RU2649014C1 - Method for obtaining the concentrate of unsaturated alkyl glycidyl ethers from sea lipides - Google Patents
Method for obtaining the concentrate of unsaturated alkyl glycidyl ethers from sea lipides Download PDFInfo
- Publication number
- RU2649014C1 RU2649014C1 RU2017112550A RU2017112550A RU2649014C1 RU 2649014 C1 RU2649014 C1 RU 2649014C1 RU 2017112550 A RU2017112550 A RU 2017112550A RU 2017112550 A RU2017112550 A RU 2017112550A RU 2649014 C1 RU2649014 C1 RU 2649014C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- age
- unsaturated
- alkyl glycidyl
- extraction
- mixture
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 62
- -1 unsaturated alkyl glycidyl ethers Chemical class 0.000 title abstract description 28
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 title description 18
- 125000003473 lipid group Chemical group 0.000 title 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 56
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims abstract description 50
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 49
- 239000003925 fat Substances 0.000 claims abstract description 38
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 30
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 claims abstract description 18
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims abstract description 17
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims abstract description 17
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims abstract description 17
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 230000032050 esterification Effects 0.000 claims abstract description 16
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 15
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims abstract description 11
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims abstract description 8
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 7
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 7
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 3
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 claims description 26
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 23
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N glycerol Substances OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 4
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 claims 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 abstract description 10
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract description 9
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 1
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 abstract 1
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 43
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 33
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 22
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 22
- 230000008569 process Effects 0.000 description 16
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 12
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 10
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 8
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 7
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 7
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 150000001355 alkyl diacyl glycerols Chemical class 0.000 description 5
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 5
- NRWMBHYHFFGEEC-UHFFFAOYSA-N selachyl alcohol Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCCOCC(O)CO NRWMBHYHFFGEEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- NRWMBHYHFFGEEC-MDZDMXLPSA-N 3-[(e)-octadec-9-enoxy]propane-1,2-diol Chemical compound CCCCCCCC\C=C\CCCCCCCCOCC(O)CO NRWMBHYHFFGEEC-MDZDMXLPSA-N 0.000 description 4
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 4
- 210000000514 hepatopancreas Anatomy 0.000 description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 4
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 4
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 4
- 239000010686 shark liver oil Substances 0.000 description 4
- 229940069764 shark liver oil Drugs 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 238000005904 alkaline hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 3
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 3
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 3
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N dodecahydrosqualene Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 1,2-Dichloroethane Chemical group ClCCCl WSLDOOZREJYCGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001161496 Berryteuthis magister Species 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001423892 Somniosus microcephalus Species 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 2
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 2
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- 208000015122 neurodegenerative disease Diseases 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 2
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150014742 AGE1 gene Proteins 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 238000007445 Chromatographic isolation Methods 0.000 description 1
- 208000028698 Cognitive impairment Diseases 0.000 description 1
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 1
- 241000251209 Echinorhinus cookei Species 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 206010061598 Immunodeficiency Diseases 0.000 description 1
- 208000029462 Immunodeficiency disease Diseases 0.000 description 1
- 241000218657 Picea Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000019155 Radiation injury Diseases 0.000 description 1
- 229930182558 Sterol Natural products 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFWWSZLGTLNVMS-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethoxyethane;hexane Chemical compound CC(O)=O.CCOCC.CCCCCC QFWWSZLGTLNVMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 208000010877 cognitive disease Diseases 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- DVSZKTAMJJTWFG-UHFFFAOYSA-N docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical class CCCCCCCCCC=CC=CC=CC=CC=CC=CC(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 235000019387 fatty acid methyl ester Nutrition 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 1
- 230000005714 functional activity Effects 0.000 description 1
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 230000011132 hemopoiesis Effects 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000007813 immunodeficiency Effects 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 1
- 230000006651 lactation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004770 neurodegeneration Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 1
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 1
- 229940068065 phytosterols Drugs 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- LMHHRCOWPQNFTF-UHFFFAOYSA-N s-propan-2-yl azepane-1-carbothioate Chemical compound CC(C)SC(=O)N1CCCCCC1 LMHHRCOWPQNFTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000003702 sterols Nutrition 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000005809 transesterification reaction Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 239000001993 wax Substances 0.000 description 1
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B11/00—Recovery or refining of other fatty substances, e.g. lanolin or waxes
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к пищевой и фармацевтической промышленности и может быть использовано для получения из морских жиров алкил-глицериновых эфиров, обладающих высоким биологическим действием.The invention relates to the food and pharmaceutical industries and can be used to produce alkyl-glycerol esters with high biological effect from sea fats.
Под названием «морские липиды» объединено большое количество биологически активных веществ - полиненасыщенные жирные кислоты, фосфолипиды, углеводороды, такие как сквален и сквалан, фитостерины и прочие. В состав суммарной липидной некоторых гидробионтов входят необычные липиды - 1-О-алкил-диацилглицерины - соединения, образованные жирными кислотами и спиртами (батиловым, химиловым и селахиловым и др. - 1-O-алкил-глицериновыми эфирами (АГЭ)).Under the name "sea lipids" a large number of biologically active substances are combined - polyunsaturated fatty acids, phospholipids, hydrocarbons, such as squalene and squalane, phytosterols and others. The composition of the total lipid of some aquatic organisms includes unusual lipids - 1-O-alkyl-diacylglycerols - compounds formed by fatty acids and alcohols (butyl, chemical and selachilic, etc. - 1-O-alkyl-glycerol ethers (AGE)).
Алкильные радикалы в 1-м положении глицерина бывают насыщенными, как в случае с химиловым и батиловым спиртами, так и ненасыщенными - у селахилового спирта. Обычно в природных смесях сумма этих 3-х спиртов составляет 80-90% и более от всех АГЭ. Для высвобождения АГЭ и дальнейшего их концентрирования сложно-эфирные связи между глицерином и жирными кислотами во 2 и 3-м положениях гидролизуют. Химическая структура алкил-глицериновых эфиров (АГЭ) приведена на фиг.1, при условии, если: R1= C16H33 - химиловый спирт, R1= C18H37 - батиловый спирт, R1= C18H35 - селахиловый спирт.Alkyl radicals in the 1st position of glycerol are saturated, both in the case of chymyl and batyl alcohols, and unsaturated in selachyl alcohol. Typically, in natural mixtures, the sum of these 3 alcohols is 80-90% or more of all AGE. To release AGE and their further concentration, the ester bonds between glycerol and fatty acids in the 2nd and 3rd positions are hydrolyzed. The chemical structure of alkyl glycerol esters (AGE) is shown in figure 1, provided that: R 1 = C 16 H 33 is a chemical alcohol, R 1 = C 18 H 37 is a butyl alcohol, R 1 = C 18 H 35 - selachyl alcohol.
Липиды с простой эфирной связью, АГЭ, вовлечены в формирование иммунной системы млекопитающих с самых первых дней жизни и являются одним из главных факторов, поддерживающих ее нормальное функционирование в течение всего периода. Широко известно их влияние на гематопоэз, причем, по мнению исследователей, АГЭ нормализуют функцию костного мозга, не вызывая его избыточной стимуляции и, как выяснилось, влияют на функциональную активность головного мозга при профилактике деменций, включая болезнь Альцгеймера, нарушениях когнитивных функций за счет снижения дефицита в нервной ткани плазмалогенов, предшественниками которых они являются. В связи с этим АГЭ успешно применяют в реабилитационной терапии при лечении рака, лучевых поражений, иммунодефицитных состояний, нарушений высшей нервной деятельности и др. (Brohult A., Brohult J., Brohult S., Joelsson I. «Reduce mortality in cancer patient after administration of alkylglycerols» // Acta Obst. Gynecol. Scand. 1986. Vol. 65 P. 779-785; Mitre R., Etienne M., Martinais S., Salmon H., Allaume P., Legrand P., Legrand A.B. «Humoral defence improvement and haematopoiesis stimulation in sows and offspring by oral supply of shark-liver oil to mother during gestation and lactation» // British J. Nutr. 2005. Vol. 94. P. 753-762; Wood P., Khan A., Mankidy R., Goodenowe D. «Plasmalogen deficit: a new and testable hypothesis for the etiology of Alzheimer’s disease». In: «Alzheimer’s disease pathogenesis - Core Concepts, Shifting Paradigms and Therapeutic Targets». 2011. Р. 561-588).Ether-bound lipids, AGEs, have been involved in the formation of the mammalian immune system from the very first days of life and are one of the main factors supporting its normal functioning throughout the entire period. Their effect on hematopoiesis is widely known, and, according to the researchers, AGE normalize bone marrow function without causing excessive stimulation and, as it turned out, affect the functional activity of the brain in the prevention of dementia, including Alzheimer's disease, cognitive impairment by reducing deficiency in the nervous tissue of plasmalogens, the precursors of which they are. In this regard, AGE is successfully used in rehabilitation therapy in the treatment of cancer, radiation injuries, immunodeficiencies, disorders of higher nervous activity, etc. (Brohult A., Brohult J., Brohult S., Joelsson I. “Reduce mortality in cancer patient after administration of alkylglycerols "// Acta Obst. Gynecol. Scand. 1986. Vol. 65 P. 779-785; Miter R., Etienne M., Martinais S., Salmon H., Allaume P., Legrand P., Legrand AB "Humoral defense improvement and haematopoiesis stimulation in sows and offspring by oral supply of shark-liver oil to mother during gestation and lactation" // British J. Nutr. 2005. Vol. 94. P. 753-762; Wood P., Khan A., Mankidy R., Goodenowe D. “Plasmalogen deficit: a new and testable hypothesis for the etiology of Alzheimer's disease.” In: “Alzheimer's disease pathogenesis - Core Concepts, Shifting Paradigms and Therapeutic Targets. "2011. P. 561-588).
Как показали новейшие исследования, АГЭ с ненасыщенным радикалом (в первую очередь, селахиловый спирт) обладают бóльшей биологической активностью, возможно, значительно бóльшей, чем насыщенные АГЭ (A.-L. Deniau, P. Mosset, D.Le Bot, A.B. Legrand Which alkylglycerols from shark liver oil have anti-tumour activities? / Biochimie. 2010. Р. 1-3). Поэтому поиск методов выделения таких соединений и создания препаратов с их участием является важным в свете профилактики и лечения многих недугов человека.As recent studies have shown, AGE with an unsaturated radical (primarily selachyl alcohol) have higher biological activity, possibly significantly higher than saturated AGE (A.-L. Deniau, P. Mosset, D.Le Bot, AB Legrand Which alkylglycerols from shark liver oil have anti-tumor activities? / Biochimie. 2010. P. 1-3). Therefore, the search for methods for isolating such compounds and creating drugs with their participation is important in the light of the prevention and treatment of many human ailments.
На данный момент не существует способа получения в одном процессе ненасыщенных и насыщенных АГЭ с высоким выходом, эффективностью производства, снижением временного параметра и упрощением всей технологической схемы, позволяющей осуществлять способ доступными средствами в любой лаборатории.At the moment, there is no way to obtain unsaturated and saturated AGE in one process with a high yield, production efficiency, reduction of the time parameter and simplification of the entire technological scheme that allows the method to be carried out by affordable means in any laboratory.
Известен способ получения концентратов ненасыщенных АГЭ из печени колючей акулы (катрана), гренландской акулы и химеры (Hallgren B., Larsson S.O. «Separation and identification of alkoxyglycerols» // Acta Chem. Scand. 1959. Vol. 13, N 7. P. 2147-2148). Способ осуществляют следующим образом: неомыляемые вещества, извлеченные из гидролизованного печеночного жира рыб, хроматографируют на колонке с активированной окисью алюминия, для элюции АГЭ используют смесь 10%-ного раствора метанола в метиленхлориде. Получены концентраты ненасыщенных АГЭ следующего содержания (по селахиловому спирту) - 47,8% для катрана, 59,4% для гренландской акулы и 53,6% для химеры. Другие уточняющие данные по выделению АГЭ отсутствуют.A known method of producing concentrates of unsaturated AGE from the liver of a prickly shark (Katran), a Greenland shark and a chimera (Hallgren B., Larsson SO "Separation and identification of alkoxyglycerols" // Acta Chem. Scand. 1959. Vol. 13, N 7. P. 2147-2148). The method is as follows: unsaponifiable substances extracted from hydrolyzed liver oil of fish are chromatographed on an activated alumina column, a mixture of 10% methanol in methylene chloride is used to elute AGE. The following concentrates of unsaturated AGE were obtained (by selachyl alcohol) - 47.8% for Katran, 59.4% for the Greenland shark and 53.6% for the chimera. Other specifying data on the release of AGE are absent.
Недостатки способа:The disadvantages of the method:
1) осуществление данного способа скорее иллюстрирует само наличие АГЭ в печени гидробионтов, чем действительно предлагает рациональный способ их выделения;1) the implementation of this method rather illustrates the very presence of AGE in the liver of aquatic organisms than actually offers a rational way to isolate them;
2) хроматографическое выделение АГЭ, без предварительного концентрирования, для получения препаратов в значительных объемах не приемлемо - низкая эффективность метода, проблемы с регенерацией сорбента, а, главное, высокая себестоимость получаемого продукта;2) chromatographic isolation of AGE, without preliminary concentration, for obtaining large quantities of drugs is not acceptable - low efficiency of the method, problems with sorbent regeneration, and, most importantly, high cost of the product obtained;
3) использование метилового спирта снижает интерес к способу, так как использует чрезвычайно токсичный растворитель, не допустимый в пищевых производствах.3) the use of methyl alcohol reduces interest in the method, as it uses an extremely toxic solvent, not acceptable in food production.
Известен способ выделения алкил-глицериновых эфиров из жира командорского кальмара Berryteuthis magister (Патент РФ №2415125, МПК C07C 43/13, C07C 41/16, C07C 41/40, опубл. 27.03). Способ включает гидролиз морского жира для выделения свободных жирных кислот и высвобождения неомыляемой фракции, содержащей АГЭ, нейтрализацию полученной жировой смеси кислотой, промывку водой и последовательную двойную кристаллизацию из органического растворителя, фильтрацию и сушку образующегося осадка после каждой кристаллизации. Для проведения первой и второй кристаллизации жировую смесь в органическом растворителе выдерживают сначала в течение 10-12 часов при комнатной температуре, а затем в течение 12-15 часов при 0-4°С.A known method for the isolation of alkyl glycerol esters from the fat of Commander squid Berryteuthis magister (RF Patent No. 2415125, IPC C07C 43/13, C07C 41/16, C07C 41/40, publ. 27.03). The method includes hydrolysis of sea fat to isolate free fatty acids and release an unsaponifiable fraction containing AGE, neutralizing the resulting fat mixture with acid, washing with water and sequential double crystallization from an organic solvent, filtering and drying the precipitate formed after each crystallization. For the first and second crystallization, the fat mixture in an organic solvent is kept first for 10-12 hours at room temperature, and then for 12-15 hours at 0-4 ° C.
В процессе используют ацетон или гексан, причем может использоваться только один растворитель во всем процессе или их комбинация.Acetone or hexane is used in the process, and only one solvent can be used in the whole process, or a combination thereof.
При использовании в качестве органического растворителя гексана соотношение жировая смесь - гексан составляет при первой кристаллизации 1:10, кг/л, а при второй кристаллизации промежуточного продукта 1:50, кг/л.When using hexane as an organic solvent, the ratio of fat mixture to hexane in the first crystallization is 1:10, kg / l, and in the second crystallization of the intermediate product 1:50, kg / l.
При использовании в качестве органического растворителя ацетона целесообразно соотношение жировая смесь - ацетон 1:10, кг/л, как при первой, так и при второй кристаллизации промежуточного продукта.When using acetone as an organic solvent, the ratio of fat mixture to acetone is 1:10, kg / l, both in the first and second crystallization of the intermediate product.
Метод позволяет получать насыщенные АГЭ с выходом 50-59,0% и чистотой более 99%.The method allows to obtain saturated AGE with a yield of 50-59.0% and a purity of more than 99%.
Недостатки:Disadvantages:
1) метод использует значительные объемы растворителей, что требует использование больших емкостей, соответствующих фильтровальных установок и постоянную регенерацию растворителей;1) the method uses significant volumes of solvents, which requires the use of large containers, appropriate filtering systems and continuous regeneration of solvents;
2) две кристаллизации метода разделены сушкой осадка для того, чтобы при смене растворителя не было загрязнения одного растворителя другим; сушка реально прерывает процесс и откладывает последующую вторую кристаллизацию на несколько часов;2) the two crystallizations of the method are separated by drying the precipitate so that when changing the solvent there is no contamination of one solvent with another; drying really interrupts the process and postpones the subsequent second crystallization for several hours;
3) продолжительность проведения всего процесса - от исходного жира до целевого продукта (АГЭ) - составляет не менее 59 часов, в среднем 65 часов, притом, что проведение процесса между стадиями является неразрывным. Такая большая продолжительность процесса крайне негативно сказывается на производительности линии получения АГЭ и не позволяет быстро и своевременно перерабатывать поступающее сырье;3) the duration of the entire process - from the initial fat to the target product (AGE) - is at least 59 hours, an average of 65 hours, despite the fact that the process between the stages is inextricable. Such a long process time has an extremely negative effect on the performance of the AGE production line and does not allow for quick and timely processing of incoming raw materials;
4) АГЭ, выделяемые по данному способу на 98-99% состоят из насыщенных соединений, все ненасыщенные АГЭ, обладающие наибольшей биологической активностью, остаются в неиспользуемом остатке и теряются из-за не разработанности технологии.4) AGE released by this method is 98-99% composed of saturated compounds, all unsaturated AGEs with the highest biological activity remain in an unused residue and are lost due to the undeveloped technology.
Известен способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров (Патент РФ №2476611, МПК C22B 7/04, C22B 15/00, C22B 23/00, C22B 4/06, опубл. 27.02.2013), включающий гидролиз морского жира для выделения свободных жирных кислот и высвобождения неомыляемой фракции, содержащей АГЭ, нейтрализацию полученной жировой смеси кислотой, промывку водой и последовательную двойную кристаллизацию из органического растворителя, фильтрацию и сушку образующегося осадка на последней стадии кристаллизации. Для проведения первой кристаллизации жировую смесь комнатной температуры смешивают с органическим растворителем температуры -15°…-5°С при интенсивном перемешивании и сразу отфильтровывают образовавшийся осадок, промывают его небольшим количеством органического растворителя при той же температуре и этот аморфный осадок вновь смешивают с органическим растворителем температуры -15°…-5°С (2-я кристаллизация) при интенсивном перемешивании и сразу отфильтровывают осадок и высушивают его от растворителя при комнатной температуре, получая целевой продукт - АГЭ. Соотношение жировая смесь : органический растворитель при первой кристаллизации составляет 1:1-5, кг/л, на второй также - 1:1-5, кг/л, в расчете на начальное количество жировой смеси. В качестве органических растворителей могут быть взяты ацетон и гексан, причем весь процесс должен использовать только один растворитель для избежания загрязнения одного растворителя другим.A known method of producing alkyl-glycerol esters from marine fats (RF Patent No. 2476611, IPC C22B 7/04, C22B 15/00, C22B 23/00,
Общий выход по АГЭ - 50-59%.The total yield of AGE is 50-59%.
Недостатки:Disadvantages:
1) в продукте содержатся практически только насыщенные АГЭ;1) the product contains almost only saturated AGE;
2) способ не обеспечивает полного извлечения АГЭ из липидов, поэтому все ненасыщенные АГЭ, обладающие высоким биологическим потенциалом, остаются в фильтрате и, в дальнейшем, попадают в отходы.2) the method does not provide complete extraction of AGE from lipids, therefore, all unsaturated AGE with high biological potential remain in the filtrate and, in the future, get into waste.
Известен способ выделения и концентрирования алкил-глицериновых эфиров из морских жиров (Patent GB 1,076,706, МПК C07C 43/02, опубл. 19.07.1967). Способ заключается в следующем: морской жир (жир печени акулы) путем переэтерификации с метиловым спиртом (допускаются этиловый и изопропиловый) и щелочным катализатором (КОН или Na-ОСН3) переводили в метиловые эфиры жирных кислот при температуре 70°С в течение 16 часов и перемешивании, при этом в смесь высвобождались алкил-глицериновые эфиры, оставшийся в смеси метанол упаривали под вакуумом, а АГЭ из общей смеси многократно экстрагировали 90%-ными водно-метанольными или водно-этанольными растворами в соотношении смесь-экстрагент 0,6:1, кг/л, при 50°С и перемешивании в течение 15 минут и отстаивании в течение 2-х часов, фазу с растворителем отделяли и заново экстрагировали смесь при таких же условиях (6 раз), объединенные водно-спиртовые растворы упаривали, получая целевые АГЭ.A known method of isolation and concentration of alkyl glycerol esters from marine fats (Patent GB 1,076,706, IPC C07C 43/02, publ. 07/19/1967). The method consists in the following: sea fat (shark liver oil) by transesterification with methyl alcohol (ethyl and isopropyl allowed) and an alkaline catalyst (KOH or Na-OCH 3 ) were transferred to fatty acid methyl esters at a temperature of 70 ° C for 16 hours and stirring, while the alkyl glycerol esters were released into the mixture, the methanol remaining in the mixture was evaporated in vacuo, and the AGE was repeatedly extracted from 90% water-methanol or water-ethanol solutions in a mixture-extractant ratio of 0.6: 1, kg / l, p At 50 ° С and stirring for 15 minutes and settling for 2 hours, the phase with the solvent was separated and the mixture was extracted again under the same conditions (6 times), the combined water-alcohol solutions were evaporated, obtaining the desired AGE.
Выход суммарных АГЭ (насыщенных и ненасыщенных) - 71%, концентрация в продукте (чистота) - 40%.The yield of total AGE (saturated and unsaturated) is 71%, the concentration in the product (purity) is 40%.
Недостатки способа:The disadvantages of the method:
1) использование метанола недопустимо в пищевых производствах и не желательно в фармацевтических;1) the use of methanol is unacceptable in food production and is not desirable in pharmaceutical;
2) способ предполагает использование хорошо отлаженной технологической линии, что затрудняет его внедрение на малых и других рыбохозяйственных и пищевых предприятиях отечественной индустрии;2) the method involves the use of a well-established technological line, which complicates its implementation in small and other fishery and food enterprises of the domestic industry;
3) в формуле указано использование низкомолекулярных спиртов для экстракции - 1-3 атома углерода, однако никаких примеров, кроме метанола не приведено, и в описании патента преимущество отдается метанолу;3) the formula indicates the use of low molecular weight alcohols for extraction of 1-3 carbon atoms, however, no examples other than methanol are given, and methanol is preferred in the patent description;
4) способ также допускает использование в экстракционной смеси уксусной кислоты и ацетонитрила, такие возможности только усложняют регенерацию растворителей и удаление их из конечного продукта;4) the method also allows the use of acetic acid and acetonitrile in the extraction mixture, such possibilities only complicate the regeneration of solvents and their removal from the final product;
5) данным способом можно получить суммарные АГЭ с чистотой только 47,7% (авторы указывают, что тот же самый опыт, пример 4, был несколько лучше в лабораторных условиях), что недостаточно для коммерческого применения и предполагает в дальнейшем дополнительные стадии очистки;5) using this method, it is possible to obtain total AGE with a purity of only 47.7% (the authors indicate that the same experiment, Example 4, was somewhat better in the laboratory), which is insufficient for commercial use and requires further additional purification stages;
6) авторы в описании патента допускают выход АГЭ при 7-8-и кратной экстракции до 90%, но никаких убедительных доказательств не приводят, хотя в примере 4, в котором тыла использована семикратная экстракция, достигается выход в 71%;6) the authors in the description of the patent allow the release of AGE with 7-8-fold extraction up to 90%, but they do not give any convincing evidence, although in example 4, in which the rear extraction was used seven times, a yield of 71% is achieved;
7) ни о каком концентрате ненасыщенных АГЭ не может быть речи, так как метод экстракции не избирательный и концентрирование в продукте насыщенных и ненасыщенных АГЭ происходит с одинаковой эффективностью, а предварительного удаления насыщенных АГЭ авторы не проводят;7) there can be no talk of any concentrate of unsaturated AGE, since the extraction method is not selective and the concentration of saturated and unsaturated AGE in the product is equally effective, and the authors do not perform preliminary removal of saturated AGE;
8) способ достаточно трудоемкий и, судя по описанию, требует повышенных экономических затрат на свое функционирование.8) the method is quite laborious and, judging by the description, requires increased economic costs for its functioning.
Наиболее близким к заявляемому способу по достигаемому результату является способ выделения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров (Patent GB 1,076,707, МПК C07C 41/12, опубл. 19.07.1967). Способ осуществляют следующим образом.Closest to the claimed method according to the achieved result is a method for the isolation of alkyl glycerol esters from marine fats (Patent GB 1,076,707, IPC C07C 41/12, publ. 07/19/1967). The method is as follows.
Морской жир (жир печени акулы) переводят в метиловые (или изопропиловые) эфиры жирных кислот с высвобождением АГЭ, используя в реакции калиевую щелочь как катализатор и большой избыток метанола (в случае изопропанола катализатор - изопропилат натрия), затем метиловый спирт удаляют под вакуумом, а смесь многократно экстрагируют 90%-ным водным метанолом (или дихлорэтиленом); выход АГЭ составляет 71% с чистотой продукта - 40% (пример 1, части А и В).Sea fat (shark liver oil) is converted to methyl (or isopropyl) esters of fatty acids with the release of AGE, using potassium alkali as a catalyst in the reaction and a large excess of methanol (in the case of isopropanol, the catalyst is sodium isopropylate), then methyl alcohol is removed under vacuum, and the mixture is repeatedly extracted with 90% aqueous methanol (or dichloroethylene); the AGE yield is 71% with a product purity of 40% (example 1, parts A and B).
Промежуточный концентрат АГЭ (40%-ный) с первой стадии растворяют в ацетоне в соотношении концентрат - ацетон 1:13,2, кг/л, выдерживают при комнатной температуре 16 часов и отфильтровывают осадок, затем охлаждают фильтрат до -13°С, выдерживают 2-е суток и снова отфильтровывают выпавший осадок, растворяют его в 2-кратном количестве этанола, фильтруют и выдерживают при 5°С 16 часов, отфильтровывают выпавшие кристаллы насыщенных АГЭ, а фильтрат еще раз кристаллизуют при -5°С в течение 20 часов, фильтруют, осадки с 2-х последних фильтраций объединяют, получая суммарные насыщенные АГЭ, выход на стадии 51%, общий выход 36%, чистота - >95% (пример 2, часть В), ацетоновый фильтрат (после кристаллизации при -13°С) приупаривают до концентрации вещества 22,7% в растворе, охлаждают до -23°С в течение 16 часов, далее выпавший осадок ненасыщенных АГЭ отделяют. Выход на стадии 60,6%, общий выход 27,3%, чистота 98,0%, содержание ненасыщенной фракции от общей суммы АГЭ не приводится, но судя по йодному числу (верхняя таблица стр. 6) - не более 80% (пример 3).The intermediate AGE concentrate (40%) from the first stage is dissolved in acetone in a concentrate-acetone ratio of 1: 13.2, kg / l, kept at room temperature for 16 hours and the precipitate is filtered off, then the filtrate is cooled to -13 ° С, maintained 2 days and again the precipitate is filtered off, dissolved in 2 times the amount of ethanol, filtered and kept at 5 ° С for 16 hours, the precipitated crystals of saturated AGE are filtered off, and the filtrate is once again crystallized at -5 ° С for 20 hours, filtered, precipitation from the last 2 filtrations combined, getting total saturated AGE, the yield at the stage of 51%, the total yield of 36%, the purity -> 95% (example 2, part B), the acetone filtrate (after crystallization at -13 ° C) is evaporated to a substance concentration of 22.7% in solution , cooled to -23 ° C for 16 hours, then the precipitated precipitate of unsaturated AGE is separated. The yield at the stage of 60.6%, the total yield of 27.3%, the purity of 98.0%, the unsaturated fraction of the total AGE is not given, but judging by the iodine number (top table p. 6) - not more than 80% (example 3).
К недостаткам способа относятся: The disadvantages of the method include:
1) использование токсичных метанола и дихлорэтилена;1) the use of toxic methanol and dichloroethylene;
2) сложности при регенерации растворителей (они все взаимно растворимы, образуют при перегонке азеотропы и не будут в дальнейшем чистыми, как изначально);2) difficulties in the regeneration of solvents (they are all mutually soluble, form azeotropes during distillation and will not be clean in the future, as originally);
3) процедуры кристаллизации АГЭ из ацетона (оба варианта) мало согласуются друг с другом - температуры -5°, -13°С, -23°С выбраны скорее произвольно, чем обоснованно; именно этим объясняется низкий выход продукта и сопутствующие в нем примеси;3) the crystallization procedures of AGE from acetone (both versions) are little consistent with each other - temperatures of -5 °, -13 ° C, -23 ° C are chosen rather arbitrarily than justified; this explains the low yield of the product and its impurities;
4) осуществление процесса длительное - несколько суток, сложно судить о технологическом применении такого решения;4) the implementation of the process is long - several days, it is difficult to judge the technological application of such a solution;
5) процесс получения насыщенных и ненасыщенных АГЭ идет не последовательно, разделительной операцией является кристаллизация концентрата АГЭ из ацетона при -13°С (пример 2, часть В) - по первому направлению получают насыщенные АГЭ со своими технологическими режимами, по второму ненасыщенные АГЭ; при этом, каким образом используют отходы в первом и втором случае не уточняется, а они содержат существенные количества насыщенных и ненасыщенных АГЭ;5) the process of obtaining saturated and unsaturated AGE does not proceed sequentially, the separating operation is the crystallization of the AGE concentrate from acetone at -13 ° C (example 2, part B) - in the first direction saturated AGE with their technological modes are obtained, in the second direction unsaturated AGE; however, how the waste is used in the first and second case is not specified, but they contain significant amounts of saturated and unsaturated AGE;
6) общий выход насыщенных АГЭ 36%, а ненасыщенных АГЭ 27,3%, то есть суммарное извлечение АГЭ из морского жира составляет 63,3% - очень малый выход и низкая степень извлечения по каждой фракции, фактически 40% АГЭ теряется в процессе.6) the total yield of saturated AGE is 36%, and unsaturated AGE is 27.3%, that is, the total extraction of AGE from sea fat is 63.3% - a very low yield and low degree of extraction for each fraction, in fact 40% of AGE is lost in the process.
Техническая проблема, поставленная перед изобретением, - разработка эффективного и экономичного способа получения из морских жиров ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров, наряду с насыщенными АГЭ, с целью максимального их извлечения из заготовленного сырья и его комплексной переработки при одновременно высоком качестве целевого продукта (высокая степень чистоты) - ненасыщенных АГЭ, как перспективных средств лечения и профилактики нейродегенеративных заболеваний.The technical problem posed by the invention is the development of an effective and economical method of obtaining unsaturated alkyl-glycerol esters from sea fats, along with saturated AGE, with the aim of extracting them from the prepared raw materials and processing them at the same time with high quality of the target product (high purity ) - unsaturated AGE, as a promising means of treatment and prevention of neurodegenerative diseases.
Поставленная техническая проблема решается тем, что в известном способе выделения ненасыщенных и насыщенных алкил-глицериновых эфиров из морских жиров, включающим этерификацию жирных кислот липидной смеси безводным низкомолекулярным спиртом в присутствии катализатора, выделение ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров из суммарных алкил-глицериновых эфиров экстракцией водно-спиртовыми растворами, согласно изобретению, при этерификации жирных кислот в качестве катализатора используют серную кислоту в количестве 1-2% к объему реакционной смеси, а в качестве безводного низкомолекулярного спирта используют этанол. Перед этерификацией жирных кислот ведут гидролиз жира щелочным агентом, подкисляют полученную смесь, промывают водой, затем кристаллизуют насыщенные алкил-глицериновые эфиры из органического растворителя, отделяют их фильтрацией. Полученный фильтрат, содержащий ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры, упаривают, затем из него выделяют ненасыщенные алкил-глицериновых эфиров экстракцией этанолом с содержанием воды 25-50%, по объему, при соотношении липидная смесь : экстрагент - 1:3-7, об./об., в результате, получают концентрат ненасыщенных алкил-глицериновых эфиров. Полученный продукт очищают методом колоночной хроматографии на силикагеле с использованием элюирующей системы петролейный эфир : этилацетат = 10:1 → 10:4,5, об./об.The technical problem posed is solved by the fact that in the known method for the separation of unsaturated and saturated alkyl glycerol esters from sea fats, including the esterification of fatty acids of the lipid mixture with anhydrous low molecular weight alcohol in the presence of a catalyst, the separation of unsaturated alkyl glycerol esters from the total alkyl glycerol esters by extraction of aqueous alcohol solutions, according to the invention, in the esterification of fatty acids, sulfuric acid is used as a catalyst in an amount of 1-2% of the reaction volume cold mixture, and as the anhydrous low molecular weight alcohol is ethanol. Before esterification of fatty acids, fat is hydrolyzed with an alkaline agent, the resulting mixture is acidified, washed with water, then saturated alkyl-glycerol ethers crystallize from an organic solvent, and they are separated by filtration. The obtained filtrate containing unsaturated alkyl glycerol esters is evaporated, then unsaturated alkyl glycerol esters are isolated from it by extraction with ethanol with a water content of 25-50%, by volume, with the ratio of lipid mixture: extractant - 1: 3-7, vol./ vol., as a result, get a concentrate of unsaturated alkyl glycerol esters. The resulting product is purified by column chromatography on silica gel using an eluting system petroleum ether: ethyl acetate = 10: 1 → 10: 4.5, vol./about.
Целесообразно в качестве органического растворителя для экстракции алкил-глицериновых эфиров использовать водный раствор этанола с содержанием воды 40%.It is advisable to use an aqueous solution of ethanol with a water content of 40% as an organic solvent for the extraction of alkyl glycerol esters.
Для повышения выхода ненасыщенных АГЭ экстракцию АГЭ ведут от трех до десяти раз.To increase the yield of unsaturated AGE, AGE extraction is carried out from three to ten times.
Описание общей схемы заявленного способа.Description of the General scheme of the claimed method.
Гидролиз жира из пищеварительной железы командорского кальмараHydrolysis of Fat from the Digestive Gland of Commander Squid
Начальной стадией выделения АГЭ является щелочной гидролиз липидов пищеварительной железы кальмара, в результате которого происходит отщепление ЖК от молекулы алкил-диацил-глицерина (АДАГ), схема гидролиза приведена на фиг.2.The initial stage of AGE isolation is the alkaline hydrolysis of squid digestive gland lipids, which results in cleavage of the FA from the alkyl-diacyl-glycerol (ADAG) molecule; the hydrolysis scheme is shown in Fig. 2.
К 2 кг жира добавляют 1,5 л 96%-ного этанола и 1 л 40%-ого раствора KОН. Реакцию проводят при 60°C в течение 1 ч. Окончание реакции гидролиза контролируют методом тонкослойной хроматографии.1.5 l of 96% ethanol and 1 l of a 40% KOH solution are added to 2 kg of fat. The reaction is carried out at 60 ° C for 1 hour. The end of the hydrolysis reaction is controlled by thin layer chromatography.
По окончании реакции смесь переносят в делительную воронку, прибавляют 4 л воды и нейтрализуют водным раствором H2SO4 до значения рН=4 по индикаторной бумаге. Гидролизованные липиды дважды промывают 3 л 1%-го раствора NaCl.At the end of the reaction, the mixture was transferred to a separatory funnel, 4 L of water was added and neutralized with an aqueous solution of H 2 SO 4 to pH = 4 using indicator paper. Hydrolyzed lipids are washed twice with 3 L of a 1% NaCl solution.
Осаждение насыщенных алкил-глицериновых эфировPrecipitation of saturated alkyl glycerol esters
Отбирают 1 кг гидролизованных липидов, приливают 2,8 л холодного (-15°С) ацетона, интенсивно перемешивают и помещают в морозильную камеру (-15°C) на 18 часов для осаждения (кристаллизация) насыщенных АГЭ. Процесс кристаллизации из ацетона проводят дважды.1 kg of hydrolyzed lipids was taken, 2.8 L of cold (-15 ° C) acetone was poured, stirred vigorously and placed in the freezer (-15 ° C) for 18 hours to precipitate (crystallized) saturated AGE. The process of crystallization from acetone is carried out twice.
Осадок после второй кристаллизации отфильтровывают через фильтрованную бумагу при -15°C. Полученный фильтрат, содержащий жирные кислоты и ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры упаривают под вакуумом.The precipitate after the second crystallization is filtered through filter paper at -15 ° C. The resulting filtrate containing fatty acids and unsaturated alkyl glycerol esters was evaporated in vacuo.
Этерификация жирных кислот смесиEsterification of fatty acids mixture
К 100 г полученной смеси прибавляют 300 мл раствор H2SO4 в безводном этаноле до ее концентрации в смеси 1-2% (об. %). Реакцию ведут при 70°C и перемешивании в течение 1 ч.To 100 g of the resulting mixture was added 300 ml of a solution of H 2 SO 4 in anhydrous ethanol to its concentration in the mixture of 1-2% (vol.%). The reaction is carried out at 70 ° C and stirring for 1 h.
Экстракция ненасыщенных АГЭExtraction of unsaturated AGE
К реакционной смеси (после этерификации жирных кислот) прибавляют 3-кратный объем воды, интенсивно перемешивают, выдерживают в течение 2 ч и отделяют фракцию липидов.A 3-fold volume of water is added to the reaction mixture (after esterification of fatty acids), intensively stirred, incubated for 2 hours and the lipid fraction is separated.
Ненасыщенные АГЭ из смеси липидов многократно экстрагируют (3-10 раз) растворами этанола с содержанием воды 25-50% (об. %) в соотношении 1:3-7, об./об., при интенсивном перемешивании. Образовавшуюся эмульсию разделяют центрифугированием при 3000 об./мин в течение 5 минут. Отбирают водно-спиртовые растворы после каждой экстракции, объединяют и переэкстрагируют из них АГЭ, добавляя 1 объем этилацетата и 5 объемов 0,9%-ного раствора NaCl при перемешивании, этилацетатный экстракт упаривают под вакуумом, получая концентрат ненасыщенных АГЭ с содержанием более 40%.Unsaturated AGE from a mixture of lipids is repeatedly extracted (3-10 times) with ethanol solutions with a water content of 25-50% (vol.%) In a ratio of 1: 3-7, vol./about., With vigorous stirring. The resulting emulsion is separated by centrifugation at 3000 rpm./min for 5 minutes. Aqueous-alcoholic solutions were taken after each extraction, the AGE was combined and re-extracted from them, adding 1 volume of ethyl acetate and 5 volumes of a 0.9% NaCl solution with stirring, the ethyl acetate extract was evaporated in vacuo to obtain a concentrate of unsaturated AGE with a content of more than 40%.
Полученный концентрат очищают методом колоночной хроматографии АГЭ на силикагеле, используя элюирующую систему петролейный эфир-этилацетат - 10:1 → 10:4,5, об./об., с повышением градиента.The resulting concentrate was purified by AGE column chromatography on silica gel using an eluting system of petroleum ether-ethyl acetate 10: 1 → 10: 4.5, v / v, with an increase in the gradient.
При разработке способа были найдены решения, позволившие осуществить его наиболее экономичным, а главное, простым способом.When developing the method, solutions were found that made it possible to implement it in the most economical, and most importantly, simple way.
Было найдено, что оптимальные концентрации катализатора - серной кислоты - в процессе этерификации липидов, составляют 1-2%, по объему, от реакционной смеси. Это позволяет полностью завершиться реакции этерификации и не подвергнуть окислению липиды. Уменьшение катализатора менее 1% не обеспечивает прохождение реакции полностью, а свыше 2% начинает протекать реакция осмоления липидной массы, что в том и другом случае недопустимо при выделении АГЭ.It was found that the optimal concentration of the catalyst - sulfuric acid - in the process of lipid esterification, is 1-2%, by volume, of the reaction mixture. This allows the esterification reaction to be completed completely and not to lipid oxidize. A decrease in the catalyst of less than 1% does not ensure the completion of the reaction, and more than 2% of the reaction begins to proceed the resinification of the lipid mass, which in both cases is unacceptable in the allocation of AGE.
Особо значимым результатом при проведении экспериментальных исследований явилось определение действительных значений концентрации водно-спиртовых растворов при экстракции ненасыщенных АГЭ из смеси этерифицированных липидов. Установлено, что оптимальное содержание воды в водно-спиртовом растворе должно находиться в пределах 25-50%, по объему. Данные растворы позволяют выделять АГЭ с наибольшей чистотой и минимизировать возможные примеси других липидов. Содержание воды в экстрагенте менее 25% резко увеличивает содержание других липидных примесей, а повышение водного компонента более 50% резко снижает экстракционные возможности смеси.A particularly significant result during experimental studies was the determination of the actual concentration of water-alcohol solutions during the extraction of unsaturated AGE from a mixture of esterified lipids. It was found that the optimal water content in the water-alcohol solution should be in the range of 25-50%, by volume. These solutions make it possible to isolate AGE with the highest purity and minimize possible impurities of other lipids. A water content in the extractant of less than 25% sharply increases the content of other lipid impurities, and an increase in the water component of more than 50% sharply reduces the extraction capabilities of the mixture.
Экспериментально установлены следующие оптимальные соотношения жировой смеси и водно-спиртовых растворов при экстракции ненасыщенных АГЭ - 1:3-7, об./об, соответственно. Оказалось, что использование соотношения менее 1:3 приводит к загрязнению экстрагента посторонними липидными примесями (холестерин и др.), что делает затруднительным работу с этим раствором в дальнейшем. Увеличение соотношения более 1:7, об./об., не оказывает влияние на извлекаемые ненасыщенные АГЭ, т.е. увеличение экстрагента станет затратным при осуществлении способа.The following optimal ratios of the fat mixture and water-alcohol solutions were experimentally established during the extraction of unsaturated AGE - 1: 3-7, vol./about, respectively. It turned out that using a ratio of less than 1: 3 leads to contamination of the extractant with extraneous lipid impurities (cholesterol, etc.), which makes it difficult to work with this solution in the future. An increase in the ratio of more than 1: 7, v / v, does not affect the recoverable unsaturated AGE, i.e. the increase in extractant will become costly when implementing the method.
Использование метода колоночной хроматографии на силикагеле позволяет очистить концентрат ненасыщенных АГЭ до содержания в нем основного вещества более 96%. Достижение данного результата обеспечивается также использованием новой элюирующей системы для выделения чистых ненасыщенных АГЭ: система петролейный эфир-этилацетат, 10:1 → 10:4,5, об./об., с повышением градиента. Отклонение от параметров системы в ту или другую сторону снижало выход или чистоту продукта.Using column chromatography on silica gel allows you to clean the concentrate of unsaturated AGE to a content of the main substance of more than 96%. Achieving this result is also ensured by using a new eluting system to isolate pure unsaturated AGE: petroleum ether-ethyl acetate system, 10: 1 → 10: 4.5, vol./about., With an increase in the gradient. Deviation from the system parameters in one direction or another reduced the yield or purity of the product.
Изобретение иллюстрируется следующими фиг. и табл. На фиг 1. приведена структурная формула алкил-глицериновых эфиров; на фиг. 2 - схема щелочного гидролиза алкил-диацил-глицеридов (АДАГ); в табл. 1 представлен состав липидов пищеварительной железы командорского кальмара; в табл. 2 представлен состав липидов в продуктах (и полупродуктах) на разных стадиях выделения ненасыщенных АГЭ.The invention is illustrated by the following FIG. and table Figure 1. shows the structural formula of alkyl glycerol esters; in FIG. 2 is a diagram of alkaline hydrolysis of alkyl diacyl glycerides (ADAG); in table 1 shows the composition of the lipids of the digestive gland of the commander squid in table Figure 2 shows the composition of lipids in products (and intermediates) at different stages of the isolation of unsaturated AGE.
Способ осуществляют следующим образом.The method is as follows.
ПРИМЕР 1. Выделение насыщенных и ненасыщенных АГЭ из жира пищеварительной железы командорского кальмара Berryteuthis magister. EXAMPLE 1. Isolation of saturated and unsaturated AGE from the digestive fat of the Commander squid Berryteuthis magister.
Состав исходных липидов представлен в табл. 1. Основными классами липидов пищеварительной железы являются алкил-диацил-глицерины (АДАГ) и свободные жирные кислоты, 37,5% и 29,7% соответственно. Кроме перечисленных компонентов, в состав липидов входят также триацил-глицерины (18,5%), холестерин (7,0%). Полярные липиды, эфиры стеринов и воски присутствуют в незначительных количествах.The composition of the starting lipids is presented in table. 1. The main classes of digestive lipids are alkyl-diacyl-glycerols (ADAG) and free fatty acids, 37.5% and 29.7%, respectively. In addition to these components, the composition of lipids also includes triacyl glycerols (18.5%), cholesterol (7.0%). Polar lipids, sterol esters and waxes are present in small quantities.
Качественный и количественный состав смесей липидов на всех стадия процесса оценивают, используя метод тонкослойной хроматографии (ТСХ) (пластинки «Sorbfil», система гексан-диэтиловый эфир-уксусная кислота 50:50:1, об./об./об.) с использованием планшетного сканера и оценки плотности (интенсивности) проявленных на ТСХ-хроматограммах пятен, применяя программу «ТСХ-менеджер версия 3.1 2005 @PinSoft».The qualitative and quantitative composition of lipid mixtures at all stages of the process is evaluated using thin layer chromatography (TLC) (Sorbfil plates, hexane-diethyl ether-acetic acid system 50: 50: 1, v / v / v) using a flatbed scanner and evaluating the density (intensity) of spots shown on TLC chromatograms using the TLC manager version 3.1 2005 @PinSoft program.
Состав АГЭ, выделенных из гидролизованных липидов, а также полученных фракций определяли ГХ-МС.The composition of AGE isolated from hydrolyzed lipids, as well as the obtained fractions, was determined by GC-MS.
Берут 100 кг пищеварительной железы (замороженные внутренности кальмара) нагревают в шнеке с водяной рубашкой и сепарируют. Получают 48,5 кг жира.Take 100 kg of the digestive gland (frozen squid guts) are heated in a screw with a water jacket and separated. Get 48.5 kg of fat.
Гидролиз липидов пищеварительной железы кальмараHydrolysis of squid digestive lipids
К 2 кг жира добавляют 1,5 л 96%-ного этанола и в 1 л 40%-ого раствора КОН. Реакцию проводят при 60°С в течение 1 ч. Окончание реакции гидролиза контролируют методом тонкослойной хроматографии.1.5 l of 96% ethanol and 1 l of a 40% KOH solution are added to 2 kg of fat. The reaction is carried out at 60 ° C for 1 hour. The end of the hydrolysis reaction is controlled by thin layer chromatography.
По окончании реакции смесь переносят в делительную воронку, прибавляют 4 л воды и нейтрализуют водным раствором H2SO4 до значения pH=4 по индикаторной бумаге. Отделившиеся липиды дважды промывают 3 л 1%-ного водного раствора NaCl.At the end of the reaction, the mixture was transferred to a separatory funnel, 4 L of water was added and neutralized with an aqueous solution of H 2 SO 4 to pH = 4 using indicator paper. The separated lipids are washed twice with 3 L of a 1% aqueous NaCl solution.
Получено 1,76 кг гидролизованного жира.Received 1.76 kg of hydrolyzed fat.
Выход (на исходную массу липидов) - 88%.The yield (to the initial mass of lipids) is 88%.
Состав липидов после проведенного гидролиза показан в сводной табл. 2.The composition of lipids after hydrolysis is shown in the summary table. 2.
Выделение насыщенных алкил-глицериновых эфировIsolation of saturated alkyl glycerol esters
После щелочного гидролиза проводят кристаллизацию насыщенных АГЭ из ацетона, согласно разработанному ранее методу (Патент РФ №2476611, МПК C22B 7/04, C22B 15/00, C22B 23/00, C22B 4/06, опубл. от 27.02.2013, «Способ получения алкил-глицериновых эфиров из морских жиров» / Касьянов С.П., Латышев Н.А., Чу Куанг Чуен). На первой стадии кристаллизации при -15°С образовывался осадок, который повторно осаждают из ацетона при той же температуре.After alkaline hydrolysis, crystallization of saturated AGE from acetone is carried out according to the previously developed method (RF Patent No. 2476611, IPC C22B 7/04, C22B 15/00, C22B 23/00,
Отбирают 1 кг гидролизованных липидов, приливают 2,8 л холодного (-15°С) ацетона, интенсивно перемешивают и помещают в морозильную камеру (-15°С) на 18 часов для осаждения насыщенных АГЭ. Процесс повторяют при тех же самых условиях. Выпавший осадок отфильтровывают через фильтрованную бумагу при -15°С. Полученный фильтрат, содержащий жирные кислоты и ненасыщенные алкил-глицериновые эфиры упаривают под вакуумом.1 kg of hydrolyzed lipids was taken, 2.8 L of cold (-15 ° С) acetone was poured, stirred vigorously and placed in the freezer (-15 ° С) for 18 hours to precipitate saturated AGE. The process is repeated under the same conditions. The precipitate formed is filtered through filter paper at -15 ° C. The resulting filtrate containing fatty acids and unsaturated alkyl glycerol esters was evaporated in vacuo.
Полученный продукт представляет собой смесь насыщенных АГЭ с чистотой 99,6%, основным компонентом которой являлся химиловый спирт (содержание 95,7%).The resulting product is a mixture of saturated AGE with a purity of 99.6%, the main component of which was chymyl alcohol (content 95.7%).
Выход насыщенных АГЭ составил 11,0% от взятых на кристаллизацию липидов, или 42,0% от содержания АГЭ в гидролизованных липидах.The yield of saturated AGE was 11.0% of the lipids taken for crystallization, or 42.0% of the AGE content in hydrolyzed lipids.
Выделение ненасыщенных алкил-глицериновых эфировIsolation of unsaturated alkyl glycerol esters
Для выделения ненасыщенных АГЭ были использованы объединенные фильтраты, полученные после кристаллизации при -15°C. Смесь липидов после удаления ацетона подвергают этерификации.To isolate unsaturated AGE, the combined filtrates obtained after crystallization at -15 ° C were used. The mixture of lipids after removal of acetone is subjected to esterification.
К 100 г полученной смеси прибавляют 300 мл раствора H2SO4 в безводном этаноле до содержания серной кислоты в смеси 1% (об. %). Реакцию проводят при 70°С и перемешивании в течение 1 ч.To 100 g of the resulting mixture was added 300 ml of a solution of H 2 SO 4 in anhydrous ethanol until the sulfuric acid content in the mixture was 1% (vol.%). The reaction is carried out at 70 ° C and stirring for 1 h.
К реакционной смеси (после этерификации жирных кислот) прибавляют 3-х кратный объем воды, интенсивно перемешивают, выдерживают 2 ч и отделяют фракцию липидов.A 3-fold volume of water is added to the reaction mixture (after esterification of fatty acids), intensively mixed, incubated for 2 hours and the lipid fraction is separated.
Далее 6 раз экстрагируют ненасыщенные АГЭ из липидной смеси водным раствором этанола с содержанием воды 50%, при соотношении липиды : экстрагент - 1:5, об./об. В результате, получают субстанцию с содержанием суммарных АГЭ 53,9%. Анализ состава АГЭ показал, что содержание ненасыщенных АГЭ составило 77,5%, основными компонентами которых были изомеры селахилового спирта 18:1 (67,2%).Next, unsaturated AGE is extracted 6 times from the lipid mixture with an aqueous ethanol solution with a water content of 50%, with a lipid: extractant ratio of 1: 5, v / v. As a result, a substance is obtained with a total AGE content of 53.9%. The analysis of the AGE composition showed that the content of unsaturated AGE was 77.5%, the main components of which were 18: 1 isomers of selachyl alcohol (67.2%).
Концентрат ненасыщенных АГЭ представлял собой коричневатую маслянистую жидкость при 20-25°C и твердую маргариноподобную массу при 0-5°С со слабым не выраженным запахом.The unsaturated AGE concentrate was a brownish oily liquid at 20–25 ° C and a solid margarine-like mass at 0–5 ° C with a faint odor.
Выход АГЭ на стадии экстракции составил 43,7% от содержания АГЭ в смеси липидов, взятых на экстракцию.The yield of AGE at the extraction stage was 43.7% of the content of AGE in the lipid mixture taken for extraction.
Общий выход ненасыщенных АГЭ (от исходного содержания в жире) - 43,2%.The total yield of unsaturated AGE (from the initial content in fat) is 43.2%.
ПРИМЕР 2.EXAMPLE 2
Для получения АГЭ было взято 2 кг гидролизованного жира из печени кальмара, полученного в Примере 1.To obtain AGE was taken 2 kg of hydrolyzed fat from squid liver obtained in Example 1.
Выделение ненасыщенных АГЭ было проведено как в Примере 1 со следующими изменениями:The selection of unsaturated AGE was carried out as in Example 1 with the following changes:
- в процессе этерификации содержание серной кислоты в реакционной смеси составляло 1,4%, по объему;- during the esterification, the sulfuric acid content in the reaction mixture was 1.4%, by volume;
- экстракцию этерифицированной липидной смеси для выделения ненасыщенных АГЭ проводили водным этанолом с содержанием воды 40%;- extraction of the esterified lipid mixture to isolate unsaturated AGE was carried out with aqueous ethanol with a water content of 40%;
- при экстракции соотношение липидная смесь : экстрагент составляло 1:7, об./об.;- during extraction, the ratio of lipid mixture: extractant was 1: 7, vol./about .;
- количество экстракций 10.- the number of extractions 10.
Содержание ненасыщенных АГЭ в концентрате - 44,6% по массе.The content of unsaturated AGE in the concentrate is 44.6% by weight.
Выход на стадии - 44,5%.The output at the stage is 44.5%.
Общий выход 44,0%.The total yield of 44.0%.
ПРИМЕР 3.EXAMPLE 3
Часть АPart a
Для получения АГЭ было взято 2 кг гидролизованного жира из печени кальмара, полученного в Примере 1.To obtain AGE was taken 2 kg of hydrolyzed fat from squid liver obtained in Example 1.
Выделение ненасыщенных АГЭ было проведено как в Примере 1 со следующими изменениями:The selection of unsaturated AGE was carried out as in Example 1 with the following changes:
- в процессе этерификации содержание серной кислоты в реакционной смеси составляло 2,0%, по объему;- during the esterification, the sulfuric acid content in the reaction mixture was 2.0%, by volume;
- экстракцию этерифицированной липидной смеси для выделения ненасыщенных АГЭ проводили водным этанолом с содержанием воды 25%;- extraction of the esterified lipid mixture to isolate unsaturated AGE was carried out with aqueous ethanol with a water content of 25%;
- при экстракции соотношение липидная смесь : экстрагент составляло 1:3, об./об.;- during extraction, the ratio of lipid mixture: extractant was 1: 3, vol./about .;
- количество экстракций 3.- number of
Содержание ненасыщенных АГЭ в концентрате - 40,1% по массе.The content of unsaturated AGE in the concentrate is 40.1% by weight.
Выход на стадии 42,0%.The output at the stage of 42.0%.
Общий выход 41,6%.The total yield of 41.6%.
Часть BPart B
Полученный продукт (концентрат) ненасыщенных АГЭ очищают методом колоночной хроматографией.The resulting product (concentrate) of unsaturated AGE is purified by column chromatography.
50 г концентрата ненасыщенных АГЭ загружают на хроматографическую колонку с силикагелем (1 кг, 100 мкм, производитель «Sorbfil») и элюируют системой петролейный эфир-этилацетат 10:1→10:4,5, об./об., с повышением градиента. Контроль осуществляют тонкослойной хроматографией. Фракции, содержащие ненасыщенные АГЭ объединяют и упаривают.50 g of the unsaturated AGE concentrate are loaded onto a chromatographic column with silica gel (1 kg, 100 μm, manufactured by Sorbfil) and eluted with a petroleum ether-ethyl acetate system of 10: 1 → 10: 4.5, vol./vol., With an increase in the gradient. Control is carried out by thin layer chromatography. Fractions containing unsaturated AGE are combined and evaporated.
Содержание ненасыщенных АГЭ в концентрате -96,8% по массе.The content of unsaturated AGE in the concentrate is -96.8% by weight.
Выход на стадии - 91,1%.The output at the stage is 91.1%.
Общий выход 89,5%.The total yield of 89.5%.
Предложенный методический подход позволил получить как насыщенные АГЭ с чистотой 96,0% (Биологически активная добавка к пище «Липидомарин»), так и смесь липидов с содержанием ненасыщенных АГЭ 40,1-96,8%. При этом особенностью является использование простых методов выделения, не требующих сложного оборудования, дорогостоящих реактивов и растворителей. Выделение высокочистых ненасыщенных АГЭ (чистота более 96%) было осуществлено методом колоночной хроматографии.The proposed methodological approach made it possible to obtain both saturated AGE with a purity of 96.0% (Biologically active food supplement “Lipidomarin”) and a mixture of lipids with an unsaturated AGE content of 40.1-96.8%. At the same time, a feature is the use of simple isolation methods that do not require sophisticated equipment, expensive reagents and solvents. High purity unsaturated AGE (purity more than 96%) was isolated by column chromatography.
Для проведения многих биологических и медицинских исследований зачастую требуются высокоочищенные препараты, поэтому нами было осуществлено выделение фракции ненасыщенных АГЭ из полученного экстракта с помощью колоночной хроматографии на силикагеле. Для очистки АГЭ использовали систему петролейный эфир-этилацетат (10:1→10:4,5, об./об.) в возрастающей полярности. Выход на данной стадии составил 91,1% от содержания АГЭ в разделяемой смеси липидов. Преимуществом данного метода является возможность выделять чистые классы липидов.Many biological and medical studies often require highly purified preparations; therefore, we carried out the separation of the unsaturated AGE fraction from the obtained extract using column chromatography on silica gel. For the purification of AGE, a petroleum ether-ethyl acetate system (10: 1 → 10: 4.5, v / v) in increasing polarity was used. The yield at this stage was 91.1% of the AGE content in the shared lipid mixture. The advantage of this method is the ability to isolate pure classes of lipids.
Как видно из вышеприведенных примеров, заявляемый способ позволяет получить целевой продукт хорошего качества с высоким выходом, при этом способ является не только технологически не сложным, но и является экономически выгодным, поскольку максимально использует ценное морское сырье.As can be seen from the above examples, the inventive method allows to obtain the target product of good quality with high yield, while the method is not only technologically sophisticated, but also economically advantageous, since it makes the most of valuable marine raw materials.
Растворы органических растворителей регенерируют, пуская заново в процесс, а не утилизируемый кубовый остаток, остающийся после выпаривания и представляющий собой свободные жирные кислоты, может быть использован в технологии получения концентрата омега-3 полиненасыщенных жирных кислот (Патент РФ №1581737 от 21.05.1993, «Способ получения концентрата этиловых эфиров эйкозапентаеновой и докозагексаеновой кислот», Касьянов С.П., Латышев Н.А., Глушенко Т.В.).Solutions of organic solvents are regenerated by reintroducing into the process, and not the utilized bottoms remaining after evaporation and representing free fatty acids, can be used in the technology for the preparation of omega-3 polyunsaturated fatty acids concentrate (RF Patent No. 1581737 dated 05/21/1993, “ A method of obtaining a concentrate of ethyl esters of eicosapentaenoic and docosahexaenoic acids ”, Kasyanov SP, Latyshev NA, Glushenko TV).
Получаемый по способу препарат расширяет ассортимент отечественных эффективных лекарственных средств для комплексной терапии онкологических больных и пациентов, страдающих нейродегенеративными расстройствами.Obtained by the method of the drug expands the range of domestic effective drugs for the complex treatment of cancer patients and patients suffering from neurodegenerative disorders.
Claims (3)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017112550A RU2649014C1 (en) | 2017-04-13 | 2017-04-13 | Method for obtaining the concentrate of unsaturated alkyl glycidyl ethers from sea lipides |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017112550A RU2649014C1 (en) | 2017-04-13 | 2017-04-13 | Method for obtaining the concentrate of unsaturated alkyl glycidyl ethers from sea lipides |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2649014C1 true RU2649014C1 (en) | 2018-03-29 |
Family
ID=61867200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017112550A RU2649014C1 (en) | 2017-04-13 | 2017-04-13 | Method for obtaining the concentrate of unsaturated alkyl glycidyl ethers from sea lipides |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2649014C1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2698715C1 (en) * | 2019-06-20 | 2019-08-29 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Национальный научный центр морской биологии им. А.В. Жирмунского" Дальневосточного отделения Российской академии наук (ННЦМБ ДВО РАН) | Method of producing unsaturated alkyl-glycerine esters of marine fats |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2415125C1 (en) * | 2009-09-09 | 2011-03-27 | Учреждение Российской академии наук Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук | Method of producing alkyl-glycerine ethers from marine fats |
| RU2425024C2 (en) * | 2005-07-25 | 2011-07-27 | Бди Биодизель Интернациональ Аг | Method of producing carboxylic alkyl esters |
| RU2476211C1 (en) * | 2011-09-16 | 2013-02-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук | Method for producing alkyl-glycerol esters of sea fats |
-
2017
- 2017-04-13 RU RU2017112550A patent/RU2649014C1/en active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2425024C2 (en) * | 2005-07-25 | 2011-07-27 | Бди Биодизель Интернациональ Аг | Method of producing carboxylic alkyl esters |
| RU2415125C1 (en) * | 2009-09-09 | 2011-03-27 | Учреждение Российской академии наук Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук | Method of producing alkyl-glycerine ethers from marine fats |
| RU2476211C1 (en) * | 2011-09-16 | 2013-02-27 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биологии моря им. А.В. Жирмунского Дальневосточного отделения Российской академии наук | Method for producing alkyl-glycerol esters of sea fats |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2698715C1 (en) * | 2019-06-20 | 2019-08-29 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки "Национальный научный центр морской биологии им. А.В. Жирмунского" Дальневосточного отделения Российской академии наук (ННЦМБ ДВО РАН) | Method of producing unsaturated alkyl-glycerine esters of marine fats |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU2016262315B2 (en) | Very long chain polyunsaturated fatty acids from natural oils | |
| NO157302B (en) | PROCEDURE FOR THE PREPARATION OF A FISH OIL CONCENTRATE. | |
| KR20020042432A (en) | Method for isolating high-purified unsaturated fatty acids using crystallization | |
| AU2019392175B2 (en) | Very long chain fatty acid compositions | |
| JPH0225447A (en) | Production of highly unsaturated fatty acids | |
| US20210139527A1 (en) | Improved process for extraction of cholesterol from fish oil waste residue | |
| RU2649014C1 (en) | Method for obtaining the concentrate of unsaturated alkyl glycidyl ethers from sea lipides | |
| Gunstone et al. | Improved procedures for the isolation of pure oleic, linoleic, and linolenic acids or their methyl esters from natural sources | |
| RU2415125C1 (en) | Method of producing alkyl-glycerine ethers from marine fats | |
| US10190075B2 (en) | Enrichment of palmitoleic acid and palmitoleic acid derivatives by dry and solvent-aided winterization | |
| US5077202A (en) | Process for producing a glycolipid having a high eicosapentaenoic acid content | |
| RU2698715C1 (en) | Method of producing unsaturated alkyl-glycerine esters of marine fats | |
| RU2698720C1 (en) | Method of producing docosahexaenoic acid | |
| RU2642294C1 (en) | Method for obtaining concentrate of unsaturated alkyl-glycerine ethers from sea hydrobionts | |
| RU2398590C1 (en) | Method of integrated sand dollar processing | |
| RU2476211C1 (en) | Method for producing alkyl-glycerol esters of sea fats | |
| WO2011018096A1 (en) | Phytanic acid fractionation process, fatty acid products and use thereof | |
| RU2078130C1 (en) | Method for production of concentrate of ethyl esters of polyunsaturated higher fatty acids | |
| EP0587787A1 (en) | Brain lipid extracts and method for the production and use thereof | |
| JPS62120340A (en) | Fractionation of high unsaturated fatty acid | |
| JP2649416B2 (en) | How to make cholesterol | |
| WO2022069923A1 (en) | Method for obtaining cholesterol present in fish oil | |
| JPH06321970A (en) | Collection of phospholipid containing docosahexaenoic acid | |
| JP2549399B2 (en) | Method for purifying highly unsaturated fatty acid triglyceride and ester | |
| JPS6293234A (en) | Purified fish oil and its production |