TW200831131A - Pharmaceutical compositions with enhanced stability - Google Patents

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200831131 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 有 本發明提供一種穩定之生物 μ〜$ 生物可分解性聚合組成物 效作為肽劑之控制釋放傳遞系統。 【先前技術】 近年來發現大量且多種 禋的肽劑，如肽、募肽、多肽、 及蛋白兔，並被關注作為可能 〃 的桌劑。然而多種肽劑並不 穩定’在生體内容易被酵素 μ ^入 并|水解或分解，具有非常短循環 的生命週期。因此，多數 、 桌知彳以〉主射投藥，一般為每 多次。 然而注射投藥疼痛、成本 a 非吊呵且不便。通常患者非 吊難以順從。多種肽劑，特 饤乃J疋貝爾蒙，需要一種以控制 速率連續性長時間傳遞的荦 桌J 因此需要控制釋放傳遞系 統。此系統可由肽劑組合座从叮八々 …、 生物可刀解性與生物可相容性的 聚合物基質而得。在一藉太 矛方法中，該聚合物可溶於有機溶 劑，然後與該肽劑混合， 猎私除该有機溶劑，將該肽劑製 成微膠囊、微顆粒、或可指 " 入ir、。该肽劑包裝於該聚合物 基質中。使用生物可分舷批取人l * y 刀解性聚合物為微粒及固體條植入物 开> 式的多種產品已經成功發 士 展出來如 Lupron， Zoladex，

Triptorelin專。雖這歧吝口月#七 二產Λ、>有效，但其具有缺點及 限制’如微粒或手術插 八固體植入物用的大量懸浮液。這

些產品對患者並不舒服。 4 I 服而且，生產無菌的再生性產品之 製造過程繁複，造成高制、生 阿衣Xe成本。因此殷切期望溶液製造 ΙΙββ-8751-PF/Ahddub 5 9 200831131 及使用之組成物。 另一方法令，將生物可分解性聚合物與肽劑溶於生物 相容性有機溶劑，形成液體組成物。將該液體組成物注入 體内時，該溶劑消散於週遭水溶性環境，該聚合物形成固 體或膠體，使生物活性劑長期釋放。以下參考資料美國專 利 6,565,874 ’· 6,528, 080 ; RE37，950 ; 6,461，631 ; 6,395, 293 ; 6,355, 657 ; 6,261， 583 ; 6, 143,314 ; 5,990,1 94 ; 5,945,1 1 5 ； 5,792,469 ； 5,780,044 ； 5,759,563 ; 5,744,153 ； 5,739,1 76 ; 5,736,1 52 ； 5^33,950 ; 5,702,71 6 ； 5,681,873 ； 5,599,552 ； 5,487,897 , 5,340,849 ； 5,324,51 9 ; 5,278,202 ； 5’ 278’ 201，及4, 938, 763被認為是此領域的代表，在此作 為參考、縱使有少數成#，上述方法並非完全滿足多數月太 劑，使其有效傳遞。 該項技藝中熟知，含有鹼官能基的生物活性劑，與生 春物可分解性聚合物作帛，可催化(或促進）該聚合物分解， 與該聚合物及/或其分解產物形成共軛。該鹼生物活性劑與 聚合物載體間的交互作用/作用可能發生在：n當該鹼生物 =性劑與該聚合物載體調配，如微膠囊化、注射製模、擠 壓製模，在有機溶劑中混有聚合物溶液時等等；2)儲存時； 及3)生體内生物分解過程及生物活性劑釋放時。 已知肽劑與生物可分解性聚合物的崩解及反應，一般 在溶液中比在乾、固態環境下更快發生。含鹼官能基如胺 的生物活欧劑與聚合物在使用溶劑蒸發/萃取方法的微顆 H66-8751-PF;Ahddub 6 200831131 , 粒形成過程中的交互作用/反應已被揭示，其中該生物活性 劑與聚合物溶解/分散於非極性有機溶劑中加抓見 snd Flanagan DR. f J Control Release. 2000 Nov 3; 69(2): 267]。形成明顯量的醯胺部分。其清楚顯示一般在傳遞 系統所使用生物可分解性聚合物製造用的溶劑，可允許生 物活性劑與聚合物間的快速反應。另外亦有報導極性親質 子性有機溶劑中有機胺加速聚合物的崩解

Flana^an DR， Linhardt RJ. Pharm Res. 1994 • Jul; 11 ⑺:i〇3〇—4' Ό 由於控制釋放傳遞系統一般經過在有機溶劑中溶解/ 分散狀劑於生物可分解性聚合物溶液中的步驟而製造，在 此v驟的組合中所有單位的穩定性表現出非常顯著的調配 挑戰。一般用於克服肽劑與生物可分解性聚合物在溶液或 w浮液中的製造與儲存穩定性的方法之一，是將肽劑與該 聚合物溶液存於兩個不同容器中，在使用前混合。此方法 • 係假設該有機溶劑在肽劑與該聚合物溶液混合後，可與聚 合基質經過擴散、萃取或蒸發快速分離。如美國專利案 6’ 565’ 874與6, 773, 714所揭示，治療前列腺癌的商業產 口口 Eligard®相關的柳菩林（leupr〇1 id幻乙酸鹽的聚合傳遞 配方，其中為了維持該配方的穩定性，此產品以個別注射 劑提供’在使用前才混合注射劑中的内含物。然而，因為 該聚合物配方的黏稠特性，最後的使用者常常難以混合兩 個別注射劑的内含物。最後使用者準備的配方可能會明顯 地不同，亦可能發生污染’可能明顯地影響治療品質。而 1166-8751»PF；Ahddub 7 200831131 且這個方法並無法避免肽難聚合物在混合與投^ 互作用。如 US20060034923 A1 ^ 又 J | 田體抑素胜肽 tide)乙酸鹽在贈中與聚乳酸_甘醇酸共聚物溶 液結合時，超過40%體抑素胜肽(〇c计e〇tide)在5小時内 乙醯化。該肽的修飾作用可導致免疫原性顯著的活性喪失 或改變。同一時間内’該聚合物的分子量也會顯著地降低。 该肽與聚合物的快速崩解將會改變肽的釋放㈣，影響产 療結果。因此’製造過程與時間的精密控制是關鍵:、： 將明顯增加最後使用者的困難。此外，可注射聚合組成物 的植入物在生體内形成並非即時的。一般而言，此溶劑消 散過程根據使用的溶劑可發生在數小時到數天。在這段時 間内’有機溶劑的存在亦可促進肽劑與該聚合物的交= 用/反應。因此需要發展可避免該肽劑與該聚合物在有機溶 液中的交互作用/反應或使其達到最小的藥學組成物。更進 :步需要發展在已可使用(ready —t"se)的產品結構上穩 定滿意的儲存半生期之藥學組成物。 【發明内容】 已發現含有與強酸（如鹽酸）形成鹽的肽劑之可注射的 生物可分解性聚合組成物，較與弱酸形成鹽的聚合組成物 展現非常高度的穩定性。該肽劑益鹽可經過任何肽劑鹼基 與強酸中和而形成。當與強酸形成的肽劑益鹽調配為可： 射的生物可分解性聚合組成物時，可避免該肽劑與該聚合 物的父互作用/反應或使其達到最小。使用由強酸形成的肽 8 U66-8751-PF；Ahddub 200831131 劑益鹽允許製成穩定的可注射組成物，以已可使用結構 —t〇ise)先填充於單_注射器中而具有滿意的儲存 t疋丨生。本發明之以強酸形成肽劑鹽的使用，以促進該可 注射聚合組成物的穩定性_點，未被先前技術所考慮。/

一 口此本發明提供一種穩定的可注射生物可分解性聚 口成物用以形成肽劑的有經濟效率、實用及有效控制 釋放傳遞系統。本發明亦提供其製造與使用方法。根據本 鲞明’此樂劑傳遞系統容易製造及方便傳遞於個體，如哺 賴或人。該組成物在所欲的延長時間上傳遞肽劑治療 里較L在數星期至一年。此組成物為生物相容性與生物 可分解性，在傳遞肽劑劑量後無害消失。 本發明之組成物包括a)一種與強酸形成之狀劑之益 鹽，避免該肽劑與該聚合物在有機溶液中交互作用/作用或 使作用減至最小；b)生物可分解性聚合物；藥學可接受 有機溶劑。本發明之藥學組成物可選擇性地含有賦形劑以 達到肽劑的理想傳遞。該藥學組成物可能為黏稠或非黏稠 液體、膠、或如液體流動的半固冑，所以可使用注射器注 射。該藥學組成物可先填充於單—注射器巾，形成已可使 用結構（ready-to use)的產品。 本發明之肽劑包含至少一 驗基。肽劑可以是可提供 動物或人生物上、生理上式、;二處、， 上次，口療效益的任何肽、寡肽、多 肽、或蛋白質。該肽劑可以是任何 一 、 Ή隹文獻或其技術上所揭 示之一或多種的已知生物活性狀、寘 养狀、多狀、或蛋白質。 該肽劑亦可以是刺激或抑制動物或 奶或人體内所欲生物活性或 1166-8751~PF;Ahddub 9 200831131 生理活性’包括刺激免疫原性或免疫反應，但無特別限定。 本發明之一具體實施態樣，該肽劑具有非初級胺的氮 (如LHRH激動劑，如路普羅瑞林（ieupr〇rei in)、格賽瑞 林（goserelin)，LHRH拮抗劑，如赛卓瑞里克希 (cetrorelix)、因弗費泰德（enfuvirtide)、胸腺素 α 1、

阿巴瑞里克希（abarel ix)等）。本發明之另一具體實施態 樣，該肽劑具有氮端初級胺或側鏈初級胺基，共價修飾親 水性及/或親脂性部分，此部份可由pEG化、乙醯化等生 成。或更進一步，該肽劑的氮端初級胺與側鏈初級胺基可 經化、乙醯化等自發性共價修飾。 该強酸可為任何水中pKa值小於3的酸，較佳小於〇， 更佳小於-3者。例如強酸可選自由鹽酸、氫溴酸、硫酸、 有機硫酸、1-40碳原子的烷基硫酸、硝酸、鉻酸、甲烷磺 酸、三氟甲烷磺酸、有機磺酸、三氯乙酸、二氯乙酸、溴 乙酉文、氯乙酸、氰酸、2 -氯丙酸、2 -酮丁酸、2 -氯丁酸、 4-氰丁酸、過氯酸、磷酸、氫化碘等，但不限於此。 生物可分解性聚合物可為任何生物相容性藥學可接受 聚合物。生物可分解性聚合物可為熱塑性，加熱時熔解^ 冷卻時固化。本發明之生物可分解性聚合物為水溶液或體 :中實質上不溶性，但可實質上溶解或分散於水溶混有機 >谷劑中’形成溶液或懸浮液。相較於水溶液，水溶混有機 溶劑擴散/分散自本發明之組成物，導致該聚合物的凝社， 形成膠、或固體基質，包囊該肽劑。適合本發明組絲之 聚合物例如聚内醋、聚甘醇酸、$己内_、聚酸酐、聚氯 H66-8751-pF;Ahddub 10 200831131 甲酸乙酯、聚酯醯胺、聚鄰酯、聚二氧六環酮、聚縮醛、 嗣、聚碳酸酯、聚鄰碳酸酯、含氟聚磷迅 (polyphosphazenes)、聚羥酪酸酯、聚羥戌酸酯、聚烷烯 草酸醋、聚烷烯琥珀酸酯、聚（蘋果酸）、聚（順丁烯二酸 酐）、及共聚物、三元共聚物、或此等之組合或混合物，但 不限於此。本發明較佳使用乳酸基質的聚合物及乳酸與甘 醇酸的共聚物（PLGA)，包括聚（D，L —乳酸—甘醇酸）共聚物與 承（L乳酸-甘醇酸）共聚物。某些具體實施態樣中，pa a 聚合物為平均分子量約2, 000-約i 〇〇, 〇〇〇間，乳酸對甘醇 酸的單體比為約50:5〇-約1〇〇:〇間。 樂學可接受有機溶劑可選自N一甲基—2一吡咯酮、甲氧 基水乙_醇、烷氧基聚乙二醇、聚乙二醇酯、克來寇弗羅 (glycofurol)、正甘油（glycer〇1⑹腦！）、乙酸甲酉旨、乙 酉夂乙S曰、甲基乙基酉同、二甲基甲酿胺、二甲基硬、四氫咬 南己内酷、癸基二甲基石風、节基苯甲酸_ 、乙基 酯、三醋精（triacetin)、— • 一 S^^(dlacehn)、丁酸甘油酯 (tr 1 butyriη)、檸糢酿-7 亦匕 . …妒 ““夂二乙，、擰檬酸三丁酯、三乙基椁 才豕I乙酯、三丁基擰檬酸乙二 醋、酞酸二乙醋、酒石酸 -乙基甘“、磷酸三乙 日/酉石酸二乙酯、乳酸乙酯^ ^ 乙烯碳酸m 烯碳酸醋、 此等之組合。 基雜虱裱-庚-2-酮、及 本發明可組合一赤 或夕種賦形劑，以達刹兮此 傳遞。適當的賦形劑可 “亥肽劑的理想 j Β括釋放速率調整匈.t 緩材料、緩衝材料、抗氧 衝出效應減 1166-8751-PF;Ahddub 11 200831131 根據本發明，適當的釋放速率調整劑包括兩性化合物 或共聚物，如烷羧酸、油酸、烷基醇、極性脂質、介面活 险J ΛΚ乙二醇與聚乳酸或聚乳酸甘醇酸共聚物的共聚 物 日盧永合物（P〇l〇xamers)、聚乙烯π比洛酮、聚山梨糖 醇等，單、二、三羧酸酯，如2-乙氧基乙酸乙酯、檸檬酸 一乙i曰乙醯檸核酸二丁酯、乙醯擰檬酸三乙酯、甘油三 乙酯、二（η-丁基）癸二酸酯等；聚羥醇，如聚乙二醇、山 木糖醇等，脂肪酸；甘油三酯，如三酸甘油酯、中級鏈三 酸甘油 _，如 MIGLY〇L 81〇, 812, 818, 829, 84〇 等，但 不限於此。本發明之聚合物系統亦可使用釋放速率調整劑 混合物。 。根據本發明，適當的緩衝材料包括無機與有機鹽，如 石反n虱氧化_、肉莖M酸_、油酸約、棕櫚酸舞、硬 脂酸、碳酸鎂、氯氧化錢、肉^酸鎮、油酸 I棕櫚酸鎮、硬脂酸鎂、鱗㈣、碳酸辞、氣氧化_、

肉莖蔻酸辞、油酸辞、棕櫚酸辞、硬脂酸鋅、磷酸鋅：及 此等之組合，但不限於此。 根據本發明，適當的抗氧化劑包括d_a "酸乙酸 酉旨、棕櫚酸敗血酸醋、丁基化羥茵香酸醋 (hydr〇xyanidQle)、丁基化經苯f醚、丁基化歸闕、經 香豆熹、丁基化經二甲苯、沒食子酸乙_、沒食子酸丙醋、 沒食子酸辛1旨、沒食子酸月桂0旨、丙基經基笨甲酸醋、三 經基丁醯苯_、維生H、PEG化維生素£或維生素e_tpgs 等’但不限於此。 12 1166-8751-PF;Ahddub 200831131 本發明更進一步提供一種製造及使用此組成物之方 矢例如製造此組成物之方法，包括中和肽劑的驗胺基， 形成益鹽，以避免該鹼胺基與該聚合物間的交互作用/反應 或使其達到最小；以及組合該益鹽與其他組成物及選擇性 組合一或多種賦形劑。該肽劑益鹽較佳先生成，然後與溶 於有機 >谷劑的聚合物組合。此組成物在控制傳遞系統的製 仏過私（如微顆粒生成作用或其他可植入基質生成作用）中 為生理化學穩定。該可注射組成物較佳在製造儲存中為生 理化學穩定，隨後投藥個體，在投藥組織處形成持續控制 釋放植入物。 本發明更進一步提供一種投藥該可注射組成物之套 組，以形成持續控制釋放的儲存系統，該套組包括溶於藥 學可接受溶劑的生物可分解性聚合物；與溶於或分散於聚 合物載劑中強酸作用形成之具有至少一個驗胺基的狀劑益 鹽；以及選擇性具有-或多種賦形劑。所有組成的單一混 合物包裝於-個容器。該容器較佳為注射器。因此，本發 明亦提供一種方法，包括填充該組成物於注射器中，形成 已可使用結構（ready-to use)之穩定產品。 本發明更進一步提供-種原位(…讀成植入物 之方法’功能為個體内該肽劑之控制釋放傳遞系統。該肽 劑較佳加於該原位生成植入物中，並隨後在該聚合物崩解 時，釋放於週遭組織液與相關體組織或器官中。此方法包 括以任何適當方法以液體供應’在植入處投與本發明之可 注射組成物，例如以注射器、針頭、插管、尿管、麼力施 1166-8751-PF;Ahddub 13 200831131 加器等之方法。 本發明提供一種穩定之可注射生物可分解性聚合組成 物开/成^濟、實用、及有效率的狀劑之控制釋放傳遞系 統。本發明亦提供其製造及使用方法。 本1明之組成物包括a) 一種與強酸形成的肽劑之益 | i免忒肽剤與该聚合物在有機溶液中交互作用/反應或 使其作用減至最小；b)生物可分解性聚合物；C)藥學可接 受有機溶劑。本發明中，該藥學組成物可選擇性地包含一 或夕種賦形劑，以達到該肽劑的理想傳遞。本發明之可注 射性聚合組成物可兔卖 為黏稠或非黏稠液體、膠、或移動如液 體的半固冑’ H]而可用注射器注射。可注射性聚合組成物 可先填充於一注射器中，形成已可使用結構(ready —t"se 的產品套組。 本發明之控制釋放傳遞系統可為生體外（/"/⑽可 植入聚合基質，或者或码/ ,· 乂有為原位（i/7 5·"")的膠或固體植入物。 當投藥個體時，根攄始λ ^ 1 楂入物的組成物，該肽劑的控制釋放 可維持一段所欲時ρ气 , 1 °加上選擇的生物可分解性聚合物與 其他組成，該肽劑的拄 、 』的持續釋放時間可控制超過數星期至一 年。 此述“ 或，， 種”解釋為，，一或以上，，及，，至 少 此述“穩定，，為兮1 ^ 馬4可注射性聚合組成物中的組成穩定 性明顯改善，必須诖μ々 ☆ 、逐到發展實用產品所需的穩定狀態。此 迷的穩定的可注射柯取人 %『生來合組成物”為該組成物的組成如 H66-8751-PF;Ahddub 200831131 該小口物與該肽劑，在製造過程及在長時間儲存後（如數月 至：年’較佳超過12個月），在適當條件下，保留其原分 子量、結構及/或生物活性的至少8〇%，較佳占至少9〇%。 此述“控制釋放傳遞，’為在投藥後、經過一段所欲、 長時間後，較佳為至少數星期至一年，生體内 的肽劑傳遞。 此述肽劑”為通稱包括聚（胺基酸），一般正常稱 為”肽”、”寡肽，，、及，，多肽，，或，，蛋白質，，。亦包括 狀劑類似物、衍生物、乙酸化衍生物、糖基化衍生物、PEG 化何生物、癒合蛋白等。，，㉟性肽劑，，為天然驗性之肽， 來自鹼胺基酸例如精胺酸或賴胺酸，編肽劑的氮端、 或為含有至少一個鹼基的肽劑，選擇性有一或以上酸性胺 基I基。φ包括肽的合成類似物、具鹼官能性的非天然胺 基酸、或其他導入驗性的型態。 肽劑包括任何具有診斷及/或治療性質的任何肽 劑，包括抗代謝性質、抗真菌性質、抗發炎性質、抗腫瘤 性質、抗感染性質、抗生物素性f、營養素性f、激動劑 性質、及拮抗性質，但不限於此。 專一地祝，本發明之肽劑可為任何與強酸形成益鹽的 肽月i 4寸別疋含有電子提供驗基的肽齊^，如驗氮原子，如 胺、亞胺、或環氮。該肽劑較佳含有一或多個暴露的可質 子化胺官：性。可用於本發明組成物製造的肽劑，包括： 產素、血官收縮素、腎上腺皮質激素（ACTH)、上皮生♦因 子（EGF)、血小板衍生生長因子（pDGF)、催乳激素、促=體 1166-8751-PF;Ahddub 15 200831131 /放素促男體竑素釋放激素（LHRH)、LHR{i激動劑、uRH拮 抗劑、生長激素（包括人、豬、及牛）、生長激素釋放因子、 夷島素促、，、工血球生長素（包括所有具有促紅血球生長活性 的蛋白貝）、生長激素釋放抑制因子（s〇mat〇statin)、昇糖 素、間白素（包括IL-2、IL—u、IW2等），干擾素α、 干擾素/5、干擾素r、胃激素、四胃激素、五胃激素、尿 抑月素、小腸内泌素、降血鈣素、腦啡呔（enkephaiins)、 月自内啡、血管收縮素、促甲狀腺素釋放激素、腫瘤壞 死口子（TNF)、田彳甲狀腺素（PTH)、神經生長因子、粒 狀血球-菌^刺激因子（G —CSF)、粒狀血球巨嗟細胞—菌落刺 ;放口子（GM-CSF)、巨噬細胞—菌落刺激因子（M —CSF)、肝素 酶血吕内皮生長因子（VEG-F)、骨形態發生蛋白（BMp)、 hANP、類幵糖素肽（GLp—丨）、依克那狀^㊀肋㈤小肽 γ(ργγ)、腎酵素、金管舒緩激酶、桿菌肽、多黏菌素、粒 菌素、短桿菌酪肽、滅革蘭菌素、環孢菌素(包括其合成類 似物及藥學活性片段）、酵素、細胞激素、抗體、疫苗、抗 生物素、抗體、醣蛋白、促印泡激素、京都紛（kyotorphin)、 泰福特新（taftsin)、胸腺聚肽激素（thym〇p〇ietin)、胸腺 素、胸腺刺激素（thymostimuUn)、胸腺體液因子、血清胸 =口子菌落刺激因子、胃動素、鈴蟾肽（bombesin)、蒂 諾分（dinorphin)、神經緊張肽、蛙皮縮膽囊肽 1 e i η)尿激酶、激肽釋放酶、物質ρ類似物及拮抗 =、血官收縮素U、血液凝結因子νπ與ίχ、滅革蘭菌素、 黑色素刺激激素、甲狀腺素釋放激素、甲狀腺素刺激激素、 1166-8751~PF；Ahddub 16 200831131 腸促胰酶素、縮膽囊素、人胎盤催 ^ 辦毛膜促性 腺激素、蛋白合成刺激肽、胃抑制肽、腸血 吕敗、血小叔 何生生長因子、及此等之合成類似物及藥學活性片段，作 此述較佳肽劑包括氮端非初級胺者。例如狀劑氮端為 焦祓fe酸，如LHRH、LHRH激動劑如路普羅瑞林 (leUpr〇relin)、布色瑞林（busereUn) ’ 艇那朵 2 林

(gonadorelin)，蒂斯羅瑞林（desl〇reU 夹山从 夭蚕瑞林 (fertirelin)，希斯吹林（histreUn)，路吹林 Uutrelin)，格賽瑞林（g〇sereHn)，那伐瑞林 (--U小崔普托瑞林(triptorelln)等。或者氮：胺 基加帽或乙醯化，如赛卓瑞里克希（ce1：r〇relix)，因弗費 泰德（enfuvirtide)，胸腺素（thym〇sin) α j，阿巴瑞里克 希（abarelix)等。 此述較佳肽劑亦可包括氮端初級胺基在親水性及/或 鲁親脂性部份共價修飾，如PEG化、乙醯化等。此述狀劑進 一步包括側鏈初級胺基在親水性及/或親脂性部份共價修 飾，如PEG化、乙醯化等。此述較佳肽劑進一步包括氮端 初級胺基與側鏈初級胺基在親水性及/或親脂性部份自發 性共價修飾’如PEG化、乙酿化等。 所明親水性部分為任何水溶性的直鏈或分支鏈寡 聚物或聚合物，包括聚乙二醇與聚丙醇以及相似的直鏈或 分支鏈聚合物，但不限於此。該聚合物分子量較佳為約5〇〇 達頓（dalton)至約50, 〇〇〇達頓。本發明使用之親水性聚合 1166-8751-PF;Ahddub 17 200831131 物可具有反應基以連接所欲肽劑之胺基、羧基或硫基。 此述“PEG化”為可溶性聚乙二醇與該肽劑的共價鍵

結。聚乙二醇可如標準操作步驟製備，一端以甲氧基加冠， 另一端與肽劑活化基形成鍵結。例如多種製備聚乙二醇方 去與PEG化用迷a兒明於先前技術：[如R〇berts MJ，Bentley MD, Harris JM, Chemistry for peptide and protein PEGylation. Adv Drug Deliv Rev. 2002 Jun 17; 54(4): 459-76. Veronese FM. Peptide and protein PEGylation: a review of problems and solutions. Biomaterials. 2001 Mar; 22(5) : 405-1 7 and US Patents Nos· 6, 1 1 3, 906; 5, 446, 090; 5, 880, 255 ]，在此皆作為參考。 此述親脂性部分”為任何在20 °C下溶於水少於 5mg/ml的分子，較佳少於〇· 5mg/ml，更佳為少於〇· lmg/mi 者。此親脂性部份較佳選自C2_39—烷基、C2 39-烯基、Cm— 二烯基、與固醇殘基。該” c2_39-烷基、c 2 3 9 _烯基、Cn 二烯基’’包括直鏈與分支鏈者，較佳為2 —39個碳原子的直 鏈、飽和、單未飽和與二未飽和烴基。 導入親脂性部份與該肽劑共價，形成親脂性修飾肽， 車乂天“、、：刀子而δ，可改善治療效果。一般可由使肽劑的胺 基與親脂性分子的酸或其他反應基作用而達到。或者經由 添加部分如橋、間隔物或連接部分達到肽劑與親脂性部份 的鍵結，此鍵結可為生物可分解性或生物不可分解性。揭 示於先前技術例如[e.g·， Hashim〇t〇， M.， et al >

Pharmaceutical Research, 6:171-176 (1989)， and 18 1166-8751-PF;Ahddub 200831131

Lindsay, D. G.， et al.， Biochemical J. 121:737-745 # (1971)，U.S· Pat· No· 5, 693,609，W095/07931，U.S· Pat·

No· 5, 75 0, 49 7， and W09 6/29 342· W098/08871, W098/08872，及W099/43708]。此等揭示作為本文參考， 以說明親脂性修飾肽與其製備。 此述”強酸”包括任何pKa值低於3的酸，較佳低於 〇’更佳為低於-3。適於本發明之強酸可選自鹽酸、氫溴酸、 亞硝酸、鉻酸、硫酸、曱烷磺酸、三氟甲烷磺酸、三氯乙 Φ 酸 '二氯乙酸、溴化乙酸、氯化乙酸、乳化乙酸、2_氯丙 酸、2-酮基丁酸、2-氯丁酸、4-氰丁酸、帕莫酸（pam〇ic aci d)、過氯酸、磷酸、碘化氫等，但不限於此。 本發明之強酸”可包括任何有機硫酸，如；[—40個碳 原子的h基、芳基或烧芳基硫酸，較佳為少於1 8個碳原 子，更佳為少於6個碳原子者，有機磺酸如1-40個碳原子 的烷基、芳烷基、芳烴、或烯基磺酸，較佳為少於18個碳 φ 原子，更佳為少於6個碳原子者。· 此述肽劑之益鹽”包括任何與強酸形成之肽劑鹽。 該肽劑之益鹽可由單一酸與鹼滴定或中和而製造。肽:之 益鹽可在合成與純化過程中生成。或者可由游離鹼形式的 肽劑製造。該游離鹼溶於適當液體媒介中。該肽劑之溶液 與強酸溶液混合，經適當方法如過遽或低壓康乾法移除溶 劑，形成益鹽。如果肽劑為一般商業可獲得形式與弱酸（如 pKa>3)形成鹽，該弱酸可經過一般離子交換方法如低壓凍 乾法、沉殿、或其他先前技術熟知者，由強酸取代。例如， 1166-8751-PF;Ahddub 19 200831131 柳菩林（leuprolide)乙酸醆溶於、吞上 化旦，合於適當液體媒介，如水。肽 劑溶液與強酸水溶液如豳醢 1 i夂此s。當該肽乙酸鹽與如鹽酸 之強酸溶於水時，該肽傾向盥 /、虱離子作用，即較強酸HC1 取代較弱酸幾乙酸。該溶判^ ^ ^釋放的乙酸（或其他酸但放出 羧酸）可在真空器中移除。因此，冷滚乾燥該混合溶液移除 水與弱酸’形成益鹽。如果該肽劑在低邱值中不穩定，則 該肽劑之益鹽可經渦具# 、，過長期的透析，以對抗非常低濃度的強 酸0

本毛月之可注射聚合組成物可包含〇 〇ι—重量％的 肽月1 般來况，理想的藥劑負荷根據所欲釋放肽劑的時 間與強度决疋。顯然地，低強度與長時間釋放肽劑需要較 高程度的合併。 所謂，，生物可分解性，，為原位的逐漸分解、溶解、水 解及/或腐蝕。此述”生物可分解性聚合物，，一般為基 經過水解及/或酵素分解的原位可水解及/或生物腐 此述”生物可分解性聚合物，，包括任何可用於生體内 之生物相容性及/或生物可分解性合成與天然聚合物，但該 :合物為至少實質上不溶於水溶性媒介物或體液。此述： 貫質上不溶” #該聚合物的不溶性必須足以使該聚合物在 水溶性媒介物或體液中沉澱者。該聚合物溶解度較佳低於 1重里％，更佳為低於〇·丨重量％。當該聚合物溶液在水可 溶混或懸浮的有機溶劑中與水溶液混合時，當有機溶劑消 失時，該聚合物將沉澱形成固體或膠狀基質。適當的生物 可分解性聚合物已揭示於美國專利案4, Μ、M3 · 1166-8751-PF；Ahddub 20 200831131 5,278, 201 ; 5,278,2012 ; 5, 324, 519 ; 5, 702, 716 ; 5, 744, 1 53 ; 5, 990, 1 94 ;及 6, 773, 714。一 些聚合物無限 定例子如聚内g旨、聚甘醇酸、聚己内1旨、聚二嗔烧、聚碟 酸酯、聚羥丁酯、聚烷烯草酸酯、聚酸酐、聚酯醯胺、聚 胺基曱酸酯、聚縮醛、聚鄰碳酸酯、含氟聚磷里 (polyphosphazenes)、聚經戊酸酯、聚烧烯號拍酸醋、聚（順 丁烯二酸）、及聚鄰酯、以及共聚物、嵌段共聚物、分支共 聚物、三元共聚物及此等之組合與混合物。 • 該嵌段聚合物包括A-B-A嵌段聚合物、B-A-B嵌段聚 合物、及/或A-B嵌段聚合物及/或分支共聚物。較佳的嵌 段聚合物為A嵌段包括斥水性聚合物，B嵌段包括親水性 聚合物。特別是當使用上述嵌段聚合物之一時，最佳的聚 合矩陣定義為A嵌段微生物可分解性聚合物，選自聚内 酯、聚甘醇酸、聚（乳酸-甘醇酸）共聚物、聚酸酐、聚（鄰 酯）、聚醚酯、聚己内酯、聚酯醯胺、聚（ε -己内酯）、聚（羥 0 丁酸）、及此等之混合物與共聚物，Β彼段為聚乙二醇或單 官能衍生性的聚乙二醇，如曱氧基聚乙二醇。這些組合多 數可形成可接受的溫度可逆膠。 聚合物的適當分子量可由該技藝中熟知該項技術者確 認。在確認分子量時須考量的因素包括所欲的聚合物可分 解速率、機械長度、及聚合物在有機溶劑中的溶解速率。 一般而言，聚合物的平均分子量適當範圍為約2, 000達頓 至約1 00, 000達頓，聚合分散性為1. 1至2. 5，根據選用 的聚合物而異。 1166-8751-PF;Ahddub 21 200831131 本發明之可注射聚人細士、仏π二 曰 、，且成物可包括生物可分解性聚合 物在10重量％-70重量％之門 士 里°之間。本發明之可注射聚合組成物 的黏度根據使用的聚合物分子量與有㈣_異。H 說，當使用相同溶劑時，聚合物的分子量與濃度㈣時， 黏度較高。該組成物中聚合物濃度較佳低於7q重量％ 佳為30重量60重量％之間。

聚（乳酸）以及乳酸與甘醇酸共聚物（plga)，包括聚 (D，L-乳酸-甘醇酸）共聚物與聚（L_乳酸—甘醇酸）共聚物= 佳使用於本發明。該聚合物（或熱塑性聚酯）具有乳酸對甘 醇酸單體比為約50:50至約100: 0,平均分子量為約2,〇〇〇一 約1 00, 000。該生物可分解性熱塑性聚酯可使用先前技藝 中熟知之方法製造，如聚縮合作用與開環聚合作用（如u. s 專利 No· 4,443,340 ; 5,242,91 0 ; 5,31 0,865，在此皆作 為參考）。聚（D，L-乳酸-甘醇酸）共聚物的端基可為羥基、 羧基、或醋，係根據聚合方法而異。適當的聚合物可包括 單官能性醇或聚醇殘基，可不具有羧酸端。單官能性醇例 如甲醇、乙醇、或1-十二烷醇。聚醇可為二醇、三醇、四 醇、五醇、及六醇，包括乙二醇、i，6—己二醇、聚乙二醇、 甘油、糖類、還原糖如山梨糖醇等。 許夕適富的PLGA為商業可獲得’特定組成物的plga 可根據先别技術製備。由B 〇 e h r i n g e r -1 n g e 1 h e i m (Petersburg, Va, USA) 、 Lakeshore Biomaterials (Birmingham，AL，USA)、DURECT Corporation (Pelham，AL) 可製得各種單體比例及分子量的PLGA。 1166-8751-PF;Ahddub 22 200831131 本組成物中的生物可分解性聚合物之型離、分子量、 及數量會影響控制釋放植入物釋放肽劑的時間長度。選擇 本組成物中的生物可分解性聚合物之型態、分子量、及數 量以達到所欲的控制釋放植入物性質可經簡單實驗確認。 本發明之—較佳具體實施態樣為，使用液態組成物調 配柳咅林ueuprollde)鹽酸鹽的控制釋放傳遞系統。此實 施態樣中’生物可分解性熱塑性聚§旨較佳為85/15聚（以_ 乳酸-甘醇酸)共聚物’包括羥基端與月桂醋端；可占該組 成物的約30重量60重量平均分子量為約i5，_ —約 50, 000 〇 本發明之另-較佳具體實施態樣為，使用液態組成物 調配柳菩林（leUprQlide)鹽酸鹽的控制釋放傳遞系統。此 實施態樣中，生物可分解性熱塑性聚醋較佳為關5聚 (D，L-乳酸-甘醇酸）共聚物，包括兩個羥基端；可占該组成 物的約30重量％_60重量平均分子量為約15，_—約 50，〇〇〇 〇 本發明之另-較佳具體實施態樣為，使用液態組成物 調配柳菩林（leuprolide)鹽酸鹽的控制釋放傳遞系統。此 實施態樣中，生物可分解性熱塑性聚較佳為85/15聚 (D，L-乳酸-甘醇酸）共聚物，包括叛酸端；可占該組成物的 約30重量％-60重量平均分子量為約15〇〇〇 —約5〇，嶋。 本發明之再-較佳具體實施態樣為’使用本組成物調 配柳菩林（leUprolide)的控制釋放傳遞系統。此實施態樣 中，生物可分解性熱塑性聚酯較佳為1〇〇/〇聚⑺几―乳酸— ll66-8751~PF;Ahddub 23 200831131 甘醇酸）共聚物，包括/不包括缓酸端；可占該組成物的約 40重量重量平均分子量為約8，咖約5〇，咖。 “藥學可接受有機溶劑”包括生物相容性有機溶劑， 在水洛液或體液中為可溶混或分散的。” 刀月文表不該溶 劑在水中為部份可溶或溶混。較佳為’單_溶劑或溶劑混 合物在水中的可溶性或溶混性大於0.1重量％。更佳為，該 溶劑在水中的可溶性或溶混性大於3重量％。該溶劑最佳在 水中的可溶性或溶混性大於7重量%。適當的有機溶劑應i 擴散入體液，因此使該液體組成物凝結或固化。可選用單 一的此等溶劑及/或混合物，溶劑的適任性可經簡單實驗確 認。 、 藥學可接受有機溶劑·包括N—甲基一2_吡咯酮、甲氧基 聚乙二醇、烷氧基聚乙二醇、聚乙二醇酯、克來㈣二 (glycofurol)、正甘油（glycer〇1 f〇rmal)、乙酸甲酯、乙 酸乙酉旨、甲基乙基酉同、二甲基甲醯胺、二甲基石風、四氫吱 喃、己内酯、癸基二曱基颯、苄基苯曱酸酯、乙基苯曱酸 酯、三醋精（triacetm)、二醋精（diacetin)、丁酸甘油酯 (tnbutyrin)、檸檬酸三乙酯、檸檬酸三丁酯、三乙基檸 檬酸乙酯、三丁基檸檬酸乙酯、三乙基甘油酯、磷酸三乙 酯、酞酸二乙酯、酒石酸二乙酯、乳酸乙酯、丙烯碳酸酯、 乙烯碳酸酯、丁醯内酯、及卜十二基雜氮環—庚—2—酮、及 此等之組合，但不限於此。 本生物可分解性聚合物在各種藥學可接受有機溶劑t 的溶解度根據聚合物的特性及其與不同溶劑的相容度而 H66-8751-PF;Ahddub 24 200831131 異。例如PLGA對n-甲其—ο 7 I —2—吡咯酮（NMP)比對三醋精 (triacetin)有較高的溶鲲 幻，合解度。但當PLGA於NMP的溶液與 水溶液接觸時，因為Nmp的古 >、日 r的间水混溶性，丽P會快速分散 形成固體聚合基質〇 士、、六如 、此/合Μ快速擴散速率會快速導致固體 植入物，但亦會造成宾沾& 的起始衝出釋放。當PLGA於三醋精 (triacetin)的溶液盥尤、、六 〃水心液接觸時，因為三醋精 (triacetin)的低水混溶 = +. ^ μ ~ θ日積（triacetin)會非常緩 慢地分散。此溶劑的緩慢擴散速率使黏性液體需要花費長 時間轉為固體基質。此時在溶劑擴散出去與聚合物凝聚 形成理想的平衡，而白#壯十丨 一 *❿包袤肽劑。因此有利於組合不同溶劑 已獲侍所欲的傳遞系統。可人 、 、、、口低吳咼水混溶性的溶齊j， 以改善聚合物的溶解度良 仏飾、、且成物的黏度、使擴散速率 達到理想、以及減少起始的衝出釋放。 本發明之可注射聚人έ a、此 口、、且成物一般包含3〇重量％ 量％的有機溶劑。本發明之可人 ^ Α 射永a組成物的黏度根攄兮 聚合物的分子量盥传用的士^ k 人… 有機溶劑而異。本組成物中的产 合物》辰度較佳低於7 0重量^/。、+ ^ 30重夏60重量％間。 尺彳土為 此述“賦形劑”包括除形+ 士 &上 /成本、、且成物之肽劑或生物可 分解性聚合物外，任何有 μ飞生物可 J α〜之組成成分。遶告 包括釋放速率調整劑、衝出 田、)蜊可 化劑等。 出政應減緩材料、緩衝劑、抗氧 根據本發明，適當的釋放速率調整劑包 或共聚物，如烷羧酸、油酸、 丨化δ物 ^说“'m脂質、介面活 25 1166-8751.pF；Ahddub 200831131 十生齊|ί 、 7 I乙二醇與聚乳酸或聚乳酸甘醇酸共聚物的共聚 物曰盧聚合物（poloxamers)、聚乙烯吡咯酮、聚山梨糖 醇等 ·單 、’平、二、三羧酸酯，如2-乙氧基乙酸乙酯、檸檬酸 二 西匕 一-曰、乙酸檸檬酸三丁酯、乙醯檸檬酸三乙酯、甘油= 了）g 匕、一 -曰、一Cn〜丁基）癸二酸酯等；聚羥醇，如聚乙二醇、 梨糖醇等·昨…说 、山 ’月曰肪I，甘油三酯，如三酸甘油酯、中級鍵： 酉夂甘油知，如 MIGLY〇L 810，812，818，829，840 等，作 不阡於此。本發明之聚合物系統亦可使用釋放速率調整 混合物。 id '釋放速率調整劑可以有效量存在該可注射聚合 物中，以減少該聚合物組成物在植入後第一 日士內： 放該肽劑的叔払兔山 Μ小日守内釋 約50重量％的釋放速率 量％ I始衝出。该聚合組成物較佳包 鈞 Fif)舌墓 . J 1 ^ η 1 約20重 調整劑，更佳為約2重 酸二，發明’適當的緩衝劑包括無機與有機鹽，如碳 辽乳化鈣、肉苴謹酸約、油酸詞 尺 酸鈣、磷酸鈣、碳酸鎂、氫趣鈣、硬脂 棕櫊酸鎂、硬脂酸鎂、磷酸鎂、叾 & 、、、，I鎂、 蔻酸鋅、油酸鋅、浐椚萨 厌-夂〃'氫氧化鋅、肉莖 “櫚酸鋅、硬脂酸鋅、磷酸链、… 之組合，但不限於此。 ·、辛及此等 孩緩衝4可以有效量存在該可注 穩定在衰敗過程中植入物 射來合組成物中，以 w的pH值。該平人 約1重量％-約30重量Λ 5、、且成物較佳包含 里里/G的綾衝劑， 重量％。 為约2重量％-約15 ΙΙββ-8751-PF/Ahddub 26 200831131 根據本發明，適當的抗氧化劑包括d_a生育酚乙酸 酯、棕櫚酸敗血酸酯、丁基化羥菌香酸酯 (hydroxyanidole)、丁基化羥苯甲醚、丁基化羥奎酮、羥 香豆熹、丁基化羥二曱苯、沒食子酸乙酯、沒食子酸丙酯、 沒食子酸辛醋、沒食子酸月桂醋、丙基羥基苯甲酸醋、三 羥基丁醯苯酮、維生素E、PEG化維生素£或維生素E—tpgs 等，但不限於此。 该抗氧化劑可以有效量存在該可注射聚合組成物中， 以捕捉任何在植人物中產生的自由基或過氧化物。該聚合 組成物較佳包含約！重量%_約3〇重量%的抗氧化劑，更佳 為約3重量％-約1 5重量％。 本發明一方面提供一種穩定的可注射生物可分解性聚 合組成物，形成經濟、實用及有效的肽劑控制釋放傳遞系 統，包括a)—種與強酸形成的肽劑之益鹽，避免該肽劑與 該聚合物在有機溶液中交互作用/反應或使其減至最小；匕） 生物可分解聚合物；〇藥學可接受有機溶劑；以及d)選擇 性地一或多種賦形劑，以達到該肽劑的理想傳遞。該可注 射性聚合組成物較佳包裝於一套組中，包括將該組成物填 充於一注射器中，形成已可使用結構（ready_t〇 —use)的步 驟。該套組中的組成物在合理時間内呈現穩定，在控制儲 存條件下具有適當的儲存半衰期，較佳至少一年。本組成 物車乂佺，主射於個體原位（y/7 W 形成一植入物，使該肽劑 的以治療有效量釋放一段所欲、延長的時間。 本發明之穩定的可注射生物可分解性聚合組成物可由 1166-8751-PF;Ahddub 27 200831131 適當結合肽劑之益鹽、生物可分解性聚合物、藥學可接受 有機溶劑、以及一選擇性賦形劑來製造。投藥之組成物可 从劑置皁位形成便利呈現，且可由任何醫藥先前技術中之 已知方法製造。製造本發明組成物之一較佳方法為，將生 物可分解性聚合物及/或一賦形劑溶於藥學可接受有機溶 劑中，先獲得單-型態的聚合溶液/懸浮液。然後將狀劑之 並鹽加入此溶液/懸浮液中。使用任何適當方法將此組成物 元整混合，獲得單一型態的溶液/懸浮液。然後將適當量的 此溶液/懸浮液轉移至一注射器中，形成已可使用結構 (ready-to-use)產品。 本發明組成物之肽劑益鹽與聚合物的作用程度，根據 4肽山b力、所欲的傳遞時間、溶劑中該聚合物的溶解度、 以及欲投藥的可注射組成物之體積與黏度，而有自然上 差異。 本發明之較佳實施態樣中，該可注射生物可分解性聚 合組成物’形成經濟、實用及有效的肽劑控制釋放傳遞系 統，包含約〇.〇1%-40%的肽劑益鹽、及約ι〇%_7〇%的聚（乳 酸-甘醇酸）共聚物。該組成物更進_步包含約繼 樂學可接受有機溶劑。 本Ιχ明之較佳實施態樣中，該組成物更進一步包含約 1%-40%的適當賦形劑’包括如上定義之釋放速率調整劑、 衝出效應減緩材料、緩衝材料、抗氧化劑、組織轉移劑等。 根據本發明，該可注射組成物轉移到適合注射投藥的 無菌容器t ’如注射器。將此容器包裹儲存，該組成物的 1166-8751-PF;Ahddub 28 200831131 内組成物在製造及儲存過程或在投與個體如動物或人前， 保邊至J 8G%的原始分子量、結構及/或生物活性，較佳為 根據本發明，該穩定組成物可以所欲的肽劑控制釋放 傳遞下投藥個體。此述，，個體” &括溫血動物，較佳為哺 乳類，更佳為人。

此述，’投藥個體”為以該組成物傳遞的適當路徑分 政傳遞或提供5亥組成物（如醫藥配方）於所欲的個體位 置：本發明之組成物較佳以皮下、肌肉内、腹膜内、或皮 内/主射及/或植人投與’根據已知該肽劑的多種醫學條件下 治療的準則，提供所欲劑量。 此述控制釋放傳遞，，為在投藥後、經過_段時間 後，較佳為至少數星期至-年，生體内。”清)的肽劑持 續傳遞。該劑的持續控制釋放傳遞可稱為，如長時間該劑 ㈣續治療效益（如刪類似物，該類似物的持續傳遞可 稱為長日才間持績抑制署固两人 一 |市j幸固酮合成）。或者，該劑的持續傳遞 可稱為長時間偵測該劑在生體内的存在。 本可注射組成物的投與量一般根據該控制釋放植入物 所欲的性質而有不同。例如，本可注射組成物的量可影響 忒肽劑自該控制釋放植入物釋放的時間長短。 本發明之較佳實施態樣 物注射個體的體積為O.lmL- 更佳為 0· 3mL-〇. 5mL。 中’本發明之可注射聚合組成 2· 0mL，較佳為 〇· 2mL-l. OmL， 本發明更進一步提供一 種原位形成植入物之 方法 包 29 H66-8751-PF;Ahddub 200831131 括:與個體有效量的可注射組成物，該可注射組成物包括 種’、強酸形成的肽劑之益鹽，避免該肽劑與該聚合物 在有機溶液中六 又互作用/反應或使其減至最小；b)生物 解聚合物；各 刀 U市予可接受有機溶劑；以及d)選擇性地一 多種賦形劑，、去u ^ 、、番 以達到該肽劑的理想傳遞；允許該溶劑分散 於週遭水錢環境，將此液體組成物以相分離法形成儲存 物錢存物可為黏膠、半固體、或固體基質。該儲存物 亦可為多孔質式非夕

貝A非夕孔質。此儲存物作為該肽劑在所欲延 長時間釋放的傳遞系統。 ^ 另較仏貫施態樣中，該可注射組成物可投 與填充體腔形成儲存系統。該體腔包括在手術後形成的腔 室或天然體腔，如陰道、肛門等。 中保留至少90%、較佳A QR0/AA & "、，曰 平乂1土馮95%的原始分子量、結構及/或生 物活性。 一另方面，本發明提供一種穩定的液態生物可分解性 :口組成物，形成經濟、實用及有效的肽劑控制釋放傳遞 系統’包括a)—種與強酸形成的肽劑之益鹽，避免該肽劑 與該聚合物在有機溶液中交互作用/反應或使其減至最 小二b)生物可分解聚合物；C)藥學可接受有機溶劑；以及 d)透擇性地-或多種賦形劑，以達到該肽劑的理想傳遞。 此液悲生物可分解性聚合組成物可製成可植入聚合基質， ’、中4液^、生物可分解性聚合組成物在製造過程前及過程 此述可植入聚合物基質，，包括用於藥劑傳遞的顆 粒薄膜！疋d、圓錐物、盤狀物、微膠囊、微球體、奈 1166-8751-PF;Ahddub 200831131 米球體、微顆粒、晶圓及其他已知聚合結構物。 形成各種藥學可接受聚合載體之方法為先前技術所熟 知。如美國專利 6, 410, 〇44 ; 5, 698, 213 ; 6, 31 2, 679 ; 5,410’016 ; 5.529,914 ; 5,501，863 ;及 PCT 公開案 w〇 93/1 6687 ； 4.938,763 ； 5,278,201 ； 5,278,202 ； EP 0, 058, 481，在此皆作為參考。 根據$發明’微球體型態的可植入聚合物基質是將肽 劑益鹽包裹於聚合物中所生成。可使用多種具有適合傳遞 =不同生物環境或適合影響特定功能的特定性質之生物相 或生物可刀解性聚合物，包裹該肽劑之益鹽。因此 可以特定包裹技術、聚合物組成、聚合物交聯作用、聚合 物黏度、聚合物溶解度、生物活性化合物/聚陰離子聚合物 的體積以幻容解度’確認肽劑的溶解速率以及傳遞。 被匕么的肽劑盤鹽溶於或懸浮於有機溶劑中的聚合物 =液中。«合物溶劑濃度必須在該肽劑益鹽加人該溶液 2，足以完全包裹該益鹽。該肽劑益鹽對聚合物的重量比 2: 1、勺50，較佳為、約〇.:ι 一約30。當該肽劑益鹽與聚 接觸而包裹時，應保持為懸浮狀態，不能結塊。 因此’此肽劑益鹽之聚合物溶液可用於各種微包裹技 包括噴霧乾燥、喷霧束結、乳化、及溶劑蒸發乳化。 根據本發明之一具體眚 斤^ 八體λ鉍恶樣，肽劑之益鹽溶於或懸 :、機溶劑中的聚合物溶液中。此溶液或懸浮液放到具 =化劑的較大體積水溶液令。在此水溶液中，有機相被 "5亥有機溶劑自該聚合物令蒸發或擴散出來。此固化 1166-875l~PF;Ahddub 31 200831131 ， 承合物包袤該肽劑益鹽，形成聚合物基質。乳化劑協助在 硬化相過程時減少系統内各物質相間的交互介面張力。或 者士果D亥包裹聚合物具有某些傳承的介面活性，也許不需 要另外添加介面活性劑。 根據本發明，用於製造包裹肽劑益鹽的乳化劑包括普 盧K。物（P〇1〇XamerS)與聚乙烯醇、可減少包裹肽劑益鹽 之♦合物與溶液間的介面張力之介面活性劑與其他介面活 性化合物。 用於衣4本發明微球體的有機溶劑，除上述者外，還 =乙酸、丙酮、氯化曱烷、乙酸乙酯、氯仿、及其他無 毒溶劑’將根據聚合物性質而選擇。應選擇可溶解聚合物 的溶劑，理想為無毒者。 析據本^明，可投與這些可植入聚合基質於個體，維 持所欲的肽劑控制釋放傳遞。本發明之可植入聚合基質較 ,以皮下、肌肉内、腹膜内、或真皮内注射及/或植入投藥， φ提仏所欲劑里，該劑量為以肽劑治療的各種醫學條件的已 知參數。 此述之所有書籍、文章以及專利案全文皆作為參考。 【實施方式】 以下實施例說明本發明之組成與方法。不應將下列實 施例作為限制，僅作兔私-^ 作為教不如何製造有效的控制釋放藥劑 傳遞組成物。 實施例1 ^酸製造肽劑益鹽及狀劑衍生物 1166-8751-PF;Ahddub 32 200831131 將含有至少一鹼性官能基的肽劑或肽劑衍生物溶於水 中。將化學劑量的強酸加入該肽劑水溶液中，中和該肽劑 的鹼基。以沉澱法、過濾及/或冷凍乾燥法獲得鹽。 實施例2柳菩林（leuprol ide)鹽酸鹽的製造 柳菩林（leUpr〇l ide)是一種促黃體生成激素（LHRH)激 動劑，含有9個胺基酸殘基與2個鹼性官能基（組織胺基與 精氨酸基）。其氮端胺以焦榖氨酸阻斷。已用於攝護腺癌與 子宮内膜異位生成的治療。柳菩林（leupr〇Hde)乙酸鹽 (LA-Ac)可獲自多肽實驗室（Polypeptides Ub〇rat〇ries，

Inc.) (PPL L〇t#PPL-LEUP0401A)。柳菩林（leupr〇Hde) 鹽酸鹽（LA-HC1)可經過離子交換及冷凍乾燥步驟以ΗΠ取 代乙酸而製得。一般來說，1 000mg柳菩林（leupr〇lide): 酸鹽溶於水。加入3.19mL的〇.5 N HC1 (HC1: LA〜2. 2:1)，並混合均勻。冷凍乾燥此溶液72小時， 私除乙酸。再將乾燥粉末再溶解並冷柬乾燥。 實施例3柳菩林Ueuprol ide)甲烷磺酸鹽的製造

將343.5mg的柳菩林（leupr〇Hde)乙酸鹽（ppL

Lot#PPL-LEUP0401A)溶於20raL水。加入32# [的曱烷磺酸 (柳菩林（leuprol ide)乙酸鹽對甲烷磺酸莫耳數比〜1:2)， 並此合均勻。冷凍乾燥此溶液7 2小時，移除乙酸。再將乾 燥粉末再溶解於水並冷;東乾燥。 貝施例4格赛瑞林（gosere 1 in)鹽酸鹽的製造 將766mg的格賽瑞林（g〇serelin)乙酸鹽（pp丄 L〇t#0603-21 9)溶於 20鈍水。加入 2.12社的 〇·5ΝΚ1 (HC1 1166-8751-PF;Ahddub 33 200831131 對格賽瑞林（g0serelin)乙酸鹽莫耳數比〜2·2:1)，並混合 均勻冷凍乾餘此溶液72小時，移除乙酸。再將乾燥粉末 再溶解於水並冷康乾燥。 見知例5棕櫚醯-體抑素胜肽（octreotide)(PAL-0CT)的 製造 將50mg的體抑素胜肽（octre〇tide)乙酸鹽溶於含有 l〇〇uL、TEA 的 l〇〇〇uL 無水 DMS0 中。將 17· lmg 棕櫚酸 N — —基號轴酸亞胺酯（^ 353.50)溶於311[無水龍8〇，直接 注入該肽溶液中。使此反應在室溫下過夜進行。將此混合 物倒入二乙醚中，沉澱棕櫚醯化的體抑素胜肽 (octreotide)。以二乙醚清洗沉澱物兩次，在真空中乾燥。 知到的乙醯化肽為白色粉末。使用強酸中和殘餘的驗胺 基，形成乙醯肽益鹽。 貫施例6 癸酸-體抑素胜肽（〇ctreotide)(DCL-OCT)的製 造

50 mg的體抑素胜肽（octre〇tide)溶於pH5、0· 1M乙酸 緩衝液中 2mL 、 20mM 氫化氰硼鈉（Mw 62. 84, NaCNBHs) (2. 51mg)溶液中。將 13.7mg 的癸醛（Mw 156.27)(0CT:DCL=1:2)直接注入該肽溶液。此反應在4°C 下過夜反應。離心分離此混合物。冷凍乾燥沉澱的 PAL-0CT。使用強酸中和殘餘的驗胺基，形成乙醯狀益鹽。 實施例7 PEG化體抑素胜肽（octreotide)的製造 將水中體抑素胜肽（octreot ide)乙酸鹽（1 Omg/mL)溶 液加入含有〇· 1M磷酸缓衝液、pH7. 4的2莫耳當量的琥珀 1166-8751-PF;Ahddub 34 200831131 醯亞胺丙酸鹽單甲氧基PEG (SPA-mPEG，MW 2000達頓）的小 瓶中。此反應在4°C下過夜反應。使用C-18(YMC ODS-A 4. 6x250mm, 5um， Waters Corporation)的反相 HPLC (RP-HPLC)分離此反應物。移動相由水中〇. i%TFA(A)與含 有0· UTFA的CAN(B)所組成。使此移動相以流速imi/min、 30-6 0%洗提液B直線梯度移動20分鐘，偵測21 5nm的洗提 液UV吸收度。根據個別波峰分別收集洗提部分，以氮清 洗，冷凍乾燥。 或者，可獲得體抑素胜肽（octre〇tide)特定部位pEG 化。將20mM氫化氰硼鈉（NaCNBIL·)中體抑素胜肽 (octreotide)乙酸鹽（i〇mg/mL)溶液、與〇·1Μ乙酸緩衝 液、ρΗ5的溶液，加入含有水中3莫耳當量的單甲氧基peg 一 丙酸醛（ALD-mPEG，MW 2000達頓）的小瓶中。此反應在4 °c 下過夜反應。使用 c—18(ymc〇ds—Α4·6χ25〇關，5um， Waters C〇rporation)的反相 hpl^rp — hplc)分離此反應 物。移動相由水中〇· 1%TFA(A)與含有〇· 1%TFA的CAN(B) 所組成。使此移動相以流速—6⑽洗提液b直 線梯度移動20分鐘，偵測215nm的洗提液uv吸收度。根 據個別波峰分別收集洗提部分，卩氮清洗，冷;東乾燥。使 用強I中和殘餘的鹼胺基，形成PEG化肽益鹽。 貝轭例8肽劑與生物可分解性聚合物在可注射聚合組成 物中的穩定性 將’有月桂S旨端基且具有乳酸比甘醇酸為85八5比例 的K(DL礼酉夂—甘醇酸）共聚物（PLGA)(DLPLG85/15， IV: 1166 - 8751-PF;Ahddu]〇 200831131 0·28)溶於N-甲基-2-吡咯酮（NMP)，成5〇重量％溶液。將 NMP中的PLGA洛液混合柳菩林鹽，形成如李 1之比例的單一型態可注射組成物。使用氣密式微量管 (luer-lock tip)將此等可注射組成物填充於h2mL聚兩稀 /主射為中。然後用氣密式微量蓋（lUer_l〇ck Cap)密封此等 預先填充的注射器。將此等加蓋的注射器在真空中包裝於 一容中，密封於塑膠袋，存於4°c與室溫（〜22°C )下，直 到18個月。此等可注射組成物在24h、1、2、3、6、j 2、 ❿ 18個月時間點抽樣檢查。以HPLC確認樣本中柳菩林 (leuprol ide)純度。聚合物分子量則以已知分子量的聚苯 乙烯標準值之膠穿透層析法（GPC)確認。 表1測試的可注射聚合物配方 樣本 柳菩林（1 eupr o 1 i de )鹽 (mg) DLPLG 8515/NMP (mg) ΐόδο 藥劑 (%y W/W)^ 空白試驗 LA-Ac 50 890 5. 3 LA-MS 54 960 5Γ3 LA-HC1-1 106 940 ΓδΠ LA-HC1-2 41 730 5.1 ' 此實施例出乎意表地發現使用柳菩林（leupr〇lide)_ 酸鹽與甲烧績酸鹽取代乙酸鹽時，在4 °C與室溫下經時备 減少NMP中PLGA溶液的柳菩林（ieupr〇i ide)與聚合物的崩 解。表2與表3各顯示在4它與室溫下經時NMP中？1^八溶 液的柳菩林（leuprol ide)的崩解。在4°C下18個月後，含 柳菩林（leuprol ide)乙酸鹽的聚合組成物中高達23%柳菩 林（leuprolide)衰解，而含柳菩林（ieUpr〇iide)鹽酸鹽與 1166-875l~PF;Ahddub 200831131 • 甲烧磺酸鹽的配方中，低於2%柳菩林（leuprolide)衰解。 至溫下1 2個月後，柳菩林（1 eupr01 i de )乙酸鹽的配方中超 過35%柳菩林（16叩1*〇11化）衰解，而含柳菩林（16111)1>〇1」(16) 鹽酸鹽與甲烷磺酸鹽的配方中，僅約11 %柳菩林 (leuprolide)衰解。而且在室溫下，觀察到一色改變（由乳 色轉為黃色轉為鐵銹色）及相分離。此相分離導致異質性配 方以及配方中該肽與聚合物的不均勻衰解。配方異質化可 能為不同時間點觀察到的結果波動。 —jCT PLGA/NMP配方的柳菩林（leuprolide)穩定度 η 主明广口、 7~ι ~---—~――—：---- 時間（月） LA-AC LA-HC1-1 LA-MS 0 100.0 100.0 100.0 1 89.3 100.0 100.0 3 100.0 100.0 100.0 6 94.1 100.0 100.0 12 88.2 100. 0 98.9 18 76Γ9~] 98.5 98. 3 己方的柳菩林(leuprolide)穩定度 時間（月） LA-AC LA-HCl-1 LA-HC1-2 1 丄 y LA-MS 0 100 — 100 100 100 1 75 99 100 95 2 78 ——^ —98 97 97 3 ~ 86 100 100 100 6 87 99 ~~~m~ 99 12 65 —89 Ί 89 89 表4與5顯示不同配方中聚合物的分子量改變。與空 戈驗相比6個月後4。〇下柳菩林（leuprol ide)乙酸鹽配 方減乂超過1 〇%，室溫下減少超過9〇%。然而，含柳菩林 (leuprolide)鹽酸鹽與甲烷磺酸鹽的配方中的pLGA分子 里即使在1 2個月後，仍與空白控制組相同。但是12個月 37 1166-8751~PF;Ahddub 200831131 後，空白控制組與含柳菩林酸鹽與曱烷磺 酸鹽的配方有超過90%聚合物衰解。結果指出以如HC1及 甲烷磺酸等強酸形成的柳菩林（丨eupr〇丨i de)鹽完全避免溶 液中肽與PLGA間的交互作用/反應。而若為弱酸如乙酸， 則無法避免DMS0溶液中肽與pLGA間的嚴重交互作用/反 應。因此’使用與強酸形成的肽鹽改善此配方的穩定度， 可製造具有滿意儲存穩定度至少一年的已可使用 (ready-to-use)可注射組成物。 表4不同ϊ 配方在4°C] plga配方分子量 時間（月） 空白試驗 LA-AC LA-HC1-1 LA-MS 0 24655 23842 24369 24556 1 25214 24282 25203 24574 3 24567 22775 24833 24833 6 23935 21957 24661 24034 12 23905 18906 23837 23393 18 22178 16107 22802 22227 表5不同配方在室溫下經時的PLGA配方分子量 時間（月） 空白試驗 LA-AC LA-HC1-1 LA-HC1-2 LA-MS 0 24655. 0 24282 24567 24468 24468 1 24282. 2 20526 25022 25022 24832 2 22969· 3 15459 23230 23230 22969 3 23227. 7 11073 23228 23311 21872 6 ND 3409 18998 17952 15114 12 3112.3 380 4236 3388 2531 實施例9 柳菩林（1 eupro 1 i de )與聚合物在可注射聚合組 成物中的穩定性 將帶有月桂酯端基且具有乳酸比甘醇酸為85/15比例 的聚（DL-乳酸-甘醇酸）共聚物（PLGA)(DLPLG85/15， IV: 0· 28)溶於二甲基砜（DMS0)，成50重量％溶液。將DMS0中 1166-8751-PF;Ahddub 38 200831131 的PLGA >谷液混合柳菩林(leupr〇lide)鹽，形成如表6之比 例的單-型態可注射組成物。使用氣密式微量管 Hock tip)將此等可注射組成物填充於"汕聚丙稀 注射器中。然後用氣密式微量蓋(lue卜1〇ckcap)密封此等 預先填充的注射器。將此等加蓋的注射器在真空中包裝於 一容器中，密封於塑膠袋，存於4°C與室溫（〜22。〇下，直 到1 6個月。此可注射組成物在預定時間點抽樣檢查。以 HPLC確認樣本中柳菩林（leupr〇lide)純度。聚合物分子量 則以已知分子量的聚苯乙烯標準值之膠穿透層析法（Gpc) 確認。 表6測試的可注射聚合組成物 樣本 1印菩林（leuprolide)鹽 (mg) DLPLG 8515 in DMSO (mg) (%，w/w) 空白試驗 0 4000 \ ^ v7 .冒軍 / ¥f y 〇 LAAc 200.4 4788 l LAMS~3 200· 0 4806 4 LAHC1-3 「 202· 8 4810 4 此實施例出乎意表地發現使用柳菩林（丨印叩““幻鹽 酸鹽與甲烷磺酸鹽取代乙酸鹽時，在4t：下經時會減少 DMSO中PLGA溶液的柳菩林（1 eUpro 1 i心）與聚合物的崩 解。第1圖與第2圖各顯示在4°C下經時DMSO中PLGA溶 液的柳菩林（1 euprο 1 i de )的崩解。在1 6個月後，柳菩林 (leuprolide)乙酸鹽的情形中高達約 20%柳菩林 (leuprolide)衰解，而含柳菩林〇eupr〇nde)鹽酸鹽與甲 烷磺酸鹽的配方中，低於5%柳菩林（leuprol ide)衰解。第 5圖顯示不同配方中PLGA分子量的變化。與空白試驗比 1166-8751-PF;Ahddub 39 200831131 車父’ 16個月後柳菩林（leuprol ide)乙酸鹽配方的PLGA分 子里在4 C下減少約40%。柳菩林（1 eupro 1 i de)鹽酸鹽與柳 菩林（leuprol ide)甲烷磺酸鹽配方的PLGA分子量在16個 月後，4°C下仍與空白試驗組相近。結果指出以如{JC1及甲 烧石頁酸等強酸形成的柳菩林（leuprol ide)鹽幾乎完全避免 DMS0溶液中肽與PLGa間的交互作用/反應。而若為弱酸如 乙酸，則無法避免DMS0溶液中肽與PLGA間的嚴重交互作 用/反應。 _ 貝施例1 0生體内（i/7 ro)柳菩林（1 eupro 1 i de)自可注 射聚合組成物中的釋放 準備如下的三種聚合物載體溶液··具有月桂酯端基的 PLG 85/15(0· 28 IV)，溶於 NMP 呈 50 重量 ％與 55 重量 ％ ; 以及具有羧酸端基的RG503，溶於NMP呈50重量％。各取 適量柳菩林（leuprolide)鹽酸鹽（LAHC1)及柳菩林 (leuprol ide)甲烷磺酸鹽（LAMS)與聚合物溶液混合各呈6 書 重量％。完全混合配方獲得單一型態配方。 取該配方懸浮液（約l〇〇mg)的部分（al iqu〇t)注入3了 C、ρΗ7· 4、具有0.1%疊氮鈉的3mL鱗酸緩衝液生理食鹽 水溶液。在選擇的時間點將此得液體以新鮮緩衝溶液取 代，移除的緩衝溶液以PH7.4磷酸缓衝液稀釋兩倍，經HpLC 分析藥劑濃度。計算每個時間點的釋放量。第3圖顯示不 同配方經時的柳菩林（leupr〇l ide)累積釋放。 如第3圖顯示，LAHC1與LAMS間柳菩林（leupr〇lide) 釋放量沒有顯著差異。但是PLGA的型態與濃度似乎明顯影 1166-8751-PF;Ahddub 40 200831131 響柳菩林（leuprolide)的釋放。RG503配方較PLG85/15配 方的柳菩林（leuprol ide)釋放率快得多。因此，rG5〇3配 方可能適合柳菩林（leuprolide)短程傳遞，而PLG85/15配 方適合用於該肽長程傳遞。該肽的釋放率亦可進一步以改 變PLGA濃度來修改。當PLG85/15濃度由50%增加到55%， 柳咅林（leuprol ide)的起始釋放率明顯減少。因此，使此 狀達到所欲釋放狀態的特定配方參數可容易由簡單實驗獲 得。 實施例11賦形劑對生體外（//? 柳菩林 (leuprol ide)釋放的影響 具有與不具有賦形劑之聚合物載體溶液如下製造··根 據表7適當量，準備溶於NMP的具有月桂端基的pu 100DLPL(0.26 IV，Lakeshore，AL)，以及維生素 e TPGS。 將適當量柳菩林（ieuprol ide)鹽酸鹽（UHC1)與聚合物溶 液混合呈1 5重量％。完全混合配方獲得單一型態配方。

^-1一y形劑對生體外柳菩生(1 eupr 〇 lide)釋放的影響 取邊配方懸洋液（約100mg)的部分（al丨叫〇ΐ)注入μ °c、ΡΗ7.4、具有〇. 1%疊氮鈉的3mL磷酸緩衝液生理食鹽 水溶液。在選擇的時間點將此得液體以新鮮緩衝溶液取 代，移除的緩衝溶液以ρΗ7·4 pBS稀釋1〇倍經HpLc分 析藥劑濃度。計算每個時間點的釋放量。g 4圖顯示不二 配方經時的柳菩林（leupr〇lide)累積釋放。 1166-875l-PF;Ahddub 41 200831131 /如第4圖顯示’維生素ETPGS的加入並不影響起使的 衝出釋放里，但在稍後階段似乎會降低柳菩林（kupr〇1 ide) 釋放率。因此，維生素E TPGS可用於延長該肽的傳遞，亦 可作為抗氧化劑。 貫施例12賦形劑對生體外（//? haw柳菩林 (leuprolide)釋放的影響 具有與不具有賦形劑之聚合物載體溶液如下製造：根 據表8適當量，準備溶於NMp的具有月桂端基的pLA 100D040(0· 34 IV，Durect，CA)，以及中鏈三酸甘油酯 Miglyol 812。將適當量柳菩林（ieupr〇1 ide)鹽酸鹽（lahci) 契承&物溶液混合呈1 5重量％。完全混合配方獲得單一型 態配方。 eupr〇i i de)釋放的影響 ~~g^-100D0I^r~NMP ⑻~~ ~~4^5 〇- 42·5~ΙΙΓ~3“ 一Γ2 ~- '" ----—

取該配方懸浮液（約100mg)的部分（aliquot)注入37 c、pH7_ 4、具有0.1%疊氮鈉的3mL磷酸緩衝液生理食鹽 水溶液。在選擇的時間點將此得液體以新鮮緩衝溶液取 代，移除的緩衝溶液以pH7. 4 PBS稀釋1〇倍，經HPLc分 析藥劑濃度。將每個時間點的釋放量再以標準曲線計算。 苐5圖顯示不同配方經時的柳菩林（1 eUpr〇 1 i de )累積釋 放0 如弟5圖顯示，M i g 1 y〇 1 812的加入明顯減少柳菩林 (leuprolide)的起使衝出釋放量，且在稍後階段仍維持柳 1166-8751~PF;Ahddub 42 200831131 ，。林（leuprolide)的釋放率。因此，Migly〇1 812可作為 延長該肽的傳遞。相較於實施例i丨的結果，此聚合物的分 子里亦明顯影響柳菩林（丨eupr〇1 ide)的起使衝出釋放量。 似乎是越小PLA分子量，柳菩林（leupr〇Hde)的起使衝出 釋放量越小。 貝施例1 3生體内（i/7 n 柳菩林（1 euproli de)的釋放 將帶有月桂醋端基且具有乳酸比甘醇酸為85/1 5比例 的聚（DL-乳酸-甘醇酸）共聚物（pLGA)(DLpLG85/15， 馨0·28)溶於N—曱基-2-吼咯酮（NMP)，成55重量％溶液。將 NMP中的PLGA >谷液混合柳菩林（1 eUpr〇i丨仏）鹽，即柳菩林 (leuprol ide)鹽酸鹽與甲烷磺酸鹽，形成約12%藥劑負荷 的單一型態可注射組成物。使用氣密式微量管（luer—1〇ck tip)將此等可注射組成物填充於連接19號薄壁針的i. 2ml 聚丙烯注射器中。然後將各配方以每群6隻皮下注入大鼠 約100 // L。注射後收集3小時、1、3、7、14、28、42、 _ 56 70 天後的血清樣本。以 peninsuiaLab〇rat〇ries Inc. 出產套組的EL ISA分析血清樣本的柳菩林（1 eUpro 1丨de )濃 度。以HPLC分析不同時間該植入物中殘餘的柳菩林 (leuprolide) 〇 第6圖顯示高達70天的兩配方之柳菩林（leuproi ide) 釋放狀態。兩配方皆顯示柳菩林（leuprolide)起始衝出釋 放量。含LAHC1配方在3小時達到Cmax 661. 6ng/mL，含LAMS 配方在3小時達到Cmax 370. 6ng/mL。兩配方皆顯示長時間 的柳菩林（leuprol ide)持續釋放。相較含LAHC1配方，含 H66~87 51-PF;Ahddub 43 200831131 LAMS配方顯示柳菩林（leUpr〇l ide)更持續的血清濃度。 實施例14生體内（//? r/ro)柳菩林（leUpT〇i ide)的釋放 將帶有1，6-已二醇部分且具有乳酸比甘醇酸為85/15 比例的聚（DL-乳酸-甘醇酸）共聚物（DLPlg85/15，IV: 0.27) 溶於N -甲基-2-吼洛酮（NMP)，成50重量％溶液。將NMP中 的PLGA溶液混合柳菩林（ι6ι1ρΓ〇ΐΗ6)鹽，即柳菩林 (leuprolide)鹽酸鹽與甲烷磺酸鹽，形成約12%藥劑負荷 的單一型態可注射組成物。使用氣密式微量管（luer_1〇ck 籲 t i P)將此等可注射組成物填充於連接1 9號薄壁針的1. 2m 1 聚丙烯注射器中。然後將各配方以每群6隻皮下注入大鼠 約1 0 0 // L。注射後收集每隻動物3小時、1、3、7、14、 28、42、56、70、91、112、133、154、175、206 天後的 血清樣本。以Peninsula Laboratories Inc·出產套組的 ELISA分析血清樣本的柳菩林（leupr〇lide)濃度，以及 LC/MS/MS分析睪固酮濃度。以fjPLC分析不同時間該植入 • 物中殘餘的柳菩林（1 euprο 1 i de)。 使用其他LHRH類似物如布色瑞林（buserelin)，蒂斯 羅瑞林（deslorelin)，芙泰瑞林（fertireiin)，希斯吹林 (histrelin)，路吹林（iutrelin)，格賽瑞林（g〇serelin)， 那伐瑞林（nafarelin)，崔普托瑞林（tript〇relin)，赛卓 瑞里克希（cetrorelix)，阿巴瑞里克希（abarelix);以及其 他肽如GLP-1，PYY等，以及其他聚合物與溶液，設計相似 實驗。 實施例15穩定的可注射聚合組成物之使用 1166-8751-PF;Ahddub 44 200831131 投藥患者該穩定的可注射聚合組成物可有多種方法。 可皮下或肌肉内注射生物可分解性聚合組成物，原位形成 一植入物，施予如穿皮乳霜，亦可經由直腸或陰道栓塞劑 投與患者。 實施例1 6 含LAHC1聚合物微球體之製造 使用水包油（0/W)單一乳化技術製造聚（乳酸—甘醇酸） 共聚物（PLGA)微球體。將PLGA溶於氯化甲烷（DCM)。關於 包裹LAHC1，將本藥劑與DCM中PLGA溶液混合。將此混合 _ 溶液或懸浮液乳化於在4°C冷凍庫預冷的500mL、0. 5-1% (¥/¥)?¥人（？¥人，88%經水解，平均分子量31，〇〇〇 — 5〇,〇〇0, Sigma-Aldrich)。RT下連續攪拌此乳化液3h，蒸發DCM。 收集硬化的微球體’以無離子水清洗3次，然後冷〉東乾燥。 實施例1 7 穩定的可注射聚合組成物用於製造可植入聚合 物基質 由乳酸比甘醇酸50:50-1 00:0的聚（乳酸—甘醇酸）共 鲁聚物組成之生物可分解性聚合物，如RG503H(Boehringer Ingelheim Chemicals, Inc· USA)，溶於揮發性有機溶劑， 如乙酸乙醋或氣化曱烷。取如上定義之適量益鹽如格賽瑞 林（goserelin)甲烷磺酸鹽（此聚合物的〇·〇1% —3〇重量 溶於/分散於此聚合溶液中。完全混合此溶液，獲得單一型 態的溶液或懸浮液。混合完全後，蒸發移除溶劑。經喷霧 乾燥過程，形成小的單一型態顆粒用於注射。亦可在禱模 中形成一植入物。所得聚合物基質亦可研磨成粉末，調配 成可注射懸浮液。 1166-8751-PF;Ahddub 45 200831131 因此’得到的固體劑型可皮下或肌肉内注射，或可在 皮膚下手術植入一植入物，或以口服肽劑部分口傳遞系 此□體微顆粒亦可製成懸浮液或非水溶液，亦可肺藥 劑傳遞經呼吸投藥患者。亦可使該微顆粒懸浮於油中，經 直％或陰道塞劑投與患者。 【圖式簡單說明】 弟1圖為4°C下1 R η ^

— 下16個月後，配方中LA的穩定度。 第2圖為4°C下16個曰1 ^ 月後，配方中PLGA分子量。 苐3圖為plga的型能访曲 Μ ^ ^ α ” 浪度對柳菩林（leuprolide) 釋放的影響。 7 第4圖為維生素e對可 外Γ 」庄射組成物中LA釋放的影塑。 弟5圖為可注射組成 曰 -,τ. ^ 物中’ Mygiy〇i 812對可注射组 成物中LA釋放的影響。 町、、且

可注射聚合組成物的LA 第6圖為在大鼠SC投藥後 釋放狀態。 【主要元件符號說明】 Ο U66-8751-PF;Ahddub

Claims (1)

1. 200831131 十、申請專利範圍： 1. 種可注射聚合組成物，包括： a) 種與強酸形成之肽劑鹽，該強酸選自鹽酸、氫溴 酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、鉻酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺 酸、二氣乙酸、二氯乙酸、溴乙酸、氯乙酸、氰酸、2一氣 丙酸、2-酮丁酸、2 —氯丁酸、4—氰丁酸、過氯酸及磷酸； b) —生物可分解聚合物； c ) 一樂學可接受有機溶劑，可溶解生物可分解性聚合 齡物，並在水溶液或生物體液中可混溶或分散；以及 d)選擇性地一或多種藥學可接受賦形劑。 2 ·如申明專利範圍第丨項之可注射聚合組成物，其可 為溶液、懸浮液、膠體或半固體的形式。 3·如申明專利範圍帛！項之可注射聚合組成物，其中 该肽劑包含至少一個驗胺基。 4.如申請專利範圍第！項之可注射聚合組成物，其中 _為肽>^自催產素、A管收縮素、腎上腺皮質激素⑽別）、 上皮生長因子（EGF)、血小板衍生生長因子（p])GF)、催乳激 素促尹'體激素促黃體激素釋放激素（匕顧）、通η激動 d LHRHt机j、生長激素、生長激素釋放因子、胰島素、 促紅血球生長素、生長激素釋放抑制因子 (S〇mat〇Statin)、昇糖素、間白素、干擾素《、干擾素万、 干擾素r、胃激素、四胃激素、五胃激素、尿抑胃素、小 腸内泌素、降血料、腦啡*(enkephaiins)、腦内啡、血 管收縮素、促甲狀腺素釋放激素⑽）、腫瘤壞死因子 1166-8751-PF;Ahddub 、 . „ 200831131 • (TNF)、副曱狀腺素（ρτΗ)、神經生長因子（ngf)、粒狀血球 一菌落刺激因子（G-CSF)、粒狀血球巨噬細胞—菌落刺激因子 (GM-CSF)、巨噬細胞—菌落刺激因子（m_csf)、肝素酶、血 官内皮生長因子（VEG-F)、骨形態發生蛋白（腿p)、hANp、 類昇糖素肽（GLP-1)、依克那肽（exenatide)、肽γγ(ργγ)、 腎酵素、血管舒緩激酶、桿菌敗、多黏菌素、粒菌素、短 才干囷赂肽、滅革蘭菌素、環孢菌素、細胞激素、抗體、疫 苗、抗生物素、抗體、醣蛋白、促印泡激素、京都酚 • (kyotorphin)、泰福特新（taftsin)、胸腺聚狀激素 (thymopcnetin)、胸腺素、胸腺刺激素（thym〇stimuiin)、 胸腺體液因子、血清胸腺因子、菌落刺激因子、胃動素、 鈴蟾肽（bombesin)、蒂諾分（din〇rphin)、神經緊張肽、蛙 皮縮膽囊肽（cerulein)、尿激酶、激肽釋放酶、物質p類 似物及拮抗物、血管收縮素π、血液凝結因子νπ與ιχ、 滅革蘭菌素、黑色素刺激激素、甲狀腺素釋放激素、甲狀 φ腺素刺激激素、腸促胰酶素、縮膽囊素、人胎盤催乳激素、 人絨毛膜促性腺激素、蛋白合成刺激肽、胃抑制肽、腸血 管肽、血小板衍生生長因子、及此等之合成類似物及藥學 活性片段。 5. 如申請專利範圍第丨項之可注射聚合組成物，其中 該狀劑具有非初級胺的氮端。 6. 如申請專利範圍第5項之可注射聚合組成物，其中 該肽劑選自促黃體激素釋放激素（LHRH)、LHRH類似物、拮 抗劑、及激動劑。 1166-8751-PF;Ahddub 48 200831131 7 ·如申請專利範圍第5項之可注射聚合組成物，其中 該肽劑選自路普羅瑞林（leuprorelin)，布色瑞林 (buserel in)，垢那朵瑞林（2〇1^(1虹七1111)，蒂斯羅瑞林 (deslorelin)，芙泰瑞林（fertirelin)，希斯吹林 (histrelin)’ 路吹林（lutrelin)，格賽瑞林（goserelin)， 那伐瑞林（naf arel in)，崔普托瑞林（triptorel in)，賽卓 瑞里克希（cetrorelix)，因弗費泰德（enfuvirtide)，胸腺 素（thymosin) α 1，及阿巴瑞里克希（abareiix)。 8·如申請專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其中 該肽劑具有以親水性部份共價修飾的氮端初級胺基及/或 侧鏈初級胺。 9·如申請專利範圍第8項之可注射聚合組成物，其中 該親水性部分包括任何水溶性的直鏈或分支鏈寡聚物或聚 合物’邊合物的分子量為約5 0 0達頓（d a 11 ο η )至約 5 0，0 0 0 達頓。 I 0.如申請專利範圍第8項之可注射聚合組成物，其中 該親水性部分為聚乙二醇及/或其衍生物。 II ·如申請專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其中 該肽劑具有以親脂性部份共價修飾的氮端初級胺基及/或 侧鏈初級胺。 12.如申請專利範圍第11項之可注射聚合組成物，其 中該親脂性部份選自C2-39-烷基、C2-39-烯基、C2-39-二烯基、 以及固醇殘基。 1 3·如申請專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其中 1166-8751-PF;Ahddub 49 200831131 該狀劑為該組成物約〇· 01重量％-約40重量％。 4 ·如申明專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其中 .亥生物可为解性聚合物選自聚内酯、聚甘醇酸、聚(乳酸— 甘醇so共聚物、聚己内酯、聚二噁酮（p〇lydi〇xan〇nes)、 :長碳酸酯、聚羥丁，、聚烷烯草酸醋、聚酸酐、聚醋醯胺、 水胺基甲酸酯、聚縮醛、聚鄰碳酸酯、含氟聚磷丐 (polyphosphazenes)、聚羥戊酸酯、聚烷烯琥珀酸酯、聚 鄰酷、以及共聚物、嵌段共聚物、分支共聚物、三元共聚 _物及此等之組合與混合物。 1 5·如申請專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其中 口亥生物可分解性聚合物為具有乳酸對甘醇酸單體比為約 50.50至約1〇0:0、以及平均分子量為約2,〇〇〇-約ι〇〇,〇〇〇 之聚（乳酸-甘醇酸）共聚物。 1 6.如申請專利範圍第1 5項之可注射聚合組成物，其 中該聚（乳酸—甘醇酸）共聚物包含經端基、魏端基、或酯端 基。 17·如申請專利範圍第15項之可注射聚合組成物，其 中該XK (礼酸—甘醇酸）共聚物包含一單官能性醇殘基或聚 醇殘基但不具有羧酸端。 18_如申請專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其中 忒生物可分解性聚合物為該組成物約3〇重量重量％。 19 _如申請專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其中 該藥學可接受有機溶劑選自N一甲基—2-吡咯酮、二曱基砜、 正甘油（glycerol f0rmal)、克來寇弗羅（glyc〇fur〇1)、曱 1166~8751-PF；Ahddub 50 200831131 氧基聚乙二醇350、烷氧基聚乙二醇、聚乙二醇酯、苄基 笨甲酸酉曰、乙基苯甲酸酯、檸檬酸酯、三醋精（t iacet in)、 一醋精（diacetin)、檸檬酸三乙酯、三乙基檸檬酸乙酯、 及此等混合物。 20·如申請專利範圍第i項之可注射聚合組成物，其中 «亥Ικ學可接文有機溶劑為該組成物約重量％ —go重量％。 21 ·如申請專利範圍第i項之可注射聚合組成物，其更 進一步包括一或多種的釋放速率調整劑。 22·如申請專利範圍第21項之可注射聚合組成物，其 中該釋放速率調整劑選自烷羧酸、油酸、烷基醇、極性脂 貝、介面活性劑、聚乙二醇與聚乳酸的共聚物或聚乳酸甘 醇文/、χΚ物、普盧聚合物（p〇l〇xamers)、聚乙稀吼略酮、 聚山梨糖醇、2-乙氧基乙酸乙酯、三醋精（triacetin)、檸 檬&L 一乙g曰、乙酸檸檬酸三丁酯、乙酸擰檬酸三乙酯、甘 油二乙酯、二（n—丁基）癸二酸酯、聚乙二醇、山梨糖醇、 二酸甘油酯、中級鏈三酸甘油酯、及此等混合物。 23·如申請專利範圍第〗項之可注射聚合組成物，其更 進一步包括一或多種的緩衝劑。 24.如申請專利範圍第23項之可注射聚合組成物，其 中4緩衝劑選自碳酸鈣、氫氧化鈣、肉莖蔻酸鈣、油酸鈣、 棕櫚酸鈣、硬脂酸鈣、磷酸鈣、碳酸鎂、氫氧化鎂、磷酸 鎂、肉菫蔻酸鎂、油酸鎂、棕櫚酸鎂、硬脂酸鎂、碳酸鋅、 氫氧化鋅、肉苴蔻酸鋅、油酸辞、棕櫚酸鋅、硬脂酸鋅、 石森酸鋅、及此等之組合。 ll66'875l~PF;Ahddub 51 200831131 25·如申請專利範圍第1項之可注射聚合組成物，其更 進一步包括一或多種的抗氧化劑。 2 6 ·如申請專利範圍第2 5項之可注射聚合組成物，其 中該抗氧化劑選自d- α生育紛乙酸酯、敗血酸棕櫚酸酯、 丁基化私香酸酯（hydroxyanidole)、丁基化經苯甲鱗、 丁基化說奎酮、羥香豆熹、丁基化羥二甲苯、沒食子酸乙 酉旨、沒食子酸丙酯、沒食子酸辛酯、沒食子酸月桂酯、丙 基經基苯甲酸酯、三羥基丁醯苯酮、維生素E、peg化維生 素E及維生素E-TPGS。 27· —種可注射聚合組成物，包括： a) LHRH拮抗劑或激動劑之鹽酸鹽或曱烷磺酸鹽； b) 聚（乳酸-甘醇酸）共聚物，其中該共聚物中的乳酸： 甘醇酸比為5 0 : 5 0 -約1 〇 〇 : 〇 ; c) N-曱基-2-吡咯酮（NMP);以及 d) 三酸甘油自旨及/或維生素e或其衍生物。 28·如申請專利範圍第27項之可注射聚合組成物，其 中該LHRH拮抗劑或激動劑選自路普羅瑞林 (leuprorelin)，布色瑞林（busereHn)，祐那朵瑞林 (gonadorelin)，蒂斯羅瑞林（desi〇reiin)，芙泰瑞林 (fertirelin) ’ 希斯吹林（histreiin)，路吹林 (lutrelin)，格賽瑞林（g〇serelin)，那伐瑞林 (nafarelin)，崔晋托瑞林（tripforeiin)，賽卓瑞里克希 (cetrorelix) ’ 因弗費泰德（enfuvirtide)，胸腺素 (thymosin)a 1，或阿巴瑞里克希（abareHx)。 1166-8751-PF;Ahddub 52 200831131 29. —種肽劑鹽之製造方法，包括使肽劑游離基溶於媒 介液體，形成溶液，以及混合此溶液與強酸水溶液，形成 該肽劑鹽之步驟。 3〇· 一種肽劑鹽之製造方法，包括： a)使與揮發性弱酸形成的第一肽劑鹽溶於適當媒介液 體中，形成溶液； b )混合此溶液與強酸水溶液，形成混合物； c)移除此混合物中的溶劑；以及 d )移除該弱酸，形成第二肽劑鹽。 31 · —種可注射聚合組成物之製造方法，以形成傳遞個 體肽劑治療量的持續控制釋放系統，包括以下步驟： a·使生物可分解性聚合物溶於藥學可接受有機溶劑 中； "" b ·將與強酸形成的肽劑鹽與步驟a )聚合物溶液組合及 混合形成可注射組成物； 其中該強酸選自鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、 鉻酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸、三氯乙酸、二氯乙酸、 溴乙酸、氯乙酸、氰乙酸、2—氯丙酸、2 —酮丁酸、2—氯丁 酸、4-氰丁酸、過氯酸及磷酸。 32. 如申請專利範圍第31項之方法，其中該生物可分 解性聚合物與一或多種藥學可接受賦形劑溶於藥學可接= 有機溶劑中。 1 33. —種生物體内原位（/厂5^ 形成植入物之方法， 包括： 1166-8751-PF;Ahddub 53 200831131 a·投與個體可注射聚合組成物，該組成物包括與強酸 形成的肽劑鹽、生物可分解性聚合物、藥學可接受有機溶 劑、以及選擇性地一或多種藥學可接受賦形劑； b·消除該組成物中的該藥學可接受有機溶劑，形成生 物可分解性植入物； 乂 其中該強酸選自鹽酸、氫漠酸、氫峨酸、硫酸、确酸、 鉻酸、甲烷磺酸、三氟曱烷磺酸、三氯乙_* 欠 —氟乙酸、

   漠乙酸、氯乙酸、t乙酸、2—氯丙酸、2_g同丁酸、2—氯丁 酸、4-氰丁酸、過氯酸及磷酸。 34.如申請專利範圍第33項之 万忐其中該可注射臂 合組成物為皮下投藥。 τ + 該可注射聚 35·如申請專利範圍第33項之方法，其中 合組成物為肌肉下投藥。

   36. 一種作為持續控制釋放系统之聚合組 方法，以傳遞個體肽劑治療量，包括 a ·使生物可分解性聚合物溶於有 b.使與強酸形成之肽劑鹽溶於戈 物溶液，形成單一型態配方；以及 成物的製造 機溶劑中 懸浮於步 驟a)之聚合 c.形成微顆粒或奈米顆粒 可分解性聚合物； 包括包裹該 狀劑的該 生物 、氫碘酸、# _ L酉欠、硝酸、 二氯乙酸、—& —氣乙酸、 酸、2 —_ 丁酴0 ^、2-氯丁 其中該強酸選自鹽酸、氫溴酉楚 鉻酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸、 溴乙酸、氯乙酸、氰乙酸、2~氯兩 酸、4-氰丁酸、過氯酸及磷酸。 1166-8751-PF;Ahddub 54 200831131 37.-種作為控制釋放系統之聚合組成物的製造方 法’以傳遞個體肽劑治療量，包括： a. 使生物可分解性聚合物溶於有機溶劑中，· b. 使與強酸形成之肽劑鹽溶於或懸浮於步人 物溶液，形成單一型態配方；以及 a 口 C·形成固體聚合物基質，包括包寡 分解性聚合物； …肽劑的該生物可 其中該強酸選自鹽酸、氫漠酸、氫峨酸、硫酸、硝酸、 鉻酸、甲燒續酸、三氟甲炫續酸、三氯乙酸、二氣乙酸、 溴乙酸：氯乙酸、以酸、2-氯丙酸、2_酮丁酸：心； 酸、4-氰丁酸、過氯酸及磷酸。 38.如申請專利範圍第37項之方法，其中該固體聚合 物基質為微顆粒、奈米顆粒、桿、薄膜、研磨顆 或晶圓型態。 ，其中該固體聚合 眼部投藥；皮下或

   39·如申請專利範圍第38項之方法 物基質適合非經腸胃投藥；黏膜投藥； 肌肉内注射或插入；或吸入。 1166-8751-PF;Ahddub 55