MX2013000895A - Fibras, proceso para producir las fibras y aposito para heridas que las incorpora. - Google Patents

Abstract

Se describen fibras de varios componentes para la reducción en heridas de la actividad perjudicial de componentes de exudado de heridas tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios, las fibras comprenden: de 10% a 100% en peso de las fibras, de pectina y un material proteináceo de protección en una relación de peso de 100:0 a 10:90 de pectina a material proteináceo de protección, y de 0% a 90%- en peso de las fibras, de otro polisacárido o un polímero soluble en agua.

Description

FIBRAS, PROCESO PARA PRODUCIR LAS FIBRAS Y APOSITO PARA HERIDAS QUE LAS INCORPORA Descripción, de la Invención La presente invención está dirigida a fibras y en particular al uso de las mismas en apositos para heridas para la reducción de la actividad perjudicial de componentes de exudado de heridas tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios en heridas, y a un método para preparar las fibras. Las fibras se usan particularmente para la unión, secuestro o inhibición de componentes perjudiciales presentes en un ambiente de herida crónico. Las fibras son de preferencia fibras de varios componentes que comprenden pectina y muy preferiblemente pectina y gelatina.

La presencia de componentes derivados de inflamación, tales como enzimas degradadoras de proteínas (proteasas) , mediadores lípidos y similares, en un ambiente de herida puede ser perjudicial, cuando existen en exceso, para la progresión de la sanación de la herida. Existen dos clases principales de proteasas, las metaloproteinasas de matriz (MMP, por sus siglas en inglés) y las elastasas, las cuales actúan en conjunto para ser efectivas en degradar tejido corporal. Por ejemplo, la síntesis de nuevo tejido de granulación puede ser inhibida por niveles elevados de REF. : 238637 enzimas que podrían impedir el proceso de sanación. Se ha visto por lo tanto como deseable reducir estos niveles elevados o excesivos de componentes derivados de inflamación del ambiente de la herida para mejorar la sanación de la herida. La sanación de una herida puede observarse por la mejora visual del lecho de la herida (formación de nuevo tejido de granulación) y una reducción en el tamaño de la herida .

En el pasado, se propuso un número de apósitos para heridas con un propósito de modular proteasas en una herida. Estos apósitos incluyen Promogran™ (Systagenix Wound Management) , una composición de celulosa regenerada y oxidada con colágeno liofilizada en forma de una hoja de matriz que se gelifica al hacer contacto con exudado de herida. Sin embargo está dirigida sólo a MMPs. Biostep™ (Smith & Nephew) , un aposito de heridas de matriz de colágeno compuesto de colágeno, alginato de sodio, carboximetilcelulosa y ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) está en forma de un aposito de hoja de matriz y también se dirige a MMPs. Tegaderm™ Matrix (3M) que tiene como sus ingredientes activos una mezcla de sales metálicas que se asegura modulan MMPs está en forma de una hoja de matriz. Aparte de la especificidad para MMPs, todos estos apósitos tienen una capacidad de manejo de fluidos limitada en comparación con los apósitos a base de fibras y particularmente aquellos a base de AQUACEL® (ConvaTec Inc) .

Se conocen en la técnica apositos que son ya sea específicos para una de las dos principales clases de proteinasas que se conoce que están presentes en heridas crónicas y por lo tanto son de efectividad limitada, o tienen capacidad de manejo de fluidos limitada, o son componentes de aposito en una forma que presenta dificultades prácticas, por ejemplo están en forma de polvo. Los polvos, si se aflojan en el apósito, pueden caer y tener que ser retirados por irrigación de la herida. Si están contenidos en cierto tipo de cavidad en el apósito o se usan como un componente embolsado separado no pueden ser cortados para ajustarse a la herida sin encontrar los problemas de polvo suelto. US2002012693A Describe un apósito que se dice tiene actividad reductora de proteasa el cual está compuesto de una matriz de soporte sobre la cual se incorporan inhibidores de elastasa péptida por enlace covalente. La composición está dirigida a elastasa únicamente. US2006142242A Describe una composición de almidón de fosfato que se dice tiene capacidad de secuestro tanto de elastasa como de MMP pero se usa típicamente en forma de un polvo. Edwards et al (2007) "Human neutrophil elastase and collagenase sequestration with phosphorlyated cotton ound dressings" Cotton Chemistry Utilization, Journal of Biomedical Materials Research parte A, describieron también una composición de algodón fosforilada con capacidad de reducción de elastasa y MMP pero aplicada a una simple gasa de algodón.

WO07137733A y WO09068249A describen un superabsorbente de poliacrilato (Paul Hartmann AG) que se dice tiene actividad inhibidora de MMP y buena capacidad de manejo de fluidos pero que parece ser activo contra MMPs únicamente. Walker et al (2007) "In Vitro Studies to Show Sequestration of Matrix Metalloproteinases by Silver-Containing Wound Care Products" Ostomy Wound Management 2007; 53(9):18-25, describen la capacidad de varios productos para cuidado de heridas que incluyen un aposito Hydrofiber de carboximetilcelulosa (CMC) que contiene plata (Aquacel Ag) para reducir MMPs in vitro.

Es por lo tanto deseable proporcionar fibras capaces de reducir en heridas la actividad perjudicial de un número de componentes de exudado de herida, tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios, y los cuales tengan ya sea propiedades inherentes de manejo de fluidos o puedan procesarse en un aposito para heridas con propiedades de manejo de fluidos adecuadas. Se han hecho ahora fibras a base de pectina que son adecuadas para usarse en el tratamiento de heridas para aliviar los problemas anteriores .

En consecuencia, la presente invención proporciona fibras de varios componentes para la reducción en heridas de la actividad perjudicial de componentes de exudado de heridas tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios, las fibras comprenden: de 10% a 100% en peso de las fibras, de pectina y un material proteináceo de protección en una relación de peso de 100:0 a 10:90 de pectina a material proteináceo de protección, y de 0% a 90% en peso de las fibras de otro polisacárido o un polímero soluble en agua.

De manera adecuada, las fibras también son capaces de reducir el nivel de actividad enzimática perjudicial en comparación con un control en al menos 25%, más adecuadamente al menos 50% y de preferencia en al menos 75% cuando se mide por el método de MMP como el descrito en el ejemplo 2 y en T = 0.

La presente invención proporciona además fibras de pectina de varios componentes capaces de reducir el nivel de actividad enzimática perjudicial in vitro en al menos 25% cuando se mide por el método de MMP como el descrito en el ejemplo 2 en T = 0.

Las fibras pueden comprender un material proteináceo de protección tal como gelatina, colágeno, proteína globular tal como proteína de suero, soja y leche, albúmina o caseína. La función del material proteináceo de protección cuando está presente es la de ocupar máximamente las actividades catalíticas de las proteináceas reduciendo de esta manera la actividad proteinácea contra proteínas corporales. De preferencia, el material proteináceo de protección es gelatina.

Para mejorar la integridad estructural de las fibras, pueden comprender otro polisacárido tal como alginato, quitosan o sus derivados, o derivados de celulosa, goma guar, goma xantánica, goma de algarrobo, dextrina, agar-agar, goma de celulosa u otro material a base de almidón, y para mejorar las capacidades de manejo de fluidos las fibras pueden comprender un polímero soluble en agua tal como poliacrilato, poliéster o poliamida. Para mejorar la función antibacteriana de las fibras, pueden comprender plata, oro y platino o sales de los mismos y/o agentes quelantes tales como EDTA o ácido cítrico. Las fibras también pueden comprender iones divalentes tales como calcio o zinc, magnesio, cobre o hierro y agentes reguladores de pH o un humectante o tensioactivo para mejorar la formación de textiles tal como polisorbato.

De preferencia, las fibras comprenden de 75% a 100% en peso de las fibras o muy preferiblemente de 90% a 100% de pectina y un material proteináceo de protección en una relación de peso de 100:0 a 10:90 de pectina a material proteináceo de protección. De preferencia la relación en peso de pectina a material proteináceo de protección en las fibras es de 90:10 a 10:90, muy preferiblemente 90:10 a 30:70 u 80:20 a 50:50 y más preferiblemente 70:30.

En un segundo aspecto de la presente invención se proporciona un aposito para heridas que comprende fibras de pectina de varios componentes para usarse en la reducción en heridas de la actividad perjudicial de componentes de exudado de heridas tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios.

Los apósitos para heridas de la presente invención pueden comprender otras fibras además de las fibras de pectina de varios componentes tales como fibras de celulosa o derivados de celulosa. Las fibras pueden estar presentes como una mezcla homogénea de fibras de varios componentes con fibras formadoras de textiles o gel o pueden estar presentes como una capa discreta en una construcción de aposito para heridas. El aposito puede comprender de 10% a 100% en peso de fibras de pectina de varios componentes con 0% a 90% en peso de otra fibra formadora de gel tal como fibra CMC. De preferencia, el aposito puede comprender de 25% a 75% en peso de fibras de pectina de varios componentes con 25% a 75% en peso de otra fibra formadora de gel, muy preferiblemente el aposito comprende una mezcla de 50% a 50%.

Las fibras de pectina de varios componentes adecuadas para usarse de acuerdo con la presente invención pueden prepararse por las siguientes etapas : (i) añadir pectina y gelatina a agua para formar una masa; (ii) forzar la masa a través de una hilandera; (iii) entrelazar con una fuente de iones para formar fibras y (iv) secar las fibras.

De preferencia, la solución de masa se prepara a una concentración de 2 a 11% (p/v) al disolver pectina en agua caliente (40-80°C) hasta que se obtenga una mezcla opaca homogénea seguida por enfriamiento a temperatura ambiente y reposo para estabilizar la viscosidad y eliminar burbujas de aire .

La hilatura para formar las fibras puede llevarse a cabo mediante hilatura en húmedo convencional que incluye pasar la masa a través de una hilandera dentro de un baño de coagulación que puede estar compuesto de iones metálicos divalentes tales como cloruro de calcio o cloruro de zinc a una concentración de 0.5 a 35% (p/v). Después, las fibras de pectina obtenidas pueden ser lavadas y estiradas en un baño de agua. Las fibras pueden ser enjuagadas con un solvente no acuoso miscible en agua tal como acetona, IDA, alcohol isopropílico o propan-2-ol para eliminar cualquier agua residual del núcleo de la fibra y facilitar el secado, seguidas por una etapa de secado a una temperatura generalmente debajo de 120 °C.

Como alternativa, se puede usar electrohilatura para producir nanofibras, por ejemplo fibras que tengan un diámetro de pocos cientos de nanometros.

La pectina adecuada para usarse en las fibras o la preparación de fibras de acuerdo con la invención es de preferencia ya sea metoxi pectinas inferiores con un contenido de metoxilo de menos de 15%, o pectina anidada con un grado de esterificación en un intervalo de 10 a 30% y un grado de amidación comprendido entre 10 y 30%. El peso molecular de estas pectinas está de preferencia en un intervalo de 30,000 y 85,000 daltons para de esta manera optimizar la viscosidad requerida de la solución de masa y las propiedades de resistencia a la tracción de las fibras. La pectina adecuada es aquella disponible comercialmente como GENU Pectin Type LM-104 AS-FS antes CP Kelco que es una pectina estabilizada con azúcar.

La gelatina útil en las fibras o en la preparación de las fibras de acuerdo con la invención es de preferencia gelatina tipo A. La gelatina adecuada es aquella disponible comercialmente como polvo de gelatina porcina ex PB Leiner.

Según se usa en la presente, el término fibra significa un material orientado aleatoriamente tanto relativamente corto como discreto (conocido algunas veces como fibra corta) e hilos hechos a partir de la misma (conocidos algunas veces como hilo cortado) e hilo de filamento continuo relativamente largo y estructurado o fibra de filamento continuo. Las fibras pueden tener una longitud de fibra de 5 mm a 70 mm, usualmente 20 mm a 50 mm. Las fibras pueden tener un diámetro en la escala de nanómetros o milímetros .

La invención se ilustra por las siguientes figuras en las cuales la figura 1 muestra la actividad MMP de varias fibras y sus componentes.

La invención se ilustra más en los siguientes ej emplos Ejemplo 1 Se prepararon fibras de varios componentes de acuerdo con la invención como sigue.

Se prepararon 9 litros de solución de masa con 8% (p/v) de gelatina ¡pectina (30:70). Se añadieron lentamente 216 g de gelatina en polvo bajo agitación y homogeneizando en agua desionizada calentada previamente a 40°C. La solución se dejó mezclar por un raspador y un homogeneizador durante 30 minutos a 40°C. Después, se añadieron lentamente 504 g de pectina en polvo usando el mismo método que el de la gelatina y la mezcla se dejó agitar y homogeneizar durante 30 minutos más. Cuando la solución fue homogénea, se detuvo la agitación y se aplicó vacío a la solución durante 5 minutos a una presión de alrededor de 0.2 bares para eliminar así el exceso de aire de la mezcla. La solución se dejó enfriar y sedimentar durante aproximadamente 24 horas.

La solución de masa se transfirió a un tanque de 3 litros presurizado a 0.35 kg/cm2 (5 psi) . La hilatura se llevó a cabo a temperatura ambiente. Directamente después del tanque, la solución de masa se empujó a través de un filtro de candela compuesto de tela viscosa. Luego, la solución de masa se empujó a través de una manguera flexible hasta un filtro de malla montado en la hilandera antes de pasar a través de la hilandera. La hilandera tenía 500 agujeros con un diámetro de 75 pm y la velocidad de flujo de la bomba se estableció en 70L/hora sobre tres hilanderas de 40,000 agujeros cada una con un diámetro de agujero de 75 pm. El baño de hilatura era un baño de 10 litros de 5% (p/v) de cloruro de calcio deshidratado en agua desionizada para la primera corrida y un baño de 10 litros de 5% (p/v) de cloruro de zinc en agua desionizada para la segunda corrida. Después de dejar el baño de coagulación, los filamentos formados pasaron a través de cuatro baños de lavado diferentes; cada baño tenía una capacidad de 10 litros. El primer baño de lavado fue un baño con agua en donde se aplicó una relación de extracción de 1:6, seguido por un baño con IDA (Alcohol Desnaturalizado Industrial) acuoso al 25% (v/v) . El tercer baño de agua se rellenó por una solución acuosa de IDA al 50% (v/v) y el cuarto baño fue un baño acuoso de IDA al 75% (v/v) . El baño final fue de 100% de IDA en el cual las fibras se dejaron durante aproximadamente 1 hora antes de ser retiradas, exprimidas manualmente y secadas en un horno con ventilador a 40°C. Los baños estaban separados por poleas que condujeron los filamentos a través de los siguientes baños y aplicaron un estiramiento a los filamentos. Se seleccionó una relación de extracción de 1.6 entre la primera polea (salida del baño de coagulación) y el segundo baño.

Ambas corridas de hilatura en calcio y en zinc proporcionaron filamentos que eran suaves y lo suficientemente resistentes como para ser procesados en apositos para heridas. Las fibras eran físicamente comparables con otras fibras usadas en apositos para heridas en términos de resistencia y diámetro. Las tablas 1 y 2 muestran detalles de resistencia medida por BSE ISO 5079, 1996 y diámetro medido por SEM y herramienta de análisis de imágenes.

Tabla 1 Resistencia de las fibras Nota: Los números entre paréntesis son las desviaciones estándar.

Tabla 2 Diámetro de las fibras Muestra Diámetro de fibra Desviación promedio (mieras) estándar Fibras hiladas en 12 44 1.13 CaCl2 Fibras hiladas en 15 66 1.73 ZnCl2 Fibras de estopa 11 56 0.66 de Hydrofibre Fibras de estopa 15 60 4.22 de alginato Ejemplo 2 Este ejemplo muestra la absorción de proteinasa de las fibras.

Método de MMP Muestras de 9 miligramos de las diferentes fibras se pusieron en frascos de 7 mi y a estas muestras se les añadieron 40 µ? de solución MMP pre-preparada. Estas muestras se dejaron reposar durante 2-3 minutos para asegurar que la enzima fuera completamente absorbida por el material. A estas muestras hidratadas se le añadieron 960 µ? de regulador de pH de reacción de ensayo MMP y las muestras se mezclaron suavemente con la mano. Después de 2-3 minutos más, 2 x 90 µ? de muestras fueron retiradas de los frascos y transferidas a pocilios individuales de una placa de varios pocilios para análisis posterior (T0) . Los frascos que contenían las muestras se dejaron reposar durante 2 horas a temperatura ambiente después de lo cual 2 x 90 µ? de muestras adicionales fueron retirados y procesados como arriba (Ti2o) · Se añadieron 20 microlitros de gelatina DQ pre-preparada a cada pocilio de la placa de varios pocilios (placas T0 y ??20) y el cambio en los niveles de fluorescencia se midió durante un periodo de aproximadamente 30 minutos usando un espectrofotómetro para placa de varios pocilios Tecan F200. La reducción porcentual en la actividad MMP presente en los frascos que contenían muestras se calculó a partir del nivel de fluorescencia detectado. Controles positivos y negativos adecuados así como muestras en blanco se prepararon y se corrieron en paralelo.

El nivel de actividad MMP en el punto de tiempo T = 0 para todas las cuatro corridas de la fibra de varios componentes es ampliamente comparable con aquél de Aquacel®. Sin embargo se observa una mejora para el punto de tiempo de T = 120 minutos particularmente en aquellas fibras que contienen zinc. Esto sugiere que el efecto de modulación de MMP dura más en las fibras de la invención. La reducción en la actividad MMP es superior a la de estopa de CMC y estopa de Kaltostat en ambos puntos de tiempo. Los resultados se muestran en la tabla 3 (figura 1) .

Estos resultados muestran la reducción de amplio espectro de la actividad perjudicial de componentes de exudado de herida provista por las fibras de esta invención.

Ejemplo 3 Fibras fabricadas con el método del ejemplo 1 se observaron bajo microscopio electrónico de barrido ambiental para investigar sus propiedades de gelificación. Se encontró que las fibras demostraban hinchazón y gelificación moderadas, con algunas áreas mezclándose durante la fase de hidratación. La relación de hinchamiento para las fibras hiladas en CaC12 es más alta, en 2.3, que aquella de las fibras hiladas en ZnCl2 (1.54).

Ejemplo 4 Fibras fabricadas con el método del ejemplo 1 se procesaron en una forma de textil. Las fibras se cortaron en longitudes cortas de 55 mm, se abrieron manualmente usando cardas manuales y se cardaron usando una carda a escala piloto con un ancho de trabajo de 500 mm. Después se punzaron con aguja en una cinta textil, con las características dadas en la tabla 5. El peso por área unitaria se midió gravimétricamente al pesar un tamaño de muestra conocido. La recuperación de humedad se midió gravimétricamente, después de un mínimo de 24 horas de acondicionamiento a 20+2 °C± y 65+4%HR, y después de secar durante 4 horas a 105°C en un horno de ventilador.

Tabla 5 Características físicas de muestras textiles con 100% de pectina/gelatina Muestra textil de Muestra textil de fibras hiladas en fibras hiladas en CaCl2 ZnCl2 Peso por área Muestra 1: 34.20 269.07 gsm unitaria gsm Muestra 2: 119.20 gsm Recuperación de Muestra 2: 18.9% 18.4% humedad Espesor Muestra 1: 1.27 mm 5.05 mm Muestra 2 : 3.69 mm La absorbencia y retención de las muestras textiles fabricadas usando las fibras hiladas en cloruro de zinc se midieron usando una solución fisiológica recomendada por BP como un medio de hidratación. La absorbencia se mide al pesar una cantidad conocida de muestra (típicamente 5 cera x 5 cm) , hidratando 20 veces su peso en el medio de hidratación, incubando a 37 °C durante 30 minutos, drenando el exceso de fluido al sujetar la muestra con fórceps durante 30 segundos, y pesando la muestra hidratada y drenada. La retención se mide al aplicar el peso equivalente a 40 mmHg a la muestra hidratada y drenada después de que ha sido pesada, dejando durante un minuto y volviendo a pesar. Para evaluar más las capacidades de manejo de fluido, la capacidad del material para evitar dispersión lateral también fue evaluada. Esto se hizo al sumergir una tira de 1.5 cm de ancho por 1 cm (a lo largo de una línea marcada) en una solución fisiológica recomendada por BP (solución A) que contenia colorante de eosina durante 1 minuto. Después del minuto, la muestra se retira y se mide la distancia de movimiento de fluido a partir de la línea marcada. La absorbencia, retención y absorción lateral del material producido se dan en la tabla 6.

Tabla 6 Propiedades de manejo de fluido de muestras textiles con 100% de pectina/gelatina Ejemplo 5 Fibras fabricadas con el método del ejemplo 1 se procesaron en una forma de textil en una mezcla al 50% del material de estopa Hydrofibre, usando una ruta similar a la descrita en el ejemplo 4. Las características físicas, y características de manejo de fluidos, medidas según el ejemplo 4, se dan en la tabla 7.

Tabla 7 Características físicas y de manejo de fluido de fibras mezcladas al 50% Estos resultados muestran la ventaja de las fibras acuerdo con la invención que se pueden procesar junto con fibras para apositos convencionales para dar un aposito que tenga las ventajas combinadas de características de manejo de fluidos adecuadas y la reducción de actividad perjudicial de componentes de heridas .

Ejemplo 6 Fibras de varios componentes de acuerdo con la invención se fabricaron en un proceso de hilatura en húmedo similar a aquél descrito en el ejemplo 1 pero a una escala más pequeña. Las fibras tenían una gama de relaciones de componentes como se muestra abajo.

Preparación de soluciones de masa: Se prepararon 300 mi de soluciones con 8% de sólidos para cada componente al calentar 288 mi de agua desionizada a 40°C en una placa caliente de agitación. La gelatina se añadió lentamente con agitación y una vez que se integró completamente se añadieron los demás componentes, pectina siendo añadida al final. Todo se mezcló y homogeneizó lentamente hasta que los sólidos se hubieran disuelto todos y las soluciones se dejaron enfriar durante la noche .

Matriz de pesos requeridos (g) Método de hilatura en húmedo La solución de masa se bombeó usando una bomba peristáltica a una velocidad de flujo baja (2.25 ml/min) a una hilandera que hiló las fibras en un baño de coagulación con cloruro de calcio al 5%. Las fibras se recogieron en un baño de 50:50 de IDA:agua. Después se lavaron en 100% de IDA antes de ser secadas al aire en una cabina de humo.

Todas las corridas de hilatura proporcionaron filamentos que eran lo suficientemente suaves y resistentes como para ser procesados en apositos para heridas.

Ejemplo 7 En este ejemplo se evaluó la capacidad de fibras de varios componentes de acuerdo con la invención que van a ser formadas en apositos para heridas, junto con las propiedades físicas del aposito resultante. Se usó un aparato de hilatura de escala media para producir 80 g de cada tipo de estopa de fibras . Las fibras se hilaron ya sea en un baño de cloruro de calcio o un baño de cloruro de zinc. La estopa resultante fue abierta, cardada y tratada con aguja para producir una fibra no tejida. A partir de cada estopa, se produjeron dos almohadillas no tejidas, una con 100% de fibras de acuerdo con la invención y una con 50% de fibra de acuerdo con la invención y 50% de Hydrofibre®, una fibra de carboximetilcelulosa producida a partir de Lyocell y disponible con el nombre de producto Aquacel (antes ConvaTec) . Las almohadillas resultantes fueron irradiadas para evaluar cualquier cambio en las propiedades físicas clave.

Hilatura en húmedo: El proceso de hilatura en húmedo fue igual a aquél usado en el ejemplo 1. Una vez que las fibras habían sido lavadas fueron cortadas, amarradas en un extremo y puestas en un baño que contenía 100% de IDA durante 1 hora. Las fibras fueron después exprimidas y puestas en un horno a 40°C durante 1 hora hasta secarse.

Observaciones: Las fibras se hilaron bien en el baño de coagulación de cloruro de calcio y las fibras una vez secas fueron muy suaves, se separaron fácilmente y tenían un color blanco/crema. Se experimentaron algunos problemas con el baño de coagulación de zinc ya que una parte del zinc se precipitó fuera de la solución y hubo cierta holgura en la fibra mientras emergía de la hilandera. Sin embargo las fibras fueron producidas y eran suaves y de un color blanquecino/ligeramente pardo.

Textilización de las fibras: Las fibras secadas fueron cortadas a 55 mm y abiertas manualmente usando cardas manuales . Después fueron cardadas usando una carda escala piloto Automatex modelo CA500 con un ancho de trabajo de 500 mm, cilindro individual, 3 pares de trabajadores y arrancadores y un solo rodillo irregular. Se produjeron cuatro telas cardadas.

Tratamiento con aguja: El tratamiento con aguja se llevó a cabo en un aparato a escala piloto. Las telas se doblaron ya sea en dos o cuatro dobleces para proporcionar más volumen durante el tratamiento con aguja.

Los productos resultantes fueron referenciados como sigue : HF-2010/078-2 : Fibras 100% biointeractivas hiladas en una 2a prueba con CaC12 (dobladas 4 veces) HF-2010/079: Fibras 100% biointeractivas hiladas en ZnC12 (dobladas 4 veces) HF-2010/080: Fibras 50% biointeractivas hiladas en CaC12 con 50% de Hydrofiber® (dobladas dos veces únicamente) HF-2010/081: Fibras 50% biointeractivas hiladas en ZnC12 con 50% de Hydrofiber® (dobladas dos veces únicamente) Irradiación: Las muestras fueron irradiadas con rayos gama con una dosis de entre 25-42 kGy.

Absorción Resumen: La absorbencia del material no tejido (CaCl2) , en su forma no mezclada y mezclada, es comparable (sobre una base de peso por peso) , con AQUACEL*. La absorbencia de las muestras hiladas en ZnCl2 es ligeramente más baja en general. Existe poca diferencia entre las muestras irradiadas y las no irradiadas. La siguiente tabla proporciona los resultados de absorbencia expresados en g/g.

Retención Resumen: Las fibras mezcladas tienen una retención ligeramente mejor que las fibras de varios componentes puras, y sobre todo, la retención parece ser más baja que la de AQUACEL*. Los resultados indican también que la irradiación se traduce en una pequeña caída en retención. La siguiente tabla proporciona los resultados de retención expresados como g/g- Este ejemplo ha proporcionado la prueba de principio de que las fibras hiladas en calcio y zinc de acuerdo con la invención pueden fabricarse en una forma de textil, con propiedades de manejo de fluido atractivas. La prueba ha confirmado que las fibras de acuerdo con la invención son lo suficientemente fuertes como para ser fabricadas exitosamente en un material no tejido ya sea como un material al 100% o como un material mezclado con Hydrofiber® .

Las fibras que fueron hiladas en un baño que contenía iones de calcio se textilizaron más fácilmente que las fibras hiladas en iones de zinc.

Ejemplo 8 Los apositos producidos en el ejemplo 7 se rociaron con plata y se irradiaron usando el siguiente método.

Cada aposito se pasó a través de un rocío ultrasónico de solución acuosa . de nitrato de plata (5%) seguido por un rocío ultrasónico de solución acuosa de cloruro de sodio (3%) . El aposito se expuso primero a la solución de plata durante alrededor de 10 segundos y después a la solución de sal durante aproximadamente 10 segundos. El aposito resultante se secó usando una secadora de aire forzado durante aproximadamente 1 minuto.

Los apositos fueron cada uno irradiados usando irradiación gamma a una dosis de 31.4 kGy. Todas las muestras fueron visualmente equivalentes una vez irradiadas a aquellas antes de la irradiación.

Ejemplo 9 Para evaluar la capacidad de los apositos del ejemplo 7 para modular elastasa, se llevó a cabo un ensayo de fluorescencia y los datos se reportaron como actividad de elastasa restante en el sobrenadante como un porcentaje del control positivo.

La prueba se llevó a cabo usando un kit de ensayo de elastasa EnzCheck siguiendo este método. Muestras de 9 miligramos de varias fibras se pusieron en frascos de 7 mi y a estas muestras se le añadieron 40 µ? de solución de elastasa pre-preparada . Estas muestras se dejaron reposar durante 2-3 minutos para asegurar que la enzima fuera completamente absorbida por el material. A estas muestras hidratadas se le añadieron 960 µ? de regulador de pH de reacción de ensayo de elastasa y las muestras se mezclaron suavemente con la mano para asegurar. Después de 2-3 minutos adicionales 2 x 20 µ? muestras se retiraron de los frascos y se transfirieron a pocilios individuales de una placa de varios pocilios para análisis posterior (T0) . Los frascos que contenían las muestras se dejaron reposar durante 2 horas a temperatura ambiente, después de lo cual 2 x 20 µ? muestras adicionales fueron retiradas, y procesadas como arriba (T12o) · Se añadieron 90 microlitros del regulador de pH de reacción de ensayo de elastasa a cada pocilio de la placa de varios pocilios para llevar el volumen final a 110 µ? .

Cuarenta microlitros de elastina DQ pre-preparada se añadieron a cada pocilio de la placa de varios pocilios (placas T0 y Ti20) y el cambio en los niveles de fluorescencia se midió durante un periodo de aproximadamente 30 minutos usando un espectrofotómetro para placa de varios pocilios Tecan F200. El porcentaje de reducción en la actividad elastasa presente en los frascos que contenían muestra se calculó a partir del nivel de fluorescencia detectado.

Controles positivos y negativos adecuados así como muestras en blanco se prepararon y corrieron en paralelo. Esto muestra por lo tanto la capacidad de los apósitos para modular la actividad elastasa.

Todos los apósitos de acuerdo con la invención se desempeñan bien tanto inicialmente como más de dos horas después con el nivel de elastasa más alto volviendo a 40% cuando se prueba HF2010/079. El aposito HF2010/078 se desempeña bien en general con una reducción de aproximadamente 90% en T0 y T120. Materiales que contenían calcio total se desempeñan bien durante el curso del ensayo.

Para evaluar la capacidad de los apositos para modular MMP, se llevó a cabo un ensayo de fluorescencia y los datos se reportan como actividad de MMP restante en el sobrenadante como un porcentaje del control positivo. El método seguido fue aquél del ejemplo 2 que dio los siguientes resultados : Ejemplo 10 En este ejemplo se prepararon fibras en nanoescala a partir de soluciones de gelatina y pectina. Las condiciones óptimas se centran en una concentración de sólidos de 25% p/p con relaciones de gelatina a pectina de entre 90/10 y 70/30 con una distancia de aguja a colector de 10 cm y un voltaje de 20 kV.

Se prepararon soluciones para hilatura de la siguiente manera: Un volumen de 10 mi de agua destilada se midió al pesar y se calentó a una temperatura de 45°C (±3°C) usando una placa caliente. La temperatura del agua, se midió periódicamente. La cantidad adecuada de gelatina y pectina se midieron por peso. La gelatina se disolvió en el agua al añadir pequeñas cantidades de gelatina en el agua a la vez. La solución se agitó usando una mezcladora de laboratorio con una velocidad de rotación de 550 rpm (±50rpm) hasta que cada cantidad se disolviera. Cuando la cantidad total de gelatina se disolvió completamente la pectina fue añadida de la misma manera. Después de disolver los componentes, la solución se pesó y se añadió agua si se había presentado evaporación. Esto aseguró que la solución final estuviera a la concentración especificada. Cuando todo el material se disolvió y mezcló completamente, la solución se dejó enfriar a la temperatura ambiente antes de la electrohilatura. Las soluciones no en uso fueron almacenadas en un refrigerador de laboratorio a -5°C.

El equipo de electrohilatura consistía en una fuente de energía de alto voltaje, bomba de aguja y un colector a tierra. Las soluciones fueron cargadas en una jeringa de vidrio con seguro Luer de 5 mi equipada con una aguja 22 G la cual tiene un diámetro interno de 0.41 mm y una longitud de aguja de 12 mm. La aguja se montó en una bomba de aguja, con velocidades de flujo de 0.1 ml/min-1 ml/min. La bomba de aguja se usó en un ambiente de temperatura ambiente estándar, o se alojó dentro de una caja de encierre controlada en temperatura. El alto voltaje se proporcionó por una unidad de alto voltaje Glassman (0-30 kV) con respecto a tierra. El voltaje se midió en la aguja usando una sonda de alto voltaje y multímetro. Las muestras se recogen en un electrodo plano formado a partir de hoja de papel aluminio.

Los resultados indican que la electrohilatura de una combinación de gelatina/pectina es posible a una concentración de sólidos total de entre 15% en peso y 30% a una relación de gelatina a pectina de 90/10 a temperaturas elevadas. Soluciones de hilatura con una relación de gelatina/pectina de 70/30 fueron posibles a concentraciones de 15% en peso - 25% en peso. Al incrementarse la viscosidad de la solución con una concentración cada vez más alta o relación de pectina a gelatina cada vez más alta, se emplearon voltajes más altos por arriba de 15 kV para de esta manera permitir que se presentara el proceso de electrohilatura.

Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el que resulta claro de la presente descripción de la invención.

Claims (11)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Fibras de varios componentes para la reducción en heridas de la actividad perjudicial de componentes de exudados de heridas tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios, caracterizadas porque comprenden : de 10% a 100% en peso de las fibras, de pectina y un material proteináceo de protección en una relación de peso de 80:20 a 60:40 de pectina a material proteináceo de protección; y de 0% a 90% en peso de las fibras de otro polisacárido o un polímero soluble en agua.

2. Las fibras de varios componentes de conformidad con la reivindicación 1, caracterizadas porque comprenden 75% a 100% en peso de las fibras, de pectina y un material proteináceo de protección en una relación de peso de 80:20 a 60:40 de pectina a material proteináceo de protección.

3. Las fibras de varios componentes de conformidad con la reivindicación 1 o reivindicación 2, caracterizadas porque comprenden 90% a 100% en peso de las fibras, de pectina y un material proteináceo de protección en una relación de peso de 80:20 a 60:40 de pectina a material proteináceo de protección.

4. Las fibras de varios componentes de conformidad con cualquier reivindicación anterior, caracterizadas porque la relación de peso de pectina a material proteináceo de protección en las fibras es de 70:30.

5. Un aposito para heridas caracterizado porque comprende fibras de pectina de varios componentes para usarse en la reducción en heridas de la actividad perjudicial de componentes de exudado de heridas tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios.

6. Un aposito para heridas caracterizado porque comprende fibras de varios componentes para la reducción en heridas de la actividad perjudicial de componentes de exudado de heridas tales como enzimas degradadoras de proteínas y mediadores inflamatorios, las fibras comprenden: de 10% a 100% en peso de las fibras, de pectina y un material proteináceo de protección en una relación de peso de 80:20 a 60:40 de pectina a material proteináceo de protección; y de 0% a 90% en peso de las fibras, de otro polisacárido o un polímero soluble en agua.

7. El aposito para heridas de conformidad con la reivindicación 5 o reivindicación 6, caracterizado porque comprende de 10% a 100% en peso de fibras de pectina de varios componentes con 0% a 90% en peso de otra fibra f ormadora de gel .

8 . Fifc>ras de pectina de varios componentes , caracterizadas porque son capaces de reducir el nivel de actividad enzimática perj udicial en al menos 25% cuando se mide por el método de MMP como el descrito en el ej emplo 2 en T = 0 o el método de ensayo de elastasa como el descrito en el ej emplo 9 en T = 0 .

9 . Un método para preparar f ibras de pectina de varios componentes , caracterizado porque comprende las siguientes etapas : ( i ) añadir pectina y un material proteináceo de protección a agua para formar una masa ; (ii) forzar la masa a través de una hilandera; (iii) entrelazar con una fuente de iones para formar fibras; y (iv) secar las fibras .

10. El método de conformidad con la reivindicación 9, caracterizado porque el material proteináceo de protección es gelatina.

11. Un método para preparar fibras de pectina de varios componentes, caracterizado porque comprende las siguientes etapas : (i) añadir pectina y un material proteináceo de protección a agua para formar una masa; (ii) forzar la masa a través de una hilandera mientras se induce un voltaje entre la hilandera y una placa colectora en un ambiente de temperatura controlada.