NL8102290A

NL8102290A - Nieuwe imidazo-rifamycine derivaten met antibacterieel nut.

Info

Publication number: NL8102290A
Application number: NL8102290A
Authority: NL
Original assignee: Alfa Farmaceutici Spa
Priority date: 1980-05-22
Filing date: 1981-05-11
Publication date: 1981-12-16
Also published as: CA1142518A; GB2079270A; DE3120460C2; IE811139L; AU7065581A; US4341785A; FI811565L; DK157876B; SE453089B; JPS6123192B2; PT73064B; SE8103216L; AU537093B2; LU83376A1; ATA222781A; FI69467B; NO155622C; DE3120460A1; EG14891A; NL187022B

Description

i "•*r 4 - 1 -

Nieuwe imidazo-rifamycine derivaten met antibacterieel nut.

Rifamycine derivaten die een heterocyclische ring dragen, die op de 3,4-plaatsen gecondenseerd is, zijn uit de literatuur over de stand van de techniek, daaronder begrepen de octrooiliteratuur, bekend. Bijvoorbeeld 5 worden in het Zuid-Afrikaanse octrooischrift 68/0903 pyrrolo [5,4-c^ rifamycine SV derivaten bij wijze van uitsluitende rechten gevraagd, terwijl in de Duitse octrooischriften 2.739.671 en 2.739.623 enige imidazo 15,4-c} rifamycine SV verbindingen worden beschreven, die 10 op de 1-en 2-plaatsen substituenten dragen. Thiazolo D>,4-c3 rifamycine SV (rifamycine P) derivaten worden vermeld in het Duitse octrooischrift 2.741.066.

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op nieuwe imidazo-rifamycine derivaten met de algemene for-15 mule 1 van het formuleblad, waarin A de structuur A^ (zie formule la op het formuleblad) of de structuur A2 (zie formule lb op het formuleblad) kan hebben, waarbij -x- een chemische binding of niets voorstelt; R waterstof of acetyl voorstelt; R·^ en R2 onafhankelijk van 20 elkaar voorstellen waterstof, (C1—^) alkyl, benzyloxy, mono- en di-CC^^) alkylamino- (C1-4) alkyl, (C-L_3) alkoxy- (C^_^) alkyl, hydroxymethyl, hydroxy- (^2-4) *" alkyl, nitro of R^^ en R2 samen genomen met twee opeenvolgende koolstofatomen van de pyridinekern een benzeen-25 ring vormen, die desgewenst is gesubstitueerd met êên of twee methyl of ethylgroepen; R^ een waterstofatoom of niets voorstelt; met dien verstande dat, wanneer A gelijk is aan A^, -x- niets voorstelt en R^ een waterstofatoom voorstelt; voorts met dien verstande dat, 30 wanneer A gelijk is aan A2, -x- een chemische binding voorstelt en R^ niets voorstelt.

De verbindingen hebben antibacteriële nuttigheid (werking).

Een voorkeursgroep van verbindingen omvat die 35 verbindingen met formule 1 van het formuleblad, waarin A • de structuur A^ of de structuur A2 zoals boven is aange geven, kan hebben, - x - een chemische binding of niets 8102290 * fc .% - 2 - voorstelt, R waterstof of acetyl voorstelt, R-j^ en R2 onafhankelijk van elkaar voorstellen waterstof, (C^_4) alkyl, benzyloxy, hydroxy (Cg_4) alkyl, di-(C^ ) alkyl- amino-(C1_4) alkyl, nitro of R1 en R2 samen genomen met 5 twee opeenvolgende koolstofatomen van de pyridinekern een benzeenring vormen en Rg een waterstofatoom of niets voorstelt; met dien verstande dat, wanneer A voorstelt A^, -x- niets voorstelt en Rg een waterstofatoom voorstelt? voorts met dien verstande dat, wanneer A voorstelt A2, 10 “X” een chemische binding en Rg niéts voorstelt.

Een tweede voorkeursgroep van verbindingen omvat die verbindingen met formule 1 van het formuleblad, waarin A de structuur A^ of de structuur Ag zoals boven gedefinieerd is kan hebben, -x- een chemische binding of niets 15 voorstelt, of R acetyl voorstelt, R^ en R2 onafhankelijk van elkaar waterstof, (C.^) alkyl of R-^ en Rg tezamen genomen met twee opeenvolgende koolstofatomen van de pyridinekern een benzeenring vormen en Rg een waterstofatoom of niets voorstelt; met dien verstande dat, wanneer 20 A voorstelt A^, -x- niets voorstelt en Rg een waterstofatoom voorstelt? voorts met dien verstande dat, wanneer A voorstelt Rg, -x- een chemische binding en Rg niets voorstëlt.

Zoals in de onderhavige beschrijving gebruikt is, 25 duiden de termen (C^_g) alkyl, Cg_4) alkyl en (C^_4) alkyl aan lineaire of vertakte alkylgroepen, die 1 t/m 3 of 2 t/m 4 of 1 t/m 4 koolstofatomen bevatten, bijvoorbeeld methyl, ethyl, η-propyl, isopropyl, n-butyl, sec.-butyl, isobutyl of tert.butyl, terwijl de term (C-j^) 30 alkoxy in wezen betrekking heeft op methoxy, ethoxy, propoxy of isopropoxygroepen.

De verbindingen volgens de uitvinding worden bereid in overeenstemming met de werkwijzen, die in wezen afhangen van het type verbinding dat men wenst te ver-35 krijgen. Daarom worden bijvoorbeeld de verbindingen met de formule 1 van het formuleblad, waarin A de structuur Ag heeft, R, R^ en Rg als boven gedefinieerd zijn, -x-een extra binding en Rg niets voorstelt, op geschikte wijze bereid, doordat men een 3-halogeenrifamycine S

81 0 2 2 9 0 - 3 - Z 4 met de formule 2 van het formuleblad, waarin hal voorstelt een halogeenatoom met bij voorkeur broom of jodium, en R als boven is gedefinieerd, laat reageren met een verbinding met formule 3 van het formuleblad, waarin Rx 5 en R2 als boven zijn gedefinieerd.

In de praktijk wordt de reactie uitgevoerd doordat men een molaire hoeveelheid van de verbinding met formule 2 in aanraking brengt met een molaire overmaat van de verbinding met formule 3 van het formuleblad.

10 Deze molaire overmaat varieert van ongev. 1 tot ongev. 8 of meer equivalenten, berekend op de verbinding met formule 2 van het formuleblad. De reactie wordt uitgevoerd in aanwezigheid van een inert organisch oplosmiddel, bijvoorbeeld een alifatische alkanol, die 1-4 koolstof-15 atomen bevat, een lagere gehalogeneerde koolwaterstof met 1-2 koolstofatomen, dioxan, tetrahydrofuran of een mengsel daarvan, bij een temperatuur, die binnen ruime grenzen kan variëren, hoewel kamertemperatuur de voorkeur heeft. De reactie wordt binnen een periode vol-20 tooid, die ligt tussen ongeveer 1 en 4 uren.

De aldus verkregen verbindingen kunnen voorts chemische reacties ondergaan, die ten doel hebben andere stoffen die binnen het kader van bovengenoemde formule 1 van het formuleblad vallen, te bereiden. Zo kunnen bij-25 voorbeeld verbindingen met formule 1 van het formuleblad worden verkregen waarin A de structuur heeft, R, R^ en R2 als boven gedefinieerd zijn, -x- niets voorstelt en R^ een waterstofatoom voorstelt, doordat men de overeenkomstige stof, waarin A de structuur A2 voorstelt, 30 behandelt met een geschikt reductiemiddel, bijvoorbeeld L(-)-ascorbinezuur.

De stap, die zelfs kan worden uitgevoerd zonder de verbinding, die is afgeleid van de condensatie van de uitgangsstoffen met de formule 2 en 3 van het formuleblad, 35 te isoleren, vindt in wezen bij kamertemperatuur plaats, hoewel zachtjes verwarmen soms het verloop van de reactie kan begunstigen, voor een periode, die uiteenloopt van ongeveer 10 min. tot ongeveer 1 uur, in een organisch oplosmiddel, dat opnieuw gekozen is uit bijvoorbeeld 8102290 - 4 - alifatische alkanolen met 1-4 koolstofatomen, een lagere gehalogeneerde koolwaterstof met 1-2 koolstofatomen, dioxan, tetrahydrofuran of mengsels daarvan. Op hun beurt kunnen de aldus verkregen verbindingen met de formule 1 5 van het formuleblad, waarin A de structuur A^ voorstelt, R, en R2 als boven zijn gedefinieerd, -x- niets voorstelt en Rg een waterstofatoom voorstelt, worden omgezet in de overeenkomstige produkten waarin A de structuur A2 heeft, doordat men een behandeling toepast met een ge-10 schikt oxidatiemiddel bijvoorbeeld mangaandioxide, lood-tetraacetaat, dichloor-dicyano-benzochinon, 2,3,4,5-tetrachloor-benzochinon, 2,3,5,6-tetrachloor-benzochinon en analoga. Deze reactie wordt uitgevoerd in een inert organisch oplosmiddel zoals die welke hierboven zijn 15 vermeld, bij een temperatuur, die gelegen is tussen kamertemperatuur en de kooktemperatuur van het reactie-mengsel. Een periode, die uiteenloopt van ongeveer 10 min. tot ongeveer 1 uur is voldoende voor het verkrijgen van een voltooide reactie.

20 Tenslotte worden de verbindingen met formule 1 van het formuleblad, waarin R waterstof voorstelt, op geschikte manier bereid door onder alkalische omstandigheden de overeenkomstige verbindingen, waarbij R acetyl voorstelt, te hydrolyseren. Deze hydrolyse wordt uitge-25 voerd in aanwezigheid van een oplosmiddel, in het algemeen een alifatische alkanol met 1-4 koolstofatomen, waarbij een molaire hoeveelheid van de gekozen verbinding wordt behandeld met een molaire overmaat van een alkalisch middel, bijvoorbeeld natrium- of kaliumhydroxide 30 of -carbonaat, bij kamertemperatuur voor een periode die uiteenloopt van ongev. 1 tot ongev. 5 uren. De aldus verkregen verbindingen met de formule 1 van het formuleblad, waarin R waterstof voorstelt, kunnen op hun beurt bovengenoemde toegelichte reductie- of oxidatiereactie onder-35 gaan, afhankelijk van de structuur, die A voorstelt.

De stoffen volgens de uitvinding worden uit het reactiemedium teruggewonnen door middel van methoden waarmee een deskundige vertrouwd is. Deze methoden omvatten de extractie met een geschikt organisch oplosmiddel, 8102290 « - 5 - bijvoorbeeld ethylacetaat, chloroform, methyleenchloride en analoga of mengsels daarvan, de indamping tot droog van het organische extract en het opnemen van het residu in een geschikt oplosmiddel, waaruit het gerede produkt 5 zich afscheidt. Een andere mogelijkheid is, dat het reactiemengsel direct kan worden afgedampt tot droog en het verkregen residu op zijn beurt wordt opgenomen in een geschikt oplosmiddel, waaruit het eindprodukt wordt afgescheiden. Kristallisatie oplosmiddelen, die geschikt 10 kunnen worden gebruikt, zijn water, methanol, ethanol, n-propanol, iso-propanol, n-hexaan, ethylacetaat, methyleenchloride, chloroform, ethyleenglycol, monomethylether of mengsels daarvan.

Zoals boven is vermeld zijn de verbindingen vol-15 gens de uitvinding nuttige antibacteriele middelen.

Preciezer gezegd bezitten zij een opmerkelijke in vitro activiteit zowel tegen Gram-positieve (bijvoorbeeld, verschillende Staph, aureus stammen) en Gram-negatieve bacteriën, waarvan sommige uit klinische isolatie af-20 komstig zijn, welke kunnen worden gevonden in de bac- teriële flora van de ingewanden in pathologische omstandigheden.

De resultaten die verkregen zijn met representa-25 tieve verbindingen volgens de uitvinding, zijn opgesomd in de volgende tabel. Zij geven de minimum concentraties weer van actieve stof, die in staat is de groei in vitro van het pathogene bacterie (M.I.C.) te belemmeren en zij zijn uitgedrukt in microgrammen stof per ml kweekmedium 30 ( /'/ml) .

Tabel A.

8102290 * - 6 - t'· ID H CO ·ΛΙΰΝΝΛΐηϊΙΝ11110 μι O O -I* O H *1* Η Η H ) »1« Η · * |*

M O O co «1« ï|- CO -I- -U -I» < CO tl·. H CO

□ CO (O (O CO co co .> ^ o o f V V °

LnincvjcocMcocoojcDco coojioco O O Η · H .1* *1·· Η I» j ) H · ·!· H O O 'I' O -I- CO CO .'l· co < C -I- H co X · · co co <0 co > o o

v V

io into · CM CM ID CM · CD CM * CM CM · OOHHHCMHTS ) Η Ό Η Η Ό O O -l> -I· > -I· -K . C .|, · -i- · x . . i> co r cm co π co c co co c

O O · H

μ v ° .

cn

H lOlO · •'lOCMlOCM CMCOCMCOCMCO

H O O Ό —« CM H CM Ή Η * I · H CM Η I

H O O · *1» -I' I- A· A- -l· CO ’l·· 4 »1- co

> «· C F- CM CD CM CO CO (O CM CO

O O · Η Η H

V v °

PÜ li) in . O· CM CM CM <0 CM CO CO · lO CM

Μ Η ΟΟΌ · Η Η H i Η -I· > Ό CM H

pq H O O · O -I· -I- <1. * <!· co < · *1* l

Pi > · · C ·,. CO CO CO CO C CM 1 o o O ^ η O V y

CO

z coin · •'incoiocMcocMio · cm cm

< OO'Ü'-'CM jCMHj H CM Ό Η H

j> H O O · ·!· >1· < ·Ι. ( < ·Ι* *1’ · H» »1*

> · · c C"· CM CM CO CM G CD CO

O " O · Η Η H

2 v v °

H

Ω · — JZ5 lO-LOlDCMCVIlOCVlOCOOJ * CVi CVJ · • H O O * Η H CM H * m\+ Η T3 Η Η *0 h g > o c; h , , < j c co 4 B· £ i £ o w O O < ύ > v v

^ LïO

m co · *> · m in co cm cm ca in · cm co

<1 H o O T3 — CM CM CM Η Η 4 CM Ό Η I

H O O · -l> -l> Ml *U CO »1· · »|. co

H · * c CV CM CM CM CM C CO

Pd O O · Η Η Η H

ξ9 ' V' V ° .'3 H Ö' ' « lil 11) · Γ*. CM CM CM CO ID CO CO Λ N J2 ,, ® M O O Ό · Η Η H J CM -I·. ; Ό CM H ^ ft H O O · O i -I- -I- ( >1* CO ^ · -1;- I u % • · G COCO CM C CM ft £ ^

. Z. T3 <U +J

y M G M 0) •H G -rl

LOLO . Cv ID CM CO CO CM CM ID · CM CM ÖOC

O O Ό •CMHCMCMHHCMOHH

H o O · O »1- -1. *1 · ‘1’ 4 J, *1- fl- (, • *C CMC0CMCM(0r CMCC0 \ O O tH rH r-i ·Η

___V v - ------------- II II

- H

v i .

O Ό tn > j λ h c Η ·Η Μ* ιΗ Η

o c CO o CO

H G M· t/3 CO

< Ή CJ) H "Cf O

Q O > X 0.0)

feGO GO O CO CM

> H +) O 00 O HO)

CU < -Η O

Hg O <C CM < O O

O) H G G O H U

O 0 01 lOGM E <H

CM O O +> 0) CO G H CÖ 3 < H

CH'v^HG H<CG b

MGHG^JCGXd G-HCD

3 3 ÜO « S 0 M jG 3 tt) C

0) O) 3 SHO.EJ3GCX

U U G Η Η ·Η 3 3 *H >> a O C G

3 3 (DHHH Φ > -P -C Η H O H

GGG000C ·α4->ΟΜ«Η _ o o o a m . a h · g ... 3 -p a g λλ·ο····®···^χ:χ: p aasxi^xjjopSEEGMöo

co GGOOOOGOHHH-PH-H

-p-pcoracflmHdGGGCxl x:

_cnCQPUMPdW^CUMCQCQMCOCQ

8102290 * * - 7 -

De verbindingen volgens de uitvinding bezitten ook een opmerkelijk in vivo activiteit tegen de experimentele infectie, opgeroepen door Staphylococcus aureus wanneer toediening plaatsvindt langs subcutane weg. Deze 5 in vivo activiteit, uitgedrukt als een ED50 waarde kan uiteenlopen tussen ongeveer 0,1 en ongeveer 0,5 mg/kg.

Gevonden werd ook, dat de verbindingen volgens de uitvinding anders dan andere rifamycine derivaten op ruime schaal toegepast in de geneeskunde, in geringe 10 mate worden geabsorbeerd uit dierlijke organen en weefsels wanneer toediening plaatsvindt langs orale weg, en onveranderd worden teruggevonden in de ontlasting in een opmerkelijk percentage ten opzichte van de toegediende dosering. Zo werd bijvoorbeeld in een representa-15 tief experiment, dat werd uitgevoerd op groepen van vier ratten, die gevast hadden en normaal waren gevoed, aan welke langs orale weg 100 mg per kg verbinding van voorbeeld VI werd gegeven, gevonden, dat na 4 uren gerekend vanaf de toediening resp. slechts 0,2 pg per ml en 20 6,5 pg per ml werd geabsorbeerd door het serum en de lever in de ratten, die gevast hadden.

In een verder representatief experiment, met het oogmerk de mate van de urinaire en faecale verwijdering van de verbindingen volgens de uitvinding te beoordelen, 25 werd aan groepen van zes ratten langs orale weg 25 mg/kg van de verbinding van voorbeeld VI gegeven. 72 uur lang werd ontlasting en urine opgevangen, vervolgens werd het gehalte van de verbinding bepaald langs microbiologische weg.

30 Na deze periode werd bijna 60% van de verbinding onveranderd in de ontlasting gevonden, terwijl de hoeveelheid van de verbinding in de urine niet kon worden bepaald vanwege de zeer lage concentratie daarvan. Deze gegevens, gekoppeld aan de opmerkelijke in vivo activi-35 text van de verbindingen volgens de uitvinding tegen Gram-negatieve bacteriën die aanwezig zijn in de bac-teriële darmflora in pathologische omstandigheden, geven aan, dat de verbindingen met de formule 1 van het formuleblad nuttig zijn als antibacteriële middelen in de darmen.

81 0 2 2 9 0

‘ * V

- 8 -

Deze eigenschappen werden bevestigd door experimenten, die werden uitgevoerd op ratten door het totale aantal (totale bacteriële belasting) in ontlastingsmonsters te bepalen, die verzameld werden zowel van dieren die geen 5 verbindingen kregen als van dieren, die dagelijks langs orale weg vooraf bepaalde hoeveelheden verbindingen volgens de uitvinding kregen.

De experimenten duurden 7 dagen en werden uitgevoerd op groepen van 6 dieren. De keuze van de diersoort 10 (rat) is absoluut gerechtvaardigd, omdat ratten een bacteriële darmflora hebben, die soortgelijk is aan die van de mens.

De verkregen resultaten zijn weergegeven in de volgende tabel, waarin de totale bacteriële belasting 15 is uitgedrukt als de logarithme met grondtal 10 van het aantal bacteriën in 1 g opgevangen verse ontlasting. Als representatieve verbindingen werden die van voorbeeld VI en XI in beschouwing genomen.

Tabel B.

8102290 < ί 6 - 9 -

8 1 8 £ S

Μ Ά ft CO CO VD

a 3 I

% hi o o , i1 31 § * °° ** O Q Φ 1 oo Αλ <ö 6 o -H O g> £} h vo oo co g -Λ β « cT ^ Q. :(U Q) •H rö ns <i) 3

«σ -P

• w S' η S' 'Ö m 3 | : »5J 5 8 8 3 3 2 Γ 31¾ - " m 0 o o φ δ < i-i +> J5 (d 6

CO

8 0 o oo co O) Ή O 00 co t-5 5-i - * “· μ ίο Φ & ^ <s\ <u -η ra

& 8 S

tr> -P

4 Is -s öï -H 10 „ ^ < Ά S 3 8 S? §

g1 « B

Q CD Φ r-{ -P £ (Ü H1 ö ·Η > :? j? Ό ffl, 3 S' Ί 8 | ai * g l g ö s 8102290 - 10 - i

De resultaten die in deze tabel zijn weergegeven, spreken voor zichzelf. Zij geven duidelijk aan dat de verbindingen volgens de uitvinding een merkbare vermindering van de bacteriële darmflora van de laboratorium-5 dieren doen ontstaan. Ook werd ontdekt, dat deze werking, die tot ontplooiing kwam door de verbindingen volgens de uitvinding, zelfs hoger was dan die, welke neomyci ne had, een aminoglucoside antibioticum, dat gebruikt wordt als antibacteriëèl middel in de darmen, (zie bijvoorbeeld 10 Remington's Pharmaceutical Sciences, blz. 1126, 16e ed. , Mack Publishing Company, Pennsylvania, 1980), die echter een hoeveelheid gevaarlijke neveneffecten ten toon spreidt (zie opnieuw Remington's Pharmaceutical Sciences, blz. 1274) .

15 Deze gunstige biologische eigenschappen zijn ge koppeld aan een zeer lage toxiciteit, waarbij de LD^ waarden langs orale weg zowel bij ratten als bij muizen altijd hoger zijn dan 2000 mg/kg.

De toepassing van de verbindingen volgens de uit-20 vinding als antibacteriële middelen heeft betrekking op alle industrieel toepasbare handelingen en aspecten van de toepassing, daar onder begrepen een opneming in farmaceutische preparaten.

De farmaceutische preparaten, die het actieve be-25 standdeel bevatten, vormen in feite voorts een specifiek doel van de uitvinding.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen daarom langs verscheidene wegen worden toegediend, bijvoorbeeld langs orale weg, plaatselijk of langs intra-30 musculaire weg. Voor dergelijke toedieningen worden de stoffen opgenomen in conventionele farmaceutische do-seringsformuleringen. Deze formuleringen bevatten, vermengd met het actieve bestanddeel, de gebruikelijke additieven bijvoorbeeld zoutstoffen, smaakstoffen, kleur-35 stoffen, bekledingsmiddelen en conserveringsmiddelen, inerte verdunningsmiddelen bijvoorbeeld calcium- of natriumcarbonaat, lactose en talk, bindmiddelen, bijvoorbeeld zetmeel, gelatine en polyvinylpyrrolidon, suspen-deermiddelen, bijvoorbeeld methylcellulose of hydroxy- 81 0 2 2 9 0 -11- ethylcellulose, en bevochtigingsmiddelen bijvoorbeeld lecithine, polyoxyethyleenstearaten en polyoxymethyleen-sorbitanmonoöleaat. De toebereiding die nuttig is voor plaatselijke en intramusculaire toediening kan het ac-5 tieve bestanddeel, opgelost of gesuspendeerd in gedestilleerd en pyrogeen-vrij water bevatten, vermengd met de gewoonlijk gebruikte farmaceutische dragers.

De uitvinding kan beter worden toegelicht aan de hand van de volgende voorbeelden die echter geenszins 10 zijn bedacht ter begrenzing van het kader van de uitvinding zelf.

De ü.V.spectra zijn opgenomen in absolute methanol met een Parkin-Elmer 552 spectrofotometer.

De I.R.spectra zijn opgenomen in KBr met een 15 Perkin-Elmer 281-B spectrofotometer.

1 13

De H-NMR en C-NMR, zijn, wanneer dat niet uitdrukkelijk gespecificeerd is, opgenomen in CDC13 met een Varian XL 100 spectrofotometer, waarbij tetra-methylsilaan als referentiestof is gebruikt.

20 De vermelde gegevens zijn in overeenstemming met de voorgestelde structuren.

Voorbeeld 1.

N-dehydro-4-deoxy-2-imino-4'-methylpyrido Cl *, 21:1,2 J -imidazo C5,4-cJ rifamycine S.

25 Aan een oplossing van 1,54 g (0,002 mol) van 3 broomrifamycine S, opgelost in 10 ml ethanol, werd onder roeren bij kamertemperatuur toegevoegd 0,430 g (0,004 mol) 2-amino-4-methylpyridine. Het reactiemengsel werd ongeveer 2 uren lang op deze temperatuur gehouden 30 totdat 3-broomrifamycine S (TLC-monitoring, elueer- systeem CHCl^/CH^OH = 40/1 (v/v)) was verdwenen, daarna werd 250 ml ethylacetaat toegevoegd. De organische fase werd afgescheiden, eerst gewassen met 5% waterig citroenzuur, daarna met water tot een pH van 7 en vervolgens 35 boven natriumsulfaat gedroogd. Na indampen tot droog werd het verkregen residu opgenomen in ethanol, waaruit de verbinding zoals in de titel is aangegeven, zich afscheidde. Opbrengst: 1,35 g (86% van de theoretische waarde). Smeltpunt 228-232°C (met ontleding).

8102290 ' r λ» - 12 - • i % U.V. spectrum: max (mp) 242 544 272 391 320 204 5 342 190 375 76 415 116 I1R. spectrumt karakteristieke absorptiebanden werden bij de volgende frequenties waargenomen (in cm *): 10 3440 (b), 2960 (s), 2920 (w), 2860 (w) , 1728 (s), 1708(s) , 1635 (w), 1590 (s) , 1500 (w) . b = breed; s = sterk; w = zwak.

^II-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden bij de volgende 6 (uitgedrukt als p.p.m.) waargenomen: 15 0,02 (d, 3H) ; 0,04 (d, 3H); 0,53 (d, 3H); 0,91 (d, 3H) ; 1,77 (s, 3H); 2,06 (s, 3H); 2,25 (s, 3H); 2,28 (s, 3H); 2,54 (s, 3H); 2,75-3,05 (m, 2H); 3,10 (s, 3H); 3,45 (s, 1H); 3,58 (d, 1H); 4,02 (d, 1H); 4,82 (d, 1H); 5,36 (dd, 1H); 6,32 (dd, 20 1H); 6,5-6,8 (m, 3H); 7,00 (dd, 1H); 7,80 (s, 1H); 9,32 (d, 1H); 13,4 (s, 1H).

s = singulet; d = doublet; m = multiplet; dd = doublet van doublet.

1^C-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden 25 waargenomen bij de volgende (uitgedrukt in p.p.m.): 7,35; 8,18; 9,55; 10,61; 14,18; 20,69; 21,44; 21,80; 22,26; 34,23; 36,45; 37,05; 39,80; 57,30; 73,98; 76,18; 77,06; 78,47; 108,20; 109,82; 110,45; 111,22; 117,63; 118,31; 118,89; 120,90; 125,13; 127,09; 128,44; 132,83; 30 138,61; 139,71; 142,03; 142,44; 146,45; 146,52; 150,01; 170,98; 172,57; 180,62; 181,92,

Voorbeelden II-V.

De volgende verbindingen werden vrijwel in overeenstemming met dezelfde werkwijze van de bovenstaande 35 voorbeelden bereid, uitgaande van een geschikt 3-halogeen-rifamycine S met de formule 2 van het formuleblad en een vooraf bepaalde verbinding met de formule 3 van het formuleblad.

8102290 - 13 -

Voorbeeld II.

N-dehydro-4-deoxy-2-imino-51-methylpyrido Cl1,2f;1/2Ï -imidazo 15,4-c~3 rifaxnycine S, uit 1,54 g (0,002 mol) 3-broom-rifamycine S en 0,432 g (0,004 mol) 2-amino-3-5 methylpyridine. Opbrengst 1,2 g (78% van de theoretische waarde). Smeltpunt 208-2l2°C (onder ontleding).

U.V. spectrum: max (mp) E^m 238 574 270 370 10 310 298 370 103 422 131 440 122 I.R. spectrum: karakteristieke absorptie banden werden 15 bij de volgende frequenties waargenomen (in cm ^): 3450 (b), 2980 (s), 2920 (s), 2870 (s), 2820 (s), 1735 (s), 1710 (s), 1660 (s), 1630 (s) , 1600 (s) , 1555 is), b = breed; s = sterk.

^H-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden 20 bij de volgende é waargenomen (uitgedrukt in p.p.m.): 0,0 (d, 3H); 0,54 (d, 3H); 0,88 (d, 3H); 1,3 (d, 3H); 1,73 (s, 3H); 2,02 (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,27 (s, 3H); 2,4 (s, 3H); 2,5-3,0 (m, 2H); 3,05 (s, 3H); 3,42 (s, 1H); 3,52 (d, 1H); 3,9 (d, 1H); 4,74 (d, 1H); 5,3 (q, 1H); 2*5 6,3 (d, 1H); 6,4-7,0 (m, 3H) ; 7,35 (d, 1H) ; 7,58 (d, 1H) ; 9,22 (s, 1H); 13,25 (s, 1H).

s = singulet; d = doublet; q = quartet; m = multiplet.

Voorbeeld III.

N-dehydro-4-deoxy-2-imino-31 -methylpyrido tl1,2*:1,2*3 -30 imidazo C5,4-cl rifamycine S, uit 1,54 g (0,002 mol) 3-broomrifamycine S en 0,432 g (0,004 mol) 2-amino-5-methylpyridine. Opbrengst 1,05 g (67% van de theoretische waarde).

/ \ „1% U.V. spectrum: max (mp) E1 35 242 459 274 362 322 260 345 155 8102290 it * - 14 - U.V.spectrum; 384 79 418 99 510 36 I.R. spectrum; karakteristieke absorptiebanden werden 5 bij de volgende frequenties (in cm x) waargenomen: 3410 (h), 3340 (h), 2960 (s), 2920 (s), 2880 (w), 2840 (w), 1735 (s), 1710 (w), 1655 (s), 1620 (vw) , 1598 (s), 1505 (s).

s = sterk, b = breed, w = zwak, vw = zeer zwak.

10 ^H-NMR spectrum; karakteristieke resonantiepieken werden bij de volgende ^ (uitgedrukt in p.p.m.) waargenomen: 0,04 (d, 3H); 0,55 (d, 3H); 0,93 (d, 3H); 1,1-1,5 (m,4H); 1,8 (s, 3H); 2,09 (s, 3H); 2,25 (s, 3H); 2,32 (s, 3H) ; 2.48 (s, 3H); 2,7-3,3 (m, 2H); 3,14 (s, 3H); 3,52 (s,lH); 15 3,62 (d, 1H); 4,1 (d, 1H); 4,9 (d, 1H)? 5,45 (q, 1H); 6.48 (d, 1H); 6,6-6,9 (m, 3H); 7,55 (d, 1H); 8,08 (d, 1H); 9,55 (s, 1H); 13,35 (s, 1H).

s = singulet, d = doublet; m = multiplet; q = quartet.

Voorbeeld IV.

20 5 1 -benzyloxy-N-dehydro-4-deoxy-2-iminopyrido Cl ' ,21:1,2j)- imidazo Ü5,4-c3 rifamycine S, uit 1,54 g (0,002 mol) 3-broomrifamycine S en 1,6 g (0,008 mol) 2-amino-3-benzyl- oxypyridine.. Opbrengst 0,840 g (46% van de theoretische waarde). Smeltpunt 198-203°C (onder ontleding).

1 % 25 U.V. spectrum: max (πιμ) Ε1αη 245 536 275 349 320 238 420 95 30 I.R. spectrum; karakteristieke absorptiebanden werden waargenomen bij de volgende frequenties , (in cm *) : 3450 (b), 2980 (w), 2970 (s), 2930 (s), 2920 (vw), 1730 (s), 1710 (s), 1655 (s), 1625 (vw), 1595 (s), 1545 (s), 1505 (s).

35 b = breed; s = sterk, w = zwak, vw = zeer zwak.

1H-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende (uitgedrukt in p.p.m.): 8102290 - 15 - 0. 08 (d, 3H); 0,53 (d, 3H); 0,94 (d, 3H); 1,1-1,6 (m, 4H) ; 1,82 (s, 3H); 1,12 (s, 3H)? 1,3 (s, 3H); 1,34 (s, 3H); 2,7-3,2 (m, 2H); 3,15 (s, 3H); 3,3-3,8 (m, 2H); 4,10 (d, 1H); 4,88 (d, 1H); 5,42 (q, 1H); 5,9 '(s, 2H); 6,42 (d,lH); 5 6,5-6,8 (m, 3H); 6,9-7,2 (m, 2H); 7,3-7,8 (m, 5H); 9,14 (q, 1H); 13,39 (s, 1H).

s = singulet; d = doublet; m + multiplet; q = quartet.

Voorbeeld V.

N-dehydro-4-deoxy-2-imino-isochinolino C21,11:1,2^ imida-10 zo Q5,4-c3 rifamycine S,_ uit 0,820 g (0,001 mol) 3-jood-rifamycine S en 0,288 g (0,002 mol) 1-amino-iso-chinoline. Opbrengst 0,510 g (62% van de theoretische waarde). Smeltpunt 198-203°C (met ontleding).

1% U.V. spectrum: max (mp) Elcm 15 256 765 322 264 338 260 413 107 1. R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden 20 waargenomen bij de volgende frequenties dn cm χ): 3460, 3120 (w), 3060 (w), 2980 (s), 2930 (s), 2880, 2820, 1735 (s), 1715 (s), 1660 (vw), 1600, 1525. s = sterk, w = zwak, vw = zeer zwak.

^H-NMR spectrum: karaktertieke resonantiepieken werden 25 waargenomen bij de volgende é (uitgedrukt in p.p.m.): 0,06 (d, 3H); 0,22 (d, 3H); 0,5 (d, 3H)? 0,83 (d, 3H); 1,79 (s, 3H); 2,00 (s, 3H); 2,26 (s, 3H); 2,3 (s, 3H); 2,5-3,00 (m, 2H); 3,10 (s, 3H); 3,45 (s, 1H); 3,6 (d, 1H); 4,00 (s, 1H); 4,76 (d, 1H); 5,39 (q, 1H); 6,8 (m, 4H); 30 7,38 (d, 1H); 7,6-7,9 (m, 3H); 9,00 (m, 1H); 9,20 (d, 1H).

s = singulet, d = doublet, q = quartet, m = multiplet.

Voorbeeld VI.

4-deoxy-41-methylpyrido Cl*,2':1,2^ imidazo t5,4-c3 -rifamycine SV.

35 1 g (0,00127 mol) verbinding van voorbeeld I werd opge lost in 50 ml abs.ethanol en aan de ontstane oplossing werd 20 ml van een 5%'s waterige oplossing van L(-)-ascorbinezuur toegevoegd. Het mengsel werd ongev. 1 uur 8102290 * - 16 - lang op kamertemperatuur gehouden totdat de verbinding van voorbeeld I verdween. (TLC-monitoring; elueersysteem CHCl^/CH^OH = 23/2 (v/v)), daarna werd het geëxtraheerd met 50 ml ethylacetaat. Na wassen met water tot een pH 5 van 7 en drogen boven natriumsulfaat werd het oplosmiddel afgedampt en het verkregen residu werd opgenomen in een 70/30 (v/v) mengsel van glycolmonomethylether/water. De verbinding van de titel scheidde zich af, welke verbinding door filtratie werd verkregen: Opbrengst 0,840 g (85% 10 van de theoretische waarde). Smeltpunt: 200-205°C (onder ontleding).

1% U'.Vv spectrum: . max. ,(mp) 232 489 260 339 15 292 295 320 216 370 119 450 159 I.R'. spectrum;· karakteristieke absorptiebanden worden 20 waargenomen bij de volgende frequenties (in cm ^): 3440 (b), 2960 (s), 2920 (s), 2860 (w), 2820 (vw), 1705 (s), 1640 (s), 1580 (s), 1500. (s).

b = breed, s = sterk, w = zwak, vw = zeer zwak.

' spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden 25 waargenomen bij de volgende & (uigedrukt in p.p.m.): -0,56 (d, 3H); 0,14 (d, 3H); 0,74 (d, 3H); 0,94 (d, 3H); 1,94 (s, 3H) ; 1,98 (s, 3H); 2,02 (s, 3H); 2,26 (s, 3H) ; 2,63 (s, 3H); 3,00 (s, 3H); 3,2-3,9 (m, 3H); 4,15-5,20 (m, 2H); 5,9-6,9 (m, 4H) ; 7,06 (dd, 1H); 7,38 (s, 1H)? 30 8,39 (s, 1H); 8,43 (d, 1H); 11,0 (s, 1H)? 13,12 (s, 1H) .

s = singulet, d = doublet, m = multiplet, dd = doublet van doublet.

13 C-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende ^ (uitgedrukt in p.p.m.): 35 6,98; 8,06; 8,21; 10,76; 17,56; 20,43; 20,78; 21,44; 22,35; 32,91; 36,93; 37,78; 38,59; 56,99; 72,65; 73,91; 76,75; 77,86; 97,83; 103,86; 104,09; 108,97; 109,99; 8102290 - 17 - 11/03; 114/96; 115/52; 117/61; 119,26; 122,99; 125,35; 128,44; 128,96; 136,21; 138,87; 141,75; 142,10; 147,74; 155,10; 170,63; 171,89; 182,19; 188,84.

Voorbeelden XII-X.

5 De volgende verbindingen werden vrijwel hetzelfde bereid als in voorbeeld VI.

Voorbeeld VII.

4-deoxy-51-methylpyrido Cl1,21:1,2 3 imidazo Cs,4-c 3 rifamycine SV, uit 1 g (0,00127 mol) van de verbinding 10 van voorbeeld II. Opbrengst 0,940 g (95% van de theoretische waarde). Smeltpunt 185-190°C (onder ontleding).

1% U.V. spectrum: max (ιημ) Elcm 217 470 235 544 15 262 . 333 273 303 292 295 320 205 356 99 20 373 122 440 164 454 166 I.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden waargenomen bij de volgende frequenties (in cm"*1) : 25 3440 (b), 3300 (b), 3200 (b), 2960 (s), 2920 (w), 2850 (vw), 1730 (s), 1710 (w), 1640 (s), 1595 (s), 1580 (b), 1555 (w).

b = breed, s = sterk, w = zwak, vw = zeer zwak.

1H-NM l spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden 30 waargenomen bij de volgende & (uitgedrukt als p.p.m.): -0,64 (d, 3H); 0,02 (d, 3H); 0,45 (d, 3H); 0,90 (d, 3H)? 1,75 (s, 3H); 1,94 (s, 3H); 1,97 (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,45 (s, 3H); 2,95 (s, 3H); 2,6-5,8 (m, 5H); 4,5-5,25 (m, 2H); 5,5-7,0 (m, 4H)? 7,25-7,75 (m, 2H); 8,27 (s, 1H); 35 8,47 (s, 1H); 14,86 (s, 1H); 16,77 (s, 1H) .

s = singulet, d = doublet, m = multiplet.

8102290 ·* ·% - 18 -

Voorbeeld VIII.

4-deoxy-3' -methylpyrldo j*l',2^1,23 imidazo t5,4-c3 rifamycine SV, uit 1,5 g (0,00191 mol) de verbinding van voorbeeld III. Opbrengst 1,46 g (96,3% van de theoretische 5 waarde). Smeltpunt 193-198°C (onder ontleding).

U.V. spectrum: max (mp.) Elcm 218 493 244 433 258 338 10 274 301 294 315 304 207 360 104 373 123 15 448 166 I.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden waargenomen bij de volgende frequenties (in cm 3340 (b), 3300 (b), 2960 (s), 2925 (s), 2870 (vw) , 2850 (s), 1730 (s), 1710 (vw), 1650 (vw) , 1640 (s) , 20 1600 (vw), 1585 (s) , 1565 (w), 1525 (vw), 1505 (s).

b = (breed) , s = sterk, w» zwak, vw = zeer zwak.

^H-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende ά (uitgedrukt in p.p.m.): -0,7 (d, 3H); 0,05 (d, 3H) ; 0,68 (d, 3H) ,· 0,87 (d, 3H) ; 25 1,73 (s, 3H); 1,92 (s, 3H); (s, 3H); 2,23 (s, 3H); 2,63 (s, 3H); 2,92 (s, 3H)? 3,25-4,00 (m, 5H); 4,6-5,10 (m, 2H); 5,9-6,8 (m, 4H)/ 7,13 (q, 1H)? 7,6 (q, 1H); 8,48 (q, 1H) ,· 14,14 (s, 1H) ? 16,65 (s, 1H) . s = singulet; d = doublet; m = multiplet; q = quartet.

30 Voorbeeld IX.

5 *-benzyloxy-4-deoxypyrido Cl1,2 * ιΐ,23 imidazo L5,4-c3 rifamycine SV, uit 1,5 g 80,00167 mol) van de verbinding van voorbeeld IV. Opbrengst 1,6 g (96,4% van de theoretische waarde). Smeltpunt 175-180°C (onder ontleding).

L% 35 U.V. spectrum: max (mji) Elcm 238 561 260 339 8102290 - 19 - Ü.V. spectrum: 282 311 324 194 355 100 370 129 5 432 153 452 167 I.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden waargenomen bij de volgende frequenties (in cm ^ : 3520 (w), 3410 (w), 3310 (w), 3210 (w), 3140 (w) f 10 3060 (vw), 2960 (s), 2920 (s), 1750 (vw), 1710 (w) , 1650 (s), 1600 (w), 1575 (s), 1505 (s).

s = sterk, w = zwak , vw = zeer zwak.

1H-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende £ (uitgedrukt in p.p.m.; 15 het spectrum werd geregistreerd in CDCl^ + CD^OD): -0,65 (d, 3H);-0,25 (d, 3H) ; 0,73 (d, 3H)? 0,90 (d, 3H); 1,92 (s, 3H); 1,97 (s, 3H); 2,02 (s, 3H); 2,28 (s, 3H) ; 2,83 (d, 1H); 2,97 (s, 3H)? 3,1-4,0 (m,lH)? 4,5-5,2 (m, 2H); 5,4 (s, 2H); 5,8-6,95 (m, 4H); 7,0-7,75 (m, 7H) ? 20 8,21 (d, 1H).

s = singulet; d = doublet; m = multiplet.

Voorbeeld X.

4-deoxy-isochinolino C21,11:1,2 3 imidazo C 5,4-c3 rif amy cine SV, uit 0,410 g (0,0005 mol) van de verbinding 25 van voorbeeld V. Opbrengst 0,400 g (97,5% van de theoretische opbrengst). Smeltpunt l8l-186°C (onder ontleding).

1% U.V. spectrum: max (ιημ) Ε1αη 253 532 288 363 30 300 346 320 290 382 120 430 120 I.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden 35 waargenomen bij de volgende frequenties (in cm-1): 3440 (b), 3140 (b), 2910 (s), 2850 (w), 1700 (s), 1630 (b), 1610 (b), 1580 (w), 1555 (vw), 1535 (vw). b = breed; s = sterk, w = zwak; vw= zeer zwak.

81 02 2 9 0 ' 9 rr - 20 - ' ^H-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende S (uitgedrukt in p.p.m.): -0,65 (d, 3H)? 0,04 (d, 3H); 0,7 (d, 3H) ; 0,88 (d, 3H); 1,55 (s, 3H) ; 1,92 (s, 3H); 2,02 (s, 3H) ,· 2,27 (s, 3H) ; 5 2,77 (d, 1H)? 2,94 (s, 3H); 3,00-3,90 (m, 4H) ; 4,78 (d, 1H); 4,93 (q, 1H) ; 5,75-7,00 (m, 4H); 7,34 (d, 1H); 7,6-8,0 (m, 6H); 16,6 m, 1H).

s = singulet; d = doublet; m + multiplet; q = quartet.

Voorbeeld XI.

10 ' 4-deoxy-pyrido t l ' , 2 ':1,23 imidazo tS,43 rifamycine SV

Aan een oplossing van 2,32 g (0,003 mol) 3-broom-rifamycine S in 50 ml ethanol werd bij kamertemperatuur onder roeren 1,41 g (0,015 mol) 2-aminopyridine toegevoegd. Het ontstane mengsel werd 4 urén lang op dezelfde 15 temperatuur gehouden totdat 3-broom-rifamycine S volledig was verdwenen (TLC-monitoring, elueersysteem: ethylacetaat) daarna werd 300 ml ethylacetaat toegevoegd. Na wassen van de organische fase met een 5%'s waterige oplossing van citroenzuur en vervolgens met water tot een pH van 7, en 20 drogen boven natriumsulfaat werd het oplosmiddel afgedampt, het verkregen residu werd opgelost in enig ethanol en aan de ontstane oplossing werd 20 ml 5%'s waterige oplossing van L(-)ascorbinezuur toegevoegd. Het reactie-mengsel werd 15 min. lang op kamertemperatuur gehouden, 25 50 ml CHCI3 werd toegevoegd, en vervolgens werd met water gewassen tot een pH van 7. Na drogen boven natriumsulfaat en afdampen van het oplosmiddel werd het. verkregen residu opgenomen in ethylacetaat. Het produkt van de titel scheidde zich af, hetgeen door filtratie werd verkregen.

3Ό Opbrengst 1,8 g (77,7% van de theoretische waarde).

Smeltpunt 170-175°C (onder ontleding).

............. 2 9.

' U.V.' spectrum; . .". max (nip) ^Tcm 234 521 258 329 35 293 301 373 122 450 160 I'.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden 8102290 - 21 - waargenomen bij de volgende frequenties (in cm Χ) : 3440 (b), 3300 (b), 3200 (b), 2970 (s), 2930 (s) , 2880 (w) , 2820 (w), 1635 (s) , 1605 (w) , 1585 (w) , 1575 (w), 1605 (s). b = breed, s = sterk, w = zwak.

5 ^H-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende £ (uitgedrukt in p.p.m.): -0,54 (d, 3H); 0,18 (d, 3H); 0,76 (d, 3H); 0,96 (d, 3H)? 1,92 (s, 3H); 1,96 (s, 3H); 1,98 (s, 3H); 2,27 (s, 3H) ; 2,88 (d, 1H); 3,00 (s, 3H); 3,34 (d, 1H); 3,66 (d, 1H) ; 10 4,92 (d, 1H); 5,06 (m, 1H); 5,5-5,9 (m, 3H) ; 6,6-7,0 (m, 1H); 7,1-7,4 (m, 1H)? 7,6-8,0 (m, 2H); 8,39 (s, 1H) ; 8,66 (d, 1H); 13,8 (s, 1H); 15,4 (s, 1H). s = singulet; d = doublet; m = multiplet.

13 C-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken werden 15 waargenomen bij de volgende £ (uitgedrukt in p.p.m.): 6,98; 8,37; 10,84; 17,53; 20,41; 20,79; 21,29; 32,96; 36,93; 37,86; 38,56; 57,08; 72,82; 74,00; 76,88; 77,87; 97,93; 104,23; 104,35; 108,94; 111,49; 112,28; 114,96; 115,02; 115,31; 119,69; 123,33; 125,42; 128,31; 129,77; 20 134,31; 137,06; 138,54; 141,97; 142,27; 155,14; 170,61; 171,86; 171,98; 182,32; 188,79.

Voorbeeld XII.

N-dehydro-4-deoxy-pyrido [^,2^1,23 imidazo 15,4-c3 rifamycine S.

25 1 g mangaandioxide werd toegevoegd aan een oplos sing van 1,5 g (0,00194 mol) verbinding van voorbeeld XI in 30 ml CHCI3. Het reactiemengsel werd op kamertemperatuur gehouden totdat de uitgangsverbinding verdween (TLC-monitoring; elueersysteem: ethylacetaat). Het oxidatie-30 middel werd daarna door filtratie verwijderd, het neerslag werd met methanol gewassen, de methanolische en chloroformfasen werden samengevoegd en met een 5%'s waterige oplossing van citroenzuur en vervolgens met water tot neutraal gewassen. Na drogen boven natrium-35 sulfaat werd het oplosmiddel afgedampt en een residu werd verkregen, dat opgenomen werd in chloroform en n-hexaan. De verbinding zoals in de titel is weergegeven scheidde zich af, welke door filtratie werd verkregen.

81 02 2 90 r c - 22 -

Opbrengst 1,45 g (97% van de theoretische waarde). Smeltpunt 207-212'°C (onder ontleding).

1% U.V. spectrum: max (ιημ) Elcm 233 429 5 272 381 315 255 342 175 410 116 I.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden 10 waargenomen bij de volgende frequenties (in cm ^): 3460 (b), 3340 (b), 2960 (s), 2930 (s) , 2880 (w) , 2850 (w) > 1735 (s) , 1710 (vw), 1655 (s), 1625 (w) , 1600 (s), 1505 (s) .

b = breed; s = sterk; w - zwak; vw = zeer zwak.

15 1H-NMR spectrum; karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende ^ (uitgedrukt in p.p.m.): 0,02 (d, 3H); 0,5 (s, 3H); 0,9 (d, 3H); 1,77 (s, 3H); 2.04 (s, 3H); 2,26 (s, 3H); 2,29 (s, 3H); 2,75-3,05 (m, 2H); 3,10 (s, 3H); 3,42 (s, 1H); 3,58 (d, 1H); 3,58 (d, 20 1H); 4,01 (d, 1H); 4,82 (d, 1H); 5,37 (q, 1H); 6,34 (dd, 1H); 6,45-6,8 (m, 3H); 7,18 (m, 1H); 7,58 (m, 1H); 8.04 (d, 1H); 9,50 (d, 1H); 13,28 (s, 1H) .

s = singulet; d = doublet; dd = doublet van doublet; m = multiplet; q = quartet.

25 1^C-NMR spectrum; karakteristieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende é (uitgedrukt in p.p.m.): 7,36; 8,22; 9,58; 10,71; 14,14; 20,70; 21,43; 22,25; 34,24; 36,45; 37,01; 39,75; 57,31; 73,94; 76,2; 76,91; 78,38; 108,19; 109,99; 110,36; 111,40; 116,52; 117,79; 30 119,55; 120,75; 125,01; 128,01; 128,32; 130,09; 132,67; 138,67; 139,99; 142,40; 146,31; 146,64; 149,48; 171,22; 172,46; 172,60; 180,26; 181,82; 192,98.

Voorbeeld XIII.

25-desacetyl-4-deoxy-41-methylpyrido Cl',2';1,2^ imidazo 35 [5,4-c3 rifamycine SV.

Een oplossing van 1,57 g (0,002 mol) van de verbinding van voorbeeld VI en 0,240 g NaOH in 60 ml methanol 8102290 ; * - 23 - werd 3 uren lang op kamertemperatuur gehouden totdat de uitgangsverbinding verdween (TLC-monitorage; elueersysteem: CHCl^/CH^OH = 23/2 (v/v)). Het reactiemengsel werd daarna geëxtraheerd met 300 ml CHCl^ en het organische extract 5 werd eerst met een 10%'s waterige oplossing van citroenzuur en vervolgens met water tot neutraal gewassen. Na drogen boven natrlumsulfaat en verwijdering van het oplosmiddel door afdampen werd het verkregen residu opgenomen in ethylacetaat. De verbinding zoals in de titel is weer-10 gegeven scheidde zich af, welke verbinding door filtratie werd verkregen. Opbrengst 1,07 g (72% van de theoretische waarde). Smeltpunt 199-200°C (onder ontleding).

1% ü.V. spectrum: max (mp) ®lcm 234 465 15 260 305 232 274 310 232 372 93 436 138 20 I.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden waargenomen bij de volgende frequenties (in cm ^): 3420 (b), 3330 (b), 2960 (s), 2920 (s), 2850 (s), 1735 (vw) , 1725 (s), 1655 (w), 1650 (w), 1630 (vw), 1595 (s), 1585 (vw), 1505 (w).

25 b = breed; s = sterk; w = zwak; vw = zeer zwak.

^H-NMR spectrum: karakteristieke resonantiepieken, geregistreerd in CDClg+CD^OD, werden waargenomen bij de volgende é (uitgedrukt in p.p.m.): -0,68 (d, 3H); -0,20 (d, 3H); 0,74 (d, 3H); 0,92 (d, 3H); 30 1,88 (s, 3H); 2,03 (s, 3H); 2,20 (s, 3H); 2,58 (s, 3H); 3,05 (s, 3H); 2,75-3,95 (m, 4H); 4,75-5,14 (m, 1H); 6,00-6,5 (m, 4H); 7,05 (d, 1H); 7,48 (d, 1H); 8,40 (d, 1H). s = singulet; d = doublet; m = multiplet.

Voorbeeld XIV.

35 25-desacetyl-N-dehydro-4-deoxy-2-imino-41-methylpyrido D.1,21:1,2 ^ imidazo £ 5,4-c^3 rifamycine S.

Deze verbinding werd vrijwel bereid als in voorbeeld XII, uitgaande van 0,740 g (0,001 mol) van de 8102290 • t- 't - 24 - verbinding van voorbeeld XIII. Opbrengst 0,720 g (97% van de theoretische waarde). Smeltpunt 200-205°C (onder ontleding).

1 % U.V. spectrum: max (mp) Elcm 5 234 465 260 305 292 274 310 232 372 93 10 436 138 I.R. spectrum: karakteristieke absorptiebanden werden waargenomen bij de volgende frequenties (in cm ^): 3400 (b), 2960 (s), 2920 (s), 2870 (s) , 1725 (s) , 1655 (w), 1645 (w), 1630 (vw), 1595 (s) , 1585 (vw), 1505 (s). 15 b = breed? s = sterk; w = zwak; vw = zeer zwak.

^H-NMR spectrum: karakterstieke resonantiepieken werden waargenomen bij de volgende b (uitgedrukt in p.p.m.): 0,25 (d, 3H); 0,42 (d, 3H); 0,65 (d, 3H)? 0,90 (d, 3H)? 1,76 (s, 3H); 2,20 (s, 6H)? 2,48 (s, 3H); 3,15 (s, 3H)? 20 2,8-4,1 (m, 7H); 5,24 (q, 1H)? 5,8-6,75 (m, 4H); 6,94 (d, 1H); 7,12 (d, 1H)? 9,25 (d, 1H); 13,25 (s, 1H). s = singulet; d = doublet; m = multiplet; q = quartet.

Door te werk te gaan vrijwel in overeenstemming met de werkwijze die is toegelicht in de bovenstaande 25 voorbeelden kunnen de volgende verbindingen die binnen het kader van de algemene formule 1 van het formuleblad vallen, worden bereid.

A -x- R R1 ... R3

Ax niets CH3CO H ^'-O^-CE^-OH H

30 A1 niets CH3C0 H -4'-CH2-CH2-CH2OH H

A1 niets ' CH3CO H -4'-CH2-CH2-N(CH3)2 H

A1 niets CH3CO H -4'-CH2-N(CH3)2 H

A1 niets CH3CO H -4 '-C^-CH^O^-Nia^) 2 H

A1 niets CH3C0 -3'-CH3 -4'-CH2-CH2-GH2-N(CH3)2 H

81 0 2 2 9 0 - 25 -

niets CH3CO -^-¾¾ -5' H

Aj_ niets CH3(X> -S'-CHg -S'-O^-O^-NiO^) 2 H

niets Η H -S'-CH^-CH^-iKCH^ H

2^ niets H -4'-CH3 -*3'-CH2-CH2-N(CH3) 2 H

5 binding CH300 H -4 '-G^-Cï^-N (CH3) 2 niets 2^2 binding CELjCO H -4'-CH2-CH2-CH2-N(CH3)2 niets

niets CH3CO Η -4'-NC>2 H

&2 binding CH300 H -4*-N32 niets

De verbindingen met formule 2 van het formuleblad 10 werden bereid in overeenstemming met de werkwijze die beschreven is in het Amerikaanse octrooischrift 4.179.438. De stoffen met de formule 3 van het formuleblad zijn in de handel verkrijgbare produkten.

Conclusies.

8102290

Claims

1. Nieuwe rifamycine derivaten, gekenmerkt door formule 1 van het formuleblad, waarbij A de structuur met formule la van het formuleblad of de structuur A2 met de formule lb van het formuleblad kan hebben, -x- een 5 chemische binding of niets voorstelt, R waterstof of acetyl is, en R2 onafhankelijk van elkaar voorstellen waterstof, (c1_4) alkyl, benzyloxy, mono- en di-(C1_2)-alkylamino-C1_4) alkyl, (C]L_3) alkoxy- (C1-4) alkyl, hydroxymethyl, hydroxy-(C2_4)-alkyl, nitro of R1 en R2 10 samengenomen met twee opeenvolgende koolstofatomen van de pyridinekern een benzeenring vormen, die desgewenst gesubstitueerd is met één of twee methyl of ethylgroepen, R3 een waterstofatoom of niets voorstelt, met dien verstande dat, wanneer A gelijk is aan A^, -x- niets voor-15 stelt en R3 een waterstofatoom is, voorts met dien verstande dat, wanneer A gelijk is aan A2, -x- een chemische binding en R^ niéts voorstelt.

2. Verbinding volgens conclusie 1, gekenmerkt doordat A de structuur A.^ of de structuur A2 20 als in conclusie 1 gedefinieerd, kan hebben, -x- een chemische binding of niets voorstelt, R waterstof of acetyl is, R^ en R2 onafhankelijk van elkaar waterstof, (C1-4) alkyl, benzyloxy, hydroxy (C2_4) alkyl, di-(C1_3) alkylamino-(01-4) alkyl, nitro of R1 en R2 samen genomen 25 met twee opeenvolgende koolstofatomen van de pyridinekern een benzeenring vormen en R3 een waterstofatoom of niets voorstelt, met dien verstande dat, wanneer A gelijk is aan -x- niets voorstelt en R3 een waterstofatoom is, voorts met dien verstande dat, wanneer A gelijk is A2, 30 -x- een chemische binding voorstelt en R3 niets voorstelt.

3. Verbinding volgens conclusie 1, gekenmerkt doordat A de structuur A^ of de structuur A2 als in de voorgaande conclusies gedefinieerd, kan hebben, -x- een chemische binding of niets voorstelt, R acetyl is,

35 Rj^ en R2 onafhankelijk van elkaar voorstellen waterstof, 8102290 A * - 27 - (C1_^) alkyl of ^ en Rg samen genomen met twee opeenvolgende koolstofatomen van de pyridinekern een benzeen-ring vormen en Rg een waterstofatoom of niets voorstelt, met dien verstande dat, wanneer A gelijk is A^, -x- niets 5 voorstelt en Rg een waterstofatoom voorstelt, voorts met dien verstande dat, wanneer A gelijk is aan Ag, -x- een chemische binding voorstelt en Rg niets voorstelt.

4. Verbinding volgens conclusie 1, gekenmerkt doordat deze verbinding is 4-deoxy-4'-methyΙ- ΙΟ pyrido C1'r2':1,23 imidazo £5,4-c3 tifamycine SV.

5. Verbinding volgens conclusie 1, gekenmerkt doordat de verbinding is 4-deoxy-pyrido [^,2^1,23 imidazo £5,4-c } rifamycine SV.

6. Werkwijze voor het bereiden van nieuwe imidazo- 15 rif amycine derivaten, met h et kenmerk, dat men derivaten met de formule 1 van het formuleblad bereidt, waarbij A de structuur A1 met de formule la van het formuleblad of de structuur Ag met de formule lb van het formuleblad kan hebben, -x- een chemische binding 20 of niets voorstelt, R waterstof of acetyl is, R^ en Rg onafhankelijk van elkaar voorstellen waterstof, (^-4) alkyl, benzyloxy, mono- en di-(C1_g) alkylamino-(^_^) alkyl, (01—3) alkoxy- (C·^) alkyl, hydroxymethyl, hydroxy-(C2_4) alkyl, nitro of R-j^ en Rg samen genomen twee opeen-25 volgende koolstofatomen van de pyridinekern een benzeen-ring vormen, die desgewenst is gesubstitueerd met één of twee methyl- of ethylgroepen, Rg een waterstofatoom of niets voorstelt, met dien verstande dat, wanneer A gelijk is aan A^ -x- niets voorstelt en Rg een waterstof-30 atoom voorstelt, voorts met dien verstande, dat wanneer A gelijk is aan Ag, -x- een chemische binding voorstelt en Rg niets voorstelt, waarbij men een molaire hoeveelheid van een 3-halogeenrifamycine S met de formule 2 van het formuleblad, waarin halogeen betekent een halogeenatoom 35 en R voorstelt waterstof of acetyl, laat reageren met een molaire overmaat van een verbinding met de formule 3 van het formuleblad, waarbij R^ en Rg als boven gedefi- 8102290 ά -«· - 28 - nieerd zijn, in aanwezigheid van een inert organisch oplosmiddel bij kamertemperatuur gedurende een periode, die ligt tussen ongeveer 1 en 4 uren, waarbij verbindingen met de formule 1 van het formuleblad worden verkregen 5 waarin A de structuur A2 heeft, R, R1 en R2 als boven zijn gedefinieerd, -x- een chemische binding en R^ niets voorstelt, welke kan worden omgezet in de overeenkomstige verbindingen met de formule 1 van het formuleblad, waarin A de structuur A^ heeft, R, R^ en R2 als boven zijn ge-10 definieerd, -x- niets voorstelt en R^ een waterstofatoom voorstelt, in een inert organisch oplosmiddel, welke werkwijze voorts wordt gekenmerkt doordat: a) de verbinding met de formule 1 van het formuleblad, waarin A aanduidt de structuur A^, R, R1 en R2 15 als boven zijn gedefinieerd, -x- niets voorstelt en R^ een waterstofatoom voorstelt, op zijn beurt kan worden omgezet in de overeenkomstige verbindingen met de formule 1 van het formuleblad, waarin A de structuur A2 heeft, R, Rj^ en R2 als boven zijn gedefinieerd, -x- een chemische 20 binding en R^ niets voorstelt, door behandeling met een geschikt oxidatiemiddel dat gekozen is uit mangaandioxide, loodtetraacetaat, dichloor-dicyano-benzochinon, 2,3,4,5-tetrachloorbenzochinon, 2,3,5,6-tetrachloorbenzochinon en analoga; 25 b) de verbindingen met de formule 1 van het formule blad waarin R acetyl voorstelt kan worden omgezet in de overeenkomstige verbinding met de formule 1 van het formuleblad, waarin R waterstof voorstelt, door milde alkalische hydrolyse.

7. Werkwijze volgens conclusie 6, m e t het kenmerk, dat men ongeveer- 2-8 molaire equivalenten verbinding met de formule 3 van het formuleblad gebruikt voor elk molair equivalent van het rifamycine derivaat met de formule 2 van het formuleblad.

8. Werkwijze volgens conclusie 6, geken merkt doordat hal voorstelt broom of jodium.

9. Werkwijze volgens conclusie 6, m e t het. 81 0 2 2 9 0 A - 29 - kenmerk, dat het organische oplosmiddel een ali-fatisch alkanol met 1-4 koolstofatomen en/of een gehalo-geneerde koolwaterstof met 1-2 koolstofatomen is.

10. Farmaceutisch antibacterieel preparaat, g e - 5 kenmerkt doordat het als actief bestanddeel bevat een verbinding met de formule 1 van het formuleblad, vermengd met één of meer vaste of vloeibare farmaceutisch aanvaardbare dragers.

11. Farmaceutisch antibacterieel preparaat volgens 10 conclusie 10, gekenmerkt doordat het actieve bestanddeel is 4-deoxy-4' -methy 1-pyrido 1^2^1,2 imidazo 5,4-c rifamycine SV.

12. Farmaceutisch antibacterieel preparaat volgens conclusie 10, gekenmerkt doordat het actieve 15 bestanddeel is 4-deoxy-pyrido 11f2’:1,2 imidazo 5,4-c rifamycine SV.

13. Werkwijze voor het behandelen van antibacteriële ziekten, gekenmerkt doordat men aan zoogdieren die lijden aan die ziekte een antibacterieel effectieve 20 hoeveelheid van een verbinding volgens conclusie 1 toedient.

14. Toepassing van de verbinding volgens conclusie 1 als antibacterieel middel. 81022S0 ’ > ... :k- CH3 CH3 CH3 r° oh ce CH3 ^ ^ 0-00¾ ®3 3 A °—h—Ov\ CH-. ' R2 3 R1 OH A : la V3 A A^ : lb l^3 4 81 0 2 2 9 0 AEFA FARt^CEUTICI 3·ρ·Α· " II CH3 CH3 ch3 OH OH 0CH3 CH, \ J 2 J1 ^ CH 0 0=C LH3 ch3 oVSA^ 0—I-—^ 0 CH3 0 Vv^ 3 vN<*A nh2 8102290 w 1 ALFA FARMACEUTICI S-.p.A.