PL227235B1

PL227235B1 - Method for producing biopreparation for the remediation of soils contaminated by heavy metals

Info

Publication number: PL227235B1
Application number: PL411385A
Authority: PL
Inventors: Małgorzata Kacprzak; Krzysztof Fijałkowski; Ewa Neczaj
Original assignee: Politechnika Częstochowska
Priority date: 2015-02-25
Filing date: 2015-02-25
Publication date: 2017-11-30
Also published as: PL411385A1

Description

Opis wynalazkuDescription of the invention

Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania biopreparatu do remediacji gleb skażonych metalami ciężkimi mający zastosowanie w przemyśle nawozów sztucznych oraz w przemysłowych technologiach dotyczących usuwania zanieczyszczeń z gruntów.The subject of the invention is a method of producing a biopreparation for the remediation of soils contaminated with heavy metals, applicable in the fertilizer industry and in industrial technologies for removing pollutants from soils.

Znany jest z polskiego opisu patentowego 173693 sposób wytwarzania środka do nadawania wartości uprawowych glebie zdegradowanej, zwłaszcza poprzez obecność metali ciężkich. Sposób polega na tym, że mułowe odpady powęglowe uzyskiwane w obiegach wodno-mułowych kopalń węgla kamiennego jako selektywnie wydzielony odpad, po oddzieleniu z nich w procesie klasyfikacji ₃ przykładowo hydraulicznej klasy ziarnowej o gęstości 2,3-2,7 g/cm i ziarnie < 1 mm zagęszcza się znanymi metodami do zawartości wilgoci najwyżej do 35% wagowych, po czym do odpadów dodaje się czynnika alkalizującego, korzystnie wodorotlenku wapnia w ilości od 0,5 do 5% wagowych w stosunku do suchej masy produktu, a uzyskaną mieszaninę suszy się do stanu powietrzno-suchego w temperaturze od 25-300°C korzystnie 200°C.There is known from the Polish patent 173693 a method of producing an agent for imparting cultivation value to degraded soil, especially through the presence of heavy metals. The method consists in the fact that the coal sludge waste obtained in the water-sludge cycles of hard coal mines as selectively separated waste, after separation from them in the classification process _{3, for} example, of hydraulic grain class with a density of 2.3-2.7 g / cm and grain < 1 mm is thickened by known methods to a moisture content of at most 35% by weight, then an alkalizing agent, preferably calcium hydroxide, is added to the waste in an amount of 0.5 to 5% by weight in relation to the dry weight of the product, and the resulting mixture is dried to a air-dry condition at a temperature of 25-300 ° C, preferably 200 ° C.

Znany jest z polskiego opisu patentowego 195988 sposób wytwarzania preparatu do usuwania i unieruchamiania kationów metali ciężkich polegający na tym, że stopniowo, miele się nośnik łupkowy oraz składnik aktywny, następnie miesza się je ze sobą, po czym dodaje się środek wiążący z wytworzeniem trójskładnikowej mieszaniny o składzie określonym przez masowy stosunek nośnik : składnik aktywny : spoiwo wynoszącym odpowiednio 1,3 do 4,3 : 1,0 do 1,3 : 1,0 do 1,5, następnie dodaje się wody z wytworzeniem zaprawy cementowej o składzie określonym przez masowy stosunek ciała stałe : woda wynoszącym odpowiednio 1 : 0,38 do 0,60, po czym otrzymuje się preparat przez skruszenie się wysuszonej zaprawy cementowej po jej związaniu i utwardzeniu w ciągu 3-10 dni.A method for producing a preparation for removing and immobilizing heavy metal cations is known from the Polish patent specification 195988, which consists in gradually grinding the shale carrier and the active ingredient, then mixing them with each other, and then adding a binder to form a three-component mixture of composition determined by the mass ratio of carrier: active ingredient: binder of 1.3 to 4.3: 1.0 to 1.3: 1.0 to 1.5, respectively, then water is added to form a cement mortar with a composition determined by mass solids: water ratio of 1: 0.38 to 0.60, respectively, then a preparation is obtained by crushing the dried cement mortar after it has set and hardened for 3-10 days.

Znany jest z europejskiego opisu patentowego EP0337047 sposób przygotowania preparatu do unieruchamiania kationów metali ciężkich. Preparat ten jest wytwarzany przez prażenie glinokrzemianów w umiarkowanej temperaturze 350-800°C z zastosowaniem statycznej atmosfery utleniającej, następnie formaldehyd z wodną zawiesiną spoiwa dodaje się w sposób ciągły w niewielkich ilościach do drobnoziarnistego wypalonego glinokrzemianu. Aktywnymi składnikami preparatu są produkty termicznego rozkładu węglanów, takich jak kalcyt, dolomit i syderyt. Preparat ten o wielkość ziarna mniejszej niż 0,25 mm jest stosowany do polepszania gleby.A method of preparing a preparation for immobilizing heavy metal cations is known from the European patent description EP0337047. This preparation is produced by calcining the aluminosilicates at a moderate temperature of 350-800 ° C using a static oxidizing atmosphere, then formaldehyde with an aqueous binder suspension is added continuously in small amounts to the fine-grained calcined aluminosilicate. The active ingredients of the preparation are products of thermal decomposition of carbonates, such as calcite, dolomite and siderite. This formulation with a grain size of less than 0.25 mm is used for soil improvement.

Celem wynalazku było opracowanie łatwego, szybkiego i ekonomiczniejszego sposobu wytwarzania biopreparatu do remediacji gleb skażonych metalami ciężkimi.The aim of the invention was to develop an easy, quick and more economical method of producing a biopreparation for the remediation of soils contaminated with heavy metals.

Istotą sposobu według wynalazku jest to, że składnik aktywny w postaci zmielonego ziarna pszenicy przerośniętego grzybnią szczepu Trichoderma o wilgotności od 30 do 40% w ilości 25-45% wag. miesza się z nośnikiem w postaci rozdrobnionej ziemi okrzemkowej po filtracji piwa o wilgotności 5-6% w ilości 15-25% wag., a następnie do uzyskanej mieszaniny dodaje się 40-50% wag. materiału uzupełniającego w postaci rozdrobnionej mieszaniny zawierającej 40-46% wag. suszonej, granulowanej wysłodki buraczanej, 18-20% wag. ryżu, 18-20% wag. ziaren jęczmienia i 18-20% wag. ziaren owsa, przy czym składnik aktywny otrzymuje się po uprzedniej 21 dniowej inkubacji w temperaturze 25°C umieszczonych w zamkniętych, perforowanych workach ziaren pszenicy wymieszanych z rozdrobnioną grzybnią szczepu Trichoderma namnożoną wcześniej na pożywce agarozowoziemniaczanej.The essence of the method according to the invention is that the active ingredient in the form of ground wheat grain overgrown with mycelium of the Trichoderma strain with a moisture content of 30 to 40% in an amount of 25-45% by weight. is mixed with the carrier in the form of crushed diatomaceous earth after filtering beer with a moisture of 5-6% in an amount of 15-25% by weight, and then 40-50% by weight of the mixture is added to the mixture obtained. % of supplementary material in the form of a comminuted mixture containing 40-46 wt. dried granulated beet pulp, 18-20 wt.% % of rice, 18-20 wt. % of barley grains and 18-20 wt. oat grains, the active ingredient being obtained after a prior 21-day incubation at 25 ° C placed in closed, perforated bags of wheat grains mixed with the fragmented mycelium of the Trichoderma strain, previously multiplied on an agarose medium.

Korzystnym jest gdy na sterylne, plastikowe płytki Petriego zawierające 10 ml zestalonej pożywki agarozowo-ziemniaczanej umieszcza się krążki grzybni szczepu Trichoderma, następnie płytki inkubuje się przez 7 dni w temperaturze 25°C po czym uzyskaną i pociętą grzybnię przenosi się do perforowanych worków z ziarnami pszenicy o wilgotności od 50 do 60%, a po ich zamknięciu worki inkubuje się przez 21 dni w temperaturze 25°C następnie przerośnięte grzybnią ziarna pszenicy suszy się w temperaturze 37°C do momentu uzyskania wilgotności 30-40%, a potem tak przygotowany składnik aktywny biopreparatu mieli się.It is advantageous to place the Trichoderma strain mycelium discs on sterile plastic petri dishes containing 10 ml of the solidified agarose-potato broth, then the plates are incubated for 7 days at 25 ° C, after which the obtained and cut mycelium is transferred to perforated bags with wheat grains. with a humidity of 50 to 60%, and after closing the bags, the bags are incubated for 21 days at 25 ° C, then the wheat grains overgrown with mycelium are dried at 37 ° C until the humidity reaches 30-40%, and then the active ingredient prepared in this way the biopreparation grinds up.

Wykorzystanie powszechnie dostępnych, tanich i odpadowych składników jak ziemia okrzemkowa po filtracji piwa stanowiących surowiec produkcyjny skutkuje otrzymaniem ekonomicznej i nie wymagającej dużych nakładów metody stanowiącej alternatywę dla droższych i bardziej skomplikowanych sposobów wytwarzania preparatów do remediacji gleb. Dodatkowo opracowanie dwuetapowego procesu przygotowania składnika aktywnego preparatu w postaci zmielonego ziarna pszenicy przerośniętego grzybnią szczepu Trichoderma powoduje znaczne przyspieszenie całego sposobu wytwarzania biopreparatu. Wytworzony opisanym sposobem biopreparatThe use of commonly available, cheap and waste components, such as diatomaceous earth after the filtration of beer, which is the production raw material, results in obtaining an economical and not requiring large expenditure method, which is an alternative to more expensive and more complicated methods of producing soil remediation preparations. In addition, the development of a two-stage process of preparing the active ingredient of the preparation in the form of ground wheat grain overgrown with mycelium of the Trichoderma strain significantly accelerates the entire process of biopreparation production. The biopreparation produced as described above

PL 227 235 B1 jest pozbawiony właściwości toksycznych, tani w produkcji oraz trwały i nie wymaga specyficznych warunków do jego przechowywania.It is devoid of toxic properties, cheap to produce and stable, and does not require any specific storage conditions.

P r z y k ł a d 1P r z k ł a d 1

Sposób według wynalazku polega na wytworzeniu biopreparatu gdzie substancjami aktywnymi są zarodniki i grzybnia grzybów rodzaju Trichoderma oraz drożdży. W skład biopreparatu wchodzą także materiały bazowe w postaci pszenicy i ziemi okrzemkowej stanowiące nośnik dla mikroorganizmów oraz materiały uzupełniające w postaci: wysłodków buraczanych, ryżu, ziarna jęczmienia i owsa, które są startową bazą odżywczą.The method according to the invention consists in the production of a biopreparation where the active substances are the spores and mycelium of Trichoderma fungi and yeasts. The biopreparation also includes base materials in the form of wheat and diatomaceous earth, which are a carrier for microorganisms, and supplementary materials in the form of: beet pulp, rice, barley and oat grains, which are the starting nutritional base.

Przygotowanie składnika zawierającego grzybnię szczepu Trichoderma wynosiło 28 dni. Cykl produkcji składnika Trichoderma był dwuetapowy, co pozwoliło na znaczne przyspieszenie całego cyklu produkcyjnego oraz odpowiednią kontrolę czystości produktu. W pierwszym etapie wyselekcjonowany gatunek grzybni szczepu Trichoderma był namnażany na pożywce agarozowo-ziemniaczanej, charakteryzującej się dużą zawartością łatwo przyswajalnych węglowodanów. Grzyb był namnażany przez fragmentację plechy. Fragmenty grzybni o średnicy około 1 cm zostały umieszczone w sterylnych płytkach Petriego o średnicy minimalnej 9 cm, zawierających po 10 ml zestalonej pożywki agarozowo-ziemniaczanej. Następnie płytki były inkubowane w stałej temperaturze 25°C przez 7 dni. Po tym czasie wyrosłe kolonie na płytkach były oceniane pod względem czystości i wielkości. Równocześnie przygotowywany był właściwy substrat - ziarno pszenicy. Ziarna pszenicy bez oznak zakażenia grzybami pleśniowymi były płukane, zalewane wodą destylowaną i sterylizowane w temperaturze 175°C przez 1,5 godziny. Po 24 godzinach proces został powtórzony. Tak przygotowane ziarna w warunkach sterylnych zostały przesypane do woreczków z folii perforowanej w ilości 0,5 kg na 1 worek. Do każdego worka została przeniesiona rozdrobniona grzybnia szczepu Trichoderma z płytki Petriego. Worki zostały zamknięte i inkubowane w inkubatorze półkowym w temperaturze 25°C przez okres 21 dni. Po zakończeniu inkubacji ziarna pszenicy przerośnięte grzybnią szczepu Trichoderma suszono w temperaturze 37°C do momentu uzyskania 32% wilgotności, a potem tak przygotowany składnik aktywny biopreparatu przesypano do młynka i zmielono na proszek.The preparation of the component containing the mycelium of the Trichoderma strain was 28 days. The production cycle of the Trichoderma component was two-stage, which allowed for a significant acceleration of the entire production cycle and appropriate control of the purity of the product. In the first stage, the selected species of mycelium of the Trichoderma strain was propagated on agarose-potato broth, characterized by a high content of easily digestible carbohydrates. The fungus was multiplied by the fragmentation of the thallus. The mycelium fragments with a diameter of about 1 cm were placed in sterile petri dishes, minimum diameter 9 cm, each containing 10 ml of solidified potato-agarose broth. The plates were then incubated at a constant temperature of 25 ° C for 7 days. After this time, the grown colonies on the plates were assessed for purity and size. At the same time, the right substrate was prepared - wheat grain. Wheat grains with no signs of mold contamination were rinsed, poured over with distilled water and sterilized at 175 ° C for 1.5 hours. After 24 hours, the process was repeated. The grains prepared in this way under sterile conditions were poured into perforated foil bags in the amount of 0.5 kg per bag. The comminuted mycelium of Trichoderma strain from a Petri dish was transferred to each bag. The bags were closed and incubated in a tray incubator at 25 ° C for 21 days. After the incubation was completed, wheat grains overgrown with mycelium of Trichoderma strain were dried at 37 ° C until obtaining 32% humidity, and then the active ingredient of the biopreparation prepared in this way was poured into a grinder and ground into a powder.

Kolejnym etapem procesu wytwarzania biopreparatu było przygotowanie nośnika w postaci rozdrobnionej ziemi okrzemkowej po filtracji piwa. W tym celu stanowiącą odpad zużytą po filtracji piwa ziemię okrzemkową o wilgotności 10% odwodniono przy użyciu prasy filtracyjnej, a następnie rozdrobniono w mieszalniku w efekcie czego otrzymano substrat do produkcji biopreparatu o wilgotności 5%. Uzyskany nośnik zawierał znaczne ilości substancji organicznych jak białka, węglowodany, związki białkowo-garbnikowe oraz mikroorganizmy głównie drożdże. Dzięki temu przygotowany nośnik był pełnowartościowym produktem do procesu remediacji łączącym w sobie właściwości sorpcyjne, co ułatwia immobilizację metali oraz biosorpcyjne dzięki obecności aktywnych komórek drożdży.The next stage of the biopreparation production process was the preparation of the carrier in the form of crushed diatomaceous earth after beer filtration. For this purpose, the 10% moisture content of the diatomaceous earth used after filtering the beer was dehydrated using a filter press, and then ground in a mixer, as a result of which a substrate for the production of a biopreparation with 5% moisture was obtained. The obtained carrier contained significant amounts of organic substances, such as proteins, carbohydrates, protein-tannin compounds and microorganisms, mainly yeasts. As a result, the prepared carrier was a complete product for the remediation process, combining sorption properties, which facilitates the immobilization of metals and biosorption due to the presence of active yeast cells.

Do wytworzenia biopreparatu wykorzystany został materiał uzupełniający dostarczający wprowadzanym mikroorganizmom składników odżywczych, pozwalający na szybką aklimatyzację w trudnych warunkach zanieczyszczonego ekosystemu. Stąd też materiał zostały tak dobrany, aby stopniowo uwalniał węglowodany, był także źródłem innych makro i mikroelementów. Składnikami materiału uzupełniającego były: suszone granulowane wysłodki buraczane oraz rozdrobnione w rozdrabniaczu tarczowym ryż, ziarna jęczmienia i owsa. Procentowy udział wagowy poszczególnych składników materiału uzupełniającego wynosił:For the production of the biopreparation, supplementary material was used to provide the introduced microorganisms with nutrients, allowing for quick acclimatization in the difficult conditions of the polluted ecosystem. Hence, the material was selected so as to gradually release carbohydrates, and was also a source of other macro and microelements. The components of the supplementary material were: dried granulated beet pulp and rice, barley and oat grains crushed in a disc crusher. The percentage by weight of individual components of the complementary material was:

- granulowane wysłodki buraczane: 40%;- granulated beet pulp: 40%;

- ryż 20%;- rice 20%;

- ziarno jęczmienia 20%- barley grain 20%

- ziarno owsa: 20%- oat grain: 20%

Ostatnim etapem wytwarzania biopreparatu do remediacji gleb skażonych metalami ciężkimi było zmieszanie składnika aktywnego z nośnikiem i materiałem uzupełniającym, przy czym procentowy udział wagowy poszczególnych składników w biopreparacie wynosił:The last step in the production of a biopreparation for remediation of soils contaminated with heavy metals was mixing the active ingredient with the carrier and supplementary material, whereby the percentage by weight of individual components in the biopreparation was:

- składnik aktywny w postaci zmielonego ziarna pszenicy przerośniętego grzybnią szczepu- the active ingredient in the form of ground wheat grain overgrown with mycelium strain

Trichoderma - 25%;Trichoderma - 25%;

- nośnik w postaci rozdrobnionej ziemi okrzemkowej po filtracji piwa - 25%;- carrier in the form of crushed diatomaceous earth after beer filtration - 25%;

- materiał uzupełniający - 50%- complementary material - 50%

Uzyskany biopreparat został zapakowany próżniowo w workach w celu zwiększenia jego trwałości podczas przechowywania.The obtained biopreparation was vacuum-packed in bags in order to increase its stability during storage.

PL 227 235 B1PL 227 235 B1

P r z y k ł a d 2P r z k ł a d 2

Przygotowanie składnika zawierającego grzybnię szczepu Trichoderma trwało 30 dni. Cykl produkcji składnika Trichoderma był dwuetapowy, co pozwoliło na znaczne przyspieszenie całego cyklu produkcyjnego oraz odpowiednią kontrolę czystości produktu. W pierwszym etapie wyselekcjonowany gatunek grzybni szczepu Trichoderma był namnażany na pożywce agarozowo-ziemniaczanej, charakteryzującej się dużą zawartością łatwo przyswajalnych węglowodanów. Grzyb był namnażany przez fragmentację plechy. Fragmenty grzybni o średnicy około 1 cm zostały umieszczone w sterylnych płytkach Petriego o średnicy 9 cm, zawierających po 10 ml zestalonej pożywki agarozowoziemniaczanej. Następnie płytki były inkubowane w stałej temperaturze 25°C przez 7 dni. Po tym czasie wyrosłe kolonie na płytkach były oceniane pod względem czystości i wielkości. Równocześnie przygotowywany był właściwy substrat - ziarno pszenicy. Ziarna pszenicy bez oznak zakażenia grzybami pleśniowymi były płukane, zalewane wodą destylowaną i sterylizowane w temperaturze 210°C przez 1,5 godziny. Po 24 godzinach proces został powtórzony. Tak przygotowane ziarna w warunkach sterylnych zostały przesypane do woreczków z folii perforowanej w ilości 0,6 kg na 1 worek. Do każdego worka została przeniesiona rozdrobniona grzybnia szczepu Trichoderma z płytki Petriego. Worki zostały zamknięte i inkubowane w inkubatorze półkowym w temperaturze 25°C przez okres 21 dni. Po zakończeniu inkubacji ziarna pszenicy przerośnięte grzybnią szczepu Trichoderma suszono w temperaturze 37°C do momentu uzyskania 38% wilgotności, a potem tak przygotowany składnik aktywny biopreparatu przesypano do młynka i zmielono na proszek.The preparation of the component containing the mycelium of the Trichoderma strain took 30 days. The production cycle of the Trichoderma component was two-stage, which allowed for a significant acceleration of the entire production cycle and appropriate control of the purity of the product. In the first stage, the selected species of mycelium of the Trichoderma strain was propagated on agarose-potato broth, characterized by a high content of easily digestible carbohydrates. The fungus was multiplied by the fragmentation of the thallus. The mycelium fragments with a diameter of about 1 cm were placed in sterile petri dishes with a diameter of 9 cm, each containing 10 ml of solidified agarose medium. The plates were then incubated at a constant temperature of 25 ° C for 7 days. After this time, the grown colonies on the plates were assessed for purity and size. At the same time, the right substrate was prepared - wheat grain. Wheat grains with no signs of mold contamination were rinsed, poured over with distilled water and sterilized at 210 ° C for 1.5 hours. After 24 hours, the process was repeated. The grains prepared in this way under sterile conditions were poured into perforated foil bags in the amount of 0.6 kg per bag. The comminuted mycelium of Trichoderma strain from a Petri dish was transferred to each bag. The bags were sealed and incubated in a tray incubator at 25 ° C for 21 days. After the incubation was completed, wheat grains overgrown with mycelium of the Trichoderma strain were dried at 37 ° C until it reached 38% humidity, and then the active ingredient of the biopreparation prepared in this way was poured into a grinder and ground into a powder.

Kolejnym etapem procesu wytwarzania biopreparatu było przygotowanie nośnika w postaci rozdrobnionej ziemi okrzemkowej po filtracji piwa. W tym celu stanowiącą odpad zużytą po filtracji piwa ziemię okrzemkową o wilgotności 10% odwodniono przy użyciu prasy filtracyjnej, a następnie rozdrobniono w mieszalniku w efekcie czego otrzymano substrat do produkcji biopreparatu o wilgotności 6%. Uzyskany nośnik zawierał znaczne ilości substancji organicznych jak białka, węglowodany, związki białkowo-garbnikowe oraz mikroorganizmy głównie drożdże. Dzięki temu przygotowany nośnik był pełnowartościowym produktem do procesu remediacji łączącym w sobie właściwości sorpcyjne, co ułatwia immobilizację metali oraz biosorpcyjne dzięki obecności aktywnych komórek drożdży.The next stage of the biopreparation production process was the preparation of the carrier in the form of crushed diatomaceous earth after beer filtration. For this purpose, the 10% moisture content of the diatomaceous earth used after filtering the beer was dehydrated using a filter press, and then ground in a mixer, as a result of which a substrate for the production of a biopreparation with a moisture of 6% was obtained. The obtained carrier contained significant amounts of organic substances, such as proteins, carbohydrates, protein-tannin compounds and microorganisms, mainly yeasts. As a result, the prepared carrier was a complete product for the remediation process, combining sorption properties, which facilitates the immobilization of metals and biosorption due to the presence of active yeast cells.

Do wytworzenia biopreparatu wykorzystany został materiał uzupełniający dostarczający wprowadzanym mikroorganizmom składników odżywczych, pozwalający na szybką aklimatyzację w trudnych warunkach zanieczyszczonego ekosystemu. Stąd też materiał został tak dobrany, aby stopniowo uwalniał węglowodany, był także źródłem innych makro i mikroelementów. Składnikami materiału uzupełniającego były: suszone granulowane wysłodki buraczane oraz rozdrobnione w rozdrabniaczu tarczowym ryż, ziarna jęczmienia i owsa. Procentowy udział wagowy poszczególnych składników materiału uzupełniającego wynosił:For the production of the biopreparation, supplementary material was used to provide the introduced microorganisms with nutrients, allowing for quick acclimatization in the difficult conditions of the polluted ecosystem. Hence, the material has been selected so as to gradually release carbohydrates, and is also a source of other macro and microelements. The components of the supplementary material were: dried granulated beet pulp and rice, barley and oat grains crushed in a disc crusher. The percentage by weight of individual components of the complementary material was:

- granulowane wysłodki buraczane: 46%;- granulated beet pulp: 46%;

- ryż 18%;- rice 18%;

- ziarno jęczmienia 18%- barley grain 18%

- ziarno owsa: 18%.- oat grain: 18%.

Trichoderma - 45%;Trichoderma - 45%;

- nośnik w postaci rozdrobnionej ziemi okrzemkowej po filtracji piwa - 15%;- carrier in the form of crushed diatomaceous earth after beer filtration - 15%;

- materiał uzupełniający - 40%- complementary material - 40%

Claims

1. A method of producing a biopreparation for remediation of soils contaminated with heavy metals, consisting in mixing the active ingredient with a carrier and supplementary material, characterized in that the active ingredient is ground wheat grain overgrown with mycelium Trichoderma strain with a moisture content of 30 to 40% in the amount of 25-45 wt.% is mixed with the carrier in the form of crushed diatomaceous earth after filtering beer with a moisture of 5-6% in an amount of 15-25% by weight, and then 40-50% by weight of the mixture is added to the mixture obtained. % of supplementary material in the form of a comminuted mixture containing 40-46 wt. dried granulated beet pulp, 18-20 wt.% % of rice, 18-20 wt. % of barley grains and 18-20 wt. oat grains, the active ingredient being obtained after a prior 21-day incubation at 25 ° C placed in closed, perforated bags of wheat grains mixed with crushed mycelium of the Trichoderma strain, previously grown on a potato-agarose broth.

2. The method according to p. A method according to claim 1, characterized in that the mycelium discs of the Trichoderma strain are placed on sterile plastic Petri dishes containing 10 ml of the solidified agarose-potato medium, then the plates are incubated for 7 days at 25 ° C, then the obtained and cut mycelium is transferred to perforated bags. with wheat grains with a moisture content of 50 to 60%, and after they are closed, the bags are incubated for 21 days at 25 ° C, then the wheat grains overgrown with mycelium are dried at 37 ° C until they reach 30-40% moisture, and then the active ingredient of the biopreparation prepared in this way was ground.