.s.,3 H)3.61(br.s.,1 H)4.11(br.s.,1 H)6.37(br.s.,1 H)7.98(s,1 H)8.33(br.s.,1 H)；LRMS(ESI)m/e 386.0[(M+H)+，為針對C17H22F3N5O2 385.0計算所得]。
5.6.9 4-[3-(3-甲氧基-吡啶-4-基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯之合成
A部份 3-溴-5-六氫吡嗪-1-基-唑並[1,5-a]嘧啶
在研鉢中將3-溴-5-氯-唑並[1,5-a]嘧啶(15.4 g，66.2 mmol)及六氫吡嗪[110-85-0](56.8 g，659.5 mmol)一同磨 碎至均勻混合物，並轉移至250 mL圓底燒瓶中，該燒瓶中含有磁力攪拌棒。將燒瓶裝入回流冷凝器，再經N2包覆，然後將反應罐浸沒入處於環境溫度之油浴。攪拌純固體混合物時，將油浴加熱至120℃達持續0.5小時以上，然後保持在常溫狀態下共2天。移走油浴，將熔融反應冷卻至約75℃。將乙酸乙酯小心地向下添加至冷凝器以溶解反應產物，防止乙酸乙酯凝固為固體塊。將反應溶液轉移至分液漏斗，用乙酸乙酯進一步稀釋，並用水清洗。乙酸乙酯萃取物經乾燥(MgSO4)及蒸發以獲取16.1 g澄清的黃色油脂。油脂經由甲醇結晶以產生15.8 g淺黃色晶狀粉末，產出量有兩種，熔點為108℃至109℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 2.51(s,1 H)3.16-3.24(m,3 H)3.38(s,1 H)3.93-4.00(m,3 H)6.85(d,J=7.83 Hz,1 H)8.03(s,1 H)8.78(d,J=8.08 Hz,1 H)9.61(br.s.,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 41.25、42.16、77.73、97.78、136.77、144.01、144.18、155.53。LRMS(ESI)m/z 282.0/284.0[(M+H)]+，為針對C10H12BrN5：282.14計算所得。
B部份 4-(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯
在10分鐘之過程中，向已快速攪拌、經N2包覆、0℃且含有3-溴-5-六氫吡嗪-1-基-唑並[1,5-a]嘧啶(15.8 g，56.0 mmol)及休尼格鹼[7087-68-5](20.0 ml，114.8 mmol)之乙酸乙酯(280 mL)溶液內平穩添加1.0 M含氯甲酸異丙酯之甲苯(67.0 mL)溶液。反應允許攪拌該溶液並加溫至環境溫度隔夜時間，同時用鹽水清洗、乾燥(MgSO4)、預載入矽膠、層析(矽膠經100%乙酸乙酯溶析)並藉由乙酸乙酯/庚烷生成13.2 g白色粉末，熔點為78℃至79℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.22(d,J=6.32 Hz,6 H)3.44-3.54(m,4 H)3.67-3.79(m,4 H)4.82(spt,J=6.23 Hz,1 H)6.77(d,J=7.83 Hz,1 H)7.97(s,1 H)8.69(d,J=7.83 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 21.94、42.80、43.87、68.17、77.32、97.66、136.47、143.87、144.40、154.29,155.64。LRMS(ESI)m/z 368.0/370.0[(M+H)]+，為針對C14H18BrN5O2：368.24計算所得。
C部份 4-[3-(3-甲氧基-吡啶-4-基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯
向盛放在50 mL圓底燒瓶中，與二氯甲烷[95464-05-4](102.4 mg，0.1 mmol)錯合之4-(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯(385.0 mg，1.1 mmol)、水合3-甲氧基吡啶-4-硼酸[1072952-50-1](229.7 mg，1.34 mmol)、三元單水合磷酸鉀[27176-10-9](516.3 mg，2.2 mmol) 及[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)之混合物添加含30%(v/v)水的1,2-二甲氧乙烷(25 mL)溶液，並用磁力攪拌棒攪拌。將反應罐裝入回流冷凝器，降低至環境溫度油浴中，然後對系統實施10次抽真空/N2包覆，同時快速攪拌。經快速攪拌及N2包覆，反應加熱至85℃油浴溫度達17小時，然後冷卻，並在鹽水(pH值經3N水溶性氫氧化鈉調整至10)與乙酸乙酯之間分隔。相分離萃取物經乾燥(MgSO4)及蒸發以生成橙色油脂，該油脂經製備RP-HPLC純化。將隔離產物溶解於甲醇、用濃縮鹽酸稀釋、蒸發至乾燥、再次溶解於甲醇，並經由添加二乙醚析出。析出物經過濾得到100.5 mg產物單羥氯酸鹽，呈黃色粉末狀，熔點為206℃至207℃(分解點)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.23(d,J=6.39 Hz,6 H)2.51(s,2 H)3.53-3.59(m,4 H)3.85(br.s.,3 H)4.13(s,3 H)4.84(spt,J=6.25 Hz,1 H)6.96(d,J=7.94 Hz,1 H)8.42(d,J=6.39 Hz,1 H)8.48(s,1 H)8.76(s,1 H)8.86(d,J=7.94 Hz,1 H)9.06(d,J=6.17 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 21.97、42.79、44.23、57.17、68.25、97.56、98.39、120.03、123.90、137.27、137.05、137.95、146.48、147.00、151.80、154.26、156.66。LRMS(ESI)m/z 397.1[(M+H)]+，為針對C20H24N6O3：396.45計算所得。
5.6.10 4-[3-(2-甲氧基-苯基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯之合成
使用與實例5.6.9之製備方式類似之製備方式，利用4-(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯(385.0 mg，1.1 mmol)及2-甲氧基苯基硼酸[5720-06-9](191.8 mg，1.3 mmol)生成76.4 mg黃色粉末，作為遊離鹼，熔點為57℃至59℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.22(d,J=6.32 Hz,6 H)3.48-3.54(m,4 H)3.68-3.77(m,4H)3.87(s,3 H)4.77-4.85(m,1 H)6.76(d,J=7.83 Hz,1 H)6.94-7.07(m,2 H)7.10-7.18(m,1 H)8.38(dd,J=7.71,1.64 Hz,1 H)8.43(s,1 H)8.71(d,J=8.08 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 21.95、44.07、55.32、68.14、96.93、101.10、111.29、120.48、121.64、125.83、127.67、136.28、145.00、154.31、155.25、155.51。LRMS(ESI)m/z 396.1[(M+H)]+，為針對C21H25N5O3：395.47計算所得。
5.6.11 (S)-三丁基2-(((3-(2乙基苯基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成
在實例5.6.5所描述之相同條件下，(S)-三丁基2-(((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯與(2-乙基苯基)硼酸之鈴木耦合以77%產出率得到了標題化合 物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.20(t,J=7.58 Hz,3 H)1.49(s,9 H)1.79-1.95(m,3 H)1.95-2.05(m,1 H)2.82(q,J=7.58 Hz,2 H)3.34-3.44(m,3 H)3.44-3.53(m,1 H)4.15(br.s.,1 H)6.08(d,J=6.82 Hz,1 H)7.23-7.31(m,3 H)7.32-7.38(m,1 H)7.51(dd,J=7.20,1.39 Hz,1 H)7.91(s,1 H)8.20(d,J=6.32 Hz,1 H)；LRMS(ESI)m/e 422.0[(M+H)+，為針對C24H31N5O2 421.0計算所得]。
5.6.12 (S)-三丁基2-(((3-(2-[D3]甲氧基苯基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之合成
A部份 2-(2-[D3]甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷
向溶解於6 mL DMSO中之2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)酚(100 mg，0.455 mmol)添加氘化甲基碘(132 mg，0.909 mmol)，然後添加60% NaH(22 mg，0.909 mmol)。所產生之混合物在室溫下經整夜攪拌。用25 mL EtOAc稀釋混合物，並用水及鹽水清洗。用MgSO4乾燥，並濃縮以獲得108 mg(100%)醚產物。
B部份 (S)-三丁基2-(((3-(2-[D3]甲氧基苯基)唑並 [1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)-吡咯啶-1-羧酸酯
在實例5.6.5中所描述之鈴木反應條件下，2-(2-[D3]甲氧基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷與(S)-三丁基2-(((3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)胺基)甲基)吡咯啶-1-羧酸酯之反應生成標題化合物，產出率為70%。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.51(s,9 H)1.83-2.11(m,4 H)3.40(dd,J=7.45,3.92 Hz,2 H)3.47-3.59(m,1 H)3.59-3.66(m,1 H)4.20(br.s.,1 H)6.07(d,J=7.07 Hz,1 H)6.96-7.02(m,1 H)7.06(td,J=7.52,1.14 Hz,1 H)7.15-7.24(m,1 H)8.19(d,J=6.32 Hz,1 H)8.46(d,J=6.82 Hz,1 H)8.51(s,1 H)；LRMS(ESI)m/e 427.0[(M+H)+，為針對C23H26D3N5O3 426.0計算得出]。
5.6.13 4-[3-(2-甲氧基-吡啶-3-基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯之合成
使用與實例5.6.9之製備方式類似之製備方式，利用4-(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯(338.7 mg，0.9 mmol)及2-甲氧基-3-吡啶硼酸[163105-90-6](169.4 mg，1.1 mmol)以生成76.0 mg黃色粉末，作為遊離鹼，熔點為131℃至132℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.22 (d,J=6.06 Hz,6 H)3.47-3.56(m,4 H)3.71-3.80(m,4 H)4.00(s,3 H)4.82(spt,J=6.23 Hz,1 H)6.81(d,J=8.08 Hz,1 H)7.08(dd,J=7.45,4.93 Hz,1 H)7.98(dd,J=4.93,1.89 Hz,1 H)8.51(s,1 H)8.76(d,J=7.83 Hz,1 H)8.82(dd,J=7.58,2.02 Hz,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 21.95、42.85、44.06、53.10、68.16、97.21、98.90、116.40、117.17、134.55、136.43、141.99、144.65、144.71、154.26、155.46、158.89。LRMS(ESI)m/z 397.1[(M+H)]+，為針對C20H24N6O3：396.45計算所得。
5.6.14 4-[3-(1-甲基-2-酮基-1,2-二羥吡啶-3-基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-六氫吡嗪-1-羧酸 異丙酯之合成
使用與實例5.6.9之製備方式類似之製備方式，利用4-(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯及(1-甲基-2-酮基-1,2-二羥吡啶-3-基)硼酸以產生黃色粉末，作為遊離鹼，熔點為206℃至207℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.23(d,J=6.32 Hz,6 H)3.53(s,7 H)3.70-3.82(m,4 H)4.83(spt,J=6.23 Hz,1 H)6.37(t,J=6.82 Hz,1 H)6.78(d,J=7.83 Hz,1 H)7.55(dd,J=6.57,1.26 Hz,1 H)8.64(dd,J=7.20,1.14 Hz,1 H)8.72(d,J=7.83 Hz,1 H)8.96(s,1 H)。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 21.97、37.39、42.84、44.11、68.16、96.94、100.56、105.49、122.80、132.49、135.00、136.42、144.40、144.56、154.29、155.46、160.29。LRMS(ESI) m/z 397.1[(M+H)]+，為針對C20H24N6O3：396.45計算所得。
5.6.15 4-[3-(3-氟-2-甲氧基-苯基)-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基]-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯之合成
使用與實例5.6.9之製備方式類似之製備方式，利用4-(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸異丙酯(389.9 mg，1.1 mmol)及3-氟-2-甲氧基苯基硼酸[762287-59-2](216.2 mg，1.3 mmol)以生成153.8 mg淺黃色粉末，作為遊離鹼，熔點為52℃至53℃。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ ppm 1.22(d,J=6.32 Hz,6 H)3.49-3.56(m,4 H)3.75(dd,J=6.44,4.17 Hz,4 H)3.83(d,J=1.01 Hz,3 H)4.82(spt,J=6.23 Hz,1 H)6.81(d,J=8.08 Hz,1 H)7.06(ddd,J=11.37,8.08,1.52 Hz,1 H)7.16(td,J=8.08,5.81 Hz,1 H)8.23(dt,J=7.89,1.36 Hz,1 H)8.42(s,1 H)。19F NMR(377 MHz,DMSO-d6)δ ppm-131.42。13C NMR(100 MHz,DMSO-d6)δ ppm 21.95、42.83、44.05、60.38、68.16、97.24、99.94、99.98、112.72、112.90、123.22、124.06、127.98、136.39、143.40、143.51、144.25、144.49、154.28、154.63、155.53、157.04。LRMS(ESI)m/z 414.1[(M+H)]+，為針對C21H24FN5O3：413.46計算所得。
5.6.16 異丙基4-(3-(2-氟吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸之合成
將異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯(4g，10.86 mmol)、2-氟吡啶-3-硼酸水合物(3.44g，21.7mmol)、碳酸鉀(4.5g，32.6mmol)、Pd(OAc)2(24mg，0.1086mmol)及x-Phos(146mg，0.217mmol)在氮包覆下溶解於二噁烷及水中，並在80℃下攪拌2小時。然後，反應冷卻至室溫，經由具有乙酸乙酯之矽藻土塞過濾。在真空中縮減體積，再通過含75%至100%己烷/乙酸乙酯之原位(isco)化學氧化矽柱。所得產物加脫溴共同洗脫，然後在真空中縮減體積。所得產物經由IPAC再結晶3次，用庚烷清洗，然後經乾燥獲得889 mg產物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ 8.95(t,J=2.15 Hz,1H),8.78(d,J=7.83 Hz,1H),8.29(d,J=4.29 Hz,1H),8.00(d,J=4.80 Hz,1H),7.43(dt,J=2.40,4.99 Hz,1H),6.85(d,J=7.83 Hz,1H),4.78-4.87(m,1H),3.73-3.83(m,4H),3.48-3.58(m,4H),3.31(s,1H),1.22(d,J=6.06 Hz,6H)。LRMS(ESI)m/z 385[(M+H)]+，為針對C19H21FN6O2：384.42計算所得。
5.6.17 異丙基4-(3-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
向200 mL圓底燒瓶添加4.00 g(10.87 mmol)異丙 基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯、2.89 g(11.41 mmol)(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)硼酸、0.38 g(0.33 mmol)Pd(PPh3)4，並用攪拌棒攪拌。添加全部固體之後，添加60 ml 2% TPGS-750-M溶液，然後添加7.56 mL(54.35 mmol)三乙胺。
將反應燒瓶插入預熱至90℃之油浴，並用力攪拌。需攪拌約0.25小時才能使全部懸浮固體完全溶解。可觀測到數次顏色變化，其餘反應完成時所維持之最後顏色為極深的棕色。
1.5小時後，液相色譜(LCMS)顯示反應完成。此時可冷卻至室溫，用100 mL EtOAc稀釋。有機層經分離，且水溶性層經由40 mL EtOAc之份量兩次萃取。用鹽水清洗合併有機層，用MgSO4乾燥，然後濃縮。使用少量DCM溶解粗混合物，然後將其直接注入120 g矽膠柱上，以便在ISCO上分離。先採用40%之EtOAc/hex至100%之EtOAc之梯度洗脫25分鐘。期望產物未洗脫，僅得到一些溶析雜質。儘管如此，採用100%之EtOAc洗脫約10分鐘後，脫溴副產物開始與期望產物一同洗脫。儘管脫溴化合物遍佈在含有期望產物之全部殘液中，但脫溴化合物所佔百分比似乎隨時間急劇降低。因此，棄用含有的脫溴百分比為最高的初始殘液。剩餘殘液經濃縮以獲得純度為87%之3.4 g期望產物，粒徑為254 nm(約13%為脫溴化合物)。[基於1H NMR，粒徑為254 nm時脫溴之紫外線估計過高，而粒徑為220 nm時脫溴之紫外線估計過低]。使用IPAC及庚烷使該物質再結晶兩次以獲得3.16 g(70%產出率)期望產物，254粒徑紫外線估計純度超過99%。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.31(d,J=6.32 Hz,6 H)3.61-3.70(m,4 H)3.77(br.s.,4 H)4.08(s,3 H)5.00(quin,J=6.19 Hz,1 H)6.41(d,J=7.83 Hz,1 H)7.83(d,J=3.03 Hz,1 H)8.37(d,J=7.83 Hz,1 H)8.63-8.71(m,2 H)。LRMS(ESI)m/e 415[(M+H)+，為針對C20H23FN6O3 414計算得出]。
5.6.18 異丙基4-(3-(2-乙氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
向1公升圓底燒瓶添加15.00 g(40.76 mmol)異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯、8.85 g(52.99 mmol)(2-乙氧吡啶-3-基)硼酸、14.06 g(101.90 mmol)K2CO3、1.41 g(1.22 mmol)P(PPh3)4，並使用攪拌棒攪拌。添加全部固體後，添加200 ml MeCN，再添加100 mL水。將反應燒瓶插入預熱至85℃之油浴，並用力攪拌。此反應設置為回流。在85℃下攪拌約16小時後，允許冷卻至室溫並用200 mL EtOAc稀釋。有機層經分離，且水溶性層經由80 mL EtOAc之份量兩次萃取。用鹽水清洗合併有機層，用MgSO4乾燥，然後濃縮。使用少量DCM溶解粗混合物，然後將該混合物直接注入750 g矽膠柱上，以便在ISCO-XL上分離。先採用50% EtOAc/hex至100% EtOAc之梯度洗脫35分鐘。期望產物未洗脫，僅得到一些溶析雜質。儘管如此，採用100% EtOAc洗脫約10分鐘後，脫溴副產物開始與期望產物一同洗脫。儘管脫溴化合物遍佈在含有期望產物之全部殘液中，但脫溴化合物所佔百分比似乎隨時間降低。因此，棄用含有的脫溴百分比為最高的初始殘液。剩餘殘液經濃縮以獲得純度為86%之13.46 g期望產物，粒徑為254 nm(約14%為脫溴化合物)。使用IPAC及庚烷使該物質再結晶兩次以獲得11.4 g(68%產出率)期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.30(d,J=6.32 Hz,6 H)1.53(t,J=7.07 Hz,3 H)3.59-3.70(m,4 H)3.70-3.81(m,4 H)4.53(q,J=7.07 Hz,2 H)5.00(dt,J=12.44,6.28 Hz,1 H)6.38(d,J=7.83 Hz,1 H)6.98(dd,J=7.45,4.93 Hz,1 H)8.01(dd,J=4.93,1.89 Hz,1 H)8.37(d,J=7.83 Hz,1 H)8.70(s,1 H)8.76(dd,J=7.45,1.89 Hz,1 H)。LRMS(ESI)m/e 411[(M+H)+，為針對C21H26N6O3 410計算所得]。
5.6.19 2-甲氧乙基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 2-甲氧乙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
向溶解於120 mL之EtOAc中且處於0℃的10.00 g (35.44 mmol)3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)唑並[1,5-a]嘧啶中添加5.40 g(38.99 mmol)2-甲氧乙基氯化碳、再添加9.86 mL(70.88 mmol)TEA。5分鐘後，移走冰浴，並在室溫下攪拌反應混合物。5小時後，LCMS顯示反應完成。用EtOAc稀釋該化合物，並用鹽水驟冷，然後用MgSO4乾燥有機層。經濃縮，並在採用0%至9% MeOH/DCM洗脫之330 g柱上經ISCO純化後，得到期望產物12.63 g(93%)。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 3.42(s,3 H)3.62-3.69(m,6 H)3.73-3.82(m,4 H)4.26-4.35(m,2 H)6.36(d,J=7.83 Hz,1 H)7.86(s,1 H)8.27(d,J=7.83 Hz,1 H)。LRMS(ESI)m/e 384[(M+H)+，(doublet)，為針對C14H18BrN5O3 383計算所得]。
B部份 2-甲氧乙基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
向100 mL圓底燒瓶添加15.00 g(39.06 mmol)2-甲氧乙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯、7.17 g(46.88 mmol)(2-甲氧吡啶-3-基)硼酸、38 mL(273.44 mmol)TEA，再添加200 ml MeCN、100 mL水，然後添加0.21 g(0.29 mmol)Pd-132。將反應燒瓶插入預熱至85℃之油浴，並攪拌。1小時後，反應完成，且可冷卻至室溫，並用200 mL之EtOAc稀釋。有機層經分離，且水溶性層經150 mL份量之EtOAc兩次萃取。用鹽水清洗合併有機層，用MgSO4乾燥， 然後藉由矽膠薄墊過濾，並將濾出液濃縮以獲得14 g固體產物，[基於254 nm時的UV吸收估計，90%為期望產物及10%為脫溴副產物]。
將14 g所得固體全部溶解於100 mL DCE中，並添加500 mg Darco中使得所得固體經木炭處理。經加熱及攪拌約1.5小時後，冷卻且隨後經由矽藻土過濾，然後濃縮。所得產物呈清澈狀，足以再結晶，無需再經矽膠層析。再結晶實施方式為：將產物溶解在處於約75℃之少量IPAC中(使用幾毫升MeOH幫助固體溶解)。全部溶解後，添加庚烷後，析出物開始成形，並允許冷卻至0℃達1小時。然後，實施過濾及乾燥獲得13.1 g純度約為97%之產物。該物質經再結晶，獲得淡黃色固體狀12.45 g(77%產出率，純度超過99%)之期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)ppm 3.42(s,3 H)3.61-3.71(m,6 H)3.72-3.80(m,4 H)4.10(s,3 H)4.29-4.34(m,2 H)6.38(d,J=7.83 Hz,1 H)7.00(dd,J=7.45,4.93 Hz,1 H)8.04(dd,J=4.93,1.89 Hz,1 H)8.37(d,J=7.83 Hz,1 H)8.64(s,1 H)8.74(dd,J=7.45,1.89 Hz,1 H)。13C NMR(101 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 43.49、44.87、53.51、59.15、64.96、71.07、76.92、77.24、77.56、96.37、100.99、116.93、117.05、135.42、136.16、142.79、145.37、146.26、155.46、155.52、160.08。LRMS(ESI)m/e 413[(M+H)+，為針對C20H24N6O4 412計算所得]。
5.6.20 三丁基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 三丁基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
將3-溴-5-氯唑並[1,5-a]嘧啶(10g，43mmol)溶解於異丙醇。添加三丁基六氫吡嗪羧酸酯(9.61g，51.6mmol)、二異丙基乙胺(22.4ml，129mmol)並在65℃下攪拌整夜。反應冷卻至室溫，用水稀釋並濾出固體產物。固體用水清洗、乾燥以獲得15.84 g粗產物留待進一步反應，不予改變。LRMS(ESI)m/z 382/384[(M+H)]+，為針對C15H20BrN5O2：382.2計算所得。
B部份 三丁基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
三丁基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯(15.84g，41.5mmol)、2-甲氧基吡啶-3-硼酸(12.68g，82.9mmol)、碳酸鉀(17.16g，124.5mmol)、Pd(OAc)2(92mg，4.15mmol)及x-Phos(394mg，8.3mmol)經氮包覆溶解於60 mL二噁烷及30mL水中，並在75℃下攪拌達2小時。然後，反應冷卻至室溫，用甲苯稀釋，並用鹽水清洗。有機層經由 硫酸鎂及矽藻土塞過濾。在真空內縮減體積，然後經由ISCO矽柱用己烷：乙酸乙酯0-100%洗脫。該產物加上脫溴一同洗脫，然後在真空中濃縮。所得產物經由IPAC：庚烷(30：70)再結晶2次，再用庚烷清洗乾燥以獲得12 g產物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ 8.78-8.85(m,1H),8.74(d,J=8.08 Hz,1H),8.50(s,1H),7.92-8.02(m,1H),7.04-7.13(m,1H),6.80(d,J=8.08 Hz,1H),4.00(s,3H),3.70-3.78(m,4H),3.49(d,J=5.31 Hz,4H),1.44(s,9H)。LRMS(ESI)m/z 411[(M+H)]+，為針對C21H26N6O3：410.48計算所得。
5.6.21 異丙基4-(3-(5-氟-2-甲氧基苯基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)唑並[1,5-a]嘧啶(2.5g，8.87mmol)溶解於DCM中。添加甲苯中的氯甲酸異丙酯1M(13.3ml，13.3mmol)及三乙胺(2.47ml，17.7mmol)並在室溫攪拌30分鐘。反應用水清洗，經硫酸鎂DCM層乾燥，並在真空中過濾、縮減體積。經DCM：MeOH 0-5%之Isco矽柱洗脫。產物殘液合併並在真空中縮減體積，以獲得2.86 g粗產 物留待進一步反應，不予改變。LRMS(ESI)m/z 368/370[(M+H)]+，為針對C14H18BrN5O：368.24計算所得。
B部份 異丙基4-(3-(5-氟-2-甲氧基苯基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
將異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯(2.86g，7.8mmol)、5-氟-2-甲氧基苯基硼酸(2.64g，15.5 mmol)、碳酸鉀(3.22g，23.3mmol)、Pd(OAc)2(35mg，0.155mmol)及x-Phos(146mg，0.31 mmol)溶解在15 mL二噁烷及7mL經氮包覆的水中，然後在80℃下攪拌2小時。然後，反應冷卻至室溫，經由含乙酸乙酯之矽藻土塞過濾。在真空中縮減體積並經由含己烷：乙酸乙酯75-100%之isco矽柱洗脫。產物加上脫溴共同洗脫，在真空中縮減體積。產物經由乙酸乙酯：己烷再結晶2次，經由庚烷清洗，並經乾燥以獲取12 g產物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ 8.73(d,J=7.78 Hz,1H),8.50(s,1H),8.29(dd,J=3.14,11.17 Hz,1H),7.04(dd,J=5.02,9.03 Hz,1H),6.95(dd,J=3.26,7.78 Hz,1H),6.79(d,J=8.03 Hz,1H),4.77-4.85(m,1H),3.87(s,3H),3.70-3.78(m,4H),3.48-3.56(m,4H),1.21(d,J=6.27Hz,6H)。LRMS(ESI)m/z 414[(M+H)]+，為針對C21H24N5O3：413.4計算所得。
5.6.22 異丙基4-(3-(2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
向100 mL圓底燒瓶添加2.00 g(5.43 mmol)異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯、1.00 g(5.98 mmol)(2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)硼酸、0.19 g(0.16 mmol)Pd(PPh3)4，並用攪拌棒攪拌。
添加全部固體後，添加30 ml 2% TPGS-750-M溶液，然後添加3.80 mL(27.15 mmol)三乙胺。將反應燒瓶插入預熱至85℃之油浴，並用力攪拌。需攪拌約0.25小時才能使全部懸浮固體完全溶解。在85℃下攪拌約2小時後，LCMS顯示反應完成。允許冷卻至室溫，用40 mL EtOAc稀釋。有機層經分離，且水溶性層經由30 mL份量之EtOAc萃取2次。用鹽水清洗合併有機層，用MgSO4乾燥，然後濃縮。使用少量DCM溶解粗混合物，然後直接注入至80 g矽膠柱，以便在ISCO上分離。先採用50% EtOAc/hex至100% EtOAc梯度洗脫15分鐘，然後僅用EtOAc洗脫該柱。期望產物在僅用EtOAc洗脫約8分鐘後開始洗脫。脫溴副產物與期望產物一同洗脫。儘管脫溴化合物遍佈於含有期望產物之全部殘液中，但脫溴化合物所佔百分比似乎隨時間降低。因此，棄用含有的脫溴百分比為最高的前幾個管子。剩餘殘液經濃縮以獲得純度為84%之1.73 g期望產物，粒徑為254 nm(其中約13%為脫溴化合物)。[基於1H NMR，粒徑為254 nm時脫溴之紫外線估計過高，而粒徑為220 nm時脫溴之紫外線估計過 低]。
使用IPAC及庚烷使該物質再結晶兩次以獲得1.45 g(65%產出率)期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.30(d,J=6.32 Hz,6 H)2.49(s,3 H)3.59-3.68(m,4 H)3.73(dd,J=6.19,3.66 Hz,4 H)4.07(s,3 H)4.99(dt,J=12.44,6.28 Hz,1 H)6.36(d,J=7.83 Hz,1 H)6.85(d,J=7.58 Hz,1 H)8.35(d,J=7.83 Hz,1 H)8.55-8.63(m,2 H)；13C NMR(101 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 22.48、24.10、43.39、44.94、53.38、69.37、96.32、101.34、113.40、116.03、135.94、136.12、145.14、146.15、152.13、155.35、155.45、159.49。LRMS(ESI)m/e 411[(M+H)+，為針對C21H26N6O3 410計算所得]。
5.6.23 異丙基4-(3-(6-甲氧吡啶-2-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 異丙基4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
向盛放在50 mL圓底燒瓶中的184 mg(0.50 mmol)異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯中添加191 mg(0.75 mmol)4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧硼戊烷)、147 mg，1.50 mmol)KOAc、8 mL DMSO，然 後再添加41 mg(0.05 mmol)PdCl2(dppf)2.DCM。將空氣置換為N2，然後將混合物加熱至80℃，同時攪拌。第二天早晨，LCMS顯示反應已完成。冷卻至室溫，用EtOAc稀釋，用鹽水清洗，然後用MgSO4乾燥有機層。經濃縮，在ISCO中使用12 g柱純化，並用25-100% EtOAc/hex洗脫以獲得107 mg期望產物[純度僅為約85%，約15%水解至相對應之硼酸]。
B部份 異丙基4-(3-(6-甲氧吡啶-2-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
向盛放在微波玻璃小瓶中的65 mg(0.157 mmol)異丙基4-(3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯添加29 mg(0.157 mmol)2-溴-6-甲氧基吡啶、43 mg(0.313 mmol)K2CO3、18 mg(0.016 mmol)Pd(PPh3)4、3 mL DME，然後添加1 mL水。所得混合物經125℃微波達0.33小時。用EtOAc稀釋，用鹽水清洗，然後在MgSO4上乾燥有機層。經濃縮後，在中性PREP HPLC上經純化以獲取42 mg期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.30(d,J=6.32 Hz,6 H)3.60-3.74(m,4 H)3.81(br.s.,4 H)4.04(s,3 H)5.00(quin,J=6.25 Hz,1 H)6.39(d,J=7.83 Hz,1 H)6.55(dd,J=8.08,0.76 Hz,1 H)7.62(dd,J=8.08,7.58 Hz,1 H)7.83-7.93(m,1 H)8.37(d,J=7.83 Hz,1 H)8.66(s,1 H)。LRMS(ESI)m/e 397[(M+H)+，為針對C20H24N6O3 396計算所得]。
5.6.24 5-異丙基-3-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-1,2,4-噁二唑之合成
A部份 4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-腈
將3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)唑並[1,5-a]嘧啶(500mg，1.77mmol)溶解於20 mL DCM並在0℃之冰浴內攪拌。添加含有酸式碳酸鈉(744mg，8.86mmol)之6mL水並攪拌。添加溴化氰(225mg，2.12mmol)並在0℃下攪拌30分鐘，然後允許達到室溫並攪拌隔夜。用DCM稀釋反應物，並用水清洗，經硫酸鎂乾燥DCM層，在真空中縮減體積得到500 mg粗產物，留待進一步反應，不予改變。LRMS(ESI)m/z 307/309[(M+H)]+，為針對C11H11BrN6：307.15計算所得。
B部份 3-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-5-異丙基-1,2,4-噁二唑
將含4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-腈 (450mg，1.46mmol)之9mL DMF與碳酸鈉(155mg，1.46mmol)在室溫攪拌15分鐘，添加羥基胺鹽酸(203mg，2.9mmol)並在80℃與應物攪拌30分鐘。然後添加12mL甲苯，再添加吡啶(474uL，5.86mmol)及異丁酸酐(973uL，5.86mmol)並將反應物在80℃下攪拌達1.5小時。反應物冷卻至室溫，並在真空中縮減體積，然後溶解於乙酸乙酯，再依次用水、鹽水、水清洗。有機層經硫酸鎂乾燥，並在真空中縮減體積。留250 mg粗產物不予改變，用於進一步之反應物。LRMS(ESI)m/z 392/394[(M+H)]+，為針對C15H18BrN7O：392.26計算所得。
C部份 5-異丙基-3-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-1,2,4-噁二唑。將3-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-5-異丙基-1,2,4-噁二唑(200mg，0.51mmol)、2-甲氧基吡啶-3-硼酸(156mg，1.0mmol)、碳酸鉀(211mg，1.53mmol)、Pd(OAc)2(3mg，0.01mmol)及x-Phos(10mg，0.02mmol)溶解於盛放在密封管內之2mL二噁烷及1mL水中，並在85℃下加熱達2小時。然後，將反應物冷卻至室溫，並經由含乙腈及DCM之矽藻土塞過濾，並在真空中縮減體積。在島津中性相製備物上經純化後，再經凍乾以獲取12 mg產物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ 8.83(dd,J=1.77,7.58 Hz,1H)、8.77(d,J=7.83 Hz,1H)、8.51(s,1H)、7.99(dd,J=1.89,4.93 Hz,1H)、7.10(dd,J=4.80,7.58 Hz,1H)、6.86(d,J=8.08 Hz,1H)、4.00(s,3H)、3.84-3.90(m,4H)、3.48-3.53(m,4H)、3.15(t,J=7.07 Hz,1H)、 1.29(d,J=6.82 Hz,6H)。LRMS(ESI)m/z 421[(M+H)]+，為針對C21H24N8O2：420.48計算所得。
5.6.25 (S)-2-胺基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊醯-1-酮之合成
A部份 (S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊醯-1-酮
將3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)唑並[1,5-a]嘧啶(200mg，0.71mmol)、丁氧基羰基-L-白胺酸胺(196mg，0.85mmol)、HATU(245mg，1.06mmol)及三乙胺(394uL，2.83mmol)溶解於DMF，並在室溫下攪拌隔夜。用DCM稀釋反應物，再用水清洗。有機層經硫酸鎂乾燥、過濾並在真空中縮減體積。將殘留物溶解於含40% TFA的20mL DCM溶液中，並在35℃下攪拌隔夜。所得混合物經真空濃縮，並通過含10% MeOH之DCM的矽塞。移除溶劑，並使殘留物經乾燥以獲得600 mg粗產物，該粗產物為TFA鹽，留待用於進一步之反應物。LRMS(ESI)m/z 395/397[(M+H)]+，為針對C16H23BrN6O：395.31計算所得。
B部份 (S)-2-胺基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並 [1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊醯-1-酮。將(S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-4-甲基戊醯-1-酮(300 mg，0.59 mmol)、2-甲氧基吡啶-3-硼酸(135mg，0.88mmol)、碳酸鉀(326mg，2.36mmol)、Pd(OAc)2(3mg，0.011mmol)及x-Phos(11mg，0.022mmol)溶解於盛放在密封管內之2mL二噁烷及1mL水中，並在85℃下加熱達2小時。然後，將反應物冷卻至室溫，經由含乙腈及矽藻土塞過濾，然後在真空中縮減體積。在島津中性相製備物上經純化後，再經凍乾以獲取28.1 mg甲酸鹽產物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ 8.82(dd,J=2.02,7.58 Hz,1H)、8.77(d,J=7.83 Hz,1H)、8.51(s,1H)、8.27(s,1H)、7.99(dd,J=1.77,4.80 Hz,1H)、7.09(dd,J=4.80,7.58 Hz,1H)、6.83(d,J=8.08 Hz,1H)、4.00(s,3H)、3.62-3.93(m,9H)、1.72-1.88(m,1H)、1.23-1.42(m,2H)、0.91(dd,J=6.57,10.11 Hz,6H)。LRMS(ESI)m/z 424[(M+H)]+，為針對C22H29N7O2：423.52計算所得。
5.6.26 (S)-2-胺基-N-((S)-1-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡啶-3-基)-N,4-二甲基戊醯醯胺之合成
A部份 (S)-三丁基(1-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡啶-3-基)胺基甲酸酯
將3-溴-5-氯唑並[1,5-a]嘧啶(2.2g，9.5mmol)、(S)-3-丁氧基羰基-胺基吡咯啶(2.6g，14.2mmol)及三乙胺(5.27ml，37.9mmol)溶解於盛放在密封管內之異丙醇中，並經140℃微波加熱達30分鐘。在真空中將反應物脫去，並溶解於乙酸乙酯，用水清洗，然後通過含乙酸乙酯之矽塞。在真空中移除溶劑，以獲得3.6g粗產物，該粗產物不予改變，留待用於B部份。LRMS(ESI)m/z 382/384[(M+H)]+，為針對C15H19BrN5O2：382.2計算所得。
B部份 (S)-1-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-N-甲基六氫吡啶-3-胺
將(S)-三丁基(1-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡啶-3-基)胺基甲酸酯(3.6g，9.4mmol)溶解於15mL DMF中，並在冰浴中冷卻至0℃。添加吲哚甲烷(1.026ml，16.5mmol)並攪拌5分鐘。然後，緩慢添加含60%氫化鈉之油脂(754mg，18.8mmol)中。在0℃下將反應物攪拌5分鐘，然後從冰浴中移出，在室溫下攪拌30分鐘。用冰將反應物驟冷，然後用乙酸乙酯萃取兩次。將乙酸乙酯殘液合併，經硫酸鎂乾燥後在真空中過濾縮減體積。再將所得物溶解於26mL DCM中，並添加4mL TFA。採用LC/MS方法攪拌1小時直至完成。用1N NaOH清洗反應物，且移除DCM層，經硫酸鎂乾燥、過濾，在真空中縮減體積以獲取2.72 g粗產物，該粗產物不予改變，留待用於C部份。LRMS(ESI)m/z 296/298[(M+H)]+，為針對 C11H14BrN5：296.17計算所得。
C部份 (S)-2-胺基-N-((S)-1-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡啶-3-基)-N,4-二甲基戊醯醯胺
將(S)-1-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-N-甲基六氫吡啶-3-胺(200 mg，0.68mmol)、丁氧基羰基-L-白胺酸胺(187mg，0.81mmol)、HATU(385mg，1.01mmol)及三乙胺(375uL,2.7mmol)溶解於DMF中，並在室溫下攪拌隔夜。用DCM稀釋反應物，用水清洗，然後DCM層經硫酸鎂乾燥、過濾，並在真空中縮減體積。然後，將所得物溶解於26mL DCM中，並添加4mL TFA。採用LC/MS方法攪拌1小時，直至完成。使用1N NaOH清洗反應物，移除DCM層，並經硫酸鎂乾燥、過濾，並在真空中縮減體積，獲得226mg粗產物，該粗產物不予改變，將用於D部份。LRMS(ESI)m/z 409/411[(M+H)]+，為針對C17H24BrN6O：409計算所得。
D部份 (S)-2-胺基-N-((S)-1-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡啶-3-基)-N,4-二甲基戊醯醯胺。將(S)-2-胺基-N-((S)-1-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡啶-3-基)-N,4-二甲基戊醯醯胺(220mg，0.54mmol)、2-甲氧基吡啶-3-硼酸(164mg，1.1mmol)、碳酸鉀(291mg，2.15mmol)、Pd(OAc)2(2mg，0.011mmol)及x-phos(10mg，0.022mmol)溶解於2mL乙腈及1mL水中，然後在85℃下在密封管內加熱達2小時。然後，經由含乙腈及DCM之矽藻土過濾反應物， 並在真空中縮減體積，然後在島津中性相製備物上經純化，再經產物殘液凍乾以獲取(S)-2-胺基-N-((S)-1-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡啶-3-基)-N,4-二甲基戊醯醯胺41.3 mg，且作為0.5 eq甲酸鹽。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ 8.87-8.97(m,1H)、8.72(s,1H)、8.50(s,1H)、8.30(s,1H)、7.96(dd,J=2.02,4.80 Hz,1H)、7.00-7.11(m,1H)、6.51(d,J=7.83 Hz,1H)、4.00(s,3H)、3.48-3.64(m,1H)、3.43(br.s.,3H)、2.96(s,2H)、2.81(s,1H)、2.11-2.28(m,2H)、1.72-1.89(m,1H)、1.19-1.39(m,2H)、0.90(dd,J=1.89,6.69 Hz,6H)。(ESI)m/z 438[(M+H)]+，為針對C23H31N7O2：437.5計算所得。
5.6.27 (S)-2-胺基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁烷-1-酮之合成
A部份 (S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁烷-1-酮
將3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)唑並[1,5-a]嘧啶(400mg，1.42 mmol)、丁氧基羰基-L-白胺酸胺酸(392mg，1.7mmol)、HATU(490mg，2.13mmol)及三乙胺(788uL, 5.7mmol)溶解於DMF，並在室溫下攪拌隔夜。用DCM稀釋反應物，用水清洗，然後DCM層經硫酸鎂乾燥、過濾，並在真空中縮減體積。然後，將所得物溶解於26mL DCM，並添加4mL TFA。採用LC/MS方法攪拌1小時，直至完成。使用1N NaOH清洗反應物，移除DCM層，並經硫酸鎂乾燥、過濾，並在真空中縮減體積以獲得349 mg粗產物，該粗產物不予改變，將用於進一步反應物。LRMS(ESI)m/z 381/383[(M+H)]+，為針對C15H21BrN6O：381.28計算所得。
B部份 (S)-2-胺基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁烷-1-酮。將(S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲基丁烷-1-酮(110m g，0.29mmol)、(2-甲氧吡啶-3-基)硼酸(88mg，0.58 mmol)、碳酸鉀(120mg，0.87mmol)、Pd(OAc)2(1mg，0.0058 mmol)及x-Phos(5mg，0.012mmol)溶解於3mL二噁烷及經氮包覆之1mL水中，並在85℃下攪拌2小時。然後，將反應物冷卻至室溫，經由含乙腈及DCM之矽藻土塞過濾。在真空中縮減體積，並在島津中性相製備物上經純化，再經凍乾以獲取18mg 1.5eq甲酸鹽產物。1H NMR(400 MHz,MSO-d6)δ 8.83(dd,J=1.77,7.58 Hz,1H)、8.78(d,J=7.83 Hz,1H)、8.52(s,1H)、8.35(s,2H)、7.99(dd,J=1.89,4.93 Hz,1H)、7.09(dd,J=4.93,7.45 Hz,1H)、6.85(d,J=7.83 Hz,1H)、4.01(s,3H)、3.81-3.89(m,1H)、3.74(d,J=5.31 Hz,3H)、3.68(d,J=7.58 Hz,3H)、1.76-1.89(m,1H)、0.94(d,J=6.82 Hz,3H)、0.86(d,J=6.82 Hz,3H)。LRMS(ESI)m/z 410[(M+H)]+， 為針對C21H27N7O2：409.5計算所得。
5.6.28 (S)-2-胺基-3-甲氧基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)丙烷-1-酮之合成
A部份 (S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲氧基丙烷-1-酮
將3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)唑並[1,5-a]嘧啶(300mg，1.1mmol)溶解於10mL DMF中。添加丁氧羰基-甲基色氨酸-OH(280mg，1.3mmol)、HATU(368mg，1.6mmol)及三乙胺(590uL,4.25mmol)並在室溫下攪拌隔夜。用DCM稀釋反應物，並用水清洗。DCM層經硫酸鎂乾燥，並在真空中縮減體積。然後，將所得物溶解於含30% TFA之DCM溶液中，並在室溫下攪拌達2小時。然後，冷卻至0℃，並緩慢添加NaOH濃縮水溶液，直至水溶層維持在鹼性狀態。DCM層經萃取物，經硫酸鎂乾燥，並在真空中縮減體積，獲得405 mg粗產物，該粗產物留待用於進一步反應物，不予改變。LRMS(ESI)m/z 383/385[(M+H)]+，為針對C14H19BrN6O2：383.25計算所得。
B部份 (S)-2-胺基-3-甲氧基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶 -3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)丙烷-1-酮。將3(S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3-甲氧基丙烷-1-酮(400mg，1.04 mmol)、2-甲氧基吡啶-3-硼酸(240mg，1.56 mmol)、碳酸鉀(435mg，3.12 mmol)、Pd(OAc)2(5mg，0.021mmol)及x-Phos(14mg，0.042 mmol)溶解於盛放在密封管內之2mL二噁烷及1mL水中，並在85℃下加熱達2小時。然後，反應物冷卻至室溫，並經由含乙腈及DCM之矽藻土塞過濾，然後在真空中縮減體積。在島津中性相製備物上經純化後，再經凍乾以獲取39mg期待產物，且呈甲酸鹽產物狀。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)δ 8.82(dd,J=1.89,7.45 Hz,1H)、8.76(d,J=7.83 Hz,1H)、8.51(s,1H)、8.29(s,1H)、7.99(dd,J=1.89,4.93 Hz,1H)、7.09(dd,J=4.93,7.45 Hz,1H)、6.84(d,J=7.83 Hz,1H)、3.98-4.02(m,4H)、3.61-3.85(m,8H)、3.31-3.45(m,2H)。LRMS(ESI)m/z 412[(M+H)]+，為針對C20H25N7O3：411.47計算所得。
5.6.29 (S)-2-胺基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3,3-二甲基丁烷-1-酮之合成
A部份 (S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3,3-二甲基丁烷-1-酮
將3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)唑並[1,5-a]嘧啶(300mg，1.1 mmol)、N-丁氧基羰基-L-三白胺酸(295mg，1.28mmol)、HATU(368mg，1.6mmol)及三乙胺(590uL，4.26 mmol)溶解於DMF，並在室溫下攪拌隔夜。用DCM稀釋反應物，用水清洗，然後DCM層經硫酸鎂乾燥、過濾，並在真空中縮減體積。然後，將所得物溶解於26mL DCM中，並添加4mL TFA。採用LC/MS方法攪拌1小時，直至完成。用1N NaOH清洗反應物，且移除DCM層，經硫酸鎂乾燥、過濾，在真空中縮減體積以獲取420 g粗產物，該粗產物不予改變，留待用於進一步反應物。LRMS(ESI)m/z 395/397[(M+H)]+，為針對C16H23BrN6O：395.31計算所得。
B部份 (S)-2-胺基-1-(4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3,3-二甲基丁烷-1-酮。將(S)-2-胺基-1-(4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-基)-3,3-二甲基丁烷-1-酮(420mg，1.1mmol)、(2-甲氧吡啶-3-基)硼酸(240mg，1.6 mmol)、碳酸鉀(435mg，3.2 mmol)、Pd(OAc)2(5mg，0.021mmol)及x-Phos(14mg，0.043mmol)溶解於4mL二噁烷及經氮包覆之1mL水中，並在85℃下攪拌達2小時。然後，反應物冷卻至室溫，經由含乙腈及DCM的矽藻土塞過濾。在真空中縮減體積，並在島津中性相製備物上經純化，再經凍乾以獲取18 mg 1 eq甲酸鹽產物。1H NMR (400 MHz,DMSO-d6)δ 8.81(dd,J=1.77,7.58 Hz,1H)、8.75(d,J=7.83 Hz,1H)、8.51(s,1H)、8.29(s,1H)、7.97-8.03(m,1H)、7.06-7.09(m,1H)、6.83(d,J=7.83 Hz,1H)、4.00(s,3H)、3.69-3.78(m,3H)、3.80(s,4H)、3.84(s,2H)、0.94(s,9H)LRMS(ESI)m/z 424[(M+H)]+，為針對C22H29N7O2：423.52計算所得。
5.6.30 (R)-四氫呋喃-3-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部分 4-(3-鏽-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸4-硝基-苯基酯
向在0℃下溶解於40 mL的EtOAc中之2.00 g(7.09 mmol)3-溴-5-六氫吡嗪-1-基-唑並[1,5-a]嘧啶添加1.71 g(8.51 mmol)4-硝苯基氯化碳，然後添加1.97 mL(14.18 mmol)TEA。5分鐘後，在0℃下攪拌，移走冰浴並在在室溫下繼續攪拌約2小時。用50 mL 50%之EtOAc/hex稀釋所得物。濾出期望產物，並經乾燥以獲得3.17 g(100%產出率)米白色固體。
B部份 4-(3-溴-唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)-六氫吡嗪-1-羧酸(R)-(四氫-呋喃-3-基)酯
向溶解於10 mL的THF中之112 mg(0.25 mmol)4-硝苯基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯添加(R)-四氫呋喃-3-醇(44 mg，0.5 mmol)，然後添加60% NaH(40 mg，1.0 mmol)，並在室溫下攪拌2小時。2小時後，用20 mL EtOAc稀釋，並用鹽水緩慢驟冷。有機層經MgSO4乾燥，並經濃縮，在採用0-10% MeOH/DCM洗脫之12克矽膠柱上純化，以獲取71 mg(72%產出率)期望產物。
C部份 (R)-四氫呋喃-3-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯。鈴木耦合反應係在與所描述之6-[1-(2,2-二甲基-丙基)-1H-吡唑-4-基]-3-(2-甲氧基-吡啶-3-基)-咪唑-[1,2-]嗒嗪之合成條件的相同條件下實施，從而以72%產出率生成期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm1.98-2.14(m,1 H)2.23(dtd,J=14.02,8.17,8.17,6.27 Hz,1 H)3.66(d,J=5.02 Hz,4 H)3.71-3.82(m,4 H)3.83-4.02(m,4 H)4.10(s,3 H)5.27-5.39(m,1 H)6.38(d,J=7.78 Hz,1 H)7.00(dd,J=7.53,5.02 Hz,1 H)8.04(dd,J=4.77,1.76 Hz,1 H)8.37(d,J=7.78 Hz,1 H)8.63(s,1 H)8.73(dd,J=7.53,1.76 Hz,1 H)。
5.6.31 1-甲氧基丙烷-2-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 1-甲氧基丙烷-2-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
此化合物係使用1-甲氧基丙烷-2-醇製備，並依照上文所描述之用於製作(R)-四氫呋喃-3-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之程序中的B部份進行。
B部份 1-甲氧基丙烷-2-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯。鈴木耦合反應係依照其他實例中所使用之程序來實施。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.29(d,J=6.57 Hz,3 H)3.40(s,3 H)3.42-3.56(m,2 H)3.61-3.70(m,4 H)3.72-3.81(m,4 H)4.10(s,3 H)5.06(td,J=6.25,4.17 Hz,1 H)6.37(d,J=7.83 Hz,1 H)7.00(dd,J=7.58,5.05 Hz,1 H)8.03(dd,J=4.80,1.77 Hz,1 H)8.36(d,J=7.83 Hz,1 H)8.63(s,1 H)8.73(dd,J=7.45,1.89 Hz,1 H)。
5.6.32 四氫-2H-呱喃-4-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 四氫-2H-呱喃-4-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
此化合物係使用四氫-2H-呱喃-4-醇製備，並依照上文所描述之用於製作(R)-四氫呋喃-3-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之程序中的B部份進行。
B部份 四氫-2H-呱喃-4-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯。此化合物之合成方法係依照上文所描述之用於製作(R)-四氫呋喃-3-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之程序中的B部份進行。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.66-1.80(m,2 H)1.95-2.02(m,2 H)3.51-3.62(m,2 H)3.67(d,J=4.55 Hz,4 H)3.71-3.82(m,4 H)3.88-4.00(m,2 H)4.09(s,3 H)4.94(tt,J=8.43,3.95 Hz,1 H)6.36(d,J=7.58 Hz,1 H)6.99(dd,J=7.07,5.31 Hz,1 H)8.03(d,J=4.80 Hz,1 H)8.35(d,J=7.58 Hz,1 H)8.62(s,1 H)8.72(d,J=7.33 Hz,1 H)。LRMS(ESI)m/e 439[(M+H)+，為針對C22H26FN6O4 438計算所得]。
5.6.33 (R)-四氫呋喃-3-基4-(3-(5-氟-2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
將(R)-四氫呋喃-3-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯(100mg，0.25mmol)、5-氟-2-甲氧基-3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊烷-2-基)吡啶(127mg，0.5mmol)、三乙胺(211uL，1.5mmol)、Pd(OAc)2(1mg，0.0025mmol)及x-Phos(5mg，0.005mmol)溶解於4mL二噁烷及經氮包覆之1mL水中，並在85℃下攪拌2小時。然後，反應物冷卻至室溫，經由含乙腈及DCM之矽藻土塞過濾。在真空中縮減體積，並在島津中性相製備物上經純化，再經凍乾以獲取30 mg產物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)d 8.80(d,J=7.83 Hz,1H)、8.72(dd,J=3.03,10.36 Hz,1H)、8.56(s,1H)、7.94(d,J=3.03 Hz,1H)、6.86(d,J=7.83 Hz,1H)、5.18(d,J=1.77 Hz,1H)、4.00(s,3H)、3.71-3.83(m,8H)、3.32(s,2H)、2.08(s,1H)、2.13(s,1H)、1.89-2.00(m,1H)LRMS(ESI)m/z 443[(M+H)]+，為針對C21H23FN6O4：442.45計算所得。
5.6.34 (S)-四氫呋喃-3-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 (S)-四氫呋喃-3-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
向溶解於18 mL的THF中之224 mg(0.50 mmol) 4-硝苯基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯添加(S)-四氫呋喃-3-醇(88 mg，1.0 mmol)，然後添加60% NaH(80 mg，2.0 mmol)，並在室溫下攪拌2小時。2小時後，用30 mL EtOAc稀釋所得物，並用鹽水緩慢驟冷。有機層經MgSO4乾燥，經濃縮，並經由採用0-10% MeOH/DCM洗脫之40 g矽膠柱純化，以獲取301 mg(76%產出率)期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 2.01-2.13(m,1 H)2.17-2.29(m,1 H)3.57-3.70(m,4 H)3.74-3.84(m,4 H)3.86-4.01(m,4 H)5.27-5.38(m,1 H)6.37(d,J=7.83 Hz,1 H)7.87(s,1 H)8.28(d,J=7.83 Hz,1 H)
B部份 (S)-四氫呋喃-3-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯。鈴木耦合反應係在與所描述之LP-943795之合成條件的相同條件下實施，並以61%產出率生成期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 2.02-2.14(m,1 H)2.16-2.30(m,1 H)3.66(d,J=4.80 Hz,4 H)3.72-3.82(m,4 H)3.84-4.01(m,4 H)4.10(s,3 H)5.33(td,J=3.85,1.89 Hz,1 H)6.38(d,J=7.83 Hz,1 H)7.01(dd,J=7.45,4.93 Hz,1 H)8.04(dd,J=5.05,1.77 Hz,1 H)8.38(d,J=7.83 Hz,1 H)8.64(s,1 H)8.73(dd,J=7.33,1.77 Hz,1 H)。LRMS(ESI)m/e 425[(M+H)+，為針對C21H24N6O4 424計算所得]。
5.6.35 (S)-1-甲氧基丙烷-2-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯之合成
A部份 (S)-1-甲氧基丙烷-2-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯
此合成係使用與上文所述之[(S)-四氫呋喃-3-基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯]所用條件及規模相同之條件及規模實施，以71%產出率獲取期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.29(d,J=6.27 Hz,3 H)3.30-3.41(m,3 H)3.41-3.54(m,2 H)3.58-3.69(m,4 H)3.71-3.83(m,4 H)4.98-5.12(m,1 H)6.35(d,J=8.03 Hz,1 H)7.86(s,1 H)8.26(d,J=7.78 Hz,1 H)。
B部份 (S)-1-甲氧基丙烷-2-基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪-1-羧酸酯。鈴木耦合反應係在其他實例之合成所用之常用合成條件下實施，從而以64%之產出率生成期望產物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.29(d,J=6.32 Hz,3 H)3.40(s,3 H)3.42-3.54(m,2 H)3.61-3.70(m,4 H)3.71-3.81(m,4 H)4.09(s,3 H)5.06(quind,J=6.32,6.32,6.32,6.32,4.04 Hz,1 H)6.38(d,J=7.83 Hz,1 H)7.00(dd,J=7.45,4.93 Hz,1 H)8.03(dd,J=4.93,1.89 Hz,1 H)8.36(d,J=7.83 Hz,1 H)8.63(s,1 H)8.74(dd,J=7.58,2.02 Hz,1 H)。LRMS(ESI)m/e 427[(M+H)+，為針對C21H26N6O4 426 計算所得]。
5.6.36 2-甲氧乙基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪(d 8 )-1-羧酸酯之合成
A部份 3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)吡唑[1,5-a]嘧啶(d 8 )
含3-溴-5-氯唑並[1,5-a]嘧啶(930 mg，4 mmol)、六氫吡嗪-d8鹽酸(1 g，6 mmol)及TEA(2.23 ml，16 mmol)混合物之異丙醇(8 mL)在微波爐內140℃下加熱達30分鐘。混合物經濃縮以獲得標題化合物，該化合物用於下一步驟，無需進一步純化。
B部份 2-甲氧乙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪(d8)-1-羧酸酯
向THF(20 mL)內之含有3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)吡唑o[1,5-a]嘧啶-d8(約2 mmol)及DIEA(1.74 ml，10 mmol)混合物添加氯甲酸甲氧乙酯(279 uL，2.4 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物經濃縮，且採殘留物經ISCO及預製HPLC處理，以獲得標題化合物(382 mg)。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 3.39(s,3 H)3.57-3.70(m,2 H) 4.24-4.31(m,2 H)6.32(d,J=7.83 Hz,1 H)7.84(s,1 H)8.24(d,J=8.08 Hz,1 H)。
C部份 2-甲氧乙基4-(3-(2-甲氧吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪(d8)-1-羧酸酯。在2-甲氧乙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪(d8)-1-羧酸酯之典型鈴木耦合條件下，使用適當硼酸以產生標題化合物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 3.41(s,3 H)3.58-3.70(t,J=3.40 Hz,2 H)4.09(s,3 H)4.27-4.32(t,J=3.40 Hz,2 H)6.35(d,J=7.83 Hz,1 H)6.99(dd,J=7.58,4.80 Hz,1 H)8.02(dd,J=4.80,1.77 Hz,1 H)8.35(d,J=7.83 Hz,1 H)8.62(s,1 H)8.72(dd,J=7.45,1.89 Hz,1 H)。LRMS(ESI)m/e 421.2[(M+H)+，為針對C21H26N6O4 420.5計算所得]。
5.6.37 A部份異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪(d 8 )-1-羧酸酯之合成
向THF(20 mL)內之含3-溴-5-(六氫吡嗪-1-基)吡唑[1,5-a]嘧啶-d8(~2 mmol)與DIEA(1.74 ml，10 mmol)混合物逐滴添加氯甲酸異丙酯(2 M溶液，1.2 ml，2.4 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物經濃縮，且殘留物經ISCO處理以獲得標題化合物(449 mg)。1H NMR(400 MHz,三氯甲烷-d)δ ppm 1.26(d J=6.32 Hz,6 H)4.90-5.00(m,1 H)6.31(d,J=7.83 Hz,1 H)7.83(s,1 H)8.23(d,J=7.83 Hz,1 H)。
B部份 異丙基4-(3-(2-甲氧基-6-甲基吡啶-3-基)唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪(d8)-1-羧酸酯。在2-異丙基4-(3-溴唑並[1,5-a]嘧啶-5-基)六氫吡嗪(d8)-1-羧酸酯之典型鈴木耦合條件下，使用適當硼酸以產生標題化合物。1H NMR(400 MHz，三氯甲烷-d)δ ppm 1.29(d,J=6.32 Hz,6 H)2.48(s,3 H)4.07(s,3 H)4.98(quin,J=6.25 Hz,1 H)6.32(d,J=7.83 Hz,1 H)6.84(d,J=7.58 Hz,1 H)8.33(d,J=7.83 Hz,1 H)8.56-8.60(m,2 H)。LRMS(ESI)m/e 419.2[(M+H)+，為針對C21H26N6O4 418.5計算所得]。
5.6.38 P81濾板檢定
使用Mutiprobe(珀金埃爾默公司)及Biomek FX(貝克曼庫爾特)將化合物連續稀釋至Labcyte LDV板(Labcyte，分類編號LP-0200)，以便最高之化合物濃度為96 μM。然後，使用ECHO 550移液器(Labcyte)將化合物插入(每孔75 nL)Greiner 384孔反應板(Greiner，編號781076)。然後，共將12μl反應緩衝劑(IMAP緩衝劑，含有Tween及DTT，美國分子儀器公司提供)添加至柱1及13的每個孔，以便實施負控制，並將12μl 2X AAK1(0.2 nM完整長度之人體蛋白，NCBI入藏登記號NP_055726.2)添加至剩餘孔。然後，在室溫下用化合物將酶預培養10分鐘。初始，向反應物添加Minitrak(珀金埃爾默公司)12μl受酶質混合料，其中含有2X Mu2(0.2 μM，完整長度之人體蛋白)、2x冷ATP(2 μM)，及1.3 μ Ci熱33P-ATP。使反應在室溫下繼續一小時。同時，將Millipore 384孔P81濾板(Millipore，分類編號MZPHN0W10)置於平 板墊圈上(Zoom ZW，由Titertek公司提供)，並用50 μl 1%磷酸預濕。然後，激酶反應在添加24 μl 2%磷酸至每個孔後停止，且然後使用Minitrak從每個孔內轉移40 μl至預濕的Millipore 384孔P81濾板。反應混合物在P81板內在室溫下培養10分鐘，然後使用Zoom濾洗器用每個孔100μl的1%磷酸沖洗五次。密封每個濾板底部，然後向每個孔添加20μl Microscint 40，然後用閃爍板蓋密封板頂部，並等候一小時，直至TopCount(珀金埃爾默公司)上出現讀數。
5.6.39 HEK281基於細胞之分析
將HEK293F細胞在含DMEM(Gibco，分類編號11965)、10% FBS(SAFC Biosciences，分類編號12103C)、1X GPS(麩醯胺酸、盤尼西林及鏈黴素)之媒介中培養。第一天，細胞塗於10 cm培養皿上，以便該等細胞可在轉染時長滿約80%。轉染時大約有一千兩百萬個細胞位於10 cm培養皿內。第二天，每個培養皿傳染48 ug DNA及144 ul脂質胺2000(Invitrogen，分類編號11668-019)。DNA由含有3 ug AAK1/HA/pIRES(完整長度人類蛋白，NCBI入藏登記號NP_055726.2)之混合物、45 μg Flag/AP2MI/pcDNA(完整長度人類蛋白)及1.5 ml OPTI-MEM(每10 cm培養皿)組成。脂質胺2000由含有144 μl脂質胺2000之混合物(每10 cm培養皿)及1.5 ml OPTI-MEM組成。每一混合物轉移至單個15ml管內，並在室內溫度下培養5分鐘，然後將兩個混合物合併，並在並在室內溫度下培養20分鐘。然後，從每一10cm板內吸出生長培養基，並置換為10ml DMEM+10% FBS(無GPS)。最終，將3 ml DNA/脂質胺混合物添加至每個10cm培養皿，並輕柔混合，然後在37℃及5% CO2下將培養基培養隔夜。
第三天，將化合物稀釋至濃度為最終濃度1000倍之100% DMSO中，然後經3次連續稀釋，獲得共5個測試濃度。每個10cm培養皿測試四種化合物。然後，每一化合物之稀釋物取一ul，用吸管吸入深孔、96孔板，然後向每個孔添加500 μl DMEM+0.5% FBS，獲得每一化合物之最終濃度之2倍。細胞經由簡單吸入便再次懸浮在10 cm培養皿內(HEK293細胞此時可輕易脫離孔板)，然後轉移至50 ml圓錐管中，並在1000 rpm轉速之離心作用下經過5分鐘以粒化。然後，細胞顆粒再次懸浮在每個10cm培養皿的之2.75 ml DMEM+0.5% FBS中，且100 μl之細胞懸浮物轉移至96孔TC板內的每個孔內。最後，將稀釋在DMEM+0.5% FBS中之具有2倍濃度之100 μl化合物接著添加至含有細胞懸浮物之孔中，以達到1倍最終濃度。然後，在37℃及5% CO2條件下將孔板培養3小時，然後將細胞懸浮液從每個孔轉移至12管PCR條帶。PCR條帶以1000 rpm轉速在尖架中旋轉達5分鐘，以使細胞粒化，然後經由吸入來移除培養媒介，無需干擾細胞顆粒。
為準備西方墨點分析，使細胞顆粒再次懸浮在40 ul 1x LDS-PAGE試樣緩衝劑(Invitrogen，分類編號NP0008)+2x Halt磷酸酶及蛋白酶抑製劑混合液(賽默飛世爾科技公司提供，分類編號1861284)，然後用設置為5之微尖聲波處理器對每份混合液實施8秒至10秒之聲波處理。向每份試樣 添加5 ul 10X NuPage試樣還原劑(含50 mM DTT)，然後用PCR機器在70℃下變性達10分鐘。每份試樣共取10μl注入4-20%三甘胺酸標準26孔凝膠中之每個洞內(Biorad，分類編號345-0034)以獲取磷mu2墨點，及取10μl注入4-12%雙三(+MES緩衝劑)NuPAGE 26孔凝膠(Invitrogen，分類編號WG1403BX10)之每個洞內，以獲取mu2墨點。為對照目的，將2ng磷mu2或20ng mu2/標籤蛋白注入每個凝膠之最後一孔內。SDS-聚丙烯醯胺凝膠電泳之後，使用iBlot將每個凝膠上的樣本轉移至PVDF薄膜，且薄膜在TBST+5%牛乳中封閉一小時，然後用TBST清洗3次，每次5分鐘至10分鐘。在TBST+5% BSA中，用兔抗-磷mu2(1：5000；一種兔多株抗體，由New England Peptide公司製造，且在萊斯康實施親和純化)探測標準凝膠，反之，則在TBST+5%牛乳中用小鼠標籤抗體探測NuPAGE凝膠(1：500；西格瑪公司，分類編號F1804)，然後在搖桿上在4℃將這些原始抗體在培養隔夜。
在第四天，用TBST清洗3遍西方墨點達5分鐘至10分鐘，在TBST+5%牛乳及在室內溫度下用抗兔-HRP(1：2000；伯樂公司，分類編號170-6515)或抗小鼠HRP(1：2000；伯樂公司，分類編號70-6516)探測達一小時，然後用TBST清洗3次，每次10分鐘，並用ECL試劑(GE Healthcare，分類編號RPN2132)在多色螢光成像系統上顯色。最後，設置照相機，每30秒拍攝一次，共拍攝10分鐘，保存無飽和訊號之每一墨點之最佳圖像(當訊號為飽和，則該等墨點帶將以紅色突出顯示)。在每一墨點帶上執行體積 分析，以獲取密度值。可藉由先正規化至總Mu2表達水平再與0%及100%對照品實施對比來計算每一試樣之抑制百分比。然後，使用Excel適用軟體計算IC50值。
活體外資料
本發明之各種化合物獲取的活體外資料均在以下表1中提供，其中「MW」表示分子重量，「P81檢定」係指上文所描述之P81濾板檢定，「CBA」係指上文所描述之HEK281基於細胞之分析，「--」表示未獲取該檢定之結果；「＊」表示低於或等於1.0 μM；「＊＊」表示低於或等於0.1 μM之值；及「＊＊＊」表示低於或等於0.01 μM。
5.6.41 藥理作用
AAK1基因剔除小鼠之研究表明，阻斷AAK1基因會影響疼痛反應，正如使用福馬林爪子測試量測所得之結果。請參看上述實例5.6.1。相同測試用於確認AAK1抑製劑之給藥亦可影響疼痛反應。
用自動傷痛刺激分析器(購自聖地亞哥市加利福尼亞大學Ozaki實驗室)對小鼠實施傷痛刺激測試。測試開始30分鐘前，用超強膠水在每一小鼠左側後爪周圍放置金屬條。30分鐘馴化期後，在左側後爪脊背表面，皮下注射20 μl 5%福馬林。將小鼠單獨放入圓筒艙室內達45分鐘。藉由用蒸餾水稀釋甲醛製備新鮮的5%福馬林溶液(新鮮甲醛20%，由新澤西費爾勞恩市飛世爾科技公司提供)。在福馬林注射前30分鐘向小鼠給予所研究之化合物。
計算機軟體記錄每分鐘的縮爪次數、階段I內收縮 總次數(急性階段=前8分鐘)及階段II內之收縮總次數(緊張性階段=20分鐘至40分鐘期間)。請參看Yaksh TL、Ozaki G、McCumber D、Rathbun M、Svensson C、Malkmus S、Yaksh MC。「An automated flinch detecting system for use in the formalin nociceptive bioassay」.J Appl Physiol.，2001；90：2386-402。
本發明之多種化合物係以不同劑量執行測試。用加巴噴丁(Gabapentin)及普瑞巴林(pregabalin)作為陽性對照。測試結果如以下表2中所示，其中「＊」表示劑量為200 mpk時作用等於或大於加巴噴丁作用之50%，「＊＊」表示劑量為200 mpk時作用等於或大於加巴噴丁作用之100%，「sc」表示皮下給藥，及「po」表示口服給藥。
該等測試結果證實，AAK1抑製劑可用於治療疼痛。
上文所引述之所有公開案(例如，專利及專利申請 案)之全部內容以引用之方式整體併入本案。

Claims (63)

  1. 一種抑制銜接因子關聯激酶1(adaptor associated kinase 1；AAK1)活性之方法，該方法包含使AAK1與一化合物或該化合物之一醫藥學上可接受之鹽接觸之步驟，該化合物具有以下化學式： 其中：R1為R1A或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1A取代；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個氰基、鹵基或羥基取代；R2為-NR2AR2B，其中R2A為氫且R2B為可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R2C取代；或者，R2A及R2B合併形成4至7員雜環，該雜環由一或更多個R2C可選取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12 烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基或R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基或羥基取代；且R3為氫或C1-6烷基，該烷基由一或更多個氰基、鹵基或羥基可選取代。
  2. 一種治療或管理由AAK1活性介導之一疾病或失調症之方法，包含以下步驟：向需要接受該方法之一患者給予一治療有效劑量之一化合物或該化合物之一醫藥學上可接受之鹽，該化合物具有以下化學式： 其中：R1為R1A或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1A取代；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基； 每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個氰基、鹵基或羥基取代；R2為-NR2AR2B，其中R2A為氫且R2B為可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R2C取代；或者，R2A及R2B合併形成4至7員雜環，該4至7員雜環由一或更多個R2C可選取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基或R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基或羥基取代；且R3為氫或C1-6烷基，該烷基由一或更多個氰基、鹵基或羥基可選取代。
  3. 如請求項2所述之方法，其中該疾病或失調症為阿茲海默(Alzheimer)症、躁鬱症、疼痛、帕金森氏(Parkinson)症或精神分裂症。
  4. 如請求項3所述之方法，其中該疼痛為神經性疼痛。
  5. 如請求項4所述之方法，其中該神經性疼痛為肌肉纖維疼痛或周邊神經病(例如，糖尿病神經病).
  6. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1為R1A。
  7. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1為可選取代C1-12烴基。
  8. 如請求項7所述之方法，其中R1為可選取代苯基。
  9. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1為可選取代2至12員雜碳基(例如，2-8員雜碳基、2-6員雜碳基、2-6員雜碳基)。
  10. 如請求項9所述之方法，其中R1為可選取代吡啶基、噻吩或咪唑。
  11. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1A為鹵基。
  12. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1A為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C或-C(O)N(R1C)2。
  13. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1A為-OR1C。
  14. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1B為-N(R1C)2、-OR1C、鹵基。
  15. 如請求項1或2所述之方法，其中或者，R2A及R2B合併形成4至7員雜環，該4至7員雜環由一或更多個R2C可選取代。
  16. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1C為氫。
  17. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R1C為C1-12烴基(例如，C1-6烴基、C1-4烴基，諸如甲基、乙基、丙基)。
  18. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R2C為-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2或-N(R2D)C(O)OR2D。
  19. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R2C為-C(O)R2D。
  20. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R2D為氫。
  21. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R2D為C1-12烴基(例如，C1-6烴基、C1-4烴基，諸如甲基、乙基、丙基)。
  22. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R2D為2至12員雜碳基，該2至12員雜碳基包含至少一個氮原子。
  23. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中至少一個R2D為可選取代C1-12烴基，該可選取代係用胺基、氰基、鹵基、羥基中之一或更多者取代。
  24. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R2D為2至12員雜碳基，該2至12員雜碳基包含至少一個氮原子。
  25. 如前述請求項中之任一項所述之方法，其中R3為氫。
  26. 如請求項1或2所述之方法，其中該化合物具有以下化學式： 或該化合物之一醫藥學上可接受之鹽，其中：A為環狀C1-12烴基或4至7員雜環；D為4至7員雜環；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1B取代； 每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個氰基、鹵基或羥基取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基或R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基或羥基取代；n為1-3；且m為0-3。
  27. 如請求項26所述之方法，但規定D不為六氫吡啶基。
  28. 如請求項26所述之方法，但規定R2C不為-N(R2D)2。
  29. 如請求項26所述之方法，但規定A不為苯基。
  30. 如請求項26所述之方法，但規定m為1。
  31. 如請求項26所述之方法，但規定m為2。
  32. 如請求項26所述之方法，但規定R2D不為乙基。
  33. 一種具有以下化學式之化合物： 或該化合物之一醫藥學上可接受之鹽，其中：A為環狀C1-12烴基或4至7員雜環；D為4至7員雜環；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個氰基、鹵基或羥基取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基或R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基取代； n為1-3；且m為0-3；並規定當D為六氫吡啶基，A為苯基，且R2C為-N(R2D)2時，R2D不為乙基。
  34. 如請求項33所述之化合物，其中D為六氫吡嗪或六氫吡啶.
  35. 如請求項33所述之化合物，其中n為1。
  36. 如請求項33所述之化合物，其中m為1。
  37. 如請求項33所述之化合物，其中A為吡啶基、噻吩或咪唑。
  38. 如請求項33所述之化合物，該化合物具有以下化學式： 其中X為CH或N。
  39. 如請求項38所述之化合物，其中X為N且m為1或2。
  40. 一種具有以下化學式之化合物： 或該化合物之一醫藥學上可接受之鹽，其中：X為CH或N；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基或R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用胺基、氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；且m為0-3。
  41. 如請求項40所述之化合物，但規定R2C不為可選取代苯基或吡啶基。
  42. 如請求項40所述之化合物，該化合物具有以下化學式：
  43. 如請求項42所述之化合物，該化合物具有以下化學式：
  44. 如請求項43所述之化合物，該化合物具有以下化學式：
  45. 如請求項43所述之化合物，該化合物具有以下化學式：
  46. 一種具有以下化學式之化合物： 或該化合物之一醫藥學上可接受之鹽，其中： X為CH或N；每一R1A獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個R1B取代；每一R1B獨立為-OR1C、-N(R1C)2、-C(O)R1C、-C(O)OR1C、-C(O)N(R1C)2、-N(R1C)C(O)OR1C、氰基或鹵基；每一R1C獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用氰基、鹵基或羥基中之一或更多者取代；每一R2C獨立為-OR2D、-N(R2D)2、-C(O)R2D、-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2、-N(R2D)C(O)OR2D、氰基、鹵基或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基或R2D取代；每一R2D獨立為氫或可選取代C1-12烴基或2至12員雜碳基，該可選取代係用一或更多個胺基、氰基、鹵基、羥基取代；且m為0-3。
  47. 如請求項46所述之化合物，該化合物具有以下化學式：
  48. 如請求項47所述之化合物，該化合物具有以下化學式：
  49. 如請求項47所述之化合物，該化合物具有以下化學式：
  50. 如請求項33至49中任一項所述之化合物，其中至少一個R1A為鹵基。
  51. 如請求項33至49中任一項所述之化合物，其中至少一個R1A為-OR1C。
  52. 如請求項51所述之化合物，其中R1C為可選取代C1-12烴基(例如，C1-6烴基、C1-4烴基)。
  53. 如請求項33至49中任一項所述之化合物，其中R2C為-C(O)OR2D、-C(O)N(R2D)2或-N(R2D)C(O)OR2D。
  54. 如請求項33至49中任一項所述之化合物，其中R2C為-C(O)R2D。
  55. 如請求項53或54所述之化合物，其中每一R2D獨立為氫或C1-12烴基(例如，C1-6烴基、C1-4烴基)。
  56. 如請求項53或54所述之化合物，其中至少一個R2D為可選取代C1-12烴基，該可選取代係用胺基、氰基、鹵基、羥基中之一或更多者取代。
  57. 如請求項53或54所述之化合物，其中R2D為2至12員雜碳基，該2至12員雜碳基包含至少一個氮原子。
  58. 一種醫藥組成物，該醫藥組成物包含如請求項33至57中任一項所述之一化合物及一醫藥學上可接受之賦形劑或稀釋液。
  59. 一種抑制AAK1活性之方法，該方法包含使AAK1與如請求項33至57中任一項所述之一化合物接觸的步驟。
  60. 一種治療或管理由AAK1活性介導之一疾病或失調症之方法，該方法包含以下步驟：向需要接受該方法之一患者給予一治療有效劑量之一化合物，該化合物為如請求項33至57中任一項所述之一化合物，或如請求項58所述之一醫藥組成物。
  61. 如請求項60所述之方法，其中該疾病或失調症為阿茲海默症、躁鬱症、疼痛、帕金森氏症或精神分裂症。
  62. 如請求項61所述之方法，其中該疼痛為神經性疼痛。
  63. 如請求項62所述之方法，其中該神經性疼痛為肌肉纖維疼痛或周邊神經病(例如，糖尿病神經病)。
TW102108283A 2012-03-09 2013-03-08 唑並［１，５－ａ］嘧啶基化合物、包含其之組成物及其使用方法 TW201341386A (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261608765P 2012-03-09 2012-03-09

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW201341386A true TW201341386A (zh) 2013-10-16

Family

ID=47892052

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW102108283A TW201341386A (zh) 2012-03-09 2013-03-08 唑並［１，５－ａ］嘧啶基化合物、包含其之組成物及其使用方法

Country Status (26)

Country Link
US (3) US8946415B2 (zh)
EP (1) EP2834243B1 (zh)
JP (1) JP6418950B2 (zh)
KR (1) KR101965025B1 (zh)
CN (1) CN104302649B (zh)
AR (1) AR090292A1 (zh)
AU (1) AU2013230128B2 (zh)
BR (1) BR112014022000A8 (zh)
CA (1) CA2866143C (zh)
DK (1) DK2834243T3 (zh)
ES (1) ES2676224T3 (zh)
HK (1) HK1201257A1 (zh)
HU (1) HUE038786T2 (zh)
IL (1) IL234486A (zh)
IN (1) IN2014DN07384A (zh)
MX (1) MX345830B (zh)
NZ (1) NZ630721A (zh)
PL (1) PL2834243T3 (zh)
PT (1) PT2834243T (zh)
RU (1) RU2014140735A (zh)
SG (1) SG11201405561RA (zh)
TR (1) TR201808280T4 (zh)
TW (1) TW201341386A (zh)
UY (1) UY34668A (zh)
WO (1) WO2013134228A1 (zh)
ZA (1) ZA201406149B (zh)

Families Citing this family (31)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE038786T2 (hu) 2012-03-09 2018-11-28 Lexicon Pharmaceuticals Inc Pirazolo[1,5-a]pirimidin-alapú vegyületek, ezeket tartalmazó kompozíciók és eljárások alkalmazásukra
MX347917B (es) 2012-03-09 2017-05-17 Lexicon Pharmaceuticals Inc Compuestos a base de imidazo[1,2-b]piridazina, composiciones que los comprenden, y metodos para su uso.
US8901305B2 (en) 2012-07-31 2014-12-02 Bristol-Myers Squibb Company Aryl lactam kinase inhibitors
CN105121445A (zh) 2013-02-22 2015-12-02 百时美施贵宝公司 作为连接蛋白相关激酶1(AAK1)抑制剂的5H-色烯并[3,4-c]吡啶
TW201542550A (zh) * 2013-09-06 2015-11-16 Lexicon Pharmaceuticals Inc 吡唑并［１，５－ａ］嘧啶基化合物、包含彼之組合物以及使用彼之方法
ES2678877T3 (es) 2013-10-11 2018-08-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibidores de pirrolotriazina quinasa
DK3636649T3 (da) 2014-01-24 2024-05-21 Turning Point Therapeutics Inc Diarylmakrocykler som modulatorer af proteinkinaser
EP3099673B1 (en) * 2014-01-31 2018-09-26 Bristol-Myers Squibb Company Quinoline-based kinase inhibitors
TW201620911A (zh) * 2014-03-17 2016-06-16 雷西肯製藥股份有限公司 銜接子關聯激酶１之抑制劑、包含其之組成物、及其使用方法
US20170239249A1 (en) * 2014-09-30 2017-08-24 Bristol-Myers Squibb Company Quinazoline-based kinase inhibitors
AU2015365587B2 (en) * 2014-12-15 2020-07-23 Cmg Pharmaceutical Co., Ltd. Fused ring heteroaryl compounds and their use as TRK inhibitors
WO2016164295A2 (en) 2015-04-10 2016-10-13 Bristol-Myers Squibb Company Fused pyridines as kinase inhibitors
AU2016287568B2 (en) 2015-07-02 2020-08-20 Turning Point Therapeutics, Inc. Chiral diaryl macrocycles as modulators of protein kinases
BR112018000297A2 (pt) 2015-07-06 2018-09-04 Tp Therapeutics Inc polimorfo de macrociclo de diarila
EP3325488B1 (en) 2015-07-21 2020-06-24 Turning Point Therapeutics, Inc. Chiral diaryl macrocycle and use thereof in the treatment of cancer
MX2018005342A (es) 2015-11-02 2018-08-15 Janseen Pharmaceutica Nv Compuesto de [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidin-7-ilo.
EP3490564A4 (en) 2016-07-28 2020-02-26 Turning Point Therapeutics, Inc. MACRO CYCLE Kinase Inhibitors
AU2017353315B2 (en) 2016-11-02 2021-09-16 Janssen Pharmaceutica Nv (1,2,4)triazolo(1,5-a)pyrimidine compounds as PDE2 inhibitors
CA3041412A1 (en) * 2016-11-02 2018-05-11 Janssen Pharmaceutica Nv [1,2,4]triazolo[1,5-a]pyrimidine derivatives as pde2 inhibitors
MX2019005123A (es) 2016-11-02 2019-06-20 Janssen Pharmaceutica Nv Compuestos de [1,2,4]triazolo[1,5-a]pirimidina como inhibidores de pde2.
TWI808958B (zh) 2017-01-25 2023-07-21 美商特普醫葯公司 涉及二芳基巨環化合物之組合療法
WO2019023417A1 (en) 2017-07-28 2019-01-31 Tp Therapeutics, Inc. MACROCYCLIC COMPOUNDS AND USES THEREOF
DK3658557T3 (da) 2017-07-28 2024-07-29 Takeda Pharmaceuticals Co Tyk2-inhibitorer og anvendelser deraf
ES2929467T3 (es) 2017-12-19 2022-11-29 Turning Point Therapeutics Inc Compuestos macrocíclicos para tratar enfermedades
CN111362949B (zh) 2017-12-22 2021-12-21 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶化合物及其药物组合物及用途
CN109575025B (zh) 2018-01-23 2020-09-11 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 取代的吡唑并[1,5-a]嘧啶类的大环化合物
JP2022503932A (ja) * 2018-09-27 2022-01-12 フォチョン・ファーマシューティカルズ・リミテッド Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての置換イミダゾ［１，２－ａ］ピリジン及び［１，２，４］トリアゾロ［１，５－ａ］ピリジン化合物
EP3866789A4 (en) * 2018-10-15 2022-07-06 Nimbus Lakshmi, Inc. TYK2 INHIBITORS AND USES THEREOF
WO2021216441A1 (en) 2020-04-21 2021-10-28 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Aak1 inhibitors for use in treating viral infections
WO2021216454A1 (en) * 2020-04-21 2021-10-28 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. 4-(3-(pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidin-5-yl)piperazine for use in the the treatment of cov-229e or cov-oc43 coronaviruses infections
US11478733B2 (en) 2020-11-24 2022-10-25 Caterpillar Inc. Filter interlock with tabs mating with a pedestal or a housing

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5464764A (en) 1989-08-22 1995-11-07 University Of Utah Research Foundation Positive-negative selection methods and vectors
AU2515992A (en) 1991-08-20 1993-03-16 Genpharm International, Inc. Gene targeting in animal cells using isogenic dna constructs
US6194410B1 (en) * 1998-03-11 2001-02-27 Hoffman-La Roche Inc. Pyrazolopyrimidine and pyrazolines and process for preparation thereof
JP4847275B2 (ja) * 2005-10-21 2011-12-28 田辺三菱製薬株式会社 ピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジン化合物
RU2009115954A (ru) 2006-09-29 2010-11-10 Новартис АГ (CH) Пиразолопиримидины в качестве ингибиторов липидной киназы р13к
US20120058997A1 (en) * 2006-11-06 2012-03-08 Supergen, Inc. Imidazo[1,2-b]pyridazine and pyrazolo[1,5-a]pyrimidine derivatives and their use as protein kinase inhibitors
ES2548135T3 (es) * 2008-05-13 2015-10-14 Novartis Ag Heterociclos condensados que contienen nitrógeno y composiciones de los mismos como inhibidores de quinasa
US8513263B2 (en) * 2008-10-22 2013-08-20 Array Biopharma Inc. Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidine compounds as Trk kinase inhibitors
AR077468A1 (es) * 2009-07-09 2011-08-31 Array Biopharma Inc Compuestos de pirazolo (1,5 -a) pirimidina sustituidos como inhibidores de trk- quinasa
WO2011029027A1 (en) 2009-09-03 2011-03-10 Array Biopharma Inc. SUBSTITUTED PYRAZOLO[1,5-a]PYRIMIDINE COMPOUNDS AS mTOR INHIBITORS
WO2011087999A1 (en) * 2010-01-14 2011-07-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Pyrazolo[1,5-a]pyrimidines as mark inhibitors
DK2734205T3 (en) * 2011-07-21 2018-06-14 Tolero Pharmaceuticals Inc Heterocyclic Protein Kinase Inhibitors
HUE038786T2 (hu) 2012-03-09 2018-11-28 Lexicon Pharmaceuticals Inc Pirazolo[1,5-a]pirimidin-alapú vegyületek, ezeket tartalmazó kompozíciók és eljárások alkalmazásukra
MX347917B (es) 2012-03-09 2017-05-17 Lexicon Pharmaceuticals Inc Compuestos a base de imidazo[1,2-b]piridazina, composiciones que los comprenden, y metodos para su uso.
AU2013230066A1 (en) 2012-03-09 2014-09-25 Lexicon Pharmaceuticals, Inc. Inhibition of adaptor associated kinase 1 for the treatment of pain
TW201620911A (zh) * 2014-03-17 2016-06-16 雷西肯製藥股份有限公司 銜接子關聯激酶１之抑制劑、包含其之組成物、及其使用方法

Also Published As

Publication number Publication date
US20150183792A1 (en) 2015-07-02
ES2676224T3 (es) 2018-07-17
KR20140138864A (ko) 2014-12-04
EP2834243A1 (en) 2015-02-11
DK2834243T3 (en) 2018-07-23
WO2013134228A1 (en) 2013-09-12
BR112014022000A2 (pt) 2017-06-20
AR090292A1 (es) 2014-11-05
NZ630721A (en) 2016-12-23
CN104302649B (zh) 2017-06-23
TR201808280T4 (tr) 2018-07-23
CA2866143C (en) 2020-08-04
PL2834243T3 (pl) 2018-09-28
UY34668A (es) 2013-10-31
JP6418950B2 (ja) 2018-11-07
IL234486A (en) 2016-10-31
IN2014DN07384A (zh) 2015-04-24
CN104302649A (zh) 2015-01-21
CA2866143A1 (en) 2013-09-12
AU2013230128B2 (en) 2017-08-17
MX345830B (es) 2017-02-17
US8946415B2 (en) 2015-02-03
KR101965025B1 (ko) 2019-04-02
PT2834243T (pt) 2018-08-01
BR112014022000A8 (pt) 2021-06-15
US20170129896A1 (en) 2017-05-11
US20130253194A1 (en) 2013-09-26
SG11201405561RA (en) 2014-10-30
JP2015509535A (ja) 2015-03-30
RU2014140735A (ru) 2016-04-27
MX2014010589A (es) 2014-09-18
ZA201406149B (en) 2016-06-29
HK1201257A1 (zh) 2015-08-28
HUE038786T2 (hu) 2018-11-28
AU2013230128A1 (en) 2014-09-25
EP2834243B1 (en) 2018-04-25
US9403832B2 (en) 2016-08-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
TW201341386A (zh) 唑並［１，５－ａ］嘧啶基化合物、包含其之組成物及其使用方法
US9862724B2 (en) Pyrazolo[1,5-a]pyrimidine-based compounds, compositions comprising them, and methods of their use
TW201341385A (zh) 咪唑［１，２－ｂ］噠嗪基化合物、包含其之組成物及其使用方法
US20150183791A1 (en) IMIDAZO[1,2-b]PYRIDAZINE-BASED COMPOUNDS, COMPOSITIONS COMPRISING THEM, AND METHODS OF THEIR USE
JP6553081B2 (ja) アダプター関連キナーゼ１の阻害剤、それを含む組成物、及びその使用方法
TW202333667A (zh) 嘧啶或吡啶類衍生物及其醫藥用途
US11806350B2 (en) Prevention and/or treatment of CNS disorders