RU2581918C2 - Гемостатический препарат, содержащий экстракт golden moss - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к гемостатическому препарату для местного применения. Полужидкий гемостатический препарат для местного применения, содержащий: экстракт корневища Golden Moss, который является экстрактом на основе этанола или является водным экстрактом, желатин и физиологический раствор. Способ осуществления гемостатического лечения места кровотечения, включающий стадии приготовления полужидкого гемостатического препарата и нанесения его на место кровотечения. Способ изготовления полужидкого гемостатического препарата включающий: кипячение корневища Golden Moss в растворителе, которым является этанол или вода, удаляя по существу весь растворитель путем испарения в условиях вакуума для образования экстракта Golden Moss, и смешивание экстракта Golden Moss с физиологическим раствором и порошком желатина. Вышеописанный гемостатический препарат является эффективным. 3 н. и 11 з.п. ф-лы, 2 ил., 1 табл., 4 пр.

Description

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение относится, как правило, к препаратам и приспособлениям, стимулирующим гемостаз, а конкретнее к использованию экстракта традиционного китайского лекарственного продукта растительного происхождения и приспособлений, применяемых для нанесения таких экстрагированных растительных препаратов к кровоточащим ранам.

ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Кровь - это жидкая ткань, содержащая эритроциты, лейкоциты, форменные элементы крови и тромбоциты, растворенные в жидкой фазе. Жидкой фазой является плазма, которая содержит кислоты, липиды, растворенные электролиты и протеины. Особым протеином, пребывающим во взвешенном состоянии в жидкой фазе, является фибриноген. При возникновении кровотечения фибриноген вступает в реакцию с водой и тромбином (энзим) и образует фибрин - вещество, нерастворимое в крови и образующее сгустки при полимеризации.

При самых различных условиях животные, в том числе люди, могут страдать кровотечениями, связанными с ранами или хирургическими процедурами. В некоторых ситуациях кровотечение сравнительно слабое и нормальных функций свертывания крови, дополненных применением простых приемов первой помощи, оказывается достаточно. В иных ситуациях может иметь место существенное кровотечение. В таких ситуациях обычно требуется специализированное оборудование и материалы, а также обученный персонал для оказания необходимой помощи.

Для решения упомянутых выше проблем были разработаны материалы для контроля чрезмерного кровотечения.

Ранее использовались известные до настоящего времени материалы, такие как желатин, коллаген, окисленная целлюлоза, тромбин, фибриноген и другие материалы, но каждая из этих композиций имеет свои ограничения к применению. Например, одним из видов коагулирующих материалов, используемых ранее в данной области, являются протеины или энзимы, произведенные на основе крови, в том числе фибриноген и/или тромбин, являющиеся дорогими, требующими специальных условий хранения и интенсивной очистки для предотвращения возможности заражения инфекционными заболеваниями, передающимися через кровь.

Композиции, основанные на традиционной китайской медицине (ТКМ), обычно являются растительными препаратами или препаратами растительного происхождения, которые использовались столетиями и во многих случаях основываются на традиционном применении и необязательно подтверждаются современными контролируемыми исследованиями.

Традиционные китайские гемостатические лекарственные препараты являются препаратами традиционной китайской медицины, которые применяются для остановки внутренних или наружных кровотечений. Некоторые из этих лекарственных препаратов претендовали дополнительно на воздействие по «остужению крови и остановке кровотечений за счет вяжущих свойств, удаления обтураций и разогрева каналов» и предлагаются для использования при кровотечениях из любых частей тела, таких как гемоптизис, кровавая рвота, кровотечение из носа, истинная гематурия, кровянистый стул, маточное кровотечение и кровотечение матки, гемморагическая сыпь и кровотечение травматического происхождения. Примерами китайских растений, которые продемонстрировали гемостатические свойства, являются Daji Radix Cirsii Japonici, Xiaoji Herba Cephalanoploris и Heuihua Flos Sophorae.

Ряд препаратов ТКМ изготавливаются способами долговременного настаивания растительных материалов ТКМ на спирту при комнатной температуре. Такие настойки обычно приготавливают при комнатной температуре и используются как растворы этанола.

Golden Moss считается лекарственным препаратом традиционной китайской медицины (ТКМ) растительного происхождения, используемым для лечения ревматизма, люмбаго, пояснично-крестцового радикулита и дизурии. Cibotium barometz (также называемый Golden Moss, Fern Lamb of Tartary или Gou-Ji) традиционно использовался как противовоспалительное и обезболивающее средство [К. Ву& Кс.-У. Йанг, Дж. Этнофарм 2009, 125, 417-422]. Земляные желтые волоски его корневища использовались для изготовления примочек на раны для остановки кровотечения за счет его широкой поверхности соприкосновения. Но, тем не менее, не существует учений, в которых говорилось бы о том, что Cibotium barometz может иметь как гемостатическое, так и антимикробное действие.

Опубликованная заявка №CN 101317916 А описывает лекарственный препарат для лечения маточного кровотечения, который содержит компоненты в таких весовых пропорциях: от 3 до 7 частей Cibotium barometz, от 7 до 12 частей дудника, от 5 до 8 частей корня шлемника байкальского, от 8 до 12 частей препарированного корневища rehmannia, от 4 до 8 частей мякоти плода лонгана, от 4 до 8 частей обожженного человеческого волоса, от 4 до 7 частей корневища хохлатки, от 6 до 10 частей корня notopterygium и от 7 до 12 частей корня белого пиона. Способ изготовления состоит в вываривании сырьевых материалов и последующем размалывании их для наполнения медицинских пакетиков. Однако этот препарат помещают в жидкость для перорального приема, а не в качестве местного гемастатического лечения.

ИЗЛОЖЕНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

Настоящее изобретение направлено на гемостатический препарат, преимущественно используемый для местного применения, содержащий экстракт корневища Golden Moss, желатиновый компонент и физиологический раствор. Желатиновый компонент преимущественно является абсорбирующей гемостатической порошковой матрицей, а точнее матрицей, в которой желатин и экстракт могут по существу однородно смешиваться в комбинации с физиологическим раствором, как в жидкой фазе.

Экстракт корневища Golden Moss является в одном из вариантов осуществления изобретения гемостатическим продуктом этилового экстрагирования. Гемостатический препарат может содержать от примерно 1% до примерно 2,5% гемостатически действующего этилового экстракта Golden Moss.

Экстракт корневища Golden Moss в другом варианте осуществления изобретения является гемостатическим продуктом водного экстрагирования. Гемостатический препарат может содержать от примерно 0,25% до примерно 2,5% гемостатически действующего водного экстракта Golden Moss.

Гемостатический препарат дополнительно может содержать эффективное количество одной или более добавок или композиций, выбранных из группы антимикробных средств, сурфактантов, антиоксидантов, увлажнителей, смачивающих реагентов, лубрикантов, загустителей, разбавителей, веществ, стабилизирующих действие облучения, например поглотителей свободных радикалов, смягчителей и стабилизаторов, а более конкретно, содержащий вытяжку, повышающую количество глицерина, а преимущественно, препарат, в котором присутствует глицерин в количестве от примерно 1% до примерно 20% в весовом соотношении жидкой фазы всего гемостатического препарата.

К тому же настоящее изобретение относится к способу проведения гемостатического лечения кровоточащих мест, включающему стадии изготовления гемостатического препарата, описанного выше, и к способу применения гемостатического препарата в местах кровотечения.

К тому же настоящее изобретение относится к способу производства полужидкого гемостатического препарата, включающему стадии вываривания корневища Golden Moss в растворе на протяжении по меньшей мере 48 часов, удаления по существу всего раствора путем испарения в условиях вакуума для получения экстракта очитка едкого и смешивания продукта гемостатического экстракта очитка едкого с физиологическим раствором и порошком желатина. Растворителем может быть низкомолекулярный спирт, такой как этанол или водный растворитель. Порошок желатина может присутствовать в форме абсорбируемой гемостатической порошковой матрицы, преимущественно, в которой желатин и гемостатический экстракт по существу однородно смешиваются в комбинации с физиологическим раствором, как в жидкой фазе. Гемостатический экстракт преимущественно по существу не содержит этиловый спирт.

Краткое описание чертежей

На Фиг. 1 показаны результаты клинического изучения гемостатических свойств А с временем до гемостаза в минутах, изображенным для нескольких образцов, содержащих гемостатические препараты и контролирующие вещества.

На Фиг. 2 показаны результаты клинического изучения гемостатических свойств В с временем до гемостаза в минутах, изображенным для нескольких образцов, содержащих гемостатические препараты и контролирующие вещества.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение направлено на получение кровоостанавливающего средства, изготавливаемого из экстракта продукта ТКМ растительного происхождения, преимущественно из экстракта растения, известного как Golden Moss, и абсорбируемой желатиновой матрицы, имеющей гемостатические и антимикробные свойства.

Изобретатели обнаружили, что в одном варианте осуществления изобретения этанольный экстракт Golden Moss компонента традиционной китайской медицины (ТКМ), также известного в традиционной китайской медицине как Cibotium Barometz, также называемого папоротниковым баранцем или Gou-Ji, способен в сочетании с желатиновой пастой, такой как SURGIFLO™, образовывать гемостатический материал высокой эффективности, сравнимой с комбинацией человеческого тромбина и SURGIFLO™.

Предпочтительно то, что открытый гемостатический препарат имеет антимикробные свойства. Предпочтительно, что открытый гемостатический препарат имеет повышенную стабильность и является эффективным с точки зрения затрат по сравнению с привычными гемостатическими препаратами, изготовленными на основе крови.

Изготовление экстракта ОЕ. Сухие земляные корневища Cibotium barometz (Цзиньчжоу, Китай) могут быть подвергнуты процессу экстрагирования с применением либо деионизированной воды, либо, предпочтительнее, 95% раствор этилового спирта, который содержится в условиях рециркуляции на протяжении по меньшей мере 48 часов. В целях данного применения корневищем является характерно горизонтальный ствол растения Cibotium barometz, который обычно находится под землей, часто выводящий корни и стрелки из его узлов. Cibotium barometz, который также часто называют золотым куриным папоротником (golden chicken fern), шерстяным папоротником (woolly fern), является видом древовидного папоротника семейства папоротников Dicksoniaceae. С.barometz естественно произрастает в некоторых районах Китая и в западной части полуострова Малакка.

В одном из способов стеклянная колба с сухим земляным корневищем очитка едкого (D-GM) помещается на горячую водяную баню, температура которой поддерживается в районе 85-100°C, предпочтительнее 100°C. Охлаждающая вода циркулирует в рубашке охлаждения рециркулирующей трубки при температуре около 4°C, таким образом, растворитель конденсируется и возвращается в стеклянную колбу традиционным образом.

После выполнения экстрагирования растворяющий экстракт материал лиофилизируется в ходе стандартного процесса лиофилизации, известного в данной области технологии, лиофилизированный продукт обозначается ниже как GM-W. Экстракт может быть концентрирован при повышенной температуре, выше 50°C, предпочтительно около 60°C и при пониженном давлении для удаления по существу всего растворителя, будь то этиловый спирт или вода, и может быть получен экстракт с полезной эффективностью 6,8% (от веса исходных сухих земляных корневищ), продукт, далее обозначенный как TCM-GM-E. Для проведения лабораторных испытаний и испытаний на живых организмах экстракты были приготовлены в рабочем разведении 10% и 1%. Для изготовления однородных растворов можно использовать ультразвуковой соникатор.

Описание носителей желатина

Желатиновым материалом в настоящем изобретении предпочтительно является жидкостно проницаемая нерастворимая в воде желатиновая губка или паста. Желатин, являющийся денатурируемой формой протеина коллагена, используется в различных повязках на рану. Поскольку желатиновые гели имеют довольно низкую температуру плавления, они не очень стабильны при температуре тела. Таким образом, обязательно нужно стабилизировать эти гели, устанавливая поперечные сшивки между цепочками протеинов. На практике это достигается обычно обработкой желатина глутаральдегидом или формальдегидом. Таким образом, сшитый желатин может быть сформирован в виде сухих губок, которые используются для провоцирования гемостаза в кровоточащих ранах, или переведен в форму пылевидного аэрозоля.

Используемый в настоящей заявке термин «гель» используется для обозначения разбухшей гидратированной полимерной сети, существенно сплошной по объему. Протеиновый гель состоит из по сути сплошной сети соединенных молекул протеина и жидкого (обычно водного) растворителя, который заполняет объем внутри протеиновой матрицы. Протеиновая матрица оказывает сильное вязкое сопротивление на молекулы растворителя, предотвращая их свободное течение. Составляющие гелевую сеть молекулы могут быть связаны ионными, гидрофобными, металлическими или ковалентными связями. Ковалентная связь является наиболее термически стабильной из перечисленных связей.

В одном варианте осуществления изобретения стерильные композиции настоящего изобретения могут содержать твердые, пористые или непористые частицы биосовместимого полимера, подходящего для использования в гемостазе, биосовместимую жидкость и описанный выше гемостатический экстракт в качестве его трех основных составляющих. Частицы, жидкость и гемостатический экстракт соединяются и смешиваются при условиях, позволяющих получить по существу однородную композицию, содержащую сплошную жидкую фазу, в состав которой входит гемостатический экстракт и в которой равномерно распределены твердые полимерные частицы. Количество и средний диаметр частиц, содержащихся в композиции, и относительное количество твердых частиц, жидкости и гемостатического экстракта эффективно для того, чтобы композиция имела гемостатические и физические свойства, как описано в настоящей заявке далее.

Используемые в настоящей заявке термины «сплошной» и «несплошной» используются в обычном значении слов в контексте стандартной номенклатуры для описания и определения дисперсии.

Используемый в настоящей заявке термин «по существу однородный» обозначает, что физическое состояние композиции или пасты, в которой в жидкой фазе равномерно распределены твердые частицы, таково, что соотношение твердые частицы: жидкость и плотность любого участка поперечного сечения композиции или пасты по существу одинаковы.

Используемый в настоящей заявке термин «стерильный» означает по существу свободный от живых микробов и/или микроорганизмов и, как определено далее и описано в правительственных стандартах, относится к композициям и медицинским приборам, описанным и заявленным в настоящей заявке.

Используемые в настоящей заявке термины «гемостатический» или «гемостатические свойства» означают способность останавливать или уменьшать кровотечение, как это было бы понято специалистами в области гемостаза, как далее показано на специфических примерах.

Для изготовления твердых частиц, применяемых в композициях настоящего изобретения, могут использоваться различные биосовместимые природные, полусинтетические или синтетические полимеры. Выбранный полимер должен быть по существу нерастворимым в жидкости, выбранной для определенной композиции. Предпочтительно использовать нерастворимые в воде биодеградирующие полимеры, которые обеспечивают механическое, химическое и/или биологическое гемостатическое воздействие. Полимеры, которые могут быть применены, включают, без ограничений, протеины и полисахариды. Используемые полисахариды включают оксидированную целлюлозу, хитозан, хитин, алгинат, оксидированный альгинат и оксидированный крахмал. Биосовместимый полимер, используемый для изготовления частиц, предпочтительно является сшитым или денатурированным протеином, таким как желатин, коллаген, фибриноген или фибриноктин. Предпочтительный порошок желатина является частично сшитым порошком желатина, изготовленным путем перемалывания желатиновой губки в частицы, средний диаметр которых составляет приблизительно 40-1200 микрон, предпочтительно 100-1000 микрон, и определяется лазерной дифракцией.

Стерильные композиции настоящего изобретения предпочтительно содержат сплошную жидкую фазу, в которой распределен гемостатический экстракт и твердые частицы на основе желатина. В зависимости от определенного медицинского прибора и его применения жидкость может быть на водной или неводной основе. Предпочтительно, чтобы жидкая фаза была водной. Водные жидкости могут содержать, без ограничений, биосовместистимые водные растворы, такие как раствор хлорида кальция или натрия хлорида. Более предпочтительно использовать жидкую фазу, содержащую раствор натрия хлорида. Жидкая фаза и фаза твердых пылевидных частиц присутствуют в относительных количествах, необходимых для того, чтобы обеспечить композиции, например пасте или кашице, наличие гемостатических свойств. В некоторых вариантах осуществления изобретения массовое соотношение твердых частиц к жидкости, как правило, составляет от около 1:1 до около 1:2 или от около 1:3 до около 1:8 или даже до около 1:5.

Композиции настоящего изобретения, описанные в данной заявке, являются стерильными, так как подвергаются воздействию облучения уровня, например, ионизирующего излучения. Такое излучение может включать электронный пучок или гамма-лучи. Уровень излучения и условия стерилизации, в том числе время, в течение которого композиции подвергаются воздействию облучения, таковы, что обеспечивают стерильность композиций, как описано в настоящей заявке. Обладая преимуществами этого раскрытия, специалист в данной области технологий сможет с готовностью определить необходимый уровень облучения для обеспечения стерильности композиций.

Гемостатические композиции дополнительно могут содержать эффективные количества одной или более добавок или композиций, в том числе, но не ограничиваясь, антимикробные средства, сурфактанты, антиоксиданты, увлажнители, смачивающие реагенты, лубриканты, загустители, разбавители, вещества, стабилизирующие действие облучения, например поглотители свободных радикалов, смягчители и стабилизаторы. Например, для улучшения экструдируемости или инъективности композиции может добавляться глицерин. При применении глицерина он может присутствовать в композиции в количестве от примерно 0% до примерно 20% веса от веса жидкой фазы. Предпочтительно, чтобы композиция содержала от примерно 1% до примерно 10% веса глицерина композиции от веса жидкой фазы. Предпочтительнее, чтобы композиция содержала от примерно 1% до примерно 5% веса глицерина от веса жидкой фазы.

В дополнение для улучшения свойств композиций могут использоваться четвертичные амины. Например, бензалкония хлорид, полибрен или Onamer М могут использоваться в содержании до 1% веса композиции от веса жидкой фазы. Предпочтительно, чтобы композиция содержала от примерно 0,001% до примерно 0,01% веса бензалкония хлорида от веса жидкой фазы. Более предпочтительно, чтобы композиция содержала от примерно 0,002% до примерно 0,006% веса бензалкония хлорида от веса жидкой фазы. Считается, что четвертичные амины могут выполнять несколько функций, выступая в роли антимикробного средства, вспенивающего препарата, вещества, поглощающего свободные радикалы и в качестве нейтрализатора гепарина.

К тому же, такие гемостатические препараты могут содержать нейтрализаторы гепарина, дополнительные прокоагуллянты или гемостатические препараты, такие как фибриноген, фибрин, фактор Ха или фактор Vila. Под термином «эффективное количество» в настоящей заявке понимается количество, необходимое для обеспечения тех свойств композиции, для которых в него добавляется добавка. Эффективное количество также ограничивается максимальным количеством, которое может быть добавлено в композицию, не вызывая пагубных биологических эффектов.

Способы включения экстракта в носители желатина

В одном из вариантов осуществления для изготовления композиций настоящего изобретения приготавливается по существу однородная паста путем смешивания частиц с жидкостью для образования однородной пасты. Жидкость содержит материал гемостатического экстракта и может содержать эффективные количества других добавок, растворенных в ней, как описано выше. Смешивание может производиться путем экструдирования или смешиванием в замкнутом пространстве при условиях, обеспечивающих однородную дисперсию твердых частиц в жидкой фазе.

С другой стороны, для изготовления композиций настоящего изобретения можно использовать мешалку, например планетарную мешалку. Жидкость, содержащая материал гемастатического экстракта, добавляется в мешалку. Жидкость может содержать эффективное количество добавок, растворенных в ней перед добавлением в раствор частиц. Например, можно приготовить физиологический раствор, содержащий материал гемастатического экстракта, глицерин и бензалкониум хлорида, и добавить его в мешалку. Твердые частицы добавляются в мешалку через некоторое время; мешалка продолжает смешивание до тех пор, пока не будут добавлены все ингредиенты. Смешивание продолжается до тех пор, пока не будет образована по существу однородная композиция, содержащая твердые частицы, равномерно распределенные в сплошной жидкой фазе.

В другом варианте осуществления гемостатический экстракт применяется в форме спрея или прессовки на основную поверхность практически сухой губки.

Гемостатическая композиция, изготовленная способом, описанным выше, может подвергаться стерилизации для обеспечения стерильности композиций, содержащих гемостатический экстракт. В ряде вариантов осуществления композиции подаются к медицинским приборам, как описано выше, а прибор, содержащий гемостатическую композицию, стерилизуется предпочтительно с помощью ионизирующего облучения. Предпочтительнее проводить стерилизацию гамма-лучами, как показано в примерах настоящей заявки.

Медицинские приборы, в которых могут применяться гемостатические композиции настоящего изобретения, включают любые приборы, используемые в настоящее время для подачи текучей или инъективной гемостатической пасты или кашицы к месту кровотечения или к ране, требующей гемостаз. Можно вручную воспользоваться губкой или применить другие средства традиционным способом. Место кровотечения, требующее гемостаз, может быть результатом раны или хирургической процедуры. Примеры приборов или применений включают помпы, такие как помпы Becton Dickinson или помпы с люэровским переходником Monoject. Другие приборы подробно описаны в патенте США №6045570, содержание которых в качестве справки включено в их текст.

Хотя нижеследующие примеры демонстрируют некоторые варианты реализации настоящего изобретения, их следует интерпретировать не как ограничение области изобретения, а как дополнительное средство для полного описания изобретения.

ПРИМЕР 1. Лабораторное исследование свертываемости крови. Изобретатели провели лабораторное исследование свертываемости крови, в котором по 200 мл каждого испытываемого раствора было налито в чистые стеклянные чаши с 200 мл свежей свиной крови. Испытываемые образцы включили:

Обычный раствор натрия хлорида

10% этанольный экстракт TCM-GM-E,

10% водный экстракт TCM-GM-W,

1% этанольный экстракт TCM-GM-E,

1% водный экстракт TCM-GM-W.

После того как чаши простояли при комнатной температуре в течение 4 минут, их перевернули. В сравнении с другими испытываемыми образцами в чаше, которая содержала 10% этанольный экстракт ТСМ, наблюдался значительный кровяной сгусток. Таким образом, 10% этанольный экстракт TCM-GM-E показал хорошую эффективность в лабораторном качественном исследовании.

ПРИМЕР 2. Исследование гемостатической эффективности препарата на живых организмах А. Было проведено исследование гемостатической активности с использованием модели биопсии селезенки свиньи с отверстием раны шириной 6 мм × глубиной 3 мм, сделанным на селезенке, испытываемый образец наносился на свежеобразованную рану, после чего следовало воздействие обтурирующим цифровым давлением (тампонада). Изначально давление применялось в течение 30 секунд, время измерялось с помощью электронного таймера. После 30-секундной тампонады действие цифрового давления прекращалось; марлевая прокладка на образце была незамедлительно удалена. Была проведена оценка гемостаза в течение 30-секундного периода. Если свободноструйное кровотечение не наблюдалось в течение 30 секунд, записывалось время до гемостаза в формате минут и секунд и испытание для такого образца заканчивалось. Если замечали свободноструйное кровотечение, то давление и марля применялись повторно в течение дополнительной 30 секундной тампонады и периодов наблюдения до тех пор, пока ни достигался гемостаз, или до тех пор, пока период проведения испытания ни достигал десяти минут. Гемостаз определялся по прекращению свободноструйного кровотечения через менее чем десять минут.

Обращаясь к Фиг. 1, отметим, что время до гемостазиса в минутах отмечено для нескольких испытываемых образцов, содержащих гемостатические препараты и контролирующие вещества. Испытываемые образцы включали смеси на основе 6 мл желатиновой пасты SURGIFLO® (SFL) с

2 мл обычного раствора натрия хлорида,

2 мл 1-10% (этанольного, водного) экстракта TCM-GM в обычном физиологическом растворе,

2 мл раствора EVITHROM™, содержащего в основном тромбин человека (полная композиция Evithrom® содержит тромбин человека (800-1200 МЕ/мл), хлорид кальция, альбумин человека, манитол, ацетат натрия и воду для инъекций).

При проведении исследования SURGIFLO® была тщательно смешана с гемостатическим материалом таким образом: 1. В пустой шприц набрали 2 мл раствора гемостатического материала; 2. Смешали 2 компонента путем подключения люэровского переходника к предварительно наполненному шприцу и присоединили к другому концу люэровского переходника шприц, содержащий раствор гемостатического материала, затем раствор гемостатического материала был впрыснут в предварительно наполненную матрицу; 3. Компоненты продолжали перемешиваться (путем проталкивания комбинированного состава туда-сюда до тех пор, пока консистенция не стала однородной), затем композицию наложили на рану и провели измерения, как указано выше.

Как видно из Фиг. 1, SFL/10% этанольного экстракта TCM-GM-E продемонстрировал такую же эффективность, что и SFL/EVITHROM в исследовании на живом организме со временем до гемостаза менее 1 минуты.

Результаты, полученные на обычном растворе натрия хлорида, используемого в качестве контрольного образца, показали время до гемостаза 4,8 минут. SFL/1% TCM-GM-E так же, как и SFL/1% TCM-GM-W и SFL/10% TCM-GM-W, показали время до гемостаза порядка 2.3-2.6 минут.

ПРИМЕР 3. Исследование гемостатической эффективности препарата на живых организмах В. Было проведено исследование гемостатической активности с использованием модели биопсии селезенки свиньи с параметрами испытания, подобными параметрам, описанным в Примере 4 настоящей заявки, с отверстием раны шириной 6 мм х глубиной 3 мм и временем тампонады: 30 сек; временем наблюдения: 30 сек.

Обращаясь к Фиг. 2, отметим, что время до гемостазиса в минутах отмечено для нескольких испытываемых образцов, содержащих гемостатические препараты и контролирующие вещества. Испытываемые образцы включали:

Смеси на основе 6 мл желатиновой пасты SURGIFLO® (SFL) с

2 мл обычного раствора натрия хлорида,

2 мл 1-10% (этанольного, водного) экстракта TCM-GM в обычном физиологическом растворе,

2 мл раствора EVITHROM™, содержащего в основном тромбин человека (полная композиция Evithrom® содержит тромбин человека (800-1200 МЕ/мл), хлорид кальция, альбумин человека, манитол, ацетат натрия и воду для инъекций),

2 мл 1-10% YNBY (порошок Yunnan Baiyao), известного препарата ТКМ, специально разработанного мануалами ТКМ для использования в качестве кровоостанавливающего средства.

Исследуемые образцы также включали в себя смеси на основе порошка оксидизированной регенерированной целлюлозы, известного и широко применяемого кровоостанавливающего средства, этот порошок изготавливают измельчением ткани оксидизированной регенерированной целлюлозы в шаровой мельнице.

Исследуемые образцы на основе оксидированной регенерированной целлюлозы были изготовлены смешиванием

0,983 г порошка оксидированной регенерированной целлюлозы с 2 мл обычного раствора натрия хлорида,

2 мл 10% (этанольного) экстракта TCM-GM в обычном физиологическом растворе,

2 мл 10% YNBY.

При проведении исследования SURGIFLO® или порошок оксидированной регенерированной целлюлозы тщательно смешивался с гемостатическим материалом и наносился на рану, затем проводились измерения, как указано выше

Как видно из данных, представленных на Фиг. 2, композиции на основе оксидированной регенерированной целлюлозы продемонстрировали более длительное время до гемостаза, в диапазоне от 8 до 10 минут. Результаты исследования SFL с использованием обычного раствора натрия хлорида в качестве контрольного образца показали время до гемостаза в 4,5 минуты

SFL/4%-10% TCM-GM-E продемонстрировал время до гемостаза порядка 2.8-3.4 минут, при этом для SFL/6%-10% TCM-GM-E было особенно коротким и составило 2,8-3,1 минут, что в общем сравнимо с данными, полученными для EVITHROM, содержащего тромбин человека, для которого время до гемостаза составило 2,6 минут.

Исследуемые образцы, содержащие YNBY и низкие концентрации 1-2% TCM-GM-E, продемонстрировали длительное время до гемостаза в диапазоне от 5,2 до 6,7 минут.

Основываясь на результатах, представленных в Примерах 4 и 5, смеси на основе желатиновой пасты SURGIFLO® с 2 мл 6%-10% TCM-GM-E в растворе натрия хлорида продемонстрировали время до гемостаза, в общем сравнимое со смесями SURGIFLO® с растворами тромбина человека и значительно лучшие результаты, чем жидкости на основе раствора натрия хлорида.

Основываясь на результатах, представленных в Примере 4, смеси желатина на основе пасты SURGIFLO® с 2 мл 1-10% TCM-GM-W в растворе натрия хлорида или с 2 мл 1% TCM-GM-E в растворе натрия хлорида продемонстрировали время до гемостаза, в общем лучшее, чем смеси SURGIFLO® с раствором натрия хлорида.

ПРИМЕР 4. Обращаясь к Таблице 1, отметим, что проведено лабораторное исследование антимикробной эффективности препарата с бактерией, находящейся в TCM-GM-E, содержащем среду TSB (триптический соевый бульон) в содержании 6 особей CFU/ml посевного материала. Эффективность оценивалась путем подсчета выживших бактерий после 24 часов инкубационного периода при 37°C. *Контрольным образцом был раствор этанола 450 м.д. в среде TSB. Изобретатели обнаружили, как и предполагалось, 3-5 мертвых особей на уровне 450 м.д. для S. aureus и Е. coli, что означало, что эффективность достигнута на уровне приблизительно 450 м.д. как для G+, так и для G-бактерии.

Claims (14)

1. Полужидкий гемостатический препарат для местного применения, содержащий:
экстракт корневища Golden Moss, который является экстрактом на основе этанола или является водным экстрактом,
желатин
и физиологический раствор,
где препарат содержит от 1% до 2,5% этанольного экстракта Golden Moss или от 0,25% до 2,5% водного экстракта Golden Moss.

2. Гемостатический препарат по п. 1, в котором желатин содержит абсорбируемую гемостатическую порошковую матрицу.

3. Гемостатический препарат по п. 2, в котором желатин и экстракт по существу однородно смешаны в комбинации с физиологическим раствором в качестве жидкой фазы.

4. Гемостатический препарат по п. 1, содержащий от 1% до 2,5% этанольного экстракта Golden Moss.

5. Гемостатический препарат по п. 1, содержащий от 0,25% до 2,5% водного экстракта Golden Moss.

6. Гемостатический препарат по п. 1, дополнительно содержащий эффективные количества одной или более добавок или соединений, выбранных из группы, состоящей из антимикробных средств, сурфактантов, антиоксидантов, увлажнителей, смачивающих реагентов, лубрикантов, загустителей, разбавителей, веществ, стабилизирующих действие облучения, например поглотителей свободных радикалов, смягчителей и стабилизаторов.

7. Гемостатический препарат по п. 3, дополнительно содержащий глицерин в количестве от 1% до 20% от веса жидкой фазы.

8. Гемостатический препарат по п. 7, дополнительно содержащий вытяжку, повышающую количество глицерина.

9. Способ осуществления гемостатического лечения места кровотечения, включающий стадии
приготовления полужидкого гемостатического препарата по п. 1, и
нанесения гемостатического препарата на место кровотечения.

10. Способ изготовления полужидкого гемостатического препарата по п. 1, включающий:
кипячение корневища Golden Moss в растворителе, которым является этанол или вода в течение по меньшей мере 1 часа, предпочтительно в течение по меньшей мере 48 часов, удаляя по существу весь растворитель путем испарения в условиях вакуума для образования экстракта Golden Moss, и
смешивание экстракта Golden Moss с физиологическим раствором и порошком желатина.

11. Способ по п. 10, в котором порошок желатина содержит абсорбируемую гемостатическую порошковую матрицу.

12. Способ по п. 11, в котором желатин и экстракт по существу однородно смешиваются в комбинации с физиологическим раствором в качестве жидкой фазы.

13. Способ по п. 12, в котором экстракт Golden Moss по существу не содержит этанола.

14. Способ по п. 13, в котором концентрация экстракта Golden Moss в полужидком гемостатическом препарате составляет от 0,25% до 2,5% веса.

Images