RU2002103159A - Модифицированный колониестимулирующий фактор гранулоцитов человека и способ его получения, днк, экспрессирующий вектор - Google Patents
Модифицированный колониестимулирующий фактор гранулоцитов человека и способ его получения, днк, экспрессирующий векторInfo
- Publication number
- RU2002103159A RU2002103159A RU2002103159/13A RU2002103159A RU2002103159A RU 2002103159 A RU2002103159 A RU 2002103159A RU 2002103159/13 A RU2002103159/13 A RU 2002103159/13A RU 2002103159 A RU2002103159 A RU 2002103159A RU 2002103159 A RU2002103159 A RU 2002103159A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- coli
- amino acid
- modified
- signal peptide
- expression vector
- Prior art date
Links
- 229920003013 deoxyribonucleic acid Polymers 0.000 title claims 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims 3
- 210000003714 Granulocytes Anatomy 0.000 title claims 2
- 230000002281 colonystimulating Effects 0.000 title 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims 13
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims 13
- 241001198387 Escherichia coli BL21(DE3) Species 0.000 claims 11
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims 7
- 101700032127 ETX1 Proteins 0.000 claims 5
- 101700029730 ETX2 Proteins 0.000 claims 5
- 231100000655 Enterotoxin Toxicity 0.000 claims 5
- 101710023118 btfP Proteins 0.000 claims 5
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 claims 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims 5
- 229920001850 Nucleic acid sequence Polymers 0.000 claims 3
- 102000006635 beta-Lactamases Human genes 0.000 claims 3
- 108020004256 beta-Lactamases Proteins 0.000 claims 3
- 125000000773 L-serino group Chemical group [H]OC(=O)[C@@]([H])(N([H])*)C([H])([H])O[H] 0.000 claims 2
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 claims 1
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 claims 1
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical group C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims 1
- 210000001322 Periplasm Anatomy 0.000 claims 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 claims 1
- 125000000267 glycino group Chemical group [H]N([*])C([H])([H])C(=O)O[H] 0.000 claims 1
- 230000001264 neutralization Effects 0.000 claims 1
- 229920000023 polynucleotide Polymers 0.000 claims 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 claims 1
Claims (21)
1. Модифицированный колониестимулирующий фактор гранулоцитов человека (hG-CSF), в котором по крайней мере одна из 1-й, 2-й, 3-й и 17-й аминокислот hG-CSF дикого типа (SEQ ID NO: 2) заменена другой (ими) аминокислотой (ами).
2. Модифицированный hG-CSF по п.1, отличающийся тем, что аминокислотная последовательность аналогична аминокислотной последовательности hG-CSF дикого типа за исключением того, что (a) 1-я аминокислота является Ser; (b) 1-я аминокислота является Ser и 17-я аминокислота является X; (с) 2-я аминокислота является Met и 3-я аминокислота является Val; (d) 2-я аминокислота является Met, 3-я аминокислота является Val и 17-я аминокислота является X; или (f) 17-я аминокислота является X, где Х означает аминокислоту, которая не заряжена при нейтральном рН.
3. Модифицированный hG-CSF по п.2, отличающийся тем, что Х представляет собой Ser, Thr, Ala или Gly.
4. Модифицированный hG-CSF по п.3, отличающийся тем, что Х представляет собой Ser.
5. ДНК, кодирующая модифицированный hG-CSF по любому из пп.1-4.
6. ДНК по п.5, отличающаяся тем, что нуклеотидная последовательность ДНК модифицированного hG-CSF с 1-й по 60-ю аминокислоту соответствует нуклеотидной последовательности, выбираемой из группы, включающей SEQ ID NOS: 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67 и 69.
7. Экспрессирующий вектор, содержащий ДНК по п.5.
8. Экспрессирующий вектор по п.7, отличающийся тем, что дополнительно включает полинуклеотид, кодирующий сигнальный пептид, присоединенный по 5’-концу ДНК, кодирующий модифицированный hG-CSF.
9. Экспрессирующий вектор по п.8, отличающийся тем, что сигнальный пептид является сигнальным пептидом терморезистентного энтеротоксина II Е. coLi или модифицированным сигнальным пептидом терморезистентного энтеротоксина II Е. coLi.
10. Экспрессирующий вектор по п.9, отличающийся тем, что сигнальный пептид терморезистентного энтеротоксина II Е. coLi имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 53.
11. Экспрессирующий вектор по п.9, отличающийся тем, что модифицированный сигнальный пептид терморезистентного энтеротоксина II Е. coLi имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 54.
12. Экспрессирующий вектор по п.9, отличающийся тем, что дополнительно включает модифицированную последовательность Шайна-Дальгарно энтеротоксина II Е. coli, имеющую нуклеотидную последовательность SEQ ID NO: 71.
13. Экспрессирующий вектор по п.8, отличающийся тем, что сигнальный пептид является сигнальным пептидом бета-лактамазы Е. coli или модифицированным сигнальным пептидом бета-лактамазы Е. coli.
14. Экспрессирующий вектор по п.13, отличающийся тем, что сигнальный пептид бета-лактамазы Е. coli имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 24.
15. Экспрессирующий вектор по п.8, отличающийся тем, что сигнальный пептид является сигнальным пептидом Gene III Е. coli или модифицированным сигнальным пептидом Gene III E. coli.
16. Экспрессирующий вектор по п.15, отличающийся тем, что сигнальный пептид Gene III E. coli имеет аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 42.
17. Экспрессирующий вектор по п.7 или 8, отличающийся тем, что представляет собой pT14SS1SG, pT14SS1S17SEG, pTO1SG, pTO1S17SG, pTO17SG или pBAD2M3V17SG.
18. Микроорганизм, трансформированный экспрессирующим вектором по п.7 или 8.
19. Микроорганизм по п.18, отличающийся тем, что представляет собой трансформированную Е. coli.
20. Микроорганизм по п.19, отличающийся тем, что трансформированная Е. coli представляет собой Е. coli BL21(DE3)/pT14SS1SG(НМ 10310), Е. coli BL21(DE3)/PT14SS1S17SEG (НМ 10311, КССМ-10154), Е. coli BL21(DE3)/pTO1SG (НМ 10409), Е. coli BL21(DE3)/pTO1S17SG(НМ 10410, КССМ-10151), Е. coli BL21(DE3)/pTO17SG(HM 10411, КССМ-10152), Е. coli BL21(DE3)/pTO17TG(HM 10413), Е. coli BL21(DE3)/pTO17AG(НМ 10414), Е. coli BL21(DE3)/pTO17GG(НМ 10415), Е. coli BL21(DE3)/pBAD2M3VG (НМ 10510, КССМ-10153), Е. coli BL21(DE3)/pBAD17SG(HM 10511) или Е. coli BL21(DE3)/pBAD2M3V17SG(HM 10512).
21. Способ получения модифицированного hG-CSF в микроорганизме, который включает культивирование трансформированного микроорганизма по п.18 с целью продуцирования и секреции модифицированного hG-CSF в периплазму.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019990027418A KR100356140B1 (ko) | 1999-07-08 | 1999-07-08 | 인간 과립구 콜로니 자극인자 변이체 및 이의 생산 방법 |
| KR1999/27418 | 1999-07-08 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002103159A true RU2002103159A (ru) | 2004-04-27 |
| RU2232772C2 RU2232772C2 (ru) | 2004-07-20 |
Family
ID=36129291
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002103159/13A RU2232772C2 (ru) | 1999-07-08 | 2000-07-07 | Модифицированный колониестимулирующий фактор гранулоцитов человека и способ его получения, днк, экспрессирующий вектор |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20040224393A1 (ru) |
| EP (1) | EP1194575B2 (ru) |
| JP (1) | JP2003504069A (ru) |
| KR (1) | KR100356140B1 (ru) |
| CN (1) | CN1195859C (ru) |
| AT (1) | ATE299187T1 (ru) |
| AU (1) | AU757147C (ru) |
| BR (2) | BRPI0012265B8 (ru) |
| CA (1) | CA2378543C (ru) |
| DE (1) | DE60021188T3 (ru) |
| DK (1) | DK1194575T4 (ru) |
| ES (1) | ES2243275T5 (ru) |
| NZ (1) | NZ516476A (ru) |
| PT (1) | PT1194575E (ru) |
| RU (1) | RU2232772C2 (ru) |
| WO (1) | WO2001004329A1 (ru) |
Families Citing this family (18)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6831158B2 (en) | 2000-01-10 | 2004-12-14 | Maxygen Holdings Ltd. | G-CSF conjugates |
| ATE468862T1 (de) | 2001-07-11 | 2010-06-15 | Maxygen Inc | G-csf konjugate |
| EP1539960B1 (en) * | 2002-09-09 | 2010-04-28 | Hanall Pharmaceutical Co., Ltd. | Protease-resistant modified interferon alpha polypeptides |
| US20090226397A1 (en) | 2003-10-24 | 2009-09-10 | Nora Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for reducing the likelihood of implantation failure or miscarriage in recipients of artificial insemination |
| US8338373B2 (en) | 2003-10-24 | 2012-12-25 | Nora Therapeutics, Inc. | Method for reducing the risk of spontaneous abortion in a human female subject |
| ES2458219T3 (es) * | 2003-10-24 | 2014-04-30 | Nora Therapeutics, Inc. | Composiciones y métodos para un embarazo saludable |
| JP5137821B2 (ja) | 2005-06-01 | 2013-02-06 | マキシジェン， インコーポレイテッド | Ｐｅｇ化されたｇ−ｃｓｆポリペプチドおよびその製造方法 |
| DE102005033250A1 (de) | 2005-07-15 | 2007-01-18 | Bioceuticals Arzneimittel Ag | Verfahren zur Reinigung von G-CSF |
| EP2274325A4 (en) * | 2008-05-13 | 2011-05-25 | Nora Therapeutics Inc | ANALOGUE OF HUMAN G-CSF AND METHOD OF MANUFACTURE AND APPLICATION THEREOF |
| CN102740840A (zh) | 2010-01-19 | 2012-10-17 | 韩美科学株式会社 | 长效g-csf缀合物的液体制剂 |
| ES2657969T3 (es) | 2010-04-02 | 2018-03-07 | Curna, Inc. | Tratamiento de enfermedades relacionadas con el Factor 3 estimulante de colonias (CSF3) por inhibición del transcrito antisentido natural a CSF3 |
| KR101831300B1 (ko) * | 2010-10-29 | 2018-02-23 | 한미사이언스 주식회사 | 재조합 대장균으로부터 인간 과립구 콜로니 자극인자를 정제하는 방법 |
| RU2467764C2 (ru) * | 2011-01-12 | 2012-11-27 | Государственное бюджетное образовательное учреждение дополнительного профессионального образования "Пензенский институт усовершенствования врачей" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации | Способ лечения больных аутоиммунной хронической крапивницей с использованием внутривенного введения препарата "габриглобин" |
| KR101623906B1 (ko) | 2014-07-23 | 2016-05-24 | 주식회사 이큐스앤자루 | 과립구 콜로니 자극인자 변이 단백질 또는 이의 트랜스페린 융합 단백질을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 |
| WO2016013725A1 (ko) * | 2014-07-23 | 2016-01-28 | 주식회사 이큐스앤자루 | 과립구 콜로니 자극인자 변이 단백질 또는 이의 트랜스페린 융합 단백질을 유효성분으로 포함하는 약학적 조성물 |
| CA3052410A1 (en) | 2017-02-03 | 2018-08-09 | Hanmi Pharm. Co., Ltd. | Conjugate of bioactive material having enhanced sustainability and use thereof |
| US11684655B2 (en) | 2019-05-31 | 2023-06-27 | Spectrum Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating neutorpenia using G-CSF protein complex |
| KR102375269B1 (ko) * | 2021-01-27 | 2022-03-17 | 한미약품 주식회사 | 단백질 액상 제제 및 이의 제조방법 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4810643A (en) * | 1985-08-23 | 1989-03-07 | Kirin- Amgen Inc. | Production of pluripotent granulocyte colony-stimulating factor |
| AU7675487A (en) * | 1986-08-11 | 1988-05-19 | Cetus Corporation | Expression of granulocyte colony-stimulating factor |
| US5362853A (en) * | 1986-12-23 | 1994-11-08 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Polypeptide derivatives of human granulocyte colony stimulating factor |
| US5681720A (en) * | 1986-12-23 | 1997-10-28 | Kyowa Hakko Co., Ltd. | DNA encoding human granulocyte colony stimulating factor plasmids and host cells comprising same, and methods of expressing the encoded polypeptide |
| JPH02104598A (ja) | 1988-04-12 | 1990-04-17 | Kirin Amgen Inc | ヒト顆粒球コロニー刺激因子ポリペプチド誘導体 |
| NZ236819A (en) * | 1990-02-03 | 1993-07-27 | Max Planck Gesellschaft | Enzymatic cleavage of fusion proteins; fusion proteins; recombinant dna and pharmaceutical compositions |
| GB9107846D0 (en) * | 1990-04-30 | 1991-05-29 | Ici Plc | Polypeptides |
| EP0626448A3 (de) * | 1993-05-26 | 1998-01-14 | BOEHRINGER INGELHEIM INTERNATIONAL GmbH | Verfahren zur Herstellung und Reinigung von alpha-Interferon |
| US6476198B1 (en) * | 1993-07-13 | 2002-11-05 | The Scripps Research Institute | Multispecific and multivalent antigen-binding polypeptide molecules |
| US5451660A (en) * | 1993-12-13 | 1995-09-19 | Genentech, Inc. | Method for purifying polypeptides |
| WO1996013599A1 (en) * | 1994-11-01 | 1996-05-09 | Winfried Wels | Nucleic acid transfer system |
| US6100070A (en) * | 1995-10-05 | 2000-08-08 | G. D. Searle & Co. | G-CSF receptor agonists |
| KR100316347B1 (ko) * | 1998-09-15 | 2002-08-27 | 한미약품(주) | 대장균엔테로톡신ⅱ신호펩티드의변형체와인체성장호르몬의융합단백질을발현하는재조합미생물및그를이용한인체성장호르몬의제조방법 |
| CN1318443C (zh) * | 2000-05-16 | 2007-05-30 | 博尔德生物技术公司 | 含游离半胱氨酸残基的蛋白重折叠的方法 |
-
1999
- 1999-07-08 KR KR1019990027418A patent/KR100356140B1/ko not_active IP Right Cessation
-
2000
- 2000-07-07 ES ES00942494T patent/ES2243275T5/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-07-07 PT PT00942494T patent/PT1194575E/pt unknown
- 2000-07-07 JP JP2001509533A patent/JP2003504069A/ja active Pending
- 2000-07-07 NZ NZ516476A patent/NZ516476A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-07-07 CN CNB008100942A patent/CN1195859C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2000-07-07 DE DE60021188T patent/DE60021188T3/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-07-07 AT AT00942494T patent/ATE299187T1/de active
- 2000-07-07 BR BRPI0012265A patent/BRPI0012265B8/pt unknown
- 2000-07-07 EP EP00942494A patent/EP1194575B2/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-07-07 DK DK00942494T patent/DK1194575T4/da active
- 2000-07-07 RU RU2002103159/13A patent/RU2232772C2/ru active
- 2000-07-07 AU AU57106/00A patent/AU757147C/en not_active Expired
- 2000-07-07 CA CA2378543A patent/CA2378543C/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-07-07 BR BR0012265-3A patent/BR0012265A/pt not_active IP Right Cessation
- 2000-07-07 WO PCT/KR2000/000733 patent/WO2001004329A1/en active IP Right Grant
-
2002
- 2002-01-09 US US10/031,123 patent/US20040224393A1/en not_active Abandoned
-
2007
- 2007-10-19 US US11/975,541 patent/US7704709B2/en not_active Expired - Fee Related
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2002103159A (ru) | Модифицированный колониестимулирующий фактор гранулоцитов человека и способ его получения, днк, экспрессирующий вектор | |
| EP0230869B1 (en) | Construction of an igg binding protein to facilitate downstream processing using protein engineering | |
| CN110128521B (zh) | 用于生产重组融合蛋白的辅助蛋白、编码基因、重组融合蛋白、重组表达载体及制备方法 | |
| CA2378543A1 (en) | Modified human granulocyte-colony stimulating factor and process for producing same | |
| CN100489114C (zh) | 低成本生产肽 | |
| Boman et al. | On the primary structures of lysozyme, cecropins and attacins from Hyalophora cecropia | |
| RU2001110120A (ru) | Модифицированный сигнальный пептид энтеротоксина-ii e. coli и микроорганизм, экспрессирующий белок слияния упомянутого пептида с гетерологичным белком | |
| CA2345905A1 (en) | Plant-optimized polynucleotides encoding approximately 15 kda and approximately 45 kda pesticidal proteins | |
| Callaway et al. | Modification of the C terminus of cecropin is essential for broad-spectrum antimicrobial activity | |
| ATE421977T1 (de) | Reinigung von peptiden unter verwendung von metall-ion-affinitätschromatographie | |
| EP0299828A1 (en) | Bactericidal and/or bacteriostatic peptides, process for their isolation, their production and their applications | |
| RU2002130278A (ru) | Новые регулирующие экспрессию последовательности и продукты экспрессии в области гифомицетов | |
| AU7891498A (en) | Flower organ-specific gene and its promoter sequence | |
| JP3362050B2 (ja) | 抗微生物ペプチドを大量生産するための方法 | |
| CN110551732A (zh) | 一种卵形鲳鲹抗菌肽leap-2基因及应用 | |
| JPS62500074A (ja) | バチルス スリンギエンシス 結晶タンパク質遺伝子毒素セグメント | |
| US10000544B2 (en) | Process for production of insulin and insulin analogues | |
| EP0301078A1 (en) | POLYPEPTIDES WITH ACTIVITY AGAINST GRAM-POSITIVE AND GRAM-NEGATIVE BACTERIA. | |
| CA2230111A1 (en) | Antisecretory factor peptides regulating pathological permeability changes | |
| Rahman et al. | Nucleotide sequence of leukocidin S-component gene (lukS) from methicillin resistant Staphylococcus aureus | |
| CN105622763B (zh) | 抗菌肽融合蛋白及其制备方法和应用 | |
| CN104195157A (zh) | 生物活性肽在原核细胞中的高效率重组表达和纯化方法 | |
| CN101307100A (zh) | 一种抗菌肽的多肽片段及其核苷酸序列和应用 | |
| EP0669396A1 (en) | Novel polypeptide and dna coding for the same | |
| JP7016552B2 (ja) | 組換えタンパク質の分泌を増加させる方法 |