RU2292898C1 - Противоопухолевый липосомный препарат направленного действия - Google Patents
Противоопухолевый липосомный препарат направленного действия Download PDFInfo
- Publication number
- RU2292898C1 RU2292898C1 RU2005124455/15A RU2005124455A RU2292898C1 RU 2292898 C1 RU2292898 C1 RU 2292898C1 RU 2005124455/15 A RU2005124455/15 A RU 2005124455/15A RU 2005124455 A RU2005124455 A RU 2005124455A RU 2292898 C1 RU2292898 C1 RU 2292898C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- growth factors
- preparation
- antitumor
- flavolignans
- tumor
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической промышленности и используется в качестве противоопухолевого средства. Противоопухолевый липосомный препарат на основе смеси флаволигнанов или их экстрактов из плодов расторопши пятнистой, при этом препарат выполнен в липосомной форме с размерами частиц 100-500 нм и дополнительно содержит векторный компонент пептидной природы, ковалентно присоединенный к липидам оболочки липосомы, причем в качестве векторного компонента пептидной природы используют белок, выбранный из группы представителей семейств факторов роста эпителия, трансформирующих факторов роста, онкофетальных белков, факторов роста эндотелия и факторов роста фибробластов или группы активных пептидных фрагментов перечисленных белков. Вышеописанный препарат обладает повышенным противоопухолевым действием, увеличивается скорость доставки препарата к опухолевой клетке-мишени. 1 табл.
Description
Предлагаемое изобретение относится к области химии природных соединений, биотехнологии, фармакологии и медицине и может быть использовано для терапии злокачественных новообразований.
Изобретение касается противоопухолевого липосомного препарата направленного действия, содержащего в качестве активного вещества смесь флаволигнанов (силибинин, силидианин и силикристин) или их экстрактов из плодов расторопши пятнистой (Silybum marianum (L.) Gaerth) и обеспечивающего направленную доставку активного вещества к опухолевым клеткам-мишеням.
Известно использование суммы флаволигнанов из плодов расторопши пятнистой в качестве гепатопротекторных препаратов, таких как карсил, легален, силибор (М.Д.Машковский. Лекарственные средства, М. 1993 г, т.1).
Хотя флавоноиды известны довольно давно в качестве веществ, обладающих гепатопротекторными свойствами, в последние годы накапливается все больше экспериментальных данных, свидетельствующих об их выраженном противоопухолевом действии (Larocca, Br.J. Hematology 75, 489, 1990), (Scambia, Br.J. Gynecologic Oncology 45, 13, 1992). Доступность, отсутствие токсичности и высокая противоопухолевая активность делают флавоноиды весьма привлекательными с точки зрения создания лекарственных препаратов. Применение флавоноидов в виде липосомных форм может значительно увеличить эффективность действия препаратов за счет снижения скорости их выведения из кровотока и адресной доставки к местам локализации опухолей.
Известно, что флаволигнаны, как правило, нерастворимы или минимально растворимы в воде, вследствие чего скорость высвобождения этих соединений и, следовательно, также их биологическая доступность и их всасываемость в организме человека неудовлетворительны.
Делались попытки добиться молекулярного изменения флаволигнанов путем обработки или взаимодействия их с подходящими химическими агентами и перевести их таким образом в производные с улучшенной водорастворимостью и повышенной скоростью высвобождения.
Так, известен комплекс силибинина с циклодекстрином (пат. РФ №2108109). Скорость растворения и высвобождения комплекса более высокая в сравнении с силибинином.
Известна флаволигнановая композиция, содержащая силимарин-сопреципитат или силибинин-сопреципитат и вспомогательные вещества, такие как сорбитановые эфиры жирных кислот и полиоксиэтиленовых производных сложных сорбитановых эфиров, водорастворимого производного сахара или целлюлозы и поливинилпирролидона (пат. РФ №2157225).
Недостатком таких комплексов является то, что рассматриваемый в отдельном случае флаволигнан связан с химическим соединением, которое может физиологически действовать как чужеродное вещество и вызывать возможно нежелательные побочные реакции или ухудшать активность флавонолигнина.
Известно средство для лечения и профилактики онкологических заболеваний на основе флаволигнанов, выбранных из изомеров силимарина, в комплексе с фосфолипидами (Патент РФ №2161488). В качестве носителя средство содержит жидкие полусинтетические глицериды жирных кислот со средней длиной цепи. Данное средство можно вводить перорально или путем инфузии: для перорального пути введения в качестве носителей особенно пригодны натуральные или синтетические фосфолипиды, поскольку они образуют жирорастворимые стабильные комплексы с изомерами силимарина; а также жидкие полусинтетические глицериды, содержащие триглицериды жирных кислот со средней длиной цепи, или их аналоги, которые могут облегчать биодоступность отдельных соединений, их натуральных смесей или содержащих их экстрактов.
В данном патенте указано, что силимарин, представляющий собой смесь флаволигнанов силибинина, силидианина и силикристина, обладает высоким сродством к эстрогеновым рецепторам типа II и антипролиферативной активностью в отношении опухолевых клеточных линий (матки, яичника и молочной железы). Авторы предлагают применять комплексы флаволигнанов в качестве лекарственных средств, обладающих активностью в отношении эстрогенных рецепторов типа II, локализованных на поверхности опухолей матки, яичника и молочной железы, что значительно суживает круг онкологических заболеваний, которые могут быть подвергнуты терапии с помощью флаволигнанов. Кроме того, недостатком предлагаемого средства являются сравнительно низкая адресность доставки флаволигнанов к опухолевым клеткам-мишеням и достаточно быстрое выведение их из организма, а следовательно, и недостаточная терапевтическая эффективность препарата.
Наиболее близким по технической сущности к настоящему изобретению относится противоопухолевый липосомный препарат на основе смеси флаволигнанов или их экстрактов из плодов расторопши пятнистой (Silibum marianum (L.) Gaertn) в липосомной форме с размерами частиц 100-500 нм (заявка РФ №2005108651 от 29.03.05).
Известный препарат предназначен для лечения и профилактики не только эстрогензависимых опухолей, но и широкого спектра опухолей эпидермального и мезенхимального происхождения и отличается простотой и технологичностью получения, сочетающейся с низкой биодеградабельностью. Несмотря на то, что средство способно избирательно доставляться к пораженному органу-мишени, скорость этой доставки недостаточна.
Задача данного изобретения - увеличение скорости доставки средства к опухолевой клетке-мишени, усиление противоопухолевой активности действующего компонента препарата за счет увеличения стабильности в кровяном русле.
Поставленная задача решается за счет использования противоопухолевого липосомного препарата направленного действия на основе смеси флаволигнанов или их экстрактов из плодов расторопши пятнистой в липосомной форме с размерами частиц 100-500 нм. При этом препарат дополнительно содержит в своем составе векторный компонент пептидной природы, ковалентно присоединенный к липидам оболочки липосомы и обеспечивающий направленную доставку активного вещества к опухолевым клеткам-мишеням. Векторный компонент может быть выбран из группы белков - представителей семейств факторов роста эпителия, трансформирующих факторов роста, онкофетальных белков, факторов роста эндотелия и факторов роста фибробластов. В качестве векторного компонента могут быть также использованы укороченные фрагменты перечисленных белков.
Вследствие низкого содержания или отсутствия рецепторов к векторному компоненту липосом, наполненных смесью флаволигнанов или их экстрактом из плодов расторопши, на поверхности нормальных клеток и экстремально высокой плотности рецепторов на опухолевых клетках липосомы адресно доставляются в последние и преодолевают мембрану клетки путем рецепторопосредованного эндоцитоза. Предлагаемый заявителем подход сочетает в себе простоту и технологичность получения липосомной формы экстракта плодов расторопши, а молекулярный дизайн препарата и механизм его доставки в опухолевые клетки позволяет значительно увеличить время циркуляции смеси флаволигнанов или их экстрактов из плодов расторопши пятнистой в крови и усилить его противоопухолевое действие.
Изобретательской задачей является создание эффективного противоопухолевого препарата направленного действия, представляющего собой нацеленные липосомы с ковалентно связанным с липидами оболочки липосом векторным компонентом пептидной природы, обеспечивающим специфическое связывание липосом с рецепторами поверхности опухолевых клеток и эффективную внутриклеточную доставку активного содержимого липосом в опухолевые клетки. В качестве противоопухолевого препарата, заключенного в липосомы, предлагается использовать смесь флаволигнанов (силибин, силидианин и силикристин) или содержащих их экстрактов из плодов расторопши пятнистой (Silybum marianum (L.) Gaerth). Предлагаемый липосомный препарат обладает способностью избирательно связываться с рецепторами на поверхности опухолевых клеток или эндотелиальных клеток опухолевых сосудов.
Препарат может быть легко получен с помощью стандартных биотехнологических и химических методов, отличается стабильностью и технологичностью получения, может быть использован для лечения различных онкологических заболеваний. Таким образом, изобретение полностью соответствует критерию «изобретательский уровень».
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Получение направленных липосом, содержащих смесь флаволигнанов.
Липосомы, содержащие фосфатидилхолин и холестерин в соотношении 7/3, получали по методу [Szoka F. and Papahadjopoulos D. Annu. Rev. Biophys. Bioeng. 9:467-508, 1980]. Включение смеси флаволигнанов или их экстрактов из плодов расторопши пятнистой в полученные липосомы осуществляли по методам [Lasic D.D. et al. FEBS Lett. 312:255-258, 1992; Наган G. et al., Biochim. Biophys. Acta 1151:201-215, 1993]. Степень включения флаволигнанов в липосомы составляет 95-98% при соотношении 300 мг препарата/100 мМ фосфолипида. Ковалентные конъюгаты векторных компонентов пептидной природы, выбранных из группы представителей семейств факторов роста эпителия (также трансформирующих факторов роста, онкофетальных белков, факторов роста эндотелия и факторов роста фибробластов или группы активных пептидных фрагментов перечисленных белков) с фосфатидилэтаноламином синтезировали с использованием стандартных методов и различных кросс-линкеров и затем инкубировали совместно с липосомами при 45-60°С в течение 0,5-1 ч. Полученные нацеленные липосомы с размером частиц 100-500 нм отделяли от невключенного конъюгата методом гель-фильтрационной хроматографии на колонке с CL-4В-сефарозой.
Полученные направленные липосомы растворяют в физиологическом растворе или фосфатно-солевом буфере, рН 7,4. Дополнительно противоопухолевый препарат направленного действия может содержать вспомогательные вещества.
Пример 2. Противоопухолевая активность липосомного препарата направленного действия в отношении экспериментальных опухолей у животных.
Клетки меланомы линии В 16 поддерживали путем еженедельной внутрибрюшинной перевивки мышам С 57 В 1/6. Для индукции солидных опухолей мышам вводили подкожно клеточную суспензию (2·105 клеток в 0,1 мл физиологического раствора). Липосомный препарат направленного действия, полученный, как описано в примере 1, содержащий в качестве векторного компонента пептидной природы фактор роста эпителия, вводили опытным животным внутривенно. В качестве препарата сравнения использовали прототип - экстракт расторопши в липосомной форме. В качестве дополнительного контроля использовали смесь флаволигнанов из экстракта расторопши, вводимую внутрижелудочно в 1% крахмальном клейстере по той же схеме. Препараты вводили один раз в неделю, всего три приема, начиная с 3-го дня после прививки опухоли. Однократные дозы препаратов составляли 20 мг/кг в пересчете на сухую смесь флаволигнанов. Каждая экспериментальная группа состояла из шести животных, контрольная (нелеченные животные) - из десяти. Размер опухолей измеряли один раз в 2-3 дня. Объем опухоли вычисляли по формуле 
, где а - короткий, b - длинный диаметр опухоли. Относительный размер опухолей (ОРО) определяли по формуле: 
, где Роп - средний размер опухолей в опытной группе, Рк - средний размер опухолей у контрольных животных. Увеличение продолжительности жизни леченых животных по сравнению с контролем определяли по формуле: 
, где Т - средняя продолжительность жизни (СПЖ) леченых животных, дни, С - СПЖ контрольных животных, дни.
Результаты эксперимента приведены в табл.1. Как видно из таблицы, эффективность терапии липосомным препаратом значительно превышает таковую от применения контрольного препарата и препарата сравнения (прототипа) и выражается в значительном торможении роста опухолей и увеличении средней продолжительности жизни леченных животных.
| № | Группа животных/препарат | ТРО, % | УПЖ, % |
| 1 | Смесь флаволигнанов из экстракта расторопши | 23 | 18 |
| 2 | Заявленный липосомный препарат направленного действия | 49 | 43 |
| 3 | Прототип - экстракт расторопши в липосомной форме | 40 | 36 |
Аналогичные результаты были получены в экспериментах с применением липосомных препаратов направленного действия, содержащих в качестве векторных компонентов пептидной природы белки - представители семейств факторов роста эпителия, трансформирующих факторов роста, онкофетальных белков, факторов роста эндотелия и факторов роста фибробластов, а также их укороченные фрагменты.
Claims (1)
- Противоопухолевый липосомный препарат на основе смеси флаволигнанов или их экстрактов из плодов расторопши пятнистой, отличающийся тем, что препарат выполнен в липосомной форме с размерами частиц 100-500 нм и дополнительно содержит векторный компонент пептидной природы, ковалентно присоединенный к липидам оболочки липосомы, причем в качестве векторного компонента пептидной природы используют белок, выбранный из группы представителей семейств факторов роста эпителия, трансформирующих факторов роста, онкофетальных белков, факторов роста эндотелия и факторов роста фибробластов или группы активных пептидных фрагментов перечисленных белков.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005124455/15A RU2292898C1 (ru) | 2005-08-02 | 2005-08-02 | Противоопухолевый липосомный препарат направленного действия |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2005124455/15A RU2292898C1 (ru) | 2005-08-02 | 2005-08-02 | Противоопухолевый липосомный препарат направленного действия |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2292898C1 true RU2292898C1 (ru) | 2007-02-10 |
Family
ID=37862472
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2005124455/15A RU2292898C1 (ru) | 2005-08-02 | 2005-08-02 | Противоопухолевый липосомный препарат направленного действия |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2292898C1 (ru) |
-
2005
- 2005-08-02 RU RU2005124455/15A patent/RU2292898C1/ru not_active IP Right Cessation
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Aiello et al. | Dietary flavonoids: Nano delivery and nanoparticles for cancer therapy | |
| Jagwani et al. | Pharmacokinetic and pharmacodynamic evaluation of resveratrol loaded cationic liposomes for targeting hepatocellular carcinoma | |
| Pawar et al. | Phytosome as a novel biomedicine: a microencapsulated drug delivery system | |
| Koudelka et al. | Liposomal delivery systems for anti-cancer analogues of vitamin E | |
| US8815931B2 (en) | Oral formulations for tetrapyrrole derivatives | |
| KR20010023522A (ko) | 리포좀으로 캡슐화된 탁산의 투여방법 | |
| EA006741B1 (ru) | Липидная композиция, содержащая производное камптотецина (варианты), способ её получения и применение | |
| Karpuz et al. | Liposomes and phytosomes for phytoconstituents | |
| Rathore et al. | Planterosomes: A potential phyto-phospholipid carriers for the bioavailability enhancement of herbal extracts | |
| Nanavati | Phytosome: a novel approach to enhance the bioavailability of phytoconstituent | |
| WO2014028587A1 (en) | Compositions comprising chitosan-drug conjugates and methods of making and using the same | |
| EP4378453A1 (en) | Dual-targeting biomimetic liposome containing elemene and cabazitaxel, and preparation method therefor and use thereof | |
| Sharma et al. | Advancements in clinical translation of flavonoid nanoparticles for cancer treatment | |
| KR20210008527A (ko) | 비스플루오로알킬-1,4-벤조디아제피논 화합물을 포함하는 조성물 및 이의 사용 방법 | |
| Peredo-Silva et al. | Derivatives of alkyl gallate triphenylphosphonium exhibit antitumor activity in a syngeneic murine model of mammary adenocarcinoma | |
| Tian et al. | Targeted drug delivery systems for elemene in cancer therapy: The story thus far | |
| Turánek et al. | Liposomal formulation of α-tocopheryl maleamide: In vitro and in vivo toxicological profile and anticancer effect against spontaneous breast carcinomas in mice | |
| Zverev et al. | Modern nanocarriers as a factor in increasing the bioavailability and pharmacological activity of flavonoids | |
| KR20210005714A (ko) | 비스플루오로알킬-1,4-벤조디아제피논 화합물을 포함하는 조합 조성물 및 이의 사용 방법 | |
| Varde et al. | Phytosomes: a potential phospholipid nanoparticulate carrier for the bioavailability enhancement of herbal extracts | |
| Moselhy et al. | Multifaceted Role of a Marvel Golden Molecule, Curcumin: a Review. | |
| CN107427471A (zh) | 疏水性物质的纳米载体递送系统 | |
| US20050019386A1 (en) | Orally administered pharmaceutical preparation comprising liposomically encapsulated paclitaxel | |
| RU2292898C1 (ru) | Противоопухолевый липосомный препарат направленного действия | |
| Upase et al. | A review on Phytosome loaded with novel herbal drug and their formulation, standardization and applications |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20080925 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170803 |