RU2275913C2 - Pharmaceutical compositions comprising polysaccharide conjugates for inhibition of metastasis or prophylaxis in malignant tumor relapse - Google Patents
Pharmaceutical compositions comprising polysaccharide conjugates for inhibition of metastasis or prophylaxis in malignant tumor relapse Download PDFInfo
- Publication number
- RU2275913C2 RU2275913C2 RU2004108141/15A RU2004108141A RU2275913C2 RU 2275913 C2 RU2275913 C2 RU 2275913C2 RU 2004108141/15 A RU2004108141/15 A RU 2004108141/15A RU 2004108141 A RU2004108141 A RU 2004108141A RU 2275913 C2 RU2275913 C2 RU 2275913C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- glycyl
- polysaccharide
- pharmaceutical composition
- glycine
- group
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
- A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
Abstract
Description
Область техники, к которой относится изобретениеFIELD OF THE INVENTION
Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для ингибирования метастазов или предотвращения рецидива злокачественной опухоли. В частности, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для ингибирования метастазов или предотвращения рецидива злокачественной опухоли, которая содержит в качестве активного ингредиента производное полисахарида, включающее полисахарид с карбоксильной группой, связанной с активным веществом, обладающим противоопухолевой активностью, например, производным камптотецина формулы (I) или (II), как упомянуто ниже, через аминокислоту или пептид, состоящий из 2-8 аминокислот, которые являются одинаковыми или различными, или его соль.The present invention relates to a pharmaceutical composition for inhibiting metastases or preventing the recurrence of a malignant tumor. In particular, the present invention relates to a pharmaceutical composition for inhibiting metastases or preventing relapse of a malignant tumor, which contains, as an active ingredient, a polysaccharide derivative comprising a polysaccharide with a carboxyl group bound to an active substance having antitumor activity, for example, a camptothecin derivative of the formula (I) or (II), as mentioned below, through an amino acid or peptide consisting of 2-8 amino acids that are the same or different, or a salt thereof.
Уровень техникиState of the art
Злокачественные опухоли являются одной из главных причин смерти в развитых странах, и большинство смертей, связанных со злокачественными опухолями, происходят из-за метастазов в отдаленные органы или рецидива, сопровождаемого метастазом к отдаленным органам после местной терапии. Метастазы в отдаленных органах могут быть вызваны гематогенным метастазом или лимфогенным метастазом и известно, что пациент, имеющий лимфогенный метастаз, подвержен высокому риску рецидива злокачественной опухоли после местной терапии. Основными органами для рецидива являются мозг, легкое, печень и кость. В особенности, опухоль в пищеварительных органах, например, рак толстой кишки, от которого страдает большое количество пациентов, может вторгаться и распространяться на печень, а рак груди и рак легкого также часто вторгаются и распространяются на печень. Далее, лимфома и лимфатический лейкоз могут распространиться главным образом на лимфатическую систему и есть сообщения, что вскрытие выявляет метастазы в печени с высокой частотой.Malignant tumors are one of the leading causes of death in developed countries, and most deaths associated with malignant tumors occur due to metastases to distant organs or relapse accompanied by metastasis to distant organs after local therapy. Metastases in distant organs can be caused by hematogenous metastasis or lymphogenous metastasis, and it is known that a patient with lymphogenous metastasis is at a high risk of cancer recurrence after local therapy. The main organs for relapse are the brain, lung, liver and bone. In particular, a tumor in the digestive organs, such as colon cancer, which affects a large number of patients, can invade and spread to the liver, and breast and lung cancer also often invade and spread to the liver. Further, lymphoma and lymphatic leukemia can spread mainly to the lymphatic system and there are reports that an autopsy reveals liver metastases with a high frequency.
Чтобы ингибировать рецидив, включая метастаз в отдаленные органы, такой как метастаз в печень, и для того, чтобы продлить жизнь, применяют химиотерапию и другие методы поддерживающего лечения после местной терапии, но химиотерапия имеет большую токсичность и не может использоваться для постоянного применения. Кроме того, почти не сообщалось, что время жизни в большей степени продлевается с помощью поддерживающего лечения в виде химиотерапии, чем с помощью одной местной терапии. Например, в опытах по химиотерапии на пациенте, который являлся объектом хирургического вмешательства по поводу обширного рака желудка, одного из раковых образований пищеварительных органов, проводили клинические испытания различных агентов против злокачественных опухолей, но никакой терапевтический метод, демонстрирующий заметно лучшую степень выживания, чем одна хирургия, не был установлен.To inhibit relapse, including metastasis to distant organs, such as liver metastasis, and in order to prolong life, chemotherapy and other supportive treatment methods are used after local therapy, but chemotherapy has great toxicity and cannot be used for continuous use. In addition, it was almost never reported that the life time is more prolonged with the help of chemotherapy maintenance treatment than with the help of local therapy alone. For example, in chemotherapy experiments on a patient who underwent surgery for extensive gastric cancer, one of the cancers of the digestive organs, clinical trials of various agents against malignant tumors were performed, but no therapeutic method demonstrating a significantly better survival rate than surgery alone has not been installed.
При этих обстоятельствах было бы желательно найти новый агент, эффективный для ингибирования рецидива или для продления жизни после местной терапии, применимый в отношении метастазов лимфатических узлов и отдаленных органов с небольшими побочными эффектами и пригодный для постоянного введения.Under these circumstances, it would be desirable to find a new agent effective in inhibiting relapse or prolonging life after local therapy, applicable to metastases of lymph nodes and distant organs with minor side effects and suitable for continuous administration.
С другой стороны, WO 94/19376, WO 97/46260, WO 97/38727, JP-A-10-72467 и JP-А-10-95 802 раскрывают полисахаридное производное, включающее полисахарид, связанный с активным веществом с противоопухолевой активностью через аминокислоту или пептид.On the other hand, WO 94/19376, WO 97/46260, WO 97/38727, JP-A-10-72467 and JP-A-10-95 802 disclose a polysaccharide derivative comprising a polysaccharide bound to an active substance with antitumor activity via amino acid or peptide.
Однако эти публикации раскрывают применение указанных полисахаридов для лечения раковых образований путем накопления их в районе опухоли и уничтожения опухолевых клеток, но нигде не указана активность в отношении ингибирования метастазов или предотвращения рецидива злокачественной опухоли.However, these publications disclose the use of these polysaccharides for the treatment of cancers by accumulating them in the area of the tumor and destroying the tumor cells, but activity is not indicated anywhere with respect to inhibiting metastases or preventing the recurrence of a malignant tumor.
Раскрытие изобретенияDisclosure of invention
Объектом настоящего изобретения является получение новой фармацевтической композиции для ингибирования метастазов или предотвращения рецидива злокачественных опухолей.The object of the present invention is to provide a new pharmaceutical composition for inhibiting metastases or preventing the recurrence of malignant tumors.
Были проведены многочисленные исследования и было обнаружено, что производное полисахарида, включающее полисахарид с карбоксильной группой, связанной с обладающим противоопухолевой активностью активным веществом через аминокислоту или пептид, оказывает превосходное действие при ингибировании метастазов и/или в предотвращении рецидива злокачественной опухоли, что позволило осуществить настоящее изобретение. Таким образом, настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции для ингибирования метастазов или предотвращения рецидива злокачественной опухоли, которая включает в качестве активного ингредиента производное полисахарида, включающее полисахарид с карбоксильной группой, связанной с обладающим противоопухолевой активностью активным веществом через аминокислоту или пептид, состоящим из 2-8 аминокислот, которые являются одинаковыми или различными, или его соль.Numerous studies have been conducted and it has been found that a polysaccharide derivative comprising a polysaccharide with a carboxyl group linked to an antitumor active substance through an amino acid or peptide has an excellent effect in inhibiting metastases and / or in preventing the recurrence of a malignant tumor, which allowed the present invention to be carried out . Thus, the present invention relates to a pharmaceutical composition for inhibiting metastasis or preventing relapse of a malignant tumor, which includes, as an active ingredient, a polysaccharide derivative comprising a polysaccharide with a carboxyl group linked to an antitumor activity active substance through an amino acid or peptide of 2-8 amino acids that are the same or different, or its salt.
Краткое описание фигурBrief Description of the Figures
Чертеж показывает количество дней, прошедших после имплантации опухоли и число выживших животных на моделях метастаза печени М 5076.The drawing shows the number of days elapsed after implantation of the tumor and the number of surviving animals on models of liver metastasis M 5076.
Осуществление изобретенияThe implementation of the invention
Полисахарид с карбоксильной группой в соответствии с настоящим изобретением включает те же полисахариды, которые раскрыты в вышеупомянутых WO 94/19376 и WO 97/46260, и включает полисахариды с карбоксильными группами, которые изначально содержатся в его структуре (например, гиалуроновая кислота, пектиновая кислота, альгиновая кислота, хондроитин, гепарин и т.д.), и полисахариды, изначально не содержащие карбоксильные группы (например, пуллулан, декстран, маннан, хитин, манноглюкан, хитозан и т.д.), но которые вводятся в них, и полисахариды, не имеющие изначально карбоксильную группу в своей структуре, но в которые карбоксильные группы вводятся после образования полиспиртов (например, полисахарид полиспирт, имеющий карбоксильную группу).A polysaccharide with a carboxyl group in accordance with the present invention includes the same polysaccharides as disclosed in the aforementioned WO 94/19376 and WO 97/46260, and includes polysaccharides with carboxyl groups that are originally contained in its structure (e.g. hyaluronic acid, pectic acid, alginic acid, chondroitin, heparin, etc.), and polysaccharides that do not initially contain carboxyl groups (for example, pullulan, dextran, mannan, chitin, mannoglucan, chitosan, etc.), but which are introduced into them, and polysaccharides not having and initial carboxyl group in its structure, but in which carboxyl groups are introduced after formation of polyalcohols (e.g., polysaccharide polyalcohol having a carboxyl group).
Полисахарид, не имеющий изначально карбоксильной группы, но в который вводится карбоксильная группа, означает полисахариды, которые получают замещением атома водорода части или всех гидроксильных групп полисахаридов, не имеющих изначально карбоксильной группы, на карбокси-С1-4-алкильную группу.A polysaccharide that does not have an initial carboxyl group, but into which a carboxyl group is introduced, means polysaccharides that are obtained by replacing a hydrogen atom of a part or all of the hydroxyl groups of polysaccharides that do not have an initial carboxyl group with a carboxy-C 1-4 alkyl group.
В настоящем изобретении полисахарид включает те полисахариды, которые получают обработкой полисахарида, первоначально не имеющего карбоксильной группы с помощью восстанавливающего агента, с последующим замещением атома водорода части или всех гидроксильных групп получившегося соединения на карбокси-С1-4-алкильную группу.In the present invention, the polysaccharide includes those polysaccharides that are obtained by treating a polysaccharide that initially does not have a carboxyl group with a reducing agent, followed by replacing the hydrogen atom of part or all of the hydroxyl groups of the resulting compound with a carboxy-C 1-4 alkyl group.
Полисахарид полиспирт, имеющий карбоксильную группу, включает, например, карбокси-С1-4-алкилполисахарид полиспирт, который получают обработкой полисахарида, первоначально не имеющего карбоксильной группы, последовательно периодатом натрия и боргидридом натрия по способу, описанному в WO 97/46260, с получением полисахарида полиспирта, который далее обрабатывают галогенированной С1-4-алкилкарбоновой кислотой.A polysaccharide polyalcohol having a carboxyl group includes, for example, a carboxy-C 1-4 alkyl polysaccharide polysaccharide, which is obtained by treating a polysaccharide, initially without a carboxyl group, sequentially with sodium periodate and sodium borohydride according to the method described in WO 97/46260, to obtain polysaccharide of a polyalcohol which is further treated with halogenated C 1-4 alkylcarboxylic acid.
Алкильная часть карбокси-С1-4-алкильной группы, которая замещает атом водорода гидроксильных групп вышеупомянутого полисахарида (включая полисахарид полиспирт), может быть или алкильной группой с линейной цепью, или алкильной группой с разветвленной цепью.The alkyl portion of the carboxy-C 1-4 alkyl group, which replaces the hydrogen atom of the hydroxyl groups of the aforementioned polysaccharide (including the polysaccharide polyalcohol), can be either a linear alkyl group or a branched chain alkyl group.
Предпочтительной карбокси-С1-4-алкильной группой являются, например, карбоксиметильная группа, 1-карбоксиэтильная группа, 3-карбоксипропильная группа, 1-метил-3-карбоксипропильная группа, 2-метил-3-карбоксипропильная группа, 4-карбоксибутильная группа и т.д., и карбоксиметильная группа является наиболее предпочтительной.Preferred carboxy-C 1-4 alkyl groups are, for example, carboxymethyl group, 1-carboxyethyl group, 3-carboxypropyl group, 1-methyl-3-carboxypropyl group, 2-methyl-3-carboxypropyl group, 4-carboxybutyl group and etc., and a carboxymethyl group is most preferred.
В настоящем изобретении полисахарид, имеющий карбоксильную группу, предпочтительно представляет собой карбокси-С1-4-алкилдекстран или карбокси-С1-4-алкилдекстран полиспирт, и карбокси-С1-4-алкилдекстран является особенно предпочтительным.In the present invention, the polysaccharide having a carboxy group is preferably a carboxy-C 1-4 alkyldextran or a carboxy-C 1-4 alkyldextran polyalcohol, and a carboxy-C 1-4 alkyldextran is particularly preferred.
Степень образования полиспирта (путем последовательного окисления периодатом натрия и восстановления боргидридом натрия) на стадии получения карбокси-С1-4-алкилполисахарида полиспирта, упомянутого выше, не определена, но промежуточный полисахарид полиспирт предпочтительно получают обработкой полисахарида при условиях, позволяющих по существу почти полное образование полиспирта.The degree of polyalcohol formation (by sequentially oxidizing with sodium periodate and reducing with sodium borohydride) in the step for producing the carboxy-C 1-4 -alkyl polysaccharide of the polyalcohol mentioned above is not determined, but the polysaccharide intermediate polysaccharide is preferably obtained by treating the polysaccharide under conditions that allow essentially almost complete formation polyalcohol.
Более того, в настоящем изобретении полисахарид, имеющий карбоксильную группу, предпочтительно представляет собой карбоксиметилированный декстран или карбоксиметилированный декстран полиспирт, и среди этих полисахаридов особенно предпочтительным является декстран, имеющий средний молекулярный вес от 20000 до 500000, и декстран, имеющий средний молекулярный вес от 50000 до 350000, является наиболее предпочтительным (указанный средний молекулярный вес определяется методом гель-проникающей хроматографии (GPC), Shinseikagaku, Jikken Koza, Vol.20, р.7, Tokyo-Kagaku-Dojin, 5.11.1991).Moreover, in the present invention, the polysaccharide having a carboxyl group is preferably a carboxymethylated dextran or a carboxymethylated dextran polyalcohol, and among these polysaccharides, dextran having an average molecular weight of from 20,000 to 500,000 and dextran having an average molecular weight of from 50,000 to 350,000 is most preferred (indicated average molecular weight is determined by gel permeation chromatography (GPC), Shinseikagaku, Jikken Koza, Vol.20, p. 7, Tokyo-Kagaku-Dojin, 5.11.1 991).
При введении карбоксиалкильной группы в полисахариды степень ее введения выражается как "степень замещения", которая определяется числом карбоксиалкильных групп (включая группы пептидной цепи, вводимые этими группами) в расчете на остаток сахара. Это выражено следующим уравнением.When a carboxyalkyl group is introduced into polysaccharides, the degree of its introduction is expressed as the “degree of substitution”, which is determined by the number of carboxyalkyl groups (including peptide chain groups introduced by these groups) based on the sugar residue. This is expressed by the following equation.
Когда карбоксиалкильной группой является карбоксиметильная группа, степень замещения иногда выражается степенью карбоксиметилирования (СМ-степень).When the carboxyalkyl group is a carboxymethyl group, the degree of substitution is sometimes expressed by the degree of carboxymethylation (CM-degree).
Когда полисахарид представляет собой декстран, степень его замещения находится предпочтительно в диапазоне от 0,3 до 0,8. Когда полисахарид представляет собой декстран полиспирт, степень замещения находится предпочтительно в диапазоне от 0,3 до 0,5.When the polysaccharide is dextran, its degree of substitution is preferably in the range from 0.3 to 0.8. When the polysaccharide is a dextran polyalcohol, the degree of substitution is preferably in the range from 0.3 to 0.5.
Аминокислота или пептид настоящего изобретения играют роль спейсера (связывающего звена), существующего между полисахаридом, имеющим карбоксильную группу, и активным веществом, обладающим противоопухолевой активностью, и аминокислота или аминокислота, образующая указанный пептид, включает природные аминокислоты и синтетические аминокислоты (включая D-аминокислоты, L-аминокислоты, их смесь), и также включает как нейтральные аминокислоты, основные аминокислоты, так и кислые аминокислоты. Кроме того, аминокислота настоящего изобретения может быть не только α-аминокислотой, но также и β-аминокислотами, γ-аминокислотами, ε-аминокислотами и т.д.The amino acid or peptide of the present invention plays the role of a spacer (linker) existing between a polysaccharide having a carboxyl group and an active substance having antitumor activity, and the amino acid or amino acid forming the indicated peptide includes natural amino acids and synthetic amino acids (including D-amino acids, L-amino acids, their mixture), and also includes both neutral amino acids, basic amino acids, and acidic amino acids. In addition, the amino acid of the present invention can be not only an α-amino acid, but also β-amino acids, γ-amino acids, ε-amino acids, etc.
Примерами аминокислот являются глицин, α-аланин, β-аланин, валин, лейцин, изолейцин, серин, треонин, цистеин, метионин, аспарагиновая кислота, глутаминовая кислота, лизин, цитруллин, аргинин, фенилаланин, тирозин, гастидин, триптофан, пролин, гидроксипролин, γ-аминомасляная кислота, ε-аминокапроновая кислота и т.д.Examples of amino acids are glycine, α-alanine, β-alanine, valine, leucine, isoleucine, serine, threonine, cysteine, methionine, aspartic acid, glutamic acid, lysine, citrulline, arginine, phenylalanine, tyrosine, gastidine, tryptophan, proline, hydroxyproline , γ-aminobutyric acid, ε-aminocaproic acid, etc.
Пептид настоящего изобретения включает пептид, состоящий из 2-8 аминокислот, предпочтительно 2-5 аминокислот, которые являются одинаковыми или различными. Примерами пептидов являются глицил-глицил-L- или D-фенилаланил-глицин, глицил-глицин, глицил-глицил-глицин, глицил-глицил-глицил-глицин, глицил-глицил-глицил-глицил-глицин, L-или D-фенилаланил-глицин, L- или D-тирозил-глицин, L- или D-лейцил-глицин, L- или D-фенилаланил-цитруллин и L- или D-валил-цитруллин (N-конец этих пептидов введенно в карбоксильной группе полисахарида).The peptide of the present invention includes a peptide consisting of 2-8 amino acids, preferably 2-5 amino acids, which are the same or different. Examples of peptides are glycyl-glycyl-L- or D-phenylalanyl-glycine, glycyl-glycine, glycyl-glycyl-glycine, glycyl-glycyl-glycyl-glycine, glycyl-glycyl-glycyl-glycyl-glycine, L-or D-phenylalanyl -glycine, L- or D-tyrosyl-glycine, L- or D-leucyl-glycine, L- or D-phenylalanyl-citrulline and L- or D-valyl-citrulline (the N-terminus of these peptides is introduced into the carboxyl group of the polysaccharide) .
Среди этих пептидов предпочтительными являются глицил-глицил-L- или D-фенилаланил-глицин, глицил-глицин, глицил-глицил-глицин, глицил-глицил-глицил-глицин, глицил-глицил-глицил-глицил-глицин и L- или D-фенилаланил-глицин.Among these peptides, preferred are glycyl-glycyl-L- or D-phenylalanyl-glycine, glycyl-glycine, glycyl-glycyl-glycine, glycyl-glycyl-glycyl-glycine, glycyl-glycyl-glycyl-glycyl-glycine, and L- or D phenylalanyl glycine.
Активное вещество, обладающее противоопухолевой активностью по настоящему изобретению, может включать различные соединения, известные в качестве противоопухолевого агента, и может являться цитотоксическими агентами или цитостатическими агентами. Цитотоксический агент представляет собой предпочтительно производные камптотецина и производные таксана, и цитостатический агент представляет собой предпочтительно ингибиторы ангиогенеза, ингибиторы рецептора EGF. Более предпочтительно, цитотоксический агент представляет собой производные камптотецина и цитостатический агент представляет собой ингибиторы ангиогенеза.An active substance having antitumor activity of the present invention may include various compounds known as an antitumor agent, and may be cytotoxic agents or cytostatic agents. The cytotoxic agent is preferably camptothecin derivatives and taxane derivatives, and the cytotoxic agent is preferably angiogenesis inhibitors, EGF receptor inhibitors. More preferably, the cytotoxic agent is camptothecin derivatives and the cytostatic agent is angiogenesis inhibitors.
Примерами производных камптотецина являются соединения формулы (I), раскрытые в JP-A-10-72467:Examples of camptothecin derivatives are compounds of formula (I) disclosed in JP-A-10-72467:
где R1 представляет собой замещенную или незамещенную низшую алкильную группу, X1 представляет собой группу формулы: -NHR2 (R2 представляет собой атом водорода или низшую алкильную группу) и Alk представляет собой C1-6-алкиленовую группу с линейной цепью или разветвленной цепью, имеющую при необходимости в цепи атом кислорода. Среди них предпочтительным является соединение 10-(3'-аминопропилокси)-7-этил-(20S)-камптотецин.where R 1 represents a substituted or unsubstituted lower alkyl group, X 1 represents a group of the formula: —NHR 2 (R 2 represents a hydrogen atom or lower alkyl group) and Alk represents a linear or branched C 1-6 alkylene group a chain having, if necessary, an oxygen atom in the chain. Among them, a compound of 10- (3'-aminopropyloxy) -7-ethyl- (20S) -camptothecin is preferred.
Другими примерами производных камптотецина являются соединения формулы (II), раскрытые в JP-A-10-95802:Other examples of camptothecin derivatives are compounds of formula (II) disclosed in JP-A-10-95802:
где две группы из числа от R2 до R6, являющиеся смежными друг с другом, объединены с образованием низшей алкиленовой группы, и один из атомов углерода указанной низшей алкиленовой группы замещен аминогруппой, и оставшиеся три группы из числа от R2 до R6 представляют собой атом водорода, низшую алкильную группу или атом галогена. Среди них предпочтительным является соединение (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1H,12Н-бензо [de]пирано [3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-дион и т.д.where two groups from a number from R 2 to R 6 , which are adjacent to each other, are combined to form a lower alkylene group, and one of the carbon atoms of the specified lower alkylene group is substituted by an amino group, and the remaining three groups from a number from R 2 to R 6 are represents a hydrogen atom, a lower alkyl group or a halogen atom. Among them, the preferred compound is (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4 ': 6.7] indolisino [1,2-b] quinoline-10.13 (9H, 15H) -dione, etc.
Примерами производных таксана являются таксол, таксотер, 13-[(2'R,3'R)-3'N-трет-бутилоксикарбонил-3'-циклопропил]-10-дезацетилбаккатин III и т.д.Examples of taxane derivatives are taxol, taxotere, 13 - [(2'R, 3'R) -3'N-tert-butyloxycarbonyl-3'-cyclopropyl] -10-deacetylbaccatin III, etc.
В активном ингредиенте настоящего изобретения отношение полисахарида и активного вещества, имеющего противоопухолевую активность, может быть выбрано в соответствии с видом полисахарида, который должен быть использован, но когда полисахаридом является декстран или декстран полиспирт, тогда содержание активного вещества, имеющего противоопухолевую активность, предпочтительно находится в интервале от 0,1 до 20% по весу, более предпочтительно в интервале от 2 до 10% по весу в расчете на общий вес активного ингредиента.In the active ingredient of the present invention, the ratio of polysaccharide to active substance having antitumor activity can be selected according to the type of polysaccharide to be used, but when the polysaccharide is dextran or dextran polyalcohol, then the content of the active substance having antitumor activity is preferably in in the range of 0.1 to 20% by weight, more preferably in the range of 2 to 10% by weight, based on the total weight of the active ingredient.
Среди активных ингредиентов настоящего изобретения предпочтительными являются полисахаридные производные или их соли, в которых аминокислота или пептид, состоящий из 2-8 аминокислот, являющихся одинаковыми или различными, введены в часть или все карбоксильные группы полисахарида, имеющего карбоксильную группу, через кислотно-амидную связь, и оставшаяся часть или все аминогруппы или карбоксильные группы, которые не участвуют в связывании с карбоксильными группами вышеупомянутого пептида, связаны с карбоксильными группами, аминогруппами или гидроксильными группами активного вещества, имеющего противоопухолевую активность, через кислотно-амидную связь или сложную эфирную связь.Among the active ingredients of the present invention, polysaccharide derivatives or salts thereof are preferred, in which an amino acid or peptide consisting of 2-8 amino acids, which are the same or different, is introduced into part or all of the carboxyl groups of a polysaccharide having a carboxyl group via an acid-amide bond, and the remainder or all of the amino groups or carboxyl groups that are not involved in binding to the carboxyl groups of the aforementioned peptide are linked to carboxyl groups, an amino group mi or hydroxyl groups of the active substance having antitumor activity through an acid-amide bond or an ester bond.
Особенно предпочтительным активным ингредиентом является производное полисахарида, в котором полисахаридом, имеющим карбоксильную группу, является карбоксиметилированный декстран, активным веществом, имеющим противоопухолевую активность, является 10-(3'-аминопропилокси)-7-этил(20S)-камптотецин и пептидом является глицил-глицил-глицин, или его соль. Особенно предпочтительным является производное полисахарида, в котором полисахаридом, имеющим карбоксильную группу, является карбоксиметилированный декстран, имеющий средний молекулярный вес от 60000 до 200000, и степень карбоксиметилирования его находится в диапазоне от 0,3 до 0,8, или его соль.A particularly preferred active ingredient is a polysaccharide derivative in which the polysaccharide having a carboxyl group is a carboxymethylated dextran, the active substance having antitumor activity is 10- (3'-aminopropyloxy) -7-ethyl (20S) -camptothecin and the peptide is glycyl- glycyl glycine, or its salt. Particularly preferred is a polysaccharide derivative in which the polysaccharide having a carboxyl group is a carboxymethylated dextran having an average molecular weight of from 60,000 to 200,000, and its carboxymethylation degree is in the range of 0.3 to 0.8, or a salt thereof.
Другим предпочтительным активным ингредиентом является производное полисахарида, в котором полисахаридом, имеющим карбоксильную группу, является карбокси-С1-4-алкилдекстран полиспирт, активным веществом, имеющим противоопухолевую активность, является (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]-хинолин-10,13(9Н,15Н)-дион и пептидом является глицил-глицил-L- или D-фенилаланил-глицин, или его соль, и особенно предпочтительными является производное полисахарида или его соль, в котором полисахаридом, имеющим карбоксильную группу, является карбокси-С1-4-алкилдекстран полиспирт, имеющий средний молекулярный вес от 200000 до 400000, и степень замещения его находится в диапазоне от 0,3 до 0,5.Another preferred active ingredient is a polysaccharide derivative in which the polysaccharide having a carboxyl group is a carboxy-C 1-4 alkyldextran polyalcohol, the active substance having an antitumor activity is (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5 -fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4': 6,7] indolisino [1,2-b] -quinoline-10, The 13 (9H, 15H) dione and peptide is glycyl-glycyl-L- or D-phenylalanyl-glycine, or a salt thereof, and a polysaccharide derivative or a salt thereof in which the polysaccharide is particularly preferred m, having a carboxyl group, a carboxy-C 1-4 -alkildekstran polyalcohol having an average molecular weight of from 200,000 to 400,000, and its degree of substitution is in the range from 0.3 to 0.5.
Производное полисахарида или соль активного ингредиента настоящего изобретения может быть получено согласно способам, раскрытым в WO 94/19376, WO 97/46260, WO 97/38727, JP-A-10-72467 и JP-А-10-95 802.A polysaccharide derivative or a salt of an active ingredient of the present invention can be prepared according to the methods disclosed in WO 94/19376, WO 97/46260, WO 97/38727, JP-A-10-72467 and JP-A-10-95 802.
Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может активно накапливаться в сайте, таком как лимфатический узел или печень, на которые может распространяться раковая опухоль, может высвобождать активное вещество с соответствующей скоростью так, чтобы активное вещество едва затрагивало нормальные клетки и подавляло рост клеток опухоли, и следовательно, фармацевтическая композиция настоящего изобретения применима для ингибирования метастазов или для предотвращения рецидива злокачественной опухоли. Фармацевтическая композиция настоящего изобретения особенно применима для ингибирования метастазов лимфатических узлов или метастазов печени, в частности, полезна для ингибирования метастазов лимфатических узлов. Кроме того, среди метастазов лимфатических узлов настоящая фармацевтическая композиция применима для ингибирования метастазирования в лимфатические узлы из толстой кишки или метастазирования в лимфатические узлы из легкого.The pharmaceutical composition of the present invention can actively accumulate in a site, such as a lymph node or liver, which can be spread by a cancerous tumor, can release the active substance at an appropriate rate so that the active substance barely affects normal cells and inhibits the growth of tumor cells, and therefore, the pharmaceutical the composition of the present invention is applicable to inhibit metastases or to prevent recurrence of a malignant tumor. The pharmaceutical composition of the present invention is particularly useful for inhibiting lymph node metastases or liver metastases, and is particularly useful for inhibiting lymph node metastases. In addition, among lymph node metastases, the present pharmaceutical composition is useful for inhibiting metastasis to the lymph nodes from the colon or metastasis to the lymph nodes from the lung.
Кроме того, настоящая фармацевтическая композиция может оказывать действие не только перед началом появления метастазов, но также и после начала образования метастазов. Поэтому настоящая фармацевтическая композиция также применима для ингибирования метастазов или предотвращения рецидива злокачественной опухоли после местной терапии (например, хирургии, лучевой терапии, термотерапии, криотерапии, лазер-сжигающей терапии и т.д.). Кроме того, настоящая фармацевтическая композиция также подходит для повторного дозирования в течение длительного времени и может использоваться вместе с местной терапией.In addition, the present pharmaceutical composition can have an effect not only before the onset of metastases, but also after the onset of metastases. Therefore, the present pharmaceutical composition is also applicable for inhibiting metastases or preventing the recurrence of a malignant tumor after local therapy (e.g., surgery, radiation therapy, thermotherapy, cryotherapy, laser-burning therapy, etc.). In addition, the present pharmaceutical composition is also suitable for repeated dosing for a long time and can be used in conjunction with local therapy.
Настоящая фармацевтическая композиция предпочтительно вводится парентерально (например, внутривенной инъекцией) и обычно вводится в форме жидкого состава, такого как раствор, суспензия, эмульсия и т.д.The present pharmaceutical composition is preferably administered parenterally (for example, by intravenous injection) and is usually administered in the form of a liquid composition such as a solution, suspension, emulsion, etc.
Настоящая фармацевтическая композиция предпочтительно составляется в форме инъекции или капельного вливания, используя дистиллированную воду для инъекции, физиологический солевой раствор, водный раствор глюкозы.The present pharmaceutical composition is preferably in the form of an injection or a drip, using distilled water for injection, physiological saline solution, aqueous glucose solution.
Дозировка настоящей фармацевтической композиции может меняться в зависимости от способов введения, возраста, веса или состояния пациентов и т.д., но она находится обычно в пределах от 0,002 до 50 мг/кг, более предпочтительно в пределах от 0,01 до 5 мг/кг, в разовой дозе, в пересчете на количество активного вещества.The dosage of the present pharmaceutical composition may vary depending on the route of administration, age, weight or condition of the patients, etc., but it is usually in the range of 0.002 to 50 mg / kg, more preferably in the range of 0.01 to 5 mg / kg, in a single dose, in terms of the amount of active substance.
В настоящем описании низшей алкильной группой и низшей алкиленовой группой может являться группа, имеющая от 1 до 6 атомов углерода, предпочтительно, имеющая от 1 до 4 атомов углерода, и атомом галогена является атом фтора, атом хлора, атом брома, атом йода и т.д.In the present description, the lower alkyl group and the lower alkylene group may be a group having from 1 to 6 carbon atoms, preferably having from 1 to 4 carbon atoms, and a halogen atom is a fluorine atom, a chlorine atom, a bromine atom, an iodine atom, etc. d.
ПримерыExamples
Эксперимент 1 (модели метастаза печени М 5076)Experiment 1 (models of liver metastasis M 5076)
Один миллион клеток М 5076 (клетки саркомы яичников мыши) имплантируют самцам мышей BDF1 (5-недельного возраста, 8 животных в группе) в хвостовую вену. Тестируемое соединение (соединение А; соединение, полученное, как описано ниже в разделе Препарат 1, и иринотекан (СРТ-11)) растворяют в физиологическом солевом растворе, и каждое количество, указанное в Таблице 1, как упомянуто ниже, вводят внутривенно мышам на 4-ый, 8-ой и 12-ый день после имплантации, и мышей наблюдают в течение 120 дней после имплантации опухоли. В контрольной группе (необработанной тестируемым соединением) вводят только физиологический солевой раствор. Наблюдали время выживания (дни) в группах, обрабатываемых тестируемыми соединениями, и в контрольной группе, и уровень продления жизни рассчитывают согласно следующему уравнению. Результаты показаны в Таблице 1 и на чертеже.One million M 5076 cells (mouse ovarian sarcoma cells) are implanted into male tail BDF1 mice (5 weeks old, 8 animals per group) in the tail vein. The test compound (compound A; the compound obtained as described below in Preparation 1 and irinotecan (CPT-11)) was dissolved in physiological saline, and each amount indicated in Table 1, as mentioned below, was administered intravenously to 4 mice the 8th, 8th and 12th day after implantation, and mice were observed for 120 days after tumor implantation. In the control group (untreated with the test compound), only physiological saline is administered. Survival time (days) was observed in the groups treated with the test compounds and in the control group, and the level of life extension was calculated according to the following equation. The results are shown in Table 1 and in the drawing.
Как показано в Таблице 1, соединение, полученное, как описано ниже в разделе Препарат 1 (соединение А), проявляет превосходную активность в отношении продления жизни на моделях метастаза печени М 5076. Необходимо отметить, что иринотекан не известен в качестве средства для ингибирования метастазов или предотвращения рецидивов злокачественной опухоли, а он был просто протестирован как лекарственное средство из ряда производных камптотецина.As shown in Table 1, the compound obtained as described below in the Preparation 1 section (compound A) exhibits excellent life extension activity in liver metastasis models M 5076. It should be noted that irinotecan is not known as an agent for inhibiting metastases or prevent relapse of the malignant tumor, and it was simply tested as a drug from a number of camptothecin derivatives.
Эксперимент 2 (метастатические модели НТ-29)Experiment 2 (metastatic models NT-29)
Сегмент (2 мм2) НТ-29 клеток (рак толстой кишки человека) имплантируют в червеобразный отросток самке мыши 100NCr пи/пи (5-6-недельного возраста, 10 животных в группе). Тестируемое соединение (соединение А; соединение, полученное, как упомянуто ниже в разделе Препарат 1, соединение В; соединение, полученное, как упомянуто ниже в разделе Препарат 4, и иринотекан (СРТ-11)) растворяют в физиологическом солевом растворе, и каждое количество, указанное в приведенной ниже Таблице 2, вводят внутривенно мышам на 15-ый, 19-ый, 23-ий и 25-ый день после имплантации опухоли. С другой стороны, контрольной группе (необработанной тестируемым соединением) вводят только физиологический солевой раствор. Присутствие или отсутствие метастаз каждого органа проверяют на 84-ый день после имплантации опухоли. Результаты показаны в следующей Таблице 2.A segment (2 mm 2 ) of NT-29 cells (human colon cancer) is implanted into the vermiform process of a female mouse 100NCr pi / pi (5-6 weeks old, 10 animals in the group). The test compound (compound A; the compound obtained as mentioned below in Preparation 1, compound B; the compound obtained as mentioned below in Preparation 4 and irinotecan (CPT-11)) is dissolved in physiological saline, and each amount shown in Table 2 below are administered intravenously to mice on the 15th, 19th, 23rd and 25th day after tumor implantation. On the other hand, only physiological saline is administered to the control group (untreated with the test compound). The presence or absence of metastases of each organ is checked on the 84th day after tumor implantation. The results are shown in the following Table 2.
(40 мг/кг)****Compound A
(40 mg / kg) ****
(20 мг/кг)****Compound A
(20 mg / kg) ****
(10 мг/кг)****Compound A
(10 mg / kg) ****
(5 мг/кг) ****Compound A
(5 mg / kg) ****
(5 мг/кг) *****Compound B
(5 mg / kg) *****
(2,5 мг/кг) *****Compound B
(2.5 mg / kg) *****
(40 мг/кг)Irinotecan
(40 mg / kg)
(20 мг/кг)Irinotecan
(20 mg / kg)
**: Р означает стандартное отклонение, где все обрабатываемые группы сравнивают с контролем с помощью точного критерия Фишера.
***: Включая диафрагму, брюшную полость и грудную полость.
****: Дозировка в пересчете на 10-(3'-аминопропилокси)-7-этил-(20S)-камптотецин.
***** Дозировка, в расчете на (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-дион.*: MI means the frequency of metastasis.
**: P stands for standard deviation, where all treatment groups are compared with controls using Fisher's exact test.
***: Including diaphragm, abdominal cavity and chest cavity.
****: Dosage in terms of 10- (3'-aminopropyloxy) -7-ethyl- (20S) -camptothecin.
***** Dosage, based on (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4': 6.7] indolisino [1,2-b] quinoline-10,13 (9H, 15H) -dione.
Эксперимент 3 (метастатические модели НТ-29)Experiment 3 (metastatic models of NT-29)
Сегмент (2 мм2) клеток НТ-29 (рак толстой кишки человека) имплантируют в vermiform аппендикс самке мыши 100NCr пи/пи (5-6 недель, 10 животных в группе). Так как метастазы лимфатического узла наблюдают на 49-ый день после имплантации опухоли, тестируемое соединение (соединение А; соединение, полученное, как упомянуто ниже в разделе Препарат 1, и иринотекан - (СРТ-11)) растворяют в физиологическом солевом растворе, и каждое количество, указанное в упомянутой ниже Таблице 3, вводят внутривенно мышам на 51-ый, 55-ый, 59-ый и 63-ий день после имплантации опухоли. С другой стороны, контрольной группе (необработанной тестируемым соединением) вводят только физиологический солевой раствор. Присутствие или отсутствие метастаз в каждом органе проверяли на 84-ый день после имплантации опухоли. Результаты показаны в следующей Таблице 3.A segment (2 mm 2 ) of NT-29 cells (human colon cancer) is implanted in the vermiform appendix of a female mouse 100NCr pi / pi (5-6 weeks, 10 animals in the group). Since lymph node metastases are observed on the 49th day after the implantation of the tumor, the test compound (compound A; the compound obtained as mentioned below in Preparation 1 and irinotecan - (CPT-11)) is dissolved in physiological saline, and each the amount shown in Table 3 below is administered intravenously to mice on the 51st, 55th, 59th and 63rd day after tumor implantation. On the other hand, only physiological saline is administered to the control group (untreated with the test compound). The presence or absence of metastases in each organ was checked on the 84th day after tumor implantation. The results are shown in the following Table 3.
(40 мг/кг)Irinotecan
(40 mg / kg)
**: Р означает стандартное отклонение, где все обрабатываемые группы сравнивали с контролем с помощью точного критерия Фишера.
***: Включая диафрагму, брюшную полость и грудную полость.
****: Дозировка в пересчете на 10-(3'-аминопропилокси)-7-этил-(20S)-камптотецин.*: MI means the frequency of metastasis.
**: P stands for standard deviation, where all treatment groups were compared with controls using Fisher's exact test.
***: Including diaphragm, abdominal cavity and chest cavity.
****: Dosage in terms of 10- (3'-aminopropyloxy) -7-ethyl- (20S) -camptothecin.
Эксперимент 4 (метастатические модели Н460)Experiment 4 (metastatic models H460)
Сегмент (2 мм2) клеток Н460 (рак легкого человека) имплантируют в левое легкое самки мыши 100NCr пи/пи (5-6 недель, 10 животных в группе). Так как метастазы наблюдают на 14-ый день после имплантации опухоли в другой контрольной группе, тестируемое соединение (соединение А; соединение, полученное, как упомянуто ниже в разделе Препарат 1, соединение В; соединение, полученное, как упомянуто ниже в разделе Препарат 4, и иринотекан (СРТ-11)) растворяют в физиологическом солевом растворе, и каждое количество, указанное в упомянутой ниже Таблице 4, вводят внутривенно мышам на 14-ый, 18-ый, 22-ой и 26-ой день после имплантации опухоли. С другой стороны, контрольной группе (необработанной тестируемым соединением) вводят только физиологический солевой раствор. Присутствие или отсутствие метастазов каждого органа проверяют на 36-ой день после имплантации опухоли. Результаты показаны в следующей Таблице 4.A segment (2 mm 2 ) of H460 cells (human lung cancer) is implanted in the left lung of a female mouse 100NCr pi / pi (5-6 weeks, 10 animals in the group). Since metastases are observed on the 14th day after implantation of a tumor in another control group, the test compound (compound A; compound obtained as mentioned below in Section 1, compound B; compound obtained as mentioned below in Section 4, and irinotecan (CPT-11)) are dissolved in physiological saline, and each amount indicated in Table 4 below is administered intravenously to mice on the 14th, 18th, 22nd and 26th day after tumor implantation. On the other hand, only physiological saline is administered to the control group (untreated with the test compound). The presence or absence of metastases of each organ is checked on the 36th day after tumor implantation. The results are shown in the following Table 4.
ПРЕПАРАТЫDRUGS
Препарат 1Drug 1
Получение СМ-декстран-7-этил-10-[3'-(глицил-глицил-глициламино)пропилокси]-(20S)-камптотецина:Preparation of CM-dextran-7-ethyl-10- [3 '- (glycyl-glycyl-glycylamino) propyloxy] - (20S) -camptothecin:
(СМ-декстран означает карбоксиметилдекстран, в дальнейшем то же самое)(CM-dextran means carboxymethyldextran, hereinafter the same)
(1) Гидрохлорид 10-(3'-аминопропилокси)-7-этил-(20S)-камптотецина (500 мг) растворяют в ацетонитриле (25 мл), затем туда же последовательно добавляют трет-бутоксикарбонилглицил-глицил-глицин (345 мг), N-метилморфолин (121 мг), N-гидроксибензотриазол (161 мг) и гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (228 мг) и смесь перемешивают в течение ночи. Выпавший в осадок продукт собирают путем фильтрования, очищают с помощью хроматографии на колонке с силикагелем, с получением порошка бледно-желтого цвета, похожего на пену, который перекристаллизовывают из н-пропанола с получением 7-этил-10-[3'-(трет-бутоксикарбонил-глицил-глицил-глициламино)пропилокси]-(20S)-камптотецина (663 мг) в виде бесцветных кристаллов.(1) 10- (3'-aminopropyloxy) -7-ethyl- (20S) -camptothecin hydrochloride (500 mg) was dissolved in acetonitrile (25 ml), then tert-butoxycarbonylglycyl-glycyl-glycine (345 mg) was successively added thereto. , N-methylmorpholine (121 mg), N-hydroxybenzotriazole (161 mg) and 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride (228 mg) and the mixture was stirred overnight. The precipitated product was collected by filtration, purified by silica gel column chromatography to give a pale yellow powder similar to a foam, which was recrystallized from n-propanol to give 7-ethyl-10- [3 '- (tert- butoxycarbonyl-glycyl-glycyl-glycylamino) propyloxy] - (20S) -camptothecin (663 mg) as colorless crystals.
Т.пл.: 157-159°С.Mp: 157-159 ° C.
(2) 7-этил-10-[3'-(трет-бутоксикарбонил-глицил-глицил-глициламино)пропилокси]-(20S)-камптотецин (3,86 г) эмульгируют в очищенной воде (64 мл) и туда добавляют 6N водный раствор соляной кислоты (32 мл) и проводят реакцию при комнатной температуре при перемешивании в течение 2 часов. Растворитель концентрируют и к остатку добавляют н-пропанол, чтобы осадить порошкообразный продукт. Полученный порошкообразный продукт собирают с помощью фильтрования и перекристаллизовывают из водного н-пропанола с получением гидрохлорида 7-этил-10-[3'-(глицил-глицил-глициламино)пропилокси]-(20S)-камптотецина (2,56 г) в виде кристаллов желтого цвета.(2) 7-ethyl-10- [3 '- (tert-butoxycarbonyl-glycyl-glycyl-glycylamino) propyloxy] - (20S) -camptothecin (3.86 g) is emulsified in purified water (64 ml) and 6N is added thereto an aqueous solution of hydrochloric acid (32 ml) and carry out the reaction at room temperature with stirring for 2 hours. The solvent was concentrated and n-propanol was added to the residue to precipitate a powdery product. The resulting powdery product was collected by filtration and recrystallized from aqueous n-propanol to give 7-ethyl-10- [3 '- (glycyl-glycyl-glycylamino) propyloxy] - (20S) -camptothecin hydrochloride (2.56 g) as crystals of yellow color.
(3) Натриевую соль СМ-декстрана (СМ-степень=0,44, 50 г) растворяют в воде (2,5 литра), и значение рН доводят до величины 5,0 с помощью 0,2N водного раствора соляной кислоты при перемешивании при температуре 15°С и к нему добавляют гидрохлорид 7-этил-10-[3'-(глицил-глицил-глициламино)пропилокси]-(20S)-камптотецина (4,01 г). К указанной смеси добавляют 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимид гидрохлорид (50 г), при этом значение рН реакционного раствора поддерживают на уровне 5,0-5,5 с помощью 0,2N соляной кислоты. Смесь реагирует при температуре 15°С при перемешивании в течение часа, после чего ее разбавляют очищенной водой до общего объема 10 литров. Пока значение рН поддерживают выше 4,0, низкомолекулярные фракции удаляют, используя ультрафильтрационный модуль (АСР-1010, выпущенный Asahi Kasei Industries, Ltd.) и значение рН доводят до 8 с помощью 0,1 N водного раствора гидроксида натрия и затем обрабатывают ионообменной смолой MSC-I (Na-форма, выпущена фирмой Dowex). Фракции, содержащие целевые соединения, концентрируют и пропускают через фильтр (0,45 мкм). Полученный продукт смешивают с этанолом (10 литров) при перемешивании и к нему добавляют по каплям 3М рассол (40 мл) при перемешивании. Полученный осадок собирают фильтрованием и растворяют в очищенной воде (21 литр). Значение рН раствора доводят до величины рН 4,0 с помощью 0,2N водного раствора соляной кислоты и подвергают снова ультрафильтрованию, в течение которого значение рН поддерживают на уровне 4,0. Растворитель концентрируют до общего объема 1,5 литра и отфильтровывают через фильтр (0,45 мкм). Полученный продукт смешивают с этанолом (9 литров), после чего при перемешивании добавляют по каплям 3М рассол (35 мл). Полученный осадок собирают фильтрованием и промывают последовательно этанолом и ацетоном, концентрируют при пониженном давлении, что дает целевое соединение (54,9 г) в виде порошка бледно-желтого цвета. Содержание по гидрохлориду 10-(3'-аминопропилокси)-7-этил-(20S)-камптотецина составило 4,2%, как подтверждено по поглощению при 367,5 нм. В соответствии с анализом с помощью GPC (гельпроникающая хроматография) средний молекулярный вес целевого продукта составил 121 кДа и степень распределения (мв/мн) составила 1,47.(3) Sodium salt of CM-dextran (CM-degree = 0.44, 50 g) was dissolved in water (2.5 liters), and the pH was adjusted to 5.0 with a 0.2N aqueous hydrochloric acid solution with stirring at a temperature of 15 ° C and 7-ethyl-10- [3 '- (glycyl-glycyl-glycylamino) propyloxy] - (20S) -camptothecin hydrochloride (4.01 g) was added to it. To this mixture was added 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride (50 g), while the pH of the reaction solution was maintained at 5.0-5.5 with 0.2N hydrochloric acid. The mixture reacts at a temperature of 15 ° C with stirring for an hour, after which it is diluted with purified water to a total volume of 10 liters. While the pH value is maintained above 4.0, low molecular weight fractions are removed using an ultrafiltration module (ACP-1010 manufactured by Asahi Kasei Industries, Ltd.) and the pH is adjusted to 8 with 0.1 N aqueous sodium hydroxide solution and then treated with an ion exchange resin MSC-I (Na form, manufactured by Dowex). Fractions containing the desired compounds are concentrated and passed through a filter (0.45 μm). The resulting product was mixed with ethanol (10 liters) with stirring, and 3M brine (40 ml) was added dropwise with stirring. The resulting precipitate was collected by filtration and dissolved in purified water (21 liters). The pH of the solution was adjusted to pH 4.0 with a 0.2N aqueous hydrochloric acid solution and again subjected to ultrafiltration, during which the pH was maintained at 4.0. The solvent is concentrated to a total volume of 1.5 liters and filtered through a filter (0.45 μm). The resulting product was mixed with ethanol (9 liters), after which 3M brine (35 ml) was added dropwise with stirring. The resulting precipitate was collected by filtration and washed successively with ethanol and acetone, concentrated under reduced pressure to give the desired compound (54.9 g) as a pale yellow powder. The 10- (3'-aminopropyloxy) -7-ethyl- (20S) -camptothecin hydrochloride content was 4.2%, as confirmed by absorbance at 367.5 nm. According to analysis using GPC (gel permeation chromatography), the average molecular weight of the target product was 121 kDa and the degree of distribution (mv / mn) was 1.47.
Препарат 2Drug 2
Получение СМ-декстран-13-[(2'R,3'S)-3'-N-трет-бутоксикарбонил-3'-фенил-2'-O-L-фенилаланил-глицил-изосеринил]-10-деацил-баккатина III:Preparation of CM-Dextran-13 - [(2'R, 3'S) -3'-N-tert-butoxycarbonyl-3'-phenyl-2'-O-L-phenylalanyl-glycyl-isoserinyl] -10-deacyl-baccatin III:
(Bz обозначает бензоильную группу, в дальнейшем то же самое)(Bz denotes a benzoyl group, hereinafter the same)
СМ-декстран (2008 мг, СМ-степень: 0,47, средний молекулярный вес: 170 кДа) растворяют при перемешивании в очищенной воде (90 мл), после чего добавляют мезилат 13-[(2'R,3'S)-3'-N-трет-бутоксикарбонил-3'-фенил-2'-O-L-фенилаланил-глицил-изосеринил]-10-деацил-баккатина III (119 мг) и диметилформамид (90 мл), а затем смесь перемешивают до растворения. К смеси добавляют при перемешивании 2-этокси-1(2Н)-хинолинкарбоновую кислоту (4,0 г) и смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. К реакционному раствору при перемешивании добавляют этанол (720 мл), а затем при перемешивании по каплям 3М рассол (1,8 мл). Осадок собирают центрифугированием и растворяют в воде (200 мл), при этом значение рН раствора доводят до величины 7 с помощью 0,2N водного раствора гидроксида натрия. Раствор выливают при перемешивании в этанол (800 мл) и к нему добавляют при перемешивании по каплям ЗМ рассол (4 мл). Полученный осадок отделяют центрифугированием и очищают тем же самым способом, как в разделе Препарат 1-(3), что дает целевое соединение (600 мг) в виде порошка белого цвета. Содержание активного вещества 2,4% (УФ способ, (λ=276 нм)CM-dextran (2008 mg, CM-grade: 0.47, average molecular weight: 170 kDa) was dissolved with stirring in purified water (90 ml), after which 13 - [(2'R, 3'S) -3 'mesylate was added. -N-tert-butoxycarbonyl-3'-phenyl-2'-OL-phenylalanyl-glycyl-isoserinyl] -10-deacyl-baccatin III (119 mg) and dimethylformamide (90 ml), and then the mixture was stirred until dissolved. 2-Ethoxy-1 (2H) -quinolinecarboxylic acid (4.0 g) was added to the mixture with stirring, and the mixture was stirred at room temperature overnight. Ethanol (720 ml) was added to the reaction solution with stirring, and then 3M brine (1.8 ml) was added dropwise with stirring. The precipitate was collected by centrifugation and dissolved in water (200 ml), while the pH of the solution was adjusted to a value of 7 with a 0.2N aqueous sodium hydroxide solution. The solution was poured into ethanol with stirring (800 ml) and 3M brine (4 ml) was added dropwise with stirring. The precipitate obtained is separated by centrifugation and purified in the same manner as in Preparation 1- (3), which gives the target compound (600 mg) in the form of a white powder. The active substance content of 2.4% (UV method, (λ = 276 nm)
Препарат 3Drug 3
Получение СМ-декстран-2'-O-фенилаланил-глицил-таксола:Obtaining CM-dextran-2'-O-phenylalanyl-glycyl-taxol:
СМ-декстран (1,294g, СМ-степень: 0,47, средний молекулярный вес: 170 кДа) растворяют при перемешивании в очищенной воде (70 мл), а затем туда добавляют мезилат 2'-O-фенил-аланил-глицилтаксола (77 мг) и диметилформамид (70 мл) и смесь перемешивают до растворения. К смеси при перемешивании добавляют 2-этокси-1(2Н)-хинолинкарбоновую кислоту (2,59 г), после чего проводят реакцию при перемешивании в течение ночи. Реакционный раствор добавляют к этанолу (700 мл) при перемешивании, и туда же при перемешивании добавляют по каплям 3М рассол (1,4 мл). Осадок отделяют центрифугированием, растворяют в воде (240 мл) и смешивают с этанолом (1200 мл) при перемешивании. К смеси при перемешивании добавляют по каплям 3М рассол (4,8 мл) для осаждения. Тем же самым способом осаждение повторяют трижды, что дает целевой продукт (746 мг) в виде порошка белого цвета. Содержание активного вещества 4,8% (УФ способ (λ=273 нм).CM-dextran (1.294g, CM-degree: 0.47, average molecular weight: 170 kDa) was dissolved with stirring in purified water (70 ml), and then 2'-O-phenyl-alanyl-glycyltaxol mesylate was added thereto (77 mg) and dimethylformamide (70 ml) and the mixture was stirred until dissolved. To the mixture, 2-ethoxy-1 (2H) -quinolinecarboxylic acid (2.59 g) was added with stirring, after which the reaction was carried out with stirring overnight. The reaction solution was added to ethanol (700 ml) with stirring, and 3M brine (1.4 ml) was added dropwise thereto with stirring. The precipitate was separated by centrifugation, dissolved in water (240 ml) and mixed with ethanol (1200 ml) with stirring. 3M brine (4.8 ml) was added dropwise to the mixture with stirring to precipitate. In the same way, the precipitation is repeated three times, which gives the target product (746 mg) in the form of a white powder. The active substance content of 4.8% (UV method (λ = 273 nm).
Препарат 4Drug 4
Получение карбоксиметилдекстран-полиспирт-(1S,9S)-1-(глицил-глицил-L-фенилаланил-глициламино)-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]-пирано [3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-диона:Preparation of carboxymethyldextran-polyalcohol- (1S, 9S) -1- (glycyl-glycyl-L-phenylalanyl-glycylamino) -9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H -benzo [de] -pyrano [3 ', 4': 6,7] indolisino [1,2-b] quinoline-10,13 (9H, 15H) -dione:
(1) Получение (1S,9S)-1-(трет-бутоксикарбонил-глицил-глицил-L-фенилаланил-глициламино)-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано-[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-диона:(1) Preparation of (1S, 9S) -1- (tert-butoxycarbonyl-glycyl-glycyl-L-phenylalanyl-glycylamino) -9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl- 1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4': 6.7] indolisino [1,2-b] quinoline-10,13 (9H, 15H) dione:
К раствору гидрохлорида (1S,9S)-1-амино-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано-[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-диона (167 мг; 0,354 ммоль), трет-бутоксикарбонил-глицил-глицил-L-фенилаланил-глицина (463 мг; 1,06 ммоль) и моногидрата 1-гидроксибензотриазола (НОВТ) (143 мг; 1,06 ммоль) в диметилформамиде (ДМФА) (10 мл) добавляют гидрохлорид 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида (EDC) (270 мг; 1,42 ммоль), триэтиламин (148 мкл; 1,06 ммоль) и 4-диметиламинопиридин (DMAP) (5 мг; 0,04 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 15 часов и растворитель концентрируют при пониженном давлении. Осадок растворяют в хлороформе и смесь промывают, высушивают, и растворитель выпаривают при пониженном давлении. Осадок очищают с помощью колоночной хроматогафии на силикагеле (растворитель-хлороформ: метанол=от 50:1 до 10:1), что дает указанное соединение (228 мг, выход 75%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета.To a solution of (1S, 9S) -1-amino-9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4 hydrochloride ': 6,7] indolisino [1,2-b] quinolin-10,13 (9H, 15H) -dione (167 mg; 0.354 mmol), tert-butoxycarbonyl-glycyl-glycyl-L-phenylalanyl-glycine (463 mg ; 1.06 mmol) and 1-hydroxybenzotriazole monohydrate (HOBT) (143 mg; 1.06 mmol) in dimethylformamide (DMF) (10 ml) add 1- (3-dimethylaminopropyl) -3-ethylcarbodiimide hydrochloride (EDC) (270 mg; 1.42 mmol), triethylamine (148 μl; 1.06 mmol) and 4-dimethylaminopyridine (DMAP) (5 mg; 0.04 mmol). The reaction mixture was stirred at room temperature for 15 hours and the solvent was concentrated under reduced pressure. The precipitate was dissolved in chloroform and the mixture was washed, dried, and the solvent was evaporated under reduced pressure. The precipitate was purified by silica gel column chromatography (solvent-chloroform: methanol = 50: 1 to 10: 1), which afforded the title compound (228 mg, 75% yield) as a pale yellow solid.
ИК (Nujol); 3290, 1710, 1655 см-1 IR (Nujol); 3290, 1710, 1655 cm -1
ESI-MS; 854 (М+Н)ESI-MS; 854 (M + H)
(2) Получение (1S,9S)-1-(глицил-глицил-L-фенил-аланил-глициламино)-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-диона:(2) Preparation of (1S, 9S) -1- (glycyl-glycyl-L-phenyl-alanyl-glycylamino) -9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4': 6,7] indolisino [1,2-b] quinoline-10,13 (9H, 15H) -dione:
К раствору (1S,9S)-1-(трет-бутоксикарбонил-глицил-глицил-L-фенилаланил-глициламино)-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано-[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-диона (220 мг; 0,258 ммоль) в диоксане (4 мл) добавляют 4N раствор хлористого водорода в диоксане (6 мл) при перемешивании в ледяной бане. Смесь продолжают перемешивать при комнатной температуре в течение 16 часов. К реакционной смеси добавляют диэтиловый эфир (30 мл) и смесь вновь перемешивают при комнатной температуре в течение часа. Осадок собирают фильтрованием и высушивают, что дает названное соединение (176 мг, выход 86%) в виде порошка желтого цвета.To a solution of (1S, 9S) -1- (tert-butoxycarbonyl-glycyl-glycyl-L-phenylalanyl-glycylamino) -9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4': 6,7] indolisino [1,2-b] quinoline-10.13 (9H, 15H) -dione (220 mg; 0.258 mmol) in dioxane (4 ml) add a 4N solution of hydrogen chloride in dioxane (6 ml) with stirring in an ice bath. The mixture was continued to stir at room temperature for 16 hours. Diethyl ether (30 ml) was added to the reaction mixture, and the mixture was again stirred at room temperature for one hour. The precipitate was collected by filtration and dried to give the title compound (176 mg, 86% yield) as a yellow powder.
ИК (Nujol); 3250, 1745, 1660, 1605, 1535 см-1 IR (Nujol); 3250, 1745, 1660, 1605, 1535 cm -1
ESI-MS; 754 (М+Н)ESI-MS; 754 (M + H)
(3) Получение декстрана полиспирта (РА-Декстран):(3) Obtaining dextran polyalcohol (RA-Dextran):
Ацетатный буфер (0,1 М, рН 5,5, 1000 мл) помещают в трехгорлую круглодонную колбу (емкостью 3 литра). Декстран Т-500® (10,0 г, от фирмы Amersham Pharmacia Biotech АВ) добавляют небольшими порциями к буферу, указанному выше в течение 30 минут при комнатной температуре. Смесь перемешивают примерно 30 минут, пока раствор не станет прозрачным, а затем смесь охлаждают при температуре 5°С (температура внутри) в бане.Acetate buffer (0.1 M, pH 5.5, 1000 ml) was placed in a three-necked round-bottom flask (3 liter capacity). Dextran T-500® (10.0 g, from Amersham Pharmacia Biotech AB) was added in small portions to the buffer indicated above for 30 minutes at room temperature. The mixture was stirred for about 30 minutes until the solution became clear, and then the mixture was cooled at 5 ° C (internal temperature) in a bath.
Отдельно в колбу (емкостью 1 литр) добавляют периодат натрия (33,0 г) и воду (1000 мл), и смесь перемешивают при комнатной температуре, а затем охлаждают при температуре 5°С.Separately, sodium periodate (33.0 g) and water (1000 ml) were added to the flask (1 liter capacity), and the mixture was stirred at room temperature and then cooled at 5 ° C.
К указанному выше раствору декстрана добавляют при перемешивании указанный выше раствор периодата натрия при температуре 5°С, и смесь оставляют при температуре 5°С в течение 5 дней в темном месте. Избыток периодата натрия удаляют с помощью добавления этиленгликоля (10 мл), после чего смесь дополнительно перемешивают при температуре 5°С в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждают до температуры 3°С и к ней добавляют 8М водный раствор гидроксида натрия, при этом температуру реакции поддерживают ниже 6°С (пока значение рН реакционной смеси не станет выше рН, равного 9). Затем к реакционной смеси добавляют боргидрид натрия (14 г) небольшими порциями при перемешивании, после чего смесь перемешивают при температуре 5°С в течение ночи. Для того, чтобы удалить избыток боргидрида натрия, значение рН реакционной смеси снижают до рН ниже 5,5 путем добавления к ней уксусной кислоты при температуре от 3 до 6°С, и смесь затем перемешивают в течение еще 2 часов. Значение рН реакционной смеси доводят примерно до 7,8 с помощью 8М водного раствора гидроксида натрия. Смесь подвергают диализу против воды (мембрана Spectora®/Por 3, предел исключения по молекулярному весу <3500) и лиофилизации, что дает декстран полиспирт (8,34 г) в виде аморфного порошка.To the above dextran solution, the above sodium periodate solution was added with stirring at a temperature of 5 ° C, and the mixture was left at 5 ° C for 5 days in a dark place. Excess sodium periodate was removed by adding ethylene glycol (10 ml), after which the mixture was further stirred at 5 ° C for 2 hours. The reaction mixture is cooled to a temperature of 3 ° C and an 8M aqueous solution of sodium hydroxide is added to it, while the reaction temperature is kept below 6 ° C (until the pH of the reaction mixture becomes higher than pH 9). Then, sodium borohydride (14 g) was added to the reaction mixture in small portions with stirring, after which the mixture was stirred at 5 ° C overnight. In order to remove excess sodium borohydride, the pH of the reaction mixture was reduced to a pH below 5.5 by adding acetic acid to it at a temperature of from 3 to 6 ° C, and the mixture was then stirred for another 2 hours. The pH of the reaction mixture was adjusted to about 7.8 with an 8M aqueous sodium hydroxide solution. The mixture is dialyzed against water (Spectora® / Por 3 membrane, molecular weight exclusion limit <3500) and lyophilized to give dextran polyalcohol (8.34 g) as an amorphous powder.
(4) Получение карбоксиметилдекстрана полиспирта (СМ-РА-Декстран):(4) Obtaining carboxymethyldextran polyalcohol (SM-RA-Dextran):
Воду (155 мл) помещают в трехгорлую круглодонную колбу (емкостью 500 мл) и к ней добавляют при перемешивании декстран полиспирт (5,18 г) при комнатной температуре в течение более 10 минут. Смесь перемешивают примерно от 10 до 30 минут, пока она не станет прозрачной, а затем к раствору декстрана полиспирта при перемешивании небольшими порциями добавляют гидроксид натрия (в гранулах, 97,0%, 21,8 г), при этом температуру внутри поддерживают на уровне от 30 до 40°С на ледяной бане. Колбу с реакционной смесью помещают на баню и смесь перемешивают при температуре 30°С. При перемешивании небольшими порциями добавляют монохлоруксусную кислоту (31,1 г) в реакционную смесь при температуре от 30 до 40°С. После завершения добавления смесь перемешивают при температуре 30°С в бане в течение 20 часов. Затем реакционную смесь охлаждают в бане со льдом и нейтрализуют, прибавляя уксусную кислоту при перемешивании (то есть, значение рН доводят до величины ниже 9).Water (155 ml) was placed in a three-necked round-bottom flask (500 ml capacity) and dextran polyalcohol (5.18 g) was added with stirring at room temperature for more than 10 minutes. The mixture is stirred for about 10 to 30 minutes until it becomes transparent, and then sodium hydroxide (in granules, 97.0%, 21.8 g) is added in small portions to a solution of the polyalcohol dextran, while the temperature inside is maintained at a level from 30 to 40 ° C in an ice bath. The flask with the reaction mixture was placed in a bath and the mixture was stirred at a temperature of 30 ° C. While stirring in small portions, monochloracetic acid (31.1 g) is added to the reaction mixture at a temperature of 30 to 40 ° C. After complete addition, the mixture is stirred at a temperature of 30 ° C in a bath for 20 hours. Then the reaction mixture is cooled in an ice bath and neutralized by adding acetic acid with stirring (that is, the pH is adjusted to below 9).
К смеси добавляют воду (160 мл) и подвергают диализу против воды (мембрана Spectora®/Por 3, предел исключения по молекулярному весу <3500), и лиофилизации, что дает карбоксиметилдекстран полиспирт (6,53 г) в виде аморфного порошка.Water (160 ml) was added to the mixture and dialyzed against water (Spectora® / Por 3 membrane, molecular weight exclusion limit <3500), and lyophilized to give a carboxymethyldextran polyalcohol (6.53 g) as an amorphous powder.
(5) Получение карбоксиметилдекстран-полиспирт-(1S,9S)-1-(глицил-глицил-L-фенилаланил-глициламино)-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-диона:(5) Preparation of carboxymethyldextran-polyalcohol- (1S, 9S) -1- (glycyl-glycyl-L-phenylalanyl-glycylamino) -9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl- 1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4': 6,7] indolisino [1,2-b] quinoline-10,13 (9H, 15H) dione:
Воду (40 мл) помещают в круглодонную колбу (емкостью 100 мл) и к ней добавляют карбоксиметилдекстран полиспирт (1,0 г) при комнатной температуре при перемешивании в течение 5 минут. Затем смесь перемешивают около 30 минут, пока смесь не станет прозрачной. К смеси добавляют при перемешивании раствор (1S,9S)-1-(глицил-глицил-L-фенилаланил-глициламино)-9-этил-5-фтор-2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[de]пирано[3',4':6,7]индолизино[1,2-b]хинолин-10,13(9Н,15Н)-диона в диметилформамиде (100 мг/10 мл) и затем диметилформамид (15 мл), после этого смесь перемешивают еще 10 минут. К смеси добавляют по каплям при перемешивании раствор 2-этокси-1-этоксикарбонил-1,2-дигидрохинолина (EEDQ) в диметилформамиде (1,0 г/10 мл) при комнатной температуре и смесь дополнительно перемешивают в течение 18 часов. Реакционную смесь подвергают диализу (мембрана Spectora®/Por 3, предел исключения по молекулярному весу <3500) и затем очищают с помощью катионообменной колонки (колонка BioRad AG® МР-50, Na-форма, 30 мл). Основную фракцию подвергают диализу (мембрана Spectora®/Por 3, предел исключения по молекулярному весу <3500) и лиофилизации, что дает сырой продукт, который растирают с ацетоном, собирают фильтрованием и высушивают, с получением целевого продукта (904 мг) в виде порошка бледно-желтого цвета.Water (40 ml) was placed in a round bottom flask (100 ml capacity) and carboxymethyldextran polyalcohol (1.0 g) was added to it at room temperature with stirring for 5 minutes. Then the mixture is stirred for about 30 minutes until the mixture becomes clear. To the mixture, a solution of (1S, 9S) -1- (glycyl-glycyl-L-phenylalanyl-glycylamino) -9-ethyl-5-fluoro-2,3-dihydro-9-hydroxy-4-methyl-1H, 12H-benzo [de] pyrano [3 ', 4': 6,7] indolisino [1,2-b] quinoline-10,13 (9H, 15H) -dione in dimethylformamide (100 mg / 10 ml) and then dimethylformamide (15 ml), after which the mixture is stirred for another 10 minutes. To the mixture, a solution of 2-ethoxy-1-ethoxycarbonyl-1,2-dihydroquinoline (EEDQ) in dimethylformamide (1.0 g / 10 ml) was added dropwise with stirring at room temperature, and the mixture was further stirred for 18 hours. The reaction mixture was dialyzed (Spectora® / Por 3 membrane, molecular weight exclusion limit <3500) and then purified using a cation exchange column (BioRad AG® MP-50 column, Na form, 30 ml). The main fraction is subjected to dialysis (Spectora® / Por 3 membrane, molecular weight exclusion limit <3500) and lyophilization, which gives a crude product, which is triturated with acetone, collected by filtration and dried, to obtain the desired product (904 mg) as a pale powder -yellow color.
Промышленная применимостьIndustrial applicability
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может в высокой степени накапливаться в таком месте, как лимфатический узел или печень, на которые может распространиться раковая опухоль, и действовать подавляюще на рост раковых клеток, не действуя при этом на нормальные клетки и, следовательно, фармацевтическая композиция настоящего изобретения полезна для ингибирования метастазов, особенно для ингибирования метастазов лимфатического узла или метастазов печени, или для предотвращения рецидива злокачественной опухоли.The pharmaceutical composition of the present invention can highly accumulate in a place such as a lymph node or liver, which can spread to a cancerous tumor, and suppress the growth of cancer cells without affecting normal cells and, therefore, the pharmaceutical composition of the present invention useful for inhibiting metastases, especially for inhibiting lymph node metastases or liver metastases, or to prevent recurrence of a malignant tumor.
Кроме того, настоящая фармацевтическая композиция может демонстрировать свое действие не только перед началом образования метастазов, но также и после того, как они образовались. Таким образом, настоящая фармацевтическая композиция также полезна для ингибирования метастазов или предотвращения рецидива злокачественной опухоли после местной терапии (например, хирургии, лучевой терапии, термотерапии, криотерапии, лазер-сжигающей терапии и т.д.).In addition, the present pharmaceutical composition can demonstrate its effect not only before the formation of metastases, but also after they are formed. Thus, the present pharmaceutical composition is also useful for inhibiting metastases or preventing the recurrence of a malignant tumor after topical therapy (e.g., surgery, radiation therapy, thermotherapy, cryotherapy, laser burning therapy, etc.).
Claims (9)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001249717 | 2001-08-21 | ||
| JP2001-249717 | 2001-08-21 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2004108141A RU2004108141A (en) | 2005-04-20 |
| RU2275913C2 true RU2275913C2 (en) | 2006-05-10 |
Family
ID=19078678
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2004108141/15A RU2275913C2 (en) | 2001-08-21 | 2002-08-16 | Pharmaceutical compositions comprising polysaccharide conjugates for inhibition of metastasis or prophylaxis in malignant tumor relapse |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1418947A1 (en) |
| KR (1) | KR20040027972A (en) |
| CN (1) | CN100372570C (en) |
| AR (1) | AR035137A1 (en) |
| AU (1) | AU2002328093B2 (en) |
| BR (1) | BR0212036A (en) |
| CA (1) | CA2457056C (en) |
| HU (1) | HUP0401351A3 (en) |
| IL (1) | IL160148A0 (en) |
| MX (1) | MXPA04001599A (en) |
| NO (1) | NO20041194L (en) |
| NZ (1) | NZ530947A (en) |
| PL (1) | PL368319A1 (en) |
| RU (1) | RU2275913C2 (en) |
| TW (1) | TWI313609B (en) |
| UA (1) | UA75450C2 (en) |
| WO (1) | WO2003015826A1 (en) |
| ZA (1) | ZA200400917B (en) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2012166903A1 (en) * | 2011-06-02 | 2012-12-06 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and uses for ex vivo tissue culture systems |
| RU2476437C2 (en) * | 2006-09-26 | 2013-02-27 | Адосиа | Dextrane functionalised by hydrophobic amino acids |
| US8647861B2 (en) | 2008-07-16 | 2014-02-11 | Children's Medical Center Corporation | Organ mimic device with microchannels and methods of use and manufacturing thereof |
| RU2575460C2 (en) * | 2010-02-09 | 2016-02-20 | Адосиа | Anionic polysaccharides, functionalised by at least two hydrophobic groups, bound with at least trivalent intermediate grouping |
Families Citing this family (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| TW200306314A (en) * | 2002-04-16 | 2003-11-16 | Tanabe Seiyaku Co | Liquid preparation comprising camptothecin derivative and pharmaceutical composition producible by lyophilizing the preparation |
| PL221351B1 (en) | 2012-03-14 | 2016-03-31 | Politechnika Warszawska | Method for obtaining polysaccharide nanoparticles |
| EP3342785B1 (en) * | 2012-10-11 | 2019-12-25 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Linkers for antibody-drug conjugates |
| US9872924B2 (en) | 2012-10-19 | 2018-01-23 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Antibody-drug conjugate produced by binding through linker having hydrophilic structure |
| EP4212552A1 (en) | 2014-01-31 | 2023-07-19 | Daiichi Sankyo Company, Limited | Anti-her2 antibody-drug conjugate |
| SG10202101887WA (en) | 2015-05-04 | 2021-03-30 | Pfizer | Group b streptococcus polysaccharide-protein conjugates, methods for producing conjugates, immunogenic compositions comprising conjugates, and uses thereof |
| WO2017002776A1 (en) | 2015-06-29 | 2017-01-05 | 第一三共株式会社 | Method for selectively manufacturing antibody-drug conjugate |
| JPWO2018110515A1 (en) | 2016-12-12 | 2019-10-24 | 第一三共株式会社 | Combination of antibody-drug conjugate and immune checkpoint inhibitor |
| TWI780104B (en) | 2017-01-17 | 2022-10-11 | 日商第一三共股份有限公司 | Anti gpr20 antibodies and anti gpr20 antibody-drug conjugates, as well as manufacturing method and use thereof |
| TWI794230B (en) | 2017-05-15 | 2023-03-01 | 日商第一三共股份有限公司 | Anti cdh6 antibodies and anti cdh6 antibody drug conjugates, as well as manufacturing method thereof |
| BR112020003646A2 (en) | 2017-08-31 | 2020-09-01 | Daiichi Sankyo Company, Limited | crystals, methods for producing crystals and an antibody-drug conjugate, and, salt. |
| CN117838880A (en) | 2017-08-31 | 2024-04-09 | 第一三共株式会社 | New method for preparing antibody-drug conjugate |
| US20210221910A1 (en) | 2018-05-18 | 2021-07-22 | Glycotope Gmbh | Anti-muc1 antibody |
| CN109481691A (en) * | 2018-11-20 | 2019-03-19 | 珠海天香苑生物科技发展股份有限公司 | Gemcitabine-carboxymethyl polysaccharide conjugate, preparation method and its usage |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5688931A (en) * | 1993-02-26 | 1997-11-18 | Drug Delivery System Institute, Ltd. | Polysaccharide derivatives and drug carriers |
| SG50747A1 (en) * | 1995-08-02 | 1998-07-20 | Tanabe Seiyaku Co | Comptothecin derivatives |
| CA2192725C (en) * | 1995-12-28 | 2004-04-20 | Kenji Tsujihara | Camptothecin derivatives |
| DE69734709D1 (en) * | 1996-04-15 | 2005-12-29 | Asahi Chemical Ind | MEDICINAL COMPLEXES CONTAINING TAXAN COMPOUNDS OR STEROIDS |
| TW527183B (en) * | 1996-06-06 | 2003-04-11 | Daiichi Seiyaku Co | Drug complex |
| CN1058038C (en) * | 1996-12-31 | 2000-11-01 | 中国科学院感光化学研究所 | Low contract photo-solidification cladding material, its prepn. method and use |
| EA003398B1 (en) * | 1998-05-22 | 2003-04-24 | Дайити Фармасьютикал Ко., Лтд. | Drug complex with polymeric carrier |
-
2002
- 2002-08-14 TW TW091118260A patent/TWI313609B/en not_active IP Right Cessation
- 2002-08-15 AR ARP020103077A patent/AR035137A1/en unknown
- 2002-08-16 CN CNB028163176A patent/CN100372570C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-08-16 NZ NZ530947A patent/NZ530947A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-08-16 IL IL16014802A patent/IL160148A0/en unknown
- 2002-08-16 UA UA2004032071A patent/UA75450C2/en unknown
- 2002-08-16 MX MXPA04001599A patent/MXPA04001599A/en unknown
- 2002-08-16 AU AU2002328093A patent/AU2002328093B2/en not_active Ceased
- 2002-08-16 RU RU2004108141/15A patent/RU2275913C2/en not_active IP Right Cessation
- 2002-08-16 WO PCT/JP2002/008309 patent/WO2003015826A1/en active IP Right Grant
- 2002-08-16 KR KR10-2004-7002566A patent/KR20040027972A/en not_active Application Discontinuation
- 2002-08-16 BR BR0212036-4A patent/BR0212036A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-08-16 CA CA002457056A patent/CA2457056C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-08-16 EP EP02762786A patent/EP1418947A1/en not_active Withdrawn
- 2002-08-16 PL PL02368319A patent/PL368319A1/en not_active Application Discontinuation
- 2002-08-16 HU HU0401351A patent/HUP0401351A3/en unknown
-
2004
- 2004-02-04 ZA ZA200400917A patent/ZA200400917B/en unknown
- 2004-03-19 NO NO20041194A patent/NO20041194L/en not_active Application Discontinuation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| SCHECHTER В., ARNON R. et al. Liver accumulation of TNP-modified streptavidin and avidin: potential use for targeted radio- and chemotherapy. - J Drug Target. 1996; 4(3):171-9. * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2476437C2 (en) * | 2006-09-26 | 2013-02-27 | Адосиа | Dextrane functionalised by hydrophobic amino acids |
| US8647861B2 (en) | 2008-07-16 | 2014-02-11 | Children's Medical Center Corporation | Organ mimic device with microchannels and methods of use and manufacturing thereof |
| RU2575460C2 (en) * | 2010-02-09 | 2016-02-20 | Адосиа | Anionic polysaccharides, functionalised by at least two hydrophobic groups, bound with at least trivalent intermediate grouping |
| WO2012166903A1 (en) * | 2011-06-02 | 2012-12-06 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and uses for ex vivo tissue culture systems |
| US9951313B2 (en) | 2011-06-02 | 2018-04-24 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and uses for ex vivo tissue culture systems |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO20041194L (en) | 2004-03-19 |
| IL160148A0 (en) | 2004-07-25 |
| KR20040027972A (en) | 2004-04-01 |
| MXPA04001599A (en) | 2004-07-08 |
| HUP0401351A2 (en) | 2004-12-28 |
| CN1545423A (en) | 2004-11-10 |
| HUP0401351A3 (en) | 2011-02-28 |
| CN100372570C (en) | 2008-03-05 |
| ZA200400917B (en) | 2004-08-25 |
| BR0212036A (en) | 2004-08-17 |
| AU2002328093B2 (en) | 2005-05-05 |
| UA75450C2 (en) | 2006-04-17 |
| PL368319A1 (en) | 2005-03-21 |
| TWI313609B (en) | 2009-08-21 |
| RU2004108141A (en) | 2005-04-20 |
| EP1418947A1 (en) | 2004-05-19 |
| CA2457056A1 (en) | 2003-02-27 |
| NZ530947A (en) | 2006-04-28 |
| WO2003015826A1 (en) | 2003-02-27 |
| CA2457056C (en) | 2008-07-22 |
| AR035137A1 (en) | 2004-04-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2275913C2 (en) | Pharmaceutical compositions comprising polysaccharide conjugates for inhibition of metastasis or prophylaxis in malignant tumor relapse | |
| ES2544481T3 (en) | Taxanes covalently bound to hyaluronic acid | |
| KR100352545B1 (en) | Camptothecin derivatives | |
| KR100387191B1 (en) | Camptothecin derivatives | |
| US6436912B1 (en) | Drug complexes | |
| JP4717016B2 (en) | O, O'-amidmalonate and N, O-amidmalonate platinum complexes | |
| AU2002328093A1 (en) | Pharmaceutical compositions comprising polysaccharide conjugates for inhibiting the metastsis or preventing the recurrence of maligant tumor | |
| JP6957629B2 (en) | Non-linear self-destructive linker and its conjugate | |
| US20120041167A1 (en) | Poly(glutamic acid)-drug conjugate with an amino acid as a linker | |
| JP2714402B2 (en) | Cancer metastasis inhibitor | |
| KR20160064726A (en) | Conjugate of Cell Penetrating Peptides-Anti-cancer Agent and Composition Comprising the Same | |
| CN103044521A (en) | Aspartase-targeted activated adriamycin derivative as well as preparation method and application thereof | |
| ES2906599T3 (en) | Functionalized hyaluronic acid or a derivative thereof in the treatment of inflammatory conditions | |
| US20060052288A1 (en) | Pharmaceutical composition for inhibiting the metastasis or preventing the recurrence of malignant tumor | |
| JPH1171280A (en) | Medicine composition | |
| JP2000506502A (en) | Hyaluronic acid receptor binding agents and methods of use | |
| RU2697551C2 (en) | New derivatives of peg | |
| CN113164474B (en) | Water-soluble polymer derivative of Venetok | |
| JP2003137818A (en) | Composition for metastasis control or recurrence prevention of carcinoma | |
| JP2019156771A (en) | Pemetrexed-conjugated hyaluronan | |
| TWI727858B (en) | Water-soluble polymer derivatives of Venetoclax | |
| WO2015075647A1 (en) | Conjugate comprising folic acid and indole-3-carbinol for medical use | |
| MX2014010209A (en) | Body cavity effusion suppressant. | |
| JPH10330261A (en) | Agent for treatment of cancer | |
| JPH10273488A (en) | Medicine composition |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100817 |