SK9212003A3 - Pharmaceutical dosage forms of epothilones for oral administration - Google Patents

Description

Predložený vynález sa týka spôsobov orálneho podávania epotilónov pacientovi spôsobom, ktorý zvyšuje biologickú dostupnosť. Tento vynález sa ďalej týka farmaceutických prostriedkov, farmaceutických dávkových foriem a kitov na použitie pri spôsoboch podľa tohto vynálezu. Predovšetkým sa tento vynález týka tuhej orálnej dávkovej formy epotilónu.

Doterajší stav techniky

Epotilóny sú 16-členné makrolidové molekuly, ktoré majú využitie v oblasti farmácie. Napríklad epotilón A a epotilón B sú prirodzene sa vyskytujúce zlúčeniny, ktoré možno izolovať z istých mikroorganizmov, tieto dve zlúčeniny majú nasledujúce vzorce:

Epotilón A R = H

Epotilón B R = Me

Od zavedenia epotilónov do odboru mnoho skupín odborníkov navrhlo, syntetizovalo a testovalo analógy prirodzene sa vyskytujúcich epotilónov v snahe vyvinúť užitočné farmaceutiká (pozri napr. D. Schnizer a koľ, Agew. Chem. Int. Ed.

Engl., 36(3), 523 až 524 (1997), K. C. Nicolaou a kol., J. Amer. Chem. Soc., 119,

7974 až 7991 (1997), K. C. Nicolaou a kol., Agew. Chem. Int. Ed. Engl., 35(20), 2399 až 2401 (1996), A. Balog a kol., Agew. Chem. Int. Ed. Engl., 35(23/24), 2801 až 2803 (1996)).

Známe epotilóny vykazujú mikrotubuly stabilizujúce účinky podobné účinkom paklitaxelu (TAXOL®) a teda cytotoxickú aktivitu voči rýchlo proliferujúcim bunkám, ako sú tumorové bunky alebo iné hyperproliferatívne bunkové choroby (pozri Agew. Chem. Int. Ed. Engl., 35(13/14), 1567 až 1569 (1996) a D. M. Bollag, Exp. Opin. Invest. Drugs, 6(7), 867 až 873 (1997)).

Deriváty a analógy epotilónu A a epotilónu B možno použiť na liečenie mnohých rakovín a ďalších chorôb s abnormálnou proliferáciou. Takéto analógy sú opísané v Hofle a kol., Agew. Chem. Int. Ed. Engl., 35(13/14), 1567 až 1569 (1996), Nicolaou a kol., Agew. Chem. Int. Ed. Engl., 36(19), 2097 až 2103 (1997) a Su a kol., Agew. Chem. Int. Ed. Engl., 36(19), 2093 až 2097 (1997).

Predtým, ako možno epotilóny použiť na liečenie chorôb pacientov sa však musia formulovať do farmaceutického prostriedku, ktorý možno pacientovi podať, napríklad do dávkovej formy vhodnej na orálne, slizničné (napr. nazálne, sublingválne, vaginálne, bukálne alebo rektálne), parenterálne (napr. subkutánne, intravenózne, bolusové injekčné, intramuskulárne alebo intraarteriálne) alebo transdermálne podanie. Prostriedky na orálne podanie sú najmä výhodné, pretože sú bežnejšie a ľahšie sa podávajú ako iné prostriedky. Orálna cesta podania tiež zamedzuje vzniku bolesti a nepohodlia, ktoré je spojené s parenterálnym podaním. Prostriedky na orálne podanie sú teda pre pacientov výhodné a vedú k lepšej kompliancii pacienta s dávkovacími schémami.

Užitočnosť orálneho prostriedku však vyžaduje, aby aktívna látka bola biologicky dostupná. Biologická dostupnosť orálne podávaných liečiv je ovplyvnená rôznymi faktormi, vrátane napríklad absorpcie liečiva v gastrointestinálnom trakte, stability liečiva v gastrointestinálnom trakte a efektu prvého priechodu (first pass effect). Účinné orálne podanie aktívnej látky vyžaduje, aby aktívna látka mala dostatočnú stabilitu v žalúdku a črevnom lúmene, aby prešla intestinálnou stenou.

Mnohé liečivá však majú sklon v intestinálnom trakte rýchlo degradovať alebo majú zlú absorpciu v intestinálnom trakte, takže orálne podanie nie je účinným spôsobom podávania liečiva.

Farmaceutické prostriedky určené na orálne podanie sú zvyčajne v tuhej dávkovej forme (napr. tablety) alebo ide o kvapalné prostriedky (napr. roztoky, suspenzie alebo elixíry). Tuhé dávkové formy však môžu predstavovať obmedzenia farmaceutického použitia aktívneho činidla, pretože niektoré populácie pacientov majú ťažkosti, buď fyzické alebo psychické, pri prehítani orálnych dávkových foriem. Pokiaľ je dostupná kvapalná dávková forma môžu títo pacienti ľahšie užiť potrebnú dávku aktívnej zložky tak, že sa podá vo forme orálneho kvapalného prostriedku, ktorý môžu vypiť alebo sa podá napríklad nazogastrickou sondou. Kvapalné orálne dávkové formy sú teda žiaduce.

Kvapalné orálne farmaceutické prostriedky vyžadujú vhodné rozpúšťadlo alebo nosičový systém na rozpustenie alebo dispergáciu aktívneho činidla na umožnenie podania prostriedku pacientovi. Rozpúšťadlový systém musí byť kompatibilný s aktívnym činidlom a musí byť pre pacienta netoxický. Zvyčajne je rozpúšťadlom pre kvapalné orálne prostriedky rozpúšťadlo založené na vode.

Formulácia istých epotilónov predstavuje ťažkosti okrem zvyčajných prekážok spočívajúca v tom, že isté epotilóny sú buď labilné v kyslom prostredí a/alebo zle rozpustné vo vodnom prostredí, čo je pre orálne roztoky prostredie prvej voľby. Predložený vynález však tieto ťažkosti prekonáva a poskytuje spôsoby a farmaceutické prostriedky na orálne podanie epotilónov, kde epotilóny sú dostatočne biologicky dostupné na to, aby mali farmakologický účinok.

Podstata vynálezu

Predložený vynález zahŕňa spôsob orálneho dodávania epotilónov cicavcovi pričom znižuje alebo vylučuje degradáciu, dekompozíciu alebo deaktiváciu epotilónu gastrointestinálnym systémom, najmä žalúdočnými kvapalinami v žalúdku. V jednom uskutočnení tento spôsob zahŕňa podávanie epotilónu vo farmaceutický prijateľnom kyseliny neutralizujúcom pufri alebo s ním. Vo výhodnom uskutočnení podania zahŕňa použitie dvoch roztokov, jedného obsahujúceho aktívny epotilón samotný alebo vo farmaceutický prijateľnom nosiči a druhého obsahujúceho farmaceutický prijateľný neutralizujúci pufor.

Tento vynález teda zahŕňa farmaceutické prostriedky obsahujúce epotilón buď v tuhej forme, ktorá je vhodná na konštitúciu alebo rekonštitúciu, pokiaľ je lyofilizovaná, vo farmaceutický prijateľnom roztoku alebo ako vopred pripravený roztok. Tento vynález tiež zahŕňa farmaceutické prostriedky obsahujúce farmaceutický prijateľný neutralizačný pufor buď v tuhej forme, ktorá je vhodná na konštitúciu alebo rekonštitúciu, pokiaľ je lyofilizovaná, vo farmaceutický prijateľnom roztoku alebo ako vopred pripravený roztok.

V špecifickejšom uskutočnení je predložený vynález zameraný na spôsoby zvyšovania biologickej dostupnosti orálne podaného epotilónu. Tieto spôsoby zahŕňajú orálne podávanie jedného alebo viacerých epotilónov všeobecných vzorcov (la) a (Ib):

(la)

(Ib) v ktorých

G je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, heterocykloskupiny,

W je atóm kyslíka alebo skupina NRi₆;

X je atóm kyslíka, atóm síry, skupina CHR₁₇ alebo atóm vodíka, Rig;

Y je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z atómu kyslíka; atómu vodíka, atómu vodíka; atómu vodíka, skupiny OR22; skupiny OR23, skupiny OR23; skupiny NOR₂₄; atómu vodíka, skupiny NOR25; atómu vodíka, skupiny HNR26R27; skupiny NHNR28R29; atómu vodíka, skupiny NHNR30R31 alebo skupiny CHR₃₂, kde skupina OR₂₃, OR23 môže byť cyklický ketal;

Β_Ί a B₂ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, skupiny OR₃₃, skupiny OCOR34, skupiny OCONR35R3S, skupiny NR37R38, skupiny NR39CONR40R41;

D je zvolený zo skupiny pozostávajúcej zo skupiny NR42R43 alebo heterocykloskupiny;

R1, R₂. R3, R₄ a Rs sú zvolené z atómu vodíka a nižšieho alkylu;

Rs, R9, R10 a Rn sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny alebo substituovanej heterocykloskupiny;

R17, R₁₈, R22 a R23 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu alebo substituovaného alkylu;

R24, R25, R26, R28, R30, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R39> R40! R4i, R42, R51, R52. R53 a R51 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu alebo substituovaného arylu,

R12, R16. R27, R29, R31, R38 a R43 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny, skupiny R₅iC=O, skupiny R₅₂OC=O, skupiny R53SO2, hydroxyskupiny a O-alkylu alebo substituovaného O-alkylu;

alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, solvátu, hydrátu, klatrátu alebo prekurzora liečiva a orálne podávanie jedného alebo viacerých farmaceutický prijateľných kyseliny neutralizujúcich pufrov.

Farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa môže podávať súčasne s podaním jedného alebo viacerých predmetných epotilónov alebo pred ním, po ňom alebo ako pred ním tak aj po ňom. Pri podaní pred aktívnym epotilónom sa farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor podá nie viac ako asi 1 hodinu pred podaním epotilónu. Pri podaní po aktívnom epotilóne sa farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor podá nie viac ako asi 1 hodinu po podaní epotilónu.

Roztok farmaceutický prijateľného kyseliny neutralizujúceho pufra, ktorým môže byť kvapalný prostriedok a ktorý sa môže konštituovať bezprostredne pred podaním, zahŕňa jednu alebo viacej zložiek, ktoré sú schopné neutralizácie kyslých roztokov, najmä žalúdočných štiav, na určitý čas. Zložky pufra zahŕňajú farmaceutický prijateľné slabé kyseliny, slabé bázy alebo ich zmesi, výpočet tým však nie je obmedzený. Výhodne sú zložkami pufra materiály rozpustné vo vode, ako je kyselina fosforečná, kyselina vínna, kyselina mliečna, kyselina jantárová, kyselina citrónová, kyselina octová, kyselina askorbová, kyselina asparágová, kyselina chlorovodíková, kyselina sírová, kyselina glutámová a ich soli.

Farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podáva v množstve dostatočnom na neutralizáciu žalúdočných štiav v žalúdku a na zvýšenie množstva epotilónu, ktorý sa v gastrointestinálnom systéme absorbuje. Farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa môže podávať ako vodný roztok, ktorý má hodnotu pH medzi asi 5 až 9. Farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa môže podávať ako vodný roztok bezvodého hydrogenfosforečnanu sodného, dihydrátu citrátu sodného alebo bezvodej kyseliny citrónovej.

Predložený vynález zvyšuje biologickú dostupnosť orálne podávaného epotilónu významne nad biologickú dostupnosť epotilónu orálne podávaného bez neutralizujúceho pufra. V jednom uskutočnení je biologická dostupnosť jedného alebo viacerých epotilónov alebo ich farmaceutický prijateľnej soli, solvátu, klatrátu, hydrátu alebo prekurzora liečiva aspoň 20 %. Jeden alebo viacej epotilónov alebo ich farmaceutický prijateľná soľ, solvát, klatrát, hydrát alebo prekurzor liečiva možno orálne podávať ako roztok v propylénglykole a etanole, napríklad roztok s pomerom propylénglykoketanol je 80:20.

Výhodným epotilónom je [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11dihydroxy-8,8,10,12,16-pentametyl-3-[1-metyl-2-(2-metyl-4-tiazolyl)etenyl]-17-oxa-4azabicyklo[14.1.0]-heptadekán-5,9-dión.

Tento vynález tiež zahŕňa kity, ktoré obsahujú prostriedok požadovaného epotilónu a rozpustného pufra. Tento vynález zahŕňa kit obsahujúci a) farmaceutický prostriedok obsahujúci epotilón, ktorý je vhodný na orálne podanie a b) farmaceutický prostriedok obsahujúci kyseliny neutralizujúci pufor, ktorý je vhodný na orálne podanie.

V jednom uskutočnení kity obsahujú:

i) prvú zložku obsahujúcu jeden alebo viacej epotilónov všeobecných vzorcov (la) alebo (lb)

G, W, X, Y, Bi, B2, D, R1, R2, R3, R4, R5, Rs, R9, R10, R11, R12, Ris, R17, Ríš, R22, R23,

R24, R25, R26, R27, R28, R29, R30, R3I, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R38. R39. R4O1 R41,

R₄₂, R43, R51, R52, R53 a R61 sú definované vyššie a ii) druhú zložku obsahujúcu farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor, kde prvá zložka a druhá zložka sú poskytnuté ako kvapalná orálna dávková forma alebo ako tuhý farmaceutický prostriedok, ktorý môže byť konštituovaný alebo rekonštituovaný pomocou rozpúšťadla na poskytnutie kvapalnej orálnej dávky.

Farmaceutický prostriedok na rekonštitúciu pomocou rozpúšťadla môže byť poskytnutý ako tableta. Prvá zložka alebo druhá zložka môžu byť bezvodé. Kit prípadne obsahuje rozpúšťadlá na rekonštitúciu prvej alebo druhej zložky. Rozpúšťadlom na rekonštitúciu prvej zložky môže byť zmes propylénglykolu a etanolu, kde pomer propylénglykoketanol je asi 80:20.

Tento vynález je ďalej zameraný na farmaceutický prostriedok obsahujúci

i) jeden alebo viacej epotilónov všeobecných vzorcov (la) alebo (Ib)

G, W, X, Y, Bi, B₂, D, R-i, R₂, R₃, R₄, R5, Rs, Rg, R10, Rn, R12, R16, R17, Ríš, R22, R23, R₂4, R₂5, P₂6, R27, R28. P₂9, R30, R3I, R3₂, R33, R34, R35. R36, R37, R 38. R39, R40, R41, R₄₂, R43, R51, Rs₂, R53 a R₆i sú definované vyššie alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva v tuhej forme a ii) farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor v množstve dostačujúcom na zníženie rozkladu jedného alebo viacerých epotilónov alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva pri rekonštitúcii farmaceutického prostriedku pomocou rozpúšťadla na poskytnutie kvapalnej orálnej dávkovej formy.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Obr. 1 Profily strednej hodnoty plazmatickej koncentrácie pre zlúčeninu (A) proti času u psov po i.v. podaní v dávke 0,5 mg/kg, -O- a po orálnom podaní 2 mg/kg roztoku,

Vertikálne stĺpce predstavujú štandardné odchýlky a sú ukázané tam, kde sú väčšie ako je veľkosť symbolu.

Obr. 2 Profily strednej hodnoty plazmatickej koncentrácie pre zlúčeninu (B) proti času u psov po i.v. podaní v dávke 0,5 mg/kg, -O- a po orálnom podaní 2 mg/kg roztoku, Vertikálne stĺpce predstavujú štandardné odchýlky a sú ukázané tam, kde sú väčšie ako veľkosť symbolu.

Detailný opis vynálezu

Na základe farmakologických prínosov epotilónov existuje potreba dávkových foriem a spôsobov podávania týchto zlúčenín tak, že budú dostatočne biologicky dostupné na dosiahnutie farmakologického účinku. Najmä existuje potreba orálnych dávkových foriem a špecifickejšie kvapalných orálnych dávkových foriem, ktoré môžu dodať množstvo epotilónu dostačujúce na liečenie choroby. Predložený vynález je sčasti založený na zistení, že epotilóny všeobecných vzorcov (la) alebo (lb):

(la) alebo

CIb) v ktorých

G je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, heterocykloskupiny,

Rs

(a)

0») □

(c)

W je atóm kyslíka alebo skupina NR16;

X je atóm kyslíka, atóm síry, skupina CHR₁₇ alebo atóm vodíka, R₁₈;

Y je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z atómu kyslíka; atómu vodíka, atómu vodíka; atómu vodíka, skupiny OR22; skupiny OR23, skupiny OR23; skupiny NOR₂₄; atómu vodíka, skupiny NOR25; atómu vodíka, skupiny HNR₂₆R₂₇; skupiny NHNR28R29; atómu vodíka, skupiny NHNR₃₀R₃i alebo skupiny CHR₃₂, kde skupina OR₂₃, OR₂₃ môže byť cyklický ketal;

Bi a B₂ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, skupiny OR₃₃, skupiny OCOR₃₄, skupiny OCONR35R36, skupiny NR₃₇R₃₈, skupiny NR39CONR40R41;

D je zvolený zo skupiny pozostávajúcej zo skupiny NR₄₂R₄3 alebo heterocykloskupiny;

R1, R2. R3, R4 a R5 sú zvolené z atómu vodíka a nižšieho alkylu;

R₈, Rg, Rw a Rn sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny alebo substituovanej heterocykloskupiny;

R₁₇, Ris> R22 a R₂₃ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu alebo substituovaného alkylu;

R24, R25, R26, R28, R30. R32, R33, R34, R35. R36, R37, R39> R40, R41, R₄2. Rsn R52, R53 a R₆₁ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu alebo substituovaného arylu,

R12· R16, R27, R29, R31, R38 a R43 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny, skupiny R₅iC=O, skupiny R₅₂OC=O, skupiny R₅₃SO₂, hydroxyskupiny a O-alkylu alebo substituovaného O-alkylu;

a ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, hydráty, klatráty alebo prekurzory liečiva, pri orálnom podaní v kombinácii s farmaceutický prijateľným kyseliny neutralizujúcim pufrom sú dostatočne biologicky dostupné na dosiahnutie farmakologického účinku. Tento vynález je teda zameraný na spôsoby zvyšovania biologickej dostupnosti orálne podávaných epotilónov všeobecných vzorcov (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, hydrátov, klatrátov alebo prekurzorov liečiva pri orálnom podávaní jedného alebo viacerých epotilónov všeobecných vzorcov (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, hydrátov, klatrátov alebo prekurzorov liečiva a orálnom podávaní farmaceutický prijateľného kyseliny neutralizujúceho pufra v kombinácii s nimi. Tento vynález sa tiež týka farmaceutických prostriedkov, farmaceutických dávkových foriem a kitov na použitie pri spôsoboch podľa tohto vynálezu.

Výhodným epotilónom na použitie v spôsoboch, prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu je [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11dihydroxy-8,8,10,12,16-pentametyl-3-[1-metyl-2-(2-metyl-4-tiazolyl)etenyl]-17-oxa-4azabicyklo[14.1.0]-heptadekán-5,9-dión (zlúčenina (A)), zobrazený ďalej:

Definície

Ďalej sú uvedené definície rôznych pojmov používaných na opis tohto vynálezu. Tieto definície sa vzťahujú na pojmy ako sú tu používané v tomto opise, pokiaľ nie je v špecifických prípadoch uvedené inak.

Ako sa tu používa, pojem alkyl” označuje nesubstituované uhľovodíkové skupiny s 1 až 20 atómami uhlíka s priamym alebo rozvetveným reťazcom, výhodne s až 7 atómami uhlíka.

Ako sa tu používa, pojem substituovaný alkyl” označuje alkylovú skupinu substituovanú napríklad jedným až štyrmi substituentami, ako je atóm halogénu, trifluórmetyl, trifluórmetoxyskupina, hydroxyskupina, alkoxyskupina, cykloalkyloxyskupina, heterocyklooxyskupina, oxoskupina, alkanoyl, aryloxyskupina, alkanoyloxyskupina, aminoskupina, alkylaminoskupina, arylaminoskupina, aralkylaminoskupina, cykloalkylaminoskupina, heterocykloaminoskupina, disubstituované amíny, v ktorých 2 substituenty aminoskupiny sú zvolené z alkylu, arylu alebo aralkylu, alkanoylaminoskupiny, aroylaminoskupiny, aralkanoylaminoskupiny, substituovanej alkanoylaminoskupiny, substituovanej arylaminoskupiny, substituovanej aralkanoylaminoskupiny, tiolu, alkyltioskupiny, aryltioskupiny, aralkyltioskupiny, cykloalkyltioskupiny, heterocyklotioskupiny, alkyltionoskupiny, aryltionoskupiny, aralkyltionoskupiny, alkylsulfonylu, arylsulfonylu, aralkylsulfonylu, sulfónamidoskupiny (napr. SO₂NH₂), substituovanej sulfónamidoskupiny, nitroskupiny, kyanoskupiny, karboxyskupiny, karbamylu (napr. CONH₂), substituovaného karbamylu (napr. CONH alkylu, CONH arylu, CONH aralkylu alebo prípadov, kde sú dva substituenty na atóme dusíka zvolené z alkylu, arylu alebo aralkylu), alkoxykarbonylu, arylu, substituovaného arylu, guanidinoskupiny a heterocykloskupin, ako je indolyl, imidazolyl, furyl, tienyl, tiazolyl, pyrolidyl, pyridyl a pyrimidyl. Kde je poznamenané vyššie, že substituent je ďalej substituovaný, bude substituovaný atómom halogénu, alkylom, alkoxyskupinou, arylom alebo aralkylom.

Ako sa tu používa, pojem atóm halogénu” označuje fluór, chlór, bróm a jód.

Ako sa tu používa, pojem aryl” označuje monocyklické alebo bicyklické aromatické uhľovodíkové skupiny, ktoré majú 6 až 12 atómov uhlíka v kruhovej časti, ako sú fenylové, naftylové, bifenylové a difenylové skupiny, pričom každá z nich môže byť substituovaná.

Ako sa tu používa, pojem aralkyľ označuje arylovú skupinu naviazanú priamo cez alkylovú skupinu, ako je benzyl.

Ako sa tu používa, pojem substituovaný aryl” označuje arylovú skupinu substituovanú napríklad jedným až štyrmi substituentami ako je alkyl; substituovaný alkyl, fenyl, substituovaný fenyl, heterocykloskupina, atóm halogénu, trifluórmetoxyskupina, trifluórmetyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, cykloalkyloxyskupina, heterocyklooxyskupina, alkanoyl, alkanoyloxyskupina, aminoskupina, alkylaminoskupina, aralkylaminoskupina, cykloalkylaminoskupina, heterocykloaminoskupina, dialkylaminoskupina, alkanoylaminoskupina, tiol, alkyltioskupina, cykloalkyltioskupina, heterocyklotioskupina, ureidoskupina, nitroskupina, kyanoskupina, karboxyskupina, karboxyalkyl, karbamyl, alkoxykarbonyl, alkyltionoskupina, aryltionoskupina, alkylsulfonyl, sulfónamidoskupina a aryloxyskupina. Substituent môže byť ďalej substituovaný atómom halogénu, hydroxyskupinou, alkylom, alkoxyskupinou, arylom, substituovaným arylom, substituovaným alkylom alebo aralkylom.

Ako sa tu používa, pojem cykloalkyl” označuje prípadne substituované nasýtené cyklické uhľovodíkové kruhové systémy, výhodne obsahujúce 1 až 3 kruhy a 3 až 7 atómov uhlíka na kruh, ktoré môžu byť ďalej kondenzované s nenasýteným karbocyklickým kruhom s 3 až 7 atómami uhlíka. Príklady skupín zahŕňajú cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl, cyklodecyl, cyklododecyl a adamantyl. Príklady substituentov zahŕňajú jednu alebo viacej alkylových skupín ako sú opísané vyššie alebo jednu alebo viacej skupín opísaných vyššie ako alkylové substituenty.

Ako sa tu používa, pojmy heterocyklus”, heterocyklický” a heterocykloskupina” označujú prípadne substituovanú, úplne nasýtenú alebo nenasýtenú aromatickú alebo nearomatickú cyklickú skupinu, napríklad 4- až 15členný systém alebo 4- až 7-členný monocyklický, 7- až 11-členný bicyklický alebo 10- až 15-členný tricyklický kruhový systém, ktorý má aspoň jeden heteroatóm v aspoň jednom kruhu obsahujúcom atóm uhlíka. Každý kruh heterocyklickej skupiny obsahujúcej heteroatóm môže mať 1, 2 alebo 3 heteroatómy zvolené z atómu dusíka, atómu kyslíka a atómu síry, kde heteroatómy kyslíka a síry môžu byť pripadne oxidované a heteroatómy dusíka môžu tiež prípadne byť kvartenizované. Heterocyklická skupina môže byť pripojená na akomkoľvek heteroatóme alebo atóme uhlíka.

Príklady monocyklických heterocyklických skupín zahŕňajú pyrolidinyl, pyrolyl, indolyl, pyrazolyl, oxetanyl, pyrazolinyl, imidazolyl, imidazolinyl, imidazolidinyl, oxazolyl, oxazolidinyl, izoxazolinyl, izoxazolyl, tiazolyl, tiadiazolyl, tiazolidinyl, izotiazolyl, izotiazolidinyl, furyl, tetrahydrofuryl, tienyl, oxadiazolyl, piperidinyl, piperazinyl, 2-oxopiperazinyl, 2-oxopiperidinyl, 2-oxopyrolidinyl, 2-oxazepinyl, azepinyl, 4-piperidonyl, pyridyl, N-oxo-pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, tetrahydropyranyl, tetrahydrotiopyranyl, tetrahydrotiopyranylsulfón, morfolinyl, tiomorfolinyl, tiomorfolinylsulfoxid, tiomorfolinylsulfón, 1,3-dioxolán a tetrahydro-1,1dioxotienyl, dioxanyl, izotiazolidinyl, tietanyl, tiiranyl, triazinyl a triazolyl, výpočet tým však nie je obmedzený.

Príklady bicyklických heterocyklických skupín zahŕňajú benzotiazolyl, benzoxazolyl, benzotienyl, chinuklidinyl, chinolyl, chinolinyl-N-oxid, tetrahydroizochinolyl, izochinolyl, benzimidazolyl, benzopyranyl, indolizinyl, benzofuryl, chromonyl, kumarinyl, cinolinyl, chinoxalinyl, indazolyl, pyrolopyridyl, furopyridinyl (ako je furo[2,3-c]pyridinyl, furo[3,1-b]pyridinyl alebo furo[2,3bjpyridinyl), dihydroizoindolyl, dihydrochinazolinyl (ako je 3,4-dihydro-4oxochinazolinyl), benzizotiazolyl, benzizoxazolyl, benzodiazinyl, benzofurazanyl, benzotiopyranyl, benzotriazolyl, benzpyrazolyl, dihydrobenzofuryl, dihydrobenzotienyl, dihydrobenzotiopyranyl, dihydrobenzotiopyranylsulfón, dihydrobenzopyranyl, indolyl, izochromanyl, izoindolyl, naftyridinyl, ftalazinyl, piperonyl, purinyl, pyridopyridyl, chinazolinyl, tetrahydrochinolinyl, tienofuryl, tienopyridyl a tienotienyl, výpočet tým však nie je obmedzený.

Príklady substituentov zahŕňajú jednu alebo viacej alkylových skupín ako sú opísané vyššie alebo jednu alebo viacej skupín opísaných vyššie ako alkylové substituenty, výpočet tým však nie je obmedzený. Zahrnuté sú taktiež menšie heterocykloskupiny, ako sú epoxidy a aziridíny.

Ako sa tu používa, pojem heteroatómy” bude zahrňovať atóm kyslíka, atóm síry a atóm dusíka.

Ako sa tu používa, predpona nižšia” znamená časť, ktorá má až vrátane 7, výhodne až vrátane 4 atómov uhlíka.

Ako sa tu používa, pojem biologicky dostupný” znamená mieru, do akej sa liečivo absorbuje do živého systému a je dostupné v obiehajúcej krvi živého systému. Spôsoby stanovenia biologickej dostupnosti liečiv sú odborníkovi v odbore dobre známe.

Ako sa tu používa, fráza dostatočne biologicky dostupný na dosiahnutie farmakologického účinku znamená to, že epotilóny sú z viac ako 20 % biologicky dostupné, výhodne z viac ako 30 % biologicky dostupné a výhodnejšie z viac ako 50 % biologicky dostupné.

Ako sa tu používa, pojem farmaceutický prijateľná soľ” označuje soľ pripravenú z epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib), ktorý má bázickú funkčnú skupinu ako je amín, s farmaceutický prijateľnou netoxickou anorganickou alebo organickou kyselinou. Vhodné netoxické kyseliny zahŕňajú kyselinu octovú, benzénsulfónovú, benzoovú, gáforsulfónovú, citrónovú, eténsulfónovú, fumárovú, glukónovú, glutámovú, bromovodíkovú, chlorovodíkovú, izetiónovú, mliečnu, maleínovú, jablčnú, mandlovú, metánsulfónovú, slížovú, dusičnú, pamoovú, pantoténovú, fosforečnú, jantárovú, sírovú, vínnu a p-toluénsulfónovú, výpočet tým však nie je obmedzený. Soli vytvorené s kyselinami možno získať napríklad s epotilónom všeobecného vzorca (la) alebo (Ib), ktorý má bázickú funkčnú skupinu a ekvivalentným množstvom netoxickej kyseliny za získania adičnej soli s kyselinou. Reakcia sa zvyčajne uskutočňuje v médiu, v ktorom sa adičná soľ s kyselinou zráža alebo vo vodnom médií, pričom nasleduje odparenie. Pojem farmaceutický prijateľná soľ” tiež označuje soľ pripravenú z epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib), ktorý má kyslú funkčnú skupinu, ako je funkčná skupina kyseliny karboxylovej a s farmaceutický prijateľnou netoxickou anorganickou alebo organickou bázou. Vhodné netoxické bázy zahŕňajú hydroxidy alkalických kovov, ako je sodík, draslík a lítium; hydroxidy kovov alkalických zemín, ako je vápnik a horčík; hydroxidy iných kovov, ako je hliník a zinok; amoniak a organické amíny, ako sú nesubstituované alebo hydroxyskupinou substituované mono-, di- alebo trialkylamíny; dicyklohexylamín; tributylamín; pyridín; N-metyl, N-etylamin; dietylamín; tributylamín; mono-, bis- alebo tris-(2-hydroxy-nižšie alkylamíny), ako je mono-, bis- alebo tris-(2-hydroxyetyl)amín, 2hydroxy-terc-butylamín alebo tris-(hydroxymetyl)metylamín, N,N-di-nižšíe alkyl-N(hydroxy nižší alkyl)amíny, ako je N,N-dimetyl-N-(2-hydroxyetyl)amín alebo tri-(2 hydroxyetyl)amín; N-metyl-D-glukamín a aminokyseliny, ako je arginín, lyzín a pod. Soli vytvorené s bázami možno získať napríklad s epotilónom všeobecného vzorca (la) alebo (Ib), ktoré majú kyslú funkčnú skupinu a ekvivalentným množstvom netoxickej bázy. Reakcia sa zvyčajne uskutočňuje v médiu, v ktorom sa soľ zráža alebo vo vodnom médiu, pričom nasleduje odparenie.

Tento vynález tiež zahŕňa zwiterióny.

Ako sa tu používa, pojem farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor” označuje kombináciu farmaceutický netoxickej kyseliny a farmaceutický prijateľnej netoxickej soli kyseliny, ktorá po pridaní do roztoku poskytuje roztok, ktorý je odolnejší voči zmenám pH v porovnaní s roztokom bez pufra, keď sa do roztoku pridá kyselina alebo zásada. Pojem farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor’’ tiež zahŕňa zlúčeniny, ako sú bázické zlúčeniny, ktoré po pridaní do kyslého roztoku neutralizujú kyseliny a zvyšujú hodnotu pH roztoku.

Ako sa tu používa, pojem klatrát” znamená ínklúziu zlúčeniny vytvorenú zahrnutím molekuly hosťujúcej” zlúčeniny do klietkovitého dutého priestoru vytvoreného kombináciou niekoľkých molekúl hostiteľskej” zlúčeniny.

Ako sa tu používa, pojem prekurzor liečiva” znamená derivát zlúčeniny, ktorá môže hydrolyzovať, oxidovať alebo inak reagovať za biologických podmienok (in vitro alebo in vivo) za poskytnutia epotilónovej zlúčeniny všeobecného vzorca (la) alebo (lb) . Napríklad estery karboxylových kyselín sa príhodné tvoria esterifikáciou funkčných skupín karboxylovej kyseliny; pokiaľ epotilón všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) obsahuje funkčnú skupinu, môže byť esterifikovaný za poskytnutia prekurzora liečiva. V odbore sú známe rôzne prekurzory liečiv (príklady prekurzorov liečiv pozri: Design of Prodrugs, redigoval H. Bundgaard, Elsevier (1985); Methods in Enzymology, 42 309 až 396, redigoval K. Widder a koľ, Academic Press (1985); A Textbook of Drug Design and Development, redigoval Krosgaard-Larsen a H, Bundgaard, kapitola 5, Design and Application of Prodrugs, ” autor H. Bundgaard, 113 až 191 (1991); H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8, 1 až 38 (1992); H, Bundgaard a koľ, Journal of Pharmaceutical Sciences, 77, 285 (1988) a N. Kakeya a koí., Chem. Phar. Bulí., 32, 692 (1984)).

Ako sa tu používa, fráza kyselinu neutralizujúca kapacita” znamená množstvo 1N kyseliny chlorovodíkovej (vyjadrené v miliekvivalentoch), ktoré možno priviesť na pH 3,5, ako je definovaná v U.S. Pharmacopeia, 301.

Ako sa tu používa, pojem roztok znamená kvapalný prostriedok, ktorý obsahuje jednu alebo viacej rozpustných aktívnych zložiek rozpustených v rozpúšťadle.

Ako sa tu používa, pojem suspenzia” znamená jemne delenú, nerozpustenú aktívnu zložku suspendovanú v rozpúšťadle.

Ako sa tu používa, pojem elixír” znamená roztok aktívnej zložky v rozpúšťadle obsahujúcom vodu a alkohol.

Ako sa tu používa, pojem sirup” znamená koncentrovaný roztok cukru, ako je sacharóza, vo vode alebo v inej vodnej kvapaline, prípadne obsahujúcej polyoly, ako je glycerín alebo sorbitol, na spomalenie kryštalizácie cukru alebo na zvýšenie rozpustnosti pridaných zložiek.

Epotilóny užitočné pri spôsoboch, v prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu.

Akýkoľvek epotilón môže byť použitý pri týchto spôsoboch, v týchto prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu. Výhodne sú epotilóny labilné v kyseline a slabo rozpustné vo vode, takže nie sú ľahko biologicky dostupné orálnou cestou. V špecifickom uskutočnení sa pri týchto spôsoboch, v týchto prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu používajú epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib). Epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) možno pripraviť spôsobmi opísanými v prihláške podanej pôvodcami, ktorá je v konaní, č. 09/280 191, podaná 29. marca 1999 a v prihláške podanej pôvodcami, ktorá je v konaní, č. 09/170 482, podaná 13. októbra 1998, ktorých obsah je tu výslovne zhrnutý. Odborník v odbore taktiež zistí, že epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) možno tiež pripraviť vhodnou modifikáciou metodológií opísaných napríklad v K.C. Nicolau a kol., An Approach to Epothilones Based on Olefin

Metathesis”, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 35(20), 2399 až 2401 (1996); K.C. Nicolau a kol., The Total Synthesis of Epothilone A: The Macrolactonization Approach,” Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 36(5), 525 až 527 (1997); K.C. Nicolau a koľ, Designed Epothilones: Combinatorial Synthesis, Tubulin Assembly Propertiés, and Cytoxic Action Aganist Taxol Resistant Tumor Celíš,” Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 36(19), 2097 až 2103 (1997); K.C. Nicolaou a koľ, ”The Olefin Metathesis Approach to Epothilone A and its Analogues”, J. Am. Chem. Soc., 119(34), 7960 až 7973 (1997); K.C. Nicolaou a kol., Total Synthesis of Epothillones A and B via a Macrolactonization-Based Strategy”, J. Am. Chem. Soc., 119(34), 7974 až 7991 (1997); K.C. Nicolaou a koľ, Synthesis of Epothilones A and B in Solid and Solution Phase,” Náture, 387, 268 až 272 (1997) a D. Meng a kol., Remote Effects in Macrolide Formation Through Ring Forming Olefin Metathesis: An Application to the Synthesis of Fully Active Epothilone Congeners,” J. Am. Chem. Soc., 119(11), 2733 až 2734 (1997).

Výhodne sú epotilóny kryštalické a bezvodé. Prípadne sa epotilóny pred použitím v prostriedkoch podľa tohto vynálezu sterilizujú.

Využitie a použite epotilónov alebo prostriedkov s ich obsahom

Epotilóny podľa tohto vynálezu sú činidlá stabilizujúce mikrotubuly a možno ich teda použiť na liečenie mnohých rakovín a ďalších chorôb s abnormálnou bunkovou proliferáciou. Spôsoby podľa tohto vynálezu sú predovšetkým užitočné na podávanie jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľnej soli, solvátu, klatrátu, hydrátu alebo prekurzora liečiva pacientovi, ktorý trpí rakovinou alebo inou hyperproliferatívnou bunkovou chorobou. Ako sa tu používa, pojem rakovina” zahŕňa solidné tumory a tumory krvného pôvodu, výpočet tým však nie je obmedzený. Pojem rakovina označuje chorobu kože, tkanív, orgánov, kostí, chrupavky, krvi a ciev. Pojem rakovina” ďalej zahŕňa primárne a metastatické rakoviny. Príklady rakovin, ktoré možno liečiť spôsobmi podľa tohto vynálezu zahŕňajú najmä karcinóm, vrátane karcinómu močového mechúra, prsníka, tračníka, obličiek, pľúc, vaječníka, pankreasu, žalúdka, maternicového krčka, štítnej žľazy a kože, vrátane skvamózneho bunkového karcinómu; hematopoetické tumory lymfoidného radu vrátane leukémie, akútnej lymfocytárnej leukémie, akútnej lymfoblastickej leukémie, lymfómu B-buniek, lymfómu T-buniek, Hodgkinovho lymfómu, ne-Hodgkinovho lymfómu, lymfómu vlasatých buniek a Burkettovho lymfómu, výpočet tým však nie je obmedzený; hematopoetické tumory myeloidného radu vrátane akútnej a chronickej myelogénnej leukémie a promyelocytárnej leukémie, výpočet tým však nie je obmedzený; tumory mezenchymálneho pôvodu vrátane fibrosarkómu, rabdomyosarkómu a osteosarkómu, výpočet tým však nie je obmedzený; ďalšie tumory vrátane melanómu, seminómu, teratokarcinómu, neuroblastómu a gliómu; tumory centrálneho a periférneho nervového systému vrátane astrocytómu, neuroblastómu, gliómu a schwannómov, výpočet tým však nie je obmedzený; a ďalšie tumory vrátane xeroderma pigmentosum, keratoaktantómu, rakoviny folikulov štítnej žľazy a teratokarcinómu, výpočet tým však nie je obmedzený.

Spôsoby podľa tohto vynálezu sú užitočné na liečenie pacientov, ktorí boli predtým liečení na rakovinu, rovnako ako pacientov, ktorí predtým neboli liečení na rakovinu. Spôsoby a prostriedky podľa tohto vynálezu možno skutočne použiť ako liečbu rakoviny prvej a druhej voľby.

Spôsoby podľa tohto vynálezu sú tiež užitočné v kombinácii so známymi protirakovinovými liečbami vrátane ožarovania. Spôsoby podľa tohto vynálezu sú najmä užitočné v kombinácii s protirakovinovými liečbami, ktoré zahŕňajú podávanie druhého liečiva, ktoré pôsobí v inej fáze bunkového cyklu, napr. S fáze, ako epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (lb), ktoré vykazujú svoje účinky v G₂ až M fáze.

Epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (lb) môžu tiež inhibovať tumorovú angiogenézu, čím ovplyvňujú abnormálnu bunkovú proliferáciu. Spôsoby podľa tohto vynálezu môžu teda byť užitočné pri istých formách retinálnej vaskularizácie, artritídy, najmä zápalovej artritídy, roztrúsenej sklerózy, restinózy a psoriázy. Epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (lb) môžu tiež indukovať alebo inhibovať apoptózu, čo je fyziologický proces bunkovej smrti rozhodujúci pre normálny vývoj a homeostázu. Zmeny apoptotických ciest prispievajú k patogenéze početných ľudských chorôb. Spôsoby podľa tohto vynálezu budú teda užitočné pri liečení početných ľudských chorôb s aberáciami apoptózy vrátane rakoviny (najmä folikulárnych lymfómov, karcinómov s mutáciami génu p53, tumorov prsníka, prostaty a vaječníkov závislých od hormónov a prekanceróznych lézií, ako je familiálna adenomatózna polypóza, výpočet tým však nie je obmedzený), vírusových infekcií (vrátane herpesvírusu, poxvírusu, vírusu Epstein-Barrovej, vírusu Sindbis a adenovírusu, výpočet tým však nie je obmedzený), autoimunitných chorôb (vrátane systémového lupus erythematosus, imunitné sprostredkovanej glomerulonefritídy, reumatoidnej artritídy, psoriázy, zápalových chorôb čriev a autoimunitného diabetes mellitus, výpočet tým však nie je obmedzený), neurodegeneratívnych porúch (vrátane Alzheimerovej choroby, demencie súvisiacej s AIDS, Parkinsonovej choroby, amyotrofickej laterálnej sklerózy, retinitis pigmentosa, spinálnej svalovej atrofie a mozočkovej degenerácie, výpočet tým však nie je obmedzený), AIDS, myelodysplastických syndrómov, aplastickej anémie, ischemického poškodenia spojeného s infarktami myokardu, mŕtvicou a poškodením z reperfúzie, arytmie, chorôb pečene indukovaných toxínom alebo alkoholom, hematologických chorôb (vrátane chronickej anémie a aplastickej anémie, výpočet tým však nie je obmedzený) degeneratívnych chorôb muskuloskeletálneho systému (vrátane osteoporózy a artritídy, výpočet tým však nie je obmedzený), rinosinusitídy citlivej na aspirín, cystickej fibrózy, roztrúsenej sklerózy, chorôb obličiek a rakovinovej bolesti.

Epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (lb) tiež môžu byť formulované alebo podávané spolu s ďalšími terapeutickými činidlami zvolenými pre ich zvláštnu užitočnosť pri podávaní v terapiách súvisiacich s vyššie uvedenými stavmi. Napríklad každá zo zlúčenín predstavovaných všeobecným vzorcom (I) a vzorcom (II) môže byť formulovaná s činidlami na prevenciu nauzey, hypersenzitivity a podráždenia žalúdka, ako sú antiemetiká a H_r a H₂-antihistaminiká. Vyššie uvedené terapeutické činidlá pri použití v kombinácii s epotilónom všeobecného vzorca (la) alebo (lb) môžu byť použité v takých množstvách, aké sú uvedené vo Physicians' Desk Reference (PDR) alebo inak určené odborníkom v odbore.

Pufre užitočné pri spôsoboch, v prostriedkoch a v dávkových formách podľa tohto vynálezu

Účelom pufra v spôsoboch podľa tohto vynálezu je dočasná neutralizácia žalúdočnej šťavy a tým zníženie degradácie epotilónu v žalúdku pacienta. Navyše vo vodných a zvlášť vodných kvapalných orálnych prostriedkoch obsahujúcich jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva znižuje pufor rozklad epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib). Pôvodcovia prekvapivo zistili, že kvapalné orálne dávkové formy obsahujúce jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva a pufor sú stabilnejšie ako kvapalné orálne dávkové formy bez pufra.

Pufre užitočné pri spôsoboch, v prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu možno ľahko pripraviť kombinovaním jednej alebo viacerých kyselín a soli jednej alebo viacerých kyselín v takom pomere, že kombinácia pri rozpustení do vodného roztoku poskytne roztok s pH od asi 5 do asi 9. Zvyčajne jedna alebo viacej kyselín bude mať pKa od asi 4 do asi 10. Odborník v odbore ľahko zistí ako pripraviť pufre, ktoré poskytujú roztok s požadovanou hodnotou pH. Navyše vynález uvažuje o použití ako pufra zlúčeniny, ktoré po pridaní do kyslého roztoku zvýšia pH takého roztoku.

Odborník v odbore ľahko zistí rad pufrov, ktoré možno použiť pri spôsoboch, v prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu. Zvyčajné pufre zahŕňajú farmaceutický prijateľné slabé kyseliny, slabé bázy alebo ich zmesi, výpočet tým však nie je obmedzený. Výhodne sú zložky pufra vo vode rozpustné materiály, ako je kyselina fosforečná, kyselina vínna, kyselina mliečna, kyselina jantárová, kyselina citrónová, kyselina octová, kyselina askorbová, kyselina asparágová, kyselina glutámová a ich soli. Výhodne je farmaceutický prijateľným kyseliny neutralizujúcim pufrom pufor hydrogenfosforečnan-dihydrogenfosforečnan alebo pufor hydrogenfosforečnan-kyselina citrónová-citrát. Tieto pufre sú komerčne dostupné alebo ich odborník v odbore môže ľahko pripraviť za pomoci komerčne dostupných pufrovacích činidiel, ako sú činidlá uvedené vyššie.

Spôsoby orálneho podávania epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) labilných v kyselinách

Tento vynález zahŕňa spôsoby zvyšovania biologickej dostupnosti orálne podávaných epotilónov orálnym podávaním epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a orálnym podávaním farmaceutický prijateľného pufra neutralizujúceho kyseliny. Tento vynález je obzvlášť vhodný pre epotilóny, ktoré sú labilné v kyseline, ale možno ho tiež použiť pri epotilónoch, ktoré sú citlivé na hydrolýzu za alkalických podmienok a pri epotilónoch, ktoré nie sú citlivé na hydrolýzu. Ďalej možno vynález použiť pri epotilónoch, ktoré sú zle rozpustné vo vodných médiách.

Je nutné mať na zreteli, že epotilóny podľa tohto vynálezu možno podávať parenterálne, čo obíde gastrointestinálny systém a prekoná problémy súvisiace s biologickou dostupnosťou. Takéto podanie je však pre pacienta nevhodné a nepohodlné a vedie k ďalším potenciálnym nežiaducim účinkom. Prostriedky podľa tohto vynálezu a spôsoby umožňujú použitie orálnej cesty podania, ktorá je významnou výhodou, najmä pre ľudských pacientov.

Podávanie jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva v kombinácii s farmaceutický prijateľným pufrom neutralizujúcim kyseliny poskytuje zvýšenú biologickú dostupnosť jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb). Bez toho aby došlo k obmedzeniu teórií sa predpokladá, že zvýšená biologická dostupnosť nastáva v dôsledku, aspoň z významnej časti, použitia pufra znižujúceho mieru rozkladu epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva v kyslom prostredí žalúdka. Isté epotilóny vrátane výhodného epotilónu, zlúčeniny A, sú nestabilné v kyslých vodných prostriedkoch a rozkladajú sa, pravdepodobne kyselinou katalyzovaným hydrolytickým otvorením epoxidového kruhu. Napríklad čas po 5 % stratu liečiva (tgs) pri teplote 37 °C pre vodný roztok zlúčeniny A je približne 38 minút pri pH 7,4, ale iba 0,2 minúty pri pH 2,5. Keď teda epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva sú orálne podávané, rozkladajú sa v žalúdku pacienta tak, že sú v gastrointestinálnom trakte buď minimálne absorbované alebo sa neabsorbujú.

Keď sa jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva podávajú pacientovi v kombinácii s farmaceutický prijateľným pufrom neutralizujúcim kyseliny však pufor neutralizuje kyselinu v žalúdku pacienta tak, že rýchlosť rozkladu jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných soli, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva sa dostatočne zníži tak, že jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva zostanú v gastrointestinálnom trakte po dostatočný čas na absorpciu.

V inom uskutočnení tohto vynálezu možno použiť na neutralizáciu kyseliny v žalúdku pred, v priebehu alebo po podaní epotilónu antacidum, ako sú hydroxidy hliníka alebo horčíka; uhličitany, ako je uhličitan sodný a uhličitan vápenatý; kremičitany a fosforečnany.

Pri orálnom podávaní podľa spôsobov podľa tohto vynálezu sú epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva aspoň asi z 20 % biologicky dostupné, výhodne aspoň asi zo 40 % biologicky dostupné a výhodnejšie aspoň asi z 50 % biologicky dostupné.

V jednom uskutočnení tohto vynálezu jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva a farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny sú poskytnuté v jedinej orálnej dávkovej forme a podávajú sa súbežne. Tento jediný prostriedok obsahujúci kombináciu jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a farmaceutický prijateľného pufra neutralizujúceho kyseliny možno podať ako tuhú orálnu dávkovú formu (napr. tabletu, kapsulu alebo prášok) alebo kvapalnú orálnu dávkovú formu (napr. roztok, suspenziu alebo elixír). Roztok alebo suspenziu možno konštituovať tesne pred podaním pomocou vhodných rozpúšťadiel na rozpustenie epotilónovej a pufrovej zložky.

Napríklad jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny možno podávať súbežne ako roztok epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) rozpusteného v kvapaline obsahujúcej propylénglykol:etanol:fosfátový pufor (napríklad 1 M, pH okolo 8) v pomere asi 58:12:30.

V inom uskutočnení tohto vynálezu sa epotilón všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) a farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny poskytnú ako oddelené farmaceutické prostriedky a podávajú sa oddelene. Každý z nich sa podáva ako tuhá orálna dávková forma alebo kvapalná orálna dávková forma.

Keď sa jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny podávajú oddelene, farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny možno orálne podať pred, po alebo ako pred, tak aj po podaní požadovaného epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib). Výhodne sa farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny podáva ako pred, tak po orálnom podaní požadovaného epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) v množstve dostačujúcom na neutralizáciu žalúdočnej kyseliny. Keď sa farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny podáva pred jedným alebo viacerými epotilónmi všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľnými soľami, solvátmi, klatrátmi, hydrátmi alebo prekurzormi liečiva, podáva sa v období asi 5 hodín, výhodne v období asi 3 hodin, výhodnejšie v období asi 1 hodiny a najvýhodnejšie v období asi 10 minút pred podaním požadovaného epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib). Keď sa farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyseliny podáva po jednom alebo viacerých epotilónoch všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva, podáva sa v období asi 5 hodín, výhodne v období asi 3 hodín, výhodnejšie v období asi 1 hodiny a najvýhodnejšie v období asi 10 minút pred podaním požadovaného epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib).

V inom uskutočnení sa epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva podávajú v entericky potiahnutej pilule alebo kapsule na oneskorenie uvoľňovania epotilónu do podania farmaceutický prijateľného pufra neutralizujúceho kyseliny. Entericky potiahnuté tablety a kapsuly sú kapsuly potiahnuté látkami, ktoré odolávajú rozpusteniu v žalúdočnej šťave, ale rozpadajú sa v čreve.

V jednom uskutočnení sa pufor podáva ako disperzibilná tableta.

Veľkosť terapeutickej dávky požadovaného epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo jeho farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva bude zvyčajne závisieť od špecifickej liečenej choroby a jej závažnosti. Dávka a možno frekvencia dávok môže taktiež závisieť od veku, telesnej hmotnosti, odpovede a anamnézy pacienta. Vhodné dávkovacie režimy odborník v odbore s uvážením týchto faktorov ľahko zvoli. Zvyčajne sa epotilón všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, solvát, klatrát, hydrát alebo prekurzor liečiva orálne podáva v celkovom množstve od asi 0,05 do asi 200 mg/kg za deň, výhodne od asi 5 do asi 100 mg/kg za deň a výhodnejšie menej ako asi 100 mg/kg za deň v jedinej dávke alebo v asi 2 až 4 delených dávkach.

Tento vynález zahŕňa farmaceutické jednotkové dávkové formy požadovaného epotilónu obsahujúce 5 mg/jednotku, 10 mg/jednotku, 15 mg/jednotku, 20 mg/jednotku, 25 mg/jednotku, 50 mg/jednotku a 100 mg/jednotku. Podobne kvapalné jednotkové dávky zahrnuté do tohto vynálezu obsahujú 2,5 mg/ml a 10 mg/ml, výpočet tým však nie je obmedzený.

Pojem celkové množstvo” ako je tu používaný znamená kombinované množstvo epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných soli, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva, pokiaľ viac ako jeden epotilón všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, solvát, klatrát, hydrát alebo prekurzor liečiva je v jednotkovej dávkovej forme alebo je podaný pacientovi.

Ďalej sa farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu podáva v množstve dostačujúcom na dodanie asi 20 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu, výhodne aspoň okolo 30 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu, výhodnejšie aspoň okolo 40 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu a najvýhodnejšie aspoň okolo 50 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu.

Tento vynález tiež zahŕňa farmaceutické jednotkové dávkové formy požadovaného pufra obsahujúce od asi 5 do asi 100 mg/jednotka, výhodne okolo 22,5 mg/jednotka a výhodnejšie okolo 22,5 mg/jednotka. Podobne kvapalné jednotkové dávky pufra zahrnuté do vynálezu obsahujú od asi 5 do asi 100 mg/jednotka, výhodne okolo 22,5 mg/jednotka a výhodnejšie okolo 22,5 mg/jednotka rozpustené v od asi 50 do 300 ml rozpúšťadla, výhodne od asi 100 do asi 200 ml rozpúšťadla a výhodnejšie okolo 150 ml rozpúšťadla.

Zvyčajne farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu sa podáva ako vodný roztok s hodnotou pH od asi 5 do asi 9, výhodne od asi 6 do asi 8,5 a výhodnejšie od asi 7 do asi 8. Pri spôsoboch podľa tohto vynálezu možno použiť akýkoľvek farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu, ktorý poskytuje roztok s pH v požadovanom rozmedzí. Výhodne je farmaceutický prijateľným pufrom neutralizujúcim kyselinu hydrogenfosforečnan-dihydrogenfosforečnanový pufor alebo pufor hydrogenfosforečnan-kyselina citrónová-citrát.

V jednom uskutočnení tohto vynálezu sa pacientovi najskôr podá farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu ako asi 150 ml vodného roztoku obsahujúceho bezvodý hydrogenfosforečnan sodný (okolo 0,2 M), dihydrát citrátu sodného (okolo 0,07 M) a bezvodú kyselinu citrónovú (okolo 0,008 M) s hodnotou pH okolo 7,4, pričom nasleduje orálne podanie jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva, ako kvapalné dávkové formy v systéme propylénglykoketanol v pomere okolo 80:20, pričom nasleduje podanie ďalších asi 150 ml vodného roztoku obsahujúceho bezvodý hydrogenfosforečnan sodný (okolo 0,2 M), dihydrát citrátu sodného (okolo 0,07 M) a bezvodú kyselinu citrónovú (okolo 0,008 M) s hodnotou pH okolo 7,4.

Zloženie, jednotkové dávkové formy a kity

Predložený vynález je taktiež zameraný na kity obsahujúce prvú zložku obsahujúcu jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a druhú zložku obsahujúcu farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu. Prvá a druhá zložka sú poskytnuté ako oddelené rozdielne farmaceutické prostriedky, ktoré sú určené na oddelené podanie. Prvá a druhá zložka sú poskytnuté ako farmaceutická dávková forma vhodná na orálne podanie alebo ako tuhý farmaceutický prostriedok, ktorý môže byť konštituovaný alebo rekonštituovaný kvapalinou na poskytnutie kvapalnej orálnej dávkovej formy. Výhodne sú epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (lb) zabalené vo fľaštičkách chránených pred svetlom.

Farmaceutické prostriedky a dávkové formy vhodné na orálne podanie môžu byť predložené ako oddelené dávkové formy ako sú tablety (napr. žuvacie tablety), kaplety, kapsuly, prášok vo vrecku, entericky potähované tablety, entericky potähované guľôčky, entericky potähované mäkké želatínové kapsuly a kvapaliny (napr. ochutené sirupy), výpočet tým však nie je obmedzený. Takéto dávkové formy obsahujú vopred určené množstvá aktívnej zložky a môžu byť pripravené farmaceutickými spôsobmi odborníkovi v odbore dobre známymi (pozri Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. vydanie, Mack Publishing, Easton, PA (1990)).

Zvyčajné orálne dávkové formy sú pripravené kombináciou aktívnych zložiek v dobre premiešanej zmesi s aspoň jednou pomocnou látkou podľa zvyčajnej praxe farmaceutického miešania. Pomocné látky môžu mať celý rad foriem v závislosti od formy prostriedku určeného na podanie. Napríklad pomocné látky vhodné na použitie v tuhých orálnych dávkových formách (napr. prášky, tablety, kapsuly a kaplety) zahŕňajú škroby, cukry, mikrokryštalickú celulózu, riedidlá, granulačné činidlá, mastivá, spojivá a dezintegračné činidlá, výpočet tým však nie je obmedzený. Príklady pomocných látok vhodných na orálne kvapalné dávkové formy zahŕňajú vodu, glykoly, oleje, alkoholy, príchute, konzervačné činidlá a farbivá, výpočet tým však nie je obmedzený.

Tablety a kapsuly predstavujú zvyčajné farmaceutické prostriedky a orálne dávkové formy, v ktorých sa používajú pomocné látky. Pokiaľ je to potrebné, môžu byť tablety potiahnuté štandardnými vodnými alebo nevodnými postupmi. Takéto dávkové formy môžu byť pripravené akýmkoľvek spôsobom z odboru farmácie.

Všeobecne sa farmaceutické prostriedky a dávkové formy pripravujú tak, že sa aktívna zložka uniformné a dobre zmieša s kvapalnými nosičmi, jemne delenými tuhými nosičmi alebo obidvoma a potom sa produkt vytvaruje do požadovaného tvaru, pokiaľ je to nevyhnutné.

Napríklad tabletu možno pripraviť lisovaním alebo vytlačovaním. Lisované tablety možno pripraviť lisovaním aktívnych zložiek vo voľne tekutej forme, ako je prášok alebo granuly, prípadne zmiešané s pomocnou látkou, vo vhodnom prístroji. Vytlačované tablety možno pripraviť vytlačovaním práškovej zlúčeniny navlhčenej inertným kvapalným riedidlom vo vhodnom prístroji.

Príklady pomocných látok, ktoré možno použiť v orálnych dávkových formách tohto vynálezu, zahŕňajú spojivá, plnivá, dezintegračné činidlá a mastivá, výpočet tým však nie je obmedzený. Spojivá vhodné na použitie vo farmaceutických prostriedkoch a dávkových formách zahŕňajú kukuričný škrob, zemiakový škrob alebo iné škroby, želatínu, prírodné a syntetické gumy, ako je arabská guma, alginát sodný, kyselina alginová, ďalšie algináty, práškový tragant, guma guar, celulóza a jej deriváty (napr. etylcelulóza, celulóza-acetát, vápenatá soľ karboxymetylcelulózy, sodná soľ karboxymetylcelulózy), polyvinylpyrolidón, metylcelulóza, vopred želatinizovaný škrob, hydroxypropylmetylcelulóza (napr. č. 2208, 2906, 2910), mikrokryštalická celulóza a ich zmesi, výpočet tým však nie je obmedzený.

Vhodné formy mikrokryštalickej celulózy zahŕňajú materiály predávané ako AVICEL-PH-101, AVICEL-PH-103, AVICEL RC-581, AVICEL-PH-105 (dostupné od firmy FMC Corporation, Američan Viscose Division, Avicel Sales, Marcus Hook, PA) a ich zmesi, výpočet tým však nie je obmedzený. Špecifickými spojivami sú mikrokryštalická celulóza a nátriumkarboxymetylcelulóza predávaná ako AVICEL RC581. Vhodné bezvodé pomocné látky alebo prísady alebo pomocné látky alebo prísady s nízkym obsahom vlhkosti zahŕňajú AVICEL-PH-103™ a Starch 1500 LM.

Príklady plnív vhodných na použitie vo farmaceutických prostriedkoch a dávkových formách tu opísaných zahŕňajú mastenec, uhličitan vápenatý (napr.

granuly alebo prášok), mikrokryštalickú celulózu, práškovú celulózu, dextráty, kaolín, manitol, kyselinu kremičitú, sorbitol, škrob, vopred želatinizovaný škrob a ich zmesi, výpočet tým však nie je obmedzený. Spojivo alebo plnivo vo farmaceutických prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu je zvyčajne prítomné v od asi 50 do asi 99 % hmotnostných farmaceutického prostriedku alebo dávkovej formy.

Dezintegračné činidlá sa používajú vo farmaceutických prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu na poskytnutie tabliet, ktoré sa rozpadajú pri expozícii vodnému prostrediu. Tablety, ktoré obsahujú príliš veľké množstvá dezintegračného činidla sa môžu rozpadať pri skladovaní, zatiaľ čo tablety s príliš malým množstvom dezintegračného činidla sa nemusia rozpadať potrebnou rýchlosťou alebo za potrebných podmienok. Na vytvorenie farmaceutických prostriedkov a tuhých orálnych dávkových foriem podľa tohto vynálezu sa teda musí použiť dostatočné množstvo dezintegračného činidla, ktoré nie je ani príliš veľké ani príliš malé ku škodlivému porušeniu uvoľňovania aktívnych zložiek. Použitie množstva dezintegračného činidla sa líši v závislosti od typu prostriedku a odborník v odbore ho ľahko určí. Zvyčajné farmaceutické prostriedky a dávkové formy obsahujú od asi 0,5 do asi 15 % hmotnostných dezintegračného činidla, výhodne od asi 15 do asi 5 % hmotnostných dezintegračného činidla.

Dezintegračné činidlá, ktoré možno použiť vo farmaceutických prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu zahŕňajú agar-agar, kyselinu algínovú, uhličitan vápenatý, mikrokryštalickú celulózu, nátirumkroskarmelózu, krospovidón, draselnú soľ polakrilínu, nátrium-glykolát škrobu, zemiakový alebo maniokový škrob, ďalšie škroby, vopred želatínizovaný škrob, ďalšie škroby, íly, ďalšie algíny, ďalšie celulózy, gumy a ich zmesi, výpočet tým však nie je obmedzený.

Mastivá, ktoré možno použiť vo farmaceutických prostriedkoch a dávkových formách podľa tohto vynálezu zahŕňajú stearát vápenatý, stearát horečnatý, minerálny olej, ľahký minerálny olej, glycerín, sorbitol, manitol, polyetylénglykol, ďalšie glykoly, kyselinu steárovú, laurylsíran sodný, mastenec, hydrogénovaný rastlinný olej (napr. olej z podzemnice olejnej, bavlníkový olej, slnečnicový olej, sezamový olej, olivový olej, kukuričný olej a sójový olej), stearát zinočnatý, etyl-oleát, etyl-laurát, agar a ich zmesi, výpočet tým však nie je obmedzený. Ďalšie mastivá zahŕňajú napríklad syloidný silikagél (AEROSIL 200, vyrábaný firmou W. R. Grace Co., Baltimore, MD), koagulovaný aerosól syntetickej siliky (predávaný firmou

Degussa Co., Piano, TX), CAB-O-SIL (pyrogénny produkt oxidu kremičitého predávaný firmou Cabot Co., Boston, MA) a ich zmesi. Pokiaľ sa mastivá vôbec použijú, použijú sa v množstve nižšom ako 1 % hmotnostné farmaceutických prostriedkov alebo dávkových foriem, do ktorých sú zahrnuté.

Farmaceutické prostriedky a dávkové formy môžu ďalej obsahovať jednu alebo viacej zlúčenín, ktoré znižujú rýchlosť rozkladu aktívnej zložky. Takéto zlúčeniny, ktoré sú tu označované ako stabilizátory zahŕňajú antioxidanty, ako je kyselina askorbová a soľné pufre, výpočet tým však nie je obmedzený.

Roztoky na orálne podanie predstavujú ďalšiu zvyčajnú orálnu dávkovú formu, pričom sa v tomto prípade sa použije rozpúšťadlo. Kvapalné orálne dávkové formy sa pripravia spojením aktívnej zložky do vhodného rozpúšťadla za vytvorenia roztoku, suspenzie, sirupu alebo elixíru aktívnej zložky v kvapaline.

Roztoky, suspenzie, sirupy a elixíry môžu prípadne obsahovať ďalšie prísady, vrátane glycerínu, sorbitolu, propylénglykolu, cukrov, príchutí a stabilizátorov, výpočet tým však nie je obmedzený.

Kity podľa tohto vynálezu môžu obsahovať prvú a/alebo druhú zložku ako už pripravenú orálnu dávkovú formu pripravenú na podanie alebo alternatívne môžu obsahovať prvú a/alebo druhú zložku ako tuhý farmaceutický prostriedok, ktorý môže byť rekonštituovaný pomocou rozpúšťadla na získanie kvapalnej orálnej dávkovej formy. Keď kit obsahuje prvú a/alebo druhú zložku ako tuhý farmaceutický prostriedok, ktorý môže byť rekonštituovaný pomocou rozpúšťadla na získanie kvapalnej orálnej dávkovej formy, môže kit prípadne zahrňovať rekonštitučné rozpúšťadlo.

Konštitučné alebo rekonštitučné rozpúšťadlo sa spojí s aktívnou zložkou na získanie kvapalnej orálnej dávkovej formy aktívnej zložky. Výhodne je aktívna zložka rozpustná v rozpúšťadle a vytvára roztok. Rozpúšťadlom môže byť voda, nevodná kvapalina alebo kombinácia nevodnej zložky a vodnej zložky. Vhodné nevodné zložky zahŕňajú oleje, alkoholy ako je etynol, glycerín a glykoly, ako je polyetylénglykol a propylénglykol, výpočet tým však nie je obmedzený.

Farmaceutický prijateľné pufre neutralizujúce kyselinu podľa tohto vynálezu sú výhodne rozpustné vo vode. Výhodným rozpúšťadlom pre farmaceutický prijateľné pufre neutralizujúce kyseliny je teda voda alebo systémy založené na vode vrátane roztokov chloridu sodného alebo roztokov dextrózy.

Epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva sú vo vode relatívne nerozpustné. Pre epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva sú teda výhodné nevodné kvapaliny alebo kvapaliny, ktoré sú kombináciou miešateľnej vodnej zložky a nevodnej zložky, pričom nevodné kvapaliny sú najvýhodnejšie.

Výhodnou nevodnou kvapalinou pre epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva je povrchovo aktívna látka, ako je propylénglykol a etanol, výhodne v pomere okolo 80:20. Vhodné nevodné kvapaliny alebo povrchovo aktívne látky zahŕňajú polyetylénglykol, polysorbáty, propylénglykol, glycerylestery, kremofor, estery mastných kyselín a alkoholy, polyoxyetylén a estery alifatických alkoholov a étery, výpočet tým však nie je obmedzený.

Keď rozpúšťadlo pre epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva zahŕňa vodnú zložku, je výhodné, keď je vodná zložka pufrovaná na zníženie rozkladu epotilónu všeobecného vzorca (la) alebo (Ib). Kvapalné orálne dávkové formy obsahujúce jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva vo vodnom alebo čiastočne vodnom rozpúšťadle poskytujú kvapalné orálne dávkové formy, ktoré sú stabilnejšie ako kvapalné orálne dávkové formy bez pufra. Špecificky bolo zistené, že rýchlosť rozkladu jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva v pufrovanom kvapalnom orálnom prostriedku je nižšia ako rýchlosť rozkladu v nepufrovanom kvapalnom orálnom prostriedku. Bez toho aby sa zamýšľalo byť obmedzený teóriou, predpokladá sa, že epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) sú nestabilné v kyslom a bázickom prostredí, pravdepodobne v dôsledku kyselinou alebo bázou katalyzovaného otvorenia epoxidového kruhu. Pufrovaním kvapalného orálneho prostriedku je však možné udržať pH kvapalného orálneho prostriedku na takej hodnote, keď rýchlosť rozkladu epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) je dostatočne nízka, takže sa epotilóny všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) nerozložia predtým, ako môžu byť podané pacientovi. Vodné alebo čiastočne vodné kvapalné orálne dávkové formy sú výhodne pufrované na hodnotu pH od asi 5 do asi 9, výhodne od asi 6 do asi 8,5 a výhodnejšie od asi 7 do asi 8.

Keď je aktívna zložka poskytnutá ako tuhý farmaceutický prostriedok, ktorý sa konštituuje alebo rekonštituuje pomocou rozpúšťadla na poskytnutie kvapalnej orálnej dávkovej formy, zvyčajne sa poskytne v práškovej forme a konštituuje pomocou kvapaliny krátko pred podaním pacientovi. Práškový farmaceutický prostriedok môže byť zabalený napríklad do fľaštičky, do ktorej sa pridá rozpúšťadlo. Alternatívne možno obsah fľaštičky pridať od rozpúšťadla v oddelenej nádobe. Prášková aktívna zložka podľa tohto vynálezu môže tiež byť zabalená vo vrecku, ako je fóliový obal, ktorý možno otvoriť a jeho obsah pridať do rozpúšťadla. Práškovú aktívnu zložku podľa tohto vynálezu možno tiež formulovať ako tabletu, ktorá sa rozpustí po pridaní do rozpúšťadla. Tableta často obsahuje dezintegračné činidlá na uľahčenie rozpúšťania tablety.

Predložený vynález je tiež zameraný na farmaceutické prostriedky obsahujúce jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľné soli, solváty, klatráty, hydráty alebo prekurzory liečiva v tuhej forme a tuhý farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu v množstve postačujúcom na zníženie rozkladu jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva, keď sa farmaceutický prostriedok rekonštituuje pomocou kvapaliny za získania kvapalnej orálnej dávkovej formy.

Okrem poskytnutia stabilnejšej kvapalnej orálnej dávkovej formy poskytujú farmaceutické prostriedky podľa tohto vynálezu tiež kvapalnú orálnu dávkovú formu, kde epotilón je biologicky dostupnejší pri orálnom podaní pacientovi. Tento vynález je teda tiež zameraný na kvapalnú orálnu dávkovú formu obsahujúcu jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a tuhý farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu rozpustený alebo dispergovaný v rozpúšťadle. Výhodne jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a tuhý farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu sú rozpustené v kvapaline za získania roztoku.

Výhodne je pufor prítomný vo farmaceutickom prostriedku tak, že poskytuje kvapalný orálny prostriedok s hodnotou pH od asi 5 do asi 9, výhodne od asi 6 do asi 8,5 a výhodnejšie od asi 7 do asi 8. Zvyčajne sa farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu podáva v množstve dostačujúcom na dodanie asi 20 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu, výhodne aspoň okolo 30 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu, výhodnejšie aspoň okolo 40 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu a najvýhodnejšie aspoň okolo 50 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyselinu, keď sa rekonštituuje pomocou kvapaliny za získania kvapalnej orálnej dávkovej formy. Akýkoľvek farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu, ktorý môže poskytnúť pH v tomto rozmedzí, môže byť použitý v prostriedku podľa tohto vynálezu. Výhodne je farmaceutický prijateľným kyseliny neutralizujúcim pufrom pufor hydrogenfosforečnandihydrogenfosforečnan alebo pufor hydrogenfosforečnan-kyselina citrónová-citrát.

Zvyčajne farmaceutické prostriedky podľa tohto vynálezu obsahujú jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva v celkovom množstve od asi 0,05 do asi 200 mg, výhodne od asi 5 do asi 100 mg a výhodnejšie od asi 10 do asi 50 mg.

Tento vynález sa ďalej týka kitu obsahujúceho farmaceutický prostriedok obsahujúci (i) kombináciu jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva v tuhej forme a tuhého farmaceutický prijateľného pufra neutralizujúceho kyselinu a (ii) rozpúšťadlo na rekonštitúciu farmaceutického prostriedku na získanie kvapalnej orálnej dávkovej formy, kde farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu je prítomný v množstve dostačujúcom na zníženie rozkladu jedného alebo viacerých epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva, keď sa kombinácia rekonštituuje pomocou rozpúšťadla na získanie kvapalnej orálnej dávkovej formy.

Rekonštitučné rozpúšťadlo sa spojí s aktívnou zložkou za získania kvapalnej orálnej dávkovej formy aktívnej zložky. Kvapalná orálna dávková forma môže byť roztokom alebo suspenziou. Výhodne je aktívna zložka rozpustná v rozpúšťadle a vytvára roztok. Rozpúšťadlom môže byť voda, nevodná kvapalina alebo kombinácia nevodnej zložky a vodnej zložky. Vhodné nevodné zložky zahŕňajú oleje, alkoholy ako je etynol, glycerín a glykoly, ako je polyetylénglykol a propylénglykol, výpočet tým však nie je obmedzený. Vhodné rozpúšťadlo na použitie v kite podľa tohto vynálezu je propylénglykol:etanol:fosfátový pufor (1M, pH 8) v pomere 58:12:30.

Rozpúšťadlo môže ďalej obsahovať jednu alebo viacej prísad, ako sú glycerín, sorbitol, propylénglykol, cukry, príchute a konzervačné činidlá, výpočet tým však nie je obmedzený.

Tento vynález ďalej zahŕňa bezvodé farmaceutické prostriedky a dávkové formy obsahujúce aktívne zložky, t.j. jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva a/alebo farmaceutický prijateľný pufor neutralizujúci kyselinu. Bezvodé farmaceutické prostriedky a dávkové formy sú výhodné, pretože voda môže uľahčiť rozklad niektorých zlúčenín. Napríklad pridanie vody (napr. 5 %) je v odbore farmácie bežne prijímané ako prostriedok simulácie dlhodobého skladovania na určenie vlastností, ako je čas použiteľnosti alebo stabilita prostriedku v čase (pozri napr. Jens T. Cartensen, Drug Stability: Principles & Practice, 2. vydanie, Marcel Dekker, NY, NY (1995) str. 379 až 80). V skutočnosti voda, teplo urýchľujú rozklad niektorých zlúčenín. Účinok vody na prostriedok môže teda mať veľký význam, pretože vlhkosť sa bežne vyskytuje v priebehu výroby, manipulácie, balenia, skladovania, zasielania a používania prostriedkov. Bezvodé farmaceutické prostriedky a dávkové formy sú obzvlášť výhodné pre farmaceutické prostriedky a dávkové formy obsahujúce jeden alebo viacej epotilónov všeobecného vzorca (la) alebo (lb) alebo ich farmaceutický prijateľných solí, solvátov, klatrátov, hydrátov alebo prekurzorov liečiva, pretože tieto zlúčeniny sú citlivé na vlhkosť.

Bezvodé farmaceutické prostriedky a dávkové formy sa musia pripraviť a skladovať tak, že sa uchová ich bezvodá povaha. Bezvodé farmaceutické prostriedky a dávkové formy podľa tohto vynálezu možno pripraviť pomocou bezvodých zložiek alebo zložiek s nízkym obsahom vlhkosti za podmienok s nízkou mierou vlhkosti. Bezvodé farmaceutické prostriedky a dávkové formy sa výhodne balia pomocou materiálov, o ktorých je známe, že zabraňujú expozícii vode tak, že môžu byť zahrnuté do vhodných kitov na použitie v lekárskej praxi. Príklady vhodných obalov zahŕňajú hermeticky uzavreté fólie, plasty, nádoby na dávkové jednotky (napr. fľaštičky), blistery a stripové balenia, výpočet tým však nie je obmedzený.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Isté uskutočnenia tohto vynálezu, rovnako ako isté výhody tohto vynálezu, sú ilustrované nasledujúcimi neobmedzujúcimi príkladmi.

Príklad 1

Farmakokinetické a farmakodynamické štúdie zlúčeniny (A) na myšiach, krysách a psoch

1.1 Analýza vzorky

Vzorky plazmy z farmakokinetických/farmakodynamických štúdií sa analyzujú na koncentráciu zlúčeniny (A) pomocou stanovenia LC/MS/MS (kvapalinová chromatografia/hmotnostná spektrometria/hmotnostná spektrometria) pomocou rozmedzia štandardnej krivky od 5 do 20 000 ng/ml (10 až 40 000 nM) pre štúdie na myšiach a od 2 do 1000 ng/ml (4 až 2000 nM) pre štúdie na krysách a psoch. Vo farmakodynamických štúdiách boli koncentrácie zlúčeniny (A) stanovené pomocou LC/MS/MS s rozmedzím štandardnej krivky od 5 do 20 000 ng/ml (10 až 40 000 nM) v myšej plazme. Stanovenie LC/MS/MS sa taktiež použilo na určenie koncentrácie zlúčeniny (B), čo je degradačný produkt zlúčeniny (A) vytvorený v matečnom/dávkovacom roztoku alebo in vivo, v krysej a psej plazme. Vzorec zlúčeniny (B) je:

Vzorky sa analyzujú pridaním vnútorného štandardu k 0,2 ml vzorky, vyzrážaním acetónom a potom extrakciou supernatantu 1-chlórbutánom. Organická vrstva sa dá nabok a odparí do sucha. Odparok sa rekonštituuje a vstrekne sa do systému LC/MS/MS. Pri ľudskej plazme sa dosiahne chromatografické rozdelenie, izokraticky, na stĺpci YMC ODS-AQ (4,6 x 50 mm, 3 mm) pomocou mobilnej fázy acetonitril:0,01 M acetát amónny, pH 5,0 (65:35). Pri psej plazme sa dosiahne chromatografické rozdelenie, izokraticky, na stĺpci Zorbax Stable Bond C18 (2,1 x 150 mm, 5 mm) uchovávanom pri 40EC pomocou mobilnej fázy 0,1 M acetátu amónneho, pH 5 a acetonitrilu. Pri krysej plazme sa dosiahne chromatografické rozdelenie, izokraticky, na stĺpci Stable Bond C18 (2,1 x 150 mm, 5 mm) uchovávaného pri 40EC pomocou mobilnej fázy acetonitril: 0,1 M acetát amónny, pH 5,0 (1:1). Detekcia sa uskutočni pomocou negatívnej elektrosprejovej tandemovej hmotnostnej spektrometrie. Štandardná krivka, ktorá má rozmedzie od 2 do 500 ng/ml pre všetky analyty, sa priradí k 1/x váženému kvadratickému regresnému modelu.

Bolo nájdené, že zlúčenina (A) a zlúčenina (B) sú pri teplote miestnosti stabilné počas aspoň 4 hodín v krysej a psej plazme ošetrenej EDTA (etyléndiamíntetraoctová kyselina) pred spracovaním pre analytickú prácu a počas aspoň 24 hodín pri teplote 4 °C v automatickom vzorkovači po spracovaní a počas aspoň 5 týždňov pri teplote -20 °C alebo nižšej pri krysej a psej plazme a aspoň 3 cykly zmrazenietopenie. Navyše bolo tiež nájdené, že obidva analyty sú stabilné v krysej a psej celej krvi ošetrenej EDTA pri teplote miestnosti počas aspoň 0,5 hodiny.

1.2 Farmakokinetika u myší:

Zlúčenina (A) sa podá intravenózne (5 mg/kg) a orálne (48 mg/kg) samiciam myší CDF-i. Pre i.v. cestu podania sa zlúčenina (A) rozpusti v 20 % etanolovom roztoku a podá sa v bolusovej dávke. Pre orálnu cestu podania sa pripravia roztoky zlúčeniny (A) ako zmes 3:7 etanol fosfátom pufrovaný fyziologicky roztok (0,25 M, pH 8,0) a podá sa žalúdočnou sondou. Vzorky plazmy na stanovenie koncentrácií zlúčeniny (A) sa odoberú od 3 rôznych myší v čase 5, 15 a 45 minút a 2, 4 a 6 hodín po podaní i.v. dávky a v čase 15 a 45 minút a 2, 4 a 6 hodín po orálnej dávke.

Po i.v. podaní bola systémová clearancia alebo celková telesná clearancia (CLT) zlúčeniny (A) 68 ml/min/kg a predstavovala 76 % prietoku krvi pečeňou (90 ml/min/kg) a distribučný objem v ustálenom stave (VSS) 6,3 litra/kg naznačoval rozsiahlu extravaskulárnu distribúciu, pretože celková telesná voda je u myší približne 0,7 litra/kg (pozri B. Davies a T. Morris, Physiological Parameters in Laboratory Animals and Humans,” Pharmaceutical Research, 10(7), 1093 až 1095 (1993)). Konečný polčas eliminácie (T-HALF) bol približne 3 hodiny.

Po orálnom podaní zlúčeniny (A) bol pík plazmatická koncentrácia (CMAX) 5983 ng/ml a čas na dosiahnutie CMAX (TMAX) bol 0,25 hodiny po dávke, čo naznačuje, že absorpcia zlúčeniny (A) bola rýchla. Absolútna orálna biologická dostupnosť zlúčeniny (A) bola 31 %.

1.3 Farmakokinetika u krýs

Zlúčenina (A) sa podá v jedinej intraarteriálnej (2 mg/kg; 10 minútová infúzia), orálnej (8 mg/kg) a intraduodenálnej (8 mg/kg) dávke hladujúcim samcom krýs kmeňa Sprague Dawley (n = 3 až 6 na skupinu). Všetky dávkovacie roztoky sa pripravia v 20 % etanole. Vzorky plazmy sa odoberú za 24 hodín po podaní a koncentrácia zlúčeniny (A) sa určí pomocou stanovenia LC/MS/MS.

Po intraarteriálnom podaní vykazujú profily plazmatickej koncentrácie-čas dvojfázovú dispozíciu s rýchlym poklesom do 2 hodín po dávke a pomalú terminálnu fázu. CLT (stredná hodnota = 56 ml/min/kg) zlúčeniny (A) predstavuje 100 % prietoku krvi pečeňou (56 ml/min/kg) a VSS (stredná hodnota = 23 litra/kg) naznačuje rozsiahlu extravaskulárnu distribúciu, pretože celková telesná voda je u krýs okolo 0,7 litra/kg (pozri B. Davies a T. Morris, Physiological Parameters in Laboratory Animals and Humans,” Pharmaceutical Research, 10(7), 1093 až 1095 (1993)). Konečný polčas eliminácie (T-HALF) bol 9,6 hodiny.

Po orálnom a intraduodenálnom podaní boli stredné hodnoty CMAX 228, respektíve 642 ng/ml; hodnoty TMAX boli 0,17 hodiny, respektíve 0,08 hodiny, čo naznačuje, že absorpcia zlúčeniny (A) bola rýchla. Absolútna orálna biologická dostupnosť zlúčeniny (A) po orálnom a intraduodenálnom podaní bola u krysy 7,5, respektíve 27 %.

V ďalšej štúdii sa krysám kmeňa Sprague Dawley s kanyláciou žlčovodu (n = 2 na skupinu) podá jedna intraarteriálna (10 mg/kg) alebo orálna (20 mg/kg) dávka zlúčeniny (A) a počas 9 hodín po dávke sa odoberajú vzorky žlče, moču a plazmy. Exkrécia intaktnej zlúčeniny (A) do žlče bola zanedbateľná (C 1 % dávky). V moči bolo isté detegovateľné množstvo zlúčeniny (A), ale skutočné koncentrácie neboli kvantifikované v dôsledku chýbania dát o stabilite zlúčeniny (A) v moči. Pokusne bolo v moči a v plazme pomocou LC/MS identifikovaných niekoľko zlúčenín príbuzných s liečivom, ktoré zahrňovali izomér (M+0) a produkt hydrolýzy (M+18). Navyše bol v plazme detegovaný metabolit (M-2).

1.4 Farmakokinetika u psov

Samcom psov plemena bígl (n = 3) sa podá 10 minútová i.v. infúzia 0,5 mg/kg zlúčeniny (A) (podaná ako 10 % etanolový roztok). Vzorky plazmy boli odoberané počas 32 hodín po dávke na určenie plazmatických koncentrácií zlúčeniny (A). Časová krivka plazmatických koncentrácií vykázala viacfázový profil, s počiatočným rýchlym poklesom koncentrácie v priebehu 2 hodín po dávke a pomalou terminálnou eliminačnou fázou. CLT (stredná hodnota = 17,3 ml/min/kg) zlúčeniny (A) predstavovala okolo 56 % prietoku krvi pečeňou (30,9 ml/min/kg) a stredná hodnota VSS 25,2 litra/kg naznačovala rozsiahlu extravaskulárnu distribúciu vo vzťahu k celkovej telesnej vode 0,6 litra/kg u psov. T-HALF bol určený na približne 24 hodín.

Kinetika zlúčeniny (A) sa taktiež vyhodnotí ako súčasť jednodávkovej i.v. toxikologickej štúdie. Zlúčenina (A) sa podá ako i.v. infúzia (cca. 15 minút) v dávkach 0,5 a 5 mg/kg 2 psom/pohlavie/dávka. Dávkovacie roztoky zlúčeniny (A) sa pripravia v 40 % propylénglykole, 5 % prípravku Cremophor EL®, 5 % etanolu a 50 % fosfátového pufra (50 mM, pH 7,4) deň pred podaním dávky. Vzorky krvi sa odoberajú počas 48 hodín po dávke a plazmatické koncentrácie zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) sa určia pomocou stanovenia LC/MS/MS s rozmedzím štandardnej krivky 2 až 500 ng/ml pre obidva analyty. Pre dávky 0,5 a 5 mg/kg zlúčeniny (A) sú stredné hodnoty CMAX pre zlúčeninu (A), kombinované naprieč pohlaviami, 218, respektíve 5118 ng/ml a stredné hodnoty AUC 316, respektíve 6925 h.ng/ml. Pre dávky v pomere 1:10 sú stredné hodnoty CMAX a AUC pre zlúčeninu (A) v pomere 1:23, respektíve 1:27, čo naznačuje, že kinetika zlúčeniny (A) je nelineárna v rozmedzí dávok 0,5 a 5 mg/kg. T-HALF, MRT(INF), CLT a VSS neboli v dôsledku obmedzeného odberu vzoriek v štúdii stanovené.

Pre zlúčeninu (B) sú stredné hodnoty CMAX 95,6, respektíve 984 ng/ml pre dávkové skupiny 0,5 a 5 mg/kg a stredné hodnoty AUC 55,0, respektíve 1109 h.ng/ml. Stredné hodnoty CMAX a AUC pre zlúčeninu (B) sú v pomere 1:10, respektíve 1:20. Vplyv pohlavia na kinetiku zlúčeniny (A) nemohol byť so záverečnou platnosťou vyhodnotený v dôsledku malej veľkosti vzoriek, ale kinetika sa medzi pohlaviami javí ako značne podobná.

Táto štúdia ukazuje, že sa pozoruje od dávky závisiaci vzostup pri systémovej expozícii zlúčenine (A), kde vzostup je viac ako úmerný zvýšeniu dávky. Ďalej bol tiež pozorovaný od dávky závisiaci vzostup pri systémovej expozícii zlúčenine (B).

Príklad 2

Toxikokinetika u krýs

Toxikokinetika zlúčeniny (A) sa vyhodnotí v jednodávkovej i.v. toxikologickej štúdii na krysách. Dávkovacie roztoky zlúčeniny (A) sa pripravia v 50 % propylénglykolu, 10 % prípravku Cremophor EL, 10 % etanolu a 30 % fosfátového pufra (50 mM, pH 7,4) deň pred podaním dávky. Zlúčenina (A) sa podá ako i.v. infúzia (cca. 3 minúty) v dávkach 10, 25 a 30 mg/kg 3 krysám/pohlavie/dávka. Počas 24 hodín po dávke sa odoberajú sériové vzorky krvi a plazmatické koncentrácie zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) sa určia pomocou stanovenia LC/MS/MS pomocou štandardnej krivky s rozmedzím 2 až 500 ng/ml pre obidva analyty. V dávke 10, 25 a 30 mg/kg sú stredné hodnoty CMAX zlúčeniny (A) u samcov krýs 6422, 19066, respektíve 24414 ng/ml; u samíc krýs sú stredné hodnoty CMAX 8384, 20524, respektíve 25054 ng/ml. Stredné hodnoty pod krivkou koncentrácie v čase (AUC) pre dávkové skupiny, 10, 25 a 30 mg/kg sú 3864, 11980, respektíve 19269 h.ng/ml. u samcov krýs; u samíc krýs sú hodnoty 8156, 28476, respektíve 34563 h.ng/ml. Pre dávky v pomere 1:2,5:3 sú stredné hodnoty CMAX zlúčeniny (A) u samcov a samíc v pomere 1:3,0:3,8, respektíve 1:2,5:3,0 a hodnoty AUC sú v pomere 1:3,1:4,9, respektíve 1:3,5:4,2. T-HALF, stredná hodnota času zotrvania v časovom intervale nula až nekonečno MRT(INF), celková telesná clearancia (CLT) a VSS neboli stanovené v dôsledku obmedzeného odberu vzoriek v štúdii.

Pre zlúčeninu (B) hodnoty CMAX a AUC medzi pohlaviami a dávkovými skupinami sú v rozmedzí 499 až 1787 ng/nt, respektíve 222 až 2003 h.ng/ml. Hodnoty CMAX pre zlúčeninu (B) u samcov a samíc sú v pomere 1:2,6:3,6, respektíve 1:3,0:2,8 a hodnoty AUC sú v pomere 1:3,4:7,0, respektíve 1:4,3:5,5. Hodnoty AUC zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) sú vyššie 1,8- až 2,4-násobne, respektíve 1,3- až 2,0-násobne u samíc krýs v porovnaní so samcami krýs.

Táto štúdia ukazuje, že sa pozoruje od dávky závisiaci vzostup pri systémovej expozícii zlúčenine (A), kde vzostup je viac ako úmerný zvýšeniu dávky. Ďalej bol tiež pozorovaný od dávky závisiaci vzostup pri systémovej expozícii zlúčenine (B).

Príklad 3

Farmakodynamické štúdie zlúčeniny (A)

Uskutoční sa rad experimentov na vyhodnotenie protirakovinovej aktivity zlúčeniny (A) podávanej ako i.v. infúzia počas 10 hodín samiciam nahých myší, ktorým bol podkožné implantovaný ľudský ovariálny karcinóm (tumor Pat-7). Zlúčenina (A) ako roztok v 10 % etanolu, sa podá v dávkach od 3 do 10 mg/kg. Výsledky týchto experimentov naznačujú, že dávka od 3 do 6 mg/kg zlúčeniny (A) sa považuje za minimálnu účinnú dávku (definovaná ako dávka potrebná na navodenie aktivity ekvivalentnej usmrteniu buniek 0,5 log). V rade paralelných experimentov sa určia zjavné rovnovážne koncentrácie zlúčeniny (A) u myší po 10 hodinách infúzie dávok od 3 do 150 mg/kg. Plazmatické koncentrácie zlúčeniny (A) sa stanovia 2, 4 a 6 hodín po počiatku infúzie a sú porovnateľné vo všetkých časových bodoch, čo naznačuje, že rovnovážny stav sa dosiahne za 2 hodiny. Koncentrácie po 2, 4 a 6 hodinách sa teda spriemerujú na určenie zrejmej koncentrácie v rovnovážnom stave. Od dávky závislé zvýšenia zrejmej koncentrácie v rovnovážnom stave sa pozorujú v celom dávkovom rozmedzí od 3 do 150 mg/kg. Minimálna účinná koncentrácia, definovaná ako zrejmá koncentrácia v rovnovážnom stave dosiahnutá i.v. infúznou dávkou od 3 do 6 mg/kg, sa pozoruje v rozmedzí od 15 do 45 ng/ml (cca. 30 až 90 nM).

Príklad 4

In vitro štúdie metabolizmu zlúčeniny (A)

Po inkubácii zlúčeniny (A) (40:M) s myšími, krysími, psími a ľudskými pečeňovými mikrozómami obohatenými nikotínamidadeníndinukleotidfosfátom (NADPH) je rýchlosť oxidatívneho metabolizmu zlúčeniny (A) 2,1, 0,7, 1,2, respektíve

1,3 nmol/min/mg proteínu. Navyše distribúcia metabolitu je podobná u všetkých druhov (metabolity zahŕňajú niekoľko zlúčenín M+6 a M-2). Kvalitatívne sa zdá, že tvorba metabolitov zlúčeniny (A) je podobná po inkubácii s krysími alebo ľudskými hepatocytmi v porovnaní s 5 mikrozomálnymi inkubáciami. Produkty podobné produktom pochádzajúcim z chemickej degradácie zlúčeniny (A) sú zdá sa hlavnými produktmi pri inkubáciách s hepatocytmi.

Schopnosť zlúčeniny (A) inhibovať hlavný ľudský cytochróm P450s (CYPs) zodpovedný za metabolizmus liečiv sa vyhodnotí in vitro pomocou rekombinantných ľudských izoforiem CYP. Stanovia sa hodnoty IC₅o na inhibiciu deetylácie 3-kyano-7etoxykumarínu (CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19 a CYP2D6) a na inhibiciu dealkylácie benzoylrezorufínu (CYP3A4). Zlúčenina (A) je slabým inhibítorom ľudského CYP3A4 s priemernou hodnotou IC₅₀ 7,3 p.M (3,7 p.g/ml). Táto zlúčenina neinhibuje CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19 a CYP2D6. Tieto výsledky získané in vitro naznačujú, že zlúčenina (A) môže mať minimálny potenciál narušiť metabolickú clearanciu liečiv, ktoré sa silne metabolizujú pomocou CYP3A4 a že je nepravdepodobné, že významne narušia metabolickú clearanciu liečiv metabolizovaných pomocou CYP1A2, CYP2C9, CYP2C19 a CYP2D6.

Zlúčenina (A) sa inkubuje s ľudskými pečeňovými mikrozómami so zlúčeninami špecifickými pre inhibíciu individuálneho cytochrómu P450s zvyčajne sa zúčastňujúceho metabolizmu liečiv. Použitými inhibítormi sú furafylín (CYPIA2), metoxypsoralén (CYP2A6), orfenadrín (CYP2B6), sulfafenazol (CYP2C9), tranylcypromín (CYP2C19), chinidín (CYP2D6), troleandomycín (CYP3A4) a ketokonazol (CYP3A4). Významná inhibícia sa pozoruje iba u inhibítorov CYP3A4, z ktorých obidva úplne inhibujú biotransformáciu zlúčeniny (A). U ľudí teda zlúčenina (A) môže byť substrátom pre CYP3A4.

Koeficient permeability (Pc) zlúčeniny (A) sa študuje na bunkovom kultivačnom systéme Caco-2, čo je in vitro model ľudskej črevnej absorpcie. Hodnoty Pc zlúčeniny (A) pri koncentrácii 10, 30 a 100 pM (cca. 5, 15, respektíve 50 pg/ml) sú 94, 105, respektíve 128 nm/sek. Hodnoty Pc niektorých modelových zlúčenín, pri ktorých je biologická dostupnosť u človeka známa, sa taktiež stanovia v rovnakom experimente. Tieto zlúčeniny zahŕňajú kyselinu salicylovú, acetaminofén, ibuprofen a propranolol, z ktorých všetky majú Pc >200 nm/s a sú absorbované aspoň z 90 %. Hodnoty Pc od 94 do 128 nm/s pre zlúčeninu (A) naznačujú, že zlúčenina (A) má potenciál byť u ľudí dobre absorbovaná.

Príklad 5

Farmakokinetiká a absolútna orálna biologická dostupnosť rôznych prostriedkov zlúčeniny (A) u psov plemien bígl

Vyhodnotí sa absolútna orálna biologická dostupnosť rôznych prostriedkov zlúčeniny (A) u dospelých psov plemien bígl (n = 4). Zlúčenina (A) sa podá ako 1043 minútová intravenózna (i.v.) infúzia (0,5 mg/kg), pufrovaný orálny roztok (2 mg/kg) a pufrovaná orálna suspenzia (1 mg/kg).

5.1 Usporiadanie experimentu

Usporiadanie experimentu v štúdii je uvedené v tabuľke 1.

Tabuľka 1 - Usporiadanie experimentu

Perióda	Ošetrenie	Cesta podania	Dávka (mg/kg)	Prostriedok	Počet psov
1	A	i.v.	0,5	Roztok v 40 % propylénglykolu, 5 % etanolu a 55 % fosfátového pufra (50 mM, pH 7,4)	4
2	B	orálna	2	Roztok v 58 % propylénglykolu, 12 % etanolu a 30 % fosfátového pufra (1 M, pH 8,0)	4
3	C	orálna	2a	Pufrovaná suspenzia v 1 % prípravku Avicel® RC591 obsahujúcom fosfátový pufor (2M, pH 8,0) a kyselinu citrónovú (85 nM)	4
4	D	orálna	1	„ „ d n.a.	n.a.a

³ V dôsledku toxicity bola táto dávka znížená na 1 mg/kg.

^b Ošetrenie 15 minút pred podaním dávky pentagastrínom (6 mg/kg, intramuskulárne).

^c Táto liečba nebola podaná v dôsledku nedostatku vyhodnotiteľného prostriedku.

^d Nedá sa použiť.

Usporiadanie je jednodávkové, so štyrmi ošetreniami, štyrmi periódami, nerandomizované a prekrížené. Zlúčenina (A) sa podáva štyrom dospelým samcom psov plemena bígl ako 10 minútová intravenózna (i.v.) infúzia (0,5 mg/kg), pufrovaný orálny roztok (2 mg/kg) alebo pufrovaná orálna suspenzia (2 mg/kg). Na i.v. podanie sa zlúčenina (A) formuluje ako roztok (sila okolo 0,375 mg/ml) v 40 % propylénglykolu, 5 % etanolu a 55 % fosfátového pufra (50 mM, pH = 7,4). Orálny roztok zlúčeniny (A) (sila okolo 1,5 mg/ml) sa pripraví v 58 % propylénglykolu, 12 % etanolu a 30 % fosfátového pufra (1M, pH = 8,0) ako vehikula. Pre orálnu suspenziu sa zlúčenina (A) suspenduje v 1 % prípravku Avicel® RCS91, ktorý obsahuje fosfátový pufor (2M) a kyselinu citrónovú (85 mM). Po rekonštitúcii je hodnota pH pufrovanej suspenzie okolo 8,0 a sila je približne 0,75 mg/ml. V dôsledku kumulovanej toxicity sa dávka orálnej suspenzie plánovaná pre tretiu ošetrovaciu periódu zníži z 2 mg/kg na 1 mg/kg. Ďalej sa štvrté ošetrenie nepodá v dôsledku nedostatku hodnotiteľného prostriedku. Exkrečná perióda medzi ošetreniami je aspoň 7 dní. V priebehu 24 hodín po podaní dávky sa odoberajú sériové vzorky krvi a koncentrácie zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) sa určia pomocou stanovenia LC/MS/MS s rozmedzím štandardnej krivky od 2 do 500 ng/ml u obidvoch analytov. Stanovenie LC/MS/MS je rovnaké ako sa použije v príklade 1.

Analytické stanovenia pozostávajú zo vzoriek štandardných, vzoriek na kontrolu kvality (QC) a testovaných vzoriek. Objem plazmy použitý na analýzu je 0,2 ml a rozmedzie štandardnej krivky je od 2 do 500 ng/ml pri obidvoch analytoch, ktoré definuje spodnú hranicu kvantifikácie (LLQ), respektíve hornú hranicu kvantifikácie (ULQ). Pokiaľ je predpovedaná koncentrácia testovanej vzorky nižšia ako najnižšia hranica štandardu, hodnota predpovedanej koncentrácie sa vyjadrí ako <LLQ. Pokiaľ je predpovedaná koncentrácia vyššia ako najvyššia hranica štandardu, výsledok tejto analýzy sa vyjadrí ako >ULQ a príslušný objem takej vzorky sa nariedi plazmou bez skúšanej látky a analyzuje sa znova.

5.2 Príprava zvierat, zaobchádzanie s nimi a podanie dávky

Na štúdiu sa vyberú štyria dospelé samce psov s venóznym prístupom na podanie liečiva a odber krvi. Psi sa aklimatizujú aspoň jeden týždeň pred štúdiou a umiestnia sa do individuálnych oceľových klietok. Zvieratá sa identifikujú zvláštnym číslom a visačkou pripevnenou na klietke. Psom sa umožni voľný prístup k pitnej vode a kŕmia sa jedenkrát denne štandardnou psou diétou, okrem noci (asi 12 hodín) pred podaním dávky, keď hladujú, čo pokračuje ešte 4 hodiny po podaní dávky. Pätnásť (15) minút pred podaním pufrovaného orálneho roztoku sa psom podá pentagastrín (6 mg/kg, intramuskulárne). Ošetrenie pentagastrinom sa použije iba v tej vetve, keď sa podáva orálna suspenzia. Dávka podaná i.v. sa aplikuje ako infúzia s konštantnou rýchlosťou počas 10 minút pomocou kalibrovanej infúznej pumpy. Dávky orálneho roztoku a suspenzie sa podávajú žalúdočnou sondou, pričom žalúdočná sonda sa prepláchne 20 ml vody.

5.3 Odber vzorky a zachádzania s ním

Pred dávkou a 10 minút (iba u i.v. podania, na konci infúzie), 15 minút, 20 minút (iba u i.v. podania), 30 minút a 45 minút a 1 hodinu, 1,5 hodiny, 2 hodiny, 4 hodiny, 6 hodín, 8 hodín, 12 hodín a 24 hodín po podaní dávky sa odoberú vzorky krvi (3 ml). Vzorky krvi sa odoberú do skúmaviek Vacutainer® obsahujúcich K₃-EDTA ako antikoagulans a obsah každej skúmavky sa premieša opatrným obracaním skúmavky. Vzorky krvi sa ihneď potom umiestnia na sekaný ľad. Plazma sa získa v priebehu 30 minút po odbere odstreďovaním skúmaviek pri teplote približne 4 °C a 2000 x g počas 5 minút. Vzorky plazmy sa skladujú pri teplote -20 °C alebo nižšej do času analýzy koncentrácií zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B).

Na každý analytický priebeh analýzy zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) v plazme sa aplikujú a priori kritéria na prijatie. Predpovedané koncentrácie aspoň troch štvrtín všetkých kalibračných štandardov budú v 15 % ich jednotlivých nominálnych koncentrácií (20 % LLQ), aspoň jeden replikát najnižšej koncentrácie v štandardnej krivke bude v 20 % jeho nominálnej koncentrácie pre túto hladinu na kvalifikáciu ako LLQ a predpovedané koncentrácie aspoň troch štvrtín všetkých vzoriek na kontrolu kvality (QC) budú v 15 % ich jednotlivých nominálnych koncentrácií.

5.4 Farmakokinetická analýza

Vrchol plazmatickej koncentrácie (CMAX) a čas na jeho dosiahnutie (TMAX) sa zaznamenajú priamo z experimentálnych pozorovaní. Plocha pod krivkou plazmatickej koncentrácie v čase od času nula do času T (AUC(O-T)), kde T je čas poslednej merateľnej koncentrácie v plazme, sa vypočíta pomocou trapezoidálneho pravidla (pozri M. Gibaldi a kol., Pharmacokinetics, 2. vydanie, New York, NY, Marcel Dekker, 445 až 91 982). T-Half sa nestanoví, pretože sa v štúdii použije obmedzený odber vzorky v konečnej fáze.

Dáta so strednou hodnotou plazmatickej koncentrácie v čase pre zlúčeninu (A) a zlúčeninu (B) sú uvedené v tabuľke 2. Zodpovedajúce grafické prehľady pre zlúčeninu (A) a zlúčeninu (B) sú zobrazené na obr. 1, respektíve obr. 2.

Tabuľka 2 - Stredná hodnota (štandardná odchýlka) plazmatických koncentrácií zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) u psov

Čas (h)a	Stredná hodnota (SD) plazmatických koncentrácií (ng/ml)b
	Zlúčenina (A)	Zlúčenina (B)
	i.v.c	Orálny roztok0	i.v.c	Orálny roztok0
Pred dávkou	0	0	0	0
0,17	1120 (189)	e	0	e
0,25	152 (9,9)	251 (150)	0	4,1 (3,9)
0,33	73,0 (4,2)	e	3,8 (0,4)	e
0,5	38,2 (2,8)	335 (73,7)	2,3 (0,2)	21,3(6,6)
0,75	28,6(1,6)	141 (75,8)	1,4 (1,2)	27,2 (3,6)
1	24,7 (3,9)	74,1 (26,4)	0	23,8(1,7)
1,5	20,1 (2,3)	n.s.'	0	n.s.r
2	17,4 (1,8)	35,5 (7,9)	0	8,4 (2,7)
4	14,5(1,4)	21,8 (6,9)	0	2,8 (0,3)
6	12,6 (0,9)	17,2(4,7)	0	0,8 (1,3)
8	12,6 (1,7)	17,6 (4,4)	0	0
12	9,5(1,4)	12,8 (4,1)	0	0
24	5,7(1,3)	7,5(1,9)	0	0

³ Predstavuje nominálny čas odberu. Predpokladá sa, že drobné odchýlky od nominálneho času odberu nemajú významný vplyv na celkovú interpretáciu výsledkov.

^b Všetky koncentrácie pre pufrovanú orálnu suspenziu sú <LLQ (2 ng/ml) a nie sú v tejto tabuľke uvedené. Hodnoty <LLQ sa považujú za nulové pre výpočty strednej hodnoty (štandardnej odchýlky). Pokiaľ koncentrácia u všetkých psov je v danom čase <LLQ, stredná hodnota je uvedená ako 0.

^c n = 3. Časový profil plazmatickej koncentrácie u jedného psa bol nekonzistentný s 10 minútovou i.v. infúziou, pretože pozorovaný TMAX je 1,0 hodina, tento pes sa pri výpočte strednej hodnoty vynechá.

^d n = 3. Jeden pes krátko po podaní dávky zvracal a pri výpočte strednej hodnoty sa teda vynechá.

^e Nebol plánovaný odber vzorky.

^f Vzorky neboli omylom odobraté, predpokladá sa, že táto odchýlka nemá vplyv na celkové závery štúdie.

Stredné hodnoty farmakokinetických parametrov zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) sú uvedené v tabuľke 3, respektíve v tabuľke 4.

Tabuľka 3 - Stredná hodnota (štandardná odchýlka) farmakokinetických parametrov zlúčeniny (A) u psov

Parametre (jednotky)	i.v.a	Orálny roztokb
CMAX (ng/ml)	1120 (189)	365 (40,9)
TMAX (h)c	0,17(0,17, 0,17)	0,50 (0,25, 0,50)
AUC(O-T) (h.ng/nt)d	420 (36,8)	560 (159)

^a n = 3. Časový profil plazmatickej koncentrácie u jedného psa bol nekonzistentný s 10 minútovou i.v. infúziou, pretože pozorovaný TMAX je 1,0 hodina, tento pes sa považuje za nevyhodnotiteľného pri farmakokinetických analýzach.

^b n = 3. Jeden pes krátko po podaní dávky zvracal a pri farmakokinetických analýzach sa považuje za nevyhodnotiteľného.

^c Medián (minimum, maximum).

^dT = 24 hodín.

Tabuľka 4 - Stredná hodnota (štandardná odchýlka) farmakokinetických parametrov zlúčeniny (B) u psov

Parametre (jednotky)	i.v.a	Orálny roztokb
CMAX (ng/ml)	3,8 (0,42)	27,2 (3,6)
TMAX (h)c	0,17 (0,17, 0,17)	0,75 (0,75, 0,75)
AUC(O-T) (h.ng/nt)d	0,69 (0,15)	45,2 (4,7)

^a n = 3. Časový profil plazmatickej koncentrácie u jedného psa bol nekonzistentný s 10 minútovou i.v. infúziou, pretože pozorovaný TMAX je 1,0 hodina, tento pes sa považuje za nevyhodnotiteľného pri farmakokinetických analýzach zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B).

^b n = 3. Jeden pes krátko po podaní dávky zvracal a pri farmakokinetických analýzach zlúčeniny (A) a zlúčeniny (B) sa považuje za nevyhodnotiteľného.

^c Medián (minimum, maximum).

^d T = 24 hodín.

Profil priebehu koncentrácie v čase u jedného psa po i.v. podaní bol inkonzistentný s 10 minútovou i.v. infúziou, pretože pozorovaný TMAX je 1,0 hodina, tento pes sa považuje za nevyhodnotiteľného pri farmakokinetických analýzach. Stredné hodnoty (štandardná odchýlka) [n = 3] hodnôt CMAX a AUC(O-T) po i.v. podaní zlúčeniny (A) sú 1120 (189) ng/ml, respektíve 420 (36,8) h.ng/nt. Hodnota AUC získaná v tejto štúdii po i.v. podaní je rozumne porovnateľná s hodnotami AUC pozorovanými v predchádzajúcej farmakokinetickej štúdii i.v. podania (stredná hodnota (štandardná odchýlka) 483 (34) h.ng/ml) po dávke 0,5 mg/kg u psov.

Po podaní orálneho pufrovaného roztoku jeden pes krátko po podaní dávky zvracal a pri farmakokinetických analýzach sa považuje za nevyhodnotiteľného. Stredná hodnota (štandardná odchýlka) [n = 3] hodnôt CMAX a AUC(O-T) po podaní pufrovaného orálneho roztoku zlúčeniny (A) sú 365 (40,9) ng/ml, respektíve 560 (159) h.ng/ml. Stredná hodnota AUC získaná v tejto štúdii po orálnom roztoku je približne dvakrát väčšia v porovnaní so strednou hodnotou AUC normalizovanou na dávku (257 h.ng/ml) získanú pri jednodávkovej štúdii toxicity u psov. Aj keď orálna formulácia pri obidvoch štúdiách je identická, celkový objem orálneho roztoku podaného v súčasnej štúdii je okolo 1,3 ml/kg, zatiaľ čo celkový objem v toxikologickej štúdii bol 0,4 ml/kg. Miliekvivalenty pufra dodaného v súčasnej štúdii sú 3- až 5-krát vyššie ako miliekvivalenty podané v toxikologickej štúdii, čo mohlo navodiť lepšiu neutralizáciu žalúdočného pH v tejto štúdii. Zlúčenina (A) je liečivo labilné v kyselinách, vyššia expozícia po orálnom podaní v súčasnej štúdii v porovnaní s toxikologickou štúdiou teda pravdepodobne súvisí s lepšou ochranou pred degradáciou žalúdočnou kyselinou. U dvoch psov, ktoré poskytli parametre farmakokinetických dát po podaní ako i.v., tak dávky orálneho roztoku, je absolútna orálna biologická dostupnosť 48,3, respektíve 30,6 % (stredná hodnota = 39,5 %).

Hodnoty CMAX a AUC(O-T) pre zlúčeninu (B) ukazujú, že psi sú vystavené zlúčenine (B) po podaní dávky i.v. alebo dávky orálneho roztoku, zvieratá nie sú vystavené zlúčenine (B) po podaní orálnej suspenzie. Systémová expozícia zlúčenine (B) po orálnom podaní je výrazne vyššia ako po podaní i.v.

Tieto výsledky ukazujú, že u dvoch psov, ktorí poskytli parametre farmakokinetických dát po podaní ako i.v., tak dávky orálneho roztoku, je absolútna orálna biologická dostupnosť 48,3, respektíve 30,6 % (stredná hodnota = 39,5 %)

Príklad 6

Kvapalný orálny prostriedok farmaceutický prijateľného pufra neutralizujúceho kyselinu

Pufre sa formulujú v nasledujúcom zložení:

	Zloženie pufra č. 1	Zloženie pufra č. 2
Zložka	Množstvo (g)	Množstvo (g)
Hydrogenfosforečnan sodný, podľa USP	4,258	5,688
Dihydrát citrátu sodného, podľa USP	2,941	2,942
Bezvodá kyselina citrónová, podľa USP	0,232	0,256
Sacharóza, NF (voliteľné)	15,00	15,00
Čerešňová príchuť (voliteľné)	0,075	0,075

Celkom

22,5

24,0

Pufor sa konštituuje 140 ml vody za získania 150 ml kvapalnej orálnej dávkovej formy. Kvapalná orálna dávková forma má pH 7,43 ± 0,07 (6 meraní). Priemerná kyseliny neutralizujúca kapacita 5 kvapalných orálnych dávkových foriem je 49,7 (štandardná odchýlka 0,17, relatívna štandardná odchýlka 0,34 %),

Príklad 7

Stabilita kvapalného prostriedku zlúčeniny (A)

Stabilita zlúčeniny (A) v zmesi 80:20 propylénglykoketanol sa vyhodnotí rekonštitúciou 25 mg zlúčeniny (A) pomocou zmesi 80:20 propylénglykoketanol na získanie kvapalnej orálnej dávkovej formy v koncentráciách 2,5 mg/ml až 12,5 mg/ml. Výsledná kvapalná orálna dávková forma sa potom skladuje až 20 hodín pri teplote miestnosti (20 až 25 °C) a pri svetle miestnosti a pri zníženej teplote (2 až 8 °C).

Od počiatočného stavu sa nepozorujú žiadne zmeny vo vzhľade kvapalnej orálnej dávkovej formy pri žiadnej zo skladovacích podmienok. Po skladovaní pri teplote miestnosti a svetle miestnosti počas 20 hodín sa pozoruje zvýšenie celkových nečistôt/produktov degradácie a znížená potencia. Po skladovaní pri zníženej teplote počas 20 hodín sa pozoruje ľahké zvýšenie celkových nečistôt/produktov degradácie. Zmena celkových nečistôt sa prisudzuje zvýšeniu oxazínovej nečistoty/produktu degradácie, ktorého štruktúra je zobrazená ďalej:

Vzorky sa analyzujú pomocou HPLC s veľkosťou častíc 75 mm x 4,6 mm i.d.,

3,5 mm, stĺpcom Waters Symmetry Shield RP8 a s UV detekciou pri 240 nm. Použijú sa injekcie 10 ml objemu, stĺpec sa udržiava pri teplote miestnosti a rýchlosť prietoku je 1 ml/minúta. Čas analýzy je 1 hodina a vzorky sa eluujú pomocou gradientovej elúcie s mobilnou fázou vody (0,05 % kyseliny octovej) (mobilná fáza A) a s mobilnou fázou acetonitrilu (0,05 % kyseliny octovej). Profil elúcie je opísaný v tabuľke uvedenej ďalej.

	Zloženie mobilnej fázy
Čas (minúty)	% A	% B	Profil gradientu
0	90	10	Izochratický
3	90	10	Izochratický
43	40	60	Lineárny
45	40	60	Izochratický
50	90	10	Lineárny
60	90	10	Izochratický

Tieto výsledky ukazujú, že kvapalná orálna dávková forma, v koncentráciách 2,5 mg/ml až 12,5 mg/ml, môže byť skladovaná pri teplote miestnosti až počas 6 hodín a pri zníženej teplote počas až 20 hodín.

Príklad 8

Syntéza zlúčeniny (A) [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihydroxy-8,8,10,12,16-pentametyl3-[1-metyl-2-(2-metyl-4-tiazolyl)etenyl]-17-oxa-4-azabicyklo[14.1.0]-heptadekán-5,9dión

Zlúčenina 1: (SS.eR.ľS.eS.IZR.ISS.ISSj-IS-azido-^.IS-epoxy^^.e.SJZ.ie-hexametyl-7-hydroxy-17-(2-metyl-4-tiazolyl)-5-oxo-16-heptadecénová kyselina.

Roztok epotilónu B (0,35 g, 0,69 mmol) v tetrahydrofuráne zbavenom plynu (4,5, 10 ml) sa spracuje s katalytickým množstvom (80 mg, 69 mmol) tetrakis(trifenylfosfín)paládiom (0) a suspenzia sa mieša pri teplote 25 °C, pod atmosférou argónu počas 30 minút. Výsledný jasnožltý, homogénny roztok sa spracuje celý naraz a roztokom azidu sodného (54 mg, 0,83 mmol) vo vode zbavenej plynu (2,2 ml). Reakčná zmes sa zahrieva na teplotu 45 °C počas 1 hodiny, nariedi sa vodou (5 ml) a extrahuje sa etylacetátom (4x7 ml). Organické extrakty sa premyjú nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (15 ml), vysušia (síran sodný) a odparia vo vákuu. Odparok sa vyčistí rýchlou chromatografiou (S1O2, 3,0 x 15 cm, 95:5,0:0,5 CHCl3-MeOH-AcOH) za získania zlúčeniny 1 (0,23 g, 61 %) ako bezfarebného oleja. MS (ESI⁺): 551 (M+H)⁺; MS(ESI-); 549 (M-H)-.

Zlúčenina 2: (3S,6R,7S,8S,12R,13S,15S)-15-amino-12,13-epoxy-4,4,6,8,12,16-hexametyl-7-hydroxy-17-(2-metyl-4-tiazolyl)-5-oxo-16-heptadecénoová kyselina.

Roztok zlúčeniny 1 (0,23 g, 0,42 mmol) v tetrahydrofuráne (4,0 ml) sa spracuje s vodou (23 ml, 1,25 mmol) a trifenylfosfínom na polymérovom nosiči (Aldrich, polystyrén zosietený pomocou 2 % DVB, 0,28 g, 0,84 mmol) pri teplote 25 °C. Výsledná suspenzia sa mieša pri teplote 25 °C pod atmosférou argónu (32 h), prefiltruje sa cez podložku z rozsievkovej zeminy a odparí sa vo vákuu. Odparok sa vyčistí rýchlou chromatografiou (SiO₂, 3,0 x 15 cm, 95:5,0:0,5 až 90:10:10 CHCI₃MeOH-AcOH gradientová elúcia) za získania zlúčeniny 2 (96 mg, 44 %) ako bezfarebného oleja. MS (ESI⁺): 525,2 (M+H)⁺; MS (ESI-): 523,4 (M-H)-.

Alternatívne sa do banky s guľatým dnom s obsahom zlúčeniny 1 (0,26 g, 0,47 mmol) a PtO₂ (0,13 g, 50 % hmotnostných) pridá absolútny etanol pod atmosférou argónu.

Výsledná čierna zmes sa mieša pod atmosférou vody počas 10 hodín, pričom sa systém prebublá dusíkom a pridá sa ďalší diel PtO₂ (65 mg, 25 % hmotnostných). Ešte jedenkrát sa reakčná zmes mieša pod vrstvou vody počas 10 hodín. Systém sa potom prebublá dusíkom a reakčná zmes sa prefiltruje cez podložku z rozsievkovej zeminy, pričom sa eluuje CH₂CI₂ (3 x 25 ml). Rozpúšťadlá sa odparia vo vákuu a odparok sa vyčistí ako je opísané vyššie za získania zlúčeniny 2 (0,19 g, 75 %).

Alternatívne sa zlúčenina 1 (20 mg, 36 mmol) v tetrahydrofuráne (0,4 ml) spracuje s trifenylfosfínom (19 mg, 73 mmol) pod atmosférou argónu. Reakčná zmes sa ohreje na teplotu 45 °C, mieša sa 14 hodín a ochladí sa na teplotu 25 °C.

Výsledný iminofozoforan sa spracuje hydroxidom amónnym (28 %, 0,1 ml) a ešte jedenkrát sa reakčná zmes ohreje na teplotu 45 °C. Po 4 hodinách sa prchavé zložky odparia vo vákuu a odparok sa vyčistí ako je opísané vyššie za získania zlúčeniny 2 (13 mg, 70 %).

Zlúčenina A: [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihydroxy8,8,10,12,16-pentametyl-3-[1 -metyl-2-(2-metyl-4-tiazolyl)etenyl]-17-oxa-4-azabicyklo[14.1.0]-heptadekán-5,9-dión

Roztok zlúčeniny 2 (0,33 g, 0,63 mmol) v dimetyíformamide zbavenom plynu (250 ml) sa spracuje s tuhým NaHCO₃ (0,42 g, 5,0 mmol) a difenylfosforylazidom (0,54 ml, 2,5 mmol) pri teplote 0 °C pod atmosférou argónu. Výsledná suspenzia sa mieša pri teplote 4 °C počas 24 hodín, nariedi sa fosfátovým pufrom (250 ml, pH = 7) s teplotou 0 °C a extrahuje sa etyl-acetátom (5 x 100 ml). Organické extrakty sa premyjú 10 % vodným roztokom LiCI (2 x 125 ml), vysušia (síran sodný) a odparia vo vákuu. Odparok sa vopred vyčistí rýchlou chromatografiou (SiO₂, 2,0 x 10 cm, 2 až 5 % MeOH-CHCI₃ gradientová elúcia) a potom sa znovu vyčistí pomocou Chromatotrónu (2 mm SiO₂, GF rotor, 2 až 5 % MeOH-CHCh gradientová elúcia) za získania zlúčeniny pomenovanej v záhlaví (0,13 g, 40 %) ako bezfarebného oleja.

¹H NMR (CDCI₃, 400 MHz) * 6,98 (s, 1H), 6,71 (d, 1H, NH, J = 8,1 Hz), 6,56 (s, 1H), 4,69-4,62 (m, 1H), 4,18-4,12 (m, 1H), 4,01 - 3,96 (m, 1H), 3,86 (s, 1H), 3,38 - 3,34 (m, 1H), 2,82 (dd, 1H, J = 5,6, 6,0 Hz), 2,71 (s, 3H), 2,58 (s, 1H), 2,43 (dd, 1H, J = 9,0, 14,5 Hz), 3,34 (dd, 1H, J = 3,0, 14,5 Hz), 2,14 (s, 3H), 2,05 - 1,92 (m, 2H), 1,82 1,41 (rad multipletov, 7H), 1,35 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 1,18 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 1,14 (s, 3H), 1,00 (d, 3H, J = 6,8 Hz);

MS (ESI⁺): 507,2 (M+H)⁺; MS (ESI-): 505,4 (M-H)-.

Príklad 9

Farmakokinetika zlúčeniny A orálne podávanej pacientom s rakovinou

Pacientom s pokročilými malignitami sa podáva zlúčenina A týždenne ako 30 minútová infúzia (terapia = 3 intravenózne týždenné podanie). Pacienti dostanú dávky 1, 2,5, 5, 10, 20, 25 alebo 30 mg/m². Začne sa s dávkovou hladinou 20 mg/m², jedna orálna dávka zlúčeniny A sa podá v deň 6 vo vehikule 80 % propylénglykolu a 20 % etanolu (objem/objem), pričom nasleduje podanie citrátového/fosfátového pufra (22,5 g) pred terapiou 1 na vyhodnotenie absolútnej biologickej dostupnosti zlúčeniny A. Dávka orálnej zlúčeniny A podaná v deň 6 zodpovedá dávke i.v. zlúčeniny A podanej v deň 1. Sériové vzorky plazmy sa získajú v deň 6 a deň 1 terapie na vyhodnotenie farmakokinetiky pomocou LC/MS/MS. Stanovenie LC/MS/MS je rovnaké ako v príklade 1.

Zlúčenina A na orálne podanie, 25 mg/fľaštička, sa dodáva ako liečivo vo fľaštičke”. Vehikulum (pufor) na konštitúciu zlúčeniny A, 25 mg/fľaštička, je zmes 80 % propylénglykolu a 20 % etanolu (objem/objem). Zmes propylénglykol/etanol sa pripraví zmiešaním 80 dielov objemových propylénglykolu a 20 dielov objemových etanolu vo vhodnej nádobe a jemným otáčaním nádoby až je roztok úplne premiešaný.

Citrátový/fosfátový pufor na orálne podanie zlúčeniny A sa dodáva v oddelenej fľaštičke. Pufor na použitie so zlúčeninou A sa konštituuje vodou do injekcie (WFI).

Zlúčenina A sa pripraví na podanie pacientom pomocou vhodnej striekačky na injikovanie 2,5, 5 alebo 10 ml zmesi propylénglykol/etanol do fľaštičky s objemom 20 štvorcových centimetrov obsahujúci 25 mg/fľaštička zlúčeniny A za získania koncentrácie 10, 5 alebo 2,5 mg/ml, v závislosti od dávky, ktorá má byť pacientovi podaná. Striekačka sa vyberie a fľaštičkou sa 10 sekúnd silne trepe. Fľaštička sa umiestni do sonikačného kúpeľa a sonikuje sa pokiaľ sa roztok nevyčíri. Fľaštičky sa spoja podľa dávky.

Pufor na podanie so zlúčeninou (A) sa dodáva vo fľaštičkách z číreho skla s objemom 237 ml a konštituuje sa vodou do injekcie (WFI). Uzáver s ochranou pred otvorením deťmi sa z fľaštičky pufra odstráni a pridá sa okolo 140 ml vody do injekcie (WFI). Fľaštičkou sa silno trepe alebo sa sonikuje za prerušovaného trepania až sa získa číry roztok.

Po orálnom podaní v deň 6 sa do skúmaviek Becton Vacutainer s K₃EDTA ako antikoagulantom (levanduľovo sfarbený vrch) odoberie 7 ml krvi podľa nasledujúceho plánu (vyjadrený ako hodiny:minúty od počiatku orálneho podania): pred dávkou, 00:15, 00:30, 00:45, 1:00, 1:30, 2:00, 3:00, 4:00, 6:00, 8:00, 24:00, 48:00 a 72:00. Po

i.v. podaní v deň 1 sa do skúmaviek Becton Vacutainer s K₃EDTA ako antikoagulantom (levanduľovo sfarbený vrch) odoberie 7 ml krvi podľa nasledujúceho plánu (vyjadrený ako hodiny:minúty od počiatku i.v. infúzie): pred dávkou, 00:15, 00:30 (koniec infúzie), 00:45, 1:00, 1:30, 2:00, 3:00, 4:00, 6:00, 8:00, 24:00, 48:00 a 72:00.

Ihneď po odbere krvi sa skúmavky Vacutainer niekoľkokrát obrátia na zaistenie premiešania s antikoagulantom a potom sa ihneď vložia na drvený ľad. Do 30 minút po odbere sa vzorky 5 minút odstreďujú pri približne 2000 x g a teplote 0 až 5 ’C. Plazma sa potom prenesie do oddelených vopred označených skrutkovacím uzáverom vybavených polypropylénových skúmaviek a skladuje sa pri teplote -70 °C do biologickej analýzy. Plazmatické koncentrácie zlúčeniny (A) sa analyzujú pomocou stanovenia LC/MS/MS ako je opísané v príklade 1.

Dáta plazmatickej koncentrácie v čase sa analyzujú pomocou nekompartmentových metód. Farmakokinetické parametre určené pre zlúčeninu (A) zahŕňajú maximálnu pozorovanú plazmatickú koncentráciu (Cmax), čas na dosiahnutie Cmax (Tmax), plochu pod krivkou priebehu koncentrácie v čase od času nula do času posledného odberu vzorky T(AUC(0-T)).

Celkom 18 pacientov dostalo orálnu zlúčeninu (A) ako roztok v deň 6 a intravenózne v deň 1. Súhrn farmakokinetických výsledkov u týchto pacientov je uvedený v tabuľke 5.

Tabuľka 5 - Súhrn farmakokinetiky u pacientov, ktorým bola podaná zlúčenina (A) orálne a intravenózne

Dávka (mg/mz)	20	25	30
N	3	11	4

Cesta	i.v.	Orálne	i.v.	Orálne	i.v.	Orálne
Prostriedok	i.v.	Roztok na orálne podanie	i.v.	Roztok na orálne podanie	i.v.	Roztok na orálne podanie
CMAXa	251	142	447	180	711	274
(ng/ml)	(108)	(106)	(189)	(110)	(530)	(104)
TMAXb	0,25	1,0	0,50	0,50	0,50	0,50
(h)	(0,25,	(0,25,	(0,25,	(0,25,	(0,25,	(0,25,
	0,25)	0,25)	0,50)	3,00)	0,50)	0,75)
AUC(0-T)a,c	796	404	848	533	1155	708
(h.ng/ml)	(587)	(381)	(284)	(284)	(292)	(291)
% Fa	NA	43,5 (16,1)	NA	55,6 (18,4)	NA	62,2 (25,1)

^a Stredná hodnota (štandardná odchýlka) ^b Medián (min., max.) ^c Predstavuje AUC(O-T)

Uskutočnenia tohto vynálezu opísané vyššie sú určené ako príklady, pričom odborník v odbore zistí alebo bude schopný zistiť pomocou len rutinných experimentov početné ekvivalenty špecifických zlúčenín, materiálov a postupov. Pri všetkých takýchto ekvivalentoch sa predpokladá, že spadajú do rozsahu tohto vynálezu a sú zahrnuté nasledujúcimi patentovými nárokmi.

Claims (37)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Spôsob zvyšovania biologickej dostupnosti orálne podávaných epotilónov, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa podávanie človeku jedného alebo viacerých epotilónov všeobecných vzorcov alebo

   G je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, heterocykloskupiny,

   W je atóm kyslíka alebo skupina NRi6l

   X je atóm kyslíka, atóm síry, skupina CHR17 alebo atóm vodíka, Ri₈;

   Y je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z atómu kyslíka; atómu vodíka, atómu vodíka; atómu vodíka, skupiny OR₂₂; skupiny OR₂₃, skupiny OR₂₃; skupiny NOR24; atómu vodíka, skupiny NOR₂s; atómu vodíka, skupiny HNR26R27; skupiny NHNR28R29; atómu vodíka, skupiny NHNR₃₀R₃i alebo skupiny CHR₃₂, kde skupina OR2₃, OR₂₃ môže byť cyklický ketal;

   Bi a B₂ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, skupiny OR₃₃, skupiny OCOR₃₄, skupiny OCONR₃5R₃₆, skupiny NR₃₇R₃₈, skupiny

   NR39CONR40R41;

   D je zvolený zo skupiny pozostávajúcej zo skupiny NR42R43 alebo heterocykloskupiny;

   R1, R₂, R3, R4 a R₅ sú zvolené z atómu vodíka a nižšieho alkylu;

   R₈, R9, R10 a R11 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny alebo substituovanej heterocykloskupiny;

   R17, Ríš, R22 a R₂₃ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu alebo substituovaného alkylu;

   R24, R25, R26, R28, R30, R32, R33, R34, R35, R361 R37, R39, R40, R4I > R42, R5I > R52, R53 a R61 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu alebo substituovaného arylu,

   R12, R16, R27, R29, R31, R38 a R43 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny, skupiny RsiC=O, skupiny R₅2OC=O, skupiny R53SO2, hydroxyskupiny a O-alkylu alebo substituovaného O-alkylu;

   alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, solvátu, hydrátu, klatrátu alebo prekurzora liečiva a orálne podávanie jedného alebo viacerých farmaceutický prijateľných kyseliny neutralizujúcich pufrov.
2. 2. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá súčasne s epotilónom.
3. 3. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá pred epotilónom.
4. 4. Spôsob podľa nároku 3, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá nie viac ako asi 1 hodinu pred epotilónom.
5. 5. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá po epotilóne.
6. 6. Spôsob podľa nároku 5, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá nie viac ako asi 1 hodinu po epotilóne.
7. 7. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá pred a po epotilóne.
8. 8. Spôsob podľa nároku 7, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá nie viac ako asi 1 hodinu pred a nie viac ako asi 1 hodinu po podaní epotilónu.
9. 9. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá v množstve dostačujúcom na dodanie aspoň okolo 20 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyseliny.
10. 10. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá ako vodný roztok, ktorý má hodnotu pH od asi 5 do asi 9.
11. 11. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor sa podá ako vodný roztok, ktorý obsahuje bezvodý hydrogenfosforečnan sodný, dihydrát citrátu sodného a bezvodú kyselinu citrónovú.
12. 12. Spôsob podľa nároku 11, vyznačujúci sa tým, že pH vodného roztoku je okolo 7.
13. 13. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že biologická dostupnosť jedného alebo viacerých epotilónov alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, solvátu, hydrátu, klatrátu alebo prekurzora liečiva je aspoň 20 %.
14. 14. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacej epotilónov alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, solvát, hydrát, klatrát alebo prekurzor liečiva sa podá orálne ako roztok v propylénglykole a etanole, kde pomer propylénglykol:etanol je 80:20.
15. 15. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacej epotilónov alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, solvát, hydrát, klatrát alebo prekurzor liečiva sa podá v celkovom množstve od asi 0,05 do asi 200 mg/kg za deň.
16. 16. Spôsob podľa nároku 15, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacej epotilónov alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, solvát, hydrát, klatrát alebo prekurzor liečiva sa podá v asi 2 až 4 delených dávkach.
17. 17. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že epotilónom je [1S[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihydroxy-8,8,10,12,16-pentametyl3-[1-metyl-2-(2-metyl-4-tiazolyl)etenyl]-17-oxa-4-azabicyklo-[14.1.0]-heptadekán5,9-dión.
18. 18. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že

    a) sa orálne podáva vodný roztok farmaceutický prijateľného kyseliny neutralizujúceho pufra, ktorý obsahuje bezvodý hydrogenfosforečnan sodný, dihydrát citrátu sodného a bezvodú kyselinu citrónovú,

    b) sa orálne podáva jeden alebo viacej epotilónov alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, solvát, hydrát, klatrát alebo prekurzor liečiva ako roztok propylénglykolu a

    c) sa orálne podáva vodný roztok farmaceutický prijateľného kyseliny neutralizujúceho pufra, ktorý obsahuje bezvodý hydrogenfosforečnan sodný, dihydrát citrátu sodného a bezvodú kyselinu citrónovú.
19. 19. Spôsob podľa nároku 1, vyznačujúci sa tým, že epotilónom je [1S[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihydroxy-8,8,10,12,16-pentametyl3-[1-metyl-2-(2-metyl-4-tiazolyl)etenyl]-17-oxa-4-azabicyklo-[14.1.0]-heptadekán5,9-dión.
20. 20. Kit na použitie pri spôsobe zvyšovania biologickej dostupnosti orálne podávaných epotilónov, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa (i) prvú zložku obsahujúcu jeden alebo viacej epotilónov všeobecných vzorcov alebo v ktorých

    G je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, heterocykloskupiny,

    W je atóm kyslíka alebo skupina NR₁₆;

    X je atóm kyslíka, atóm síry, skupina CHR₁₇ alebo atóm vodíka, R₁₈;

    Y je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z atómu kyslíka; atómu vodíka, atómu vodíka; atómu vodíka, skupiny OR22; skupiny OR₂₃, skupiny OR₂₃; skupiny NOR₂₄; atómu vodíka, skupiny NOR₂₅; atómu vodíka, skupiny HNR₂₆R₂7; skupiny NHNR28R29; atómu vodíka, skupiny NHNR₃oR₃i alebo skupiny CHR₃₂, kde skupina OR_23t OR₂₃ môže byť cyklický ketal;

    Bi a B₂ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, skupiny OR₃₃₁ skupiny OCOR₃₄, skupiny OCONR₃₅R₃₅, skupiny NR₃₇R₃₈, skupiny

    NR₃gCONR₄oR₄i;

    D je zvolený zo skupiny pozostávajúcej zo skupiny NR42R43 alebo heterocykloskupiny;

    R1, R₂, R3, R4 a R5 sú zvolené z atómu vodíka a nižšieho alkylu;

    Rs, Rg, R10 a Rn sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny alebo substituovanej heterocykloskupiny;

    R17, Ria, R22 a R₂₃ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu alebo substituovaného alkylu;

    R24, R25, R26, R28, R30, R32, R33, R34, R35, R36, R37, R39, R40, R41, R42, R51, R52, R53 a R₆i sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu alebo substituovaného arylu,

    R12, R16, R27, R29, R31, R38 a R43 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny, skupiny R₅iC=O, skupiny R₅₂OC=O, skupiny R₅₃SO₂, hydroxyskupiny a O-alkylu alebo substituovaného O-alkylu;

    alebo jeho farmaceutický prijateľnej soli, solvátu, hydrátu, klatrátu alebo prekurzora liečiva a (ii) druhú zložku obsahujúcu farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor, kde prvá a druhá zložka sú poskytnuté ako orálne dávkové formy alebo ako farmaceutický prostriedok, ktorý možno rekonštruovať pomocou rozpúšťadla za získania kvapalnej orálnej dávky.
21. 21. Kit podľa nároku 20, vyznačujúci sa tým, že aspoň jedna z prvej alebo druhej zložky je poskytnutá ako tuhá orálna dávková forma.
22. 22. Kit podľa nároku 20, vyznačujúci sa tým, že aspoň jedna z prvej alebo druhej zložky je bezvodá.
23. 23. Kit podľa nároku 20, vyznačujúci sa tým, že aspoň jedna z prvej alebo druhej zložky je poskytnutá ako farmaceutický prostriedok, ktorý možno rekonštituovať pomocou rozpúšťadla za získania kvapalnej orálnej dávkovej formy.
24. 24. Kit podľa nároku 23, vyznačujúci sa tým, že aspoň jedna z prvej alebo druhej zložky je poskytnutá ako tableta.
25. 25. Kit podľa nároku 23, vyznačujúci sa tým, že aspoň jedna z prvej alebo druhej zložky je bezvodá.
26. 26. Kit podľa nároku 23, vyznačujúci sa tým, že ďalej obsahuje rozpúšťadlo na rekonštitúciu prvej alebo druhej zložky.
27. 27. Kit podľa nároku 26, vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlom na rekonštitúciu prvej alebo druhej zložky je zmes propylénglykolu a etanolu.
28. 28. Farmaceutický prostriedok vhodný na orálne podanie cicavcovi, vyznačujúci sa tým, že zahŕňa (i) jeden alebo viacej epotilónov všeobecných vzorcov rG

    w.

    ralebo ^Gi

    w.

    v ktorých

    G je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, heterocykloskupiny, ο

    W je atóm kyslíka alebo skupina NR₁₆;

    X je atóm kyslíka, atóm síry, skupina CHRv alebo atóm vodíka, R₁₈;

    Y je zvolený zo skupiny pozostávajúcej z atómu kyslíka; atómu vodíka, atómu vodíka; atómu vodíka, skupiny OR22; skupiny OR₂₃, skupiny OR23; skupiny NOR24; atómu vodíka, skupiny NOR25; atómu vodíka, skupiny HNR26R27; skupiny NHNR28R29; atómu vodíka, skupiny NHNR30R31 alebo skupiny CHR32, kde skupina OR23, OR23 môže byť cyklický ketal;

    Bf a B₂ sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, skupiny OR₃₃, skupiny OCOR34, skupiny OCONR35R36, skupiny NR37R38, skupiny NR39CONR4QR41;

    D je zvolený zo skupiny pozostávajúcej zo skupiny NR42R43 alebo heterocykloskupiny;

    R1, R₂, R3, R4 a R₅ sú zvolené z atómu vodíka a nižšieho alkylu;

    R₈, Rg, R10 a Rn sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny alebo substituovanej heterocykloskupiny;

    R17, Ríš, R22 θ R23 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu alebo substituovaného alkylu;

    R24, R25, R26, R28, R3O1 R32i R33, R34, R35, R36, R37, R39> R40, R41, R₄2, R51, R52- R53 a R₆i sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, arylu alebo substituovaného arylu,

    R12, R16, R27, R29, R31, R38 a R43 sú zvolené zo skupiny pozostávajúcej z atómu vodíka, alkylu, substituovaného alkylu, substituovaného arylu, cykloalkylu, heterocykloskupiny, skupiny R₅₁C=O, skupiny R₅₂OC=O, skupiny R₅₃SO₂, hydroxyskupiny a O-alkylu alebo substituovaného O-alkylu;

    alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, solvát, hydrát, klatrát alebo prekurzor liečiva a (ii) tuhý farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor v množstve dostačujúcom na zníženie rozkladu jedného alebo viacerých epotilónov alebo jeho farmaceutický prijateľnú soľ, solvát, hydrát, klatrát alebo prekurzor liečiva, keď sa farmaceutický prostriedok rekonštituuje pomocou rozpúšťadla za získania kvapalnej orálnej dávkovej formy.
29. 29. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor poskytuje kvapalnú orálnu dávkovú formu, ktorá má hodnotu pH od asi 5 do asi 9.
30. 30. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľný kyseliny neutralizujúci pufor je prítomný v množstve dostačujúcom na dodanie aspoň okolo 20 miliekvivalentov kapacity neutralizujúcej kyseliny.
31. 31. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že farmaceutický prijateľným kyseliny neutralizujúcim pufrom je pufor hydrogenfosforečnan sodný-kyselina citrónová-citrát.
32. 32. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že jeden alebo viacej epotilónov alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ, solvát, hydrát, klatrát alebo prekurzor liečiva sa podá v celkovom množstve od asi 0,05 do asi 200 mg/kg za deň.
33. 33. Farmaceutický prostriedok podľa nároku 28, vyznačujúci sa tým, že epotilónom je [1S-[1R*,3R*(E),7R*,10S*,11R*,12R*,16S*]]-7,11-dihydroxy-8,8,10,12,16-pentametyl-3-[1-metyl-2-(2-metyl-4-tiazolyl)etenyl]-17-oxa-4-azabicyklo-[14.1.0]-heptadekán-5,9-dión.
34. 34. Kit, vyznačujúci sa tým, že obsahuje farmaceutický prostriedok podľa nároku 28 a rozpúšťadlo na rekonštitúciu farmaceutického prostriedku na poskytnutie orálnej dávkovej formy.
35. 35. Kit podľa nároku 34, vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo obsahuje propylénglykol, etanol a fosfátový pufor (1M, pH 8).
36. 36. Kit podľa nároku 35, vyznačujúci sa tým, že pomer propylénglykol:etanol:fosfátový pufor je asi 58:12:30.
37. 37. Kvapalná orálna dávková forma vhodná na orálne podanie cicavcovi, vyznačujúca sa tým, že zahŕňa (i) jeden alebo viacej epotilónov všeobecných vzorcov