SK121793A3 - Cyclopeptides - Google Patents

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka nových cyklopeptidov so všeobecným vzorcom I cyklo-(A-D-C-D-Arg) /1/, v ktorom

Λ o Q znamenajú vždy nezávisle oá seba Ala, Asn, Asp, Arg,

Cys, Gin, Glu, Gly, Jíis, Tie, Leu, L.ys, Let, Phe,

Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr alebo Val,

C predstavuje Asp alebo Asp(O-C^ ^-alkyl) a

C znamená Gly alebo Ala, pričom aspoň dva uvedená zvyšky aminokyseliny sú v D-i'orme, rovnako ako ich solí.

Doterajší stav techniky

Fodobné zlúčeniny sú známe z Ph^rmazic 40 /8/,

532-535 /1985/.

Podstata vynálezu

Úloh ou vynálezu je nájsť nové zlúčeniny s.cennými vlastnosťami, najmä taká, ktoré sa môžu použiť na výrobu liečiv.

Bolo zistené, že zlúčeniny so všeobecným vzorcom I a ich soli majú veľmi cenné vlastnosti. Tieto zlúčeniny predovšetkým pôsobia ako inhibítory, pričom potlačujú, predovšetkým vzájomné pôsobenie IK-inteprinových receptorov s l.igan2 ôsmi. Tento účinok sa môže doložiť napríklad spôsobom, ktorý uviedol J. W. Smith s kol. v J. Biol. Chem. 265, 12267-12271/1990/. Okrem toho so u zlúčenín vyskytujú protizápa lové účinky. Všetky tieto účinky sa môžu dokázať spôsobmi známymi z literatúry.

Zlúčeniny sa môču používať ako účinné látky pre liečivá v humánnej a veterinárnej me čie í ne, najmä pre profylaxiu a ošetrovanie chorôb krvného obehu, trombózy, srdcového infarktu, artériosklerózy, zápalov, apolexie, angíny pectoris, zhubných nádorov, osteologických chorôb, najmä osteopo rózy, angiogenézy a restenózy po angioplastii.

V predchádzajúcom a nasledujúcom texte sa, používajú óalej uvedené skratky esterov aminokyselín pre zvyšky týchto aminokyselín:

Ala

Asp

Asp(OR)

Arg

Cys

Gin

Glu

Gly

Uis

Íle

Leu

Lys

Ide t

Phe

Pr₀

Ser

Thr

Trp alanín asparagín kyselina asparágovó 'Ír ester/ arginin cysteín glutamín kyselina glutámnvá glycín histidín

Izoleucín leucíxi lyzín metionín fenylalanín prolín serín treonín trvptofán

- 3 Tyr tyrozín

Val vslín.

Dolej sa používajú tiež ďalšie skratky, ktoré znamenajú

BOC terc.-butoxykarbonyl

CBZ benzylox.ykarbonyl

DCCI dicyklohexylkarbodiimid

MPF dimetylíormamid

EDCI hydrochlorid N-etyl-N’-(3-dimet,yleminopropyl)karbodiimidu

Et etyl

FMOC 9-Fluórenylmetoxykarbonyl

KOBt 1-hydroxvbenzotriazol

Me metyl

Mtr 4-metoxy-2,3,6-trimetylfenylsulfonyl

OBut terc.-butylester

OMe metylester

OEt etylester

POA f enox.yacetyl

TFA kyselina trifluóroctová.

Ak vyššie uvedené aminokyseliny môžu mat väčší počet, enant.iomérnych foriem, tok stí vpredu oj v čalšej časti zahrnuté všetky tieto formy a tiež ich zmesi /napríklad DL-í'ormy/, napríklad ako súčasť zlúčenín so všeobecným vzorcom I.

Predmetom tohto vynálezu je 3alej spôsob výroby zlúčeniny so všeobecným vzorcom I, ktorý je uvedený vyššie alebo jej soli, ktor.ý spočíva v tom, že sa uvolní zo svojho funkčného derivátu spracovaním so solvolyzačným alebo hydrof.enolyzačným činidlom alebo sa peptid so všeobecným vzorcom II

Η-Ζ-ΟΗ /11/, v ktorom

Z znamená A-B-C-D-Arg-,

-B-C-D-Arg-A-,

-C-D-Arg-A-B-,

-D-Arg-A-b_c_ alebo -Arg-A-B-C-D-, alebo reaktívny derivát takéhoto peptidu spracuje s cyklizaČ ným činidlom a/alebo sa bázická alebo kyslá zlúčenina so všeobecným vzorcom I prevedie spracovaním s kyselinou alebo bázou na svoju soľ.

V predchádzajúcom a v nasledujúcom texte majú zvyšky

A, B, C, D a Z významy uvedené vo všeobecnom vzorci I a II, pokiaľ nie je výslovne uvedené inak.

V predchádzajúcich vzorcoch alk s výhodou znamená metyl, etyl, izopropyl alebo terc.-butyl.

Skupina A je výhodne Val, najmä D-Val. B znamená výhodne Phe, najmä D-Phe. C výhodne predstavuje Asp, najmä D-Asp. D znamená výhodne ^ly.

V tomto zmysle sú predmetom vynálezu predovšetkým tak zlúčeniny so všeobecným vzorcom I, v ktorých aspoň jeden z vymenovaných zvyškov má vyššie uvedené výhodné významy.

Výhodná skupina zlúčenín sa môže vyjadriť čiastočným vzorcom la, ktorý inak zodpovedá všeobecnému vzorcu I, v kto roín však

- 5 predst· vuje D-Val znamená Phe predstavuje Asp a znamená Gly alebo Ala.

Zlúčeniny so všeobecným vzorcom I a tiež východiskové zlúčeniny na ich výrobu sa obvykle vyrábajú známymi spôsobmi, ako sú popísané v literatúre /napríklad v základných prácach, ako je Houben-Weyl, Methoden der organischen Chemie, Georg-Ihieme-Verlag, Stuttgard/ 8 síce pri reakčných podmienkach, ktoré sú známe a vhodné pre uvedené reakcie. Pritom sa môžu používať tiež známe, tu však bližšie neuvedené varian ty.

Východiskové zlúčeniny môžu vznikať, ak je to žiadúce, tiež in situ, takže sa nemusia izolovať z reakčných zmesí, pokiaľ sa hneó použijú pre reakciu na zlúčeniny so všeobecným vzorcom I.

Zlúčeniny so všeobecným vzorcom I sa môžu získať, kečí sa uvoľnia zo svojich funkčných derivátov solvolýzou, najmä hydrolýzou, alebo hvdrogenolýzou.

Výhodné východiskové zlúčeniny pre solvolýzu alebo hydrogenolýzu sú také zlúčeniny, ktoré na mieste jednej alebo väčšieho počtu amlnoskupín a/alebo h.ydroxyskupín obsahujú zodpovedajúce chránené aminoskupiny a/alebo hydroxvskupiny, výhodne také, ktoré na mieste atómu vodíka spojeného s atómom dusíka nesú skupinu chrániacu aminoskupinu, napríklad také, ktoré zodpovedajú všeobecnému vzorcu I, avšak v mieste aminoskupiny obsahujú skupinu so vzorcom NHR*, v ktorom R*znamená chrániacu skupinu, napríklad BOC alebo CBZ.

- 6 Ďalej sú výhodné východiskové zlúčeniny, ktoré na mieste voHíka hydroxyskupiny obsshujú skupinu chrániacu hydroxyskupinu, napríklad také zlúčeniny, ktoré zodpovedajú všeobecnému vzorcu I, avšak namiesto hydroxyfenylovej skupiny obsahujú skupinu RO-fenylovú, kde R znamená skupinu chrániacu hydroxyskupinu.

V molekule východiskovej zlúčeniny môže byť tiež prítomných viac rovnakých alebo rozdielnych chránených aininoskupín a/alebo hydroxyskupín. V prípade, že prítomné chrániace skupiny sú vzájomne odlišné j m~žu byť v mnohých prípadoch selektívne odštiepené.

Výraz skupina chrániaca aminoskupinu je všeobecne známy a vzťahuje sa na skupiny, ktoré chránia /blokujú/ aminoskupinu pred chemickou reakciou, a ktoré sú ľahko odštiepitelné, potom čo sa vykonala požadovaná chemická reakcia v iných miestach molekuly i Typickými takýmito zlúčeninami sú najmä nesubstituované alebo substituované acylové, arylové, aralkoxymetylové alebo sralkylové skupiny. Pretože sa skupina chrániaca aminoskupinu po požadovanej reakcii /alebo reakčnom slede/ odštiepi, jej druh a veľkosť všeobecne nie je rozhodujúca, avšak výhodne sa používajú také skupiny, ktoré obsahujú 1 až 20 atómov uhlíka, najmä 1 až 8 atómov uhlíka.

Výraz acylová skupina sa má chápať v súvislosti s predloženým spôsobom v najširšom zmysle. Tento výraz zahrnuje acylové skupiny odvodené od alifatických, aralifatických, aromatických alebo heterocyklických karboxylových kyselín alebo sulfónových kyselín; najmä potom ide o alkoxykarbonylové, aryloxykarbonylové a predovšetkým aralkoxykarbonylové skupiny. Príklady takýchto acvlových skupín sú alkanoylové skupiny, ako je acetyl, propionyl alebo butyryl, aralksnoylové skupiny', ako je fenylacetyl, arovlové skupiny, ako je benzoyl alebo toluyl, aryloxyalkanoylové skupiny, ako je POA, alkoxykarbonylové skupiny, ako je metoxykarbonyl, etoxykarbonyl, *

2,2,2-trichlóretoxykarbonyl, BOC alebo 2-jódetoxykarbonyl, aralkoxykarbonylové skupiny, ako je CBZ /karbobenzoxyskupili/, 4-metox.ybenzyloxykarbonyl alebo FMOC a arylsulfonové skupiny, ako je Mtr. Výhodné skupiny chrániace aminoskupinu εΰ BOC a Mtr, óalej CBZ, benzyl a acetyl.

Výryz skupina chrániaca hydroxyslrupinu je takisto všeobecne známy a vzťahuje sa na skupiny, ktoré sú výhodné pre ochranu hydroxyskupiny pred chemickou reakciou, ktoré sa však ľahko odštiepujú, potom čo prebehla chemická reakcia na inom mieste molekuly. Obvyklé takéto skupiny sú vyššie uvedené nesubstituované alebo substituované arylové, aralk.ylové alebo acylové skupiny, čalej tiež alkylové skupiny. Povaha a veľkosť skupín chrániacich hydroxyskupinu nie je rozhodujúca, pretože sa skupina chrániaca hydroxyskupinu po požadovanej reakcii alebo reakčnom slede znovu odštiepi, avšak výhodné sú také skupiny, ktoré obsahujij 1 až 20 atómov uhlíka, najmä 1 až 10 atómov uhlíka. Príklady skupín chrániacich hydroxyskupinu sú okrem iného benzyl, P-nltrobenzyl, p-toluénsulfonyl e acetyl, pričom benzyl a acetyl sú mimoriadne výhodné. Karboxyskupiny v kyseline aspargovej a kyseline glutámovej sú výhodne chránené vo forme svojho terc.-butylesteru/ napríklad Asp(OBut)/.

Funkčné deriváty zlúčenín so všeobecným vzorcom I, používané ako východiskové zlúčeniny, sa môžu vyrobiť obvyklými spôsobmi pre syntézu aminokyselín a peptidov, ako napríklad je popísané v základných prácach a patentových prihláškach, napríklad spôsobom vykonávaným v tuhej fáze podľa Merrifielda /B. F. Gysin a R. B. Merrifield, J. Am, Chem.

oc. 24, 3102 a nasl. /1972//.

Uvoľnenie zlúčenín so všeobecným vzorcom I z ich funkčných derivátov sa vykonáva, vždy podľa použitej funkčnej skupiny, napríklad pôsobením silných kyselín, účelne kyseliny

- 8 trif'luóroctove j alebo kyseliny chloridtej, avšak tiež pôsobením iných silných kyselín anorganických, ako kyseliny chlorovodíkovej alebo kyseliny sírovej j silných organických karboxylových kyselín, ako kyseliny trichlóroctovej alebo sulfónových kyselín, ako kyseliny benzénsulfónovej alebo kyseliny p-toluénsulfónovej. Prítomnosť dodatkového inertného rozpúšťadla je možná, avšak nie je vždy potrebná. Ako inertné rozpúšťadlo sa hodí výhodne organické rozpúšťadlo, napríklad karboxylové kyseliny, ako je kyselina octová, étery, ako je tetrahydrofurán alebo dioxán, amidy, ako je dimetylformamidj halogénované uhľovodíky, ako je dichlórmetán, óalej tiež alkoholy, ako metanol, etanol alebo izopropanol, rovnako ako voda* Ďalej prichádzajú do úvahy zmesi uvedených rozpúšťadiel. Kyselina trifluóroctová sa výhodne používa v prebytku bez prídavku čalšieho rozpúšťadlakyselina chloristá vo forme zmesi pozostávajúcej z kyseliny octovej a 70% kyseliny chĺoriätej v pomere 9:1* Reakčné teploty pre Štiepenie sú účelne od približne 0 do zhruba 50 °C, výhodne sa pracuje pri teplote od 15 do 30 °C /teplote miestnosti/.

Skupiny BOC, OBut a Mtr sa môžu výhodne odštiepiť pôsobením kyseliny trií’luóroctove j v dichlórmetáne alebo pôsobením 3- až 5-normálnej kyseliny chlorovodíkovej v dioxáne pri teplote od 15 do 30 °C. FMOC skupina sa môže odštiepiť pôsobením približne 5 až 50% roztoku dimetylamínu, dietylamínu alebo piperidínu v dimetylformamide pri teplote od 15 do 30 °C.

Hydrogonolyticky odštiepitelné chrániace skupiny /napríklad CBZ alebo benzyl/ sa môžu odštiepiť spracovaním s vodíkom v prítomnosti katalyzátora /napríklad katalyzátora na' báze drahých kovov, ako jepaládium, účelne na nosiči, ako na uhlí/* Ako rozpúšťadlo sa pritom hodia vyššie uvedené rozpúšťadla, najmä napríklad alkoholy, ako je metanol alebo eta*

- 9 nol, alebo smidy, ako je dimetylformamid. Hydrogenolýza ss zvyčajne vykonáva pri teplotách približne od 0 do 100 °C a tlaku zhruba od 100 kPa do 20 MPa, výhodne pri teplote od 20 do 30 °C a tlaku od 100 kPa do 1 MPa. Hydrogenolýza CBZ skupiny ša dobre darí napríklad na 5% až 10% paládiu na uhlí v metanole alebo pôsobením formiátu amónneho pri teplote od 20 do 30 °C.

Zlúčeniny so všeobecným vzorcom I sa môžu získať cyklizáciou zlúčenín so všeobecným vzorcom II pri podmienkach pre syntézu peptidov. Pritom sa účelne pracuje obvyklými spôsobmi známymi pre syntézu peptidov, ako sú napríklad popísané v publikácii Rouben-Weyl, citované vyš.ie, zv. 13/11, str. 1 až-806 /1974/.

Reakciu sa darí výhodne uskutočňovať v prítomnosti dehydratačného činidla, napríklad karbodilmidu, ako je DCCI alebo ĽDCI, ňalej anhydridu kyseliny propán!osfónovej /por. Ange'Vi Chem. £2, 129 /1980//, d.ifen.ylfosforylaz idu alebo 2-etoxy-IÍ-etoxykarbonyl-1,2-d ihydrochinolínu, v inertnom rozpúšťadle, napríklad halogénovanom uhľovodíku, ako je dichlórmetán, éteri, ako je tetrahydrofurán alebo dioxán, amide, ako je dimetylformamid alebo diraetylacetamid, nltrile, ako je acetonitrilu alebo zmesi týchto rozpúšťadiel, pri teplotách od približne -10 do 40 °C, výhodne od 0 do'30 °C. Aby sa podporila intramoiekulárna cyklizácia intramolekulárnej peptidovej väzby, je účelné pracovať v zriedenom rozpúšťadle /zásada rozriedenia/.

Namiesto zlúčenín so všeobecným vzorcom II se môžu tiež pri reakcii používať reaktívne deriváty týchto zlúčenín, n príklad také, v ktorých sú reaktívne skupiny intermediárne blokované chrániacimi skupinami. Deriváty aminokyselín so v”e obecným vzorcom II sa môžu používať napríklad vo forme svojich aktivovaných esterov, ktoré sa účelne tvoria in situ, neprikla j prídavkom HOBt alebo Ň-hydroxysukcinimidu.

Východiskové zlúčeniny so všeobecným vzorcom II sú¹ zvyčajne nové zlúčeniny, ktoré s·' ni^Ažu vyrábať známymi spôsobmi, napríklad spôsobmi popísanými vyššie pre syntézu peptidov a odštiepením chrániacich skupín.

Zvyčajne se predovšetkým syntetizuj§^?ÍVOP^pentapeptidu so všeobecným vzorcom R*-Z-OR”, napríklad BOC-Z-OMe ale bo BOC-Z-OEt, ktorý sa najprv zmydelní na kyseliny so všeobecným vzorcom R*-Z-OH, napríklad BOC-Z-OTI a z tejto zlúčeniny sa odštiepi chrániaca skupina R* čím sa získajú voľné peptidy so všeobecným vzorcom II

K-Z-OH /11/.

Báza všeobecného vzorca I sa môže previesť reakciou s kyselinou na príslušnú adičnú soľ s kyselinou. Pre túto reakciu prichádzajú do úvahy najma kyseliny, ktoré poskytujú fyziologicky nezávadné soli. Tak sa môžu použiť anorganic ké kyseliny, napríklad kyselina sírová, kyselina dusičná, halogenovodíkové kyseliny, ako je kyselina chlorovodíková alebo kyselina brómovo líková, kyseliny fosforečné, ako je kyselina ortofosforečná, alebo kyselina sulfámová, óalej organické kyseliny, najma alifatické, alIcyklické, aralifatické, aromatické alebo heterocyklické jednosýtne alebo viacsýt ne karboxylové, sulfónové alebo sírové kyseliny, napríklad kyselina mravčia, kyselina octová, kyselina propiónová, kyselina pivalová, kyselina dietyloctová, kyselina melónová, kyselina jantárová, kyselina pimelovó, kyselina fumárová, kyselina maleínová, kyselina mliečna, kyselina vínna, kyselina jablčná, kyselina benzoová, kyselina salicylová, kyselina 2- alebo 3-fenylprop.iónová, kyselina citrónová, kyselina glukónová, kyselina askorbová, kyselina nikotínová, kyselina izoni.kotínová, kyselina metánsulfónová, kyselina etáns Ifónová, kyselina etándisulfónová, kyselina 2-hydroxyetán* sulfónová, kyselina benzénsulfónová, kyselina p-t.oluénsulfónová, kyselina naftalénmonosulfónová, kyselina naftaléndisulfónová a kyselina laurylsírová. Soli s fyziologicky neprijatelnými kyselinami, napríklad pikráty, sa môžu používať na izoláciu a/alebo prečistenie zlúčenín so všeobecným vzorcom E.

t

Na druhej strane sa kyselina so všeobecným vzorcom í prevedie reakciou s bázou na svoju fyziologicky prijstelnú soľ s kovom alebo soľ amónnu. Ako soli pritom prichádzajú do úvahy najmä soli sodné, draselné, hôrečnaté, vápenaté a. amónne, áriej substituované amónne soli, napríklad dimetylamónna, dietylamónna alebo diizopropylamónna soľ, monoetanolamónna, dietanolamónna alebo trietanolamónna soľ, cyklohexylamónna a d i. cyklohexyl amónna soľ, dibenzylet.yléndiamónna soľ, Číalej napríklad soli s W-metyl-D-plukamínom alebo s arginínom alebo lyzínom.

Nové zlúčeniny so všeobecným vzorcom I a ich fyziologicky prijateľné soli sa môžu používať na výrobu farmaceutických prostriedkov, pokial sa vo vhodnej dávkovej forme uvedú do styku dokopy s aspoň jednou nosnou látkou alebo látkou pomocnou a podľa potreby tiež dokopy s aspoň jednou ňa.lšou účinnou látkou. Takto získané prostriedky sa môžu používať v humánnej a veterinárnej medicíne ako liečivá. Ako nosné látky prichádzajú do úvahy organické alebo anorganické látky, ktoré sú vhodné pre anterálne /napríklad orálne alebo rektálne/, parenterálne /napríklad intravenózne injekcie/ alebo lokálne /napríklad topická, dermálne, oftalmické alebo nazálne/ aplikácie alebo pre použitie vo forme inhalačných sprejov a. s novými zlúčeninami nereagujú, ako je napríklad voda, vodné izotonické roztoky chloridu sodného, nižšie alkoholy, rastlinné oleje, benzvlalkohol, polyetylénglykoly, triacetát glycerínu a iné glyceridy mastných kyselín, želatína, sójový lecitín, uhľohydráty, ako laktóza alebo škroby, *

stearát horečnatý, mastenec, celulóza a vazelína. Pre perorálne podanie slúžia zvláštne tablety, dražé, kapsule, sirupy, otavy .alebo kvapky, pričom zaujímavé sú. zvláštne lakované tablety e kapsule s povlakom odolným voči žalúdočným šťavám alebo potiahnuté kapsule* Pre rektálne použitie slúžia čipky, na parenterálnu aplikáciu roztoky, výhodne olivové alebo vodné roztoky, 3alej suspenzie, emulzie alebo implantáty. Pre topické použitie sa hodia napríklad roztoky, ktoré sa používajú vo forme očných kvapiek, 3alej napríklad suspenzie, emulzie, krémy* masti alebo komprimáty. Pre použitie ako inhalačné spreje sa môžu používať také spreje, ktoré obsahujú účinnú látku rozpustenú alebo suspendovanú vo vynášacom plyne alebo zmesi vynášacích plynov /napríklad v oxide uhličitom alebo fluórovaných a súčasne chlórovaných uhľovodíkoch/. Účinná látka sa účelne pritom používa v raikronlzovanej forme, pričom sa môže pridávať jedna alebo väčší počet dodatkových fyziologicky znášanlivých rozpúšťadiel, ako je napríklad etanol. Inhalačné roztoky sa môžu podávať pomocou obvyklých inhalátorov. Nové zlúčeniny sa môžu tiež lyofllizovať a získané lyofilizáty se nržu použiť napríklad na prípravu injekčných prípravkov. Injekcie sa môžu pritom podávať ako boľus alebo ako nepretržitá infúzia /napríklad intravenózna, intravaskulérna, subkutánna alebo intratekálna/. Uvedené prostriedky sa irU'žu sterilizovať a/alebo môžu obsahovať pomocné látky, ako konzervačné prostriedky, stabilizátory a/alebo zmáeacie prostriedky, emulgačné činidlá, soli ηβ ovplyvnenie osmothk'ho tlaku, pufre, farbivá a/alebo aromatické látky. Prostriedky môžu podľa potreby obsahovať tiež najmenej jednu 3alšiu účinnú látku, napríklad jeden alebo väčší počet vitamínov

Látky podľa tohto vynálezu sa nľžu spravidla podávať analogicky, ako známe v obchode dostupné' peptidy, najmä však zlúčeniny popísané v US patente č. 4 472 305, výhodne v dávke približne od 0,05 do 500 mg, najmä od 0,5 do 100 mo na dávkovú jednotku. Denné dávka je výhodne od približne 0,01 do

2 mg/kg telesnej hmotnosti. Zvláštne dávka pre každého určitého pacienta však závisí od rôznych okolností, napríklad od účinnosti použitej zvláštnej zlúčeniny, veku, telesnej hmotnosti, všeobecnom zdravotnom stave, pohlaví, cene, čase a ce ste podania, rýchlosti vylučovania, kombinácii liečiv a obtiažnosti príslušného ochorenia, ktorého sa týka terapia. Parenterálna aplikácia je výhodná.

Príklady uskutočnenia vynálezu

V predchádzajúcom aj nasledujúcom texte sa teploty uvádzajú, ako je obvyklé, v stupňoch celzia. V óalej uvedených príkladoch sa za ’bpôsob obvyklého opracovania pokladá, keó sa podľa potreby pridá voda, vykoná sa neutralizácia extrakcia éterom alebo dichlórmetánom, oddelenie fáz, vysušenie organickej fáze síranom sodným, filtrácia, odparenie a čistenie chromatografiou na silikagéli a/alebo kryštalizáciou. RD označuje čas retencie /v minutách/ pri vysoko účinnej kvapalinovej chromatografii na stĺpci naplnenom LiChrosorb RP select B /250 až 4,7 pm/, elučné činidlo: 0,3 % kyselina trifluóroctová vo vode, izopropanolový gradient od 0 do 80 % objemových počas 50 minút pri prietoku 1 ml/min, detekcia sa vykonáva pri vlnovej dĺžke 215 nm. M označuje molekulárny pik v hmotnostnom spektre, získaný technikou •'bombardovania rýchlými atómami.

Príklad 1

Roztok 30 mg cvklo-(D-Val-L-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-P-Arg(f4tr)) /ktorý sa môže získať cyklizáciou H-D-Arg(Mtr)-ľ)-Val-L-Phe-D-Asp(OBut^-Gly-OH spôsobom vykonaným podľa príklady 2/ v 840 pl TFA, 170 pl dichlórmetánu a 85 pl tiofenolu sa nechá stáť pri teplote 20 °C počas 2 hodín, a potom sa odparí pri zníženom tlaku pri teplote 37 °C a po zrie dení vodou sa lyof .ilizu je. Po gelovej filtrácii s použitím Sephadexu G 10 v zmesi kyseliny octovej a vody v pomere

1:1 e následnom čistení vysoko účinnou kvapalinovou chro matografiou na stĺpci naplnenom LiChrosorb RF 8 s izopro pcnolovým gradientom v 0,3% TFA vo vode sa dostane cyklo -(D-Val-L-Phe-D-Asp-gly-D-Arg), RD 17,9, H⁺ 375.

Analogickým spôsobom sa získa:

z cyklo-( D-Vcl-D-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-D-ÄrgQítr)) cyklo-(.D-Val-D-Phe-D-Asp-Gly-D-Arg}, RD 18,5, M⁺ 575, z cvklo-(D-Val-D-Phe-L-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr)) cvklo-(Ľ-Val-D-Phe-L-Asp-Gly-D-Arg), RD 19,3, M⁺ 575, z c.yklo-(D-Val“Ľ-Phe-R-Asp(pBut}-Ľ-Ala-R-ArgO'^í‘‘tľ)') cyklo-(D-Val-D-Phe-D-Asp-L-Ala-R-Arg'), RD 20,3, M⁺ 589, z c.yklo-(D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg(Mtr)) cyklo- (D-Val-D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg), RD 21,4, 584 z cyklo-(D-Val-D-Phe-L-Asp(OBut}-Gly-L-Arg(Mtr)) cy klo-(D-Val-D-Phe-L-Asp-Gly-Lr-Arg'), z cyklo-(L-Val-D-Phe-D-Asp(OBut)-Gly-L-Arg(ľítr)) cvklo-(L-Val-D-Phe-D-Asp-Gly-L-Arg}, z cyklo-(D-Val-L-Phe-D-Asp(OBut.^-Gly-L-Ärg(ľ’tr)) cyklo-^D-Val-L-Phe-D-Asp-Gly-L-Arg}, z cyklo- (L-Val-D-Phe-L-Asp(OBut)-Gly-D-Arg(Mtr)) cyklo-(L-Val-D-Phe-L-Asp-C-ly-D-Arg'), z cyklo-(D-Val-L-Pbe-L-Asp(OBut}-Glv-D-Arg(Mtr)) cyklo- (D -Vel-L-Phe-L-Asp-Gly-D-Arg), z cyklo-(_L-Val-L-Phe-D-Asp(OBut) -Gly-D-Arg(Mtr)) cyklo-(L-Val-L-Phe-D-Asp-Gly-D-Arg},

- 15 z cyklo-(L-Val-D-Phe-L-Asp^OBut) -D-Ala-L-Arg(Mtr)) cyklo-^L-Val-D-Phe-L-Asp-D-Ala-L- Arg), z cyklo- (D-Val-L-Phe-L-Asp(OBut)-D-Ala-L-Arg(Mtr)) cyklo-(D-Val-L-Phe-L-Asp-D-Ala-^-Arg), . z cyklo-ÍL-Val-L-Phe-D-Asp(OBut)-D-Ala-L-ArgQ'ítr)) cyklo-^L-Val-L-Phe-D-Asp-D-Ala-L-Arg) a z cyklo-CL-Val-L-Phe-L-Asp^But^-D-Ala-D-ArgO'ľtr)) cyklo-(L-Val-L-Phe-L-Asp-D-Ala-D-Arg}.

Príklad 2

Roztok 80 mg H-L-Arg-Ď-Val-D-Phe-D-AspíOMe^-Gly-OKa /ktorý sa môže získať odštiepením FMOC skupiny z FMOC-L-Arg-D-Val-D-Asp(OMe}-Gly-O-Wang, kde O-’Vang znamená zvyšok -4-oxymetylfenoxymetyl-polystyrénu použitý pri Merrfteldovej syntéze, zosieťovanébo z 1 % p-divinylbenzénom, pôsobením morfolínu a odštiepením pentapeptidu od polyméru pôsobením zmesi TFA a dichlórmetánu v pomere 1:1/ v 8 ml DMF sa zriedi 72 ml dichlórmetánu a uvedie do styku s 34 mg jemne práškového hydrogénuhličitanu sodného. Po vysušení zmesí tuhého oxidu uhličitého 9 acetónu sa pridá 34 Jul difenylfosforylazidu. Všetko sa nechá stáť pri teplote 20 °C počas 16 hodín a potom sa oddestiluje pri teplote 37 °C dichlórmetán. Zvyšný roztok sa podrobí gelovej filtrácii /na stĺpci Seph.adex G10 so zmesou izopropanolu a vody v pomere 8;2/ a potom sa podrobí chromatografii na stĺpci polyméru /Mitsubishi MCI CHP-20P/, pri použití izopropanolového gradientu vo vode. Tak sa získa c.yklo-(D-Val -D-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg), RD 21,4, M⁺ 589.

Celej uvedené príklady sa týkajú farmaceutických prostriedkov.

Príklad Λ: Injekčné fľaštičky

Roztok 100 g cyklopeptidu so všeobecným vzorcom I s 5 g hydrogenfosforečnanu sodného v 3 litroch dvakrát destilovanej vody s? upraví 2-normálnou kyselinou chlorovodíkovou na hodnotu pH 6,5, sterilné se filtruje, plní do injekčných fľaštičiek, lyofilizuje sa pri sterilných podmienkach a sterilné uzatvorí. Každá injekčná fľaštičky obsahuje 5 mg účinnej látky.

Príklad B: Čipky

Zmes 20 g účinnej látky so všeobecným vzorcom I sa roztaví s 100 g sójového lecitínu a 1400 g kakaového masla, naleje do foriem a nechá vychladnúť. Každý čípok obsahuje 20 mg účinnej látky.

Príklad C: Roztok

Pripraví sa roztok z 1 g účinnej látky so všeobecným vzorcom I, 9,3B g dihydrátu dihydrogenfosforečnanu sodného, 28,48 g dodekahydrátu hydrogenfosforečnanu dvojsodného a 0,1 g benzalkónlumchloridu v 940 ml dvakrát, destilovanej vody. hodnota pp sa upraví na 6,8, roztok sa doplní na 1 liter a sterilizuje sa. pôsobením žiarenia. Tento roztok sa môže použiť vo forme očných kvapiek.

Príklad D: Masť

500 mg účinnej látky so všeobecným vzorcom I sa zm.ieše

- 17 s 99,5 g vazelíny pri aseptických podmienkach.

Príklad E: Tablety

Zmes 100 g cýklopeptidu so všeobecným vzorcom I, kg laktózy, 600 g mikrokryštalickej celulózy, 600 g kukuričného škrobu, 100 g polyvinylpyrolidínu, 80 g mastenca a 10 g stearátu horečnatého sa obvyklým spôsobom zlisuje na tablety tak, že každá tableta obsahuje 10 mg účinnej látky.

Príklad F: T.'ražé

Vylisujú sa tablety ako je uvedené v príklade E a potom sa potihanu obvyklým spôsobom povlakom zo sacharózy, kukuričného škrobu, mastenca, tragantu a farbiva.

Príklad G: Kapsule

Obvyklým spôsobom sa naplnia tvrdé želatínové kapsule účinnou látkou so všeobecným vzorcom I, tak, že kaž.dá kapsula obsahuje 5 mg účinnej látky.

Príklad H: Inhalačný sprej g účinnej látky so všeobecným vzorcom I sa rozpustí v 10 litroch izotonického roztoku ch¹ oridu sodného a roztok sa plní do obchodne dostupných rozstrekovacích nádobiek zaopatrených čerpacím mechanizmom. Roztok sa môže rozstrekovať do úst alebo do nosu. Rozstrekovaný objem /približne 0,1 ml/ zodpovedá dávke približne 0,14 mg· účinnej látky.

Claims (11)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Cyklopeptidy so všeobecným vzorcom I cyklo-(A-B-C-D-Arg) /1/, v ktorom

   A a B znamenajú vždy nezávisle Od seba Ala, Asn, Asp,

   Arg, Cys, Gin, Glu, Gly, His, Íle, Leu, Lys, Met,

   Phe, Pro, Ser, Thr, Trp, Tyr alebo Val,

   C predstavuje Asp alebo Asp(O-C^_^-alkyl) a

   D znamená Gly alebo Ala, pričom aspoň dva uvedené zvyšky aminokyseliny sú. v D-forme, rovnako ako ich soli*
2. 2. cyklo-(p-Val-L-Phe-D-Asp-Gly-D-Arg).
3. 3. cyklo-(D-Val-D-Phe-D-Asp-Gly-L-Arg).
4. 4. cyklo-(D-Val-D-Phe-L-Asp-Gly-D-Arg).
5. 5. cyklo-^D-Val-D-Phe-D-Asp-L-Ala-D-Arg).
6. 6. cyklo-(D-Val-P-Phe-D-Asp(OMe)-Gly-L-Arg).
7. 7. Spôsob výroby zlúčeniny so všeobecným vzorcom I podľa nároku 1 alebo jej soli, vyznačujúci sa t ý m_t že sa uvolní zo svojho funkčného derivátu spracovaním so solvolyzačným alebo hydrogenolyzačným činidlom.

   alebo sa peptid so všeobecným vzorcom II

   - 19 ΙΙ-Ζ-ΟΗ /η/, v ktorom

   Z znamená A-B-C-D-Arg-,

   -B-C-D-Arg-A-, ^z -C-D-Arg-Λ-Β-,

   -D-Arg-A-B-C- alebo -Arg-A-B-C-D-, alebo reaktívny derivát takéhoto peptidu spracuje s cvklizačným činidlom a/alebo sa bázická alebo kyslá zlúčenina so všeobecným vzorcom I prevedie spracovaním s kyselinou alebo bážou na Svoju soľ.
8. 8. Spôsob výroby farmaceutických prostriedkov, vyznačujúci sa tým, že vo Vhodnej dávkovej forme sa uvedie zlúčeniny so všeobecným vzorcom I podľa nároku 1 a/alebo jej fyziologicky prijetelná soľ do styku spolu s aspoň jednou tuhou^ kvapalnou alebo polotuhou nosnou alebo pomoconou látkou.
9. 9. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúc i sa t ý m, že obsahuje aspoň jednu zlúčeninu so všeobecným vzorcom 1 podľa nároku 1 a/alebo jej fyziologicky prijatelnú soľ.
10. 10. Použitie zlúčenín so všeobecným vzorcom I podľa nároku 1 a/alebo ich fyziologicky prijatelných solí na výrobu liečiva.
11. 11. Použitie zlúčenín so všeobecným vzorcom T podľa nároku 1. a/alebo ich fyziologicky prijatelných solí na hubenie chorôb.