RU2123183C1

RU2123183C1 - Method of estimation of nonimmunological manifestations of pollinosis

Info

Publication number: RU2123183C1
Application number: RU96101868A
Authority: RU
Inventors: Х.Х. Ганцева; Н.Н. Красногорская; В.Н. Гордеев; Э.Ф. Легушс
Original assignee: Уфимский государственный авиационный технический университет
Priority date: 1996-01-31
Filing date: 1996-01-31
Publication date: 1998-12-10

Abstract

FIELD: medicine, clinical allergology. SUBSTANCE: method involves determination of self-diffusion coefficient of peripheral blood erythrocytes in health men that can be used for estimation of nonimmunological manifestation of pollinosis. EFFECT: simplified method, decreased difficulty. 1 cl, 5 ex

Description

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к клинической аллергологии, и может быть использовано в комплексной диагностике поллинозов. The present invention relates to medicine, namely to clinical allergology, and can be used in the comprehensive diagnosis of pollinosis.

Известен способ иммунологической диагностики поллинозов путем кожного тестирования аллергенами больных, сенсибилизированных к соответствующей пыльце. Недостатком этого способа является то, что при тестировании in vivo различными аллергенами возможны местные органные и общие реакции, происходит дополнительная сенсибилизация, есть угроза переноса вирусных заболеваний (инфекционный гепатит, СПИД и т.д.). A known method of immunological diagnosis of hay fever by skin testing with allergens of patients sensitized to the corresponding pollen. The disadvantage of this method is that when testing in vivo with various allergens, local organ and general reactions are possible, additional sensitization occurs, there is a threat of transmission of viral diseases (infectious hepatitis, AIDS, etc.).

Известен также способ диагностики аллергических заболеваний, в том числе и поллинозов, путем исследования общего анализа крови на содержание зозинофилов и оценка его с нормальной лейкоцитарной формулой у здоровых людей. Недостатком этого способа является то, что в стадии ремиссии содержание зозинофилов в крови больных людей соответствует норме, что может привести к ошибке в диагнозе. There is also a method of diagnosing allergic diseases, including hay fever, by examining a general blood test for the content of zosinophils and evaluating it with a normal leukocyte formula in healthy people. The disadvantage of this method is that in the remission stage the content of zosinophils in the blood of sick people is normal, which can lead to an error in the diagnosis.

Наиболее близким является выбранный в качестве прототипа способ диагностики поллинозов, в соответствии с которым исследуют эритроциты периферической крови, сравнивая их размер и форму у больных и здоровых людей. The closest is the selected as a prototype method for the diagnosis of pollinosis, according to which peripheral blood red blood cells are examined, comparing their size and shape in patients and healthy people.

Недостатком данного способа является то, что он в силу своей сложности и трудоемкости не может быть использован в широкой медицинской практике, так как проводится методами электронной микроскопии с последующим визуальным анализом морфоэритрограмм. The disadvantage of this method is that due to its complexity and complexity it cannot be used in wide medical practice, as it is carried out by electron microscopy with subsequent visual analysis of morphoerythrograms.

Морфоэритрограмму исследуют с помощью светового микроскопа "Биолам" при увеличении в 600 раз, цитометрию проводят с помощью бинокулярной насадки с микрометром, средний объем 1 эритроцита вычисляют делением величины гематокрита на число эритроцитов в 1 мл крови. Для электронной микроскопии эритроциты фиксируют в 4% растворе параформальдегида с последующей дофиксацией в 2% растворе четырехокиси осмия. Материал заливают в смесь эпона в аралдитом. Ультратонкие срезы готовят на ультратоме IKB-III, контрастируют уранилацетатом и реактивом Рейнольда и просматривают в трансмиссионном электронном микроскопе ЭВМ-100 Л. The morphoerythrogram is examined using a Biolam light microscope with a magnification of 600 times, cytometry is performed using a binocular nozzle with a micrometer, the average volume of 1 red blood cell is calculated by dividing the hematocrit by the number of red blood cells in 1 ml of blood. For electron microscopy, red blood cells are fixed in a 4% solution of paraformaldehyde, followed by additional fixation in a 2% solution of osmium tetroxide. Material is poured into a mixture of epon in araldite. Ultrathin sections are prepared on an IKB-III ultratome, contrasted with uranyl acetate and Reynold's reagent and viewed in an EVM-100 L transmission electron microscope.

Задачей, на решение которой направлено дальнейшее изобретение, является упрощение и снижение трудоемкости оценки неиммунологических проявлений поллинозов, за счет определения коэффициента самодиффузии эритроцитов крови. The task to which the further invention is directed, is to simplify and reduce the complexity of evaluating non-immunological manifestations of hay fever by determining the coefficient of self-diffusion of red blood cells.

Поставленная задача достигается тем, что в известный способ оценки неиммунологических механизмов поллинозов, в соответствии с которым исследуют эритроциты периферической крови, в отличие от прототипа введены операции определения коэффициента самодиффузии эритроцитов крови больных и сравнения его с коэффициентом самодиффузии эритроцитов крови здоровых людей. This object is achieved by the fact that in the known method for evaluating the non-immunological mechanisms of hay fever, according to which peripheral blood erythrocytes are examined, in contrast to the prototype, operations for determining the self-diffusion coefficient of blood erythrocytes of patients and comparing it with the self-diffusion coefficient of blood red blood cells of healthy people are introduced.

Введение операции определения коэффициента самодиффузии эритроцитов крови, проводимой методом импульсного ядерно-магнитного резонанса (ЯМР), позволяет упростить диагностику поллинозов и снизить трудоемкость исследования, так как отсутствуют сложные подготовительные операции по подготовке исследуемой крови на электронном микроскопе, а также визуальный анализ морфоэритрограмм. The introduction of the operation to determine the coefficient of self-diffusion of blood red blood cells, carried out by the method of pulsed nuclear magnetic resonance (NMR), allows to simplify the diagnosis of pollinosis and reduce the complexity of the study, since there are no complicated preparatory operations for the preparation of the test blood using an electron microscope, as well as a visual analysis of morphoerythrograms.

Способ реализуется следующим образом. The method is implemented as follows.

Центрифугируется взятая для анализа гепаринизованная кровь. Затем эритроциты крови анализируют методом импульсной ЯМР-спектроскопии. Если при td(V)= 40 мс коэффициент диффузии имеет минимум, то человек, обследование которого проводилось, болен поллинозом. The heparinized blood taken for analysis is centrifuged. Then, red blood cells are analyzed by pulsed NMR spectroscopy. If at td (V) = 40 ms the diffusion coefficient has a minimum, then the person whose examination was carried out is ill with hay fever.

Пример 1. Больной Васильев В.Ф., 51 г.р. (ИБ N 7057/93). Example 1. Patient Vasiliev V.F., 51 D.O. (IB N 7057/93).

DS: Поллиноз I и III типа с риноконъюнктивальным синдромом, фарингитом, евстахеитом в стадии ремиссии. DS: Pollinosis of type I and III with rhinoconjunctival syndrome, pharyngitis, eustacheitis in remission.

Болен 12 лет, специфическое лечение не получал. Sick for 12 years, did not receive specific treatment.

В периоде сезонного контакта (апрель-май и июль-август) появляется зуд в глазах, слезотечение, ринорея, чихание, боли в глотке, заложенность в ушах. Аналогичные симптомы появляются при употреблении в пищу яблок, орехов, моркови, вишни, земляники. Кожное тестирование: береза - 4(+), дуб - 1(+), ольха - 3(+), лещина - 3(+), лебеда - 1(+), кукуруза -1(+). Остальные пыльцевые пробы отрицательные. Провокационные нозальные пробы положительные на березу, ольху, лещины, лебеду. In the period of seasonal contact (April-May and July-August), itching in the eyes, lacrimation, rhinorrhea, sneezing, pain in the throat, and stuffy ears appear. Similar symptoms appear when eating apples, nuts, carrots, cherries, strawberries. Skin testing: birch - 4 (+), oak - 1 (+), alder - 3 (+), hazel - 3 (+), quinoa - 1 (+), corn -1 (+). The remaining pollen samples are negative. Provocative nosal tests are positive for birch, alder, hazel, quinoa.

Общий анализ крови в стадии ремиссии - эритроциты - 4,8•10¹² /л, H_b - 150 г/л, α- 5,5•10⁹/л, эозинофиллы - 1%, палочкоядерные нейтродиллы - 4%, сегментоядерные - 73%, лимфоциты - 19%, моноциты - 3%, СОЭ - 7 мм/час.Complete blood count in remission - red blood cells - 4.8 • 10 ¹² / l, H _b - 150 g / l, α-5.5 • 10 ⁹ / l, eosinophils - 1%, stab neutrodilles - 4%, segmented - 73%, lymphocytes - 19%, monocytes - 3%, ESR - 7 mm / hour.

Данные исследования коэффициента самодиффузии эритроцитов даны в табл.1. The data of the study of the coefficient of self-diffusion of red blood cells are given in table 1.

Пример 2. Больная Сатаева З.В., 43 г. (ИБ N 2081/93). Example 2. Patient Sataeva Z. Century, 43 g. (IB N 2081/93).

DS: Поллиноз 1 тип с риноконъюнктивольным синдромом, евстахеитом в стадии ремиссии. DS: Pollinosis type 1 with rhinoconjunctivol syndrome, eustacheitis in remission.

Больна 2 сезона. В конце апреля - мая появляется риноконъюнктивальный синдром, шум в ушах, заложенность. Продукты питания все переносит хорошо. Специфическое лечение не получала. Кожное тестирование: береза - 3(+), дуб - 1(+), ольха - 2(+), лещина - 1(+). Провокационные пробы положительные с березой. Общий анализ крови - эритроциты - 4,1•10¹²/л, H_b - 127 г/л, лейкоциты - 5,6•10⁹/л, эозинофиллы - 2%, палочкоядерные - 4%, сегментоядерные - 62%, лимфоциты - 27%, моноциты - 5%, СОЭ - 7 мм/час.Sick 2 seasons. At the end of April - May rhinoconjunctival syndrome appears, tinnitus, congestion. Food transfers everything well. I did not receive specific treatment. Skin testing: birch - 3 (+), oak - 1 (+), alder - 2 (+), hazel - 1 (+). Provocative tests are positive with birch. Complete blood count - erythrocytes - 4.1 • 10 ¹² / l, H _b - 127 g / l, white blood cells - 5.6 • 10 ⁹ / l, eosinophils - 2%, stab - 4%, segmented - 62%, lymphocytes - 27%, monocytes - 5%, ESR - 7 mm / hour.

Коэффициенты самодиффузии эритроцитов даны в табл.2. The coefficients of self-diffusion of red blood cells are given in table.2.

Пример 3. Больная Сахаутдинова Л.И., 33 г. (ИБ N 2050/93). Example 3. Patient Sakhautdinova LI, 33 g. (IB N 2050/93).

DS: Поллиноз III тип с риноконъюнктивальным синдромом. Больна 7 лет. В конце июля - августе появляется сезонно риноконъюнктивальный синдром, прогрессирующий по степени тяжести процесса. Все продукты питания переносит хорошо. Кожное тестирование: лебеда - I(+), кукуруза - 1(+), подсолнух, сорные травы - 3(+), полынь - 3(+), ежа - 1(+), тимофеевка - 2(+). Из провокационных положительна проба с полынью. DS: Pollinosis III type with rhinoconjunctival syndrome. Sick 7 years. In late July - August, a seasonal rhinoconjunctival syndrome appears, progressing in severity of the process. He tolerates all foods well. Skin testing: quinoa - I (+), corn - 1 (+), sunflower, weed herbs - 3 (+), wormwood - 3 (+), hedgehog - 1 (+), timothy - 2 (+). From provocative positive test with wormwood.

Общий анализ крови - эритроциты - 3,96•10¹²/л, H_b - 126 г/л, лейкоциты - 7,5•10⁹/л, эозинофиллы - 2%, палочкоядерные - 7%, сегментоядерные - 70%, лимфоциты - 19%, моноциты - 2%, СОЭ - 6 мм/час.Complete blood count - erythrocytes - 3.96 • 10 ¹² / l, H _b - 126 g / l, white blood cells - 7.5 • 10 ⁹ / l, eosinophils - 2%, stab - 7%, segmented - 70%, lymphocytes - 19%, monocytes - 2%, ESR - 6 mm / hour.

Коэффициенты самодиффузии эритроцитов даны в табл. 3. The coefficients of self-diffusion of red blood cells are given in table. 3.

Пример 4. Больной Шайхулов И.Л., 18 л. (ИБ N 6913/93)
DS: Поллиноз I тип с риноконъюнктивальным синдромом, ремиссия.Example 4. Patient Shaykhulov I.L., 18 l. (IB N 6913/93)
DS: Pollinosis type I with rhinoconjunctival syndrome, remission.

Кожное тестирование: лещина - 2(+), береза - 3(+). Skin testing: hazel - 2 (+), birch - 3 (+).

Общий анализ крови - эритроциты 5,00•10¹²/л, H_b - 150 г/л, лейкоциты - 6,0•10⁹/л, эозинофиллы - 1%, палочкоядерные - 6%, сегментоядерные - 68%, лимфоциты - 21%, моноциты - 4%, СОЭ - 5 мм/час.Complete blood count - erythrocytes 5.00 • 10 ¹² / l, H _b - 150 g / l, white blood cells - 6.0 • 10 ⁹ / l, eosinophils - 1%, stab - 6%, segmented - 68%, lymphocytes - 21%, monocytes - 4%, ESR - 5 mm / hour.

Коэффициенты самодиффузии эритроцитов даны в табл. 4. The coefficients of self-diffusion of red blood cells are given in table. 4.

Пример 5. Больная Ягофарова Т.Р., 34 г. (ИБ N 2101/93)
DS: Поллиноз I тип с риноконъюнктивальным синдромом. Ремиссия.Example 5. Patient Yagofarova TR, 34 g. (IB N 2101/93)
DS: Pollinosis type I with rhinoconjunctival syndrome. Remission.

Кожное тестирование: ольха - 1(+), береза (++). Провокационные назальные пробы положительны на ольху, березу, одуванчик, полынь. Skin testing: alder - 1 (+), birch (++). Provocative nasal tests are positive for alder, birch, dandelion, wormwood.

Общий анализ крови - эритроциты - 4,20•10¹²/л, H_b - 121 г/л, лейкоциты - 4,5•10⁹/л, эозинофиллы - 2%, палочкоядерные - 4%, сегментоядерные 68%, лимфоциты - 22%, моноциты - 4%, СОЭ - 8 мм/час.Complete blood count - erythrocytes - 4.20 • 10 ¹² / l, H _b - 121 g / l, white blood cells - 4.5 • 10 ⁹ / l, eosinophils - 2%, stab - 4%, segmented 68%, lymphocytes - 22%, monocytes - 4%, ESR - 8 mm / hour.

Коэффициенты самодиффузии эритроцитов представлены в табл.5. The coefficients of self-diffusion of red blood cells are presented in table 5.

Предлагаемый способ оценки неиммунологических проявлений поллинозов сравнительно прост, не требует больших трудозатрат, объективен, что дает возможность проводить его в более широких масштабах для обеспечения комплексной терапии. Предлагаемый способ позволяет вести обследование больных в местностях, удаленных от установки импульсного ЯМР-спектрометра (в селах и малых городах), поскольку гепаринизованная кровь сохраняет стабильно свои диффузионные характеристики в течение недели при хранении в условиях холодильника (3 - 5^oC).The proposed method for assessing the non-immunological manifestations of pollinosis is relatively simple, does not require large labor costs, is objective, which makes it possible to carry out it on a larger scale to provide complex therapy. The proposed method allows the examination of patients in areas remote from the installation of a pulsed NMR spectrometer (in villages and small towns), since heparinized blood stably maintains its diffusion characteristics for a week when stored in a refrigerator (3 - 5 ^o C).

Использование методики важно для верификации диагноза, раннего выявления аллергозов и формирования групп риска. Using the technique is important for verifying the diagnosis, early detection of allergies and the formation of risk groups.

Способ применен в клинике для диагностики у 83 больных поллинозом. The method was used in a clinic for diagnosis in 83 patients with hay fever.

Claims

A method for assessing non-immunological manifestations of pollinosis, according to which peripheral blood erythrocytes are examined, characterized in that they determine the self-diffusion coefficient of blood red blood cells and compare it with the self-diffusion coefficient of blood red blood cells in healthy people, and if at td (V) = 40 ms the self-diffusion coefficient has a minimum, then a person is sick with hay fever.