RU2023269C1 - Способ диагностики гипериммуноглобулинемии - Google Patents
Способ диагностики гипериммуноглобулинемии Download PDFInfo
- Publication number
- RU2023269C1 RU2023269C1 SU4713597A RU2023269C1 RU 2023269 C1 RU2023269 C1 RU 2023269C1 SU 4713597 A SU4713597 A SU 4713597A RU 2023269 C1 RU2023269 C1 RU 2023269C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- serum
- hyperimmunoglobulinemia
- patient
- blood serum
- hours
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, а именно к гематологии. Цель изобретения - упрощение способа. У больного берут кровь, выделяют сыворотку, наносят на предметное стекло, инкубируют при температуре 35 - 37°С в течение 2 - 4 ч. Под микроскопом сравнивают микроформы с контролем и при их совпадении диагностирут гипериммуноглобулинемию. По сравнению с прототипом упрощается диагностика.
Description
Изобретение относится к медицине и биологии и может быть использовано для качественной экспресс-диагностики гипериммуноглобулинемий.
Различные типы нарушений гуморального иммунитета, проявляющиеся качественными и количественными изменениями иммуноглобулинов, сопровождают заболевания различной нозологии, включая парапротеинемические гемобластозы, разнообразные формы гуморальных иммунодефицитов, аутоиммунную и иммунокомплексную патологию, а также заболевания, связанные с сильной и длительной антигенной стимуляцией или с нарушением регуляции иммунного ответа.
Иммуноглобулины представляют собой семейство структурно-сходных белковых молекул, обладающей функцией антител. Структурные, антигенные и биологические особенности иммуноглобулинов, генетические и клеточные основы их биосинтеза широко известны.
Диагностика гипериммуноглобулинемий требует качественной и количественной характеристики иммуноглобулинов в сыворотке крови (СК). Такая характеристика может быть получена при помощи иммунохимических методов, основанных на взаимодействии исследуемых белков с антителами специфических реагентов - антисывороток. Иммунохимические методы позволяют определить количество иммуноглобулинов разных классов, выявить их структурные особенности, обнаружить разные по структуре комплексы иммуноглобулинов. Основу всех методов составляет иммунопреципитация и электрофорез, применяемые раздельно или в комбинациях.
Известен способ исследования содержания иммуноглобулинов в СК методом иммуноэлектрофореза. Принцип метода заключается в сочетании электрофореза в агаровом теле с иммунодиффузией. Классический вариант состоит в следующем. Вначале проводят электрофоретическое разделение белков в забуференном теле агара, после разделения в канавку, которая идет в направлении миграции белков, вносят преципитирующую иммунную сыворотку. Антиген и антисыворотка диффундируют в геле навстречу друг другу и в месте их взаимодействия возникают дугообразные линии преципитации, число, положение и формы которых дают представление о составе исходной смеси антигенов.
По расположению линий, их форме, интенсивности можно судить о качественных особенностях исследуемых белков и иногда об их количестве. Иммунохимическая идентификация линий основана на использовании моноспецифических антисывороток.
Способ включает следующие операции: приготовление агаровых пластин; формирование лунок и канавок в геле; проведение электрофореза; внесение антисыворотки; иммунодиффузия на протяжении 24 ч; элюирование 3 сут, окрашивание; фотографирование.
При осуществлении предлагаемого способа используют следующие материалы и оборудование: предметные стекла, пробирки, пипетки на 10 мл, препаравальную иглу, фильтровальную бумагу, ледяную кислоту, веронал-натрий, комплект приборов для электрофореза, источник тока, электрофоретическую камеру, штампы, водяную баню, стеклорез, ванночки для окрашивания предметных стекол и фотооборудование.
Все перечисленное затрудняет возможность широкого применения способа, в связи с чем уменьшается возможность ранней диагностики гипериммуноглобулинемий.
Цель изобретения - упрощение способа.
Способ осуществляют следующим образом. Моноспецифические сыворотки, взятые из стандартного набора против иммуноглобулинов A, M, G и сыворотки крови исследуемого лица раздельно в виде капель (3-5) объемом 0,01-0,03 мл каждая наносят на предметные стекла, накрывают покровными стеклами и высушивают в эксикаторе с влагопоглотителем, помещенном в суховоздушный шкаф при Т = 35-37оС на протяжении 2-4 ч, затем микроскопируют.
Кристаллоскопическое исследование выполняют в биологическом микроскопе ЛОМО. В качестве эталона используют моносыворотки, взятые из набора стандартных сывороток Горьковского НИИ эпидемиологии и микробиологии.
Для проб использованы СК больных с заболеваниями крови (острый миэлолейкоз, хронический лимфолейкоз), с аутоиммунными расстройствами (неспецифический язвенный колит, ревматоидный артрит, системная красная волчанка, системная склеродермия).
При изучении образцов, приготовленных из моносывороток (эталон) и сывороток исследуемых больных (проба), были выделены главные микроформы (кристаллы типы ледяных узоров) и соподчиненные (веретенообразные агрегаты и спирали). Облик кристаллов типа ледяных узоров был специфичен в соответствии с видом гипериммуноглобулинемии (веретенообразные агрегаты и спирали) встречались во всех случаях гипериммуноглобулинемий, но в разном соотношении.
П р и м е р 1. Получен микротип сыворотки крови (СК) больной с острым миэлолейкозом, повышено содержание IgA (3,1 г/л при норме 1,52 г/л). Присутствует скелетный кристалл типа ледяных узоров, пятилучевой.
Технология: две-три капли сыворотки крови больного объемом 0,02 мл каждая наносят на предметное стекло, каждую накрывают покровным и помещают в эксикатор с влагопоглотителем, сушат в суховоздушном шкафу на протяжении 4 ч при Т = 37оС, затем микроскопируют.
П р и м е р 2. Получен микротип сыворотки крови больного с ревматоидным артритом, повышено содержание IgA (5,4 г/л). Присутствует пятилучевой кристалл, веретенообразные агрегаты.
Технология: капли сыворотки крови исследуемого больного (3-5) наносят на предметное стекло, объем каждой капли 0,02 мл, затем их накрывают покровными стеклами и сушат в эксикаторе с влагопоглотителем, помещенном в суховоздушный шкаф на протяжении 3 ч при Т = 36оС. Полученный препарат микроскопируют.
П р и м е р 3. Получен микротип сыворотки крови больного с системной склеродермией, повышено содержание IgM (4,4 г/г при норме 1,1 г/л). Присутствует крупный четырехлучевой скелетный кристалл типа ледяных узоров.
Технология: капли сыворотки крови больного объемом 0,03 мл каждая наносят на предметное стекло, каждую накрывают покровным и сушат 2 ч при Т = 37оС в эксикаторе с влагопоглотителем, помещенном в суховоздушный шкаф, затем микроскопируют.
П р и м е р 4. Получен микротип сыворотки крови больного с хроническим миэлолейкозом, повышено содержание IgM (2,8 г/л) виден скелетный кристалл четырехлучевой (лучи удвоены) спиралеобразный агрегат. Технология: сыворотка крови в виде капель (две-три) объемом 0,01 мл каждая наносят на предметное стекло, накрывают покровными стеклами, помещают в эксикатор с влагопоглотителем, который находится в суховоздушном шкафу, сушат 4 ч при Т= = 36оС, затем микроскопируют.
П р и м е р 5. Получен морфотип СК больной с системной красной волчанкой, повышено содержание IgA (3,4 г/г) присутствует пятилучевой скелетный кристалл типа ледяных узоров.
Технология: капли сыворотки объемом 0,03 мл каждая наносят на предметное стекло, накрывают по отдельности покровными и сушат в эксикаторе с влагопоглотителем, помещенном в суховоздушный шкаф, на протяжении 20 ч при Т = 36оС, полученный препарат микроскопируют.
П р и м е р 6. Получена микроструктура СК больного с хроническим лимфолейкозом, присутствуют скелетные кристаллы типа ледяных узоров, трехлучевой, отдельная ветвь луча или отдельный луч. Содержание IgA равно 2,8 г/л, норма 1,52 г/л. Технология аналогична примеру 2.
П р и м е р 7. Получены микрофорфотипы СК больного с узелковым периартериитом. Присутствуют отдельные лучи с ветвящимися под углом ветвями, веретенообразные агрегаты. Повышено содержание IgG (20,2 г/л при норме 8,82 г/л).
Технология: капли сыворотки крови исследуемого больного (две-три), объем каждой - 0,03 мл, наносят на предметное стекло, затем капли накрывают покровными стеклами, помещают в эксикатор с влагопоглотителем, который находится в суховоздушном шкафу, сушат 4 ч при Т = 35оС, полученный препарат микроскопируют.
П р и м е р 8. Получены микротипы из СК больного с неспецифическим язвенным колитом, присутствует реликтовый скелетный кристалл, ветви которого отходят под острым углом от основного хода луча, а виден мелкий скелетный кристалл, спиралеобразный агрегат, также присутствует крупный скелетный кристалл, ветви которого отходят под углом от основного хода луча. Повышено содержание IgG (21,2 г/л).
Технология: капли сыворотки крови больного (две-три) наносят на предметное стекло, объем каждой капли равен 0,02 мл, капли накрывают покровными стеклами, сушат в эксикаторе с влагопоглотителем, помещенном в суховоздушный шкаф, на протяжении 4 ч при Т = 37оС, затем микроскопируют.
П р и м е р 9. Получен микротип сыворотки крови здорового человека. Присутствуют нитевидные ветвящиеся кристаллы.
Технология: капли сыворотки крови здорового человека наносят на предметное стекло, объем каждой - 0,03 мл, затем накрывают покровными стеклами и сушат в эксикаторе с влагопоглотителем, помещенном в суховоздушный шкаф при Т = 36оС, на протяжении 3 ч. Полученный препарат микроскопируют.
Эффективность предлагаемого способа по сравнению с прототипом заключается в том, что по типам кристаллов, полученных при высыхании в сыворотке крови исследуемого лица, можно установить качественно наличие гипериммуноглобулинемии, при этом гипериммуноглобулинемии A соответствуют преимущественно пяти- и трехлучевые кристаллы или их отдельные лучи, при гипериммуноглобулинемии М присутствуют преимущественно четырехлучевые кристаллы или их отдельные лучи, при гипериммуноглобулинемии I присутствуют преимущественно скелетные кристаллы с ветвями, отходящими под углом от хода основного луча.
Способ прост в техническом исполнении, доступен, не требует дорогостоящей аппаратуры и может быть использован при массовых осмотрах в поликлинике и стационаре.
Claims (1)
- СПОСОБ ДИАГНОСТИКИ ГИПЕРИММУНОГЛОБУЛИНЕМИИ, включающий забор крови, выделение сыворотки с последующим ее исследованием, отличающийся тем, что, с целью упрощения способа, исследование сыворотки осуществляют на стекле, при этом наносят раздельно каплю сыворотки больного и каплю гиперглобулиновой сыворотки, накрывают их покровным стеклом и инкубируют при 35-37oС в течение 2-4 ч, далее под микроскопом сравнивают микроформы кристаллов в обеих каплях и при одинаковых микроформах диагностируют гиперглобулинемию.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4713597 RU2023269C1 (ru) | 1989-07-04 | 1989-07-04 | Способ диагностики гипериммуноглобулинемии |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU4713597 RU2023269C1 (ru) | 1989-07-04 | 1989-07-04 | Способ диагностики гипериммуноглобулинемии |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2023269C1 true RU2023269C1 (ru) | 1994-11-15 |
Family
ID=21458242
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU4713597 RU2023269C1 (ru) | 1989-07-04 | 1989-07-04 | Способ диагностики гипериммуноглобулинемии |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2023269C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2614731C1 (ru) * | 2015-10-15 | 2017-03-28 | Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Амурская Государственная Медицинская Академия" Министерства Здравоохранения Российской Федерации | Способ исследования клеток крови |
-
1989
- 1989-07-04 RU SU4713597 patent/RU2023269C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Иммунологические методы. Под редакцией Г.Фримеля. М.: Медицина. 1987, с.89-97. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2614731C1 (ru) * | 2015-10-15 | 2017-03-28 | Государственное Бюджетное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Амурская Государственная Медицинская Академия" Министерства Здравоохранения Российской Федерации | Способ исследования клеток крови |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DE69521608T2 (de) | Verwendung von humanem neutrophil-lipocalin(hnl) als diagnostischer marker und anti-hnl-antikörperzubereitung | |
Haston et al. | Neutrophil leucocyte chemotaxis: a simplified assay for measuring polarising responses to chemotactic factors | |
US3912805A (en) | Reagent and assay for human fibrinogen degradation products | |
US4294818A (en) | Methods and materials for detection of multiple sclerosis | |
Knapp et al. | Surface immunoglobulins in chronic lymphatic leukaemia, macroglobulinaemia and myelomatosis | |
NYLAND et al. | In‐situ characterization of mononuclear cell infiltrates in lesions of multiple sclerosis | |
RU2061241C1 (ru) | Способ определения специфической сенсибилизации лимфоцитов | |
DE3685818T2 (de) | Immunkomplextestverfahren. | |
RU2023269C1 (ru) | Способ диагностики гипериммуноглобулинемии | |
Yunis et al. | Cell Antigens and Cell Specialization: I. A Study of Blood Group Antigens on Normoblasts | |
WO2013097616A1 (zh) | 一种鉴定抗体敏感性和克隆细胞株的方法及试剂盒 | |
Hammarström et al. | Myasthenia gravis: studies on HL-A antigens and lymphocyte subpopulations in patients with myasthenia gravis. | |
Price et al. | Disc electrophoresis on polyacrylamide gels of serum mucoids of individuals with selected chronic diseases | |
Abe et al. | Rheumatoid-factor-like substance and antistreptolysin O antibody in leprosy serum | |
Börjeson et al. | Dissociation of leukagglutinating and transforming properties of phytohemagglutinin by the coating of lymphocytes with Vi polysaccharide | |
Kunori et al. | Spontaneous antibody-secreting human blood lymphocytes detected with a protein A plaque assay. | |
US4402934A (en) | Diagnostic technique for rheumatoid arthritis | |
US4474876A (en) | Flow cytometric analysis of histamine receptors | |
Kite et al. | Autoantibodies to thyroid tissue sediment detected by the antiglobulin consumption test | |
Avigan et al. | Thein vitroproduction of antibodies to mitochondrial antigens by peripheral blood mononuclear cells from patients with primary biliary cirrhosis | |
JPS6339573B2 (ru) | ||
JPH09218202A (ja) | 抗核抗体の検出方法及び検出用キット | |
RU2526820C1 (ru) | Способ титрования групповых антител системы аво | |
McCoy et al. | Tumor-bound immunoglobulin in human gynecologic cancers | |
RU2063041C1 (ru) | Способ определения снижения устойчивости организма больных лейкозами к инфекции |