NO331780B1 - Prodrug av eksitasjonsaminosyre, farmasoytisk preparat samt anvendelser derav - Google Patents

Prodrug av eksitasjonsaminosyre, farmasoytisk preparat samt anvendelser derav Download PDF

Info

Publication number
NO331780B1
NO331780B1 NO20050122A NO20050122A NO331780B1 NO 331780 B1 NO331780 B1 NO 331780B1 NO 20050122 A NO20050122 A NO 20050122A NO 20050122 A NO20050122 A NO 20050122A NO 331780 B1 NO331780 B1 NO 331780B1
Authority
NO
Norway
Prior art keywords
mmol
dicarboxylic acid
hexane
tert
amino
Prior art date
Application number
NO20050122A
Other languages
English (en)
Other versions
NO20050122L (no
Inventor
James Allen Monn
Concepcion Pedregal-Tercero
Eric David Moher
Original Assignee
Lilly Co Eli
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lilly Co Eli filed Critical Lilly Co Eli
Publication of NO20050122L publication Critical patent/NO20050122L/no
Publication of NO331780B1 publication Critical patent/NO331780B1/no

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/542—Carboxylic acids, e.g. a fatty acid or an amino acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/555—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound pre-targeting systems involving an organic compound, other than a peptide, protein or antibody, for targeting specific cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/08—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for nausea, cinetosis or vertigo; Antiemetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/32—Alcohol-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/34—Tobacco-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/36—Opioid-abuse
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C237/00—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups
    • C07C237/02—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C237/04—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C07C237/12—Carboxylic acid amides, the carbon skeleton of the acid part being further substituted by amino groups having the carbon atoms of the carboxamide groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated having the nitrogen atom of at least one of the carboxamide groups bound to an acyclic carbon atom of a hydrocarbon radical substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D333/78—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems condensed with rings other than six-membered or with ring systems containing such rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/14—All rings being cycloaliphatic
    • C07C2602/18—All rings being cycloaliphatic the ring system containing six carbon atoms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)

Abstract

Foreliggende oppfinnelse angår syntetiske eksitasjonsaminosyreprodrug og fremgangsmåter for deres fremstilling. Oppfinnelsen angår videre fremgangsmåter for anvendelse og farmasøytiske sammensetninger som innbefatter forbindelsene for behandling av neurologiske forstyrrelser og psykiatriske forstyrrelser.

Description

Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer syntetisk eksitasjonsaminosyreprodrug, farma-søytisk formulering som innbefatter nevnte forbindelse samt anvendelser derav.
Behandling av neurologiske eller psykiatriske forstyrrelser, slike som angstforstyrrelser, har blitt knyttet til selektiv aktivering av metabotropisk eksitasjonsaminosyrereseptorer. For eksempel, er (+)-4-amino-2-sulfonylbicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre be-skrevetsom en aktiv mGluR2-reseptoragonist i U.S. patent nr. 5,688,826 ('826-patentet), meddelt 18. november 1997.1 tillegg er (+)-2-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre beskrevet somen aktiv mGluR2-reseptoragonist i U.S. patent nr. 5,958,960 ('960-patentet), meddelt 28. september 1999.
US5688826 beskriver eksitasjonsforbindelser som kan er egnet for behandling av ulike nevrologiske og psykiatriske lidelser.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer prodrugformen av en mGluR2-reseptoragonistforbindelse, som øker in vivo-potensen til den respektive morforbindelsen og gir høyere oral eksponering av morforbindelsen. Forbindelsen ifølge oppfinnelsen representerer beste tilnærming for opprettholdelse av sikkerheten og effektiviteten til tidligere beskrevet mGluR2-reseptoragonist med økt oral biotilgjengelighet.
Syntetiske eksitasjonsaminosyreprodrug og fremgangsmåter for deres fremstilling er beskrevet i PCT-søknad serienr. PCT7US01/45866 og PCT/US02/00488.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en forbindelse med formel I
R<10>er hydrogen;
R<11>er hydrogen;
X er S02;
A er H-(Q)P-;
Q er metionyl; og
perl;
eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Et ytterligere aspekt ved foreliggende oppfinnelse tilveiebringer en farmasøytisk formulering som innbefatter, i assosiasjon med en farmasøytisk akseptabel bærer, fortynningsmiddel eller eksipient, en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
Et ytterligere aspekt ved foreliggende oppfinnelse tilveiebringer anvendelse av en forbindelse med formel I for fremstilling av et medikament for behandling av en neurologisk forstyrrelse hos en pasient.
Et ytterligere aspekt ved foreliggende oppfinnelse tilveiebringer anvendelse av en forbindelse med formel I for fremstilling av et medikament for å behandle en psykiatrisk forstyrrelse hos en pasient.
Forbindelsen med formel I kan fremstilles ved en fremgangsmåte som er analog med den som er kjent i kjemisk litteratur for fremstilling av strukturelle analoge hetero-cykliske forbindelser eller ved en ny fremgangsmåte beskrevet heri. Slike fremgangsmåter og intermediater anvendelige for fremstilling av en forbindelse med formel I som definert ovenfor er illustrert ved følgende fremgangsmåte hvori, med mindre annet er angitt, betydningene til de generiske radikalene er som definert heri.
Foreliggende beskrivelse tilveiebringer en fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med formel I som innbefatter acylering av en forbindelse med formel (ii): med et korresponderende aminoacyl med formel III
hvori Pg<N>er en nitrogenbeskyttende gruppe og A er som definert ovenfor;
hvoretter, for en hvilken som helst av fremgangsmåtene ovenfor, når en funksjonell gruppe er beskyttet ved anvendelse av en beskyttende gruppe, fjerning av den beskyttende gruppen; hvoretter, for en hvilken som helst av fremgangsmåtene ovenfor; når et farmasøytisk akseptabelt salt av en forbindelse med formel I er påkrevet, reagere den basiske formen til en slik forbindelse med formel I med en syre som gir et farmasøytisk akseptabelt motion; eller for en forbindelse med formel I som bærer en sur del, omsette den sure formen til en slik forbindelse med formel I med en base som gir et farmasøy-tisk akseptabelt kation; eller for en switterionisk forbindelse med formel I, nøytralisere syreaddisjonssaltformen eller baseaddisjonssaltformen til en slik forbindelse med formel I; eller ved en hvilken som helst annen vanlig fremgangsmåte.
Forbindelsen ifølge oppfinnelsen har blitt funnet å være et anvendelig prodrug av forbindelser som er selektive agonister av metabotropisk glutamatreseptorer, og er derfor anvendelig ved behandling av sykdommer i sentralnervesystemet slik som neurologiske sykdommer, f.eks. neurodegenerative sykdommer, og som antipsykotiske, angsiolyt-tiske, legemiddelabstinens-, antidepressant-, antikonvulsant-, analgesiske og anti-emetiske midler.
Aminosyredelen har foretrukket den naturlige aminosyrekonfigurasjonen, dvs. L-konfigurasjon relativt til D-glyserolaldehyd.
Foreliggende oppfinnelse inkluderer farmasøytisk akseptable salter av en forbindelse med formel I. Disse saltene kan eksistere i forbindelse med den sure eller basiske delen av molekylet og kan eksistere som syreaddisjons-, primære, sekundære, tertiære eller kvaternære ammonium-, alkalimetall- eller jordalkalimetallsalter. Generelt, kan syreaddisjonssalter fremstilles ved reaksjon mellom syren og en forbindelse med formel I. Alternativt kan syreaddisjonssaltene fremstilles ved å omsette penultimatforbindelsen (beskyttet intermediat) med passende ekvivalenter av syre for å gi den korresponderende saltformen, som i sin tur kan omsettes for å gi en forbindelse med formel I eller andre salter. Alkalimetall eller jordalkalimetallsaltene blir generelt fremstilt ved å omsette hydroksidformen til det ønskede metallsaltet med en forbindelse med formel I.
Noen spesielle salter gir visse formuleringsfordeler på grunn av deres krystallinske for-me. Ikke krystallinske amorfe former av forbindelsene kan være hygroskopiske. Krystallinske former av farmasøytiske forbindelser er til tider mer ønskelig på grunn av at de fremviser fordelaktige fastfaseegenskaper.
Syrer som vanligvis anvendes for å danne slike salter inkluderer uorganiske syrer, f.eks. saltsyre, hydrobromsyre, salpetersyre, svovelsyre, eller fosforsyre, eller med organiske syrer slik som organiske karboksylsyrer, f.eks. glykolsyre, maleinsyre, hydroksymalein-syre, fumarsyre, eplesyre, vinsyre, sitronsyre, salicylsyre, o-acetoksybenzosyre, eller organiske sulfonsyrer, 2-hydroksyetansulfonsyre, toluen p-sulfonsyre, metansulfonsyre, naftalen-2-sulfonsyre, benzensulfonsyre eller etansulfonsyre.
I tillegg til farmasøytisk akseptable salter er andre salter inkludert ifølge oppfinnelsen. De kan tjene som intermediater ved rensing av forbindelsene eller ved fremstilling av andre farmasøytisk akseptable syreaddisjonssalter, eller er anvendelige for identifika-sjon, karakterisering eller rensing.
I foreliggende oppfinnelse inkluderer forbindelsene med formel I solvater derav. Særlig inkluderer forbindelser med formel I hydrater derav.
Et antall fysiologiske funksjoner har vist seg å være gjenstand for innflytelse av over-dreven eller ikke-tilfredsstillende stimulering av eksitasjonsaminosyretransmissjon. Formel I forbindelsen ifølge oppfinnelsen antas å ha evnen til å behandle et antall neurologiske forstyrrelser hos pattedyr assosiert med denne tilstanden, som inkluderer akutt neurologisk forstyrrelse slik som cerebrale svakheter etterfølgende hjertebypasskirurgi og poding, slag, cerebral ischemi, ryggradtraume, hodetraume, perinatal hypoksi, hjertearrest, og hypoglykemisk neuronal skade. Formel I forbindelser antas å ha evnen til å behandle et antall kroniske neurologiske forstyrrelser, slik som Alzheimer's sykdom, Huntington's Chorea, amyotrofisk lateral sklerose, AIDS-indusert dements, okulær skade og retinopati, kognitive forstyrrelser og idiopatisk og legemiddelindusert Parkinson.
Formel 1 forbindelsen ifølge oppfinelsen behandler et antall andre neurologiske forstyrrelser hos pasienter som er assosiert med glutamatdysfunksjon, som inkluderer muskulære spasmer, konvulsjoner, migrenehodepiner, urininkontinens, smerte, premenstruell dysforisk forstyrrelse (PDD), psykose, (slik som schizofreni), legemiddeltoleranse, abstinens, opphør og sterk trang (slik som nikotin, opiater, kokain, benzodiazepiner, og etanol), angst og relaterte forstyrrelser, emesi, hjerneødem, kronisk smerte og tardiv dyskinesi. Formel I forbindelser er også anvendelige som antidepressanter og smertestil-lende midler. Derfor vedrører foreliggende oppfinnelse også anvendelse av en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, for fremstillinga vet preparat for behandling av disse forstyrrelsene.
Følgende definisjoner er fremsatt for betydningene og omfanget til de forskjellige begrepene som anvendes heri. Generelle begreper anvendt heri har deres vanlige betydninger.
Begrepet "berøring" refererer til en formel II forbindelse som virker som en agonist ved en eksitasjonsaminosyrereseptor. Begrepet "eksitasjonsaminosyrereseptor" refererer til en metabotropisk glutamatreseptor, en reseptor som kobles til cellulære effektorer via GTP-bindingsproteiner. Begrepet "cAMP-bundet metabotropisk glutamatreseptor" refererer til en metabotropisk reseptor som er koblet til inhibering av adenylatcyklaseaktivi-tet.
Begrepet "neurologisk forstyrrelse" refererer til både akutte og kroniske neurodegenerative tilstander, som inkluderer cerebrale svakheter etterfølgende hjertebypasskirurgi og poding, cerebral ischemi (f.eks. slag som resultat av hjertearrest), ryggradtraume, hodetraume, Alzheimer's sykdom, Huntington's Chorea, amyotrofisk lateral sklerose, AIDS-indusert dements, perinatal hypoksi, hypoglykemisk neuronal skade, okulær skade og retinopati, kognitive forstyrrelser, idiopatisk og legemiddelindusert Parkinson's sykdom. Begrepet inkluderer også andre neurologiske tilstander som forårsakes av glutamatdysfunksjon, som inkluderer muskulær spasme, migrene og hodepine, urininkontinens, legemiddeltoleranse, abstinens, avslutning og sterk trang til (dvs. opiater, benzodiazepiner, nikotin, kokain eller etanol), røkeavslutning, emesi, hjerneødem, kronisk smerte, søvnforstyrrelser, konvulsjoner, Tourette's sykdon, oppmerksomhetsforstyrrelse og tardiv dyskinesi.
Begrepet "psykiatrisk forstyrrelse" refererer til både akutte og kroniske psykiatriske tilstander, som inkluderer schizofreni, angst og relaterte forstyrrelser (f.eks. panikkangst og stressrelaterte kardiovaskulære forstyrrelser), depressjon, bipolare forstyrrelser, psykose, obsessiv kompulsiv forstyrrelse, generelle angstforstyrrelser, akutt stressforstyr-relse og panikkforstyrrelse.
Slik det anvendes heri refererer begrepet "effektiv mengde" til mengden eller dosen av forbindelsen, etter enkel eller multippel doseadministrasjon til pasienten, som tilveiebringer ønsket effekt på pasienten under diagnose eller behandling.
En effektiv mengde kan lett bestemmes av legen, som fagmannen, ved anvendelse av kjente teknikker og ved å observere resultatene oppnådd under analoge omstendigheter. Ved bestemmelse av den effektive mengden eller dosen av forbindelsen som administ reres, blir et antall faktorer vurdert av legen, som inkluderer, men ikke er begrenset til: pattedyrart; størrelse, alder og generell helse; den spesifikke sykdommen som er invol-vert; grad av involvering eller alvorlighet av sykdommen; responsen til denne individu-elle pasienten; den bestemte forbindelsen som administreres; administrasjonsmodus; biotilgjengelighetskarakteristikker til preparatet som administreres; doseringsregimet som velges; anvendelse av ledsagende medisinering; og andre relevante omstendigheter. For eksempel, kan en typisk daglig dose inneholde fra ca. 5 mg til ca. 300 mg av den aktive ingrediensen. Forbindelsene kan administreres gjennom et antall ruter som inkluderer orale, rektale, transdermale, subkutane, intravenøse, intramuskulære, bukkale, eller intranasale ruter. Alternativt kan forbindelsene administreres ved kontinuerlig infu-sjon.
Slik det anvendes heri, refererer begrepet "pasient" til et pattedyr, slik som en mus, marsvin, rotte, hund eller menneske. Det er å forstå at en foretrukket pasient er et menneske.
Begrepet "behandling" (eller "behandle") slik det anvendes heri, inkluderer den generelt aksepterte betydningen som omfatter unngåelse, hindring, tilbakeholdelse og redusere hastigheten på, stoppe eller reversere progressjon av et resulterende symptom. Som så-dan, omfatter foreliggende oppfinnelse både terapeutisk og profylaktisk administrasjon.
De generelle kjemiske begrepene som anvendes heri har deres vanlige betydninger. For eksempel, betyr begrepet "(1-6C) alkyl" en rett eller forgrenet gruppe. Eksempler på verdier for en (1-6C) alkylgruppe inkluderer (1-4C) alkyl slik som metyl, etyl, propyl, isopropyl, butyl og isobutyl. Begrepet "(2-6C) alkenyl" inkluderer (2-4C) alkenyl, slik som allyl. Begrepet "(2-6C) alkenyl" inkluderer (2-4C) alkenyl, slik som propynyl.
Begrepet "eventuelt substituert" slik det anvendes i begrepene "eventuelt substituert (1-6C) alkylgruppe", "eventuelt substituert (2-6C) alkenylgruppe" og "eventuelt substituert (2-6C) alkynylgruppe" heri, viser at en eller flere substituenter kan være tilstede, foretrukket en til tre, hvor nevnte substituenter er utvalgt fra atomer og grupper som, når de er tilstede i forbindelsen med formel I, ikke hindrer forbindelsen med formel I fra å modulere metabotropisk glutamatreseptorfunksjon.
Eksempler på atomer og grupper som kan være tilstede i en eventuelt substituert (1-6C) alkylgruppe, en eventuelt substituert (2-6C) alkenylgruppe eller en eventuelt substituert (2-6C) alkynylgruppe er en eventuelt substituert aromatisk gruppe, en eventuelt substi tuert heteroaromatisk gruppe, en ikke-aromatisk karbocyklisk gruppe, en ikke-aromatisk heterocyklisk gruppe, en ikke-aromatisk monocyklisk karbocyklisk gruppe sammensmeltet med en eller to monocykliske aromatiske eller heteroaromatiske grupper og en ikke-aromatisk monocyklisk, heterocyklisk gruppe sammensmeltet med en eller to monocykliske aromatiske eller heteroaromatiske grupper.
Begrepet "heteroaromatisk gruppe" inkluderer en aromatisk 5-6-leddet ring som inneholder fra en til fire heteroatomer utvalgt fra oksygen, svovel og nitrogen, og en aromatisk bicyklisk gruppe som består av en 5-6-leddet ring som inneholder fra en til fire heteroatomer utvalgt fra oksygen, svovel og nitrogen sammensmeltet med en benzenring eller 5-6-leddet ring som inneholder fra en til fire heteroatomer utvalgt fra oksygen, svovel og nitrogen. Eksempler på heteroaromatiske grupper er furyl, tiofenyl, oksazolyl, isoksazolyl, tiazoyl, isotazolyl, imidazolyl, pyrimidyl, benzofuryl, benzotiofenyl, ben-zimidazolyl, benzoksazolyl, benzotiazolyl og indolyl.
Begrepet "aromatisk gruppe" inkluderer fenyl og en polycyklisk aromatisk karbocyklisk ring slik som naftyl.
Begrepet "eventuelt substituert" slik det anvendes i begrepene "eventuelte substituert heteroaromatisk gruppe" og "eventuelt substituert aromatisk gruppe", heri betyr at en eller flere substituenter kan være tilstede, nevnte substituenter er utvalgt fra atomer og grupper som, når de er tilstede i forbindelsene med formel I, ikke hindrer forbindelsen med formel I fra å modulere metabotropisk glutamatreseptorfunksjon.
Eksempler på atomer og grupper som kan være tilstede i en eventuelt substituert heteroaromatisk eller en eventuelt substituert aromatisk gruppe er amino, hydroksy, nitro, h alogen, (1-6C) alkyl, (1-6C) alkoksy, (1-6C) alkyltio, karboksy, (1-6C) alkoksykarbo-nyl, karbamoyl, (1-6C) alkanoylamino, (1-6C) alkylsulfonyl, (1-6C) alkylsulfonylami-no, eventuelt substituert fenyl, fenoksy, fenyltio, fenylsulfonyl, fenylsulfonylamino, toluensulfonylamino, (1-6C) fluoralkyl og (1-6C) fluoralkoksy. Eksempler på særlige verdier er amino, hydroksy, fluor, klor, brom, jod, metyl, metoksy, metyltio, karboksy, acetylamino, metansulfonyl, nitro, acetyl, fenoksy, fenyltio, fenylsulfonyl, metansulfo-nylamino og trifluormetyl.
Eksempler på verdier for en eventuelt substituert aromatisk gruppe er 1-naftyl, 2-naftyl, fenyl, 2-bifenyl, 3-bifenyl, 4-bifenyl, 2-hydroksyfenyl, 3-hydroksyfenyl, 4-hydroksyfenyl, 2-fluorfenyl, 3-fluorfenyl, 4-fluorfenyl, 2,4-difluorfenyl, 3,4- difluorfenyl, pentafluorfenyl, 2-klorfenyl, 3-klorfenyl, 4-klorfenyl, 2,4-diklorfenyl, 3,4-diklorfenyl, 3-klor-4-fluorfenyl, 3,5-diklorfenyl, 2-bromfenyl, 3-bromfenyl, 4-bromfenyl, 2-metylfenyl, 3-metylfenyl, 4-metylfenyl, 2-metoksyfenyl, 3-metoksyfenyl, 4- metoksyfenyl, 2,3-dimetoksyfenyl, 2,5-dimetoksyfenyl, 3,4-dimetoksyfenyl, 3,5-dimetoksyfenyl, 2-trifiuormetylfenyl, 3-trifluormetylfenyl, 4-trifluormetylfenyl, 2-fluor-3-trifluormetylfenyl, 3-trifluormetyl-4-fluorfenyl, 3-trifluormetyl-5-fluorfenyl, 2-fluor-5- trifluormetylfenyl, 2-fenoksyfenyl, 3-fenoksyfenyl, 3-karboksyfenyl og 4-karboksyfenyl.
Begrepet "ikke-aromatisk karbocyklisk gruppe" inkluderer monocyklisk gruppe, f.eks. en (3-1OC) cykloalkylgruppe, slik som cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohek-syl, cykloheptyl, cyklooktyl, cyklononyl eller cyklodecyl, og en sammensmeltet polycyklisk gruppe slik som 1-adamantyl eller 2-adamantyl, 1-dekalyl, 2-dekalyl, 4a-dekalyl, bicyklo[3,3,0]okt-l-yl, -2-yl eller -3-yl, bicyklo[4,3,0]non-l-yl, -2-yl, -3-yl eller -7-yl, bicyklo[5,3,0]dek-l-yl, -2-yl, -3-yl, -4-yl, -8-yl eller -9-yl og bi-cyklo[3,3,l]non-l-yl, -2-yl, -3-yl eller 9-yl.
Begrepet "ikke-aromatisk heterocyklisk gruppe" inkluderer en 4- til 7-leddet ring som
inneholder en eller to heteroatomer utvalgt fra oksygen, svovel og nitrogen, f.eks. azeti-din-l-yl eller -2-yl, pyrrolidin-l-yl, -2-yl eller -3-yl, piiperidin-l-yl, -2-yl, -3-yl eller -4-yl, heksahydroazepin-l-yl, -2-yl, -3-yl eller -4-yl, oksetan-2-yl eller -3-yl, tetrahydrofuran-2-yl eller -3-yl, tetrahydropyran-2-yl,-3-yl eller -4-yl, heksahydrooksepin-2-yl, -3-yl eller -4-yl, tietan-2-yl eller -3-yl, tetrahydrotiofen-2-yl eller -3-yl, tetrahydrotiopyran-2-yl, -3-yl eller -4-yl, heksahydrotiepin-2-yl, -3-yl eller -4-yl, piperazin-l-yl eller -2-yl, morfolin-l-yl, -2-yl eller -3-yl, tiomorfolin-l-yl, -2-yl eller -3-yl, tetrahydropyrimidin-1-yl, -2-yl, -4-yl eller -5-yl, imidazolin-l-yl, -2-yl eller -4-yl, imidazolidin-l-yl, -2-yl eller -4-yl, oksazolin-2-yl, -3-yl, -4-yl eller -5-yl, oksazolidin-2-yl, -3-yl, -4-yl eller -5-yl, tiazolin-2-yl, -3-yl,-4-yl eller -5-yl, eller tiazolidin-2-yl, -3-yl, -4-yl eller -5-yl.
Begrepet "en ikke-aromatisk monocyklisk karbocyklisk gruppe sammensmeltet med en eller to monocykliske aromatiske eller heteroaromatiske grupper" inkluderer en (3-10C) cykloalkylgruppe sammensmeltet med en benzenring eller en aromatisk 5-6-leddet ring som inneholder fra en til fire heteroatomer utvalgt fra oksygen, svovel og nitrogen, slik som indanyl, 1,2,3,4-tetrahydronaft-l-yl eller -2-yl, 5,6,7,8-tetrahydroquinolin-5-yl, -6-yl, -7-yl eller -8-yl, 5,6,7,8-tetrahydroisoquinolin-5-yl, -6-yl, -7-yl eller -8-yl, 4,5,6,7-tetrahydrobenzotiofen-4-yl, -5-yl, -6-yl eller -7-yl, dibenzo[2,3,6,7]cykloheptan-l-yl eller -4-yl, dibenzo[2,3,6,7]cyklohept-4-en-l-yl eller -4-yl, eller 9-fluorenyl.
Begrepet "en ikke-aromatisk monocyklisk heterocyklisk gruppe sammensmeltet med en eller to monocykliske aromatiske eller heteroaromatiske grupper" inkluderer en 4- til 7-leddet ring som inneholder en eller to heteroatomer utvalgt fra oksygen, svovel og nitrogen, sammensmeltet med en benzenring eller en aromatisk 5-6-leddet ring som inneholder fra en til fire heteroatomer utvalgt fra oksygen, svovel og nitrogen, slik som 2,3-dihydroenzopyran-2-yl, -3-yl eller -4-yl, xanten-9-yl, 1,2,3,4-tetrahydroquinolin-l-yl, - 2-yl, -3-yl eller -4-yl, 9,10-dihydroakridin-9-yl eller -10-yl, 2,3-dihydrobenzotiopyran-2-yl, -3-yl eller -4-yl eller dibenzotiopyran-4-yl.
Begrepet "nitrogenbeskyttende gruppe" slik det anvendes heri, og som representert ved "Pg<N>", refererer til de gruppene som er tiltenkt å beskytte eller blokkere nitrogengrup-pen ovenfor uønskede reaksjoner i løpet av syntesefremgangsmåtene. Valg av egnet beskyttende gruppe som anvendes vil avhenge av betingelsene som vil anvendes i etter-følgende reaksjonstrinn hvori beskyttelsen er påkrevet, så vel som med kunnskapen til fagmannen.Vanlig anvendte nitrogenbeskyttende grupper er beskrevet i T.W. Greene og P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 3. utgave (John Wiley & Sons, New York (1999)). En foretrukket nitrogenbeskyttende gruppe er tert-butoksykarbonyl.
Begrepet "karboksybeskyttende gruppe", slik det anvendes heri og som representert ved "Pg<c>", refererer til et av esterderivatene til karboksylgruppen som vanligvis anvendes for å blokkere eller beskytte karboksylsyregruppen mens reaksjon utføres på andre funksjonelle grupper i forbindelsen. Særlige verdier inkluderer f.eks. metyl, etyl, tert-butyl, benzyl, metoksymetyl, trimetylsilyl, og lignende. Ytterligere eksempler på slike grupper kan finnes i T.W. Greene og P.G.M. Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, 3. utgave, (John Wiley & Sons, New York (1999)). Foretrukne karboksybeskyttende grupper er metyl og etyl. Esteren nedbrytes ved anvendelse av vanlig fremgangsmåte som ikke påvirker andre deler av molekylet.
Begrepet "hydroksylbeskyttende gruppe" betegner en gruppe som forstås av fagmannen innen organisk kjemi av typen i kapittel 2 til Greene og Wuts. Representative hydroksylbeskyttende grupper inkluderer f.eks. etergrupper, substituerte etyletergrupper, isopropyletergrupper, fenyl og substituerte fenyletergrupper, benzyl og substituerte ben-zyletergrupper, alkylsilyletergrupper, esterbeskyttende grupper og lignende. Typer hydroksylbeskyttende grupper som anvendes er ikke kritisk så lenge den derivatiserte hy-droksylgruppen er stabil overfor betingelsene i etterfølgende reaksjoner på andre posi-sjoner til intermediatmolekylet og kan bli selektivt fjernet på et passende punkt uten å forstyrre resten av molekylet som inkluderer eventuelt andre hydroksylbeskyttende grupper.
Begrepet "aminoacyl" betyr et aminoacyl avledet fra en aminosyre utvalgt fra gruppen som består av naturlige og unaturlige aminosyrer som definert heri. De naturlige aminosyrene kan være nøytralie, positive eller negative avhengig av substituentene i sidekje-den. "Nøytral aminosyre" betyr en aminosyre som inneholder uladede sidekjedesubsti-tuenter. Eksempler på nøytrale aminosyrer inkluderer alanin, valin, leucin, isoleucin, prolin, fenylalanin, tryptofan, metionin, glycin, serin, treonin, cystein, glutamin og as-pargin. "Positiv aminosyre" beteyr en aminosyre hvori sidekjedesubstituentene er positivt ladet ved fysiologisk pH. Eksempler på positive aminosyrer inkluderer lysin, arginin og histidin. "Negativ aminosyre" betyr en aminosyre hvori sidekjedesubstituentene bærer en netto negativ ladning ved fysiologisk pH. Eksempler på negative aminosyrer inkluderer aspartinsyre og glutaminsyre. Foretrukne aminosyrer er oc-aminosyre. De mest foretrukne aminosyrene er a-aminosyrer som har L-stereokjemi ved a-karbonet. Eksempler på nøytrale a-aminosyrer er valin, isoleucin, prolin, fenylalanin, tryptofan, metionin, glycin, serin, treonin, cystein, tyrosin, asparagin, glutamin, lysin, arginin, histidin, aspartinsyre og glutaminsyre.
"Unaturlig aminosyre" betyr en aminosyre fra hvilken det ikke er noen nukleinsyreko-don. Eksempler på unaturlige aminosyrer inkluderer f.eks. D-isomerene av de naturlige a-aminosyrene som indikert ovenfor; Aib (aminosmørsyre), |3AiB (3-aminoisosmørsyre), Nva (norvalin), (5-Ala, Aad (2-aminoadipinsyre), |3Aad (3-aminoadipinsyre), Abu (2-aminosrnørsyre), Gaba (y-aminosmørsyre), acp (6-aminokapronsyre), Dbu (2,4-diaminosmørsyre), a-aminopimelinsyre, TMSA (trimetylsilyl-Ala), alle (allo-isoleucin), Nie (norleucin), tert-Leu, Cit (citrullin), Orn, Dpm (2,2'-diaminopimelinsyre), Dpr (2,3-diaminopropionsyre), a- eller (}-Nal, Cha (cykloheksyl-Ala), hydroksyprolin, Sar (sarkosin), O-metyltyrosin, fenylglycin og lignende; cykliske aminosyrer; Na<->alkylerte aminosyrer hvor Na<->alkylert aminosyre er Na<->(1-10C)alkylaminosyre slik som MeGly (Na<->metylglycin), EtGly (Na<->etylglycin), og EtAsn (Na<->etylasparagin) og aminosyrer hvori a-karbonet bærer to sidekjedesubstituen-ter. Eksempler på unaturlige a-aminosyrer inkluderer D-alanin, D-leucin og fenylglycin. Navnene på naturlige og unaturlige aminosyrer og rester derav anvendt heri følger navngivningskonvensjoner foreslått av JUPAC-JUB "Joint Commission on Biochemical Nomenclature" (JCBN) som fremsatt i "Nomenclature and Symbolism for Amino Acids and Peptides" (Recommendations, 1983) European Journal of Biochemistry, 138, 9-37
(1984). I den grad navn og forkortelser av aminosyrer og rester derav som anvendes i denne beskrivelsen og vedlagte krav er forskjellig fra de som er angitt, vil forskjellige navn og forkortelser gjøres klare.
Selv om forbindelsen med formel I er anvendelige aktive mGluR2-reseptoragonister, er visse forbindelser foretrukket. Følgende avsnitt definerer foretrukne klasser.
A) Forbindelsen er en fri base.
B) Forbindelsen er et salt.
C) Forbindelsen er hydrokloirdsaltet.
D) Forbindelsen er mesylatsaltet.
E) Forbindelsen er esylatsaltet.
F) Forbindelsen er tosylatsaltet.
Forbindelsen med formel I er anvendelige for behandling av forstyrrelser hos pattedyr, og foretrukket pattedyr er et menneske.
Forbindelsen ifølge oppfinnelsen kan fremstilles ved et antall fremgangsmåter, hvor noen er illustrert i skjemaene nedenfor. Den bestemte rekkefølgen av trinnene som kreves for å fremstille forbindelsen av formel I er avhengig av den bestemte forbindelsen som syntetiseres, utgangsforbindelsene og den relative labiliteten til substituentene. Noen substituenter kan ha blitt eliminert i følgende skjemaer for klarhets skyld og er ikke tiltenkt å begrense beskrivelsen i skjemaene på denne måten. Fagmannen vil se at substituentene R<15>og R16 representerer passende sidekjede for å danne ønsket aminoacyl.
Hvis ikke kommersielt tilgjengelige, kan nødvendige utgangsmaterialer for følgende skjemaer fremstilles ved fremgangsmåter som er utvalgt fra standardteknikker innen organisk og heterocyklisk kjemi, teknikker som er analoge med syntese av kjente, struk-turelt tilsvarende forbindelser, og fremgangsmåtene beskrevet i fremstillingene og eksemplene, som inkluderer nye fremgangsmåter.
Forbindelser med formel I omdannes via enzymatisk eller hydrolyttisk prosess in vivo for å danne forbindelser med formel II, som vist i skjema 1 ovenfor. Særlig kan en krystallinsk form av en forbindelse med formel I fremstilles i henhold til ruten angitt i skjema 2 nedenfor.
Hydrolysen av di-esterbeskyttet peptidylforbindelse med formel (iii) med en passende base slik som litiumhydroksid eller natriumhydroksid i et passende løsemiddel, slik som
THF eller THF/vann, gir di-syrebeskyttet peptidylforbindelse med formel (iv). En forbindelse med formel (iv) kan avbeskyttes med en passende syre i et passende løsemid-del. Slike betingelser kan gi det korresponderende syresaltet av di-syrepeptidylforbindelsene, angitt i formel I-salt, som et amorft fast stoff eller, direkte, et krystallinsk fast stoff, hvori X" representerer det korresponderende anionet. I tilfellet et amorft fast stoff, kan etterfølgende krystallisering skje fra egnede løsemidler. Karboksy-latsaltene kan dannes ved introduksjon av en kationisk bestanddel av et reagens slik natriumacetat. Til slutt kan switterionforbindelsen oppnås ved behandling av den krystallinske saltforbindelsen med en passende base.
For eksempel, gir en di-syrebeskyttet peptidylforbindelse med formel (iv), når den behandles med hydrogenkloridgass i passende løsemiddel, det avbeskyttede hydrokloridsaltet som et amorft fast stoff. Den amorfe hydrokloridforbindelsen kan deretter krystalliseres fra aceton og vann for å gi den krystallinske hydrokloridsaltforbindelsen. I tilfellet et krystallinsk fast stoff som dannes direkte kan filtrering av reaksjonsblandingen gi det krystallinske saltet. Switterionforbindelsen oppnås ved behandling av den krystallinske hydrokloridsaltforbindelsen med natriumhydroksid; alternativt vil behandling av mesylatsaltforbindelsen eller tosylatsaltforbindelsen med natriumhydroksid også gi switterionforbindelsen. Fagmannen vil se at en forbindelse med formel I kan fremstilles i en fremgangsmåte hvor det i de indikerte intermediatene ikke isoleres.
Skjema 3
Di-esteren med formel (ii) acyleres med en forbindelse med formel III ved anvendelse av passende koblingsmiddel for å gi en di-esterbeskyttet peptidylforbindelse med formel (iii). Alternativt, kan denne omdannelsen oppnås ved anvendelse av syrekloridet til forbindelsen med formel III.
Egnede peptidkoblingsreagenser inkluderer dicykloheksylkarbodiimid (DCC), l-(3-dimetylaminopropyl)-3-etylkarbodiimid (EDC), isobutylklorformat, difenylklorfosfat, 2-klor-4,6-dimetoksy-l,3,5-triazin (CDMT), bis(2-okso-3-oksazolidinyl)fosfinsyreklorid, og benzotriazol-1-yloksytris(dimetylamino)fosfoniumheksafluorfosfat.
Skjema 4
I skjema 4 ovenfor, blir en forbindelse med formel II, en di-syre, behandlet med et passende karboksybeskyttende middel, slik som katalytisk saltsyre eller tionylklorid og metanol eller etanol, som gir den korresponderende diesteren med formel (ii). Alternativt, kan en forbindelse med formel II først behandles med et nitrogenbeskyttende middel slik som BOC2O for å gi en nitrobeskyttet forbindelse med formel (i). Deretter kan en forbindelse med formel (i) behandles med et karboksybeskyttende middel slik som metyljodid under nærvær av en base slik som kaliumkarbonat, fulgt deretter av et nitro-genavbeskyttende middel slik som saltsyre eller trifluoreddiksyre for å gi en forbindelse med formel (ii).
I tillegg, vil fagmannen se at, avhengig av X, kan et passende beskyttende middel være nødvendig.
Forbindelser med formel II er kjente i litteraturen. For eksempel, kan fremstilling av disse forbindelsene finnes i U.S. patent nr. 5,688,826 ('826-patentet) og 5,958,960 ('960-patentet).
Forskjellige forbedringer av synteseruten til forbindelser med formel II har blitt gjort i forhold til fremgangsmåtene beskrevet tidligere. Forbedringene involverer svovel og alkoholoksidasjon, så vel som optisk oppløsning av forskjellige intermediater som beskrevet nedenfor.
Den forbedringen angår omdannelsen beskrevet i '826-patentet i kolonne 8, linje 22-34 og kolonne 7, begynnende med kolonne 33 (formel V), som inkluderer oksidasjon av en forbindelse med formel VII i '826-patentet
for å danne en forbindelse med formel V i '826-patentet
Det har blitt funnet at svoveltrioksidpyridinkomplekset eller trifluoreddiksyreanhydridet i forbindelse med DMSO foretrukket er blant de mange oksidasjonsfremgangsmåtene kjente i litteraturen.
For det andre, med hensyn til oppløsning av en forbindelse med formel III i '826-patentet hvori R representerer en karboksylgruppe, referert til i kolonne 8, linje 3-7 og kolonne 6, begynnende ved linje 1 (formel III), har det blitt funnet at (R)-a-metylbenzylamin og quinin er foretrukket. (R)-a-metylbenzylamin er særlig foretrukket.
Det er videre blitt funnet at, når sulfidet av en forbindelse med formel III i '826-patentet oksideres hvori X er svovel for å danne en forbindelse med formel III i '826-patentet hvor X er sulfonyl, som referert til i '826-patentet i kolonne 8, linje 39-53, er det foretrukket at et basisk vandig system og hydrogenperoksid anvendes i kombinasjon med en katalysator.
Alle eksperimenter i de påfølgende eksempler kjøres under positivt trykk av tørr nitrogen eller argon. Alle løsemidlene og reagensene er levert fra kommersielle kilder og anvendes slik de mottas, med mindre annet er angitt. Tørr tetrahydrofuran (THF) kan oppnås ved destillasjon fra natrium eller natriumbenzofenonketyl før anvendelse. Pro-tonkjernemagnetisk resonans (<]>H NMR)-spektra oppnås på en Bruker Avance II-bay-500 ved 500 MHz, en Bruker Avance 1 bay-200 ved 200 MHz, eller en Varian Ino-va/Varian 300/Varian 400 ved 500 MHz. Elektronspraymassespektroskop (ESI) utføres på et Agilent MSD/B-instrument ved anvendelse av acetonitril/vandig ammoniumacetat som mobilfase.Fri atombombardementmassespektroskopi (FABMS) utføres på et VG ZAB-2SE-instrument. Feltdesorpsjonsmassespektroskopi (FDMS) utføres ved anvendelse enten av et VG 70SE eller et Varian MAT 731-instrument. Optisk dreining måles med et Perkin-Elmer 241 polarimeter. Kromatografisk separasjon på en Waters Prep 500 LC blir generelt utført ved anvendelse av en lineær gradient av løsemidler som indikert i teksten. Reaksjoner blir generelt overvåket for fullstendig reaksjon ved anvendelse av tynnsjiktkromatografi (TLC). Tynnsjiktkromatografi utføres ved anvendelse av E. Merck Kieselgel 60 F254-plater, 5 cm x 10 cm, 0,25 mm tykkelse. Flekker detekteres ved anvendelse av en kombinasjon av UV og kj emisk deteksjon (plater dyppes i en cerisk ammoniummolybdatløsning [75 g ammoniummolybdat og 4 g cerium (IV) sulfat i 500 ml 10% vandig svovelsyre] og blir deretter varmet på en varm plate). Flashkromatografi utføres som beskrevet av Still, et al. Still, Kahn og Mitra, J. Org. Chem., 43, 2923 (1978). Elementanalyse for karbon, hydrogen og nitrogen bestemmes på en Cont-rol Equipment Corporatio 440 Elemental Analyzer eller utføres av "the Universidad Complutense Analytical Centre" (Facultad de Farmacia, Madrid, Spania). Smeltepunk-tene bestemmes i åpne glasskapillærer på et Gallenkamp varmluftbadsmeltepunktappa-ratur eller en Buchi smeltepunktapparatur og er ukorrigert.
Forkortelser, symboler og begreper anvendt i eksemplene har følgende betydninger:
Ac = acetyl
Anal. = elementanalyse
ATR = attenuert total intern refleksjon
Bn eller Bzl = benzyl
Bu = butyl
BOC = t-butoksykarbonyl
calcd = beregnet
D2O = deuteriumoksid
DCC = dicykloheksylkarbodiimid
DCM = 1,2-diklormetan
DIBAL-H = diisobutylaluminiumhydrid
DMAP = 4-dimetylaminopyridin
DMF = dimetylformamid
DMSO = dimetylsulfoksid
DSC = differensiert scanningkalorimetri
EDC = N-etyl-N'N'-dimetylaminopropylkarbodiimid hydroklorid ES = elektronspray
Et = etyl
EtOH = etanol
FAB = Fast Atom Bombardment (massespektroskopi) FDMS = feltdesorpsjonsmassespektrum
FTIR = Fourier-transformasjonsinfrarødt spektrometri HO At = l-hydroksy-7-azabenzotriazol
HOBt= 1-hydroksybenzotriazol
HPLC = høyytelses væskekromatografi
HRMS = høy oppløsningsmassespektrum
i-PrOH = isopropanol
IR = infrarødt spektrum
L = liter
Me = metyl
MeOH = metanol
MPLC = middels trykk væskekromatografi
Mp = smeltepunkt
MTBE = t-butylmetyleter
NBS = N-bromsuksinimid
NMR = kjernemagnetisk resonans
PC-TLC = preparativ sentrifugaltynnsjiktkromatografi
Ph = fenyl
p.o. = oral administrasjon
i-Pr = isopropyl
Rochelle 's salt = kaliumnatriumtartrat
rt = romtemperatur
SM = utgangsmateriale
TBS = tert-butyldimetylsilyl
TEA = trietylamin
Temp. = temperatur
TFA = trifluoreddiksyre
THF = tetrahydrofuran
TLC = tynnsjiktkromatografi
t-BOC = tert-butoksykarbonyl
Generell fremgangsmåte A
EDC- kobling mellom aminer og N- BOC-( L)- aminosvrer
Suspender utgangsaminodialkylesteren (en forbindelse med formel ii, skjema 3) (1,0 ekv.) i tørr diklormetan under nitrogen. Tilsett sekvensielt den korresponderende N-Boc-(L)-aminosyren (1,5-2,0 ekv.), EDC (1,5-2,0 ekv.), HOBt (1,5-2,0 ekv.) og dimetylaminopyridin (DMAP, 0,1-0,2 ekv.). Rør reaksjonsblandingen ved romtemperatur til den anses fullstendig med TLC med mindre annet er angitt. Fortynn reaksjonsblandingen med etylacetat og vask sekvensielt med mettet vandig NaHCC«3 og/eller vandig NaHSCvog saltvann. Etter tørking over natriumsulfat og fordamping i vakuum, rens den urene resten (en forbindelse med formel iii) med silikagelkromatografi ved anvendelse av passende eluent (typisk etylacetat/heksan).
Generell fremgangsmåte B
Anhvdridkobling mellom amin og N- BOC-( L)- aminosvreisobutylanhvdrider
Til en løsning av den korresponderende N-Boc-(L)-aminosyren (1,5 ekv.) i tørr diklormetan (10 ml) tilsett ved -20°C under nitrogen N-metylmorfolin (NMM, 1,5 ekv., i 1 ml CH2CI2) fulgt av dråpevis tilsetning av iso-butylklorformat (IBCF, 1,5 ekv., i 5 ml CH2CI2) ved en hastighet slik at den indre reaksjonstemperaturen ikke overskrider
-15°C. Rør den resulterende reaksjonsblandingen ved -20°C i 30 minutter og tilsett deretter ved -20°C en løsning av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(2'-amino-propionylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester hydroklorid (1,0 ekv.) i
diklormetan (10 ml) i en hastighet slik at den indre temperaturen ikke overskrider -15°C. Etter fullstendig tilsetning fjern kjølebadet og rør reaksjonsblandingen ved romtemperatur til den anses fullstendig ved TLC. Fortynn reaksjonsblandingen med etylacetat, vask sekvensielt med mettet vandig NaHCC«3, vandig NaHSCuog saltvann. Etter tørking over magnesiumsulfat og fordamping i vakuum, rens den urene resten ved silikagelkromatografi ved anvendelse av passende eluent (typisk heksan/etylacetat).
Generell fremgangsmåte C
Sekvensiell N- Boc og esterbeskvtende gruppefjerning
Rør det korresponderende N-Boc-diesterpeptidderivatet (en forbindelse med formel iii, skjema 2) (1,0 ekv.) i en 1:1 blanding av THF/2,5N LiOH (10-20 ekv.) ved romtemperatur i opptil 4 timer. Fortynn reaksjonsblandingen med H2O og vask med etylacetet. Kast det organiske sjiktet. Juster den vandige fasen til pH 2 med IN HC1 (NaCl tilsatt til den vandige fasen for å øke ekstraherbarheten hvis nødvendig) og ekstraher inngående med N-boc-dikarboksylsyreproduktet (en forbindelse med formel iv) med etylacetat. Kombiner alle de organiske fraksjonene, vask med saltvann, tørk over MgSCvog konsentrer til tørrhet i vakuum som gir det ønskede karboksylatproduktet som et skummet fast stoff. Løs opp i etylacetat og avkjøl til 0°C. Overstrøm reaksjonsblandingen med vannfri HCl-gass til mettet med HC1. Rør den resulterende reaksjonsblandingen ved 0°C i opp til 4 timer. Isoler det fullt avbeskyttede peptidderivatet (en forbindelse med formel I) som dets hydrokloridsalt ved filtrering under N2eller ved konsentrering av reaksjonsblandingen til tørrhet fulgt av triturering med etylacetat eller Et20 og konsentrering til et hvitt pulver. Eventuelt, for å fjerne restløsemiddel og overskudd HC1, rekonstitusjoner produktet i H2O, frys ned og lyofiliser deretter de ønskede hydrokloridproduktene.
Fremstilling 1
( 1 R. 4S. 5S. 6S)- 4- amino- 2. 2- diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6- dikarboksvlsvre dietylester
Til en slurry av (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4-dikarboksylsyre (10 g, 42,5 mmol, U.S. patent nr. 5,688,826) i 100 ml 2B etanol ved romtemperatur tilsettes tionylklorid (15,5 ml, 212,6 mmol) dråpevis i løpet av 20 minutter fulgt av rensing med 40 ml etanol. Varm opp slurryen til refluks og rør over natten. Analyser via 500 MHz 1H NMR (CD3OD) til en konsentrert alikvot avdekker fullstendig konsumpsjon av utgangsmaterialene og intermediatmonoester. Avkjøl den resulterende løsningen til romtemperatur og konsentrer deretter til en gelatinøs rest. Tilsett EtOAc (50 ml) til gelatinen som ytterligere konsentreres til et fast stoff og fortynn deretter med ytterligere 94 ml EtOAc. Tilsett 15 ml vandig natriumkarbonat (70 ml) sakte til blandingen med røring for hånd for gradvis å gi oppløsning, som gir en pH på 7,95. Filtrer den resulterende natriumkarbonatpresipitasjonen før ekstraksjon av sjiktene. Tilbakeekstraher det vandige sjiktet med EtOAc (2x100 ml). Vask de kombinerte organiske ekstraktene med saltvann (1x100 ml), tørk (MgS04), filtrer og konsentrer i vakuum for å gi en matt gul olje som størkner for å gi tittelforbindelsen som et off-white faststoff (1 1,71 g, 95% utbytte).
Rekrvstallisasion
En blanding av tittelforbindelsen (200 mg) i EtOAc (800 ul) varmes til 56°C hvorved oppløsning finner sted. Etter røring i 15 minutter ved 56°C blir heptan (1 ml) tilsatt dråpevis til løsningen. Varmes skrus av. Tillat løsningen å avkjøles til 52°C hvorved presipitasjon finner sted. Etter avkjøling og ytterligere fortynning med heptan (600 ul) dannes slurryen. Rør den resulterende slurryen ved romtemperatur i 1 time før filtrering, vasking med heptan (2 x 500 ul), og tørking ved 45°C over natten som gir 145 mg (73% utvinning) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Smp. 80-83°C.
[a]25D -57.7° (c 1.04, CH30H).
500 MHz 1H NMR (CD3C13) 5 4.31 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 4.20 (m, 2H), 3.78 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 3.36 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 2.93 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 2.81 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 2.46 (t, 1H, J = 4.0), 1.34 (t, 3H, J = 7.0), 1.30 (t, 3H, J = 7.0).
13C NMR (125 MHz, CD3C13) 5 171.68, 168.57, 63.26, 62.42, 59.96, 56.06, 43.78, 32.25,22.49, 14.31, 14.25.
FTIR(ATR) 3364.15 (s), 1725.95 (s), 1304.91 (s), 1259.24 (s), 1200.84 (s), 1104.91 (s), 1022.99 (s), 896.45 (s), 851.21 (s) cm-1.
Analyse beregnet for Cl 1H17N06S: C, 45.35; H, 5.88; N, 4.81. Funnet: C, 45.02; H, 5.75; N, 4.82.
Fremstilling 2
( 1 R, 4S , 5 S, 6S")- 4-( 2' S- tert- butoksvkarbonvlamino- propionylamino)- 2, 2- diokso- 2X6- tiabicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksylsvre dietylester
Til en løsning av N-Boc-L-alanin (43,52 g, 230 mmol) og N-metylmorfolin (25,5 ml, 232 mmol) i 457 ml metylenklorid ved -30°C under nitrogen tilsettes isobutylklorformat (30,4 ml, 234 mmol) dråpevis i løpet av 10 minutter. Rør den resulterende tynne slurryen ved -25 til -30°C i 30 minutter hvorved en løsning av (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (63,90 g, 219 mmol, fremstilling 1) i 213 ml metylenklorid tilsettes i løpet av 25 minutter slik at reaksjonstemperaturen ikke overstiger -25°C. Etter fullstendig tilsetning blir kjølebadet fjernet og blandingen rørt ved omgivelsestemperatur i 60 minutter hvorved reaksjonstemperaturen når 19°C og farven blir matt oransje. Behandle reaksjonsblandingen med 350 ml IN HC1 og separer sjiktene. Vask det organiske sjiktet med mettet vandig NaHCOj(1 x 350 ml) og saltvann (1 x 350 ml), tørk (NaiSCu), filtrer og konsentrer i vakuum som gir et hvitt skum (105,2 g, 104%).<!>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5: 7.62 (brs, 1H), 4.90 (brd, 1H,J = 7.1 Hz), 4.34-4.10 (m, 6H), 3.39 (ddd, 1H, J = 7.2,3.9, 1.0 Hz), 3.00 (dd, 1H, J = 7.1, 3.9 Hz), 2.90 (brd, 1H, J = 14.9 Hz), 2.43 (t, 1H, .7=4.1 Hz), 1.46 (s, 9H), 1.31 (m, 9H).<I3>C NMR (75 MHz, CDCI3) 5: 173.0,168.6,167.6, 80.9, 76.5, 63.3, 62.3, 59.9, 55.7, 42.8, 31.5,28.2, 22.7, 16.6,14.0, 13.9 MS (ES) m/z 461.0 [M-H]\ Fremstilling 3 ( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4-( 2' S- tert- butoksvkarbonvlamino- propionylamino)- 2. 2- diokso- 2X6- tiabicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre
Til en løsning av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dietylester (181,4 g, 392 mmol teoretisk, fremstilling 2) i 292 ml THF ved romtemperatur tilsett 490 ml (980 mmol) 2N natriumhydroksid. Rør tofaseblandingen kraftig ved romtemperatur i 1,25 timer hvorved reaksjonen blir homogen. Fortynn blandingen med 490 ml etylacetat og separer sjiktene. Fortynn det vandige sjiktene med 490 ml etylacetat og reduser pH i blandingen til 1,5 med konsentrert HC1. Separer sjiktene og tilbakeekstraher det vandige sjiktet med 245 ml etylacetat. Tørk de kombinerte organiske sjiktene (NaiSCu), filtrer og konsentrer for å gi 167,9 g (105%) av tittelforbindelsen som et hvitt skum. Dette materialet anvendes uten karakterisering i eksempel 1 og 2.
Fremstilling 4
( lR. 4S. 5S. 6S)- 4- amino- 2. 2- diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan- 4. 6- dikarboksvlsvre dimetylester
Tilsett tionylklorid (6,2 ml, 85,0 mmol) dråpevis til en raskt rørt suspensjon av
(1 R,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre (10,0 g, 42,5 mmol, U.S. patent nr. 5,688,826) i MeOH (170 ml, 5°C). Etter fullstendig tilsetning, varmes reaksjonsblandingen sakte til romtemperatur og varmes til refluks i 48 timer. Fjern de flyktige forbindelsene under redusert trykk og fordel resten mellom en mettet løsning av NaHCC«3 (200 ml) og etylacetat (400 ml). Separer sjiktene og ekstraher det vandige sjiktet med etylacetat (2x400 ml hver gang). Tørk de kombinerte organiske sjiktene over K2CO3og konsentrer under redusert trykk for å gi 8,10 g (30,8 mmol) av tittelforbindelsen i 72% utbytte.
[<a>]<23,>D=-84° (c = 0.5, MeOH).
Analyse beregnet for C9Hi3N06S: C, 41.06; H, 4.98; N, 5.32. Funnet: C, 40.94; H, 4.93; N, 5.30.
MS (ES) m/z 264.0 [M+H]<+>.
Fremstilling 5
( 1 R, 4S , 5 S, 6S")- 4-( 2' S- tert- butoksykarbonylamino- 3' - fenyl- propionylamino)- 2, 2- diokso-2X6- tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-(L)-fenylalanin og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 4). Reflukser reaksjonsblandingen over natten. Rens ved PC-TLC, 4 mm SiC«2-rotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 0,85 g (88%, 1,67 mmol) som et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-35.2° (c = 0.45, CHC13).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.43 (9H, s), 2.38-2.40 (1H, m), 2.86 (1H, d, J = 15.0 Hz), 2.91 (1H, dd, J = 4.4, 7.3 Hz), 3.04 (2H, d, J = 7.3 Hz), 3.35-3.39 (1H, m), 3.77 (3H, s), 3.84 (3H, s), 4.11 (1H, d, J = 14.3), 4.30 (1H, app. q, J = 7.3), 4.96 (1H, bd, J = 6.6 Hz), 6.96 (1H, bs), 7.22-7.36 (5H, m).
Analyse beregnet for C23H3oN209S'0.1H20: C, 53.92; H, 5.94; N, 5.47. Funnet: C, 53.62; H, 5.90; N, 5.28.
MS (ES) m/z 509.16 [M - H]"; 411.2 [M-Boc]<+>.
Fremstilling 6
( 1 R. 4S , 5 S, 6S)- 4-( 2' S- tert- butoksvkarbonylamino- 3' S- metyl- pentanoylamino)- 2, 2-diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan- 4. 6- dikarboksvlsvre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-(L)-isoleucin og (lR,4S,5S,6S)-4-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 4). Reflukser reak sjonsblandingen over natten. Rens ved PC-TLC, 4 mm SiCVrotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 0,75 g (83%, 1,57 mmol) som et hvitt skum.
[<*]23,D= -32.65° (c = 0.49, CHC13).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 0.91 (3H, t, J = 7.3 Hz), 0.93 (3H, d, J = 6.6 Hz), 1.10-1.18 (lH,m), 1.46 (9H, s), 1.42-1.52 (1H, m), 1.81-1.86 (1H, bm), 2.51 (lH,t, J = 4.0 Hz), 2.95 (1H, d, J = 15.0 Hz), 3.06 (1H, dd, J = 4.4, 7.3 Hz), 3.43 (3H, dd, J = 3.7, 7.0 Hz), 3.78 (3H, s), 3.85 (3H, s), 3.82-3.90 (1H, m), 4.20 (1H, d, J = 14.7 Hz), 4.94 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.19 (1H, bs).
Analyse beregnet for C20H32N2O9S: C, 50.41; H, 6.77; N, 5.88. Funnet: C, 50.32; H, 6.92; N, 5.76.
MS (ES) m/z 475.1 [M-H]\
Fremstilling 7
( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4-( 2' S- tert- butoksvkarbonylamino- 3' - metvl- butvrylamino)- 2. 2- diokso-2X6- tia- bicvklor3. 1. 0"| heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-(L)-isoleucin og (lR,4S,5S,6S)-4-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 4). Reflukser reaksjonsblandingen over natten. Rens med PC-TLC, 4 mm SiCVrotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 0,41 g (47%, 0,89 mmol) som et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-35.36° (c = 0.51, CHC13).
<!>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 0.93 (3H, d, J = 7.0 Hz), 0.96 (3H, d, J = 6.6 Hz), 1.46 (9H, s), 2.06-2.13 (1H, m), 2.50 (1H, t, J = 4.0 Hz), 2.94 (1H, d, J = 15.0 Hz), 3.04 (1H, dd, J = 4.4, 7.3 Hz), 3.43 (1H, dd, J = 3.3, 6.6), 3.78 (3H, s), 3.80-3.86 (1H, m), 3.86 (3H, s), 4.24 (1H, d, J = 15.0 Hz), 4.94 (1H, d, J = 8.1 Hz), 7.15 (1H, bs).
Analyse beregnet for C19H30N2O9S: C, 49.34; H, 6.54; N, 6.06. Funnet: C, 49.33; H, 6.44; N, 6.05.
MS (ES) m/z 461.2 [M-H]"
Fremstilling 8
( 1 R, 4S , 5 S, 6S")- 4-( 2' S- tert- butoksykarbonylamino- 4' - metyl- pentanoylamino)- 2, 2-diokso- 2X6- tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-(L)-isoleucin monohydrat og (lR,4S,5S,6S)-4-2,2-diokso-2X.<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 4). Reflukser reaksjonsblandingen over natten. Rens ved PC-TLC, 4 mm SiC«2-rotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 0,85 g (94%, 1,78 mmol) som et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-46.15° (c = 1.04, CHC13).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 0.92 (3H, d, J = 6.2 Hz), 0.95 (3H, d, J = 6.6 Hz), 1.47 (9H, s), 1.42-1.47 (1H, m), 1.63-1.67 (1H, m), 2.46 (1H, t, J = 3.7 Hz), 2.87 (1H, d, J = 15.0 Hz), 3.04 (1H, dd, J = 4.4, 7.3 Hz), 3.41 (1H, dd, J = 3.7, 7.0), 3.78 (3H, s), 3.86 (3H, s), 4.00-4.05 (1H, m), 4.20 (1H, d, J = 15.0 Hz), 4.75 (1H, d, J = 6.6 Hz), 7.43 (1H, bs).
Analyse beregnet for C20H32N2O9S: C, 50.41; H, 6.77; N, 5.88. Funnet: C, 50.30; H, 6.82; N, 5.75.
MS (ES) m/z 475.2 [M - H]\
Fremstilling 9
( 1 R. 4S , 5 S, 6S)- 4-( 2' S. 6' - tert- butoksvkarbonylamino- heksanovlamino)- 2, 2- diokso- 2X6-tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-OH og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 4). Reflukser reaksjonsblandingen over natten. Rens ved PC-TLC, 4 mm SiC«2-rotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 1,04 g (93%, 1,76 mmol) som et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-32.0° (c = 0.5, CHC13).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.44 (9H, s), 1.46 (9H, s), 1.39-1.53 (3H, m), 1.56-1.65 (1H, m), 1.77-1.84 (2H, m), 2.50 (1H, t, J = 4.4 Hz), 2.98-3.20 (4H, m), 3.42 (1H, dd, J = 3.7, 7.0 Hz), 3.76 (3H, s), 3.86 (3H, s), 4.01 (1H, dd, J = 7.7,13.2 Hz), 4.09-4.19 (1H, m), 4.71 (1H, t, J = 7.3 Hz), 5.13 (1H, bs), 7.59 (1H, bs).
Analyse beregnet for C25H41N30iiS: C, 50.75; H, 6.98; N, 7.10. Funnet: C, 50.36; H, 6.99; N, 6.87.
MS (ES) m/z 590.2 [M - H]\
Fremstilling 10
( 1 R, 4S , 5 S, 6S")- 4- r2' S- tert- butoksvkarbonylamino- 4' -( trityl- karbamovlVbutyrylaminol-2, 2- diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsvre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-(L)-glutamin (Trt)-OH og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 4). Reflukser reaksjonsblandingen over natten. Rens ved PC-TLC, 4 mm SiC«2-rotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 0,53 g (48%, 0,72 mmol) som et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-8.0° (c = 0.50, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 1.42 (9H, s), 1.83-1.88 (1H, m), 2.03-2.18 (1H, m), 2.16 (1H, t, J = 4.0 Hz), 2.57-2.64 (1H, m), 2.60 (1H, d, J = 15.0 Hz), 2.64-2.80 (1H, m), 2.88 (1H, dd, J = 4.4, 7.3 Hz), 3.26 (1H, dd, J = 4.0, 7.0 Hz), 3.47 (3H, s), 3.76-3.90
(1H, m), 3.81 (3H, s), 4.05 (1H, d, J = 15.0 Hz ), 5.47 (1H, bs), 7.02 (1H, bs), 7.20-7.35 (15H,m), 8.68 (1H, bs).
Analyse beregnet for C38H43N3O10S: C, 62.20; H, 5.91; N, 5.73. Funnet: C, 61.83; H, 6.09; N, 5.57.
MS (ES) m/z 731.9 [M-H]";
HRMS beregnet for C38H43N3O10S [M + Na]<+>, 756.2567. Funnet, 756.2585.
Fremstilling 11
( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4- f( 1 - tert- butoksvkarbonvl- pyrrolidin- 2' S- karbonyl)- aminol- 2. 2- diokso-2X6- tia- bicvklor3. 1. 0"| heksan- 4, 6- dikarboksvlsvre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig Boc-(L)-prolin (0,61 g, 2,9 mmol) og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X6-tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,5 g, 1,9 mmol, fremstilling 4). Rens ved anvendelse av PC-TLC (etylacetat/heksan) for å gi 0,87 g (99,2%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=-61.2 (c=0.49, CHC13).
<]>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 1.51 (9H, s), 1.75-1.98 (3H, m), 2.35-2.5 (2H, m), 2.84 (1H, d, J=14.7 Hz), 2.9-3.03 (1H, m), 3.25-3.4 (1H, m), 3.3-4.1 (2H, m), 3.76 (3H, s), 3.86 (3H, s), 4.14-4.31 (2H, m), 8.66 (1H, s).
MS (ES) m/z 459.2 [M-l]".
Fremstilling 12
( 1 R, 4S , 5 S, 6S")- 4-( 2' S- tert- butoksykarbonylamino- 4' - meteylsulfanvl- butvrylamino)- 2, 2-diokso- 2X6- tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksylsvre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig Boc-(L)-metionin (0,71 g, 2,9 mmol) og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,5 g, 1,9 mmol, fremstilling 4). Rens ved anvendelse av PC-TLC (etylacetat/heksan) for å gi 0,85 g (90,5%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=-20.4 (c=0.49, CHClj).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.46 (9H, s), 1.69 (1H, s), 1.8-2.05 (2H, m), 1.9-2.0 (1H, m), 1.95-2.3 (3H, bs), 2.0-2.2 (1H, m), 2.4-2.8 (2H, m), 2.48 (1H, t, J=4.0 Hz), 2.58 (1H, bs), 2.92 (1H, d, J=14.7 Hz), 3.01 (1H, dd, J=4.4, 7.0 Hz), 3.42 (1H, dd,, J=3.7, 7.3 Hz), 3.78 (3H, s), 3.87 (3H, s), 4.22-4.24 (2H, m), 5.06 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.27 (1H, s).
MS (ES) m/z 493.1 [M-l]".
Fremstilling 13
( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4- r2' S- tert- butoksvkarbonylamino- 3' -( 1 - tert- butoksykarbonyl- 1 H- indol-3- vl)- propionvlamino1- 2, 2- diokso- 2X6- tia- bicvklo[ 3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig Boc-(L)-tryptoheptan (Boe) (1,1 g, 2,8 mmol) og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,5 g, 1,9 mmol, fremstilling 4). Rens ved anvendelse av PC-TLC (etylacetat/heksan) for å gi 0,7 g (56,7 %) av tittelforbindelsen.
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.44 (9H, s), 1.67 (9H, s), 2.37 (1H, bs), 2.86 (1H, d, J=15.0 Hz), 2.88 (1H, t, J=4.4 Hz), 3.15 (2H, d, J=6.6 Hz), 3.39 (1H, dd, J=3.7, 7.0 Hz), 3.73 (3H, s), 3.83 (3H, s), 4.18 (1H, d, J=14.7 Hz), 4.37-4.44 (1H, m), 5.01 (1H, bd, J=8.1 Hz), 7.11 (1H, bs), 7.25-7.59 (4H, m), 8.14 (1H, bd, J=8.4 Hz).
[<a>]<23,>D=-19.6(c=0.51,CHCl3).
Analyse beregnet for C3oH39N3OnS'1.0 C4H802: C, 55.35; H, 6.42; N, 5.70. Funnet: C, 54.98; H, 6.09; N, 6.07.
HRMS beregnet for C3oH39N3OnNaiS, 672.2203. Funnet, 672.2180.
Fremstilling 14
( 1 R. 4S , 5 S, 6S)- 4- f2' S- tert- butoksykarbonylamino- 3' -( 4- tert- butoksvkarbonyloksv-fenvl)- propionvlaminol- 2, 2- diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig 2S-tert-butoksykarbonylamino-3-(4-tert-butoksykarbonyloksy-fenyl)-propionsyre (1,1 g, 2,9 mmol) og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,5 g, 1,9 mmol, fremstilling 4). Rens ved anvendelse av PC-TLC (etylacetat/heksan) for å gi 0,94 g (79,0%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=+4 (c=1.00, CH3OH).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.44 (9H, s), 1.56 (9H, s), 2.44 (1H, t, J=4.0 Hz), 2.88 (1H, d, J=14.7 Hz), 2.98 (1H, dd, J=4.4, 7.3 Hz), 3.04 (2H, d, J=7.3 Hz), 3.38 (1H, dd, J=4.0, 7.3 Hz), 3.77 (3H, s), 3.83 (3H, s), 4.11 (1H, d, J=14.3 Hz), 4.22-4.29 (1H, app q, J=7.3 Hz), 4.92 (1H, bd, J=7.7 Hz), 7.07 (1H, bs), 7.1-7.26 (4H, m).
HRMS beregnet for C^Hss^OnSNa, 649.2043. Funnet, 649.2001.
Fremstilling 15
( lR, 4S, 5S, 6S")- 4-( 3- acetoksv- 2, S- tert- butoksvkarbonvlamino- propionyl>- amino- 2, 2-diokso- 2X6- tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dimetylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig 3-acetoksy-2S-(tert-butoksykarbonylamino)propionsyre (0,25 g, 1,0 mmol, fremstilling 44) og (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,2 g, 0,8 mmol, fremstilling 4) med unntak av at DMAP ikke blir anvendt. Rens ved anvendelse av PC-TLC (etylacetat/heksan) for å gi 0,19 g (48,2%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=-24 (c=1.0, CH3OH).
<]>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 1.47 (9H, s), 2.10 (3H, s), 2.51 (1H, t, J=4.4 Hz), 2.99-3.07(2H, m), 3.43 (1H, dd, J=4.0, 7.3 Hz), 3.77(3H, s), 3.86 (3H, s), 4.14-4.40 (4H, m), 5.29 (1H, bd, J=7.3 Hz), 7.64 (1H, bs).
HRMS beregnet for Ci9H28N20nSNa, 515.1312. Funnet, 515.1305.
Fremstilling 16
( lR, 2S, 4R, 5R, 6R)- 2- amino- 4- fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre dietylester
Til en slurry av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (14,45 g, 71,12 mmol, U.S. patent nr. 5,958,960) i 202 ml absolutt etanol ble det ved romtemperatur tilsatt tionylklorid (26 ml, 356 mmol) dråpevis i løpet av 20 minutter. Slurryen varmes til refluks og røres i 3 timer. Avkjøl blandingen til rom temperatur og rør over natten. Konsentrer den resulterende løsningen i vakuum til en rest og fortynn deretter med 136 ml etylacetat og behandle med 306 ml 10% vandig natriumkarbonat i løpet av 15 minutter med røring for hånd slik at den endelige pH blir 10. Separer sjiktene og vask det vandige sjiktet med etylacetat (1 x 136 ml). Vask de kombinerte organiske ekstraktene med saltvann (1 x 136 ml), tørk (MgS04), filtrer og konsentrer i vakuum for å gi 17,07 g (93%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
[<a>]<23,>D=+20.37° (c = 1.1, MeOH). m.p. = 64-66 °C.
<]>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 1.28 (3H, t, J = 7.3 Hz), 1.31 (3H, t, J = 6.8 Hz), 1.34-1.45 (1H, m), 1.85 (2H, bs), 2.17-2.21 (2H, m), 2.32-2.34 (1H, m), 2.49 (1H, dd, J = 7.8,14.1 Hz), 4.24 (2H, dq, J = 1.5, 7.3 Hz), 5.33-5.52 (1H, m).
Analyse beregnet for C12H18FNO4: C, 55.59; H, 7.00; N, 5.40. Funnet: C, 55.29; H, 6.75; N, 5.45.
MS (ES) m/z funnet 260.3 [M+H]+.
Fremstilling 17
( lR, 2S, 4R, 5R, 6R)- 2- r2, S-( tert- butoksvkarbonvlamino) propionyllamino- 4-fluorbicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Til en løsning av N-Boc-L-alanin (38,62 g, 204 mmol) i 396 ml metylenklorid ble det ved -22°C under nitrogen tilsatt N-metylmorfolin (22,44 ml, 204 mmol) fulgt av iso-butylklorformat (26,48 ml, 204 mmol) dråpevis i løpet av 15 minutter slik at reaksjonstemperaturen ikke oversteg -18°C. Den resulterende tynne slurryen røres ved -20°C i 30 minutter hvorved en løsning av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (49,46 g, 191 mmol, fremstilling 16) i 247 ml metylenklorid tilsettes i løpet av 40 minutter slik at reaksjonstemperaturen ikke overstiger -16°C. Etter fullstendig tilsetning, fjern reaksjonsblandingen fra kjølebadet og rør ved omgivelsestemperatur i 70 minutter, hvorved reaksjonstemperaturen når 15°C og farven blir matt oransje. Behandle reaksjonsblandingen med 408 ml IN HC1 og rør i 5 minutter og separer deretter sjiktene. Vask det organiske sjiktet med met tet vandig natriumbikarbonat (lx 408 ml), tørk (Na2S04), filtrer og konsentrer i vakuum til et hvitt skum (88,16 g).
Analyse beregnet for C2oH3iFN207'0.1 CH2C12: C, 55.00; H, 7.16; N, 6.38. Funnet: C, 55.18; H, 7.18; N, 6.49.
MS (ES) m/z 431.3 [M+H]+, 331.2 [M+H-Boc]+.
Fremstilling 18
( lR, 2S, 4R, 5R, 6R)- 2- r2, S-( tert- butoksvkarbonvlamino) propionyllamino- 4-fluorbicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre
Til en løsning av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-[2'S-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl]-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (88,16 g, 191 mmol, fremstilling 17) i 238 ml THF ble det ved romtemperatur tilsatt 238 ml (477 mmol) 2N natriumhydroksid. Tofaseblandingen røres kraftig ved romtemperatur i 2,5 timer, hvorved reaksjonsblandingen blir homogen. Fortynn blandingen med 238 ml t-butylmetyleter fulgt av sammenblanding og separasjon av sjiktene. Fortynn ytterligere det vandige sjiktet med 238 ml vann og filtrer for å fjerne partikulært materiale. Behandle løsningen med konsentrert HC1 (42,9 ml, 515 mmol) i løpet av 30 minutter eventuelt fulgt av såing med tittelforbindelsen og røring i 1 time. Filtrer den resulterende slurryen, vask med vann (2 x 100 ml) og vakuumtørk ved 45°C i 40 timer for å gi 72,2 g av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff. Rør en del av det faste stoffet (69,5 g) med
490 ml aceton i 1 time for å gi en matt løsning; filtrer og vask med aceton (2 x 100 ml). Konsentrer filtratet i vakuum for å gi et hvitt skum som ytterligere tørkes i vakuum ved 45°C i 16 timer for å gi 61,8 g (86%, korrigert for 12% vekt/vekt aceton) av tittelforbindelsen. Dette materialet ble anvendt i eksempel 14-18 uten karakterisering.
Fremstilling 19
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6R)- 4- acetvloksv- 2-( tert- butoksvkarbonyl) aminobicvklor3. 1 . Olheksan-2, 6- dikarboksvlsyre dietylester
Til en løsning av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(tert-butoksykarbonyl)amino-4-hydroksybicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (1,50 g, 4,20 mmol, US 5958960), pyridin (0,365 ml, 4,62 mmol) og DMAP (0,513 g, 4,20 mmol) i diklormetan (40 ml) ble det under nitrogen tilsatt eddiksyreanhydrid (0,514 ml, 5,0 mmol). Rør ved romtemperatur i 16 timer, fortynn med diklormetan og hell over i 10% vandig sitronsy-reløsning (50 ml). Vask det organiske sjiktet med vann (50 ml) og saltvann (50 ml). Tørk over MgSC>4, filtrer og konsentrer i vakuum for å gi tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (1,295 g, 75%).
LCMS: m/ z 400 [M + H]<+>og m/ z 300 [M + H - C02<t>Bu]<+>@ RT 1.39 min.
Fremstiling 20
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6R)- 4- acetyloksv- 2- aminobicyklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre dietylester
Løs opp (lS,2S,4S,5R,6R)-4-acetyloksy-2-(tert-butoksykarbonyl)aminobicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (1,25 g, 3,13 mmol, fremstilling 19) i en løsning av 95% TF A i diklormetan (60 ml) og rør under nitrogen ved romtemperatur i 5 minutter. Deretter fjernes TFA/diklormetan i vakuum. Løs opp det urene produktet i en suspensjon av NaHCC«3 (1,00 g) i diklormetan (50 ml) og rør i 30 minutter. Filtrer suspensjonen, vask med diklormetan (3 x 25 ml) og konsentrer i vakuum for å gi 916 mg (98%) av produktet som en gul olje.
LCMS: m/ z 300 [M + H]<+>@ RT 0.92 min.
Fremstilling 21
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV4- acetvloksv- 2- r2, S-( tert- butoksv) karbonvlaminopropionyll-aminobicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Til en suspensjon av (lS,2S,4S,5R,6R)-4-acetyloksy-2-aminobicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (0,80 g, 1,94 mmol, fremstilling 20) og Boc-L-Ala (0,477 g, 2,52 mmol) i vannfri diklormetan (50 ml) ble det under nitrogen sekvensielt tilsatt EDC (0,519 g, 2,72 mmol), HOBt (0,314 g, 2,32 mmol), katalytisk DMAP (0,024 g, 0,19 mmol) og trietylamin (1,08 ml, 7,76 mmol). Etter røring ved romtemperatur i ca. 15 minutter, ble den innledningsvis hvite suspensjonen løst opp fullstendig. Rør reaksjonsblandingen i 16 timer, fortynn med diklormetan og vask med mettet vandig NaHCCv løsning (50 ml), 1,0N vandig HCl-løsning (3x20 ml), og mettet saltvannsløsning (40 ml). Tørk det organiske sjiktet over MgSC*4 og filtrer, og konsentrer i vakuum. Rens det resulterende urene amidet med kolonnekromatografi ved anvendelse av en (4:1) blanding av etylacetat og heksan som eluent som gir 638 mg (75%) av produktet som et hvitt fast stoff.
<]>H NMR (CD3OD)<*>: 5 5.05 (1H, d, 5.7 Hz), 4.09 (2H, q, 7.3 Hz), 4.02 (2H, q, 7.3 Hz), 4.01-3.94 (1H, m), 2.65-2.59 (2H, m), 2.38 (1H, d, 14 Hz), 2.10-2.03 (3H, m), 1.91 (3H, s), 1.78 (1H, dd, 5.9 Hz, 16 Hz), 1.59 (1H, br s), 1.34 (9H, s), 1.16 (6H, 2 x t, 7.3 Hz);
<*>N.B. Utbyttbare protoner ikke observert med NMR = 2.
LCMS: m/ z 471 [M + H]<+>og m/ z 371 [M + H - C02<t>Bu]<+>@ RT 1.30 min.
Rf 0.50 (80% etylacetat:heptan).
Fremstilling 22
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- amino- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dieteylester
Avkjøl en løsning av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-tert-butoksykarbonylamino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (5,0 g, 14,0 mmol, US 5958960) i etylacetat til 0°C. Boble vannfri HC1 (g) inn i løsningen til mettet løsning og rør i 0,5 timer. Varm reaksjonsblandingen til romtemperatur og rør i 1 time. Konsentrer reaksjonsblandingen og fordel mellom etylacetat og H2O. Behandle det vandige sjiktet med NaHCC>3 (aq.) og ekstraher med etylacetat. Tørk de organiske fraksjonene med K2CO3og konsentrer for å gi 2,2 g (59,7%) av hvitt fast stoff.
[<a>]<23,>D=-30.8 (o=0.52, CH3OH).
<]>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 1.26 (3H, t, J=7.33 Hz), 1.36 (3H, t, 7.33 Hz), 1.60 (1H, dd, J=5.87, 15.40 Hz), 1.64 (1H, t, J=2.93 Hz), 2.27 (2H, bs), 2.15-2.29 (3H, m), 3.93 (1H, bs), 4.13 (2H, q, J=6.97 Hz), 4,27-4.36 (3H, m).
Analyse beregnet for Ci2Hi9N05: C, 56.02; H, 7.44; N, 5.44. Funnet: C, 55.75; H, 7.36; N, 5.40.
MS (ES) m/z 258.1 [M+H]<+>.
Fremstilling 23
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2,- tert- butoksvkarbonvlamino- acetvlamino)- 4- hydroksv-bicyloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-glycin (458 mg, 2,62 mmol, Aldrich) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dieteylester (450 mg, 1,75 mmol, fremstilling 22). Rens på 35 g silika eluert med en gradient av 50/50 til 20/80 heksan/etylacetat. Utbytte: 560 mg (77%).
<]>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 1.28 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.29 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.48 (9H, s), 1.57 (2H, m), 2.21 (1H, m), 2.41 (1H, dd, J=2.9, 5.8 Hz), 2.81 (1H, d, J=15.6 Hz), 3.76 (1H, d, J=5.8 Hz), 4.10-4.18 (3H, m), 4.26 (2H, q, J=7.3 Hz), 4.33 (1H, m), 5.10 (1H, bs), 6.86 (1H, bs).
Analyse beregnet for C19H30N2O8: C, 55.06; H, 7.30; N, 6.76. Funnet: C, 55.24; H, 7.50; N, 6.76.
MS (ES) m/z 415.2 [M+H]<+>, 437.2 [M+Na]<+>.
Fremstilling 24
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV2-( 2, S- tert- butoksvkarbonvlamino- 3,- metvl- butvrylamino>- 4-hydroksy- bicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-valin (569 mg, 2,62 mmol, Sigma) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (450 mg, 1,75 mmol, fremstilling 22). Rens det urene materialet på 35 g silika; eluer med en gradient av 70/30 til 20/80 heksan/etylacetat. Utbytte: 694 mg (87%) av et hvitt skum.
<]>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 0.95 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.00 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.29 (6H, t, J=7.3 Hz), 1.45 (9H, s), 1.52-1.60 (2H, m), 2.08 (1H, m), 2.20 (1H, m), 2.42 (1H, m), 2.81 (1H, d, J=15.6 Hz), 3.86 (1H, dd, J=6.3, 8.8 Hz), 4.14 (2H, q, J=7.3 Hz), 4.21-4.32 (4H, m), 5.00 (1H, d, J=8.3 Hz), 6.63 (1H, s).
Analyse bergnet for C22H36N208: C, 57.88; H, 7.95; N, 6.14. Funnet: C, 57.87; H, 8.03; N, 6.12.
MS (ES) m/z 457.2 [M+H]<+>, 479.2 [M+Na]<+>.
Fremstilling 25
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2, S- tert- butoksvkarbonvlamino- 4,- metyl- pentaovlamino)- 4-hvdroksv- bicyklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-leucin (606 mg, 2,62 mmol, Chemlog) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy- bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietyl (450 mg, 1,75 mmol, fremstilling 22). Rens det urene materialet på 35 g silika; eluer med en gradient fra 70/30 til 20/80 heksan/etylacetat. Utbytte 689 mg (84%) av et hvitt skum.
<]>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 0.96 (6H, m), 1.28 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.29 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.46 (9H, s), 1.45-1.73 (5H, m), 2.20 (1H, m), 2.42 (1H, m), 2.80 (1H, d, J=16.1 Hz), 4.07-4.35 (7H, m), 4.81 (1H, bd), 6.86 (1H, bs).
Analyse beregnet for C23H38N2CVO.IH2O: C, 58.48; H, 8.15; N, 5.93. Funnet: C, 58.22; H, 7.94; N, 5.92.
MS (ES) m/z 471.2 [M+H]<+>, 493.2 [M+Na]<+>.
Fremstilling 26
( 1 S. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2' S- tert- butoksvkarbonylamino- 3' S- metyl- pentaoylamino)- 4-hvdroksy- bicykloD. 1. 01heksan- 2. 6- dikarboksylsyre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-isoleucin (606 mg, 2,62 mmol, Aldrich) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (450 mg, 1,75 mmol, fremstilling 22). Rens det urene materialet på 35 g silika eluert med en gradient fra 70/30 til 20/80 heksan/etylacetat. Utbytte 731 mg (89%).
<]>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 0.92 (3H, t, J=7.3 Hz), 0.97 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.17
(lH,m), 1.29 (6H, t, J=6.8 Hz), 1.46 (9H, s), 1.53 (1H, dd, J=5.8,15.6 Hz), 1.58 (1H, t, J=2.4 Hz), 1.74 (1H, m), 1.83 (1H, m), 2.20 (1H, m), 2.43 (1H, m), 2.80 (1H, d, J=15.6 Hz), 3.88 (1H, dd, J=7.3, 8.8 Hz), 4.12-4.32 (6H, m), 4.98 (1H, d, J=7.3 Hz), 6.60 (1H, s).
Analyse beregnet for C23H38N2CVO.2H2O: C, 58.25; H, 8.16; N, 5.91. Funnet: C, 58.17; H, 8.11; N, 5.91.
MS (ES) m/z 471.2 [M+H]<+>, 493.2 [M+Na]<+>.
Fremstilling 27
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- r2,-( 2- tert- butoksvkarbonvlamino- acetvlamino)- acetylaminol- 4-hydroksy- bicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-Gly-Gly (474 mg, 2,04 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester hydroklorid (400 mg, 1,36 mmol, fremstilling 22 uten basisk opparbeiding) med følgende unntak. DMAP anvendes ikke. Tilsett en ekvivalent trietylamin. Rens det urene materialet på 35 g silika; eluer med etylacetat. Utbytte: 517 mg (81%).
[a]<23>,D= -18.18 (c=0.55, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.26 (3H, t, J=6.8 Hz), 1.27 (1H, t, J=7.3 Hz), 1.28 (3H, t, J=6.8 Hz), 1.46 (9H, s), 1.59 (1H, t, J=3.4 Hz), 1.62 (1H, dd, J=6.3,16.1 Hz), 2.21 (1H, dd, J=2.9, 5.8 Hz), 2.46 (1H, dd, J=2.4, 5.8 Hz), 2.73 (1H, d, J=15.6 Hz), 3.78-3.91 (3H, m), 4.01-4.15 (3H, m), 4.24 (2H, q, J=6.8 Hz), 4.32 (1H, d, J=5.8 Hz), 5.28 (1H,
b), 6.87 (1H, bt, J=4.9 Hz), 7.39 (1H, bs).
HRMS beregnet for C21H34N3O9,472.2295. Funnet, 472.2303.
HPLC: 16.755 min. Kolonne: Symmetri Cl8, 3.5um, 4.6X150 mm. X = 230nM. Strømningshastighet: 1 mL/min. Gradient: 10% til 50% ACN/vann inneholdende 0.1%TFA i løpet av 25 min.
Fremstilling 28
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- r2,-( 2S- tert- butoksvkarbonvlamino- propionvlamino)- acetylaminol-4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Fremstill ifølge generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-Ala-Gly (502 mg, 2,04 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester hydroklorid (400 mg, 1,36 mmol, fremstilling 22 uten basisk opparbeiding) med følgende unntak. DMAP anvendes ikke. Tilsett en ekvivalent trietylamin. Rens det urene materialet på 35 g silika eluert med etylacetat. Utbytte: 500 mg (76%).
[<a>]<23,>D= -31.37(c=0.55, MeOH).
<!>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.27 (3H, t, J=6.8 Hz), 1.28 (3H, t, J=6.8 Hz), 1.42 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.45 (9H, s), 1.58 (1H, t, J=3.4 Hz), 1.64 (1H, dd, J=5.8,15.6 Hz), 2.23 (1H, dd, J=3.4,5.8 Hz), 2.50 (1H, dd, J=2.9, 6.3 Hz), 2.69 (1H, d, J=15.6 Hz), ABq av dubletter (2H, vA = 3.87, vB= 3.98 Jab=17.1 Hz, Jd=6.3 Hz), 3.92 (1H, m), 4.07-4.16 (3H, m), 4.24 (2H, q, J=7.3 Hz), 4.32 (1H, b), 5.08 (1H, b), 6.84 (1H, bt, J=4.88 Hz), 7.14 (1H, bs).
HRMS beregnet for C22H36N3O9, 486.2452. Funnet, 486.2451.
Fremstilling 29
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2,- tert- butoksvkarbonvlamino- 3,- fenvl- propionylamino)- 4-hydroksy- bicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-fenylalanin (772 mg, 2,91 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (480 mg, 1,94 mmol, fremstilling 22). Konsentrer den urene blandingen, løs opp i diklormetan, flash gjennom en kort silikagelplugg med etylacetat/DCM (1:1), og konsentrer i vakuum for å gi en gul olje. Rens ytterligere materialet med silikagelkromatografi eluert med 30% etylacetat/heksan til 80% etylacetat/heksan for å gi 852 mg (87%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D= -23.66 (c=0.93, MeOH).
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.22 - 1.30 (6H, m), 1.35 (9H, s), 1.59 (1H, t, J = 2.9 Hz), 1.70 (1H, dd, J = 5.5, 15.4 Hz), 2.06 (1H, m), 2.40 (1H, d, J = 15.4 Hz), 2.63 (1H, dd, J = 2.9, 5.9 Hz), 2.76 (1H, dd, J = 9.2, 13.9 Hz), 4.08 - 4.33 (6H, m), 7.20 - 7.29 (5H, m).
MS funnet 505.0 [M+H]<+>.
HRMS beregnet for CieHaeNjOs, 505.2550. Funnet, 505.2559.
Fremstilling 30
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV242,- tert- butoksvkarbonvlamino- 4,-( tritvl- karbamovlV butvrvlaminol- 4- hvdroksv- bicyklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-glutamin(trityl)-OH (1,40 g, 2,86 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (490 mg, 1,90 mmol, fremstilling 22), med unntak av at DMAP anvendes ikke. Konsentrer den urene blandingen, løs opp i diklormetan, flash gjennom en kort silikagelplugg med etylacetat, og konsentrer i vakuum for å gi en gul olje. Rens ytterligere med silikagelkromatografi eluert med 30% etylacetat/heksan til 100% etylacetat/heksan for å gi 1,3 g (94%) av tittelforbindelsen.
[a]<23>,D= -21.28 (c=0.94, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.18 - 1.26 (6H, m), 1.44 (9H, s), 1.62 - 1.74 (3H, m), 1.91 - 2.00 (1H, m), 2.05 (1H, m), 2.38 - 2.48 (3H, m), 2.54 (1H, m), 4.00 - 4.27 (6H, m), 7.18- 7.30 (15H, m).
MS funnet 728.2 [M+H]<+>.
HRMS beregnet for C41H49N3O9, 728.3547. Funnet, 728.3533.
Fremstilling 31
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2, S, 6,- bis- tert- butoksvkarbonylamino- heksanovlamino)- 4-hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-lysing(Boc)-OH (910 mg, 2,63 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (450 mg, 1,75 mmol, fremstilling 22), med unntak av at DMAP tilsettes ikke til reaksjonsblandingen. Konsentrer den urene reaksjonsblandingen, løs opp i diklormetan, flash gjennom en kort silikagelplugg med etylacetat og konsentrer i vakuum for å gi en gul olje. Rens ytterligere materialet med silikagelkromatografi eluert med etylacetat/heksan (1:1) for å gi 800 mg (78%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D= -30.19 (c=0.53, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.21 - 1.24 (6H, m), 1.26 - 1.77 (27H, m), 2.07 (1H, m), 2.42 (1H, d, J = 15.8 Hz), 2.59 (1H, dd, J = 2.6, 5.5 Hz), 3.03 (1H, t, J = 6.2 Hz), 3.99 (1H, m), 4.07 - 4.28 (5H, m).
MS funnet 586.1 [M+H]<+>.
HRMS beregnet for C28H47N3O10, 586.3340. Funnet, 586.3348.
Fremstilling 32
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV242,- tert- butoksvkarbonvlamino- 3,-( tritvl- karbamovlV propionvlaminol- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-asparagin(trityl)-OH (1,35 g, 2,84 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (476 mg, 1,85 mmol, fremstilling 22), med unntak av at DMAP ikke tilsettes til reaksjonsblandingen. Konsentrer den urene reaksjonsblandingen, løs opp i diklormetan, flash gjennom en kort silikagelplugg med etylacetat og konsentrer i vakuum for å gi en gul olje. Rens ytterligere materiale med silikagelkromatografi eluert med 20% etylacetat/heksan til 50% etylacetat/heksan for å gi 1,07 g (81%) av tittelforbindelsen.
[a]<23>,D= -25.45 (c=0.55, MeOH).
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.19 - 1.26 (6H, m), 1.45 (9H, s), 1.61-1.69 (2H, m), 2.05 (1H, m), 2.44 (1H, d, J = 15.4 Hz), 2.51 - 2.72 (3H, m), 4.02 - 4.21 (4H, m), 4.25 (1H, d, J = 5.5 Hz), 4.36 (1H, dd, J = 4.8, 8.8 Hz), 7.18 - 7.30 (15H, m).
MS funnet 714.1 [M+H]<+>.
HRMS beregnet for C40H47N3O9, 714.3391. Funnet, 714.3380.
Fremstilling 33
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6RV2- r2,- tert- butoksvkarbonylamino- 3'-( 1 '- tert- butoksvkarbonyl- 1H-indol- 3 '- vl")- propionvlaminol- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-tryptofan(Boc)-OH (1,18 g, 2,91 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (520 mg, 1,90 mmol, fremstilling 22). Konsentrer den urene reaksjonsblandingen, løs opp i diklormetan, flash gjennom en kort silikagelplugg med etylacetat, og konsentrer i vakuum for å gi en gul olje. Rens ytterligere materialet med silikagelkromatografi eluert med etylacetat/DCM (1:1) for å gi 1,2 g (92%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D= -12.5 (c=0.96, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.18 - 1.27 (6H, m), 1.34 (9H, s), 1.62 (1H, t, J = 2.9 Hz), 1.67 (9H, s), 1.74 (1H, dd, J = 5.9, 15.2 Hz), 2.07 (1H, m), 2.46 (1H, d, J = 15.7 Hz), 2.60 (1H, d, J = 2.9, 5.9 Hz), 2.89 (1H, dd, J = 9.3, 15.0 Hz), 3.16 (1H, dd, J = 4.9, 15.2 Hz), 4.04 - 4.12 (2H, m), 4.18 - 4.24 (2H, m), 4.27 (1H, d, J = 5.4 Hz), 4.43 (1H, dd, J = 5.4,9.3 Hz), 7.26 (2H, m), 7.52 (1H, s), 7.64 (1H, d, J = 7.3 Hz), 8.10 (1H, d, J = 8.3 Hz).
MS funnet 644.8 [M+H]<+>, 666.8 [M+Na]<+>.
HRMS beregnet for C33H44N3O10, 666.3002. Funnet, 666.2988.
Fremstilling 34
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 1 '- tert- butoksvkarbonvl- pyrrolidin- 2 ' S- karbonvD- 4- hvdroksv-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-L-prolin og
(1 S,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1,0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 22). Rens det urene materialet på 110 g silika på et ISCO-system eluert med en gradient på 80% etylacetat/heksan til 100% etylacetat for å gi 699 mg (84%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=-52.53 (c=0.99, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.26 (6H, m), 1.44 (9H, s), 1.62 (1H, m), 1.73(1H, dd, J= 5.4, 15.3Hz), 1.84 (1H, m), 1.97 (1H, m), 2.07 (4H, m), 2.41 (1H, d, J= 15.3 Hz), 2.50 (1H, m), 2.59 (1H, m), 4.12 (2H, m), 4.20 (1H, q, J= 7.4 Hz), 4.27 (1H, d, J= 5.4 Hz).
MS funnet 454.9 [M+H]<+>, 476.8 [M+Na]<+>.
HRMS beregnet C22H34N208Na, 477.2213. Funnet, 477.2210
Fremstilling 35
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV2- r2, S- tert- butoksvkarbonylamino- 3,-( 4- tert-butoksvkarbonvloksvfenvl>- propionvlaminol- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6-dikarboksylsvre dietylester
Fremstill tittelforbindelsen i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av 2S-tert-butoksykarbonylamino-3-(4-tert-butoksykarbonyloksy-fenyl)-propionsyre og (1 S,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 22). Rens det urene materialet på 110 g silikagel på et Isco-system eluert med en gradient på 60% etylacetat/heksan til 90% etylacetat/heksan for å gi 1,09 g (91%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=-12 (c=1.0, MeOH).
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.25 (6H, m), 1.37 (9H, s), 1.52 (9H, s), 1.68 (1H, dd, J= 5.4, 15.3 Hz), 2.06 (1H, m), 2.38 (1H, d, J= 15.3 Hz), 2.64 (1H, m), 2.79 (1H, dd, J= 8.4,13.9 Hz), 3.05 (1H, dd, J= 5.4,13.9 Hz), 4.20 (6H, m), 7.04 (2H, d, J= 8.4Hz), 7.26 (2H, d, J= 8.4Hz).
MS funnet 621.8 [M+H]+, 643.8 [M+Na]<+>.
HRMS beregnet for CaiH^NiOnNa, 643.2843. Funnet, 643.2845.
Fremstilling 36
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV2-( 2, S- tert- butoksvkarbonvlamino- 4,- metvlsulfanvl- butvrylamm 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Tittelforbindelsen ble fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av (Boc-L-metionin) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 22). Det urene materialet renses på 110 g silika på et Isco-system eluert med en gradient på 80% etylacetat/heksan til 100% etylacetat for å gi 1,01 g (92%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=-30 (c=1.0, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.26 (6H, m), 1.43 (9H, s), 1.84 (6H, m), 2.06 (1H, m), 2.2 (1H, m), 2.48 (1H, m), 2.61 (1H, m), 3.37 (1H, m), 2.49 (1H, m), 4.2 (6H, m). MS funnet 488.8 [M+H]<+>, 510.8 [M+Na]<+>.
HRMS beregnet for C22H36N208SNa, 511.2090. Funnet, 511.2071.
Fremstilling 37
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2, S- tert- butoksvkarbonvlamino- propionvlamino)- 4- hydroksv-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av kommersielt tilgjengelige N-BOC-(L)-alanin og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-amino-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 22). Reflukser reaksjonsblandingen over natten. Rens med prep. HPLC, 1 x 500 g Si02-kolonne, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 3,0 g (90%, 7,00 mmol) av et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-32.31° (c = 0.37, CHC13).
<!>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.28 (6H, t, J = 7.3 Hz), 1.34 (3H, d, J = 7.3 Hz), 1.46 (9H, s), 1.51-1.58 (2H, m), 1.64 (1H, s), 2.19 (1H, dd, J = 3.3, 6.2 Hz), 2.40 (1H, dd, J = 2.9, 6.2 Hz), 2.80 (1H, d, J = 15.8 Hz), 4.10-4.36 (6H, m), 4.92 (1H, bs), 6.94 (1H, bs). Analyse beregnet for C20H32N2CVO.IH2O: C, 55.83; H, 7.54; N, 6.51. Funnet: C, 55.57; H, 7.64; N, 6.44.
MS (ES) m/z 429.2 [M + H]<+>, 329.1 [M - Boc]<+>.
Fremstilling 38
( 1 S. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2' S- amino- propionylamino)- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1 . Olheksan-2, 6- dikarboksvlsvre dietylester hvdroklorid
Overstrøm en løsning av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (2,95 g, 6,88 mmol, fremstilling 37) i etylacetat (30 ml) ved 0°C med vannfri HCl-gass inntil løsningen er mettet med HC1. Rør den resulterende reaksjonsblandingen ved 0°C til reaksjonen anses fullstendig med TLC. Overstrøm reaksjonsblandingen i 30 minutter med N2for å fjerne overskudd HCl-gass. Konsentrer den resulterende suspensjonen til tørrhet i vakuum for å gi 2,47 g (98%, 6,78 mmol) av ønsket aminohydrokloridsalt. Ing-en ytterligere rensing er nødvendig.
[<a>]<23,>D=-28.0° (c = 0.50, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CDC1) 5 1.24 (3H, t, J = 7.0 Hz), 1.28 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.50 (3H, d, J = 7.3 Hz), 1.61 (1H, t, J = 2.9 Hz), 1.76 (1H, dd, J = 5.9,15.8 Hz), 2.10 (1H, dd, J = 3.3,5.9 Hz), 2.43 (1H, d, J = 15.4 Hz), 2.60 (1H, dd, J = 2.9, 6.2 Hz), 3.90 (1H, q, J = 7.0, 13.9 Hz), 4.15 (2H, q, J = 7.3 Hz), 4.14-4.31 (3H, m).
Analyse beregnet for Ci5H24N2(VHCM).7H20: C, 47.73; H, 7.05; N, 7.42. Funnet: C, 47.96; H, 6.91; N, 7.04.
MS (ES) m/z 329.1 [M + H]<+>.
Fremstilling 39
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV2- r2, S-( 2S- tert- butoksvkarbonvlamino- propionylaminoV propionvlaminol- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Fremstill i henhold til fremgangsmåte A ved anvendelse av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S-amino-propionylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester hydroklorid (0,2 g, 0,55 mmol, fremstilling 38) og Boc-(L)-alanin (0,16 g, 0,82 mmol) med unntak av at DMAP ikke anvendes. Rens ved anvendelse av PC-TLC (etylacetat/heksan) for å gi 0,13 g (47,3%) av tittelforbindelsen.
[<a>]<23,>D=-46.2 (c=0.52, CHC13).
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 5 1.27 (3H, t, J=7.0 Hz), 1.28 (3H, t, J=7.0 Hz), 1.36 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.37 (3H, d, J = 7.0 Hz), 1.44 (9H, s), 1.58-1.65 (2H, m), 2.19 (1H, dd, J=3.0,5.9 Hz), 2.46 (1H, dd, J=2.6,5.9 Hz), 2.70 (1H, d, J=15.4 Hz), 4.09-4.33 (7H, m), 4.48 (1H, app p, J=7.0 Hz), 5.05 (1H, bd, J=6.6 Hz), 6.79 (1H, bd, J=7.7 Hz), 7.26 (1H, s).
HRMS beregnet for C23H38N3O9, 500.2608. Funnet, 500.2598.
Fremstilling 40
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- r2, S-( 2- tetr- butoksvkarbonvlamino- acetvlamino)- propionylaminol-4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte A ved anvendelse av Boc-glycin (0,29 g, 1,6 mmol) og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S-amino-propionylamno)-4-hydroksy- bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietyelster hydroklorid (0,4 g, 1,1 mmol, fremstilling 38) med unntak av at DMAP ikke anvendes. Rens ved anvendelse av PC-TLC (etylacetat/heksan) for å gi 0,14 g (26,2%) av tittelforbindelsen.
[a]23,D= -14 (c=1.00, CDC13).
<]>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 1.27 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.29 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.38 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.45 (9H, s), 1.57-1.65 (2H, m), 2.19 (1H, dd, J=3.3,5.9 Hz), 2.44 (1H, dd, J=2.9, 5.9 Hz), 2.74 (1H, d, J=15.8 Hz) 3.70-3.86 (2H, m), 4.08-4.34 (6H, m), 4.56 (1H, app p, J=7.0 Hz), 5.31 (1H, bs), 6.88 (1H, bd, J=7.0 Hz), 7.50 (1H, s).
HRMS beregnet for C22H36N3O9, 486.2452. Funnet, 486.2444.
Fremstilling 41
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- r2,-( 2S- tert- butoksvkarbonvlamino- 4- metyl- pentanovlamino)-propionvlaminol- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte B ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-(L)-leucin monohydrat og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S-amino-propionylamno)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester hydroklorid (0,2 g, 0,55 mmol, fremstilling 38). Rens med PC-TLC, 4 mm SiCvrotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat). Utbytte 0,54 g (62%, 1,00 mmol) av et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-61 -2° (c = °-49>MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 0.93 (3H, d, J=6.2 Hz), 0.94 (3H, d, J=6.2 Hz), 1.25 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.27 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.36 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.43 (9H, s), 1.53 (1H, d, J=9.5 Hz), 1.55-1.69 (5H, m), 2.18 (1H, dd, J=2.9, 5.9 Hz), 2.44 (1H, dd, J=2.9, 6.2 Hz), 2.70 (1H, d, J=15.8 Hz), 4.06 (1H, bs), 4.13 (4H, q, J=7.3 Hz), 4.18-4.28 (2H, m), 4.31 (1H, d, J=5.9 Hz), 4.41-4.45 (1H, m), 4.85 (1H, bs), 6.57 (1H, d, J=7.3 Hz), 6.97 (1H, bs).
Analyse beregnet for C26H43N3CVO.IH2O: C, 57.46; H, 8.01; N, 7.73. Funnet: C, 57.18; H, 8.00; N, 7.64.
HRMS beregnet for C26H43N3O9[M + Na]<+>, 564.2897. Funnet, 564.2922.
Fremstilling 42
( lS, 2S, 4S, 5R, 6RV242,( 2S- tetr- butoksvkarbonvlamino- 3- metvl- butyrvlaminoV propionvlaminol- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre dietylester
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte B ved anvendelse av kommersielt til-gjengelig N-BOC-(L)-valin og (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S-amino-propionylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester hydroklorid (0,2 g, 0,55 mmol, fremstilling 38). Rens ved PC-TLC, 4 mm SiCvrotor (10% etylacetat/heksan til 67% etylacetat). Utbytte 0,36 g (43%, 0,68 mmol) av et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-65.5° (c = 0.58, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CDCI3) 5 0.91 (3H, d, J=7.0 Hz), 0.97 (3H, d, J=6.6 Hz), 1.27 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.28 (3H, t, J=7.0 Hz), 1.37 (3H, d, J=17.3 Hz), 1.44 (9H, s), 1.54-1.61 (3H, m), 2.12-2.20 (2H, m), 2.42 (1H, dd, J=2.6, 5.9 Hz), 2.70 (1H, d, J=15.4 Hz), 3.90 (1H, t, J=6.6 Hz), 4.13 (2H, q, J=7.0 Hz), 4.20-4.29 (2H, m), 4.31 (1H, d, J=5.9 Hz), 4.40-4.48 (1H, m), 4.93 (1H, bs), 6.41 (1H, d, J=7.3 Hz), 6.91 (1H, bs).
Analyse beregnet for C25H4iN3O9'0.2CH2Cl2: C, 55.58; H, 7.66; N, 7.72. Funnet: C, 55.76; H, 7.27; N, 7.49.
MS (ES) m/z 528.3 [M + H]<+>.
Fremstilling 43
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2, S- acetvlamino- propionylamino)- 4- hvdroksv-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre dietylester
Rør en løsning av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S-mino-propionylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester hydroklorid (0,30 g, 0,82 mmol,
fremstilling 38) i CH2C12(30 ml) ved 0°C idet trietylamin (0,16 g, 1,6 mmol) og deretter acetylklorid (0,10 g, 1,18 mmol) tilsettes sekvensielt. La reaksjonsblandingen bli varmet opp idet den røres over natten. Fortynn reaksjonsblandingen med etylacetat (700 ml) og vask med vandig NaHSC«4 og saltvann. Tørk det organiske sjiktet over magnesiumsulfat. Rens med PC-TLC, 4 mm Si02-rotor, (10% etylacetat/heksan til 100% etylacetat) for å gi 0,24 g (79%, 0,65 mmol) av et hvitt skum.
[<a>]<23,>D=-48° (c = 0.5, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CDClj) 5 1.27 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.28 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.37 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.55-1.62 (2H, m), 1.99 (3H, s), 2.19 (1H, dd, J=3.3, 6.6 Hz), 2.40 (1H, dd, J=2.6, 5.9 Hz), 2.77 (1H, d, J=15.8 Hz), 4.07 (2H, q, J = 7.0 Hz), 4.21-4.31 (2H, m), 4.33 (1H, d, J=6.2 Hz), 4.43-4.47 (1H, m), 6.13 (1H, bs), 7.06 (1H, bs).
Analyse beregnet for Ci7H26N207: C, 55.13; H, 7.08; N, 7.56. Funnet: C, 55.05; H, 7.12; N, 7.29.
HRMS beregnet for Ci7H26N207[M + Na]<+>, 393.1638. Funnet, 393.1644.
Fremstilling 44
3- acetoksv- 2S-( tert- butoksvkarbonvlamino) propionsvre
Tilsett N-metylmorfolin (2,8 g, 27,2 mmol) og di-tert-butyldikarbonat (5,8 g, 25,2 mmol) til en løsning av O-acetyl-L-serin (3,7 g, 25,2 mmol) i 1:1 dioksan:vann. Rør reaksjonsblandingen i 24 timer og fordel deretter mellom etylacetat og vann. Ekstraher den vandige fasen med etylacetat og kast de organiske fraksjonene. Juster pH til 0-1 med vandig NaHS04. Ekstraher de vandige sjiktene med etylacetat, tørk over Na2S04, filtrer og konsentrer i vakuum. Rens med flashkromatografi som gir 2,6 g (41,7%). Materialet ble anvendt i fremstilling 15 uten karakterisering.
Fremstilling 45
( lS, 5R)- 3-( tert- butoksvkarbonvlamino)- 3-( tert- butoksvkarbonyl)- 6-oksabicvklor3. 1 . Olheksan
Tilsett en løsning av t-butylmetylmalonat (129 g, 0,75 mol) i THF (385 ml) til en slurry av LiH (14,9 g, 1,875 mol) i THF (900 ml) og N,N-dimetylpropylenurea (DMPU, 155 g, 1,2 mol) i løpet av 30 minutter mens temperaturen holdes ved 0-5°C. Varm opp reaksjonsblandingen til 65°C og tilsett en løsning av cis-l,4-diklor-2-buten (95%, 100 g, 0,8 mol, 1,08 ekv.) i THF (100 ml) i løpet av 5,5 timer, mens temperaturen blir holdt mellom 63-67°C. Rør reaksjonsblandingen i 4 timer ved 65°C. En vann/MTBE-opparbeiding av reaksjonsblandingen gir l-(metoksykarbonyl)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en.
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 5.57 (s, 2H, CH=CH), 3.71 (s, 3H, CH3), 2.95 (s, 4H, 2CH2), 1.42 (s, 9H, C(CH3)3).
IR (film) 1734 (C=0), 1646,1268, 1149 cm'<1>.
Avkjøl reaksjonsløsningen som inneholder l-(metoksykarbonyl)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en til 10-15°C og tilsett til en avkjølt løsning (10-15°C) av IN NaOH (1,3 1, 1,3 mol) i løpet av 30 minutter. Rør reaksjonsløsningen ved 25°C i 24 timer og overvåk med GC-undersøkelse. Når hydrolysereaksjonen er fullstendig, tilsettes MTBE (645 ml) til reaksjonsblandingen og rør løsningen i 5 minutter. La sjiktene sette seg og separer. Kast det organiske sjiktet. Tilsett 1,5M NaHSCVløsning (1470 ml) for å gjøre det basiske sjiktet surt (pH 2-3). Tilsett MTBE (1,3 1) og separer sjiktene. Ekstraher det vandige sjiktet med MTBE (385 ml) og vask de kombinerte organiske sjiktene med 5% LiCl-løsning. Konsentrer det organiske sjiktet under vakuum og for tynn med heptan (780 ml). Konsentrer løsningen til ca. 500 ml og rør den resulterende slurryen i 1 time ved omgivelsestemperatur. Filtrer det faste stoffet, vask med heptan (250 ml), og vakuumtørk ved 35°C for å 103,29 g (61% utbytte) av l-(karboksylsyre)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en som et hvitt fast stoff.
Smp. = 119 °C.
<]>H NMR (300 MHz, CDC13), 8 5.61 (s, 2H, CH=CH), 3.00 (s, 4H, 2CH2), 1.46 (s, 9H, C(CH3)3).
IR: 3800-3000 (br, COOH), 1741 (C02R), 1705 (C02H), 1283), 1149 cm'<1>.
Løs opp l-(karboksylsyre)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en (50 g, 236 mmol) i 850 ml 70:30 toluen:MTBE under nitrogen i 11 kolbe med mekanisk rører. Tilsett tionylklorid (33,6 g, 283 mmol, 1,2 ekv.) til den rørte reaksjonsblandingen og hold temperaturen ved 23°C. Avkjøl reaksjonsløsningen til 0-5°C og tilsett trietylamin (32,2 g, 318 mmol, 1,35 ekv.) dråpevis i løpet av 30 minutter.Varm reaksjonsblandingen til 23°C og rør i 1 time. Tilsett reaksjonsblandingen raskt dråpevis til deionisert vann (625 ml), og hold temperaturen ved 20-25°C. Separer sjiktene og vask det organiske sjiktet med 500 ml IM NaHC03-løsning. Konsentrering av det organiske sjiktet isoleres som 1-(klorkarbonyl)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en som en lys gul væske.
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 5.61 (s, 2H, CH=CH), 3.04 (app q, J = 15.1 Hz, 4H, 2CH2), 1.49 (s, 9H, C(CH3)3).
IR (film) 1796 (COC1), 1743 (C02R), 1274 ,1233,1158 cm"1.
Tilsett en løsning av tetrabutylammoniumhydrogensulfat (0,81 g, 2,4 mmol) i deionisert vann (700 ml) til natriumazid (20,16 g, 310 mmol). Tilsett løsningen som inneholder 1-(klorkarbonyl)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en i MTBE/toluen til azidløsningen i løpet av 45 minutter. Rør reaksjonsblandingen i 3 timer ved 23°C til l-(klorkarbonyl)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en er brukt opp, som bekreftes ved GC-analyse av reaksjonsløsningen. Separer sjiktene og vask det organiske sjiktet med IM NaHC03(540 ml) og deionisert vann (540 ml, deretter 270 ml). Tørk det organiske sjiktet med Na2S04og filtrer. Konsentrer løsningen under vakuum for å gi l-(acyl-azid)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en som en olje.
<]>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 5.58 (s, 2H, CH=CH), 2.96 (app t, J = 2.3 Hz, 4H, 2CH2), 1.46 (s, 9H, C(CH3)3).
IR (film) 2137 (CON3), 1720 (C02R), 1246 (s, 1185, 1136 cm'<1>.
Tilsett løsningen av l-(acylazid)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en i løpet av 1 time til 110 ml toluen ved 95°C. Utvikling av nitrogengass er tilsetningshastighetskont- rollert under disse betingelsene. Destiller MTBE fra reaksjonsblandingen i løpet av til-setningen. Rør reaksjonsblandingen i 1 time ved 95°C og avkjøl til 23°C over natten. Konsentrering av løsemidlet under vakuum gir l-(isocyanat)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en som en olje.
<!>H NMR (300 MHz, CDC13) 8 5.67 (s, 2H, CH=CH), 3.01 (d, J = 15.6 Hz, 2H), 2.61 (d, J = 15.6 Hz, 2H), 1.50 (s, 9H, C(CH3)3).
IR (film) 2258 (-NCO), 1732 (-C02R), 1157 cm'<1>.
Tilsett t-butanol (35 g, 471 mmol) til en løsning av kalium t-butoksid (IM i THF, 471 ml, 471 mmol) under nitrogen. Avkjøl reaksjonsblandingen til 0-5°C og tilsett toluen-løsningen som inneholder l-(isocyanat)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en i løpet av 60 minutter mens temperaturen holdes ved 0-10°C. Varm opp reaksjonsblandingen til 23°C, rør i 2 timer og undersøk med GC for at isocyanatutgangsmaterialet er borte. Tilsett reaksjonsblandingen til en blanding av deionisert vann (1,2 1) og MTBE (1,2 1) ved 15°C. Rør reaksjonsløsningen i 20 minutter og separer sjiktene. Vask det organiske sjiktet med en 20% saltvannsløsning (250 ml) og separer sjiktene. Overfør det organiske sjiktet konsentrert via destillasjon, til ca. 250 ml. Tilsett heptan (500 ml) og konsentrer løsningen til et totalvolum på 250 ml. Avkjøl den resulterende slurryløsningen til 0°C og rør i 2 timer og filtrer. Vask filterkaken med kald heptan (2 x 100 ml) og vakuumtørk for å gi 34,54 g (52% utbytte fra l-(karboksylsyre)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en) av l-(tert-butoksykarbonyl)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en som et hvitt fast stoff.
Smp. 87-89°C.
<!>H NMR (500 MHz, CDCI3) 8 5.63 (s, 2H, CH=CH), 5.1 (bs,<!>H, NH), 2.99 (d, J = 11. 2 Hz, 2H), 2.57 (d, J= 16.0 Hz, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.44 (s, 9H).
<I3>C NMR (CDCb) 8 173.3, 154.9, 127.7, 81.1, 64.5, 44.8,28.3, 27.8.
IR (KBr): 3451, 2981, 2932, 1712, 1489,1369, 1154 cm'<1>.
MS (FIA) m/e (% relative intensitet) 284.2 (M<+>+ 1, 56), 228.2 (73), 172.1 (97), 128.0
(100). Tilsett en løsning av l-(tert-butoksykarbonylamino)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-3-en (20,00 g, 71 mmol) i 100 ml EtOAc til en blanding av tetrabutylammoniumhydrogensulfat (4,08 g, 10 mmol, 0,17 ekv.), magnesiummonoperoksyftalathydrat (MMPA, 52,4 g, 4,76% aktiv oksygen = 2,1 ekv.) og deionisert vann (100 ml).Rør reaksjonsblandingen med mekanisk rører i 19 timer. Tilsett en løsning av natriumsulfid (18 g) i deionisert vann (100 1) til reaksjonsblandingen i løpet av 30 minutter. Fortynn blandingen med 100 ml EtOAc og separer sjiktene. Vask det organiske sjiktet med deionisert H20 3(100 ml), 2N NaOH (2 x 100 ml) og deionisert H20 (2 x 100 ml). Destiller det organiske sjiktet ved 75-90°C ved atmosfæretrykk til volumet når 40 ml. Avkjøl løsningen til 75°C og tilsett varm heptan (120 ml). Avkjøl løsningen til 65°C og eventuelt så med ønsket produkt. Tillat den resulterende slurryen til å avkjøle til omgivelsestemperatur og avkjøl deretter på isbad i 1 time. Filtrer produktet og vask med 80 ml kald 4:1 heptan:EtOAc og vakuumtørk ved 40°C for å gi 15,45 g (73% utbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff. Forbindelsen kan ytterligere renses ved rekrystallisasjon fra 2:1 isopropanol:vann.
Smp. 130-133°C.
<]>H NMR (500 MHz, CDC13) 8 5.0 (bs, 1H), 3.58 (s, 2H), 2.41 (d, J = 15.3 Hz, 2H), 2.20 (d, J = 15.2 Hz, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.40 (s, 9H).
<13>C NMR (CDCb) 8 171.3, 154.3, 81.2, 79.5, 62.8, 57.0, 38.6, 28.3, 27.7.
IR (KBr): 3453,2982,2932,1726,1708,1489, 1369,1293,1156, 840 cm'<1>.
MS (FIA) m/e (% relativ intensitet) 300.3 (M<+>+ 1, 65), 244.4 (68), 188.2 (100) 144.1 (99).
Fremstilling 46
( 1 R. 3R)- 1, 3 - di( metvlbenzylamino) propan dihvdroklorid
Varm (R)-a-metylbenzylamin (98% ee, 121 g, 1 mol) til 100°C under nitrogen. Tilsett dibrompropan (25,4 ml, 50,5 g, 250 mmol) dråpevis i løpet av 70 minutter. Varm blandingen i ytterligere 3 timer og avkjøl deretter til 80°C. Tilsett konsentrert (50%) NaOH-løsning (30 ml) dråpevis i løpet av 10 minutter. Tilsett vann (30 ml) for å løse opp de faste stoffene og la blandingen avkjøle til romtemperatur i løpet av 30 minutter. Tilsett MTBE (100 ml). Løs opp presipitatet ved tilsetning av 100 ml vann, og separer sjiktene. Vask det organiske sjiktet med 50 ml saltvann, tørk (Na2SC«4) og konsentrer under vakuum for å gi 126,0 g av en lys gul olje. Destiller oljen under vakuum ved 70°C (topp-temperatur), ved anvendelse av en 12 tommer kolonne for å fjerne overskudd (R)-a-metylbenzylamin. Løs opp kolberesten (68 g urent diamin) i 1 1 i-PrOH i en 2 1 kolbe med mekanisk rører. Tilsett konsentrert HC1 (12M, 45 ml, 540 mmol) dråpevis i løpet av 10 minutter. Tilsett ytterligere 100 ml i-PrOH for å forsikre om god blanding av den tykke slurryen. Rør blandingen i 90 minutter og filtrer. Vask kaken med i-PrOH og va- kuumtørk ved 40°C for å oppnå 64,32 g (72% utbytte, basert på dibrompropan) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<]>H NMR (500 MHz, DMSO-c/6) 5 9.93 (bs, 2H), 9.47 (bs, 2H), 7.56 (d, J = 7.0 Hz, 4H), 7.37 (m, 6H), 4.27 (m, 2H), 2.84 (m, 2H) 2.48 (m, 2H), 2.1 (m, 2H), 1.56 (d, J = 6.7 Hz, 6H).
Fremstilling 47
( 1S")- 1 -( tert- butoksvkarbonylamino")- 1 -( tert- butoksvkarbonylV cvklopent- 4- en- 3- on
Løs opp (lR,3R)-l,3-di(metylbenzylamino)propan dihydroklorid (24,65 g, 69,3 mmol, fremstilling 46) i 150 ml vann med røring. Tilsett til løsningen 35 ml (175 mmol) 5N NaOH-løsning, fulgt av 150 ml MTBE. Etter røring i 15 minutter, separer sjiktene og ekstraher de vandige sjiktene med 100 ml MTBE. Vask de kombinerte organiske sjiktene med 100 ml saltvann, tørk med Na2S04og konsentrer under vakuum for å gi 18,06 g (92% utbytte) av lR,3R-di(metylbenzylamino)propan som en farve løs olje.
I en 500 ml firehalset rundkolbe med overrører, løses opp 20,59 g (73,5 mmol) 1R,3R-di(metylbenzylamino)propan i 30 ml hver av tørr MTBE og THF, under N2-strøm. Av-kjøl løsningen til -45°C og tilsett 59 ml (147 mmol) n-BuLi-løsning (2,5M i heksan) dråpevis i løpet av 17 minutter. Rør den lyse gule løsningen i 2 timer ved -45°C. Tilsett en løsning av (lS,3S,5R)-3-(tert-butoksykarbonylamino)-3-(tert-butoksykarbonyl)-6-oksabicyklo[3.1.0]heksan (10,00 g, 33,4 mmol) i 55 ml tørr THF dråpevis i løpet av 28 minutter, mens temperaturen holdes under -40°C. Rens tilsetningstrakten med ytterligere 5 ml THF. Rør reaksjonsblandingen i 18 timer ved -45°C og stopp deretter reaksjonen med dråpevis tilsetning av 4N vandig svovelsyre (75 ml). Fjern kjølebadet etter syretil-setningen er fullstendig. Separer sjiktene og ekstraher det vandige sjiktet med 50 ml MTBE. Vask de kombinerte organiske sjiktene med 50 ml hver av vann og saltvann, tørk med Na2SC«4 og konsentrer under vakuum for å gi 9,78 g av uren 578242 som et hvitt fast stoff. Løs opp det faste stoffet i 33 ml varm MTBE og tilsett heptan (66 ml) porsjonsvis. La den rørte løsningen avkjøles til romtemperatur og rør deretter blandingen i 1 time ved 0°C. Filtrer det faste stoffet, vask med 2 x 10 ml kald 2:1 heptan:MTBE og vakuumtørk i 4 timer ved 35°C for å gi 8,52 g (85% utbytte) av (lS,3R)-l-(tert- butoksykarbonylamino)-1 -(tert-butoksykarbonyl)-3-hydroksycyklopent-4-en som et hvitt fast stoff.
Chiral HPLC-undersøkelse: 99.7% ee.
[a]D=+H4(c l,MeOH.
<!>H NMR (500 MHz, CDC13) 8 6.1 (bs, 1H), 5.9 (bs, 1H), 5.55 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 4.8 (m, 1H), 4.44 ( d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.87 ( dd, J = 14.5, 7.5 Hz, 1H), 2.00 ( d, J = 14.5 Hz, 1H), 1.45 (s,9H), 1.42 (s, 9H).
IR (KBr): 3413, 2983, 1703, 1491, 1370,1309, 1255, 1155,1055 cm'<1>.
MS (FIA) m/e (% relativ intensitet) 300.3 (M<+>+ 1,15), 226.2 (29), 170.1 (100), 126.1 (89), 108.3 (20).
Tilsett 2,2,6,6-tetrametyl-l-piperidinyloksy (fritt radikal) (TEMPO) (0,84 g, 5,3 mmol) og KBr (0,63 g, 5,3 mmol, i 2 ml vann) til en løsning av (lS,3R)-l-(tert-butoksykarbonylamino)-l-(tert-butoksykarbonyl)-3-hydroksycyklopent-4-en (20 g, 66,8 mmol) i MTBE (200 ml). Avkjøl reaksjonsblandingen til 0°C og tilsett en løsning av NaOCl (3,14%, 240 g, 100 mmol) som inneholder NaHCOa(8,4 g) dråpevis, mens temperaturen holdes under 5°C. Rør reaksjonsblandingen i 1 time ved 0°C og varm den til romtemperatur. Separer sjiktene og ekstraher det vandige sjiktet med MTBE (2 x 200 ml). Vask de kombinerte organiske sjiktene med 200 ml IN HCl-løsning som inneholder 2,21 g Kl fulgt av 10% Na2S03-løsning (200 ml). Vask det organiske sjiktene med vann (2 x 200 ml) og konsentrer til tørrhet under vakuum. Løs opp det urene produktet i MTBE (60 ml) ved 50°C og krystalliser ved tilsetning av heptan (200 ml) i løpet av 1 time. Avkjøl blandingen til 0°C i løpet av 2 timer og filtrer deretter. Vask filterkaken med 100 ml kald heptan:MTBE (65:35) og vakuumtørk for å gi 16,99 g (89% utbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Smp. 116-18 °C.
[a]D=+123 (c l,MeOH).
<!>H NMR (500 MHz, CDC13) 8 7.4 (bs, 1H), 6.32 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 5.6 (bs, 1H), 2.87 (d, J = 18.2 Hz, 1H), 2.9 (d, J = 18.2 Hz, 1H), 1.43 (s, 18H).<B>C NMR (CDCI3) 8 206.1, 170.2, 160.8, 154.9, 136.1, 84.5, 66.1, 46.6, 28.9, 28.4.
IR (KBr): 3419, 2983, 1722, 1487, 1730,1300, 1259, 1151,1012 cm'<1>.
MS (FIA) m/e (% relativ intensitet) 254.2 (M<+>+ 1,11), 242.3 (18), 228.2 (13), 186.1 (76), 143.2(11), 242.3 (100).
Fremstilling 48
l-( 2- tert- butoksv- 2- oksoetyl) tetrahvdrotiofeniumbromid
Tilsett t-butylbromacetat (2,44 1, 16,52 mol, 1 ekv.) til en løsning av tetrahydrotiofen (2,19 1, 24,8 mol, 1,5 ekv.) i aceton (11,38 1) i en 22 1 kolbe i løpet av 30-60 minutter mens temperaturen holdes mellom 15-25°C ved anvendelse av vannbad. Rør reaksjonsblandingen i 22 timer og undersøk en prøve med<]>H NMR for å bekrefte fullstendig reaksjon. Filtrer presipitatet, vask med aceton (2 1), og vakuumtørk i 3 dager ved 28-33°C for å gi 4,328 kg (92,5% utbytte) av tittelforbindelsen.
<]>H NMR (500 MHz, DMSO d- 6) 8 4.40 (s, 1H), 3.51 (m, 2H), 3.48 (m, 2H), 2.23 (m, 2H), 2.13 (M, 2H), 1.42 (s, 9H).
Fremstilling 49
( 1 S. 2S. 5R. 6R)- 2-( tert- butoksvkarbonvlamino)- 4- okso- bicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsvre di- tert- butylester
Tilsett KOtBu (42 ml, 42 mmol, IM løsning i THF, 2,5 ekv.) til en 0°C løsning av l-(2-tert-butoksy-2-oksoetyl)tetrahydrotiofeniumbromid (11,9 g, 42 mmol, 2,5 ekv., fremstilling 48) i acetonitril (30 ml) under N2i løpet av 10 minutter mens temperaturen holdes under 5°C. Rør den melkeaktige løsningen kald i 1,5 timer. Tilsett trifluoretanol (6,9 g, 69 mmol, 4,1 ekv.) dråpevis. Tilsett en løsning av (lS)-l-(tert-butoksykarbonylamino)-l-(tert-butoksykarbonyl)-cyklopent-4-en-3-on (5 g, 16,8 mmol, fremstilling 47) og trifluoretanol (13,3 g, 132 mmol, 7,9 ekv.) i acetonitril (20 ml) i løpet av 5 minutter, mens temperaturen hodles ved 3-5°C. Rør løsningen i 4,5 timer ved 0-5°C. Tilsett MTBE (155 ml) og H2O (80 ml) til den kalde reaksjonsblandingen. Separer sjiktene og vask det organiske sjiktet med H2O (50 ml), og deretter 20% saltvann (50 ml). Konsentrer det organiske sjiktet via atmosfæretrykkdestillasjon til ca. 30 ml. Tilsett heptan (100 ml) og konsentrer løsningen. Tilsett ytterligere heptan hvis nødvendig til damptemperaturen til destillatet når 93°C. Tilsett THF (65 ml) for å gi en løsning av tittelforbindelsen.
Fremstilling 50
( lS, 2S, 5R, 6RV2-( tert- butoksvkarbonylaminoV4- okso- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6-dikarboksylsyre di- tert- butylester
Tilsett 1,7 1 mettet vandig K2CC>3-løsning til en 0°C løsning av l-(2-tert-butoksy-2-oksoetyl)tetrahydrotiofeniumbromid (757 g, 2,67 mol, fremstilling 48) i 2,2 1CH2CI2, mens temperaturen holdes under 10°C. Etter røring av denne tofaseblandingen i 1,5 timer, tilsettes 223 ml 50% NaOH-løsning porsjonsvis, mens temperaturen holdes under 5°C. Rør reaksjonsblandingen i 3 timer og filtrer. Rens saltet med CH2CI2. Separer sjiktene og ekstraher det vandige sjiktet med 600 ml CH2CI2. Tørk de kombinerte organiske sjiktene med fast K2CO3og konsentrer under vakuum for å gi 533,3 g (98% utbytte) av (2-tert-butoksy-2-oksoetyl)tetrahydrotiofenium som en matt gul olje. Etter lagring i fry-ser, krystalliserer oljen og gir et off-white fast stoff.
Smp. 48-50°C.
<]>H NMR (500 MHz, CDCI3) 8 3.12 (m, 2H), 3.00 (m, 2H), 2.85 (s, 1H), 2.41 (m, 2H), 1.84 (m, 2H), 1.38 (s, 9H).
Tilsett 474 ml (6,5 ml, 10 ekv.) trifluoretanol til en 0°C løsning av (lS)-l-(tert-butoksykarbonylamino)-l-(tert-butoksykarbonyl)cyklopent-4-en-3-on (194 g, 653 mmol) i 650 ml CH2CI2. Tilsett en løsning av (2-tert-butoksy-2-oksoetyl)tetrahydrotiofenium (396 g, 1,96 mol) i 325 ml CH2CI2dråpevis i løpet av 40 minutter mens temperaturen holdes under 10°C. Fjern isbadet etter 1 time. Tilsett deionisert vann (680 ml) og separer sjiktene. Ekstraher det vandige sjiktet med 400 ml CH2CI2. Vask de kombinerte organiske sjiktene med 500 ml saltvann, tørk med Na2SC«4 og konsentrer under vakuum for å gi 587 g av et gult, oljeaktig fast stoff. Løs opp det faste stoffet i 400 ml CH2CI2og eluer gjennom en 1,6 kg silikagelplugg ved anvendelse av 5:1:1 heksan:metyl t-butyleter:CH2Cl2som eluent for å gi totalt 13,2 1 eluent. Konsentrer eluenten for å gi 398,7 g av et hvitt fast stoff. Løs opp det faste stoffet i 3 1 reflukserende 70:30 heksan:MTBE. La reaksjonsblandingen avkjøle til romtemperatur over natten og avkjøl på isbad i 1 time. Filtrer det faste stoffet, rens med kaldt løsemid-del (ca. 700 ml) og vakuumtørk ved 35°C for å gi 173 g (64% utbytte) av (1 S,2S,5R,6R)-2-(tert-butoksykarbonylamino)-4-okso-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre di-tert-butylester som et hvitt fast stoff.
Smp. 144-46°C.
[a]D=+30.5 (c 1,CHC13).
<]>H NMR (500 MHz, CDCI3) 8 5.36 (d, 1H), 2.88 (m, 1H), 2.64 (dd, J = 5.2, 3.2 Hz, 1H), 2.37 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 2.23 (bs, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.43 (s, 18H).
<13>C NMR (125 MHz, CDC13) 8 206.2,171.2,168.5,155.3, 83.4, 82.7, 80.7,61.2,43.2, 36.0, 34.3 28.4,28.2,28.0, 25.3.
IR (CHCI3): 2982,1744, 1719, 1485, 1394, 1309 cm'1.
MS (ES+) m/e (% relativ intensitet) 412.2 (M<+>+ 1, 79), 356.2 (50), 300.1 (97), 276.1 (68), 244.1 (100). Analyse beregnet for C21H33NO7(411.29): C, 61.30; H, 8.08; N, 3.40. Funnet: C, 61.32; H, 8.04; N, 3.51.
Fremstilling 51
( lS. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( tert- butoksvkarbonvlammo)- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan-2, 6- dikarboksylsvre di- tert- butylester
Avkjøl løsningen fra fremstilling 49 til 0°C under nitrogen og tilsett litium tri-sek-butylborhydrid (L-Selectride™, IM i THF, 21 ml, 21 mmol) dråpevis. Rør reaksjonsblandingen i 45 minutter ved 0°C. Tilsett en løsning av 2M natriumkarbonat (31 ml) dråpevis, mens temperaturen holdes under 8°C. Tilsett en løsning av 30% H2O2(7,15 g, 63 mmol) i 20 ml vann, mens temperaturen holdes under 15°C. Etter røring i 10 minutter tilsettes MTBE (210 ml) og deionisert vann (100 ml). Separer sjiktene og vask det organiske sjiktet med mettet Na2SC«3-løsning (40 ml) og IM NaHSCvløsning (40 ml). Konsentrer det organiske sjiktet ved destillasjon ved atmosfæretrykk til et volum på ca. 90 ml. Fortsett destillasjonen og tilsett heptan for å opprettholde et konstant volum. Når damptemperaturen til destillatet når 93°C, avkjøles løsningen til 70°C og det tilsettes 7 ml THF. Avkjøl løsningen til 0°C og rør i 1 time. Filtrer det faste stoffet, vask med kald heptan (10 ml) og vakuumtørk ved 50°C for å gi 4,68 g (67% utbytte) av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(tert-butoksylcarbonylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre di-tert-butylester som et hvitt fast stoff.
Smp. 187-88°C.
<!>H NMR (CDCI3, 500 MHz) 8 5.31(bs, 1H), 4.38 (d, JAB= 10.5 Hz, 1H), 4.30 (dd, J = 11.0, 6.0 Hz, 1H), 2.68 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 2.17 (m, 1H), 2.07 (m, 1H), 1.58 (m, J = 15.2 Hz, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.44 (s, 9H), 1.43 (s, 9H).
<I3>C NMR (75 MHz, CDCI3) 8 175.2, 170.5, 155, 83.2, 81.3, 80.1, 73.7, 66.9,43.1, 36.0, 34.4, 29.3, 28.3, 28.1, 27.4, 22.1.
IR (CHCI3): 3445,2982,1714,1485, 1361 cm'<1>.
MS (ES+) m/e (% relativ intensitet) 414.2 (M<+>+ 1, 58), 358.1 (75), 302.1 (78), 246.0
(100).
[a]D=-28.6 (c l,MeOH).
Fremstilling 52
( 1 R, 2S, 4R, 5R, 6R)- 2-( 2' S- 2 ,-( tert- butoksvkarbonvlamino) propionyl) amino- 4- fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre
Tilsett en løsning av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-(tert-butoksykarbonylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre di-tert-butylester (25,00 g, 60,5 mmol, fremstilling 51) i CH2C12(230 ml) til en -78°C løsning av Deoxofluor™ (16,05 g, 72,6 mmol, 1,2 ekv.) i CH2CI2(105 ml) i løpet av 2 timer. Rør reaksjonsblandingen i 1,5 timer, og tilsett ytterligere 1,66 g Deoxofluor™. Rør løsningen i 30 minutter og var den opp til -10°C. Tilsett en løsning av mettet NaHCC«3(105 ml) dråpevis i løpet av 20 minutter, mens temperaturen holdes under 5°C. Juster pH til det vandige sjiktet til 7 ved tilsetning av 160 ml mettet NaHC03-løsning. La blandingen varmes opp til omgivelsestemperatur og separer sjiktene. Ekstraher det vandige sjiktet med 100 ml CH2CI2. Vask de kombinerte organiske sjiktene med 250 ml saltvann, og tørk deretter med Na2SC>4. Fjern løsemidlet under vakuum og tilsett heptan (75 ml) til det urene produktet. Varm opp den resulterende blandingen til 50°C til alle de faste stoffene er løst opp og rør ved omgivelsestemperatur i 4 timer. Avkjøl blandingen til 0°C på isbad og filtrer. Rens produktet med kald heptan og vakuumtørk for å gi 20,23 g (80% utbytte) av (1 R,2S,4R,5R,6R)-2-(tert-butoksykarbonylamino)-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre di-tert-butylester som et hvitt fast stoff.
Smp. 140-143°C.
[a]D=+ 20.6 (c 1,CHC13).
<!>H NMR (CDCI3, 500 MHz) 5 5.45 (dd, J H-f = 56, JH-H = 4.8 Hz, 1H), 5.28 (bs, 1H), 3.00 (m, 1H), 2.23 (bs, 1H), 2.11 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.45 (s, 9H), 1.43 (s, 9H), 1.37 (m, 1H).
<I3>C NMR (CDCI3, 75 MHz) 5 177.7, 170.5,155.0, 94.4, 92.0, 82.2, 81.5, 80.2, 64.7, 37.7, 33.2,29.7, 29.3, 28.3,28.1, 27.8, 20.4.
MS (ES+) m/e (% relativ intensitet) 416.2 (M<+>+ 1, 66), 360.1 (67), 304.1 (100), 248.0 (60).
IR (CHC13): 3444,2981, 1715,1485, 1369 cm'1.
Tilsett SOCI2(21,29 g, 13,05 ml, 0,179 mol, 5 ekv.) til en løsning av
(1 R,2S,4R,5R,6R)-2-(tert-butoksykarbonylamino)-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre di-tert-butylester (14,87 g, 0,036 moml) i EtOH (abs., 149 ml) dråpevis løpet av 10 minutter uten kjøling for å gi en forsiktig refluksert løsning. Reflukser løs-ningen over natten. Fjern løsemidlet fra reaksjonsblandingen under vakuum. Løs opp resten i EtOAc (150 ml) og tilsett en løsning av 10% Na2C03(75 ml) dråpevis i løpet av 5-10 minutter med røring. Separer sjiktene og ekstraher det vandige sjiktet med EtOAc (50 ml). Vask de kombinerte organiske ekstraktene med saltvann (1 x 50 ml), tørk over Na2S04, filtrer og konsentrer produktet, (lR,2S,4R,5R,6R)-2-amino-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester, i vakuum til en tykk væske som størkner etter henstand (11,02 g).
Tilsett N-metylmorfolin (22,44 ml, 204 mmol) til en løsning av N-Boc-L-alanin (38,62 g, 204 mmol) i 396 ml metylenklorid ved -22°C under nitrogen, fulgt av tilsetning av iso-butylklorformat (26,48 ml, 204 mmol) dråpevis i løpet av 15 minutter slik at reaksjonstemperaturen ikke overskrider -18°C. Rør den resulterende tynne slurryen ved -20°C i 30 minutter og tilsett en løsning av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-amino-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (49,46 g, 191 mmol) i 247 ml metylenklorid i løpet av 40 minutter slik at reaksjonstemperaturen ikke overskrider -16°C. Fjern reaksjonsblandingen fra kjølebadet og rør ved omgivelsestemperatur i 70 minutter. Tilsett 408 ml IN saltsyre, rør i 5 minutter og separer sjiktene. Vask det organiske sjiktet med mettet vandig natriumbikarbonat (1 x 408 ml), tørk (Na2S04), filtrer og konsentrer produktet, (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-2'-(tert-butoksykarbony lamino)propiony l)amino-4-fluor-bicyklo [3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester, i vakuum til et hvitt skum (88,16 g).
Tilsett 46,7 ml (93,4 mmol) 2N natriumhydroksid til en løsning av uren (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-2'-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl)amino-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (17,5 g, 37,3 mmol teoretisk) i 46,6 ml tetrahydrofuran ved romtemperatur. Rør tofaseblandingen kraftig ved romtempratur til homogen løsning, rør deretter ytterligere i 1 time (tre timer totalt). Fortynn blandingen med 46 ml t-butylme ty leter og bland deretter i 10 minutter og separer sjiktene. I en separat kolbe tilsettes 93 ml vann og deretter 8,4 ml (101 mmol) konsentrert HC1. Tilsett eventuelt (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-2'-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl)amino-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre såkrystaller til syreløsningen, fulgt av det vandige sjiktet fra ovenfor. Tilsett det vandige sjiktet først sakte, slik at en moderat tykk slurry dannes. På dette tidspunktet, øker tilsetningshastigheten (40 minutter total tilsetningstid). Rens tilsetningstrakten med vann (16 ml). Rør den resulterende slurryen i 2 timer filtrer, vask med vann (2 x 32 ml) og vakuumtørk ved 45°C til konstant vekt for å gi 13,9 g (99%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Fremstilling 53
( 1 R. 4S. 5S. 6S)- 4- amino- 2. 2- diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan- 4. 6- dikarboksvlsvre dietylester
Tilsett tionylklorid til en slurry av (lR,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre (10 g, 42,5 mmol, U.S. patent nr. 5,688,826) i 100 ml 2B etanol ved romtemperatur (15,5 ml, 212,6 mmol) dråpevis i løpet av 20 minutter fulgt av rensing med 40 ml etanol. Varm opp slurryen til refluks og rør over natten. Avkjøl den resulterende løsningen til romtemperatur og konsentrer til en gelatinøs rest. Tilsett etylacetat (50 ml) til resten, fulgt av fortynning med ytterligere 94 ml etylacetat. Tilsett sakte 50% vandig natriumkarbonat (70 ml) til blandingen med røring for hånd som gradvis gir oppløsning og gir en slutt-pH på 7,95. Filtrer og separer sjiktene. Ekstraher det vandige sjiktet med etylacetat (2 x 100 ml). Vask de kombinerte organiske ekstraktene med saltvann (1 x 100 ml), tørk (MgSC^), filtrer og konsentrer i vakuum for å gi tittelforbindelsen som en matt gul olje som størkner til et off-white faststoff (11,71 g, 95% utbytte).
Smp. 80-83°C.
[a]25D-57.7 (c 1.04, CH30H).
500 MHz 1H NMR (CDC13) 5 4.31 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 4.20 (m, 2H), 3.78 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 3.36 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 2.93 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 2.81 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 2.46 (t, 1H, J = 4.0), 1.34 (t, 3H, J = 7.0), 1.30 (t, 3H, J = 7.0).
13C NMR (125 MHz, CD3CI3) 5 171.68, 168.57, 63.26, 62.42, 59.96, 56.06, 43.78, 32.25,22.49, 14.31, 14.25.
FTIR(ATR) 3364.15 (s), 1725.95 (s), 1304.91 (s), 1259.24 (s), 1200.84 (s), 1104.91 (s), 1022.99 (s), 896.45 (s), 851.21 (s) cm-1.
Analyse beregnet for Cl 1H17N06S: C, 45.35; H, 5.88; N, 4.81. Funnet: C, 45.02; H, 5.75; N, 4.82.
Fremstilling 54
( 1 R. 4S . 5 S. 6S V4-( 2' S- 4 '- metyltio- 2'-( tetr- butoksvkarbonvDaminobutanovDamino- 2. 2-diokso- 2X6- tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre dietylester
Tilsett N-metylmorfolin (14,4 ml, 130,9 mmol) til en klar løsning av N-Boc-L-metionin (32,64 g, 130,9 mmol) i 110 ml metylenklorid ved -22°C under nitrogen, fulgt av tilsetning av iso-butylklorformat (17 ml, 130,9 mmol) dråpevis i løpet av 7 minutter mens reaksjonstemperaturen holdes ved -22°C. Etter fullstendig tilsetning blir det dannet en resulterende tynn slurry. Rør ved -22°C til -26°C i 30 minutter. Tilsett en løsning av (1 R,4S,5S,6S)-4-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dietylester (35,65 g, 122,4 mmol, fremstilling 53) i 107 ml metylenklorid i løpet av 15 minutter, fulgt av rensing med 36 ml metylenklorid. Fjern reaksjonsblandingen fra kjø-lebadet og rør ved romtemperatur i 70 minutter. Tilsett 51 ml 5N saltsyre til løsningen, og separer sjiktene deretter. Tilbakeekstraher det vandige sjiktet med metylenklorid (2 x 107 ml). Vask det kombinerte organiske sjiktene med vandig natriumbikarbonat (lx 107 ml), tørk (MgS04), filtrer og konsentrer i vakuum for å gi 65,82 g (103% vektutbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt skum.
[a]25D -12.7 (c 1.2,CH30H).
500 MHz 1H NMR (CDC13) 5 7.53 (s, 1H), 5.06 (d, 1H, J = 8.0 Hz), 4.34 - 4.20 (m, 6H), 3.41 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0), 2.97 - 2.89 (m, 2H), 2.64 - 2.59 (m, 2H, J = 4.0), 2.12 - 1.89 (m, 5H), 1.47 (s, 9H), 1.32 (t, 6H, J = 7.0).
13C NMR (125 MHz, CD3OD) 5 172.53, 169.03, 167.88, 156.00, 80.62, 63.45, 62.56, 60.20, 55.33, 52.78, 42.81, 31.52, 31.38, 30.12, 28.49, 22.69, 15.44,14.23,14.143. FTIR (ATR) 3341.88 (w), 2979.38 (s), 1733.03 (s), 1674.92 (s), 1514.58 (s), 1315.80 (s), 1255.15 (s), 1161.47 (s), 1142.63 (s), 1025.68 (s), 854.85 (s), 763.53 (s) cm-1.
Fremstilling 55
( 1 R. 4S , 5 S. 6S V4-( 2' S- 4 '- metyltio- 2'-( tert- butoksvkarbonvDaminobutanovDamino- 2, 2-diokso- 2X6- tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre mononatriumsalt Til 141 ml (282 mmol) 2N natriumhydroksid til en løsning av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-metyltio-2'-(tert-butoksykarbonyl)aminobutanonyl)amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dietylester (58,95 g, 112,8 mmol teoretisk, fremstilling 54) i 141 ml tetrahydrofuran ved romtemperatur. Rør blandingen kraftig ved romtemperatur i 2 minutter. Fortynn løsningen med 141 ml tert-butylmetyleter, og separer deretter sjiktene. Fortynn ytterligere det vandige sjiktet med 141 ml vann og tilsett konsentrer saltsyre dråpevis for å redusere pH til 4,46. Rør i 10 minutter for å gi en tynn slurry. Tilsett mer konsentrert saltsyre til slurryen for å la pH'en falle til 1,4
(total anvendelse av 17 ml kons. HC1,204 mmol). Etter røring i 2 timer, filtrer slurryen. Vask kaken med vann (2x118 ml) og tørk i vakuum ved 45°C i 1 time før overføring til en veiepanne. Tørk kaken igjen i vakuum ved 45°C i 16 timer og ved 58°C i 4 timer for å gi 52,96 g (96% vektutbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Smp. (dekomp.) 258 °C.
[a]25D -25.2(c 1.03, H20).
500 MHz 1H NMR (D20) 5 4.07 - 4.01 (m, 2H), 3.45 - 3.43 (m, 1H), 3.11 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 2.85 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 2.47-2.35 (m, 3H), 1.96-1.90 (m, 4H), 1.78-1.72 (m, 1H), 1.28 (s, 9H).
13C NMR (125 MHz, CD30D) 5 174.45, 173.58,172.80,157.46, 81.71, 61.41, 55.04, 53.24, 42.29, 31.71, 30.85, 29.41, 27.79, 23.65, 14.41.
FTIR (ATR) 3287.62 (s), 1698.00 (s), 1528.91 (s), 1327.36 (s), 1283.74 (s), 1245.90 (s), 1174.81 (s), 1109.06 (s), 1053.05 (s), 874.27 (s), 808.95 (s) cm-1.
Fremstilling 56
( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4-( 2' S- 4 '- metyltio- 2'-( tert- butoksvkarbonvl) aminobutanonyl) amino- 2. 2-diokso- 2X6- tia- bicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre
Tilsett 397 ml (795 mmol) 2N natriumhydroksid til en løsning av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-metyltio-2'-(tert-butoksykarbonyl)aminobutanonyl)amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dietylester (166,15 g, 318 mmol, fremstilling 54) i 480 ml tetrahydrofuran ved romtemperatur. Rør blandingen kraftig ved romtemperatur i 2 minutter hvorved reaksjonsblandingen blir homogen for å danne en klar matt gul/grønn løsning. Rør i ytterligere 2 timer ved romtemperatur. Fortynn løsningen med 480 ml tert-butylmetyleter, og separer deretter sjiktene. Tilsett det vandige sjiktet dråpevis til en løsning av konsentrert saltsyre (71,5 ml, 858 mmol) i vann (960 ml). Tilsett etylacetat (500 ml) fulgt av resten av det vandige sjiktet for å gi en emulsjon og fortynn ytterligere med etylacetat (460 ml). Rør emulsjonen i 40 minutter og filtrer og vask med vann (2 x 250 ml). Separer sjiktene av filtratet og tilbakeekstraher det vandige sjiktet med etylacetat (500 ml). Vask de kombinerte organiske sjiktene med saltvann (75 ml), tørk (MgSC>4), fitlrer og konsentrer i vakuum for å gi 125,26 g (84% konsentrert utbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt skum.
Fremstilling 57
Etyl 2- brom- 2- fluor- 2-( 3- oksocyklopentvDacetat
Tilsett 8,45 ml (50,4 mmol) trietylsilylklorid til en suspensjon av 2,99 g aktivert Zn (45,8 mmol) i vannfri acetonitril (100 ml) ved -20°C og rør blandingen i 5 minutter. Tilsett 8,0 ml (57,3 mmol) etyl 2,2-dibrom-2-fluoracetat og rør blandingen i 90 minutter ved -20°C. Tilsett 1,86 ml (22,9 mmol) 2-cyklopenten-l-on, og rør reaksjonsblandingen over natten, mens temperaturen heves sakte til romtemperatur, tilsett HC1 IN (125 ml) og EtOAc (100 ml). Vask det organiske sjiktet med mettet NaHCOj(2 x 150 ml), vann (2x150 ml) og saltvann (2x150 ml), tørk over vannfri MgS04, filtrer og konsentrer under redusert trykk. Rens resten med kolonnekromatografi ved anvendelse av EtOAc/heksan (1:8) som eluent for å gi tittelforbindelsen (5,36 g, 88% totalt utbytte) som en farveløs olje som en blanding av diastereomerer.
<]>H-NMR (300 MHz, CDC13): 1.34-1.41 (m, 6H), 1.91-1.95 (m, 1H), 2.04-2.68 (m, 11H), 3.12-3.31 (m, 2H), 4.33-4.43 (m, 4H).
Zn-aktivering: Tilsett 10 ml konsentrert HC1 til en suspensjon av 100 g Zn-støv i vann (900 ml). Rør blandingen i 20 minutter ved romtemperatur. Dekanter vannet og vask resten med vann (3 x 250 ml), aceton (3 x 150 ml) og eter (2 x 100 ml). Tørk resten under redusert trykk ved 35°C over natten.
Fremstilling 58
Etyl ( lRS, 5RS, 6RSV6- lfuor- 2- oksobicvklor3, 1, 01heksan- 6- karboksvlat
Tilsett 13,0 ml (75,0 mmol) etyldiisopropylamin til en løsning av 2,0 g (7,5 mmol) etyl 2-brom-2-fluor-2-(3-oksocyklopentyl)acetat (fremstilling 57) i DMF (8 ml) ved 0°C, og rør blandingen over natten ved romtemperatur. Tilsett en løsning av HC1 IN (20 ml), vann (15 ml) og EtOAc (75 ml). Ekstraher det organiske sjiktet, vask med mettet NaH-C03(2 x 100 ml), vann (2 x 100 ml) og saltvann (2 x 100 ml), tørk over vannfri MgS04, filtrer og konsentrer under redusert trykk. Rens resten med kolonnekromatografi ved anvendelse av EtOAc/heksan (1:4) som eluent for å gi tittelforbindelsen (1,17 g, 84% utbytte) som en blanding trans:ci 5:1 av isomerer som en farveløs olje.
<]>H-NMR (300 MHz, CDC13): 1.33 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 2.19-2.34 (m, 3H), 2.41-2.49 (m, 1H), 2.59 (d, 1H, J = 6.6 Hz), 2.71-2.76 (m, 1H), 4.29 (q, 2H, J= 7.1 Hz).
Fremstilling 59
( 1 RS, 2RS, 5RS, 6RS)- 2- spiro- 5 '- hydantoin- e- fluor- bicyklors. 1. 01heksan- 6-karboksvlsvre
Rør en blanding av etyl (lRS,5RS,6RS)-6-fluor-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (0,1 g, 0,54 mol, fremstilling 58) og IN NaOH (0,55 ml, 0,55 mmol) i EtOH (1 ml) i 10 minutter ved iskjøling. Tilsett IN HC1 til blandingen dråpevis til pH 1 og fordel den resulterende blandingen mellom EtOAc og saltvann. Ekstraher den vandige fasen med EtOAc to ganger og tørk de kombinerte organiske sjiktene over MgS04og konsentrer deretter under redusert trykk. Rør blandingen av resten, (NH4)2C03(0,31 g, 3,2 mmol) og KCN (0,11 g, 1,62 mmol) i EtOH og vann (1:1) (2 ml) ved 60°C over natten. Avkjøl på isbad og surgjør blandingen ved behandling med IN KHSO4. Fjern løsemidlet under redusert trykk og gjenoppløs resten i MeOH, filtrer og konsentrer i vakuum. Det urene produktet kan anvendes uten ytterligere rensing.
Fremstilling 60
( lR, 2S, 5R, 6R)- dietvl- 2-( 2' R- tert- butoksvkarbonvlamino- propionylamino)- 6- fluor-bicvkloD. 1. 01heksan- 2. 6- dikarboksvlat og ( 1 S. 2R. 5S. 6SVdietyl- 2-( 2, R- tert-butoksvkarbonvlamino- propionvlamino")- 6- fluor- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6-dikarboksylat
Tilsett 1,59 g (5,0 mmol) Ba(OH)2til en løsning av 0,32 g (1,5 mmol)
(lR<*>,2S<*>,5R<*>,6R<*>)-2-spiro-5'-hydantoin-6-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylsyre (fremstilling 59) i vann (10 ml) og rør blandingen ved 105°C over natten. Surgjør løs-ningen til pH 1 med IN HC1 ved 0°C og konsentrer deretter under redusert trykk. Gjen-oppløs resten og konsentrer under redusert trykk med absolutt EtOH (20 ml) flere ganger til det faste stoffet er fullstendig tørt. Tilsett 0,37 ml (5,0 mmol) SOCI2til resten løst i absolutt EtOH (20 ml) ved 0°C og rør deretter blandingen til refluks i 5 timer. Gjør
blandingen basisk med mettet NaHC03og tilsett EtOAc (25 ml). Separer det organiske sjiktet og ekstraher det vandige sjiktet med mer EtOAc P(2 x 25 ml). Tørk de kombinerte organiske sjiktene over vannfri MgS04, filtrer og konsentrer ved redusert trykk. Løs opp resten i 20 ml av en blanding av DCM-DMF (4:1), 0,73 g (1,9 mmol) HATU, 0,26 g (1,9 mmol) HoAt, 0,35 g (1,8 mmol) L-Ala. Tilsett 2,7 ml (15,3 mmol) diisopropyle-tylamin og rør blandingen under argon over natten. Tilsett DCM (15 ml), separer og vask med mettet NaHC03(2 x 25 ml), vann (2 x 25 ml), og saltvann (2 x 25 ml). Vask det organiske sjiktet over vannfri MgS04, filtrer og konsentrer under redusert trykk. Rens resten med kolonnekromatografi ved anvendelse av EtOAc/heksan (1:2) som eluent for å gi tittelforbindelsen (0,33 g, 51% totalt utbytte) so en blanding 1:1 av diastereomerer som farveløs olje.
Blandingen av diastereomerer separeres med kiral HPLC ved anvendelse av følgende analyttiske fremgangsmåte: Chiralpak AD 10m, 4,6 x 250 mm; eluent: 10% IPA i heksan; strømningshastighet: 1,0 ml/min.; UV: 215 nm. Isomer A-retensjonstid = 5,9 min. Isomer B-retensjonstid = 9,2 min.
Isomer A: (lR,2S,5R,6R,2'R)-dietyl-2-(2'-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-6-fluor-bicyklo[3.1,0]heksan-2,6-dikarboksylat
<]>H-NMR (300 MHz, CDC13): 1.18 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.23 (t, 1H, J = 7.1 Hz) , 1.36 (s, 9H), 1.56-1.68 (m, 1H), 2.03-2.11 (m, 2H), 2.21-2.31 (m, 1H), 2.37-2.45 (m, 1H), 2.61-2.63 (m, 1H), 4.09-4.16 (m, 5H), 5.10 (bd, 1H, J= 6.6 Hz), 7.11 (bs, 1H).
<I3>C-NMR (75 MHz, CDC13): 13.9, 14.0,17.7, 24.9 (d, J = 1.0 Hz), 28.1, 31.5 (d, J = 10.9 Hz), 34.9 (d, J = 9.4 Hz), 36.4 (d, J = 8.8 Hz), 49.1, 61.5, 61.8, 67.4, 77.2, 81.5 (d, J = 242.6 Hz), 155.4, 168.6 (d, J = 25.1 Hz), 171.8 og 172.7ppm.
Isomer B: (lS,2R,5S,6S,2'R)-dietyl-2-(2'-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-6-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylat
<!>H-NMR (300 MHz, CDCI3): 1.13 (t, 3H, J = 7.1 Hz), 1.18 (t, 1H, J = 7.1 Hz) , 1.31 (s, 9H), 1.51-1.60 (m, 1H), 1.98-2.07 (m, 2H), 2.15-2.22 (m, 1H), 2.26-2.39 (m, 1H), 2.55-2.60 (m, 1H), 4.07-4.12 (m, 5H), 5.20 (sd, 1H), 7.22 (bs, 1H).
<I3>C-NMR (75 MHz, CDCI3): 13.7, 13.8,18.0, 24.7, 28.0, 31.4 (d, J = 10.9 Hz), 34.5 (d, J= 8.9 Hz), 36.3 (d, J = 9.4 Hz), 49.1, 61.4, 61.7, 67.3, 77.2, 81.4 (d, J = 242.6 Hz), 155.2, 168.5 (d, J = 25.1 Hz), 171.7 og 172.8 ppm.
Fremstilling 61
( lR, 2S, 5R, 6R)- 2- amino- 6- fluor- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre
Reflukser en løsning av 30 mg (0,07 mmol) av isomer A i fremstilling 60 i 6N HC1 (2 ml) over natten. Fjern løsemidlet under redusert trykk, vask resten med eter, løs opp i MeOH (1 ml), og tilsett propilenoksid (2 ml). Rør blandingen ved romtemperatur over natten. Dekanter løsemidlet, vask resten med eter og tørk med en Ar-strøm for å gi tittelforbindelsen (12 mg, 85%) som et hvitt fast stoff.
[a]D= -25,0 (c = 0,80 mg/ml, H20).
Fremstiling 62
( 1 S, 2R, 5S, 6S)- 2- amino- 6- fluor- bicyklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre
Ved å begynne med en løsning av isomer B i fremstilling 60, ble tittelforbindelsen fremstilt idet vesentlige som i fremstilling 61.
[a]D= 21,7 (c = 0,46 mg/ml, H20).
Fremstilling 63
Etyl ( 6SV4- tiabicvklor3. 1. 01heks- 2- en- 6- karboksvlat
En 3-halset, 5 liter rundkolbe utstyrt med rør, termokobling og teflontilsetningsrør, og N2-innløp ble tilsatt 2000 ml tiofen (d = 1,05 g/ml, 25,0 mol ved begynnelsen og økende til 45 mol ved tilsetning av etyldiazoacetatløsning i tiofen, 17,1 ekv. basert på total tilsetning av etyldiazoacetat og ikke korrigert for potensialet for EDA, 19,0 ekv. basert på potensialkorrigert etyldiazoacetat). Til dette ble det tilsatt under N20,968 g Rh2(oktanoat)4(1,24 mmol, 0,0472 mol-% basert på g etyldiazoacetat ikke korrigert for potensiale, 0,052 mol-% basert på mol ren etyldiazoacetat, Johnson Mathey: Lot No. 059255001). Suspensjonen varmes til 46°C og røres ved 46°C i 10 minutter for å bevirke oppløsning til en grønn løsning. Til løsningen tilsettes, ved positiv fortrengnings-pumpe, en løsning av 300 g etyldiazoacetat (90% ren, 2,63 mol, 2,37 mol pura, 1,00 ekv., Aldrich: Lot No. 17603PI) løst i 1600 ml tiofen. Tilsetningshastigheten er slik at totaltilsetningstiden blir 8 timer; den sakte tilsetningshastigheten undertrykker dannelse av maleatet og fumaratetylestere. Når etyldiazoacetat ikke lenger er igjen (ca. 30 minutter), ble den mørke gulaktige reaksjonsblandingen (3,985 g) avkjølt i 23°C. Reaksjonsblandingen splittes i porsjoner og den største porsjonen (3,240 g av 3,985 g totalt = 81,3%) blir direkte konsentrert til en olje. Det urene produktet passeres gjennom en tør-ket filmdestillasjonsapparatur ved 1,5 torr og 23°C for å avgasse produktet og fjerne restmengde av tiofen. Produktet blir deretter destillert ved 120°C og 1,3 torr. Tittelforbindelsen (matt gul) blir samlet opp i to fraksjoner, 155,0 g og 32,2 g. Analyse ved HPLC bestemmer potens på 78% og 76% av de to lottene respektivt. Krystallisering av destillatet fra blandingen ovenfor utføres ved oppløsning i metanol (2 ml pr. 1 g destil lat) og avkjøling til -10°C, hvorved løsningen eventuelt sås hvis krystallvekst ikke observeres. Idet krystallvekst har avtatt, blir blandingen ytterligere avkjølt til -45°C og rørt i 2-3 timer, filtrert og vasket med kald (-45°C) metanol (1 x 1 ml pr. 1 g destillat). Materialet tørkes i vakuum ved 24°C for å tilveiebringe tittelforbindelsen som et off-white fast stoff i 80-85% utvinning og >98% potens.
Fremstilling 64
Etyl ( 4S. 6SV4- hvdroksv- 2- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 6- karboksvlat
Til en løsning av etyl (6S)-4-tiabicyklo[3.1.0]heks-2-en-6-karboksylat (22,2 g, 131 mmol) i 136 ml tetrahydrofuran under nitrogen og ved 0°C ble det tilsatt boran-THF-kompleks (98 ml, 98 mmol) i løpet av 15-20 minutter. Etter røring ved 0°C i 30 minutter ble reaksjonsblandingen varmet til 15°C og rørt til fullstendig reaksjon med HPLC (1,5-2 timer). Reaksjonsblandingen avkjøles til 0°C og overføres i løpet av 10-15 minutter til 111 ml forhåndsavkjølt (0°C) IN pH 7 bufferløsning mens temperaturen holdes ved
0°C. Til blandingen blir det tilsatt natriumperborat monohydrat (15,6 g, 157 mmol) som et fast stoff i fem porsjoner slik at temperaturen holdes under 20°C. Løsningen varmes til romtemperatur og røres i 1 time fulgt av tilsetning av 222 ml vann. Etter røring i 2 timer, blir peroksidene reagert ved tilsetning av natriumtiosulfatpentahydrat (9,7 g) opp-løst i 24 ml vann fulgt av røring i 10 minutter. Blandingen ekstraheres som etylacetat (2 x 222 ml). De kombinerte organiske ekstraktene vaskes med mettet vandig natriumbikarbonat (lx 222 ml) fulgt av saltvann (lx 222 ml) og konsentreres i vakuum til tørr-het. Det urene produktet løses i 1,2-dikloretan (1 ml pr.l g uren olje) og tilsettes en sili-kagelkolonne (4 g silikagel pr. 1 g uren oljeslurry og pakkes i 15% etylacetat-heptan). Kolonnen elueres med 15% etylacetat-heptan til produktet er synlig med TLC, hvorved løsemidles svitsjes til 50% etylacetat-heptan. Alle fraksjoner som inneholder tittelproduktet kombineres og konsentreres i vakuum til en olje. Totalutbytte er i 55-65% området.
Fremstilling 65
Etyl ( 6S)- 4- okso- 2- tiabicyklor3. 1 . Olheksan- 6- karboksylat
Til en løsning av dimetylsulfoksid (33,4 ml, 471 mmol) i 194 ml metylenklorid ble det ved -70°C sakte tilsatt en løsning av trifluoreddiksyreanhydrid (33,2 ml, 235 mmol) i 73 ml metylenklorid i løpet av 30 minutter (temperaturen holdes under -66°C). Etter røring i 20 minutter, blir en løsning av etyl (4S,6S)-4-hydroksy-2-tiabicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (34,1 g, 181 mmol) i 194 ml metylenklorid tilsatt i løpet av 60 minutter slik at temperaturen holdes under -60°C. Etter røring i 1 time, blir reaksjonsblandingen behandlet med trietylamin (75,7 ml, 543 mmol) i løpet av 35 minutter slik at temperaturen holdes under -50°C. Reaksjonsblandingen røres i ytterligere 1 time hvorved kjølebadet fjernes og 400 ml 2N saltsyre tilsettes. Etter oppvarming til 0°C, blir sjiktene separert og det organiske sjiktet vasket med 2N saltsyre (1 x 300 ml), IN vandig natriumbikarbonat (1 x 670 ml) og vann (1 x 300 ml) fulgt av tørking over natriumsulfat, filtrering og konsentrering i vakuum til en rød olje som størkner etter henstand. Det urene produktet til-føres en silikagelpute (2 g pr. 1 g utgangsalkohol pakket med metylenklorid) og eluert med metylenklorid (200-300 ml). Alle fraksjoner som inneholder produkt samles og konsentreres for å tilveiebringe tittelforbindelsen som et oransje/brunt fast stoff. Typiske korrigerte utbytter er i området 85-90%. Fremstilling 66 ( 6S, llS)- 8, 10- diokso- 2- tiaspirorbicvklor3. 1. 01heksan- 4, 5'- imidazolidin1- 6-karboksylsyre
Ammoniumkarbonat (2,46 g, 25,6 mmol) og kaliumcyanid (0,817 mg, 12,5 mmol)
kombineres i 19,9 ml metanol og røres i 30 minutter. Blandingen behandles med en løs-ning av etyl (6S)-4-okso-2-tiabicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (2,39 g, 12,8 mmol) i 19,9 ml metanol og reaksjonsblandingen varmes til 30°C og røres i 23 timer. De flyktige forbindelsene fordampes og resten løses i 2,75N natriumhydroksid (13,1 ml) og røres i 1
time. Etter fortynning med 13,1 ml vann, blir pH redusert til 3,1 med konsentrert saltsyre og blandingen blir eventuelt sådd med (6S,1 lR)-8,10-diokso-2-tiaspiro[bicyklo[3.1.0]heksan-4,5'-imidazolidin]-6-karboksylsyre. pH reduseres til 1,0 og suspensjonen avkjøles til 0°C og røres i 1,25 timer. Et gyldenbrunt fast stoff samles opp, vaskes med kaldt vann (2,3 ml og 0,8 ml), og tørkes over natten i vakuum ved 40°C for å gi 2,00 g (55% korrigert for renhet) av (6S,1 lR)-8,10-diokso-2-tiaspiro[bicyklo[3.1.0]heksan-4,5 '-imidazolidin]-6-karboksylsyre. Filtratet fortynnes med 50 ml etylacetat og behandles med 18 g natriumklorid. Etter røring i 15 minutter
blir sjiktene separert og det vandige sjiktet ytterligere vasket med etylacetat (2 x 50 ml). De kombinerte organiske ekstraktene tørkes med natriumsulfat, filtreres og konsentreres i vakuum til en slurry (ca. 5 ml) til hvilken det tilsettes tert-butylmetyleter (25 ml) fulgt av røring over natten. Det faste stoffet samles opp, vaskes med tert-butylmetyleter og tørkes i vakuum ved 40°C i 2 timer for å gi 0,64 g (10% korrigert for renhet) av tittelforbindelsen som en 1:1 blanding av diastereomere hydantoiner. Den andre innhøsting-en av hydantoiner kombinert med den første innhøstingen tas med til neste trinn.
Til en slurry av racemisk syre (15 g, 65,7 mmol, ca. 6:1 forhold av diastereomere hydantoiner) i 300 ml etanol og 75 ml vann tilsettes (R)-fenylglycinol (9,0 g, 65,7 mmol). blandingen varmes til ca. 80°C for å bevirke oppløsning. Den mørke løsningen avkjøles sakte og presipitasjon observeres ved 40-45°C. Slurryen blir ytterligere avkjølt til 0°C og holdt i 1-1,5 timer. Det faste stoffet samles opp, vaskes (med røring) med 4:1 etanol: vann (1 x 60 ml, forhåndsavkjølt til 0°C) og tørkes i vakuum ved 65°C i 12-24 timer. Typiske utbytter av oppløst salt er i 37-45% området med >98% de og >98% ee observert. Det oppløste saltet løses i 6 volum (ml pr. g) vann fulgt av behandling med 1,1 ekv. kons. HC1. Slurryen avkjøles til 0°C og røres i 1 time fulgt av filtrering, rensing med 1 volum kaldt vann og tørking i vakuum ved 60°C. Typiske utbytter av tittelforbindelsen er >90% med % de og % ee >99%.
Fremstilling 67
( 6S. 11 SV2. 2. 8. 10- tetraokso- 2- tiaspirorbicvklor3. 1. 01heksan- 4. 5 '- imidazolidinl- 6-karboksylsyre
Til en blanding av 6,8 ml vann, 0,7 ml 50% vandig natriumhydroksid og 186 mg (0,74 mmol) tungstinsyre tilsettes (6S,llS)-8,10-diokso-2-tiaspiro[bicyklo[3.1.0]heksan-4,5'-imidazolidin]-6-karboksylsyre (3,4 g, 14,9 mmol). Den resulterende løsningen varmes til 50°C og behandles med 35% hydrogeneroksid (7,7 ml, 74,5 mmol) sakte i løpet av 66 minutter. Reaksjonsblandingen røres deretter ved 47-48°C i 5 timer, fulgt av avkjøling til 0°C, filtrering over en tynn celitpute og rensing med kaldt vann (1x2 ml). Filtratet varmes til 50°C og behandles med konsentrert saltsyre til pH = 1,5. Slurryen avkjøles til romtemperatur og røres over natten. Etter avkjøling til 0°C blir slurryen filtrert, vasket med kaldt vann (2x2 ml) og vakuumtørket ved 55°C til konstant vekt, som ga 3,19 g (82%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
[a]<25>D-48.6 (c, 1.19, 1 N NaOH).
mp 275°C (grå), 295 °C (brun).
500 MHz<]>H NMR (DMSO-^) 513.15 (br s, 1H), 10.99 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 3.85 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 3.74 (dd, 1H, J = 7.0, 4.0 Hz), 3.03 (d, 1H, J = 15.5 Hz), 2.80 (dd, 1H, 7.0, 4.0 Hz), 2.39 (t, 1H, J = 4.0 Hz).
<13>C NMR (125 MHz, DMSO-c/tf) 5 174.39, 169.87,156.35, 62.67, 52.59,44.16, 31.69, 21.92; FTIR (KBr) 3317 (s), 3250 (s), 3211 (s), 3086 (w), 1791 (s), 1742 (s), 1713 (s), 1327 (s), 1192 (s), 1140 (s) cm'<1>.
Analyse beregnet for C8H8N206S: C, 36.93; H, 3.10; N, 10.77. Funnet: C, 36.76; H, 3.07; N, 10.60.
Fremstilling 68
( 1 R. 4S. 5S. 6S)- 4- Amino-( 2- sulfonylbicvklor3. 1. 01heksan)- 4. 6- dikarboksvlsvre
Til en rustfri stål Parr-reaktor tilsettes (6S,1 lS)-2,2,8,10-tetraokso-2-tiaspiro[bicyklo[3.1.0]heksan-4,5'-imidazolidin]-6-karboksylsyre (2,50 g, 9,60 mmol) og 2N natriumhydroksid (24,0 ml, 48,0 mmol). Etter at blanidngen har blitt varmet til 95 °C og rørt i 21 timer blir blandingen avkjølt til romtemperatur og behandlet med aktivt kull (1,25 g). Blandingen filtreres gjennom celitt og filtratet konsentreres til 17 g og fortynnes med H20 for å gi 24 g. pH reduseres til 6,5 ved anvendelse av kons. HC1 og blandingen varmes til 62°C. Etter reduksjon av pH til 2,5 ved anvendelse av kons. HC1, skjer krystallisering. Suspensjonen avkjøles til 30°C før pH blir justert til 1,7 og tempe- råturen redusert til 5°C. Etter at suspensjonen er holdt ved denne temperaturen i 18 timer, blir det faste stoffet samlet opp og vasket med kald H2O (2 x 2,9 ml). Det hvite faste stoffet tørkes i vakuum ved 45°C for å gi tittelforbindelsen (1,81 g, 80%). Tittelforbindelsen oppslemmes i 10 volumenheter vann og varmes til 85°C i 3-4 timer, avkjø-les til romtemperatur og røres i 2-3 timer, filtreres og vaskes med vann (lxl volum). Utvinning >95%.
Fremstilling 69
Etyl ( 6S)- 2- oksobicvklor3. 1 . Olheksan- 6- karboksylat
Til en suspensjon av (etoksykarbonylmetyl)dimetylsulfoniumbromid (134 g, 585 mmol) i 486 ml acetonitril ble det ved romtemperatur tilsatt 87,4 ml (585 mmol) 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-en dråpevis i løpet av 15 minutter. Etter røring i 1 time, blir den gule blandingen behandlet med 40 g (487 mmol) 2-cyklopenten-l-on i løpet av 10 minutter. Blandingen røres over natten hvoretter 480 ml tert-butylmetyleter tilsettes, fulgt av vasking med IN saltsyre (1 x 240 ml). Det vandige sjiktet vaskes med tert-butylmetyleter (lx 240 ml). De kombinerte organiske ekstraktene vaskes med saltvann (lx 400 ml), tørkes (MgSC>4), filtreres og konsentreres i vakuum for å gi uren etyl (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat som et oransje fast stoff (84,8 g). Det urene materialet renses ved destillasjon (~138°C, 10 mm Hg), fulgt av oppslemming av det størknede destillatet i heptan, filtrering og tørking.
Fremstilling 70
( ± ) ( 6S)- 2- oksobicvklor3. 1. 01heksan- 6- karboksvlsvre
Til en løsning av uren etyl (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (30,2 g, 180 mmol, ukorrigert) i 30 ml etanol ble det ved romtemperatur tilsatt 89 ml (178 mmol) 2N natriumhydroksid. Etter røring i 80 minutter, blir reaksjonsblandingen vasket med tert-butylmetyleter (1 x 90 ml) og det vandige sjiktet behandlet med kons. saltsyre (18 ml) for å nå pH = 1,0. Blandingen behandles med 15 g natriumklorid fulgt av vasking med etylacetat (3 x 90 ml). De kombinerte organiske ekstraktene tørkes (Na2S04), filtreres, og konsentreres i vakuum for å gi 23,8 g (94%, ukorrigert) av tittelforbindelsen som et off-white fast stoff.
Fremstilling 71
(+) ( 6S)- 2- oksobicvklor3. 1. 01heksan- 6- karboksvlsvre N- benzyl- q- metylbenzylaminsalt
Til en løsning av uren (±) (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylsyre (11,9 g, 84,9 mmol, antatt 100% potens) i 119 ml 6:1 etylacetatetanol ved refluks blir det tilsatt 18 g (85,1 mmol) (S)-N-benzyl-a-metylbenzylamin. Etter oppløsning, blir blandingen avkjølt eventuelt fulgt av såing ved 52°C. Etter avkjøling til romtemperatur og røring i ytterligere 13,5 timer, blir krystallene samlet opp og vasket med 6:1 etylacetat:etanol (2 x 48 ml). Tørking i vakuum ga 10,8 g (36%, 77% de) av det oppløste saltet som et fast stoff.
de av saltet bestemmes ved kiral GC-analyse av den avledede metylesteren fremstilt
som følger: 150 mg oppløst salt løses i 5 ml metylenklorid og vaskes med IN svovelsyre (2 x 1 ml). Det organiske sjiktet tørkes, filtreres, fortynnes med 2 ml metanol, og behandles med 1 ml 2M trimetylsilyldiazometan i heksan. Etter røring ved romtemperatur i 15 minutter, blir blandingen konsentrert i vakuum for å gi metylesteren egnet for kiral GC-analyse. GC-betingelser: 30 m x 0,25 mm x 0,25 u (5-DEX 325-kolonne, 140°C ovntemperatur, heliumbærergass @ 1 ml/min., FID-deteksjon ved 250°C, 1 ul splitt 1:100, prøve @ 1 mg/ml i metylenklorid.
Fremstilling 72
Etyl ( 6S)- 2- oksobicvklor3. 1 . Olheksan- 6- karboksylat
Til en suspensjon av 46,3 g (132 mmol) (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylsyre N-benzyl-a-metylbenzylaminsalt i 200 ml etylacetat tilsettes 198 ml (198 mmol) 2N natriumhydroksid. Etter god sammenblanding, blir sjiktene separert og det vandige sjiktet vaskes med etylacetat (1 x 200 ml). Det vandige sjiktet behandles med 18 ml (211 mmol) i kons. saltsyre og 100 g natriumklorid. Blandingen røres i 30 minutter fulgt av vasking med etylacetat (2 x 200 ml). De kombinerte organiske reaksjonene tørkes (MgSCu), filtreres og konsentreres i vakuum for å gi 18,3 g (99%) av den oppløs-te syren [(+) (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylsyre] som et hvitt fast stoff.
Deretter blir 10 g (71 mmol) urent oppløst syreprodukt fra ovenfor, løst i 42 ml etanol og behandlet med 4 ml (71 mmol) kons. svovelsyre dråpevis. Blandingen varmes til 45°C og røres i 75 minutter. Etter avkjøling til romtemperatur, blir 42 ml tilsatt sammen med 20 ml etylacetat og 12 g natriumbikarbonat. Etter røring i flere minutter, blir blandingen vasket med etylacetat (2 x 50 ml). De kombinerte organiske reaksjonene tørkes (MgSCu), filtreres og konsentreres i vakuum for å gi 11 g (92%) av uren etyl (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat som et hvitt fast stoff. Krystallisasjon fra 6: l/heptan:tert-butylmetyleter (3,5 m 1 pr. g substrat) gir tittelforbindelsen i ca. 80% utbytte og >98% ee som bestemmes ved kiral GC-analyse.
Fremstilling 73
( 6S)- 6-( etoksvkarbonvl) bicvklor3. 1. 01heks- 2- en- 2- vl acetat
En blanding av etyl (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (380,1 g, 2,26 mol) og svovelsyre (18M, 6,3 ml, 0,11 mol) i isopropenylacetat (2,26 1) varmes til refluks ved anvendelse av en Dean-Stark-apparatur i 2,5 timer, hvorved GC-analyse avdekket en 9:1 blanding av tittelforbindelsen versus etyl (6S)-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat. Etter fjerning av 950 ml løsemiddel ved destillasjon i løpet av 1 time, viser GC at produkt/utgangsmaterialforholdet er 17:1. Ytterligere isopropenylacetat (900 ml) og kons. H2SO4(3,15 ml) tilsettes, og blandingen røres til refluks i ytterligere 15 timer, hvorved GC viser 27:1 produkt/utgangsmateriale. Etter ytterligere 1,35 1 løsemiddel er destillert fra, blir blandingen avkjølt til romtemperatur før den fortynnes med MTBE (2 1), H2O (250 ml) og vandig mettet NaHCC>3 (600 ml). Sjiktene separeres og det organiske sjiktet vaskes med saltvann (400 ml). De kombinerte vandige sjiktene ekstraheres med MTBE (400 ml) og de kombinerte organiske sjiktene tørkes (Na2S04), filtreres og konsentreres til en mørk rød/brun olje (540 g). Den urene oljen splittes i to like porsjoner og filtreres gjennom en pute med flash Si02(713 g for hver batch), eluert med 10:l/heptan:etylacetat. De produktinneholdende fraksjonene fra begge pluggene kombineres og konsentreres for å gi tittelforbindelsen som en gul olje (460 g, 97%; 90% korrigert for løsemiddel ved NMR). Kolonnekromatografi på silikagel eluert med etylacetat/heksan (1:5) gir en analyttisk ren prøve av tittelforbindelsen som en farveløs olje.
[a]<25>D+185 (c 1.48, CHC13).
SOOMFlVHNMRtCDClOSS.^-S.lStm, lH),4.12(q, 1H, J = 7.0 Hz), 4.11 (q, 1H, J = 7.0 Hz), 2.74-2.69 (m, 1H), 2.48-2.43 (m, 2H), 2.22-2.19 (m, 1H), 2.16 (s, 3H), 1.39 (dd, 1H, J = 2.5, 2.5 Hz), 1.25 (t, 3H, J = 7.0 Hz).
<I3>C NMR (125 MHz, CDC13) 5 173.37, 169.01, 152.26, 111.56, 61.28, 32.47, 32.40, 29.72, 24.97,21.67, 14.95.
FTIR (CHC13) 3026 (m), 2985 (m), 1724 (s), 1272 (s), 1187 (s) cm"<1>.
ES HRMS beregnet for CnHi8N04[M+NH4]<+>228.1236, funnet 228.1252.
Fremstilling 74
Etvl( 3S. lR. 6R)- 7- oksa- 5- oksotricvklor4. 1. 0. 0<2. 4>lheptan- 3- karboksvlat
En blanding av (6S)-6-(etoksykarbonyl)bicyklo[3.1.0]heks-2-en-2-yl acetat (212,2 g, 1,01 mol) og 2,3-diklor-5,6-dicyano-l,4-benzoquinon (252,0 g, 1,11 mol) i 2,02 11,4-dioksan varmes til refluks og røres i 17 timer, hvorved GC-analyse viser fullstendig omdanning til etyl (6S)-4-oksobicyklo[3.1.0]heks-2-en-6-karboksylat. Blandingen av-kjøles til romtemperatur og fortynnes med THF (564 ml). Etter avkjøling av blandingen til 80°C, blir l,8-diazabicyklo[5.4.0]undek-7-en (377 ml, 2,52 mol) tilsatt i løpet av 30 minutter slik at reaksjonstemperaturen holdes under 10°C. Blandingen blir deretter av-kjølt til 5°C og tert-butylhydroperoksid (70 vekt-% i vann, 210 ml, 1,51 mol) tilsettes i løpet av 50 minutter, mens reaksjonstemperaturen holdes under 9°C. Etter at blandingen er rørt i ytterligere 50 minutter, blir reaksjonsblandingen filtrert og den brune kaken vaskes med MTBE (2 x 800 ml). Filtratet tilsettes 1,20 1 IN HC1 og, etter god blanding, blir sjiktene separert. Det organiske sjiktet vaskes sekvensielt med mettet vandig NaH-CO3(1,20 1), vandig mettet Na2S2C«3 (1,20 1), og saltvann (600 ml). Etter at løsningen er tørket (Na2S04), blir den konsentrert til en oransje oppslemming som fortynnes med 200 ml heptan. De flyktige forbindelsene fordampes for å et oransje fast stoff til triture- res med 350 ml heptan og filtreres, filterkaken vaskes med ytterligere heptan (2 x 175 ml). Det oppsamlede faste stoffet tørkes i vakuum ved romtemperatur i 17 timer for å gi 138,7 g (75%) av tittelforbindelsen som et brunt-gult fast stoff. Krystallisering fra MTBE gir en analyttisk ren prøve av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
[a]<25>D+2.3 (c 1.20, CHC13), +8.4° (c 1.28, aceton); smp. 129-130°C.
500 MHz<]>H NMR (CDCI3) 5 4.16 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 3.99 (t, 1H, J = 2.5 Hz), 3.24-3.23 (m, 1H), 2.96-2.94 (m, 1H), 2.21- 2.19, (m, 1H), 2.08 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.26 (t, 3H, J = 7.0 Hz).
<I3>C NMR (125 MHz, CDC13) 5 201.19,168.84, 62.42, 57.04, 51.25, 31.16, 30.54,29.60, 14.79.
FTIR (KBr) 3087 (w), 3059 (w), 3051 (w), 3007 (w), 2993 (w), 2963 (w), 1753 (s), 1719 (s), 1273 9s), 1191 (s), 1009 (m), 848 (m) cm'<1>.
Analyse beregnet for C9Hi0O4: C, 59.34; H, 5.53. Funnet: C, 59.32; H, 5.43.
Fremstilling 75
Etyl ( 6S)- 4- oksobicvklor3. 1. 01heks- 2- en- 6- karboksvlat
Selv om tittelforbindelsen typisk anvendes in situ i fremstilling av etyl (3S,lR,6R)-7-oksa-5-oksotricyklo[4.1.0.0<2.4>]heptan-3-karboksylat, blir en analyttisk ren prøve av tittelforbindelsen oppnådd ved filtrering av reaksjonsblandingen som inneholder denne forbindelsen og fordamping av filtratet for å gi et brunt fast stoff. Det faste stoffet re-suspenderes i etylacetat, suspensjonen filtreres, og filtratet konsentreres. Kromatografi av resten på silikagel med etylacetat/heksan (1:5 til 1:2) gir tittelforbindelsen, som rekrystalliseres fra varm etylacetat og kromatograferes igjen ved anvendelse av de tidligere betingelsene for å gi tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
[a]<25>D-268 (c 1.17, CHC13).
Smp. 97-98°C.
500 MHz<!>H NMR (CDCI3) 5 7.60 (ddd, 1H, J = 5.5,2.5, 0.75 Hz), 5.73 (dd, 1H, J = 5.0, 0.5 Hz), 4.15 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 2.96-2.94 (m, 1H), 2.63-2.61 (m, 1H), 2.60 (t, 1H, J = 2.5 Hz), 1.26 (t, 3H, J = 7.0 Hz).
<I3>C NMR (125 MHz, CDCI3) 5 203.96, 168.61, 160.33, 130.29, 62.03,46.53, 30.72, 29.62, 14.82.
FTIR (KBr) 3080 (m), 2996 (m), 1717 (s), 1695 (s), 1266 (s), 1291 (m), 1191 (s), 1179 (s) cm"<1>.
Analyse beregnet for C9H10O3: C, 65.05; H, 6.07. Funnet: C, 64.97; H, 6.01.
Fremstilling 76
Etyl ( 4S, 6S)- 4- hvdroksv- 2- oksobicyklor3. 1 . Olheksan- 6- karboksylat
En rør løsning av etyl (3S,lR,6R)-7-oksa-5-oksotricyklo[4.1.0.0<2,4>heptan-3-karboksylat (36,3 g, 0,20 mol) i 667 ml aceton behandles sekvensielt med natriumacetat (36,1 g, 0,44 mol), natriumjodid (65,8 g, 0,44 mol) og eddiksyre (27,5 ml, 0,48 mol). Blandingen røres ved 30°C i 15 timer før acetonet fjernes i vakuum som gir et brunt fast stoff som fordeles mellom etylacetat (323 ml) og H20 (232 ml). Sjiktene separeres og det vandige sjiktet vaskes med etylacetat (3 x 323 ml). De kombinerte organiske fraksjonene vaskes sekvensielt med vandig mettet Na2S203(364 ml) og vandig mettet NaHCC>3 (364 ml). Hver vandig fraksjon tilbakeekstraheres med etylacetat (323 ml). De kombinerte organiske fraksjonene tørkes (NaiSCu), filtreres og konsentreres til en rød-brun olje som løses opp i 300 ml etanol. Fordamping av de flyktige forbindelsene gir tittelproduktet som en rød-brun olje (41,8 g, 114%). Kolonnekromatografi på silikagel ved anvendelse av etylacetat/heksan (1:2 til 2:1) fulgt av krystallisering fra varm MTBE gir en analyttisk ren prøve av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
[a]<25>D+3.9 (c 1.39, CHC13), +6.0° (c 1.69, MeOH).
Smp. 81-82°C.
500 MHz<]>H NMR (CDCI3) 5 4.60 (br s, 1H), 4.16 (q, 2H, J = 7.0 Hz), 2.66 (dd, 1H, J = 5.0,4.0 Hz), 2.42-2.40 (m, 1H), 2.34 (dd, 1H, J = 19.0, 5.5 Hz), 2.24, (br d, 1H, J = 3.0 Hz), 2.07 (d, 1H, J = 19.0 Hz), 1.91 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.27 (t, 3H, J = 7.0 Hz).
<I3>C NMR (125 MHz, CDC13) 5 209.74, 170.07, 69.04, 62.32, 43.47, 36.89, 34.95, 26.14, 14.83.
FTIR (CHCI3) 3607 (w), 3447 (w), 3025 (m), 2985 (w), 1739 (s), 1728 (s), 1270 (s).1187 (s) cm'1.
Analyse beregnet for C9H12O4: C, 58.69; H, 6.57. Funnet: C, 58.48; H, 6.63.
Fremstilling 77
Etvl24(( lRH- fenvletvDammo1( 2S, 4^^ 6- karboksvlat
Til en løsning av etyl (4S,6S)-4-hydroksy-2-oksobicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (68,2 g korrigert til 60,0 g på grunn av etanolkontaminering, 0,326 mol) i etanol (332 ml) og H20 (332 ml) blir det tilsatt (R)-metylbenzylamin (46,3 ml, 0,359 mol) og NaCN (20,8 g, 0,424 mol), mens temperaturen ble holdt mellom 20 og 25°C. Kons. HC1 (35,3 ml, 0,424 mol) blir deretter tilsatt i løpet av 10 minutter mens den ovenfor angitte reaksjonstemperaturen holdes. Den mørke brune blandingen røres i 1 time før den eventuelt sås med tittelforbindelsen for å initiere krystallisering. Suspensjonen røres i 1 time før H20 (664 ml) tilsettes. Etter suspensjon røres i ytterligere 1,75 timer, blir tittelforbindelsen samlet opp som et gyldenbrunt fast stoff som vaskes med H20 (332 ml). Luft blir passert gjennom våtkaken og filtrert i 25 minutter før materialet anvendes direkte i ni-trilhydrolysen (våtkakevekt 145 g). Selv om tittelforbindelsen raskt nedbrytes i løpet av vakuumtørking, ved temperaturer større enn 25°C, er det mulig å tørke små prøver i vakuum ved romtemperatur uten nedbryting.
[a]<25>D+81.6 (c 1.18, CHCb).
Smp. 70-72 °C (dekomp.).
500 MHz ]H NMR (CDCI3) 5 7.39 (d, 2H, J = 7.0 Hz), 7.26-7.16 (m, 3H), 4.31 (d, 1H, J = 5.0 Hz), 4.22 (q, 1 H, J = 6.5 Hz), 3.93-3.85 (m, 2H), 2.33 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 2.01 (brt, 1H, J = 4.5 Hz), 1.64 (dd, 1H, J= 15.0, 5.0 Hz), 1.55-1.54 (m, 1H), 1.40-1.39 (m, 4H), 1.17 (t, 3H, J = 7.0Hz).
<I3>CNMR(125 MHz, CDC13) 5 170.54,144.85,128.61,127.45,127.38, 121.88, 72.17, 61.02, 60.66, 56.57, 45.82, 36.70, 34.45, 25.83,21.75,14.22.
FTIR (KBr) 3568 (m), 3489 (m), 3285 (m), 2923 (m), 2228 (w), 1712 (s), 1298 (m).1197(m)cm<-1>.
FAB HRMS beregnet for Ci8H23N203[M+H]<+>315.1709, funnet 315.1704.
Fremstilling 78
2- f(( lRV 1 - fenvletvDaminoK 1 S, 4S, 6R)- 4- hvdroksvbicyklor3, 1, 01heksan- 2, 6-dikarboksylsyre
Til en løsning av etyl 2-[((lR)-l-fenyletyl)amino](2S,4S,6R)-2-cyano-4-hydroksybicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylatvåtkake (0,326 mmol teoretisk) i DMSO (220 ml) blir det sakte tilsatt 30% H202(44,5 ml, 0,426 mol), mens temperaturen ble holdt under 27°C. Temperaturen reduseres til 19°C og 5N NaOH (52,3 ml, 0,262 mmol) blir forsiktig og sakte tilsatt først i løpet av 15 minutter mens temperaturen ble holdt mellom 22 og 27°C. Et isbad med passende kapasitet kreves for å håndtere den ekso-terme reaksjonen. Etter at den brune heterogene blandingen er rørt i 20 minutter, ved det ovenfor angitte temperaturområdet, viser HPLC at utgangsmaterialet har blitt konsumert for å gi et amidintermediat. Etter at reaksjonen røres i ytterligere 1,5 timer, blir Na2SC«3 (13,7 g, 0,109 mol) og blandingen røres i 15 minutter hvorved blandingen tester nega-tivt på peroksider ved stivelses-jod-papir. Etterfølgende tilsetning av 3N NaOH (291 ml, 0,873 mol), blir blandingen varmet ved 85°C og røres i 18 timer. Den homogene brune blandingen avkjøles til 30°C og kons. HC1 tilsettes for å redusere pH til 3,6 mens temperaturen holdes mellom 30 og 35°C. Etter krystalliseringen begynner ved pH 3,6, blir suspensjonen rørt i 15 minutter før pH blir redusert til 2,5. Etter at blandingen er rørt i ytterligere 10 minutter, blir den avkjølt til 2°C og røres i 2 timer før et grått faststoff samles opp og vaskes med kald H20 (400 ml) og EtOH (300 ml). Det oppsamlede faste stoffet tørkes i vakuum ved 45°C i 17 timer for å gi 42,9 g (43% fra starten av fremstilling 18) av tittelforbindelsen. For å forbehandle tittelforbindelsen fremstilt i reaksjonen, blir den utvunnet fra morluten på følgende måte. Etanoldelen til morluten fordampes og resten kombineres med den vandige delen av morluten. Etterfølgende destillasjon av H20 (485 ml) under redusert trykk, blir pH til morluten justert til 12,9 med 70 ml 5N NaOH og 5 ml 50% NaOH. Etter vasking av løsningen med n-BuOH (3 x 800 ml) blir pH justert til 2,5 med kons. HC1 og løsningen konsentreres. Resten fortynnes med EtOH (100 ml) og de flyktige forbindelsene fordampes (2x). Resten fortynnes med EtOH (150 ml) og et gyldenbrunt faststoff som inneholder ytterligere tittelforbindelse og salter vaskes med EtOH (75 ml) og tørkes ved 50°C i vakuum til en vekt på 102 g. Begge innhøs-tingene var tittelforbindelsen anvendes i etterfølgende forestring.
[a]<25>D+4.5 (c 1.41,1 N NaOH).
Smp. 220°C (grå fra off-white), 280°C (brun).
500 MHz ]H NMR (D20, KOD) 5 7.39 (d, 2H, J = 7.0 Hz), 7.19-7.04 (m, 5H), 3.92 (d, 1H, J = 5.0 Hz), 3.67 (q, 1H, J = 7.0 Hz), 1.76 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 1.54-152 (m, 1H), 1.37 (dd, 1H, J= 15.0, 5.0 Hz), 1.15 (d, 3H, J = 6.5 Hz), 1.12 (dd, 1H, J = 6.0, 3.0 Hz), 0.92 (t, 1H, J = 3.3 Hz).
<I3>C NMR (125 MHz, D20, KOD) 5 185.82, 182.96, 148.01, 131.31,129.97,129.78, 74.99, 73.84, 58.78, 46.91, 38.05, 35.02, 27.34, 27.15.
FTIR (KBr) 3366 (m), 3072 (s), 2886 (s), 1696 (m), 1611 (m), 1560 (m), 1455 (m), 1377 (m), 1278 (m), 1202 (m), 1188 (m) cm'<1>.
Analyse beregnet for Ci6Hi9N05: C, 62.94; H, 6.27; N, 4.59. Funnet: C, 62.70; H, 6.21; N, 4.67.
Fremstilling 79
Etyl 2- IY( 1 R)- 1 - fenvletvl) aminoK2S. 4S. 6R)- 2- karbamovl- 4-hvdroksvbicvklor3. 1. 01heksan- 6- karboksvlat
Selv om tittelforbindelsen typisk anvendes in situ i fremstillingen av 2-[((lR)-l-fenyletyl)amino](2S,4S,6R)-4-hydroksybicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre, kan forbindelsen isoleres i seg selv med noe utbyttetap på grunn av ledsagende esterhydro-lyse i løpet av nitrilhydrolyse. Ved isoleringen blir nitrilhydrolysereaksjonsblandingen fordelt mellom CH2C12og H20 så snart etyl 2-[((lR)-l-fenyletyl)amino](2S,4S,6R)-2-cyano-4-hydroksybicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat er forbrukt. Etter at det organiske sjiktet blir tørket (MgS04) og konsentrert, blir resten renset med silikagelkolonnekro-matografi ved anvendelse av EtOAc/heksan (2:1) til EtOAc for å gi tittelforbindelsen som et hvitt skum.
[a]<25>D+61.3 (c 1.20, CHCb).
500 MHz<!>H NMR (CDC13) 5 7.32-7.20 (m, 5H), 7.19 (br d, 1H, J = 4.0 Hz), 5.49 (br d, 1H, J = 4.0 Hz), 4.88 (d, 1 H, J = 11.5 Hz), 4.24 (dd, 1H, J = 11.5, 6.0 Hz), 4.06-4.00 (m, 2H), 3.77 (q, 1H, J = 7.0 Hz), 2.21 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 2.18-2.15 (m, 2H), 1.71 (br s, 1H), 1.54 (dd, 1H, J = 14.5, 6.0 Hz), 1.38, (d, 3H, J = 6.5 Hz), 1.32 (t, 1H, J = 3.3 Hz), 1.24 (t, 3H, J = 7.0Hz).
<13>CNMR(125 MHz, CDC13) 5 180.42,171.47,146.05,128.97,127.43, 126.48, 73.16, 70.76, 61.08, 56.00,42.82, 35.97, 35.67,26.13,21.53,14.34.
FTIR (CHCI3) 3441 (m), 3345 (m), 2975 (w), 1725 (s), 1665 (s), 1288, 1186 (m) cm'<1>. Analyse beregnet for C18H24N2O4: C, 65.04; H, 7.28; N, 8.43. Funnet: H, 7.58; N, 8.32.
Fremstilling 80
Etvl2- r(( lRVl- fenvletvnamino1-( 2S. 4S. 6RV2-( etoksvkarbonvlV4-hvdroksvbicvkloD. 1 . Olheksan- 6- karboksylat
Til en suspensjon av 2-[((lR)-l-fenyletyl)amino](2S,4S,6R)-4-hydroksybicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (4 g, 13 mmol) i 48 ml etanol ble det ved romtemperatur tilsatt acetylklorid (11,2 ml, 157 mmol) via tilsetningstrakt slik at en forsiktig refluks ble opprettholdt. Den resulterende blandingen ble rørt i ytterligere 16 timer til refluks og etter avkjøling til romtemperatur ble den konsentrert i vakuum til en fast rest. Det faste stoffet ble behandlet langsomt med enløsningen av natriumbikarbonat (6,6 g) i 100 ml vann fulgt av vasking med etylacetat (2 x 100 ml). De kombinerte organiske sjiktene ble tørket (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum som ga 4,7 g (99%) av tittelforbindelsen som et fast stoff. Kolonnekromatografi på silikagel eluert med CH2Cl2/MeOH (95:5) fulgt av krystallisasjon fra Et20 ga analyttisk ren prøve av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
[a]<25>D+52.5 (c 1.30, CHCI3).
Smp. 73-74°C.
500 MHz<!>H NMR (CDCI3) 5 7.29-7.14 (m, 5H), 4.25 (dq, 1H, 11.0, 7.0 Hz), 4.18 (dd, 1H, J = 9.5, 5.5 Hz), 4.10 (dq, 1H, J = 11.0, 7.0 Hz), 3.92 (dq, 1H, J = 11.0, 7.0 Hz) 3.82 (dq, 1H, J = 11.0 Hz, 7.0 Hz), 3.67 (q, 1H, J = 7.0 Hz), 2.73 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 2.15-2.12 (m, 2H), 2.01-1.99 (m, 1H), 1.89 (dd, 1H, J = 6.0, 3.0 Hz), 1.61 (dd, 1H, J = 15.0, 6.0 Hz), 1.36 (t, 1H, J = 3.5 Hz), 1.33-1.30 (m, 6H), 1.18 (t, 3H, J = 7.0 Hz).
<I3>C NMR (125 MHz, CDCI3) 5 178.11,171.59,146.32,128.41,127.07, 126.85,73.33, 70.15, 62.07, 60.75, 56.66, 44.72, 36.78, 33.61, 26.24, 20.07, 14.37,14.23.
FTIR (KBr) 3492 (s), 3303 (m), 3055 (w), 2981 (w), 2896 (w), 1722 (s), 1705 (s), 1289 (m), 1251 (m), 1177 (m)cr<n1>.
Analyse beregnet for C20H27NO5: C, 66.46; H, 7.52; N, 3.88. Funnet: C, 66.42; H, 7.44; N, 3.92.
Fremstilling 81
Etvl2- r(( lRVl- fenvletvnaminoK2S. 4R, 6RV2-( etoksvkarbonvlV4-fluorbicvklor3. 1 . Olheksan- 6- karboksvlsyre
Til en løsning av etyl 2-[((lR)-l-fenyletyl)amino](2S,4S,6R)-2-(etoksykarbonyl)-4-hydroksybicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (59,0 g uren, 0,163 mol) i CH2C12(690 ml) ble det ved -20°C tilsatt Deoxo-Fluor® (45,1 ml, 0,245 mol) i løpet av 15 minutter mens temperaturen ble holdt mellom -15 og -20°C. Blandingen ble rørt i 20 minutter ved denne temperaturen og ved 0°C i 15 minutter før vandig 15% Na2CC>3(650 ml) ble sakte tilsatt mens temperaturen ble holdt under 10°C. Sjiktene ble separert og det vandige sjiktet tilbakeekstrahert med CH2CI2(150 ml). De kombinerte organiske sjiktene ble tørket (Na2SC«4) og konsentrert til en brun olje (73 g). Oljen ble renset med en silikagelpute (400 g) eluert med EtOAc/heptan (1:6) som ga tittelforbindelsen som en gul olje (49,7 g, 84%).
[a]<25>D+36.2 (c 1.30, CHCI3).
500 MHz ]H NMR (CDCI3) 5 7.29-7.14 (m, 5H), 5.22 (ddt, 1H, J = 8.0,4.5 Hz, JHF= 56.0 Hz), 4.16 (dq, 1H, J = 11.0, 7.0 Hz), 4.05 (dq, 1H, 11.0, 7.0 Hz), 3.96 (dq, 1H, 10.5, 7.0 Hz), 3.85 (dq, 10.5, 7.0 Hz), 3.66 (q, 1H, 6.5 Hz), 2.45 (dd, 1H, J = 14.0, 8.0 Hz), 2.16-2.12 (m, 1H), 1.95 (t, 1H, J = 3.5 Hz), 1.81 (dt, 1H, J = 3.5 Hz, JHF= 3.5 Hz), 1.51 (ddd, 1H, J = 14.0, 8.0 Hz, JHF= 22.0 Hz), 1.32 (d, 3H, J = 6.5 Hz), 1.27 (t, 3H, J = 7.0 Hz), 1.21 (t, 3H, J = 7.0 Hz).
<I3>CNMR(125 MHz, CDCI3) 5 175.29,171.66,146.21,128.45,127.03, 126.90, 92.65 (d, Jcf= 182 Hz), 68.68 (d, JCF= 4.9 Hz), 61.70, 60.92, 56.13, 38.60 (d, JCF= 23.0 Hz), 33.07 (d, JCF= 7.6 Hz), 32.23 (d, JCF= 22.0 Hz), 26.26,20.22 (d, JCF= 3.9 Hz), 14.41, 14.24.
FTIR (CHC13) 3028 (w), 2983 (w), 1724 (s), 1705 (s), 1293 (m), 1242 (m), 1190 (m), 1037 (m), 1013 (m) cm'<1>.
Analyse beregnet for C20H26FNO4: C, 66.10; H, 7.21; N, 3.85. Funnet: C, 66.02; H, 7.00; N, 3.95.
Fremstilling 82
lR, 2S, 4R, 5R, 6R- 2- amino- 4- fluorbicyklor3. 1. 0"| heksan- 2, 6- dikarboksylsvre hydroklorid
En blanding av etyl 2-[((lR)-l-fenyletyl)amino](2S,4R,6R)-2-(etoksykarbonyl)-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-6-karboksylat (68,4 g, 0,188 mol), kons. HC1 (15,7 ml, 0,188 mol) og 10% Pd/C (tørr, 13,7 g) i EtOH (400 ml) ble plassert under hydrogen (50 psi) i 18 timer. Katalysatoren ble filtrert fra og filtratet fordampet som ga tittelforbindelsen som et off-white skum (59,2 g, 106% korrigert til 97% p.g.a. EtOH-kontaminering). Krystallisering fra EtOAc/MTBE ga analyttisk ren prøve av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
[a]<25>D+55.6 (c 1.17, CHC13).
Smp. 86-88°C.
500 MHz ]H NMR (CDC13) 5 9.20 (br s, 2H), 5.50 (ddt, 1H, J = 8.0,4.5 Hz, JHF= 56.0 Hz), 4.31 (q, 1H, J = 7.0 Hz), 4.20-4.07 (m, 3H), 2.88 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 2.71 (dd, 1H, J = 14.5, 8.0 Hz), 2.48-2.43 (m, 2H), 2.16 (ddd, 1H, J = 14.5, 7.5 Hz, JHF= 22.0 Hz), 1.34 (t, 3H, J = 7.0 Hz), 1.25 (t, 3H, J = 7.0 Hz)
<I3>C NMR (125 MHz,CDCl3) 5 171.12,169.41, 91.94 (d, JCF= 189 Hz), 63.85, 63.66 (d, JCF= 3.8 Hz), 61.73, 34.55 (d, JCF= 26.4 Hz), 31.58 (d, JCF= 7.8 Hz), 30.80 (d, JCF= 24.1 Hz), 20.22, 14.31, 14.21.
FTIR (KBr) 3353 (m), 3173 (w), 2745 (m), 1729 (s), 1547 (m), 1294 (m), 1269 (m), 1195 (m), 1011 ( m) cm'\
Analyse beregnet for Ci2Hi8FN04: C, 48.74; H, 6.48; N, 4.74. Funnet: C, 48.80; H, 6.41; N, 4.76.
Fremstilling 83
lR. 2S. 4R. 5R. 6R- 2- amino- 4- fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6- dikarboksvlsvre
En løsning av 3N NaOH (251 ml, 0,753 mol) blir sakte tilsatt til lR,2S,4R,5R,6R-2-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre hydroklorid (59,2 g uren, 0,188 mol teoretisk), mens temperaturen ble holdt under 26°C. Etter røring av blandingen i 10 minutter, er den homogen. Blandingen ble rørt i 1,25 timer ved romtemperatur før pH sakte ble redusert til pH 2,8 ved anvendelse av kons. HC1 mens temperaturen ble holdt mellom 20 og 26°C. Ved pH 2,8 begynte blandingen å krystallisere og suspensjonen ble rørt ved denne pH i 10 minutter før pH ble redusert tril 2,1 med kons. HC1. Etter ytterligere 15 minutter med røring ble i-PrOH (67 ml) tilsatt og suspensjonen ble avkjølt til 0°C og rørt i 2 timer. Det faste stoffet ble samlet opp og vasket med 37 ml kald H^O/i-PrOH (4:1). Det oppsamlede faste stoffet tørkes i vakuum ved 40°C i 18 timer som ga tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (33,1 g, 87% fra starten av fremstilling 23).
Fremstilling 84
Gjenoppslemming av lR, 2S, 4R, 5R, 6R- 2- amino- 4- fluorbicvklor3. 1 . Olheksan- 2, 6-dikarboksvlsvre
En rørt suspensjon av lR,2S,4R,5R,6R-2-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (33,0 g, 0,162 mol) i H20 (165 ml) ble varmet til 89°C i 1 time og i-PrOH (41 ml) ble tilsatt. Blandingen ble deretter rørt i 5 minutter til refluks (83°C) før den ble avkjølt til romtemperatur og rørt i 4 timer. Produktet ble isolert, vasket med i-PrOH/H20 (1:4, 40 ml) og i-PrOH (25 ml) og tørket i vakuum ved 40°C i 18 timer som ga tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff (30,6 g, 93%).
Fremstilling 85
lR, 2S, 4R, 5R, 6R- 2- amino- 4- lfuorbicyklor3. 1. 0"| heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre etvlester
Til en slurry av lR,2S,4R,5R,6R-2-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (14,45 g, 71,12 mmol) i 202 ml absolutt etanol ble det ved romtemperatur tilsatt tionylklorid (26 ml, 356 mmol) dråpevis i løpet av 20 minutter. Slurryen ble varmet til refluks og rørt i 3 timer før avkjøling til romtemperatur over natten. Den resulterende løsningen ble konsentrert i vakuum til en rest som ble fortynnet med 136 ml etylacetat og behandlet med 306 ml 10% vandig natriumkarbonat i løpet av 15 minutter og rørt for hånd slik at den endelige pH ble 10. Sjiktene ble separert og det vandige sjiktet vasket med etylacetat (1 x 136 ml). De kombinerte organiske ekstraktene ble vasket med saltvann (1 x 136 ml), tørket (MgSC^), filtrert og konsentrert i vakuum som ga 17,07 g (93%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
FDMS: M<+>+l = 260.
Analyse beregnet for Ci2Hi8FNO4-0.1 H20: C, 55.21; H, 7.03; N, 5.37. Funnet: C, 55.10; H, 6.96; N, 5.22.
Smp. = 64-66°C.
[a]D<25>= +20 (c = 0.96, MeOH), [a]D<25>= +15 (c = 1.21, DMSO)
Fremstilling 86
lR. 2S. 4R. 5R. 6R- 2- r2' S- 2,-( tert- butoksvkarbonvlamino) propionyllamino- 4-fluorbicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre etylester
Til en løsning av N-Boc-L-alanin (38,62 g, 204 mmol) i 396 ml metylenklorid ved -22°C under nitrogen tilsatt N-metylmorfolin (22,44 ml, 204 mmol) fulgt av iso-butylklorformat (26,48 ml, 204 mmol) dråpevis i løpet av 15 minutter slik at reaksjonstemperaturen ikke overskred -18°C. Den resulterende tynne slurryen ble rørt ved -20°C i 30 minutter hvorved en løsning av lR,2S,4R,5R,6R-2-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyreetylester (49,46 g, 191 mmol) i 247 ml metylenklorid ble tilsatt i løpet av 40 minutter slik at reaksjonstemperaturen ikke oversteg -16°C. Etter fullstendig tilsetning, ble reaksjonsblandingen fjernet fra kjølebadet og rørt ved omgivelsestemperatur i 70 minutter, hvorved reaksjonstemperaturen hadde nådd 15°C og farven ble svakt oransje. Reaksjonsblandingen ble behandlet med 408 ml IN saltsyre fulgt av røring i 5 minutter og separasjon av sjiktene. Det organiske sjiktet ble vasket med mettet vandig natriumbikarbonat (lx 408 ml), tørket (Na2S04), filtrert og konsentrert i vakuum som ga et hvitt skum (88,16 g).
FDMS: M<+>+l = 260.
Analyse beregnet for Ci2H]8FNO4-0.1 H20: C, 55.21; H, 7.03; N, 5.37. Funnet: C, 55.10; H, 6.96; N, 5.22.
Smp. = 64-66°C.
[a]D<25>= +20 (c = 0.96, MeOH), [a]D<25>= +15 (c = 1.21, DMSO).
Fremstilling 87
lR, 2S, 4R, 5R, 6R- 2- r2' S- 2,-( tert- butoksvkarbonvlamino) propionyllamino- 4-fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre
Til en løsning av lR,2S,4R,5R,6R-2-[2'S-2'-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl]amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre etylester (88,16 g, 191 mmol) i 238 ml tetrahydrofuran ble det ved romtemperatur tilsatt 238 ml (477 mmol) 2N natriumhydroksid. Tofaseblandingen ble rørt kraftig ved romtemperatur i 2,5 timer hvorved reaksjonen ble homogen. Blandingen ble fortynnet med 238 ml t-butylmetyleter fulgt av blanding og separering av sjiktene. Det vandige sjiktet ble ytterligere fortynnet med 238 ml vann og filtrert for å fjerne partikulært materiale. Løsningen ble behandlet med kons. HC1 (42,9 ml, 515 mmol) i løpet av 30 minutter eventuelt fulgt av såing med tittelforbindelsen og røring i 1 time. Den resulterende slurryen ble filtrert, vasket med vann (2 x 100 ml), og vakuumtørket ved 45°C i 40 timer for å gi 72,2 g av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff. En del av det faste stoffet (69,5 g) ble rørt med 490 ml aceton i 1 time som ga en blakket løsning som ble filtrert og vasket med aceton (2 x 100 ml). Filtratet ble konsentrert i vakuum som ga et hvitt skum som ble ytterligere tørket i vakuum ved 45°C i 16 timer for å gi 61,8 g (korrigert for 12% vekt/vekt aceton) av tittelforbindelsen. Eksempel 1 ( lR. 4S. 5S. 6S)- 4-( 2, S- aminopropionyl) aminol- 2. 2- diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan-4, 6- dikarboksvlsyre hydroklorid
Til en suspensjon av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-ammopropionyl)amino]-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre (110,0 g, 271 mmol, fremstilling 3) i 563 ml etylacetat ble det tilsatt en løsning av hydrogenklorid i etylacetat (3,7M, 514 ml) i løpet av 20 minutter. Etter røring av suspensjonen i 2,5 timer og filtrering ble kaken vasket med etylacetat (lx 200 ml, 1x115 ml). Etter vakuumtørking ved 46°C i 18 timer, ble tittelforbindelsen samlet opp som et hvitt fast stoff (85,77 g, 92%).
<]>H NMR (300 MHz, metanol-^) 5: 4.12 (brd, 1H, J = 14.6 Hz), 3.94 (q, 1H, J = 7.1 Hz), 3.52 (ddd, 1H, J = 7.0, 3.9, 0.9 Hz), 3.16 (d, 1H, J = 14.6 Hz), 3.02 (dd, 1H, J = 7.0,4.4 Hz), 2.49 (t, 1H, J = 4.1 Hz), 1.52 (d, 3H, J = 7.1 Hz).
Eksempel 2
( lR. 4S. 5S. 6S)- 4-( 2, S- aminopropionyl) aminol- 2. 2- diokso- 2X6- tia- bicvklor3. 1. 01heksan-4. 6- dikarboksvlsvre tosvlat
En suspensjon av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre (300 mg, 0,738 mmol, fremstilling 3) og toluensulfonsyre monohydrat (140 mg, 0,738 mmol) i toluen (3 ml) ble varmet til 75°C og rørt i 45 minutter før avkjøling til romtempratur og røring i 16 timer. Filtrering av suspensjonen og vasking av kaken med toluen (2x1 ml) fulgt. Etter vakuumtøring ved 45°C i 1 time, ble 307 mg (87%) av tittelforbindelsen samlet opp som et hvitt fast stoff.
Smp. (DSC) 233°C.
<]>H NMR (500 MHz, CD3OD) 5 7.70 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 7.24 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 4.11 (d, 1H, J = 15 Hz), 3.94 (q, 1H, J = 7.0Hz), 3.53 (dd, 1H, J = 7.0, 4.0 Hz), 3.13 (dd, 1H, J = 14, 1.0 Hz), 3.02 (dd, 1H, J = 7.0,4.5 Hz), 2.48 (t, 1H, J = 4.5 Hz), 2.37 (s, 3H), 1.52 (d, 3H, J = 7.5 Hz).
<I3>CNMR(125 MHz, CD3OD) 5 170.70, 170.32,169.80, 142.04, 140.78, 128.79, 125.79, 60.20, 54.73, 48.77, 42.44, 30.84, 22.22, 20.20, 16.09.
Eksempel 3
( lR, 4S, 5S, 6SV4-( 2, S- amino- 3,- hvdroksv- propionvlVamino- 2, 2- diokso- 2X6- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre saltsyre
Fremstilling i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1R,4S,5S,6S)-4-(3'-acetoksy-2'S-tert-butoksykarbonylamino-propionyl)-amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (380 mg, 0,77 mmol, fremstilling 15).
[a]<23>,D= -19.23 (c=0.52, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 2.48 (1H, t, J=4.0 Hz), 3.04 (1H, dd, J=4.4, 7.3 Hz), 3.17 (1H, d, J=14.7 Hz), 3.51 (1H, dd, J=4.4, 7.0 Hz), 3.77 (1H, dd, J=7.0, 10.6 Hz), 3.94-4.12 (3H,m).
Analyse beregnet for CioHnNzOgS-HCl^O: C, 31.88; H, 4.55; N, 7.44; Cl, 9.41. Funnet: C, 31.53; H, 4.40; N, 7.32; Cl, 9.24.
HRMS beregnet for CioH15N208S, 323.0549. Funnet, 323.0533.
Eksempel 4
( 1 R. 4S. 5S. 6S)- 4- r( pyrrolidin- 2' S- karbonyl)- aminol- 2. 2- diokso- 2X6- tiabicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-[(r-tert-butoksykarbonyl-pyrrolidin-2'S-karbonyl)-amino]-2,2-diokso-2X6-tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,8 g, 1,7 mmol, fremstilling 11) som ga 0,42 g (67,0%) av tittelforbindelsen.
[a]<23>,D= -32 (c=1.00, CH3OH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 1.98-2.12 (3H, m), 2.40-2.50 (1H, m), 2.52 (1H, t, J=4.4 Hz), 2.99 (1H, dd, J=4.4, 7.0 Hz), 3.2 (1H, d, J=14.7 Hz), 3.29-3.42 (3H, m), 3.54 (1H, m), 4.13 (1H, d, J=15.8 Hz), 4.30 (1H, dd, J=6.2, 9.2 Hz).
HRMS beregnet for Ci2H17N207S, 333. 0756. Funnet, 333.0740.
Eksempel 5
( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4-( 2' S- amino- 4' - metylsulfanvl- butvrylamino)- 2. 2- diokso- 2X6- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 4. 6- dikarboksvlsvre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-tert-butoksykarbonylamino-4'-metylsulfanyl-butyrylamino)-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,77 g, 1,6 mmol, fremstilling 12) som ga 0,41 g (54,9%) av tittelforbindelsen.
[a]<23>,D= +4 (c=1.00, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 2.1-2.2 (2H, m), 2.13 (3H, s), 2.47 (1H, t, J=4.4 Hz), 2.58-2.63 (2H, m), 3.02 (1H, dd, J=4.0, 7.0 Hz), 3.12 (1H, d, J=14.7 Hz), 3.52 (1H, dd, J=3.3, 6.6 Hz), 3.98 (1H, t, J=6.2 Hz), 4.14 (1H, d, J = 14.7 Hz).
HRMS beregnet for C12H19N2O7S2, 367.0634. Funnet, 367.0634.
Eksempel 6
( 1 R. 4S , 5 S. 6S )- 4 -\ 2 ' S- amino- 3' -( 1 H- indol- 3- yl)- propionylaminol- 2, 2- diokso- 2X6- tiabicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-[2' S-tert-butoksykarbonylamino-3' -(1 -tert-butoksykarbonyl- lH-indol-3-yl)-propionylamino]-2,2-diokso-2X6-tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,54 g, 0,83 mmol, fremstilling 13) som ga 0,28 g (73,6%) av tittelforbindelsen.
[<x]<23>,D= +7.8 (c=1.02, CH3OH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 2.47-2.53 (1H, m), 3.05-3.18 (3H, m), 3.44-3.57 (2H, m), 4.13-4.23 (2H, m), 7.07-7.41 (3H, m), 7.71-7.78 (2H, m), 8.22 (1H, app d, J=7.7 Hz).
Analyse beregnet for Ci8Hi9N307S«HCl: C, 47.22; H, 4.40; N, 9.18. Funnet: C, 46.51; H, 3.96; N, 8.54.
MS (ES) m/z 420.1 [M-l]".
Eksempel 7
( 1 R. 4S . 5 S. 6S V4-[ 2' S- amino- 3' -( 4- hvdroksv- fenvl)- propionvlaminol- 2, 2- diokso- 2X6-tia- bicyklo[ 3. 1. 0"| heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-[2 'S-tert-butoksykarbonylamino-3' -(4-tert-butoksykarbonyloksy-fenyl)- propionylamino]-2,2-diokso-2X6-tia-bicyWo[3J.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,33 g, 0,53 mmol, fremstilling 14) som ga 0,13 g (56,4%) av tittelforbindelsen.
[a]23,D= -6 (c<=>1.00, H20).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 2.47 (1H, t, J=4.0 Hz), 2.87 (1H, dd, J=9.2, 14.7 Hz), 3.05-3.12 (2H, m), 3.23 (1H, dd, J=5.1, 14.7 Hz), 3.55 (1H, dd, J=4.0, 7.0 Hz), 4.00 (1H, dd, J=4.8,9.2 Hz), 4.13 (1H, d, J=14.7 Hz), 6.80 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.13 (2H, d, 8.8 Hz).
HRMS beregnet for C16H19N208S, 399.0862. Funnet, 399.0844.
Eksempel 8
( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4-( 2' S- amino- 3' - fenvl- propionvlamino)- 2. 2- diokso- 2X6- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksylsvre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-tert-butoksykarbonylamino-3'-fenyl-propionylamino)-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 5). Utbytte 0,55 g (85%, 1,31 mmol) som et hvitt fast stoff.
[a]<23>,D= +4.17 (c = 0.48, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 2.45 (1H, t, J=4.0 Hz), 2.98 (1H, dd, J=9.2, 14.7 Hz), 3.06 (1H, dd, J=4.4, 7.0 Hz), 3.10 (1H, d, J=14.6 Hz), 3.33 (1H, dd, J=4.8, 13.6 Hz), 3.52 (1H, dd, J=3.3, 7.3 Hz), 4.08 (1H, dd, J=5.1, 8.8 Hz), 4.10 (1H, d, J=15.4 Hz), 7.31-7.42 (5H,m).
I3C NMR (300 MHz, D20 w/ 1,4-dioksan): 5 172.55,171.94, 170.01, 134.31, 130.39, 130.27, 130.01,129.00, 61.38, 54.76, 54.37,43.07, 37.36, 31.57,23.18.
Analyse beregnet for Ci6Hi8N207S'1.5 HC1: C, 43.97; H, 4.50; N, 6.41. Funnet: C, 43.59; H, 4.17; N, 6.46.
MS (ES) m/z funnet 383.1 [M+H]<+>.
HRMS beregnet for Ci6H19N207S [M + H]<+>: 383.0913. Funnet: 383.0923.
Eksempel 9
( 1 R. 4S , 5 S. 6S V4-( 2' S- amino- 3' S- metvl- pentanonvlaminoV2, 2- diokso- 2X6- tiabicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsvre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-(2' S-tert-butoksykarbonylamno-3' S-metyl-pentanoy lamino)-2,2-diokso-2X6-tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 6). Utbytte 0,43 g (80%, 1,12 mmol) som et hvitt fast stoff.
[a]<23>,D= +4.08 (c = 0.49, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 0.98 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.07 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.15-1.24 (1H, m), 1.53-1.62 (1H, m), 1.95-2.04 (1H, m), 2.44 (1H, t, J=4.0 Hz), 3.06 (1H, dd, J=4.4, 7.0 Hz), 3.14 (1H, d, J = 15.0 Hz), 3.52 (1H, dd, J=3.7,7.0 Hz), 3.73 (1H, d, J=5.1 Hz), 4.10 (1H, d, J=14.7 Hz).
Analyse beregnet for Ci3H2oN207S'HCl'0.5 H20: C, 39.64; H, 5.63; N, 7.11. Funnet: C, 39.38; H, 5.39; N, 7.04.
MS (ES) m/z funnet 349.1 [M+H]<+>.
HRMS (ES) beregnet for Ci3H2iN207S [M + H]<+>, 349.1069. Funnet, 349.1086.
Eksempel 10
( lR. 4S. 5S. 6S)- 4-( 2, S- amino- 3,- metvl- butvrvlamino)- 2. 2- diokso- 2X6- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksylsvre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-tert-butoksykarbonylammo-3'-metyl-butyrylamino)-2,2-diokso-2X6-tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 7). Utbytte 0,18 g (88%, 0,49 mmol) som et hvitt fast stoff som HCl-saltet.
[a]23,D = +7.84 (c = 0.51, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 1.04 (3H, d, J=6.6 Hz), 1.09 (3H, d, J=7.0 Hz), 2.22-2.29 (1H, m), 2.44 (1H, t, J=4.0 Hz), 3.05 (1H, dd, J=4.4, 7.0 Hz), 3.10 (1H, d, J=14.7 Hz), 3.52 (1H, dd, J=4.0, 7.3 Hz), 3.67 (1H, d, J=5.5 Hz), 4.10 (1H, d, J=14.7 Hz). Analyse beregnet for Ci2H18N2O7S'HCl'0.4H2O: C, 38.12; H, 5.20; N, 7.41. Funnet: C, 37.78; H, 4.90; N, 7.15.
MS (ES) m/z funnet 335.1 [M+H]<+>.
Eksempel 11
( 1 R. 4S . 5 S. 6S)- 4-( 2' S- amino- 4' - metvl- pentanovlamino)- 2. 2- diokso- 2X6- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksylsvre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-tert-butoksykarbonylamino-4'-metyl-pentanoylamino)-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 8). Utbytte 0,50 g (76%, 1,30 mmol) som et hvitt fast stoff som HCl-saltet.
[<x]<23>,D= -4.0 (c = 0.50, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 1.00 (3H, d, J=5.5 Hz), 1.02 (3H, d, J=5.9 Hz), 1.62-1.79 (3H, m), 2.42 (1H, t, J=4.0 Hz), 3.04 (1H, dd, J=4.4, 7.3 Hz), 3.13 (1H, d, J=15.0 Hz), 3.52 (1H, dd, J=3.3,7.0 Hz), 3.84-3.89 (1H, m), 4.10 (1H, d, J=15.0 Hz). Analyse beregnet for Ci3H2oN207S'HCl'0.3H20: C, 40.01; H, 5.58; N, 7.18. Funnet: C, 39.66; H, 5.57; N, 6.99.
MS (ES) m/z funnet 349.1 [M+H]<+>.
Eksempel 12
( lR^ S^ S^ S^^^^^^ diamino- heksanovlamino^^^- diokso^ X^ tiabicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre bis hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S,6'-bis-tert-butoksykarbonylamino-heksanoylamino)-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (fremstilling 9). Utbytte 0,56 g (86%, 1,28 mmol) av et hvitt fast stoff som bis hydrokloridsaltet.
[<x]<23>,D= -4.0 (c = 0.50, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 1.48-1.55 (2H, m), 1.67-1.74 (2H, m), 1.89-1.97 (2H, m), 2.47 (1H, t, J=4.0 Hz), 2.97 (2H, app t, J=4.0), 3.08 (1H, dd, J=4.4, 7.0 Hz), 3.20 (1H, d, J=15.0 Hz), 3.53 (1H, dd, J=3.7, 7.0 Hz), 3.93 (1H, app. t, J=6.2 Hz), 4.08 (1H, d, J=14.7 Hz).
Analyse beregnet for Ci3H2iN307S'2HO0.2H20: C, 35.49; H, 5.36; N, 9.55. Funnet: C, 35.30; H, 5.48; N, 9.42.
MS (ES) m/z funnet 364.1 [M+H]<+>.
Eksempel 13
( 1 R. 4S , 5 S. 6S V4-( 2' S- amino- 4' - karbamovl- butyrylamino )- 2, 2- diokso- 2X6- tiabicyklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsyre hydroklorid
Rør(lR,4S,5S,6S)-4-[2'S-tert-butoksykarbonylamino-4'-(trityl-karbamoyl)-butyrylamino]-2,2-diokso-2X6-tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre dimetylester (0,48 g, 0,65 mmol, fremstilling 10) i en 1:1 blanding av 2,5N LiOH og THF (6 ml totalvolum) ved romtemperatur i 4 timer. Juster reaksjonsblandingens pH til 2 med IN HC1 og ekstraher produktet med etylacetat. Kombiner alle organiske fraksjoner, vask med saltvann, tørk over MgSC«4og konsentrer for å gi 0,46 g (lR,4S,5S,6S)-4-[2'S-tert-butoksykarbonylamino-4'-(trityl-karbamoyl)-butyrylamino]-2,2-diokso-2X.<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre som et hvitt skum. Løs opp disyren i DCM og rør ved romtemperatur som anisol (0,28 g, 2,6 mmol) og deretter blir TF A (3,70 g, 32,5 mmol) etterfølgende tilsatt. Rør den resulterende reaksjonsblandingen ved romtemperatur i 2 timer og konsentrer i vakuum. Triturer den resulterende gule oljen i Et20 til det blir dannet et frittflytende presipitat. Samle opp TFA-saltet med vakuumfilt-rering under N2-teppe. Løs opp produktet i 1 ml IN HC1 og lyofiliser produktet for å gi det ønskede produktet som HCl-saltet. Utbytte 0,16 g (62%, 0,40 mmol) av et hvitt fast stoff.
[a]<2>3,D= +8.0 (c = 1.0, H20).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 2.00-2.08 (2H, m), 2.37-2.41 (3H, m), 2.93 (1H, dd, J=4.4, 7.3 Hz), 3.04 (1H, d, J=14.7 Hz), 3.45 (1H, dd, J=3.7, 7.0 Hz), 3.86 (1H, app. t, J=5.9 Hz), 4.05 (1H, d, J=14.7 Hz).
Analyse beregnet for Ci2H17N3O8S'HCl'2.0H2O: C, 33.07; H, 5.09; N, 9.64. Funnet: C, 33.37; H, 4.69; N, 9.39.
MS (ES) m/z funnet 363.9 [M+H]<+>.
HRMS (ES) beregnet for Ci2H18N308S [M + H]<+>: 364.0815. Funnet: 364.0825.
Eksempel 14
( lR, 2S, 4R, 5R, 6RV2-( 2, S- amino- propionvDamino- 4- fluorbicvklor3. 1 . Olheksan- 2, 6-dikarboksylsvre hydroklorid
Rør en slurry av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-2'-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl)amino-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (53,0 g korrigert for aceton, 142 mmol) i 447 ml aceton ved 50°C i 35 minutter. Filtrer den blakkede løsningen til klar løsning fulgt av rensing med 100 ml aceton. Tilsett 22,1 ml (265 mmol) konsentrert saltsyre dråpevis til det klare, off-white filtratet i løpet av 5 minutter. Varm reaksjonsblandingen til 45-50°C og rør i 90 minutter. Eventuelt så blandingen med (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-aminopropionyl)amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre hydroklorid, fulgt av at varmen skrus av og blandingen avkjøles langsomt til romtemperatur. Etter 2 timer når temperaturen 25°C og aceton (942 ml) tilsettes til slurryen i løpet av 90 minutter. Rør slurryen i ytterligere 16 timer fulgt av filtrering, vasking med aceton (2 x 200 ml) og vakuumtørking ved 45 °C i 9 timer og ved romtemperatur i ytterligere 64 timer for å gi 40,2 g (91%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Løs opp 1,06 g i 0,5 ml vann og 2,12 ml aceton med oppvarming til 50°C fulgt av fortynning med ytterligere 5,3 ml aceton og eventuell såing. Tilsett ytterligere 4,2 ml aceton til den svakt blakkede blandingen eventuelt fulgt av ny såing, varmen skrus av og blandingen avkjøles langsomt til romtemperatur i løpet av 1 time. Fortynn den resulterende slurryen ytterligere med ytterligere 9,5 ml aceton i løpet av 30 minutter fulgt av røring i 15 timer. Etter filtrering, vasking med aceton (2x5 ml) og vakuumtørking ved 45°C i 10 timer og ved romtemperatur i 60 timer blir 0,905 g (85% utvinning) av tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt fast stoff.
Smp. (DSC) 183°C.
[a]25D +33° (c 1.06, CH3OH).
500 MHz iH NMR (CD3OD) 5 5.58-5.42 (m, 1H), 3.92 (q, 1H, J = 7.0Hz), 2.96 (dd, 1H, J = 14, 8.0 Hz), 2.41-2.39 (m, 1H), 2.35-2.30 (m, 1H), 2.10 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.52 (d, 3H, J = 7.5 Hz), 1.51-1.42 (m, 1H).
13c NMR (125 MHz, CD3OD) 5 173.74,173.62,170.00, 93.48 og 92.04 (C-F splitting), 63.95 og 63.92 (C-F splitting), 48.80, 36.89 og 36.70 (C-F splitting), 32.97 og 32.91 (C-F splitting), 30.05 og 29.87 (C-F splitting), 19.37, 16.28.
FTIR (DRIFT) 3430 (w), 3016 (s), 1721 (s), 1662 (s), 1496 (s), 1190 (m), 1024 (m), 637 (w) cm-1.
Eksempel 15
( 1 R. 2S. 4R. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- propionvl) amino- 4- lfuorbicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsyre mesylat
En slurry av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-[2'S-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl]-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (1,87 g korrigert, 4,98 mmol, fremstilling 18) i 16,8 ml aceton røres ved 50°C i 15 minutter. Den blakkede løsningen filtreres for å klargjøre løsningen fulgt av rensing med aceton (3 x 1,25 ml). Det klare filtratet fortynnes med 0,935 ml vann, plasseres på varmebad ved 50°C og behandles med 0,647 ml (9,97 mmol) metansulfonsyre dråpevis (gassutvikling observert). En hvit slurry blir fremstilt i løpet av 25 minutter. Etter røring i totalt 2 timer, blir ytterligere 35,5 ml aceton tilsatt i løpet av 5-10 minutter. Varmen skrus av og slurryen avkjøles gradvis til romtemperatur i løpet av 2 timer fulgt av filtrering og vasking med aceton (2x8 ml) og vakuumtørking ved 45°C i 14 timer for å gi 1,77 g (95%) av tittelforbindelsen som et matt rosa faststoff. En prøve av dette materialet rekrystalliseres som følger: 1,65 g løses i 1,16 ml vann og 4,95 ml aceton med oppvarming til 50°C fulgt av fortynning med ytterligere 1,65 ml aceton og eventuell såing. Varmen skrus av og blandingen blir gradvis avkjølt til romtemperatur. Aceton (26,4 ml) tilsettes simultant i løpet av 40 minutter. Den resulterende slurryen røres i ytterligere 3 timer. Etter filtrering, vasking med aceton (2x6 ml), og vakuumtørking ved 45°C i 6 timer og ved romtemperatur i 60 timer, blir 1,59 g (96% utvinning) av tittelforbindelsen oppnådd som et hvitt fast stoff: smp. (DSC) 206°C.
[a]25D +30 (c 1.05,CH3OH).
<]>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 5.58-5.42 (m, 1H), 3.92 (q, 1H, J = 7.0Hz), 2.96 (dd, 1H, J = 14, 8.0 Hz), 2.70 (s, 3H), 2.41-2.39 (m, 1H), 2.35-2.30 (m, 1H), 2.10 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.52 (d, 3H, J = 7.5 Hz), 1.51-1.42 (m, 1H).
<13>C NMR (125 MHz, CD3OD) 8 173.73, 173.61, 170.02, 93.50 og 92.05 (C-F splitting), 63.91,48.79, 38.30, 36.89 og 36.70 (C-F splitting), 32.97 og 32.91 (C-F splitting), 30.02 og 29.84 (C-F splitting), 19.37,16.26.
FTIR (DRIFT) 3472 (w), 3077 (s), 1717 (s), 1691 (s), 1557 (m), 1220 (s), 1019 (m), 781 (m), 563 (m)cm-l.
Analyse beregnet for Ci2H19FN208S: C, 38.92; H, 5.17; N, 7.56. Funnet: C, 38.96; H, 4.97; N, 7.51.
Eksempel 16
( lR. 2S. 4R. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- propionvl) amino- 4- fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsyre esylat
En slurry av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-[2'S-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl]-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (0,2 g, 0,534 mmol, fremstilling 18) i 1,8 ml aceton røres ved 50°C i 5 minutter. Den blakkede løsningen filtreres for å klar-gjøre løsningen fulgt av rensing med aceton (1 x 0,4 ml). Det klare filtratet fortynnes med 0,1 ml vann, plasseres på varmebad ved 50°C og behandles med 0,124 ml (1,07 mmol) etansulfonsyre dråpevis (gassutvikling observert). En hvit slurry blir fremstilt etter 90 minutter. Etter røring i totalt 2 timer, blir ytterligere 1,8 ml aceton tilsatt i løpet av 5 minutter. Varmen skrus av og slurryen avkjøles gradvis til romtemperatur i løpet av 1 time fulgt av røring i ytterligere 2 timer. Filtrering, vasking med aceton (2x1 ml), og vakuumtørking ved 45°C i 4 timer og ved romtemperatur i 6 timer gir 0,173 g (84%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Smp. (DSC) 210°C (dekomp).
<]>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 5.58-5.42 (m, 1H), 3.92 (q, 1H, J = 7.0Hz), 2.96 (dd, 1H, J = 14, 8.0 Hz), 2.80 (q, 2H, 7.3 Hz), 2.42-2.37 (m, 1H), 2.35-2.30 (m, 1H), 2.09 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.52 (d, 3H, J = 7.5 Hz), 1.51-1.40 (m, 1H), 1.30 (t, 3H, J = 7.5 Hz).
Eksempel 17
( lR, 2S, 4R, 5R, 6RV2-( 2, S- amino- propionvDamino- 4- fluorbicvklor3. 1 . Olheksan- 2, 6-dikarboksylsvre besylat
En slurry av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-[2'S-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl]-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (0,402 g, 1,07 mmol, fremstilling 18) i 3,6 ml aceton røres ved 50°C i 10 minutter. Den blakkede løsningen behandles med en liten mengde celitt og filtreres for å klargjøre løsningen fulgt av rensing med aceton (2 x 0,4 ml). Det klare filtratet plasseres på varmebad ved 50°C og behandles med 226 mg (90%, 1,29 mmol) benzensulfonsyre som en løsning i 0,113 ml vann fulgt av rensing med 0,4 ml aceton (gassutvikling observert). Etter røring ved forsiktig refluks i 4 timer, blir varmen skrudd av og reaksjonsblandingen behandlet med 8 ml aceton i løpet av 10 minutter eventuelt fulgt av såing. En slurry har blitt dannet i løpet av 1 time som fortynnes med 3,2 ml aceton fulgt av røring ved romtemperatur i ytterligere 15,5 timer. Filtrering, vasking med aceton (2x10 ml) og tørking i vakuum ved 45°C i 24 timer ga 313 mg (62% korrigert for 10 vekt-% aceton) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff. Smp. (DSC) 132°C.
<]>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 7.86-7.80 (m, 2H), 7.46-7.37 (m, 3H), 5.58-5.42 (m, 1H), 3.92 (q, 1H, J = 7.0Hz), 2.96 (dd, 1H, J = 14, 8.0 Hz), 2.42-2.37 (m, 1H), 2.35-2.30 (m, 2H), 2.09 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.52 (d, 3H, J = 7.5 Hz), 1.51-1.40 (m, 1H).
Eksempel 18
( 1 R. 2S. 4R. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- propionvl) amino- 4- fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsvre tosylat
En slurry av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-[2'S-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl]-amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (1,04 g korrigert, 2,78 mmol, fremstilling 18) i 9,36 ml aceton røres ved 50°C i 15 minutter. Den blakkede løsningen behandles med en liten mengde celitt og filtreres for å klargjøre løsningen fulgt av rensing med aceton (1 x 2,08 ml deretter 1 x 1,04 ml). Det klare filtratet plasseres på varmebad ved 50°C og behandles med 634 mg (3,33 mmol) p-toluensulfonsyre monohydrat som en løsning i 0,317 ml vann fulgt av en rensing med 0,317 ml aceton (gassutvikling observert). Etter røring til forsiktig refluks i 4 timer, blir reaksjonsblandingen fjernet fra var-mebadet og behandlet med 10,4 ml aceton i løpet av 10 minutter. Den klare farveløse løsningen blir eventuelt sådd og et presipitat blir observert dannet i løpet av 30 minutter hvorved ytterligere 10,4 ml aceton tilsettes i løpet av 20 minutter. Slurryen røres i ytterligere 4 timer fulgt av filtrering, vasking med aceton (2x10 ml) og tørking i vakuum ved 45°C i 14 timer for å gi 995 mg (78% korrigert for 3 vekt-% aceton) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.<]>H NMR (500 MHz, CD3OD) 8 7.70 (d, 2H, J = 7.5 Hz), 7.34 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 5.58-5.42 (m, 1H), 3.92 (q, 1H, J = 7.0Hz), 2.96 (dd, 1H, J = 14, 8.0 Hz), 2.42-2.30 (m, 2H), 2.24 (s, 3H), 2.09 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.52 (d, 3H, J = 7.5 Hz), 1.51-1.40 (m, 1H). Eksempel 19 ( 1 R. 2S. 4R. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- propionvl) amino- 4- fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksvlsvre
Til en løsning av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-amino-propionyl)amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre mesylat (0,5 g, 1,353 mmol, eksempel 15) i 1 ml vann ble det 50°C tilsatt 5 ml 3A etanol fulgt etter få minutter av 0,27 ml (1,35 ml) 5N vandig natriumhydroksid. Varmen skrus av og den klare farveløse løs-ningen fortynnes med 2,5 ml etanol, sås eventuelt, og fortynnes ytterligere med 7,5 ml etanol i løpet av 30 minutter. Den resulterende slurryen røres deretter med kjøling til romtemperatur i løpet av 1 time og deretter ved romtemperatur i 2 timer. Det faste stoffet samles opp og vaskes med etanol (1x10 ml), fulgt av tørking i vakuum ved 45°C i 18,5 timer som gir 0,301 g (78% utbytte korrigert for 1,6 vekt-% natriummetansulfonat og 3 vekt-% etanol) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<]>H NMR (500 MHz, D20) 8 5.45-5.30 (m, 1H), 3.88 (q, 1H, J = 7.0 Hz), 2.58 (dd, 1H, J = 14, 8.0 Hz), 2.33-2.30 (m, 1H), 2.27-2.26 (m, 1H), 1.92 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.36 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.41-1.32 (m, 1H).
<I3>C NMR (125 MHz, D20) 8 177.46, 176.92, 170.42, 94.56 og 93.19 (C-F splitting), 65.36, 49.01, 36.75 og 36.57 (C-F splitting), 33.61 og 33.55 (C-F splitting), 30.54 og 30.36 (C-F splitting), 20.27, 16.67.
Eksempel 20
( 1 R. 2S. 4R. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- propionvl) amino- 4- fluorbicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsvre dinatriumsalt
Til en løsning av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-amino-propionyl)amino-4-fluorbicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre mesylat (70 mg, 0,19 mmol, eksempel 15) i 420 ul metanol ble det ved 60°C tilsatt en varm løsning av natriumacetat (46,5 mg, 0,57 mmol) i 470 ul metanol med en rensing med 230 ul metanol. Oppvarmingen skrus av. Den rørte blakkede løsningen fortynnes med 280 (il metanol eventuelt fulgt av såing for å hjelpe til med krystalliseringen. Den resulterende slurryen blir sakte avkjølt til omgivelsestemperatur i løpet av 1 time og rørt i 2 timer ved omgivelsestemperatur. Produktet isoleres ved filtrering, vaskes med metanol (2 x 280 ul) og tørkes i vakuum ved 45°C i 15 timer for å gi 52,5 mg (85% utbytte korrigert for 2,3 vekt-% natriummetansulfonat og 0,2 vekt-% metanol) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
<]>H NMR (500 MHz, D20) 8 5.44-5.29 (m, 1H), 3.89 (q, 1H, J = 7.0 Hz), 2.65 (s, 3H), 2.56 (dd, 1H, J= 14,.8.0Hz), 2.16-2.13 (m, 1H), 2.10-2.09 (m, 1H), 1.74 (t, 1H, J = 3.1 Hz), 1.38 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.36-1.28 (m, 1H).
<I3>C NMR (125 MHz, D20) 8 180.00, 178.72, 170.13, 95.40 og 93.99 (C-F splitting), 65.97,49.06, 37.25 og 37.07 (C-F splitting), 33.01 og 32.94 (C-F splitting), 29.64 og 29.46 (C-F splitting), 22.48, 16.68.
Eksempel 21
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2' S- aminopropionyl>amino- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1 . Olheksan- 2, 6-dikarboksylsvre hydroklorid
Til en løsning av (lS,2S,4S,5R,6R)-4-acetyloksy-2-[2'S-(tert-butoksy)karbonylaminopropionyl]-aminobicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (0,600 g, 1,28 mmol, fremstilling 21) i THF (30 ml) og vann (30 ml) blir det tilsatt litiumhydroksid monohydrat (0,535 g, 12,8 mmol). Etter røring ved romtemperatur i 3 timer, blir reaksjonsblandingen fortynnet med vann og vasket med etylacetat (2 x 25 ml). Det vandige sjiktet blir surgjort til pH 1 med vandig IN HCl-løsning og ekstra-hert med etylacetat (3 x 30 ml). De kombinerte organiske ekstraktene konsentreres, gjenoppløses i IN HC1 i etylacetat (60 ml) og røres deretter under nitrogen ved romtemperatur i 16 timer. Løsemidlet fjernes i vakuum for å gi 400 mg (99%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
LCMS: m/ z 273 [M + H]<+>@ RT 0.20 min.
<]>H NMR (CD3OD)<*>: 4.13 (1H, d, 5.9 Hz), 3.80 (1H, q, 6.7 Hz), 2.41-2.31 (2H, m), 1.93 (1H, dd, 6.0 Hz, 2.7 Hz), 1.62 (1H, dd, 5.9 Hz, 15.5 Hz), 1.44 (1H, t, 3.0 Hz), 1.38 (3H, d, 6.8 Hz); * N. B. Utbyttbare protoner ikke observert ved NMR = 6.
Eksempel 22
( lS. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2,- amino- acetylamino)- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsvre h<y>droklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2' -tert-butoksykarbonylamino-acetylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6- dikarboksylsyre dietylester (300 mg, 0,84 mmol, fremstilling 23), med unntak av at den tert-butoksykarbonylbeskyttende gruppen fjernes ved behandling med 4M HC1 i dioksan. Utbytte 156 mg (63%).
[<a>]<23,>D= -36 (c=0.5, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.56 (1H, t, J=2.9 Hz), 1.74 (1H, dd, J=5.8, 15.4 Hz), 2.12 (1H, m), 2.48 (1H, d, J=15.4 Hz), 2.61 (1H, m), 3.62 (2H, s), 4.32 (1H, d, J=5.49 Hz).
Analyse beregnet for Ci0Hi4N206'1.3HOH20: C, 37.11; H, 5.39; N, 8.66. Funnet: C, 37.36; H, 4.99; N, 8.30.
MS (ES) m/z 258.8 [M+H]<+>.
Eksempel 23
( lS. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- 3,- metvl- butvrylamino)- 4-hydroksvbicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre saltsyre
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S-tert-butoksykarbonylamino-3-metyl-butyrylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (480 mg, 1,19 mmol, fremstilling 24), med unntak av at den tert-butoksykarbonylbeskyttende gruppen fjernes ved behandling med 4M HC1 i dioksan. Utbytte 307 mg (76%).
[<a>]<23,>D= +8.33 (c=0.48, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.07 (3H, d, J=6.8 Hz), 1.11 (3H, d, J=7.3 Hz), 1.55 (1H, t, J=2.9 Hz), 1.76 (1H, dd, J=5.8, 15.6 Hz), 2.14 (1H, dd, J=3.4, 5.8 Hz), 2.24 (1H, m), 2.50 (1H, d, J=15.6 Hz), 2.64 (1H, dd, J=2.9, 5.8 Hz), 3.66 (1H, d, J=5.4 Hz), 4.32 (1H, d, J=5.8Hz).
Analyse beregnet for Ci3H2oN206'HCM.lH20: C, 43.79; H, 6.56; N, 7.86. Funnet: C, 43.77; H, 6.20; N, 7.47.
HRMS beregnet for Ci3H2iN206, 301.1400. Funnet, 301.1400.
Eksempel 24
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2' S- amino- 4,- metvl- pentanovlamino)- 4- hvdroksy-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre saltsyre
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2' S-tert-butoksykarbony lamino-4' -mety 1-pentanoy lamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (460 mg, 1,11 mmol, fremstilling 25), med unntak av at den tert-butoksykarbonylbeskyttende gruppen fjernes ved behandling med 4M HC1 i dioksan. Utbytte 371 mg (95%).
[<a>]<23,>D= +4 (c=0.5, MeOH).
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.01 (3H, d, J=5.8 Hz), 1.03 (3H, d, J=6.3 Hz), 1.54 (1H, t, J=2.9 Hz), 1.63-1.82 (4H, m), 2.14 (1H, dd, J=2.9, 5.8 Hz), 2.49 (1H, d, J=15.6 Hz), 2.62 (1H, dd, J=2.9, 5.8 Hz), 3.83-3.86 (1H, m), 4.32 (1H, d, J=5.8 Hz).
Analyse beregnet for Ci^NjOe-HCM^HzO: C, 44.72; H, 6.92; N, 7.45. Funnet: C, 44.52; H, 6.57; N, 7.13.
HRMS beregnet for Ci4H23N206) 315.1556. Funnet, 315.1569.
Eksempel 25
( lS. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- 3, S- metvl- pentanovlamino)- 4- hvdroksv-bicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre saltsyre
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2' S-tert-butoksykarbonylamino-3' S-metyl-pentanoylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (410 mg, 0,99 mmol, fremstilling 26), med unntak av at den tert-butoksykarbonylbeskyttende gruppen fjernes ved behandling med 4M HC1 i dioksan. Utbytte 330 mg (95%).
[a]<23>,D= +8 (c=0.5, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 0.99 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.08 (3H, t, J=7.3 Hz), 1.17-1.27 (1H, m), 1.53 (1H, t, J=2.9 Hz), 1.59-1.65 (1H, m), 1.76 (1H, dd, J=5.8, 15.6 Hz), 1.96-2.00 (1H, m), 2.14 (1H, dd, J=2.9, 5.8 Hz), 2.46 (1H, d, J=15.6 Hz), 2.66 (1H, dd, J=2.9, 5.8 Hz), 3.70 (1H, d, J=5.4 Hz), 4.31 (1H, d, J=5.8 Hz).
Analyse beregnet for C14H22N206'1.1HCM.2H20: C, 44.71; H, 6.83; N, 7.45. Funnet: C, 44.38; H, 6.51;N, 7.08.
HRMS beregnet for C14H23N2O6, 315.1556. Funnet, 315.1566.
Eksempel 26
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R")- 2- r2,-( 2- amino- acetvlamino)- acetvlaminol- 4- hydroksv-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre
Behandle (1 S,2S,4S,5R,6R)-2-[2'-(2-tert-butoksykarbonylamino-acetylamino)-acetylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (360 mg, 0,77 mmol, fremstilling 27) med et overskudd 4M HC1 i dioksan og rør i 40 minutter og konsentrer i vakuum. Tilsett etylacetat og konsentrer. Behandle det faste stoffet med THF (3M) og IN LiOH (3,0 ekv.). Rør i 1 time og tilsett deretter IN HC1 til pH = 3. Konsentrer reaksjonsblandingen i vakuum. Rens med DOWEX® 50WX8-100 ione-bytterharpiks. Utbytte 188 mg (78%).
[a]<23>,D= +3.92 (c=0.51, H20).
<]>H NMR 300 MHz, D20) 5 1.43 (1H, t, J=2.9 Hz), 1.53 (1H, dd, J=5.9, 15.4 Hz), 1.98 (1H, m), 2.23-2.31 (2H, m), 3.70 (2H, s), 3.82 (2H, app d, J=l.l Hz), 4.16 (1H, d, J=5.9 Hz).
HRMS beregnet for C12H18N3O7, 316.1145. Funnet, 316.1123.
Eksempel 27
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- r2,-( 2S- amino- propionvlamino)- acetylaminol- 4- hvdroksv-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte angitt i eksempel 26 ved anvendelse av (lS,2S,4S,5R,6R)-2-[2'-(2S-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-acetylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (410 mg, 0,84 mmol, fremstilling 28). Utbytte 200 mg (72%).
[a]<23>,D= +23.53 (c=0.51, H20).
<]>H NMR 300 MHz, D20) 5 1.36 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.37 (1H, t, J=3.3 Hz), 1.49 (1H, dd, J=5.9, 15.4 Hz), 1.91 (1H, dd, J=2.9, 5.9 Hz), 2.15 (1H, dd, J=2.9, 5.9 Hz), 2.27 (1H, d, J=15.4 Hz), 3.79 (2H, s), 3.95 (1H, q, J=7.0 Hz), 4.13 (1H, d, J=5.5 Hz).
HRMS beregnet for Ci3H19N307, 330.1301. Funnet, 330.1290.
Eksempel 28
( 1 S. 2S. 4S. 5R. 6RV2-( 2' S- amino- 3 ,- fenvl- propionvlamino)- 4- hvdroksvbicyklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2'-tert-butoksykarbonylamino-3'-fenyl-propionylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (400 mg, 0,89 mmol, fremstilling 29). Utbytte 290 mg (85%).
[<x]<23>,D= +3.64 (c=0.55, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.45 (1H, t, J = 3.3 Hz), 1.60 (1H, dd, J = 5.5,15.4 Hz), 2.03 (1H, dd, J = 2.6, 5.9 Hz), 2.37 (1H, d, J = 15.4 Hz), 2.55 (1H, dd, J = 2.9, 5.9 Hz), 2.90 (1H, dd, J = 8.4, 14.3 Hz), 3.22 (1H, dd, J = 5.1, 14.7 Hz), 3.97 (1H, dd, J = 5.5, 8.8 Hz), 4.21 (1H, d, J = 5.5 Hz), 7.19 - 7.31 (5H, m).
HRMS beregnet for C17H21N2O6, 349.1400. Funnet, 349.1388.
Analyse beregnet for C17H21N2O6• HC1 • H20: C, 50.69; H, 5.76; N, 6.95; Cl, 8.80. Funnet: C, 50.66; H, 5.65; N, 6.85; Cl, 8.20.
MS funnet 349.0 [M+H]<+>.
Eksempel 29
( 1 S. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2' S- amino- 4,- karbamovl- butvrvlamino)- 4- hvdroksv-bicvkloD. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre hydroklorid
Fremstill tittelforbindelsen ved å løse opp (lS,2S,4S,5R,6R)-2-[2'-tert-butoksykarbonylamino-4'-(trityl-karbamoyl)-butyrylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (1,18 mmol, fremstilling 30) i THF (10 ml) og behandle løsningen med 2,5N LiOH (12 ml). La blandingen røre i 3 timer og juster deretter pH til 2 med 2,5N HC1. Ekstraher produktet fire ganger med etylacetat, tørk over vannfri natriumsulfat og konsentrer i vakuum for å gi et hvitt pulver. Løs opp di-syreproduktet (0,74 mmol) i 1,2-dikloretan (3,7 ml) og behandle med anisol (0,3 ml) og trifluoreddiksyre (3,72 ml). Rør reaksjonsblandingen ved 23°C i 2,5 timer og konsentrer deretter i vakuum for å gi en brun olje. Løs opp den brune oljen i vann, ekstraher fem ganger med diklormetan, konsentrer det vandige sjiktet i vakuum, behandle med IN HC1 (0,74 ml) og lyofiliser. Behandle det faste stoffet med en ytterligere del IN HC1 (2 ml) og lyofiliser igjen for å gi 446 mg (kvant.) av tittelforbindelsen.
[<x]<23>,D= +8.16 (c=0.49, MeOH).
<!>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.60 (1H, t, J = 3.3 Hz), 1.79 (1H, dd, J = 5.5,15.4 Hz), 2.10 - 2.17 (3H, m), 2.46 - 2.55 (3H, m), 2.60 (1H, dd, J = 2.9, 5.9 Hz), 3.94 (1H, t, J = 6.2 Hz), 4.33 (1H, d, J=5.5 Hz).
MS funnet 330.0 [M+H]<+>, 351.9 [M+Na]<+>.
HRMS beregnet for daH^O?, 330.1301. Funnet, 330.1295.
Eksempel 30
( lS. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2, S. 6,- diamino- heksanovlamino)- 4- hvdroksv-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre bis hydroklorid
Fremstilt i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2'S,6'-bis-tert-butoksykarbonylamino-heksanoylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 31).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.47-1.59 (3H, m), 1.66-1.78 (2H, m), 1.84 (1H, dd, J=5.4, 15.2 Hz), 1.91 (2H, m), 2.16 (1H, dd, J=3.4, 5.7 Hz), 2.45 (1H, d, J-15.7 Hz), 2.66 (1H, dd, J=2.9, 5.9 Hz), 2.97 (2H, t, J=7.3 Hz), 3.92 (1H, t, J=6.4 Hz), 4.33 (1H, d, J=5.4 Hz).
MS funnet 330.0 [M+H]<+>.
Eksempel 31
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-( 2, S- amino- 3,- karbamovl- propionylamino)- 4- hvdroksv-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre
Fremstill tittelforbindelsen ved å løse opp (lS,2S,4S,5R,6R)-2-[2'-tert-butoksykarbonylamino-3' -(trityl-karbamoy l)-propionylamino] -4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (1,07 mmol, fremstilling 32) i THF (12 ml) og behandle løsningen med 2,5N LiOH (12 ml). La reaksjonsblandingen røre i 3 timer og juster pH til 2 med 2,5N HC1. Ekstraher produktet fire ganger med etylacetat, tørk over vannfri natriumsulfat og konsentrer i vakuum for å gi et hvitt pulver. Løs opp di-syreproduktet (1,22 mmol) i 1,2-dikloretan (6 ml) og behandle med anisol (1 ml) og trifiuoreddiksyre (6 ml). La reaksjonsblandingen røre ved 23°C i 10 timer og konsentrer deretter i vakuum for å gi en brun olje. Fortynn den brune oljen med die-tyleter og krystalliser produktet som et hvitt fast stoff. Filtrer og vask med store mengder eter. Løs opp det faste stoffet i minimummengde vann, behandle med 0,5N HC1 (5 ml) og lyofiliser tre ganger for å gi 386 mg (90%) av tittelforbindelsen.
[a]<23>,D= 0 (c=0.5, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.59 (1H, t, 3.4 Hz), 1.76 (1H, dd, J = 5.9,16.1 Hz), 2.11 (1H, dd, J = 2.9, 5.9 Hz), 2.53 (1H, d, J = 16.1 Hz), 2.55 (1H, dd, J = 2.9, 5.9 Hz), 2.74 (1H, dd, J = 9.8, 17.1 Hz), 2.95 (1H, dd, J = 3.9,17.1 Hz), 4.19 (1H, dd, J = 3.9, 9.8 Hz), 4.32 (1H, d, J = 5.9 Hz).
MS funnet 316.0 [M+H]<+>, 337.9 [M+Na]<+>.
HRMS beregnet for Ci2H16N307Na, 338.0964. Funnet, 338.0953.
Eksempel 32
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6PO- 2- r2' S- amino- 3 MlH- indol- 3- yl)- propionvlaminol- 4- hvdroksvbicyklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsvre
Fremstill ved å løse opp 2-[2'-tert-butoksykarbonylamino-3'-(l '-tert-butoksykarbonyl-lH-indol-3 '-yl)-propionylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (0,93 mmol, fremstilling 33) i THF (11 ml) og behandle løsningen med 2,5N LiOH (11 ml). La reaksjonsløsningen røre i 3 timer og juster pH til 2 med 2,5N HC1. Ekstraher produktet fire ganger med etylacetat, tørk over vannfri natriumsulfat og konsentrer i vakuum for å gi et hvitt pulver. Løs opp disyreproduktet (0,78 mmol) i en løs-ning av 4M HC1 i dioksan (20 ml) og la reaksjonsblandingen røre i 3 timer ved 23°C. Konsentrer reaksjonsblandingen, fortynn med diklormetan og konsentrer i vakuum. Løs opp det urene produktet i metanol, tilfør produktet på en radial kromatografi (silikagel) plate, la den spinntørke og eluer med MeOH (10%)/NH4OH (1%)/CHC13til MeOH (60%)/NH4OH (2%)/CHCl3. Løs opp produktet i vann og lyofiliser to ganger for å gi 139 mg (46%) av tittelforbindelsen.
[a]<23>,D= +19.23 (c=0.52, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.43 (1H, t, J = 2.9 Hz), 1.57 (1H, dd, J = 5.9, 15.2 Hz), 2.05 (1H, dd, J = 3.4, 6.4 Hz), 2.41 (1H, d, J = 14.7 Hz), 2.46 (1H, dd, J = 2.4, 5.9 Hz), 3.15 (1H, dd, J = 5.4, 14.7 Hz), 3.49 (1H, dd, J = 5.4, 14.7 Hz), 4.05 (1H, dd, J = 5.4, 9.3 Hz), 4.17 (1H, d, J = 5.4 Hz), 7.09 (2H, m), 7.27 (1H, s), 7.37 (1H, d, J = 8.3 Hz), 7.75 (1H, d, J = 7.8Hz).
MS funnet 388.0 [M+H]<+>, 409.9 [M+Na]<+>.
HRMS beregnet for C19H21N3O6, 388.1508. Funnet, 388.1502.
Eksempel 33
( 1 S, 2S, 4S, 5R, 6RV4- hvdroksv- 2- r( pvrrolidin- 2' S- karbonvD- aminol-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre saltsyre
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(l '-tert-butoksykarbonyl-pyrrolidin-2'S-karbonyl)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 34), med unntak av at cen tert-butoksykarbonylbeskyttende gruppen fjernes ved behandling med 4M HC1 i dioksan.
[a]<23>,D= -40 (c=0.5, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.59 (1H, t, J= 3 Hz), 1.78 (1H, dd, J= 5.9,15.3 Hz), 2.06 (4H, m), 2.42 (1H, m), 2.59 (2H, m), 3.35 (m, 3H), 4.27 (1H, m), 4.32 (1H, d, J= 5.9 Hz).
HRMS beregnet for C13H19N2O6, 299.1243. Funnet, 299.1242.
Analyse beregnet for Ci3Hi8N206 • HC1 • H20: C, 44.26; H, 6.00; N, 7.94. Funnet: C, 44.13; H, 5.78; N, 7.62.
Eksempel 34
( 1 S. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2- f2' S- amino- 3 ,-( 4- hvdroksy- fenvl)- propionylamino1- 4- hvdroksy-bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre hvdrokloridsalt
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-[2'S-tert-butoksykarbonylamino-3'-(4-tert-butoksykarbonyloksy-fenyl)-propionylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 35), med unntak av at den tert-butoksykarbonylbeskyttende gruppen fjernes ved behandling med 4M HC1 i dioksan. Utbytte 199 mg (50%).
[a]<23>,D= +8 (c=0.5, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.48 (1H, t, J = 3 Hz), 1.62 (1H, dd, J= 5.9, 15.3 Hz), 2.03 (1H, m), 2.38 (1H, d, J= 15.3Hz), 2.55 (1H, m), 2.8 (1H, dd, J= 8.9, 14.4 Hz), 3.12 (1H, dd, J = 5.4, 14.4 Hz), 3.90 (1H, q, J= 5.4 Hz), 4.21 (1H, d, J= 5.9 Hz), 6.7 (2H, d, J= 8.4 Hz), 7.05 (2H, d, J= 8.4 Hz).
HRMS beregnet for C17H21N2O7, 365.1349. Funnet, 365.1374.
Analyse beregnet for C17H20N2O7 • 1.1 HC1 • 1.1 H20: C, 48.12; H, 5.54; N, 6.60. Funnet: C, 47.89; H, 5.37; N, 6.50.
Eksempel 35
( lS. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2, S- amino- 4,- metvlsulfanvl- butvrvlamino)- 4- hvdroksvbicyklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre bis ammoniumsalt
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2' S-tert-butoksykarbony lamino-4' -mety lsulfany l-butyrylamino)-4-hy droksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 36), med unntak av at den tert-butoksykarbonylbeskyttende gruppen fjernes ved behandling med 4M HC1 i dioksan. Sluttproduktet tilsettes med MeOH til en 2 mm Chromatotron-plate og elueres med 50/49,5/0,5 CHCla/MeOH/N^OH. Mengden NH4OH ble økt til 1% i løpet av elueringen for å gi switterionforbindelsen. Utbytte 136 mg (37%).
[<x]<23>,D= +28 (c=1.0, MeOH).
<]>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 1.63 (1H, dd, J= 6.0, 15.6 Hz), 2.03 (2H, m), 2.12 (3H, s), 2.18 (1H, m), 2.35 (1H, m), 2.49 (1H, d, J= 15.6 Hz), 2.65 (2H, t, J= 8.4 Hz), 3.84 (1H, t, J= 6.0 Hz), 4.19 (1H, d, J= 6.0 Hz). HRMS beregnet for CbH2iN206S, 333.1120. Funnet, 333.1105.
Eksempel 36
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- r2, S-( 2S- amino- propionvlammo)- propionylaminol- 4- hvdroksv-bicvklor3. 1. 0] heksan- 2, 6- dikarboksylsvre
Rør (lS,2S,4S,5R,6R)-2-[2'S-(2S-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-propionylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (0,045 g, 0,1 mmol, fremstilling 39) i 1 ml 4N HC1 i dioksan i 40 minutter og konsentrer deretter reaksjonsblandingen i vakuum. Rør det urene materialet i THF (5 ml) og 0,5N LiOH (0,35 mmol) i 1 time. Juster pH til 2 med 0,5N HC1 og konsentrer reaksjonsblandingen. Rens det urene produktet ved anvendelse av kationbytterkromatografi (Dowex® 50X8-100; eluert med 10% pyridin/H20) for å gi 19 mg (55,3%) av tittelforbindelsen.<]>H NMR (300 MHz, D20) 5 1.23 (3H, d, J=7.3 Hz), 1.36 (3H, d, J=7.3 Hz), 1.40-145 (1H, m), 1.50 (1H, dd, J=5.5, 15.4 Hz), 1.90-1.96 (1H, m), 2.20 (1H, dd, J=2.6, 5.9 Hz), 2.29 (1H, d, J=15.4 Hz), 3.90 (1H, q, J=7.3 Hz), 4.15-4.22 (2H, m).
MS (ES) m/z 342.1 [M-l]".
HRMS beregnet for C14H22N3O7, 344.1458. Funnet, 344.1457.
Eksempel 37
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2-[ 2, S-( 2- amino- acetvlamino)- propionylamino1- 4- hvdroksv-bicvklo[ 3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksvlsyre
(lS,2S,4S,5R,6R)-2-[2'S-(2-tert-butoksykarbonylamino-acetylamino)-propionylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (0,12 g, 0,25 mmol,
fremstilling 40) i THF (5 ml) og IN LiOH (1,0 mmol) røres i 1 time. Juster blandingen til pH 2 ved anvendelse av IN HC1 og konsentrer. Rør det urene materialet i mettet HC1 (g) etylacetatløsning ved 0°C. Fjern overskudd HC1 (g) ved overstrømming med N2og
konsentrering av reaksjonsblandingen. Rens det urene produktet ved anvendelse av kationbytterkromatografi (Dowex® 50X8-100; eluer med 10% pyridin/H20) for å gi 0,06 g (72,9%) av tittelforbindelsen.
[a]<23>,D= -42.11 (c = 0.57, H20).
<]>H NMR (300 MHz, D20) 5 1.21 (3H, d, J=7.3 Hz), 1.39 (1H, m), 1.50 (1H, dd, J=5.7, 15.8 Hz), 1.91 (1H, m), 2.15 (1H, dd, J=2.6, 5.9 Hz), 2.28 (1H, d, J=15.0 Hz), 3.65 (2H, s), 4.14 (1H, app d, J=5.9 Hz), 4.20 (1H, app q, J=7.3 Hz).
HRMS beregnet for Ci3H2oN307, 330.1301. Funnet, 330.1299.
Eksempel 38
( lS. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2- r2, S-( 2S- amino- 4- metvl- pentanovlamino)- propionylaminol- 4-hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-[2'-(2S-tert-butoksykarbonylamino-4-metyl-pentanoylamino)-propionylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 41). Utbytte 0,21 g (57%, 0,50 mmol) av et hvitt fast stoff.
[<x]<23>,D= -3.64° (c = 0.55, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 0.89 (3H, d, J=4.4 Hz), 0.91 (3H, d, J=4.0 Hz), 1.29 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.52 (1H, t, J=3.3 Hz), 1.55-1.67 (4H, m), 1.97 (1H, dd, J=2.9,5.9 Hz), 2.38 (1H, dd, J=2.9, 5.9 Hz), 2.45 (1H, d, J=15.4 Hz), 3.75-3.80 (1H, m), 4.18 (1H, d, J=5.9 Hz), 4.33 (1H, app. q, J=7.0 Hz),
Analyse beregnet for C17H27N3O7«1.0 HO» 1.6 H20: C, 45.30; H, 6.98; N, 9.32; Cl, 7.87. Funnet: C, 44.95; H, 6.54; N, 9.12; Cl, 7.53.
HRMS (ES) beregnet for Ci7H28N307[M + H]<+>, 386.1927. Funnet, 386.1911.
Eksempel 39
( lS, 2S, 4S, 5R, 6R)- 2- r2, S-( 2- amino- 3- metvl- butvrvlamino)- propionylaminol- 4-hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6- dikarboksylsvre
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-[2'-(2S-tert-butoksykarbonylamino-3-metyl-butyrylamino)-propionylamino]-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (fremstilling 42). Utbytte 0,15 g (88%, 0,37 mmol) som et hvitt fast stoff.
[a]<23>,D= -15.69° (c = 0.51, MeOH).
<]>H NMR (300 MHz, CD3OD) 5 0.92 (3H, d, J=7.0 Hz), 0.95 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.28 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.52 (1H, t, J=2.9 Hz), 1.60 (1H, dd, J=5.9, 15.4 Hz), 1.98 (1H, dd, J=3.3, 5.9 Hz), 2.03-2.15 (1H, m), 2.39 (1H, dd, J=2.9, 6.2 Hz), 2.45 (1H, d, J=15.4 Hz), 3.56 (1H, d, J=5.5 Hz), 4.18 (1H, d, J=5.9 Hz), 4.33 (1H, app. q, J=7.0 Hz), 8.82 (1H, s).
Analyse beregnet for CieHisNaOv-l.O HCM.5H20: C, 44.19; H, 6.72; N, 9.66; Cl, 8.15.
Funnet: C, 44.32; H, 6.48; N, 9.14; Cl, 7.66.
HRMS (ES) beregnet for C16H26N307[M + H]<+>, 372.1771. Funnet, 372.1758.
Eksempel 40
( lR. 2S. 4R. 5R. 6R)- 2-( 2, S- 2,- aminopropionvl) amino- 4- lfuor- bicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsvre mesylatmonohydrat
Tilsett 16 ml vann fulgt av 11,4 ml (175 mmol) metansulfonsyre til en blakket løsning av (lR,2S,4R,5R,6R)-2-(2'S-2'-(tert-butoksykarbonylamino)propionyl)amino-4-fluor-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre (32,8 g, 87,5 mmol, fremstilling 52) i 295 ml aceton ved forsiktig refluks dråpevis for å gi en klar matt gul løsning som gir en slurry etter 5 minutter. Rør i 130 minutter, fjern varmekilden og tilsett ytterligere 295 ml aceton i løpet av 30 minutter. Avkjøl slurryen til romtemperatur og rør deretter i ytterligere 2 timer. Filtrer slurryen, vask med aceton (2 x 82 ml), og vakuumtørk ved 45°C i 16 timer for å gi 31,5 g (93%) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Materialet kan ytterligere krystalliseres. Bland 30,5 g av det urene produktet ovenfor med 152,5 ml aceton og 35 ml vann. Varm til 55°C og tilsett vann (3,66 ml) for å bevirke fullstendig oppløsning. Løs opp løsningen med 61 ml aceton og så eventuelt. Fjern varmekilden og la blandingen sakte avkjøle til god nukleering har startet opp. Tilsatt 396 ml aceton til slurryen i løpet av 70 minutter og rør deretter ved romtemperatur i ytterligere 3 timer. Filtrer, vask med aceton (3x91 ml) og vakuumtørk ved 45°C i flere timer (typisk over natten) for å gi 27,7 g (91% utvinning) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Smp. (DSC) 200°C.
[a]25D +34° (c 1.0, CH3OH)
400 MHz iH NMR (DMSO-d6) 5 12.76 (br s, 2H), 9.18 (s 1H), 8.07 (br s, 3H), 5.50-5.36 (m, 1H), 3.87 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 2.82 (dd, 1H, J = 14, 8.0 Hz), 2.38 (s, 3H), 2.25 (m, 2H), 1.96 (t, 1H, J = 3.0 Hz), 1.39 (m, 1H), 1.37 (d, 3H, J = 6.8 Hz).
100 MHz<i>3C NMR (DMSO-de) 5 173.1, 172.3, 169.7, 92.8 (d, C-F splitting), 63.2 (d, C-F splitting), 48.0, 39.7, 36.4 (d, C-F splitting), 32.5(d, C-F splitting), 29.3 (d, C-F splitting), 19.3 (d, C-F splitting), 16.9.
FTIR (KBr) 3461 (w), 3379 (w), 3269 (m), 2653 (s), 2591 (s), 2529 (s), 1724 (s), 1691 (s), 1353 (m), 1287 (s), 1271 (s), 1256 (s), 1212 (s), 1147 (s), 1052 (s), 1024 (s), 787 (m) cm-i.
Analyse beregnet for C12H21FN2O9S: C, 37.11; H, 5.45; N, 7.21. Funnet: C, 37.12; H, 5.45; N, 7.16.
Eksempel 41
( lR, 4S, 5S, 6SV4-( 2, S- 4,- metyltio- 2,- aminobutanovnamino- 2, 2- diokso- 2X6- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsvre monohydrat
Varm en slurry av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-metyltio-2'-(tert-butoksykarbonyl)aminobutanonyl)amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre mononatriumsalt (110,04 g, 225,3 mmol, fremstilling 55) i aceton (110 ml) og vann (550 ml) til 55°C. Tilsett konsentrert saltsyre (56 ml, 675,8 mmol) dråpevis til en rørte slurryen for gradvis å gi oppløsning. Etter fullstendig tilsetning rør reaksjonsblandingen ved 55°C i 2 timer. Fjern varmekilden og avkjøl løsningen til romtemperatur. Filtrer løsningen og rens med 20 ml vann. Tilsett sakte 2N natriumhydroksid (165 ml, 330 mmol) til løsningen for å heve pH til 1,71 hvorved presipitering finner sted. Rør i 10 minutter og det dannes deretter en slurry og pH faller til 0,98. Tilsett mer 2N natriumhydroksid (62 ml, 124 mmol) til den resulterende slurryen og hev pH til 3,06 fulgt av røring i 3 timer for å gi en endelig pH på 3,24. Filtrer slurryen, vask med vann (2 x 165 ml) og tørk ved 45°C i 15 timer for å gi 73,27 g (85% vektutbytte) av tittelforbindelsen som et hvitt fast stoff.
Smp. (DSC) 203°C.
[a]25D +13.4 (c 1.19,1NHC1).
500 MHz 1H NMR (D20) 5 3.99 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 3.93 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 3.50 (dd, 1H, J = 1.0, 4.0 Hz), 3.12 (d, 1H, J = 15.0 Hz), 2.95 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 2.48 (t, 2H, J = 8.0 Hz), 2.33 (t, 1H, J = 4.0), 2.09 - 1.98 (m, 5H).
13C NMR (125 MHz, D20) 5 173.50,172.60,169.18, 61.66,54.76,52.19,42.55, 31.70, 30.10,28.09,23.53, 14.14.
FTIR (ATR) 3558.54 (s), 3024.05 (s), 2959.87 (s), 1748.83 (s), 1692.89 (s), 1681.99 (s), 1617.50 (s), 1567.63 (s), 1497.65 (s), 1314.11 (s), 1282.22 (s), 1263.26 (s), 1239.01 (s), 1101.46 (s), 884.62 (s), 809.95 (s), 773.46 (s) cm-1.
Analyse beregnet for C12H18N207S2.H20: C, 37.49; H, 5.24; N, 7.29. Funnet: C, 37.34; H, 5.04; N, 7.15.
Eksempel 42
( lR, 4S, 5S, 6SV4-( 2, S- 4,- metyltio- 2,- aminobutanonvDamino- 2, 2- diokso- 2X6- tiabicvklor3. 1. 01heksan- 4, 6- dikarboksvlsvre tosylat
Varm en blanding av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-metyltio-2'-(tert-butoksykarbonyl)aminobutanonyl)amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre (118,09 g korrigert, 253 mmol, fremstilling 56) og p-toluensulfonsyre monohydrat (54 g, 278 mmol) i toluen (1180 ml) til 75°C, som resulterer i en tykk slurry. Rør slurryen til refluks i 165 minutter. Fjern varmekilden og slurryen avkjøles til romtemperatur fulgt av røring over natten. Filtrer slurryen, vask med toluen (3 x 240 ml), og tørk i vakuum ved 45°C i 22 timer for å 134,92 g (98% utbytte) av tittelforbindelsen.
Smp. (DSC) 255 °C.
[a]25D +8.3 (c 1.2, CH30H).
500 MHz 1H NMR (CD3OD) 57.71 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 7.24 (d, 2H, J = 8.0 Hz), 4.14 (d, 1H, J = 15 Hz), 4.00 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 3.54 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 3.13 (d, 1H, J = 15 Hz), 3.01 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 2.60 (t, 2H, J = 8.0 Hz), 2.49 (t, 1H, J = 4.0 Hz), 2.37 (s, 3H), 2.19 - 2.12 (m, 5H).
13C NMR (125 MHz, CD3OD) 5 170.49, 169.69,168.99,142.18,140.67,182.73, 125.79, 60.26, 54.76, 52.21, 42.44, 30.90, 30.77, 27.20, 22.33, 20.17, 13.96. FTIR(ATR) 3091.19 (w), 1730.91 (s), 1668.22 (s), 1563.97 (s), 1518.49 (s), 1312.69 (m), 1247.46 (s), 1212.05 (s), 1156.33 (s), 1123.09 (s), 1035.95 (s), 1011.36 (s), 892.41 (s), 814.02 (s), 683.69 (s) cm-1.
Eksempel 43
( lR. 4S. 5S. 6S)- 4-( 2, S- 4,- metvltio- 2,- aminobutanonyl) amino- 2. 2- diokso- 2X6- tia-bicvkloD. 1. 0"| heksan- 4, 6- dikarboksylsvre mesylat
Varm en slurry av (lR,4S,5S,6S)-4-(2'S-4'-metyltio-2'-(tert-butoksykarbonyl)aminobutanonyl)aminon-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre (1,08 g, 2,31 mmol, fremstilling 56) i 13 ml propionitril til 85°C. Tilsett vann (540 ul) til slurryen, og tilsett deretter metansulfonsyre dråpevis (225 ul, 3,47 mmol). Rør slurryen i 90 minutter. Fjern varmekilden og tilsett propionitril (30 ml). Avkjøl slurryen til romtemperatur og rør i 90 minutter. Filtrer, vask med propionitril (3 x 2,7 ml) og tørk ved 45°C over natten for å gi 1,04 g (97%) av tittelforbindelsen.
Smp. (DSC) 244°C.
[a]25D +10.2 (c 1.16, CH30H).
500 MHz 1H NMR (CD3OD) 5 4.16 (d, 1H, J = 15 Hz), 4.00 (t, 1H, J = 6.0 Hz), 3.54 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 3.15 (d, 1H, J = 15 Hz), 3.01 (dd, 1H, J = 4.0, 7.0 Hz), 2.71 (s, 3H), 2.61 (t, 2H, J = 8.0), 2.51 (t, 1H, J = 4.0), 2.20 - 2.14 (m, 5H).
13C NMR (125 MHz, CD3OD) 5 170.50, 169.71,169.00, 60.27, 54.78, 52.18,42.43, 38.35, 30.90, 30.78, 28.20, 22.35, 13.96.
FTIR (ATR) 3055.57 (m), 1725.90 (s), 1693.60 (s), 1527.33 (s), 1528.96 (s), 1320.89 (s), 1176.86 (s), 1152.70 (s), 1118.55 (s), 1051.42 (s), 816.49 (s), 786.63 (s) cm-1. Analyse beregnet for C12H18N207S2.CH403S: C, 33.76; H, 4.79; N, 6.06. Funnet: C, 33.98; H, 4.82; N, 5.98.
Eksempel 44
( lR. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2, R- aminopropionvl) amino- 6- fluor- bicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsvre hydroklorid
Tilsett 1,13 ml (2,8 mmol) av 2,5N LiOH til en løsning av 0,20 g (0,47 mmol) isomer A fra fremstilling 60 i THF (1,2 ml) og rør den resulterende blandingen over natten ved romtemperatur. Vask løsningen med eter, nøytraliser ved 0°C med IN HC1 og ekstraher med EtOAc (3x3 ml). Tørk de kombinerte organiske sjiktene med vannfri MgS04og konsentrer under redusert trykk. Løs opp det urene materialet i 3,76 ml IN HC1 i EtOAc og rør over natten. Dekanter løsemidlet, vask med eter, og tørk produktet med en Ar-strøm for å gi tittelforbindelsen (83 mg, 57% utbytte) som et hvitt fast stoff.
<]>H-NMR (300 MHz, CDC13): 1.28 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.64-1.69 (m, 1H), 1.86-2.02 (m, 1H), 2.11-2.21 (m, 3H), 2.54 (d, 1H, J = 7.1 Hz), 3.84 (q, 1H, J = 7.1 Hz).
Eksempel 45
( lS, 2R, 5S, 6SV2-( 2, R- aminopropionvDamino- 6- fluor- bicvklor3. 1. 01heksan- 2, 6-dikarboksylsvre hydroklorid
Begynn med en løsning av isomer B i fremstilling 60, og tittelforbindelsen fremstilles essensielt som eksempel 44.
<]>H-NMR (300 MHz, CDC13): 1.30 (d, 3H, J = 7.1 Hz), 1.59-1.65 (m, 1H), 1.85-2.03 (m, 1H), 2.05-2.25 (m, 3H), 2.53 (d, 1H, J = 6.6 Hz), 3.85 (q, 1H, J = 7.1 Hz).
Eksempel 46
( 1 S. 2S. 4S. 5R. 6R)- 2-( 2' S- aminopropionvl) amino- 4- hvdroksv- bicvklor3. 1. 01heksan- 2. 6-dikarboksylsvre hydroklorid
Fremstill i henhold til generell fremgangsmåte C ved anvendelse av (1S,2S,4S,5R,6R)-2-(2' S-tert-butoksykarbonylamino-propionylamino)-4-hydroksy-bicyklo[3.1.0]heksan-2,6-dikarboksylsyre dietylester (0,47 g, 1,1 mmol, fremstilling 37) for å gi 0,23 g (67,7%) av tittelforbindelsen.
[<x]<23>,D= -4.1 (c=0.49, MeOH).
<!>H NMR (CD3OD) 5 1.51 (3H, d, J=7.0 Hz), 1.56 (1H, t, J=2.9 Hz), 1.77 (1H, dd, J=5.8,15.8 Hz), 2.1-2.13 (1H, m), 2.52 (1H, d, J=16.1 Hz), 2.57 (1H, dd, J=2.9, 5.9 Hz), 3.88 (1H, dd, J=7.0, 14.3 Hz), 4.32 (1H, d, J=5.5 Hz).
Analyse beregnet for CnHnNiOe • 1.1 HC1 • 0.9 H20: C, 40.12; H, 5.80; N, 8.53. Funnet: C, 39.85; H, 5.41; N, 8.36.
HRMS beregnet for C„H16N206Na, 295.0906. Funnet, 295.0883.
Prodrugforbindelsen ifølge oppfinnelsen kan evalueres ovenfor korresponderende mor-forbindelse gjennom forskjellige cellulære opptaksundersøkelser. Disse undersøkelsene kan gi sammenligningsdata for å muliggjøre for fagmannen å identifisere forbindelser som lett absorberes inn i cellen for å gi overlegen eksponering. To slike undersøkelser inkluderer Gly-Sar-opptakundersøkelse og Caco-2-undersøkelse, beskrevet nedenfor.
Gly- Sar- opptaksundersøkelse
Det har blitt funnet at noen oralt administrerte peptidoetterlignende legemidler absorberes gjennom intestinalpeptidtransportsystemet. Yang, et al., Pharm. Res. 16(9) (1999). Særlig, har intestinalpeptidtransporteren hPepTl blitt studert for dens ekspresjon ved inhibering av peptidylopptak og det korresponderende nivået av gjenkjenning i cellen. Meredith, et al, Eur. J. Biochem., 267, 3723-3728 (2000). Videre har intestinalab-sorpsjonsmekanismen til aminosyrene i hPepTl-transporteren vært målet som en effektiv strategi for å identifisere forbedret oral legemiddelabsorpsjon. Han, et al, Polym. Prepr. (Am. Chem. Soc, Div. Polym. Chem.) 40(1): 259-260 (1999); Sawada, et al, J. Pharmacol. Exp. Ther., 291(2): 705-709 (1999).
U.S. patent nr. 5,849,525 beskriver fremgangsmåter som kan anvendes for å måle affini-tetsnivået til forbindelsen ifølge oppfinnelsen med hPepTl-transporteren.
For eksempel, kan stabilt transfekterte kinesisk hamsterovarie (CHO)-celler som overut-trykker hPepTl-transporteren anvendes for å teste forbindelser ifølge oppfinnelsen. CHO-cellene vil overvåkes for opptak av Gly-Sar, som når de tas opp under nærvær av prodrugforbindelsene ifølge oppfinnelsen er i mengder større enn når cellene er uten prodrugforbindelser ifølge oppfinnelsen som vil være indikative for agonistisk aktivitet; og som når opptak av prodrugforbindelsene ifølge oppfinnelsen er mindre enn opptak under fravær av prodrugforbindelser ifølge oppfinnelsen, vil dette være indikativt for inhiberingsaktivitet. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen, inhiberer generelt ECso-verdier på mindre enn 5 mM.
Caco- 2- undersøkelse
En annen spesiell fremgangsmåte for å måle opptak av forbindelsen ifølge oppfinnelsen i celler er å studere peptidtransportbærer av human intestinalcellelinje Caco-2. Humane adenokarcinomceller (Memorial Sloan-Kettering Cancer Center, Rye, NY og/eller ATCC, Rockville, MD) passeres i Dulbecco's modifiserte Eagle medium som inneholder 10% fosterkalveserum og 1% minimal essensiell medium ikke-essensiell aminosyre-løsning uten tilsetning av natriumpyruvat og antibiotiske stoffer. Disse cellene var my-koplasmafrie og ble anvendt mellom passering nr. 28 og 40. For fluksmålinger, ble mellom 5 til 10 x 10<4>celler dyrket i kollagenbelagte flerbrønnsskåler i 13-18 dager og me-diet ble erstattet hver annen eller tredje dag.
Legemiddelopptak måles ved 37°C ved anvendelse av en testforbindelse ved anvendelse av en clusterfatteknikk (se Gazzola, et al., Anal. Biochem. 115, 368-74 (1981)). Fluks-buffer er bikarbonatfri Earle's balanserte saltløsning som inneholder 25 mM Mes titrert til pH 6,0 med KOH, og cholinklorid i stedenfor natriumklorid. Osmolaliteten til fluks-bufferen justeres til 300 ± 5 mosmol/kg med cholinklorid. [ H]inulin anvendes som en markør for det ekstracellulære fluidet som festes til cellene i løpet av vaskeprosedyren for å estimere nulltid for bestemmelse av opptakshastighet. Nye løsninger av testforbin-delsen og dipeptidene blir fremstilt daglig. Ved slutten av eksperimentene blir cellene lysert i vann og testforbindelsene kan detekteres i cellelysat ved anvendelse av LC/MS/MS. Protein måles ved fremgangsmåten beskrevet i Smith, et al., Anal. Biochem. 150, 76-85 (1985).
Opptak måles i løpet av 40 minutter. Initielle opptakshastigheter beregnes i det lineære området i løpet av tiden i løpet av regresjon og en estimert nulltid som beskrevet ovenfor ved anvendelse av lineær regresjon. Prosent inhibering beregnes basert på kontroll-opptakshastighet målt under fravær av et dipeptid. Eksempel på denne Caco-2 - undersøkelsen, se Dantzig & Bergin, Biochim. Biophys. Acta 1027,211-17 (1990).
In vivo- eksponering målt ved rotteplasmakonsentrasjon
For å studere in vivo-eksponeringen av forbindelsen med formel II etterfølgende oral dosering av forbindelse med formel I sammenlignet med forbindelser med formel II, ble studier som måler plasmakonsentrasjon av den respektive forbindelsen med formel II hos rotter utført. Voksne Fischer 344 hannrotter (190-270 g) ble oppnådd fra Harlan Sprague-Dawley, Cumberland, IN, USA, og aklimatisert i studieinnlosjeringen i 3 dager. På dag 4, ble testforbindelsene løst i bufret vann (1 mg/ml = testforbindelse/20 mM kaliumdihydrogenfosfat, pH = 2) og gitt oralt som en enkel 5 mg/kg dose. Blodprøver samles opp gjennom orbital sinus eller hjertepunktering (siste tidspunkt) ved 0,5 og 1 time eller, alternativt, ved 1 og 3 timer. Plasmaprøver lagres ved -20°C under nærvær av fenylmetylsulfonylfluorid, en proteaseinhibitor, før analyse. Plasmaprøver og indre standardforbindelser ble forhåndsbehandlet med fastfaseekstraksjon (SAX-støttemateriale, metanol/vann/fortynnet eddiksyre).
Som vist i tabellene IA og IB nedenfor, ble plasmakonsentrasjoner (ng/ml av den respektive forbindelsen med formel II for hver testforbindelse bestemt ved LC/MS/MS og er presentert som summen av konsentrasjoner ved 0,5 og 1 time eller, alternativt, ved 1 og 3 timer prøvetidspunkter.
Som vist i tabellene IA og IB, når det gis oralt til rottene, fremviser prodrugforbindelsen sammenlignbar plasmakonsentrasjon av morforbindelsen. Dette demonstrerer at prodrugforbindelsen omdannes til morforbindelsene, forbindelser med formel II, in vivo.
Forbindelsen ifølge oppfinnelsen blir foretrukket formulert før administrasjon. Derfor, er et annet aspekt av foreliggende oppfinnelse en farmasøytisk formulering som innbefatter en forbindelse med formel I, eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, og en farmasøytisk akseptabel bærer, fortynningsmiddel eller eksipient. De farmasøytiske formuleringene kan fremstilles ved fremgangsmåter kjente for fagmannen. Ved fremstilling av sammensetningene ifølge oppfinnelsen vil den aktive ingrediensen vanligvis blandes med en bærer, eller fortynnes med en bærer, eller innelukkes i en bærer, og kan være i form av en kapsel, sachet, papir eller annen beholder. Når bæreren tjener som et fortynningsmiddel, kan den være et fast, delvis fast eller flytende materiale som virker som en vehikkel, eksipient eller medium for den aktive ingrediensen. Sammensetningene kan være form av tabletter, piller, pulvere, lozenger, sacheter, cacheter, eliksirer, suspensjoner, emulsjoner, løsninger, siruper, aerosoler, salver som f.eks. inneholder opp til 10 vekt-% av den aktive forbindelsen, myke og harde gelatinkapsler, stikkpiller, ste-rile injiserbare løsninger og sterilt pakkede pulver.
Noen eksempler på egnede bærer, eksipienter og fortynningsmidler inkluderer laktose, dekstrose, sukrose, sorbitol, mannitol, stivelser, gummi, akacia, kalsiumfosfat, alginater, tragakant, gelatin, kalsiumsilikat, mikrokrystallinsk cellulose, polyvinylpyrrolidon, cellulose, vannsirup, metylcellulose, metyl- og propylhydroksybenzoater, talkum, magne-siumstearat og mineralolje. Formuleringene kan i tillegg inkludere smøremidler, fukte-midler, emulgerings- og suspenderingsmidler, konserveringsmidler, søtningsgjørende midler og smaksstoffer. Sammensetningene ifølge oppfinnelsen kan formuleres for å tilveiebringe rask, vedvarende eller forsinket frigivelse av den aktive ingrediensen etter administrasjon til pasienten ved å anvende fremgangsmåter kjente i litteraturen.
Sammensetningene blir foretrukket formulert i en enhetsdoseringsform, hvor hver dosering inneholder fra ca. 5 mg til ca. 500 mg aktiv forbindelse, foretrukket ca. 25 mg til ca. 300 mg aktiv ingrediens. Slik det anvendes heri, refererer begrepet "aktiv ingrediens" til en forbindelse inkludert innenfor omfanget av formel I.
Begrepet "enhetsdoseringsform" refererer til en fysisk adskillbar enhet egnet som en-hetsdosering for menneskesubjekter og andre pattedyr, hvor hver enhet inneholder en forhåndsbestemt mengde av et aktivt materiale beregnet for å gi ønsket terapeutisk effekt, sammen med en passende farmasøytisk bærer, fortynningsmiddel eller eksipient.

Claims (12)

1. Forbindelse,karakterisert vedat nevnte forbindelse er (1 R,4S ,5 S,6S)-4-(2' S-4 '-metyltio-2 '-aminobutanony l)amino-2,2-diokso-2X6-tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav.
2. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat nevnte forbindelse er (1 R,4S,5S,6S)-4-(2' S-4'-metyltio-2 '-aminobutanonyl)amino-2,2-diokso-2X<6->tia-bicyklo[3.1.0]heksan-4,6-dikarboksylsyre monohydrat.
3. Forbindelse ifølge krav 1 eller 2, for medisinsk bruk.
4. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2, for fremstilling av et medikament for administrering av en effektiv mengde av en forbindelse med formel (II),
hvor X er SO2, R<10>er hydrogen ogR<11>er hydrogen.
5. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller 2, for fremstilling av et medikament for behandling av en neurologisk lidelse hos en pasient.
6. Anvendelse ifølge krav 5, hvori nevnte neurologiske lidelse er cerebrale svekkelse etter hjertebypass og poding; ryggradtraume; hodetraume; Alzheimer's sykdom; Hunting-ton's Chorea; amyotrofisk lateral sklerose; AIDS-indusert dements; perinatal hypoksi; hypoglykemisk neuronal skade; okulær skade og retinopati; kognitive forstyrrelser; idiopatisk og legemiddelindusert Parkinson's sykdom; muskulære spasmer; migreneho-depine; urininkontinens; legemiddeltoleranse, abstinens, avslutning og etterlengting; røykeavslutning; emesi; hjerneødem; kronisk smerte; søvnforstyrrelser; konvulsjoner; Tourette's syndrom; oppmerksomhetssviktforstyrrelse; og tardiv dyskinesi.
7. Anvendelse ifølge krav 6, hvori nevnte neurologiske lidelse er legemiddeltoleranse, abstinens, avslutning og etterlengting; og røkeavslutning.
8. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2, for fremstilling av et medikament, for behandling av en psykiatrisk forstyrrelse hos en pasient.
9. Anvendelse ifølge krav 8, hvori nevnte psykiatrisk forstyrrelse er schizofreni, angst og relaterte forstyrrelser, depressjon, bipolare forstyrrelser, psykose og obsessiv kompulsi-ve forstyrrelser.
10. Anvendelse ifølge krav 9, hvori nevnte psykiatrisk forstyrrelse er angst og relaterte forstyrrelser.
11. Anvendelse ifølge krav 9, hvori nevnte psykiatrisk forstyrrelse er schizofreni.
12. Farmasøytisk formulering, hvor nevnte formulering omfatter en forbindelse ifølge krav 1 eller krav 2 i assosiasjon med en farmasøytisk akseptabel bærer, diluent eller eksipient.
NO20050122A 2002-06-11 2005-01-10 Prodrug av eksitasjonsaminosyre, farmasoytisk preparat samt anvendelser derav NO331780B1 (no)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP02380120 2002-06-11
EP02380121 2002-06-11
US41593702P 2002-10-03 2002-10-03
US41593602P 2002-10-03 2002-10-03
PCT/US2003/015405 WO2003104217A2 (en) 2002-06-01 2003-06-06 Prodrugs of excitatory amino acids

Publications (2)

Publication Number Publication Date
NO20050122L NO20050122L (no) 2005-01-10
NO331780B1 true NO331780B1 (no) 2012-03-26

Family

ID=29740902

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20050122A NO331780B1 (no) 2002-06-11 2005-01-10 Prodrug av eksitasjonsaminosyre, farmasoytisk preparat samt anvendelser derav
NO20080765A NO20080765L (no) 2002-06-11 2008-02-12 Prodrug av eksitasjonsaminosyrer

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
NO20080765A NO20080765L (no) 2002-06-11 2008-02-12 Prodrug av eksitasjonsaminosyrer

Country Status (30)

Country Link
US (5) US7371872B2 (no)
EP (2) EP1517915B1 (no)
JP (2) JP4342437B2 (no)
KR (1) KR20080058509A (no)
AR (1) AR040257A1 (no)
AT (1) ATE421526T1 (no)
AU (1) AU2003232146B2 (no)
BR (1) BR0311558A (no)
CA (1) CA2488167C (no)
CO (1) CO5631438A2 (no)
CR (2) CR7616A (no)
CY (1) CY1108976T1 (no)
DE (1) DE60325968D1 (no)
DK (1) DK1517915T3 (no)
EA (2) EA011231B1 (no)
EC (1) ECSP085481A (no)
ES (1) ES2319116T3 (no)
HK (1) HK1075259A1 (no)
HR (2) HRP20041179B1 (no)
IL (2) IL165100A0 (no)
MX (1) MXPA04012518A (no)
MY (1) MY146238A (no)
NO (2) NO331780B1 (no)
NZ (3) NZ536459A (no)
PE (1) PE20040555A1 (no)
PL (1) PL221489B1 (no)
PT (1) PT1517915E (no)
SI (1) SI1517915T1 (no)
WO (1) WO2003104217A2 (no)
ZA (1) ZA200409553B (no)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP1517915B1 (en) * 2002-06-11 2009-01-21 Eli Lilly And Company Prodrugs of excitatory amino acids
AR059898A1 (es) 2006-03-15 2008-05-07 Janssen Pharmaceutica Nv Derivados de 3-ciano-piridona 1,4-disustituida y su uso como moduladores alostericos de los receptores mglur2
TW200845978A (en) 2007-03-07 2008-12-01 Janssen Pharmaceutica Nv 3-cyano-4-(4-tetrahydropyran-phenyl)-pyridin-2-one derivatives
TW200900065A (en) 2007-03-07 2009-01-01 Janssen Pharmaceutica Nv 3-cyano-4-(4-pyridinyloxy-phenyl)-pyridin-2-one derivatives
PT2203439E (pt) 2007-09-14 2011-02-11 Ortho Mcneil Janssen Pharm 4-fenil-3,4,5,6-tetra-hidro-2h,1'h-[1,4']bipiridinil-2'- onas 1',3'-dissubstituídas
RU2510396C2 (ru) 2008-09-02 2014-03-27 Янссен Фармасьютикалз, Инк. 3-азабицикло[3.1.0]гексильные производные в качестве модуляторов метаботропных глутаматных рецепторов
WO2010043396A1 (en) 2008-10-16 2010-04-22 Ortho-Mcneil-Janssen Pharmaceuticals, Inc. Indole and benzomorpholine derivatives as modulators of metabotropic glutamate receptors
AU2009319387B2 (en) 2008-11-28 2012-05-10 Addex Pharma S.A. Indole and benzoxazine derivatives as modulators of metabotropic glutamate receptors
WO2010111080A2 (en) 2009-03-27 2010-09-30 Eli Lilly And Company Optimized treatment of schizophrenia
NZ596078A (en) 2009-05-12 2013-06-28 Janssen Pharmaceuticals Inc 1,2,4-TRIAZOLO [4,3-a] PYRIDINE DERIVATIVES AND THEIR USE FOR THE TREATMENT OR PREVENTION OF NEUROLOGICAL AND PSYCHIATRIC DISORDERS
MY153913A (en) 2009-05-12 2015-04-15 Janssen Pharmaceuticals Inc 7-aryl-1,2,4-triazolo[4,3-a]pyridine derivatives and their use as positive allosteric modulators of mglur2 receptors
WO2010130422A1 (en) 2009-05-12 2010-11-18 Ortho-Mcneil-Janssen Pharmaceuticals, Inc 1,2,4-triazolo[4,3-a]pyridine derivatives and their use as positive allosteric modulators of mglur2 receptors
EP3300717B1 (en) * 2009-06-29 2020-09-23 Inolex Investment Corporation Non-petrochemically derived cationic emulsifiers that are neutralized amino acid esters and related compositions and methods
AR079343A1 (es) * 2009-12-21 2012-01-18 Lilly Co Eli Compuesto de acido 2-amino-4-(4h-1,2,4-triazol-3-ilsulfanil)biciclo[3.1.0]hexano-2,6-dicarboxilico, composicion farmaceutica que lo comprende y su uso para preparar un medicamento util para tratar un trastorno psiquiatrico
US8993591B2 (en) 2010-11-08 2015-03-31 Janssen Pharmaceuticals, Inc. 1,2,4-triazolo[4,3-a] pyridine derivatives and their use as positive allosteric modulators of MGLUR2 receptors
PL2649069T3 (pl) 2010-11-08 2016-01-29 Janssen Pharmaceuticals Inc Pochodne 1,2,4-triazolo[4,3-a]pirydyny i ich zastosowanie jako dodatnich allosterycznych modulatorów receptorów mGluR2
EP2643320B1 (en) 2010-11-08 2015-03-04 Janssen Pharmaceuticals, Inc. 1,2,4-TRIAZOLO[4,3-a]PYRIDINE DERIVATIVES AND THEIR USE AS POSITIVE ALLOSTERIC MODULATORS OF MGLUR2 RECEPTORS
WO2012068041A1 (en) 2010-11-18 2012-05-24 Eli Lilly And Company 4-SUBSTITUTED-3-BENZYLOXY-BICYCLO[3.1.0]HEXANE COMPOUNDS AS mGluR 2/3 ANTAGONISTS
TWI520935B (zh) 2010-11-18 2016-02-11 美國禮來大藥廠 作為ｍＧｌｕＲ２／３拮抗劑之４－經取代－３－苯基磺醯基甲基－雙環［３.１.０］己烷化合物
AU2012271024B2 (en) 2011-06-17 2015-07-09 Eli Lilly And Company Bicyclo (3.1.0) hexane- 2, 6 -dicarboxylic acid derivatives as mGlu2 receptor agonist
AR089718A1 (es) * 2012-02-01 2014-09-10 Lilly Co Eli AGONISTAS DE mGlu2/3
MY169069A (en) 2012-06-01 2019-02-12 Taisho Pharmaceutical Co Ltd Prodrug of fluorine-containing amino acid
JO3368B1 (ar) 2013-06-04 2019-03-13 Janssen Pharmaceutica Nv مركبات 6، 7- ثاني هيدرو بيرازولو [5،1-a] بيرازين- 4 (5 يد)- اون واستخدامها بصفة منظمات تفارغية سلبية لمستقبلات ميجلور 2
JO3367B1 (ar) 2013-09-06 2019-03-13 Janssen Pharmaceutica Nv مركبات 2،1، 4- ثلاثي زولو [3،4-a] بيريدين واستخدامها بصفة منظمات تفارغية موجبة لمستقبلات ميجلور 2
KR20200126026A (ko) 2014-01-21 2020-11-05 얀센 파마슈티카 엔.브이. 대사 조절형 글루탐산 작동성 수용체 제2아형의 양성 알로스테릭 조절제 또는 오르토스테릭 작동제를 포함하는 조합 및 그 용도
EP3431106B1 (en) 2014-01-21 2020-12-30 Janssen Pharmaceutica NV Combinations comprising positive allosteric modulators of metabotropic glutamatergic receptor subtype 2 and their use
CN108752212B (zh) * 2015-03-06 2024-03-12 北京大学 9-脱羧迷迭香酸类似物及其合成方法和应用
JP6801835B2 (ja) 2015-07-09 2020-12-16 ミメトゲン ファーマシュウティカルズ インコーポレイテッドＭｉｍｅｔｏｇｅｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． β−ターンペプチド模倣環状塩の液相合成及び結晶化

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US200488A (en) 1878-02-19 Improvement in temporary binders
US1459765A (en) * 1922-03-18 1923-06-26 Wordsworth M Elliott Interchangeable sign letters
WO1993006127A1 (en) * 1991-09-17 1993-04-01 Warner-Lambert Company Novel amino acid prodrug renin inhibitors
US5849525A (en) 1994-03-09 1998-12-15 Brigham And Women's Hospital, Inc. Compositions corresponding to a proton-coupled peptide transporter and methods of making and using same
DE69529209T2 (de) * 1995-03-14 2003-11-13 Brown & Sharpe Tesa S.A., Renens Element mit einem geregelten Diodenlaser, und elektrooptische Vorrichtung unter Verwendung eines derartigen Elements
US5688826A (en) * 1995-11-16 1997-11-18 Eli Lilly And Company Excitatory amino acid derivatives
JP2000500748A (ja) * 1995-11-16 2000-01-25 イーライ・リリー・アンド・カンパニー 興奮性アミノ酸誘導体
US5952294A (en) 1996-07-31 1999-09-14 University Of Pittsburgh Of The Commonwealth System Of Higher Education Peptidyl prodrugs and methods of making and using the same
ZA983930B (en) * 1997-05-14 1999-11-08 Lilly Co Eli Excitatory amino acid receptor modulators.
AU734812B2 (en) * 1998-01-28 2001-06-21 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Fluorine-containing amino acid derivatives
WO2000012464A1 (fr) * 1998-08-31 2000-03-09 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd. Derives de 6-fluorobicyclo[3. 1.0]hexane
US6716452B1 (en) 2000-08-22 2004-04-06 New River Pharmaceuticals Inc. Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
US6313498B1 (en) * 1999-05-27 2001-11-06 Actrans System Inc. Flash memory cell with thin floating gate with rounded side wall, and fabrication process
KR20030017562A (ko) * 2000-06-28 2003-03-03 다이쇼 세이야꾸 가부시끼가이샤 신규 디카르복실산 유도체
EP1351925A1 (en) * 2001-01-11 2003-10-15 Eli Lilly And Company Prodrugs of excitatory amino acids
HUP0400620A3 (en) * 2001-01-11 2012-09-28 Lilly Co Eli Prodrugs of excitatory amino acids and pharmaceutical compositions containing them and process for preparation the compounds
US7067507B2 (en) * 2001-06-12 2006-06-27 Pharmacia & Upjohn Company Macrocycles useful in the treatment of Alzheimer's disease
KR20090031962A (ko) 2001-12-27 2009-03-30 다이쇼 세이야꾸 가부시끼가이샤 6-플루오로비시클로[3.1.0]헥산 유도체
AU2003218063A1 (en) * 2002-04-03 2003-10-20 Eli Lilly And Company Therapy for psychoses combining an atypical antipsychotic and an mglu2/3 receptor agonist
US20050192273A1 (en) * 2002-04-03 2005-09-01 Johnson Bryan G. Therapy for psychoses combining an atypical antipsychotic and an mglu2/3 receptor agonist
EP1517915B1 (en) * 2002-06-11 2009-01-21 Eli Lilly And Company Prodrugs of excitatory amino acids

Also Published As

Publication number Publication date
JP4342437B2 (ja) 2009-10-14
US20110207672A1 (en) 2011-08-25
US20100113579A1 (en) 2010-05-06
EA200801711A1 (ru) 2008-12-30
US20120172422A1 (en) 2012-07-05
CY1108976T1 (el) 2014-07-02
PL374381A1 (en) 2005-10-17
MXPA04012518A (es) 2005-02-17
NZ556437A (en) 2008-11-28
IL189355A (en) 2014-05-28
HRP20090058A2 (en) 2009-04-30
US7671082B2 (en) 2010-03-02
US7371872B2 (en) 2008-05-13
EA014979B1 (ru) 2011-04-29
CR7616A (es) 2005-01-13
KR20080058509A (ko) 2008-06-25
AU2003232146B2 (en) 2009-06-18
US7964632B2 (en) 2011-06-21
AR040257A1 (es) 2005-03-23
MY146238A (en) 2012-07-31
ES2319116T3 (es) 2009-05-04
CR20110130A (es) 2011-03-30
JP2008201779A (ja) 2008-09-04
HRP20041179B1 (hr) 2012-11-30
IL189355A0 (en) 2008-06-05
CA2488167C (en) 2012-07-24
WO2003104217A3 (en) 2004-02-26
EP1517915A2 (en) 2005-03-30
HK1075259A1 (en) 2005-12-09
EP1897550A3 (en) 2008-06-25
EP1897550A2 (en) 2008-03-12
JP2006503807A (ja) 2006-02-02
CA2488167A1 (en) 2003-12-18
EA011231B1 (ru) 2009-02-27
NO20050122L (no) 2005-01-10
ATE421526T1 (de) 2009-02-15
US20080182889A1 (en) 2008-07-31
SI1517915T1 (sl) 2009-06-30
NZ536459A (en) 2008-03-28
EA200500007A1 (ru) 2006-06-30
EP1517915B1 (en) 2009-01-21
PT1517915E (pt) 2009-04-09
AU2003232146A1 (en) 2003-12-22
DE60325968D1 (de) 2009-03-12
NO20080765L (no) 2005-01-10
DK1517915T3 (da) 2009-03-16
WO2003104217A2 (en) 2003-12-18
HRP20041179A2 (en) 2005-06-30
CO5631438A2 (es) 2006-04-28
US20050222231A1 (en) 2005-10-06
PL221489B1 (pl) 2016-04-29
US8153683B2 (en) 2012-04-10
BR0311558A (pt) 2007-04-27
ZA200409553B (en) 2006-07-26
NZ564692A (en) 2009-05-31
IL165100A0 (en) 2005-12-18
PE20040555A1 (es) 2004-08-30
ECSP085481A (es) 2008-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
NO331780B1 (no) Prodrug av eksitasjonsaminosyre, farmasoytisk preparat samt anvendelser derav
CA2433667C (en) Prodrugs of excitatory amino acids
CN100482680C (zh) 兴奋性氨基酸前药
AU2008200612B8 (en) Prodrugs of excitatory amino acids
KR101061663B1 (ko) 흥분성 아미노산의 전구약물
AU2002228737A1 (en) Prodrugs of excitatory amino acids
EP1423411A2 (en) Prodrugs of excitatory amino acids
US20040176459A1 (en) Prodrugs of excitatory amino acids
WO2004004706A1 (en) Prodrugs of excitatory amino acids
EP1310480A1 (en) Prodrugs of excitatory amino acids
UA80280C2 (en) Prodrugs of excitatory amino acids

Legal Events

Date Code Title Description
MK1K Patent expired