TW201339155A - □唑啶－２－酮化合物及其用途 - Google Patents
□唑啶－２－酮化合物及其用途 Download PDFInfo
- Publication number
- TW201339155A TW201339155A TW102106331A TW102106331A TW201339155A TW 201339155 A TW201339155 A TW 201339155A TW 102106331 A TW102106331 A TW 102106331A TW 102106331 A TW102106331 A TW 102106331A TW 201339155 A TW201339155 A TW 201339155A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- methyl
- amino
- trifluoromethyl
- compound
- etoac
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
- A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
- A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
- A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D498/04—Ortho-condensed systems
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
- Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
本發明係關於經□唑啶-2-酮取代之嘧啶化合物，其用作PI3K(磷脂醯肌醇-3-激酶)抑制劑；以及其醫藥組合物，其製造方法，及其治療依賴於PI3K之病狀、疾病及病症的用途。
Description
本發明係關於經唑啶-2-酮取代之嘧啶化合物，其充當PI3K(磷脂醯肌醇-3-激酶)抑制劑；以及其醫藥組合物，其製造方法及治療依賴於PI3K之病狀、疾病及病症的用途。
磷脂醯肌醇3-激酶(PI3K)包含脂質激酶家族，其催化磷酸酯基轉移至肌醇脂質之D-3'位置以產生磷酸肌醇-3-磷酸酯(PIP)、磷酸肌醇-3,4-二磷酸酯(PIP2)及磷酸肌醇-3,4,5-三磷酸酯(PIP3)，其轉而又藉由使含有普列克受質蛋白(pleckstrin)同源性、FYVE、Phox及其他磷脂結合域之蛋白質對接至常常位於質膜處之各種信號傳導複合物中來充當信號傳導級聯中之第二信使((Vanhaesebroeck等人，Annu.Rev.Biochem 70：535(2001)；Katso等人，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17：615(2001))。在兩種1類PI3K中，1A類PI3K為由與可為p85α、p55α、p50α、p85β或p55γ之調節次單元組成性締合的催化p110次單元(α、β、δ同功異型物)構成之雜二聚體。1B類子類具有一個家族成員，其為由與兩種調節次單元p101或p84中之一者締合的催化p110γ次單元構成之雜二聚體(Fruman等人，Annu Rev.Biochem.67：481(1998)；Suire等人，Curr.Biol.15：566(2005))。p85/55/50次單元之模組域包括Src同源(SH2)域，其結合活化受體及細胞質酪胺酸激酶上特定序列情形下之磷酸酪胺酸殘基，從而引起1A類PI3K之活化及定位。1B類PI3K直
接由G蛋白偶合受體活化，該等受體結合不同譜系之肽及非肽配位體(Stephens等人，Cell 89：105(1997))；Katso等人，Annu.Rev.Cell Dev.Biol.17：615-675(2001))。因而，I類PI3K之所得磷脂產物連接具有下游細胞活性之上游受體，該等細胞活性包括增殖、存活、趨化性、細胞轉運、活動力、代謝、發炎性及過敏性反應、轉錄及轉譯(Cantley等人，Cell 64：281(1991)；Escobedo及Williams,Nature 335：85(1988)；Fantl等人，Cell 69：413(1992))。
在許多情況下，PIP2及PIP3將病毒致癌基因v-Akt之人類同源物的產物Akt募集至質膜，在此處Akt充當對於生長及存活重要之許多細胞內信號傳導路徑的節點(Fantl等人，Cell 69：413-423(1992)；Bader等人，Nature Rev.Cancer 5：921(2005)；Vivanco及Sawyer,Nature Rev.Cancer 2：489(2002))。PI3K之異常調節(其常常經由Akt活化而增加存活率)為人類癌症中最普遍事件之一且已顯示以多個級別發生。腫瘤抑制基因PTEN使肌醇環之3'位置處的磷酸肌醇去磷酸化且因此拮抗PI3K活性，其在多種腫瘤中功能性缺失。在其他腫瘤中，p110α同功異型物之基因PIK3CA及Akt之基因得到擴增且其基因產物之蛋白質表現增加已在若干種人類癌症中得到證實。此外，用以上調p85-p110複合物之p85α的突變及易位已在人類癌症中描述。最後，活化下游信號傳導路徑之PIK3CA的體細胞錯義突變已在多種不同之人類癌症中極為頻繁地描述(Kang等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102：802(2005)；Samuels等人，Science 304：554(2004)；Samuels等人，Cancer Cell 7：561-573(2005))。
在一些腫瘤中，p110β同功異型物PIK3CB得到擴增或過表現。另外，研究指示由PTEN缺失驅動之腫瘤可能對p110β而非p110α敏感。(Jia等人，Nature,454：776-779(2008)。Wee等人，PNAS 105(35),13057-13062(2008)；Liu等人，Nature Rev.Drug Discovery 8：627-644
(2009))。
p110δ與p110γ皆主要在造血系統中表現且似乎在白血球信號傳導中起重要作用(Liu等人Blood 110(4),1191-1198(2007))。然而，其亦在一些癌症中起作用(Knobbe等人，Brain Pathol.13,507-518(2003)；Kang等人PNAS 103(5),1289-1294(2006))。p110δ表現侷限於白血球，從而指明其在白血球介導疾病中之潛在作用(Vanhaesebroeck等人PNAS 94(9),4330-4335(1997))。p110δ在急性骨髓白血病患者之母細胞中得到上調，在該等細胞中其在細胞存活方面起重要作用(Sujobert等人，Blood 106(3),1063-1066(2005))，指示其作為白血病及其他惡性血液病中之標靶之潛力。p110δ活化在B細胞惡性病之發展中起重要作用且因此抑制p110δ可用於治療B細胞惡性病，諸如慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、非霍奇金氏淋巴瘤(non-Hodgkin's lymphoma，NHL)、漿細胞骨髓瘤及霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma，NH)(Castillo等人，Expert Opin.Investig.Drugs 21,15-22(2012))。
此等觀察結果顯示磷酸肌醇-3激酶及此信號傳導路徑之上游及下游組件的失調為與人類癌症及增生性疾病相關之最常見失調之一(Parsons等人，Nature 436：792(2005)；Hennessey等人，Nature Rev.Drug Disc.4：988-1004(2005))。
公開國際專利申請案WO2007/084786描述抑制PI3K之經取代之嘧啶分子。
仍需要抑制I類PI3K同功異型物(α、β、δ及γ)中之一者以上的活性之化合物，因為與具有唯一特異性(例如對於I類PI3K家族之一個成員之特異性)之化合物相比，該等化合物被視為能夠避免由經由其他同功異型物進行路徑重佈引起之適應機制。
對至少一種PI3K同功異型物之抑制效力增加(亦即以較低濃度抑
制至少一種PI3K同功異型物，尤其為α及β同功異型物中之一者或兩者)亦可為有利的。舉例而言，在PTEN缺失腫瘤之情況下，儘管驅動同功異型物為p110b，但完整功效可能需要其他IA類同功異型物之參與。亦需要有效力地抑制PI3Kα激酶之化合物，例如用於治療主要由編碼p110a之基因(例如PIK3CA H1047R或E545K)的致癌形式驅動之癌症，以及顯示PIK3CA複本數目增加之腫瘤。
亦需要顯示與mTOR相比偏向於一或多種PI3K同功異型物(例如α、β、δ及γ同功異型物中之至少兩者、較佳三者，例如α、β及δ同功異型物)之選擇性抑制的化合物，因為mTOR抑制效應一般會降低安全窗，當化合物對mTOR之抑制強於對PI3K之抑制(不利的比率)時尤其如此。
此外，需要具有降低之(尤其不具有)脫靶效應(諸如微管蛋白結合)之PI3K抑制劑，因為該等效應會引起與中靶PI3K抑制無關之毒性效應且因此該等化合物可能需要額外小心的給藥控制以確保治療效果可控且可歸因於PI3K抑制。因此，需要具有降低或弱的脫靶效應或不具有脫靶效應之化合物。
適宜地，尋求顯示增強之對至少一種(例如PI3Kα)、但尤其兩種(例如PI3Kα及PI3Kβ)或三種(例如PI3Kα、PI3Kβ及PI3Kδ)或所有四種1類PI3K(PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ及PI3Kλ)之抑制以及降低之(尤其不存在)脫靶效應的化合物。
本發明提供化合物及其醫藥組合物，該等化合物為PI3K抑制劑。本發明亦提供包含彼等化合物之組合。本發明進一步提供本發明化合物用於治療、預防或改善PI3K介導性疾病(諸如癌症)之方法中，該等方法包含向有需要之個體投與有效量之本發明之PI3K抑制化合物。本發明亦提供適用於製備本發明化合物之中間物。
在一個態樣中，本發明提供一種式(I)化合物
其中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2及R3=H；R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH；或R4=-CH2OH，且R5=H；或R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3、-CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2，或
R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5連接並形成-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH；或R2=R4=H；且R3與R5連接並形成基團或基團
或R3=R5=H；且R2與R4連接並形成基團
或其醫藥學上可接受之鹽。
波形線指示嗎啉之連接點以及(若存在)其他所示基團與分子其餘部分之連接點。
式(I)化合物被視為例如適合用於治療依賴於PI3激酶之疾病，尤其增生性疾病，諸如癌症，例如腫瘤疾病。
本發明可藉由參考以下描述(包括所提及之定義及推斷實例)而更全面地瞭解。除非另有規定，否則所述實施例將獨立地、共同地或以任何組合形式進行。如本文中所使用，術語「包括」、「含有」及「包含」以其開放式、非限制性意義用於本文中。
除非另外指定，否則術語「本發明化合物(compounds of the present invention)」或「本發明化合物(a compound of the present invention)」及其類似術語係指式(I)及其子式(例如式(IA)及(IA'))化合物，及該等化合物之鹽，以及同位素標記之化合物(包括氘取代)。
除非另有規定，否則本發明化合物具有式(I)及其子式中所描繪之立體化學。
圖1為實例10之結晶物質的差示掃描熱量測定圖。
圖2為實例10之結晶物質的粉末X射線繞射圖。
圖3為實例18、批次A之結晶物質的差示掃描熱量測定圖。
圖4為實例18、批次A之結晶物質的粉末X射線繞射圖。
圖5為實例18、批次B之結晶物質的差示掃描熱量測定圖。
圖6為實例18、批次B之結晶物質的粉末X射線繞射圖。
圖7為實例18、批次C之結晶物質的差示掃描熱量測定圖。
圖8為實例18、批次C之結晶物質的粉末X射線繞射圖。
圖9為實例18、批次D之結晶物質的差示掃描熱量測定圖。
圖10為實例18、批次D之結晶物質的粉末X射線繞射圖。
圖11為實例18、批次E之結晶物質的差示掃描熱量測定圖。
圖12為實例18、批次E之結晶物質的粉末X射線繞射圖。
本文描述本發明之多種實施例。應認識到各實施例中所指定之特徵可與其他指定特徵組合以提供本發明之其他實施例。本文亦描述本發明之多種(所列舉)實施例。
在一個態樣中，本發明提供一種式(I)化合物：
其中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2及R3=H；R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH；或R4=-CH2OH，且R5=H；或R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；
R3=H；R4=-CH3、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3、-CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5連接並形成-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH；或R2=R4=H；且R3與R5連接並形成基團或基團
或R3=R5=H；且R2與R4連接並形成基團
或其醫藥學上可接受之鹽。
在彼態樣之一較佳實施例中，提供一種式(I)化合物，其中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2及R3=H；R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH；或R4=-CH2OH，且R5=H；或R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或
R3=R4=H
R2與R5連接並形成-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH；或R2=R4=H；且R3與R5連接並形成基團或基團
或R3=R5=H；且R2與R4連接並形成基團
或其醫藥學上可接受之鹽。
在彼態樣之一更佳實施例中，提供一種式(I)化合物，其中，R1=
，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2及R3=H；R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH；或R4=-CH2OH，且R5=H；或R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5連接並形成-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH；
或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一較佳實施例中，提供一種式(I)化合物
其中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2及R3=H；R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH；或R4=-CH2OH，且R5=H；或R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或
R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5連接並形成-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一替代性較佳實施例中，提供一種式(I)化合物
其中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；
R2及R3=H；R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH；或R4=-CH2OH，且R5=H；或R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5連接並形成-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
關於上述實施例中之任一者中的式(I)，提供以下詳細描述。
R
1a
在一實施例中，R1a為H。
在另一實施例中，R1a為-CH3。
在一較佳實施例中，R1a為H。
下文描述本發明之其他實施例。
在一實施例中，R1=
，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3,-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5=-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=
，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=
，其中D=氘；R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=
，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，較佳地，R1=，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH且R5=H或R4=H且R5=CH3或-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，較佳地，R1=，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3或-CH2CH2OH，且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
在一實施例中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5=-(CH2)4-；或R4=R5=H；且
R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=
，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，
或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，R1=，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，較佳地，R1=，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH且R5=H或R4=H且R5=CH3或-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一實施例中，較佳地，R1=
，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3，且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
在另一較佳實施例中，R1=，其中R1a=H或-CH3
R2=-CH2OH；R3=H；R4=-CH3，且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
在一實施例中，提供下式(IA')化合物：
其中R1a、R2、R3、R4及R5如上文所提及之實施例中之任一者中所述。
在一實施例中，R1a可為氫，由此提供下式(IA)化合物：
其中，R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之一實施例中，R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之另一實施例中，R2=-CH3或-CH2OH；
R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH且R5=H或R4=H且R5=CH3或-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之另一實施例中，R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3或-CH2CH2OH且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之另一實施例中，R2=-CH3；R3=H；R4=-CH2CH2OH，且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
或者，在R1a可為氫之一實施例中，提供下式(IA)化合物：
其中，R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；
R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之一實施例中，R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之另一實施例中，R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3或-CH2OH且R5=H或R4=H且R5=CH3或-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之另一實施例中，R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3，且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
在式(IA)化合物之一較佳實施例中，R2=-CH2OH；
R3=H；R4=-CH3，且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
如下提供其他實施例(所列舉)：
實施例1.一種式(I)化合物
其中，R1=，其中R1a=H或-CH3
或R1=，其中D=氘；R2及R3=H；R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH；或R4=-CH2OH，且R5=H；或
R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3、-CH2OH、-CH2CH(OH)CH3或-CH2C(OH)(CH3)2，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5連接並形成-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH；或R2=R4=H；且R3與R5連接並形成基團或基團
或R3=R5=H；且R2與R4連接並形成基團
或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例2.根據實施例1之化合物，其中，R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H
R2與R5=-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例3.根據實施例1或實施例2之化合物，其中R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R4=R5=H；且
R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例4.根據實施例1至3中任一者之化合物，其中R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例5.根據實施例1至4中任一者之化合物，其具有式(IA')
其中R1a=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例6.根據實施例1之化合物，其具有式(IA)：
其中，R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例7.根據實施例6之化合物，其中R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例8.根據實施例7之化合物，其中R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH且R5=H或R4=H且R5=CH3或-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例9.根據實施例8之化合物，其中R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3或-CH2CH2OH且R5=H，或其醫藥學上可接受之鹽。
實施例10.根據實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係選自(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5,5-二甲基-唑啶-2-酮、外消旋3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-4,5'-聯嘧啶-6-基)-4-(羥基甲基)-4-甲基唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-4,5'-聯嘧啶-6-基)-4-(羥基甲基)-4-甲基唑啶-2-酮(未確定絕對立體化學)、(R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-4,5'-聯嘧啶-6-基)-4-(羥基甲基)-4-甲基唑啶-2-酮(未確定絕對立體化學)、(3aS,7aS)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-六氫-苯并唑-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-甲氧基甲基-唑啶-2-酮、(4S,5S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-(D8-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-(2-羥基-乙基)-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基]-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、
甲酸(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-甲基-2-側氧基-唑啶-4-基甲酯、(S)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基]-4-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-4-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-D8-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-4-甲基唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(4S,5S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-4-甲基-唑啶-2-酮、(R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-唑啶-2-酮、(3aR,6aR)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)四氫呋喃并[3,4-d]唑-2(3H)-酮、外消旋(3aR*,6R*,6aR*)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-6-羥基六氫-2H-環戊并(cyclopenta)[d]唑-2-酮、(3aR,6R,6aR)-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-6-羥基六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮、(3aS,6S,6aS)-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-6-羥基六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮及
(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-(2-羥基乙基)-4-甲基唑啶-2-酮。
實施例11.根據實施例1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係選自(4S,5R)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基]-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮及(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-(2-羥基乙基)-4-甲基唑啶-2-酮。
實施例12.一種化合物，其係選自(4S,5R)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基]-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮及(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-(2-羥基乙基)-4-甲基唑啶-2-酮。
實施例13.化合物(4S,5R)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基]-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮。
實施例14.化合物(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮。
實施例15.化合物(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-(2-羥基乙基)-4-甲基唑啶-2-酮。
實施例16.一種實施例13、實施例14或實施例15之化合物的醫藥學上可接受之鹽。
在本發明之另一態樣中，提供自實例10獲得之化合物的結晶形式，其具有實質上與圖2中所示之X射線粉末繞射光譜相同的X射線繞
射光譜。
在本發明之另一態樣中，提供自實例18、批次A獲得之化合物的結晶形式，其具有實質上與圖4中所示之X射線粉末繞射光譜相同的X射線繞射光譜。
在本發明之另一態樣中，提供自實例18、批次B獲得之化合物的結晶形式，其具有實質上與圖6中所示之X射線粉末繞射光譜相同的X射線繞射光譜。
在本發明之另一態樣中，提供自實例18、批次C獲得之化合物的結晶形式，其具有實質上與圖8中所示之X射線粉末繞射光譜相同的X射線繞射光譜。
在本發明之另一態樣中，提供自實例18、批次D獲得之化合物的結晶形式，其具有實質上與圖10中所示之X射線粉末繞射光譜相同的X射線繞射光譜。
在本發明之另一態樣中，提供自實例18、批次E獲得之化合物的結晶形式，其具有實質上與圖12中所示之X射線粉末繞射光譜相同的X射線繞射光譜。
關於X射線繞射峰位置的術語「基本上相同」意謂考慮典型峰位置及強度可變性。舉例而言，熟習此項技術者應瞭解，峰位置(2θ)將展示一定裝置間可變性，通常多達0.2°。此外，熟習此項技術者應瞭解，相對峰強度將展示裝置間可變性以及由結晶度、較佳取向、所製備樣品表面及熟習此項技術者已知之其他因素引起之可變性，且僅應作為定性量度。
由本文所述之特定例示化合物提供特定實施例。
本發明提供化合物及其醫藥調配物，其適用於治療PI3K促成本文所述之疾病發病機制的疾病、病狀及/或病症。
本發明化合物可由包括類似於化學技術中熟知之方法的合成途
徑，尤其根據本文所含之描述來合成。起始物質一般購自諸如Aldrich Chemicals(Milwaukee,Wis.)之商業來源或容易使用熟習此項技術者熟知之方法製備(例如藉由Louis F.Fieser及Mary Fieser,Reagents for Organic Synthesis，第1-19卷，Wiley,New York(1967-1999版)，或Beilsteins Handbuch der organischen Chemie,4,Aufl.編Springer-Verlag,Berlin(包括增刊)(亦可經由Beilstein在線資料庫得到))中一般性所述之方法製備。
出於說明性目的，下文所描繪之反應流程提供用於合成本發明化合物以及關鍵中間物的可能途徑。關於個別反應步驟之更詳細描述，參見以下實例部分。熟習此項技術者應瞭解，可使用其他合成途徑合成本發明化合物。儘管流程中描繪且下文論述特定起始物質及試劑，但可容易用其他起始物質及試劑替代以提供各種衍生物及/或反應條件。另外，由下文所述之方法製備之多種化合物可根據本發明揭示內容使用熟習此項技術者熟知之習知化學方法進一步修飾。
在製備本發明化合物，可能需要保護中間物之遠端官能基(例如一級或二級胺基、羥基或羧基)。對該保護之需要將視遠端官能基之性質及製備方法之條件而變化。適合之胺基保護基(NH-Pg)包括乙醯基、三氟乙醯基、第三丁氧羰基(BOC)、苯甲氧羰基(CBz)及9-茀基亞甲氧基羰基(Fmoc)。適合之羥基保護基包括三烷基矽烷基醚，其中一或兩個烷基可經苯基置換。適合之羧基保護基(C(O)O-Pg)包括烷基酯(例如甲基、乙基或第三丁基)、苯甲基酯、矽烷基酯及其類似基團。對該保護之需要容易由熟習此項技術者判定。關於保護基及其使用之一般性描述，參見T.W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley & Sons,New York,1991。
流程1(以下)描述用於製備式(IA')化合物之可能途徑，其中R1-R5如上文所定義。在存在保護基之情況下，增加脫除保護基步驟以使經
保護之IA'轉化為IA'。
或者，式(IA')化合物亦可藉由顛倒流程I中所示之步驟，亦即首先進行鈴木偶合(Suzuki coupling)，隨後與Ib進行布奇沃德反應(Buchwald reaction)來合成。
對於非市售之彼等唑啶-2-酮Ib，以下流程2提供一種製備其中R2-R5如上文所定義之彼等中間物之方法。若一級羥基存在於R2至R5中之任一者中，則如流程3中所例示，先進行選擇性保護步驟。胺基可在如流程4中所示之另一先前步驟中加以保護，其中亦顯示不同羥基保護基。
如流程2中一般性所示，且如流程5中具體所示，用三光氣使流程3之經保護產物環化，得到Ib中間物之實例。
如流程6中所示，用氫化鈉使流程4之經雙保護產物環化，得到Ib
中間物之實例。
流程7描繪得到流程4之經雙保護中間物的替代途徑，接著其可如流程6中所示進行環化。
以下流程8提供酸酯中間物B之合成。
如流程1中所示，流程6之環化產物與4,6-二氯-嘧啶中間物(例如
中間物A或來自步驟10.1之產物，兩者皆在下文提及)反應可得到其他中間物，且特定中間物如下所示：
如流程1中所示所形成之中間物與中間物B進一步反應得到如下經保護產物IA'：
因此，本發明之中間化合物包括下式化合物：
其中R1a及R4如本文先前所定義，Hal為鹵素，諸如氯，且PG為保護基，例如矽烷基保護基，其形成例如三烷基矽烷基醚，其中一或兩個烷基可經苯基置換，例如烷基-二苯基-矽烷基醚保護基，具體為二甲基-第三丁基-矽烷基或二苯基-第三丁基矽烷基。
本發明之另一中間化合物包括下式化合物：
若一級羥基存在於R2至R5中之任一者中，則可關於本文中之各式設想如上文所描繪之其他類似經保護之中間化合物。該等經保護之化合物亦包括於本發明中。舉例而言，當R4為基團-CH2CH2OH時，此可經保護以得到R4為-CH2CH2O-PG(其中PG如上文所定義)之化合物，例如：
脫除經保護產物IA'之經第三丁基二苯基矽烷基或第三丁基二甲基矽烷基保護之羥基的保護基(矽烷基醚之一般脫除保護基)以得到例如最終產物，可使用HF.吡啶(例如THF溶液)或HCl達成。
本發明化合物或本文中所使用之中間物可以化合物本身形式(例如游離鹼形式)或以其鹽(若例如化合物之pKA值允許形成鹽)形式分離且使用。如本文中所使用，術語「鹽(salt)」或「鹽(salts)」係指本發明化合物之酸加成或鹼加成鹽。「鹽」尤其包括「醫藥學上可接受之鹽」。術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留本發明化合物之生物有效性及性質且通常並非生物學上或另外不合需要之鹽。本發明化合物由於胺基存在而能夠形成酸加成鹽。本發明化合物本身為較佳的。
用於形成醫藥學上可接受之酸加成鹽的無機酸及有機酸包括例如乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙烷二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、磺酸基水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及三氟乙酸鹽。
用於衍生鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似酸。
用於衍生鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、草酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸、磺基水楊酸及其類似酸。醫藥學上可接受之鹼加成鹽可與無機鹼及有機鹼形成。
用於衍生鹽之無機鹼包括例如銨鹽及元素週期表之第I至XII欄的金屬。在某些實施例中，鹽可衍生自鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；尤其適合之鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。
用於衍生鹽之有機鹼包括例如一級胺、二級胺及三級胺、經取代之胺(包括天然存在的經取代之胺)、環胺、鹼性離子交換樹脂及其類似物。某些有機胺包括異丙胺、苄星青黴素、膽酸鹽、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺、哌嗪及緩血酸胺。
在可形成本發明之醫藥學上可接受之鹽的情況下，其可藉由習知化學方法由母化合物、鹼性或酸性部分合成。一般而言，該等鹽可
藉由使此等化合物之游離酸形式與化學計算量之適當鹼(諸如鈉、鈣、鎂或鉀之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或其類似物)反應，或藉由使此等化合物之游離鹼形式與化學計算量之適當酸反應來製備。該等反應通常在水中或在有機溶劑中，或在兩者之混合物中進行。一般而言，當可實行時，需要使用非水性介質，如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈。其他適合鹽之清單可見於例如「Remington's Pharmaceutical Sciences」，第20版，Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)及Stahl及Wermuth之「Handbook of Pharmaceutical Salts：Properties,Selection,and Use」(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)中。
除非另外指示，否則本文所給出之任何式子意欲表示未標記形式。顯示化合物經氘同位素標記之形式，其中氘(D)作為取代基以替代H。可製備本發明之其他同位素標記之化合物且其具有由本文所給出之式子描繪的結構，但一或多個原子經具有所選原子質量或質量數之原子置換。可併入本發明化合物中的同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，分別諸如2H、3H、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl、125I。本發明可包括如本文所定義之各種同位素標記之化合物，例如存在諸如3H、13C及14C之放射性同位素的彼等化合物。該等同位素標記之化合物適用於代謝研究(使用14C)；反應動力學研究(使用例如2H或3H)；偵測或成像技術，諸如正電子發射斷層攝影法(PET)或單光子發射電腦斷層攝影法(SPECT)，包括藥物或基質組織分佈分析；或患者之放射性治療。詳言之，18F或經標記化合物對於PET或SPECT研究可能特別合乎需要。本發明之同位素標記之化合物一般可藉由進行流程或下文所述之實例及製備中所揭示之程序藉由用容易獲得之同位素標記之試劑替代非同位素標記之試劑(例如氘標記之嗎啉(D8-嗎啉))來製備。
此外，用較重同位素，尤其氘(亦即2H或D)取代可得到由較大代謝穩定性所產生之某些治療優點，例如活體內半衰期延長、劑量需求降低、CYP抑制(競爭性或時間依賴性)降低或治療指數改善。舉例而言，用氘取代可調節未氘化化合物之不合需要的副作用，諸如競爭性CYP抑制、時間依賴性CYP不活化等。應瞭解在此情形下氘被視為本發明化合物中之取代基。該種較重同位素(具體為氘)之濃度可由同位素增濃因子定義。如本文中所使用，術語「同位素增濃因子」意謂指定同位素之同位素豐度與天然豐度之間的比率。若本發明化合物中之取代基表示為氘，則該化合物中各指定氘原子之同位素增濃因子為至少3500(在各指定氘原子處併入52.5%氘)、至少4000(併入60%氘)、至少4500(併入67.5%氘)、至少5000(併入75%氘)、至少5500(併入82.5%氘)、至少6000(併入90%氘)、至少6333.3(併入95%氘)、至少6466.7(併入97%氘)、至少6600(併入99%氘)或至少6633.3(併入99.5%氘)。
此外，本發明化合物(包括其鹽)亦可以其水合物形式獲得，或包括用於其結晶之其他溶劑。本發明化合物可固有地或藉由設計與醫藥學上可接受之溶劑(包括水)形成溶劑合物。該等溶劑分子為藥物技術中常用之溶劑分子，已知其對接受者無害，例如水、乙醇及其類似物。術語「水合物」係指溶劑分子為水之複合物。術語「溶劑合物」係指本發明化合物(包括其醫藥學上可接受之鹽)與併入晶格結構中之一或多個溶劑分子的分子複合物。溶劑合物中之溶劑分子可以有序排列及/或無序排列存在。溶劑合物可包含化學計算量或非化學計算量之溶劑分子。舉例而言，具有非化學計算量之溶劑分子的溶劑合物可由自溶劑合物部分失去溶劑而產生。溶劑合物可以二聚物或寡聚物形式存在，其在晶格結構中包含一個以上本發明化合物之分子。
本發明化合物(包括其鹽、水合物及溶劑合物)可固有地或藉由設
計形成多晶型物。
如本文中所使用，「多晶型物」係指具有相同化學組成但形成晶體之分子、原子及/或離子的空間排列不同之結晶形式。
如本文中所使用，「非晶形」係指非結晶之分子、原子及/或離子的固體形式。非晶形固體不顯示確定的X射線繞射圖案。
本發明之醫藥學上可接受之溶劑合物包括結晶溶劑可經同位素取代(例如D2O、d6-丙酮、d6-DMSO)之溶劑合物。
熟習此項技術者應認識到，本發明化合物含有對掌性中心且因此以異構形式存在。如本文中所使用，術語「異構體」係指具有相同分子式但原子之排列及組態不同之不同化合物。又如本文中所使用，術語「光學異構體」或「立體異構體」係指本發明之特定化合物可存在的多種立體異構組態中之任一者。應瞭解取代基可在碳原子之對掌性中心處連接。因此，本發明化合物包括對映異構體，藉由在本發明化合物之結構描述中指示對掌性中心處之立體特異性排列所示，其中間斷楔形鍵指示所連接之取代基或原子在平面下方且實心楔形鍵指示所連接之取代基或原子在平面上方。
「對映異構體」為一對彼此不可重疊鏡像之立體異構體。一對對映異構體之1：1混合物為「外消旋」混合物。適當時，使用該術語表示外消旋混合物。
「非對映異構體」為具有至少兩個不對稱原子、但彼此不為鏡像之立體異構體。
絕對立體化學係根據卡恩-英格爾-普雷洛格R-S系統(Cahn-Ingold-Prelog R-S system)指定。當化合物為純對映異構體時，各對掌性碳之立體化學可由R或S指定。絕對組態未知之解析化合物可依其在鈉D線波長下使平面偏振光旋轉的方向(右旋或左旋)而指定為(+)或(-)。本文所述之某些化合物含有一或多個不對稱中心或軸，且因此可產生
對映異構體、非對映異構體及其他立體異構形式，其可根據絕對立體化學定義為(R)-或(S)-。
本發明化合物之任何不對稱原子(例如對掌性碳或其類似物)可富含對映異構，例如(R)-或(S)-組態。在某些實施例中，在特定不對稱原子(例如對掌性碳)所述之(R)-或(S)-組態中各不對稱原子具有至少50%對映異構過量、至少60%對映異構過量、至少70%對映異構過量、至少80%對映異構過量、至少90%對映異構過量、至少95%對映異構過量或至少99%對映異構過量。
因此，本發明化合物可呈實質上純對映異構體形式。
任何所得異構體混合物可基於組分之物理化學差異而分離為純或實質上純的光學異構體，例如藉由層析及/或分步結晶。
光學活性(R)-及(S)-異構體可使用對掌性合成組元或對掌性試劑製備，或使用習知技術解析。任何所得最終產物或中間物之外消旋體可藉由已知方法解析為光學對映體。舉例而言，已知方法包括分離使用光學活性酸或鹼獲得之其非對映異構鹽，及釋放光學活性酸性或鹼性化合物。因此，特別可使用鹼性部分將本發明化合物解析為其光學對映體，例如藉由分步結晶與以下光學活性酸形成之鹽：例如酒石酸、二苯甲醯基酒石酸、二乙醯基酒石酸、二-O,O'-對甲苯甲醯基酒石酸、杏仁酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸。外消旋產物亦可藉由對掌性層析(例如高壓液相層析(HPLC))使用對掌性吸附劑解析。
若化合物含有雙鍵，則取代基可為E或Z組態。若化合物含有經二取代之環烷基，則環烷基取代基可具有順式或反式組態。亦意欲包括所有互變異構形式。
含有能夠充當氫鍵之供體及/或接受體的本發明化合物能夠與適合之共晶體形成劑形成共晶體。此等共晶體可由本發明化合物藉由已知共晶體形成程序來製備。該等程序包括研磨、加熱、共昇華、共熔
化或在結晶條件下在溶液中使本發明化合物與共晶體形成劑接觸並分離由此形成之共晶體。適合之共晶體形成劑包括WO 2004/078163中所述之形成劑。因此，本發明進一步提供包含本發明化合物之共晶體。
式(I)化合物抑制PI3激酶(PI3K)且因此可適用於治療蛋白質或脂質激酶依賴性疾病，尤其依賴於I類PI3激酶PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ及PI3Kγ或一或多種其個別激酶成員或所提及激酶中任何兩者或兩者以上之任何組合的疾病。
抑制I類PI3K同功異型物(α、β、δ及γ)中之一者以上的活性、尤其對IA類成員p110a、p110b及p110d及視情況以及IB類成員p110g實質上等效之化合物被視為有益的，因為與具有唯一特異性(例如對於I類PI3K家族之一個成員之特異性)之化合物相比，該等化合物被視為能夠避免由經由其他同功異型物進行路徑重佈引起之適應機制。「等效」意謂化合物對若干種同功異型物之抑制程度類似，例如如本文所述之酶或細胞分析中所量測。
對至少一種PI3K同功異型物之抑制效力增加(亦即以較低濃度抑制至少一種PI3K同功異型物)亦可為有利的。舉例而言，在PTEN缺失腫瘤之情況下，儘管驅動同功異型物為p110b，但完整功效可能需要其他IA類同功異型物之參與。舉例而言，對α及β同功異型物之效力可為有利的。
亦需要有效力地抑制PI3Kα激酶之化合物，例如用於治療主要由編碼p110a之基因(例如PIK3CA H1047R或E545K)的致癌形式驅動之癌症，以及顯示PIK3CA複本數目增加之腫瘤。
希望本發明化合物顯示所提及之PI3激酶活性而對mTOR不顯示活性，或至少顯示優先於mTOR抑制一或多種I類PI3激酶之有利選擇性。舉例而言，需要顯示與mTOR相比偏向於一或多種PI3K同功異型
物(例如至少兩者、較佳三者，例如α、β及δ同功異型物)之選擇性抑制的化合物，因為mTOR抑制效應一般會降低安全窗，更尤其當化合物對mTOR之抑制強於對PI3K之抑制(不利的比率)時。
此外，需要具有降低之脫靶效應或不具有脫靶效應(諸如不具有微管蛋白結合)之PI3K抑制劑，因為該等效應會引起與中靶PI3K抑制無關之毒性效應且因此該等化合物可能需要額外小心的給藥控制以確保治療效應可控且可歸因於PI3K抑制。當使用本文所述之程序量測時，本發明化合物顯示弱的或無可觀測到的脫靶作用(微管蛋白結合)。
需要抑制一種以上I類PI3K同功異型物(α、β、δ及γ)、尤其對IA類成員p110a、p110b及p110d及視情況以及IB類成員p110g實質上等效且另外具有降低之脫靶效應或不具有脫靶效應(諸如不具有微管蛋白結合)或降低之微管蛋白結合的化合物。
適宜地，尋求顯示增強之對至少一種(例如PI3Kα)、但尤其兩種(例如PI3Kα及PI3Kβ)或三種(例如PI3Kα、PI3Kβ及PI3Kδ)或所有四種1類PI3K(PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ及PI3Kγ)之抑制以及降低之(尤其不存在)脫靶效應(例如降低之或不存在微管蛋白結合)的化合物。合意地，此等化合物亦顯示與mTOR相比偏向於一或多種PI3K同功異型物(例如至少兩者、較佳三者，例如α、β及δ同功異型物)之選擇性抑制。
因而，在另一態樣中，本發明化合物可用於(例如製造藥劑)治療個體(例如哺乳動物，較佳人類)與PI3激酶之抑制或拮抗作用相關之疾病、病狀或病症。由於與PI3激酶抑制相關，因此本發明化合物被視為適用於治療諸如癌症之增生性疾病。由本發明化合物治療之特定疾病/病狀包括腦、腎、肝、腎上腺、膀胱、乳房、胃(尤其胃腫瘤)、食道、卵巢、結腸、直腸、前列腺、胰臟、肺(例如非小細胞肺癌、小細胞肺癌)、陰道、甲狀腺之良性或尤其惡性腫瘤、實體腫瘤、癌
瘤，肉瘤、膠質母細胞瘤、多發性骨髓瘤或胃腸癌(尤其結腸癌或結腸直腸腺瘤)、或頸部及頭部腫瘤、其他疾病，諸如考登症候群(Cowden syndrome)、萊-杜二氏病(Lhermitte-Duclos disease)及班-左二氏症候群(Bannayan-Zonana syndrome)(或PI3K/PKB路徑經異常活化之疾病)、前列腺增生、瘤形成(尤其具有上皮特徵之瘤形成)，較佳為乳房癌或鱗狀細胞癌、B細胞惡性病(諸如慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、非霍奇金氏淋巴瘤(NHL)、漿細胞骨髓瘤及霍奇金氏淋巴瘤(NH)或白血病)。該等化合物宜能夠促使腫瘤消退並防止腫瘤轉移之形成及轉移(亦微轉移)之生長。亦可使用式(I)化合物治療涉及若干或尤其個別脂質激酶及/或(其他)絲胺酸/蘇胺酸蛋白激酶之免疫系統疾病。
除非本文另有指示或明顯與上下文矛盾，否則如本文中所使用，在本發明文中(尤其在申請專利範圍文中)所使用之術語「一(a)」、「一(an)」及「該」及類似術語應解釋為涵蓋單數與複數。
除非本文另有指示或明顯與上下文矛盾，否則本文所述之所有方法均可以任何適合之次序進行。本文所提供之任何及所有實例或例示性語言(例如「諸如」)的使用僅意欲更佳地闡明本發明且不對另外主張之本發明的範疇加以限制。
本發明化合物通常以醫藥組合物(例如本發明化合物及至少一種醫藥學上可接受之載劑)形式使用。
因此，在另一態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含本發明化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。
本發明化合物可以非晶形式提供於組合物中。本發明化合物可以其游離形式，亦即不以鹽形式(游離鹼形式)提供於組合物中。本發明化合物可以其游離形式，亦即不以鹽形式(游離鹼形式)且亦以非晶形式提供於組合物中。
如本文中所使用，術語「醫藥學上可接受之載劑」包括如熟習此項技術者所已知之一般認為安全(GRAS)之溶劑、分散介質、塗佈劑、界面活性劑、抗氧化劑、防腐劑(例如抗細菌劑、抗真菌劑)、等滲劑、吸收延遲劑、鹽、防腐劑、藥物穩定劑、黏合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、調味劑、染料、緩衝劑(例如順丁烯二酸、酒石酸、乳酸、檸檬酸、乙酸、碳酸氫鈉、磷酸鈉及其類似物)及其類似物及其組合(參見例如Remington's Pharmaceutical Sciences，第18版Mack Printing Company,1990，第1289-1329頁)。除非任何習知載劑與活性成分不相容，否則預期其用於治療劑或醫藥組合物中。出於本發明之目的，溶劑合物及水合物被視為包含本發明化合物及溶劑(亦即溶劑合物)或水(亦即水合物)之醫藥組合物。
調配物可使用習知溶解及混合程序來製備。舉例而言，將原料藥(bulk drug substance)(亦即本發明化合物或化合物之穩定形式(例如與環糊精衍生物或其他已知複合劑之複合物))溶解於存在一或多種上述賦形劑之適合溶劑中。本發明化合物通常調配於藥物劑型中以提供劑量容易控制之藥物並給與患者以美觀且容易處置之產品。
醫藥組合物可經調配用於特定投藥途徑，諸如經口投藥、非經腸投藥及經直腸投藥等。另外，本發明之醫藥組合物可配製成固體形式(包括(但不限於)膠囊、錠劑、丸劑、顆粒、粉末或栓劑)或液體形式(包括(但不限於)溶液、懸浮液或乳液)。醫藥組合物可經歷習知藥物操作(諸如滅菌)及/或可含有習知惰性稀釋劑、潤滑劑或緩衝劑，以及佐劑，諸如防腐劑、穩定劑、濕潤劑、乳化劑及緩衝劑等。
通常，醫藥組合物為包含活性成分以及以下各物之錠劑或明膠膠囊：a)稀釋劑，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素及/或甘胺酸；
b)潤滑劑，例如二氧化矽、滑石、硬脂酸、其鎂鹽或鈣鹽及/或聚乙二醇；對於錠劑亦包含c)黏合劑，例如矽酸鎂鋁、澱粉糊、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯啶酮；必要時包含d)崩解劑，例如澱粉、瓊脂、海藻酸或其鈉鹽或起泡混合物；及/或e)吸收劑、著色劑、調味劑及甜味劑。
錠劑可根據此項技術中已知之方法包覆膜衣或包覆腸溶包衣。
可使用活性成分之溶液以及懸浮液及尤其等滲水性溶液或懸浮液，例如在包含單獨活性成分或活性成分以及載劑(例如甘露糖醇)之凍乾組合物之情況下可在使用之前製備該等溶液或懸浮液。醫藥組合物可經滅菌及/或可包含佐劑，例如防腐劑、穩定劑、濕潤劑及/或乳化劑、增溶劑、調節滲透壓之鹽及/或緩衝劑；且以本身已知之方式，例如藉助於習知溶解或凍乾方法製備。該等溶液或懸浮液可包含黏度增加物質，諸如羧甲基纖維素鈉、羧甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚葡萄糖、聚乙烯吡咯啶酮或明膠。
於油中之懸浮液包含習用於注射目的之植物油、合成油或半合成油作為油組分。因此，尤其可提及液體脂肪酸酯，其含有具有8-22個碳原子、尤其12-22個碳原子之長鏈脂肪酸作為酸組分，例如月桂酸、十三烷酸、十四烷酸、十五烷酸、棕櫚酸、十七烷酸、硬脂酸、花生酸、二十二烷酸或相應不飽和酸，例如油酸、反油酸、芥子酸、巴惟酸(brasidic acid)或亞麻油酸，必要時添加抗氧化劑，例如維生素E、β-胡蘿蔔素或3,5-二-第三丁基-4-羥基甲苯。彼等脂肪酸酯之醇組分具有最多6個碳原子且為單羥基或多羥基，例如單羥基、二羥基或三羥基；醇，例如甲醇、乙醇、丙醇、丁醇或戊醇；或其異構體，但尤其為乙二醇及甘油。因此，提及脂肪酸酯之以下實例：油酸乙酯、
十四烷酸異丙酯、棕櫚酸異丙酯、「Labrafil M 2375」(聚氧乙烯甘油三油酸酯，Gattefossé，Paris)、「Miglyol 812」(具有C8-C12鏈長度之飽和脂肪酸的三酸甘油酯，Hüls AG，Germany)，但尤其為植物油，諸如棉籽油、杏仁油、橄欖油、蓖麻油、芝麻油、大豆油且更尤其為花生油。
可注射組合物以習用方式在無菌條件下製備；此亦適用於將組合物引入安瓶或小瓶中且密封容器。
用於經口投藥之醫藥組合物可藉由組合活性成分與固體載劑，必要時將所得混合物造粒，及必要或必需時在添加適當賦形劑後將該混合物加工為錠劑、糖衣藥丸核心或膠囊來獲得。亦可將其併入塑膠載劑中，允許活性成分以所量測之量擴散或釋放。
適合於經口投藥之組合物包括有效量之呈錠劑、口含錠、水性或油性懸浮液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬膠囊或軟膠囊或糖漿或酏劑形式之本發明化合物。欲用於經口使用之組合物係根據製造醫藥組合物技術中已知之任何方法製備，且該等組合物可含有一或多種選自由甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑組成之群的藥劑以提供醫藥學上美觀且可口之製劑。錠劑可含有與適合於製造錠劑之醫藥學上可接受之無毒賦形劑混合的活性成分。該等賦形劑為例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑及崩解劑，例如玉米澱粉或褐藻酸；黏合劑，例如澱粉、明膠或阿拉伯膠；及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。錠劑未包覆包衣或可藉由已知技術包覆包衣以延遲在胃腸道內之崩解及吸收且由此提供較長時間之持續作用。舉例而言，可使用時間延遲物質，諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。用於經口使用之調配物可呈現為硬明膠膠囊，其中活性成分與例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土之惰性固體稀釋劑混合；或軟明膠膠囊，其中活性成分與水或例如花生油、液狀石蠟或橄欖油之油
介質混合。
用於局部投藥之醫藥組合物可藉由組合活性成分與液體載劑(例如水性液體載劑)以溶解或分散活性劑，以及其他視情況使用之調配成分(諸如溶劑/增溶劑、膠凝劑、油類、穩定劑、緩衝劑及防腐劑)以提供例如溶液、洗劑、乳膏、凝膠或軟膏來獲得。用於局部投藥之醫藥組合物可例如提供用於真皮塗覆。用於局部投藥之醫藥組合物可包含約0.1%至約2%活性成分，該活性成分尤其為式(I)化合物，詳言之為本文個別實例中所述之化合物。
供施用之醫藥組合物(或調配物)可以各種方式包裝，此視用於投與藥物之方法而定。一般而言，供分配用之物品包括內部貯存有適當形式之醫藥調配物的容器。適合之容器為熟習此項技術者所熟知且包括諸如瓶子(塑膠及玻璃)、安瓶、塑膠袋、金屬圓筒及其類似物之材料。容器亦可包括防干預裝配(tamper-proof assemblage)以防止輕率接近包裝內含物。另外，容器上附有描述容器內含物之標籤。該標籤亦可包括適當警告。
包含治療有效量之本發明化合物的醫藥組合物可經調配用作非經腸投藥。醫藥組合物(例如靜脈內(iv)調配物)可經歷習知藥物操作(諸如滅菌)及/或可含有習知惰性稀釋劑或緩衝劑，以及佐劑，諸如熟習此項技術者所熟知之防腐劑、穩定劑、濕潤劑、乳化劑及緩衝劑。
本發明進一步提供包含本發明化合物作為活性成分之無水醫藥組合物及劑型，因為水可能加速某些化合物之降解。本發明之無水醫藥組合物及劑型可使用無水或含低水分之成分及低水分或低濕度條件來製備。可製備並儲存無水醫藥組合物以使得其無水性質得以維持。因此，使用已知可防止曝露於水之材料包裝無水組合物以使得其可包括於合適之配方(formulary)套組中。適合包裝之實例包括氣密式密封箔、塑膠、單位劑量容器(例如小瓶)、發泡包裝及條狀包裝。
本發明進一步提供包含一或多種降低作為活性成分之本發明化合物分解之速率的試劑之醫藥組合物及劑型。在本文中稱為「穩定劑」之該等試劑包括(但不限於)諸如抗壞血酸之抗氧化劑、pH值緩衝劑或鹽緩衝劑等。
本發明化合物、尤其本文個別實例中所述之化合物可以非晶形式提供。
本發明化合物、尤其本文個別實例中所述之化合物可調配為標準懸浮液、奈米懸浮液及固體分散液，例如如下。
標準懸浮液：
1.)出於目標為3 mg/ml之調配物濃度之目的，稱取所需量之實例18、批次E之結晶物質。
2.)接著將實例18、批次E之結晶物質分散於0.5%[w/w]羧甲基纖維素/0.5%[w/w]Tween 80/水中
3.)渦旋懸浮液以使其均質化
4.)使用探針音波器對懸浮液進行音波處理以減小粒徑(2分鐘)
奈米懸浮液：
1.)精確稱取32 mg實例18、批次E之結晶物質至定製大理石研磨裝置中
2.)將2.148 g 0.2 mm氧化鋯研磨介質添加至研磨裝置中
3.)將0.608 ml 1%[w/V]HPMC 603(603級羥丙基甲基纖維素)/0.05%[/w]SDS(十二烷基硫酸鈉)/水添加至研磨裝置中
4.)封閉研磨裝置且放入旋轉式研磨機中
5.)以400 rpm研磨樣品4小時
6.)使用注射器收集奈米懸浮液
固體分散液：
1.)稱取30 mg實例18、批次E之結晶物質至凍乾小瓶中
2.)將30 mg HPMC603(603級羥丙基甲基纖維素)添加至同一小瓶中
3.)將5.6 ml二烷添加至小瓶中。用蓋子封閉該小瓶。
4.)在周圍條件下攪拌樣品12小時
5.)根據以下條件冷凍乾燥所獲得之溶液
當提供呈固體分散液形式之本發明化合物，例如藉由組合化合物與載劑(諸如聚合物，例如HPMC)及溶劑且凍乾混合物(意欲提供呈非晶形式而非呈結晶形式之化合物)所製備時，出於穩定性原因，宜增加載劑量與化合物量之比率以避免化合物在靜置時再結晶。
在某些情況下，宜投與本發明化合物與至少一種其他醫藥(或治療)劑(例如抗增生劑或抗癌劑或化學療法中通常所用之輔助療法)之組合。本發明化合物可與一或多種其他治療劑同時或在其之前或之後投與。或者，本發明化合物可藉由相同或不同投藥途徑分開投與，或與其他藥劑一起於同一醫藥組合物中投與。適合之其他抗癌劑包括(但不限於)：
HER2及HER3受體抑制劑：如近年來在HER2陽性乳癌模型中所例示，PI3K抑制將經由FoxO依賴性HER2/HER3轉錄誘導引起路徑再活化，暗指在此配置下使用HER2抑制劑(Serra等人，2011 Oncogene 30；Chandarlapaty等人，2011 Cancer Cell 19；Chakrabarty等人2012,PNAS 109)。例如曲妥珠單抗(Trastuzumab)(由Genentech/Roche以商品名稱Herceptin®銷售)、帕妥珠單抗(pertuzumab)(由Genentech/Roche以商品名稱PerjetaTM銷售)、來自Genentech/Roche之抗體-藥物結合物曲妥珠單抗Emtansine(T-DM1)、埃羅替尼(erlotinib)(由Genentech/Roche以商品名稱Tarceva®銷售)、吉非替尼(gefitinib)(由AstraZeneca以商品名稱IressaTM銷售)、MOR10703、來那替尼(neratinib)(亦稱為HKI-272，(2E)-N-[4-[[3-氯-4-[(吡啶-2-基)甲氧基]苯基]胺基]-3-氰基-7-乙氧基喹啉-6-基]-4-(二甲基胺基)丁-2-烯醯胺，且描述於PCT公開案第WO 05/028443號中)、拉帕替尼(lapatinib)或二甲苯磺酸拉帕替尼(lapatinib ditosylate)(由GlaxoSmithKline以商品名稱Tykerb®銷售)。該組合適用於例如HER2陽性乳癌及HER2擴增性胃癌。作為治療性標靶，HER3(ErbB3)呈現具有非活性酪胺酸激酶之難題，由此妨礙ATP-模擬物酪胺酸激酶抑制劑(TKI)之效用。旨在阻斷配位體與ErbB3之結合(例如MM-121)或阻斷過表現ErbB2之細胞中ErbB3與ErbB2二聚化的抗體介導之策略(例如帕妥珠單抗)可解決此難題。
雌激素受體下調劑/芳香酶抑制劑：例如氟維司群(Fulvestrant)(以商品名稱Faslodex®銷售)、來曲唑(Letrozole)(由Novartis以商品名稱Femara®銷售)或依西美坦(Exemestane)(由Pfizer以商品名稱Aromasin®銷售)。該組合適用於治療例如ER陽性乳癌。組合之基本原理旨在解決PI3K相關激素抗性。
有絲分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)抑制劑：例如XL-518(目錄號1029872-29-4，購自ACC公司)、AZD6244或司美替尼(selumetinib)
(AstraZeneca)、GSK1120212(GlaxoSmithKline)、AZD8330(AstraZeneca)或MEK162。該組合適用於治療例如KRAS突變肺、結腸直腸癌(CRC)及胰臟癌。
Bcl2/BclXL抑制劑：例如ABT737(Abbott)。
抗雄激素：例如尼魯胺(Nilutamide)(以商品名稱Nilandron®及Anandron®銷售)、比卡魯胺(bicalutamide)(以商品名稱Casodex®銷售)、氟他胺(flutamide)(以商品名稱FulexinTM銷售)、MDV3100(恩紮魯胺(Enzalutamide)，由Medivation以商品名稱Xtandi®銷售)及阿比特龍(Abiraterone)(由Janssen以商品名稱Zytiga®銷售)。該組合適用於治療例如伴有PTEN不活化之激素依賴性前列腺癌。組合之基本原理旨在解決PI3K與雄激素受體路徑之間的串擾。
熱休克蛋白90(HSP90)抑制劑：例如替拉替尼(Tanespimycin)(17-烯丙基胺基-17-去甲氧基格爾德黴素(geldanamycin)，亦稱為KOS-953及17-AAG，購自SIGMA，且描述於美國專利第4,261,989號中)及5-(2,4-二羥基-5-異丙基-苯基)-4-(4-嗎啉-4-基甲基-苯基)-異唑-3-甲酸乙醯胺(亦稱為AUY922且描述於PCT公開案第WO2004/072051號中)。該組合適用於治療例如EGFR依賴性肺癌，或抑制變得EGR抑制劑難治之EGRmut，或HER2陽性乳癌，或HER2陽性胃癌。
紫杉烷(Taxane)抗贅生劑：例如卡巴他賽(Cabazitaxel)(1-羥基-7β,10β-二甲氧基-9-側氧基-5β,20-環氧基紫杉-11-烯-2α,4,13α-三基-4-乙酸酯-2-苯甲酸酯-13-[(2R,3S)-3-{[(第三丁氧基)羰基]胺基}-2-羥基-3-苯基丙酸酯)、拉洛他賽(larotaxel)(苯甲酸(2α,3ξ,4α,5β,7α,10β,13α)-4,10-雙(乙醯氧基)-13-({(2R,3S)-3-[(第三丁氧羰基)胺基]-2-羥基-3-苯基丙醯基}氧基)-1-羥基-9-側氧基-5,20-環氧基-7,19-環紫杉-11-烯-2-基酯)；抗有絲分裂劑：例如多烯紫杉醇(Docetaxel)(由Sanofi-Aventis以
商品名稱Taxotere®銷售)，其適用於治療乳癌。
植物鹼：例如太平洋紫杉醇(paclitaxel)(以商品名稱Taxol及OnxalTM銷售)及蛋白質結合型太平洋紫杉醇(以商品名稱Abraxane®銷售)且適用於治療前列腺癌、長春鹼(vinblastine)(亦稱為硫酸長春鹼(vinblastine sulfate)、長春花鹼(vincaleukoblastine)及VLB，以商品名稱Alkaban-AQ®及Velban®銷售)、長春新鹼(vincristine)(亦稱為硫酸長春新鹼(vincristine sulfate)、LCR及VCR，以商品名稱Oncovin®及Vincasar Pfs®銷售)及長春瑞賓(vinorelbine)(以商品名稱Navelbine®銷售)。
抗胰島素樣生長因子-1受體(IGF-1R)抗體：例如伐土木單抗(Figitumumab)(亦稱為CP-751,871，購自ACC公司)及羅土木單抗(robatumumab)(目錄號934235-44-6)。
PARP(聚ADP-核糖聚合酶)抑制劑：例如BSI-201(伊尼派力伯(iniparib))及奧拉派力伯(olaparib)。該組合適用於例如解決PI3K抑制劑對DNA損傷機制之可能誘導。
適合於輔助療法之治療劑包括類固醇、消炎劑、抗組織胺劑、止吐藥及熟習此項技術者熟知用於改善治療本文所述之疾病、病狀或病症的患者之護理品質之其他藥劑。
因為PI3K/Akt路徑之活化驅動細胞存活，所以抑制該路徑與驅動癌細胞凋亡之療法(包括放射療法及化學療法)的組合可引起反應增強(Ghobrial等人，CA Cancer J.Clin 55：178-194(2005))。舉例而言，PI3激酶抑制劑與卡鉑(carboplatin)之組合在活體外增殖與細胞凋亡分析中以及在卵巢癌之異種移植模型中在活體內腫瘤功效方面顯示協同效應(Westfall及Skinner,Mol.Caneer Ther.4：1764-1771(2005))。本發明化合物可結合放射療法投與。
本發明化合物或其醫藥組合物可藉由以下途徑投與：腸內，諸
如經鼻；直腸或經口；非經腸，諸如肌肉內或靜脈內；或局部，諸如真皮投藥。用於人類之本發明化合物或其醫藥組合物較佳經口投與(例如以錠劑形式)。
本發明之醫藥組合物或組合用於約50 kg至約70 kg之個體的單位劑量可為約1 mg至約1000 mg活性成分，或約1 mg至約500 mg或約1 mg至約250 mg或約1 mg至約150 mg或約0.5 mg至約100 mg或約1 mg至約50 mg活性成分。用於約50 kg至約70 kg之個體的單位劑量亦可為約50 mg至約1000 mg活性成分，或約50 mg至約500 mg或約50 mg至約250 mg或約50 mg至約150 mg或約50 mg至約100 mg活性成分。用於約50 kg至約70 kg之個體的單位劑量亦可為約100 mg至約500 mg活性成分，或約200 mg至約500 mg或約300 mg至約500 mg或約300 mg至約400 mg活性成分。此等劑量可提供作為總日劑量，且可以單位劑量或分開劑量提供。劑量可視用於傳遞活性成分之特定劑型而定。一般而言，化合物、醫藥組合物或其組合之治療有效劑量視個體之物種、體重、年齡及個別狀況、所治療之病症或疾病或其嚴重程度而定。劑量亦可視活性成分於所治療之物種中的生物可用性而定。具有一般技能之醫師、藥劑師、臨床醫師或獸醫可容易確定預防、治療或抑制病症或疾病進展所必需之各活性成分之有效量。
以上所列舉之劑量性質可在宜使用哺乳動物，例如小鼠、大鼠、狗、猴或經分離器官、組織及其製備物之活體外及活體內測試中證明。本發明化合物可在活體外以溶液(例如由例如10 mM DMSO儲備溶液製備之水性溶液)形式施用，且在活體內例如以懸浮液或水性溶液形式經腸、非經腸、宜靜脈內施用。活體外劑量可在約10-3莫耳與約10-9莫耳濃度之間的範圍內。活體內治療有效量可視投藥途徑在約0.1 mg/kg至約500 mg/kg或在約1 mg/kg至約100 mg/kg之範圍內。
一般而言，向需要治療之患者投與治療有效量之本發明化合
物。術語本發明化合物之「治療有效量」係指本發明化合物將引起個體之生物或醫學反應(例如酶活性或蛋白質活性或蛋白質複合物活性之降低或抑制)或改善症狀、減輕病狀、減緩或延緩疾病進展或預防疾病等之量。
在另一態樣中，提供一種治療哺乳動物之癌症的方法，其包含向需要該治療之哺乳動物投與有效量之本發明化合物。
如本文中所使用，術語「個體」係指動物。通常該動物為哺乳動物。個體亦指例如靈長類動物(例如人類，男性或女性)、母牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥及其類似動物。在某些實施例中，個體為靈長類動物。個體較佳為人類。
如本文中所使用，術語「抑制(inhibit)」、「抑制(inhibition)」或「抑制(inhibiting)」係指減輕或壓抑特定病狀、症狀或病症或疾病，或顯著降低生物活性或過程之基線活性。
如本文中所使用，術語「治療(treat)」、「治療(treating)」或「治療(treatment)」任何疾病或病症係指(i)改善疾病或病症(亦即減緩或遏止或減少疾病或其至少一種臨床症狀之發展)；(ii)減輕或改善至少一種身體參數，包括可能不被患者察覺之身體參數；或(iii)預防或延遲疾病或病症之發作或發展或進展。一般而言，術語「治療」係描述為對抗疾病、病狀或病症之目的管理及護理患者，且包括投與本發明化合物以預防症狀或併發症之發作，減輕症狀或併發症，或消除疾病、病狀或病症。
如本文中所使用，若個體在生物學上、醫學上或在生活品質方面得益於該治療，則該個體「需要」該治療(個體較佳為人類)。
本發明之另一態樣為一種包含本發明化合物及至少一種其他治療劑(或藥劑)呈組合製劑同時、分開或依次用於療法以增強細胞凋亡之產品。
在本發明之組合療法中，本發明化合物及其他治療劑可由相同或不同製造商製造及/或調配。此外，本發明化合物及其他治療劑(或藥劑)可一起構成組合療法：(i)在組合產品發放至醫師之前(例如在包含本發明化合物及其他治療劑之套組的情況下)；(ii)在投藥前不久由醫師親自(或在醫師指導下)達成；(iii)在患者自身中達成，例如在依次投與本發明化合物及其他治療劑期間。
因此，本發明提供本發明化合物藉由抑制或拮抗PI3K治療疾病或病狀的用途，其中製備藥劑以與另一治療劑一起投與。本發明亦提供另一治療劑之用途，其中本發明化合物與其他治療劑組合投與藥劑。
由以下實例說明本發明之實施例。然而，應瞭解，本發明之實施例並不限於此等實例之特定細節，因為其他變化為一般技術者已知或根據本發明揭示內容顯而易見。
除非另外規定，否則起始物質一般購自諸如以下之商業來源：Aldrich Chemicals Co.(Milwaukee,Wis.)、Lancaster Synthesis,Inc.(Windham,N.H.)、Acros Organics(Fairlawn,N.J.)、Maybridge Chemical Company,Ltd.(Cornwall,England)、Tyger Scientific(Princeton,N.J.)、Chem-Impex International,Inc.(Wood Dale,IL)及AstraZeneca Pharmaceuticals(London,England)。
以下實例中所用之縮寫具有以下所列之相應含義。
1H-NMR量測係在Bruker Ultrashield TM 400(400 MHz)、Bruker Ultrashield TM 600(600 MHz)或500 MHz DRX Bruker CryoProbe(500 MHz)光譜儀上使用或不使用三甲基矽烷作為內部標準物來進行。化學位移(d值)係以自四甲基矽烷向低場之ppm報導，偶合常數(J)以Hz
給出，光譜分離圖案以單峰(s)、二重峰(d)、雙二重峰(dd)、三重峰(t)、四重峰(q)、多重峰或重疊更多之信號(m)、寬單峰(br)表示。溶劑在括號中給出。
TLC係使用預塗佈之矽膠60 F254玻璃板(Merck,Darmstadt,Germany)，使用各別指定溶劑系統來進行。一般藉由UV光(254 nm)進行觀測。
HPLC條件：LC-MS 1：管柱：Acquity HSS T3 2.1×50 mm，1.8 μm。流速：1.2 mL/min。管柱溫度：50℃。梯度：在1.4分鐘內2%至98% B，98% B持續0.75分鐘，在0.04分鐘內98%至2% B，2% B持續0.01分鐘；A=水+0.05%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B=乙腈+0.04%甲酸
偵測全掃描：215-350 nm
LC-MS 2：管柱：Acquity HSS T3 2.1×50 mm，1.8 μm。流速：1.2 mL/min。管柱溫度：50℃。梯度：在1.4分鐘內2%至98% B，98% B持續0.75分鐘，在0.04分鐘內98%至2% B，2% B持續0.01分鐘；A=水+0.05%甲酸+0.05%乙酸銨，B=乙腈+0.04%甲酸
偵測全掃描：215-350 nm
LC-MS 3：管柱：Acquity HSS T3 2.1×50 mm，1.8 μm。流速：1.0 mL/min。管柱溫度：60℃。梯度：在1.4分鐘內5%至98% B，98% B持續0.75分鐘，在0.04分鐘內98%至5% B，5% B持續0.01分鐘；A=水+0.05%甲酸+3.75 mM乙酸銨，B=乙腈+0.04%甲酸
偵測全掃描：215-350 nm
HPLC 1：
管柱：Chromolith performance RP18e 4.6×100 mm，流速：2.0 mL/min。梯度：在4.5分鐘內2%至100% B，100% B持續1分鐘，A=水+0.1% TFA，B=乙腈+0.1% TFA
偵測：215 nm
UPLC 1：管柱：Acquity UPLC HSS T3 C18，1.7 μm 2.1×50 mm，流速：1.0 mL/min。梯度：在1.5分鐘內5%至100% B，100% B持續1分鐘，A=水+0.1% TFA，B=乙腈+0.1% TFA
偵測：218 nm
中間物A為市售的或可使用以下程序製備。
在165℃下向2,4,6-三氯嘧啶(5.0 mL，42.6 mmol)於均三甲苯(80 mL)中之溶液中逐滴添加嗎啉(4.83 mL，55.4 mmol)於均三甲苯(20 mL)中之溶液且在165℃下攪拌懸浮液30分鐘。用H2O、EtOAc及NaHCO3處理反應混合物。用H2O及鹽水洗滌有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮。藉由急驟層析(己烷/EtOAc，100：0→7：3)純化殘餘物。在己烷中濕磨殘餘物並過濾，得到標題化合物(3.36 g，33%)。tR：1.11分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：234.2[M+H]+(LC-MS 1)。
在氬氣下向來自步驟B.1之產物(16.2 g，66.3 mmol)、雙-頻哪醇根基二硼(18.5 g，72.9 mmol)及KOAc(19.5 g，199 mmol)於二烷(300 mL)中之懸浮液中添加PdCl2(dppf)．CH2Cl2加合物(2.4 g，2.98 mmol)且在115℃下攪拌混合物4小時。使反應混合物冷卻至50℃且用EtOAc處理。經Hyflo過濾所得懸浮液且用EtOAc洗滌。濃縮合併之濾液。將殘餘物懸浮於2 N NaOH中，在室溫下攪拌5分鐘，接著添加Et2O及H2O且經由Hyflo過濾二元混合物。分離濾液各相。用HCl 4 N將所得水層之pH值調整至5-6，接著用EtOAc萃取。用H2O及鹽水洗滌有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮。在Et2O及己烷中濕磨殘餘物，過濾，得到標題化合物(8.33 g，42%)。tR：1.00分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：290.3[M+H]+(LC-MS 1)。
在黑暗中向2-胺基-4-三氟甲基嘧啶(25 g，0.15 mol)於CH3CN(800 mL)中之溶液中逐滴添加(經2.5小時)溶解於200 mL CH3CN中之NBS(34.8 g，0.195 mol)。在室溫下在黑暗中攪拌混合物4.5小時，接著蒸發溶劑。將殘餘物溶解於EtOAc及H2O中且將二元混合物轉移至分液漏斗中。分離水層且用EtOAc萃取。用H2O及鹽水洗滌有機層，用Na2SO4乾燥，過濾並蒸發。藉由矽膠層析，使用己烷/EtOAc 9：1至3：2之梯度純化殘餘物。蒸發合併之純溶離份且將殘餘物懸浮於40 mL己烷中，攪拌10分鐘，過濾且用2×20 mL己烷洗滌，得到呈米色固體狀之標題產物(31.2 g，85%)。tR：0.82分鐘(LC-MS 1)。
在80℃下在氬氣下攪拌來自步驟1.1之產物(350 mg，1.16 mmol)、中間物B(449 mg，1.51 mmol)、Na2CO3(2 M，1.7 mL，3.48 mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2(95 mg，0.17 mmol)於DME(10 mL)中之溶液1小時。用EtOAc稀釋混合物且用飽和NaHCO3萃取。用H2O及鹽水洗滌有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮。藉由急驟層析(CH2Cl2/EtOH，99.5：0.5→98：2)純化殘餘物。在己烷中濕磨殘餘物，過濾並乾燥。藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100 mm，5 μm；0.1% TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-100%乙腈)純化殘餘物，得到標題化合物(260 mg，52%)。tR：0.93分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：426.3[M+H]+(LC-MS 1)。
在氬氣氛圍下向(S)-4-甲基-2-唑啶酮(432 mg，4.19 mmol)於DMF(10 mL)中之溶液中緩慢添加NaH(60%礦物油，201 mg，5.02 mmol)且在室溫下攪拌懸浮液30分鐘。將反應混合物冷卻至0℃且添加
中間物A(1 g，4.19 mmol)。在室溫下攪拌混合物4小時。用EtOAc稀釋反應混合物且用H2O萃取。用H2O及鹽水洗滌有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮。藉由急驟層析(己烷/EtOAc，97：3→1：1)純化殘餘物，得到標題化合物(605 mg，47%)。tR：1.00分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：299.2/301.2[M+H]+(LC-MS 1)。
在室溫下攪拌來自步驟2.1之產物(28 mg，0.04 mmol)及TBAF(2 mL，2.0 mmol，1 M THF溶液)之溶液隔夜。濃縮反應混合物且藉由急驟層析(DCM/MeOH，100：0→95：5)純化殘餘物，得到標題產物。tR：0.89分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：470.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於用於實例1之程序，但使用來自步驟2.2之產物來製備標題化合物。在100℃下混合物進行反應40分鐘。萃取後，藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→30：70)純化殘餘物，得到標題產物。tR：1.45分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：708.4[M+H]+(LC-MS 1)。
在氬氣下在100℃下攪拌來自步驟2.3之產物(95 mg，0.25 mmol)、中間物A(58 mg，0.25 mmol)、xantphos(10 mg，0.02 mmol)、Pd2dba3(4.5 mg，4.95 μmol)及Cs2CO3(121 mg，0.37 mmol)於二烷中之溶液3小時。使混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3溶液萃取。用鹽水洗滌有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→0：100)純化殘餘物，得到標題產物(85 mg，56%)。tR：1.54分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：581.4/583.3[M+H]+(LC-MS 1)。
類似用於步驟6.2之程序，但使用來自步驟2.4之產物，且使用Et3N替代咪唑來製備標題化合物。在室溫下攪拌混合物16小時。濃縮反應混合物且藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→55：45)純化，得到標題產物。tR：1.33分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：384.3[M+H]+(LC-MS 1)。
在室溫下攪拌來自步驟2.5之產物(110 mg，0.59 mmol)及HCl(4 M二烷溶液，5 mL，20 mmol)之溶液4小時。濃縮反應混合物且殘餘物不經進一步純化即使用。
在0℃下在氬氣下向來自步驟2.6之產物(190 mg，0.73 mmol)於DMF(6 mL)中之溶液中添加NaH(88 mg，2.20 mmol，60%於油中)且在0℃下攪拌混合物6小時。用H2O淬滅反應混合物並濃縮。在EtOAc中濕磨殘餘物並過濾。乾燥(Na2SO4)濾液，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→60：40)純化產物。
在0℃下在氬氣下向(S)-2,2-二甲基唑啶-3,4-二甲酸3-第三丁酯4-甲酯(500 mg，1.93 mmol)於THF(15 mL)中之溶液中逐滴添加溴化甲基鎂(1.4 mL，4.24 mmol)且在0℃下攪拌混合物2小時。用飽和NH4Cl溶液淬滅反應物且用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→65：35)
純化殘餘物。tR：1.01分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：260.3[M+H]+(LC-MS 1)。
在80℃下攪拌中間物B(68 mg，0.21 mmol)、來自步驟3.1之產物(120 mg，0.21 mmol)、2 M Na2CO3溶液(317 μL，0.63 mmol)及肆(三苯基膦)鈀(tetrakis，15 mg，0.01 mmol)於DME(2 mL)中之溶液3小時。用EtOAc稀釋反應混合物且添加Na2SO4。過濾所得懸浮液且濃縮濾液。用THF(2 mL)溶解殘餘物且添加TBAF(212 μL，0.21 mmol)。在室溫下攪拌混合物16小時且濃縮。藉由急驟層析(DCM/EtOH，99：1→96：4)純化粗物質。在DCM/己烷中濕磨殘餘物，得到標題化合物。tR：0.85分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：456.3[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自步驟3.2之產物來製備標題化合物。萃取後，藉由急驟層析(己烷/EtOAc：9：1→1：1)純化
殘餘物，得到標題化合物。
類似於對於步驟6.4所述之程序，但使用4-(羥基甲基)-4-甲基唑啶-2-酮，且使用DCM替代DMF來製備標題化合物。用Et2O萃取反應混合物。用H2O及鹽水洗滌有機層，乾燥(Na2SO4)，過濾並濃縮。在己烷中濕磨所得固體並過濾，得到標題化合物。tR：1.20分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：339.2/341.2[M+H]+(LC-MS 1)。
未確定絕對立體化學。
對實例3之外消旋產物進行製備型對掌性SFC分離後獲得標題化合物。(管柱：Chiralpak AD-H，30×250 mm。流速：80 mL/min。scCO2/MeOH 85：15)。tR：3.97分鐘(管柱：Chiralpak AD-H，4.6×250 mm。流速：3 mL/min。scCO2/MeOH 85：15)。
未確定絕對立體化學。
對實例3之外消旋產物進行製備型對掌性SFC分離後獲得標題化合物。(管柱：Chiralpak AD-H，30×250 mm。流速：80 mL/min。scCO2/MeOH 85：15)。tR：4.49分鐘(管柱：Chiralpak AD-H，4.6×250 mm。流速：3 mL/min。scCO2/MeOH 85：15)。
在80℃下在氬氣下在密封小瓶中攪拌來自步驟4.1之產物(60 mg，0.17 mmol)、中間物B(54 mg，0.17 mmol)、Na2CO3(2 M，260 μL，0.52 mmol)及肆(三苯基膦)鈀(palladium tetrakis，10 mg，8.7 μmol)於DME(1.5 mL)中之溶液2小時。濃縮反應混合物。藉由急驟層析(CH2Cl2/EtOH，99.8：0.2→97.5：2.5)純化殘餘物。將殘餘物溶解於DCM(2 mL)中，接著用己烷(4 mL)處理。過濾晶體且用己烷(3 ml)洗滌，得到標題化合物(36 mg，44%)。tR：1.10分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：466.3[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自步驟4.2之產物來製備標題化合物。在100℃下進行反應1小時。經由Hyflo過濾反應混合物並濃縮。藉由急驟層析(己烷/EtOAc：9：1→1：1)純化殘餘物，得到標題化合物。tR：1.20分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：339.2/341.2[M+H]+(LC-MS 1)。
在90℃下在密封小瓶中於DCE(15 mL)及DIEA(2.39 mL,13.68 mmol)中攪拌(1S,2S)-2-胺基環己醇(750 mg，6.51 mmol)及氯甲酸2-硝基苯酯(1378 mg，6.84 mmol)1小時。將反應混合物送至含有50 mL EtOAc及50 mL飽和NaHCO3溶液之分液漏斗中。用50 mL EtOAc洗滌水層。合併有機層且用50 mL H2O、50 mL鹽水洗滌，用Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析(己烷/EtOAc：7：3→3：7)純化殘餘物，得到標題化合物(770 mg，5.13 mmol)。tR：0.69分鐘(LC-MS 1)；1H NMR(400 MHz,<dmso>)δ ppm 1.19-1.44(m,3 H)1.45-1.61(m,1 H)1.65(d,J=9.77 Hz,1 H)1.76(d,J=11.34 Hz,1 H)1.82-1.93(m,1 H)1.93-2.10(m,1 H)3.03-3.23(m,1 H)3.74(td,J=11.34,3.52 Hz,1 H)7.53(br.s.,1 H)
在微波小瓶中，向來自步驟5.1之產物(116 mg，0.28 mmol)及中間物B(90 mg，0.31 mmol)於DME(2.1 mL)中之溶液中添加飽和Na2CO3溶液(0.7 mL)及PdCl2(dppf)2.CH2Cl2(23 mg，0.03 mmol)。用氬氣使混合物鼓泡5分鐘。在120℃下在微波照射下攪拌15分鐘。將反應混合物溶解於DCM及水中。分離各層且再用一些DCM萃取水層兩次。接著合併有機層，經硫酸鈉乾燥並蒸發。藉由急驟層析(DCM/MeOH：100%→95% DCM)純化殘餘物。藉由逆相急驟層析(MeCN/H2O：10%→100% MeCN)純化所得殘餘物，得到標題化合物(19 mg，13%)。tR：0.91分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：456.1[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自步驟5.2之產物來製備標題化合物。在115℃下進行反應80分鐘。濃縮反應混合物且用DCM/水溶解。分離各層且用DCM萃取水層三次。合併有機層並經硫酸鈉乾燥。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc：100%→60%庚烷)純化殘餘物，得到標題化合物(116 mg，22%)。tR：0.98分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：329.2[M+H]+(LC-MS 1)。
將TsOH(800 mg，4.21 mmol)添加至來自步驟5.3之產物(1.013 g，4.13 mmol)於MeOH(10 ml)中之黃色溶液中。在室溫下攪拌混合物90分鐘。接著添加TsOH(140 mg，0.74 mmol)且在室溫下攪拌70分鐘。接著移除溶劑且將殘餘物與三乙胺(1.44 ml，10.32 mmol)一起溶解於DCM(6 mL)中。將三光氣(0.613 g，2.07 mmol)於DCM(4 mL)中之溶液緩慢添加至混合物中。在室溫下攪拌反應混合物2小時30分鐘。用幾滴水淬滅反應物。接著添加緩衝液，使其酸化至pH=4，接著分離各層。再用一些DCM萃取水層一次。合併有機層，經硫酸鈉乾燥並蒸發。藉由急驟層析(DCM/MeOH：100%→90% DCM)純化殘餘物，得到標題化合物(231 mg，38%)。ESI-MS：132.1[M+H]+(LC-MS 1)。
將NaH(265 mg，6.63 mmol)添加至(S)-1-Boc-2,2-二甲基-4-羥基甲基唑啶(AstaTech Inc.,Bristol,Pennsylvania)(1 g，4.19 mmol)於THF(10 mL)中之黃色溶液中。接著在周圍溫度下攪拌混合物15分鐘。將碘甲烷(323 μL，5.19 mmol)添加至黃色懸浮液中且在室溫下攪拌混合物2小時30分鐘。接著添加水以淬滅反應物。移除溶劑。藉由急驟層析(DCM/MeOH：5%→10% MeOH)純化殘餘物，得到標題化合物(1.013 g，94%)。ESI-MS：246.1[M+H]+(LC-MS 1)；1H NMR
(400 MHz,<cdcl3>)δ ppm 1.48(s,9 H)1.53(br.s.,6 H)3.30(m,1 H)3.36(s,3 H)3.41-3.63(m,2 H)3.88-4.00(m,2 H)
在室溫下在塑膠小瓶中用HF.吡啶之THF溶液(7.14 mL，57.5 mmol)處理來自步驟6.1之產物(600 mg，0.82 mmol)於THF(5 mL)中之溶液4天。接著將反應混合物逐滴添加至經攪拌之飽和NaHCO3溶液(300 mL)與EtOAc(200 mL)的混合物中。接著添加固體NaHCO3直至pH~8且分離各層。用100 mL EtOAc洗滌水層。合併有機萃取物且用水及鹽水洗滌。接著經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發。藉由急驟層析(DCM/EtOH：99：1→95：5)純化粗物質。合併溶離份並濃縮。在DCM中對殘餘物進行音波處理，接著添加己烷。濾出所得晶體且藉由急驟層析(DCM/EtAOc：9：1→3：7，接著己烷/THF：9：1→1：1，接著己烷/THF：7：3→1：1)再純化3次，得到標題化合物(243 mg，64%)。tR：0.80分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：456.6[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例1所述之程序，但使用來自步驟6.2之產物來製備標題化合物。在80℃下進行反應1小時。萃取後，藉由急驟層析(DCM/EtOH：95.5：0.5→97：3)純化殘餘物，得到標題化合物。tR：1.43分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：694.5[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自步驟6.3之產物來製備標題化合物。在100℃下進行反應3小時30分鐘。用EtOAc溶解反應混合物且用飽和NaHCO3溶液及鹽水洗滌。合併有機層並經硫酸鈉乾燥。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc：100%→30%庚烷)純化殘餘物，得到標題化合物(116 mg，22%)。tR：1.51分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：567.4/569.5[M+H]+(LC-MS 1)。
將來自步驟6.4之產物(3.2 g，9.31 mmol)溶解於DCM(32 ml)中且用Et3N(3.25 ml，23.29 mmol)處理。用氬氣沖洗溶液且在室溫下攪拌5
分鐘。接著用三光氣(1.382 g，4.66 mmol)處理且在室溫下攪拌16小時。用飽和NH4Cl溶液(10 mL)淬滅反應物且在室溫下攪拌10分鐘。分離水層且用水洗滌有機層。用DCM萃取合併之水層3次。經Na2SO4乾燥合併之有機層，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc：100%→50%庚烷)純化殘餘物，得到標題化合物(2.22 g，61%)。tR：1.28分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：387.3[M+18]+(LC-MS 1)。
將D-蘇胺醇(2 g，19.02 mmol)溶解於DMF(15 ml)中，用咪唑(3.89 g，57.1 mmol)處理且在室溫下攪拌5分鐘。接著在氬氣下將TBDPS-Cl(5.13 ml，19.97 mmol)逐滴添加至反應溶液中。在室溫下攪拌反應溶液16小時。接著用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3溶液洗滌兩次且用鹽水洗滌一次。經Na2SO4乾燥有機層，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc：100%→0%庚烷)純化殘餘物，得到標題化合物(3.21 g，47%)。tR：0.98分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：344.3[M+H]+(LC-MS 1)。
在80℃下攪拌來自步驟7.1之產物(200 mg，0.35 mmol)、中間物
B(131 mg，0.39 mmol)、Na2CO3(2 M，526 μL，1.05 mmol)及肆(三苯基膦)鈀(palladium tetrakis，24 mg，0.21 mmol)於DME(4 mL)中之溶液2小時。用Na2SO4處理反應混合物，用EtOAc稀釋且濾出不溶性部分。用EtOAc洗滌濾餅三次且蒸發濾液。接著將殘餘物溶解於THF中且添加TBAF溶液(1 N，351 μL，0.35 mmol)。在室溫下攪拌混合物1小時。移除溶劑且藉由急驟層析(DCM/EtOH：99：1→95：5)純化殘餘物，得到標題化合物。tR：0.74分鐘(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自步驟7.2之產物來製備標題化合物。在100℃下進行反應3小時。過濾反應混合物且濃縮濾液。藉由急驟層析(己烷/EtOAc：9：1→6：4)純化殘餘物，得到標題化合物。tR：1.53分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：553.4/555.5[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟6.4所述之程序，但使用(S)-4-(羥基甲基)唑啶-
2-酮(SpeedChemical Corp.Shanghai)，且使用DCM替代DMF來製備標題化合物。在室溫下進行反應16小時。用水稀釋反應混合物且用Et2O萃取兩次。合併有機層，用水及鹽水洗滌，經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發。藉由急驟層析(己烷/EtOAc：98：2→4：6)純化殘餘物。用己烷及Et2O處理殘餘物。濾出所得晶體，得到標題化合物。tR：1.26分鐘(LC-MS 1),1H NMR(400 MHz,<dmso>)δ ppm 0.98(s,9 H)3.51-3.63(m,2 H)3.88(dd,J=8.60,4.30 Hz,1 H)4.14(dd,J=8.60,4.69 Hz,1 H)4.30-4.38(m,1 H)7.37-7.50(m,6 H)7.57-7.65(m,4 H)7.71(s,1 H)。
類似於對於實例6所述之整個程序，但使用來自步驟8.1之產物替代中間物A且使用D-別-蘇胺醇替代D-蘇胺醇來製備標題化合物。tR：0.79分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：464.5[M+H]+(LC-MS 1)。
將2,4,6-三氯嘧啶與Et3N及D8-嗎啉一起溶解於EtOH中。在室溫
下攪拌反應混合物1小時。接著用飽和NaHCO3溶液稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併有機萃取物且用鹽水洗滌。接著經Na2SO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析(己烷/EtOAc：0%己烷→40%)純化殘餘物。tR：0.94分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：242.3/244.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例6所述之程序，但使用來自步驟9.1之產物來製備標題化合物。在DCM中進行萃取。藉由製備型HPLC(H2O/ACN)，接著藉由急驟層析(DCM/MeOH，100：0→95：5)純化殘餘物。tR：0.78分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：456.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例1所述之程序，但使用來自步驟9.2之產物來製備標題化合物。在120℃下進行反應15分鐘。將反應混合物溶解於DCM中且用H2O萃取。乾燥(Na2SO4)有機層，過濾並濃縮。藉由急驟層析
(庚烷/EtOAc，8：2→4：6)純化殘餘物。tR：1.54分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：694.3[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自步驟9.3之產物來製備標題化合物。在115℃下進行反應2.5小時。濃縮混合物。藉由製備型HPLC(H2O/ACN)，接著藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，9：1→0：100)純化殘餘物。tR：1.49分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：567.3[M+H]+(LC-MS 1)。
在氬氣下向來自步驟9.4之產物(900 mg，2.03 mmol)於THF(40 mL)中之溶液中添加含60% NaH之油(160 mg，4.0 mmol)且在室溫下攪拌混合物4小時。用EtOAc稀釋混合物且用H2O萃取。乾燥(Na2SO4)有機層，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→0：100)純化殘餘物。tR：1.23分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：370.2[M+H]+(LC-MS
1)。
在0℃下向來自步驟9.5之產物(40 g，73 mmol)於TBME(400 mL)中之溶液中逐滴添加LiBH4(2 M THF溶液，74 mL，146 mmol)且在0℃下攪拌混合物10分鐘，接著在室溫下升溫並攪拌5小時。用H2O、接著用0.5 M檸檬酸溶液淬滅反應混合物。用TBME萃取混合物。乾燥(MgSO4)有機層，過濾並濃縮。產物不經進一步純化即使用。
類似於對於步驟6.4所述之程序製備標題產物。Rf：0.7(己烷/EtOAc，8：2)
在-20℃下向Boc-L-天冬胺酸-4-苯甲酯(100 g，309 mmol)於DME(1.8 L)中之溶液中添加NMM(34 mL，309 mmol)，接著逐滴添加
氯甲酸異丁酯(40 mL，309 mmol)且在-20℃下攪拌混合物20分鐘。過濾反應混合物且使濾液冷卻至-20℃。在-20℃下逐份添加NaBH4(17.5 g，463 mmol)。使混合物升溫且在室溫下攪拌1小時。用20%檸檬酸溶液淬滅混合物，接著用AcOEt萃取。用NaHCO3溶液、H2O及鹽水洗滌有機層，乾燥(MgSO4)，過濾並濃縮。產物不經進一步純化即用於下一步驟。
類似於對於實例6所述之整個程序，但使用來自步驟10.1之產物替代中間物A且使用D-別-蘇胺醇替代D-蘇胺醇來製備標題化合物。將混合物逐滴添加至飽和Na2CO3溶液中。添加後，添加飽和NaHCO3溶液(最終pH值為約7-8)。用水稀釋且用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機相，經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發。藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100 mm，5 μm；0.1% TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-100%乙腈)純化殘餘物。使殘餘物在Et2O/己烷(3/1)中再結晶。濾出晶體且用己烷洗滌，得到標題化合物。tR：2.89分鐘(HPLC 1)；ESI-MS：470.3[M+H]+(LC-MS 1)；m.p.217.7℃(起始)。
將2,4,6-三氯嘧啶(100 mg，0.53 mmol)與DIPEA(280 μL，1.6 mmol)及(S)-3-甲基嗎啉(54 mg，0.53 mmol)一起溶解於二烷(2 mL)中。在130℃下在微波照射下加熱反應混合物15分鐘。接著用EtOAc稀釋且用鹽水洗滌。經Na2SO4乾燥有機層，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100 mm，5 μm；0.1% TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-100%乙腈)純化殘餘物，得到標題化合物(45 mg，34%)。tR：3.70分鐘(HPLC 1)；ESI-MS：248.2/250.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於實例5(包括步驟5.1)，但使用來自步驟11.1之產物來製備標題化合物。在100℃下進行反應1小時。在EtOAc中進行萃取。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→0：100)純化殘餘物。tR：0.87分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：412.4[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之整個程序，但使用唑啶-2-酮來製備標題化合物。tR：0.93分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：285.5/287.4[M+H]+
(LC-MS 1)。
將實例18之化合物(47 mg，0.10 mmol)溶解於甲酸(80 μL，2.09 mmol)中且在5℃下儲存4天。接著使其升溫至室溫且儲存2天。用EtOAc溶解且用飽和NaHCO3溶液及鹽水洗滌。經Na2SO4乾燥有機層，過濾並濃縮。藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100 mm，5 μm；0.1% TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-70%乙腈)純化殘餘物，得到標題化合物(57 mg，80%)。tR：0.88分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：484.4[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例11所述之整個程序，但使用來自步驟10.1之產物替代中間物A且使用(S)-4-甲基-2-唑啶酮替代唑啶-2-酮來製備標題化合物。藉由急驟層析(DCM/EtOH：99.8/0.2→98/2)，接著藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100mm，5 μm；0.1% TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-100%乙腈)純化殘餘物，得到標題化合物
(35 mg，32%)。tR：0.98分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：440.1[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例6所述之程序，但使用來自步驟14.1之產物來製備標題化合物。藉由急驟層析(DCM/MeOH，100：0→95：5)純化殘餘物。tR：0.77分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：442.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例5所述之程序，但使用來自步驟14.2之產物來製備標題化合物。在100℃下在油浴中進行反應1小時。在EtOAc中進行萃取。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→0：100)純化殘餘物。tR：1.40分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：680.3[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自14.3步驟之產物來製備標題化合物。萃取後，藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→40：60)純化殘餘物。tR：1.49分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：553.3[M+H]+(LC-MS 1)。
在氬氣下向來自步驟14.4之產物(2.72 g，8.27 mmol)及Et3N(2.88 mL，20.67 mmol)於DCM中之溶液中逐滴添加三光氣(982 mg，3.31 mmol)且在室溫下攪拌混合物5小時。用NH4Cl溶液淬滅反應混合物。乾燥(Na2SO4)有機層，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，100：0→0：100)純化殘餘物。tR：1.21分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：373.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟6.4所述之程序，但使用(S)-3-胺基丙-1,2-二醇且使用Et3N替代咪唑來製備標題化合物。萃取後，藉由急驟層析
(DCM/MeOH，100：0→90/10)純化殘餘物。tR：0.93分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：330.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例6所述之整個程序，但使用來自步驟15.1之產物替代D-蘇胺醇來製備標題化合物。tR：0.98分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：344.3[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於步驟19.1之程序，但使用來自步驟15.2之產物來製備標題化合物。藉由急驟層析(DCM/EtOH：99.8/0.2→98/2)，接著藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100mm，5 μm；0.1% TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-100%乙腈)純化殘餘物，得到標題化合物(35 mg，32%)。tR：0.98分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：440.1[M+H]+(LC-MS 1)。
標題化合物為在步驟19.2期間形成之第二異構體(1.07 g，57%)。
tR：0.91分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：252.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於實例11，但使用來自步驟16.1之產物替代(R)-4-甲基-2-唑啶酮來製備標題化合物。在100℃下進行反應1小時。用EtOAc溶解反應混合物。用飽和NaHCO3溶液洗滌兩次且用鹽水洗滌一次。經硫酸鈉乾燥有機層。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc：0%→85% EtOAc)純化殘餘物，得到標題化合物(9.6 mg，58%)。tR：0.94分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：426.2[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於步驟6.3所述之程序，但使用(S)-1-胺基丙-2-醇來製備標題化合物。在室溫下進行反應3小時。用飽和NH4Cl溶液(10 mL)淬滅反應物且在室溫下攪拌10分鐘。分離水層且用水洗滌有機層。用DCM萃取合併之水層3次。經Na2SO4乾燥合併之有機層，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc：0%→100% EtOAc)純化殘餘物，得到標題化合物(38 mg，9%)。1H NMR(400 MHz,<DMSO>)δ ppm 1.27(d,J=6.25 Hz,3 H)2.94-3.08(m,1 H)3.48-3.58(m,1 H)4.62(m,1 H)7.37(br.s.,1 H)
類似於對於實例4所述之程序，但使用來自步驟17.1之產物來製備標題化合物。完成後，經由矽藻土過濾反應混合物並濃縮。藉由急驟層析(DCM/EtOH，99.5：0.5→98：2)純化殘餘物。在DCM中濕磨殘餘物且用己烷洗滌，得到標題化合物。tR：0.89分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：434.4[M+H]+(LC-MS 1)；Rf：0.67(DCM/EtOH,95：5)。
類似於對於步驟2.2所述之程序，但使用來自步驟8.1之產物及(S)-4-甲基-2-唑啶酮來製備標題化合物。在DCM中進行萃取。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc，9：1→7：3)純化殘餘物。tR：0.97分鐘(LC-MS 1)；ESI-MS：307.3/309.3[M+H]+(LC-MS 1)。
類似於對於實例6所述之整個程序，但使用D-別-蘇胺醇替代D-蘇胺醇來製備標題化合物。在室溫下進行反應33小時。將混合物逐滴添加至飽和Na2CO3溶液中。添加後，pH值為約7-8。用水稀釋且用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機相，經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發。藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100 mm，5 μm；0.1% TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-60%乙腈)純化殘餘物。合併溶離份且用5% NaHCO3溶液鹼化。產物沈澱且將其濾出。為消除殘餘鈀，將產物溶解於DCM/MeOH(4/1)中且通過來自polymerlabs之MP-Thiol的SPE濾筒，接著蒸發溶劑。根據此方法製備多個批次，且若干處理得到如下結晶物質。
批次A：為製備此批次，不使產物通過來自polymerlabs之MP-Thiol的SPE濾筒。合併製備型HPLC後所獲得之純溶離份且用NaHCO3處理。蒸發CH3CN，隨後產物結晶。藉由過濾收集產物，用水洗滌並乾燥，得到呈白色固體狀之標題化合物。m.p.221.3℃(起始)。
批次B：為製備此批次，不使產物通過來自polymerlabs之MP-Thiol的SPE濾筒。合併製備型HPLC後所獲得之純溶離份且用固體NaHCO3處理。蒸發CH3CN，隨後產物結晶。水性混合物在冰箱中保持1小時，過濾，用水洗滌並在HV下乾燥隔夜，得到白色固體，m=298 mg。m.p.249.9℃(起始)
批次C：
為製備此批次，不使產物通過來自polymerlabs之MP-Thiol的SPE濾筒。合併製備型HPLC後所獲得之純溶離份並蒸發。將殘餘物溶解於CH3CN中，接著依序添加含有0.1% TFA之水、固體NaHCO3。濃縮溶液且過濾沈澱物，用水洗滌並乾燥，得到呈白色固體狀之標題產物。m.p.237.9℃(起始)
批次D：通過來自polymerlabs之MP-Thiol的SPE濾筒後，蒸發溶劑。將殘餘物溶解於CH3CN中，接著用相同量之水稀釋。蒸發CH3CN且在產物即將結晶之前，添加批次B之一些晶體。接著完全蒸發CH3CN且在冰箱中冷卻懸浮液。接著過濾，收集並在HV下乾燥隔夜，得到呈白色固體狀之標題產物，m.p.259.0℃(起始)
批次E：與對於批次C所述相同之程序，但添加批次D之一些晶體以誘導結晶。獲得呈白色固體狀之標題產物，m.p.258.8℃(起始)。
類似於對於實例6所述之整個程序，但使用來自步驟19.1之產物替代D-蘇胺醇來製備標題化合物。在室溫下進行反應16小時30分鐘。將混合物逐滴添加至飽和Na2CO3溶液中。添加後，用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。用鹽水洗滌有機相，經Na2SO4乾燥，過濾並蒸發。藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100 mm，5 μm；0.1%
TFA-水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-80%乙腈)純化殘餘物，得到標題化合物(16.3 mg，75%)。tR：2.79分鐘(HPLC 1)；ESI-MS：456.1[M+H]+。
在室溫下在HCl之EtOH溶液中攪拌來自步驟19.2之產物2小時。移除溶劑，得到呈鹽酸鹽形式之標題化合物(303 mg，100%)。1H NMR(400 MHz,<dmso>)δ ppm 1.08(d,J=6.65 Hz,3 H)3.18-3.33(m,1 H)3.33-3.45(m,1 H)3.61-3.72(m,1 H)7.85(br.s.,2 H)
將來自步驟19.3之產物(產物2，最後溶離，538 mg，2.14 mmol)與Pd/C(100 mg)一起溶解於AcOH(25 mL)中且在室溫下在H2條件下攪拌反應混合物11小時。接著經由矽藻土過濾，接著移除溶劑，得到標題化合物(311 mg，100%)。1H NMR(400 MHz,<dmso>)δ ppm 0.90-1.04(m,3 H)1.16-1.38(m,6 H)2.76-2.90(m,1 H)3.75(dd,J=13.86,7.22 Hz,2 H)3.90(br.s.,1 H)；tR：3.13分鐘(HPLC 1)。
向經充分攪拌之1.48 g(6.29 mmol)來自步驟19.4之產物於80 ml Et2O中的溶液中整份添加6.29 ml(6.29 mmol)1 M Et2AlCl之己烷溶液且持續攪拌15分鐘。接著使混合物冷卻至-60℃且用6.29 ml(18.87 mmol)3 M溴化甲基鎂之Et2O溶液處理。在-60℃下攪拌混合物2小時，接著使其在夜間攪拌下緩慢升溫至室溫。隨後，用NaOH(2 M，40 ml)處理反應物。在室溫下攪拌15分鐘後，用Et2O萃取混合物3×120。經Na2SO4乾燥合併之有機層，過濾並在真空下濃縮。將殘餘物溶解於MeOH中且藉由逆相製備型HPLC以8次注射(在20分鐘內H2O[+0.1% TFA]/CH3CN 97：3至50：50)純化：
- 將溶離份1-3收集在一起且用約2 g NaHCO3鹼化，隨後濃縮。用2×150 ml Et2O萃取所得層且經Na2SO4乾燥合併之有機層，過濾並蒸發至乾燥，得到1.01 g無色油狀物，其緩慢結晶(根據1H NMR為約99%純度；HPLC Rt=2.36；ESI-MS：252.2[M+H]+(LC-MS 1))->產物1
- 將溶離份5-7收集在一起且用約2 g NaHCO3鹼化，隨後濃縮。用2×150 ml Et2O萃取所得懸浮液且經Na2SO4乾燥合併之有機層，過濾並蒸發至乾燥，得到363 mg白色固體(根據1H NMR為約99%純度；HPLC Rt=2.44；ESI-MS：252.3[M+H]+(LC-MS 1))->產物2。
將1.50 g(11.53 mmol)(R)-2,2-二甲基-1.3-二氧雜環戊烷-4-甲醛(Fluorochem,Hadfield,UK)溶解於60 ml DCM中且用1.64 g(11.53 mmol)硫酸鈉處理。用氬氣沖洗反應混合物且用1.42 g(11.53 mmol)N-
苯甲基-羥胺(由市售鹽酸鹽製備)於20 ml CH2Cl2中之溶液處理。在室溫下在氬氣下攪拌反應混合物16.5小時，接著過濾。將矽膠添加至濾液中且預吸收，隨後藉由矽膠層析(梯度：在30分鐘內庚烷/EtOAc 0%-100%)純化。收集溶離份20-80，蒸發至乾燥並在真空下乾燥隔夜，得到1.48 g白色固體(根據HPLC為約100%純度，Rt=1.43)；ESI-MS：236.2[M+H]+(LC-MS 1))
類似於對於實例6所述之整個程序，但使用(R)-3-胺基丙-1,2-二醇替代D-蘇胺醇來製備標題化合物。在室溫下進行反應16小時。接著小心地用NaHCO3淬滅反應混合物。接著用EtOAc稀釋且用飽和NaHCO3溶液洗滌兩次且用鹽水洗滌一次。經Na2SO4乾燥有機層，過濾並蒸發。藉由急驟層析(DCM/EtOH：0%→10% MeOH)純化殘餘物，得到標題化合物(22.8 mg，38%)。tR：0.77分鐘(HPLC 1)；ESI-MS：442.2[M+H]+(LC-MS 1)。
在80℃下在氬氣下攪拌(3aR,6aR)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)四氫呋喃并[3,4-d]唑-2(3H)-酮(100 mg，0.306 mmol)、中間物B(115 mg，0.398 mmol)、K3PO4(195 mg，0.918 mmol)及PdCl2(dppf)-CH2Cl2(25 mg，0.031 mmol)於DME/H2O(2.2 mL)中之溶液1.5小時。用EtOAc稀釋混合物且用飽和NaHCO3萃取。用H2O及鹽水洗滌有機層，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析(己烷-EtOAc 70：30→0：100)純化殘餘物，得到呈無色固體狀之標題化合物(88 mg，62%)：tR=0.84分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：454[M+H]+(LC-MS 3)。
在用氬氣脫氣後向(3aR,6aR)-四氫呋喃并[3,4-d]唑-2(3H)-酮(500 mg，3.87 mmol)、4-(4,6-二氯嘧啶-2-基)嗎啉(1088 mg，4.65 mmol)及Cs2CO3(2.14 g，6.58 mmol)於二烷(20 mL)中之溶液中添加4,5-雙(二苯基膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(157 mg，0.271 mmol)及Pd2(dba)3(70.9 mg，0.077 mmol)且在85℃下加熱反應混合物6小時。將反應混合物添加至10% NaHCO3水溶液中且用EtOAc萃取。用鹽水洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。在MeOH中濕磨粗產物隔夜，濾出並乾燥，得到呈無色固體狀之標題化合物(1.12 g，87%)：tR=0.92分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：327,329[M+H]+(LC-MS 3)。
在室溫下經30分鐘時段向(3R,4R)-4-胺基四氫呋喃-3-醇(1.1 g，7.88 mmol)及DIEA(4.54 ml，26.0 mmol)於CH2Cl2(30 mL)中之溶液中添加溶解於CH2Cl2(5 mL)中之碳酸雙(三氯甲基)酯(1.75 g，5.91 mmol)。在25℃下攪拌0.5小時後，將反應混合物添加至K2CO3水溶液中，攪拌1小時且蒸發CH2Cl2。用Et2O洗滌水相，隨後蒸發至乾燥。用EtOH/THF 1：1濕磨殘餘物，藉由經由矽膠塞過濾來移除無機鹽，且濃縮濾液，得到呈米色固體狀之標題化合物(930 mg，90%)：ESI-MS：147[M+NH]+。
在0℃下向(3aR*,6R*,6aR*)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮(810 mg，1.253 mmol)於THF(12 mL)中之溶液中逐滴添加1 M TBAF之THF溶液(1.0 mL，1.0 mmol)。在0℃下攪拌反應混合物30分鐘且在室溫下攪拌2小時，隨後蒸發。藉由急驟層析(己烷-THF 60：40→0：100)純化殘餘物。在Et2O中濕磨殘餘物，過濾並乾燥。藉由製備型HPLC(Waters Sun Fire C18，30×100 mm，5 μm；0.1% TFA-
水/乙腈；梯度：在20分鐘內5-100%乙腈)純化殘餘物，得到標題化合物(430 mg，72%)；tR=0.93分鐘(UPLC 1),tR=0.81分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：468[M+H]+(LC-MS 3)。
類似於對於實例21所述之程序，由(3aR*,6R*,6aR*)-6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮及中間物B且使用Pd(PPh3)4替代PdCl2(dppf)-CH2Cl2且使用Na2CO3替代K3PO4來製備標題化合物，自EtOAc/己烷中結晶後得到呈白色固體狀之標題化合物：tR=1.62分鐘(UPLC 1),tR=1.47分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：582[M+H]+(LC-MS 3)。
類似於對於步驟21.1所述之程序，由(3aR*,6R*,6aR*)-6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮及中間物A製備標題化合物：tR=1.76分鐘(UPLC 1),tR=1.58分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：
455,457[M+H]+(LC-MS 3)。
向(3aR*,6R*,6aR*)-6-((第三丁基二甲基矽烷基)氧基)-3-((2-硝基苯基)磺醯基)六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮(1.47 g，3.32 mmol)及Cs2CO3(2.164 g，6.64 mmol)於DMF(25 mL)中之懸浮液中添加N-乙醯基-L-半胱胺酸(0.921 g，5.65 mmol)且在室溫下攪拌反應混合物16小時。蒸發反應混合物且將殘餘物懸浮於飽和NaHCO3溶液中且用EtOAc萃取。用鹽水洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析(庚烷/EtOAc 90：10→50：50)純化後獲得呈黃色油狀之標題化合物(0.84 g，98%)：TLC(庚烷/EtOAc 1：1)Rf=0.28。
在0℃下向(3aR*,6R*,6aR*)-6-羥基-3-((2-硝基苯基)磺醯基)六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮(1.2 g，3.66 mmol)及2,6-二甲基吡啶(0.851 mL，7.31 mmol)於CH2Cl2(25 mL)中之溶液中逐滴添加三氟甲烷磺酸第三丁基二甲基矽烷酯(1.091 mL，4.75 mmol)。在0℃下攪拌反應混合物1小時，隨後在室溫下攪拌2小時。用CH2Cl2稀釋反應混合物且用20% NaH2PO4水溶液及H2O洗滌，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。自EtOAc/庚烷中結晶後獲得呈白色固體狀之標題化合物(1.5 g，88%)：
TLC(庚烷/EtOAc 1：1)Rf=0.54；tR=1.58分鐘(UPLC1),tR=1.43分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：460[M+NH4]+(LC-MS 3)。
向(1R*,2S*,5S*)-6-氧雜雙環[3.1.0]己-2-基((2-硝基苯基)磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(2.0 g，5.10 mmol)於MeOH(40 mL)中之溶液中添加Amberlyst 15(4.0 g)且在25℃下攪拌所得懸浮液1.5小時。過濾並濃縮反應混合物。藉由急驟層析(庚烷-EtOAc 90：10→EtOAc)純化後獲得呈米色固體狀之標題化合物(1.24 g，73%)：TLC(庚烷/EtOAc 1：2)Rf=0.36；tR=0.80分鐘(UPLC 1),tR=0.77分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：346[M+NH4]+(LC-MS 3)。
向環戊-2-烯-1-基((2-硝基苯基)磺醯基)胺基甲酸第三丁酯(2.75 g，7.46 mmol)及NaHCO3(1.254 g，14.93 mmol)於CH2Cl2(60 mL)中之懸浮液中整份添加間氯過氧苯甲酸(2.58 g，14.93 mmol)。在室溫下攪拌所得反應混合物隔夜。用CH2Cl2稀釋反應混合物且用20% Na2SO3水溶液、飽和NaHCO3溶液及水洗滌。經MgSO4乾燥有機相並濃縮。自EtOAc中結晶後獲得呈白色晶體狀之標題化合物(2.01 g，
68%)：TLC(庚烷-EtOAc 1：1)Rf=0.48；tR=1.20分鐘(UPLC 1),tR=1.12分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：329[M-異丁烯]+(LC-MS 3)。
在-20℃下向三苯基膦(3.09 g，11.77 mmol)、2-硝基苯基磺醯基胺基甲酸第三丁酯(3.40 g，11.23 mmol)及環戊-2-烯醇(0.900 g，10.70 mmol)於甲苯(60 mL)中之懸浮液中逐滴添加偶氮二甲酸二乙酯(1.948 mL，12.30 mmol)。在-20℃下攪拌反應混合物2小時，隨後在0℃下攪拌3小時。濃縮反應混合物且藉由急驟層析(庚烷/EtOAc 95：5→3：1)純化後獲得呈白色固體狀之標題化合物(2.79 g，67%)：tR=1.34分鐘(UPLC 1),tR=1.24分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：386[M+NH4]+(LC-MS 3)。
未確定絕對立體化學。
對實例22之外消旋產物進行製備型對掌性HPLC分離後獲得標題化合物。(管柱：Chiralpak AD 20 μm 5×500 mm。流速：70 mL/min。庚烷/EtOH/DEA 20：80：0.01)。tR：17.7分鐘(管柱：Chiralpak AD-H，4.6×250 mm。流速：1.2 mL/min。庚烷/EtOH 70：30)。
未確定絕對立體化學。
對實例22之外消旋產物進行製備型對掌性HPLC分離後獲得標題化合物。(管柱：Chiralpak AD 20 μm 5×500 mm。流速：70 mL/min。庚烷/EtOH/DEA 20：80：0.01)。tR：23.3分鐘(管柱：Chiralpak AD-H，4.6×250 mm。流速：1.2 mL/min。庚烷/EtOH 70：30)。
在0℃下向(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-(2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)乙基)-4-甲基唑啶-2-酮(2.1 g，3 mmol)於THF(20 mL)中之溶液中逐滴添加1 M TBAF之THF溶液(3 mL，3 mmol)。在0℃下攪拌反應混合物1小時，隨後蒸發。藉由急驟層析(己烷/EtOAc/MeOH 90：10：1→0：100：10)純化殘餘物。使純化產物自MeOH中再結晶，得到呈白色固體狀之標題化合物(1.17 g，83%)：tR=0.80分鐘(UPLC 1),tR=0.82分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：470[M+H]+(LC-MS 3)。
類似於對於實例22.1所述之程序，由(4S,5R)-5-(2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)乙基)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)-4-甲基唑啶-2-酮及中間物B製備標題化合物，自MeOH中結晶後得到標題化合物：tR=1.72分鐘(UPLC 1),tR=1.55分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：708[M+H]+(LC-MS 3)。
類似於對於步驟21.1所述之程序，由5-(2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)乙基)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)-4-甲基唑啶-2-酮之(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體的4：1混合物及中間物A製備標題化合物，藉由自THF/MeOH中兩次再結晶移除(4S,5S)-非對映異構體後僅得到標題化合物之(4S,5R)-非對映異構體：tR=1.88分鐘(UPLC 1),tR=1.64分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：581,583[M+H]+(LC-MS 3)；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 1.08(s,9H),1.36(d,3H),2.02(m,2H),3.70-3.90(m,10H),4.82(m,2H),7.40-7.50(m,6H),7.51(s,1H),7.67(m,4H)。
在0℃下向5-(2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮之(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體的4：1混合物(4.1 g，7.8 mmol)於乙腈(40 mL)中之溶液中添加(NH4)2Ce(NO3)6(10.71 g，19.5 mmol)於H2O(20 mL)中之溶液。在0-5℃下攪拌反應混合物4小時。將混合物添加至冰水中且用EtOAc萃取產物。用飽和NaHCO3溶液及鹽水洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析純化(庚烷/EtOAc 10：1→EtOAc)後獲得呈非對映異構體之4：1混合物形式的標題化合物(2.2 g，71%)：TLC(己烷-EtOAc 1：1)Rf=0.23；tR=1.47分鐘(UPLC 1),tR=1.33分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：401[M+NH4]+(LC-MS 3)。
在0-5℃下向5-(2-羥基乙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮之(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體的4：1混合物(2.65
g，10 mmol)於DMF(30 mL)中之溶液中添加咪唑(1.73 g，25 mmol)及TBDPSCl(3.57 g，13 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且在室溫下攪拌隔夜。濃縮反應混合物，將殘餘油狀物溶解於TBME中且用10% KHSO4水溶液、H2O、飽和NaHCO3溶液及鹽水洗滌，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析純化(庚烷/EtOAc 20：1→2：1)獲得呈非對映異構體之4：1混合物形式的標題化合物(4.18 g，80%)：TLC(己烷/EtOAc 3：1)Rf=0.27；tR=1.70分鐘(UPLC 1),tR=1.52分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：526[M+Na]+(LC-MS 3)。
在-78℃下使(4S,5R)-5-烯丙基-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-5-烯丙基-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮之4：1混合物(2.67 g，10 mmol)於CH2Cl2-MeOH 2：1(40 mL)中臭氧化。臭氧化物形成完成後，添加NaBH4(0.57 g，15 mmol)且使反應混合物升溫至室溫並在室溫下攪拌2小時。將反應混合物添加至20% K2CO3水溶液中且用EtOAc萃取產物。用鹽水洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮，得到呈淡黃色油狀之標題化合物(2.65 g，99%)：TLC(EtOAc)Rf=0.28；tR=0.68分鐘(UPLC 1),tR=0.69分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：266[M+H]+(LC-MS 3)。
在-50℃下在氬氣下向((2S,3R)-3-羥基己-5-烯-2-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基甲酸苯甲酯與((2S,3S)-3-羥基己-5-烯-2-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基甲酸苯甲酯(3.55 g，9.5 mmol)之4：1混合物中之THF(60 mL)溶液中添加1 M NaHMDS之THF溶液(10.5 mL)。在-40℃下攪拌反應混合物0.5小時後，將混合物添加至冷的10% KHSO4水溶液中且用EtOAc萃取產物。用鹽水洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析(己烷/EtOAc 10：1→1：1)純化後獲得呈無色油狀之標題化合物(2.4 g，97%)：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.42；tR=1.03分鐘(UPLC 1),tR=0.99分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：262[M+H]+(LC-MS 3)；1H NMR(400 MHz,DMSO-d6)：δ 1.06(d,2.4H),1.13(d,0.6H),2.30-2.40(m,2H),3.25(m,0.2H),3.66(m,0.8H，強NOE以在4.54處發信號)，3.75(s,3H),4.07(d,1H),4.10(m,0.2H),4.48(d,1H),4.54(m,0.8H),5.05-5,20(m,2H),5.23(m,0.2H),5.78(m,0.8H),6.92(d,2H),7.22(d,0.4H),7.24(d,1.6H)。
向(S)-4-甲氧基苯甲基(1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸苯甲酯(3.86 g，10 mmol)於THF(30 mL)中之溶液中添加鋅粉(1.64 g，25 mmol)、飽和NH4Cl水溶液(5 mL)及溴化烯丙基(2.2 mL，25 mmol)且在25-30℃
下攪拌反應混合物1小時。用H2O稀釋反應混合物且用EtOAc萃取產物。用10% KHSO4水溶液、H2O、NaHCO3及鹽水洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮。藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→2：1)純化後獲得呈無色油狀之標題化合物(3.5 g，97%)：tR=1.25分鐘及1.27分鐘(UPLC 1)((2S,3R)-與(2S,3S)-非對映異構體之4：1混合物)，TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.51；tR=1.68分鐘及1.69分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：370[M+H]+(LC-MS 3)。
向(S)-(1-羥基丙-2-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基甲酸苯甲酯(11.8 g，35.5 mmol)之CH2Cl2溶液中添加NaHCO3(3.28 g，39 mmol)、KBr(0.25 g，2.1 mmol)及TEMPO(0.168 g，1.07 mmol)。使反應混合物冷卻至0-5℃且在30分鐘內添加5% NaClO水溶液(85 mL，71 mmol)。在0-5℃下攪拌1小時後，將反應混合物添加至Na2S2O3溶液中且用EtOAc萃取產物。用NaH2PO4水溶液、H2O及鹽水洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮，得到呈黃色油狀之標題化合物(11.2 g，96%)：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.55；tR=1.29分鐘(UPLC 1),tR=1.15分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：328[M+H]+(LC-MS 3)。
在0-5℃下在氬氣下向(S)-2-(((苯甲氧基)羰基)(4-甲氧基苯甲基)
胺基)丙酸[439589-23-8](16 g，41.9 mmol)於THF(150 mL)中之溶液中緩慢添加甲硼烷二甲硫醚(8.4 mL，84 mmol)。在0-5℃下攪拌反應混合物1小時，隨後在40-45℃下攪拌3小時。藉由小心添加MeOH來消除過量甲硼烷且將反應混合物與200 mL MeOH一起蒸發3次且與CHCl3一起蒸發2次。乾燥後獲得呈無色油狀之標題化合物(13.7 g，99%)：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.22；tR=1.06分鐘(UPLC 1),tR=1.02分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：330[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(R)-組態。
類似於對於實例23所述之程序，由(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-((R)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮及TBAF製備標題化合物，藉由急驟層析純化(己烷/EtOAc 5：1→EtOAc/MeOH 10：1)且自MeOH中再結晶後得到呈白色固體狀之標題化合物：TLC(EtOAc)Rf=0.50；tR=0.88分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：484[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(R)-
組態。
類似於對於步驟22.1所述之程序，由(4S,5R)-5-((R)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)-4-甲基唑啶-2-酮及中間物B製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→EtOAc)純化後得到呈淡黃色泡沫狀之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.45；tR=1.57分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：722[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(R)-組態。
類似於對於步驟21.1所述之程序，由(4S,5R)-5-((R)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮及中間物A製備標題化合物，藉由急驟層析純化(己烷/EtOAc 20：1→3：1)後得到呈無色油狀之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.65；tR=1.67分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：595,597[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(R)-組態。
類似於對於步驟23.3所述之程序，由(4S,5R)-5-((R)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮製備標題化合物，藉由急驟層析純化(己烷/EtOAc 20：1→EtOAc)後得到呈無色油狀之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.28；tR=1.38分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：415[M+NH4]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(R)-組態。
類似於對於步驟23.4所述之程序，由(4S,5R)-5-((R)-2-羥基丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮(受15%來自步驟24.5之第一溶離(2S,4S,5R)-非對映異構體污染)製備標題化合物，藉由急驟層析純化(己烷/EtOAc 20：1→EtOAc)後得到呈無色油狀之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 3：1)Rf=0.26；tR=1.55分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：540[M+Na]+(LC-MS 3)。
未確定酮還原後2-羥基丙基部分之絕對立體化學，對於第一溶離產物(4S,5R,5S)-非對映異構體任意指定(S)-組態。
第一溶離產物為(4S,5R,5S)-非對映異構體：
第二溶離產物，(2R,4S,5R)-非對映異構體(對於2-羥基丙基部分任意指定(2R)-組態)：(85%)
受第一溶離(4S,5R,5S)-非對映異構體污染之混合物：(15%)
類似於對於步驟23.5所述之程序，由3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基-5-(2-甲基烯丙基)唑啶-2-酮之(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體的3：1混合物製備標題化合物，藉由急驟層析(RediSep Rf Gold矽膠；己烷/EtOAc 1：1→EtOAc及甲苯/EtOAc 3：1→EtOAc)多次分離3：3：1：1異構體混合物後得到呈無色油狀之個別兩種次要(2S,4S,5S)-非對映異構體及(2R,4S,5S)-非對映異構體及個別兩種主要(2S,4S,5R)-非對映異構體及(2R,4S,5R)-非對映異構體：標題化合物之第一溶離(2S,4S,5R)-非對映異構體(對於2-羥基丙
基部分任意指定(2S)-組態)：TLC(EtOAc)Rf=0.39；tR=0.752分鐘(UPLC 1)；tR=0.76分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：280[M+H]+(LC-MS 3)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 1.12(d,3H),1.28(d,3H),1.5-1.63(m,1H),1.81(m,1H),1.90(d,1H),3.68(m,1H),3.82(s,3H),4.03(d,1H),4.14(m,1H),4.60(ddd,1H),4.79(d,1H),6.89(d,2H),7.22(d,2H)。
標題化合物之第二溶離(2R,4S,5R)-非對映異構體(對於2-羥基丙基部分)任意指定(2R)-組態，其受15%第一溶離(2S,4S,5R)-非對映異構體污染：TLC(EtOAc)Rf=0.35；tR=0.742分鐘及0.752分鐘(UPLC 1)；tR=0.75分鐘及0.76分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：280[M+H]+(LC-MS 3)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 1.12(d,3H),1.28(d,3H),1.50-1.64(m,1H),1.81(m,0.15H),1.90(d,0.15H).1.94(m,0.85H),2.21(d,0.85H),3.67(m,1H),3.82(s,3H),4.01(m,1H),4.13(m,1H),4.73(m,0.85H),4.79(d,0.15H),4.80(d,1H),6.90(d,2H),7.22(d,2H)。
類似於對於步驟23.6所述之程序，由((2S)-3-羥基-5-甲基己-5-烯-2-基)(4-甲氧基苯甲基)胺基甲酸苯甲酯之(2S,3R)-非對映異構體與(2S,3S)-非對映異構體的3：1混合物製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→1：1)純化後得到呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之3：1混合物形式的標題化合物：tR=1.112分鐘(UPLC 1)；tR=1.05分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：276[M+H]+(LC-MS 3)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 1.13(d,2.2H),1,20(d,0.8H),1.76(s,
0.8H),1.80(s,2.2H),2.23(ddd,0.25H),2.27(dd,0.75H),2.39(dd,0.25H)2.46(dd,0.75H),3.28(m,0.25H),3.68(m,0.75H),3.83(s,3H),3.99(d,0.75H),4.04(d,0.35H),4.14(m,0.25H),4.62(m,0.75H),4.70-4.90(m,4H),6.90(d,2H),7.25(d,2H)。
類似於對於步驟23.7所述之程序，由(S)-4-甲氧基苯甲基(1-側氧基丙-2-基)胺基甲酸苯甲酯及3-溴-2-甲基丙-1-烯製備標題化合物，得到呈(2S,3R)-非對映異構體與(2S,3S)-非對映異構體之3：1混合物形式之標題化合物：tR=1.322分鐘(主要異構體)及1.329分鐘(次要異構體)(UPLC 1)；tR=1.23分鐘(主要異構體)及1.24分鐘(次要異構體)(LC-MS 3)；ESI-MS：384[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(S)-組態。
類似於對於實例23所述之程序，由(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-
4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮之8：1混合物及TBAF製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 5：1→EtOAc/MeOH 10：1)且自MeOH中再結晶純化後得到呈白色固體狀之標題化合物：TLC(EtOAc)Rf=0.50；tR=0.87分鐘(次要(4S,5S)-非對映異構體)及0.89分鐘(主要(4S,5R)-非對映異構體)(LC-MS 3)；ESI-MS：484[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(S)-組態。
類似於對於步驟22.1所述之程序，由(4S,5R)-5-((R)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-5-((R)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)-4-甲基唑啶-2-酮之7：1混合物及中間物B製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→EtOAc)純化後得到呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之8：1混合物形式之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.45；tR=1.58分鐘(LC-MS 3)；
ESI-MS：722[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(S)-組態。
類似於對於步驟21.1所述之程序，由(4S,5R)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮之7：1混合物及中間物A製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→3：1)純化且自MeOH/THF中結晶後得到呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之7：1混合物形式之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.65；tR=1.67分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：595,597[M+H]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(S)-組態。
類似於對於步驟23.3所述之程序，由(4S,5R)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮之7：1混合物製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→2：1)純化後得到呈無色油狀且呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之10：1混合物形式之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 1：1)Rf=0.30；tR=1.38分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：415[M+NH4]+(LC-MS 3)。
未確定經保護之2-羥基丙基部分之絕對立體化學，任意指定(S)-組態。
類似於對於步驟23.4所述之程序，由步驟24.5中所製備之(4S,5R)-5-((S)-2-羥基丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-5-((S)-2-羥基丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮之7：1混合物製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→EtOAc)純化後得到呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之
7：1混合物形式之標題化合物：TLC(己烷/EtOAc 3：1)Rf=0.26；tR=1.56分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：540[M+Na]+(LC-MS 3)。
類似於對於步驟22.1所述之程序，由(4S,5R)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)-5-(2-羥基-2-甲基丙基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-3-(6-氯-2-嗎啉基嘧啶-4-基)-5-(2-羥基-2-甲基丙基)-4-甲基唑啶-2-酮之5：1混合物及中間物B製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc/MeOH 90：10：1→10：100：10)純化且自MeOH中再結晶後得到呈白色固體狀且呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之7：1混合物形式之標題化合物：TLC(EtOAc)Rf=0.43；tR=0.93分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：498[M+H]+(LC-MS 3)。
類似於對於步驟21.1所述之程序，由(4S,5R)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-5-((S)-2-((第三丁基二苯基矽烷基)氧基)丙基)-4-甲基唑啶-2-酮之5：1混合物及中間物A製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 10：1→EtOAc)純化後得到呈淡黃色泡沫狀且呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之5：1混合物形式之標題化合物：TLC(EtOAc/McOH 10：1)Rf=0.55；tR=1.02分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：371,373[M+H]+(LC-MS 3)。
類似於對於步驟23.3所述之程序，由(4S,5R)-5-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮與(4S,5S)-5-(2-羥基-2-甲基丙基)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基唑啶-2-酮之5：1混合物製備標題化合物，藉由急驟層析(己烷-EtOAc 1：1→EtOAc-MeOH 5：1)純化後得到呈無色油狀且呈(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之5：1混合物形式之標題化合物：TLC(EtOAc/MeOH 10：1)Rf=0.40；tR=0.41分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：174[M+H]+(LC-MS 3)。
在-78℃下在氬氣下向2-((4S,5R)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-側氧基唑啶-5-基)乙酸甲酯與2-((4S,5S)-3-(4-甲氧基苯甲基)-4-甲基-2-側氧基唑啶-5-基)乙酸甲酯之3：1混合物(2.0 g，6.82 mmol)於THF(50 mL)中之溶液中緩慢添加3 M氯化甲基鎂之THF溶液(6.82 ml，20.46 mmol)。添加後，使反應混合物升溫至室溫。添加10% NH4Cl水溶液後，用EtOAc萃取產物。用H2O洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→EtOAc)純化後得到呈無色油狀之標題化合物(1.2 g，59%，(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之3：1混合物)：TLC(CH2Cl2/MeOH 10：1)Rf=0.43；tR=0.80分鐘及0.81分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：294[M+H]+(LC-MS 3)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 1.12(d,2.25H),1.22(d,0.75),1.32(s,1.5H),1.34(s,4.5H),1.68(dd,1H),1.86(dd,0.25H),1.93(dd,0.75H),3.23(m,0.25H),3.64(m,0.75H),3.83(s,3H),3.99(d,0.75H),4.04(d,0.25H),4.26(d,0.25H),4.72(d,0.25H),4.73(m,0.75H),4.80(d,0.75H),6.89(d,0.5H),6.90(d,1.5H),7.23(d,0.5H),7.24(1.5H)。
向(3R,4S)-3-羥基-4-((4甲氧基苯甲基)胺基)戊酸甲酯與(3S,4S)-3-羥基-4-((4甲氧基苯甲基)胺基)戊酸甲酯之3：1混合物(4.1 g，10.74 mmol)於CH2Cl2(80 mL)中之懸浮液中添加DIEA(8.44 mL，48.3 mmol)且在0℃下添加碳酸雙(三氯甲基)酯(2.389 g，8.05 mmol)溶解於
CH2Cl2(10 mL)中之溶液。在室溫下攪拌0.5小時後，將反應混合物添加至飽和NaHCO3溶液中且用CH2Cl2萃取產物。用H2O洗滌合併之萃取物，經MgSO4乾燥，過濾並濃縮，藉由急驟層析(己烷/EtOAc 20：1→EtOAc)純化後得到呈淡黃色泡沫狀之標題化合物(2.02 g，63%，(4S,5R)-非對映異構體與(4S,5S)-非對映異構體之3：1混合物)：TLC(甲苯/EtOAc 1：1)Rf=0.47；tR=0.84分鐘(LC-MS 3)；ESI-MS：294[M+H]+(LC-MS 3)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)：δ 1.11(d,2.25H),1.27(d,0.75H),2.57(dd,0.25H),2.67(dd,0.75H),2.75(dd,0.25H),2.81(dd,0.75H),3.34(m,0.25H),3.70(s,0.75H),3.73(s,2.25H),3.77(m,0.75H),3.83(s,3H),3.99(d,0.75H),4.04(d,0.25H),4.44(m,0.25H),4.75(d,0.25H),4.78(d,0.75H),4.88(m,0.75H),6.90(d,2H),7.22(d,0.5H),7.23(d,1.5H)。
向(3R,4S)-4-胺基-3-羥基戊酸甲酯鹽酸鹽[111061-25-7](2.17 g，11.8 mmol)於CH2Cl2(60 mL)及MeOH(60 mL)中之懸浮液中添加NaOAc(1.357 g，16.54 mmol)且攪拌10分鐘後添加對大茴香醛(1.37 mL，11.2 mmol)及分子篩(2 g)。在室溫下攪拌反應混合物16小時。添加2 mL AcOH後，經30分鐘時段逐份添加NaBH3CN(1.11 g，17.7 mmol)。在室溫下再攪拌30分鐘後，過濾反應混合物，用4 N HCl水溶液酸化濾液並蒸發至乾燥。首先用Et2O洗滌殘餘物，接著懸浮於CH2Cl2/MeOH 1：1中且濾出無機物質。濃縮濾液，在50℃下乾燥4小時後得到呈米色固體狀之標題化合物(2.9 g，80%，(3R,4S)-非對映異構
體與(3S,4S)-非對映異構體之3：1混合物)：tR=0.46分鐘((3R,4S)-非對映異構體)及0.48分鐘((3S,4S)-非對映異構體)(LC-MS 3)；ESI-MS：268[M+H]+(LC-MS 3)。
以上實例之化合物的1H NMR數據提供於下表中。
如下進一步表徵自實例10及18、批次A-E獲得之結晶物質。
熔點測定：藉由差示掃描熱量測定(DSC)測定熔點。使用TA儀器DSC 2000(序列號100036)量測DSC。稱取1-5 mg之樣品至標準鋁盤(盤+蓋子，TA 900786.901、900779.901)中。使用Thermal Advantage Q-Series軟體V.2.6.0.367及Thermal Advantage軟體V4.6.9操作該儀器。使用Universal Analysis V4.3A Build 4.3.0.6表徵熱事件。對照空盤來量測樣品。根據以下方案處理樣品：
步驟1：在-40℃下平衡
步驟2：加熱10℃/min/300℃
調製：否
所獲得之圖展示於圖1、3、5、7、9及11中。
粉末X射線繞射(PXRD)：將約2-5 mg量之樣品置於物鏡玻璃載片上且置於具有CuKa陽極之Bruker D8 GADDS Discover(序列號002482)上之X射線束中心。樣品-偵測器距離為30 cm。在5° 2-θ與40° 2-θ之間記錄到兩個訊框(frame)。使用GADDS軟體4.1.27合併各訊框。使用EVA 10.0.0進行評估。
所獲得之圖展示於圖2、4、6、8、10及12中。
代表性2-θ[°]峰提供於下表中：
本發明化合物作為PI3激酶抑制劑的功效可如下證明：
將測試化合物溶解於DMSO(10 mM)中且藉由個別Novartis化合物中樞(compound hub)轉移至帶有獨特2D基質晶片之1.4 mL平底或V形基質管中。此等晶片之數目區別性地與Novartis Pharma Numbers有關。若不立即使用，則將儲備溶液儲存於-20℃下。對於測試程序，解凍小瓶且由掃描儀鑑別，藉此產生指導後續工作步驟之工作底稿。
若測試384孔中之分佈，則如文中所述用DMSO手動稀釋化合物用於個別實驗(96孔能夠操作8種(單一點)濃度之10種化合物)或如下文所述製備化合物。此格式允許分析8種濃度(單一點)之最多40種個別測試化合物，包括4種參考化合物。稀釋方案包括製備「預稀釋板」、「母板」及「分析板」。
預稀釋板：使用96孔聚丙烯板作為預稀釋板。製備總共4個預稀釋板，包括各自處於板位置A1-A10的10種測試化合物，處於A11之一
種標準化合物及處於A12之一種DMSO對照物。稀釋步驟之模式概述於表1中。已寫出程式以在HamiltonSTAR自動機上操作此等移液步驟。
用H2O使DMSO飽和至10%之濃度。Vol：體積，Conc：濃度，Dil.比：稀釋比，Fin.c：最終濃度。
母板：將4個「預稀釋板」中之包括標準化合物及對照物在內之100 μL個別化合物稀釋液轉移至384「母板」中，包括分別於90% DMSO中之以下濃度：1'820、564、182、54.6、18.2、5.46、1.82及0.546 μM。
分析板：接著藉由將「母板」中各50 nL化合物稀釋液吸移至384孔「分析板」中來製備相同「分析板」。將該等化合物與對應於1：181稀釋度之4.5 μL分析組分加上4.5 μL酶混合，分別實現10、3.0、1.0、0.3、0.1、0.03、0.01及0.003 μM之最終濃度。「母板」之製備由Matrix PlateMate Plus自動機操作且「分析板」之複製由HummingBird自動機操作。
如所述選殖，表現且純化具催化活性之人類PI3Kα、PI3Kβ、PI3Kδ及mTOR(Maira SM,Stauffer F,Brueggen J,Furet P,Schnell C,Fritsch C,Brachmann S,Chène P,de Pover A,Schoemaker K,Fabbro D,
Gabriel D,Simonen M,Murphy L,Finan P,Sellers W,Garcia-Echeverria C(2008),Mol Cancer Ther.7：1851-63及Maira SM,Pecchi S,Brueggen J,Huh K,Schnell C,Fritsch C,Nagel T,Wiesmann M,Brachmann S,Dorsch M,Chène P,Schoemaker K,De Pover A,Menezes D,Fabbro D,Sellers W,García-Echeverría C,Voliva CF(2011),Mol.Cancer Ther.已接收)。
基於發光之ATP偵測試劑KinaseGlo係經由Catalys,Wallisellen,Switzerland獲自Promega(目錄號V6714，批號236161)。(L-α-磷脂醯肌醇(PI)(牛肝臟)係獲自Avanti Polar Lipid(目錄號840042C，批號LPI-274)，磷脂醯肌醇-4,5-二磷酸酯(PIP(4,5)2)(Avanti，目錄號840046X)或L-α-磷脂醯肌醇(PI)係獲自Avanti Polar Lipid(目錄號840042C，批號LPI-274)。L-α-磷脂醯絲胺酸(PS)係來自Avanti Polar Lipid(目錄號840032C)，正辛基葡糖苷係來自Avanti Polar Lipid(目錄號10634425001)。發光為用於測定ATP濃度之經充分確定的讀數且因此可用於追蹤許多激酶之活性，而不考慮其受質。Kinase Glo發光激酶分析(Promega,Madison/WI,USA)為藉由定量激酶反應後溶液中殘餘之ATP的量來量測激酶活性之均質HTS方法。
如章節8.2中所述將50 nL化合物稀釋液分配至黑色384孔低體積非結合苯乙烯(NBS)板(Costar，目錄號NBS#3676)上。將以10 mg/mL甲醇溶液形式提供之L-α-磷脂醯肌醇(PI)轉移至玻璃管中並在氮氣束下乾燥。接著藉由渦旋使其再懸浮於3%辛基葡糖苷中且儲存於4℃下。添加含PI3Ka及Pi3Kb亞型之5 μL PI/OG混合物。藉由添加於最終體積10 μL中含有10 mM TRIS-HCl(pH 7.5)、3 mM MgCl2、50 mM NaCl、0.05% CHAPS、1 mM DTT及1 μM ATP之5 μl ATP混合物開始激酶反應，且在室溫下進行。用10 μl KinaseGlo中止反應且10分鐘後
在Synergy2讀取器中使用每孔0.1秒之積分時間來讀取各板。將2.5 μM NVP-BGT226(標準物)添加至分析板中以產生對激酶反應之100%抑制，而溶劑媒劑(90% DMSO水溶液)達成0%抑制。使用NVP-BGT226作為參考化合物且以16個稀釋點形式包括於所有分析板中，一式兩份。
藉由將S形劑量-反應曲線與如所述之分析讀數相對於抑制劑濃度的圖擬合得到8種濃度(通常為10、3.0、1.0、0.3、0.1、0.030、0.010及0.003 μM)(n=2)之各化合物之百分比抑制的IC50值。所有擬合均使用程式XLfit4(ID Business Solutions,Guildford,UK)進行。
TR-FRET AdaptaTM通用激酶分析套組係購自Invitrogen公司(Carlsbad/CA,USA)(目錄號PV5099)。該套組含有以下試劑：Adapta Eu-抗ADP抗體(含經銪標記之抗ADP抗體的HEPES緩衝鹽水，目錄號PV5097)、經Alexa Fluor® 647標記之ADP示蹤劑(含經Alexa Fluor® 647標記之ADP示蹤劑的HEPES緩衝鹽水，目錄號PV5098)、專用TR-FRET稀釋緩衝液(pH 7.5)(目錄號PV3574)。
PIK3CD受質磷脂醯肌醇係獲自Invitrogen(由含2 mM PI之50 mM HEPES(pH 7.5)組成之微脂粒；目錄號PV5371)。PIK3CG受質磷脂醯肌醇-4,5-二磷酸酯((PIP(4,5)2)係獲自Invitrogen(由含1 mM PIP2：19 mM PS之50 mM HEPES(pH7.5)、3 mM MgCl2、1 mM EGTA組成之PIP2：PS單層大微脂粒；目錄號PV5100)。
時差式螢光共振能量傳遞(TR-FRET)係一種基於經由共振在兩種相鄰染料之間自一種染料之激發電子(供體)至相鄰染料之電子(接受體)能量轉移、接著作為光子釋放之技術。此能量轉移藉由接受體之螢光發射增加及供體之螢光發射減少來偵測。針對蛋白激酶之TR-FRET分析使用長壽命鑭系元素鋱或銪螯合物作為供體物質，其藉由
在受閃光燈激發源激發後引入延遲來克服來自化合物自發螢光或來自沈澱化合物之光散射的干擾。結果常常以接受體及供體螢光團之強度比率表示。該值之比率量測性質針對各孔之間分析體積之差異進行校正，以及針對由有色化合物引起之淬滅效應進行校正。AdaptaTM分析可分為兩個階段：激酶反應階段及ADP偵測階段。在激酶反應階段，將所有激酶反應組分添加至孔中且使反應物培育對於各激酶具有特異性之固定時段。反應後，將經Eu標記之抗ADP抗體之偵測溶液、經Alexa Fluor® 647標記之ADP示蹤劑及EDTA(用來中止激酶反應)添加至分析孔中。由激酶反應形成之ADP將置換來自抗體之經Alexa Fluor® 647標記之ADP示蹤劑，導致TR-FRET信號減弱。在抑制劑存在下，由激酶反應形成之ADP的量降低，且所產生之完整抗體-示蹤劑相互作用維持高TR-FRET信號。在AdaptaTM分析中，供體(銪-抗ADP抗體)在340 nm處受激發且將其能量轉移至接受體(經Alexa Fluor® 647標記之ADP示蹤劑)。來自Alexa Fluor® 647之發射可用集中於665 nm處之濾光器監測，因為其位於供體之發射峰之間，其在615/620 nm處量測到。
如章節2.2中所述將50 nL化合物稀釋液分配至384孔白色小體積聚苯乙烯板上。接著在室溫下培育5 μL PI3Kg及PI3Kd及脂質受質(PI或PIP2：PS)，隨後培育5 μL ATP(最終分析體積10 μL)。用於AdaptaTM TR-FRET分析之標準反應緩衝液含有10 mM Tris-HCl(pH 7.5)、3 mM MgCl2、50 mM NaCl、1 mM DTT、0.05% CHAPS。用5 μL含有經Eu標記之抗ADP抗體的EDTA與經Alexa Fluor® 647標記之ADP示蹤劑於TR-FRET稀釋緩衝液(IVG專用)中之混合物中止反應。15至60分鐘後在Synergy2讀取器中使用0.4秒之積分時間及0.05秒之延遲讀取各板。藉由用標準反應緩衝液置換PI3K來進行達成對激酶反應之100%抑制的對照。由化合物之溶劑媒劑(90% DMSO之H2O溶液)給出達成0%抑
制之對照。使用標準化合物NVP-BGT226作為參考化合物且以16個稀釋點形式包括於所有分析板中，一式兩份。
使用Excel擬合軟體或Graphpad Prism分析數據。藉由將S形劑量-反應曲線與分析讀數相對於抑制劑濃度之圖擬合得到EC50值。所有擬合均使用程式XLfit4(ID Business Solutions,Guildford,UK)進行。藉由將S形劑量-反應曲線與分析讀數相對於抑制劑濃度之圖擬合得到8種濃度(通常為10、3.0、1.0、0.3、0.1、0.030、0.010及0.003 μM)(n=2)之各化合物之百分比抑制的EC50值之測定。所有擬合均使用程式XLfit4(ID Business Solutions,Guildford,UK)進行。
針對蛋白激酶之TR-FRET分析使用長壽命鑭系元素鋱或銪螯合物作為供體物質，其藉由在受閃光燈激發源激發後引入延遲來克服化合物自發螢光或來自沈澱化合物之光散射的干擾。結果常常以接受體及供體螢光團之強度比率表示。該值之比率量測性質針對各孔之間分析體積之差異進行校正，以及對於由有色化合物引起之淬滅效應進行校正。
結合分析係基於經Alexa Fluor® 647標記之ATP競爭性激酶抑制劑與所關注激酶之結合及置換。已開發Invitrogen之「激酶示蹤劑」來定位各種激酶標靶且其係基於ATP競爭性激酶抑制劑，使其適合於偵測結合於ATP位點或改變ATP位點構形之別位位點的任何化合物。結合ATP位點之抑制劑包括I型激酶抑制劑，其僅結合於ATP位點；與II型抑制劑(例如Gleevec®/伊馬替尼(Imatinib)、索拉非尼(Sorafenib)、BIRB-796)，其結合於ATP位點與曝露於DFG-out(非活性)構形中之疏水性位點。III型抑制劑為不與ATP競爭之化合物，其不精確地稱為別位抑制劑。對15種不同III型抑制劑之研究證明在效力與活性分析相等的結合分析中偵測到除一種以外的所有化合物。唯一
例外為受質競爭性化合物，且因此並非真正的別位抑制劑。
與大部分基於螢光之激酶活性分析形成對比，LanthaScreen® Eu3+激酶結合分析可連續讀取，其有助於評估具有慢結合動力學之化合物。又，不同於大部分活性分析，結合分析可使用活性或未活化激酶製劑進行，由此允許表徵優先結合於未活化激酶之化合物，諸如Gleevec®/伊馬替尼及一些別位抑制劑。
在LanthascreenTM激酶結合分析中，供體(Eu3+-抗GST抗體)在340 nm處受激發且將其能量轉移至接受體(經Alexa Fluor® 647標記之ATP競爭性激酶抑制劑=示蹤劑-314)。來自示蹤劑-314(Alexa Fluor® 647抑制劑)之發射可用集中於665 nm處之濾光器監測，因為其位於供體之發射峰之間，其在615/620 nm處量測到。示蹤劑-314與Eu3+-抗GST抗體均與激酶結合導致自Eu3+-供體螢光團至示蹤劑-314上之Alexa-Fluor® 647-接受體螢光團的高度FRET。抑制劑與激酶之結合與示蹤劑之結合競爭，導致FRET損失。
如章節2.2中所述將50 nL化合物稀釋液分配至384孔白色小體積聚苯乙烯板上。接著在室溫下培育5 μL GST-mTOR及銪-抗GST抗體、隨後培育5 μL示蹤劑-314(最終分析體積為10 μL)。用於LanthascreenTM激酶結合分析之標準反應緩衝液含有50 mM HEPES(pH 7.5)、5 mM MgCl2、1 mM EGTA、0.01%普洛尼克(Pluronic)F-127。60分鐘後在Synergy2讀取器中使用0.2微秒之積分時間及0.1微秒之延遲讀取各板。
為計算發射比率，將在665 nm處自接受體(經Alexa Fluor® 647標記之示蹤劑-314)發射之信號除以在620 nm處自供體(Eu3+抗GST抗體)發射之信號。
由化合物之溶劑媒劑(90% DMSO之H2O溶液)給出達成0%抑制之對照。藉由添加10 μM含有GST-mTOR及銪抗GST抗體之混合物進行
達成相對100%抑制之對照。由無GST-mTOR之Eu3+抗GST抗體給出達成絕對0%抑制之另一對照。
AlphaScreen(增強型發光接近均質分析，ALPHA，Perkin Elmer)為以均質微量滴定盤格式研究生物分子相互作用之基於非放射性珠粒之接近分析技術。商標名稱SureFire表示適合於藉由使用由抗磷酸化激酶及抗激酶抗體組成之匹配抗體對定量細胞溶解物中內源性細胞蛋白質之磷酸化的AlphaScreen分析。該分析允許表徵細胞中之激酶信號傳導以及量測激酶抑制劑作用。AlphaScreen技術提供優於諸如ELISA之標準分析技術之若干個優點，因為其避免耗時洗滌程序且減少板處理。此外，其至少可小型化至384孔格式且提供低至毫微微莫耳濃度範圍之敏感度，此視個別AlphaScreen SureFire分析套組中包括之抗體的親和力而定。藉由固有擴增機制達到高敏感度，該機制涉及產生單態氧分子。SureFire分析套組可針對特定標靶購得且包括成對的經驗證抗體(PerkinElmer)。此報導描述應用於AlphaScreen SureFire分析之常見程序及用於基於細胞分析中之常規激酶抑制劑分佈分析的各別半自動化步驟。
如所述製備穩定過表現經活化I類PI3K同功異型物大鼠-1 pBABEpuro Myr-HA-hp110 δ(大鼠-1_PI3Kδ)及大鼠-1 pBABEpuro Myr-HA-hp110α(大鼠-1_PI3Kα)及大鼠-1 pBABEpuro Myr-HA-hp110 β(大鼠-1_PI3β)之大鼠-1細胞株(Maira SM,Stauffer F,Brueggen J,Furet P,Schnell C,Fritsch C,Brachmann S,Chène P,de Pover A,Schoemaker K,Fabbro D,Gabriel D,Simonen M,Murphy L,Finan P,Sellers W,García-Echeverría C(2008),Mol Cancer Ther.7：1851-63及Maira SM,Pecchi S,Brueggen J,Huh K,Schnell C,Fritsch C,Nagel T,Wiesmann M,Brachmann S,Dorsch M,Chène P,Schoemaker K,De
Pover A,Menezes D,Fabbro D,Sellers W,García-Echeverría C,Voliva CF(2011),Mol.Cancer Ther.，已接收)。在37℃/5% CO2/90%濕度下在含濕氣的CO2培育箱中將所有細胞株於完全生長培養基(DMEM高葡萄糖、10%(v/v)胎牛血清、1%(v/v)MEM NEAA、10 mM HEPES、2 mM L-麩醯胺酸、嘌呤黴素(對於大鼠-1_PI3Kδ及大鼠-1_PI3Kα為10 μg/mL，對於大鼠-1_PI3β為4 μg/mL)、1%(v/v)Pen/Strep)中培養至90%融合且每週分裂兩次。
對於大鼠-1細胞溶解物中之p-AKT(S473)偵測使用以下物質：杜爾貝科氏改良伊格爾氏培養基(Dulbecco's modified Eagle's medium，DMEM)(高葡萄糖)(Gibco Invitrogen,Basel,Switzerland，目錄號41965)、合格之熱不活化胎牛血清(HI FBS；Gibco Invitrogen,Basel,Switzerland，批號16140)、MEM非必需胺基酸(NEAA；Gibco Invitrogen,Basel,Switzerland，目錄號11140)、HEPES(Gibco Invitrogen,Basel,Switzerland，目錄號15630)、青黴素/鏈黴素(Pen/Strep，100×；Gibco Invitrogen,Basel,Switzerland，目錄號15140-122)、L-麩醯胺酸(Gibco Invitrogen,Basel,Switzerland，目錄號25030)、嘌呤黴素(Sigma Aldrich Buchs,Switzerland，目錄號P9620)、DMSO(MERCK,Dietikon,Switzerland，目錄號8.02912.2500)、H2O(除非另有規定，否則為MilliQ-H2O)(MILLIPORE QGARDOOR1,Millipore,Zug,Switzerland)、牛血清白蛋白(BSA；Sigma Aldrich,Buchs,Switzerland，目錄號A8412)、SureFire p-Akt 1/2(Ser473)分析套組(PerkinElmer,Schwerzenbach,Switzerland，目錄號TGRAS50K)。
p-Akt(S473)SureFire分析量測細胞溶解物中在Ser473處內源性細胞Akt 1/2之磷酸化。使用穩定表現myr-HA標記型式之人類PI3Kδ、PI3Kα或PI3Kβ p110催化次單元同功異型物的大鼠-1細胞，該分析開
發為384孔格式之雙板方案。
對於化合物測試，將細胞以4000(大鼠-1_PI3Kδ)、7500(大鼠-1_PI3Kα)或6200(大鼠-1_PI3Kβ)個細胞之密度於20 μl完全生長培養基中接種至經細胞培養物處理之384孔板中且在37℃/5% CO2/90%濕度下生長24小時。在化合物轉移之前不久，移除完全培養基，添加30 μl分析緩衝液(DMEM(高葡萄糖)、1×MEM NEAA、10 mM HEPES、2 mM L-麩醯胺酸、0.1%(w/v)BSA)且將10 μl化合物預稀釋液轉移至細胞中。對於2010年2月後之測試，用分析緩衝液取代完全生長培養基，其顯示類似結果(數據未展示)。用化合物處理1小時後，藉由添加20 μl補充有0.24%(w/v)BSA之溶解緩衝液溶解細胞。根據製造商之說明書，用SureFire p-Akt 1/2(Ser473)分析套組，使用5 μl細胞溶解物以12 μl之總偵測體積進行p-AKT(Ser473)之偵測。
藉由將S形劑量-反應曲線與如所述之分析讀數相對於抑制劑濃度的圖擬合得到8種濃度(通常為10、3.0、1.0、0.3、0.1、0.030、0.010及0.003 μM)(n=2)之各化合物之百分比抑制的IC50值。所有擬合均使用程式XLfit4(ID Business Solutions,Guildford,UK)進行。
開發基於細胞之分析(384孔格式)以用於測定化合物對來源於缺乏TSC1(結節性硬化症複合物1)(mTOR激酶活性之有效抑制因子)之小鼠的MEF(小鼠胚胎纖維母細胞)細胞中之細胞mTOR激酶活性之作用。由於缺乏TSC1，mTOR激酶經組成性活化，導致S6激酶1(S6K1)(其為mTOR之下游標靶之一)之Thr 389的永久性磷酸化。
使用能夠測定S6K1上之Thr389的磷酸化之SureFire套組，以Alpha-Screen格式開發、驗證並實施分析，其允許定量測定細胞溶解物中S6K1之磷酸化T389。用mTOR特異性(或mTOR路徑特異性)抑制劑處理MEF TSC1-/-細胞可以劑量依賴方式降低S6K1上磷酸化T389之
含量，從而允許計算IC50值。此等值與由允許定量比較mTOR抑制劑之效力的生物化學mTOR ATP-結合分析獲得之彼等值一致。
在37℃、5% CO2下將TSC1-/- MEF細胞(Kwiatkowski,D.J.,Zhang,H.,Bandura,J.L.,Heiberger,K.M.,Glogauer,M.,el-Hashemite,N.，及Onda,H.(2002)Hum.Mol.Genet.11,525-534)於補充有10% FBS(Invitrogen)、2 mM麩醯胺酸及1%(w/v)青黴素/鏈黴素之DMEM高葡萄糖培養基中培養。
用於測定P70S6激酶磷酸化之SureFire套組係購自Perkin Elmer(p70S6K p-T389，#TGR70S50K)且根據供應商之說明書且根據SureFire分析之通用方法進行分析。不久，將每孔5 μL細胞溶解物轉移至384孔白色proxy-plate(用於讀出發光)且與7 μL A及5 μL B混合(最終體積：12 μL)。在室溫下在黑暗中培育3小時後，用Envision讀取器(Perkin Elmer)讀取發光。使用未經處理之細胞作為對照物(高對照物)且使用經3 μM BEZ235處理之細胞作為低對照物。高對照物與低對照物所獲得之信號之間的分析窗定義為100%且化合物作用以抑制百分比表示。藉由圖解外推由劑量反應曲線計算IC50值。
使用上述分析所獲得之結果提供於下表中，其中SEM為平均標準誤差且n為數據量測次數。
*不同的各別量測得到<0.003 μM之值。
*3個值中之2個值>9.1。不可能進行SEM計算。
**兩個值皆>9.1。不可能進行SEM計算。
*第四次量測為3.9 μM，離群值
**第二個值>10。因此不可能進行SEM計算。
*第二個值>10。因此不可能進行SEM計算。
*第二個值>2.27。因此不可能進行SEM計算。
** 4個值中之3個值>2.27。因此不可能進行SEM計算。
*** 5個值中之3個值>2.27。因此不可能進行SEM計算。
****所有值均>2.27。因此不可能進行SEM計算。
如下量測脫靶效應(微管蛋白結合之證據)。
Cytospin分析描述：偵測MAPP衍生物之微管蛋白結合(脫靶)結合活性的細胞週期G2/M停滯Cytospin分析：將5×105個細胞A2058細胞接種於含有2 mL DMEM(高葡萄糖，含有1%丙酮酸鈉、1%麩醯胺酸及10% FCS)之6孔組中。18小時後，以5 μM之濃度添加測試項目(攙入1 μL 10 mM測試項目溶液)。24小時後，以胰蛋白酶處理細胞且轉移至15 mL錐形管中。接著藉由離心將細胞集結成粒，且用PBS/O(含有10% FCS)再懸浮。用CASY計數器進行細胞計數，且各樣品平衡至每毫升1×106個細胞。接著將200 μL(2×105個細胞)轉移至1.5 mL Cytospin管(Heraeus Sepatec，參考1152)中，且在4℃下以50×g離心5分鐘，其中在顯微鏡載片(Thermo-Scientific，參考：#PH040820)上調整含有Sepatech系統(Heraeus，參考#3425)之Cytospin系統。接著在室溫下固定細胞15分鐘，且根據製造商之推薦用Diff Quick®分析(Medion Diagnostics，參考：#130832)染色。當在顯微鏡下檢查載片時，由細胞中之斑點染色顯示反映G2/M停滯之凝聚DNA。針對凝聚DNA之存在目測評估染色且給出分數，其中0=未觀察到凝聚DNA(指示無脫靶活性)，1=(指示弱脫靶活性)，2=(指示中等脫靶活性)，3=觀察到大量凝聚DNA(指示強脫靶活性)。
使用此方法獲得之數據展示於下表中：
n.d.=未進行
Claims (15)
- 一種式(I)化合物，
- 如請求項1之化合物，其中，R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3；或R3=R4=H R2與R5=-(CH2)4-；或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
- 如請求項1或2之化合物，其中，R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3； 或R4=R5=H；且R2=-CH2OH，且R3=-CH3；或R2=H或-CH3，且R3=-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
- 如請求項1或2之化合物，其中，R2=-CH3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2CH2OH、-CH2OC(O)H；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
- 如請求項1或2之化合物，其具有式(IA')
- 如請求項1之化合物，其具有式(IA)：
- 如請求項6之化合物，其中R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或R4=H，且R5=-CH3或-CH2OH，或R4=R5=H或-CH3，或其醫藥學上可接受之鹽。
- 如請求項7之化合物，其中R2=-CH3或-CH2OH；R3=H；R4=-CH3、-CH2OH或-CH2CH2OH，且R5=H，或 R4=H，且R5=CH3或-CH2OH，或其醫藥學上可接受之鹽。
- 如請求項1之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係選自(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5,5-二甲基-唑啶-2-酮、外消旋3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-4,5'-聯嘧啶-6-基)-4-(羥基甲基)-4-甲基唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-4,5'-聯嘧啶-6-基)-4-(羥基甲基)-4-甲基唑啶-2-酮(未確定絕對立體化學)、(R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-4,5'-聯嘧啶-6-基)-4-(羥基甲基)-4-甲基唑啶-2-酮(未確定絕對立體化學)、(3aS,7aS)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-六氫-苯并唑-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-甲氧基甲基-唑啶-2-酮、(4S,5S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-(D8-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-(2-羥基-乙基)-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5'] 聯嘧啶-6-基]-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、甲酸(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-甲基-2-側氧基(oxo)-唑啶-4-基甲酯、(S)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基]-4-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-4-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-甲基-唑啶-2-酮、(S)-3-(2'-胺基-2-D8-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-4-甲基唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(4S,5S)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-4-甲基-唑啶-2-酮、(R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-5-羥基甲基-唑啶-2-酮、(3aR,6aR)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-四氫呋喃并[3,4-d]唑-2(3H)-酮、外消旋(3aR*,6R*,6aR*)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-6-羥基六氫-2H-環戊并(cyclopenta)[d]唑-2-酮、(3aR,6R,6aR)-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-6-羥基六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮、 (3aS,6S,6aS)-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-6-羥基六氫-2H-環戊并[d]唑-2-酮及(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-(2-羥基乙基)-4-甲基唑啶-2-酮。
- 一種化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係選自(4S,5R)-3-[2'-胺基-2-((S)-3-甲基-嗎啉-4-基)-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基]-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮、(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉-4-基-4'-三氟甲基-[4,5']聯嘧啶-6-基)-4-羥基甲基-5-甲基-唑啶-2-酮或(4S,5R)-3-(2'-胺基-2-嗎啉基-4'-(三氟甲基)-[4,5'-聯嘧啶]-6-基)-5-(2-羥基乙基)-4-甲基唑啶-2-酮。
- 一種醫藥組合物，其包含治療有效量之如請求項1至10中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑。
- 一種組合，其包含治療有效量之如請求項1至10中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種其他治療活性劑。
- 如請求項1、2及6至10中任一項之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其係用作藥劑。
- 如請求項中1、2及6至10任一項之化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療癌症。
- 一種如請求項1至10中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製造供治療癌症之藥劑。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261602954P | 2012-02-24 | 2012-02-24 | |
| US201261736707P | 2012-12-13 | 2012-12-13 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW201339155A true TW201339155A (zh) | 2013-10-01 |
Family
ID=48142031
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW102106331A TW201339155A (zh) | 2012-02-24 | 2013-02-22 | □唑啶－２－酮化合物及其用途 |
Country Status (31)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US8865894B2 (zh) |
| EP (1) | EP2817307B1 (zh) |
| JP (1) | JP6154404B2 (zh) |
| KR (1) | KR101640698B1 (zh) |
| CN (1) | CN104144926B (zh) |
| AP (1) | AP2014007835A0 (zh) |
| AR (1) | AR090121A1 (zh) |
| AU (1) | AU2013223713C1 (zh) |
| BR (1) | BR112014020672B1 (zh) |
| CA (1) | CA2865372A1 (zh) |
| CO (1) | CO7051028A2 (zh) |
| CR (1) | CR20140397A (zh) |
| DO (1) | DOP2014000194A (zh) |
| EA (1) | EA026031B1 (zh) |
| ES (1) | ES2598118T3 (zh) |
| GE (1) | GEP20156389B (zh) |
| GT (1) | GT201400178A (zh) |
| HK (1) | HK1199643A1 (zh) |
| IL (1) | IL233936A (zh) |
| MX (1) | MX353341B (zh) |
| NI (1) | NI201400089A (zh) |
| NZ (1) | NZ629198A (zh) |
| PE (1) | PE20142456A1 (zh) |
| PH (1) | PH12014501900A1 (zh) |
| PL (1) | PL2817307T3 (zh) |
| PT (1) | PT2817307T (zh) |
| SG (1) | SG11201404794XA (zh) |
| TW (1) | TW201339155A (zh) |
| UY (1) | UY34632A (zh) |
| WO (1) | WO2013124826A1 (zh) |
| ZA (1) | ZA201405446B (zh) |
Families Citing this family (33)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PE20141581A1 (es) | 2011-09-27 | 2014-11-14 | Novartis Ag | 3-pirmidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inhibidores de la idh mutante |
| UY34632A (es) | 2012-02-24 | 2013-05-31 | Novartis Ag | Compuestos de oxazolidin- 2- ona y usos de los mismos |
| US9296733B2 (en) | 2012-11-12 | 2016-03-29 | Novartis Ag | Oxazolidin-2-one-pyrimidine derivative and use thereof for the treatment of conditions, diseases and disorders dependent upon PI3 kinases |
| CA2903979A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Novartis Ag | 3-pyrimidin-4-yl-oxazolidin-2-ones as inhibitors of mutant idh |
| JOP20200094A1 (ar) | 2014-01-24 | 2017-06-16 | Dana Farber Cancer Inst Inc | جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها |
| JOP20200096A1 (ar) | 2014-01-31 | 2017-06-16 | Children’S Medical Center Corp | جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها |
| CR20160425A (es) | 2014-03-14 | 2017-05-26 | Novartis Ag | Moléculas de anticuerpos que se unen a lag-3 y usos de las mismas |
| MY179292A (en) | 2014-03-24 | 2020-11-03 | Novartis Ag | Monobactam organic compounds for the treatment of bacterial infections |
| TW201609108A (zh) | 2014-07-25 | 2016-03-16 | 諾華公司 | 醫藥劑型 |
| MA41044A (fr) | 2014-10-08 | 2017-08-15 | Novartis Ag | Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer |
| ES2952717T3 (es) | 2014-10-14 | 2023-11-03 | Novartis Ag | Moléculas de anticuerpos contra PD-L1 y usos de las mismas |
| WO2016064957A1 (en) | 2014-10-22 | 2016-04-28 | Bristol-Myers Squibb Company | Bicyclic heteroaryl amine compounds as pi3k inhibitors |
| EP3209665B1 (en) | 2014-10-22 | 2019-08-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted pyrrolotriazine amine compounds as pi3k inhibitors |
| WO2016100882A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Novartis Ag | Combination therapies |
| EP3268035A4 (en) | 2015-03-10 | 2018-10-31 | Aduro Biotech, Inc. | Compositions and methods for activating "stimulator of interferon gene" -dependent signalling |
| WO2017001658A1 (en) * | 2015-07-02 | 2017-01-05 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Benzoxazepin oxazolidinone compounds and methods of use |
| PE20181021A1 (es) | 2015-07-02 | 2018-06-27 | Hoffmann La Roche | Compuestos de benzoxacepina oxazolidinona y metodos de uso |
| DK3317301T3 (da) | 2015-07-29 | 2021-06-28 | Immutep Sas | Kombinationsterapier omfattende antistofmolekyler mod lag-3 |
| WO2017019897A1 (en) | 2015-07-29 | 2017-02-02 | Novartis Ag | Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3 |
| CN108025051B (zh) | 2015-07-29 | 2021-12-24 | 诺华股份有限公司 | 包含抗pd-1抗体分子的联合疗法 |
| CA3004117A1 (en) | 2015-11-03 | 2017-05-11 | Janssen Biotech, Inc. | Antibodies specifically binding pd-1 and their uses |
| WO2017106656A1 (en) | 2015-12-17 | 2017-06-22 | Novartis Ag | Antibody molecules to pd-1 and uses thereof |
| WO2018009466A1 (en) | 2016-07-05 | 2018-01-11 | Aduro Biotech, Inc. | Locked nucleic acid cyclic dinucleotide compounds and uses thereof |
| KR20190077040A (ko) * | 2016-11-02 | 2019-07-02 | 쿠리스 인코퍼레이션 | 아연 결합 모이어티를 갖는 포스포이노시티드 3-키나아제 억제제를 이용하는 조합 요법 |
| UY37695A (es) | 2017-04-28 | 2018-11-30 | Novartis Ag | Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo |
| US20200172628A1 (en) | 2017-06-22 | 2020-06-04 | Novartis Ag | Antibody molecules to cd73 and uses thereof |
| US11312783B2 (en) | 2017-06-22 | 2022-04-26 | Novartis Ag | Antibody molecules to CD73 and uses thereof |
| IL275522B2 (en) * | 2017-12-22 | 2024-02-01 | Petra Pharma Corp | Amine derivatives of ARYL–BIPYRIDINE as phosphatidylinositol phosphate kinase inhibitors |
| AR126019A1 (es) | 2018-05-30 | 2023-09-06 | Novartis Ag | Anticuerpos frente a entpd2, terapias de combinación y métodos de uso de los anticuerpos y las terapias de combinación |
| WO2019232244A2 (en) | 2018-05-31 | 2019-12-05 | Novartis Ag | Antibody molecules to cd73 and uses thereof |
| CN109134558A (zh) * | 2018-09-21 | 2019-01-04 | 常州方圆制药有限公司 | 一种提高1-N-乙基庆大霉素Cla收率的合成方法 |
| CN109970764B (zh) * | 2019-03-26 | 2021-11-09 | 上海吉奉生物科技有限公司 | 一种（S）-1,1,5,5-四甲基二氢恶唑并[3,4-c]恶唑-3-酮的合成方法 |
| WO2021053559A1 (en) | 2019-09-18 | 2021-03-25 | Novartis Ag | Entpd2 antibodies, combination therapies, and methods of using the antibodies and combination therapies |
Family Cites Families (124)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB581334A (en) | 1943-09-29 | 1946-10-09 | Francis Henry Swinden Curd | New pyrimidine compounds |
| JPS4921148Y1 (zh) | 1970-02-07 | 1974-06-06 | ||
| JPS4921149Y1 (zh) | 1970-06-27 | 1974-06-06 | ||
| JPS4921148B1 (zh) | 1970-12-28 | 1974-05-30 | ||
| JPS4921149B1 (zh) | 1970-12-28 | 1974-05-30 | ||
| DE2341925A1 (de) | 1973-08-20 | 1975-03-06 | Thomae Gmbh Dr K | Neue pyrimidinderivate und verfahren zu ihrer herstellung |
| AT340933B (de) | 1973-08-20 | 1978-01-10 | Thomae Gmbh Dr K | Verfahren zur herstellung neuer pyrimidinderivate und ihrer saureadditionssalze |
| US4261989A (en) | 1979-02-19 | 1981-04-14 | Kaken Chemical Co. Ltd. | Geldanamycin derivatives and antitumor drug |
| US4994386A (en) | 1987-07-13 | 1991-02-19 | Pharmacia Diagnostics, Inc. | Production of HBLV virus in the HSB-2 cell line |
| US4929726A (en) | 1988-02-09 | 1990-05-29 | Georgia State University Foundation, Inc. | Novel diazines and their method of preparation |
| EP0330263A1 (en) | 1988-02-25 | 1989-08-30 | Merck & Co. Inc. | Piperazinylalkylpyrimidines as hypoglycemic agents |
| GB9012311D0 (en) | 1990-06-01 | 1990-07-18 | Wellcome Found | Pharmacologically active cns compounds |
| EP0489925B1 (en) | 1990-07-03 | 1996-06-12 | Mitsui Petrochemical Industries, Ltd. | Pyrimidine compound and pharmaceutically acceptable salt thereof |
| EP0767170B1 (en) | 1995-04-13 | 2002-10-23 | Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel 4,6-diarylpyrimidine derivatives and salts thereof |
| JP3734907B2 (ja) | 1996-12-19 | 2006-01-11 | 富士写真フイルム株式会社 | 現像処理方法 |
| CA2297326C (en) | 1997-07-24 | 2007-03-20 | Zenyaku Kogyo Kabushiki Kaisha | Heterocyclic compound and antitumor agent containing the same as active component |
| JPH11158073A (ja) | 1997-09-26 | 1999-06-15 | Takeda Chem Ind Ltd | アデノシンａ３拮抗剤 |
| US6440965B1 (en) | 1997-10-15 | 2002-08-27 | Krenitsky Pharmaceuticals, Inc. | Substituted pyrimidine derivatives, their preparation and their use in the treatment of neurodegenerative or neurological disorders of the central nervous system |
| US6150362A (en) | 1997-12-12 | 2000-11-21 | Henkin; Jack | Triazine angiogenesis inhibitors |
| PT930302E (pt) | 1998-01-16 | 2003-07-31 | Hoffmann La Roche | Derivados de benzo-sulfona |
| ATE274510T1 (de) | 1998-06-19 | 2004-09-15 | Chiron Corp | Glycogen synthase kinase 3 inhibitoren |
| US7045519B2 (en) | 1998-06-19 | 2006-05-16 | Chiron Corporation | Inhibitors of glycogen synthase kinase 3 |
| AU768201B2 (en) | 1999-01-22 | 2003-12-04 | Amgen, Inc. | Kinase inhibitors |
| US6495558B1 (en) | 1999-01-22 | 2002-12-17 | Amgen Inc. | Kinase inhibitors |
| AU5889100A (en) | 1999-06-30 | 2001-01-31 | Merck & Co., Inc. | Src kinase inhibitor compounds |
| US6329380B1 (en) | 1999-06-30 | 2001-12-11 | Merck & Co., Inc. | SRC kinase inhibitor compounds |
| ATE253915T1 (de) | 1999-06-30 | 2003-11-15 | Merck & Co Inc | Src-kinase hemmende verbindungen |
| JP2003505384A (ja) | 1999-07-15 | 2003-02-12 | ファーマコピーア，インコーポレーティッド | ブラジキニンｂ１受容体アンタゴニスト |
| JP2001089452A (ja) | 1999-09-22 | 2001-04-03 | Sankyo Co Ltd | ピリミジン誘導体 |
| US20030004174A9 (en) | 2000-02-17 | 2003-01-02 | Armistead David M. | Kinase inhibitors |
| HUP0300382A3 (en) | 2000-03-29 | 2006-11-28 | Cyclacel Ltd | 2-substituted 4-heteroaryl-pyrimidines and their use in the treatmetn of proliferative disorders and pharmaceutical compositions containing the compounds |
| WO2001083456A1 (fr) | 2000-04-27 | 2001-11-08 | Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. | Derives d'heteroaryle condenses |
| NZ522217A (en) | 2000-04-28 | 2004-04-30 | Tanabe Seiyaku Co | Cyclic compounds |
| WO2002000647A1 (en) | 2000-06-23 | 2002-01-03 | Bristol-Myers Squibb Pharma Company | Heteroaryl-phenyl substituted factor xa inhibitors |
| KR100816769B1 (ko) | 2000-09-06 | 2008-03-26 | 노바티스 백신즈 앤드 다이아그노스틱스 인코포레이티드 | 글리코겐 합성효소 키나아제 3의 억제제 |
| EP1317448B2 (en) | 2000-09-15 | 2011-05-04 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors |
| SE0004053D0 (sv) | 2000-11-06 | 2000-11-06 | Astrazeneca Ab | N-type calcium channel antagonists for the treatment of pain |
| DE60120219T2 (de) | 2000-12-21 | 2007-04-12 | Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge | Pyrazolverbindungen als protein-kinase-inhibitoren |
| WO2002062766A2 (en) | 2001-02-07 | 2002-08-15 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Melanocortin-4 receptor binding compounds and methods of use thereof |
| WO2002064096A2 (en) | 2001-02-16 | 2002-08-22 | Tularik Inc. | Methods of using pyrimidine-based antiviral agents |
| WO2002096876A1 (en) | 2001-05-25 | 2002-12-05 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Carbamate and oxamide compounds as inhibitors of cytokine production |
| JP2005500294A (ja) | 2001-06-19 | 2005-01-06 | ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニー | ホスホジエステラーゼ７に対するピリミジン阻害剤 |
| US6603000B2 (en) | 2001-07-11 | 2003-08-05 | Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. | Synthesis for heteroarylamine compounds |
| WO2003030909A1 (en) | 2001-09-25 | 2003-04-17 | Bayer Pharmaceuticals Corporation | 2- and 4-aminopyrimidines n-substtituded by a bicyclic ring for use as kinase inhibitors in the treatment of cancer |
| ATE468336T1 (de) | 2002-03-15 | 2010-06-15 | Vertex Pharma | Azolylaminoazine als proteinkinasehemmer |
| AU2003225800A1 (en) | 2002-03-15 | 2003-09-29 | Hayley Binch | Azolylaminoazine as inhibitors of protein kinases |
| US7091343B2 (en) | 2002-03-15 | 2006-08-15 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions useful as inhibitors of protein kinases |
| EP1485376B1 (en) | 2002-03-15 | 2007-06-27 | Vertex Pharmaceuticals Incorporated | Compositions useful as inhibitors of protein kinases |
| US20040082627A1 (en) | 2002-06-21 | 2004-04-29 | Darrow James W. | Certain aromatic monocycles as kinase modulators |
| DE10228103A1 (de) | 2002-06-24 | 2004-01-15 | Bayer Cropscience Ag | Fungizide Wirkstoffkombinationen |
| AU2003275242B2 (en) | 2002-09-27 | 2010-03-04 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted pyrimidines |
| CA2501685A1 (en) | 2002-10-08 | 2004-04-22 | Massachusetts Institute Of Technology | Compounds for modulation of cholesterol transport |
| US7223870B2 (en) | 2002-11-01 | 2007-05-29 | Pfizer Inc. | Methods for preparing N-arylated oxazolidinones via a copper catalyzed cross coupling reaction |
| ATE527250T1 (de) | 2002-11-21 | 2011-10-15 | Novartis Ag | 2,4,6-trisubstituierten pyrimidinen als phosphotidylinositol (pi) 3-kinase inhibitoren und deren verwendung zur behandlung von krebs |
| US20060293339A1 (en) | 2003-03-24 | 2006-12-28 | Chakravarty Prasun K | Biaryl substituted 6-membered heterocycles as sodium channel blockers |
| US20050014753A1 (en) | 2003-04-04 | 2005-01-20 | Irm Llc | Novel compounds and compositions as protein kinase inhibitors |
| AU2004230928B2 (en) | 2003-04-09 | 2010-12-02 | Exelixis, Inc. | Tie-2 modulators and methods of use |
| WO2005002514A2 (en) | 2003-06-13 | 2005-01-13 | Echelon Biosciences Incorporated | Compounds having inhibitibe activity of phosphatidylinositol 3-kinase and methods of use thereof |
| CA2531490A1 (en) | 2003-07-15 | 2005-02-03 | Neurogen Corporation | Substituted pyrimidin-4-ylamina analogues as vanilloid receptor ligands |
| EP1644358A2 (en) | 2003-07-16 | 2006-04-12 | Neurogen Corporation | Biaryl piperazinyl-pyridine analogues |
| US7399865B2 (en) | 2003-09-15 | 2008-07-15 | Wyeth | Protein tyrosine kinase enzyme inhibitors |
| PE20050952A1 (es) * | 2003-09-24 | 2005-12-19 | Novartis Ag | Derivados de isoquinolina como inhibidores de b-raf |
| EP1742634B1 (en) | 2004-04-13 | 2010-10-27 | ICAgen, Inc. | Polycyclic pyrimidines as potassium ion channel modulators |
| GB0415364D0 (en) | 2004-07-09 | 2004-08-11 | Astrazeneca Ab | Pyrimidine derivatives |
| GB0415365D0 (en) * | 2004-07-09 | 2004-08-11 | Astrazeneca Ab | Pyrimidine derivatives |
| MY145822A (en) | 2004-08-13 | 2012-04-30 | Neurogen Corp | Substituted biaryl piperazinyl-pyridine analogues |
| EP1827434B1 (en) | 2004-11-30 | 2014-01-15 | Amgen Inc. | Quinolines and quinazoline analogs and their use as medicaments for treating cancer |
| JP2008523152A (ja) | 2004-12-13 | 2008-07-03 | ニューロジェン・コーポレーション | ピペラジニル−ピリジン類縁体 |
| EP1824839A2 (en) | 2004-12-13 | 2007-08-29 | Neurogen Corporation | Substituted biaryl analogues |
| CN101184734B (zh) | 2004-12-28 | 2013-05-29 | 金克斯医药品有限公司 | 治疗细胞增殖紊乱的化合物和方法 |
| WO2006078992A2 (en) | 2005-01-19 | 2006-07-27 | Neurogen Corporation | Heteroaryl substituted piperazinyl-pyridine analogues |
| AU2006217742A1 (en) | 2005-02-25 | 2006-08-31 | Kudos Pharmaceuticals Limited | Hydrazinomethyl, HYDR zonomethyl and 5-membered heterocylic compounds which act as MTOR inhibitors and their use as anti cancer agents |
| AU2006236387A1 (en) | 2005-04-18 | 2006-10-26 | Neurogen Corporation | Subtituted heteroaryl CB1 antagonists |
| KR101280096B1 (ko) | 2005-06-29 | 2013-06-28 | 컴퓨메딕스 리미티드 | 전도성 브리지를 포함하는 센서 어셈블리 |
| GB2431156A (en) | 2005-10-11 | 2007-04-18 | Piramed Ltd | 1-cyclyl-3-substituted- -benzenes and -azines as inhibitors of phosphatidylinositol 3-kinase |
| KR20080083188A (ko) | 2006-01-11 | 2008-09-16 | 아스트라제네카 아베 | 모르폴리노 피리미딘 유도체 및 요법에서의 그 유도체의용도 |
| JO2660B1 (en) * | 2006-01-20 | 2012-06-17 | نوفارتيس ايه جي | Pi-3 inhibitors and methods of use |
| EP2012794B1 (en) * | 2006-04-13 | 2014-09-17 | The Trustees of Columbia University in the City of New York | Compositions and intraluminal devices for inhibiting vascular stenosis |
| TW200833342A (en) | 2006-12-28 | 2008-08-16 | Basf Ag | 2-substituted pyrimidines I in therapy |
| ES2381895T3 (es) | 2007-02-06 | 2012-06-01 | Novartis Ag | Inhibidores de PI 3-quinasa y métodos para su uso |
| US7957951B2 (en) | 2007-03-16 | 2011-06-07 | Robert Bosch Gmbh | Address translation system for use in a simulation environment |
| WO2009007748A2 (en) | 2007-07-09 | 2009-01-15 | Astrazeneca Ab | Trisubstituted pyrimidine derivatives for the treatment of proliferative diseases |
| WO2009066084A1 (en) * | 2007-11-21 | 2009-05-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | 2 -morpholinopyrimidines and their use as pi3 kinase inhibitors |
| WO2009109605A1 (en) | 2008-03-05 | 2009-09-11 | Novartis Ag | Use of pyrimidine derivatives for the treatment of egfr dependent diseases or diseases that have acquired resistance to agents that target egfr family members |
| AU2009228797B2 (en) | 2008-03-26 | 2012-07-19 | Novartis Ag | 5imidazoquinolines and pyrimidine derivatives as potent modulators of VEGF-driven angiogenic processes |
| JP2011515462A (ja) | 2008-03-27 | 2011-05-19 | アウククランド ウニセルビセス リミテッド | 置換されたピリミジン、及びトリアジン、並びに癌療法におけるこれらの使用 |
| WO2009125870A1 (en) | 2008-04-09 | 2009-10-15 | Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation | Pyrimidine, pyridine and triazine derivatives as maxi-k channel openers. |
| GB0815369D0 (en) | 2008-08-22 | 2008-10-01 | Summit Corp Plc | Compounds for treatment of duchenne muscular dystrophy |
| MX2011004585A (es) | 2008-10-31 | 2011-06-01 | Novartis Ag | Combinacion de un inhibidor de fosfatidilinositol-3-cinasa (p13k) y un inhibidor de mtor. |
| GB2465405A (en) | 2008-11-10 | 2010-05-19 | Univ Basel | Triazine, pyrimidine and pyridine analogues and their use in therapy |
| WO2010068863A2 (en) | 2008-12-12 | 2010-06-17 | Cystic Fibrosis Foundation Therapeutics, Inc. | Pyrimidine compounds and methods of making and using same |
| JP5747440B2 (ja) | 2009-02-06 | 2015-07-15 | 住友化学株式会社 | ヒドラジド化合物及びその有害生物防除用途 |
| SI2394999T1 (sl) | 2009-02-06 | 2014-05-30 | Nippon Shinyaku Co., Ltd. | Derivati aminopirazina in zdravilo |
| ES2740424T3 (es) | 2009-03-13 | 2020-02-05 | Agios Pharmaceuticals Inc | Métodos y composiciones para trastornos relacionados con la proliferación celular |
| WO2010120994A2 (en) | 2009-04-17 | 2010-10-21 | Wyeth Llc | Ureidoaryl-and carbamoylaryl-morpholino- pyrimidine compounds, their use as mtor kinase and pi3 kinase inhibitors, and their synthesis |
| DK2432767T3 (da) | 2009-05-19 | 2013-09-30 | Dow Agrosciences Llc | Forbindelser og fremgangsmåder til at kontrollere svampe |
| EP2532659A1 (en) | 2009-07-07 | 2012-12-12 | Pathway Therapeutics, Inc. | Pyrimidinyl and 1,3,5-triazinyl benzimidazoles and their use in cancer therapy |
| US8609676B2 (en) | 2009-08-04 | 2013-12-17 | Merck Sharp & Dohme, Corp. | 4, 5, 6-trisubstituted pyrimidine derivatives as factor IXa inhibitors |
| AR077999A1 (es) | 2009-09-02 | 2011-10-05 | Vifor Int Ag | Antagonistas de pirimidin y triazin-hepcidina |
| AU2010292198A1 (en) | 2009-09-09 | 2012-04-05 | Celgene Avilomics Research, Inc. | PI3 kinase inhibitors and uses thereof |
| EP2509600B1 (en) | 2009-12-09 | 2017-08-02 | Agios Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutically active compounds for use in the treatment of cancer characterized as having an idh mutation |
| GB201004200D0 (en) | 2010-03-15 | 2010-04-28 | Univ Basel | Spirocyclic compounds and their use as therapeutic agents and diagnostic probes |
| AR081331A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-08-08 | Cytokinetics Inc | Amino- pirimidinas composiciones de las mismas y metodos para el uso de los mismos |
| WO2011133920A1 (en) | 2010-04-23 | 2011-10-27 | Cytokinetics, Inc. | Certain amino-pyridines and amino-triazines, compositions thereof, and methods for their use |
| AR081626A1 (es) | 2010-04-23 | 2012-10-10 | Cytokinetics Inc | Compuestos amino-piridazinicos, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos para tratar trastornos musculares cardiacos y esqueleticos |
| WO2011143160A2 (en) | 2010-05-10 | 2011-11-17 | The Johns Hopkins University | Metabolic inhibitor against tumors having an idh mutation |
| JP6081354B2 (ja) | 2010-07-16 | 2017-02-15 | アジオス ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド | 治療活性組成物およびそれらの使用方法 |
| CN104945373A (zh) | 2010-10-01 | 2015-09-30 | 诺华有限公司 | 制造嘧啶衍生物的方法 |
| NZ718514A (en) | 2010-10-18 | 2017-10-27 | Cerenis Therapeutics Holding Sa | Compounds, compositions and methods useful for cholesterol mobilisation |
| GB201106829D0 (en) | 2011-04-21 | 2011-06-01 | Proximagen Ltd | Heterocyclic compounds |
| RU2013141559A (ru) | 2011-02-11 | 2015-03-20 | Дана-Фарбер Кэнсер Инститьют, Инк. | Способ ингибирования клеток опухоли гамартомы |
| CN102827073A (zh) | 2011-06-17 | 2012-12-19 | 安吉奥斯医药品有限公司 | 治疗活性组合物和它们的使用方法 |
| CN103764130A (zh) | 2011-09-01 | 2014-04-30 | 诺华股份有限公司 | 用于治疗骨癌或者预防原发性癌细胞转移性播散入骨中的pi3k抑制剂 |
| PE20141581A1 (es) | 2011-09-27 | 2014-11-14 | Novartis Ag | 3-pirmidin-4-il-oxazolidin-2-onas como inhibidores de la idh mutante |
| US9365562B2 (en) | 2011-10-06 | 2016-06-14 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 1,3 substituted azetidine PDE10 inhibitors |
| UY34632A (es) | 2012-02-24 | 2013-05-31 | Novartis Ag | Compuestos de oxazolidin- 2- ona y usos de los mismos |
| US10213432B2 (en) | 2012-05-16 | 2019-02-26 | Novartis Ag | Dosage regimen for a PI-3 kinase inhibitor |
| JP2015518888A (ja) | 2012-06-06 | 2015-07-06 | ノバルティス アーゲー | 腫瘍疾患を治療するための１７−アルファ−ヒドロキシラーゼ（ｃ１７，２０−リアーゼ）インヒビターと特定のｐｉ−３ｋインヒビターとの組み合わせ |
| WO2014028566A1 (en) | 2012-08-16 | 2014-02-20 | Novartis Ag | Combination of pi3k inhibitor and c-met inhibitor |
| BR112015007243B1 (pt) | 2012-10-23 | 2022-02-08 | Novartis Ag | Processo aperfeiçoado para fabricação de 5-(2,6-di-4-morfolinil-4-pirimidinil)-4- trifluorometilpiridin-2-amina |
| US9296733B2 (en) | 2012-11-12 | 2016-03-29 | Novartis Ag | Oxazolidin-2-one-pyrimidine derivative and use thereof for the treatment of conditions, diseases and disorders dependent upon PI3 kinases |
| CA2903979A1 (en) | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Novartis Ag | 3-pyrimidin-4-yl-oxazolidin-2-ones as inhibitors of mutant idh |
| CN103483345B (zh) | 2013-09-25 | 2016-07-06 | 中山大学 | Pi3k激酶抑制剂、包含其的药物组合物及其应用 |
| CN103694218B (zh) | 2013-12-05 | 2016-04-27 | 中山大学 | 嘧啶化合物、pi3k抑制剂、包含pi3k抑制剂的药物组合物及应用 |
-
2013
- 2013-02-21 UY UY0001034632A patent/UY34632A/es not_active Application Discontinuation
- 2013-02-22 PE PE2014001291A patent/PE20142456A1/es not_active Application Discontinuation
- 2013-02-22 NZ NZ629198A patent/NZ629198A/en not_active IP Right Cessation
- 2013-02-22 GE GEAP201313557A patent/GEP20156389B/en unknown
- 2013-02-22 TW TW102106331A patent/TW201339155A/zh unknown
- 2013-02-22 AP AP2014007835A patent/AP2014007835A0/xx unknown
- 2013-02-22 PT PT137173175T patent/PT2817307T/pt unknown
- 2013-02-22 EA EA201491579A patent/EA026031B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2013-02-22 CN CN201380010698.9A patent/CN104144926B/zh active Active
- 2013-02-22 ES ES13717317.5T patent/ES2598118T3/es active Active
- 2013-02-22 KR KR1020147023243A patent/KR101640698B1/ko active IP Right Grant
- 2013-02-22 CA CA2865372A patent/CA2865372A1/en not_active Abandoned
- 2013-02-22 US US13/773,947 patent/US8865894B2/en active Active
- 2013-02-22 AU AU2013223713A patent/AU2013223713C1/en active Active
- 2013-02-22 PL PL13717317T patent/PL2817307T3/pl unknown
- 2013-02-22 BR BR112014020672-4A patent/BR112014020672B1/pt active IP Right Grant
- 2013-02-22 WO PCT/IB2013/051443 patent/WO2013124826A1/en active Application Filing
- 2013-02-22 AR ARP130100536A patent/AR090121A1/es unknown
- 2013-02-22 MX MX2014010141A patent/MX353341B/es active IP Right Grant
- 2013-02-22 JP JP2014558256A patent/JP6154404B2/ja active Active
- 2013-02-22 SG SG11201404794XA patent/SG11201404794XA/en unknown
- 2013-02-22 EP EP13717317.5A patent/EP2817307B1/en active Active
-
2014
- 2014-07-23 ZA ZA2014/05446A patent/ZA201405446B/en unknown
- 2014-08-04 IL IL233936A patent/IL233936A/en not_active IP Right Cessation
- 2014-08-12 NI NI201400089A patent/NI201400089A/es unknown
- 2014-08-15 CO CO14179492A patent/CO7051028A2/es unknown
- 2014-08-22 GT GT201400178A patent/GT201400178A/es unknown
- 2014-08-22 DO DO2014000194A patent/DOP2014000194A/es unknown
- 2014-08-22 PH PH12014501900A patent/PH12014501900A1/en unknown
- 2014-08-22 CR CR20140397A patent/CR20140397A/es unknown
- 2014-09-05 US US14/478,523 patent/US9458177B2/en active Active
-
2015
- 2015-01-02 HK HK15100012.7A patent/HK1199643A1/zh unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP6154404B2 (ja) | オキサゾリジン−２−オン化合物およびｐｉ３ｋ阻害剤としてのその使用 | |
| ES2611885T3 (es) | Derivados heterocíclicos novedosos | |
| TW202110446A (zh) | 用於治療ｎａｓｈ／ｎａｆｌｄ及相關疾病之組合 | |
| EP2771342B1 (en) | Purine derivatives and their use in the treatment of disease | |
| JP6262245B2 (ja) | オキサゾリジン−２−オンピリミジン誘導体 | |
| WO2022265993A1 (en) | Urea derivatives which can be used to treat cancer | |
| JP6970684B2 (ja) | クマリン骨格を有するスルホンアミド誘導体 | |
| WO2022072632A1 (en) | Bicyclic compounds for use in the treatment cancer | |
| NZ624366B2 (en) | Novel purine derivatives and their use in the treatment of disease |