RU2104299C1 - Способ получения сухих бактериальных препаратов - Google Patents
Способ получения сухих бактериальных препаратов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2104299C1 RU2104299C1 RU96110483A RU96110483A RU2104299C1 RU 2104299 C1 RU2104299 C1 RU 2104299C1 RU 96110483 A RU96110483 A RU 96110483A RU 96110483 A RU96110483 A RU 96110483A RU 2104299 C1 RU2104299 C1 RU 2104299C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- microorganisms
- sorbent
- suspension
- drying
- silicon dioxide
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии, касается производства сухих бакпрепаратов. Сущность изобретения: способ включает получение культуры микроорганизмов в виде суспензии, смешивание с сорбентом - высокодисперсным порошком диоксида кремния при соотношении суспензии микроорганизмов к диоксиду кремния как 2 : 1, сушку на открытом воздухе при температуре 27-32oC и тонкую диспергацию полученной смеси, 2 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, а именно к производству сухих микробных препаратов.
В производстве сухих препаратов основными этапами являются смешивание суспензии микроорганизмов с адсорбентом влаги и последующая сушка в определенных условиях. Основным требованием к адсорбенту влаги является его инертность по отношению к микроорганизмам, что должно способствовать сохранению нативных свойств бактериального препарата.
Известен способ получения сухих бактериальных препаратов, включающий выращивание и концентрирование культуры микроорганизмов, смешивание с сорбентом - глинистым минералом и последующее распылительное высушивание. При этом имеет место повышенный выход жизнеспособных клеток [1].
Общим существенным признаком известного и предложенного технических решений является выращивание культуры микроорганизмов, смешивание ее с сорбентом и последующая сушка.
Причиной, препятствующей достижению технического результата, является недостаточно высокий выход жизнеспособных клеток, а применяемый сорбент не улучшает выживаемости клеток.
Эта причина частично устраняется в способе получения, сухих бактериальных препаратов, выбранном, авторами в качестве прототипа и являющимся наиболее близким к предложенному по технической сущности и достигаемому эффекту. Известный способ [2] включает выращивание культуры микроорганизмов на питательной среде, смешивание ее с сорбентом и сушку. При этом в качестве сорбента выбирают порошкообразную окись алюминия, а затем дополнительно вводят другой сорбент, связывающий воду в меньшей степени, чем основной сорбент. После этого производят досушивание смеси в сушильном шкафу при 105oC в течение четырех часов. Отмечается, что полученный по этому способу препарат микроорганизмов сохраняет нативные свойства, выживаемость микроорганизмов повышается по отношению к контролю и составила от 29 до 43%.
Этот способ является наиболее близким к предложенному. Общими существенными признаками известного и предложенного технических решений является выращивание микроорганизмов на питательной среде, смешивание полученной суспензии микроорганизмов с адсорбентом и последующая сушка.
Причинами, препятствующими достижению технического результата, являются:
- использование двух сорбентов, двухступенчатое их смешивание с культуральной жидкостью;
- недостаточно высокий выход жизнеспособных клеток микроорганизмов;
- снижение выживаемости микроорганизмов в течение месяца почти на 20%.
- использование двух сорбентов, двухступенчатое их смешивание с культуральной жидкостью;
- недостаточно высокий выход жизнеспособных клеток микроорганизмов;
- снижение выживаемости микроорганизмов в течение месяца почти на 20%.
В основу изобретения поставлена задача усовершенствования способа получения сухих бактериальных препаратов, в котором за счет выбора сорбента обеспечивается высокий выход жизнеспособных микроорганизмов, препарат сохраняет высокий титр клеток в течение достаточно длительного периода времени, независимо от вида микроорганизмов.
Поставленная задача достигается тем, что в способе получения сухих бактериальных препаратов, включающим выращивание культуры микроорганизмов в виде суспензии, смешивание ее с сорбентом и сушку, согласно изобретению, суспензию микроорганизмов смешивают с высокодисперсным порошком диоксида кремния, в соотношении 2 : 1, сушку ведут на воздухе и полученную смесь диспергируют до тонкодисперсного состояния.
Установлено, что в результате осуществления изобретения в объеме его существенных признаков за счет выбора сорбента исключается операция введения второго сорбента дополнительно вдобавок к основному, а собственно сушку возможно вести на открытом воздухе при температуре, близкой к комнатной. При этом полученный бактериальный препарат сохраняет высокий титр жизнеспособных бактерий в течение полугода и более. Добавление в качестве сорбента высокодисперсного порошка диоксида кремния позволяет сохранить нативные свойства микроорганизмов и получить биопрепараты, удобные для применения со 100%-ным сохранением высоких титров бактерий. Выбранное соотношение суспензии микроорганизмов к высокодисперсному порошкообразному диоксиду кремния как 2 : 1 необходимо и достаточно для образования удобной для сушки консистенции получаемой смеси. Увеличение количества порошка диоксида кремния более 1 мас. ч. приводит к загущению смеси и неудобству при перемешивании, а снижение количества кремнезема ведет к увеличению времени сушки жидкой смеси, хотя на жизнеспособности получаемого затем бактериального препарата не сказывается. Введение порошка диоксида кремния в указанном соотношении к суспензии микроорганизмов позволяет не только упростить процесс сушки, но и сделать его возможным при комнатной температуре, что обеспечивает также сохранение высокого титра бактерий. При дальнейшем использовании нет необходимости отделять сорбент от биокомпонента, полученные сухие бактериальные препараты поэтому очень удобны в применении. Диспергирование высушенной смеси до тонкодисперсного состояния способствует обволакиванию бактерий и созданию защитного слоя порошкообразного диоксида кремния, что делает возможным достаточно длительное сохранение высокого титра бактерий, независимо от того, идет речь об аэробных или анаэробных микроорганизмах.
Далее сущность изобретения поясняется описанием технологии получения сухих бактериальных препаратов микроорганизмов, а также данными изучения изменений титра бактерий, их выживаемости во времени.
Для осуществления способа использовали культуральные жидкости аэробных микроорганизмов Streptococcus lactis N8, Bacilus subtilis, анаэробных микроорганизмов Lactobacillus plantarum N12 и Bifidobacterium adolescentes N5. Штаммы культивировали на кровяносывороточном бульоне по известным методикам.
Высокодисперсный /размер частиц 5-10 нм/ порошок диоксида кремния /см. ГОСТ 14922-77 "Аэросил"/.
Пример 1. Высокодисперсный порошок диоксида кремния предварительно высушивают при 400-450oC. Затем в количестве 20 г постепенно добавляют к 40 мл бульонной культуры Bifidobacterium adolescentes N5 до получения однородной густой массы при перемешивании. Полученную массу сушат в термостате при 27-32oC, затем ведут диспергирование в течение двух часов до тонкодисперсного состояния.
Полученный препарат тестируют по общепринятой методике: посев производят на питательную среду МРС-2. Для этого делают разведение в физиологическом растворе на 4,5 мл полграмма препарата. Затем 1 мл смеси вносят в 9 мл МРС-2. Выдерживают в термостате при температуре 37oC в течение 72 ч. Проверку титра проводили через каждые 2 недели в течение шести месяцев. На шестой месяц хранения титр бактерий снизился незначительно. Данные представлены в табл. 1 и 2.
Пример 2. К 50 мл бульонной культуры Lactobacillus plantarum N12 при постоянном перемешивании добавляют 24 г высокодисперсного порошка диоксида кремния. Полученную массу сушат на воздухе. Затем после диспергирования полученный продукт тестируют. Жизнеспособность бактерий равна 100%. По мере хранения тестирование проводят через каждые 2-4 недели. Данные представлены в табл. 1.
Пример 3. К 40 мл бульонной культуры Streptococcus lactis N8 добавляют 26 г порошка диоксида кремния при постоянном перемешивании. К концу перемешивания масса загущается и становится неудобной для дальнейшего перемешивания. Однако тестирование подтвердило достаточно высокий титр бактерий и 100%-ную выживаемость в течение полугода. Для проверки титра бактерий высев культуры проводили на мясо-пептонном бульоне. Данные приведены в табл. 1.
Пример 4. К 50 мл бульонной культуры Bacillus subtilis представляющей собою суспензию микроорганизмов, добавляют 25 г порошка диоксида кремния при постоянном перемешивании, как описано в примере 1. Готовый продукт представляет собой тонкодисперсный порошок, сухой бактериальный препарат со 100%-ной выживаемостью, сохраняющейся в течение полугода. Данные проверки титра бактерий представлены в табл. 2.
Ниже в табл. 1 представлены данные проверки титра бактерий сухих бактериальных препаратов, полученных по предложенному способу. В табл. 2 представлены данные проверки титра за 1995 г. Выживаемость сразу после получения готового продукта составила 100%, а через полгода 78%. Выживаемость микроорганизмов в сухом бактериальном препарате, полученном по известному способу /прототип/ составила 29-43%, а титр бактерий снизился на треть.
Таким образом, способ получения сухих бактериальных препаратов прост, не требует дополнительных затрат на введение второго сорбента, не требует сушки при высокой температуре, а полученный продукт обладает высокими характеристиками:
- высокий выход жизнеспособных клеток микроорганизмов - 100%,
- препарат сохранят высокий титр бактерий в течение 6-9 мес независимо от того, аэробные или анаэробные сами бактерии,
- сорбент выбран таким, что при дальнейшем использовании бактериального препарата нет необходимости отделять сорбент от биокомпонента.
- высокий выход жизнеспособных клеток микроорганизмов - 100%,
- препарат сохранят высокий титр бактерий в течение 6-9 мес независимо от того, аэробные или анаэробные сами бактерии,
- сорбент выбран таким, что при дальнейшем использовании бактериального препарата нет необходимости отделять сорбент от биокомпонента.
Claims (1)
- Способ получения сухих бактериальных препаратов, включающий выращивание культуры микроорганизмов в виде суспензии, смешивание ее с сорбентом и сушку, отличающийся тем, что суспензию микроорганизмов смешивают с высокодисперсным порошком диоксида кремния в соотношении 2 1, сушку ведут на воздухе и полученную смесь диспергируют до тонкодисперсного состояния.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96110483A RU2104299C1 (ru) | 1996-05-24 | 1996-05-24 | Способ получения сухих бактериальных препаратов |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU96110483A RU2104299C1 (ru) | 1996-05-24 | 1996-05-24 | Способ получения сухих бактериальных препаратов |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2104299C1 true RU2104299C1 (ru) | 1998-02-10 |
RU96110483A RU96110483A (ru) | 1998-03-20 |
Family
ID=20181030
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU96110483A RU2104299C1 (ru) | 1996-05-24 | 1996-05-24 | Способ получения сухих бактериальных препаратов |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2104299C1 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100408108C (zh) * | 2003-05-13 | 2008-08-06 | Sca卫生产品股份公司 | 新产品 |
RU2448684C2 (ru) * | 2009-01-15 | 2012-04-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН "МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского" Роспотребнадзора) | Препарат, содержащий биологически активные действующие вещества |
RU2449775C2 (ru) * | 2009-01-15 | 2012-05-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.Н. Габричевского Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" (ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора) | Способ введения защитной среды в биологически активный материал |
RU2720111C1 (ru) * | 2018-12-28 | 2020-04-24 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Способ конвективного обезвоживания высокодисперсных биоматериалов |
-
1996
- 1996-05-24 RU RU96110483A patent/RU2104299C1/ru active
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN100408108C (zh) * | 2003-05-13 | 2008-08-06 | Sca卫生产品股份公司 | 新产品 |
AU2004238175B2 (en) * | 2003-05-13 | 2009-07-16 | Sca Hygiene Products Ab | New product |
RU2448684C2 (ru) * | 2009-01-15 | 2012-04-27 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН "МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского" Роспотребнадзора) | Препарат, содержащий биологически активные действующие вещества |
RU2449775C2 (ru) * | 2009-01-15 | 2012-05-10 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.Н. Габричевского Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека" (ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора) | Способ введения защитной среды в биологически активный материал |
RU2720111C1 (ru) * | 2018-12-28 | 2020-04-24 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека | Способ конвективного обезвоживания высокодисперсных биоматериалов |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Hestrin et al. | The enzymic production of levan | |
US3360440A (en) | Cold water reconstitutable microbiological medium, process for preparation and use, ad product | |
Mattman et al. | L variation in mycobacteria | |
CN113088463B (zh) | 一种具有益生特性的嗜酸乳杆菌及其应用 | |
CN107988115B (zh) | 植物乳杆菌及其复合益生菌发酵液与制备方法 | |
CN110777097A (zh) | 一株强耐酸性乳酸杆菌菌株及其筛选、发酵工艺 | |
JPH0153035B2 (ru) | ||
CN104762350B (zh) | 一种具有抑菌作用的生物发酵麸皮及其制备方法和应用 | |
EA006847B1 (ru) | Твердая композиция, содержащая споры непатогенных бактерий рода bacillus | |
RU2104299C1 (ru) | Способ получения сухих бактериальных препаратов | |
EP0077646A2 (en) | Method of culturing microbes belonging to the genus Bordetella and culture medium | |
CA2073778C (en) | Enzyme treated bcg vaccine and process therefor | |
CN108949854A (zh) | 固定化植物乳杆菌发酵生产胞外多糖的工艺 | |
RU2388489C1 (ru) | Способ изготовления вакцины ассоциированной против псевдомоноза и энтерококковой инфекции нутрий | |
CN108977361A (zh) | 凝胶型菌剂及其制备方法 | |
CN105925645A (zh) | 一种活性乳酸菌素的制备方法及其在生物饲料中的应用 | |
Tao et al. | Immobilization of Lactic acid bacteria for production of extracellular polysaccharides | |
CN110283730B (zh) | 溶液共混法包埋复合微生态制剂的工艺 | |
RU2288002C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против энтерококковой инфекции нутрий | |
Schlecht et al. | Culture and biological activity of Propionibacterium acnes | |
RU2158302C2 (ru) | Питательная среда для роста бифидо- и лактобактерий | |
RU2101354C1 (ru) | Способ получения нуклеиновых кислот bacillus anthracis | |
CN115322921B (zh) | 一株对奶牛乳房炎致病菌有拮抗作用的芽孢杆菌及其应用 | |
AU659155B2 (en) | Material for promoting growth of bacteria | |
RU94026123A (ru) | Способ получения препарата бцл |