RO115633B1 - Compozitie farmaceutica pe baza de compusi de reactie tip amadori si procedeu pentru prepararea acesteia - Google Patents
Compozitie farmaceutica pe baza de compusi de reactie tip amadori si procedeu pentru prepararea acesteia Download PDFInfo
- Publication number
- RO115633B1 RO115633B1 RO94-01361A RO9401361A RO115633B1 RO 115633 B1 RO115633 B1 RO 115633B1 RO 9401361 A RO9401361 A RO 9401361A RO 115633 B1 RO115633 B1 RO 115633B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- reaction
- amadori
- lubricant
- mixture
- weight
- Prior art date
Links
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 36
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 51
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims abstract description 18
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims abstract description 18
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims abstract description 8
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims abstract description 7
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 claims abstract description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 claims abstract description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 45
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 45
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 43
- 238000003691 Amadori rearrangement reaction Methods 0.000 claims description 26
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 22
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 22
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 claims description 21
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 21
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 20
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 18
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 18
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 18
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 17
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 claims description 17
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 16
- 150000002482 oligosaccharides Polymers 0.000 claims description 14
- 239000003415 peat Substances 0.000 claims description 14
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 13
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 13
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 claims description 13
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 12
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 11
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 claims description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 10
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 9
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 claims description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 9
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 8
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 7
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 claims description 7
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 claims description 7
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 claims description 7
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 7
- 239000008101 lactose Substances 0.000 claims description 7
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 7
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 claims description 7
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 208000007976 Ketosis Diseases 0.000 claims description 6
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 6
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 6
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 6
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960002429 proline Drugs 0.000 claims description 6
- 229960001153 serine Drugs 0.000 claims description 6
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 5
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 5
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 5
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 5
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 claims description 5
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 5
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 claims description 5
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 5
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 claims description 5
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 5
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 claims description 5
- 229960004295 valine Drugs 0.000 claims description 5
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 4
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 4
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 4
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 claims description 4
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 4
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 claims description 4
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 claims description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 claims description 4
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 4
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 4
- MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 2-amino-2-deoxy-D-galactopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 3
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-QYESYBIKSA-N 6-deoxyglucose Chemical compound C[C@@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-QYESYBIKSA-N 0.000 claims description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 3
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000023661 Haematological disease Diseases 0.000 claims description 3
- PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N Hydroxyproline Chemical compound O[C@H]1CN[C@H](C(O)=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-DMTCNVIQSA-N 0.000 claims description 3
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 3
- LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N L-cystine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CSSC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LEVWYRKDKASIDU-IMJSIDKUSA-N 0.000 claims description 3
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 claims description 3
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 claims description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 claims description 3
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 3
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 claims description 3
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000337 buffer salt Substances 0.000 claims description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 claims description 3
- 229960003067 cystine Drugs 0.000 claims description 3
- PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N dl-hydroxyproline Natural products OC1C[NH2+]C(C([O-])=O)C1 PMMYEEVYMWASQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims description 3
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960002591 hydroxyproline Drugs 0.000 claims description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 claims description 3
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 claims description 3
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 claims description 3
- 235000008521 threonine Nutrition 0.000 claims description 3
- FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N trans-L-hydroxy-proline Natural products ON1CCCC1C(O)=O FGMPLJWBKKVCDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N (3r,4s,5r)-3,4,5,6-tetrahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CC=O VRYALKFFQXWPIH-PBXRRBTRSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 2
- PMMURAAUARKVCB-UHFFFAOYSA-N alpha-D-ara-dHexp Natural products OCC1OC(O)CC(O)C1O PMMURAAUARKVCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 abstract description 4
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 abstract description 2
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 50
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 45
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 31
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 31
- 239000000047 product Substances 0.000 description 27
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 20
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 17
- CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N D-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UWTATZPHSA-N 0.000 description 15
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 14
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 13
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 13
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 13
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 12
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 10
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 10
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- 230000004044 response Effects 0.000 description 9
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 8
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 8
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 8
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 7
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 7
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 7
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 7
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 7
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 7
- 235000021309 simple sugar Nutrition 0.000 description 7
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 108010047620 Phytohemagglutinins Proteins 0.000 description 5
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000001885 phytohemagglutinin Effects 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N D-OH-Asp Natural products OC(=O)C(N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- -1 amino acid compound Chemical class 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 4
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920006926 PFC Polymers 0.000 description 3
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 3
- 102100038567 Properdin Human genes 0.000 description 3
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 3
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 3
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 3
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 3
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 3
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000710188 Encephalomyocarditis virus Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 2
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N actinomycin D Natural products CC1OC(=O)C(C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)C2CCCN2C(=O)C(C(C)C)NC(=O)C1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)NC4C(=O)NC(C(N5CCCC5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)C(C(C)C)C(=O)OC4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 2
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 239000013553 cell monolayer Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 2
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000035931 haemagglutination Effects 0.000 description 2
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 2
- 230000000686 immunotropic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 125000000972 4,5-dimethylthiazol-2-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C1=C(N=C(*)S1)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- IJJWOSAXNHWBPR-HUBLWGQQSA-N 5-[(3as,4s,6ar)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-n-(6-hydrazinyl-6-oxohexyl)pentanamide Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)NCCCCCC(=O)NN)SC[C@@H]21 IJJWOSAXNHWBPR-HUBLWGQQSA-N 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N D-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 229930182847 D-glutamic acid Natural products 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 235000014066 European mistletoe Nutrition 0.000 description 1
- 229920001917 Ficoll Polymers 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 108010006464 Hemolysin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 101000599940 Homo sapiens Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N L-Alanine Natural products C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- 235000019766 L-Lysine Nutrition 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N L-arginine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930064664 L-arginine Natural products 0.000 description 1
- 235000014852 L-arginine Nutrition 0.000 description 1
- 229930182844 L-isoleucine Natural products 0.000 description 1
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 101001044441 Ovis aries Interferon gamma Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 235000012300 Rhipsalis cassutha Nutrition 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 241000221012 Viscum Species 0.000 description 1
- RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N actinomycin D Chemical compound C[C@H]1OC(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C(=O)[C@@H](C(C)C)NC(=O)[C@H]1NC(=O)C1=C(N)C(=O)C(C)=C2OC(C(C)=CC=C3C(=O)N[C@@H]4C(=O)N[C@@H](C(N5CCC[C@H]5C(=O)N(C)CC(=O)N(C)[C@@H](C(C)C)C(=O)O[C@@H]4C)=O)C(C)C)=C3N=C21 RJURFGZVJUQBHK-IIXSONLDSA-N 0.000 description 1
- 208000009956 adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000020411 cell activation Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 1
- 239000007806 chemical reaction intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000011247 coating layer Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 229960000640 dactinomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 239000012847 fine chemical Substances 0.000 description 1
- 239000003205 fragrance Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 150000002337 glycosamines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003228 hemolysin Substances 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004140 ketosis Effects 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 239000006225 natural substrate Substances 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002020 noncytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000263 nonmitogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Chemical group 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Chemical group 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N serine phosphoethanolamine Chemical compound [NH3+]CCOP([O-])(=O)OCC([NH3+])C([O-])=O UQDJGEHQDNVPGU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000010972 statistical evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
- C08B37/0009—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid alpha-D-Glucans, e.g. polydextrose, alternan, glycogen; (alpha-1,4)(alpha-1,6)-D-Glucans; (alpha-1,3)(alpha-1,4)-D-Glucans, e.g. isolichenan or nigeran; (alpha-1,4)-D-Glucans; (alpha-1,3)-D-Glucans, e.g. pseudonigeran; Derivatives thereof
- C08B37/0021—Dextran, i.e. (alpha-1,4)-D-glucan; Derivatives thereof, e.g. Sephadex, i.e. crosslinked dextran
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/60—Sugars; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
- A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
- A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
- A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q19/00—Preparations for care of the skin
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H7/00—Compounds containing non-saccharide radicals linked to saccharide radicals by a carbon-to-carbon bond
- C07H7/02—Acyclic radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K9/00—Peptides having up to 20 amino acids, containing saccharide radicals and having a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
- A61Q5/00—Preparations for care of the hair
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Birds (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Transplantation (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Cephalosporin Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Description
Invenția de față se referă la o compoziție farmaceutică pe bază de compuși de reacție de tip Amadori și la un procedeu pentru prepararea acesteia, având utilizare în terapia bolilor hematologice și/sau imunologice.
Compușii de reacție tip Amadori sunt cunoscuți. Aceștia sunt produși de reacție, de exemplu ai unui aminoacid sau ai unei peptide cu zaharuri, oligo- sau polizaharide, având un rearanjament de tip Amadori [J.Biol.Soc.215 (1955), Henri Borsoock et al). Astfel, în brevetul DE-C-3914354, se descrie glicoproteină solubilă în apă a unui aminoacid și zahar, care este izolată dintr-un extract de Avena sativa. Brevetul EP-A-406087 descrie complecși solubili în apă de polizaharide-glicopeptide, care sunt derivați din celule de bacterii gram-pozitive. în J.Biol.Chem 1985, 260/9, se arată că spectroscopia RMN a fost utilizată pentru a caracteriza produsele de reacție tip Amadori, formate prin reacția glucozei cu grupe amino libere ale proteinelor.
Până în prezent nu au fost testate diferitele faze de purificare a extractului din produsul de reacție tip Amadori (în scopul eliberării de balast și impurități] pentru activitatea lor biologică.
Sunt cunoscute medicamentele imunostimulatoare din resurse naturale, cum ar fi extractele de vâsc, extractele de turbă etc., care prezintă dezavantajul unui tratament costisitor, cu cantități mari de materie primă pentru a obține câteva grame de substanță activă; impuritățile necontrolate duc la toxicitate și efecte secundare si prin urmare implică probleme în durata de administrare, datorită și naturii complexe și greu de reprodus a compozițiilor.
Produsele comparabile sau amestecul de produse din surse artificiale, cum ar fi interferonul sau alte metode ale ingineriei genetice, sunt costisitoare pentru a fi aplicate.
în plus, moleculele de interferon uman sunt deseori prea mari pentru a penetra peretele celular uman, astfel încât numai o parte din doza administrată are acțiune efectivă. De asemenea, produsele obținute prin inginerie genetică dau efecte secundare și chiar toxice, unele din aceste produse acționând eficient într-o zi, după care în următoarea zi își pierd efectul, motivele nefiind cunoscute.
Un obiect al invenției constă într-o compoziție farmaceutică pe bază de compuși de reacție tip Amadori, pentru profilaxia sau tratamentul bolilor hematologice și/sau imunologice, prin inducerea formării de citokină sau pentru regenerarea țesuturilor și/sau funcției de nutrient al celulei la animale și oameni, care cuprinde cel puțin un compus de reacție tip Amadori, în special 0,01 ... 10 mg/kg corp, având formula generală:
R^NH-Rg, în care R., cuprinde un radical 1-deoxi-2-cetoză derivat dintr-o zaharidă simplă, oligo- sau polizaharidă de mai puțin de 5000 daltoni, și R2 cuprinde un amino acid sau un radical peptidic de mai puțin de 1000 daltoni, în care zaharida este în forma D, de preferință selectată din grupa constând din glucoza, xiloză, galactoză, ramnoză, fructoză, manoză,
2-deoxi-glucoză, 6-deoxi-glucoză, glucozamîne și galactozamină, si amino acidul este în forma L, de preferință selectat din grupa constând din serină, glicină, prolină, histidină, arginină, alanină, acid aspartic, acid glutamic, fenilalanină, treonină, cisteină, cistină, glutamină, valină, asparagină, metionină, tirosină, hidroxiprolină, lizină, triptofan, izoleucină, și leucină; alături de cel puțin un agent vehiculant acceptabil din punct de vedere farmaceutic și/sau un lubrifiant.
Compoziția, conform invenției conține cel puțin doi compuși de rearanjare Amadori care au radicali 1-deoxi-2-cetoză diferiți și/sau radicali amino acid sau peptidici diferiți.
RO 115633 Bl
Radicalii sunt prezenți esențial în aceeași compoziție și/sau esențial în aceleași raporturi în greutate ca în extractul natural de turbă și în care compoziția conține opțional urme de elemente anaorganice existente și în extractul respectiv.
Compoziția conform invenției conține cel puțin un agent vehiculant acceptabil farmaceutic, un adjuvant și/sau un lubrifiant într-un raport în greutate al acestor compuși de rearanjare Amadori la agentul vehiculant, adjuvant și/sau lubrifiant de 1:1 ... 1:100, de preferință 1:8... 1:20, și cel mai de preferat de aproximativ 1:9.
Lubrifiantul este prezent într-un amestec cu lactoză, raportul în greutate lactoză/lubrifiant fiind de 20/1 ...100/1, de preferință aproximativ 50/1.
Un alt obiect al invenției constă într-un procedeu pentru prepararea compoziției, care cuprinde:
a) reacția cel puțin a unui aminoacid sau a unei peptide, de preferință a cel puțin doi aminoacizi diferiți și peptide, cu cel puțin o zaharidă simplă, oligo- sau polizaharidă, de preferință cu cel puțin două zaharide diferite, oligo- sau polizaharide, la o temperatură de aproximativ 70...121 °Cîntr-o soluție apoasă concentrată, de preferință de circa 0,67 la circa 2,75 părți, în greutate, de solide per 1 părți, în greutate, solvent apos,
b) continuarea încălzirii pentru a permite produșilor rezultați să efectueze rearanjarea Amadori în timp ce se îndepărtează simultan sau ulterior solventul apos, până când - de preferință după circa 30...120 min - amestecul de reacție își capătă culoarea portocaliu-brun și activitatea biologică și capacitatea de reducere a fericianurii pot fi detectate în probe prelevate din amestec,
c) oprirea rearanjării Amadori, de preferință înaintea producerii descompunerii din care se obțin compuși care și-au pierdut activitatea biologică,
d) uscarea amestecului de reacție și/sau supunerea acestuia în continuare unei purificări prin coloana cromatografică în care fracțiile active biologic care cauzează reducerea fericianaurii de potasiu sunt colectate; și de preferință
e) combinarea amestecului uscat sau a unei fracții care rezultă din faza (d) cu cel puțin un aditiv acceptabil din punct de vedere farmaceutic selectat din grupa constând dintr-un agent vehiculant, un adjuvant, și un lubrifiant.
Reacția este efectuată în prezența unor urme de elemente anorganice ca cele existente în extractul natural de turbă și opțional sub presiune și/sau în prezenta unui alcool inferior și în care raportul molar preferat al zaharurilor și/sau zaharidelor la amino acizi și/sau peptide este cuprins între 2:1 și 1:1, în special 1,5:1.
Zaharideie simple, oligo- sau polizaharidele, amino-acizii și/sau peptidele, și opțional urmele de elemente anorganice, sunt prezente esențial în aceeași compoziție și/sau esențial în același raport în greutate ca cele existente în extractul natural de turbă.
Conform acestui procedeu, cel puțin un aminoacid are două grupe carboxil și reacția este efectuată în prezența unei săruri tampon, de preferință bicarbonat de sodiu, într-un raport molar cu aminoacidul de 1:1.
Prezenta invenție se referă la o compoziție farmaceutică și un procedeu de preparare a acesteia, pe baza unui compus rezultat din reacții cu rearanjament Amadori, asa cum se observă din schema de reacție și/sau o reacție Maillard:
H OH
I/ c —
| H | I - c - I | OH |
| HO | I - c - I | H |
| I - c - | OH | |
| U | I - c — | 0 1 |
+ h2n-r
H NH.R
I/ c----
| H - | 1 c - 1 | OH |
| HO - | 1 c - | | H |
| H - | 1 c - | OH |
| H - | 1 c — | 0 1 |
Amadcri — > rearrangement
HO
H
H
C - NH.R
I c = O
I
C - H
I
C - OH
I
C - OH
100
CH2OH ch2oh ch-,οη
RO 115633 Bl
Acești compuși reduc fericianura de potasiu, o reacție test pentru substanțele biologic-active formate în reacția zaharurilor cu aminoacizi.
S-a constatat conform invenției că acei complecși formați din orice aminoacid simplu/zaharuri, după ce suferă în ultima parte a reacției o rearanjare de tip Amadori, nu prezintă dezavantajele menționate mai sus, ci dimpotrivă prezintă o activitate imunologică mărită.
Complecșii din orice aminoacid simplu și zaharuri, după ce suferă în ultima parte o rearanjare de tip Amadori, pot fi folosiți în formulări farmaceutice și în cosmetică. Moleculele mici ale acestora penetrează ușor peretele celular și acționează ca un nutritiv. Acești complecși induc formarea interferonului natural și a altor citokine, incluzând factorul de necroză tumorală. Chiar la trei zile după administrare, se evidențiază acest efect stimulator asupra activității biologice. Acest efect creste cu creșterea formării complexului de tip rearanjare Amadori și descrește din nou cu creșterea descompunerii complexului format.
în locul zaharurilor simple, de preferat cele cu greutate moleculară joasă. în special mai mici de 1000 dalton, se pot utiliza polizaharide, de exemplu dextran, care reacționează similar. Polizaharidele au activitate biologică și își pot păstra această activitate după ce devin oligozaharide. Activitatea biologică a acestor compuși este foarte puțin cunoscută. S-a dovedit că formarea unor combinații din aceste substanțe în contact cu leucocitele umane duce la producerea de interferon și alte citokine. Aceasta este denumită activarea policlonală a celulelor.
Este posibilă testarea substanțelor produse sub influența acestor compuși și de a determina activitatea biologică în unități internaționale privind citokinele specifice. Acești compuși sunt cu activitate înalt biologică într-un domeniu de concentrație a substanței pure de la 1... 100^g/ml. La nivel molecular, natura specifică a aminoacidului este mai importantă decât natura părții de zaharuri din molecule. Produsele de reacție ale acidului L - aspartic cu glucoza sau galactoza, după trecerea prin rearanjament de tip Amadori, când vin în contact cu leucocitele umane și sunt incubate în țesutul mediului de cultură la 37°C timp de 20 h în atmosferă de 5% COa, vor produce 30...1000 unități antivirale de interferon. Interferonul este măsurat în teste bio folosind celule canceroase umane. Sub influența acestor compuși se pot produce compuși tumorali necrotici.
Produșii care permit o astfel de utilizare au formula generală:
R\ - NH - Ra’ în care:
RJ reprezintă un radical 1 - amino - 1- deoxi - 2- cetoză derivat din grupa de zaharuri simple, oligo sau de preferință cu greutate moleculară joasă. în special minimum 1000 daltoni, polizaharide, și
Ra' reprezintă un aminoacid sau un radical peptidic, de preferință cu greutate moleculară joasă, în special minimum 1000 daltoni.
Astfel de grupe ale compușilor biologic activi pot acoperi compuși specifici cu rearanjament de tip Amadori descriși mai sus, sau derivați N - substituiți cu un număr diferit de compuși aminoacizi și o zaharidă simplă, oligo-sau polizaharide, de preferință cu greutate moleculară joasă, în special minim 1000 daltoni, sau derivați N-substituiți ai unui compus aminoccid cu un număr de zaharuri simple, oligo- sau polizaharide, sau orice combinație a acestor derivați având activitate biologică suficient de mare.
De preferință, R/ din formula de mai sus trebuie să fie un radical selectat din forma □ a unei zaharide simple, în special [dar nu exclusiv] din forma D a glucozei, xilozei,
RO 115633 Bl galactozei, ramnozei, fructozei, manozei, 6 - deoxiglucozei, glucozaminei și galactozaminei; R2' poate fi un radical selectat din forma L a unui compus aminoacid, cum ar fi serina, glicina, histidina, arginina, glutamina, asparagina, alanina, acidul aspartic, acidul 155 glutamic, fenilalanina, treonina, cisteina, cistina, metionina, hidroxiprolina, triptofan, pralina, tirosina, valina, izoleucina, leucina, lizina sau alte peptide ale aminoacizilor în orice combinații.
Invenția de față se referă și la un procedeu pentru obținerea compușilor menționați mai sus și produsele lor și prin care se formează un intermediar ce are formula: 160
R’ - NH - R” în care:
R’ este radical 0,-1- deoxi cu lanț liniar de atomi de carbon, sau oricare legătură de oxigen a unei zaharide simple sau oligo - sau polizaharide si 165
R” reprezintă un aminoacid sau un radical peptidic, intermediarul fiind cel puțin un component parțial pentru rearanjarea Amadori și/sau pentru reacția Maillard în condiții de încălzire continuă a amestecului de reacție, de preferință sub presiune si simultan sau consecutiv cu îndepărtarea solventului.
Invenția de față prezintă avantajul obținerii unor produși cu activitate biologică 170 mărită, de preferință, pentru prepararea a cel puțin unui compus cu formula generală R, - NH - R2, în care R, reprezintă 1-amino-1-deoxi-2-cetoză radical derivat din zaharuri simple cu zaharide cu greutate moleculară joasă și R2 reprezintă un aminoacid sau un radical peptidic cu greutate moleculară joasă, un amestec de zaharuri simple și/sau zaharide de greutate moleculară joasă existente în compușii conținuți în extractul natural 175 de turbă, se supune reacției cu un amestec de aminoacizi și/sau peptide de greutate moleculară joasă existente în compușii conținuți în extractul natural de turbă, si opțional cu urme de elemente anorganice existente în extractul amintit. în prezentă de apă drept solvent la temperatură înaltă și opțional sub presiune și/sau în prezența unui alcool inferior, raportul molar dintre zaharuri si/sau zaharide față de aminoacizi și/sau peptide 180 fiind de preferință cuprins între 2:1 ... 1:1, mai indicat fiind 1,5:1.
Reacția zaharurilor și/sau zaharidelor cu aminoacizii și/sau peptidele se realizează într-o soluție apoasă concentrată, de preferință 0,67 ... 2,75 părți în greutate, de solid, per 1 parte, în greutate, solvent apos, următoarea fază de rearanjare Amadori realizându-se cu îndepărtarea simultană sau succesivă a solventului apos, când ames- 185 tecul de reacție devine colorat bej-deschis.
în unele cazuri, în special când sunt utilizați aminoacizi cu două grupe carboxil, este avantajos de a se adăuga o sare tampon, cum ar fi bicarbonat de sodiu, de preferință în proporție molară 1:1.
S-a dovedit că produsele de tip reacție Amadori sunt relativ susceptibile la 190 descompunere și acele produse de descompunere au aspect de gudroane de culoare maro-închis, produsele neidentificate pierzându-și activitatea biologică. Prin urmare este de preferat a stopa reacția de rearanjare Amadori într-o fază la care amestecul de reacție devine colorat portocaliu-brun.
Este interesant de notat că produsele intermediare de reacție formate, când 195 soluția de aminoacizi, inițial opacă, devine clară (este faza de început a rearanjării Amadori], sunt ușor nidrolizate, de exemplu reacția este reversibilă. Prin creșterea rearanjării reversibilitatea se diminuează, astfel produsele devin mai stabile si culoarea se schimbă gradat de la galben-deschis la portocaliu-deschis și, în final, devine portocaliubrună când rearanjarea Amadori pare să fie completă. Probele luate în timpul rearanjării 200
RO 115633 Bl
Amadori și testate [conform procedeelor descrise mai jos] arată că activitatea biologică creste cu intrarea în reacția de tip Amadori și descrește ca urmare a produselor de descompunere datorate încălzirii la care schimbarea culorii produsului în maro-închis este un semn al începerii descompunerii.
Reducerea rapidă a fericianurii și schimbarea culorii vor semnala dacă amestecul de reacție conține alte grupe ceto și/sau sulful conținut în aminoacizi ,cum ar fi cisterna; pe de altă parte, aceasta arată că în 3...5 min de la acest punct se poate controla creșterea rearanjării Amadori.
Zaharurile nereacționate vor arăta schimbarea de culoare după o jumătate de oră sau numai după câteva ore.
Izolarea produselor pure rezultate din rearanjarea de tip Amadori este realizată prin metode cunoscute, bazate pe trecerea amestecului pe schimbător cationic puternic (cum ar fi Amberlit(R) sau Dowex(R)], eluția făcându-se succesiv cu apă amoniacală și evaporând fracția dorită (definită] a eluatului sub presiune scăzută și apoi cristalizând compusul pur din metanol anhidru. (J.E.Hodge și B.E Fisher, Metode în chimia carbohidraților. voi.II, Reacțiile carbohidraților, Academic Press, N.Y. London, 1963, pag.
105...106, sau Borsook et al; sau J.Duiburg și P.Devilliers).
în procedeul conform prezentei invenții, toate preferințele menționate mai sus privind tipul de radicali derivați de la zaharuri simple și compuși aminoacizi rămân neschimbate. în plus, un amestec preferat de substraturi de zaharide constă în forma D a glucozei, xilozei, galactozei, ramnozei si fructozei în proporție de circa 20:10:4:1:1, pe când amestecul preferat de substraturi din aminoacid cuprinde formele L de serină, glicină, histidină, arginină, alanină, prolină, tirosină, valină, leucină, izoleucină și lizină în proporție de 20,4 : 35,8: 35,8 : 132 : 180 : 360 : 21 6 : 160 : 72 : 68 : 780.
Așa cum s-a arătat mai sus, produsele derivate din rearanjament Amadori au capacitatea de a reduce fericianura de potasiu, cum ar fi testul chimic ce reprezintă o bază pentru determinarea rapidă a activității biologice a compozițiilor formate în reacția dintre aminoacid și zaharidă.
S-a determinat că produsele reacției de tip Amadori sunt active, în special active dacă amestecul unei zaharide simple de aceeași compoziție și aceeași proporție ca cele din extractul natural de turbă reacționează cu un amestec de compuși aminoacizi de aceeași compoziție și aceeași proporție (în greutate], ca cele din extractele naturale de turbă, în prezența unui solvent apos, de preferință cu adaos de alcool inferior - și opțional având urme de elemente anorganice în extractele naturale de turbă - la temperatură înaltă (și opțional sub presiune) și, prin urmare, prelungind încălzirea în scopul inițierii rearanjamentului Amadori, pentru produsele obținute, simultan sau consecutiv înlăturând solventul, oprind reacția de rearanjare Amadori în punctul la care amestecul de reacție devine colorat portocaliu deschis - brun, uscând produsele astfel obținute si purificând la fel cum s-a arătat, prin intermediul coloanei cromatografice si colectând în final fracțiile care cauzează reducerea maximă a fericianurii de potasiu.
în una dintre formulări, compoziția farmaceutică (instant) conține ca ingredient activ unul din produsele de reacție de formula R/ - NH - R2' sau un compus specific de formula R3 - NH - R2 împreună cu un agent vehiculant corespunzător farmaceutic și/sau un adjuvant și/sau opțional un lubrifiant în proporția ingredient activ față de componentii remanenți de 1 : 1 ... 1 : 1000, de preferință 1 : 8 ... 1 : 20 și, în special, de 1 : 9.
□ altă formulare farmaceutică avantajoasă conține ca adaos la ingredientul activ lactoza și lubrifiant, proporția în greutate de lactoză față de lubrifiant fiind de 20 : 1 ... 100 : 1, de preferință 50 : 1.
RO 115633 Bl
Aceste preparate farmaceutice sunt utilizate pentru a trata și/sau a preveni îmbolnăvirile hematologice și/sau imunologice și/sau pentru a stimula sistemul imunitar 250 uman și/sau a animalelor prin inducția formării citokinelor.
ϋ altă utilizare a ingredienților activi este în preparatele cosmetice. Ingredientul activ este prezent în asemenea preparate în cantitate de 0,01 ... 10% în greutate, de preferință 0,01 ... 1% greutate și, în special, în cantități de 0,05 ... 0,1% greutate. Aceste preparate cosmetice conțin, alături de ingredientul activ, și un agent vehiculant 255 uzual, adjuvanți, componenți de completare și/sau miresme.
Se dau, în continuare, 13 exemple de realizare a invenției:
Exemplul 1 .într-un balon de 25 ml al unui evaporator rotativ plasat într-o baie cu apă caldă, s-au încărcat:
1,47 g [0,01 M) L - acid glutamic 260
0,84 g [0,01 M) NaHCO3
0,91 g [D-glucoză]
0,91 g galactoză și
3,00 ml apă redistilată.
Amestecul de reacție s-a încălzit până la 80°C, când, de preferință sub presiune 265 scăzută. 50% din apă a fost evaporată și apoi la presiunea atmosferică s-a încălzit la temperatura de 80 ... 85°C, la care s-a menținut timp de 120 min, când acesta devine colorat în portocaliu. Soluția apoasă concentrată, de consistența unui sirop, s-a evaporat la sec sub presiune redusă. Produsul de reacție solid de culoare portocaliu-roșu astfel obținut s-a marcat cu simbolul D-10 și s-a păstrat pentru testul biologic. 270
Exemplul 2.într-un balon de 25 ml al unui evaporator rotativ, plasat într-o baie cu apă caldă, s-au încărcat:
1,33 g [0,01 M) L - acid aspartic
0,84 g (0,01 M) NaHC03
0,91 g D-glucoză 275
0,91 g galactoză și
3,00 ml apă redistilată.
Amestecul s-a încălzit până la 80°C sub agitare rotativă, s-a concentrat sub presiune când volumul total de apă de 1,5 ml s-a evaporat și apoi s-a tratat la presiunea atmosferică și la o temperatură de 8O...85°C, după care acesta a devenit colorat în 280 portocaliu-deschis; amestecul s-a menținut astfel timp de 60 min.
Amestecul de reacție - o soluție apoasă concentrată ca un sirop - s-a uscat sub presiune scăzută. Produsul de reacție rezultat s-a uscat continuu, rezultând o pulbere de culoare galben-portocaliu. Acesta s-a marcat cu simbolul D - 11 si s-a păstrat pentru testul biologic. 285
Exemplul 3.într-un balon de 25 ml al unui evaporator rotativ, plasat într-o baie cu apă caldă, s-au încărcat:
1,05 g (0,01 M) L - serină
0,91 g D-glucoză
0,91 g galactoză și 290
2,50 ml apă redistilată.
Amestecul s-a încălzit la 85...92°C sub agitare rotativă. După 100 min, soluția începe să se coloreze în oranj. Presiunea s-a redus și produsul de reacție s-a evaporat până la sec. Produsul de reacție s-a plasat într-un strat transparent oranj pe peretele vasului. Acesta s-a colectat și s-a măcinat obținându-se o pulbere. Produsul astfel obținut 295 s-a marcat cu D-12 și s-a păstrat pentru testul biologic.
RO 115633 Bl
300
305
310
315
320
325
330
335
Exemplul 4. într-un balon de 25 ml al unui evaporator rotativ, plasat într-o baie cu apă caldă, s-au încărcat:
1,66 g [0,005 M) D-acid glutamic
0,42 g (0,005 M) NaHC03
0,45 g D-glucoză
0,45 g galactoză și
3,00 ml apă redistilată.
Amestecul s-a încălzit la 80°C, s-a evaporat sub presiune, când volumul de 1,5 ml apă s-a evaporat și apoi s-a tratat la presiune atmosferică la o temperatură de 85°C. După 60 min, amestecul a căpătat culoarea oranj; presiunea s-a scăzut și soluția apoasă concentrată, cu aspect de sirop, s-a evaporat până la sec. înainte ca reziduul să devină uscat definitiv s-au introdus în vas de două ori câte 10 ml de etanol anhidru și s-a evaporat pentru a elimina umiditatea remanentă. Produsul de reacție uscat astfel obținut s-a măcinat pentru a se obține o pulbere care s-a marcat cu D-13 și s-a păstrat pentru teste biologice.
Exemplul 5. în scopul obținerii - pe cale sintetică - a unui echivalent de fracție biologică activă a extractului de turbă, în balonul unui evaporator rotativ, plasat în baie cu apă caldă, s-au încărcat următoarele:
20,5 mg L-serină
35,8 mg L-glicină
35,8 mg L-histidină
132,0 mg L-arginină 180,0 mg L-alanină 360,0 mg L-prolină 216,0 mg L-tirosină 160,0 mg L-valină 68,0 mg L-izoleucină 72,0 mg L-leucină 780,0 mg L-lizină
2000,0 mg D-glucoză
1000,0 mg D-xiloză
400,0 mg D-galactoză
100,0 mg D-ramnoză 100,0 mg D-fructoză și 6,0 ml apă redistilată.
Amestecul s-a agitat prin rotație și s-a încălzit sub presiune timp de 45 min la temperatura de 75°C cu creștere până la 86°C. în această perioadă, s-au evaporat aproximativ 3 ml apă și substraturile s-au dizolvat total. Amestecul de reacție s-a menținut 30 min la presiune atmosferică la temperatura de 85...86°C, pentru a facilita reacția de rearanjament Amadori. în acest timp soluția își schimbă rapid culoarea în roșu-brun. Presiunea a fost redusă și s-a continuat încălzirea la 84°C, când solvenții s-au evaporat simultan. La sfârșitul evaporării s-au introdus de două ori câte 1 5 ml etanol anhidru și amestecul de reacție s-a menținut astfel pentru uscare. Balonul conținând produsul de reacție uscat s-a plasat într-un exicator pe clorură de calciu timp de 18 h; apoi produsul de reacție s-a măcinat pentru a se obține pulbere. S-a obținut astfel o cantitate de 4,5 g de produs pulbere care s-a marcat cu simbolul EK2-S.
O porție de 4 g din acest produs de reacție s-a dizolvat în 20 ml apă distilată și s-a plasat într-o coloană cromatografică de 25 mm x 330 mm, umplută cu adsorbant
340
RO 115633 Bl
Amberlite1R) XAD-2, de puritate analitică. Coloana s-a eluat cu 0,4 ml/min apă distilată. 345 S-au colectat fracții de câte 10 ml, în total un volum de 450 ml. Conținutul fracțiilor s-a monitorizat cromatografic.
Fracțiile consecutive cu nr.11 - 13 s-au combinat și s-au evaporat sub presiune redusă. Aceste fracții s-au caracterizat printr-un conținut mare de produse de tip rearanjament Amadori (confirmat de testul reducerii concentrației de fericianură de potasiu). 350 Produsul s-a păstrat pentru teste biologice sub simbolul EK2-S-11.
Testele biologice pentru determinarea activității biologice s-au realizat cu șoareci imunizați Balb/C de ambele sexe, la o vârstă de 8...10 săptămâni. Imunizarea s-a efectuat prin administrare peritoneală de 0,2 ml de 10% suspensie de eritrocite de oaie (SRBC), de exemplu, 6 x 108 celule. Eritrocitele s-au fixat într-o soluție Alsever sterilă, 355 ce are următoarea compoziție:
glucoza - 2,05 g citrat de sodiu - 0,8 g clorură de sodiu - 0,42 g acid citric - 0,055 g 360 apă redistilată până la 100 ml.
în soluția Alsever, proba de sânge de oaie aseptic s-a introdus în proporție de 1 : 1 si amestecul s-a menținut timp de 3 zile la temperatura de + 4°C. Eritrocitele astfel stabilizate si trecute în probă aseptică s-au introdus în soluție tampon de sare fosfat (PBS) pentru a le spăla. Spălarea eritrocitelor cu PBS se execută de două ori și apoi sunt 365 centrifugate timp de 10 min la 2000 rpm. Celulele spălate sunt utilizate sub formă de suspensie 10% în PBS. O astfel de suspensie este utilizată pentru imunizarea șoarecilor Balb/C.
Produsul de reacție pentru testare s-a administrat intraperitoneal (i.p.) sau oral (p.o) de patru ori la dozele dorite, prima administrare fiind la două ore înaintea imunizării 370 șoarecilor cu SRBC, în timp ce celelalte trei doze s-au administrat după imunizare la interval de 24 h.
Fiecare grup de animale pentru testare s-a tratat cu doze diferite din produsul de reacție pentru testare: 10 mg/Kg, 1 mg/Kg, 0,1 mg/Kg și 0,01 mg/Kg.
Un grup de animale pentru control a fost de asemenea imunizat cu SRBC, dar în 375 locul substanței de testare s-au administrat 0,2 ml de PBS la aceeași perioadă de timp.
Fiecare grup de animale, de control și de testare, în toate experimentele a constat din 8 ... 1 2 șoareci.
în ziua a patra (în cazul determinării de anticorpi tip 7 S) și a cincea după imunizare, șoarecii au fost ușor anesteziați cu eter și s-a scos sânge prin extirparea globului 380 ocular. Sângele s-a colectat în tubul de testare, apoi a fost ruptă șira spinării și s-a scos splina. Sângele s-a folosit pentru obținerea serului necesar determinărilor de anticorpi hemoglutinanți de tipul 1 9 S + 7 S si 7 S, pe când splina s-a folosit pentru a prepara celule necesare determinării de procente de celule care pot forma globule roșii - E si pentru determinarea activității hemolitice. Pentru astfel de utilizări s-a prelucrat splina 385 șoarecilor supuși testării.
Celulele splenocite obținute s-au suspendat în cca. 2 ml de mediu Hank la temperatura de + 4°C, stratificate pe Ficoll - Uropolin gradient de densitate de 1,077, apoi sau centrifugat timp de 1 5 min la 3000 rpm. la temperatura de 4°C. După separarea din interfaze, stratul limfocitar s-a plasat în mediul Hank la temperatura de + 4°C și s-a 390 spălat de două ori cu centrifugare timp de 7...10 minu la 1800 rpm. Splenocitele s-au suspendat apoi în 1 ml mediu Hank la o astfel de proporție încât să conțină 1 x 106 celule.
RO 115633 Bl
Pentru fiecare test, procentul de celule moarte s-a determinat prin amestecarea unei picături din suspensia de testare de splenocite cu o picătură într-o soluție colorată care conține 4 părți de soluție 0,2% tripan albastru și o parte soluție de 4,25% NaCI. S-a determinat la microscop procentul de splenocite moarte pentru fiecare 100 celule. Celulele moarte sunt colorate albastru-intens, pe când cele vii sunt deschise la culoare. Prezența celulelor moarte în proporție de peste 10% este critică; o astfel de probă va fi eliminată și nu va mai fi utilizată în continuare.
Toate fazele realizate cu celule de testare vor fi performante în condiții de aparatură din sticlă siliconică de laborator, plasată în baie de gheată.
Exemplul G.în primul test s-a determinat efectul produșilor de reacție de testat asupra numărului de celule care produc anticorpi hemolitici (PFC - IgM). Testul s-a realizat după cum urmează: la 0,5 ml de soluție 0,5% agaroză plasată într-un tub de testare susținută în baie cu apă caldă la temperatura de 45°C s-au adăugat 0,1 ml de suspensie 10% SRBC (preparată așa cum s-a descris mai sus). Apoi, 0,1 ml suspensie de splenocite având o densitate de 1 x 106 celule/ml s-au adăugat la amestecul de mai sus. acesta fiind omogenizat rapid și turnat imediat pe lamele, acoperite în prealabil cu agaroză. Lamelele au fost incubate la temperatura de 37°C timp de două ore. Apoi, probele testate au venit în contact cu complement de sânge de cobai și s-au diluat la 1: 20 timp alte două ore. După incubarea probelor de testare, s-a numărat numărul de plăci formatoare de celule (PFC) și s-a recalculat pentru 1 x 106 splenocite. Fiecare test s-a repetat de două ori.
Amplificarea puternică a răspunsului la SRBC, exprimată în termenii de creștere a numărului de splenocite producătoare de hemolizină IgM (PFC). s-a observat după administrarea de substanță D-11 la o doză de 0,1 mg/Kg. Amplificarea a fost de 119%. Când doza zilnică a fost mărită de 10 ori până la 1 mg/Kg, amplificarea răspunsului a scăzut la 53%.
Produsul de reacție D-12 a arătat o mai mare activitate - o creștere de 58% la o doză de 1 mg/Kg.
Produsul de reacție EK2-S-11 în acest test a arătat cea mai puternică activitate la o doză de 0,1 mg/Kg (o creștere de 65%). La o doză de 10 ori mai mare, de exemplu la 1 mg/Kg, creșterea a scăzut ușor până la 52%.
Produsul de reacție D-13 testat la o doză de 1 mg/kg duce la o creștere de 40% Când doza a crescut la 10 mg/Kg adică de 10 ori. răspunsul a fost numai de 14% creștere.
Exemplul 7. Un test de hemoaglutinare activă s-a realizat de asemenea determinând anticorpii de anti-SRBC tip 19S + 7S și anticorpi 7 S. Pentru a determina nivelul de anticorpi 19 S-lgM, serul pentru șoareci s-a preparat în a patra zi după imunizare cu SRBC, pe când pentru a determina nivelul de anticorpi 7 S-lgG, astfel de preparate au fost făcute la 10 zile după imunizare cu SRBC, care se referă la ziua de maximă cotă de anticorpi pentru tipul de imunizare a șoarecilor cu SRBC.
A. Determinarea numărului de anticorpi de tip 19S + 7S: o probă de sânge s-a centrifugat timp de 30 min la 3500 rpm. Din fiecare probă astfel preparată s-a colectat serul și s-a plasat într-o baie cu apă încălzită la temperatura de 56°C timp de 30 mm, pentru a dezactiva produsul - complement din sânge. Apoi, s-au preparat soluții cu diluții diferite din fiecare ser de testare (de la 1 :1 la 1 : 4096), folosind un microtitrator si microplăci de formă U, având un volum de 250 4 fiecare. Serurile diluate s-au incubat la temperatura camerei timp de o oră. La fiecare probă de ser,s-a adăugat o picătură de suspensie de 1% SRBC în PBS (preparate așa cum s-a descris mai sus); amestecurile s-au incubat la temperatura de 37°C timp de încă două ore și apoi s-au păstrat la
RO 115633 Bl temperatura de + 4°C. Rezultatele s-au analizat a doua zi. Diluția maximă la care hemoaglutinarea este sensibilă (dependentă] s-a considerat ca fiind numărul de anticorpi. Apariția unui inel pe fundul vasului este un semn al producerii hemoaglutinării. Apariția unei 445 formații sub formă aglomerată punctiformă pe fundul vasului este considerată ca un rezultat negativ, adică lipsită de hemoaglutinare. Pentru analizele statistice ale rezultatelor, creșterea diluției serului în substanțele de testat a fost comparată cu aceea a grupei de control.
Produsul de reacție, D-11 administrat la o doză 1 mg/Kg, face să crească IgM 450 de 2,57 ori. La o doză de 10 ori mai mare, efectul stimulativ în comparație cu grupa de control arată o creștere de 3,5 ori.
în acest test, produsul de reacție D-12 arată o activitate slabă. La o doză de 0,1 mg/Kg acesta duce la o creștere de două ori a IgM, la o doză de 1 mg/Kg creșterea este de 4 ori. 455
Produsul de reacție EK2 - S - 11 arată o activitate puternică în acest test. La o doză de 0,1 mg/Kg, acesta duce la o creștere de 4,3 ori a IgM, iar la o doză de 1 mg/Kg creșterea este de 3,6 ori.
Produsul de reacție D-13 la o doză de 1 mg/Kg duce la o creștere de 3 ori a IgM, iar o mărire de 10 ori a dozei duce la o creștere de 1,5 ori. 460
B. Determinarea numărului de anticorpi 7S: Serurile inactivate pentru testare s-au combinat într-o proporție de 1 : 1 cu o soluție 0,1 M de 2 - mercaptoetanol și amestecul a fost incubat timp de 30 min la temperatura de 37°C.
Imunoglobulina de tip 19 S - (IgM) este distrusă de 2-mercaptoetanol, pe când imunoglobulina de tip 7 S - (IgG) nu este susceptibilă la acțiunea 2-mercaptoetanolului. 465 După 30 min de incubație, produsul de reacție redus s-a întrerupt prin răcire până la temperatura + 4°C timp de 15 min. Apoi, s-a preparat o serie de diluții într-o manieră similară cu cea descrisă mai sus, în scopul determinării numărului de anticorpi 1 9 S și s-au combinat cu o suspensie de 1% SRBC; după 2 h de incubație la temperatura de 37°C, probele s-au stocat la temperatura de + 4°C. Rezultatele s-au evaluat 470 în ziua următoare după criteriile de determinare a numărului de hemoaglutinare descris mai sus. Simultan, s-a realizat un test de control prin combinarea unei suspensii 1% SRBC cu PBS în proporție de 1:1.
Când substanța D-11 s-a testat la o doză de 1 mg/Kg, așa cum s-a descris mai sus, aceasta a dus la o creștere a producerii de anticorpi IgG de 3,16 ori. La o doză de 475 10 mg/Kg creșterea a fost de 2,2 ori.
Produsul de reacție D-12 testat la o doză de 0,1 mg/Kg și 1 mg/Kg a stimulat producerea de anticorpi IgG de 1,3 ori: la o doză de 10 mg/Kg de 1,5 ori.
Produsul de reacție EK2 - S - 11 la o doză de 0,1 mg/Kg a stimulat producerea de IgG de 1,9 ori, la o doză de 1 mg/Kg de 2,89 ori (în comparație cu testul de 480 control).
Rezultatele testelor A și B, obținute pentru fiecare lot de producție sau pentru fiecare fracție de produse de reacție biologic active sintetizate conform invenției și care au dat răspuns imunologic asa cum s-a menționat mai sus, au fost baza analizelor statistice prin metoda T - student, a = 0,05. Rezultatele obținute pentru fiecare doză 485 testată s-au comparat cu un test de control executat în paralel și au arătat o creștere a activității biologice.
Exemplul 8. Grupul de produse de reacție biologic active, obținute conform exemplelor 1 ...5, a fost de asemenea supus testului în care s-a determinat procentul de splenocite care formează globule roșii - E. 490
RO 115633 Bl □ cantitate de 250 dintr-o suspensie de 1% SRBC și 250 J de celule de testat, la o concentrație de 1 x 10s celule/ml, s-au adăugat la 550 I mediu Hank.
Fiecare din aceste probe s-a incubat într-o baie cu apă caldă echipată cu agitator, timp de 15 min, la temperatura de 37°C. Apoi, acestea s-au stocat la temperatura de + 4°C timp de încă 20 h. Procentul de splenocite formatoare de globule roșii - E cu SRBC s-a determinat după ce suspensia s-a colorat cu 1 ...3 picături de cristal violet. Fiecare probă a fost supusă testului de citire de trei ori a procentului de splenocite, numărând de exemplu un total de 400 splenocite. Astfel, o splenocită înconjurată cu minimum trei eritrocite s-a considerat a fi o globulă roșie - E.
Pentru evaluarea statistică, procentul de creștere a numărului de splenocite I cu globule roșii - E s-a comparat între substanțele de testat și grupul de control.
în acest test, efectul stimulativ cel mai puternic l-a prezentat produsul de reacție D-11 și EK2 - S - 11, 63% și, respectiv, 70% la o doză de 1 mg/Kg.
La o doză de 10 ori mai mică, de exemplu 0,1 mg/Kg, valorile au scăzut la 45% si, respectiv, 57%.
Produsul de reacție D-1 2 la o doză de 1 mg/Kg a facilitat creșterea abilității de a forma globule roșii - E (cu 22%), în comparație cu grupa de control.
Valoarea corespunzătoare pentru o doză de 10 ori mai mică, de exemplu 0,1 mg/Kg, a fost de 29%.
Produsul de reacție D-13 a prezentat efect maxim la o doză de 1 mg/Kg (58%), pe când la o doză mai mare efectul este ușor micșorat.
Activitatea biologică a compușilor sintetizați s-a evaluat conform cu următoarele teste:
1. Test pentru determinarea procentului de splenocite formatoare de globule roșii - E, realizat după Bach și Dardenne (Ce//. Imunol. 3, 1-16, 1972);
2. Test pentru determinarea numărului de celule producătoare de anticorpi hemolitici de tip IgM, realizat conform metodei Jerne, modificată de Mishell și Dutton [J.Exp.Med., 126, 423-442, 1967] și,
3. Test pentru determinarea numărului de hemoaglutinanți 19 S+7 S și 7 S, realizat conform metodei Adler de hemoaglutinare activă [J.Imunol. 95, 26 - 38, 39 47, 1965) cu folosirea de microplăci (J.lmunofarmacol., 4, 43 - 52, 1982).
Exemplul 9. într-un balon de la un evaporator rotativ, plasat într-o baie de apă caldă, s-au încărcat:
1,33 g (0,01 M) L-acid aspartic
0,84 g (0,01 M ) NaHC03
10,00 g dextran hidrolizat cu greutate moleculară medie de cca. 3000 daltoni
10,00 ml apă redistilată
Amestecul s-a încălzit sub presiune la o temperatură de 70°C, când substanțele solide au fost complet dizolvate, eliminate prin distilare, pe parcursul căreia s-au evaporat 3 ml apă s-a evaporat (timpul de încălzire a fost de aproximativ 30 min). Balonul cu soluția realizată s-a acoperit și s-a plasat într-un sterilizator cu abur și s-a încălzit sub presiune la o temperatură de 121°C, timp de 40 min. După răcire, soluția obținută, de culoare galben-portocaliu, s-a diluat cu 15 ml în apă, s-a clarificat prin centrifugare si s-a uscat cu aer la temperatura inițială de + 160°C și la temperatura finală de + 85°C, obținându-se 10,5 g produs de reacție de culoare bej-deschis, ușor solubil în apă.
Prezența produselor de rearanjare tip Amadori în acest produs de reacție a fost confirmată prin testul cu fericianură de potasiu, metodă descrisă de Borsook, Abrams și Lowy, J.Biol.Chem.215, 1955, 111-124 și prin metoda cromatografică.
RO 115633 Bl
Testele biologice, așa cum s-au descris în exemplele precedente, au confirmat o activitate imunotropică ale produselor de mai sus, similar cu cele prezentate de 540 formulările obținute cu zaharuri simple.
Exemplul 10.Un pahar conic s-a încărcat cu 5,0 g dextran hidrolizat cu greutate moleculară medie de aproximativ 5000 daltoni, 1,1 g L-prolină și 4,0 ml apă redistilată.
Conținutul vasului s-a dizolvat prin agitare; amestecul uniform astfel obținut s-a plasat într-un sterilizator cu abur și s-a încălzit sub presiune la temperatura de 110°C 545 timp de 40 min.
Soluția transparentă rezultată, de culoare oranj, s-a diluat cu 20 ml apă redistilată și a devenit clară prin centrifugare.
Soluția limpede obținută s-a uscat, obținându-se 5,3 g de produs de reacție ușor solubil în apă. Activitatea imunotropică a fost similară cu aceea observată în alte 550 experimente, conform exemplelor precedente.
Exemplul 11. Metodele convenționale testează activitatea biologică a compușilor la șoareci și nu sunt aplicabile la oameni. Din această cauză s-au introdus noi bioteste, care măsoară cantitățile și activitatea citokinelor eliberate de leucocitele din sângele periferic (PBL), tratate cu produsele de reacție, conform cu cele descrise în exemplele 555
1...5, 9 și 10.
Citokinele sunt hormoni asemănători cu proteinele, care joacă un rol important în practica reacțiilor imunologice, ca și în procesele obișnuite care mențin homeostaza.
Verificarea citotoxicității: Citotoxicitatea produselor de reacție s-a determinat în plămânul uman prin celulă - adenocarcinom A 549 (inclus în American Type Culture 560 Collection ATCC CCL 185). Monostratul celular s-a tripsinizat și s-a amestecat cu suspensiile de 2 χ 105 celule/ml în mediu Dulbecco-Eagle modificat (DMEM) ,plus 10% ser de vițel (CS), cu diferite doze de medicamente așezate în microplăci de plastic și incubate timp de 48 h la 37°C. Concentrația minimă a fost CD50 pentru compusul care a cauzat 50% - distrugerea celulelor de cultură măsurate prin 0,015% soluție de roșu - 565 neutral în DMEM.
Inducția de citokine:
Straturile de acoperire din sânge de bou sănătos s-au obținut de la centrele regionale de transfuzie. Eritrocitele s-au curățat prin tratare cu NH4CI, conform metodei Cantell si col. (Cantell, K, Hirvonen S.Kauppinen H.L: Production and Parțial Purification 570 of Human Imune Interferon, Meth. Enzymol., 119, 54, 1986). Leucocitele de la un singur donor, conținând 8 χ 10s leucocite/ml în mediu RPMI 1640, s-au suplimentat cu 10% ser de vițel fetal (FCS), L-glutamină și antibiotice. întreg lotul de FCS s-a pretestat. S-a utilizat numai FCS nonmitogenic pentru culturi PBL. Inductorii de citokine s-au adăugat la 1 ml de culturi (exprimat în volume). Referitor la inductorii de citokine, aceștia au 575 fost fitohemaglutinin (PHA) [Farmacia Fine Chemicals, Sweden) și LPS din E.coli 0111 : B 4 (Difco Laboratiories). Culturile induse de PBL s-au incubat în atmosferă de 5% C02 în aer la 37°C timp de 20 h, cu centrifugare. Supernatanții s-au stocat la temperatura de + 4°C si s-au testat pentru activitatea TNF și IFN timp de o săptămână.
Proba Interferon (IFN): 580
S-au preparat celule monostrat confluente de A 549, în microplăci în DMEM cu 10% CS, L-glutamină și antibiotice (100 unități/ml de penicilină și 100 ,^g/ml de streptomicină) Probele IFN diluate în plăci s-au adăugat la celulele monostrat și s-au incubat la temperatura de + 37°C timp de 20 h, în 5% C02 în aer.
Celulele au fost apoi spălate și s-au inițiat cu virusul encefalomiocarditis (EMCV). 585 Calitatea IFM a fost definită ca fiind diluția probei de IFN la care efectul virusului citopatogenic este redus la 50% după 48 h de incubație. S-a folosit metoda MTT (3-bromură
RO 115633 Bl de [4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difeniltetrazoniu - (Hansen, M.B. Nielsen, S.E și Berg K: Re examination and Further Development of a Precise and Rapid Dye Method for Measuring Cel! Growth/Cell Kill J.lmmuno Meth., 1989, 119, 203 - 210], pentru a măsura distrugerea celulei în baleaj ELISA. Standardele de laborator pentru IFN s-au inclus în toate încercările: Recombinat human IFN - γ (Genentech Inc., USA, specific activity 2 x 10? unita/mg], the natural human leukocyte IFN-a(3 x 1O lU/ml] and IFN - y [2 x 1CF lU/mf] obtained from Dr.K.Cantell, Helsinki, Finland],
Proba - Factorul de necroză tumorală [TNF] :
Activitatea citotoxică a TNF s-a măsurat în celule L 929 conform cu Flick și Gifford (Comparison of in Vitro Cell Cytotoxic Assays for Tumor Necrosis Factor. J.lmmuno!. Meth., 68, 167, 1984],
Probele și soluția de actinomicin D s-au adăugat la culturi monostrat de celule. După incubație la temperatura de 37°C timp de 20 h, culturile s-au vopsit cu cristal violet și efectele toxice au putut fi determinate. Cantitatea ce cauzează aproximativ 50% distrugere a culturilor de celule s-a definit ca fiind o unitate a activității TNF. Comparând cu o preparație de TNF - [Genentech. Inc. USA], s-a stabilit că o unitate în încercarea de față a fost egală cu 100...200 pg/ml TNF.
încercarea de neutralizare a citokinei: antihuman TNF - a de iepure, lot 2958 - 40 și anti-human IFN - γ - de iepure, lot 2891 - 56 (Genentech. Inc. USA] anti-human IFN «. β de oaie si antihuman IFN - γ de oaie [obținut de Dr.K.Cantell, Finland], Preparatele de citokine s-au tratat cu ser diluat 1 : 200 în mediu de cultură si s-au incubat timp de o oră la temperatura camerei. Apoi, activitățile IFN și TNF s-au determinat așa cum s-a descris mai sus.
O serie de cinci încărcături diferite [Ln la Lg] de PBL, preparate din sânge sănătos, s-a utilizat după cum urmează: concentrația optimă PBL pentru determinări s-a stabilit la valoarea 8 x 106 celule pentru 1 ml de mediu. [RPMI 1640 suplimentat cu 10% ser de vițel fetal și adaos de antibiotice].
S-a incubat PBL - uman cu produși noi de reacție I - XI (tabel 1] rezultați în sinteza IFN și TNF. Răspunsurile observate au fost dozele rezultate în domeniul 3...100 <:g/ml de compus (tabelul 2], Compușii folosiți în concentrațiile indicate au fost noncitotoxici. în toate biotestele efectuate s-a inclus controlul negativ și controlul pozitiv. Controlul negativ măsoară cantitatea de citokine [IFN și TNF] produse spontan, fără adaosul unui stimulent exogen. Controlul pozitiv indică cantitatea de citokine produse în răspunsul fată de un inductor cunoscut; în cazul nostru acesta a fost fitohemaglutinin (PHA - Farmacia, Sweden, 10 g per ml].
Este necesar de a sublinia că inducția de citokine în culturi PBL-human, obținute de la diferiți indivizi, de obicei a dat o variație considerabilă de rezultate. Fenomenul poate fi explicat în termeni legați de diferențierea genetică a populației umane. Mai mult, culturile PBL de obicei produc spontan IFN si TNF.
Cu alte cuvinte, răspunsurile înalte sau răspunsurile joase sau chiar non - răspunsurile ca reacție sunt destul de des observate în cazul donorilor sănătoși de PBL [este vorba de răspunsurile față de inductor].
Privind limitările prezentate, rezultatele biotestelor au arătat că PBL (Lq - L5], tratate cu produșii de reacție (I - XI] ce au dat IFN și/sau INF, pot fi măsurate cantitativ, în cazul L1 care a conținut leucocite cu un înalt răspuns, produsul II de reacție (care conține forma L a acidului aspartic] s-a constatat că este cu mult mai activ ca o citokinăinductor, față de produsul III de reacție (care conține forma D a acidului aspartic, care este mai scump]. Observația este importantă din cauza faptului că în special formele L ale aminoacizilor sunt recunoscute de celule ca substraturi naturale în reacțiile biochimice.
RO 115633 Bl în plus, pentru estimarea activității biologice a produselor de reacție, partea aminoacidă a moleculei este mai importantă decât forma ei de zaharidă. în locul zaharidelor simple, de preferat cu greutate moleculară joasă, în special mai puțin de 1OOO 640 daltoni, se pot utiliza polizaharidele (cum ar fi dextran, produs de reacție X - XI], care reacționează similar. în mod contrar, polizaharidele conținând resturi de aminoacizi pot avea activitate biologică și această activitate este reținută când ei sunt descompuși la oligozaharide cu legături de aminoacid. Rezultate similare pot fi de asemenea observate dacă o peptidă cu lanț scurt este folosită în loc de aminoacid simplu și este utilizată pen- 645 tru a stimula leucocitele să producă citokine.
Șapte încărcături de referință ale TTP nefracționate s-au testat în peste 100 culturi PBL de la diferiți donori și produc de la 10 la 1000 unități de IFN per ml și de la 9 la 750 unități de TNF/ml. Fracția EK2 - S preparată dintr-un amestec ce corespunde conținutului extractului natural de turbă (exemplul 5] a fost încercată în 8 culturi PBL de 650 la 8 donori de sânge diferiți. S-a găsit că acesta este cel mai activ preparat în inducerea de IFN și totodată de TNF.
Aplicații posibile ale produselor de reacție sunt ca imunomodulatori și o astfel de activitate a fost utilizată din punct de vedere clinic. Regenerarea țesutului este o altă activitate probată. Activitatea anti-cancer, probabil legată de prezența interferonului indus 655 și a factorului de necroză tumorală, a fost de asemenea observată în încercările făcute. S-a notat si activitatea anti-virală.
Calea de utilizare a produselor de reacție de mai sus include administrarea lor orală, dar tratamentul parenteral este de asemenea posibil, ca și aplicarea topică, curentă. Produsele apar ca fiind relativ stabile. 660
Tabelul 7
Lista produșilor de reacție
| Nr. | Substraturi |
| I (D-10) | L-acid glutamic, glucoza, galactoză |
| II (D-11) | L-acid aspartic, glucoză, galactoză |
| III (D-13] | D-acid aspartic, glucoză, galactoză |
| IV (D-1 2] | L-serină, glucoză, galactoză |
| V | EK2-S (fracțiile 11 - 13] |
| VI | EK2-S (fracțiile 6 - 7] |
| VII | EK2-S (fracțiile 8-10) |
| VIII | EK2-S (fracțiile 28 - 34] |
| IX | L-prolină, glucoză |
| X | L-acid aspartic + dextran (varianta 1) |
| XI | L-acid aspartic + dextran (varianta 2] |
675
Exemplul 12.Formulările farmaceutice care conțin drept ingredient activ produsele de reacție conform exemplelor 1 ... 5, 9 și 10 s-au preparat folosind următorii produși de reacție:
RO 115633 Bl
A. Tablete/granule:
5,0 g produsul de reacție obținut conform exemplului 1 sau 10 (substanță activă) 444,0 g lactoză acceptabilă din punct de vedere farmaceutic
1,0 g lubrifiant, de exemplu MYVATEX|R), produs comercial de EASTMAN KODAK Ingredienții s-au omogenizat și s-au granulat cu 30% soluție apoasă de etanol, pe cale convențională, apoi s-au uscat la temperatura de 40°C. Granulele s-au utilizat la prepararea capsulelor, fiecare conținând aproximativ 450 mg granule de exemplu 5 mg de substanță activă.
B. în aceeași manieră convențională, substanțele active obținute conform exemplelor precedente, 1 ...5; 9 și 10, au fost folosite în alte formulări farmaceutice, incluzând și agenți de vehiculare corespunzători.
Tabelul 2
Activitatea biologică a produselor de reacție l-XI în Human PBL
| Doza | Unități IFN/ml | Unități TNF/ml | |||||||||
| «g/ ml | L2 | L3 | l4 | l5 | ^2 | l3 | l4 | l5 | |||
| Contrai | - | 10 | <10 | <10 | 20 | <10 | 80 | 9 | 27 | 27 | <9 |
| PHA | 10 | 100 | 30 | 30 | 60 | 100 | 250 | 80 | 250 | 250 | 250 |
| I | 100 | 100 | <10 | <10 | 20 | - | 250 | 9 | 9 | 160 | - |
| 30 | - | - | - | 30 | - | - | - | - | 500 | - | |
| 10 | 30 | <10 | <10 | 30 | - | 80 | 9 | 18 | 160 | - | |
| 3 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 160 | - | |
| II | 100 | 100 | 10 | <10 | 10 | <10 | 250 | 18 | 18 | 250 | <9 |
| 30 | - | - | - | 10 | <10 | - | - | - | 250 | <9 | |
| 10 | □ o □ | 10 | 30 | 10 | 10 | 250 | 50 | 27 | 250 | <9 | |
| 3 | - | - | - | 10 | <10 | - | - | - | 160 | <9 | |
| III | 100 | <10 | <10 | 10 | 10 | <10 | 250 | 9 | 18 | 250 | <9 |
| 30 | - | - | - | 30 | <10 | - | - | - | 250 | <9 | |
| 10 | <10 | <10 | <10 | 10 | <10 | 80 | 27 | 18 | 250 | <9 | |
| 3 | - | - | - | <10 | <10 | - | - | - | 80 | <9 | |
| IV | 100 | <10 | 10 | 10 | 20 | <10 | 80 | 60 | 9 | 160 | <9 |
| 30 | - | - | - | 20 | <10 | - | - | - | 27 | <9 | |
| 10 | <10 | 30 | <10 | 20 | <10 | 80 | 50 | 18 | 80 | <9 | |
| 3 | - | - | - | 20 | <10 | - | - | - | 80 | <9 |
RO 115633 Bl
Tabel 2 [continuare]
715
| Doza | Unități IFN/ml | Unități TNF/ml | |||||||||
| V | 100 | 30 | <10 | <10 | 60 | - | 80 | 50 | 18 | 250 | - |
| 30 | - | - | - | 60 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | <10 | <10 | <10 | 10 | - | 80 | 27 | 9 | 80 | ||
| 3 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 80 | - | |
| VI | 100 | <10 | <10 | <10 | 20 | <10 | <80 | 9 | 18 | 80 | - |
| 30 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | 10 | <10 | <10 | 20 | - | 50 | 27 | 18 | 160 | - | |
| 3 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 250 | - | |
| VII | 100 | <10 | <10 | <10 | - | - | 80 | 27 | 27 | - | - |
| 30 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| 10 | 10 | <10 | <10 | - | - | 80 | 27 | 27 | - | - | |
| 3 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| VIII | 100 | <10 | <10 | <10 | - | - | 80 | 16 0 | 27 | - | - |
| 30 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| 10 | <10 | <10 | <10 | - | - | 750 | 80 | 27 | - | - | |
| 3 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| IX | 100 | 10 | <10 | <10 | 10 | - | 27 | 27 | 18 | 80 | - |
| 30 | - | - | - | 20 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | 100 | 30 | <10 | 20 | - | 80 | 27 | 18 | 80 | - | |
| 3 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 50 | - | |
| X | 100 | 100 | <10 | 20 | 20 | - | 27 | 27 | 18 | 250 | - |
| 30 | - | - | - | 30 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | <10 | 10 | <10 | 30 | - | 18 | 50 | 27 | 50 | - | |
| 3 | - | - | - | 30 | - | - | - | - | 250 | - | |
| XI | 100 | <10 | 10 | <10 | 30 | - | 18 | 27 | 27 | 50 | - |
| 30 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 250 | - | |
| 10 | <10 | 30 | <10 | 10 | - | 18 | 80 | 80 | 80 | - | |
| 3 | - | - | - | 20 | - | - | - | - | 750 | - |
720
725
730
735
740
745
Exemplul 13.Substanțele active obținute conform exemplelor precedente 1, 5, 9 si 10 s-au utilizat ca aditivi eficienți în preparatele cosmetice uzuale pentru păr și îngrijirea corpului, conținutul substanțelor fiind în proporție de 0,01... 10% greutate, în funcție de felul preparatului, metoda de aplicare și frecvența utilizării în cazul unui 750 preparat cu destinație specială.
RO 115633 Bl
Tabelul 2 [continuare]
715
| Doza | Unități IFN/ml | Unități TNF/ml | |||||||||
| V | 100 | 30 | <10 | <10 | 60 | - | 80 | 50 | 18 | 250 | - |
| 30 | - | - | - | 60 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | <10 | <10 | <10 | 10 | - | 80 | 27 | 9 | 80 | ||
| 3 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 80 | - | |
| VI | 100 | <10 | <10 | <10 | 20 | <10 | <80 | 9 | 18 | 80 | - |
| 30 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | 10 | <10 | <10 | 20 | - | 50 | 27 | 18 | 160 | - | |
| 3 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 250 | - | |
| VII | 100 | <10 | <10 | <10 | - | - | 80 | 27 | 27 | - | - |
| 30 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| 10 | 10 | <10 | <10 | - | - | 80 | 27 | 27 | - | - | |
| 3 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| VIII | 100 | <10 | <10 | <10 | - | - | 80 | 16 □ | 27 | - | - |
| 30 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| 10 | <10 | <10 | <10 | - | - | 750 | 80 | 27 | - | - | |
| 3 | - | - | - | - | - | - | - | - | - | - | |
| IX | 100 | 10 | <10 | <10 | 10 | - | 27 | 27 | 18 | 80 | - |
| 30 | - | - | - | 20 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | 100 | 30 | <10 | 20 | - | 80 | 27 | 18 | 80 | - | |
| 3 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 50 | - | |
| X | 100 | 100 | <10 | 20 | 20 | - | 27 | 27 | 18 | 250 | - |
| 30 | - | - | - | 30 | - | - | - | - | 80 | - | |
| 10 | <10 | 10 | <10 | 30 | - | 18 | 50 | 27 | 50 | - | |
| 3 | - | - | - | 30 | - | - | - | - | 250 | - | |
| XI | 100 | <10 | 10 | <10 | 30 | - | 18 | 27 | 27 | 50 | - |
| 30 | - | - | - | 10 | - | - | - | - | 250 | - | |
| 10 | <10 | 30 | <10 | 10 | - | 18 | 80 | 80 | 80 | - | |
| 3 | - | - | - | 20 | - | - | - | - | 750 | - |
720
725
730
735
740
745
Exemplul 13.Substanțele active obținute conform exemplelor precedente 1, 5, 9 și 10 s-au utilizat ca aditivi eficienți în preparatele cosmetice uzuale pentru păr și îngrijirea corpului, conținutul substanțelor fiind în proporție de 0,01... 10% greutate, în funcție de felul preparatului, metoda de aplicare și frecvența utilizării în cazul unui 750 preparat cu destinație specială.
Claims (11)
- Revendicări1. Compoziție farmaceutică pe bază de compuși de reacție tip Amadori, pentru profilaxia sau tratamentul bolilor hematologice și/sau imunologice, prin inducerea formării de citokină sau pentru regenerarea țesuturilor și/sau funcției de nutrient al celulei la animale și oameni, caracterizată prin aceea că, cuprinde cel puțin un compus de reacție tip Amadori, în special 0,01 ... 10 mg/kg corp, având formula generală:RrNH-R2 în care R5 cuprinde un radical 1-deoxi-2-cetoză derivat dintr-o zaharidă simplă, oligo- sau polizaharidă de mai puțin de 5000 daltoni, și R2 cuprinde un aminoacid sau un radical peptidic de mai puțin de 1000 daltoni, în care zaharida este în forma D, de preferință selectată din grupa constând din glucoză, xiloză, galactoză, ramnoză, fructoză, manoză,
- 2-deoxi-glucoză, 6-deoxi-glucoză, glucozamină și galactozamină, și aminoacidul este în forma L, de preferință selectat din grupa constând din serină, glicină, prolină, histidină, arginină, alanină, acid aspartic, acid glutamic, fenilalanină, treonină, cisteină, cistină, glutamină, valină, asparagină, metionină, tirosină, hidroxiprolină, lizină, triptofan, izoleucină, și leucină; alături de cel puțin un agent vehiculant, acceptabil din punct de vedere farmaceutic și/sau un lubrifiant.2. Compoziție, conform revendicării 1, caracterizată prin aceea că, cuprinde un amestec de cel puțin doi compuși de rearanjare Amadori, care au radicali de 1-deoxi-2-cetoză diferiți și/sau radicali aminoacid sau peptidici diferiți.
- 3. Compoziție, conform revendicărilor 1 sau 2, caracterizată prin aceea că, radicalii sunt prezenți esențial în aceeași compoziție și/sau esențial în același raport. în greutate, cu cele existente în extractul natural de turbă, și în care această compoziție mai cuprinde opțional urme de elemente anorganice existente și în extractul respectiv.
- 4. Compoziție, conform oricăreia din revendicările 1 la 3, caracterizată prin aceea că, cuprinde cel puțin un agent vehiculant acceptabil farmaceutic, un adjuvant și/sau un lubrifiant în raport în greutate al acestor compuși de reacție tip Amadori la agentul vehiculant, adjuvant și/sau lubrifiant de 1:1 ... 1:100, de preferință 1:8 ... 1:20, și cel mai de preferat de aproximativ 1:9.
- 5. Compoziție, conform oricăreia din revendicările 1 la 3, caracterizată prin aceea că, cuprinde cel puțin un agent vehiculant acceptabil din punct de vedere farmaceutic, un adjuvant și/sau un lubrifiant și 0,01 ... 10%, în greutate, un compus de reacție tip Amadori.
- 6. Compoziție, conform revendicării 4 sau 5, caracterizată prin aceea că, acest lubrifiant este prezent într-un amestec cu lactoză, raportul în greutate al lactozei și lubrifiantului fiind de 20:1 ... 100:1, de preferință de aproximativ 50:1.
- 7. Procedeu pentru prepararea compoziției definite în revendicarea 1, caracterizat prin aceea că, cuprinde:a) reacția cel puțin a unui aminoacid sau a unei peptide, de preferință a cel puțin doi aminoacizi diferiți și peptide, cu cel puțin o zaharidă simplă, oligo- sau polizaharidă, de preferință cu cel puțin două zaharide diferite, oligo- sau polizaharide, la o temperatură de 7O...121°C, într-o soluție apoasă concentrată, de preferință de 0,67 ... 2,75 părți, în greutate, solid la 1 parte, în greutate solvent apos,b] continuarea încălzirii, pentru a permite produșilor rezultați să efectueze rearanjarea Amadori în timp ce se îndepărtează simultan sau ulterior solventul apos, până când, de preferință după 30 ... 120 min, amestecul de reacție capătă culoarea795RO 115633 Bl portocaliu-brună, iar activitatea biologică și capacitatea de reducere a fericianurii pot fi 800 detectate în probe prelevate din amestec,c] oprirea rearanjării Amadori, de preferință înaintea producerii descompunerii din care se obțin compuși care și-au pierdut activitatea biologică,d] uscarea amestecului de reacție și/sau supunerea acestuia în continuare unei purificări prin coloana cromatografică, în care fracțiile active biologic care cauzează 805 reducerea fericianaurii de potasiu sunt colectate și, de preferințăe] combinarea amestecului uscat sau a unei fracții care rezultă din faza [d] cu cel puțin un aditiv acceptabil din punct de vedere farmaceutic, selectat din grupa constând dintr-un agent vehiculant, un adjuvant și un lubrifiant.
- 8. Procedeu, conform revendicării 7, caracterizat prin aceea că, reacția este 810 efectuată în prezența unor urme de elemente anorganice ca cele existente în extractul natural de turbă și, opțional, sub presiune și/sau în prezența unui alcool inferior, și la un raport molar preferat al zaharurilor și/sau zaharidelor la aminoacizi și/sau peptide este între 2:1 și 1:1, în special 1,5:1.
- 9. Procedeu, conform revendicării 7 sau 8, caracterizat prin aceea că, oligo- 815 sau polizaharidele au greutatea moleculară de cel mult 5000 daltoni și/sau peptidele au greutatea moleculară cel mult 1000 daltoni.
- 10. Procedeu, conform oricăreia din revendicările 7 la 9, caracterizat prin aceea că, zaharidele simple, oligo- sau polizaharidele, aminoacizii și/sau peptidele si, opțional, urmele de elemente anorganice,sunt prezente esențial în aceeași compoziție 820 și/sau esențial în același raport, în greutate, ca cele existente în extractul natural de turbă.
- 11. Procedeu, conform oricăreia din revendicările 7 la 10, caracterizat prin aceea că, cel puțin un aminoacid are două grupe carboxil și reacția este efectuată în prezența unei săruri tampon, de preferință bicarbonat de sodiu, într-un raport molar cu 825 aminoacidul de 1:1.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL29346492A PL171023B1 (pl) | 1992-02-13 | 1992-02-13 | Sposób wytwarzania nowych induktorów cytokin |
| EP92103614 | 1992-03-03 | ||
| PCT/EP1993/000327 WO1993016087A2 (en) | 1992-02-13 | 1993-02-11 | Amadori reaction compounds and products, process for their manufacture, and their use |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO115633B1 true RO115633B1 (ro) | 2000-04-28 |
Family
ID=26130822
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RO94-01361A RO115633B1 (ro) | 1992-02-13 | 1993-02-11 | Compozitie farmaceutica pe baza de compusi de reactie tip amadori si procedeu pentru prepararea acesteia |
Country Status (21)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5723504A (ro) |
| JP (1) | JPH07506344A (ro) |
| AT (1) | ATE187734T1 (ro) |
| AU (1) | AU672595B2 (ro) |
| BG (1) | BG62172B1 (ro) |
| BR (1) | BR9305878A (ro) |
| CA (1) | CA2130106A1 (ro) |
| CZ (1) | CZ285200B6 (ro) |
| DE (2) | DE632813T1 (ro) |
| ES (1) | ES2072244T1 (ro) |
| FI (1) | FI943733A (ro) |
| GR (1) | GR950300017T1 (ro) |
| HU (1) | HUT70434A (ro) |
| MX (1) | MX9300759A (ro) |
| NO (1) | NO304026B1 (ro) |
| RO (1) | RO115633B1 (ro) |
| RU (1) | RU2141337C1 (ro) |
| SG (1) | SG52390A1 (ro) |
| SK (1) | SK86994A3 (ro) |
| TW (1) | TW302368B (ro) |
| WO (1) | WO1993016087A2 (ro) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5629412A (en) * | 1994-07-11 | 1997-05-13 | Glinskii; Guennadi V. | Synthetic glycoamines that promote or inhibit cell adhesion |
| FR2746316B1 (fr) * | 1996-03-19 | 1998-06-12 | Guerlain | Nouvelles compositions cosmetologiques ou dermatologiques |
| WO1997049389A1 (en) * | 1996-06-27 | 1997-12-31 | The Picower Institute For Medical Research | 3-alkylamino-2-hydroxy-4-hydroxymethyl-2-cyclopenten-1-one advanced glycosylation endproducts and methods of use therefor |
| DE19705233A1 (de) * | 1997-02-12 | 1998-08-13 | Froelich Juergen C | Verfahren zur Herstellung einer Formulierung enthaltend Arginin |
| GB0319463D0 (en) * | 2003-08-20 | 2003-09-17 | Givaudan Sa | Compounds |
| TW200925268A (en) * | 2007-12-06 | 2009-06-16 | Mallinckrodt Baker Inc | Fluoride-containing photoresist stripper or residue removing cleaning compositions containing conjugate oligomeric or polymeric material of alpha-hydroxycarbonyl compound/amine or ammonia reaction |
| JP2012140360A (ja) * | 2010-12-28 | 2012-07-26 | Kracie Home Products Ltd | 抗酸化剤、化粧料、飲食品組成物及び医薬品組成物 |
| JP2012140378A (ja) * | 2010-12-29 | 2012-07-26 | Kracie Home Products Ltd | チロシナーゼ活性阻害剤、メラニン産生抑制剤及び美白剤、並びにこれらを含有する化粧料、飲食品組成物及び医薬品組成物 |
| JP5835894B2 (ja) * | 2010-12-29 | 2015-12-24 | クラシエホームプロダクツ株式会社 | チロシナーゼ活性阻害剤、メラニン産生抑制剤及び美白剤、並びにこれらを含有する化粧料、飲食品組成物及び医薬品組成物 |
| JP2012140377A (ja) * | 2010-12-29 | 2012-07-26 | Kracie Home Products Ltd | チロシナーゼ活性阻害剤、メラニン産生抑制剤及び美白剤、並びにこれらを含有する化粧料、飲食品組成物及び医薬品組成物 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1514910A (en) * | 1974-07-02 | 1978-06-21 | Unilever Ltd | Amadori compounds and their use to flavour foods |
| US4629692A (en) * | 1982-12-06 | 1986-12-16 | Miles Laboratories, Inc. | Immunoassay for nonenzymatically glucosylated proteins and protein fragments an index of glycemia |
| DE3405841A1 (de) * | 1984-02-17 | 1985-08-22 | Bayer Ag, 5090 Leverkusen | N-acylierte 1-alkylamino-1-desoxy-ketose-derivate, verfahren zur herstellung und ihre verwendung |
| DE3601472A1 (de) * | 1986-01-20 | 1987-07-23 | Fresenius Ag | Verwendung von umsetzungsprodukten von reduzierenden zuckern und serotonin oder serotonin-precursoren zur behandlung cerebraler stoerungen |
| DK163689A (da) * | 1988-04-08 | 1989-10-30 | Sandoz Ag | Peptidderivater |
| PL176934B1 (pl) * | 1991-03-16 | 1999-08-31 | Torf Ets | Sposób wytwarzania kompozycji kosmetycznej zawierającej torfopochodny produkt bioaktywny oraz kompozycja kosmetyczna zawierająca torfopochodny produkt bioaktywny |
-
1993
- 1993-02-11 JP JP5513786A patent/JPH07506344A/ja not_active Ceased
- 1993-02-11 HU HU9402347A patent/HUT70434A/hu unknown
- 1993-02-11 RU RU94040167A patent/RU2141337C1/ru active
- 1993-02-11 WO PCT/EP1993/000327 patent/WO1993016087A2/en active IP Right Grant
- 1993-02-11 SK SK869-94A patent/SK86994A3/sk unknown
- 1993-02-11 US US08/284,635 patent/US5723504A/en not_active Expired - Fee Related
- 1993-02-11 DE DE0632813T patent/DE632813T1/de active Pending
- 1993-02-11 RO RO94-01361A patent/RO115633B1/ro unknown
- 1993-02-11 AT AT93903950T patent/ATE187734T1/de not_active IP Right Cessation
- 1993-02-11 BR BR9305878A patent/BR9305878A/pt not_active Application Discontinuation
- 1993-02-11 SG SG1996003877A patent/SG52390A1/en unknown
- 1993-02-11 CZ CZ941945A patent/CZ285200B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1993-02-11 AU AU34966/93A patent/AU672595B2/en not_active Ceased
- 1993-02-11 ES ES93903950T patent/ES2072244T1/es active Pending
- 1993-02-11 CA CA002130106A patent/CA2130106A1/en not_active Abandoned
- 1993-02-11 DE DE69327310T patent/DE69327310D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1993-02-12 MX MX9300759A patent/MX9300759A/es unknown
- 1993-03-23 TW TW082102133A patent/TW302368B/zh active
-
1994
- 1994-08-05 BG BG98956A patent/BG62172B1/bg unknown
- 1994-08-08 NO NO942930A patent/NO304026B1/no unknown
- 1994-08-12 FI FI943733A patent/FI943733A/fi unknown
-
1995
- 1995-04-30 GR GR950300017T patent/GR950300017T1/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI943733A0 (fi) | 1994-08-12 |
| MX9300759A (es) | 1993-11-01 |
| WO1993016087A2 (en) | 1993-08-19 |
| DE632813T1 (de) | 1996-02-15 |
| RU94040167A (ru) | 1996-07-10 |
| BR9305878A (pt) | 1997-08-19 |
| CZ194594A3 (en) | 1994-12-15 |
| NO942930L (no) | 1994-08-08 |
| NO304026B1 (no) | 1998-10-12 |
| HU9402347D0 (en) | 1994-10-28 |
| NO942930D0 (no) | 1994-08-08 |
| AU672595B2 (en) | 1996-10-10 |
| BG98956A (bg) | 1995-07-28 |
| GR950300017T1 (en) | 1995-04-30 |
| RU2141337C1 (ru) | 1999-11-20 |
| AU3496693A (en) | 1993-09-03 |
| ATE187734T1 (de) | 2000-01-15 |
| FI943733A (fi) | 1994-08-12 |
| TW302368B (ro) | 1997-04-11 |
| ES2072244T1 (es) | 1995-07-16 |
| JPH07506344A (ja) | 1995-07-13 |
| CA2130106A1 (en) | 1993-08-14 |
| CZ285200B6 (cs) | 1999-06-16 |
| SG52390A1 (en) | 1998-09-28 |
| BG62172B1 (bg) | 1999-04-30 |
| HUT70434A (en) | 1995-10-30 |
| DE69327310D1 (de) | 2000-01-20 |
| US5723504A (en) | 1998-03-03 |
| WO1993016087A3 (en) | 1993-09-16 |
| SK86994A3 (en) | 1995-02-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| IKEKAwA et al. | Antitumor activity of Hypsizigus marmoreus. I. Antitumor activity of extracts and polysaccharides | |
| CN100427502C (zh) | 抗肿瘤寡肽及其制备方法和应用 | |
| CZ287816B6 (en) | Peptide, process of its preparation, pharmaceutical preparation in which it is comprised and use thereof | |
| RO115633B1 (ro) | Compozitie farmaceutica pe baza de compusi de reactie tip amadori si procedeu pentru prepararea acesteia | |
| EA003090B1 (ru) | Ферментированный высушенный материал, способ его получения и его применение для получения фармацевтической композиции и диетической добавки, а также фармацевтическая композиция и диетическая добавка, содержащие указанный материал | |
| US5114926A (en) | Tetrapeptide inhibiting the entry into cycle of hemopoietic stem cells processes for its preparation, and its uses | |
| CA1321993C (en) | Substituted n-glycosylamides, process for their preparation, and their use as medicaments | |
| AU728539B2 (en) | Myelopeptides and their therapeutic use | |
| JPH05500817A (ja) | マイコバクテリウムケロナエの極性糖ペプチド脂質に基づく免疫刺激薬 | |
| PL171319B1 (pl) | S posób wytwarzania kompozycji przydatnej do uzytku farmaceutycznegoi/lub kosmetycznego PL PL PL | |
| EP0632813B1 (en) | Amadori reaction compounds and products, process for their manufacture, and their use | |
| US4399124A (en) | Peptides having immunostimulating properties and pharmaceutical compositions containing them | |
| Dzierzbicka et al. | Synthesis and biological activity of tuftsin, its analogue and conjugates containing muramyl dipeptides or nor‐muramyl dipeptides | |
| US5968898A (en) | THF-γ2 analogs and pharmaceutical compositions comprising them | |
| Yoshida et al. | Characterization of a streptococcal antitumor glycoprotein (SAGP) | |
| US3522350A (en) | Process for extracting an anti-inflammatory and anti - irritant principle from yarrow and the product produced thereby | |
| US5008371A (en) | Biologically active polypeptide and use thereof | |
| Rocchi et al. | Glyco‐tuftsin derivatives modulate interleukin‐1 and tumor necrosis factor production | |
| CA1056305A (en) | Protein having thymus hormone-like activity | |
| PL171023B1 (pl) | Sposób wytwarzania nowych induktorów cytokin | |
| FR2597107A1 (fr) | Tripeptide doue d'une activite immunostimulante | |
| US5783557A (en) | THF-γ2 analogs and pharmaceutical compositions comprising them | |
| CA1337731C (en) | Inhibitory tetrapeptide of entry into cycle of hemopoietic stem cells, processes for its preparation and its uses | |
| US5656601A (en) | Acylated splenopentins, methods for their synthesis and their use | |
| Saim et al. | Low molecular weight immunosuppressive factors found in elevated amounts in cancer ascitic fluids of mice 1. Isolation, identification and immunosuppressive effects of uric acid and uracil |