RU2192464C2 - Strain of poultry newcastle virus disease psevdopestis avium used for vaccine preparing - Google Patents
Strain of poultry newcastle virus disease psevdopestis avium used for vaccine preparing Download PDFInfo
- Publication number
- RU2192464C2 RU2192464C2 RU2000130491A RU2000130491A RU2192464C2 RU 2192464 C2 RU2192464 C2 RU 2192464C2 RU 2000130491 A RU2000130491 A RU 2000130491A RU 2000130491 A RU2000130491 A RU 2000130491A RU 2192464 C2 RU2192464 C2 RU 2192464C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- vaccine
- virus
- poultry
- vniivvim
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к области вирусологии, в частности к получению штамма вируса ньюкаслской болезни "М-ВНИИВВиМ" и может быть использован в научно-исследовательских учреждениях и различных отраслях биологической промышленности для производства вирусвакцины против ньюкаслской болезни птиц. The invention relates to the field of virology, in particular to the production of the Newcastle disease virus strain "M-VNIIVViM" and can be used in research institutions and various branches of the biological industry for the production of virus vaccine against Newcastle disease of birds.
Имеется несколько штаммов для приготовления живых вакцин для специфической профилактики ньюкаслской болезни (НБ), такие как "Ла-Сота", "B1", "Бор-74 ВГНКИ", "Н" (В.И.Сюрин и др., Вирусные болезни животных, 1998, М., ВНИИТИБП, с. 214-232), "ГАМ-61" (В.И.Смоленский, Средства и методы специфической профилактики болезней птиц вирусной этиологии, докт. дисс., 1999 г.). Штаммы "Ла-Сота", "Бор 74". "В 1" в дозе (1-5)•106ЕД50/см3 при интраназальном введении вызывают образование вирусспецифических антител (≥3 log2) и защищают не менее 80% птицы от заболевания. Однако указанные штаммы размножаются только в куриных эмбрионах и для этой цели используют СПФ-эмбрионы.There are several strains for the preparation of live vaccines for the specific prevention of Newcastle disease (NB), such as La Sota, B1, Bor-74 VGNKI, N (V.I.Syurin et al., Viral diseases animals, 1998, M., VNIITIBP, pp. 214-232), "GAM-61" (V.I. Smolensky, Means and methods of specific prophylaxis of bird diseases of viral etiology, doct. diss., 1999). The strains of La Sota, Bor 74. "In 1" at a dose of (1-5) • 10 6 IU 50 / cm 3 upon intranasal administration cause the formation of virus-specific antibodies (≥3 log 2 ) and protect at least 80% of the bird from the disease. However, these strains reproduce only in chicken embryos and SPF embryos are used for this purpose.
Производимая в РФ вакцина из мезогенного штамма "Н" хорошо зарекомендовала себя в условиях эпизоотической нестабильности и неблагополучия, однако ее применение ограничено в связи с остаточной вирулентностью для цыплят младших возрастных групп. The vaccine produced in the Russian Federation from the mesogenic strain "N" has proven itself in conditions of epizootic instability and distress, but its use is limited due to residual virulence for chickens of younger age groups.
Штамм ГАМ-61 был получен путем аттенуации вирулентного вируса НБ перемежающимися пассажами на первичной культуре клеток почки теленка и куриных эмбрионах и является штаммом максимально "поздней" селекции. Вирус размножался в первичных (куриных, утиных, перепелиных фибробластах, почке эмбрионов, тестикулах КРС) и перевиваемых линиях (Hela, Hер-1, СПЭВ). При этом уровень гемагглютинации находился в диапазоне 2-4 log2, инфекционный титр составлял 5,0-6,0 lg ТЦД50/см3.Strain GAM-61 was obtained by attenuating the virulent NB virus with alternating passages in the primary culture of calf kidney cells and chicken embryos and is a strain of the most “late” selection. The virus multiplied in primary (chicken, duck, quail fibroblasts, kidney embryos, cattle testicles) and transplanted lines (Hela, Hep-1, SPEV). The level of hemagglutination was in the range of 2-4 log 2 , the infectious titer was 5.0-6.0 lg TCD 50 / cm 3 .
После 3 циклов пассирования увеличение титра вируса не наблюдали. Таким образом первичные и перевиваемые культуры клеток оказались малочувствительными и непригодными для его накопления с целью изготовления вакцин. Поэтому оптимальной системой для репродукции вируса являются куриные эмбрионы, в которых вирус накапливался в титре 8,5-9,5 lg ЭЛД50/см3 с гемагглютинирующим титром 8,0 log2. Стоимость одного СПФ эмбриона, который затрачивается для изготовления приблизительно 200 доз вакцины, составляет 47 руб. 50 коп.After 3 passaging cycles, no increase in virus titer was observed. Thus, primary and transplantable cell cultures turned out to be insensitive and unsuitable for its accumulation for the purpose of manufacturing vaccines. Therefore, the optimal system for the reproduction of the virus is chicken embryos, in which the virus accumulated in the titer of 8.5-9.5 lg ELD 50 / cm 3 with a hemagglutinating titer of 8.0 log 2 . The cost of one SPF embryo, which is expended for the manufacture of approximately 200 doses of the vaccine, is 47 rubles. 50 kopecks
Целью изобретения является получение нового штамма вируса НБ "поздней" селекции, размножающегося с необходимой для приготовления вакцины инфекционной и гемагглютинирующей активностью в технологичных перевиваемых культурах клеток и сохраняющего иммуногенность. The aim of the invention is to obtain a new strain of NB virus of "late" selection, multiplying with the necessary for the preparation of the vaccine infectious and hemagglutinating activity in technological transplantable cell cultures and preserving immunogenicity.
Штамм вируса ньюкаслской болезни "М-ВНИИВВиМ" получен из эпизоотического вируса, выделенного от бройлерных цыплят в птицеводческом хозяйстве Мурманской области селекцией по признаку максимального накопления в перевиваемой культуре клеток ВНК-21/13. Исходный выделенный штамм не был патогенен для цыплят, но инокуляция 20%-ной суспензии селезенки павших в хозяйстве цыплят в разведении 10-3 вызывала гибель 50% куриных эмбрионов через 60-84 часа, который был идентифицирован как мезогенный штамм. Инфекционный титр составлял 8,5-9,0 lg ЭЛД50/см3, а гемагглютинирующий титр - 1:256-1:512 (8,0-9,0 log2).The strain of the Newcastle disease virus M-VNIIVViM was obtained from an epizootic virus isolated from broiler chickens in the poultry farm of the Murmansk region by selection based on the maximum accumulation of VNK-21/13 cells in the transplanted culture. The initial isolated strain was not pathogenic for chickens, but inoculation of a 20% suspension of the spleen of dead chickens on a farm of 10 -3 dilution caused the death of 50% of chicken embryos after 60-84 hours, which was identified as a mesogenic strain. The infectious titer was 8.5–9.0 log ELD 50 / cm 3 and the hemagglutinating titer was 1: 256–1: 512 (8.0–9.0 log 2 ).
После первых 4 пассажей выделенного в хозяйстве штамма в клетках ВНК-21/13 наблюдалось четко выраженное цитопатогенное действие вируса, который накапливался в титрах 7,0-7,5 lg ТЦД50/см3 (титрование в культуре клеток) или 8,0-8,5 lg ЭЛД50/см3 (титрование на куриных эмбрионах), а гемагглютинирующий титр возрастал с 1:4 в первом пассаже до 1:32 в 4 пассаже. Начиная с 5 пассажа, накопление вируса в клетках ВНК-21/13 стабилизировалось и составляло 7,0-7,5 lg ТЦД50/см3 или 8,0-8,5 lg ЭЛД50/см3 а гемагглютинирующий титр - 1:256-1:512. Этому штамму вируса НБ, размножающемуся в перевиваемой культуре клеток, было присвоено название штамм "М-ВННИВВиМ" и он был депонирован в Коллекции штаммов ВНИИВВиМ за 2225 от 01.09.00.After the first 4 passages of the strain isolated on the farm, BHK-21/13 cells showed a distinct cytopathogenic effect of the virus, which accumulated in titers of 7.0-7.5 lg TCD 50 / cm 3 (titration in cell culture) or 8.0- 8.5 lg ELD 50 / cm 3 (titration on chicken embryos), and the hemagglutinating titer increased from 1: 4 in the first passage to 1:32 in the 4th passage. Starting from passage 5, the virus accumulation in BHK-21/13 cells stabilized and amounted to 7.0-7.5 lg TCD 50 / cm 3 or 8.0-8.5 lg ELD 50 / cm 3 and the hemagglutinating titer - 1: 256-1: 512. This strain of NB virus propagating in transplantable cell culture was given the name strain M-VNNIVViM and it was deposited in the VNIIVViM Collection of strains for 2225 from 09/01/00.
При инокуляции 10-дневных эмбрионов штаммом "М-ВНИИВВиМ" в дозе 10-1 в объеме 0,1 см3/к.э. последний накапливался в эмбрионах до 8,0-8,5 lg ЭЛД50, гемагглютинирующий титр при этом составлял 1:256-1:512 (8,0-9,0 log2).When inoculating 10-day-old embryos with the strain M-VNIIVViM at a dose of 10 -1 in a volume of 0.1 cm 3 / ke. the latter accumulated in embryos up to 8.0-8.5 lg ELD 50 ; the hemagglutinating titer in this case was 1: 256-1: 512 (8.0-9.0 log 2 ).
При интраназальном введении интактным бройлерам и цыплятам яичной породы индуцировал у них образование гуморальных антител в среднем титре 4,7 log2. Штамм защищал 75-100% птицы, вакцинированной в дозе (1-3)•106 ТЦД50 в объеме 0,1-0,5 см3/голову от контрольного заражения вирулентным вирусом НБ (штамм Т-53) в дозе (3-5)•103 ЭЛД50/голову. Стабильность данного признака: размножение в культуре клеток ВПК-21/13 с сохранением высокой иммуногенности не изменялось на протяжении 15 пассажей (срок наблюдения).When intranasally administered to intact broilers and egg chickens, they induced the formation of humoral antibodies in them with an average titer of 4.7 log 2 . The strain protected 75-100% of the bird vaccinated at a dose of (1-3) • 10 6 TCD 50 in the amount of 0.1-0.5 cm 3 / head from the challenge of infection with virulent NB virus (strain T-53) in a dose (3 -5) • 10 3 ELD 50 / head. The stability of this trait: propagation in the culture of VPK-21/13 cells with maintaining high immunogenicity did not change during 15 passages (observation period).
Полученный штамм на уровне 6-15 пассажей может служить живой культуральной вакциной для иммунизации птицы против ньюкаслской болезни в птицеводческих хозяйствах. Цыплят прививают интраназально с 15-дневного возраста в дозе 3•105ТЦД50/гол. в объеме 0,1 см3 однократно. Иммунитет наступает на 14 сутки после вакцинации. Проверка экспериментальных серий вакцины показала, что она ареактогенна, безвредна и иммуногенна. Однократная вакцинация птицы обеспечивает 75-100% защиту от контрольного заражения эпизоотическим вирусом НБ в дозе 3-5 тыс. ЭЛД50/гол.The resulting strain at the level of 6-15 passages can serve as a live culture vaccine for immunization of birds against Newcastle disease in poultry farms. Chicks are inoculated intranasally from 15 days of age at a dose of 3 • 10 5 TCD 50 / goal. in a volume of 0.1 cm 3 once. Immunity occurs on the 14th day after vaccination. Verification of the experimental vaccine series showed that it is areactogenic, harmless and immunogenic. A single vaccination of poultry provides 75-100% protection against control infection with epizootic NB virus in a dose of 3-5 thousand ELD 50 / goal.
Штамм "М ВНИИВВиМ" характеризуется следующими признаками:
Таксономия. Штамм М ВНИИВВиМ относится к семейству Paramixovirider род Rubulavirus.Strain "M VNIIVViM" is characterized by the following features:
Taxonomy. Strain M VNIIVViM belongs to the family Paramixovirider genus Rubulavirus.
Маркерные характеристики. Штамм оказывает цитопатическое действие на перевиваемые культуры клеток ВНК-21/13, ПСГК и накапливаются в титрах 7,0-7,5 lg ТЦД50/см3 с гемагглютинирующим титром - 1/16-1/32. Культуральный вирус хорошо размножается в 9-10-дневных куриных эмбрионах, зараженных в аллантоисную полость. Биологическая активность через 48-72 часа инкубации при 37oС достигает титра 8,0-8,5 lg ЭЛД50/см3.Marker characteristics. The strain has a cytopathic effect on transplantable cell cultures of BHK-21/13, PSHC and accumulate in titers of 7.0-7.5 lg TCD 50 / cm 3 with hemagglutinating titer - 1 / 16-1 / 32. The culture virus multiplies well in 9-10-day-old chicken embryos infected in the allantoic cavity. The biological activity after 48-72 hours of incubation at 37 o With reaches a titer of 8.0-8.5 lg ELD 50 / cm 3 .
Вирулентные свойства. Индекс интрацеребральной патогенности составляет 1,4. Индекс внутривенной патогенности составляет 0,8. Величина среднего времени гибели куриных эмбрионов, вызванная минимальной летальной дозой, составляет 80-95 часов. Virulent properties. The intracerebral pathogenicity index is 1.4. The intravenous pathogenicity index is 0.8. The average time of death of chicken embryos caused by the minimum lethal dose is 80-95 hours.
Антигенные свойства. Видовая специфичность штамма "М ВНИИВВиМ" определена в реакции задержки гемагглютинации со специфическими сыворотками к вирусу ньюкаслской болезни, ГП и ССЯ-76 по общепринятой методике и твердофазным иммуноферментным анализом (ТФ ИФЛ) с использованием моноклональных антител (МАт) к рибонуклеопротеиду (РНП) вирусов НБ и ГП. Установлено, что штамм "М ВНИИВВиМ" антигенно родственен парамиксовирусу первой антигенной подгруппы (ПМВ-1). При введении в организм птиц вызывает формирование иммунитета. Антигемагглютинирующие антитела накапливаются в титрах 4,0-5,5 лог2. Однократно привитые цыплята вакциной из штамма "М ВНИИВВиМ" интраназально и внутримышечно через 7-14 дней были иммунны в 100% случаев.Antigenic properties. The species specificity of strain “M VNIIVViM” was determined in the reaction of delaying hemagglutination with specific sera to the Newcastle disease virus, GP and SSYA-76 according to the generally accepted method and enzyme-linked immunosorbent assay (TF IFL) using monoclonal antibodies (Mabs) to ribonucleoprotein V (RNP) and GP. It was established that the strain "M VNIIVViM" is antigenically related to paramyxovirus of the first antigenic subgroup (PMV-1). When introduced into the body of birds, it causes the formation of immunity. Anti-hemagglutinating antibodies accumulate in the titers of 4.0-5.5 log 2 . Once vaccinated chickens with the vaccine from the strain "M VNIIVViM" intranasally and intramuscularly after 7-14 days were immune in 100% of cases.
Иммуногенность. При контрольном заражении вакцинированная птица интраназально в дозе 0,3 млн. ТЦД50/см3 и внутримышечно в дозе 0,15 млн. ТЦД50/см3 была невосприимчива к заболеванию.Immunogenicity During infection control, the vaccinated bird intranasally at a dose of 0.3 million TCD 50 / cm 3 and intramuscularly at a dose of 0.15 million TCD 50 / cm 3 was immune to the disease.
Серологические свойства. Штамм "М ВНИИВВиМ" вируса НБ обладает способностью агглютинировать эритроциты птиц, животных и человека. Гемагглютинирующий титр 1/512-1/1024. Элюция вирусов с эритроцитов наступает через 30-40 минут. Serological properties. The strain "M VNIIVViM" virus NB has the ability to agglutinate red blood cells of birds, animals and humans. Hemagglutinating titer 1 / 512-1 / 1024. Elution of viruses from red blood cells occurs after 30-40 minutes.
Тропизм. Выраженным тропизмом штамм не обладает. Преимущественно вирус размножается в клетках головного мозга, селезенке и трахее. Tropism. The strain does not have a pronounced tropism. Mostly the virus multiplies in brain cells, spleen and trachea.
Безвредность. Штамм "М ВНИИВВиМ" вируса НБ безвреден для цыплят всех возрастных групп при энтеральном и парентеральном введении в 10-100-кратной профилактической дозе. Harmlessness. The strain "M VNIIVViM" of the NB virus is harmless to chickens of all age groups with enteral and parenteral administration in a 10-100-fold prophylactic dose.
Стандартные условия выращивания. Вирус выращивают в перевиваемых культурах клеток ВНК-21 или ПСГК (ПСГК-60, ПСГК-С85) стационарным или роллерным способом культивирования в поддерживающей среде Игла (MEM) при 37o±1oC. Множественность заражения составляет 0,1-10 ТЦД50/кл. При наступлении 80% ЦПД, инфицированную культуру замораживают и хранят при -40oС.Standard growing conditions. The virus is grown in transplantable cell cultures of BHK-21 or PSGK (PSGK-60, PSGK-C85) by stationary or roller method of cultivation in a supporting medium Needle (MEM) at 37 o ± 1 o C. The multiplicity of infection is 0.1-10 TCD 50 / cl. At the onset of 80% of the CPP, the infected culture is frozen and stored at -40 o C.
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000130491A RU2192464C2 (en) | 2000-12-06 | 2000-12-06 | Strain of poultry newcastle virus disease psevdopestis avium used for vaccine preparing |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2000130491A RU2192464C2 (en) | 2000-12-06 | 2000-12-06 | Strain of poultry newcastle virus disease psevdopestis avium used for vaccine preparing |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2192464C2 true RU2192464C2 (en) | 2002-11-10 |
| RU2000130491A RU2000130491A (en) | 2002-12-27 |
Family
ID=20243002
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2000130491A RU2192464C2 (en) | 2000-12-06 | 2000-12-06 | Strain of poultry newcastle virus disease psevdopestis avium used for vaccine preparing |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2192464C2 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2821028C1 (en) * | 2024-02-13 | 2024-06-17 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" ФГБУ "ВНИИЗЖ" | Newcastle disease virus "vniizzh g7" strain for production of biopreparations for diagnosis and specific prevention of newcastle disease of birds |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4251509A (en) * | 1980-01-31 | 1981-02-17 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Dry particulate vaccine for oral administration |
| US5427791A (en) * | 1992-08-05 | 1995-06-27 | Regents Of The University Of Minnesota | Embryonal vaccine against Newcastle disease |
| RU2055890C1 (en) * | 1994-04-29 | 1996-03-10 | Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов | Strain paramyxovirus which is used for producing vaccine against newcasl hen disease |
| RU2154104C1 (en) * | 1999-04-26 | 2000-08-10 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Cold-adapted strain "h" of newcastle disease virus used as interferon inductor |
-
2000
- 2000-12-06 RU RU2000130491A patent/RU2192464C2/en active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4251509A (en) * | 1980-01-31 | 1981-02-17 | Wisconsin Alumni Research Foundation | Dry particulate vaccine for oral administration |
| US5427791A (en) * | 1992-08-05 | 1995-06-27 | Regents Of The University Of Minnesota | Embryonal vaccine against Newcastle disease |
| RU2055890C1 (en) * | 1994-04-29 | 1996-03-10 | Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов | Strain paramyxovirus which is used for producing vaccine against newcasl hen disease |
| RU2154104C1 (en) * | 1999-04-26 | 2000-08-10 | Государственное унитарное предприятие "Иммунопрепарат" | Cold-adapted strain "h" of newcastle disease virus used as interferon inductor |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| АГЕЕВА Л.С. и др. Биологические свойства штаммов вируса псевдочумы птиц. Труды ВГНКИ. - М.: 1971, т. 17, с.24-34. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2821028C1 (en) * | 2024-02-13 | 2024-06-17 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Федеральный центр охраны здоровья животных" ФГБУ "ВНИИЗЖ" | Newcastle disease virus "vniizzh g7" strain for production of biopreparations for diagnosis and specific prevention of newcastle disease of birds |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4481188A (en) | Vaccines | |
| US6086892A (en) | Poultry vaccine | |
| US4053583A (en) | Live newcastle disease virus vaccines | |
| US7462479B2 (en) | Infectious bronchitis virus vaccine | |
| RU2528750C2 (en) | Recombinant vaccine of inactivated viral vector | |
| JPS6121924B2 (en) | ||
| IE51122B1 (en) | Infectious-bronchitis vaccines for poultry,combined infectious-bronchitis vaccines,process for preparing such vaccines,method for preventing infectious bronchitis,and infectious-bronchitis virus strains | |
| CA1159366A (en) | Vaccine against newcastle fowl disease and method for preparing same | |
| RU2126268C1 (en) | Vaccine for prophylaxis of chicken bursa infectious sickness, lyophilized viral composition, method of chicken protection from this disease and a method of live vaccine preparing | |
| JP3945842B2 (en) | Attenuated Newcastle disease virus vaccine | |
| RU2192464C2 (en) | Strain of poultry newcastle virus disease psevdopestis avium used for vaccine preparing | |
| KR102656435B1 (en) | Novel fowl adenovirus and Fowl adenovirus polyvalent vaccine comprising the same as effective component | |
| KR101757752B1 (en) | Infectious bronchitis virus k40/09 strain, and vaccine for infectious bronchitis using same | |
| CN102140441B (en) | Bird flu vaccine by using attenuated vaccinia Tian Tan as vector | |
| JP2010065027A (en) | Inactivated vaccine to fish viral hemorrhagic septicemia and formula for the same | |
| Taylor et al. | History | |
| HU204439B (en) | Process for producing living virus-vaccines against newcastle-disease and newcastle-disease and infective bronchitis and for producing virus of newcastle-disease | |
| KR810001063B1 (en) | Process for preparing improved live new castle disease virus vaccine | |
| RU2236255C1 (en) | Cultural virus-vaccine against newcastle disease | |
| Taylor et al. | History of vaccines and vaccination | |
| RU2054038C1 (en) | Virus strain of infectious bursal disease in poultry | |
| KR102830382B1 (en) | Infectious Bronchitis virus attenuated strain and Vaccine composition comprising the same | |
| MANZOOR et al. | Comparative Immunogenic Response of Live Vaccine of Lasota and Mukteswar Strains of Newcastle Disease Virus by Different Routes of Inoculation in Layer Chicken | |
| Huygelen et al. | Studies on the Growth of a Vaccine Strain (Komarov) of Newcastle Disease Virus in Bovine Kidney Tissue Culture and Preparation of a Vaccine | |
| RU2108385C1 (en) | Attenuated strain of carnivorous plague virus pestis carnivorum |