RU2687041C1 - Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров - Google Patents
Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров Download PDFInfo
- Publication number
- RU2687041C1 RU2687041C1 RU2018120191A RU2018120191A RU2687041C1 RU 2687041 C1 RU2687041 C1 RU 2687041C1 RU 2018120191 A RU2018120191 A RU 2018120191A RU 2018120191 A RU2018120191 A RU 2018120191A RU 2687041 C1 RU2687041 C1 RU 2687041C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- chitosan
- cows
- endometritis
- treatment
- bacillus subtilis
- Prior art date
Links
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 title claims abstract description 51
- 208000004145 Endometritis Diseases 0.000 title claims abstract description 48
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 45
- 230000002265 prevention Effects 0.000 title claims description 15
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims abstract description 101
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims abstract description 29
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 claims abstract description 24
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 11
- 238000003381 deacetylation reaction Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000006196 deacetylation Effects 0.000 claims abstract description 10
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims abstract description 4
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 235000015191 beet juice Nutrition 0.000 claims abstract description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 63
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 51
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 4
- -1 caso 3 Substances 0.000 claims description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 abstract description 5
- 239000008267 milk Substances 0.000 abstract description 5
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 abstract description 5
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 abstract 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 abstract 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 46
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 25
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 17
- 238000000034 method Methods 0.000 description 14
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 11
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 11
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 11
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 10
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 9
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 8
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 8
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 239000000829 suppository Substances 0.000 description 7
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 7
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 6
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 6
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 5
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 5
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 5
- 208000030373 chronic endometritis Diseases 0.000 description 5
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 5
- 229960001625 furazolidone Drugs 0.000 description 5
- PLHJDBGFXBMTGZ-WEVVVXLNSA-N furazolidone Chemical compound O1C([N+](=O)[O-])=CC=C1\C=N\N1C(=O)OCC1 PLHJDBGFXBMTGZ-WEVVVXLNSA-N 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 5
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 4
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 4
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 4
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 239000004460 silage Substances 0.000 description 4
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 239000005714 Chitosan hydrochloride Substances 0.000 description 3
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 3
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 3
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 3
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 3
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 3
- 238000006640 acetylation reaction Methods 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N metronidazole Chemical compound CC1=NC=C([N+]([O-])=O)N1CCO VAOCPAMSLUNLGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960000282 metronidazole Drugs 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 3
- ICVKYYINQHWDLM-KBEWXLTPSA-N (2r,3r)-2,3-dihydroxybutanedioic acid;2-[(4r,5s,6s,7r,9r,11e,13e,15r,16r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-5-[(2s,4r,5s,6s)-4,5-dihydroxy-4,6-dimethyloxan-2-yl]oxy-4-(dimethylamino)-3-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-16-ethyl-4-hydroxy-15-[[(2r,3r,4r,5r,6r)-5-hydroxy-3,4 Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 ICVKYYINQHWDLM-KBEWXLTPSA-N 0.000 description 2
- DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N Acetamide Chemical group CC(N)=O DLFVBJFMPXGRIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 201000004171 acute endometritis Diseases 0.000 description 2
- 230000000843 anti-fungal effect Effects 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000009534 blood test Methods 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- WJJMNDUMQPNECX-UHFFFAOYSA-N dipicolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC(C(O)=O)=N1 WJJMNDUMQPNECX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 244000144980 herd Species 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 2
- 208000000509 infertility Diseases 0.000 description 2
- 230000036512 infertility Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000035987 intoxication Effects 0.000 description 2
- 231100000566 intoxication Toxicity 0.000 description 2
- 230000000622 irritating effect Effects 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 230000003274 myotonic effect Effects 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 2
- AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N propranolol Chemical compound C1=CC=C2C(OCC(O)CNC(C)C)=CC=CC2=C1 AQHHHDLHHXJYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 2
- 229960001717 tylosin tartrate Drugs 0.000 description 2
- KFUDFIMHDRJVLV-MSKGSUGCSA-N (z)-7-[(1s,2r,3r,5s)-2-[(2s)-3-(3-chlorophenoxy)-2-hydroxypropyl]sulfanyl-3,5-dihydroxycyclopentyl]hept-5-enoic acid Chemical compound C([C@H](O)CS[C@@H]1[C@H]([C@@H](O)C[C@H]1O)C\C=C/CCCC(O)=O)OC1=CC=CC(Cl)=C1 KFUDFIMHDRJVLV-MSKGSUGCSA-N 0.000 description 1
- 235000001674 Agaricus brunnescens Nutrition 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N Baytril Chemical compound C1CN(CC)CCN1C(C(=C1)F)=CC2=C1C(=O)C(C(O)=O)=CN2C1CC1 SPFYMRJSYKOXGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002498 Beta-glucan Polymers 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 241000194032 Enterococcus faecalis Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- 240000000950 Hippophae rhamnoides Species 0.000 description 1
- 235000003145 Hippophae rhamnoides Nutrition 0.000 description 1
- 241000556204 Huso dauricus Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 241000735284 Irena Species 0.000 description 1
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 1
- 241000194041 Lactococcus lactis subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010036416 Postpartum complications Diseases 0.000 description 1
- 235000014969 Streptococcus diacetilactis Nutrition 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 239000004182 Tylosin Substances 0.000 description 1
- 229930194936 Tylosin Natural products 0.000 description 1
- 208000025609 Urogenital disease Diseases 0.000 description 1
- 208000006374 Uterine Cervicitis Diseases 0.000 description 1
- 206010046914 Vaginal infection Diseases 0.000 description 1
- 201000008100 Vaginitis Diseases 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 230000021736 acetylation Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N all-trans beta-carotene Natural products CC=1CCCC(C)(C)C=1/C=C/C(/C)=C/C=C/C(/C)=C/C=C/C=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-UKMVMLAPSA-N 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002421 anti-septic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000011203 antimicrobial therapy Methods 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N beta-carotene Natural products CC(=C/C=C/C=C(C)/C=C/C=C(C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C)C=CC=C(/C)C=CC2=CCCCC2(C)C TUPZEYHYWIEDIH-WAIFQNFQSA-N 0.000 description 1
- 235000013734 beta-carotene Nutrition 0.000 description 1
- 239000011648 beta-carotene Substances 0.000 description 1
- 229960002747 betacarotene Drugs 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 229940088623 biologically active substance Drugs 0.000 description 1
- 229920001222 biopolymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004820 blood count Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 1
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- AIXAANGOTKPUOY-UHFFFAOYSA-N carbachol Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCOC(N)=O AIXAANGOTKPUOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 229940106164 cephalexin Drugs 0.000 description 1
- ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N cephalexin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@@H]3N(C2=O)C(=C(CS3)C)C(O)=O)=CC=CC=C1 ZAIPMKNFIOOWCQ-UEKVPHQBSA-N 0.000 description 1
- 206010008323 cervicitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000035606 childbirth Effects 0.000 description 1
- 210000003022 colostrum Anatomy 0.000 description 1
- 235000021277 colostrum Nutrition 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000009918 complex formation Effects 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000006389 diacetylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 229960000740 enrofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004744 fabric Substances 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 230000004720 fertilization Effects 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 229960002518 gentamicin Drugs 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 244000309465 heifer Species 0.000 description 1
- 229920006158 high molecular weight polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 231100000535 infertility Toxicity 0.000 description 1
- 230000009027 insemination Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940090504 iodopen Drugs 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- XBCXJKGHPABGSD-UHFFFAOYSA-N methyluracil Natural products CN1C=CC(=O)NC1=O XBCXJKGHPABGSD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 210000001724 microfibril Anatomy 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 1
- 230000000956 myotropic effect Effects 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- IAIWVQXQOWNYOU-FPYGCLRLSA-N nitrofural Chemical compound NC(=O)N\N=C\C1=CC=C([N+]([O-])=O)O1 IAIWVQXQOWNYOU-FPYGCLRLSA-N 0.000 description 1
- 229960001907 nitrofurazone Drugs 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000010606 normalization Methods 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 229940060184 oil ingredients Drugs 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 description 1
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 231100000915 pathological change Toxicity 0.000 description 1
- 230000036285 pathological change Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 229920000867 polyelectrolyte Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 229960003712 propranolol Drugs 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004994 reproductive system Anatomy 0.000 description 1
- 238000011012 sanitization Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 230000001568 sexual effect Effects 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000003330 sporicidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002602 strong irritant Substances 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N thymine Chemical compound CC1=CNC(=O)NC1=O RWQNBRDOKXIBIV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001256 tonic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 239000006163 transport media Substances 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229960004059 tylosin Drugs 0.000 description 1
- WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N tylosin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](C)O[C@H]([C@@H]([C@H]1N(C)C)O)O[C@@H]1[C@@H](C)[C@H](O)CC(=O)O[C@@H]([C@H](/C=C(\C)/C=C/C(=O)[C@H](C)C[C@@H]1CC=O)CO[C@H]1[C@@H]([C@H](OC)[C@H](O)[C@@H](C)O1)OC)CC)[C@H]1C[C@@](C)(O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 WBPYTXDJUQJLPQ-VMXQISHHSA-N 0.000 description 1
- 235000019375 tylosin Nutrition 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N β-Carotene Chemical compound CC=1CCCC(C)(C)C=1\C=C\C(\C)=C\C=C\C(\C)=C\C=C\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C OENHQHLEOONYIE-JLTXGRSLSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/742—Spore-forming bacteria, e.g. Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, clostridium or Lactobacillus sporogenes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/10—Bacillus licheniformis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/07—Bacillus
- C12R2001/125—Bacillus subtilis ; Hay bacillus; Grass bacillus
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии. Препарат для лечения и профилактики послеродовых эндометритов коров для внутриматочного введения содержит бактерии Bacillus subtilis и бактерии Bacillus licheniformis с титром спор 108-1011 в соотношении 1:1, 0,5-1,5% раствор хитозана со степенью дезацетилирования не менее 70% и вязкостью 20-200 сП и вспомогательные вещества, такие как лактоза, СаСО3, молочная сыворотка или свекольный сок в заданном соотношении компонентов. При этом в качестве бактерий используются штамм Bacillus subtilis УКМ В-5007 и штамм Bacillus licheniformis УКМ В-5514 или Bacillus subtilis ВКПМ В-10172 и штамм Bacillus licheniformis ВКПМ В-10135 или Bacillus subtilis СН201 и штамм Bacillus licheniformis СН200, а рН находится в пределах 3,5-5,8. Изобретение позволяет улучшить эффективность лечения или профилактики послеродовых эндометритов коров. 3 з.п. ф-лы, 2 табл., 15 пр.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, ветеринарной медицине, в частности – к гинекологии, и может быть использовано для предупреждения и лечения патологии репродуктивных органов в послеродовом периоде.
Послеродовые эндометриты коров стали масштабным явлением. Они по нарастающей сопровождают весь период промышленного скотоводства, и в среднесрочной перспективе снижение их масштабов не просматривается. Если раньше эндометриты наблюдались у 30% рожениц, то сейчас отмечают до 80% случаев, причем особенно часто – у высокопродуктивных коров.
Первопричина эндометритов может быть разной, но в родовых путях больных животных всегда отмечается массированное развитие микрофлоры. Отсюда следует, что эффективным лечебно-профилактическим средством при послеродовых эндометритах должны быть этиотропные препараты с выраженным антимикробным действием. Обычно это антибиотики, и их применение действительно позволяет устранить клинические признаки послеродового эндометрита. Однако у многих животных заболевание переходит в скрытую форму, без клинических проявлений. В результате следствием монотерапии антибиотиками часто оказывается бесплодие.
В качестве альтернативы антибиотикам предлагается использовать препараты на основе йода, для внутриматочного применения. /1, 2/. Недостатком такой монотерапии, заметно ограничивающим применение йодсодержащих препаратов, является сильное раздражающее действие йода на слизистую оболочку матки.
Другим подходом к лечению послеродовых эндометритов является комплексное лечение, когда наряду с антимикробной терапией одновременно применяют иммуностимулирующую, гормональную, витаминную и другие варианты терапии. Эффективность такого лечения выше, т.к. число бесплодий значительно меньше, чем при монотерапии. Однако необходимость вводить корове целый ряд препаратов заметно увеличивает трудоемкость процесса.
Дальнейшим развитием принципа комплексного лечения является применение многокомпонентных препаратов, содержащих два и более действующих начала различной фармакологической направленности: антибактериальные, иммуностимулирующие, миотропные, общеукрепляющие и другие.
Так, известен препарат Метролек, обладающий противовоспалительным, противомикробным, регенеративным и миотоническим свойствами благодаря наличию в его составе таких действующих начал, как облепиховое масло, тилозин тартрат, фуразолидон, β-каротин, метилурацил, метронидазол, миотоническое средство, масло растительное. Препарат представляет собой эмульсию и вводится больной эндометритом корове внутриматочно, в количестве от 20 до 60 см3 1 раз в сутки с интервалом в 24 часа /3, 4/.
Известен также препарат Метролек-Е, отличающийся от Метролека тем, что он вместо тилозин тартрата содержит в своем составе энрофлоксацин.
Недостатком указанных препаратов является то, что в их состав обязательно входит антибиотик, со всеми вытекающими отсюда последствиями (привыкание микрофлоры, возможность аллергических реакций, невозможность использования молока для пищевых целей).
Известно средство для лечения эндометритов у коров в виде суппозиториев, содержащих фуразолидон и дополнительно биологически активное вещество Био-Мос, диметилсульфоксид и карбахолин /5/.
Недостатком данного средства является то, что входящее в его состав антимикробное средство фуразолидон оказывает на раневую поверхность слизистой оболочки матки раздражающее действие, аналогично действию йодных препаратов.
Несмотря на то, что в целом применение многокомпонентных препаратов имеет свои преимущества, как менее трудоемкое по сравнению с комплексным лечением, заметного повышения эффективности лечения и в этом случае не наблюдается.
Все большее распространение приобретает использование для лечения послеродовых эндометритов пробиотических препаратов на основе спорообразующих бактерий. Их применение позволяет не только добиться высокого лечебного эффекта без отрицательного воздействия на организм животного, но также нормализовать состояние его репродуктивной системы после применения противомикробных препаратов. К тому же спорообразующие пробиотики самоэлиминируются из организма после оказания пробиотического действия.
Пробиотические препараты на основе бактерий рода Bacillus оказывают на патогенную и условно-патогенную микрофлору как прямое, так и опосредованное действие. Первый вариант осуществляется за счет синтеза биологически активных веществ, таких как различные гидролитические ферменты и антибиотикоподобные вещества (например, дипиколиновая кислота). Второй вариант связан с активацией иммунного ответа организма: бактерии рода Bacillus оказывают стимулирующее воздействие на регионарные лимфатические узлы и лимфоциты крови, что значительно повышает уровень защитных реакций организма. Также установлен факт повышения продукции эндогенного интерферона уже в первые минуты после введения пробиотика на основе Bacillus. Споровые пробиотические препараты обладают высоким профилем безопасности. Об этом свидетельствует многолетний опыт их клинического применения в медицине и ветеринарии для нормализации микрофлоры кишечного тракта, а также результаты экспериментальных работ. В ходе многочисленных морфологических, биохимических, бактериологических и иммунологических исследований побочных явлений не выявлено, следовательно, споровые пробиотические препараты можно считать достаточно безопасными /6/.
Для лечения эндометритов у коров предложено немало споровых пробиотиков. Известен препарат под названием Гипролам для профилактики послеродовых эндометритов у коров. Он представляет собой суспензию светло-коричневого цвета, содержащую жизнеспособные штаммы молочнокислых бактерий Lactobacillus fermentum 44/1 (ВКПМ В-2940) и Lactococcus lactis subsp. lactis 574 (ВКПМ В-3145) в количестве не менее 1х108 КОЕ/см3 и вспомогательные вещества: вода, сыворотка молочная, глюкоза, экстракт дрожжевой. Предлагается применять Гипролам интравагинально по двум схемам: до родов, за 5-7 дней до отела, ежедневно в дозе 100 мл /7/ и после родов, не позднее 12 часов, дважды с интервалом 24 часа. Применение его до отела профилактирует развитие у коров послеродового эндометрита в 71,4-80,0%, а после отела – поддерживает на оптимальном уровне содержание в родовых путях и молозиве индигенной микрофлоры /7, 8, 9/.
Недостатком препарата Гипролам является его невысокая эффективность, в среднем– 75%, и незначительный срок его хранения, всего 45 дней /3/.
Известен пробиотический препарат под названием Моноспорин для лечения коров с хроническим эндометритом. Моноспорин представляет собой суспензию со взвешенными частицами от светло-коричневого до кремового цвета, содержащую микробную массу спорообразующих бактерий Bacillus subtilis 945 (B-5225) в количестве 1х108 КОЕ/см3. Препарат вводят внутриматочно по 5 мл 1 раз в день на 9, 10, 11, 12 и 13 дни после отела. В результате период от родов до восстановления половой цикличности сокращается на 17,36 дней, индекс оплодотворения сократился на 0,56 /10/.
Известен препарат под названием Эндоспорин для лечения и профилактики эндометритов животных, представляющий собой лиофилизированную биомассу Bacillus subtilis 39 и Bacillus subtilis 51 в соотношениях клеток 1:1 при следующем соотношении компонентов на 1 г сухого препарата: штамм Bacillus subtilis 39 4-5х1011 клеток и штамм Bacillus subtilis 51 4-5х1011 клеток, стабилизатор сахароза 40 мг, желатина 10 мг, остальное сухой остаток среды роста и метаболиты бактерий. В 0,5 г сухого препарата содержится не менее 400-500 млрд. клеток. /11,12/.
Известен препарат ветеринарного назначения «Ирилис», в состав которого входит штамм B.subtilis ВКПМ В-8611 и штамм B.licheniformis ВКПМ В-8610. Штаммы характеризуются широким спектром антагонистической активности, могут использоваться как в равных, так и в различных соотношениях /13/.
Известен препарат, названный Ветомгин, который представляет собой гинекологические свечи весом 2 г и является иммобилизированной высушенной споровой биомассой бактерий Bacillus subtilis ВКПМ-7048 и Bacillus licheniformis ВКПМ-7038 на пенной основе. Препарат используется как в профилактических, так и в лечебных целях, включая хронический эндометрит, путем внутриматочного введения по 1 суппозиторию 1 или 2 раза в сутки в течение трех дней. При увеличении числа суппозиториев до 2 или даже 3 суппозиториев одновременно продолжительность лечения до выздоровления составляет от 3 до 8 дней, а сервис период уменьшается на 20-40 дней в зависимости от количества введенных суппозиториев и схемы их введения в течение суток /14/. Тем не менее препарат не нашел широкого применения у практикующих ветеринарных специалистов из-за его недостаточной эффективности.
Из представленного материала следует, что все перечисленные пробиотические препараты оказывают при послеродовых эндометритах у коров как профилактическое, так и лечебное действие. Однако их эффективность является недостаточной, что связано с использованием лекарственных форм с невысоким титром бактерий и с неоптимальными схемами введения препаратов.
Так, например, препарат Гипролам, введенный за 5-7 дней до родов, показывает заметно бóльшую лечебно-профилактическую эффективность, чем он же, введенный в послеродовой период.
В последнее время в разных областях медицины, ветеринарии и косметологии наблюдается повышенный интерес к хитозану.
Хитозан является производным натурального соединения хитина, что определяет его особую ценность. Он, будучи продуктом жизнедеятельности живых организмов, безвреден для животных и человека. Для сравнения: LD50 хитозана для мышей составляет 16000 мг/кг веса, а, например, сахара – 12000 мг/кг.
Хитозан предлагается использовать в качестве мягкого лечебного средства, обладающего разнообразными физиологическими свойствами. В связи с тем, что характер и величина его физиологической активности в значительной степени зависят от его физико- химической структуры, целесообразно рассмотреть особенности строения самого хитозана и его низкомолекулярных производных, а также хитина, как исходного материала для его получения.
Хитин по химической структуре близок к целлюлозе и только ей уступает по распространенности в природе. Хитин является природным линейным кристаллическим полисахаридом с высокой молекулярной массой, состоящим из β-(1-4) связанных остатков N-ацетил-D-глюкозамина. Его официальное название поли[(1-4)-2-ацетамидо-2-дезокси-D-глюкоза].
Большая длина молекулы хитина и ограниченная гибкость макромолекул являются предпосылками для образования биополимерами сложных надмолекулярных структур, особенно в тканях живых организмов. Для хитина основным элементом такой структуры являются фибриллы – высокоориентированные агрегаты макромолекулы диаметром 25-50 нм, в свою очередь состоящие из микрофибрилл диаметром 2,5-2,8 нм. В научной литературе имеются данные, что выделенный, в частности, из панцирей ракообразных, хитин представляет собой высокомолекулярный полимер с молекулярной массой 2-2,5 млн. дальтон со степенью полимеризации 10-14 тыс.
Хитин получают из измельченных ракообразных, насекомых, грибов. Получение качественного хитина, а затем и его производного хитозана, является непростой задачей и требует знания композиционного состава полимера, в частности – доли его белковой составляющей, т.к. композиционная неоднородность, присущая хитину, сохраняется и для хитозана.
Хитин по сути своей является гликопротеином, он имеет аморфно-кристаллическое строение, образует надмолекулярные структуры в виде глобул, растворим только в концентрированных кислотах и специальных растворителях. С одной стороны, хитин в форме гликопротеина представляет самостоятельный интерес, а с другой – является источником для получения хитозана.
Хитозан – самое известное и самое простое производное хитина, можно сказать, что это искусственный аминополисахарид (2-амино-2-дезокси-β-D-глюкан). Его получают в результате реакции дезацетилирования хитина. Отщепление ацетамидных групп удается осуществить только в жестких условиях (воздействие на хитин 40-50% раствором NaOH при температуре 110-140ºС в течение 4-6 часов). Доля отщепившихся в этих условиях ацетамидных групп в расчете на одно элементарное звено не достигает единицы, составляя обычно 0,8-0,9. При этом, во время процесса дезацетилирования происходит распад главной молекулярной цепи, о чем свидетельствует уменьшение молекулярной массы хитина. Как и хитин, хитозан в твердом состоянии представляет собой аморфно- кристаллический полимер, для которого также характерно явление полиморфизма по молекулярному весу, причем количество структурных модификаций при переходе от хитина к хитозану увеличивается до 6. Конформация макромолекул при переходе от хитина к хитозану существенно не меняется. В то же время, в процессе дезацетилирования хитина его молекулярная масса заметно уменьшается. Общая упорядоченность структуры (степень кристалличности) снижается до 40-50%. Одним из важнейших свойств полимеров вообще и хитозана в частности является их растворимость, определяющая возможность их переработки и применения. В отличие от хитина, получаемый в результате реакции дезацетилирования хитозан растворяется даже в разбавленных органических кислотах, например, в водном растворе уксусной кислоты. Появление свободной аминогруппы в каждом элементарном звене макромолекулы придает хитозану свойство полиэлектролита. Это свойство позволяет получать различные модификации хитозана (сукцинат-, лактат-хитозан и др.). Существенное различие между молекулярными массами хитина и хитозана свидетельствует о протекании на стадии дезацетилирования заметной деструкции полимерных цепей. Так, если молекулярный вес хитина составляет 2,0-2,5 млн. кДА, то после его деструкции молекулярный вес хитозана составляет 10-14 тыс. кДА.
Благодаря своей химической природе, хитозан способен к различным видам химического взаимодействия с образование 4-х основных типов связей: ионных, водородных, гидрофобных и связей по типу комплексообразования. Тем не менее, некоторые физико-химические свойства высокомолекулярных хитозанов, такие как нерастворимость в очищенной воде и высокая вязкость нейтральных и щелочных водных растворов, плохая всасываемость из желудочно-кишечного тракта, ограничивают их применение в медицине и ветеринарии, что диктует необходимость поиска производных хитозана, лишенных этих недостатков.
Одним из подходов для получения водорастворимых хитозанов, сохраняющих при этом необходимую биологическую активность хитозана, является уменьшение его молекулярной массы, вплоть до получения олигохитозанов с молекулярной массой от 5 до 30 кДА. Для этого применяют различные способы: химические, физические, электрохимические и различные типы ферментативного гидролиза.
Приоритетными направлениями использования низкомолекулярного хитозана при разработке лекарственных препаратов являются его применение для иммобилизации лекарств, коррекции антимикробного, антивирусного, противоопухолевого, противотуберкулезного действий, для разработки наносистем как носителей лекарственных средств и др.
Из перечисленного следует, что сам хитозан и его низкомолекулярные производные, включая олигохитозаны, в зависимости от молекулярной массы, степени ацетилирования и дезацетилирования, расположения ацетилированных звеньев вдоль полимерной цепи, полидисперстности, вязкости, значения рКа – обладают множественными свойствами и могут оказывать на организм полифункциональное действие /15, 16, 17, 18/.
Из уровня техники известны попытки использования хитозана в медицине и ветеринарии и для лечения послеродовых эндометритов.
Известен способ лечения послеродовых эндометритов у женщин на основе хитозана. Для этого матку санируют раствором фурациллина 1:5000, а затем однократно внутриматочно струйно вводят 10 мл препарата, состоящего из хлоргидрата хитозана с молекулярной массой 300-700 кДа, степенью дезацетилирования 89%, метронидазола и диоксидина. Один литр такого геля содержит хлоргидрата хитозана 10 г, метронидазола 1,250-1,668 г и диоксидина 2,5 г, остальное – вода дистиллированная. Способ обеспечивает пролонгированное антимикробное, антисептическое и противовоспалительное действия, позволяя при однократном введении геля купировать воспалительный процесс, снизить эндогенную интоксикацию, нормализовать состав вагинальной микрофлоры. При этом лечение осуществляют, не прерывая грудного вскармливания /19/.
Известен способ использования хитозана в комплексном лечении эндометрита после кесарева сечения в медицине. Группе женщин (27 человек) с эндометритом после кесарева сечения на первом этапе перорально назначали гелевую форму хитозана «Амидан» в комплексе с общепринятой тактикой ведения болезни. Кроме того, интравагинально на ночь вводили 20 мл 1% геля аскорбата хитозана. Контрольная группа женщин (31 пациентка) получала всё то же лечение, но без препарата «Амидан». Для оценки эффективности лечения использовали клинический, лабораторный и инструментальный мониторинг, включающий развернутый анализ крови с подсчетом показателей красной крови, лейкограммы, СОЭ, лейкоцитарного индекса интоксикации, биохимического исследования крови и др. Было показано, что включение хитозановой терапии в комплекс лечения эндометрита после кесарева сечения снижало проявления воспалительного процесса и уменьшало возможность возникновения тяжелых гнойно-септических осложнений /20/.
Известна работа, где изучали лечебную эффективность препаратов, созданных на основе хитозана, при гнойно-катаральном эндометрите у коров. Было сформировано 5 групп коров, больных эндометритом, красно-степной породы, 4-5-летнего возраста, по 10 голов в каждой. Животным первой группы (контрольная группа) для лечения эндометритов применяли внутриматочно фуразолидоновые палочки по 3 штуки через день до полного выздоровления. Животных второй группы лечили препаратом хитомаст, который состоял из 3% хитозана и гелеобразующей основы. Животных третьей группы лечили препаратом хитомаст-2, который состоял из гентамицина 20 мг/мл в 1,5% растворе хитозана. Четвертая группа животных получала хитомаст-3 (20 мг/мл цефалексина в 1,5% растворе хитозана) и, наконец, пятая группа получала хитомаст-4 (мирасепт 0,02% в 1,5% растворе хитозана). Все препараты вводили внутриматочно в дозе 30 мл. Дополнительно всем группам животных однократно инъецировали по 10 мл тривитамина. Показано, что период выздоровления коров после применения фуразолидоновых палочек составлял 19,2 суток, что на 52%, 53%, 53% и 56 дней больше, чем у животных, которых лечили хитомастом, хитомастом-2, хитомастом-3 и хитомастом-4 соответственно. Сервис-период у экспериментальных групп животных по сравнению с контрольной группой сократился на 47%, 52%, 48% и 49% у второй, третьей, четвертой и пятой групп животных соответственно, Индекс осеменения у экспериментальных групп животных уменьшился в 2 и более раз /21/.
Таким образом, установлено, что хитозан и его различные модификации обладают антибактериальными свойствами и могут подавлять рост любых бактерий. Однако авторами настоящего изобретения было показано, что только немодифицированный хитозан с вязкостью 20-200 сП позволяет не подавлять рост бактерий B.subtilis и B.liheniformis. Таким образом, получена композиция, состоящая из двух начал, дополняющих и усиливающих друг друга. Так, бактерии обладают антагонистическими свойствами, а хитозан – антибактериальными, антигрибковыми и антистимулирующими свойствами, а общими свойствами являются иммуностимулирующее и противовоспалительное.
К тому же растворы немодифицированного хитозана с вязкостью 20-200 сП позволяют равномерно распределить споры бактерий в препарате, благодаря чему длительно сохраняется жизнеспособность спор, а в организме животного проявляется максимальная биологическая активность.
При этом авторами было также экспериментально установлено, что растворы именно немодифицированного хитозана проявляют значимо более высокую антибактериальную активность.
Таким образом, был получен высокоэффективный препарат, состоящий из хитозана и пробиотика на основе бактерий B.subtilis и B.liheniformis, обладающий полифункциональными свойствами. Имеющиеся компоненты в заявляемом лекарственном препарате обеспечивают высокую терапевтическую эффективность лечения и профилактику эндометритов у коров. Этот лекарственный препарат получил название «Биометрин».
Технический результат заключается в повышении эффективности действия препарата для профилактики и лечения послеродовых эндометритов коров за счет объединения двух активных действующих компонентов, которые усиливают действия друг друга, позволяя получить полифункциональный препарат с антагонистическими, антибактериальными, антигрибковыми, антивирусными, иммуностимулирующими и противовоспалительными свойствами.
Технический результат достигается путем получения препарата для лечения или профилактики послеродовых эндометритов коров для внутриматочного введения, содержащего бактерии Bacillus subtilis и бактерии Bacillus licheniformis с титром спор 108-1011 в соотношении 1:1, 0,5%-1,5% раствор хитозана со степенью дезацетилирования не менее 70% и вязкостью 20-200сП, вспомогательные вещества, такие как лактоза, СаСО3, молочная сыворотка или свекольный сок, причем рН находится в пределах 3,5-5,8.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Получение препарата «биометрин» и изучение его антимикробной активности
Авторами настоящего изобретения была исследована антибактериальная активность хитозанов.
В настоящем исследовании проводилось изучение антибактериального действия модифицированного и немодифицированного хитозана (7 образцов) на тест-культуру Staphylococcus aureus.
Исследуемые растворы 1% хитозана вносили в испытуемых концентрациях и через 4 часа производили высевы из каждого разведения на МПА (мясопептонный агар). Отсутствие роста при высеве из пробирки с максимальным разведением определяли как минимальную ингибирующую концентрацию.
Результаты исследования приведены в таблице 1.
Таблица 1.
№ п/п |
Образец хитозана | Производитель | Степень диацетилирова-ния, % | рН | Минимальная ингибирующая концентрация хитозана относительно Staphylococcus aureus, % |
1 | Хитозан гидрохлорид | Xi’an Beihe Biological Technology Co., Ltd. (Китай) | 85,6 | 4,66 | >0,5 |
2 | Хитозан нитрат | Xi’an Beihe Biological Technology Co., Ltd. Китай) | 92,4 | 5,17 | >0,5 |
3 | Хитозан Agriculture grade | Qingdao Jingling Ocean Technology Co.,LTD(Китай) | 86,1 | 7,0 | 0,0018 |
4 | Хитозан Pharmaceutical grade |
Qingdao Yunzhou Biochemistry Co., LTD(Китай) | 91,5 | 5,2 | 0,003 |
5 | Хитозан пищевой | ООО «Биопрогресс» (Россия) | 89,0 | 3,6 | 0,003 |
6 | Хитозан сукцинат | ООО «Биопрогресс» (Россия) | 75,1 | 7,67 | >0,5 |
7 | Хитозан Carboxyl methyl grade |
Xi'an Ceres Biotech Co., Ltd (Китай) | 80,0 | >0,5 |
Проведенные исследования показали, что образцы немодифицированного хитозана (№№3-5) обладают высокой антибактериальной активностью. Минимальная ингибирующая концентрация хитозана (образцы №№4, 5) относительно Staphylococcus aureus составляет 0,003%. Минимальная ингибирующая концентрация образцов модифицированного хитозана (№№1, 2, 6, 7) составляет >0,5%.
Пример 1.
Шаг 1. Получение 1% раствора хитозана.
Берут навеску кислоторастворимого хитозана одного из нижеуказанных производителей (ЗАО Биопрогресс, Россия; Sigma-Aldrich, USA; Qingdao Jingding Ocean Technology Co., LTD Китай) или, по другой классификации, хитозана с молекулярной массой 1000000-700000 Да и степенью дезацетилирования не менее 80%, и растворяют в 2% уксусной кислоте с целью получения 1% раствора хитозана.
Полученный раствор при необходимости фильтруют через капроновую ткань для сит 61/69 ПА 122. Динамическая вязкость полученного хитозана составляет 300+120 сП. Его разливают в стеклянные флаконы по 300 мл и подвергают автоклавированию в следующем режиме: 121ºС при 0,8 атм в течение 30 мин. Динамическая вязкость стерильного раствора хитозана составляет 75±25 сП. Полученный раствор хитозана проверяют на антимикробную активность в тест-системах с грамотрицательными и грамположительными микроорганизмами в соответствии с общепринятыми методами; антимикробная активность в среднем составляла не менее 30 мкг/мл.
Шаг 2. Получение раствора культур Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200 в 1% хитозане.
Культуры микроорганизмов рода Bacillus выращивают по общепринятой технологии на скошенном агаре МПА, затем смывают с помощью 1% стерильного раствора хитозана.
Шаг 3. Получение препарата «Биометрин»
Берут 880 мл стерильного 1% раствора хитозана и добавляют к нему по 60 мл раствора культуры Bacillus subtilis СН 201 в 1%-ом хитозане и культуры Bacillus licheniformis СН 200 в 1%-ом хитозане до конечной концентрации каждого штамма 3х109КОЕ/см3. Динамическая вязкость Биометрина составляет 75+25 сП. Водородный показатель составляет 3,8-5,2.
Шаг 4. Изучение жизнеспособности спор входящих в состав «Биометрина» культур Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200, в зависимости от концентрации в нем хитозана и разных значений рН раствора.
Смесь культур Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200 в соотношении 1:1 вносят в питательный бульон с разными концентрациями хитозана (см. таблицу 2) и инкубируют при температуре 37ºС в течение 18 часов, после чего по 0,1 мл бульона высевают на чашки Петри с агаром и подсчитывают количество выживших клеток. Как видно, количество жизнеспособных клеток обоих штаммов в бульоне с разными концентрациями хитозана от 1% до 0,007% остается на уровне того же порядка, что и до начала инкубации. Из этого следует, что оба штамма рода Bacillus в этих условиях не подвергаются спороцидному действию хитозана. Жизнеспособность спор составляет около 100%.
Таблица 2
Концентрация хитозана в питательном бульоне, % |
Количество жизнеспособных клеток, КОЕ/ см3 | |||
Инкубация без хитозана | Инкубация с хитозаном | |||
Bacillus subtilis |
Bacillus
licheniformis |
Bacillus subtilis |
Bacillus
licheniformis |
|
1,00 | 6,1х106 | 5,7х106 | 5,0 х106 | 5,0 х106 |
0,50 | 6,1х106 | 5,7х106 | 3,5 х106 | 4,6 х106 |
0,25 | 6,1х106 | 5,7х106 | 5,4 х106 | 4,2 х106 |
0,12 | 6,1х106 | 5,7х106 | 3,1 х106 | 3,5 х106 |
0,06 | 6,1х106 | 5,7х106 | 2,0 х106 | 5,7 х106 |
0,03 | 6,1х106 | 5,7х106 | 4,4 х106 | 3,9 х106 |
0,015 | 6,1х106 | 5,7х106 | 2,7 х106 | 2,9 х106 |
0,007 | 6,1х106 | 5,7х106 | 5,1 х106 | 3,7 х106 |
Аналогичные результаты получают при изучении жизнеспособности спор штаммов Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200 в зависимости от разных концентраций хитозана при рН 2,0, рН 4,5 и рН 5,3. Таким образом, интервал жизнеспособности спор Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200 в препарате биометрин находится в пределах рН 2,0 – 5,3.
Шаг 5. Изучение антимикробного действия препарата «биометрин» на микроорганизмы цервикальной слизи коров на 2-7 день после отела.
Цервикальную слизь берут от коров с помощью ложки Панкова на 2-7-й день после родов и помещают в две стерильные пробирки с транспортной средой Стюарда MS 306 (Miculture Transport Swabs/Stuard Transport in polysterene tube).
Одну пробирку в течение 2-6 часов доставляют в ветлабораторию ООО «Пастер» Москва для идентификации микроорганизмов. Были идентифицированы следующие микроорганизмы:
1. E. coli – 50% случаев;
2. St. aureus – 23.3% случаев;
3. Corynobacterium -16.6% случаев;
4. Дрожжеподобные культуры и грибы – 13,3% случаев;
5. Candida, Klebciella pneumonia – 10% случаев;
6. Плесень Aspergillus – 13.33% случаев;
7. Bac. subtilis – 10% случаев;
8. Streptococcus faecalis – 20% случаев.
Вторую пробирку используют для культивирования микроорганизмов цервикальной жидкости. Для этого часть цервикальной слизи (по 2 мл) помещают в пробирки с МПБ с добавлением Биометрина и без него и часть в пробирки со средой Сабуро с Биометрином и без него.
Культивирование осуществляют при температуре 37ºС в течение 24 часов для роста бактерий, и при температуре 28ºС в течение 48 часов для роста грибов. Затем берут по 0,1 мл ферментата из каждой пробирки, вносят на чашки Петри с МПА и тщательно растирают. При посеве ферментата из пробирок без препарата наблюдают интенсивный рост разных штаммов микроорганизмов, а в случаях с добавлением препарата «Биометрин» – только рост колоний Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200, особенно при тестировании цервикальной слизи, полученной на 2-3-й день после родов; наряду с такой картиной на фоне колоний Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200 встречаются единичные колонии из цервикальной жидкости коров.
Таким образом, препарат «Биометрин» в модельных условиях резко подавляет рост микроорганизмов из цервикальной жидкости коров, взятой на 2-7-й день после отела.
Пример 2. Все процедуры выполняют так, как описано в примере 1, за исключением того, что в «Биометрине» вместо 1% хитозана используют хитозан в количестве 0,5% со степенью дезацетилирования не менее 70%, а рН раствора составляет 3,8. После культивирования цервикальной слизи с биометрином такого состава в течение 18 часов и высева на МПА наблюдается эффективность на уровне антимикробной активности, равной 75% от активности «Биометрина» с хитозаном в дозе 1%.
Пример 3. Все процедуры выполняют так, как в примере 1, за исключением того, что для приготовления «Биометрина» используют хитозан в дозе 1,5%. Антимикробная активность такого «биометрина» составляет 100%.
Таким образом, экспериментальным путем установлено, что наиболее эффективными дозами хитозана со степенью дезацетилирования более 70% и вязкостью 75±25 сП являются 0,5-1,5%. Дальнейшее увеличение дозы хитозана нецелесообразно, так как это увеличивает расход хитозана без увеличения антимикробной эффективности.
Изучение влияния динамической вязкости хитозана на антимикробную активность «биометрина»
Пример 4. Поступают, как описано в примере 1, но для приготовления «Биометрина» вместо хитозана с динамической вязкостью 75 сП берут хитозан с динамической вязкостью 20 сП. В этом случае антимикробная активность биометрина соразмерна с активностью, полученной в примере 1 (хитозан с динамической вязкоситью вязкостью 75 сП).
Пример 5. Поступают, как описано в примере 1, но исследуют антимикробную активность «Биометрина» с хитозаном с динамической вязкостью 150 сП. И в этом случае наблюдают антимикробную активность, близкую к 100%.
Пример 6. Поступают, как описано в примере 1, но для изучения берут «Биометриин» на основе хитозана с динамической вязкостью 200 сП. Наблюдается снижение антимикробной активности Биометрина до 85% при использовании хитозана с динамической вязкостью 200 сП.
Дальнейшие испытания зависимости антимикробной активности биометрина от динамической вязкости хитозана нецелесообразны, так как наблюдаются трудности в приготовлении «Биометрина» из-за расхода большого количества хитозана и высокой вязкости приготовленных растворов.
Изучение эффективности «Биометрина» в зависимости от использования разных штаммов Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis
Пример 7. Готовят «Биометрин» так, как описано в примере 1, но вместо штаммов Bacillus subtilis СН 201 и Bacillus licheniformis СН 200 берут штаммы Bacillus subtilis УКМ В 5007 и Bacillus licheniformis УКМ В 5514, а дальше проводят испытания, как описано в примере 1, Эффективность препарата равна полученной в примере 1.
Пример 8. Готовят «Биометрин» так, как описано в примере 1, но используют штаммы Bacillus subtilis ВКПМ 10172 и Bacillus licheniformis ВКПМ 10135, все остальные процедуры проводят, как описано в примере 1. Эффективность препарата не отличается от эффективности Биометрина, наблюдаемой в примере 1.
Таким образом, проверка эффективности «Биометрина», полученного с использованием трех разных пар штаммов культур Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis, проведенная в модельных условиях in vitro, никаких различий между этими парами штаммов не выявляет.
Изучение терапевтической эффективности «Биометрина» на коровах разных пород в разных хозяйствах с целью профилактики и лечения эндометритов
Применение «Биометрина» с профилактической целью
Пример 9. Опыт по определению терапевтической эффективности биометрина проводили в хозяйстве ОНО ХОСЖиР с 15 сентября 2006 г. по 15 ноября 2006 г. В эксперименте участвовало 20 коров голштино-фризской породы в возрасте от 3 до 5 лет общей массой 450-480 кг после отела. Содержание животных было стойлово-пастбищное. Рацион состоял из объёмистых кормов (силос и сенаж) с добавлением концентратов (размолотый ячмень и пшеница) + пастбище. Коровы, находящиеся в эксперименте, не подвергались обработке другими лекарственными препаратами в период проведения опыта. Каждое животное имело индивидуальную ушную бирку.
10 коров первой группы были обработаны Биометрином в дозе 150 мл с помощью шприца Жане с профилактической целью однократно через сутки после отела.
Животные второй группы (10 коров) были без обработки и служили контролем.
У коров, обработанных «Биометрином», патологические изменения матки после отела отсутствовали при наблюдении в течение двух месяцев. Ветеринарными врачами хозяйства коровы были признаны здоровыми и были осеменены.
В контрольной группе у трех из 10-ти животных на 10-й день после отела появился выраженный острый эндометрит, сопровождавшийся гнойными выделениями. Этим трем животным Биометрин был введен с лечебной целью в дозе 150 мл трехкратно с интервалом 24 часа. В течение 14 дней наступило полное выздоровление животных.
Пример 10. Определяли терапевтическую эффективность «Биометрина» в колхозе «Русь» Юхновского района Калужской области. Биометрином были обработаны 12 коров голштино-фризской породы в возрасте 4-8 лет и массой 460-480 кг с профилактической целью в дозе 150 мл однократно через 24 часа после отела.
Содержание животных было стойлово-пастбищное. Рацион состоял из объёмистых кормов (силос и сенаж) с добавлением концентратов (размолотый ячмень и пшеница) + пастбище. Коровы, находящиеся в эксперименте, не подвергались обработке другими лекарственными препаратами в период проведения опыта. Каждое животное имело индивидуальную ушную бирку.
Заболеваний эндометритом у этой группы коров не наблюдали. Все животные были признаны здоровыми, пришли в охоту и были осеменены.
Пример 11. В колхозе «Пламя революции» Московской области было исследовано 25 коров черно-пестрой породы, массой тела 420 – 450 кг в возрасте от 3 до 8 лет, у которых отделение последа происходило вручную. Содержание животных стойлово-пастбищное, кормление на пастбище + объемистые корма с добавлением концентратов. Сразу после отела и через 24 часа вводили Биометрин с профилактической целью в дозе 150 мл/животное. Положительный эффект был получен у всех 25-ти обработанных животных. Животные оставались здоровыми и были осеменены в положенные сроки.
Пример 12. Исследования проводили в ООО «Сосновка» Озерского района Ярославской области. В исследовании было задействовано 100 голов голштино-фризской породы в возрасте 3-5 лет массой 500-600 кг с продуктивностью 5,5 тысяч литров молока в год. Содержались животные в стойлах без привязи. Для кормления использовали силос кукурузный, сенаж, концентраты.
Биометрин вводили с профилактической целью всем животным после отела на 5-е и 10-е сутки по 150 мл на голову. Контролем служило остальное стадо коров, которым после отела вводили гормон просольвин. Из 100 животных, обработанных «Биометрином», оставались здоровыми 80 коров, т.е. эффективность «Биометрина» в качестве профилактического средства составила 80%.
В контрольной группе животных, получивших только просольвин, с клиническим проявлением острого катарального эндометрита оказались 90 голов, т.е. 90% животных заболело.
Применение «Биометрина» при лечении острого послеродового эндометрита
Пример 13. Опыт проводили в ЗАО СП «Жилевское» Ступинского района Московской области. Исследования проводили на коровах черно-пестрой породы в возрасте 3-6 лет и массой 480-560 кг. Животные находились на привязном содержании, кормление было силосно-концентратное (60%/40%). «Биометрин» вводили 20-ти коровам с диагнозом острый катаральный эндометрит. Препарат вводили в дозе 150 мл/голову внутриматочно 3-6 раз с интервалом 48 часов.
В качестве препарата сравнения использовали тилозинокар. Им было обработано 40 голов с диагнозом острый катаральный эндометрит.
При лечении «Биометрином» коров с диагнозом острый катаральный эндометрит выздоровело 17 голов из 20-ти, что составило 85%. При лечении животных препаратом сравнения – 75%.
Пример 14. Исследования проводили в ГУП МСС Московской области на коровах голштино-фризской породы массой 560-600 кг, первотелки. В хозяйстве наблюдался высокий уровень заболеваемости коров эндометритом, что связано с их высокой продуктивностью и стойловым содержанием. Рацион состоял из объёмистых кормов (силос и сенаж) с добавлением концентратов (размолотый ячмень и пшеница). Потребление воды было не ограниченным. Каждое животное имело индивидуальную ушную бирку.
Было сформировано три группы коров. Первая группа состояла из 165 голов с признаками острого послеродового эндометрита, которые обрабатывались «Биометрином» с третьего дня после отела внутриматочно из расчета 150 мл/голову. В зависимости от состояния матки количество введений составляло 3-5 раз с интервалом 48 часов. Диагноз и эффективность лечения устанавливали путем исследования слизи с шейки матки. Слизь получали при помощи ложки Панкова. Важным показателем служил приход животного в охоту.
Вторая группа состояла из 100 голов и получала лечение по схеме, принятой в хозяйстве. Это комплексная схема, включающая как инъекционные, так и внутриматочные препараты ежедневного введения в течение 7 дней: в первый день инъекции гормона просольвина, мультивитамина и внутриматочно йодопен, во второй день антибиотик окситетрациклин внутримышечно в разные точки в виде препарата энгимицин 10% (Intervet, Нидерланды). В третий день снова энгимицин и дополнительно ихгдюковит 50 мл в прямокишечную ямку. В четвертый день животные не обрабатываются. В пятый день применяется внутриматочно антибиотик тилозин в виде препарата тилозинокара (ООО Биоспектр, Россия) в дозе 150 мл/голову. В шестой день животных лечению не подвергали, а на седьмой день снова вводили тилозинокар в дозе 150 мл/голову. Эта группа считалась контрольной.
Также была организована третья группа животных, с клиническим проявлением острого послеродового эндометрита, в количестве 157 голов, которых в течение трех дней лечили по схеме хозяйства, а на 5-й и 7-й день вводили «Биометрин».
Были получены следующие результаты. В первой группе, из 165 голов здоровыми оказались 136, т.е. эффективность лечения «биометрином» составила 82%.
Во второй группе, где животные обрабатывались по стандартной схеме, используемой в хозяйстве, эффективность лечения составила 80% (из 100 голов здоровыми оказались 80).
В третьей группе, где животные получали комбинированную схему лечения, животные на 5 сутки были переведены в общее стадо, продолжали получать лечение, но при этом молоко можно было использовать без ограничений. Эффективность данной схемы лечения составила 96%.
Применение «Биометрина» при лечении скрытого эндометрита
Пример 15. Опыт проводили в ЗАО СП «Жилевское» Ступинского района Московской области. Исследования проводили на коровах черно-пестрой породы в возрасте 3-6 лет и массой 480-560 кг. Животные находились на привязном содержании, кормление было силосно-концентратное (60%/40%). Препарат «Биометрин» вводили 10-ти коровам с диагнозом хронический эндометрит (животные были клинически здоровы, но не осеменялись) в дозе 50 мл/голову внутриматочно двукратно с интервалом 48 часов.
8 из 10-ти обработанных животных пришли в охоту и были удачно осеменены, что составило 80%. На основании данного примера можно сделать вывод о том, что лекарственный препарат «биометрин» может быть использован в качестве средства восстановительной терапии после применения антибиотиков.
Список литературы
1. Микулич. Е.А Эффективность применения препаратов «йодомастин» и «йодометрин» для лечения маститов и эндометритов у коров. Животноводство и ветеринарная медицина.2012, №6.
2. Сидоркин В.В., Якунин К.А., Клищенко Е.А. Комплексный подход к профилактике и лечению эндометрита у коров. Журнал Зооиндустрия, 2007, №5.
3. Инструкция по применению Метролека для лечения и профилактики послеродовых осложнений, острых и хронических эндометритов, цервицитов и вагинитов у коров. № регистрационного удостоверения ПВР-1-35.13/02987/См. система Ирена Минсельхоз РФ.
4. Регистрационное удостоверение на препарат Метролек за №12-3-10.14-2313 № 1713Р-3-10/03071.
5. Патент РФ №2085207 на изобретение Ветеринарная композиция для профилактики и лечения различных форм эндометрита, содержащая пропранолол в сочетании с антибактериальным компонентом и ветеринарное лекарственное средство для профилактики и лечения различных форм эндометрита. Дата публикации 27.07.1997.
6. Скрыпник И.Н., Маслова А.С. Современные спорообразующие пробиотики. Сучасна гастроентерология, 2009, №3 (47), 81-90.
7. Патент РФ №2538804 на изобретение Способ профилактики послеродового эндометрита у коров. Дата публикации 10.01.2015.
8. Инструкция по применению биологического препарата Гипролам для профилактики эндометрита у коров. 2012 № регистрационного удостоверения ПВР=1=35.13/02987.
9. Заявка на изобретение РФ №2012147670. Способ лечения эндометритов у высокопродуктивных коров. Дата публикации 20.05.2014.
10. Ряпосова М.В., Степанов И.1 В., Заузолкова О.И., Сивкова У.В. Опыт применения пробиотического препарата «Моноспорин» в схемах лечения коров с хроническим эндометритом. Ветеринария Кубани, 2016, №2.
11. Патент Украины №UA14569. Биопрепарат для лечения и профилактики эндометритов животных. Дата публикации 15.05.2006.
12. Сафронова Л.А., Осадчая А.И. Эффективный биопрепарат для лечения и профилактики послеродовых заболеваний у сельскохозяйственных животных. «Наука та iновацii», 2008, т.5, №1, 85-90.
13. Патент РФ №2264453 на изобретение Биопрепарат «Ирилис» ветеринарного назначения. Дата публикации 20.11.2005.
14. Патент РФ №45289 на полезную модель Суппозитории «ветомгин» для профилактики и лечения урогенитальных заболеваний. Дата публикации 10.05.2005
15. Хитин и хитозан. Получение, свойства и применение. Изд-во «Наука», Москва, 2000. Под редакцией акад Скрябина и др.
16. Степанова Е.А. Получение производных высоко- и низкомолекулярного хитозана: физико-химические свойства и биологическая активность. Дисс. на соискание канд. химических наук. Москва, 2009.
17. Гамзазаде А.И. Производные хитина/хитозана контролируемой структуры в качестве потенциальных новых биоматериалов. Дисс. на соискание доктора хим.наук, Москва, 2005.
18. Алаа Эльдин Мухамед Мухамед Юнес. Разработка технологии получения хитозана с заданными свойствами из панциря ракообразных. Дисс. на соискание кандидата технических наук. Астрахань, 2010.
19. Патент РФ №2309744 на изобретение Способ лечения послеродового эндометрита. Дата публикации 10.11.2007.
20. Островская А.Э. Использование хитозана в комплексном лечении эндометрита после кесарева сечения. Дисс. на соискание канд. медицинских наук. Иркутск, 2006.
21. Топурия А.Ю. Структурно-функциональная и клиническая оценка влияния иммуномодуляторов природного происхождения на организм животных. Дисс. На соискание доктора биол.наук. Оренбург, 2008.
Claims (8)
1. Препарат для лечения или профилактики послеродовых эндометритов коров для внутриматочного введения, содержащий:
- бактерии Bacillus subtilis и бактерии Bacillus licheniformis с титром спор 108-1011 в соотношении 1:1,
- 0,5-1,5% раствор хитозана со степенью дезацетилирования не менее 70% и вязкостью 20-200 сП,
- вспомогательные вещества, такие как лактоза, СаСО3, молочная сыворотка или свекольный сок,
причем рН находится в пределах 3,5-5,8.
2. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве бактерий используются штамм Bacillus subtilis УКМ В-5007 и штамм Bacillus licheniformis УКМ В-5514.
3. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве штаммов бактерий используются штамм Bacillus subtilis ВКПМ В-10172 и штамм Bacillus licheniformis ВКПМ В- 10135.
4. Препарат по п.1, отличающийся тем, что в качестве штаммов бактерий используются штамм Bacillus subtilis СН201 и штамм Bacillus licheniformis СН200.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018120191A RU2687041C1 (ru) | 2018-05-31 | 2018-05-31 | Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2018120191A RU2687041C1 (ru) | 2018-05-31 | 2018-05-31 | Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2687041C1 true RU2687041C1 (ru) | 2019-05-06 |
Family
ID=66430586
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2018120191A RU2687041C1 (ru) | 2018-05-31 | 2018-05-31 | Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2687041C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2774843C1 (ru) * | 2021-08-23 | 2022-06-23 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ получения кормовой добавки для выращивания цыплят бройлеров |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2437563C1 (ru) * | 2010-06-09 | 2011-12-27 | Ольга Николаевна Дегтярёва | Пробиотическая кормовая добавка |
-
2018
- 2018-05-31 RU RU2018120191A patent/RU2687041C1/ru active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2437563C1 (ru) * | 2010-06-09 | 2011-12-27 | Ольга Николаевна Дегтярёва | Пробиотическая кормовая добавка |
Non-Patent Citations (7)
Title |
---|
LESTER T.D., KNARREBORG A., et.al., Germination and outgrowth of Bacillus subtillis and Bacillus licheniformis spores in the gastrointestinal tract of pigs, Journal of Applied Microbiology, 2008, 104, p. 1025-1033. * |
LESTER T.D., KNARREBORG A., et.al., Germination and outgrowth of Bacillus subtillis and Bacillus licheniformis spores in the gastrointestinal tract of pigs, Journal of Applied Microbiology, 2008, 104, p. 1025-1033. ТОПУРИЯ Л.Ю., Структурно- функциональная и клиническая оценка влияния иммуномодуляторов природного происхождения на организм животных. Автореф. дисс. на соискание ученой степени доктора биологических наук,2008, Оренбург, с. 19-39. ПОХИЛЕНКО В.Д., ПЕРЕЛЫГИН В.В., Пробиотики на основе спорообразующих бактерий и их безопасность, Химическая и биологическая безопасность, 2007, N 2-3 (32-33), с. 20-41. * |
БЕРЕЖНОЙ В.В., КОРНЕВА В.В., Возможности и перспективы использования отечественного пробиотика на основе спорообразующих бактерий в педиатрической практике, Современная педиатрия, 2015, 7(71), с.43-50. * |
ПОХИЛЕНКО В.Д., ПЕРЕЛЫГИН В.В., Пробиотики на основе спорообразующих бактерий и их безопасность, Химическая и биологическая безопасность, 2007, N 2-3 (32-33), с. 20-41. * |
САФРОНОВА Л.А., ОСАДЧАЯ А.И., Эффективный биопрепарат для лечения и профилактики послеродовых заболеваний у сельскохозяйственных животных, Наука и инновации, 2009, Т.5, N 1, с.85-90. * |
САФРОНОВА Л.А., ОСАДЧАЯ А.И., Эффективный биопрепарат для лечения и профилактики послеродовых заболеваний у сельскохозяйственных животных, Наука и инновации, 2009, Т.5, N 1, с.85-90. БЕРЕЖНОЙ В.В., КОРНЕВА В.В., Возможности и перспективы использования отечественного пробиотика на основе спорообразующих бактерий в педиатрической практике, Современная педиатрия, 2015, 7(71), с.43-50. * |
ТОПУРИЯ Л.Ю., Структурно- функциональная и клиническая оценка влияния иммуномодуляторов природного происхождения на организм животных. Автореф. дисс. на соискание ученой степени доктора биологических наук,2008, Оренбург, с. 19-39. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2774843C1 (ru) * | 2021-08-23 | 2022-06-23 | Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Кубанский государственный аграрный университет имени И.Т. Трубилина" | Способ получения кормовой добавки для выращивания цыплят бройлеров |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE602004006133T2 (de) | Neue galactooligosaccharidzusammensetzung und herstellung davon | |
HU204710B (en) | Process for producing pharmaceutical compositions having antiviral and antibacterial effect | |
EP3190893B1 (en) | Compositions and methods for treating and preventing bacterial infections | |
CN111568919A (zh) | 一种含壳寡糖的抗幽门螺旋杆菌制剂 | |
CN103333830B (zh) | 猪源粪肠球菌、微生态制剂及其应用 | |
CN117143783B (zh) | 一种唾液联合乳杆菌vb330及其应用 | |
CN109985069A (zh) | 益生菌组合物及其用途 | |
HUT61478A (en) | Process for producing pharamceutical composition suitable for treating diarrhoae caused by clostridium difficile and by pseudomembranous colitis | |
RU2687041C1 (ru) | Биопрепарат для профилактики и лечения эндометритов у коров | |
RU2367433C1 (ru) | Препарат для лечения мастита у коров в период лактации | |
CN106620668A (zh) | 一种复方替米考星固体分散剂及其制备方法 | |
CN113476431B (zh) | 一种环三酮衍生物在制备动物用药中的应用 | |
CN100388949C (zh) | 一种用于防治牛子宫内膜炎的溶葡萄球菌酶冻干粉剂 | |
Kyriakis et al. | Evaluation of Toyocerin, a probiotic containing Bacillus toyoi spores, on health status and productivity of weaned, growing and finishing pigs | |
JP5072286B2 (ja) | 動物の免疫調節剤 | |
CN109152793A (zh) | 新的免疫学产品 | |
RU2377005C1 (ru) | Способ лечения желудочно-кишечных болезней у телят | |
KR100371090B1 (ko) | 동물용 복합항균제 조성물 | |
RU2612009C1 (ru) | Способ лечения субклинического мастита у коров | |
RU2352344C2 (ru) | Способ профилактики эндометритов коров | |
CN103386115A (zh) | 胸腺五肽在制备治疗乳房炎药物中的应用 | |
JPH08157377A (ja) | 家畜等の下痢予防・治療剤 | |
Baymuratovich et al. | Treatment of necrobacteriosis in dairy cows, imported from foreign countries | |
RU2709970C1 (ru) | Способ лечения и профилактики острых и хронических форм мастита у животных | |
RU2722161C1 (ru) | Способ профилактики желудочно-кишечных болезней молодняка крупного рогатого скота |