RU2650968C1 - Method of quantification of amantadine in blood plasma - Google Patents
Method of quantification of amantadine in blood plasma Download PDFInfo
- Publication number
- RU2650968C1 RU2650968C1 RU2017123072A RU2017123072A RU2650968C1 RU 2650968 C1 RU2650968 C1 RU 2650968C1 RU 2017123072 A RU2017123072 A RU 2017123072A RU 2017123072 A RU2017123072 A RU 2017123072A RU 2650968 C1 RU2650968 C1 RU 2650968C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- amantadine
- blood plasma
- carried out
- internal standard
- solution
- Prior art date
Links
- 229960003805 amantadine Drugs 0.000 title claims abstract description 66
- DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N amantadine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(N)C3 DKNWSYNQZKUICI-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 65
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 title claims abstract description 21
- 238000011002 quantification Methods 0.000 title abstract description 5
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims abstract description 9
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 8
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims abstract description 8
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims abstract description 8
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 claims abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 claims abstract description 7
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 claims abstract description 7
- -1 octadecylsilyl silica gel Chemical compound 0.000 claims abstract description 7
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 5
- 150000001793 charged compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000009534 blood test Methods 0.000 claims abstract 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 abstract description 3
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 7
- ZDRUTIWDKDUPST-UHFFFAOYSA-N 1-(1-adamantyl)azepane Chemical compound C1C(C2)CC(C3)CC1CC23N1CCCCCC1 ZDRUTIWDKDUPST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 5
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 3
- 208000027089 Parkinsonian disease Diseases 0.000 description 3
- 206010034010 Parkinsonism Diseases 0.000 description 3
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 3
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 3
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 238000001195 ultra high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 1-(1-adamantyl)ethanamine Chemical compound C1C(C2)CC3CC2CC1(C(N)C)C3 UBCHPRBFMUDMNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010013710 Drug interaction Diseases 0.000 description 2
- 208000027776 Extrapyramidal disease Diseases 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000003291 dopaminomimetic effect Effects 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 2
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002414 normal-phase solid-phase extraction Methods 0.000 description 2
- QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N reserpine Chemical compound O([C@H]1[C@@H]([C@H]([C@H]2C[C@@H]3C4=C(C5=CC=C(OC)C=C5N4)CCN3C[C@H]2C1)C(=O)OC)OC)C(=O)C1=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C1 QEVHRUUCFGRFIF-MDEJGZGSSA-N 0.000 description 2
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- 208000019901 Anxiety disease Diseases 0.000 description 1
- 206010012177 Deja vu Diseases 0.000 description 1
- 206010013952 Dysphonia Diseases 0.000 description 1
- 208000004547 Hallucinations Diseases 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 206010022998 Irritability Diseases 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102000004868 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090001041 N-Methyl-D-Aspartate Receptors Proteins 0.000 description 1
- 206010028813 Nausea Diseases 0.000 description 1
- 206010029412 Nightmare Diseases 0.000 description 1
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical class [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010042464 Suicide attempt Diseases 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- WOLHOYHSEKDWQH-UHFFFAOYSA-N amantadine hydrochloride Chemical compound [Cl-].C1C(C2)CC3CC2CC1([NH3+])C3 WOLHOYHSEKDWQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000648 anti-parkinson Effects 0.000 description 1
- 229940035678 anti-parkinson drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000939 antiparkinson agent Substances 0.000 description 1
- 239000000164 antipsychotic agent Substances 0.000 description 1
- 229940005529 antipsychotics Drugs 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 230000036506 anxiety Effects 0.000 description 1
- 210000004227 basal ganglia Anatomy 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 235000019658 bitter taste Nutrition 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007012 clinical effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000013016 damping Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- DLNKOYKMWOXYQA-UHFFFAOYSA-N dl-pseudophenylpropanolamine Natural products CC(N)C(O)C1=CC=CC=C1 DLNKOYKMWOXYQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 229930195712 glutamate Natural products 0.000 description 1
- 239000001307 helium Substances 0.000 description 1
- 229910052734 helium Inorganic materials 0.000 description 1
- SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N helium atom Chemical compound [He] SWQJXJOGLNCZEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000589 high-performance liquid chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 201000001881 impotence Diseases 0.000 description 1
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 1
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 1
- HPHUVLMMVZITSG-ZCFIWIBFSA-N levetiracetam Chemical compound CC[C@H](C(N)=O)N1CCCC1=O HPHUVLMMVZITSG-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- 229960004002 levetiracetam Drugs 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 1
- 210000002161 motor neuron Anatomy 0.000 description 1
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 1
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 1
- 230000008693 nausea Effects 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 description 1
- 230000004751 neurological system process Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001050 pharmacotherapy Methods 0.000 description 1
- DLNKOYKMWOXYQA-APPZFPTMSA-N phenylpropanolamine Chemical compound C[C@@H](N)[C@H](O)C1=CC=CC=C1 DLNKOYKMWOXYQA-APPZFPTMSA-N 0.000 description 1
- 229960000395 phenylpropanolamine Drugs 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 1
- 238000003908 quality control method Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 1
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960000888 rimantadine Drugs 0.000 description 1
- 238000009097 single-agent therapy Methods 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000012224 working solution Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/49—Blood
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Ecology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области медицины, а именно к клинической фармакологии и может быть использовано для количественного определения амантадина в плазме крови для фармакокинетического сопровождения лечения пациентов, страдающих болезнью Паркинсона, получающих амантадин как монотерапию, так и в комбинации с другими противопаркинсоническими препаратами.The invention relates to medicine, namely to clinical pharmacology and can be used for the quantitative determination of amantadine in blood plasma for pharmacokinetic support of the treatment of patients with Parkinson's disease receiving amantadine as monotherapy, or in combination with other antiparkinsonian drugs.
Амантадин - противовирусный и, одновременно, антипаркинсонический дофаминэргический препарат, по своей химической природе - трициклический аминоадамантан, производное адамантана-1-аминоадамантана гидрохлорид, или 1-адамантиламина гидрохлорид. Белый или белый со слабым желтоватым оттенком кристаллический порошок горького вкуса. Препарат был первоначально предложен в 1967 году в качестве противовирусного средства, эффективного в отношении вирусов гриппа типа А2. В дальнейшем была обнаружена его эффективность при паркинсонизме. Механизм лечебного действия амантадина при паркинсонизме объясняют тем, что он стимулирует выделение дофамина из нейрональных депо и повышает чувствительность дофаминергических рецепторов к нейромедиатору (дофамину); таким образом, даже при уменьшении образования дофамина в базальных ганглиях создаются условия для нормализации происходящих в них нейрофизиологических процессов. Имеются также данные, свидетельствующие о том, что амантадин тормозит генерацию импульсов в моторных нейронах ЦНС, являясь слабым антагонистом глутаматных NMDA-рецепторов. Амантадин в комбинации с другими препаратами используется для лечения вируса гриппа А, гепатита С, паркинсонизма и рассеянного склероза. В неврологии амантадин преимущественно применяется в фармакотерапии болезни Паркинсона. При всех своих важных положительных свойствах амантадин характеризуется достаточно большим числом побочных эффектов (особенно у пожилых лиц), минимизация которых требует привлечения наиболее чувствительных технологий терапевтического лекарственного мониторинга с оценкой содержания данного лекарственного вещества в крови пациентов. Амантадин в дозе 200 мг/день противодействует экстрапирамидным симптомам как при идиопатической болезни Паркинсона, так и в случае паркинсонических расстройств, обусловленных нейролептиками. Стационарный концентрационный уровень в крови достигается в течение 4-7 дней. Индивидуальные концентрационные значения в крови пациентов могут варьировать в терапевтическом диапазоне 200-900 нг/мл. Существует доказанная взаимосвязь между содержанием амантадина в крови и его влиянием на экстрапирамидную симптоматику. Данный препарат может вступать в лекарственные взаимодействия с другими веществами, как с положительными, так и с негативными клиническими эффектами. Так, например, амантадин усиливает подавление вирусной активности интерфероном, потенцирует антдискинезийный эффект леветирацетама у пациентов с болезнью Паркинсона и может являться причиной интенсивных и рекуррентных парамнестичеких симптомов (типа дежавю) при одновременном применении с фенилпропаноламином при лечении гриппа. Побочные эффекты амантадина, такие как тошнота, головокружение, бессонница встречаются у пациентов довольно часто (5-15%), особенно при длительном приеме (более 6 недель). Побочные эффекты амантадина включают также амфетаминоподобные эффекты, такие, как синдром повышенной нервно-рефлекторной возбудимости, тревожность, кошмарные сны, и изредка - галлюцинации. Концентрация амантадина в крови, превышающая 1600 мкг/мл считается токсичной. Лечение высокими дозами амантадина является причиной серьезных побочных эффектов, таких как инфаркт миокарда, попытки суицида, импотенция, спутанность сознания, дисфония и алопеция. Лекарственные взаимодействия напрямую зависят от сывороточной концентрации амантадина. Управление этими эффектами и тестирование комплаентности пациентов требует применения адекватного метода количественного анализа. Существующие методы анализа, такие как газовая хроматография/масс-спектрометрия, как правило, довольно сложны в исполнении, по причине необходимости применения сложной многостадийной пробоподготовки с последующей дериватизацией амантадина. Это является причиной того, что рутинный анализ амантадина представлен в очень малом числе клинических лабораторий, а также того, что терапевтический лекарственный мониторинг этого препарата недостаточно распространен. Создание метода анализа амантадина на основе жидкостной тандемной хромато-масс-спектрометрии может позволить существенно упростить пробоподготовку, уменьшить продолжительность работы и стоимость анализа одного образца, а также улучшить селективность и специфичность метода.Amantadine is an antiviral and, at the same time, antiparkinsonian dopaminergic drug, by its chemical nature is a tricyclic aminoadamantane, a derivative of adamantane-1-aminoadamantane hydrochloride, or 1-adamantylamine hydrochloride. A crystalline powder of bitter taste, white or white with a slight yellowish tint. The drug was originally proposed in 1967 as an antiviral agent effective against type A2 influenza viruses. Subsequently, its effectiveness in Parkinsonism was discovered. The mechanism of the therapeutic effect of amantadine in parkinsonism is explained by the fact that it stimulates the release of dopamine from neuronal depots and increases the sensitivity of dopaminergic receptors to a neurotransmitter (dopamine); Thus, even with a decrease in the formation of dopamine in the basal ganglia, conditions are created for normalizing the neurophysiological processes that occur in them. There is also evidence that amantadine inhibits the generation of impulses in the motor neurons of the central nervous system, being a weak antagonist of glutamate NMDA receptors. Amantadine in combination with other drugs is used to treat influenza A virus, hepatitis C, parkinsonism, and multiple sclerosis. In neurology, amantadine is primarily used in the pharmacotherapy of Parkinson's disease. With all its important positive properties, amantadine is characterized by a rather large number of side effects (especially in the elderly), minimization of which requires the use of the most sensitive technologies for therapeutic drug monitoring with an assessment of the content of this drug in the blood of patients. Amantadine at a dose of 200 mg / day counteracts extrapyramidal symptoms both in idiopathic Parkinson's disease and in case of Parkinson's disorders caused by antipsychotics. A stationary concentration level in the blood is reached within 4-7 days. Individual concentration values in the blood of patients can vary in the therapeutic range of 200-900 ng / ml. There is a proven relationship between the content of amantadine in the blood and its effect on extrapyramidal symptoms. This drug can enter into drug interactions with other substances, both with positive and negative clinical effects. For example, amantadine enhances the suppression of viral activity by interferon, potentiates the antidyskinesia effect of levetiracetam in patients with Parkinson's disease, and can cause intense and recurrent paramnestic symptoms (such as deja vu) when used with phenylpropanolamine in the treatment of influenza. Side effects of amantadine, such as nausea, dizziness, insomnia, are quite common in patients (5-15%), especially with prolonged use (more than 6 weeks). Side effects of amantadine also include amphetamine-like effects, such as increased neuro-reflex irritability syndrome, anxiety, nightmares, and occasionally hallucinations. A concentration of amantadine in the blood in excess of 1600 mcg / ml is considered toxic. Treatment with high doses of amantadine causes serious side effects, such as myocardial infarction, suicide attempts, impotence, confusion, dysphonia, and alopecia. Drug interactions directly depend on the serum concentration of amantadine. Managing these effects and testing patient compliance requires an adequate quantitative method. Existing methods of analysis, such as gas chromatography / mass spectrometry, are usually quite difficult to implement, due to the need to use complex multi-stage sample preparation followed by derivatization of amantadine. This is the reason that routine analysis of amantadine is presented in a very small number of clinical laboratories, and also because therapeutic drug monitoring of this drug is not widespread. The creation of an amantadine analysis method based on liquid tandem chromatography-mass spectrometry can significantly simplify sample preparation, reduce the duration and cost of analysis of one sample, and also improve the selectivity and specificity of the method.
На сегодняшний день известен метод определения остаточного амантадина и римантадина в яйцах и цыплятах путем диспергирования твердофазной экстракции - сверхвысокой эффективности жидкостной хроматографии(СВЭЖХ)-тандемной масс-спектрометрии (Lin Т, Fan J, Liu X, Chen X, Li Y, Liu H Determination of amantadine and rimantadine residues in egg and chicken samples by dispersive solid phase extraction purification-ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, Se Pu, 2015 Nov; 33(11):1169-74). Данный способ разработан только для определения амантадина, в частности его остаточного содержания, в яйцах и цыплятах.Today, a method is known for determining the residual amantadine and rimantadine in eggs and chickens by dispersing solid-phase extraction - ultra-high performance liquid chromatography (UHLC) -tandem mass spectrometry (Lin T, Fan J, Liu X, Chen X, Li Y, Liu H Determination of amantadine and rimantadine residues in egg and chicken samples by dispersive solid phase extraction purification-ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, Se Pu, 2015 Nov; 33 (11): 1169-74). This method is designed only to determine amantadine, in particular its residual content, in eggs and chickens.
Наиболее близким техническим решением является способ определения амантадина в плазме крови с помощью жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии, в котором авторы применяли хроматограф Surveyor MS pump, оснащенный автосамплером и трехквадрупольным детектором TSQ Quantum mass, производства фирмы Thermo Electron (США), условия хроматографирования были следующими: режим элюирования - изократический, подвижная фаза состояла из воды и ацетонитрила, взятых в соотношении 60/40 (об./об.) с добавлением муравьиной кислоты (5 г/л), скорость потока составляла - 0,2 мл/мин с общим временем хроматографирования - 3 минуты; для разделения использовали хроматографическую колонку Phenomenex Luna С8, 100×2.0 мм; с размером частиц 3 мкм. Масс-спектрометрическое определение осуществляли в режиме положительно заряженного электроспрея, в режиме мониторинга выбранных реакций, с MRM переходами: m/z 152.→135.1 при нормализованной энергии соударений 22 эВ для амантадина и m/z 214.1→135.1 при 26 эВ для внутреннего стандарта. В качестве способа пробоподготовки авторами применяется простое разведение образцов сыворотки крови деионизированной водой в соотношении 1:462 (сыворотка: вода) (Arndt Т., Guessregen В., Hohl A., Reis J. Determination of serum amantadine by liquid chromatography -tandem mass spectrometry // Clin. Chim. Acta. 2005; 359:125-131). К недостаткам указанного метода, относится то, что данный способ пробоподготовки сопряжен с сильным уменьшением концентрации целевого соединения в финальном образце, что требует применения дорогостоящего масс-спектрометрического оборудования с особо высокой чувствительностью. Это делает метод недостаточно универсальным и ограничивает сферу его применения трехквадрупольными хромато-масс-спектрометрами и другими приборами со сходными характеристиками по чувствительности. Кроме того, указанный метод, согласно приведенному описанию, относится к категории микроколоночной ультра-высокоэффективной жидкостной хроматографии, что опять же ограничивает выбор хроматографов, пригодных для реализации данного метода, позволяя применять только те хроматографические насосы, которые способны развивать давление, достаточное для того, чтобы работать с ультрамелкозернистым сорбентом (с размером частиц 3 мкм и ниже).The closest technical solution is a method for determining amantadine in blood plasma using liquid chromatography-tandem mass spectrometry, in which the authors used a Surveyor MS pump chromatograph equipped with an autosampler and a three-quadrupole detector TSQ Quantum mass, manufactured by Thermo Electron (USA), the chromatographic conditions were the following: the elution mode is isocratic, the mobile phase consisted of water and acetonitrile, taken in a ratio of 60/40 (vol./about.) with the addition of formic acid (5 g / l), the flow rate was 0.2 ml / min with a total chromatographic time of 3 minutes; a Phenomenex Luna C8 chromatography column, 100 × 2.0 mm, was used for separation; with a particle size of 3 microns. Mass spectrometric determination was carried out in the mode of positively charged electrospray, in the monitoring mode of selected reactions, with MRM transitions: m / z 152. → 135.1 at normalized collision energy of 22 eV for amantadine and m / z 214.1 → 135.1 at 26 eV for the internal standard. As a method of sample preparation, the authors use a simple dilution of blood serum samples with deionized water in a ratio of 1: 462 (serum: water) (Arndt T., Guessregen B., Hohl A., Reis J. Determination of serum amantadine by liquid chromatography -tandem mass spectrometry // Clin. Chim. Acta. 2005; 359: 125-131). The disadvantages of this method include the fact that this method of sample preparation is associated with a strong decrease in the concentration of the target compound in the final sample, which requires the use of expensive mass spectrometric equipment with particularly high sensitivity. This makes the method insufficiently universal and limits the scope of its application to tri-quadrupole chromatography-mass spectrometers and other devices with similar sensitivity characteristics. In addition, this method, according to the above description, belongs to the category of microcolumn ultra-high-performance liquid chromatography, which again limits the choice of chromatographs suitable for implementing this method, allowing the use of only those chromatographic pumps that are able to develop a pressure sufficient to work with an ultrafine-grained sorbent (with a particle size of 3 microns and below).
Технический результат заявленного изобретения заключается в создании способа определения амантадина в плазме крови с высокой воспроизводимостью и точностью, и наиболее адаптированного для решения задач экспериментальной и клинической фармакокинетики.The technical result of the claimed invention is to create a method for determining amantadine in blood plasma with high reproducibility and accuracy, and the most adapted to solve the problems of experimental and clinical pharmacokinetics.
Технический результат достигается тем, что проводят количественное определение амантадина в плазме крови путем ее анализа на наличие амантадина высокоселективным методом хромато-масс-спектрометрии, при этом хромато-масс-спектрометрию проводят с использованием матрицы в виде плазмы крови с амантадином и внутреннего стандарта, вещества, близкого по строению молекулы к анализируемому веществу - N-адамантил-гексаметиленимина, разделение продуктов экстракции проводят на хроматографической колонке 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм, при этом в качестве элюента применяют 10 мМ ацетат аммония - раствор А и смесь ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 - раствор Б, взятых в процентном соотношении раствора А к раствору Б - 42:58, соответственно, причем разделение продуктов экстракции осуществляют с температурой 30°С и скоростью подачи элюента 0,6 мл/мин, детектирование внутреннего стандарта проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона с m/z 234.0, а детектирование амантадина проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с m/z 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV, а его концентрацию рассчитывают по формуле: С=1198, 5306×AR, где С -концентрация амантадина (мкг/мл), AR - отношение площади хроматографического пика амантадина к площади пика внутреннего стандарта..The technical result is achieved by the quantitative determination of amantadine in blood plasma by analyzing it for the presence of amantadine using a highly selective chromatography-mass spectrometry method, while chromatography-mass spectrometry is carried out using a matrix in the form of blood plasma with amantadine and an internal standard, a substance, N-adamantyl-hexamethyleneimine, which is close in structure to the analyte, is separated by extraction on a 4.6 × 100 mm chromatographic column filled with finely porous octa decylsilyl silica gel with a particle size of 5 μm, while 10 mM ammonium acetate - solution A and a mixture of acetonitrile and 10 mm ammonium acetate in a ratio of 90:10 - solution B, taken as a percentage of solution A to solution B - 42 are used as eluent: 58, respectively, with the separation of the extraction products carried out at a temperature of 30 ° C and an eluent feed rate of 0.6 ml / min, the detection of the internal standard is carried out by the daughter ion with m / z 134.9, resulting from the fragmentation of the parent molecular ion with m / z 234.0 , and the detective Amantadine is ionized using a daughter ion with m / z 134.9, which is formed as a result of fragmentation of the parent molecular amantadine ion with m / z 152.0 at a normalized collision energy of 20 eV, and its concentration is calculated by the formula: C = 1198, 5306 × AR, where C is amantadine concentration (μg / ml), AR is the ratio of the chromatographic peak area of amantadine to the peak area of the internal standard ..
Способ осуществляется следующим образом.The method is as follows.
Все растворители имели квалификацию «Для хроматографии», реактивы - не ниже «ч.д.а.». Для приготовления растворов стандартных образцов использовали субстанции стандартов амантадина (адамантан-1-амин) - C10H17N с молекулярной массой: 151,249 а.е.м. (производства Sigma-Aldrich, США) и N-адамантил-гексаметиленимина (см. фиг. 1А, Б). На фиг. 1А, Б показаны структурная формула амантадина (см. фиг. 1А) и N-адамантил-гексаметиленимина (см. фиг. 1Б) В качестве биологической матрицы использовали плазму крови.All solvents had the qualification “For chromatography”, reagents - not lower than “analytical grade”. To prepare solutions of standard samples, the substances of amantadine standards (adamantan-1-amine) —C 10 H 17 N with a molecular weight of 151.249 amu were used. (manufactured by Sigma-Aldrich, USA) and N-adamantyl-hexamethyleneimine (see Fig. 1A, B). In FIG. 1A, B show the structural formula of amantadine (see Fig. 1A) and N-adamantyl-hexamethyleneimine (see Fig. 1B). Blood plasma was used as a biological matrix.
Для выделения амантадина из плазмы крови и очистки экстракта используют метод жидкостной экстракции. К образцу плазмы крови объемом 500 мкл добавляют 50 мкл внутреннего стандарта (N-адамантил-гексаметиленимина, 50 мкг/мл) и 500 мкл пересыщенного раствора бикарбоната натрия (NaHCO3, 1,14 моль/л) с целью повышения коэффициента извлечения амантадина. Затем приливают 5 мл органического экстрагента - диэтилового эфира. Образовавшуюся смесь встряхивают в течение 5 минут на вортекс-миксере Heidolph Ultra, а затем центрифугируют на скорости 3500 об/мин для разделения органического и гидрофильного слоя. Надосадочную жидкость осторожно декантируют и упаривают в центрифужном вакуумном концентраторе Eppendorf Concentrator 5301 при температуре 45°С. Полученный сухой остаток перерастворяют в 500 мкл метанола. Образец переносят в хроматографическую виалу, которую помещают в автосамплер хроматографа для дальнейшего хромато-масс-спектрометрического анализа. Раствор инжектируют в петлю хроматографа в объеме 10 мкл.To extract amantadine from blood plasma and purify the extract, the liquid extraction method is used. 50 μl of internal standard (N-adamantyl-hexamethyleneimine, 50 μg / ml) and 500 μl of a supersaturated sodium bicarbonate solution (NaHCO 3 , 1.14 mol / L) are added to a 500 μl blood plasma sample to increase the amantadine recovery coefficient. Then 5 ml of organic extractant, diethyl ether, are poured. The resulting mixture was shaken for 5 minutes on a Heidolph Ultra vortex mixer, and then centrifuged at a speed of 3500 rpm to separate the organic and hydrophilic layer. The supernatant was carefully decanted and evaporated in an Eppendorf Concentrator 5301 centrifugal vacuum concentrator at a temperature of 45 ° C. The resulting dry residue was redissolved in 500 μl of methanol. The sample is transferred to a chromatographic vial, which is placed in an autosampler of a chromatograph for further chromatography-mass spectrometric analysis. The solution is injected into the loop of the chromatograph in a volume of 10 μl.
В данных условиях коэффициент экстракции для амантадина составляет 88,97±1,25%, для внутреннего стандарта - 90,96±0,93%.Under these conditions, the extraction coefficient for amantadine is 88.97 ± 1.25%, for the internal standard - 90.96 ± 0.93%.
Для высокоэффективной жидкостной хромато-масс-спектрометрии используют хроматограф - «Finnigan Surveyor LC Pump Plus», детектор - масс-спектрометрический детектор «LCQ Fleet MS» (квадрупольная ионная ловушка) и аналитическую колонку - обращенно-фазную колонку Hypersil Gold фирмы Thermo Scientific, США (4,6×100 мм; 5 мкм).For high-performance liquid chromatography-mass spectrometry, a Finnigan Surveyor LC Pump Plus chromatograph is used, a detector is an LCQ Fleet MS mass spectrometric detector (quadrupole ion trap), and a Hypersil Gold reversed-phase analytical column from Thermo Scientific, USA (4.6 × 100 mm; 5 μm).
Масс-спектрометрическое детектирование амантадина проводят по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате фрагментации родительского молекулярного иона амантадина с m/z 152.0 при нормализованной энергии соударений 20 eV. Масс-спектр второго порядка для амантадина представлен на фиг. 2 А и для N-адамантил-гексаметиленимина на фиг. 2 Б (по вертикали интенсивность (Intensity) по горизонтали масса заряда (m/z).Mass spectrometric detection of amantadine is carried out by the daughter ion with m / z 134.9, resulting from the fragmentation of the parent molecular amantadine ion with m / z 152.0 at a normalized collision energy of 20 eV. The second-order mass spectrum for amantadine is shown in FIG. 2A and for N-adamantyl-hexamethyleneimine in FIG. 2 B (vertical intensity (Intensity) horizontally charge mass (m / z).
Внутренний стандарт детектируют по дочернему иону с m/z 134.9, образующемуся в результате распада молекулярного иона внутреннего стандарта с m/z 234.0. Масс-спектрометр работал в режиме регистрации ионов, положительно заряженных электроспреем (ESI), создаваемым напряжением в 5 кВ. Скорость потока газа-небулайзера (азота): 5 л/мин, давление на распылителе - 100 psi. Температура интерфейса капилляра составляла 350°С, температура нагревателя - 300°С. Амплитуда возбуждения на концевых электродах ловушки 0,1 В. В качестве демпфирующего газа в ионной ловушке используют гелий. Данные обрабатывают с помощью компьютерной хроматографической программы Xcalibur 2.1 w/Foundation 1.0.1. (Thermo Scientific, США).The internal standard is detected by the daughter ion with m / z 134.9, resulting from the decay of the molecular ion of the internal standard with m / z 234.0. The mass spectrometer worked in the registration mode of ions positively charged by electrospray (ESI) created by a voltage of 5 kV. Nebulizer (nitrogen) gas flow rate: 5 L / min, atomizer pressure - 100 psi. The temperature of the capillary interface was 350 ° С; the temperature of the heater was 300 ° С. The excitation amplitude at the end electrodes of the trap is 0.1 V. Helium is used as a damping gas in the ion trap. Data is processed using a Xcalibur 2.1 w / Foundation 1.0.1 computer chromatographic program. (Thermo Scientific, USA).
Разделение осуществляют на обращенно-фазной хроматографической колонке Hypersil Gold фирмы Thermo Scientific, США, 5 мкм, 4,6×100 мм, заполненной мелкопористым октадецилсилильным силикагелем с размером частиц 5 мкм. Подвижная фаза состоит из двух растворов: 10 мМ ацетата аммония, (раствор А) и смеси ацетонитрила и 10 мМ ацетата аммония в соотношении 90:10 соответственно (раствор Б). Растворы А и Б взяты в процентном соотношении 58А:42Б. Работа проводилась в изократическом режиме элюирования. Скорость потока подвижной фазы составляла 0,6 мл/мин. Объем пробы - 10 мкл. Температура разделения 30°С. Продолжительность хроматографирования - 11 минут. Время удерживания аналита - 3,28±0,05 минут. Время удерживания внутреннего стандарта (N-адамантил-гексаметиленимина) - 7,28±0,05 минут.Separation is carried out on a Hypersil Gold reverse phase chromatography column from Thermo Scientific, USA, 5 μm, 4.6 × 100 mm, filled with finely porous octadecylsilyl silica gel with a particle size of 5 μm. The mobile phase consists of two solutions: 10 mM ammonium acetate, (solution A) and a mixture of acetonitrile and 10 mM ammonium acetate in a ratio of 90:10, respectively (solution B). Solutions A and B were taken in a percentage ratio of 58A: 42B. The work was carried out in isocratic elution mode. The flow rate of the mobile phase was 0.6 ml / min. The sample volume is 10 μl. The separation temperature is 30 ° C. The duration of the chromatography is 11 minutes. The analyte retention time is 3.28 ± 0.05 minutes. The retention time of the internal standard (N-adamantyl-hexamethyleneimine) is 7.28 ± 0.05 minutes.
Демонстрационная хроматограмма образца плазмы крови с концентрацией амантадина 500 нг/мл представлена на фиг. 3, на котором видна хроматограмма экстрагированного образца плазмы крови с концентрацией амантадина 500 нг/мл, верхний пик - пик аналита, нижний пик - пик внутреннего стандарта (по вертикали относительное содержание (Relative abundance), по горизонтали время (Time) в минутах).A demonstration chromatogram of a blood plasma sample with an amantadine concentration of 500 ng / ml is shown in FIG. 3, which shows a chromatogram of an extracted blood plasma sample with an amantadine concentration of 500 ng / ml, the upper peak is the analyte peak, the lower peak is the peak of the internal standard (vertical relative content (Relative abundance), horizontal time (Time) in minutes).
Для приготовления калибровки готовили маточные растворы стандартов амантадина и внутреннего стандарта в метаноле с концентрациями 1 мг/мл. Раствор амантадина применяли для приготовления растворов рабочих стандартных образцов на плазме крови с концентрациями 31,3 нг/мл; 62,5 нг/мл; 125 нг/мл; 250 нг/мл; 500 нг/мл; 1000 нг/мл. Раствор внутреннего стандарта с концентрацией 1 мг/мл разбавляли в 20 раз для получения рабочего раствора внутреннего стандарта с концентрацией 50 мкг/мл. Калибровочная кривая амантадина в плазме крови показана на фиг. 4.To prepare the calibration, mother solutions of amantadine and internal standards in methanol with concentrations of 1 mg / ml were prepared. A solution of amantadine was used to prepare solutions of working standard samples in blood plasma with concentrations of 31.3 ng / ml; 62.5 ng / ml; 125 ng / ml; 250 ng / ml; 500 ng / ml; 1000 ng / ml. A solution of the internal standard with a concentration of 1 mg / ml was diluted 20 times to obtain a working solution of the internal standard with a concentration of 50 μg / ml. A calibration curve of amantadine in blood plasma is shown in FIG. four.
Количественное определение осуществляли по градуировочной зависимости для амантадина в плазме крови и рассчитывали по формуле:Quantitative determination was carried out by the calibration dependence for amantadine in blood plasma and was calculated by the formula:
С = 1198,5306×AR, где С - концентрация амантадина (мкг/мл), AR (Area Ratio) -отношение площадей пиков аналита и внутреннего стандарта. Коэффициент корреляции составил R2=0,9985, что соответствует надлежащей аналитической аппроксимации. Предел количественного определения - 31,3 нг/мл.C = 1198.5306 × AR, where C is the concentration of amantadine (μg / ml), AR (Area Ratio) is the ratio of the peak areas of the analyte and the internal standard. The correlation coefficient was R2 = 0.9985, which corresponds to a proper analytical approximation. The limit of quantification is 31.3 ng / ml.
Точность и воспроизводимость.Accuracy and reproducibility.
Точность выражалась в виде коэффициента вариации (% C.V.) для каждой серии образцов согласно уравнению:Accuracy was expressed as the coefficient of variation (% C.V.) for each series of samples according to the equation:
SD - стандартное отклонение серии определений;SD - standard deviation of a series of definitions;
Воспроизводимость измерялась, как процент отклонения (%dev.) от теоретического значения по формуле:Reproducibility was measured as the percentage deviation (% dev.) From the theoretical value by the formula:
Для метрологической валидации полученной методики определяют точность в течение рабочего дня. Каждый из образцов, предназначенных для контроля качества, анализировали в течение 1 рабочего дня (6 определений). Результаты представлены в таблице 1.For metrological validation of the obtained methodology, accuracy is determined during the working day. Each of the samples intended for quality control was analyzed within 1 working day (6 determinations). The results are presented in table 1.
Относительная ошибка определения амантадина не превышала 10%. Таким образом, представленный метод обладает высокой эффективностью в проведении анализа, не требует использования большого количества химических реактивов. Высокая точность и чувствительность данного метода количественного определения амантадина в плазме крови обеспечивает идентификацию вещества с установленными характеристиками погрешности, что позволяет использовать данную методику для решения задач по изучению как экспериментальной, так и клинической фармакокинетики препарата.The relative error in the determination of amantadine did not exceed 10%. Thus, the presented method is highly effective in the analysis, does not require the use of a large number of chemical reagents. The high accuracy and sensitivity of this method for the quantitative determination of amantadine in blood plasma provides the identification of a substance with established error characteristics, which allows the use of this technique to solve problems of studying both experimental and clinical pharmacokinetics of the drug.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017123072A RU2650968C1 (en) | 2017-06-29 | 2017-06-29 | Method of quantification of amantadine in blood plasma |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017123072A RU2650968C1 (en) | 2017-06-29 | 2017-06-29 | Method of quantification of amantadine in blood plasma |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2650968C1 true RU2650968C1 (en) | 2018-04-18 |
Family
ID=61976583
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017123072A RU2650968C1 (en) | 2017-06-29 | 2017-06-29 | Method of quantification of amantadine in blood plasma |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2650968C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113740476A (en) * | 2020-05-29 | 2021-12-03 | 宜宾市南溪区红光制药有限公司 | Method for detecting content of impurity L-2-aminobutanamide hydrochloride in brivaracetam drug |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2568876C1 (en) * | 2015-02-11 | 2015-11-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) | Method of determining pinostrobin oxime in blood plasma |
| RU2585115C1 (en) * | 2015-03-05 | 2016-05-27 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) | Method of determining carnosine in biological materials |
-
2017
- 2017-06-29 RU RU2017123072A patent/RU2650968C1/en active
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2568876C1 (en) * | 2015-02-11 | 2015-11-20 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) | Method of determining pinostrobin oxime in blood plasma |
| RU2585115C1 (en) * | 2015-03-05 | 2016-05-27 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научный центр неврологии" (ФГБНУ НЦН) | Method of determining carnosine in biological materials |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| ARNDT T et al. Determination of serum amantadine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. Clin Chim Acta, 2005, 359(1-2), p.125-31. * |
| JALALI F et al. Potentiometric determination of trace amounts of amantadine using a modified carbon-paste electrode. Anal Sci., 2009, 25(10), p.1227-30. * |
| WANG F et al. Sensitive Determination of Amantadine in Microdialysis Samples from Rat Plasma by HPLC with Fluorescence Detection. Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, 2015, Vol.38, Is.17, p.1622-1628. * |
| WANG F et al. Sensitive Determination of Amantadine in Microdialysis Samples from Rat Plasma by HPLC with Fluorescence Detection. Journal of Liquid Chromatography & Related Technologies, 2015, Vol.38, Is.17, p.1622-1628. JALALI F et al. Potentiometric determination of trace amounts of amantadine using a modified carbon-paste electrode. Anal Sci., 2009, 25(10), p.1227-30. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN113740476A (en) * | 2020-05-29 | 2021-12-03 | 宜宾市南溪区红光制药有限公司 | Method for detecting content of impurity L-2-aminobutanamide hydrochloride in brivaracetam drug |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US11879900B2 (en) | Mass spectrometric quantitation assay for metabolites of leflunomide | |
| US11789026B2 (en) | C peptide detection by mass spectrometry | |
| Guo et al. | Simultaneous identification, confirmation and quantitation of illegal adulterated antidiabetics in herbal medicines and dietary supplements using high-resolution benchtop quadrupole-Orbitrap mass spectrometry | |
| JP2019082481A (en) | Method for detecting reverse triiodothyronine through mass analysis | |
| Qu et al. | Quantitative performance of online SPE-LC coupled to Q-Exactive for the analysis of sofosbuvir in human plasma | |
| JP2020530904A (en) | Detection and quantification of guanidinoacetic acid, creatine, and creatinine by mass spectrometry | |
| Arinobu et al. | High-throughput determination of theophylline and caffeine in human serum by conventional liquid chromatography-mass spectrometry | |
| RU2650968C1 (en) | Method of quantification of amantadine in blood plasma | |
| KR101549179B1 (en) | Analytical method for the simultaneous measurement of chemical castration agents and testosterone levels in serum | |
| Koçak et al. | Determination of Ibuprofen in Pharmaceutical Preparations by UPLC-MS/MS Method | |
| Yang et al. | Determination of palonosetron in human plasma by ultra performance liquid chromatography–tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetic study | |
| Honour | Benchtop mass spectrometry in clinical biochemistry | |
| RU2568876C1 (en) | Method of determining pinostrobin oxime in blood plasma | |
| RU2665164C1 (en) | Method of quantification of levodopa in blood plasma | |
| CN111413439A (en) | Method for determining metformin in blood plasma by rapid hydrophilic interaction chromatography-tandem mass spectrometry | |
| Aji et al. | A novel UPLC–MS/MS method for determination of γ-amino butyric acid analogue in human Plasma: application to pharmacokinetic study | |
| RU2631613C1 (en) | Method for determining topiramate in blood plasma | |
| Mather et al. | a hIgh SenSITIvITy uplc/MS/MS MeThod for The analySIS of fluTIcaSone propIonaTe In plaSMa | |
| Katteboina et al. | LC-MS/MS assay for irbesartan in human plasma using solid phase extraction technique: a pharmacokinetic study | |
| Zhang et al. | Simultaneous determination of 18 steroids in the hypothalamic pituitary gonadal axis based on UPLC-MS/MS with multimode ionization | |
| Fu et al. | Application of a simple and rapid LC-MS/MS method for determination of danshensu in human plasma for an oral pharmacokinetic study of Danshen granules in chinese healthy subjects | |
| RU2483309C1 (en) | Method for detecting exogenicous steroids in human biological fluid | |
| CN109932468A (en) | A kind of synchronous method for detecting free state CML and 5-HMF in liquid or semisolid flavouring | |
| Hailin et al. | SENSITIVE AND SPECIFIC LIQUID CHROMATOGRAPHY TANDEM MASS SPECTROMETRY METHOD FOR ASSAY OF FLUOXETINE AND ITS METABOLITE NORFLUOXETINE IN HUMAN PLASMA AND APPLICATION OF METHOD TO PHARMACOKINETIC ANALYSIS |