MX2014016062A - Preparacion, usos y formas sólidas del ácido obeticólico. - Google Patents

Preparacion, usos y formas sólidas del ácido obeticólico.

Info

Publication number
MX2014016062A
MX2014016062A MX2014016062A MX2014016062A MX2014016062A MX 2014016062 A MX2014016062 A MX 2014016062A MX 2014016062 A MX2014016062 A MX 2014016062A MX 2014016062 A MX2014016062 A MX 2014016062A MX 2014016062 A MX2014016062 A MX 2014016062A
Authority
MX
Mexico
Prior art keywords
acid
obethicolic
colan
hydroxy
keto
Prior art date
Application number
MX2014016062A
Other languages
English (en)
Other versions
MX365059B (es
Inventor
André Steiner
Poulsen Heidi Waenerlund
Emilie Jolibois
Melissa Rewolinski
Ralf Gross
Emma Sharp
Fiona Dubas-Fisher
Alex Eberlin
Original Assignee
Intercept Pharmaceuticals Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48741553&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=MX2014016062(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Intercept Pharmaceuticals Inc filed Critical Intercept Pharmaceuticals Inc
Publication of MX2014016062A publication Critical patent/MX2014016062A/es
Publication of MX365059B publication Critical patent/MX365059B/es

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • C07J9/005—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane containing a carboxylic function directly attached or attached by a chain containing only carbon atoms to the cyclopenta[a]hydrophenanthrene skeleton
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/575—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of three or more carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, ergosterol, sitosterol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2004—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/2022—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/205—Polysaccharides, e.g. alginate, gums; Cyclodextrin
    • A61K9/2054—Cellulose; Cellulose derivatives, e.g. hydroxypropyl methylcellulose
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/04—Drugs for disorders of the urinary system for urolithiasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07J—STEROIDS
    • C07J9/00—Normal steroids containing carbon, hydrogen, halogen or oxygen substituted in position 17 beta by a chain of more than two carbon atoms, e.g. cholane, cholestane, coprostane
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

La presente invención se refiere a ácido obeticólico, (ver Fórmula) o una sal, solvato o conjugado de aminoácido farmacéuticamente aceptable del mismo, El ácido obeticólico es útiles para el tratamiento o prevención de una enfermedad o afección mediada por FXR, enfermedad cardiovascular o hepatopatía colestásica, y para reducir el colesterol HDL, para disminuir los triglicéridos en un mamífero, o para la inhibición de la fibrosis. La presente invención se refiere también a procesos para la síntesis de ácido obeticólico. 19266673v.1.

Description

PREPARACIÓN Y USOS DE ÁCIDO OBETICÓLICO SUMARIO DE LA INVENCIÓN La presente invención se refiere a ácido obeticólico, un agonista de FXR, a procesos de preparación de ácido obeticólico, a formulaciones farmaceuticas que comprenden ácido obeticólico y al uso terapéutico de los mismos. Ácido obeticólico (también conocido como INT-747) La presente invención se refiere a una forma C cristalina de ácido obeticólico caracterizada por un patrón de difracción de rayos X que incluye picos característicos a aproximadamente 4,2. 6,4, 9,5, 12,5, y 16,7 grados 2-teta. La forma C cristalina de ácido obeticólico se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X sustancialmente similar al expuesto en la Figura 5 y se caracteriza adicionalmente por un termograma de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que tiene un valor de endotermia a aproximadamente 98+2 °C.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende la etapa de convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaBH para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de hacer reaccionar el áster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de hacer reaccionar el áster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsil¡loxi-5p-col-6-en-24-oico con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico; hacer reaccionar el éster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto^-colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-53-colan-24-oico con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5 -col-6-en-24-oico; hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-53-col-6-en-24-oico con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el éster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-et¡l-7-ceto-5P-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico con CH3OH y H2SO4 para formar áster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5P-colan-24-oico; hacer reaccionar el áster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar áster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsil¡lox¡-5p-col-6-en-24-o¡co; hacer reaccionar el áster metílico de ácido 3a,7-d¡trimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico con CH3CHO para formar el áster metílico del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-et¡liden-7-ceto-5 b-co la h-24-oico ; hacer reaccionar el áster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5P-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5P-colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, en el que la conversión de la forma C de ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico comprende la etapa de disolver la forma C de ácido obeticólico cristalino en solución de NaOH acuoso y añadir HCI.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, en el que la reacción de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 85 °C a aproximadamente 110 °C en una solución básica acuosa.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, en el que la reacción del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con Pd/C e hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 100 °C a aproximadamente 105 °C y a una presión a aproximadamente 4 a aproximadamente 5 bares.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, en el que la reacción del éster metílico del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, en el que la reacción del éster metílico del ácido 3a, 7-ditrimetilsililox¡-5 -col-6-en-24-oico o éster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidrox¡-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico se lleva a cabo en un disolvente aprótico polar a una temperatura de aproximadamente -50 °C a aproximadamente -70 °C en presencia de BF3.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, en el que la reacción del éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5 -colan-24-oico con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililox¡-5p-col-6-en-24-oico se lleva a cabo en un disolvente aprótico polar a una temperatura de aproximadamente -10 °C a aproximadamente -30 °C.
La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, en el que la reacción del ester metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5 -colan-24-oico con CH3OH y H2SO4 para formar éster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico se calienta durante aproximadamente 3 horas y el pH de la mezcla de reacción se ajusta con una solución básica acuosa hasta un valor de pH de aproximadamente 6,5 a aproximadamente 8,0.
La presente invención se refiere a un ácido obeticólico, o una sal, solvato o conjugado de aminoácido farmacéuticamente aceptable del mismo, que tiene una potencia superior a aproximadamente 98 %, superior a aproximadamente 98,6 %, superior a aproximadamente 99,0 %, o superior a aproximadamente 99,5 %. La presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende la forma 1 de ácido obeticólico producido mediante un proceso de la invención y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
La presente invención se refiere a un método de tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por FXR en un sujeto que comprende administrar una cantidad eficaz de la forma 1 de ácido obeticólico. La enfermedad o afección se selecciona de atresia biliar, enfermedad hepática colestásica, hepatopatía crónica, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), infección por hepatitis C, hepatopatía alcohólica, cirrosis biliar primaria (PBC), daño hepático por fibrosis progresiva, fibrosis hepática, fibrosis hepática inducida por alcohol, y enfermedades cardiovasculares, incluyendo aterosclerosis, arteriesclerosis, hipercolesterolemia e hiperlipidemia. La presente invención se refiere a un metodo para reducir los triglicéridos en un sujeto que comprende administrar una cantidad eficaz de la forma 1 de ácido obeticólico.
BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 es un cromatograma de HPLC-UV/MS del compuesto bruto 5 de la etapa 4 del ejemplo 1 inyectado a 1 mg/ml, volumen de inyección 3 mI. El cromatograma se obtiene de acuerdo con el método descritos en el ejemplo 2.
La Figura 2 es un cromatograma de HPLC-UV/MS del compuesto 5 de la etapa 4 del ejemplo 1, referencia purificada inyectada a 1 mg/ml, volumen de inyección 20 mI. El cromatograma se obtiene de acuerdo con el método descritos en el ejemplo 2.
La Figura 3 es un cromatograma de UV del compuesto bruto 5 de la etapa 4 del ejemplo 1 usando el método de HPLC. El cromatograma se obtiene de acuerdo con el método descritos en el ejemplo 2.
La Figura 4A es una traza iónica precisa de m/z 850,61914 ± 3 ppm de la fracción del pico principal (RT 29,0 min) del compuesto 5 de la etapa 4 del ejemplo 1, aislado puramente con el método HPLC (véase el Ejemplo 2).
La Figura 4B es una traza iónica precisa de m/z 850,61914 ± 3 ppm de la fracción del pico principal (RT 29,9 min) del compuesto 5 de la etapa 4 del ejemplo 1, aislado puramente con el método HPLC (véase el Ejemplo 2).
La Figura 4C es una traza iónica precisa de m/z 850,61914 ± 3 ppm del compuesto 5 de la etapa 4 del ejemplo 1 (véase el ejemplo 2).
La Figura 4D es una traza iónica precisa de m/z 850,61914 + 3 ppm del compuesto 5 de la etapa 4 del ejemplo 1 , referencia purificada (véase el ejemplo 2).
La Figura 5 es un difractograma de XRPD de la forma C del ácido obeticólico cristalino (véase el ejemplo 3).
La Figura 6 muestra los termogramas de TGA y DSC de la forma C del ácido obeticólico cristalino (véase el ejemplo 3).
La Figura 7 muestra difractogramas VT-XRPD del ácido obeticólico cristalino a 25 °C, 110 °C, y 120 °C (véase el Ejemplo 3).
La Figura 8A es un gráfico de isotermas GVS de la forma C del ácido obeticólico cristalino (véase el ejemplo 3).
La Figura 8B es un gráfico de la cinética GVS de la forma C del ácido obeticólico cristalino (véase el ejemplo 3).
La Figura 8C muestra difractogramas XRPD de la forma C del ácido obeticólico cristalino y tras análisis GVS (véase el Ejemplo 3).
La Figura 9 muestra difractogramas XRPD de la forma C del ácido obeticólico cristalino antes y después de almacenar a 40 °C / HR del 75 % (véase el Ejemplo 3).
La Figura 10 es un difractograma de XRPD del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 11 muestra los difractogramas XRPD para los lotes 1, 2, 3, 4, 5 y 6 de ia forma 1 del ácido obeticólico (vease el ejemplo 5).
La Figura 12 es un espectro RMN del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico en d6-DMSO (véase el ejemplo 5).
La Figura 13 muestra los espectros de RMN de 1H para los lotes 1, 2, 3, 4, 5 y 6 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 14 es una expansión del espectro de RMN de 13C DEPTQ de la de la forma 1 del ácido obeticólico de la región 10-75 ppm (véase el ejemplo 5).
La Figura 15 es una expansión del espectro de RMN de 13C DEPTQ de la de la forma 1 del ácido obeticólico suprimiendo los carbonos cuaternarios de la región 0-75 ppm (véase el ejemplo 5).
La Figura 16 es una RMN de 13C cuantitativa de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 17 es una vista expandida de los picos a 32,33 ppm de la Figura 16 (véase el ejemplo 5).
La Figura 18 es un espectro FT-IR del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 19 muestra los termogramas de TGA y DSC de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 20 muestra los termogramas de DSC modulados del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 21 muestra los trazados de TGA de los lotes 1, 2, 3, 4, 5, 5 y 6 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 22 muestra los trazados de DSC de los lotes 1, 2, 3, 4, 5, 5 y 6 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 23A es una imagen del lote 1 de la forma 1 de ácido obeticólico bajo microscopía óptica polarizada. La Figura 23B es una imagen del lote 2 de la forma 1 de ácido obeticólico bajo microscopía óptica polarizada. La Figura 23C es una imagen del lote 3 de la forma 1 de ácido obeticólico bajo microscopía óptica polarizada. La Figura 23D es una imagen del lote 4 de la forma 1 de ácido obeticólico bajo microscopía óptica polarizada. La Figura 23E es una imagen del lote 5 de la forma 1 de ácido obeticólico bajo microscopía óptica polarizada. La Figura 23F es una imagen del lote 6 de la forma 1 de ácido obeticólico bajo microscopía óptica polarizada.
La Figura 24 muestra el gráfico de la isoterma de GVS del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 25 muestra el gráfico de la cinética de GVS del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 26 muestra difractogramas XRPD del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico y tras GVS (véase el Ejemplo 5).
La Figura 27 es un gráfico de la medición de la pKa a tres proporciones diferentes de metanol/agua para la forma 1 de ácido obeticólico (véase el Ejemplo 5).
La Figura 28 es un gráfico de Yasuda-Shedlovsky para la forma 1 del ácido obeticólico (vease el ejemplo 5).
La Figura 29 es un gráfico que muestra la distribución de la especie en función del pH para la forma 1 de ácido obeticólico (véase el Ejemplo 5).
La Figura 30 es un gráfico que muestra la curva de diferencias obtenida mediante potenciometría para la forma 1 de ácido obeticólico (véase el Ejemplo 5).
La Figura 31 muestra el perfil de lipofilicidad de la forma 1 del ácido obeticólico (véase el ejemplo 5).
La Figura 32 muestra los difractog ramas XRPD del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico después de almacenar a 40 °C/HR del 75 % (véase el Ejemplo 5).
La Figura 33 muestra los difractog ramas XRPD del lote 1 de la forma 1 del ácido obeticólico después de almacenar a 25 °C/HR del 97 % (véase el Ejemplo 5).
La Figura 34 muestra una vista de la molécula de la forma G de ácido obeticólico de la estructura cristalina que muestra elipsoides de desplazamiento atómico anisotrópico para los átomos no hidrógeno al nivel de probabilidad del 50 % (véase el Ejemplo 6).
La Figura 35 muestra una vista de los enlaces de hidrógeno intermoleculares de la estructura cristalina de la forma G del ácido obeticólico en el que los puentes de hidrógeno se muestran como líneas discontinuas (vease el Ejemplo 6).
La Figura 36 muestra una cubierta del XRPD del patrón de polvo simulado, los patrones experimentales del cristal recolectado y la forma G de ácido obeticólico (véase el Ejemplo 6).
La Figura 37 muestra un gráfico del perfil de ácido obeticólico en plasma frente al tiempo tras la administración oral de 20 mg/kg de la forma 1 de ácido obeticólico y la forma F cristalina (véase el Ejemplo 7).
La Figura 38 muestra un gráfico de la concentración en plasma del conjugado tauro de la forma 1 de ácido obeticólico y la forma F cristalina a diferentes intervalos de tiempo tras la administración (véase el Ejemplo 7).
La Figura 39 muestra la curva DSC de la forma 1 (véase el ejemplo 7).
La Figura 40 muestra la curva DSC de la forma F (véase el ejemplo 7).
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente solicitud se refiere a ácido obeticólico, un ingrediente farmacéuticamente activo (también conocido como INT-747) que tiene la estructura química: ' Ácido obeticólico (tambien conocido como INT-747) incluyendo, ácido obeticólico sustancialmente puro, un proceso para la preparación de ácido obeticólico que comprende ácido obeticólico cristalino como un intermedio sintético, y métodos analíticos para confirmar la presencia y la pureza del ácido obeticólico e intermedios sintéticos en el proceso para preparar ácido obeticólico. La presente solicitud también describe composiciones farmacéuticas y formulaciones de ácido obeticólico y usos para dichas composiciones.
Proceso para preparar ácido obeticólico La presente solicitud está dirigida a un proceso para preparar ácido obeticólico altamente puro. El proceso de la presente solicitud se muestra en el Esquema 1. El proceso es una síntesis de 6 etapas, seguida de una etapa de purificación para producir ácido obeticólico altamente puro.
Esquema 1 HO'- ác de átído obetkólico Etapa 7 O,H Forma 1 de ácido obettcóiico El proceso de la presente invención tambien incluye un proceso de acuerdo con el Esquema 1 en el que los compuestos 4 y 5 están cada uno compuestos por una mezcla de los isómeros E y Z como se ilustra mediante las estructuras de los compuestos 4A y 5A más siguientes: En una realización, la proporción de los isómeros E/Z del éster metílico del ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4A) es de aproximadamente 50 %, superior a aproximadamente 60 %, superior a aproximadamente 70 %, superior a aproximadamente 80 %, superior a aproximadamente 83 %, superior a aproximadamente 85 %, superior a aproximadamente 90 %, superior a aproximadamente 93 %, superior a aproximadamente 95 %, o superior a aproximadamente 99 %. En una realización, la proporción de los isómeros E/Z se determina mediante HPLC. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 80 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 83 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 85 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 90 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 93 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 95 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 99 %.
En una realización, la proporción de los isómeros E/Z del ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (5A) es de aproximadamente 50 %, superior a aproximadamente 60 %, superior a aproximadamente 70 %, superior a aproximadamente 80 %, superior a aproximadamente 83 %, superior a aproximadamente 85 %, superior a aproximadamente 90 %, superior a aproximadamente 93 %, superior a aproximadamente 95 %, o superior a aproximadamente 99 %. En una realización, la proporción de los isómeros E/Z se determina mediante HPLC. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 80 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 83 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 85 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 90 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 93 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 95 %. En una realización, la proporción es superior a aproximadamente 99 %.
El proceso de la presente solicitud nunca se ha notificado en la materia. El proceso es una síntesis de 6 etapas, seguida de una etapa de purificación. La etapa 1 es la esterificación del ácido carboxílico C-24 de ácido 7-ceto-litocólico (KLCA) usando metanol en presencia de catálisis ácida y calor para producir el compuesto ester metílico 1. La etapa 2 es la formación de sililenol éter a partir del compuesto 1 usando una base fuerte seguido de tratamiento con clorosilano para producir el compuesto 3. La etapa 3 es una reacción de condensación de aldol del compuesto 3 de sililenol eter y acetaldehído para producir el compuesto 4 (o el compuesto 4A). La etapa 4 es hidrólisis del éster, es decir saponificación del éster metílico de C-24 del compuesto 4 (o compuesto 4) para producir el compuesto ácido carboxílico 5 (o compuesto 5A). La etapa 5 es la hidrogenación del resto 6-etilideno del compuesto 5 (o compuesto 5A), seguido de isomerización para producir el compuesto 6. La etapa 6 es la reducción selectiva del grupo 7-Ceto del compuesto 6 en un grupo 7a-hidroxi para producir ácido obeticólico cristalino. La Etapa 7 es la conversión del ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
El proceso de la presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, en el que el proceso usa una forma cristalina de ácido obeticólico como un intermedio sintético.
En una realización, La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende la etapa de convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico En una realización, La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-53-colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto^-colan-24-oico (6) con NaBI-U para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico. En una realización, La presente invención se refiere un proceso para prepararla forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el éster metílico de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4A) con NaOH para formar ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A), hacer reaccionar el ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, La presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ester metílico de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (4) con NaOH para formar ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5), hacer reaccionar el ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino, y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, La presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico (3) con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E/Z-3a-hidrox¡-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico (4A), hacer reaccionar el éster metílico de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4A) con NaOH para formar ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A), hacer reaccionar el ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24- oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino, y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, La presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ester metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico (3) con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4), hacer reaccionar el éster metílico de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4) con NaOH para formar ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (5), hacer reaccionar el ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino, y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, la presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5 -colan-24-oico (1) con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5 -col-6-en-24-oico (3), hacer reaccionar el ester metílico de ácido 3a,7-ditrimet¡ls¡l¡loxi-5p-col-6-en-24-oico (3) con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E/Z-3a-hidrox¡-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (4A), hacer reaccionar el éster metílico de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (4A) con NaOH para formar ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico (5A), hacer reaccionar el ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5P-colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6) con NaBhU para formar ácido obeticólico cristalino, y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, la presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a-h id roxi-7-ceto-5p-colan-24-oico (1) con U[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico (3), hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5P-col-6-en-24-oico (3) con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico (4), hacer reaccionar el éster metílico de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (4) con NaOH para formar ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico (5), hacer reaccionar el ácido E-3a-h¡droxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-o¡co (5) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5P-colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino, y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, la presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico (KLCA) con CH3OH y H2SO4 para formar áster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5P-colan-24-oico (1), hacer reaccionar el áster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5P-colan-24-oico (1) con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar áster metílico de ácido 3a,7-ditrimet¡lsililoxi-5P-col-6-en-24-oico (3), hacer reaccionar el áster metílico de ácido 3a,7-ditrimet¡lsililoxi-5p-col-6-en- 24-oico (3) con CH3CHO para formar el áster metílico del ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico (4A), hacer reaccionar el áster metílico de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (4A) con NaOH para formar ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico (5A), hacer reaccionar el ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-o¡co (5A) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino, y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, la presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico (KLCA) con CH3OH y H2SO4 para formar ester metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5P-colan-24-oico (1), hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico (1) con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5 -col-6-en-24-oico (3), hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico (3) con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico (4), hacer reaccionar el éster metílico de ácido E-3a-hidroxi-6-etil¡den-7-ceto-53-colan-24-oico (4) con NaOH para formar ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (5), hacer reaccionar el ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6), hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino, y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, la presente invención se refiere un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico usando ácido obeticólico cristalino., En otra realización, el ácido obeticólico es la forma C. En una realización la forma C del ácido obeticólico cristalino se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X similar al expuesto en la Figura 5. En una realización, la forma C del ácido obeticólico cristalino se cristaliza y recristaliza en acetato de n-butilo.
Etapa 1 La etapa 1 es la reacción del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico (KLCA) con CH3OH y H2SO4 para formar ester metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5P-colan-24-oico (1). En una realización de la etapa 1, la mezcla de reacción se calienta durante aproximadamente 3 horas y el pH de la mezcla de reacción se ajusta con una solución básica acuosa hasta un valor de pH de aproximadamente 6,5 a aproximadamente 8,0. En una realización, el aislamiento del éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5 -colan-24-oico (1) comprende además tratamiento con carbono activado. En una realización, el aislamiento del éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5 -colan-24-oico (1) no comprende además tratamiento con carbono activado. En una realización, el aislamiento del éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5 -colan-24-oico (1) sin el tratamiento con carbono activado proporciona un mayor rendimiento. En una realización, la reacción del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico (KLCA) con CH3OH y H2SO4 se lleva a cabo en metanol. En una realización, la solución básica es una solución acuosa de NaOH. En una realización, el valor de pH es de aproximadamente 7,0 a aproximadamente 7,5.
En una realización, el alcohol metílico actúa como reactivo de metilación así como el disolvente de reacción. En una realización, la solución que contiene el producto se trata con carbono activado durante aproximadamente 30 minutos y se filtra para eliminar los sólidos de carbono. En una realización, la solución que contiene el producto no se trata con carbono activado. Para precipitar el producto, se añaden agua a aproximadamente 5 °C a aproximadamente 20 °C y material de siembra. En otra realización, el agua está a aproximadamente 10 °C a aproximadamente 15 °C. En una realización, el producto se aísla con una centrífuga y se lava con una metanol y agua. En una realización, el contenido de agua del material húmedo se cuantifica mediante Karl Fischer (KF). En una realización, el material se seca en un secador de tambor antes de usar en la siguiente etapa. En una realización, el material no se seca antes de usar en la siguiente etapa.
Etapa 2 La etapa 2 es la reacción del áster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5P-colan-24-oico (1) con Li[N(CH(CFl3)2)2] y Si(CFl3)3CI para formar áster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5 -col-6-en-24-oico (3), En una realización, la etapa 2 se lleva a cabo en un disolvente aprótico polar a una temperatura a aproximadamente -10 °C a aproximadamente -30 °C. En una realización, el disolvente aprótico polar es tetrahidrofurano. En una realización, la temperatura es de aproximadamente -20 °C a aproximadamente -25 °C. En una realización, la reacción del áster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto^-colan-24-oico (1) con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI se agita durante aproximadamente 2 horas.
En una realización, el compuesto 1 se carga en el reactor en condiciones inertes. En otra realización, el agua y el metanol residuales se eliminan mediante destilación azeotrópica repetida a aproximadamente 65 °C y a presión normal. En otra realización, se añade THF al residuo según sea necesario y la destilación se repite aproximadamente 4 veces. En otra realización, la destilación se repite aproximadamente 3 veces, aproximadamente 2 veces, o aproximadamente 1 vez. En una realización, la solución restante que contiene el producto tiene un contenido final de agua £ 0,05 % (titulación de Karl Fischer) El agua puede hidrolizar clorotrimetilsilano, que se añade después en esta etapa. En una realización, la solución del producto se enfría previamente hasta aproximadamente -10 °C a aproximadamente -30 °C y después se añade clorotrimetilsilano. En otra realización, la solución se enfría previamente hasta hasta aproximadamente -20 °C a aproximadamente -25 °C. En una realización, en un reactor separado se añaden una base fuerte y THF y se enfrían hasta aproximadamente -10 °C a aproximadamente -30 °C. En una realización, la base fuerte es diisopropilamida de litio. En otra realización, el reactor es inerte, (p. ej., en atmósfera de nitrógeno o de argón. En otra realización, la solución de la base y THF se enfría hasta aproximadamente -20 °C a aproximadamente -25 °C. En una realización, la solución enfriada seca de éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto^-colan-24-oico, THF, y clorotrimetilsilano se carga en la solución básica de aproximadamente -10 °C a aproximadamente -30 °C. En otra realización, la temperatura es de aproximadamente -20 °C a aproximadamente -25 °C. En una realización, la mezcla de reacción se agita durante 2 horas. En una realización, para el procesamiento, la mezcla de reacción se añade a una solución ácida previamente enfriada. En otra realización, la solución ácida es una solución acuosa de ácido cítrico. En una realización, tras la adición, la fase acuosa se separa y se desecha. En una realización, el disolvente se elimina de la fase orgánica, mediante destilación a vacío a aproximadamente 50 °C. En una realización, el residuo aislado es ester metílico del ácido 3a, 7a -ditrimet¡lsililox¡-5p-coI-6-en-24-oico (3) se usa "como tal" en la siguiente etapa. Alternativamente, el compuesto 3 se puede purificar antes de la etapa 3.
Etapa 3 La etapa 3 es la reacción del éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililox¡-5p-col-6-en-24-oico (3) con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4). En una realización, la etapa 3 se lleva a cabo en un disolvente aprótico polar a una temperatura de aproximadamente -50 °C a aproximadamente -70 °C en presencia de BF3. En una realización, el disolvente aprótico polar es diclorometano. En una realización, el BF3 es una solución al 16 % en peso en acetonitrilo. En una realización, la temperatura es de aproximadamente -60 °C a aproximadamente -65 °C.
En una realización, el compuesto 3 en un disolvente aprótico apolar se carga en un reactor inerte. En otra realización, el disolvente aprótico apolar es el disolvente residual de la etapa anterior (p. ej., THF). En una realización, se añade THF para ayudar a eliminar por destilación de agua residual y diisopropilamina. A una temperatura máxima de aproximadamente 50 °C, las cantidades residuales del disolvente aprótico polar se eliminan mediante destilación al vacío. El contenido de agua en el residuo que contiene el compuesto 3 está limitado a £ 0,5 % (titulación de Karl Fischer). El residuo que contiene el compuesto 3 se disuelve despues en un disolvente aprótico polar y se enfría previamente hasta aproximadamente -50 °C a aproximadamente -70 °C. El disolvente aprótico polar es diclorometano. En otra realización, el residuo que contiene el compuesto 3 en el disolvente aprótico polar se enfría previamente hasta aproximadamente -50 °C a aproximadamente -65 °C. Se añade acetaldehído (CH3CHO) Un disolvente aprótico polar y un complejo solvatado de trifluoruro de boro ( (BF3) se cargan en un reactor separado y después se enfría hasta aproximadamente -50 °C a aproximadamente -70 °C. En otra realización, el disolvente aprótico polar es diclorometano. En otra realización, El complejo solvatado de trifluoruro de boro es un complejo de acetonitrilo trifluoruro de boro. La temperatura de la solución de BF3 es de aproximadamente -60 °C a aproximadamente -65 °C. La solución que contiene el compuesto 3 y acetaldehído se añade a la solución de BF3 a aproximadamente -60 °C a aproximadamente -65 °C. En otra realización, la solución que contiene el compuesto 3 y acetaldehído es seca. En una realización, La mezcla de reacción se agita durante dos horas a aproximadamente -60 °C a aproximadamente -65 °C, se calienta hasta aproximadamente 23 °C a aproximadamente 28 °C, se agita durante aproximadamente otras 2 horas y se enfría hasta aproximadamente 2 °C a aproximadamente m10 °C para la hidrólisis/procesamiento. En una realización, el tiempo total para la adición y agitación es de apo 4 horas. En una realización, para el procesamiento, la solución enfriada del reactor se añade a una solución básica acuosa previamente enfriada. En otra realización, la solución básica acuosa es aproximadamente un 50 % en peso de hidróxido sódico (NaOH; sosa cáustica). En una realización, las fases se separan y la capa orgánica (inferior) se transfiere a un reactor separado. En una realización, el disolvente se elimina de la capa orgánica mediante destilación a no más de (NMT) 50 °C lo más posible. En una realización, el residuo comprende éster metílico del ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico (4) y algo de acetonitrilo y diclorometano restante. Se entiende que la etapa 4 puede formar éster metílico del ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (4A). El producto de la etapa 3 se pasa directamente a la etapa 4.
Etapa 4 La etapa 4 es la reacción del éster metílico de ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4) con NaOH para formar el ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5). En una realización, antes de la etapa 4, el residuo de la etapa 3 se calienta hasta aproximadamente 45 °C a aproximadamente 60 °C para eliminar las cantidades residuales del disolvente. En una realización, la temperatura es de aproximadamente 49 °C a aproximadamente 55 °C. En una realización, la reacción de hidrólisis de éster que hace reaccionar el éster metílico de ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4) con NaOH se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C en metanol, agua, y una solución de NaOH.
En una realización, la reacción de ester metílico de ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4) se carga en un reactor. En otra realización, el reactor es inerte, (p. ej., en atmósfera de nitrógeno o de argón. A una temperatura de NMD 50 °C, las cantidades residuales del disolvente se eliminan mediante destilación al vacío. En una realización, el residuo se calienta hasta aproximadamente 45 °C a aproximadamente 60 °C. En otra realización, el residuo se calienta hasta aproximadamente 49 °C a aproximadamente 55 °C. En otra realización, el residuo de la etapa 3 (compuesto 4) se disuelve en metanol y agua y una solución básica acuosa. En otra realización, la solución básica acuosa es aproximadamente un 50 % en peso de hidróxido sódico (NaOH; sosa cáustica). La reacción de hidrólisis del éster de la etapa 4 se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C y se calienta hasta que la reacción de hidrólisis es completa. En una realización, la hidrólisis del éster se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. El pH de la mezcla de reacción se comprobó para verificar que es > 12. Si el pH es < 12, se añade NaOH adicional. La mezcla de reacción se diluye con agua y la temperatura se ajusta a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 35 °C. En otro aspecto, la mezcla de reacción se diluye con agua y la temperatura se ajusta a aproximadamente 25 °C a aproximadamente 35 °C. En una realización, para el procesamiento, las fases se separan y la capa acuosa inferior se transfiere a un reactor separado y la capa orgánica se descarta. El compuesto 5 está en la fase acuosa. En una realización, se añaden a la fase acuosa que contiene el compuesto 5 acetato de etilo y un ácido con agitación intensiva a la capa acuosa. En otra realización, el ácido es una solución acuosa de ácido cítrico. En una realización, las fases se separan y la capa acuosa inferior se descarta. El compuesto 5 está en la capa orgánica. En una realización, el acetato de etilo se elimina mediante destilación de la capa orgánica y se sustituye por acetato de etilo. En una realización, la destilación se repite hasta que el contenido de agua del destilado es NMD 1 % o hasta que se alcanza un punto de ebullición constante. En una realización, la suspensión se enfría hasta aproximadamente 10 °C a aproximadamente 30 °C y se aísla y lava con acetato de etilo. En otra realización, la suspensión resultante que contiene el compuesto 5 se enfría hasta aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. En una realización, el secado del producto resultante se realiza al vacío (p. ej., secado con tambor) a aproximadamente 60 °C.
En una realización, el ácido E-3a-hidroxi-6-etil¡den-7-ceto-53-colan-24-oico (5) bruto se cristaliza usando etanol. En una realización, en el reactor se cargan etanol y el compuesto 5 bruto. En otra realización, el reactor es inerte. En una realización, para disolver el compuesto 5 bruto la mezcla se calienta hasta reflujo. En una realización, la mezcla se enfría e una rampa de enfriamiento controlado a aproximadamente 15 °C a aproximadamente 20 °C. En una realización, el compuesto 5 cristalino se aísla usando una centrífuga y después se lava con acetato de etilo. En una realización, el secado del compuesto 5 cristalino se realiza al vacío (p. ej., secador con tambor) y a aproximadamente 60 °C. Se puede tomar una mezcla para medir el ensayo, la pureza, y la humedad del compuesto 5 purificado. En una realización, el compuesto 5 purificado contiene los isómeros E y Z del ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-o¡co En una realización, la proporción entre E y Z es de aproximadamente 99:1, aproximadamente 98:2, aproximadamente 95: 5, aproximadamente 90:10, aproximadamente 85:15, aproximadamente 80:20, aproximadamente 75:25, aproximadamente 70:30, aproximadamente 65:35, aproximadamente 60:40, aproximadamente 55:45, o de aproximadamente 50:50. Vease el Ejemplo 2 los detalles completos respecto a la identificación y caracterización del compuesto 5 purificado.
La etapa 4 también se puede llevar a cabo a partir de un compuesto que es una mezcla de isómeros E/Z. Por ejemplo, la etapa 4 es la reacción del éster metílico de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (4A) con NaOH para formar el ácido E/z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A). En una realización, antes de la etapa 4, el residuo de la etapa 3 se calienta hasta aproximadamente 45 °C a aproximadamente 60 °C para eliminar las cantidades residuales del disolvente. En una realización, la temperatura es de aproximadamente 49 °C a aproximadamente 55 °C. En una realización, la reacción de hidrólisis de éster implica hace reaccionar el éster metílico de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico (4A) con NaOH se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C en metanol, agua, y una solución de NaOH. En una realización, la solución de NaOH es una solución acuosa al 50 % en peso.
En una realización, la reacción de éster metílico de ácido E/Z-3a-hidrox¡-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (4A) se carga en un reactor. En otra realización, el reactor es inerte, (p. ej., en atmósfera de nitrógeno o de argón. A una temperatura de NMD 50 °C, las cantidades residuales del disolvente se eliminan mediante destilación ál vacío. En una realización, el residuo se calienta hasta aproximadamente 45 °C a aproximadamente 60 °C. En una realización, la temperatura es de aproximadamente 49 °C a aproximadamente 55 °C. En una realización, el residuo de la etapa 3 (compuesto 4A) se disuelve en metanol y agua y una solución básica acuosa. En otra realización, la solución básica acuosa es aproximadamente un 50 % en peso de hidróxido sódico (NaOH; sosa cáustica). La reacción de hidrólisis del ester de la etapa 4 se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C y se agita hasta que la reacción de hidrólisis es completa. En una realización, la hidrólisis del éster se lleva a cabo a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. El pH de la mezcla de reacción se comprobó para verificar que es > 12. Si el pH es < 12, se añade NaOH adicional la mezcla de reacción se diluye con agua y la temperatura se ajusta a aproximadamente 25 °C a aproximadamente 35 °C. En una realización, para el procesamiento, las fases se separan y la capa acuosa inferior se transfiere a un reactor separado y la capa orgánica se descarta. El compuesto 5A está en la fase acuosa. En una realización, se añaden a la fase acuosa que contiene el compuesto 5A acetato de etilo y un ácido con agitación intensiva a la capa acuosa. En otra realización, el ácido es una solución acuosa de ácido cítrico. En una realización, las fases se separan y la capa acuosa inferior se descarta. El compuesto 5A está en la capa orgánica. En una realización, el acetato de etilo se elimina mediante destilación de la capa orgánica y se sustituye por acetato de etilo. En una realización, la destilación se repite hasta que el contenido de agua del destilado es NMD 1 % o hasta que se alcanza un punto de ebullición constante. En una realización, la suspensión se enfría hasta aproximadamente 10 °C a aproximadamente 30 °C y se aísla y lava con acetato de etilo. En otra realización, la suspensión resultante que contiene el compuesto 5A se enfría hasta aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. En una realización, el secado del producto resultante se realiza al vacío (p. ej., (secador de tambor) a aproximadamente 60 °C. El compuesto 5A se puede pasar a la Etapa 5 sin purificar.
En una realización, el ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico (5A) bruto se cristaliza usando etanol. En una realización, en el reactor se cargan etanol y el compuesto 5A bruto. En otra realización, el reactor es inerte. En una realización, para disolver el compuesto 5A bruto la mezcla se calienta hasta reflujo. En una realización, la mezcla se enfría e una rampa de enfriamiento controlado a aproximadamente 15 °C a aproximadamente 20 °C. En una realización, el compuesto 5A cristalino se aísla usando una centrífuga y despues se lava con acetato de etilo. En una realización, el secado del compuesto 5A cristalino se realiza al vacío (p. ej., secador con tambor) y a aproximadamente 60 °C. En una realización, el producto cristalino aislado de la etapa 4 es el compuesto 5.
Etapa alternativa 4 El compuesto 5 se puede preparar de acuerdo con un método alternativo. En una realización, el compuesto 4 se carga en el reactor inertes. A aproximadamente 50 °C (máximo), las cantidades residuales del disolvente (p. ej., acetonitrilo, diclorometano) se pueden eliminar mediante destilación a vacío. El residuo se disuelve en metanol y se enfría. Se añaden agua corriente y sosa cáustica (50 % en peso de NaOH). En una realización, la mezcla de reacción se agita durante aproximadamente cuatro horas a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. La solución se diluye con agua corriente y se añade tolueno. Despues de agitar, las fases se separan y la capa acuosa inferior se transfiere al reactor inerte. La capa orgánica se desecha. Durante agitación intensiva se añaden a la capa acuosa éster etílico de ácido acético y una solución de ácido cítrico. Las fases se separan y la capa acuosa inferior se descarta. La capa orgánica se transfiere al reactor inerte. De la capa orgánica se elimina por destilación el éster etílico del ácido acético y se sustituye con éster etílico del ácido acético. En una realización, esta operación se repite hasta que el contenido de agua del destilado no es superior a aproximadamente 1 % o hasta que se alcanza un punto de ebullición constante. La presente suspensión se enfría hasta aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. y el compuesto 5 se aísla y se lava con éster etílico de ácido acético con la centrífuga inerte. El secado se realiza en el secador de tambor al vacío y a aproximadamente 60 °C.
Esta etapa 4 alternativa también se puede llevar a cabo a partir de un compuesto que es una mezcla de isómeros E/Z. En una realización, el compuesto 4A se carga en el reactor inerte. A aproximadamente 50 °C (máximo), las cantidades residuales del disolvente (p. ej acetonitrilo, diclorometano) se pueden eliminar mediante destilación a vacío. El residuo se disuelve en metanol y se enfría. Se añaden agua corriente y se añade sosa cáustica (50 % en peso de NaOH). En una realización, la mezcla de reacción se agita durante aproximadamente cuatro horas a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. La solución se diluye con agua corriente y se añade tolueno. Despues de agitar, las fases se separan y la capa acuosa inferior se transfiere al reactor inerte. La capa orgánica se desecha. Durante agitación intensiva se añaden a la capa acuosa éster etílico de ácido acético y una solución de ácido cítrico. Las fases se separan y la capa acuosa inferior se descarta. La capa orgánica se transfiere al reactor inerte. De la capa orgánica se elimina por destilación el éster etílico del ácido acético y se sustituye con éster etílico del ácido acético. En una realización, esta operación se repite hasta que el contenido de agua del destilado no es superior a aproximadamente 1 % o hasta que se alcanza un punto de ebullición constante. La presente suspensión se enfría hasta 20 °C a 25 °C y el compuesto 5A se aísla y se lava con éster etílico de ácido acético con la centrífuga inerte. El secado se realiza en el secador de tambor al vacío y a aproximadamente 60 °C.
Etapa 5 La etapa 5 es la reacción de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6), La etapa 5 se puede llevar a cabo en una fase (hidrogenación e isomerización juntos) o en dos fases (hidrogenación seguido de isomerización). En una realización, la etapa 5 se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 90 °C a aproximadamente 110 °C y a una presión a aproximadamente 4 a aproximadamente 5 bares. En una realización, durante el procesamiento, la fase orgánica de la mezcla de reacción se trata con carbono activado. En una realización, la presión es de aproximadamente 4,5 a 5,5 bares. En otra realización, la presión es de aproximadamente 5 bares. En una realización, la mezcla de reacción de hidrogenación se deja agitar durante 1 hora. En una realización, la reacción de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno se calienta hasta aproximadamente 100 °C y se agita durante aproximadamente 2 horas a aproximadamente 5 horas. En una realización, la reacción de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno se calienta hasta aproximadamente 100 °C y se agita durante aproximadamente 3 horas.
En una realización, la reacción de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (5) con Pd/C y gas hidrógeno se calienta en presencia de una solución básica. En una realización, la solución básica acuosa una solución de hidróxido sódico (NaOH; sosa cáustica). Tras la reacción de hidrogenación, la mezcla de reacción se calienta hasta aproximadamente 100 °C (para llevar a cabo la isomerización de la posición C-6 de configuración beta a configuración alfa) y despues se enfría hasta aproximadamente 40 °C a aproximadamente 50 °C. Para el procesamiento, el Pd/C se elimina mediante filtración. En una realización, al filtrado se añaden acetato de n-butilo y un ácido. En otra realización, el ácido es ácido clorhídrico (HCI). La fase acuosa se separa y se descarta después de comprobar el valor de pH - para garantizar que se ácida. La fase orgánica que contiene el producto se trata con carbono activado. En una realización, el carbono activado se elimina mediante filtración y el filtrado resultante que contiene el producto se condensa mediante destilación y la suspensión resultante se enfría hasta aproximadamente 10 °C a aproximadamente 30 °C. En otra realización, la suspensión se enfría hasta aproximadamente 15 °C a aproximadamente 20 °C. La suspensión que contiene el compuesto 6 se aísla y se lava con acetato de etilo. El compuesto 6 se filtró usando un filtro de presión. En una realización, el secado se realiza en el filtro de presión al vacío y a aproximadamente 80 °C.
En una realización en la etapa 5, la solución de ácido E-3a-hidrox¡-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5), agua, NaOH (p.ej. 50 % en peso.), y Pd/C se mezclan a aproximadamente 5 bares de gas H2 y a una temperatura a aproximadamente 100 °C a aproximadamente105 °C hasta que cesa la captación de H2. La mezcla de reacción se enfría hasta aproximadamente 40 °C a aproximadamente 50 °C y el Pd/C se elimina por filtración. Después, a la solución que contiene el compuesto 6 se añade acetato de n-butilo y HCI. En una realización, la fase acuosa se separa y se desecha. La fase orgánica que contiene el compuesto 6 se trata con carbono activado. El carbono se elimina mediante filtración y el filtrado se pasa a otro reactor, donde se reduce mediante destilación y, después, la suspensión se enfría hasta aproximadamente 5 °C a aproximadamente 20 °C. En una realización, el compuesto 6 se aísla mediante filtración y el filtrado se seca en el filtro de presión al vacío a aproximadamente 80 °C.
La etapa 5 también se puede llevar a cabo a partir de un compuesto que es una mezcla de isómeros E/Z. Por ejemplo, la etapa 5 es la reacción de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etil¡den-7-ceto^-colan-24-o¡co (5A) con Pd/C y gas hidrógeno y calentar para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico (6), La etapa 5 se puede llevar a cabo en una fase (hidrogenación e isomerización juntos) o en dos fases (hidrogenación seguido de isomerización). En un aspecto, la etapa 5 se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 90 °C a aproximadamente 110 °C y a una presión a aproximadamente 4 a aproximadamente 5 bares. En una realización, durante el procesamiento, la fase orgánica de la mezcla de reacción se trata con carbono activado. En una realización, la presión es de aproximadamente 4,5 a 5,5 bares. En otra realización, la presión es de aproximadamente 5 bares. En una realización, la mezcla de reacción de hidrogenación se deja agitar durante 1 hora. En una realización, la reacción de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno se calienta hasta aproximadamente 100 °C y se agita durante aproximadamente 2 horas a aproximadamente 5 horas. En una realización, la reacción de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto^-colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno se calienta hasta aproximadamente 100 °C y se agita durante aproximadamente 3 horas.
En una realización, la reacción de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno se lleva a cabo en presencia de una solución básica. En una realización, la solución básica acuosa una solución de hidróxido sódico (NaOH; sosa cáustica). Tras la reacción de hidrogenación, la mezcla de reacción se calienta hasta aproximadamente 100 °C (para llevar a cabo la isomerización de la posición C-6 de configuración beta a configuración alfa) y despues se enfría hasta aproximadamente 40 °C a aproximadamente 50 °C. Para el procesamiento, el Pd/C se elimina mediante filtración. En una realización, al filtrado se añaden acetato de n-butilo y un ácido. En otra realización, el ácido es ácido clorhídrico (HCI). La fase acuosa se separa y se descarta despues de comprobar el valor de pH - para garantizar que sea ácida. La fase orgánica que contiene el producto se trata con carbono activado. En una realización, el carbono activado se elimina mediante filtración y el filtrado resultante que contiene el producto se condensa mediante destilación y la suspensión resultante se enfría hasta aproximadamente 10 °C a aproximadamente 30 °C. En otra realización, la suspensión se enfría hasta aproximadamente 15 °C a aproximadamente 20 °C. La suspensión que contiene el compuesto 6 se aísla y se lava con acetato de etilo. El compuesto 6 se filtró usando un filtro de presión. En una realización, el secado se realiza en el filtro de presión al vacío y a aproximadamente 80 °C.
En una realización en la etapa 5, el ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etilideno-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) agua, solución de NaOH (p.ej. 50 % en peso.), y Pd/C se mezclan a aproximadamente 5 bares de gas H2 y a una temperatura a aproximadamente 100 °C a aproximadamente105 °C hasta que cesa la captación de H2. La mezcla de reacción se enfría hasta aproximadamente 40 °C a aproximadamente 50 °C y el Pd/C se elimina por filtración. Después, a la solución que contiene el compuesto 6 se añade acetato de n-butilo y HCI. En una realización, la fase acuosa se separa y se desecha. La fase orgánica que contiene el compuesto 6 se trata con carbono activado. El carbono se elimina mediante filtración y el filtrado se pasa a otro reactor, donde se reduce mediante destilación y, después, la suspensión se enfría hasta aproximadamente 5 °C a aproximadamente 20 °C. En una realización, el compuesto 6 se aísla mediante filtración y el filtrado se seca en el filtro de presión al vacío a aproximadamente 80 °C.
En otra realización, las reacciones de hidrogenación/isomerización descritas anteriormente para preparar el compuesto 6 se llevan a cabo en dos fases (a partir del compuesto 5 o del compuesto 5A). En primer lugar, la hidrogenación se lleva a cabo a aproximadamente 4 a 5 bares y, en segundo lugar, la mezcla de reacción se calienta hasta aproximadamente 20 °C a aproximadamente 40 °C. El calentamiento de la mezcla de reacción isomeriza el grupo etilo en la posición 6 en la configuración alfa deseada. La mezcla de reacción se calienta hasta que la isomerización se ha completado.
Etapa 6 La etapa 6 es la reacción de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico (6) con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino. En una realización, la etapa 6 se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 85 °C a aproximadamente 110 °C en una solución acuosa básica. En una realización, la temperatura es de aproximadamente 90 °C a aproximadamente 95 °C. En una realización, la solución acuosa básica es una solución acuosa de NaOH. En una realización, la solución acuosa básica es una mezcla del 50 % en peso de solución de NaOH y agua. En una realización, la mezcla de reacción del compuesto 6 y NaBH4 se agitó durante aproximadamente 3 horas a aproximadamente 5 horas. En otra realización, la mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente 4 horas.
Para el procesamiento, una vez completada la reacción, la mezcla se enfría hasta aproximadamente 80 °C y se transfiere a un reactor enfriada. En una realización, a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C, se añaden acetato de n-butilo y un ácido. En una realización, la temperatura es de aproximadamente 40 °C a aproximadamente 45 °C. En otra realización, el ácido es ácido cítrico. La fase acuosa se separa y se descarta despues de comprobar el valor de pH - para garantizar que sea ácida. La fase orgánica que contiene el producto se concentra mediante destilación. En una realización, al residuo se añade acetato de n-butilo y se elimina por destilación de nuevo. En una realización, al residuo se añade de nuevo acetato de n-butilo y después se enfría lentamente. En otra realización, el residuo se siembra a aproximadamente 50 °C. En otra realización, una vez que se ha producido la cristalización, la mezcla se calienta a 52 °C y después se enfría lentamente hasta aproximadamente 15 °C a aproximadamente 20 °C. En otra realización, el residuo se enfría hasta aproximadamente 15 °C a aproximadamente 20 °C. En una realización, el ácido obeticólico resultante se lava con acetato de n-butilo. En una realización, el ácido obeticólico se aísla y se lava con acetato de n-butilo (p. ej., en un filtro de presión). En otra realización, el filtro de presión es inerte. El producto cristalino se seca al vacío a aproximadamente 60 °C. En una realización, el ácido obeticólico cristalino resultante se aísla del disolvente orgánico (p. ej., heptano). Véase en el Ejemplo 3 los detalles completos respecto a la identificación y caracterización de la forma C del ácido obeticólico.
Etapa 7 La Etapa 7 es la conversión de la forma C del ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico. En una realización, la etapa 7 comprende la etapa de disolver la forma C de ácido obeticólico cristalino en solución de NaOH acuoso y añadir HCI.
En una realización, el ácido obeticólico cristalino se disuelve en agua y solución de sosa cáustica (50 % en peso) a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 50 °C. En una realización la temperatura es de aproximadamente 30 °C a aproximadamente 40 °C. En una realización, el ácido obeticólico es la forma C. En una realización la solución resultante de la forma C de ácido obeticólico cristalino se añade al ácido diluido a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 50 °C. En otra realización, la temperatura es de aproximadamente 30 °C a aproximadamente 40 °C. En otra realización, el ácido es ácido clorhídrico (p. ej., 37 %). En una realización, la solución de ácido clorhídrico al 37 % se diluye en agua a menos de aproximadamente 1 % en volumen. En una realización, la solución de ácido clorhídrico al 37 % se diluye en agua hasta aproximadamente 0,7 % en volumen. En una realización, la suspensión del producto en el ácido diluido se agita durante aproximadamente 30 minutos a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 50 °C. En otra realización, la temperatura es de aproximadamente 30 °C a aproximadamente 40 °C. En una realización, la forma 1 de ácido obeticólico se aísla y se lava con agua (p. ej., en el filtro de presión) a NMD aproximadamente 20 °C. En una realización, la forma 1 de ácido obeticólico se aísla y se lava con agua (p. ej., en el filtro de presión) a NMD aproximadamente 20 °C. En otra realización, el filtro de presión es inerte. El producto se seca en el filtro de presión al vacío a una temperatura de NMT, aproximadamente 50 °C.
El procedimiento de la presente solicitud usa un intermedio cristalino en la preparación de la forma 1 de ácido obeticólico, que inesperadamente condujo a mejoras significativas en la preparación global y la pureza del producto final. Específicamente, la etapa 6 de la síntesis produce una nueva forma cristalina de ácido obeticólico. La producción de esta forma cristalina conduce a la forma 1 del ácido obeticólico sustancialmente pura.
El proceso de la presente solicitud es una mejora con respecto a los procesos divulgados en la teenica anterior. La preparación de ácido obeticólico se divulga en la publicación de EE.UU. N° 2009/0062526 A1 (en el presente documento denominado "publicación 526"), la patente de EE.UU. N° 7.138.390 (en el presente documento denominada "‘patente 390"), y el documento WO 2006/122977 (en el presente documento denominado "‘solicitud 977").
El proceso para preparar ácido obeticólico en la "patente 390 (denominada en lo sucesivo en el presente documento "proceso 390") se representa en el Esquema 3 (R es etilo).
Esquema 3 Aunque este proceso comprende algunas etapas, presenta una serie de inconvenientes. En todas las etapas, los productos de reacción se purifican en una columna cromatográfica, es decir un método de separación muy caro que no se puede usar a escala industrial. Por otra parte, el rendimiento de la reacción de la etapa 2 es extremadamente bajo (12-13 %) con una disminución considerable del rendimiento global, que es inferior al 3,5 %. Este proceso también usa hexametilenfosfonamida como reactante, que es un agente carcinogénico conocido.
El proceso para preparar de ácido obeticólico en la solicitud '977 se representa en la Esquema 4.
Esquema 4 O - 4A 1 etapa 4 acetaldehído/trifluorurc de boro eterato de dietilo etapa 5 1) MaOH 2SH’ etapa 6 I tyeat | OH· 4 1) calor 2)H’ tapa B o ácido obeticólico bruto etapa 9 purificación etapa ta puriícaton ácido obeticólico bruto ácido obeticólico purificado El proceso '977 para preparar ácido obeticólico es un proceso sintético de 8 etapas que incluye una etapa de purificación (etapa 7) seguido de 2 etapas de purificación adicionales. Existe un número significativo de diferencias entre el proceso '977 y el proceso de la presente solicitud. En la Tabla A siguiente se describen al menos algunas de las diferencias entre los dos procesos: Tabla A: Diferencias entre el proceso '977 y el proceso de la solicitud Las diferencias en el proceso de la presente solicitud en comparación con el proceso '977 tiene como resultado mejoras importantes en el proceso, incluyendo mejoras relacionadas con la optimización de la escalada, seguridad, así como la pureza y mejoras en el proceso global. La pureza de ácido obeticólico producido mediante los procesos de la presente solicitud es sustancialmente pura. Específicamente, el ácido obeticólico producido por los procesos de la presente solicitud es sustancialmente más puro que el ácido obeticólico producido mediante los procesos en la teenica anterior, incluyendo el proceso '390 y el proceso '977. Por ejemplo, una comparación de los resultados presentados en el Certificado de Análisis del ácido obeticólico producido por un proceso de la presente solicitud y ácido obeticólico producido por el proceso '977 se muestran en la Tabla B siguiente. Los porcentajes de las impurezas se determinaron usando métodos de HPLC.
Tabla B: Comparación de las impurezas del ácido obeticólico generadas a partir del proceso de la solicitud y el proceso '977 La impureza 1 es ácido 6-etilursodesoxicólico.
La impureza 2 es ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico.
La impureza 3 es ácido 6P-etilchenodesoxicólico.
La impureza 4 es ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden-5p-colan-24-oico.
La impureza 5 es ácido chenodesoxicólico.
La impureza 6 es ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5P-colan-24-oico (dímero 6ECDCA).
NMD hace referencia a "No mas Que".
El ácido obeticólico cristalino como un intermedio sintetico El ácido obeticólico se está desarrollando actualmente como ingrediente farmacéutico activo como un sólido no cristalino. Con el fin de facilitar el desarrollo de ácido obeticólico, se llevó a cabo un estudio inicial de cristalización y polimorfismo para determinar si las formas cristalinas eran accesibles y, si lo eran, su eran adecuadas para desarrollar. Después de un cribado de solubilidad preliminar diseñado para dar una mejor comprensión del comportamiento del material en diversos disolventes, pareció que el material tenía una tendencia a formar geles y posiblemente podría cristalizar. Después se llevó a cabo un extenso cribado de polimorfos, exponiendo el material a una gran gama de disolventes y condiciones de cristalización con el fin de identificar y caracterizar tantos polimorfos relevantes como sea posible. Durante este cribado se encontraron cinco formas sólidas diferente.
Tres formas (A, C, y D) de ácido obeticólico se mezclaron hidratos/solvatos que contienen 0,25 mol eq. de agua y cantidades variables de una serie de disolventes orgánicos. Con calentamiento, estos sólidos perdieron cristalinidad y el disolvente al mismo tiempo y, desgraciadamente, estas formas solvatadas no eran adecuadas para desarrollo posterior como ingrediente farmaceutico debido a sus bajas temperaturas de fusión bajas y un elevado contenido en disolvente. También se observa que existen formas "inadecuadas" similares de este tipo. Por ejemplo, en experimentos posteriores se encontró una forma solvatada de bajo punto de fusión, así como cristales sencillos de otra forma, que se demostró que era un solvato monohidrato/anisol mediante SCXRD (difracción de rayos X de cristal único).
Las dos formas restantes tenían un punto de fusión más alto y eran potencialmente más prometedoras, pero una de ellas (forma G) no se pudo reproducir a escala ni repetir a pesar de los muchos intentos. La dificultad para producir esta forma individualmente la convierte en inadecuada para el desarrollo. La forma F no solvatada restante se preparó de forma reproducible, pero requirió procedimientos de recristalización extensos y el uso de nitrometano, que es un disolvente tóxico y puede detonar su se sensibiliza con aminas, álcalis, ácidos fuertes o a temperaturas altas o compresión adiabática. Los problemas sobre los niveles residuales de nitrometano estimaron que la forma F también era inadecuada para el desarrollo.
Los resultados globales del estudio inicial de cristalización y polimorfo revelaron que el material podría formar varias formas de materiales cristalinos, pero ninguno de los materiales o formas cristalinas se consideraron adecuados para el desarrollo.
No fue hasta mucho despues que se descubrió la importancia de producir ácido obeticólico cristalino como intermedio en la penúltima etapa del proceso de la presente solicitud. El ácido obeticólico cristalino podría aislarse fácilmente a gran escala usando el proceso de la solicitud. Este ácido obeticólico cristalino se determinó que era consistente con la forma C del estudio inicial de cristalización y polimorfo. La formación, facilidad de aislamiento y el ácido obeticólico cristalino altamente puro producido como intermedio sintético en la etapa 7 del proceso de la presente solicitud es, de hecho, crucial para la preparación del ácido obeticólico sustancialmente puro.
En una realización, La presente invención se refiere a una forma C cristalina de ácido obeticólico caracterizada por un patrón de difracción de rayos X que incluye picos característicos a aproximadamente 4,2. 6,4, 9,5, 12,5, y 16,7 grados 2-teta. En una realización, el patrón de difracción de rayos X incluye picos característicos a aproximadamente 4,26,4, 9,5, 12,5, 12,6, 15,5, 15,8, 16,0, 16,7 y 19,0 grados 2-teta. En una realización, el patrón de difracción de rayos X incluye picos característicos a aproximadamente 4,2 6,4, 8,3, 9,5, 11,1, 12,2, 12,5, 12,6, 15,5, 15,8, 16,0, 16,3, 16,7, 18,6 y 19,0 grados 2-teta. En una realización, el patrón de difracción de rayos X incluye picos característicos a aproximadamente 18,6, 18,8, 19,0, 20,5 y 20,9 grados 2-teta. En una realización, la presente invención se refiere a una forma C del ácido obeticólico cristalino caracterizada por un patrón de difracción de rayos X sustancialmente similar al expuesto en la Figura 5. En una realización, el patrón de difracción de rayos X se recoge en un difractómetro usando radiación Cu Ka (40 kV, 40 mA). En una realización, el patrón de difracción de rayos X incluye picos característicos a aproximadamente 12,0 a aproximadamente 12,8 y de aproximadamente 15,4 a aproximadamente 21,0.
En una realización, la presente invención se refiere a una forma C cristalina de ácido obeticólico cristalino caracterizada por un termograma de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que tiene un valor de endotermia en aproximadamente 98±2 °C, medido mediante un instrumento Mettler DSC 823e. En una realización, el termograma de calorimetría de barrido diferencial (DSC) tiene un valor de endotermia en aproximadamente 98±2 °C, medido mediante un instrumento Mettler DSC 823e.
En una realización, la presente invención se refiere a un ácido obeticólico cristalino, en el que dicho ácido obeticólico cristalino es la forma C y tiene una pureza superior a aproximadamente 90 %. En una realización, la pureza de dicha forma C de ácido obeticólico cristalino se determina mediante HPLC. En una realización, la presente invención se refiere a una forma C de ácido obeticólico cristalino, o una sal, solvato o conjugado de aminoácido farmacéuticamente aceptable del mismo, En una realización, el solvato es un hidrato. En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 92 %. En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 94 %. En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 96 %. En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 98 %. En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 99 %.
En una realización, la presente invención se refiere a un ácido obeticólico cristalino, en el que dicho ácido obeticólico cristalino es la forma C y tiene una pureza superior a aproximadamente 90 %. En una realización, la pureza de dicha forma C de ácido obeticólico cristalino se determina mediante HPLC y/u otros procedimientos analíticos conocidos en la teenica. En una realización, la presente invención se refiere a una forma C de ácido obeticólico cristalino, o una sal, solvato o conjugado de aminoácido farmacéuticamente aceptable del mismo, En una realización, el solvato es un hidrato. En una realización, la potencia es superior a aproximadamente 92 %. En una realización, la potencia es superior a aproximadamente 94 %. En una realización, la potencia es superior a aproximadamente 96 %. En una realización, la potencia es superior a aproximadamente 98 %. En una realización, la potencia es superior a aproximadamente 99 %.
En una realización, la presente invención se refiere a una forma C de ácido obeticólico cristalino que contiene un total de menos de aproximadamente 4 % de una o más impurezas seleccionadas de ácido 6-etilursodesoxicólico, ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico, ácido 6 -et¡lcenodesoxicólico, ácido 3a, 7a-dihidroxi-6-etiliden-5 -colan-24-oico, ácido cenodesoxicólico y ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-53-colan-24-oico. En una realización, las impurezas totales son superiores a aproximadamente 3,8 %. En una realización, las impurezas totales son superiores a aproximadamente 3,6 %.
El ejemplo 3 de la solicitud proporciona una caracterización completa de esta nueva forma cristalina de ácido obeticólico.
La estructura de rayos X de cristal único del ácido obeticólico se obtuvo y se asignó la estereoquímica absoluta. Por ejemplo, la estructura de rayos X de cristal único de la forma G de ácido obeticólico se determinó a partir de un cristal obtenido de la recristalización de ácido obeticólico de una solución de acetonitrilo tras enfriar hasta 5 °C a 0,1 ° C/min, seguido de maduración a ciclos de TA/50 °C 8 horas durante 1 semana.
La estructura es ortorómbica, grupo espaciador P2i2i2i, y contiene una molecula de ácido obeticólico en la unidad asimétrica. Final R1 [I>2s(I)] = 3,22 %. La estereoquímica absoluta de la molécula se determinó como se muestra más adelante con un parámetro de Flack = -0,01 (13). La estructura no presentó desorden.
Se llevó a cabo un estudio de biodisponibilidad de la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina) frente a la forma F de ácido obeticólico cristalino (Ejemplo 7). Los resultados del estudio muestran que el estado físico de un ácido obeticólico sólido puede desempeñar un papel en la biodisponibilidad de la molécula cuando se administró por vía oral a un sujeto. La cinética plasmática tras la administración por vía oral y la eficiencia de la absorción intestinal y la farmacocinética de la forma 1 de ácido obeticólico sólido (no cristalina) y la forma F cristalina se evaluaron de acuerdo con los métodos conocidos en la materia. El ejemplo 8 de la presente invención muestra los perfiles de la concentración plasmática del ácido obeticólico frente al tiempo, el , la Cmax y la AUC tras la administración de la forma 1 o la forma G de ácido obeticólico (véanse las Figuras 37-38). La forma F cristalina tiene una biodisponibilidad más alta que la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina). Los perfiles plasmáticos muestran que la forma F es absorbida con más eficiencia (mayor AUC) e incluso la cinética es más regular, lo que refleja una distribución óptima del fármaco en el contenido intestinal.
La solubilidad en agua de la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina) es ligeramente mayor que la de la forma F. La forma F parece ser estable, ya que el análisis termogravimétrico (TGA) no mostró ninguna pérdida de peso en el intervalo de temperatura estudiado. Ácido obeticólico sustancialmente puro La presente solicitud proporciona ácido obeticólico sustancialmente puro y sales, solvatos, conjugados de aminoácido farmacéuticamente aceptables del mismo: Ácido obeticólico (tambien conocido como INT-747) Otros nombres para el ingrediente farmacéuticamente activo ácido obeticólico son INT-747, ácido 3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oico, ácido 6a-etil-cenodesoxicólico, 6-etil-CDCA, 6ECDCA, y ácido colan-24-oico,6-etil-3,7-dihidroxi-,(3a,5b,6a,7a)-.
La presente solicitud proporciona composiciones que comprenden la forma 1 de ácido obeticólico y procesos para la síntesis de la forma 1 de ácido obeticólico altamente pura que son seguras y que producen ácido obeticólico a gran escala. En un aspecto, la forma 1 de ácido obeticólico ese produce en un proceso a escala comercial. La expresión "proceso a escala comercial" se refiere a un proceso que se realiza como un único lote de al menos aproximadamente 100 gramos. En un aspecto, el proceso de la presente solicitud produce la forma 1 de ácido obeticólico con un rendimiento alto (> 80 %) y con pocas impurezas.
El término “pureza”, como se usa en el presente documento, se refiere a una cantidad de ácido obeticólico basada en HPLC. La pureza se basa en la pureza "orgánica" del compuesto. La pureza no incluye una medida de cualquier cantidad de agua, disolvente, metales, sales inorgánicas etc. En un aspecto, la pureza del ácido obeticólico se compara con la pureza del patrón de referencia comparando el área debajo del pico. En otro aspecto, el patrón estándar para la pureza es un patrón de referencia de ácido obeticólico. En un aspecto, el ácido obeticólico tiene una pureza superior a aproximadamente 96 %. En un aspecto, el ácido obeticólico tiene una pureza superior a aproximadamente 98 %. Por ejemplo, la pureza de la forma 1 de ácido obeticólico es del 96,0 %, 96,1 %, 96.2 %, 96,3 %, 96,4 %, 96,5 %, 96,6 %, 96,7 %, 96,8 %, 96,9 %, 97,0 %, 97,1 %, 97.2 %, 97,3 %, 97,4 %, 97,5 %, 97,6 %, 97,7 %, 97,8 %, 97,9 %, 98,0 %, 98,1 %, 98.2 %, 98,3 %, 98,4 %, 98,5 %, 98,6 %, 98,7 %, 98,8 %, 98,9 %, 99,0 %, 99,1 %, 99,2 %, 99,3 %, 99,4 %, 99,5 %, 99,6 %, 99,7 %, 99,8 %, o 99,9 %. Por ejemplo, la pureza de la forma 1 de ácido obeticólico es del 98,0 %, 98,1 %, 98,2 %, 98.3 %, 98,4 %, 98,5 %, 98,6 %, 98,7 %, 98,8 %, 98,9 %, 99,0 %, 99,1 %, 99,2 %, 99.3 %, 99,4 %, 99,5 %, 99,6 %, 99,7 %, 99,8 %, o 99,9 %. Por ejemplo, la pureza de del ácido obeticólico es del 98,0 %, 98,5 %, 99,0 %, 99,5 %, 99,6 %, 99,7 %, 99,8 %, o 99,9 %. Por ejemplo, la pureza de del ácido obeticólico es del 98,5 %, 99,0 %, o 99,5 %. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, la presente invención se refiere a un ácido obeticólico que tiene una pureza superior a aproximadamente 98 %. En una realización, la pureza se determina mediante HPLC. En otra realización, La presente invención se refiere a ácido obeticólico, o una sal, solvato o conjugado de aminoácido farmacéuticamente aceptable del mismo, En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 98,5 %. En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 99,0 %. En una realización, la pureza es superior a aproximadamente 99,5 %. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
El término "pureza" como se usa en el presente documento es una medida de la cantidad de ácido obeticólico basada en la de un patrón conocido (p.ej., criterios de aceptación de aproximadamente 95 % a aproximadamente 102 %). La potencia tiene en cuenta todas las impurezas posibles, incluyendo agua, disolventes, orgánico, e inorgánicas. En un aspecto, el patrón conocido es ácido obeticólico. En un aspecto, el ácido obeticólico tiene una potencia superior a aproximadamente 96 %. En un aspecto, el ácido obeticólico tiene una potencia superior a aproximadamente 98 %. En un aspecto, el patrón conocido es ácido obeticólico. En otro aspecto, la potencia es 100 % menos las cantidades de agua cenizas sulfúricas, disolventes residuales y otros contenidos en impurezas tales como ácido 6-etilursodesoxicólico, ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico, ácido 63-etilcenodesoxicólico, ácido 3a,7a-d¡hidrox¡-6-etiliden-5p-colan-24-oico, ácido cenodesoxicólico y ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oico. En otra realización, la potencia representa las impurezas debidas al agua, disolvente, metales, sales inorgánicas y otras impurezas inorgánicas u orgánicas. Por ejemplo, la potencia del la forma 1 de ácido obeticólico es del 96,0 %, 96,1 %, 96,2 %, 96,3 %, 96,4 %, 96,5 %, 96,6 %, 96.7 %, 96,8 %, 96,9 %, 97,0 %, 97,1 %, 97,2 %, 97,3 %, 97,4 %, 97,5 %, 97,6 %, 97.7 %, 97,8 %, 97,9 %, 98,0 %, 98,1 %, 98,2 %, 98,3 %, 98,4 %, 98,5 %, 98,6 %, 98.7 %, 98,8 %, 98,9 %, 99,0 %, 99,1 %, 99,2 %, 99,3 %, 99,4 %, 99,5 %, 99,6 %, 99.7 %, 99,8 %, o 99,9 %. En un aspecto, la potencia del la forma 1 de ácido obeticólico es del 98,0 %, 98,1 %, 98,2 %, 98,3 %, 98,4 %, 98,5 %, 98,6 %, 98.7 %, 98,8 %, 98,9 %, 99,0 %, 99,1 %, 99,2 %, 99,3 %, 99,4 %, 99,5 %, 99,6 %, 99.7 %, 99,8 %, o 99,9 %. Por ejemplo, la potencia del ácido obeticólico es del 98,0 %, 98,5 %, 99,0 %, 99,5 %, 99,6 %, 99,7 %, 99,8 %, o 99,9 %. Por ejemplo, la potencia del ácido obeticólico es del 98,5 %, 99,0 %, o 99,5 %. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, la presente invención se refiere a ácido obeticólico que contiene un total de menos de aproximadamente 2 % de una o más impurezas seleccionadas de ácido 6-etilursodesoxicólico, ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico, ácido 6b-et¡lcenodesoxicólico, ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etil¡den-5 -colan-24-oico, ácido cenodesoxicólico y ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-et¡l-5 -colan-24-o¡co. En una realización, las impurezas totales son superiores a aproximadamente 1,5 %. En una realización, las impurezas totales son superiores a aproximadamente 1,4 %. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 10 % de agua, menos de aproximadamente 9 % de agua, menos de aproximadamente 8 % de agua, menos de aproximadamente 7 % de agua, menos de aproximadamente 6 % de agua, menos de aproximadamente 5 % de agua, menos de aproximadamente 4 % de agua, menos de aproximadamente 3 % de agua, menos de aproximadamente 2 % de agua, o menos de aproximadamente 1 % de agua, En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 1 ,2 % de agua, En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 1 ,0 % de agua, En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En otra realización, el ácido obeticólico contiene no más de (NMT) 0,15 % de ácido 6-etilursodesoxicólico y ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden-5 -colan-24-oico.
En otra realización, el ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 0,07 % de ácido 6-etilursodesoxicólico y ácido 3a,7a-dihidrox¡-6-etiliden^-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 0,06 % de ácido 6-etilursodesoxicólico y ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden-5 -colan-24-o¡co. En una realización, el ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 6-etilursodesoxicólico y ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden-5p-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, el ácido obeticólico contiene no más de (NMT) 0,15 % de ácido 6-etilursodesoxicólico y ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico . En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,07 % de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-53-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,06 % de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-53-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, el ácido obeticólico contiene no más de (NMT) 0,15 % de ácido 6b-etilcenodesoxicólico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,07 % de ácido 6 -etilcenodesoxicólico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,06 % de ácido db-etilcenodesoxicólico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 6b-et¡lcenodesox¡cól¡co. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, el ácido obeticólico contiene no más de (NMT) 3 % de ácido cenodesoxicólico (CDCA). En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 1 % de CDCA. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,5 % de CDCA. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,3 % de CDCA. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,2 % de CDCA. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
En una realización, el ácido obeticólico contiene no más de (NMT) 4 % de CDCA y ácido 6-etilursodesoxicólico.
En una realización, el ácido obeticólico contiene no más de (NMT) 1,5 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 1 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,07 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5P-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,06 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5P-colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etiI-5p-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oico. En una realización, el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
Formulación v Administración oral El ácido obeticólico es para administración oral. En una realización, la formulación es administración oral para la prevención y tratamiento de enfermedades y afecciones mediadas por FXR. En una realización, la formulación comprende la forma 1 de ácido obeticólico. En otra realización, la formulación comprende ácido obeticólico sustancialmente puro.
Las formulaciones adecuadas para administración oral pueden proporcionarse como unidades discretas, tales como comprimidos, cápsulas, comprimidos oblongos (cápsula oblea usada por los farmaceuticos para presentar un fármaco), pastillas, conteniendo cada uno una cantidad predeterminada de ácido obeticólico, como polvos o gránulos; como soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; o como emulsiones de aceite en agua o de agua en aceite.
Las formulaciones de la invención se pueden preparar por cualquier método adecuado, normalmente mediante mezcla uniforme e íntima de ácido obeticólico con vehículos líquidos o sólidos finamente divididos o ambos, en las proporciones requeridas y, después, en caso necesario, conformando la mezcla resultante en la forma deseada.
Por ejemplo, un comprimido se puede preparar comprimiendo una mezcla íntima que comprende un polvo o gránulos de ácido obeticólico y uno o más ingredientes opcionales, tal como un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, o un agente dispersante de superficie activa, o moldeando una mezcla íntima del ingrediente activo en polvo y diluyente líquido inerte.
Por ejemplo, se pueden administrar uno o más comprimidos para obtener un nivel de dosis diana basado en el peso del sujeto, (p. ej., un ser humano entre aproximadamente 30 kg a aproximadamente 70 kg).
En una realización, el sujeto es un niño y la formulación se usa para tratar la atresia biliar. Atresia biliar, también conocida como "ductopenia extrahepática" y "colangiopatía obliterante progresiva" es una enfermedad congénita adquirida del hígado y una de las formas principales de rechazo crónico de un aloinjerto de hígado transplantado. En la forma congénita, el conducto colédoco entre el hígado y el intestino delgado está bloqueado o ausente. El tipo adquirido más frecuente en el contexto de una enfermedad autoinmune, y es una de las formas principales de rechazo crónico de un aloinjerto de hígado transplantado.
Los lactantes y niños con atresia biliar tienen colestasis progresiva con todos los signos concomitantes habituales; ictericia,, prurito, malabasorción con retraso del crecimiento, deficiencias de vitaminas liposolubles, hiperlipidemia, y, en última instancia, cirrosis con hipertensión portal. Si no se reconoce, la afección conduce a insuficiencia hepática, pero sin kernicterus, ya que el hígado sigue pudiendo conjugar con bilirrubina, y la bilirrubina conjugada no puede atravesar la barrera hematoencefálica. La causa de la afección es desconocida. Los únicos tratamientos eficaces son ciertas cirugías, como el procedimiento kasai o transplante hepático.
En una realización, el niño humano ha sufrido un procedimiento de Kasai, en el que el procedimiento de Kasai les proporciona con eficacia un conducto colédoco funcional cuando nacen sin uno o si está completamente bloqueado al nacer.
Además de los ingredientes mencionados específicamente anteriormente, las formulaciones orales de la presente invención pueden incluir otros agentes conocidos por los expertos en la téenica de farmacia, con respecto al tipo de formulación en uso. Las formulaciones orales adecuadas pueden incluir agentes aromatizantes.
En una realización, la presente invención se refiere a una formulación farmacéutica de ácido obeticólico o una sal, solvato, conjugados de aminoácido farmacéuticamente aceptables del mismo: en el que el ácido obeticólico se produce mediante un proceso de la invención (forma 1 de ácido obeticólico). En otra realización, la formulación se administra por vía oral.
En una realización, la formulación está en forma de comprimido. En otra realización, la formulación comprende ácido obeticólico y uno o más componentes seleccionados de celulosa microcristalina, glicolato sódico de almidón, estearato de magnesio, material de recubrimiento o dióxido de silicio coloidal. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En otra realización, la formulación comprende aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 30 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 4 mg a aproximadamente 26 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 2 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1,2 mg a aproximadamente 1,8 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1,3 mg a aproximadamente 1,7 mg. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 ,5 mg.
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg de ácido obeticólico, de aproximadamente 180 a aproximadamente 190 mg de celulosa microcristalina, de aproximadamente 10 a aproximadamente 15 mg de glicolato almidón sódico, de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 mg de estearato de magnesio y de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 10 mg de material de recubrimiento. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg de ácido obeticólico, aproximadamente 185,0 mg de celulosa microcristalina, aproximadamente 12,0 de glicolato almidón sódico, aproximadamente 2,0 mg de estearato de magnesio, y aproximadamente 8,0 mg de material de recubrimiento. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 5 mg de ácido obeticólico, de aproximadamente 180 a aproximadamente 190 mg de celulosa microcristalina, de aproximadamente 10 a aproximadamente 15 mg de glicolato almidón sódico, de aproximadamente 1 a aproximadamente 3 mg de estearato de magnesio y de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 10 mg de material de recubrimiento. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 5 mg de ácido obeticólico, aproximadamente 181,0 mg de celulosa microcristalina, aproximadamente 12,0 de glicolato almidón sódico, aproximadamente 2,0 mg de estearato de magnesio, y aproximadamente 8,0 mg de material de recubrimiento. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 10 mg de ácido obeticólico, de aproximadamente 170 a aproximadamente 180 mg de celulosa microcristalina, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 15 mg de glicolato almidón sódico, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 3 mg de r estearato de magnesio, y de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 10 mg de material de recubrimiento. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 10 mg de ácido obeticólico, aproximadamente 176,0 mg de celulosa microcristalina, aproximadamente 12,0 de glicolato almidón sódico, aproximadamente 2,0 mg de estearato de magnesio, y aproximadamente 8,0 mg de material de recubrimiento. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 25 mg de ácido obeticólico, de aproximadamente 170 a aproximadamente 160 mg de celulosa microcristalina, de aproximadamente 10 mg a aproximadamente 15 mg de glicolato almidón sódico, de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 3 mg de estearato de magnesio, de aproximadamente 5 a aproximadamente 10 mg de material de recubrimiento y de aproximadamente 1 a aproximadamente 10 mg de dióxido de silicio coloidal. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 mg a aproximadamente 1.500 mg de ácido obeticólico por comprimido. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 25 mg de ácido obeticólico, aproximadamente 157,0 mg de celulosa microcristalina, aproximadamente 12,0 de glicolato almidón sódico, aproximadamente 2,0 mg de estearato de magnesio, aproximadamente 8,0 mg de material de recubrimiento y aproximadamente 4,0 mg de dióxido de silicio coloidal. En una realización, el material de recubrimiento es un material de recubrimiento Opadry® .
Todos los porcentajes y proporciones usados en el presente documento, salvo que se indique lo contrario, se expresan en peso. El porcentaje de la impureza dimérica está en base al porcentaje del área, normalmente cuantificado mediante HPLC analítica.
A lo largo de la descripción, cuando se describe que las composiciones tienen, incluyen, o comprenden componentes específicos, se contempla que las composiciones también consisten esencialmente en. o consiste en, los componentes citados. Análogamente, cuando se describe que los métodos o procesos tienen, incluyen, o comprende etapas de proceso específicas, los procesos también consisten esencialmente en, o consiste en, las etapas de procesamiento citadas. Además, debe entenderse que el orden de las etapas o el orden para realizar ciertas acciones es inmaterial siempre que la invención siga siendo operable. Por otra parte, dos o más etapas o acciones se pueden realizar de forma simultánea.
Formulación de los comprimidos API Ingrediente farmacéutico activo HSE = especificación interna USP-NF = Formulario Nacional de la Farmacopea de EE.UU.
Ph Eur = Farmacopea Europea JP =Farmacopea Japonesa ‘cantidad de ácido obeticólico presentada supone que el API es anhidro y 100 5 puro; la cantidad real se ajusta en base a la potencia del lote de la sustancia farmacológica usado y la cantidad de celulosa microcristalina disminuye en consecuencia.
En una realización, el comprimido comprende Opadry®.amarillo. En otra realización, el comprimido comprende Opadry® blanco. En otra realización, el comprimido comprende Opadry® verde Composiciones Farmacéuticas Ácido obeticólico incluyendo la forma 1 de ácido obeticólico, formas sustancialmente puras de ácido obeticólico y formas cristalinas de ácido obeticólico, o una sal, solvato, o conjugado de aminoácido farmacéuticamente aceptable del mismo para varios fines medicinales. El ácido obeticólico se puede usar en métodos para el tratamiento o prevención de enfermedades y afecciones mediadas por FXR. En una realización, La enfermedad o afección se selecciona de atresia biliar, enfermedad hepática colestásica, hepatopatía crónica, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), infección por hepatitis C, hepatopatía alcohólica, cirrosis biliar primaria (PBC), daño hepático por fibrosis progresiva, fibrosis hepática, fibrosis hepática inducida por alcohol, y enfermedades cardiovasculares, incluyendo aterosclerosis, arteriesclerosis, hipercolesterolemia e hiperlipidemia. En una realización, la forma 1 de ácido obeticólico se puede usar en métodos para disminuir los triglicéridos. En una realización, el ácido obeticólico cristalino se puede usar en métodos para disminuir los triglicéridos. La forma 1 de ácido obeticólico o el ácido obeticólico cristalino puede aumentar los niveles de HDL. Otros efectos de la forma 1 de ácido obeticólico o el ácido obeticólico cristalino incluyen la disminución de la fosfatasa alcalina (ALP), bilirrubina, ALT, AST, y GGT.
En una realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende ácido obeticólico y un vehículo farmacéuticamente aceptable, en el que el ácido obeticólico se produce mediante un proceso de la invención, (p. ej., la forma 1 de ácido obeticólico. En una realización, la composición farmacéutica comprende ácido obeticólico sustancialmente puro y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En otra realización, la composición farmacéutica comprende ácido obeticólico cristalino y un vehículo farmacéuticamente aceptable. En otra realización, el ácido obeticólico cristalino es la forma C.
En una realización, la presente invención se refiere a un metodo de tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por FXR en un sujeto que comprende administrar una cantidad eficaz de la forma 1 de ácido obeticólico producida mediante un proceso de la invención o una composición farmacéutica del mismo.. En una realización, la presente invención se refiere a un método de tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por FXR en un sujeto que comprende administrar una cantidad eficaz de ácido obeticólico sustancialmente puro producido mediante un proceso de la invención o una composición farmacéutica del mismo.. En una realización, la presente invención se refiere a un método de tratar o prevenir una enfermedad o afección mediada por FXR en un sujeto que comprende administrar una cantidad eficaz de ácido obeticólico.cristalino o una composición farmacéutica del mismo. En otra realización, el ácido obeticólico es la forma C. En una realización el ácido obeticólico es la forma A. En una realización el ácido obeticólico es la forma C. En una realización el ácido obeticólico es la forma D. En una realización el ácido obeticólico es la forma F. En una realización el ácido obeticólico cristalino es la forma G.
En otra realización, la enfermedad o afección es una enfermedad cardiovascular o enfermedad hepática colestásica y para disminuir los triglicéridos. En otra realización, la enfermedad cardiovascular es aterosclerosis o hipercolesterolemia. En otra realización, el sujeto es un mamífero. En otra realización, el mamífero es un ser humano.
En otra realización, el compuesto o composición farmacéutica se administra por vía oral, por vía parenteral, o por vía tópica. En otra realización, el compuesto o composición farmaceutica se administra por vía oral.
En una realización, la presente invención se refiere a un método para inhibir la fibrosis en un sujeto que sufre una afección colestásica, comprendiendo el método la etapa de administrar al sujeto una cantidad eficaz de ácido obeticólico o una composición farmacéutica del mismo, en el que el ácido obeticólico se produce mediante un proceso de la invención. En una realización, la presente invención se refiere a un método para inhibir la fibrosis en un sujeto que sufre una afección colestásica, comprendiendo el método la etapa de administrar al sujeto una cantidad eficaz de ácido obeticólico o una composición farmacéutica del mismo, en el que el ácido obeticólico se produce mediante un proceso de la invención. En una realización, la fibrosis que se va a inhibir se produce en un órgano en el que se expresa FXR.
En una realización, la afección colestásica se define como niveles séricos elevados anormalmente de fosfatasa alcalina, 7-glutamil transpeptidasa (GGT) y 5' nucleotidasa. En otra realización, la afección colestásica se define además como que presenta al menos un síntoma clínico. En otra realización, el síntoma es picor (prurito). En otra realización, la fibrosis se selecciona del grupo que consiste en fibrosis hepática, fibrosis renal y fibrosis intestinal. En otra realización, la afección colestásica se selecciona del grupo que consiste en cirrosis biliar primaria, colangitis esclerosante primaria, colestasis inducida por fármacos, colestasis hereditaria y colestasis intrahepática del embarazo. En otra realización, el sujeto no sufre una afección colestásica asociada con una enfermedad o afección seleccionada del grupo que consiste en cáncer hepático y biliar primario, cánceres metastásicos, septicemia, nutrición parenteral total crónica, fibrosis cística, y hepatopatía granulomatosa.
En otra realización, el sujeto tiene fibrosis hepática asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en hepatitis B, hepatitis C, hepatopatías parasitarias, infecciones bacterianas, víricas y fúngicas postransplante; hepatopatía alcohólica (ALD); hepatopatía grasa no alcohólica (NAFLD); esteatohepatitis no alcohólica (NASH), enfermedades hepáticas inducidas por metotrexato, isoniazida, oxifenistatina, metildopa, clorpromazina, tolbutamida, o amiodarona; hepatitis autoinmune, sarcoidosis, enfermedad de Wilson', hemocromatosis, enfermedad de Gaucher; enfermedades del almacenamiento del glucógeno de tipos III, IV VI. IX y X; deficiencia de la ar antitripsina ; síndrome de Zellweger; tirosinemia; fructosemia; galactosemia; desorganización vascular asociada con el síndrome de Budd-Chiari, enfermedad venooclusiva, o trombosis venosa portal; y fibrosis hepática congenita.
En otra realización, el sujeto tiene fibrosis intestinal asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, colitis posradiación, y colitis microscópica.
En otra realización, el sujeto tiene fibrosis renal asociada con una enfermedad seleccionada del grupo que consiste en nefropatía diabética, nefrosclerosis hipertensora, glomerulonefritis crónica, glomerulopatía crónica por transplante, nefritis intersticial crónica y enfermedad renal poliquística.
Definiciones Por comodidad, determinados terminos empleados en la memoria descriptiva, ejemplos y reivindicaciones adjuntas se recogen en el presente documento.
Como se usa en el presente documento, el término "'ácido obeticólico" u "OCA" se refiere a un compuesto que tiene la estructura química: Otros nombres químicos para el ácido obeticólico incluyen: ácido 3a, 7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oico, ácido 6a-etil-cenodesoxicólico, 6-etil-CDCA, 6ECDCA, ácido colan-24-oico,6-etil-3,7-dihidroxi-,(3a,5 , 6a, 7a)- y INT-747. El número de registro CAS para el ácido obeticólico es 459789-99-2. Este término se refiere a todas las formas del ácido obeticólico, (p. ej., no cristalino, cristalino y sustancialmente puro.
Como se usa en el presente documento, la expresión " acido obeticólico cristalino" se refiere a cualquier forma cristalina de un compuesto que tiene la estructura química: l ácido obeticólico cristalino significa que el compuesto cristaliza en una disposición en paquete de cristales específica en tres dimensiones espaciales o el compuesto que tiene planos faciales externos. La forma cristalina del ácido obeticólico (o una sal, conjugado de aminoácido, solvato farmacéuticamente aceptables del mismo) pueden cristalizar en diferentes disposiciones de paquete de cristal, todos los cuales tienen la misma composición elemental de ácido obeticólico. Diferentes formas cristalinas normalmente tienen diferentes patrones de difracción de rayos X, espectros de infrarrojos, puntos de fusión, dureza de densidad, forma cristalina, propiedades ópticas y eléctricas, estabilidad y solubilidad. Disolvente de recristalización, tasa de cristalización, temperatura de almacenamiento y otros factores pueden hacer que domine una forma cristalina. Los cristales de ácido obeticólico se pueden preparar mediante cristalización en condiciones diferentes, (p. ej., diferentes disolventes, temperaturas, etc.
Como se usa en el presente documento, la expresión "forma C del ácido obeticólico cristalino" se refiere a una forma de ácido obeticólico cristalino con un patrón de difracción de rayos X similar al expuesto en la Figura 5, (p. ej., la forma cristalina como se caracteriza en el Ejemplo 3.
Como se usa en el presente documento, la expresión "ácido obeticólico sustancialmente puro" hace referencia a ácido obeticólico que tiene una potencia superior a aproximadamente 95 %. La potencia del ácido obeticólico tiene en cuenta las impurezas, incluyendo, por ejemplo, agua, disolventes, y otras impurezas orgánicas e inorgánicas que están en una muestra de ácido obeticólico. En otra realización, el patrón estándar conocido para la potencia es ácido obeticólico al 100 % y la potencia se determina restando los porcentajes de las impurezas, tales como disolvente, agua, y otras impurezas orgánicas e inorgánicas a partir del 100 % del patrón conocido. En un aspecto, las impurezas inorgánicas incluyen, por ejemplo, sales inorgánicas y cenizas sulfúricas. En un aspecto, las impurezas orgánicas incluyen ácido 6-etilursodesoxicólico, ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto^-colan-24-oico, ácido 6P-etilcenodesoxicólico, ácido 3a, 7a-dihidroxi-6-etiliden-5 -colan-24-oico, ácido cenodesoxicólico y ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oico. Las cantidades de las impurezas se pueden determinar mediante métodos conocidos en la téenica, (p. ej., HPLC, RMN, o métodos de la Farmacopea de EE.UU. o de la Farmacopea Europea, o una combinación de dos o más de estos métodos.
Como se usa en el presente documento, el término "pureza" se refiere aun análisis químico de un compuesto obtenido de, por ejemplo, HPLC, En una realización, la pureza de un compuesto se compara con la pureza del patrón de referencia, (p. ej., ácido obeticólico mediante el área bajo sus respectivos picos para comparaciones. En una realización, la pureza representa las impurezas orgánicas en una muestra.
Como se usa en el presente documento, la expresión "mezcla de reacción" se refiere a una mezcla de una o más sustancias combinadas. En una realización, la mezcla o combinación de las sustancias produce una transformación química o cambio en una o más de las sustancias originales.
Como se usa en el presente documento, la expresión "forma 1 de ácido obeticólico" se refiere a un ácido obeticólico no cristalino". En una realización, esta forma de ácido obeticólico se produce mediante un ácido obeticólico cristalino como un intermedio sintetico. Por ejemplo, esta forma de ácido obeticólico se produce mediante el proceso de la aplicación mediante la forma C de ácido obeticólico cristalino como el intermedio sintético. En una realización, la forma 1 de ácido obeticólico es la forma que se usa como ingrediente farmacéuticamente activo. Véanse más detalles en el ejemplo 5.
"Tratar" incluye cualquier efecto, (p. ej., disminuir, reducir, modular o eliminar que tiene como resultado la mejora de la afección, enfermedad, trastorno, etc. "Tratar" o "tratamiento" de un estado de enfermedad incluye: inhibir el estado de enfermedad, es decir, detener el desarrollo del estado de enfermedad o sus síntomas clínicos: o aliviar el estado de enfermedad, es decir, producir una regresión temporal o permanente del estado de enfermedad o sus síntomas clínicos.
"Prevenir" el estado de enfermedad incluye hacer que los síntomas clínicos del estado de enfermedad no se desarrollen en un sujeto que pueda estar expuesto o predispuesto al estado de enfermedad, pero que todavía no experimenta ni muestra síntomas del estado de enfermedad.
"Estado de enfermedad" significa cualquier enfermedad, trastorno, afección, síntomas o indicación.
La expresión "cantidad eficaz" como se usa en el presente documento, se refiere a una cantidad de ácido obeticólico (p. ej., un ligando activador de FXR) que produce un efecto terapéutico agudo o crónico sobre la administración adecuada de la dosis. El efecto incluye la prevención, corrección, inhibición o inversión de los síntomas, signos y patología subyacente de una enfermedad/afección (p. ej., fibrosis hepática, renal o intestinal) y complicaciones relacionadas en cualquier medida detectable.
Una "cantidad terapéuticamente eficaz" significa la cantidad de ácido obeticólico que, cuando se administra aun mamífero para tratar una enfermedad, es suficiente para efectuar dicho tratamiento de la enfermedad. La "cantidad terapéuticamente eficaz" variará en función del ácido obeticólico, la enfermedad y su gravedad y la edad, el peso, etc., al mamífero al que se va a tratar.
Una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido obeticólico se puede formular con un vehículo farmacéuticamente aceptable para administrar a un ser humano o un mamífero. De acuerdo con ello, el ácido obeticólico o sus formulaciones se pueden administrar por ejemplo, por vía oral, parenteral, o por vía tópica, para proporcionar una cantidad eficaz del compuesto. En realizaciones alternativas,, el ácido obeticólico preparado de acuerdo con la presente invención se puede usar para recubrir o impregnar un dispositivo médico, (p. ej., una endoprótesis vascular.
"Efecto farmacológico", como se usa en el presente documento, abarca los efectos producidos en el sujeto que alcanzan el objetivo indicado de una terapia.
En una realización, un efecto farmacológico significa que las indicaciones primarias del sujerto que se esté tratando se previenen, alivian, o reducen. Por ejemplo, un efecto farmacológico sería uno que tuviera como resultado la prevención, el alivio y la reducción de las indicaciones primarias en un sujeto tratado. En otra realización, un efecto farmacológico significa que los trastornos o síntomas de las indicaciones primarias del sujerto que se esté tratando se previenen, alivian, o reducen. Por ejemplo, un efecto farmacológico sería uno que tuviera como resultado la prevención o la reducción de las indicaciones primarias en un sujeto tratado.
La invención también comprende ácido obeticólico marcado isotópicamente o sales solvatos, o conjugados de aminoácido farmacéuticamente aceptables del mismo, que son idénticos a los citados en las fórmulas de la invención y siguientes, salvo por el hecho de que uno o más átomos están sustituidos por un átomo que tiene una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico que se encuentra habitualmente en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que se pueden incorporar en el ácido obeticólico o sales solvatos, o conjugados de aminoácidos farmacéuticamente aceptables del mismo incluye isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, flúor, tales como 3H, 11C, 14C y 18F.
El ácido obeticólico, o sales, solvatos, o conjugados de aminoácidos del mismo que contienen los isótopos anteriormente mencionados y/u otros isótopos de otros átomos están incluidos dentro de la alcance de la presente invención. Ácido obeticólico marcado isotópicamente o sales solvatos, o conjugados de aminoácido farmacéuticamente aceptables del mismo, por ejemplo, aquellos en los que se incorpora isótopos radiactivos tales como 3H, 14C y son útiles en análisis de la distribución en tejidos del fármaco o sustrato. Los isótopos tritiados, es decir, 3H, y carbono-14 es decir, 14C, son particularmente preferidos por su facilidad de preparación y detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos más pesados tales como deuterio, es decir, 2H, puede conseguir determinadas ventajas terapeuticas que dan como resultado mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una mayor semivida in vivo o necesidad de una dosificación inferior y, de este modo, se puede preferir en algunas circunstancias, ácido obeticólico marcado isotópicamente o sales solvatos, o conjugados de aminoácido farmacéuticamente aceptables de los mismos pueden prepararse generalmente .llevando a cabo los procedimientos divulgados en los Esquema y/o en los ejemplos de la invención sustituyendo un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible para un reactivo no marcado isotópicamente. En una realización, ácido obeticólico o sales solvatos, o conjugados de aminoácido farmacéuticamente aceptables de los mismos y no están marcado isotópicamente. En una realización, el ácido obeticólico deuterado es útil para ensayos bioanalíticos. En otra realización, ácido obeticólico o sales solvatos, o conjugados de aminoácidos farmacéuticamente aceptables de los están radiomarcados.
"Isómeros geométricos" significa los diastereómeros que deben su existencia a la rotación impedida alrededor de los dobles enlaces. Estas configuraciones se diferencian por sus nombres en los prefijos cis y trans. o Z y E, lo que indica que los grupos están en el mismo lado o en el opuesto del doble enlace en la molécula de acuerdo con las normas de Cahn-Ingold-Prelog.
“Solvatos” significa formas de adición de disolvente que contienen cantidades estequiometricas o no estequiométricas de disolvente. El ácido obeticólico puede tener una tendencia a atrapar una proporción molar fija de moléculas de disolvente en el estado sólido cristalino, de este modo se forma un solvato. Si el disolvente es agua, el solvato formado es un hidrato, cuando el disolvente es alcohol, el solvato formado es un alcoholato. Los hidratos se forman mediante la combinación de una o más moléculas de agua con una de las sustancias en las que el agua conserva su estado molecular como H2O, y dicha combinación es capaz de formar uno o más hidratos. Además, En el compuesto de la presente invención, por ejemplo, las sales de los compuestos, pueden existir en forma hidratada o no hidratada (anhidro) o como solvatos con otras moléculas de disolvente. Ejemplos no limitantes de hidratos incluyen monohidratos, dihidratos etc. Ejemplos no limitantes de solvatos incluyen solvatos de etanol, solvatos de acetona etc.
"Tautómeros" se refiere a los compuestos cuyas estructuras pueden diferir marcadamente en la disposición de los átomos, pero pueden existir en equilibrio fácil y rápido. Debe entenderse que el ácido obeticólico puede representarse como tautómeros diferentes. También debe entenderse que cuando el ácido obeticólico y los intermedios sintéticos de la invención tienen formas tautoméricas, cada forma tautomérica está destinada a caer dentro del alcance de la invención., y la denominación de ácido obeticólico no excluye a ninguna forma tautomérica. El ácido obeticólico y los intermedios sintéticos de la invención pueden existir en varias formas tautoméricas, incluido el ceto-enol. Por ejemplo, en el tautomerismo ceto-enol se produce un desplazamiento simultáneo de electrones y un átomo de hidrógeno. Los tautómeros existen como mezclas de un grupo tautomerico en solución. En forma sólida, normalmente predomina un tautómero. Aunque se puede describir un tautómero, la presente invención incluye todos los tautómeros de los presentes compuestos.
En consecuencia, debe entenderse que los isómeros que surgen de átomos de carbono asimétricos (p. ej., todos los enantiómeros y diaestereómeros) están incluidos dentro del ámbito de I invención, a menos que se indique lo contrario. Dichos isómeros se pueden obtener en forma sustancialmente pura mediante téenicas de separación clásicas y mediante síntesis estereoquímicamente controlada. Adicionalmente, las estructuras y otros compuestos y restos tratados en esta solicitud también incluyen todos los tautómeros de los mismos. Los alquenos pueden incluir la geometría E o Z, cuando sea adecuado. El ácido obeticólico y los intermedios sintéticos pueden existir en forma estereoisomérica y, por tanto, se pueden producir como estereoisómeros individuales o como mezclas.
Una “composición farmacéutica” es una formulación que contiene ácido obeticólico en una forma adecuada para la administración a un sujeto. En una realización, la composición farmacéutica está en masa o en forma de dosificación unitaria. Puede ser ventajoso formular composiciones orales en forma de unidad de dosificación para facilidad de administración y uniformidad de la dosificación. La forma de unidad de dosificación, como se usa en el presente documento, se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para el sujeto que se va a tratar, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de reactivo activo calculada para producir el efecto terapeutico deseado en asociación con el vehículo farmacéutico requerido. La especificación para las formas de unidad de dosificación de la invención está dictada y depende directamente de las características únicas del reactivo activo y del efecto terapéutico concreto que se debe conseguir v y de las limitaciones inherentes en la téenica de formar tal agente activo para el tratamiento de individuos.
La forma de dosificación unitaria es cualquiera de diversas formas, incluidas, por ejemplo, una cápsula, una bolsa i.v., un comprimido una bomba única en un inhalador aerosol o un vial. La cantidad de ácido obeticólico (p. ej., una formulación de ácido obeticólico, o una sal, solvato, o conjugado de aminoácidos farmacéuticamente aceptables de los mismos) en una dosis unitaria de la composición es una cantidad eficaz y varía de acuerdo con el tratamiento concreto implicado. Un experto en la técnica apreciará que en ocasiones es necesario realizar variaciones rutinarias a la dosificación según la edad y la afección del paciente. La dosificación también dependerá de la vía de administración. Se contemplan varios vías, incluyendo oral, pulmonar rectal, parenteral, transdérmica, subcutáneas, vía intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, de inhalación, bucal, sublingual, intrapleural, intratecal, intranasal, y similar. Las formas de dosificación para administración tópica o transdérmica de un compuesto de la presente invención incluyen polvos, pulverizadores, pomadas, pastas, cremas, lociones, geles, disoluciones, parches e inhaladores. En una realización, el ácido obeticólico se mezcla en condiciones de esterilidad con un vehículo farmacéuticamente aceptable y con cualquier conservante, tampón, o propelente que se requiera.
La expresión “dosis ultrarrápida” se refiere a formulaciones de ácido obeticólico que son formas de dosificación de dispersión rápida.
La expresión “liberación inmediata” se define como una liberación de ácido obeticólico desde una forma de dosificación en un periodo de tiempo relativamente breve, generalmente de hasta aproximadamente 60 minutos. La expresión “liberación modificada” se define de modo que incluya la liberación retardada, la liberación extendida y la liberación pulsada. La expresión “liberación pulsada” se define como una serie de liberaciones de fármaco a partir de una forma de dosificación. La expresión “liberación sostenida” o “liberación extendida” se define como la liberación continua de ácido obeticólico a partir de una forma de dosificación durante un periodo prolongado.
Un "sujeto" incluye mamíferos, (p. ej., seres humanos, animales de compañía (por ejemplo, perros, gatos, aves, y similares), animales de granja (por ejemplo, vacas, oveja, cerdos, caballos, aves, y similares) y animales de laboratorio (por ejemplo, ratas, ratón, cobayas, aves, y similares). En una realización, el sujeto es un ser humano. En una realización, el sujeto es un ser humano que es un niño (p. ej., de entre aproximadamente 30 kg a aproximadamente 70 kg). En una realización, el niño humano ha sufrido un procedimiento de Kasai, en el que el procedimiento de Kasai les proporciona con eficacia un conducto colédoco funcional cuando nacen sin uno o si está completamente bloqueado al nacer.
Como se usa en el presente documento, la frase “farmacéuticamente aceptable” se refiere a los compuestos, materiales, composiciones, vehículos y/o formas de dosificación que son, dentro del alcance del buen criterio medico, adecuados para uso en contacto con los tejidos de los seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica, u otro problema o complicación, en consonancia con una proporción beneficio/riesgo razonable.
"Excipiente farmacéuticamente aceptable" significa un excipiente que es útil en la preparación de una composición farmacéutica que en general es segura, no tóxica y ni biológicamente indeseable ni indeseable de otro modo, e incluye excipientes que son aceptables para uso veterinario así como para uso farmacéutico. Un "excipiente farmacéuticamente aceptable” como se usa en la memoria descriptiva y reivindicaciones incluye uno u más de un excipiente.
Aunque es posible administrar ácido obeticólico directamente sin ninguna formulación, el ácido obeticólico normalmente se administra en forma de formulaciones farmacéuticas que comprenden un excipiente farmacéuticamente aceptable y ácido obeticólico. Estas formulaciones se pueden administrar mediante diversas cías, incluyendo oral bucal, rectal, intranasal, transdérmica, subcutánea, vía intravenosa, intramuscular, e intranasal. La formulación oral de ácido obeticólico se describe adicionalmente en el presente documento en la sección titulada "Formulación y administración oral".
En una realización, el ácido obeticólico se puede administrar transdérmicamente. Con el fin de administrar transdérmicamente se necesita un dispositivo de liberación transdérmica ("parche"). Dichos parches transdérmicos se pueden usar para proporcionar infusión continua o discontinua de un compuesto de la presente invención en cantidades controladas. La construcción y uso de parches transdermicos para la liberación de agentes farmacéuticos es bien conocido en la téenica. Consulte, (p. ej., la patente de Estados Unidos n° 5.023.252. Dichos parches se pueden construir para liberación continua, pulsátil o a demanda de agentes farmacéuticos.
En una realización de la presente invención, se proporciona una formulación farmacéutica que comprende al menos ácido obeticólico como se ha descrito anteriormente en una formulación adaptada para administración bucal y/o sublingual, o nasal. Esta realización proporciona la administración de ácido obeticólico de un modo que evite las complicaciones gástricas, Tal como el metabolismo de primer paso por el sistema gástrico y/o a través del hígado. Esta vía de administración también puede reducir los tiempos de adsorción, proporcionando un inicio más rápido del beneficio terapéutico. Los compuestos de la presente invención pueden proporcionar perfiles de solubilidad particularmente favorables para facilitar las formulaciones sublinguales/bucales. Dichas formulaciones normalmente requieren concentraciones altas de ingredientes activos para liberar cantidades suficientes de ingredientes activos en el área de superficie limitada de la mucosa sublingual/bucal, para las duraciones relativamente breves la formulación está en contacto con el área de superficie para permitir la absorción del ingrediente activo. De esta manera, la muy elevada actividad del ácido obeticólico, combinada con su elevada solubilidad, facilita su idoneidad para la formulación sublingual/bucal.
El ácido obeticólico se formula, preferentemente, en una forma de dosificación unitaria, conteniendo cada dosis de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 1500 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 30 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 4 mg a aproximadamente 26 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 2 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1,2 mg a aproximadamente 1,8 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 ,3 mg a aproximadamente 1 ,7 mg. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1,5 mg. La expresión "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de material activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado como se ha descrito en lo que antecede.
En general, el ácido obeticólico es eficaz en un amplia gama de dosificaciones. Por ejemplo, las dosificaciones al día normalmente entrarán dentro del intervalo de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 30 mg/kg de peso corporal. En el tratamiento de humanos adultos, el intervalo de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 15 mg/kg/día, en dosis únicas o divididas, es especialmente preferido. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 0,1 mg a aproximadamente 1500 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 50 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 30 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 4 mg a aproximadamente 26 mg. En otra realización, la formulación comprende de aproximadamente 5 mg a aproximadamente 25 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 2 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1 ,2 mg a aproximadamente 1 ,8 mg. En una realización, la formulación comprende de aproximadamente 1,3 mg a aproximadamente 1,7 mg. En una realización, la formulación comprende aproximadamente 1 ,5 mg. No obstante, se entenderá que la cantidad real de ácido obeticólico que realmente se administra la determinará un medico, a la luz de las circunstancias relevantes, incluyendo la afección a tratar, la ruta de administración elegida, la forma del ácido obeticólico administrada, la edad, el peso, y la respuesta del paciente individual, y la gravedad de los síntomas del paciente y por tanto, con los intervalos de dosificación anteriores no se pretende limitar el alcance de la invención de ningún modo. En algunos casos los niveles de dosificación por debajo del límite inferior del intervalo mencionado anteriormente pueden ser más que adecuados, mientras que, en otros casos, se pueden utilizar dosis aún más grandes sin producir ningún efecto secundario dañino, siempre que dichas dosis más grandes se dividan en primer lugar en varias dosis más pequeñas para su administración a lo largo del día.
"Proceso de la invención" se refiere a un método para preparar ácido obeticólico como se ha descrito en el presente documento, en el que el método comprende ácido obeticólico cristalino.
"Fibrosis" se refiere a una afección que implica el desarrollo de tejido conjuntivo fibroso excesivo, (p. ej., tejido cicatricial, en un tejido u órgano. Dicha generación de tejido cicatricial se puede producir en respuesta a infección, inflamación, o lesión en el órgano debido a una enfermedad, traumatismo, toxicidad química y así sucesivamente. La fibrosis se puede desarrollar en diversos tejidos y órganos, incluyendo el hígado, riñones, intestino, pulmón, corazón, etc.
Los términos "inhibir" o "inhibición", tal como se usan en el presente documento, se refieres a cualquier efecto positivo detectable sobre el desarrollo o progresión de una enfermedad o afección. Dicho efecto positivo puede incluir el retraso o prevención del inicio de al menos un síntoma o signo de la enfermedad o afección, alivio o inversión del o los síntomas o signos y ralentización o prevención del empeoramiento adicional del o los síntomas o signos.
Como se usa en el presente documento, una "afección colestásica" se refiere a cualquier enfermedad o afección en la que la excreción de bilis por el hígado está alterada o bloqueada, que se puede producir bien en el hígado o en las vías biliares. La colestasis intrahepática y la colestasis extrahepática son los dos tipos de afecciones colestásicas. La colestasis intrahepática (que se produce en el interior del hígado" se ve con mayor frecuencia en la cirrosis biliar primaria, la colangitis esclerosante primaria, la septicemia (infección generalizada), la hepatitis alcohólica aguda, la toxicidad por fármacos, la nutrición parenteral total (alimentación intravenosa), la neoplasia maligna, la fibrosis cística, y el embarazo. La colestasis extrahepática (que se produce fuera del hígado) puede deberse a los tumores en las vías biliares, contracciones, quistes, divertículos, formación de cálculos en el conducto colédoco, pancreatitis tumor pancreático o seudoquiste, y compresión por una masa o tumor en un órgano cercano.
Los síntomas y signos clínicos de una afección colestásica incluyen: picor (prurito), fatiga, ictericia en piel u ojos, incapacidad para digerir ciertos alimentos, náuseas, vómitos, heces claras, orina oscura y dolor abdominal en el cuadrante superior derecho. Se puede diagnosticar a un paciente con una afección colestásica y seguir clínicamente en base a un conjunto de pruebas de laboratorio clínicas estándar, incluyendo la medición de los niveles de la fosfatasa alcalina, la g-glutamil transpeptidasa (GGT), la 5' nucleotidasa, la bilirrubina, los ácidos biliares, y el colesterol en el suero de un paciente. En general, se diagnostica en un paciente una afección colestásica si los niveles en suero de los tres marcadores diagnósticos, fosfatasa alcalina, GGT, y 5' nucleotidasa, se consideran anormalmente elevados. El nivel sérico normal de estos marcadores puede variar en algún grado de un laboratorio a otro y de un procedimiento a otro, dependiendo del protocolo de ensayo. De esta manera, un médico podrá determinar, en base al laboratorio y al procedimiento de ensayo específico, lo que es un nivel anormalmente elevado en sangre para cada uno de los marcadores.
Por ejemplo, un paciente que sufre una afección colestásica generalmente tiene más de 125 Ul/I de fosfatasa alcalina, más de aproximadamente 65 Ul/I de GGT y más de aproximadamente 17 NIL de 5' nucleotidasa en sangre. Dada la variabilidad en el nivel de los marcadores sericos, se puede diagnosticar una afección colestásica en base a los niveles anormales de estos tres marcadores, además de al menos uno de los síntomas mencionados anteriormente, tal como picor (prurito).
El término "órgano" se refiere a una estructura diferenciada (como el corazón, pulmón, riñones, hígado etc.) que consiste en células y tejidos y que realiza alguna función específica en un organismo. Este término abarca las partes del cuerpo que realizan una función o colaboran en una actividad (p. ej., un ojo y estructuras relacionadas que forman los órganos visuales). El término "órgano" también abarca cualquier estructura parcial de células y tejidos diferenciados que es potencialmente capaz de desarrollarse en una estructura completa (p. ej., un lóbulo o una sección de un hígado).
Todas las publicaciones y documentos de patentes citados en el presente documento se incorporan en el presente documento por referencia como si cada una de estas publicaciones o documentos estuviera específica e individualmente indicado para su incorporación en el presente documento por referencia. La mención de publicaciones y documentos patente no se pretende que sea una admisión de que cualquiera sea téenica anterior pertinente no constituye admisión alguna en cuanto a los contenidos o la fecha de los mismos. La invención que se ha descrito ahora a modo de descripción escrita, los expertos en la materia reconocerán que la invención se puede poner en práctica en diversas realizaciones y que la descripción anterior y los ejemplos siguientes son con fines ilustrativos y no limitativos de las reivindicaciones siguientes.
En la memoria descriptiva, las formas en singular también incluyen el plural, a menos que el contexto estipule claramente otra cosa. A menos que defina lo contrario, todos los términos téenicos y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado que el que entiende comúnmente una persona normalmente experta en la técnica a la cual pertenece la presente invención. En caso de conflicto, prevalecerá la presente memoria descriptiva.
Todos los porcentajes y proporciones usados en el presente documento, salvo que se indique lo contrario, se expresan en peso.
EJEMPLOS EJEMPLO 1 : Síntesis de ácido obeticólico Los números de compuesto a los que se hace referencia en este procedimiento sintético se refieren a los hallados en el Esquema 1 y la reacción que corresponde a cada una de las etapas.
Etapa 1. Preparación de éster metílico de ácido 3a-hidrox¡-7-ceto-5B-colan-24-oico .
. ; - - - - Reacción 1: Esterificación de ácido carboxílico C-24 de ácido 7-ceto-litocólico (KLACA) El ácido 3a-hidroxi-7-ceto^-colan-24-oico (KLACA: 500,0 g, 1,28 mol) se esterificó usando alcohol metílico (2.500 mi), en presencia de catalizadores ácidos (ácido sulfúrico, 1,0 mi) y se calentó hasta 62 °C a 64 °C durante aproximadamente 3 horas, para dar áster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-^-colan-24-oico (1). En esta reacción, el alcohol metílico actúa como reactivo de metilación así como el disolvente de reacción. Para el procesamiento, el valor de pH se ajustó con una solución de hidróxido sódico (2N) a un pH de 7,0 a 7,5. La solución se trató con carbono activado (25 g) durante aproximadamente 30 minutos y se filtró para eliminar los sólidos de carbono. Alternativamente, la solución que contiene el producto no se trató con carbono activado. Para precipitar el producto, se añadió agua (625 mi) a de 10 °C a 15 °C durante 15 minutos y el material de siembra. La mezcla de reacción se agita durante 1 hora a de 10 °C a 15 °C . Se añadió otra porción de agua (1875 mi) durante de aproximadamente 20 a 25 minutos. El producto en suspensión se agitó durante 30 minutos a de 10 °C a 15 °C. El producto se aisló con una centrífuga y se lavó con una mezcla de metanol y agua (1:1, 350 mi). El contenido de agua del material húmedo se cuantificó mediante Karl Fischer (KF). El material se secó en secador de tambor al vacío a NMR 70 °C. El material tambien se puede usar en la siguiente etapa sin secar. El rendimiento (calculado en el producto seco) es 501,4 g (1,24 mol, 96,8 %).
Etapa 2. Preparación de áster metílico de ácido 3a.7a -d¡trimetilsililoxi-5B-col-6-en- 24-oico Reacción 2: Formación de sililenol éter a partir de éster metílico de ácido 7-ceto-litocólico El Compuesto 1 (60,69 g, 150 mmol, calculado como la sustancia seca), que contiene agua residual y metanol, se cargó en el reactor en condiciones inertes y se disolvió en tetrahidrofurano (THF, 363 mi). El agua y el metanol se eliminaron mediante destilación azeotrópica repetida a aproximadamente 65 °C y a presión normal. Se añadió THF al residuo según sea necesario y la destilación se repitió aproximadamente 4 veces. La solución restante debe tener un contenido final de agua £ 0,05 % (titulación de Karl Fischer). Esta solución se enfrió previamente hasta de -20 °C a -25 °C y, despues, se añadió clorotrimetilsilano (73,33 g, 675 mmol, 4,5 equivalentes) en aproximadamente 30 a 45 minutos. En atmósfera de nitrógeno se cargó diisopropilamida de litio (solución al 28 % de LDA, 900 mmol) y THF (504 mi) en un reactor inerte separado y se enfrió hasta de -20 °C a -25 °C. La solución enfriada del compuesto 1, THF (84 mi) y clorotrimetilsilano se cargó en la solución de LDA a de-20 °C a -25 °C. Después, la mezcla de reacción se agitó durante 2 horas. Para el procesamiento, la mezcla de reacción se añadió a una solución acuosa preenfriada de ácido cítrico (34,6 g en 300 mi) a de 2 °C a 8 °C. Tras la adición, la fase acuosa se separó y se desechó. De la fase orgánica se eliminó el líquido mediante destilación al vacío a un máximo de 50 °C El residuo aislado contenía el compuesto 3 y algunos disolventes residuales y se usó "como tal" en la etapa siguiente.
Etapa 3- Preparación de éster metílico de ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5B-colan-24-oico . - ; Reacción 3: Condensación aldol del sililenoléter y acetaldehído El compuesto 3 (164,68 g, 300 mmol, calculado como la sustancia seca) en TH se cargó en un reactor inerte. A una temperatura máxima de 50 °C, cantidades residuales del disolvente se eliminaron mediante destilación al vacío. El contenido de agua en el residuo se limitó a £ 0.5 % (titulación de Karl Fischer) para proceder. Después, el residuo se disolvió en diclorometano (200 mi) y se enfrió previamente hasta -60 °C a -65 °C. Después se añadió acetaldehído (33,8 mi,. 600 mmol). En atmósfera de nitrógeno se cargó diclorometano (700 mi) y trifluoruro de boro (disolución de 16 % en peso en acetonitrilo, 318 g, 750 mmol) en un reactor separado y después se enfrió hasta-60 °C a -65 °C. A -60 °C a -65 °C.. se añadió la solución del compuesto 3 seco. La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente dos horas a -60 °C a-65 °C, se calentó hasta de 23 °C a 28 °C, se agitó durante aproximadamente otras 3 horas y se enfrió hasta aproximadamente de 2 °C a 10 °C para la hidrólisis/procesamiento. Para el procesamiento, la solución enfriada del reactor se añadió a una solución acuosa preenfriada del 50 % en peso de sosa cáustica (40 mi) y 660 mi de agua. Tras aproximadamente 10 minutos de agitación intensiva, se separaron las fases y la capa orgánica (inferior) se transfirió a un reactor separado. Se eliminó el disolvente de la capa orgánica mediante destilación a NMD 50 °C lo más posible. El residuo compuesto por el compuesto 4 y algo de acetonitrilo y diclorometano restante se descargó en tambores. El Compuesto 4A, una mezcla de isómeros E/Z también se puede preparar mediante el procedimiento descrito anteriormente para la etapa 3.
Etapa 4- Preparación de ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico (5): , , - - - - - - - - - - - - - - - Reacción 4: Saponificación del éster C-24 El compuesto 4 (258,37 g, 600 mmol, calculado como la sustancia seca) se cargó en un reactor inerte. A una temperatura de NMD 50 °C, las cantidades residuales del disolvente se eliminaron mediante destilación al vacío. El residuo se disolvió en metanol (360 mi) y se añadieron agua (54 mi) y sosa cáustica al 50 % en peso (54 mi). La mezcla se calentó hasta de 49 °C a 53 °C y se agitó a esta temperatura durante al menos 2 horas. El pH de la mezcla de reacción se comprueba y se verifica que es > 12. Si el pH es < 12, se añade NaOH adicional y se repite el tiempo de reacción de 2 horas. La solución se diluyó con agua (1000 mi) y la temperatura se ajustó a 25 °C a 35 °C. Para el procesamiento, la mezcla de reacción se dejó reposar durante al menos 30 minutos. Se separaron las fases y la capa acuosa inferior se transfirió a un reactor separado y la capa orgánica se descartó. A la capa acuosa se añadieron acetato de etilo (1.400 mi) y ácido cítrico acuoso (244 g en 480 mi) con agitación intensa. La mezcla de reacción se agitó a de 25 °C a 35 °C durante 10 minutos. Las fases se separaron y la capa acuosa inferior se descartó. El acetato de etilo se eliminó mediante destilación de la capa orgánica y se sustituyó por acetato de etilo (800 mi). Esta operación se repitió hasta que el contenido de agua del destilado es NMD 1 % o hasta que se alcanzó un punto de ebullición constante. La suspensión se enfrió hasta de 20 °C a 25 °C. se agitó durante 30 minutos y despues se aisló el producto y se lavó con acetato de etilo (100 mi, de 3 a 4 veces) El secado se realizó en un secador de tambor al vacío a aproximadamente 60 °C. El rendimiento es de 118,71 g (47,5 % de KLCA) del compuesto 5 bruto. Compuesto 4A, también se puede usar una mezcla de isómeros E/Z como material de partida para producir el compuesto 5A, una mezcla de isómeros E/Z .
Después se cristalizó el compuesto 5 usando etanol. El compuesto en bruto para cristalización también puede ser una mezcla de isómeros E/Z, compuesto 5A. Se cargaron etanol (390 a 520 mi) y el compuesto en bruto 5 (130 g) en un reactor inerte. Para disolver el compuesto 5 bruto, la mezcla de reacción se calentó hasta reflujo. Después, la mezcla de reacción se enfrió en una rampa de enfriamiento controlado hasta 15 °C a 20 °C en de 3 a 5 horas mediante un perfil lineal. El compuesto 5A cristalino se aisló usando una centrífuga y después se lavó con acetato de etilo (50-100 mi,. 2 veces). El secado se realizó en un secador de tambor al vacío y a aproximadamente 60 °C. Esto conduce a un rendimiento de 85,8 g (66 %). Se tomó una muestra para medir el ensayo, la pureza, y la humedad del compuesto 5 purificado. El compuesto 5 purificado es el isómero E del ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico. Véase en el Ejemplo 2 los detalles completos respecto a la identificación y caracterización del compuesto 5 purificado. Aislamiento del compuesto 5 purificado, el isómero E puede ser opcional. El isómero E y el isómero Z tienen solubilidades diferentes. El isómero E es menos soluble y cristaliza de un modo tal que el isómero Z se puede eliminar mediante lavado.
Un metodo alternativo para preparar el compuesto 5 es el siguiente. El compuesto 4 (111 ,96 g) se cargó en el reactor inerte. A un máximo de 50 °C, las cantidades residuales del disolvente (p. ej., acetonitrilo, diclorometano) se eliminaron mediante destilación a vacío. El residuo se disolvió en metanol (!56 mi) y se enfrió hasta aproximadamente 10 ° C. Se añadió agua corriente (23,4 mi) y sosa cáustica al 50 % (23,4 mi). La mezcla de reacción se agitó durante aproximadamente cuatro horas a aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C. La solución se diluyó con agua corriente (433 mi) y se añadió tolueno (144 mi). Después de agitar, las fases se separaron y la capa acuosa inferior se transfirió al reactor inerte. La capa orgánica se desechó. Durante agitación intensiva se añadieron a la capa acuosa éster etílico de ácido acético (607 mi) y una solución de ácido cítrico (105,7 g en 208 mi de agua). Las fases se separaron y la capa acuosa inferior se descartó. La capa orgánica se transfirió al reactor inerte. De la capa orgánica se eliminó por destilación el éster etílico del ácido acético y se sustituyó con éster etílico del ácido acético (347 mi). En una realización, la operación se repitió con éster etílico del ácido acético (173 mi) hasta que el contenido de agua del destilado no era superior a aproximadamente 1 % o hasta que se alcanzó un punto de ebullición constante. La presente suspensión se enfrió hasta de 20 °C a 25 °C. El compuesto 5 se aisló y se lavó con éster etílico del ácido acético (de 3 a 4 veces cada 43 mi) con centrífuga inerte. El secado se realizó en el secador de tambor al vacío y a aproximadamente 60 °C (rendimiento del 64,8 % en base al compuesto 1 ). El compuesto 4A (una mezcla de isómeros E/Z) también se puede usar como material de partida para la etapa 4 para producir el compuesto 5A (una mezcla de isómeros E/Z).
Etapa 5- Preparación de ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5B-colan-24-oico (6): . i Reacción 5: Hidrogenación del resto 6-etilideno Una mezcla del compuesto 5 purificado (110 g, 264 mmol), agua (1.100 mi), sosa cáustica (35,8 mi, 682 mmol) a 50 % y catalizador de paladio (Pd/C, 11 g) se cargaron en un reactor de hidrogenación. La temperatura se ajustó a de 25 °C a 35 °C y el reactor se lavó tres veces con nitrógeno (2 bares) y tres veces con hidrógeno (1 bar). Estos valores de presión se expresaron con respecto a la presión ambiental (= 0 bares). Se aplicó una presión de hidrógeno de 5 bares y la mezcla de reacción se calentó hasta 100 °C (para isomerización en la posición alfa) en un periodo de 1 ,5 horas y después se agitó durante 3 horas manteniendo la presión de hidrógeno a 4,5 a 5 bares. La mezcla de reacción se enfrió después a 40 °C a 50 °C. Para el procesamiento, el Pd/C se elimina mediante filtración. Al filtrado se añadieron acetato de n-butilo (1.320 mi) y ácido clorhídrico (67,8 mi, 815 mmol, 37 %). La fase acuosa se separó y se desechó. La fase orgánica se trató con carbono activado (5,5 g) durante aproximadamente 10 minutos a de 40 a 50 °C. El carbono activado se eliminó por filtración y el filtrado se condensó mediante destilación y la suspensión resultante se enfrió hasta de 15 °C a 20 °C en de 2 a 3 horas. El compuesto 6 precipitado se aisló el producto y se lavó con acetato de n-butilo (160 mi). El producto se filtró usando un filtro de presión. El secado se realizó en el filtro de presión al vacío a aproximadamente 60 °C. Esto conduce a 89,8 g (81 ,2 %) del compuesto 6. El compuesto 5A, una mezcla de isómeros E/Z . se puede usar en la etapa 5 para preparar el compuesto 6.
Etapa 6- Preparación de ácido 3a.7a-d¡hidroxi-6a-etil-5B-colan-24-oico (ácido obeticólico) . - ácido 3tt -hidroi -d «b -7-MIO- ¾p- colan-24-oico ácido 3u>¾· tffcüroiti- Mact- COÍ®»-24O*O 6 Forma C del ácido obetkóiko cristalino Reacción 6: Reducción selectiva del grupo 7-ceto en el grupo 7a-hidroxi Una mezcla del compuesto 6 (86 g, 205,4 mmol), agua (688 mi) y solución al 50 % de hidróxido sódico (56,4 mi) se hizo reaccionar con borohidruro sódico (7,77 g, 205,4 mmol) en una mezcla de solución al 50 % de hidróxido sódico (1.5 mi) y aguar (20 mi) a 90 °C - 105 °C. La mezcla de reacción se calentó a reflujo y se agitó durante al menos 3 horas. Para el procesamiento, despues de completada la reacción, la mezcla de reacción se enfrió hasta aproximadamente 80 °C y se transfirió a un reactor enfriado. A de 30 °C a 50 °C, se añadieron acetato de n-butilo (860 mi) y ácido cítrico (320,2 g anhidro) en agua (491 mi). La fase acuosa se separó y se descartó despues de comprobar el valor de pH - para garantizar que era ácida. La fase orgánica se transfirió y se destiló. El residuo se diluye con acetato de n-butilo y lentamente se enfrió hasta 15 °C a 20 °C y el ácido obeticólico en bruto se filtró usando una centrífuga. El producto se cristalizó en acetato de n-butilo. El producto ácido obeticólico se aisló y se lavó con acetato de n-butilo (43 mi, 4 veces) en un filtro de presión inerte. El secado se realizó en el filtro de presión al vacío a aproximadamente 80 °C. Esto condujo a 67,34 g (77,9 %) del ácido obeticólico cristalino. Véase en el Ejemplo 3 los detalles completos respecto a la identificación y caracterización del ácido obeticólico cristalino.
Etapa 7- Preparación de la forma 1 de ácido obeticólico: , Forma 1 de ácido obeticólico Forme C de ácido obeticólico cris aÉoo Reacción 7: Preparación de la forma 1 de ácido obeticólico a partir de la forma C de ácido obeticólico cristalino La forma C de ácido obeticólico cristalino (58 g) se disolvió en agua (870 mi) y solución de sosa cáustica (50 %, 8,79 mi, 166 mmol) a 30 °C - 40 °C. La mezcla se agitó hasta que se disolvió todo el sólido. El producto se precipitó usando el procesamiento siguiente. La solución de ácido obeticólico se añadió lentamente a través de un filtro al ácido clorhídrico diluido (37 %, 16,05 mi, 193 mmol) en agua (870 mi) a 30 °C - 40 °C. La suspensión se agitó durante aproximadamente 30 minutos a de 30 a 40 °C y después se enfrió a no más de (NMT) 20 °C. El producto se aisló y se lavó con agua (465 mi, 6 veces) en un filtro de presión inerte. El secado se realizó en el filtro de presión al vacío a una temperatura de NMD 50 °C. Esto condujo a 53,2 g (91 ,7 %) de la forma 1 de ácido obeticólico.
EJEMPLO 2: Caracterización de ácido E-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5B-colan-24-oico El compuesto 5 es el intermedio clave para el proceso de la solicitud. El compuesto se aisló en acetato de etilo y después se cristalizó en etanol. El compuesto 5 altamente puro permite una producción eficiente y un rendimiento elevado del compuesto 6 y, posteriormente, la forma C de ácido obeticólico cristalino y la forma 1 de ácido obeticólico, incluyendo ácido obeticólico sustancialmente puro.
La estructura del compuesto 5 de la etapa 4 en el ejemplo 1 se confirmó usando RMN de 1H, RMN de 13C, y espectrometría de masas. El producto en bruto de la etapa 4 tuvo como resultado un producto mayoritario en el tiempo de retención (TR) 27,457 min y un producto minoritario a TR 28,078 min en el cromatograma UV generado mediante el método de control de calidad 1 por medio de acoplamiento CL/EM. Los dos productos son los isómeros E/Z del compuesto 5.
Fórmula molecular) C26H40O4 Estos dos isómeros muestran la misma masa precisa y la misma fragmentación en el espectro EM/EM. No se pueden distinguir mediante los datos de la espectrometría de masas.
Usando un método semipreparativo para aislar los picos del isómero E/Z, las estructuras de los isómeros E/Z se confirmaron usando un abordaje de dos etapas. El método 1 de control de calidad de la HPLC usó un tampón de ácido fosfórico no volátil y, por tanto, no fue posible el acoplamiento directo de CL/EM con el tampón no volátil. Las pruebas preliminares para el ajuste del método mostró que sólo un método UPLC permitió números muy altos de platos para una separación adecuada de los isómeros E/Z. El abordaje de dos etapas fue el siguiente: La Etapa 2 fue la identificación de los isómeros E/Z en dos muestras con el nuevo método UPLC/EM desarrollado y le Etapa B fue el aislamiento de la fracción de los picos de los isómeros E/Z con el método 2 de HPLC y la posterior identificación con el método 1 UPLC/EM. Los detalles experimentales de los métodos fueron los siguientes: Tabla C Los resultados se muestran en las figuras 1 y 2. Las Figuras 1 y 2 son cromatogramas de UPLC UV/EM para "compuesto 5 en bruto" (Figura 1) y el compuesto 5 "de referencia purificado" (Figura 2) obtenidos en una columna de UPLC de alto rendimiento. Para la Figura 1, la muestra se disolvió a 1 mg/ml en ACN/H2O 1:1; 200 x 2 mm Hypersil GOLD R122; LMA:H20+10mM AF + 0,1 % de HFo; LMB:ACN; 45 %-20-60 %(10); 0,4 ml/min; 40°C; UVA=200nm; volumen de inyección 3 mI Para la Figura 2, la muestra se disolvió a 1 mg/ml en ACN/H20; 200 x 2mm Hypersil GOLD R122; A: AF10mM + 0,1 % de HFo; B:ACN; 45 %-20-60 %B(10); 0,4 ml/min; volumen de inyección 20 ml En ambas muestras, el peso molecular del componente principal (TR 9,92 min) y del componente minoritario (TR, 10,77 min) fue el mismo que el esperado y las masas precisas de los dos compuestos fueron consistentes con las estructuras proporcionados como se muestra en las Tabla D y E de los datos de la medición de iones positivos y negativos que se muestra a continuación: Tabla D Datos de la medición de iones positivos Tabla E: Datos de la medición de iones negativos Para garantizar la portabilidad del metodo 2 de HPLC de control de calidad, la separación original se repitió exactamente en las condiciones prescritas. El pico principal y el pico minoritario se aisló como semipreparativo. El cromatograma UV resultante con las posiciones marcadas délas fracciones atrapadas se muestra en la Figura 3. La Figura 3 es un cromatograma UV del compuesto en bruto 5 usando el método 2 HPLC 125 x 4mm Purospher STAR C18 5 mm AG; LMA:H20 pH 2,6 mit H3P04; LMBACN; 30 % de B-10-35 %-30-60 %-1-90 %(9); 1 ml/min; 35°C; UVA=200nm; una EM: 25 mi. Posteriormente, Las fracciones aisladas se analizaron por separado con el metodo UPLC/EM recién desarrollado. Para la evaluación de la traza iónica precisa del ion cuasimolecular se usó [2M+NH4] a 850., 61914 ± 3 ppm Los cromatogramas resultantes de la fracción del pico principal, la fracción del pico minoritario y de las dos muestras se muestran en la Figura 4A-4D. Los estudios de EM mostraron que los dos picos generados por el método 2 de control de calidad a TR 27,457 min y a TR 28,278 min son dos isómeros con la fórmula C26H40O4. Esta fórmula es consistente con la estructura propuesta para los isómeros E/Z. De esta manera, el desarrollo del método UPCL-EM ha demostrado que los isómeros E/Z de ácido 3a-hidroxi-etiliden-7-ceto-5 -cólico-24 se separan por cromatografía de alta resolución. Los datos de EM precisos del espectrómetro de masas FR-ICR son consistentes con la estructura propuesta para los isómeros E/Z. Para ambos isómeros, se derivó la misma fórmula C26H40O4.
Debido al aislamiento semipreparativo de los picos del isómero E/K con el método 2HPLC y la posterior identificación con el método upKC-EM, se pueden mostrar que los dos picos generados por el método de control de calidad (TR 27,457 y TR 28,28 minutos, (véase la figura 1) son los dos isómeros con la fórmula C26H40O4. Esta fórmula es consistente con la estructura propuesta para los isómeros E/Z. Junto con los resultados de RMN descritos más adelante se obtuvieron las siguientes asignaciones: TR 27,457 minutos pertenece al isómero E y TE 28,078 minutos al isómero Z.
La asignación de los desplazamientos de 1H y 13C para el isómero E del ácido 3a-hidroxi-etiliden-7-ceto-5p-cólico-24 se muestran a continuación. Los desplazamiento se estimaron conforme a "L Bettarello et al., II Fármaco (2000), 51-55 (sustancia ácido 3a-hidroxi-7-ceto-53-colan-24-oico).
! Tabla F: Asignación del desplazamiento 1H (RMN de 1H, 500 MHz, 303K, CD3OD, Tabla G: Asignación del desplazamiento 13C (RMN de 13C, 125 MHz, 303K, CD3OD s= singlete d= doblete t = triplete c =cuadruplete m =multiplete dd = doblete de dobletes dt = doblete de tripletes EJEMPLO 3: Caracterización de la forma C de ácido obeticólico cristalino La caracterización en estado sólido completo del producto de la etapa 6 del Esquema 1 y el Ejemplo 1 mostraron que el ácido obeticólico es cristalino. Esta forma cristalina es la forma C marcada. A continuación se incluye una tabla que resume la caracterización de la forma C del ácido obeticólico: Tabla G: Resumen de las características de la forma C de ácido obeticólico cristalino Análisis térmico Se recogieron datos de DSC (calorimetría de barrido diferencial) en un Mettler DSC 823e equipado con un automuestreador de 34 posiciones. Se calibró la energía y la temperatura del instrumento usando indio certificado. Normalmente 0,5-1 mg de cada muestra en una bandeja de aluminio perforada, se calentó a 10 °C min 1 desde 25 °C a350 °C. Se mantuvo una purga de nitrógeno a 50 ml rnin 1 sobre la muestra. El software de control y de análisis de datos del instrumento fue STARe v9.20.
Los datos de TGA (análisis termogravimetrico) se recogieron en un Mettler TGA/SDTA 851e equipado co un automuestreador de 34 posiciones. Se calibró la temperatura del instrumento usando indio certificado. Normalmente, 5-10 mg de cada muestra se cargaron en un crisol de aluminio previamente pesado y y se calentaron a 10 °C.min 1 desde la temperatura ambiente a 350 °C. Sobre la muestra se mantuvo una purga de nitrógeno a 50 ml.min 1. El software de control y de análisis de datos del instrumento fue STARe v9.20.
Se observaron dos etapas de pérdida de peso mediante TGA de la forma C de ácido obeticólico cristalino. La primera tuvo lugar entre la temperatura ambiente (ta) y 85 °C (0,41 %) y la segunda se produjo entre 85 °C-115 °C (4., 10 %). La primera etapa de pérdida de peso se puede atribuir a la pérdida de agua y la segunda etapa se atribuye a la pérdida del agua restante (agua responsable de aproximadamente 1,2 % de pérdida de peso) y le pérdida de heptano unido (aproximadamente 3,4 % de pérdida de peso). La forma C de ácido obeticólico cristalino contenía entre 0,15 y 0,2 moles de disolvente (heptano) y aproximadamente 1,5 % p/p (0,3 moles). El termograma DSC de la forma C de ácido obeticólico cristalino cristalina contenía una endotermia. Esto fue bastante nítido y tuvo un inicio de aproximadamente 98 °C. Véase la figura 6. Diferentes disolventes tendrían diferentes puntos de ebullición y, por tanto, se evaporarían a diferentes temperaturas en los experimentos de DSC y TGA.
Análisis de difracción de rayos X en polvo (XRPD) Bruker AXS C2 GADDS Se recogieron patrones de difracción de rayos X en polvo en un difractómetro Bruker AXS C2 GADDS usando radiación Cu Ka (40 kV, 40 mA), etapa XYZ automatizada, vídeo microscopio láser para posicionamiento de automuestra y un detector de área bidimensional HiStar. La óptica de rayos X consistió en un espejo de múltiples capas Gobel acoplado con un colimador de perforación de 0,3 mm. Se realizó una comprobación semanal usando un NIST 1976 Corundum (placa plana) certificada estándar.
La divergencia del haz, es decir, el tamaño eficaz del haz del rayos X sobre la muestra, fue de aproximadamente 4 mm. Se usó un modo de barrido continuo Q-Q con una distancia del detector de muestras de 20 cm, que proporciona un intervalo 20 eficaz de 3,2 ° - 2,7 °. Típicamente, la mezcla se expuso al haz de rayos X durante 120 segundos. El software usado para la recogida de datos fue GADDS para WNT 4.1.16 y los datos se analizaron y presentaron usando Diffrac Plus EVA v 9.0.0.2 o v 13.0.0.2.
Condiciones ambientales: Las muestras ensayadas en condiciones ambientales se prepararon como especímenes de placa plana usando polvo según se recibieron sin molienda. Aproximadamente 1-2 mg de la muestra se comprimieron ligeramente sobre un portaobjetos de vidrio para obtener una superficie plana.
Condiciones no ambientales Las muestras ensayadas en condiciones no ambientales se montaron sobre una oblea de silicio con un compuesto conductor del calor. Después, la muestra se calentó hasta la temperatura adecuada a aproximadamente 10 °C.min-1 y después se mantuvo isotérmica mente durante aproximadamente 1 minuto antes de iniciar la recolección de datos.
Bruker AXS/Siemens D5000 Se recogieron patrones de difracción de rayos X en polvo en un difractómetro Siemens D5000 usando radiación Cu Ka (40 kV, 40 mA), Goniómetro Q-Q divergencia de V20 y rendijas receptoras, un monocromador secundario de grafito y un contador de centelleo. Se comprueba el rendimiento del instrumento usando un patrón Corundum certificado (NIST 1976). El software usado para la recogida de datos fue Diffrac Plus XRD Commander v2.3.1 y los datos se analizaron y presentaron usando Diffrac Plus EVA v 11.0.0.2 o v 13.0.0.2.
Las muestras se ensayaron en condiciones ambientales como especímenes de placa plana usando polvo según se recibieron. Aproximadamente 20 mg de la muestra se introdujeron suavemente en una cavidad cortada en la oblea de silicio de fondo cero (510) pulida.. La muestra se rotó en su propio plano durante el análisis. Los detalles de la recogida de datos son: · Intervalo angular: de 2 a 42 °2Q • Tamaño de etapa: 0,05 °2Q • Tiempo de recogida: 4 s etapa 1 Bruker AXS D8 Advance Se recogieron patrones de difracción de rayos X en polvo en un difractómetro Bruker AXS C2 GADDS usando radiación Cu Ka (40 kV, 40 mA), goniómetro Q-2Q y divergencia de V20 y rendijas receptoras, un monocromador Ge y un detector Lynxcye Se comprueba el rendimiento del instrumento usando un patrón Corundum certificado (NIST 1976). El software usado para la recogida de datos fue Diffrac Plus XRD Commander v 2.5.0 y los datos se analizaron y presentaron usando Diffrac Plus EVA v 1 .0.0.2 o v 13.0.0.2.
Las muestras se ensayaron en condiciones ambientales como especímenes de placa plana usando polvo según se recibieron. Aproximadamente 5 mg de la muestra se introdujeron suavemente en una cavidad cortada en la oblea de silicio de fondo cero (510) pulida.. La muestra se rotó en su propio plano durante el análisis. Los detalles de la recogida de datos son: • Intervalo angular: de 2 a 42 °2Q • Tamaño de etapa: 0,05 °2Q · Tiempo de recogida: 0,5 s etapa 1 El XRPD mostró que el o del aislado de la etapa 6 del proceso de la invención se recogió en un Bruker AXS D8 Advance. (Vease Figura 5) Los datos correspondientes al difracción de rayos X se presentan en la tabla siguiente. El software usado para la recolección de datos fue Diffrac Plus XRD Commander v2.6.1 y los datos se analizaron y presentaron usando Diffrac Plus EVA V13.0.0.2 or v15.0.0.0. Las muestras se ensayaron en condiciones ambientales como especímenes de placa plana usando polvo según se recibieron. La muestra se introdujeron suavemente en una cavidad cortada en la oblea de silicio de fondo cero (510) pulida.. La muestra se rotó en su propio plano durante el análisis. Los detalles de la recogida de datos son: • Intervalo angular: de 2 a 42 °2Q • Tamaño de etapa: 0,05 °20 · Tiempo de recogida: 0,5 s etapa 1 Tabla H: Datos del difractograma de rayos X de la forma C de ácido obeticólico cristalino VT-XRPD (Difracción de rayos X-Temperatura variable) reveló que la endotermia observada en el termograma DSC correspondía a la desolvatación de la muestra, ya que no se observaron cambios en la forma con el calentamiento. Existe una diferencia de temperatura entre los datos de DSC y de VT-XRPD, ya que el experimento de VT-XRPD se llevó'a cabo en un espacio grande con la muestra expuesta mientras que el experimento DSC se llevó a cabo en un espacio confinado cerrado. Esta diferencia es de aproximadamente 20 °C y explica por que la muestra se fundía a una temperatura mucho menor en el experimento DSC y la muestra sigue apareciendo cristalina a 110 °C en el experimento VT-XRPD. VT-XRPD muestra que el secado del disolvente del material tenía como resultado una pérdida de cristalinidad que es consistente con el material en forma solvatada. Véase Figura 7.
Sorción de vapor qravimétrica (GVS) Las isotermas de sorción se obtuvieron usando un analizador de porción de humedad SMS DVS Intrinsic controlado por el software SMS Analysis Suite. La temperatura de la muestra se mantuvo a 25 °C mediante los controles del instrumento. La humedad se controló mezclando corrientes de nitrógeno seco y húmedo con un caudal de 200 ml-min 1. La humedad relativa se midió mediante una sonda Rotronic calibrada (intervalo dinámico de 1,0-HR del 100 ), localizado cerca de la muestra. El cambio del peso, (relajación de la masa) de la muestra como función del % de HR se monitorizó de un modo constante mediante la microbáscula (exactitud ±0,005 mg). de 5 a 20 mg de la muestra se introdujeron en una cesta de acero inoxidable de malla tarada en condiciones ambientales. La muestra se cargó y se descargó a una HR del 40 % y a 25 °C (condiciones ambiente típicas). Se realizó una isoterma de sorción de humedad como se indica más adelante (2 barridos que dan 1 ciclo completo). La Isoterma estándar se realizó a 25 °C a intervalos de HR del 10 % sobre un intervalo de HR de 0,5-90 %. El análisis de datos se realizó en Microsoft Excel usando DVS Analysis Suite v6.0.0.7. Los parámetros del metodo para los experimentos SMS DVS Intrinsic fueron los siguientes: La muestra se recuperó tras la finalización de la isoterma y se volvió a analizar mediante XRPD.
El análisis de la forma C de ácido obeticólico cristalino mostró que la muestra era ligeramente higroscópica porque un incremento de masa de 1,18 % se observó a una HR entre 0-90 %. Esta captación de agua fue constante durante el análisis y el equilibrio se alcanzó para todas las etapas. La histéresis de la curva fue pequeña, lo que indica que la muestra perdió fácilmente el agua que había captado. El análisis XRPD tras el análisis GVS mostró que la muestra no se había modificado. Véanse las figuras 8A, 8B, y 8C.
Determinación del agua mediante titulación de Karl Fischer (KF) El contenido en agua de cada muestra se midió en un colorímetro Mettler Toledo DL39 usando reactivo Hydranal Coulomat AG y una purga con argón. Las muestras sólidas pesadas se introdujeron en el vaso sobre una placa de TGA de platino, que se conectó con un subaseal para evitar la entrada de agua. Para la titulación se usaron aproximadamente 10 mg de la muestra y se realizaron determinaciones por duplicado.
El análisis de Karl Fischer mostró que la forma C de ácido obeticólico cristalino contenía 1 ,5 % de agua, que corresponde a aproximadamente 0,3 oles de agua.
Estabilidad a una semana a 40 °C v HR del 75 % La estabilidad del ácido obeticólico a 40 °C y HR del 75 % (humedad relativa) se determinó del siguiente modo. Una muestra de ácido obeticólico se almacenó en una cámara de humedad durante una semana a 40 °C y HR del 75 % La muestra se volvió a analizar mediante XRPD y se halló que no estaba modificada.
El estudio en estado sólido ha demostrado que la presencia de una cantidad relativamente grande de disolvente orgánico es necesaria para cristalizar la formar C del ácido obeticólico. Es muy improbable que una muestra de la forma 1 de ácido obeticólico cristalizará de forma espontánea para formar la forma C de ácido obeticólico durante el almacenamiento.
EJEMPLO 4: Formulación de comprimidos de ácido obeticólico La tabla siguiente muestra la composición cuantitativa del ácido obeticólico en comprimidos. Las formulaciones de 5 mg, 10 mg, y 25 mg se han usado como material del ensayo clínico de fase 3.
Tabla I: Comprimidos recubiertos con película API Ingrediente farmaceutico activo HSE = especificación interna USP-NF = Formulario Nacional de la Farmacopea de EE.UU.
Ph Eur = Farmacopea Europea JP =Farmacopea Japonesa ‘cantidad de ácido obeticólico presentada supone que el API es anhidro y 100 5 puro; la cantidad real se ajusta en base a la potencia del lote de la sustancia farmacológica usado y la cantidad de celulosa microcristalina disminuye en consecuencia.
EJEMPLO 5: Caracterización de la la forma 1 de ácido obeticólico.
La forma 1 de ácido obeticólico se refiere a una forma no cristalina de ácido obeticólico. Esta forma de ácido obeticólico se produce mediante un ácido obeticólico cristalino como un intermedio sintetico. La forma 1 de ácido obeticólico es la forma que se usa como ingrediente farmacéuticamente activo.. La forma 1 de ácido obeticólico se caracterizó y analizó del siguiente modo.
El lote 1 de la forma 1 de ácido obeticólico se caracterizó usando las téenicas siguientes; evaluación mediante difracción en polvo de rayos X (XRPD) para la cristalinidad. Resonancia magnética nuclear (RMN) de 1H y 13C Espectroscopia de infrarrojos por transformada de Fourier (FT-IT), evaluación óptica (p. ej., tamaño/forma de partícula), propiedades térmicas (p. ej., calorimetría de barrido diferencial (DSC) y análisis termogravimétrico (TGA)), Determinación del agua mediante Karl Fischer (KF) almacenamiento a 40 °C y HR del 75 % y reanálisis tras 2 semanas mediante XRPD, pKa mediante método potenciométrico, Log P/D (octanol/agua) mediante potenciometría y estabilidad a la humedad usando sorción de vapor gravimétrico (GVS (p. ej., ciclo de sorción-desorción completo con análisis de sólidos recogidos mediante XRPD). Otros cinco lotes (p. ej., lote 2: 3, 4, 5, y 6) de la forma 1 de ácido obeticólico también se caracterizaron y compararon usando las técnicas siguientes: evaluación mediante XRPD y comparación con el patrón del lote principal 1. RMN de 1H o 13C, FT-IR, evaluación óptica (p. ej., tamaño/forma de partícula), propiedades térmicas (p. ej., DSC, TGA y microscopía con etapa en caliente) y determinación de agua mediante KF. Análisis de difracción de rayos X en polvo (XRPD) Se recogieron patrones de difracción de rayos X en polvo en un difractómetro Bruker AXS C2 GADDS usando radiación Cu Ka (40 kV, 40 mA), etapa XYZ automatizada, vídeo microscopio láser para posicionamiento de automuestra y un detector de área bidimensional HiStar. Las ópticas de rayos X consisten en un espejo multicapa Góbel sencillo acoplado con un colimador de poro de 0,3 mm. La divergencia del haz, es decir, el tamaño eficaz del haz del rayos X sobre la muestra, fue de aproximadamente 4 mm. Se empleó un modo de barrido continuo Q-Q con una distancia muestra - detector de 20 cm que dio un intervalo 2Q eficaz de 3,2 ° - 29,7 °. Típicamente, la mezcla se expuso al haz de rayos X durante 120 segundos. El software usado para la recogida de datos fue GADDS para WNT 4.1.16 y los datos se analizaron y presentaron usando Diffrac Plus EVA v 9.0.0.2 o v 13.0.0.2.
Las muestras ensayadas en condiciones ambientales se prepararon como especímenes de placa plana usando polvo según se recibieron sin molienda. Aproximadamente 1-2 mg de la muestra se comprimieron ligeramente sobre una oblea de silicio para obtener una superficie plana. Los difractogramas muestran que la forma 1 de ácido obeticólico es no cristalina (véase, la figura 10 y la figura 11).
Caracterización RMN Los espectros de RMN se recogieron en un instrumento Bruker 400 MHz equipado con un automuestreador y se controlaron con una consola DRX400. Se obtuvieron experimentos automatizados usando ICONNMR v 4.0.4 (compilación 1) funcionando con Topspin v 1.3 (nivel de parche 8) usando los experimentos cargados de Bruker convencionales. Para espectroscopia no rutinaria, se adquirieron datos a través de el uso de solo Topspin. Las muestras se prepararon en d6-DMSO, a menos que se indique lo contrario. Se llevó a cabo un análisis off-line usando ACD SpecManager v 9.09 (build 7703).
La Figura 12 muestra los espectros de RMN de 1H para el lote 1. También se registraron los espectros de RMN de 1H de los lotes 2-6 y se compararon con el espectro del lote 1. Véase Figura 13. Los espectros son todos similares pero con cantidades variables de agua. Se observan algunas diferencias en la integración del grupo grande de protones entre 0,75 ppm y 2 ppm, donde los picos se solapan y no se pueden integrar por separado. La Tabla J muestra el número total de protones integrados en los espectros de los lotes 1-6 teniendo en cuenta la variación en la región de 0,75-2 ppm.
Tabla J: El protón de ácido carboxílico se ha excluido, por tanto el número de protones debería ser 43 pero, en realidad, varía de 40 a 43 entre los 6 espectros. Sin embargo, el área de la que procede la variación es bastante amplia (0,75-2-ppm) y debido a la calidad del basal, esta no se puede considerar esta integración.
Dado que no se pudo asignar completamente el espectro y la integración había variado, se registró un espectro de RMN de 13C del lote 2. La Figura 14 muestra el espectro DEPTQ en el que los picos de CH2 y los carbonos cuaternarios apuntan hacia arriba mientras que los grupos de CH3 y CH puntan hacia abajo. Hay trece picos apuntando hacia abajo, que corresponden a nueva grupos CH y a cuatro grupos CH3. Esto es consistente con la estructura. El pico del carbono del ácido carboxílico se observó a 175 ppm. Se ha excluido de esta vista expandida por claridad del área de interes. Sin embargo, solo hay once picos apuntando hacia arriba, mientras que debería haber doce, ya que hay diez grupos CH2 y dos carbonos cuaternarios en la molécula (Excluyendo el carbonilo). Un carbono aparece solapando con otra señal. Por lo tanto, se recogió espectro DEPT135 suprimiendo las señales de carbono cuaternarias, lo que podría mostrar mejor que la señal solapante es cuaternaria. Véase Figura 15. Una comparación del espectro DEPT135 y el espectro DEPTQ muestra que un pico (a 42,5 ppm) desaparece. Existen dos carbonos cuaternarios en la molécula, que deberían corresponder a dos picos que desaparecen. Por tanto, la señal del carbono solapante es una cuaternaria.
Además, se llevó a cabo un experimento para determinar el tiempo de relajación de los carbonos para determinar donde la señal de carbono cuaternario que falta solapa con otra señal de carbono. Véase la Figura 16. El espectro de 13C contiene picos que estaban integrados. Esto mostró que el pico a 32,3 ppm representa dos carbonos. Vease la figura 17 para una vista expandida del pico a 32,3 ppm. De esta manera, ahora hay veintiséis carbonos representados por las integraciones (incluyendo el ácido carboxílico). lo que es consistente con la estructura.
FT-IR mediante ATR Los datos se recogieron en un Perkin-Elmer Spectrum One equipado con un accesorio de muestreo Universal ATR. Los datos se recogieron y analizaron usando el software Spectrum v5.0.1. Véase la Figura 18.
Análisis térmico mediante Calorimetría de barrido diferencial (DSC) v análisis termoqravimétrico (TGA) Los datos de DSC se recogieron en un TA Instruments Q2000 equipado co un automuestreador de 50 posiciones. Se calibró la energía y la temperatura del instrumento usando indio certificado. Normalmente 0,5-3 mg de cada muestra en una bandeja de aluminio perforada, se calentó a 10 °C min 1 desde 25 °C a350 °C. Se mantuvo una purga de nitrógeno a 50 ml-min 1 sobre la muestra. El software de control del instrumento fue Advantage para Q Series v2.8.0.392 y Thermal Advantage v4.8.3 y los datos se analizaron usando Universal Analysis v4.3A. Para DSC modulada, la muestra se preparó como se ha descrito en lo que antecede y el recipiente se calentó a 2 °C.min 1 de 25 °C a 200 °C. Las condiciones del modulador fueron una amplitud de 0,20 °C y una periodicidad de 40 s. El intervalo para la toma de muestras fue de T1 s/pt.
Los datos del TGA se recogieron en un TA Instruments Q500 TGA equipado con un automuestreador de 16 posiciones. Se calibró la temperatura del instrumento usando Alumel certificado. Normalmente se cargaron 5-10 mg de cada muestra en un crisol de platino previamente tarado y un recipiente para DSC de aluminio y se calentó a 10 °C min 1 desde la temperatura ambiente a 350 °C. Se mantuvo una purga de nitrógeno a 60 ml-min 1 sobre la muestra. El software de control del instrumento fue Advantage para Q Series v2.8.0.392 y Thermal Advantage v4.8.3.
Se realizó un análisis térmico del lote 1 mediante DSC y TGA. El trazado del TGA (véase la Figura 19) muestra una pérdida de peso de 1,7 % entre la temperatura ambiente y 121 °C, lo que es probable que sea pérdida de agua. El trazado de DSC (véase la Figura 19) muestra una amplia endotermia de temperatura baja, que probablemente corresponde a la pérdida de agua, seguido de una pequeña endotermia con inicio a94 °C.
Esta segunda endotermia podría indicar una transición vitrea y se investigó adicionalmente mediante DSC modulada (véase la Figura 20). Esta téenica permite separar los acontecimientos reversibles, como una transición vitrea, de los irreversibles, tal como una pérdida de disolvente o una fusión de una forma cristalina. El trazado del flujo de calor reversible en la DSC modulara muestra la transición vitrea como una etapa con un punto de inflexión (Tv) a 95 °C. Esto es elevado para una transición vitrea y sugiere que la forma 1 es estable. La pequeña endotermia con inicio a 89 °C en el trazado de flujo de calor no reversible corresponde a una relajación molecular del material a granel a la temperatura de transición vitrea.
El trazado de DSC (véase la Figura 19) muestra la descomposición que comienza aproximadamente a 220° C, que también corresponde al trazado de TGA que se curva hacia abajo.
Los trazados de TGA de los lotes 1, 2, 3, 4, 5, y 6 tienen una forma similar (Figura 21). Las pérdidas de peso medidas entre la temperatura ambiente y 120 °C se muestran en la Tabla K. Son consistentes con las cantidades variables de agua observadas mediante RMN. Estas cantidades se cualificaron además mediante titulación del agua de Karl Fischer (KF). Véase la determinación de agua mediante KF.
Tabla K: Resumen de las pérdidas de peso en TGA de las muestras recibidas La Figura 22 muestra los trazados de DSC de seis lotes para comparar. Los trazados son similares con una amplia endotermia de temperatura baja de tamaño variable consistente con cantidades variables de agua, seguido de una pequeña endotermia alrededor de la temperatura de transición vitrea como se ve en la sección DSC y TGA. Los resultados se resumen en la Tabla L.
Tabla L: Resumen de los resultados de DSC de las muestras recibidas Microscopía de luz polarizada (PLM) Las muestras se estudiaron en un microscopio de luz polarizada LM/DM con una cámara de vídeo digital para captura de imágenes. Se colocó en un portaobjetos una cantidad pequeña de cada muestra, se montó en aceite de silicona y se cubrió con un cubreobjetos, estando las partículas individuales lo más separadas posibles. La muestra se vio con el aumento adecuado y luz parcialmente polarizada acoplada a un filtro de color falso l .
Las Figuras 23A-23F muestran que los lotes 1 , 2, 3, 4, 5, y 6 son materiales formados por aglomerados duros grandes de partículas pequeñas irregulares. Los lotes 1 : 2, 3, 4, 5, y 6 tienen un aspecto similar. No se observó birrefrinegncia en luz polarizada plana, lo que es consistente con que el material no sea cristalino. El tamaño de las partículas varía desde menos de 1pm a 3 pm. El tamaño pequeño de estas partículas sugiere que se han precipitado muy rápidamente.
Sorción de vapor qravimetrica (GVS) Las isotermas de sorción se obtuvieron usando un analizador de porción de humedad SMS DVS Intrinsic, controlado con un software SMS Analysis Suite. La temperatura de la muestra se mantuvo a 25 °C mediante los controles del instrumento. La humedad se controló mezclando corrientes de nitrógeno seco y húmedo con un caudal de 200 ml min 1. La humedad relativa se midió mediante una sonda Rotronic calibrada (intervalo dinámico de 1,0-HR del 100 ), localizado cerca de la muestra. El cambio del peso, (relajación de la masa) de la muestra como función del % de HR se monitorizó de un modo constante mediante la microbáscula (exactitud ±0,005 mg).
Normalmente, 5-20 mg de la muestra se introdujeron en una cesta de acero inoxidable de malla tarada en condiciones ambientales. La muestra se cargó y se descargó a una HR del 40 % y a 25 °C (condiciones ambiente típicas). Se realizó una isoterma de sorción de humedad como se indica más adelante (2 barridos que dan 1 ciclo completo). La isoterma estándar se realizó a 25 °C a intervalos de HR del 10 % sobre un intervalo de HR de 0,5-90 %.
Tabla M La isoterma de sorción de vapor gravimétrica (GVS) se obtuvo para el lote 1 a 25 °C y se muestra en la Figura 24. La muestra parece ser moderadamente higroscópica, con un cambio de peso total de 3,8 % de 0 a 90 % de humedad relativa (HR). La histéresis (área entre las curvas de adsorción y desorción) es pequeña, lo que indica que el sólido libera bastante fácilmente el agua adsorbida. No se observa formación de hidrato. No se produjo un cambio significativo de peso después de todo el experimento (0,3 %).
El gráfico de la cinética de la GVS (Figura 25) muestra que la adsorción del agua se producía principalmente a humedades muy altas y la desorción a humedades muy bajas. En la fase de adsorción, la muestra alcanzó el equilibrio bastante rápido hasta una HR del 80 % y requirió más tiempo para equilibrarse a HR del 90 %. Con la desorción, la masa se estabilizó en todas las etapas.
Despues de que se completara la GVS, se recuperó la muestra y se volvió a analizar con XRPD, que mostró que el material seguía siendo no cristalino (Figura 26).
Determinación del agua mediante Karl Fischer (KF) El contenido en agua de cada muestra se midió en un colorímetro Mettler Toledo DL39 usando reactivo Hydranal Coulomat AG y una purga con argón. Las muestras sólidas pesadas se introdujeron en el vaso en un recipiente de platino para TGA, que se conectó a un subsello para evitar la entrada de agua. Para la titulación se usaron aproximadamente 10 mg de la muestra y se realizaron determinaciones por duplicado.
La titulación del agua mediante Karl Fischer colorimétrica dio como resultado 2,4 % en peso de agua. Esto es ligeramente mayo que la pérdida de peso observada mediante TGA. Podría significar que parte del agua no se libera del material al calentarlo, pero es probable que se deba a los diferentes procedimientos experimentales para estas dos téenicas.
El contenido de agua de cada lote se determinó mediante titulación colorimétrica de Karl Fischer. La tabla N muestra estos resultados y los compara con los resultados anteriores de Karl Fischer obtenidos y con las pérdidas de peso observadas mediante TGA. Los datos son consistentes, ya que la tendencia es la misma en los tres análisis. Los datos de Karl Fischer obtenidos anteriormente muestran cantidades menores de agua que los resultados obtenidos aquí. Esto es consistente con que el material sea higroscópico, aunque algunas muestras han captado más agua que otras. La perdida de peso en TGA es consistentemente menor que los resultados obtenidos mediante titulación de Karl Fischer, lo que podría significar que parte del agua permanece atrapada en el material y no se libera al calentar, pero también podría deberse al procedimiento experimental. Tabla N: Resultados de Karl Fischer (KF) y resumen de los datos del contenido de agua Determinación v predicción de la pKa Los datos para la determinación de la pKa se recogieron en un instrumento Sirius GlpKa con un accesorio D-PAS. Las mediciones de realizaron a 25 °C en solución acuosa mediante UV y en mezclas de agua y metanol mediante potenciometría. El medio de titulación se ajustó según la fuerza iónica (ISA) con KCI 0,15M (ac.). Los valores hallados en las metanol de metanol y agua se corrigieron al 0 % de codisolvente mediante extrapolación de Yasuda-Shedlovsky. Los datos se perfeccionaron usando el software Refinement Pro v1.0. La predicción de los valores de pKa se realizó usando un software de predicción de pKa ACD v9.
La pKa del ácido obeticólico se midió mediante potenciometría usando metanol como codisolvente (Figura 27) y se extrapoló al 0 % de codisolvente usando una extrapolación de Yasuda-Shedlovsky (Figura 28). La pKa permite la determinación de la proporción de la forma neutra e ionizada del compuesto a un pH dado. La Figura 29 muestra la distribución de la especie en función del pH. Determinación del Loo P Los datos se recogieron mediante titulación potenciométrico en un instrumento Sirius GlpKa usando tres proporciones de octanohagua ajustada según la fuerza iónica (ISA) para generar los valores de Log P, Log Pión, y Log D. Los datos se perfeccionaron usando el software Refinement Pro v1.0. La predicción de los valores de Log P se realizó usando el software ACD v9 y Syracuse KOWWIN v1.67.
Tabla O: LogP predicho y medido El LogP se predijo usando software ACD, despues se midió mediante potenciometría. Se realizaron tres titulaciones a tres proporciones diferentes de octanol/ISA agua, dando la curva de diferencias representada en la Figura 30. La curva negra es la titulación de pKa acuosa pura y las curvas de 3 colores corresponden a las tres proporciones de octanol/ISA agua. Los desplazamientos en la pKa permiten la determinación de LogP.
La curva de lipofilicidad (logD como una función del pH) se muestra en la Figura 31. El logD es el coeficiente de distribución, que representa la lipofilicidad combinada de todas las especies presentes a un pH específico. El LogP es una constante del compuesto, que corresponde al coeficiente de reparto de la especie neutra pura, mientras que LogPion es el de la especie ionizada pura. LogP y LogPion se puede determinar a partir de la curva de lipofilicidad, como la intersección del eje Y con, respectivamente, la tangente al inicio de la escala del pH (cuando la molécula está puramente en su forma neutra) y la tangente al final de la escala de pH (cuando la molécula está completamente ionizada).
Estabilidad a dos semanas a 40 °C y HR del 75 % v a 25 °C v HR del 97 % Una muestra del lote 1 se almacenó a 40 °C y a una humedad relativa (HR) del 75 % en una prueba de estabilidad acelerada de la forma sólida. Otra muestra se almacenó a 25 °C y a una humedad relativa del 97 % para comprobar el efecto de la humedad muy alta. Ambas muestras se volvieron a analizar mediante XRPD tras cinco días y tras dos semanas. Ambas muestras permanecieron no cristalinas en las dos condiciones de almacenamiento durante hasta dos semanas, lo que muestra que la forma 1 es estable en estas condiciones. Vease la figura 32 y la figura 33.
Los seis lotes analizados eran todos no cristalinos. La temperatura de transición vitrea se midió a 95 °C con un experimento de DSC modulada. Los seis lotes parecieron muy similares con todas las téenicas analíticas usadas, siendo la única diferencia entre ellas su contenido en agua, que varió de 1,9 % a 2,8 % mediante titulación de Karl Fischer. El análisis térmico mostró la cantidad variable de agua e indicó descomposición comenzando aproximadamente a 175-220°C. La pKa medida fue 4,82 y el LogP es 5,4. La evaluación microscópica mostró aglomerados duros grandes de partículas irregulares muy pequeñas.
Los ensayos de estabilidad mostraron que el material todavía no era cristalino tras dos semanas en condiciones aceleradas (40°C / HR del 75 %) o a una humedad alta (25°C /HR del 97 %). El análisis de sorción de vapor gravimétrica (GVS) mostró que el material era únicamente moderadamente higroscópico, con una ganancia de peso total de 3,8 % de 0 a 90 % de humedad relativa (HR). No se observó formación de hidrato en GVS. La muestra reanalizada mediante XRPD tras GVS seguía siendo no cristalina. La temperatura de transición vitrea y los resultados de los ensayos de estabilidad sugieren que la forma no cristalina es estable.
EJEMPLO 6: Estructura de ravos X de cristal único v estereoquímica absoluta La estructura de rayos X de cristal único del ácido obeticólico se determinó a partir de un cristal obtenido de la rescristalización de ácido obeticólico de una solución de acetonitrilo tras enfriar hasta 5 °C a 0,1 ° C/min, seguido de maduración a ciclos de TA/50 °C de 8 horas durante 1 semana (véase la Figura 34). La estructura es consistente con la forma G y se ha generado un patrón de XRPD simulado como patrón de referencia para este material. La forma G se puede preparar mediante enfriamiento de una solución del ácido obeticólico en, por ejemplo, acetonitrilo.
La estructura es ortorómbica, grupo espaciador P2i2i21t y contiene una molécula de ácido obeticólico en la unidad asimétrica. Final R1 [I>2s(I)] = 3,22 %. El cristal exhibió una morfología de prisma de dimensiones aproximadas de 0,4 x 0,4 x 0,3 mm. La estereoquímica absoluta de la molécula se determinó como S en los centros quirales C5, C9, C10 y C14 y R en los centros quirales C3, C6, C7, C8, C13, C17 y C22 con un parámetro Flack = -0,01 (13). Para la estructura invertida con los centros quirales C5, C9, C10 y C14 y la configuración R y los centros quirales C3, C6, C7, C8, C13, C17 y C22 en la configuración S, el parámetro de Flack = 1,01(13), lo que confirma la asignación mencionada anteriormente.
En su conjunto, la estructura tenía un conjunto de datos fuerte y ningún desorden.
El software usado para asignar la estereoquímica (PLATON) determina el centro quiral (C8) como un estereocentro R. mientras que el software ACD (y el Cahn-Ingold-Prelog) la asignación para (C8) es S. No obstante, la asignación de la unión trans anillo para el sistema anular B/C se define de forma absoluta a partir de la estructura cristalina.
La determinación de la estructura absoluta usando estadística Bayesiana sobre las diferencias de Bijvoet, (Hooft et al., J. Appl. Cryst., (2008), 41, 96-103), revela que la probabilidad de que la estructura absoluta tal como se presenta sea correcta es 1,000, mientras que las probabilidades de que la estructura absoluta sea una gemela racemica o falsa son 0,000 y 0,000, respectivamente. El equivalente de Flack y si incertidumbre se calculan a través de este programa como -0,019 (17).
La estructura del ácido obeticólico contiene un anillo de cinco miembros y anillos de 3 a 6 miembros que se condensan. El análisis conformacional en el anillo de 5 miembros (C13, C14, C15, C16 y C17)) revela que el descriptor de pliegue más cercano para este anillo es una semisilla. El análisis conformacional en los anillos de tres a 6 miembros (C1, C2, C3, C4, C5 y C10); (C5, C6, C7, C8, C9 y C10) y (C 8, C9, C11, C12, C13 y C14) revela que el descriptor de pliegue más cercano para estos anillos es una silla.
En la estructura cristalina se observan dos únicos puentes de hidrógeno intermoleculares. Cada molecula de ácido obeticólico forma un puente de hidrógeno con dos moléculas relacionadas de simetría diferente del ácido obeticólico, con los oxígenos, 01 y 04, actuando como donantes a los oxígenos, 03 y 01 respectivamente, actuando como aceptores, 01— H1C— 03 [D- A = 2.7419(12)A] and 04— H4C— 01 [D- A = 2.6053(13)A (véase la Figura 35). Estas interacciones tienen como resultado una compleja red tridimensional unida por hidrógenos. El mapa final de la diferencia de Fourier muestra densidades de electrones máximas y mínimas de 0,402 y -0,176 eA-3, respectivamente.
Un exceso del patrón de XRPD calculado para la estructura con los lotes experimentales muestra que el cristal es consistente con el volumen principal y es la forma G del ácido obeticólico (véase la Figura 36).
Tabla 1. Datos del cristal para la Forma G del ácido obeticólico Disolventes de cristalización Acetonitrilo Método de cristalización Maduración a TR/50 °C Fórmula empírica C26 H44 O4 Peso de la fórmula 420,63 Temperatura 100(2) K Longitud de onda 1,54178 A Tamaño del cristal 0,40 x 0,40 , 0,30 mm Hábito del cristalina Prisma incoloro Sistema cristalino Ortorómbico grupo espaciador P2 fr, Dimensiones de la celula unitaria a = 8,72510(10) A a = 90° b = 12,69860(10) A b = 90° c = 22,5408(2) A g = 90° Volumen 2497,44(4) A3 Z 4 Densidad (calculada) 1,119 Mg/m3 Coeficiente de absorción 0,574 mm-1 F(000) 928 Tabla 2. Recolección de datos y refinado de la estructura para la forma G del ácido obeticólico Difractómetro SuperNova, Dual, Cu en cero, Atlas Fuente de radiación SuperNova (Cu) Fuente de rayos X, CuKa Método de recolección de datos barridos omega Intervalo de teta para la recolección de datos 9,15 a 74,49° Intervalos del índice -10 £ h £ 10, -15 £ k £ 15, -28 £ I £ 26 Reflexiones recogidas 50001 Reflexiones independientes 5073 [R(int) = 0,0220] Cobertura de las reflexiones independientes 99,4 % Variación en las reflexiones de comprobación N/A Corrección de la absorción Semiempírica de los equivalentes Transmisión max. y min. t 1.00000 y 0,78605 Téenica de solución de la estructura directa Programa de la solución de la estructura SHELXTL (Sheldrick, 2001) Técnica de refinamiento Mínimos cuadrados de la matriz completa en F2 Programa de refinamiento SHELXTL (Sheldrick, 2001) Función minimizada Datos / restricciones / parámetros 5073 / 0 / 286 Bondad del ajuste en F2 1,060 D/omax 0,001 índices R finales Datos 5039 l>2o(l) R1 = 0,0320, wR2 = 0,0859 todos los datos R1 = 0,0322, wR2 = 0,0861 Esquema de pesado cale w=1 / [o2 (F02)+( 0,0503P)2+0,5520P] donde P = (F02+2Fc2)/3, parámetro de estructura absoluta = -0,01 (13).
Pico y agujero más grande dif. 0,402 y -0,176 eA-3 El resumen del refinamiento de la estructura es el siguiente: átomos no H ordenados, XYZ de refinado libre átomos no H ordenados, U Anisotrópico Átomos H (en carbono) XYZ Posiciones idealizadas portadas sobre los átomos unidos Átomos H (en carbono) U Múltiplo adecuado de U(eq) para el átomo unido Átomos H (en heteroátomos), XYZ de refinado libre Atomos H (en heteroátomos), U Isotrópico Átomos desordenados, OCC Sin desorden Átomos desordenados, XYZ Sin desorden Átomos desordenados, U Sin desorden Ejemplo 7: Diferencia de biodisponibilidad entre la forma 1 del ácido obeticólico (no cristalino) v las formas cristalinas (Forma F) El estado físico de un ácido obeticólico sólido puede desempeñar un papel en la biodisponibilidad de la molecula cuando se administró por vía oral a un sujeto (p. ej., ratas). El estudio descrito a continuación se llevó a cabo para evaluar la cinética plasmática tras una única administración oral y la eficiencia de la absorción intestinal y la farmacocinética de las formas sólidas no cristalina y cristalina del ácido obeticólico. Los perfiles de la concentración en plasma del ácido obeticólico frente al tiempo. el tmax, la Cmax y la AUC se compararon tras la administración de la forma 1 (no cristalina) o la forma F de ácido obeticólico (véanse las Figuras 37-38).
La forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina) y la forma F se administraron a ratas y de cada animal se extrajo sangre a diferentes periodos de tiempo durante al menos 3 horas. Se estudiaron seis animales para cada forma de ácido obeticólico.
Protocolo experimental: La sustancia de ensayo usada fue la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina) y la forma F cristalina. La forma F se puede preparar mediante maduración de acetonitrilo o nitrometano. Las formulaciones se prepararon como una suspensión en agua a pH 4. El modelo del estudio es de ratas Sprague Dawlcy machos adultas de aproximadamente 225 a aproximadamente 250 g (Harían Laboratories). Se usaron seis animales por vía de dosis. La dosis es 20 mg/kg/ mi por vía oral. Los animales ayunaron durante la noche antes del tratamiento con la formulación de ácido obeticólico. La administración oral se realizó mediante sonda gástrica.
El día uno se introdujo en los animales una cánula implantada en la vena yugular izquierda (SOP VIVO/SAF6), la anestesia se obtuvo mediante isoflurano. El experimento se inició tras un día de recuperación de la cirugía. Se extrajeron aproximadamente 500 ml de sangre (250 pl de plasma) a través de una cánula en una jeringuilla heparinizada (heparina Na) y se recogió inmediatamente en microtubos en un baño de hielo/agua. En 1 hora, las muestras se centrifugaron a 10.000 x g durante 5 minutos a 4 °C. El plasma se transfirió inmediatamente en microtubos y se almacenó a -20 °C. Las muestras de sangre se recogieron 30 minutos, 1 hora, 1,3 hora, 2 horas, y 3 horas después de la dosis. Las muestras de plasma se analizaron usando el método cuantitativo de HPLC-ES/EM/EM. El estudio de farmacocinética se realizó usando métodos no compartimentales.
Resultados: Las concentraciones plasmáticas medias de obeticólico tras la administración de una única dosis oral de20 mg/kg de peso corporal de las dos formas sólidas se indican en la Figura 37. Los valores son la media de seis conjuntos de experimentos para cada formulación. Las desviaciones estándar se indican en el gráfico.
Tras la administración de la forma cristalina se alcanza la Cmax tras 1,5 horas y la concentración de ácido obeticólico sigue una cinética regular con un valor máximo y tras 3 horas la dosis es casi la mitad de la Cmax.
El perfil cinético tras la administración de la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina) es diferente de la de la forma F cristalina. Se obtiene un pico temprano de la concentración en plasma tras 30 minutos y un segundo tras 2 horas. La variabilidad de los datos en las 6 ratas es muy baja y este comportamiento es estadísticamente diferente del de la forma cristalina. La AUC para las tres horas estudiadas es mayor para la forma cristalina. La cinética sugiere que el ácido obeticólico todavía está presente en el plasma tras 3 horas. Previamente se ha demostrado que el paso de ácido obeticólico a través de la herida produce el tauroconjugado metabolito hepático que se secreta a la bilis y se acumula en la circulación enterohepática. De esta manera, la medición del tauro conjugado se puede usar para determinar el paso de la cantidad de ácido obeticólico a través del hígado. La tasa de formación del tauroconjugado se indica en la Figura 38, que muestra que la formación del tauroconjugado es más rápida y se alcanza una concentración más alta tras la administración de la forma cristalina.
Punto de fusión y transición vitrea El punto de fusión de la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina y la forma F cristalina se midieron usando un método convencional. El punto de fusión del ácido quenodesoxicólico y el ácido ursodesoxicólico se midieron como compuestos de referencia. Las mediciones se han realizado por triplicado. Para la forma cristalina, la transición del estado sólido al líquido se define como la temperatura de fusión (Tf) mientras que para la forma no cristalina se define como temperatura de transición vitrea (Tv), En la tabla se indican los valores medidos expresados tanto en °C como en °K.
Tabla 3: Puntos de fusión del ácido obeticólico (forma 1 y forma F) y CDCA y UDCA Resultados: Los valores obtenidos para CDCA y UDCA coinciden con los indicados anteriormente, mientras que el punto de fusión de UDCA es mayor que el de CDCA. La temperatura de transición vitrea Tv de la firma 1 (102-112 °C) es inferior a la temperatura del punto de fusión Tm de la forma F (120-124 °C). Este patrón observado coincide con los datos indicados anteriormente cuando se comparan las dos formas en estado solido. La forma F tiene una transición adicional a una temperatura más alta (235-237 °C).
La proporción entre la temperatura de punto de fusión más alta y la temperatura de transición vitrea expresadas en grados Kelvin es bastante similar a la de otros fármacos y otros ácidos biliares. (J. Kerc et al. Thermochim. Acta, 1995 (248) 81-95).
Análisis de calorimetría de barrido diferencial El análisis de calorimetría diferencial de barrido (DSC) se llevó a cabo para definir mejor los puntos de fusión y el estado físico del las formas de ácido obeticólico cristalina y no cristalina. El instrumento usado fue un Mettler Toledo DSC modelo 821 e Aproximadamente 4-5 mg de cada forma 1 y forma F se presentaron para su análisis. Los compuestos se expusieron al intervalo de temperatura de 30-300 °C a 10 °C/min de tasa de calentamiento.
La Figura 39 muestra la curva de DSC obtenida para la forma G de ácidos correspondientes Id -HCI obeticólico cristalino. Se detectó una transición endotermica a 120,04 °C correspondiente al punto de fusión del compuesto. Este resultado se confirmó también mediante microscopía en etapa de calor (HSM); en el intervalo de 30°-240 °C la transición sólido-líquido observada fue a 122-124 °C. En el trazado de la DSC, la forma y la intensidad del pico obtenido para la forma F coinciden con el comportamiento típico mostrado por las formas cristalinas. Sin embargo, la anchura del pico es bastante amplia; esto se puede deber a cristales no homogéneos. El análisis termogravimétrico (TGA) no mostró ninguna pérdida de peso en el intervalo de temperatura de 30-300 °C.
La Figura 40 muestra la curva de DSC obtenida para la forma 1 de ácido obeticólico no cristalina. Se observó una transición endotérmica a 79,95 °C . La forma y la intensidad del pico coinciden con el comportamiento esperado para los compuestos no cristalinos. Para estas sustancias se requiere energía para la transición sólido-líquido (transición vitrea) es menor que para los compuestos cristalinos. El termograma no mostró ninguna pérdida de peso en el intervalo de temperatura de 30-300 °C.
Solubilidad en agua La solubilidad en agua de la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina y la forma F cristalina se midió siguiendo los procedimientos conocidos en la téenica. Brevemente, el sólido se suspendió en agua a un pH bajo (HCI 0,1 mol/l) y se dejó equilibrar a 25 °C durante una semana en mezclado ligero. La solución saturada se filtró y la concentración del compuesto en solución se midió mediante HPLC-ES-EM/EM.
Resultados: La Forma 1 presenta una solubilidad más alta 17,9 pmol/l frente a 9,1 pmol/l para la forma F.
De acuerdo con los datos de biodisponibilidad del ácido obeticólico, la forma F cristalina es más alta que la forma 1 de ácido obeticólico (no cristalina). A pesar de un pico de concentración en plasma más temprano tras la administración e la forma 1 , los perfiles plasmáticos muestran que la forma F es absorbida con más eficiencia (mayor AUC) e incluso la cinética es más regular, lo que refleja una distribución óptima del fármaco en el contenido intestinal. La Forma 1 muestra este pico temprano, después un segundo pico con una Cmax inferior a la de la forma F.
La solubilidad en agua de la forma 1 es ligeramente mayor que la de la forma F. La forma F parece ser estable, ya que el análisis termogravimétrico (TGA) no mostró ninguna pérdida de peso en el intervalo de temperatura estudiado.
De acuerdo con estos resultados, la forma F, cuando se administra por vía oral, parece que se absorbe con más eficiencia por el intestino y es captada por el hígado. La tasa de formación del tauroconjugado del metabolito hepático es casi el doble para la forma F que para la forma 1, lo que sugiere un transporte más eficiente y la acumulación en la circulación enteropática y la concentración plasmática tras 3 horas.
Ejemplo 8: Preparación del ácido obeticólico radiomarcado El ácido obeticólico radiomarcado se preparó de acuerdo con el esquema siguiente.
Esquema 5 ’ ' 5X ácido [etil-1-14C]obeticólico = MC Los espectros de RMN se registraron en solución CDC13 y MeOD-d4 en tubos de 5 mm de o.d. (Norell, Inc. 507-HP) a 30 °C y se recolectaron en Varían VNMRS-400 a 400 MHz para 1H. Los desplazamientos químicos (d) son relativos a tetrametilsilano ((TMS = 0,00 ppm) y se expresan en ppm. La CL-EM/EM se tomó en el espectrómetro de masas de trampa iónica en Accela-Thermo Finnigan LCQ Fleet en modo de ionización EST (-) La HPLC se realizó en Agilent 1200 (Columna: Xterra MS C8, 250 x 4,6 mm; 5 mm 40 °C) en b-Ram. La actividad específica se tomó en LSA (Liquid Scintillation Analyzer, Perkin Elmer, Tri-Carb 2900TR).
Preparación del Compuesto 2X 1X 2X A una disolución de diisopropilamina (1,59 g, 15,8 mmol) en THF seco (6,0 mi) se añadió n-BuLi (6,30 mi, 2,5 M, 15,8 mmol) a -20 °C. Despues de agitar la mezcla de reacción durante 1 hora a -20 °C, se enfrió hasta -78 °C y se añadió TMSC1 (1,72 g, 15.8 mmol) seguido del compuesto 1X (3,00 g, 6,29 mmol) en THF seco (6,0 mi), La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a -78 °C, se inactivó mediante la adición de NaHCO3 y se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente.! La capa orgánica se separó y se concentró al vacío para dar el compuesto 2X (3,29 g, 95 %) y se usó para la siguiente etapa sin purificación adicional.
Preparación del Compuesto 3X El [1-14C]acetaldehído (330 mCi, 5,63 minol) (preparado a partir de [14C]BaC03, SA = 58,6 mCi/mmol) en tolueno (1,0 mi) y acetaldehído (130 mg, 2,95 mmol) en DCM (2.0 mi) se mezclaron a -78 °C y despues se transfirieron a una solución del compuesto 2X (3,29 g, 6,00 mmol) en DCM (13.0 mi), seguido de la adición de BF3 OEt2 (1,05 g, 7,40 mmol) a -78 °C. Después de agitar durante 1 hora a -78 °C, la mezcla de reacción se dejó calentar hasta I35 °C y se agitó 1 hora a la temperatura ambiente. La reacción se inactivo mediante la adición de agua (10 mi), la fase acuosa se extrajo con DCM, la capa orgánica combinada se secó sobre Na2S04 anhidro, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna en Si02 (Hexano: EtOAc = 5:1 a 3:1) para dar el compuesto 3X (102 mCi, 31 %, SAW 37,0 mCi/mmol) como un sólido blanco. RMN 1H (CDCI3 Varían, 400 MHz): 8 0,65 (3H, s). 0,93 (3H, d, J = 6,0 Hz), 1,01 (3H, s), 1,06-1,49 (12H, m), 1,62-2,04 (7H, m), 1,69 (3H, d, J = 6,8 Hz), 2,18-2,28 (2H, m), 2,32-2,43 (2H, m), 2,58 (1H, dd, J = 12,8, 4,0 Hz), 3,62-3,70 (1H, m), 3,67 (3H, s), 6,18 (1H, c, J = 6,8 Hz).
Preparación del Compuesto 4X A una solución del compuesto 3X (102 mCi, 2,75 mmol) en MeOH (6.0 mi) se añadió NaOH (220 mg, 5,50 mmol) en H2O (3,0 mi) a temperatura ambiente. Despues de agitar la mezcla de reacción durante 1 hora a 45 °C, se enfrió a temperatura ambiente, el MeOH se eliminó a presión reducida y se diluyó con H2O (12 mi). La capa acuosa se acidificó con H3PO4, se extrajo con DCM y la capa orgánica se concentró al vacío. El residuo se suspendió en Et20 y el precipitado se recogió mediante filtración para obtener el compuesto 4X (86,3 mCi, 85 %) en forma de un sólido de color blanco.
RMN de 1H (CDCI3, Varían, 400 MHz); 80,63 (3H, s), 0,92 (3H, d, J = 6,0 Hz), 0,99 (3H, s), 1,04-1,50 (13H, m), 1,61-2,01 (7H, m), 1,67 (3H, d, J 7,2 Hz), 2,21-2,28 (2H, m), 2,35-2,41 (2H, m), 2,56 (1H, dd, J = 12,8, 4,0 Hz), 3,58-3,69 (1H, m), 6,16 (1H, c,J= 7,2 Hz).
Preparación del Compuesto 5X 4X La mezcla del compuesto 4X (86,3 mCi, 2,35 mmol) y 5 % - Pd/C (100 mg) en. NaOH 0,5 M (10 mi, 5,0 mmol) se agitó durante 10 h a temperatura ambiente en atmósfera de H2 (globo) y despues se agitó durante 14 h a 100 °C. El catalizador se eliminó mediante filtración, se lavó con agua y el filtrado se acidificó con H3PO4. Los precipitados se recogieron por filtración, el sólido se disolvió en EtOAc, se lavaron con salmuera, se filtraron a través de una almohadilla corta de Si02 y se concentraron al vacío. El sólido residual se recristalizó con EtOAc, dando el compuesto 5X (67.7 mCi, 78 %) en forma de un sólido de color blanco.
RMN de 1H (MeOH-d4, Varían, 400 MHz): 80,71 (311), s), 0,75-0,84 (1H, m), 0,81 (3H, t, J = 7,4 Hz), 0,921,01 (1H, m), 0,96 (3H, d, J = 6,4 Hz), 1,06-1,38 (7H, m), 1,25 (3H, s), 1,41-1,96 (1211), m), 2,01-2,05 (1H, m), 2,11-2,24 (2H, m), 2,30-2,37 (1H, m), 2,50 (1H, t, J = 11,4 Hz), 2,80-2,85 (1H, m), 3,42-3,49 (1H, m).
Preparación de ácido [etil-1 -14C]obeticólico A una solución del compuesto 5X (67,7 mCi, 1,83 mmol) en NaOH 2 M acuoso (4,50 mi, 9.00 mmol) se añadió una solución de NaBH4 (416 mg, 11,0 mmol) en 1120 (2,0 mi) a 80 °C. Despues de agitar la mezcla de reacción durante 2 horas a 100 °C, se añadió agua (6,0 mi) a temperatura ambiente y se acidificó con H3PO4. La fase acuosa se extrajo con DCM, se secó sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron a través de una almohadilla corta de S1O2 y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna en S1O2 (hexano:EtOAc = 1:1 a 1:3), dando el producto (44,0 mCi 65 %) en forma de un sólido de color blanco. El producto (44,0 mCi, 1,19 mmol) y ácido obeticólico (120 mg, 0,285 mmol) se disolvieron en EtOAc (4 mi), la solución se agitó durante 2 horas a 50 °C y después se concentró al vacío. El aceite residual se suspendió en Et20, el precipitado se recogió mediante filtración para dar el ácido [etil-1-14C]obeticólico (560 mg, 38,5 mCi, SAW 29 mCi/mmol) como un sólido blanco.
RMN de 1H (CDCI3, Varían, 400 MHz): 80,66 (3H, s), 0,88 (311, s), 0,93 (3H, t, J = 7,2 Hz), 0,93 (3H, d, J= 6,4 Hz), 0,96-1,04 (1H, m), 1,08-1,52 (14H, m), 1,51-1,60 (1011), m), 2,22-2,30 (111), m), 2,36-2,44 (1H, m), 3,38-3,45 (111), m), 3,71 (1H, s).
CL-EM/EM (EM: LCQ Fleet): EM Caled.: 421,56; EM hallado: 421,07 [M-H]\ Radio TLC: TLC placa de sílice 60 F254, y fase móvil es EtOAc. La pureza radioquímica es 98,90 % Rf = 0,675.
HPLC (Agilent 1200 series): fase móvil, acetonitrilo. Tampón fosfato 5 mM (pH= 3):MeOH= 450:450:100. La pureza radioquímica es 98,19 % (b-ram), Tr = 20,00 min.
El ácido [Etil-1 -14C]obeticólico tiene una fórmula molecular 14CIC25H44Ü4 y un peso molecular de 421,46 en la actividad específica de 29 mCi/mmol mediante LSC.

Claims (106)

REIVINDICACIONES
1. Una forma C cristalina de ácido obeticólico caracterizada por un patrón de difracción de rayos X que incluye picos característicos a aproximadamente 4,2, 6,4, 9,5, 12,5, y 16,7 grados 2-teta.
2. Una forma C del ácido obeticólico cristalino caracterizada por un patrón de difracción de rayos X similar al expuesto en la Figura 5.
3. La forma C cristalina de ácido obeticólico de acuerdo con la reivindicación 1 caracterizada por un patrón de difracción de rayos X que incluye picos característicos a aproximadamente 4,2, 6,4, 9,5, 12,5, 12,6, 15,5, 15,8, 16,0, 16,7 y 19,0 grados 2-teta.
4. La forma C cristalina de ácido obeticólico de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 3 caracterizada por un patrón de difracción de rayos X que incluye picos característicos a aproximadamente 4,2, 6,4, 8,3, 9,5, 11,1, 12,2, 12,5, 12,6, 15,5, 15,8, 16,0, 16,3, 16,7, 18,6 y 19,0 grados 2-teta.
5. La forma C cristalina de ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 o 3-4 caracterizada por un patrón de difracción de rayos X que incluye picos característicos a aproximadamente 4,2, 6,4, 8,3, 9,5, 11,1, 12,2, 12,5, 12,6, 15,5, 15,8, 16,0, 16,3, 16,7, 17,0, 17,8, 18,6, 18,8, 19,0, 20,5 y 20,9 grados 2-teta.
6. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en la que el patrón de difracción de rayos X se recoge en un difractómetro usando radiación Cu Ka .
7. La forma C cristalina de ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6 caracterizada por un patrón de difracción de rayos X que incluye picos característicos a aproximadamente 12, o a aproximadamente 12,8 y de aproximadamente 15,4 a aproximadamente 21 ,0.
8. Una forma C cristalina de ácido obeticólico cristalino caracterizada por un termograma de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que tiene un valor de endotermia en aproximadamente 98+2 °C.
9. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, caracterizada además por un termograma de calorimetría de barrido diferencial (DSC) que tiene un valor de endotermia en aproximadamente 98±2 °C.
10. Un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico que comprende una forma cristalina de ácido obeticólico como un intermedio sintetico.
11. Un proceso para preparar la forma 1 de ácido obeticólico, que comprende convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
12. El proceso de acuerdo con la reivindicaciónll, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
13. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 -12, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5P-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaBH para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
14. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 -13, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico, hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p- colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-o¡co con NaBhU para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
15. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 -14, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ester metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido 3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico, hacer reaccionar el éster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5P-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaBhU para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
16. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 -15, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24- oico con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar ester metílico de ácido 3a, 7-ditrimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico¡ hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5p-col-6-en-24-oico con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el éster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico con NaOH para formar ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto^-colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
17. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 -16, que comprende las etapas de: hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico con CH3OH y H2SO4 para formar éster metílico de ácido 3a-hid roxi-7 -ceto-5p-colan-24-oico , hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico con L¡[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar éster metílico de ácido 3a, 7-ditrimetilsililoxi-5 -col-6-en-24-oico; hacer reaccionar el éster metílico de ácido 3a,7-d¡trimetilsililox¡-5P-col-6-en-24-oico con CH3CHO para formar el éster metílico del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden- 7-ceto-5p-colan-24-oico; hacer reaccionar el ester metílico de ácido E- o E/Z-3a-h id roxi-6-eti liden-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido E- o /Z-3a-hidroxi-6-etil¡den-7-ceto-5 -colan-24-o¡co con Pd/C y gas hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico; hacer reaccionar el ácido 3a-hidroxi-6a-et¡l-7-ceto^-colan-24-o¡co con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino; y convertir el ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico.
18. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10 -17, en el que el ácido obeticólico cristalino es la forma C.
19. El proceso de acuerdo con la reivindicación 18, en el que la forma C del ácido obeticólico cristalino se caracteriza por un patrón de difracción de rayos X similar al expuesto en la Figura 5.
20. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 18 o 19, en el que la forma C del ácido obeticólico cristalino se cristaliza y recristaliza en acetato de n-butilo.
21. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 11 -17, en el que la conversión de la forma C de ácido obeticólico cristalino en la forma 1 de ácido obeticólico comprende la etapa de disolver la forma C de ácido obeticólico cristalino en solución de NaOH acuoso y añadir HCI.
22. El proceso de acuerdo con la reivindicación 21, en el que la forma C de ácido obeticólico cristalino aislada se seca al vacío a aproximadamente 80 °C.
23. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 12 -17, en el que la reacción de ácido 3a-hidroxi-6a-et¡l-7-ceto-5 -colan-24-oico con NaBH4 para formar ácido obeticólico cristalino se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 85 °C a aproximadamente 110 °C en una solución básica acuosa.
24. El proceso de acuerdo con la reivindicación 23, en el que la temperatura es de aproximadamente 90 °C a aproximadamente 105 °C.
25. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 23 -24, en el que la solución acuosa básica es una solución acuosa de NaOH.
26. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 25, en el que la solución acuosa básica es una mezcla del 50 % en peso de solución de NaOH y agua.
27. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 13 -17, en el que la reacción del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-53-colan-24-oico con Pd/C e hidrógeno para formar ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5 -colan-24-oico se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 40 °C y a una presión a aproximadamente 4 a aproximadamente 5 bares.
28. El proceso de acuerdo con la reivindicación 27, en el que, la fase orgánica de la mezcla de reacción se trata con carbono activado.
29. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 27 -28, en el que la temperatura es de aproximadamente 25 °C a aproximadamente 35 °C.
30. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 27 -29, en el que la presión es de aproximadamente 4,5 a 5,5 bares.
31. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 27 -30, en el que la mezcla de reacción de hidrogenación se deja agitar durante 1 hora.
32. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 27 -31, en el que la reacción de ácido E o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno se calienta hasta aproximadamente 100 °C y se agita durante aproximadamente 2 horas a aproximadamente 5 horas.
El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 27 -32, en el que la reacción de ácido E o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico (5A) con Pd/C y gas hidrógeno se calienta hasta aproximadamente 100 °C y se agita durante aproximadamente 3 horas.
34. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 14 -17, en el que la reacción del áster metílico del ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico con NaOH para formar ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto^-colan-24-oico se lleva a cabo a una temperatura de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C.
35. El proceso de acuerdo con la reivindicación 34, en el que la temperatura es de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 25 °C.
36. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 34 -35, en el que la reacción del áster metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5P-colan-24-oico con NaOH se lleva a cabo en metanol, agua, y una solución de NaOH.
37. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 34 -36, en el que la solución de NaOH es una solución acuosa al 50 % en peso.
38. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 15 -17, en el que la reacción del áster metílico del ácido 3a,7-ditrimetilsililoxi-5 -col-6-en- 24-oico o ester metílico de ácido E- o E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5p-colan-24-oico se lleva a cabo en un disolvente aprótico polar a una temperatura de aproximadamente -50 °C a aproximadamente -70 °C en presencia de BF3.
39. El proceso de acuerdo con la reivindicación 38, en el que el disolvente aprótico polar es diclorometano.
40. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 -39, en el que el BF3 es una solución al 16 % en peso en acetonitrilo.
41. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 38 -40, en el que la temperatura es de aproximadamente -60 °C a aproximadamente -65 °C.
42. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 16 -17, en el que la reacción del éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-53-colan-24-oico con L¡[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI para formar éster metílico de ácido 3a, 7-d¡trimetilsililox¡-5P-col-6-en-24-oico se lleva a cabo en un disolvente aprótico polar a una temperatura de aproximadamente -10 °C a aproximadamente -30 °C.
43. El proceso de acuerdo con la reivindicación 42, en el que el disolvente aprótico polar es tetrahidrofurano.
44. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 42 -43, en el que la temperatura es de aproximadamente -20 °C a aproximadamente -25 °C.
45. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 42 -44, en el que la reacción del ester metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto-53-colan-24-oico (1) con Li[N(CH(CH3)2)2] y Si(CH3)3CI se agita durante aproximadamente 2 horas.
46. El proceso de acuerdo con la reivindicación 17, en el que la reacción del éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto^-colan-24-oico con CH3OH y H2SO4 para formar éster metílico de ácido 3a-hidroxi-7-ceto^-colan-24-oico se calienta durante aproximadamente 3 horas y el pH de la mezcla de reacción se ajusta con una solución básica acuosa hasta un valor de pH de aproximadamente 6,5 a aproximadamente 8,0.
47. El proceso de acuerdo con la reivindicación 46, en el que el aislamiento del éster metílico del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5 -colan-24-oico (1) comprende además tratamiento con carbono activado.
48. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 46 -47, en el que la reacción del ácido 3a-hidroxi-7-ceto-5p-colan-24-oico (KLCA) con CH3OH y H2SO4 se lleva a cabo en metanol.
49. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 46 -48, en el que la solución acuosa básica es una solución acuosa de NaOH.
50. El proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 46 -49, en el que el pH es de aproximadamente 7,0 °C a aproximadamente 7,5 °C.
51. Un compuesto de ácido E/Z-3a-hidroxi-6-etiliden-7-ceto-5 -colan-24-oico producido mediante el proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10 - 50. en el que la proporción de isómeros E/Z es superior a aproximadamente 50 %. superior a aproximadamente 60 %, superior a aproximadamente 70 %, superior a aproximadamente 80 %, superior a aproximadamente 83 %, superior a aproximadamente 85 %, superior a aproximadamente 90 %, superior a aproximadamente 93 %, superior a aproximadamente 95 %, o superior a aproximadamente 99 %.
52. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 51 , en el que la proporción de E/Z se determina mediante HPLC.
53. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51-52, en el que la proporción es superior a aproximadamente 80 %.
54. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 -53, en el que la proporción es superior a aproximadamente 83 %.
55. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51-54, en el que la proporción es superior a aproximadamente 85 %.
56. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 -55, en el que la proporción es superior a aproximadamente 90 %.
57. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 -56, en el que la proporción es superior a aproximadamente 93 %.
58. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 -57, en el que la proporción es superior a aproximadamente 95 %.
59. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 51 -58, en el que la proporción es superior a aproximadamente 99 %.
60. Un ácido obeticólico, o una sal, solvato o conjugado de aminoácido farmacéuticamente aceptable del mismo, que tiene una potencia superior a aproximadamente 98 %.
61. El ácido obeticólico de la reivindicación 60, en el que dicho ácido obeticólico tiene una potencia superior a aproximadamente 98 %.
62. El ácido obeticólico de acuerdo con la reivindicación 60, en el que la potencia de dicho ácido obeticólico se determina restando la cantidad de agua, cenizas sulfúricas, disolventes residuales y otras impurezas orgánicas.
63. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 61-62, que tiene una potencia superior a aproximadamente 98,5 %.
64. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 61-63, que tiene una potencia superior a aproximadamente 99,0 %.
65. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 61-64, que tiene una potencia superior a aproximadamente 99,5 %.
66. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 61 -65, en el que dicho ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 2 % de una o más impurezas seleccionadas de ácido 6-etilursodesoxicólico, ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico, ácido 6b-etilcenodesoxicólico, ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden-5p-colan-24-oico, ácido cenodesoxicólico y ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oiloxi)-7a-hidrox¡-6a-etil-5p-colan-24-oico.
67. El ácido obeticólico de acuerdo con la reivindicación 66, en el que dicho ácido obeticólico tiene una potencia superior a aproximadamente 1,5 %.
68. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -67, en el que dicha forma 1 de ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 1 ,4 % de impurezas.
69. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -68, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 1 ,2 % de agua.
70. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -69, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 1,0 % de agua.
71. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -70, en el que dicho ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 0,15 % de ácido 6-etilursodesoxicólico y ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden-5 -colan-24-oico.
72. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -71, en el que dicho ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 0,06 % de ácido 6-etilursodesoxicólico y ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden^-colan-24-oico.
73. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -72, en el que dicho ácido obeticólico contiene un total de menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 6-etiiursodesoxicólico y ácido 3a,7a-dihidrox¡-6-etiliden-5p-colan-24-oico.
74. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -73, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,15 % de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico.
75. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -74, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,06 % de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-oico.
76. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -75, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 3a-hidroxi-6a-etil-7-ceto-5p-colan-24-o¡co.
77. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -76, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,15 % de ácido 6p-etilcenodesoxicólico.
78. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -77, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,06 % de ácido 6p-etilcenodesoxicólico.
79. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -78, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 6 -etilcenodesoxicólico.
80. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -79, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 3 % de ácido cenodesoxicólico.
81. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -80, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 1 % de ácido cenodesoxiycólico.
82. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -81, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,2 % de ácido cenodesoxiycólico.
83. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -82, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,15 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-et¡l-5p-colan-24-oico.
84. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -83, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,06 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oico.
85. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 66 -84, en el que dicho ácido obeticólico contiene menos de aproximadamente 0,05 % de ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5 -colan-24-oiloxi)-7a-hidroxi-6a-etil-5p-colan-24-oico.
86. El ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 61 -85, en el que el ácido obeticólico es la forma 1 de ácido obeticólico.
87. Un ácido obeticólico cristalino, o una sal, solvato o conjugado de aminoácido farmaceuticamente aceptable del mismo, en el que dicho ácido obeticólico cristalino es la forma C.
88. El ácido obeticólico cristalino de acuerdo con la reivindicación 87, en el que dicho ácido obeticólico cristalino tiene una potencia superior a aproximadamente 90 %.
89. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con la reivindicación 88, en la que la potencia de dicha forma C de ácido obeticólico cristalino se determina restando la cantidad de agua, cenizas sulfúricas, disolventes residuales y otras impurezas orgánicas.
90. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con la reivindicación 87, en la que el solvato es un hidrato.
91. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 88-90, que tiene una potencia superior a aproximadamente 92 %.
92. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 88-91, que tiene una potencia superior a aproximadamente 94 %.
93. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 88-92, que tiene una potencia superior a aproximadamente 96 %.
94. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 88-93, que tiene una potencia superior a aproximadamente 98 %.
95. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 88-94, que tiene una potencia superior a aproximadamente 99 %.
96. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 87-95, en la que la forma C de ácido obeticólico cristalino contiene un total de menos de aproximadamente 4 % de una o más impurezas seleccionadas de ácido 6-etilursodesoxicólico, ácido 3a-h id roxi-6a-etil-7-ceto-53 colan-24-oico, ácido 6p-etilcenodesoxicólico, ácido 3a,7a-dihidroxi-6-etiliden-5 -colan-24-oico, ácido cenodesoxicólico y ácido 3a(3a,7a-dihidroxi-6a-etil-5P-colan-24-oiloxi)-7a-h¡droxi-6a-etil-5 -colan-24-oico.
97. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con la reivindicación 96, en la que las impurezas totales son menos de aproximadamente 3,8 %.
98. La forma C de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 96-97, en la que las impurezas totales son menos de aproximadamente 3,6 %.
99. Una composición farmaceutica que comprende la forma 1 de ácido obeticólico producida mediante el proceso de una cualquiera de las reivindicaciones 10-50 y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
100. Una composición farmacéutica que comprende ácido obeticólico cristalino y un vehículo farmacéuticamente aceptable.
101. La composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 100, en la que el ácido obeticólico cristalino es la forma C.
102. Un metodo de tratamiento o prevención de una enfermedad o afección mediada por FXR en un sujeto que comprende la administración de una cantidad eficaz de la forma 1 de ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 60-86 o producido mediante un proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10-50. o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 99.
103. Un método de tratamiento o prevención de una enfermedad o afección mediada por FXR en un sujeto que comprende la administración de una cantidad eficaz del ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-9 u 87-98 o una composición farmacéutica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 100-101.
104. El método de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 102 -103, en el que la enfermedad o afección se selecciona de atresia biliar, enfermedad hepática colestásica, hepatopatía crónica, esteatohepatitis no alcohólica (NASH), infección por hepatitis C, hepatopatía alcohólica, cirrosis biliar primaria (PBC), daño hepático por fibrosis progresiva, fibrosis hepática, fibrosis hepática inducida por alcohol, y enfermedades cardiovasculares, incluyendo aterosclerosis, arteriesclerosis, hipercolesterolemia e hiperlipidemia.
105. Un metodo para disminuir los triglicéridos en un sujeto comprende la administración de una cantidad eficaz de la forma 1 de ácido obeticólico de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 60-86 o producido mediante un proceso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 10-50. o una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 99.
106. Un método para disminuir los triglicéridos en un sujeto comprende la administración de una cantidad eficaz de ácido obeticólico cristalino de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-9 u 87-98 o una composición farmacéutica de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 100-101.
MX2014016062A 2012-06-19 2013-06-17 Preparacion, usos y formas sólidas del ácido obeticólico. MX365059B (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261661531P 2012-06-19 2012-06-19
PCT/US2013/046150 WO2013192097A1 (en) 2012-06-19 2013-06-17 Preparation, uses and solid forms of obeticholic acid

Publications (2)

Publication Number Publication Date
MX2014016062A true MX2014016062A (es) 2015-07-17
MX365059B MX365059B (es) 2019-05-22

Family

ID=48741553

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MX2014016062A MX365059B (es) 2012-06-19 2013-06-17 Preparacion, usos y formas sólidas del ácido obeticólico.
MX2019005819A MX2019005819A (es) 2012-06-19 2014-12-19 Preparacion y usos de acido obeticolico.

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
MX2019005819A MX2019005819A (es) 2012-06-19 2014-12-19 Preparacion y usos de acido obeticolico.

Country Status (25)

Country Link
US (8) US9238673B2 (es)
EP (4) EP3992201A1 (es)
JP (6) JP2015521621A (es)
KR (4) KR20150022974A (es)
CN (2) CN104781272A (es)
AU (5) AU2013277429B2 (es)
BR (2) BR112014031828B1 (es)
CA (3) CA3028207A1 (es)
CL (2) CL2014003475A1 (es)
CO (1) CO7240414A2 (es)
DK (1) DK3336097T3 (es)
EA (2) EA032347B1 (es)
ES (1) ES2822375T3 (es)
HK (1) HK1211296A1 (es)
IL (3) IL236231A0 (es)
IN (1) IN2014MN02561A (es)
MX (2) MX365059B (es)
NZ (3) NZ719360A (es)
PH (1) PH12014502835A1 (es)
PL (1) PL3336097T3 (es)
PT (1) PT3336097T (es)
SG (3) SG10201607230SA (es)
SI (1) SI3336097T1 (es)
TW (1) TWI673284B (es)
WO (1) WO2013192097A1 (es)

Families Citing this family (164)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL157816A0 (en) 2001-03-12 2004-03-28 Roberto Pellicciari Steroids as agonists for fxr
US9719068B2 (en) 2010-05-06 2017-08-01 Children's Hospital Medical Center Methods and systems for converting precursor cells into intestinal tissues through directed differentiation
EP2545964A1 (en) 2011-07-13 2013-01-16 Phenex Pharmaceuticals AG Novel FXR (NR1H4) binding and activity modulating compounds
US9982008B2 (en) 2012-06-19 2018-05-29 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Preparation and uses of obeticholic acid
CA3028207A1 (en) 2012-06-19 2013-12-27 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Preparation, uses and solid forms of obeticholic acid
WO2014085474A1 (en) * 2012-11-28 2014-06-05 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Treatment of pulmonary disease
US9814733B2 (en) * 2012-12-31 2017-11-14 A,arin Pharmaceuticals Ireland Limited Compositions comprising EPA and obeticholic acid and methods of use thereof
HUE055554T2 (hu) 2013-04-17 2021-12-28 Sage Therapeutics Inc 19-nor-C3,3-Diszubsztituált C21-N-pirazolil szteroid terápiában történõ alkalmazásra
PL2986624T3 (pl) 2013-04-17 2020-11-16 Sage Therapeutics, Inc. Neuroaktywne steroidy 19-NOR do stosowania w sposobach leczenia
WO2014169836A1 (en) 2013-04-17 2014-10-23 Sage Therapeutics, Inc. 19-nor neuroactive steroids and methods of use thereof
US9725481B2 (en) 2013-04-17 2017-08-08 Sage Therapeutics, Inc. 19-nor C3, 3-disubstituted C21-C-bound heteroaryl steroids and methods of use thereof
CN105555277B (zh) 2013-07-19 2022-01-11 萨奇治疗股份有限公司 神经活性类固醇化合物、组合物及其用途
RS61370B1 (sr) 2013-08-23 2021-02-26 Sage Therapeutics Inc Neuroaktivni steroidi, njihove kompozicije i upotreba
CN113249297A (zh) 2014-05-28 2021-08-13 儿童医院医疗中心 用于经由定向分化将前体细胞转化为胃组织的方法和系统
JP6820253B2 (ja) 2014-05-29 2021-01-27 バール ファーマシューティカルズ ソチエタ レスポンサビリタ リミタータ Ｆｘｂ及びｔｇｒ５／ｇｐｂａｒ１介在性疾患の治療及び／又は予防に使用するためのコラン誘導体
US10246482B2 (en) 2014-06-18 2019-04-02 Sage Therapeutics, Inc. Neuroactive steroids, compositions, and uses thereof
CN106459136B (zh) * 2014-09-28 2018-06-26 江苏盛迪医药有限公司 一种奥贝胆酸的制备方法
CA2964898A1 (en) 2014-10-16 2016-04-21 Sage Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating cns disorders
SG10202009861SA (en) 2014-10-16 2020-11-27 Sage Therapeutics Inc Compositions and methods for treating cns disorders
CA2963704A1 (en) 2014-10-17 2016-04-21 Children's Hospital Medical Center In vivo model of human small intestine using pluripotent stem cells and methods of making and using same
MX2017005935A (es) 2014-11-06 2018-01-11 Enanta Pharm Inc Análogos de ácido biliar como agonistas fxr/tgr5 y métodos de uso de los mismos.
CN107108687B (zh) 2014-11-19 2019-10-29 Nzp英国有限公司 作为制备类固醇FXR调节剂的中间体的5β-6-烷基-7-羟基-3-酮类固醇
EA033427B1 (ru) 2014-11-19 2019-10-31 Nzp Uk Ltd 6-алкил-7-гидрокси-4-ен-3-оновые стероиды в качестве промежуточных соединений для получения стероидных модуляторов fxr
PL3221333T3 (pl) * 2014-11-19 2020-01-31 NZP UK Limited Steroidy, 6.alfa-alkilo-3,7-diony jako związki pośrednie do wytwarzania steroidowych modulatorów fxr
KR102527821B1 (ko) 2014-11-19 2023-05-02 엔제트피 유케이 리미티드 스테로이드 FXR 조절인자를 제조하기 위한 중간체로서의 6α-알킬-6,7-다이온 스테로이드
US10208081B2 (en) 2014-11-26 2019-02-19 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bile acid derivatives as FXR/TGR5 agonists and methods of use thereof
US11578097B2 (en) 2014-11-26 2023-02-14 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Tetrazole derivatives of bile acids as FXR/TGR5 agonists and methods of use thereof
MX2017006833A (es) 2014-11-26 2018-02-13 Enanta Pharm Inc Análogos de ácido biliar como agonistas de fxr/tgr5 y métodos para el uso de los mismos.
EP3224269B1 (en) 2014-11-27 2020-02-26 Sage Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating cns disorders
CN105777835B (zh) * 2014-12-25 2020-02-14 重庆药友制药有限责任公司 一种制备鹅去氧胆酸类似物的方法
CN105801653B (zh) * 2014-12-30 2018-04-17 苏州晶云药物科技有限公司 奥贝胆酸的晶型a及其制备方法
CN105859814A (zh) * 2015-01-23 2016-08-17 江苏奥赛康药业股份有限公司 一种奥贝胆酸化合物及其药物组合物
PL3250210T3 (pl) 2015-01-26 2021-07-26 Sage Therapeutics, Inc. Kompozycje i sposoby leczenia zaburzeń OUN
ES2905872T3 (es) 2015-02-06 2022-04-12 Intercept Pharmaceuticals Inc Composiciones farmacéuticas para terapia combinada
EP3256134A4 (en) 2015-02-11 2018-10-03 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bile acid analogs as fxr/tgr5 agonists and methods of use thereof
CN105985395A (zh) * 2015-02-13 2016-10-05 江苏奥赛康药业股份有限公司 一种奥贝胆酸化合物及含有该化合物的药物组合物
CN105985396A (zh) * 2015-02-16 2016-10-05 苏州泽璟生物制药有限公司 氘代鹅去氧胆酸衍生物以及包含该化合物的药物组合物
JP6875996B2 (ja) 2015-02-20 2021-05-26 セージ セラピューティクス， インコーポレイテッド 神経刺激性ステロイド、組成物、およびその使用
CN107530361A (zh) * 2015-03-09 2018-01-02 英特塞普特医药品公司 用于调节骨密度的方法
SI3277286T1 (sl) 2015-03-31 2021-09-30 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Derivati žolčne kisline kot antagonisti FXR/TGR5 in metode za njihovo uporabo
US10894054B2 (en) 2015-04-07 2021-01-19 Intercept Pharmaceuticals, Inc. FXR agonist compositions for combination therapy
CN105777836A (zh) * 2015-04-09 2016-07-20 厦门蔚扬药业有限公司 奥贝胆酸的多晶型物及其制备方法
WO2016168553A1 (en) * 2015-04-17 2016-10-20 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated obeticholic acid
PE20180690A1 (es) * 2015-04-27 2018-04-23 Intercept Pharmaceuticals Inc Composiciones de acido obeticolico y metodos de uso
CN106290594B (zh) * 2015-05-27 2020-07-17 中美华世通生物医药科技（武汉）有限公司 测定奥贝胆酸片溶出含量的方法
CN105294801A (zh) * 2015-07-02 2016-02-03 扬子江药业集团南京海陵药业有限公司 6-乙基鹅去氧胆酸异构体的合成及其分离测定方法
CZ2015504A3 (cs) 2015-07-16 2017-01-25 Zentiva, K.S. Krystalické formy obeticholové kyseliny
EP3124080A1 (en) * 2015-07-28 2017-02-01 Merz Pharma GmbH & Co. KGaA Semisynthetic bile acids for injection lipolysis
CN105085597B (zh) * 2015-08-28 2017-03-29 成都百裕制药股份有限公司 一种无定型奥贝胆酸的制备方法
CN106478756A (zh) * 2015-09-02 2017-03-08 中美华世通生物医药科技（武汉）有限公司 Oca-e单晶及其制备方法和用途
WO2017053428A1 (en) * 2015-09-21 2017-03-30 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Methods of promoting hepatic regeneration
MX2018003649A (es) 2015-09-24 2018-05-11 Intercept Pharmaceuticals Inc Metodos e intermedios para la preparacion de derivados de acido biliar.
EP3981779A1 (en) 2015-10-07 2022-04-13 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Farnesoid x receptor modulators
CN106589038A (zh) * 2015-10-15 2017-04-26 重庆医药工业研究院有限责任公司 一种制备3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆烷酸的方法
CN106589039B (zh) * 2015-10-15 2019-12-17 苏州朗科生物技术股份有限公司 一种奥贝胆酸的制备方法及相关化合物
CN106632564B (zh) * 2015-10-30 2021-04-13 苏州泽璟生物制药股份有限公司 奥贝胆酸盐及其无定形物和药物组合物
CN106668027A (zh) * 2015-11-05 2017-05-17 中美华世通生物医药科技（武汉）有限公司 奥贝胆酸药物组合物及其制备方法
AU2016350690C1 (en) * 2015-11-06 2020-04-23 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Methods for the preparation of obeticholic acid and derivatives thereof
CN106749466B (zh) * 2015-11-23 2019-05-21 南京济群医药科技股份有限公司 一种高纯度奥贝胆酸的制备方法
CN105315320B (zh) * 2015-11-30 2017-03-08 山东省药学科学院 一种制备奥贝胆酸的方法
CN106810586A (zh) * 2015-12-01 2017-06-09 中美华世通生物医药科技（武汉）有限公司 奥贝胆酸晶型ⅱ及其制备方法和用途
CN106810587A (zh) * 2015-12-01 2017-06-09 中美华世通生物医药科技（武汉）有限公司 制备无定型奥贝胆酸的方法
CN106822005A (zh) * 2015-12-03 2017-06-13 江苏先声药业有限公司 奥贝胆酸组合物及其制备方法
CN106854229A (zh) * 2015-12-08 2017-06-16 陈剑 一类脂肪酸盐,其制备及其在医药上的应用
CN105481925B (zh) * 2015-12-17 2018-06-22 南京济群医药科技股份有限公司 一种奥贝胆酸及其中间体的制备方法
CN108495858A (zh) * 2015-12-22 2018-09-04 英特塞普特医药品公司 奥贝胆酸的多晶结晶形式
CN105399793A (zh) * 2015-12-24 2016-03-16 北京康立生医药技术开发有限公司 一种胆烷酸的制备方法
CN106916195A (zh) * 2015-12-25 2017-07-04 中美华世通生物医药科技（武汉）有限公司 奥贝胆酸中间体的纯化方法
WO2017115324A1 (en) * 2016-01-01 2017-07-06 Lupin Limited Solid forms of obeticholic acid and processes thereof
CN105646633B (zh) * 2016-01-22 2020-05-26 南京长澳医药科技有限公司 一种制备奥贝胆酸1型的方法
CN105566429B (zh) * 2016-01-22 2020-12-01 南京长澳医药科技有限公司 一种奥贝胆酸1型的制备方法
CN105646634A (zh) * 2016-01-29 2016-06-08 中国药科大学 奥贝胆酸杂质的制备方法
US10519193B2 (en) 2016-02-02 2019-12-31 Shenzhen Targetrx, Inc. Steroidal compound, composition containing the same and use thereof
CN113995755A (zh) * 2016-02-04 2022-02-01 辛多美制药有限公司 氘代多潘立酮组合物和用于治疗病症的方法
CN108779141A (zh) * 2016-02-10 2018-11-09 雷迪博士实验室有限公司 奥贝胆酸的胺盐
WO2017147137A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Benzoic acid derivatives of bile acid as fxr/tgr5 agonists and methods of use thereof
WO2017147174A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl containing bile acid analogs as fxr/tgr5 agonists and methods of use thereof
WO2017147159A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Deuterated bile acid derivatives as fxr/tgr5 agonists and methods of use thereof
CN107126419B (zh) * 2016-02-26 2020-06-19 石药集团中诺药业（石家庄）有限公司 一种奥贝胆酸片剂及其制备方法
CN106008639B (zh) * 2016-03-11 2019-01-08 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 用于预防或治疗fxr-介导疾病的胆烷酸化合物
CN105541953B (zh) * 2016-03-15 2017-11-21 成都市新功生物科技有限公司 一种高纯度奥贝胆酸的重结晶纯化方法
CN107188917A (zh) * 2016-03-15 2017-09-22 正大天晴药业集团股份有限公司 奥贝胆酸盐及其药物组合物
EP3437659B1 (en) * 2016-03-28 2023-03-01 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Combination of a fxr agonist and an angiotensin ii receptor blocker
US11161871B2 (en) 2016-03-31 2021-11-02 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Crystalline form of obeticholic acid and preparation method therefor
JP6880000B2 (ja) * 2016-03-31 2021-06-02 インターセプト ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 有効成分の化学的安定性に優れたフィルムコーティング錠
AU2017244984A1 (en) * 2016-03-31 2018-11-01 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Oral preparation having exceptional elutability
CN109311933A (zh) 2016-04-04 2019-02-05 迪法玛弗朗西斯有限公司 制备法尼醇x受体激动剂的方法
EP3228306A1 (en) 2016-04-04 2017-10-11 ratiopharm GmbH Complex compound comprising obeticholic acid and cyclodextrin and pharmaceutical formulation comprising the complex compound
TW201738254A (zh) * 2016-04-19 2017-11-01 英特賽普醫藥品公司 奧貝膽酸及其衍生物之製備方法
ES2929758T3 (es) 2016-05-05 2022-12-01 Childrens Hospital Med Ct Métodos para la fabricación in vitro de tejido del fondo gástrico y composiciones relacionadas con el mismo
CN105859817A (zh) * 2016-05-09 2016-08-17 成都宇西医药技术有限公司 一种制备3α-羟基-6-乙烯基-7-酮基-5β-胆烷酸的方法
GB201608777D0 (en) 2016-05-18 2016-06-29 Dextra Lab Ltd Compounds
CN107400154A (zh) * 2016-05-18 2017-11-28 北京凯因科技股份有限公司 一种制备3α,7α-二-羟基-6α-乙基-5β-胆烷酸的方法
GB201608776D0 (en) 2016-05-18 2016-06-29 Dextra Lab Ltd Methods and compounds
CN106046094A (zh) * 2016-05-30 2016-10-26 福建广生堂药业股份有限公司 一种奥贝胆酸二聚体杂质及其制备方法
CN105859818A (zh) * 2016-05-31 2016-08-17 四川瑞希康生物医药有限公司 一种奥贝胆酸α晶型及其制备方法、药物组合物和用途
WO2017208165A1 (en) 2016-06-01 2017-12-07 Dr. Reddy’S Laboratories Limited Process for preparation of obeticholic acid
CN105997909A (zh) * 2016-06-02 2016-10-12 中国药科大学 一种奥贝胆酸口崩片及其制备方法
ES2921432T3 (es) 2016-06-13 2022-08-25 Gilead Sciences Inc Derivados de azetidina como moduladores de FXR (NR1H4)
CA2968836A1 (en) 2016-06-13 2017-12-13 Gilead Sciences, Inc. Fxr (nr1h4) modulating compounds
CN106083971B (zh) * 2016-06-17 2017-11-14 苏州敬业医药化工有限公司 一种(E)‑3α‑羟基‑6‑亚乙基‑7‑酮‑5β‑胆烷‑24‑酸的制备方法
CZ2016385A3 (cs) 2016-06-28 2018-01-10 Zentiva, K.S. Způsoby přípravy intermediátů pro syntézu Obeticholové kyseliny
CN107540720B (zh) * 2016-06-29 2021-03-02 常州市第四制药厂有限公司 3α,7α-二羟基-6α-乙基-5β-胆烷酸晶型H及其制备方法和应用
CA3030413A1 (en) 2016-07-11 2018-01-18 Sage Therapeutics, Inc. C17, c20, and c21 substituted neuroactive steroids and their methods of use
JP7065825B2 (ja) 2016-07-11 2022-05-12 セージ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｃ７、ｃ１２、およびｃ１６置換神経刺激性ステロイドおよびそれらの使用方法
CN107648190B (zh) * 2016-07-26 2021-04-27 海南先声药业有限公司 奥贝胆酸组合物及其制备方法
CN106279331B (zh) * 2016-07-27 2019-06-14 宋火良 胆酸类肝病治疗药物
CN107674106B (zh) * 2016-08-01 2021-06-22 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 一种奥贝胆酸二聚体的制备方法
CN106279335A (zh) * 2016-08-12 2017-01-04 齐鲁制药有限公司 一种制备奥贝胆酸及其中间体的方法
EP3287467A1 (en) 2016-08-22 2018-02-28 ratiopharm GmbH Preparation of obeticholic acid comprising continuous flow process steps
CN115490744A (zh) * 2016-08-29 2022-12-20 山东新时代药业有限公司 一种3α-羟基-6α-乙基-7-酮-5β-胆-24-酸的制备方法
CN107778339A (zh) * 2016-08-29 2018-03-09 鲁南制药集团股份有限公司 一种无定型奥贝胆酸的制备方法
EP3293196A1 (en) 2016-09-09 2018-03-14 Hexal AG Process for purifying obeticholic acid
CN106478757B (zh) * 2016-09-27 2019-01-18 华南理工大学 一种3α,7α-二羟基-6α-乙基胆烷酸的制备方法
WO2018064441A1 (en) * 2016-09-30 2018-04-05 Intercept Pharmaceuticals, Inc Crystalline forms of a bile acid derivative
CN107976506B (zh) * 2016-10-25 2020-05-12 成都弘达药业有限公司 一种奥贝胆酸有关物质的检测方法
WO2018085615A1 (en) 2016-11-04 2018-05-11 Children's Hospital Medical Center Liver organoid compositions and methods of making and using same
US10584145B2 (en) * 2016-11-29 2020-03-10 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Process for preparation of sulfonylurea bile acid derivatives
JP7068305B2 (ja) 2016-12-05 2022-05-16 チルドレンズ ホスピタル メディカル センター 結腸オルガノイドならびにその作製方法および使用方法
ES2894261T3 (es) * 2016-12-09 2022-02-14 Cadila Healthcare Ltd Tratamiento de la colangitis biliar primaria
CN108614038B (zh) * 2016-12-13 2022-05-17 亚宝药业集团股份有限公司 一种测定奥贝胆酸原料药有关物质的方法
CN106749472B (zh) * 2016-12-30 2019-02-22 江苏开元医药化工有限公司 一种3α-羟基-6α-乙基-7-酮-5β-胆烷-24-酸的制备方法
CN106645497A (zh) * 2017-01-03 2017-05-10 山东省药学科学院 一种奥贝胆酸及其制剂中有关物质的检测方法
US10954713B2 (en) 2017-01-18 2021-03-23 Tremco Incorporated Structural bonding composite
WO2018152171A1 (en) 2017-02-14 2018-08-23 Enanta Pharmaceuticals, Inc. Bile acid derivatives as fxr agonists and methods of use thereof
CN106892954B (zh) * 2017-02-23 2019-04-30 广州隽沐生物科技有限公司 奥贝胆酸的制备工艺
AU2018230350A1 (en) * 2017-03-08 2019-09-26 Intercept Pharmaceuticals, Inc Crystalline forms of obeticholic acid
EP4424364A2 (en) 2017-03-28 2024-09-04 Gilead Sciences, Inc. Methods of treating liver disease
CN108659086A (zh) * 2017-03-29 2018-10-16 杭州源昶医药科技有限公司 一种奥贝胆酸的合成方法
KR102624997B1 (ko) 2017-04-07 2024-01-12 이난타 파마슈티칼스, 인코포레이티드 술포닐 카바메이트 담즙산 유도체의 제조 방법
CN106986910A (zh) * 2017-04-19 2017-07-28 成都百特万合医药科技有限公司 奥贝胆酸中间体的制备方法
US11053275B2 (en) 2017-04-20 2021-07-06 Daewoong Bio Inc. Method for bile acid derivative by using continuous flow reaction
WO2018211413A1 (en) * 2017-05-15 2018-11-22 Dr. Reddy’S Laboratories Limited Solid forms of obeticholic acid and process for preparation
CZ2017298A3 (cs) 2017-05-26 2018-12-05 Zentiva, K.S. Amorfní formy obeticholové kyseliny
CN107286160A (zh) * 2017-06-05 2017-10-24 毛佳婧 一种抗肝炎药物的哌啶并吡啶并吡唑‑锌配合物的制备方法
US11364226B2 (en) 2017-06-30 2022-06-21 Cinrx Pharma, Llc Deuterated domperidone compositions, methods, and preparation
CN109280071A (zh) * 2017-07-19 2019-01-29 东莞东阳光药物研发有限公司 奥贝胆酸的晶型及其制备方法
MX2020000873A (es) 2017-07-24 2020-07-22 Intercept Pharmaceuticals Inc Derivados de ácidos biliares marcados isotópicamente.
CN111328332B (zh) 2017-08-03 2023-01-24 玫帝托克斯股份有限公司 用于制备胆汁酸类的方法
CN107383139A (zh) * 2017-08-09 2017-11-24 杭州和泽医药科技有限公司 一种3α‑羟基‑7‑氧代‑5β‑胆烷酸新衍生物制备奥贝胆酸的方法
CN109485687A (zh) * 2017-09-12 2019-03-19 成都弘达药业有限公司 奥贝胆酸的晶型j及其制备方法
US10611793B1 (en) 2017-11-27 2020-04-07 Teva Czech Industries S.R.O. Solid state forms of obeticholic acid salts
WO2019106043A1 (en) 2017-11-29 2019-06-06 Hexal Ag Pharmaceutical composition comprising obeticholic acid
US20200291059A1 (en) 2017-12-08 2020-09-17 Sage Therapeutics, Inc. Compositions and methods for treating cns disorders
WO2019145977A1 (en) * 2018-01-25 2019-08-01 Msn Laboratories Private Limited, R&D Center PROCESS FOR THE PREPARATION OF 3α,7α-DIHYDROXY6α-ETHYL-5β-CHOLAN-24-OIC ACID
CN108440629A (zh) * 2018-03-16 2018-08-24 丽珠集团新北江制药股份有限公司 一种制备奥贝胆酸中间体及奥贝胆酸的方法
WO2019197962A1 (en) * 2018-04-09 2019-10-17 Biophore India Pharmaceuticals Pvt. Ltd Crystalline forms of (3α, 5β, 6α, 7α)-6-ethyl-3, 7-dihydroxycholan-24-oic acid (obeticholic acid) and processes thereof
CN110655550A (zh) * 2018-06-29 2020-01-07 江苏海悦康医药科技有限公司 (E)-3α-羟基-6-亚乙基-7-氧代-5β-胆甾烷-24-酸的制备方法
CN108794558B (zh) * 2018-07-03 2020-05-22 丽珠集团新北江制药股份有限公司 一种反应条件温和的奥贝胆酸制备方法
GB201812382D0 (en) 2018-07-30 2018-09-12 Nzp Uk Ltd Compounds
WO2020039449A1 (en) * 2018-08-24 2020-02-27 Solara Active Pharma Sciences Limited An improved process for the preparation of obeticholic acid and intermediates used in the process thereof
EA202191299A1 (ru) * 2018-11-08 2021-07-26 Интерсепт Фармасьютикалз, Инк. Способы применения обетихолевой кислоты
CN109535217B (zh) * 2018-11-13 2020-04-14 丽珠集团新北江制药股份有限公司 一种奥贝胆酸的精制方法
HUE065889T2 (hu) 2019-01-15 2024-06-28 Gilead Sciences Inc Izoxazol vegyület mint FXR agonista és az azt tartalmazó gyógyszerészeti készítmények
EP3927683A1 (en) 2019-02-19 2021-12-29 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of fxr agonists
EP3976049A1 (en) 2019-05-30 2022-04-06 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Pharmaceutical compositions comprising a fxr agonist and a fibrate for use in the treatment of cholestatic liver disease
CA3139554A1 (en) 2019-05-31 2020-12-03 Sage Therapeutics, Inc. Neuroactive steroids and compositions thereof
WO2021029656A1 (ko) * 2019-08-14 2021-02-18 주식회사 바이오톡스텍 하이드로퀴논 유도체, 및 오베티콜릭산을 포함하는 비알콜성 지방간염의 예방 또는 치료용 약학조성물
CN112824425B (zh) * 2019-11-21 2023-10-03 成都西岭源药业有限公司 一种6-位烯基取代胆酸化合物及其制备方法和应用
US20230201222A1 (en) * 2020-05-13 2023-06-29 Children's Hospital Medical Center Alleviation of liver injury by activating the signaling pathway mediated by farnesoid x receptor
WO2022051321A1 (en) 2020-09-03 2022-03-10 Coherus Biosciences, Inc. Fixed dose combinations of chs-131 and a fxr agonist
KR102526452B1 (ko) * 2020-10-28 2023-04-27 (주)델로 관절 구조를 포함하는 토이 로봇
CN114644670A (zh) * 2020-12-17 2022-06-21 四川弘远药业有限公司 奥贝胆酸和对氨基苯甲酸的共晶及其制备方法
CN114236027B (zh) * 2021-12-22 2024-01-12 中山百灵生物技术股份有限公司 一种(E)-6-亚乙基-3α-羟基-7-酮基-5β-胆甾烷-24-酸的检测方法

Family Cites Families (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4072695A (en) 1972-09-21 1978-02-07 Intellectual Property Development Corporation 3α,7α-Dihydroxy-cholanic acid derivatives
IT1137459B (it) * 1981-04-14 1986-09-10 Erregierre Spa Prodesso per la preparazione di acido ursodeossicolico ad alta purezza
DE3366932D1 (en) 1982-07-29 1986-11-20 Lehner Ag New derivatives of biliary acids, process for the production thereof and pharmaceutical compositions containing the same
IT1206112B (it) 1983-04-29 1989-04-14 Lehner Ag Nuovi derivati di acidi biliari, procedimento per la loro preparazione e relative composizioni farmaceutiche.
IT1212835B (it) 1983-08-18 1989-11-30 Lehner Ag Derivati di acidi biliari, procedimento per la loro preparazione e relative composizioni farmaceutiche.
US4892868A (en) 1984-08-17 1990-01-09 Gipharmex, S.P.A. Derivatives of biliary acids, process for the production thereof and corresponding pharmaceutical compositions
IT1196377B (it) 1984-12-21 1988-11-16 Lehner Ag Derivati di acidi biliari,procedimento per la loro preparazione e relative composizioni farmaceutiche
US5023252A (en) 1985-12-04 1991-06-11 Conrex Pharmaceutical Corporation Transdermal and trans-membrane delivery of drugs
IT1223313B (it) 1987-10-20 1990-09-19 Gipharmex Spa Derivati di acidi biliari loro preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono
JPH0320265A (ja) * 1989-02-10 1991-01-29 Meiji Seika Kaisha Ltd アミノチアゾール酢酸誘導体並びにその製造法
IT1229570B (it) 1989-04-17 1991-09-04 Giuliani Spa Derivati fluorurati di acidi biliari, loro preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono.
US5175320A (en) 1989-04-17 1992-12-29 Giuliani S.P.A. Fluorinated bile acid derivatives, processes for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing them
DE69018592T2 (de) 1989-12-13 1995-10-05 Mitsubishi Chem Corp Pyrazolylacrylsäure-Derivate, verwendbar als systemische Fungiziden in Pflanzen- und Materialschutz.
AU1856997A (en) 1996-02-02 1997-08-22 Merck & Co., Inc. Method for raising hdl cholesterol levels
GB9604242D0 (en) 1996-02-28 1996-05-01 Glaxo Wellcome Inc Chemical compounds
GB9606805D0 (en) 1996-03-30 1996-06-05 Glaxo Wellcome Inc Medicaments
TR199900056T2 (xx) 1996-07-12 1999-04-21 Smithkline Beecham P.L.C. Leptin direncinin yeni tedavisi.
JP3600713B2 (ja) 1997-08-06 2004-12-15 東京応化工業株式会社 ポジ型ホトレジスト組成物
US6008237A (en) 1997-12-19 1999-12-28 Merck & Co., Inc. Arylthiazolidinedione derivatives
DE69939864D1 (de) 1998-01-29 2008-12-18 Amgen Inc Ppar-gamma modulatoren
JP3146187B2 (ja) * 1998-06-26 2001-03-12 高砂香料工業株式会社 ジホスフィンオキシドの新規な製造方法
JP2002528721A (ja) 1998-10-23 2002-09-03 グラクソ グループ リミテッド 核内受容体のリガンド用のアッセイ
US6639078B1 (en) 1998-12-23 2003-10-28 Smithkline Beecham Corporation Assays for ligands for nuclear receptors
AU2409600A (en) 1999-01-07 2000-07-24 Tularik Inc. Fxr receptor-mediated modulation of cholesterol metabolism
JP2004510682A (ja) 1999-03-26 2004-04-08 シティ・オブ・ホープ 核胆汁酸受容体を用いコレステロール異化作用に影響を与える方法
EP1473042B1 (en) 1999-03-26 2006-06-21 City of Hope Screening for FXR receptor modulators
US20020132223A1 (en) 1999-03-26 2002-09-19 City Of Hope Methods for modulating activity of the FXR nuclear receptor
US6906057B1 (en) 1999-06-11 2005-06-14 Allergan, Inc. Methods for modulating FXR receptor activity
EP1185277B1 (en) 1999-06-11 2005-10-26 Allergan, Inc. Use of FXR synthetic ligands for the treatment of diseseas linked to cholesterol imbalance and colon cancer
US6559188B1 (en) 1999-09-17 2003-05-06 Novartis Ag Method of treating metabolic disorders especially diabetes, or a disease or condition associated with diabetes
CA2386750A1 (en) 1999-10-22 2001-05-03 Merck & Co. Inc. Pharmaceuticals for treating obesity
US6627636B2 (en) 2000-06-15 2003-09-30 Bristol-Myers Squibb Company HMG-CoA reductase inhibitors and method
US6777446B2 (en) 2000-09-05 2004-08-17 Tularik, Inc. FXR modulators
US20020119958A1 (en) 2001-02-13 2002-08-29 Shinichiro Tojo Therapeutic agent for hyperlipidemia
IL157816A0 (en) 2001-03-12 2004-03-28 Roberto Pellicciari Steroids as agonists for fxr
WO2002084286A1 (fr) 2001-04-12 2002-10-24 Takeda Chemical Industries, Ltd. Procede de criblage
WO2003016280A1 (en) 2001-08-13 2003-02-27 Lion Bioscience Ag Nr1h4 nuclear receptor binding compounds
DE60131967D1 (de) 2001-08-13 2008-01-31 Phenex Pharmaceuticals Ag Nr1h4-kern-rezeptor-bindende verbindungen
WO2003015777A1 (en) 2001-08-13 2003-02-27 Lion Bioscience Ag Nr1h4 nuclear receptor binding compounds
US7112340B2 (en) * 2001-10-19 2006-09-26 Baxter International Inc. Compositions of and method for preparing stable particles in a frozen aqueous matrix
EP1458693A4 (en) * 2001-11-14 2005-02-09 Teva Pharma Amorphous and crystalline forms of losartan potassium and method for making same
US20030144360A1 (en) 2001-11-19 2003-07-31 Allergan Sales, Inc. Composition and method for modulating BAR/FXR receptor activity
AU2003225903A1 (en) 2002-03-21 2003-10-08 Curagen Corporation Methods of using farnesoid x receptor (fxr) agonists
CA2482195A1 (en) 2002-04-12 2003-10-23 The University Of Chicago Farnesoid x-activated receptor agonists
US6987121B2 (en) 2002-04-25 2006-01-17 Smithkline Beecham Corporation Compositions and methods for hepatoprotection and treatment of cholestasis
ITMI20021532A1 (it) 2002-07-12 2004-01-12 Roberto Pellicciari Composti chimici
JP2006515838A (ja) 2002-11-22 2006-06-08 スミスクライン ビーチャム コーポレーション ファルネソイドｘ受容体アゴニスト
WO2005032549A1 (en) 2003-09-26 2005-04-14 Smithkline Beecham Corporation Compositions and methods for treatment of fibrosis
EP1568706A1 (en) 2004-02-26 2005-08-31 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Novel steroid agonist for FXR
AR048918A1 (es) * 2004-03-11 2006-06-14 Fresenius Kabi De Gmbh Conjugados de almidon de hidroxietilo y eritropoyetina
DK1734970T3 (en) 2004-03-12 2015-02-16 Intercept Pharmaceuticals Inc Treatment of fibrosis using FXR ligands
MX2007001539A (es) * 2004-08-10 2007-04-23 Exelisis Inc Compuestos heterociclicos como agentes farmaceuticos.
US20060252670A1 (en) * 2004-10-14 2006-11-09 Intercept Pharmaceuticals Inc. Method of reducing drug-induced adverse side effects in a patient
JP2008539243A (ja) * 2005-04-25 2008-11-13 ジェネーラ・コーポレーション スクアラミンジラクテートの多形塩形態および無定形塩形態
ITMI20050912A1 (it) 2005-05-19 2006-11-20 Erregierre Spa Processo di preparazione di acidi 3-a-ya(b)-diidrossi-6-a(b)-alchil-5b-colanici
JP2007077123A (ja) 2005-09-16 2007-03-29 Shiono Chemical Co Ltd 非晶質セフジニル、その製造方法およびこれを含有する経口投与用医薬組成物
EP2040713B1 (en) 2006-06-27 2014-06-18 Intercept Pharmaceuticals Inc. Bile acid derivatives as fxr ligands for the prevention or treatment of fxr-mediated deseases or conditions
EP1894924A1 (en) * 2006-08-29 2008-03-05 Phenex Pharmaceuticals AG Heterocyclic FXR binding compounds
CL2007003035A1 (es) * 2006-10-24 2008-05-16 Smithkline Beechman Corp Compuestos derivados de isoxazol sustituidos, agonistas de receptores farnesoid x; procedimiento de preparacion; composicion farmaceutica que lo comprende; y uso del compuesto en el tratamiento de la obesidad, diabetes mellitus, fibrosis en organos,
MX2009007728A (es) 2007-01-19 2009-12-15 Intercept Pharmaceuticals Inc Acidos biliares 23-sustituidos como moduladores de tgr5 y metodos de uso de los mismos.
EP1947108A1 (en) 2007-01-19 2008-07-23 Intercept Pharmaceuticals, Inc. TGR5 modulators and methods of use thereof
US8338628B2 (en) 2007-08-28 2012-12-25 City Of Hope Method of synthesizing alkylated bile acid derivatives
EP2222645B1 (en) * 2007-11-15 2013-03-20 F. Hoffmann-La Roche AG Benzimidazole derivatives and their use as fxr agonists
EA020310B1 (ru) 2008-07-30 2014-10-30 Интерсепт Фармасьютикалз, Инк. Модуляторы рецептора tgr5 и их применение
US20110190242A1 (en) * 2008-09-23 2011-08-04 Resolvyx Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for the treatment of inflammatory disease
US8114862B2 (en) 2008-11-19 2012-02-14 Intercept Pharmaceuticals, Inc. TGR5 modulators and methods of use thereof
SG178562A1 (en) 2009-08-25 2012-03-29 Victor Ling Polyhydroxylated bile acids for treatment of biliary disorders
CN102121547B (zh) * 2010-12-23 2013-01-16 拉卡萨安吉拉股份有限公司 用于管道接头的衬套和采用该衬套的管道接头
CN102372757B (zh) * 2011-10-31 2013-01-16 安徽科宝生物工程有限公司 酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法
CA3028207A1 (en) 2012-06-19 2013-12-27 Intercept Pharmaceuticals, Inc. Preparation, uses and solid forms of obeticholic acid

Also Published As

Publication number Publication date
JP2016074724A (ja) 2016-05-12
JP6978544B2 (ja) 2021-12-08
CA3047776A1 (en) 2013-12-27
CO7240414A2 (es) 2015-04-17
KR20150022974A (ko) 2015-03-04
US20210395293A1 (en) 2021-12-23
PL3336097T3 (pl) 2021-05-31
EP2861613A1 (en) 2015-04-22
MX2019005819A (es) 2019-10-21
CN104781272A (zh) 2015-07-15
AU2017204057A1 (en) 2017-07-06
JP6877389B2 (ja) 2021-05-26
CN111228278A (zh) 2020-06-05
WO2013192097A1 (en) 2013-12-27
AU2017204057B2 (en) 2018-11-01
AU2016200832B2 (en) 2017-05-18
BR112014031828A2 (pt) 2021-07-06
CA3047776C (en) 2022-10-18
EP3789394A1 (en) 2021-03-10
JP2017075169A (ja) 2017-04-20
MX365059B (es) 2019-05-22
CL2014003475A1 (es) 2015-08-07
CA3028207A1 (en) 2013-12-27
AU2013277429B2 (en) 2016-01-14
US20130345188A1 (en) 2013-12-26
SG10201607230SA (en) 2016-10-28
TWI673284B (zh) 2019-10-01
EP3336097A1 (en) 2018-06-20
IL257841A (en) 2018-04-30
SG10201610434YA (en) 2017-02-27
AU2018241172A1 (en) 2018-11-01
CA2877122C (en) 2020-04-28
US10155787B2 (en) 2018-12-18
JP6527077B2 (ja) 2019-06-05
JP2018172438A (ja) 2018-11-08
CL2015002145A1 (es) 2015-12-11
US20230340010A1 (en) 2023-10-26
JP2018184443A (ja) 2018-11-22
AU2013277429A1 (en) 2015-01-22
SG11201408501UA (en) 2015-01-29
US20170226149A1 (en) 2017-08-10
US20160074419A1 (en) 2016-03-17
PT3336097T (pt) 2020-10-29
US10047117B2 (en) 2018-08-14
IN2014MN02561A (es) 2015-09-04
KR101881245B1 (ko) 2018-07-23
CA2877122A1 (en) 2013-12-27
AU2016200832A1 (en) 2016-02-25
NZ719360A (en) 2017-08-25
BR112014031828B1 (pt) 2021-12-21
IL236231A0 (en) 2015-02-01
NZ734451A (en) 2018-12-21
BR122016011808A2 (pt) 2018-12-11
US20190153020A1 (en) 2019-05-23
KR20160143894A (ko) 2016-12-14
HK1211296A1 (en) 2016-05-20
SI3336097T1 (sl) 2021-07-30
EP3992201A1 (en) 2022-05-04
EA201590040A1 (ru) 2015-05-29
US9238673B2 (en) 2016-01-19
KR20180083966A (ko) 2018-07-23
KR20190121871A (ko) 2019-10-28
US9732116B2 (en) 2017-08-15
ES2822375T3 (es) 2021-04-30
EA201990211A1 (ru) 2019-06-28
AU2018241172B2 (en) 2020-03-05
JP2020125317A (ja) 2020-08-20
EP3336097B1 (en) 2020-08-19
NZ703072A (en) 2016-06-24
AU2020202405A1 (en) 2020-04-30
TW201410699A (zh) 2014-03-16
US20160215014A1 (en) 2016-07-28
PH12014502835A1 (en) 2015-02-02
US20160176913A1 (en) 2016-06-23
EA032347B1 (ru) 2019-05-31
BR122016011808B1 (pt) 2021-09-21
DK3336097T3 (da) 2020-09-28
IL261372A (en) 2018-10-31
JP2015521621A (ja) 2015-07-30
US10174073B2 (en) 2019-01-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
MX2014016062A (es) Preparacion, usos y formas sólidas del ácido obeticólico.
US20180305397A1 (en) Preparation and Uses of Obeticholic Acid
EP3394081A1 (en) Polymorphic crystalline forms of obeticholic acid

Legal Events

Date Code Title Description
FG Grant or registration