NO169979B - Fremgangsmaate og proevesett til bestemmelse av frie virksomme stoffer i biologiske vaesker - Google Patents
Fremgangsmaate og proevesett til bestemmelse av frie virksomme stoffer i biologiske vaesker Download PDFInfo
- Publication number
- NO169979B NO169979B NO873258A NO873258A NO169979B NO 169979 B NO169979 B NO 169979B NO 873258 A NO873258 A NO 873258A NO 873258 A NO873258 A NO 873258A NO 169979 B NO169979 B NO 169979B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- analyte
- antibody
- free
- bound
- marker
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 27
- 239000013543 active substance Substances 0.000 title claims abstract description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 238000010998 test method Methods 0.000 title 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000012491 analyte Substances 0.000 claims description 65
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims description 31
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 claims description 15
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 claims description 14
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 claims description 14
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 7
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 7
- AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N Thyrolar Chemical compound IC1=CC(C[C@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC=C(O)C(I)=C1 AUYYCJSJGJYCDS-LBPRGKRZSA-N 0.000 claims description 5
- 229940035722 triiodothyronine Drugs 0.000 claims description 5
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000003270 steroid hormone Substances 0.000 claims description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 7
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 abstract 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 13
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 13
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 11
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 3
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N iodane Chemical compound [125IH] XMBWDFGMSWQBCA-YPZZEJLDSA-N 0.000 description 2
- 229940044173 iodine-125 Drugs 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- PPJYSSNKSXAVDB-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetraiodothyroacetic acid Chemical compound IC1=CC(CC(=O)O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 PPJYSSNKSXAVDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 229930013930 alkaloid Natural products 0.000 description 1
- 150000003797 alkaloid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 230000003302 anti-idiotype Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 239000002359 drug metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/536—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with immune complex formed in liquid phase
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/0004—Gaseous mixtures, e.g. polluted air
- G01N33/0009—General constructional details of gas analysers, e.g. portable test equipment
- G01N33/0027—General constructional details of gas analysers, e.g. portable test equipment concerning the detector
- G01N33/0036—General constructional details of gas analysers, e.g. portable test equipment concerning the detector specially adapted to detect a particular component
- G01N33/0055—Radionuclides
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
- G01N33/78—Thyroid gland hormones, e.g. T3, T4, TBH, TBG or their receptors
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Combustion & Propulsion (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
Oppfinnelsens gjenstand er en fremgangsmåte og et analysesett til bestemmelse av konsentrasjonen av den frie del av en i en biologiske væske tilstedeværende aktiv bestanddel, herefter kalt analytt, i nærvær av naturlige analyttbindende midler som proteiner, idet den frie og bundne del av analytten står i likevekt med hverandre.
Det er for de fleste fysiologiske analytter kjent at de i biologiske væsker som blod foreligger delvis i fri form, delvis imidlertid også bundet til proteiner som globuliner og albuminer. Derved står den frie og bundne form av analytten i likevekt med hverandre.
Det ble tidligere antatt at bare den del av analytten som ikke er bundet til proteiner utfolder fysiologiske virk-ninger. Ved bindingen til proteiner skulle analytten miste evnen til å reagere med sin spesifikke reseptor, hvilket er forutsetningen for dens virkning. Det kunne også allerede vises at bestemte legemidler taper sin virkning når de bindes til albuminer i serum, mens virkningen øker ved tilsetning av stoffer som fortrenger dem fra albuminbindingen. Det er derfor også allerede utviklet en rekke diagnostiske frem-gangsmåter hvormed det kan bestemmes den ikke til proteiner bundne del av en slik aktiv bestanddel eller analytt.
Således er det fra EP-PS 24 103 kjent en fremgangsmåte til bestemmelse og konsentrasjonen av den frie del av en i en biologisk væske tilstedeværende analytt hvor prøven som skal undersøkes blandes med et markert derivat av analytten, og med et spesifikt analyttbindende middel, og mengden av det markerte derivat av analytten som er bundet eller ikke-bundet til det spesifikke analyttbindende middel måles efter omsetning av disse reagenser. Derefter kan man beregne konsentrasjonen av den frie analytten i den biologiske væske. Med denne fremgangsmåte lar det seg imidlertid bare oppnå tilforlatelige måleresultater når det markerte derivat av analytten er valgt slik at det praktisk talt utelukkende forbinder seg med det spesifikke analyttbindende middel, imidlertid ikke med de naturlige bindingsproteiner som er tilstede i den biologiske væske. Dette krav lar seg imidlertid i praksis i mange tilfeller ikke oppfylle tilfreds-stillende .
Derfor ble det i EP-søknad 155 104 også allerede foreslått, til den prøven av den biologiske væske som skal undersøkes, foruten det markerte derivat av analytten og det spesifikke analyttbindende middel, settes et ytterligere stoff som skal blokkere bindingen av det markerte derivat av analytten til de naturlige proteiner, hvori det selv besetter bindingssetene på proteinene. Denne fremgangsmåte omtales også i DE-PS 34 15 818.
Også ifølge WO 85/00 226 forsøker man å løse problemet av bindingen av det markerte analytt-derivat til de naturlige proteiner og de derved forårsakede målefeil. Her foreslås det, til den biologiske væske som inneholder den frie analytt, å sette et spesifikt analytt-bindende middel, et markert derivat av analytten, og dessuten også et spesielt bindemiddel for det markerte analytt-derivat. Det markerte analytt-derivat (markør) reagerer da både med det spesifikke bindemiddel for den aktive bestanddel og med det markør-bindende middel, imidlertid ikke med bindingsproteinene fordi disse har en meget mindre affinitet til markøren enn det spesifikke markørbindende middel.
De ovenfor nevnte publikasjoner viser at den uønskede binding av markøren til naturlige proteiner fører til en alvorlig påvirkning av målenøyaktigheten ved bestemmelsen av den frie del av analytten i en biologisk væske og at det består et behov for å løse dette problem på enklest mulig måte. Til grunn for oppfinnelsen ligger derfor den oppgave å løse dette problem uten den ekstra anvendelsen av et middel som blokkerer bindingssetene av de naturlige proteiner og også uten tilsetning av et spesifikt markeringsbindende middel.
I henhold til dette er det nu funnet en fremgangsmåte for bestemmelse av konsentrasjonen av den frie del av en i en biologiske væske tilstedeværende analytt i nærvær av naturlige analyttbindende midler, idet den frie og den bundne del av analytten står i likevekt med hverandre, idet man
a) bringer en prøve av væsken i berøring med et umarkert antistoff, b) adskiller det bundne umarkerte antistoff fra prøven som inneholder forstyrrende bindingsproteiner, c) inkuberer det umarkerte bundne antistoff med en markert, med dette kryssreagerende markør, d) måler mengden av markøren som er bundet eller ikke bundet til antistoffet og herav beregner konsentrasjonen av den
frie analytten,
og denne fremgangsmåte karakteriseres ved at mengden av det umarkerte antistoff som anvendes og/eller dets affinitet til det virksomme stoffet er så liten at den ikke vesentlig påvirker likevekten mellom fri og bundet del av analytten, og at markøren som anvendes har en betraktelig høyere eller en betraktelig mindre affinitet til antistoffet enn til analytten.
Fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen adskiller seg fra de i ovennevnte publikasjoner omtalte analysemetoder, i første rekke ved at prøven av den biologiske væske skal undersøkes adskilles efter reaksjonen med det umarkerte antistoff. Dermed fjernes de forstyrrende naturlige bindingsproteiner som ikke lenger kan forstyrre det videre forløp av analysen og heller ikke forårsake noen målingsunøyaktigheter.
En slik totrinns fremgangsmåte er i og for seg kjent fra DE-OS 29 36 307. Her beskrives også en metode til bestemmelse av den frie del av en analytt idet man bringer væskeprøven som skal undersøkes i kontakt med en umarkert reseptor for at den frie analytt bindes til denne. Derefter fjernes væskeprøven og den umarkerte reseptor inkuberes med et markert analytt-derivat og derefter måles den til reseptoren bundne eller ikke bundne mengde av det markerte reagens. Denne fremgangsmåte har imidlertid denne store ulempe at det i første trinn anvendes så store mengder av umarkert reseptor at i praksis bindes den samlede frie analytt. Da imidlertid den frie analytt og den til proteinet bundne analytt står i likevekt med hverandre, ødelegges likevekten ved bindingen av den frie analytt fra sin til proteiner bundne form. Derved måles efter denne metode for høye konsentrasjoner av fri analytt.
Det er derfor et trekk ved foreliggende oppfinnelse at det umarkerte antistoff anvendes i en så liten mengde at det ikke merkbart kan påvirke likevekten mellom fri og til protein bindet analytt. Av samme grunn skal affiniteten av dét umarkerte antistoff til analytten bare være liten. Den totale mengde frianalytt skal ikke bindes til ikke-markert antistoff og heller ikke skal de totale frie seter av ikke-markert antistoff besettes.
Et for bestemmelsesmetoden egnet umarkert antistoff velges hensiktsmessig fra gruppen av polyklonale eller monoklonale antistoffer og dets affinitet til analytten fastslås i noen få rutinemessige forsøk. Efter adskillelse av væskeprøven som skal undersøkes fra det umarkerte antistoff, inkuberes dette derefter med et markert stoff som kryssreagerer med det (markør). Markøren markeres enten med et radioaktivt atom som Jod-125, eller en fluorescerende eller kjemiluminescerende forbindelse. Likeledes er det også mulig å foreta markeringen med et enzym eller en lyskromofor.
Viktig er at markøren har en molekylstruktur som avviker fra analytten som skal bestemmes. Vil man eksempelvis ved bestemmelse av thyroxin efter fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen som markør anvende et med Jod-125 markert thyroxin, får man den i fig. 1 viste meget flate standardkurve, hvorav entydige måleresultater ikke lenger kan avleses. Kurven viser måleverdiene som ble dannet efter 1 times inkubasjon av en serumprøve med økende innhold av fritt thyroxin i et thyroxin-antistoff, separering av serumprøven og en andre inkubasjonstid på 1 time 1 nærvær av jod-125-thyroxin som markør.
Som fig. 2 viser, lar dette utilfredsstillende forløp av standardkurven seg heller ikke forbedre med variasjon av prøvevolumet under ellers like målebetingelser. De med 50 pm, 100 jjm og 200 pm opptatte standardkurver viser et for flatt forløp i de for målingen viktige områder.
Mens det ved de i fig. 2 viste målinger ble ført på en antistoffkonsentrasjon på 20 ni på den indre overflate av et prøverør, viser fig. 3 det samme forsøk efter økning av antistoffmengden til 80 ni pr. underøkelse. Heller ikke dette førte til noe steilere kurveforløp i det for målingen viktige området.
Fig. 4 viser måleverdiene som ble oppnådd ved en gjentagelse av de på fig. 1 viste målinger under anvendelse av markøren med forskjellig radioaktivitet. Markøraktiviteten utgjorde 0,04 pCi og 0,02 pCi. Standardkurvens utsagnskraft ble derfor ikke forbedret.
Anvender man imidlertid for bestemmelsen av thyroxin ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen et derivat av thyroxin som ble modifisert på amino-, på karboksylgruppen eller på et annet sted av molekylet, får man standardkurver lik de som vist på fig. 5-8, hvor hver til antistoffet bundne markør-mengde entydig kan tilordnes en bestemt thyroxin-konsentrasjon. Egnede markører for bestemmelse av thyroxin og trijodthyronin som kan anvendes ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er omtalt i DE-søknad P 36 00 365.4.
På grunn av dets endrede kjemiske struktur har markøren en høyere eller mindre affinitet til antistoffet enn analytten. Vanligvis er det fordelaktig å velge en markør som har en større affinitet til antistoffet enn analytt. Er imidlertid konsentrasjonen av den frie analytt som skal bestemmes meget lav, er det å foretrekke en markør med betraktelig mindre affinitet til antistoffet enn analytten. Den i meget lav konsentrasjon foreliggende analytt besetter bare få bindingsseter av antilegemet, hvilket knapt kunne erkjennes hvis det derefter hadde vært tilsatt en markør med høy affinitet. Det kunne da oppstå det inntrykk at det overhodet ikke er tilstede noen fri analytt. Derimot lar det seg dessuten alltid oppnå et uklanderlig måleresultat når det anvendes en markør med mindre affinitet.
Prinsippielt kan man som markør anvende alle stoffer som har en annen affinitet til antistoffet enn analytten som skal bestemmes, men konkurrerer med den om de frie bindingsseter på antistoffet i en kryssreaksjon. Derfor kan det som antistoffer også anvendes anti-idiotype antistoffer som binder til de i fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen anvendte antistoffer. En på dette prinsipp oppbygget analyse er omtalt i EP-søknad 106.615.
For to-trinns fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen er det således karakteristisk at analytten som skal bestemmes og markøren i sin affinitet adskiller seg i forhold til antistoffet. Derimot er det for en-trinns-analysen slik den for eksempel er kjent fra EP-PS 26 103, karakteristisk at analyttens stoff som skal bestemmes og markøren har forskjellig affinitet overfor bindingsproteinene.
Et til gjennomføring av bestemmelsesfremgangsmåten ifølge oppfinnelsen egnet prøvesett for bestemmelse av konsentrasjonen av den frie del av en i en biologisk væske tilstedeværende analytt, karakteriseres ved at man a) bringer en prøve av væsken i berøring med et umarkert antistoff, b) adskiller det bundne umarkerte antistoff fra prøven som inneholder forstyrrende bindingsproteiner.
Et slikt analysesett kan sammenlignes slik at det muliggjør bestemmelsen av den frie del av et ønskelig hormon, et steroid, et legemiddel, en legemiddelmetabolitt, et poly-peptid, et vitamin, et tumorantigen, et toxin eller et alkaloid. Spesielt foretrukket er bestemmelsen av den frie del av thyroxin, trijodthyronin og et steroidhormon.
Som spesielt egnede markører for den kvantitative påvisning av thyroxin i biologiske væsker ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen skal nevnes:
(1) 3,3',5,5'-tetrajodthyroeddiksyre (fig. 5),
(2) 3,5-dijod-4-(3,5-dijod-4-oksyfenyl)-benzosulfonsyre (fig. 6), (3) N-(metylfosfinoacetyl)-3,3',5,5'-tetrajodthyrosin (fig. 7), (4) N-(u)-aminokaproyl )-3,3* , 5 ,5 '-tetrajodhyrosin (fig. 8).
Generell arbeidsforskrift til bestemmelse av fritt th<y>roxin ved fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen.
I smårør som er belagt med T4-antistoff (20 ng antistoff pr. rør) bringes 200 pl av en standardrekke (humansera med økene innhold av fritt thyroxin) og 1000 pl buffer i kontakt 1/2 time under risting.
Efter utristing av reaksjonsoppløsningen settes 1000 pl markør (aktivitet ca. 60.000 impulser pr. minutt) til de forinkuberte smårør. Det inkuberes 1 time, den ikke bundne markør separeres og måles i en gammateller.
Resultatene er vist på fig. 5 til fig. 8.
Claims (4)
1.
Fremgangsmåte til bestemmelse av konsentrasjonen av den frie del av en i en biologisk væske tilstedeværende analytt i nærvær av naturlige analyttbindende midler, idet den frie og den bundne del av analytten står i likevekt med hverandre, idet man a) bringer en prøve av væsken i berøring med et umarkert antistoff, b) adskiller det bundne umarkerte antistoff fra prøven som inneholder forstyrrende bindingsproteiner, c) inkuberer det umarkerte bundne antistoff med en, med dette kryssreagerende markør, d) måler mengden av markøren som er bundet eller ikke bundet til antistoffet og herav beregner konsentrasjonen av den frie analytten,
karakterisert ved at mengden av det umarkerte antistoff som anvendes og/eller dets affinitet til det virksomme stoffet er så liten at den ikke vesentlig påvirker likevekten mellom fri og bundet del av analytten, og at markøren som anvendes har en betraktelig høyere eller en betraktelig mindre affinitet til antistoffet enn til analytten.
2.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at den frie del av det virksomme stoff som skal bestemmes av thyroxin, trijodthyronin eller et steroidhormon.
3.
Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at man til bestemmelse av den frie del av thyroxin eller trijodthyronin som markør anvender et derivat av thyroxin eller av trijodthyronin som ble modifisert ved amino- eller karboksygruppen, eller ved et annet sted av molekylet.
4.
Prøvesett til bestemmelse av konsentrasjonen av den frie del et i en biologisk væske tilstedeværende analytt ifølge krav 1, karakterisert ved at det a) inneholder et umarkert antistoff som reagerer med analytten som skal bestemmes og hvis mengde og/eller affinitet til analytten er så liten at det ikke vesentlig påvirker likevekten mellom fri og bundet del av analytten, og b) inneholder en markør som har en vesentlig høyere eller mindre affinitet til antistoffet enn til analytten.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19863626468 DE3626468A1 (de) | 1986-08-05 | 1986-08-05 | Verfahren und testkit zur bestimmung freier wirkstoffe in biologischen fluessigkeiten |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO873258D0 NO873258D0 (no) | 1987-08-04 |
| NO873258L NO873258L (no) | 1988-02-08 |
| NO169979B true NO169979B (no) | 1992-05-18 |
| NO169979C NO169979C (no) | 1992-08-26 |
Family
ID=6306719
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO873258A NO169979C (no) | 1986-08-05 | 1987-08-04 | Fremgangsmaate og proevesett til bestemmelse av frie virksomme stoffer i biologiske vaesker |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5714336A (no) |
| EP (1) | EP0257352B1 (no) |
| JP (1) | JPH0743375B2 (no) |
| AT (1) | ATE77149T1 (no) |
| CA (1) | CA1304680C (no) |
| DE (2) | DE3626468A1 (no) |
| DK (1) | DK172582B1 (no) |
| ES (1) | ES2033266T3 (no) |
| NO (1) | NO169979C (no) |
Families Citing this family (19)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3624464A1 (de) * | 1986-07-19 | 1988-01-28 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren zum nachweis eines analyten sowie hierfuer geeignetes mittel |
| JP2003514524A (ja) | 1999-11-18 | 2003-04-22 | コルバス・インターナショナル・インコーポレイテッド | エントセリアーゼをコードしている核酸、エンドセリアーゼおよびその使用 |
| US6638977B1 (en) * | 1999-11-19 | 2003-10-28 | Corvas International, Inc. | Plasminogen activator inhibitor antagonists |
| WO2001036351A2 (en) | 1999-11-19 | 2001-05-25 | Corvas International, Inc. | Plasminogen activator inhibitor antagonists related applications |
| US7700341B2 (en) | 2000-02-03 | 2010-04-20 | Dendreon Corporation | Nucleic acid molecules encoding transmembrane serine proteases, the encoded proteins and methods based thereon |
| US7125703B2 (en) | 2001-03-13 | 2006-10-24 | Dendreon Corporation | Nucleic acid molecules encoding a transmembrane serine protease 7, the encoded polypeptides and methods based thereon |
| KR20040011480A (ko) | 2001-03-22 | 2004-02-05 | 덴드레온 샌 디에고 엘엘씨 | 세린 프로테아제 ｃｖｓｐ14를 암호화하는 핵산 분자,암호화된 폴리펩티드 및 이에 근거한 방법 |
| WO2002077267A2 (en) | 2001-03-27 | 2002-10-03 | Dendreon San Diego Llc | Nucleic acid molecules encoding a transmembran serine protease 9, the encoded polypeptides and methods based thereon |
| US7589029B2 (en) * | 2002-05-02 | 2009-09-15 | Micron Technology, Inc. | Atomic layer deposition and conversion |
| US7160577B2 (en) * | 2002-05-02 | 2007-01-09 | Micron Technology, Inc. | Methods for atomic-layer deposition of aluminum oxides in integrated circuits |
| US7084078B2 (en) * | 2002-08-29 | 2006-08-01 | Micron Technology, Inc. | Atomic layer deposited lanthanide doped TiOx dielectric films |
| US7588988B2 (en) | 2004-08-31 | 2009-09-15 | Micron Technology, Inc. | Method of forming apparatus having oxide films formed using atomic layer deposition |
| US7662729B2 (en) * | 2005-04-28 | 2010-02-16 | Micron Technology, Inc. | Atomic layer deposition of a ruthenium layer to a lanthanide oxide dielectric layer |
| US7572695B2 (en) * | 2005-05-27 | 2009-08-11 | Micron Technology, Inc. | Hafnium titanium oxide films |
| US7927948B2 (en) | 2005-07-20 | 2011-04-19 | Micron Technology, Inc. | Devices with nanocrystals and methods of formation |
| US7575978B2 (en) | 2005-08-04 | 2009-08-18 | Micron Technology, Inc. | Method for making conductive nanoparticle charge storage element |
| US7410910B2 (en) | 2005-08-31 | 2008-08-12 | Micron Technology, Inc. | Lanthanum aluminum oxynitride dielectric films |
| US7763511B2 (en) * | 2006-12-29 | 2010-07-27 | Intel Corporation | Dielectric barrier for nanocrystals |
| US8367506B2 (en) | 2007-06-04 | 2013-02-05 | Micron Technology, Inc. | High-k dielectrics with gold nano-particles |
Family Cites Families (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3928553A (en) * | 1972-03-23 | 1975-12-23 | Univ New York | Radioimmunoassay method for triiodothyronine and thyroxine |
| US4292296A (en) * | 1978-09-12 | 1981-09-29 | Baxter Travenol Laboratories, Inc. | Diagnostic method |
| US4366143A (en) * | 1979-09-24 | 1982-12-28 | Amersham International Public Limited Company | Assay for the free portion of substances in biological fluids |
| WO1981001414A1 (en) * | 1979-11-19 | 1981-05-28 | Charles Hospital Dev | An improved method of non homogenous enzyme immunoassay |
| US4391795A (en) * | 1980-03-21 | 1983-07-05 | Becton Dickinson And Company | Assay for free thyroid hormone |
| US4426453A (en) * | 1980-09-18 | 1984-01-17 | Amersham International Limited | Derivatives of iodothyronine compounds and their use in an assay for the free iodothyronine compounds |
| DE3122019C2 (de) * | 1981-06-03 | 1983-11-10 | Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim | Verfahren und Vorrichtung zur Durchführung eines automatisierten kontinuierlichen Enzymimmunotestes |
| US5304498A (en) * | 1982-03-19 | 1994-04-19 | Ekins Roger Philip | Method and composition for free ligand assay |
| DE3380125D1 (en) * | 1982-03-22 | 1989-08-03 | Amersham Int Plc | Assay for the free portion of substances in biological fluids |
| DE3380777D1 (en) * | 1982-08-27 | 1989-11-30 | Roger Philip Ekins | Measurement of analyte concentration |
| ZA837119B (en) * | 1982-10-07 | 1984-12-24 | Amersham Int Plc | Assay for the free portion of substances in biological fluids |
| GB8317124D0 (en) * | 1983-06-23 | 1983-07-27 | Ekins R P | Free ligand assay |
| GB8404843D0 (en) * | 1984-02-24 | 1984-03-28 | Amersham Int Plc | Free analyte assay |
| US4711855A (en) * | 1985-02-05 | 1987-12-08 | Ciba Corning Diagnostics Corp. | Derivatives of 3,5,3-triiodothyronine |
| DE3600365A1 (de) * | 1986-01-09 | 1987-07-16 | Hoechst Ag | Neue thyroninderivate |
| GB8800419D0 (en) * | 1988-01-08 | 1988-02-10 | Amersham Int Plc | Method for measuring free fraction of ligands in biological fluids |
-
1986
- 1986-08-05 DE DE19863626468 patent/DE3626468A1/de not_active Withdrawn
-
1987
- 1987-08-01 DE DE8787111139T patent/DE3779704D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-01 EP EP87111139A patent/EP0257352B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-01 AT AT87111139T patent/ATE77149T1/de not_active IP Right Cessation
- 1987-08-01 ES ES198787111139T patent/ES2033266T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-04 NO NO873258A patent/NO169979C/no not_active IP Right Cessation
- 1987-08-04 CA CA000543624A patent/CA1304680C/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-08-04 DK DK198704060A patent/DK172582B1/da not_active IP Right Cessation
- 1987-08-04 JP JP62193870A patent/JPH0743375B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1992
- 1992-05-18 US US07/884,874 patent/US5714336A/en not_active Expired - Lifetime
-
1993
- 1993-06-14 US US08/075,832 patent/US6103486A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ATE77149T1 (de) | 1992-06-15 |
| JPH0743375B2 (ja) | 1995-05-15 |
| EP0257352A1 (de) | 1988-03-02 |
| DE3779704D1 (de) | 1992-07-16 |
| DK172582B1 (da) | 1999-02-08 |
| CA1304680C (en) | 1992-07-07 |
| US5714336A (en) | 1998-02-03 |
| EP0257352B1 (de) | 1992-06-10 |
| NO873258L (no) | 1988-02-08 |
| JPS6344168A (ja) | 1988-02-25 |
| ES2033266T3 (es) | 1993-03-16 |
| NO873258D0 (no) | 1987-08-04 |
| DE3626468A1 (de) | 1988-02-11 |
| US6103486A (en) | 2000-08-15 |
| NO169979C (no) | 1992-08-26 |
| DK406087D0 (da) | 1987-08-04 |
| DK406087A (da) | 1988-02-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO169979B (no) | Fremgangsmaate og proevesett til bestemmelse av frie virksomme stoffer i biologiske vaesker | |
| DK172587B1 (da) | Fremgangsmåde til bestemmelse af koncentrationen af en analyt, analytisk anordning samt prøvesæt til brug ved fremgangsmåde | |
| CA1113841A (en) | Test device and method for its use | |
| JPH0277649A (ja) | 生物学的流体中の物質の遊離部分の分析法 | |
| JPH0664059B2 (ja) | 被検体の濃度の測定方法 | |
| AU1772083A (en) | Inactivation of a lipid virus | |
| JP2684244B2 (ja) | 被分析成分を測定する方法及び患者血清中の抗−ｔｓｈ受容体自己抗体の測定へのその使用 | |
| US20150017656A1 (en) | Rapid Lateral Flow Assay Method for Detecting Low Quantity Liquid or Dry Samples | |
| US5721105A (en) | Method for the immunological determination of proteins and kit for carrying out the method | |
| US5009997A (en) | Two site cross-reaction immunometric sandwich assay method | |
| US4166844A (en) | Solid phase separation technique for use in radioimmunoassays | |
| CN107102140A (zh) | 一种谷氨酸脱羧酶抗体化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 | |
| US4307071A (en) | Analytical reagent and method | |
| Rush et al. | Solid-phase radioimmunoassay on polystyrene beads and its application to dopamine-β-hydroxylase | |
| Merry et al. | The quantification of C3 fragments on erythrocytes: estimation of C3 fragments on normal cells, acquired haemolytic anaemia cases and correlation with agglutination of sensitized cells | |
| EP0318491A1 (en) | Determination of analyte concentration using two labelling markers | |
| Petsos et al. | Assessment of corpus luteum function by direct radioimmunoassay for progesterone in blood spotted on filter paper. | |
| Doetsch et al. | Determination of urinary total protein by use of gel filtration and a modified biuret method | |
| JPH08297123A (ja) | 蛋白質の免疫学的測定法とその方法の実施のためのキット | |
| Kuczala et al. | Evaluation of two digoxin radioimmunoassay procedures in which 125I-labeled digoxin is used. | |
| Plomp et al. | Evaluation of the manual enzyme immunoassay (EMIT) procedure for determination of serum thyroxine | |
| US4474891A (en) | Mini-iodinated polypeptide hormone tracer and method for its use | |
| CN106771119A (zh) | 一种抗Scl‑70抗体IgG化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN106771131A (zh) | 一种抗线粒体抗体m2型化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 | |
| CN106771209A (zh) | 一种类风湿因子化学发光免疫检测试剂盒及其制备方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK1K | Patent expired |