MX2007006136A - Inhibidores de catepsina proteasa. - Google Patents

Abstract

Esta invencion se relaciona con una clase novedosa de compuestos, dibujados en lo siguiente, en donde R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7, D y n son como se definen en la presente los cuales son inhibidores de la proteina cisteina que incluyen, pero que no se limitan a inhibidores de las catepsinas K, L, S y B; estos compuestos son utiles para tratar enfermedades en las cuales esta indicada la inhibicion de la resorcion osea, tal como osteoporosis.

Description

INHIBIDORES DE CATEPSINA CISTEINA PROTEASA ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Una diversidad de trastornos en los humanos y otros mamíferos involucran o están relacionados con resorción ósea anormal. Tales trastornos incluyen, pero no se limitan a osteoporosis, osteoporosis inducida por glucocorticoides, enfermedad de Paget, recambio óseo aumentado de manera anormal, enfermedad periodontal, pérdida de dientes, fracturas óseas, artritis reumatoide, osteoartritis, osteolisis periprostética, osteogénesis imperfecta, hipercalcemia o cáncer o mieloma múltiple. Uno de los trastornos más comunes es la osteoporosis, la cual, en su manifestación más frecuente se presenta en mujeres postmenopáusicas. La osteoporosis es una enfermedad del sistema esquelético caracterizada por pérdida de masa ósea y deterioro microarquitectónico del tejido óseo con incremento consecuente en la fragilidad ósea y susceptibilidad a fracturas. Las fracturas osteoporóticas son la causa principal de morbilidad y mortalidad en población vieja. Hasta un 50% de las mujeres y un tercio de los hombres experimentarán una fractura osteoporótica. Una gran cantidad de la población más vieja de antemano ha presentado una densidad ósea baja y un riesgo alto de fracturas. Existe una necesidad significativa a evitar y tratar la osteoporosis y otras condiciones relacionadas con la resorción ósea. Debido a que la osteoporosis, así como otros trastornos asociados con la pérdida ósea generalmente son condiciones crónicas, se considera que un tratamiento apropiado típicamente requerirá de tratamiento crónico Las catepsinas pertenecen a la superfamiha de papaina de las cisteínas proteasas Estas proteasas funcionan en la fisiología normal así como la degradación patológica del tejido conectivo Las catepsinas juegan un papel principal en la degradación y recambio y remodelación de proteínas intracelulares Hasta la fecha, se han identificado muchas catepsinas y se ha establecido la secuencia de numerosas fuentes Estas catepsmas se encuentran de manera natural en una amplia variedad de tejidos, por ejemplo se han clonado la catepsina B, C, F, H, L, K, O, S, V, W y Z La catepsina L esta relacionada con proteolisis sosómica normal asi como vanos estados de enfermedad que incluyen, pero que no se limitan a metástasis de melanomas La catepsina S esta implicada en la enfermedad de Alzheimer, aterosclerosis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica y ciertos trastornos autoinmunes que incluyen, pero que no se limitan a diabetes de inicio juvenil, esclerosis múltiple penfigo vulgar, enfermedad de Grave, miastenia grave, lupus entematoso sistemico, artritis reumatoide y tiroiditis de Hashimoto, trastornos alérgicos que incluyen pero que no se limitan a asma y respuestas inmunologicas halogenicas que incluyen pero que no se limitan a rechazo de transplante de órganos o injertos de tejido Las concentraciones aumentadas de catepsina B y la redistribución de la enzima se encuentran en tumores, lo que sugiere un papel en la invasión tumoral y la metástasis Ademas, se ha implicado la actividad aberrante de catepsina B en estados de enfermedad tales como artritis reumatoide, osteoartritis, infección por pneumocistisis carinn, pancreatitis aguda, enfermedad inflamatoria de las vías respiratorias y trastornos óseos y de articulaciones Las catepsinas en mamífero están relacionadas con cisteína proteasas similares a papaína que se expresan por parásitos que provocan la enfermedad que incluyen aquellos de las familias protozoa, platihelmintos, nemátodos y artrópodos Estas cisteína proteasas juegan un papel esencial en el ciclo de vida de estos organismos El colágeno humano tipo I, el colágeno principal en hueso es un buen sustrato para catepsina K Véase Kafienah, W , et al , 1998, Biochem J 331 727-732, la cual se incorpora en la presente como referencia en su totalidad En experimentos m vitro utilizando ohgonucleótidos antisentido para catepsina K, se ha demostrado resorción ósea disminuida in vitro, lo cual probablemente se deba a una reducción en la traducción del ARNm para catepsina K Véase Inuí, T , et al , 1997, J Biol Chem 272 8109-81 12, la cual se incorpora en la presente como referencia en su totalidad Se han resuelto la estructura cristalina de catepsina K Véase McGrath, M E , et al , 1997, Nat Struct Biol 4 105-109, Zhao, B , et al , 1997, Nat Struct Biol 4 109-1 1 , la cual se incorpora en la presente como referencia en su totalidad También se han desarrollado inhibidores selectivos basados en peptidos para catepsina K véase Bromme, D , et al , 1996, Biochem J 315 85-89, Thompson, S K , et al , 1 997, Proc Nati Acad Sci U S A 94 14249-14254, la cual se incorpora en la presente como referencia en su totalidad En consecuencia, los inhibidores de catepsina K pueden reducir la resorción ósea. Tales inhibidores pueden ser útiles para tratar trastornos que involucran la resorción ósea tal como osteoporosis.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con compuestos que son capaces de tratar y evitar condiciones o estado de enfermedad dependientes de catepsina en un mamífero en necesidad del mismo. Una modalidad de la presente invención se ilustra por un compuesto de fórmula I y las sales farmacéuticamente aceptables, estereoisómeros y derivados de N-óxido de los mismos' DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN La presente invención se relaciona con compuestos de la siguiente fórmula química: en donde R1 y R2 se toman juntos con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con alquilo de 1 a 3 átomos de carbono, R3 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está sustituido con 1 a 4 de fluoro y 1 a 4 de cloro, R4 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está sustituido con 1 a 5 de halo, R5 es hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con 1 a 5 de halo, cada D es independientemente aplo o heteroaplo, R6 es hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con uno a dos de hidroxilo o dos a seis de halo, R7 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con dos a cinco de halo, n es 2, o sales, estereoisómeros o derivados de N-óxido farmacéuticamente aceptables del mismo En una modalidad de la invención, R1 y R2 se toman juntos con el átomo de carbono al cual están unidos para formar ciclopropilo En una modalidad de la invención, D es fenilo. En una modalidad de la invención, R4 es CF3. En una modalidad de la invención, R5 es hidrógeno. En una modalidad de la invención, R7 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono sustituido con dos o tres de fluoro. La referencia a las modalidades preferidas establecida en lo anterior significa la inclusión de todas las combinaciones de grupos particulares y preferidos, a menos que se indique de otra manera. Las modalidades específicas de la presente invención incluyen, pero no se limitan a: N1-(1 -cianociclopropil)-N2-(1 -{4'-[2,2-difluoro-1 -hidroxietil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{2,2,2-trifluoro-1 -[4'-(2,2,2-trifluoro-1 -hidroxietil]bifenil-4-il]etil}-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-(2,2,2-trifluoro-1 -[4'-[3,3,3-trifluoro-1 -hidroxi-1 -metilpropil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-(2,2,2-1 -{4-[2,2,2-trífluoro-1 -hidroxi-1 -(thfluorometil)etil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinamida; N1-(1 -cíanociclopropil)-4-fluoro-N2-(2,2,2-1 -[4'-(2,2,2-trifluoro-1 -hidroxi-1 -metiletil)bifenil-4-il]etil}-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-(2,2,2-thfluoro-1 -{4'-[1 -hidroxi-1 -(trifluorometil)propil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinamida; N -(l -cianociclopropil)-N -(1 -{4'-[2,2-difluoro-1-hidroxi-1-metiletil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-N2-(1 -{4'-[2,2-difluoro-1-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N2-[1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetil]-N1-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-N2-((1 S)-1 -{4'-[(1 R)-2,2-difluoro-1 -hidroxietil]bifenil-4-il}-2,2,2-thfluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N1-(1-cíanociclopropil)-N2-((1S)-1 -{4'-[(1 S)-2,2-difluoro-1-hidroxietil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1-[4-(2,2,2-trifluoro-1-hidroxietil)bifenil-4-il]etil}-L-leucinamida; N^ÍI -cianociclopropilH-fluoro-N^ÍI S^^^-trífluoro-l^'- I S)-3,3,3-t fluoro-1-hidroxi-1-metilpropil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-tpfluoro-1-{4'-[(1 R)- 3,3,3-trifluoro-1 -hidroxi-1 -met?lpropil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinam¡da; N1-(1 -cianoc?clopropil)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -[4'-(R)-(2,2,2-trifluoro-1-hidroxietil)bifenil-4-il]et¡l)-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -{4'-[2,2,2-thfluoro-1-hidroxi-1 -(trifluorometil)etil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -{4'-(2,2,2-thfluoro-1 -hidroxi-1 -met?letil)bifenil-4-il]etil}-L-leucinamida; N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-tr?fluoro-1 -{4'-[1 -h?drox?-1 -(tr?fluoromet?l)prop?l]b?fen?l-4-?l}et?l)-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-N -((1 S)-1-{4'-[(1 R)-2,2-d?fluoro-1-h?drox?-1 -met?let?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tpfluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-N2-((1 S)-1-{4'-[(1 S)-2,2-d?fluoro-1-h?drox?- 1 -met?let?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N1-(1-c?anoc?cloprop?l)-N2-((1 S)-1-{4'-[(1 S)-2,2-d?fluoro-1-h?drox?-1 -(h?drox?met?l)et?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N1-(1-c?anoc?cloprop?l)-N2-((1 S)-1-{4'-[(1 R)-2,2-d?fluoro-1 -h?drox?-1 -(h?drox?met?l)et?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N2-[(1 S)-1 -(4-bromofen?l)-2,2,2-tpfluoroet?l]-N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, y sales, estereoisómeros y derivados de N-oxido farmacéuticamente aceptable de los mismos También se incluyen dentro del alcance de la presente invención una composición farmacéutica la cual está constituida de un compuesto de fórmula I como se describe en lo anterior y un portador farmacéuticamente aceptable La invención también contempla abarcar una composición farmacéutica la cual esta constituida de un portador farmacéuticamente aceptable y cualquiera de los compuestos descritos específicamente en la presente solicitud Otra modalidad de la presente invención se relaciona con una composición farmacéutica oral que comprende un compuesto de formula I o una sal, estereoisómero o derivado N-óxido farmacéuticamente aceptable del mismo, adaptada para inhibir la resorción ósea de acuerdo con un protocolo continuo que tiene un intervalo de dosificación de una vez a la semana, dos veces a la semana, dos veces al mes o una vez al mes. Estos y otros aspectos de la invención se volverán evidentes a partir de las enseñanzas contenidas en la presente.

Utilidades Los compuestos de la presente invención son inhibidores de catepsina y por lo tanto son útiles para tratar o evitar enfermedades o condiciones dependientes de catepsina en mamíferos, preferiblemente humanos. Específicamente, los compuestos de la presente invención son inhibidores de catepsina K y por lo tanto son útiles para evitar enfermedades o condiciones dependientes de catepsina K en mamíferos, preferiblemente humanos. Los compuestos de la presente invención tienen ventajas sobre compuestos estructuralmente similares conocidos en la técnica en la medida en que tienen un perfil farmacocinético notablemente mejorado. Específicamente, los compuestos de la presente invención tienen excelente bíodisponibilidad, como se ejemplifica, pero no se limita a dosis de 10 miligramos por kilogramo en ratas Sprague Dawley macho en metocel 0.5-1 %. Adicionalmente, los compuestos de la presente invención proporcionan una mayor exposición sistémica al medicamento en comparación con sus compuestos estructuralmente similares conocidos en la técnica. El término "enfermedades o condiciones dependientes de catepsina" se refiere a condiciones patológicas que dependen de la actividad de una o más catepsinas. El término "enfermedades o condiciones dependientes de catepsina K" se refiere a condiciones patológicas que dependen de la actividad de catepsina K. Las enfermedades asociadas con las actividades de catepsina K incluyen osteoporosis, osteoporosis inducida por glucocorticoide, enfermedad de Paget, enfermedad anormal, pérdida de dientes, fracturas óseas, artritis reumatoide, osteoartritis, osteolisis periprostética, osteogénesis imperfecta, aterosclerosis, obesidad, glaucoma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica y cáncer que incluye enfermedad ósea metastásica, hipercalcemia o cáncer y mieloma múltiple. Al tratar dichas condiciones con compuestos que se reclaman en este documento, la cantidad terapéutica requerida vahará de acuerdo con la enfermedad específica y se puede determinar fácilmente por aquellos expertos en la técnica. Aunque el tratamiento y la prevención se contemplan por el alcance de la invención, el tratamiento de estas condiciones es el uso preferido. Una modalidad de la invención es un método para inhibir la actividad de catepsina en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior.

Una clase de la modalidad es el método en donde la actividad de catepsina es actividad de catepsina K Otra modalidad de la invención es un método para tratar o evitar condiciones dependientes de catepsina en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Una clase de la modalidad es el método en donde la actividad de catepsina es actividad de catepsina K Otra modalidad de la invención es un método que inhibe la pérdida ósea en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Otra modalidad de la invención es un método para reducir la pérdida osea en un mamífero en necesidad de la misma, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Una modalidad adicional de la invención es un método para tratar recambio oseo aumentado anormalmente y fracturas óseas en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior La utilidad de los inhibidores de catepsina K en la inhibición de resorción ósea se conoce en la literatura, véase Stroup, G.B., Lark, M.W., Veber, DF., Bhattacharrya, A., Blake, S., Daré, L.C., Erhard, K.F., Hoffman, S.J., James, LE, Marquis, R.w., Ru, Y., Vasko-Moser, J.A., Smith, B.R., Tomaszek, T. y Gowen, M. Potent and selective inhibition of human cathepsin K leads to inhíbition of bone resorption in vivo in a nonhuman primate. J. Bone Miner. Res., 16:1739-1746; 2001 ; and Votta, B.J., Levy, M.A., Badger, A., Dodds, R.A., James, LE., Thompson, S., Bossard, M.J., Carr, T., Connor, J.R., Tomaszek, T.A., Szewczuk, L., Drake, F.H., Veber, D., and Gowen, M. Peptide aldehyde inhibitors of cathepsin K inhibí bone resorption both in vivo and in vitro. J. Bone Miner. Res. 12:1396-1406; 1997. Otra modalidad de la invención es un método para tratar o evitar osteoporosis en un mamífero en necesidad del mismo que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas anteriores descritas antes. La utilidad de inhibidores de catepsina K en el tratamiento o prevención de osteoporosis, que incluye osteoporosis inducida por glucocorticoides, se conoce en la literatura, véase Saftig, P., Hunziker, E., Wehmeyer, O., Jones, S., Boyde, A., Rommerskirch, W., Moritz, J.D., Schu, P., and Vonfigura, K. Impaired osteoclast bone resorptíon leads to osteopetrosis in cathepsin K-deficient mice. Proc. Nalt. Acad. Sci. USA 95:13453-13458; 1998. Otra modalidad de la invención es un método para tratar o evitar enfermedad periodontal o pérdida de dientes en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas anteriores descritas antes La utilidad de los inhibidores de catepsina K en el tratamiento o prevención de enfermedad penodontal o pérdida de dientes se ha expuesto a la literatura, véase Sasaki, T , "Differentiation and functions of osteoclasts and osontoclasts in minerahzed tissue resorption," Microsc Res Tech 2003, Aug 15,61 (6) 483-95 Otra modalidad de la invención es un método para tratar o evitar artritis reumatoide o una condición artrítica reumatoide en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Se sabe de la literatura que la destrucción progresiva de hueso peparticular es un causa principal de disfuncion articular y de mcapacitación en pacientes con artritis reumatoide (RA), véase Goldnng SR, "Pathogenesis of bone erosions in rheumatoid arthntis" Curr Opin Rehumatol 2002, 14 406-10 El análisis de los tejidos de la articulación de pacientes con RA ha mostrado pruebas de que los osteoclastos catepsina K positivos son los tipos de células que median la resorción osea focal asociada con lesión sinovial reumatoide, véase Hou, W-S, Li, W Keyszer, G Weber, E, Levy, R Klein, MJ, Gravallese, EM, Goldring, SR, Bromme, D, "Compapson of Cathepsin K and S expression within the Rheumatoid and Ostearthptic Synovium", Arthptis Rheumatism 2002, 46 663-74 Ademas, la perdida osea generalizada es una causa principal de morbilidad asociada con RA grave. La frecuencia de fracturas de cadera y de columna vertebral se incrementa de manera sustancial en pacientes con RA crónica, véase Gould, A, Sambrook, P. Devlin J et al, "Osteoclastic activatíon is the principal mechanism leading to secondary osteoporosis in rheumatoid arthritis". J. Rheumatol. 1998; 25:1282-9. La utilidad de inhibidores de catepsina K en el tratamiento o prevención de resorción en el hueso subarticular y de pérdida ósea generalizada representa un enfoque razonado para intervención farmacológica de artritis reumatoide. Otra modalidad de la invención es un método para tratar o evitar el progreso de osteoartritis en un mamífero en necesidad del mismo que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior. Se conoce en la literatura que la osteoartritis (OA) está acompañada por cambios bien definidos en las articulaciones que incluyen erosión de la superficie de cartílago articular, osificación/osteofitosis endocondrial pe articular y esclerosis ósea subcondrial y formación de quistes, véase Oettmeier R. Abendroth, K. "Osteoarthritis and bone: osteologic types of osteoarthritis of the hip", Skeletal Radiol. 1989; 18:165-74. Recientemente se ha sugerido la contribución potencial de la esclerosis ósea subcondrial al inicio y progreso de OA. El hueso subcondrial rigidificado como la articulación que responde a carga impulsiva repetitiva, es menos susceptible de atenuar y distribuir fuerzas a través de la articulación, sometiéndolas a tensiones mecánicas mayores a través de la superficie del cartílago articular. Esto a su vez acelera el desgaste del cartílago y lo fibrila, véase Radin, EL y Rose RM, "Role of subchondral bone in the initiation and progression of cartilage damage", Clin. Orthop. 1986; 213:34-40. La inhibición de resorción ósea subarticular excesiva por un agente antiresortivo tal como inhibidor de catepsina K, generará inhibición del recambio óseo subcondrial lo que puede tener un impacto favorable en el progreso de OA. Además de la hipótesis anterior, la expresión de proteína de catepsina K recientemente se ha identificado en fibroblastos sinoviales, células similares a macrófagos y condrocitos del sinovio y especímenes de cartílago articular derivados de pacientes con OA, véase Hou, W-S, Li, W, Keyszer, G, Weber, E, Levy, R, Klein, MJ, Gravallese, EM, Goldring, SR, Bromme, D, "Comparison of Cathepsin K and S expression within the Rheumatoid and Osteoarthritic Synovium", Arthritis Reumatism 2002; 46: 663-74; y Dodd, RA, Connor, JR, Drake, FH, Gowen, M, "Expression of Cathepsin K messenger RNA in giant cells and their precursors in human osteoarthritic synovial tissues". Arthritis Rheumatism 1999; 42:1588-93; y Konttinen, YT, Mandelín, J, Li, T-F, Salo, J, Lassus, J et al. "Acidic cysteine endoproteinase cathepsin K in the degeneration of the superficial articular hyaline cartilage in osteoarthritís", Arthritis Rheumatism 2002; 46: 953-60. Estos estudios recientes han implicado el papel de catepsina K en la destrucción de colágeno tipo II en el cartílago articular asociado con el progreso de osteoartritis. La utilidad de inhibidores de catepsina K en el tratamiento o prevención de osteoartritis como se describe en esta invención por lo tanto comprende dos mecanismos diferentes, uno es la inhibición del recambio subcondnal impulsado por osteoclastos y dos es en la inhibición directa de la degeneración de colágeno tipo II en el sinovio y cartílago de pacientes con OA Otra modalidad de la invención es un método para tratar osteólisis penprostética, en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior El uso de inhibidores de catepsina K para el tratamiento de osteóhsis pepprostética se discute en la literatura, véase Mandelin, J , et al , "Interface tissues fibroblasts from loóse total hip replacement prosthesis produce receptor activator of nuclear factor-kappaB hgand, osteoprotegenn and cathepsin K," J Rheumatol 2005 Apr, 32(4), 713-20 Otra modalidad de la invención es un método para tratar enfermedades óseas, tales como la enfermedad de Paget, osteogenesis imperfecta y lesiones oseas a partir de mieloma múltiple en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior El uso de inhibidores de catepsina K para el tratamiento de enfermedad Paget, osteogenesis imperfecta y lesiones oseas a partir de mieloma múltiple se expone en la literatura, véase Lipton, A , "New therapeutic agents for the treatment of bone diseases," Expert Opin Biol Ther 2005 Jun, 5(6) 817-32 Otra modalidad de la invención es un método para tratar cáncer en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Se conoce en la literatura que la catepsina K se expresa en carcinoma de mama humano, cáncer de próstata y condpoma y tiene capacidades de degradación de matriz, véase Littlewood-Evans AJ, Bilbe G, Bowler WB, Farley D, Wlodarski B, Kokubo T, Inaoka T, Sloane J, Evans DB, Gallagher JA, "The osteoclast-associated protease cathepsin K is expressed in human breast carcinoma," Cáncer Res 1997 Dec 1 , 57(23) 5386-90 Brubaker KD, Vessella RL, True LD, Thomas R, Corey E, "Cathepsin K mRNA and protein expression in prostate cáncer progression," J Bone Miner Res 2003 18, 222-30 Haeckel C, Krueger S, Kuester D, Ostertag H, Samn M, Buehiing F, Broemme D, Czemiak B, Roessner A, "Expression of cathepsin K in chordoma," Hum Pathol 2000 Jul, 31 (7) 834-40 Otra modalidad de la invención es un método para tratar aterosclerosis en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Se conoce en la literatura que la catepsma K se expresa en ateroma humano y presenta una actividad significativa de elastasa, véase Sukhova GK, Shi GP, Simón DI, Chapman HA, Libby P, "Expression of the elastolytic cathepsins S and K in human atheroma and regulation of their production in smooth muscle cells," J Clin Invest 1998 Aug 102, 576-83. Otra modalidad de la invención es un método para tratar obesidad en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior. Se conoce en la literatura que el ARNm para catepsina K se incrementa en tejido adiposo en varios modelos de obesidad en ratón y también en tejido adiposo de humanos obesos del género masculino, véase Chiellini C, Costa M, Novelli SE, Amri EZ, Benzi L, Bertacca A, Cohén P, Del Prato S, Friedman JM, Maffei M, "Identification of cathepsin K as a novel marker of adiposity in white adipose tissue," J Cell Physiol 2003, 195, 309-21 . Otra modalidad de la invención es un método para tratar glaucoma en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero un compuesto terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior. La catepsina K se expresa en altos niveles en el iris, cuerpo ciliar y epitelio pigmentado retinal y como tal puede ser útil en el tratamiento de glaucoma, véase Ortega, J., et al., "Gene Expression of Proteases and Protease Inhibitors in the Human Ciliary Epithelium and ODM-2 cells," Exp. Eye Res (1997) 65, 289-299; publicación internacional WO 2004/058238 (Alcon, Inc.).

Otra modalidad de la invención es un método para tratar enfermedad pulmonar obstructiva crónica en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Se conoce en la literatura que la catepsina K juega un papel en la fibrosis pulmonar, véase Buhhng, F , et al , "Pivotal role of cathepsin K in lung fibrosis," Am J Pathol 2004 Jun, 164(6) 2203-16 Otra modalidad de la invención es un método para tratar infecciones por parásitos en un mamífero, en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior Se conoce en la literatura que las catepsinas de mamífero se relacionan con cisternas proteasas similares a papaína las cuales juegan un papel importante en el ciclo de vida de estos parásitos Dichos parásitos están involucrados en las enfermedades de paludismo, tripanosomiasis americana, tripanosomiasis africana, leishmaniasis, giardiasis, tpcomoniasis, amibiasis, esquistosomiasis, fasciolasis, paragonimiasis y lombrices intestinales, véase Lecaille F, Kaleta J, Bromme D , Human and parasitic papain-hke cysteine proteases their role m physiology and pathology and recent developments in inhibitor design Chem Rev 2002 102, 4459-88 Otra modalidad de la invención es un método para tratar síndrome respiratorio agudo grave (SARS) en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior. Otra modalidad de la invención es un método para tratar enfermedad ósea metastásica en un mamífero en necesidad del mismo, que comprende administrar al mamífero una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior. Se conoce en la literatura que los osteoclastos son los responsables de la resorción ósea y que la destrucción del hueso y la hipercalcemia inducida por tumores metastásicos se lleva a cabo por los osteoclastos. En consecuencia, la inhibición de los osteoclastos puede evitar la destrucción ósea y metástasis de los huesos, véase Miyamoto, T. y Suda, T., "Differentiation and function of osteoclasts," Keio J Med 2003 Mar; 52(1 ):1-7. Otra modalidad de la invención es la administración a un mamífero de una cantidad terapéuticamente eficaz de cualquiera de los compuestos o cualquiera de las composiciones farmacéuticas descritas en lo anterior para el tratamiento de las enfermedades del mamífero relacionadas con catepsina S que incluyen enfermedad de Alzheimer, aterosclerosis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, cáncer y ciertos trastornos autoinmunes que incluyen, pero no se limitan a diabetes de inicio juvenil, esclerosis múltiple, pénfigo vulgar, enfermedad de Grave, miastenia grave, lupus eptemaso sistémico, artritis reumatoide y tiroiditis de Hashimoto, trastornos alérgicos que incluyen pero que no se limitan a asma, y respuestas inmunológicas alogénicas que incluyen pero que no se limitan a rechazo de transplante de órganos o injertos de tejido Se sabe en la literatura que la actividad de catepsina S se relaciona con los estados de enfermedad anteriores, véase Munger JS, Haass C, Lemere CA, Shi GP, Wong WS, Teplow DB, Selkoe DJ, Chapman HA, "Lysosomal processing of amyloíd precursor protein to A beta peptides a distinct role for cathepsin S," Biochem J 1995 311 , 299-305 Sukhova GK, Zhang Y, Pan JH, Wada Y, Yamamoto T, Naito M, Kodama T, Tsimikas S, Witztum JL, Lu ML, Sakara Y, Chin MT, Libby P, Shi GP, "Deficiency of cathepsin S reduces atherosclerosis in LDL receptor-deficient mice," J Clin Invest 2003 111 , 897-906 Zheng T, Zhu Z, Wang Z, Homer RJ, Ma B, Riese RJ Jr, Chapman HA Jr, Shapiro SD, Elias JA, "Inducible targeting of IL-13 to the adult lung causes matrix metalloproteinase-and cathepsin-dependent emphysema," J Clin Invest 2000 106, 1081 -93 Shi GP, Sukhova GK, Kuzuya M, Ye Q, Du J, Zhang Y, Pan JH, Lu ML, Cheng XW, Iguchi A, Perry S, Lee AM, Chapman HA, Libby P, "Deficiency of the cysteine protease cathepsin S impairs microvessel growth," Circ Res 2003 92, 493-500 Nakagawa TY, Bpssette WH, Lira PD, Gpffiths RJ, Petrushova N, Stock J, McNeish JD, Eastman SE, Howard ED, Clarke SR, Rosloniec EF, Elliott EA, Rudensky AY, "Impaired invanant chain degradation and antigen presentation and diminished collagen-induced arthptis in cathepsin S nuil mice," Immunity 1999 10, 207-17 Ejemplificando la invención está el uso de cualquiera de los compuestos descritos en lo anterior en la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de osteoporosis en un mamífero en necesidad del mismo Una ejemplificación adicional de la invención es el uso de cualquiera de los compuestos descritos en lo anterior en la preparación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de pérdida osea, resorción ósea, fracturas de huesos, enfermedad ósea metastasica y/o trastornos relacionados con el funcionamiento de catepsina Ejemphficaciones adicionales de la invención es el uso de inhibidor de catepsma K de la presente invención o una sal, estereoisomero o derivado N-óxido farmacéuticamente aceptable del mismo, para la elaboración de un medicamento, como una dosis unitaria oral para tratar un trastorno que se selecciona de osteoporosis, osteporosis inducida por glucocorticoides, enfermedad de Paget, recambio óseo aumentado de manera anormal, enfermedad pepodontal, perdida de dientes, fracturas oseas, artritis reumatoide, osteoartptis, osteólisis penprostetica, osteogénesis imperfecta, aterosclerosis, obesidad, glaucoma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de huesos metastásica, hipercalcemia o cáncer o mieloma múltiple, en un mamífero en necesidad del mismo, de acuerdo con un protocolo continuo que tiene un intervalo de dosificación de una vez a la semana, dos veces a la semana, dos veces al mes o una vez al mes También ejemplifican la invención un método para tratar un trastorno que se selecciona de osteoporosis, osteoporosis inducida por glucocorticoides, enfermedad de Paget, recambio óseo aumentado de manera anormal, enfermedad pepodontal, pérdida de dientes, fracturas óseas, artritis reumatoide, osteoartntis, osteóhsis penprostética, osteogénesis imperfecta, aterosclerosis, obesidad, glaucoma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad de los huesos metastásica, hipercalcemia de cáncer o mieloma múltiple, por administración de un inhibidor de catepsina K de la presente invención a un mamífero en necesidad del mismo de acuerdo con un protocolo continuo que tiene un intervalo de dosificación de una vez a la semana, dos veces a la semana, dos veces al mes y una vez al mes. Los compuestos de esta invención se pueden administrar a mamíferos, preferiblemente humanos, ya sea solos o preferiblemente en combinación con portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables, opcionalmente con adyuvantes conocidos, tales como alumbre, en una composición farmacéutica de acuerdo con la practica farmacéutica estándar Los compuestos se pueden administrar oralmente o por vía parenteral, e incluyen las vías intravenosa, intramuscular, intrapentoneal, subcutánea, rectal y tópica como vías de administración En el caso de comprimidos para uso oral, los portadores los cuales se utilizan comúnmente incluyen lactosa y almidón de maíz y agentes lubricantes tales como estearato de magnesio, que son los que se agregan habitualmente Para administración oral en forma de cápsula, los diluyentes útiles incluyen lactosa y almidón de maíz seco Para uso oral de un compuesto terapéutico de acuerdo con esta invención, el compuesto seleccionado se puede administrar, por ejemplo, en forma de comprimidos o cápsulas, o como una solución o suspensión acuosa Para administración oral en forma de un comprimido o cápsula, el componente de medicamento activo se puede combinar con un portador inerte, farmacéuticamente aceptable, no tóxico oral tal como lactosa, almidón, sacarosa, glucosa, metilcelulosa, estearato de magnesio, fosfato dicálcico, sulfato de calcio, manitol, sorbitol y similar, para administración oral en forma líquida, los componentes de medicamento oral se pueden combinar con cualquier portador inerte, farmacéuticamente aceptable, no tóxico, oral, tal como etanol, glicerol, agua y similar Además, cuando se desee o sea necesario, también se pueden incorporar en la mezcla aglutinantes, lubricantes, agentes desintegrantes y agentes colorantes adecuados Los aglutinantes adecuados incluyen almidón, gelatina, azúcares naturales tales como glucosa o ß-lactosa, edulcorantes de maíz, gomas naturales y sintéticas tal como goma acacia, goma de tragacanto o alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol, ceras y similares Los lubricantes utilizados en estas formas de dosificación incluyen oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio, cloruro de sodio y similares Los desintegradores incluyen, sin limitación, almidón, metilcelulosa, agar, bentonita, goma de xantano y similares Cuando se requiere suspensiones acuosas para uso oral, el ingrediente activo se combina con agentes emulsificantes y mejoradores de suspensión Si se desea se pueden agregar ciertos agentes edulcorantes y/o sabopzantes Para uso intramuscular, intrapeptoneal, subcutáneo e intravenoso se pueden preparar habitualmente soluciones estériles del ingnrediente activo y se ajusta y amortigua adecuadamente el pH de las soluciones Para uso intravenoso, la concentración total de solutos se debe controlar con el fin de volver isotónica a la preparación Los compuestos de la presente invención también se pueden administrar en forma de sistemas de suministro de hposomas, tales como vesículas unilamelares pequeñas, vesículas unilamelares grandes y vesículas multilamelares Los hposomas se pueden formar de una diversidad de fosfolípidos, tales como colesterol, esteplamina o fosfatidilcolinas Los compuestos de la presente invención también se pueden suministrar mediante el uso de anticuerpos monoclonales como portadores individuales a los cuales se acoplan las moléculas del compuesto Los compuestos de la presente invención también se pueden acoplar con polímeros solubles como portadores de medicamentos dirigibles Dichos polímeros pueden incluir polivinilpirrohdona, copohmero de pirano, pohhidroxipropilmetacplamida-fenol, pohhidroxi-etilaspartamida-fenol o polióxido de etileno-polilisina sustituida con residuos palmitoilo Además, los compuestos de la presente invención se pueden acoplar a una clase de polímeros biodegradables útiles en la obtención de la liberación controlada de un medicamento, por ejemplo acido polilactico, ácido polighcolico, copolímeros de ácido poliláctico y po glicóhco, poh-e-caprolactona, ácido polihidroxibutípco, pohortoésteres, poliacetales, po hidropiranos, policianoacnlatos y copohmeros de bloque reticulados o anfipáticos de hidrogeles Los presentes compuestos también son útiles en combinación con agentes conocidos útiles para tratar o evitar osteoporosis, osteporosis inducida por glucocorticoides, enfermedad de Paget, recambio óseo aumentado de manera anormal, enfermedad pepodontal, pérdida de dientes, fracturas oseas, artritis reumatoide, osteoartptis, osteólisis pepprostética, osteogénesis imperfecta, enfermedad de huesos metastásica, hipercalcemia o cáncer y mieloma múltiple Las combinaciones de los compuetos descritos actualmente con otros agentes útiles para tratar o evitar osteoporosis u otros trastornos óseos están dentro del alcance de la invención Una persona habitualmente experta en la técnica será capaz de discernir cuáles combinaciones de agentes pueden ser útiles en base en las características particulares de los medicamentos y la enfermedad involucrada Dichos agentes incluyen a los siguientes un bifosfonato orgánico, un modulador y receptor de estrógeno, un modulador de receptor de andrógeno, un inhibidor de ATPasa de protón de osteoclastos, un inhibidor de HMG-CoA reductasa, un antagonista de receptor de integpna, una vitamina D, un análogo sintético de vitamina D, un agente anabólico tal como PTH, un medicamento antnnflamatopo no esteroideo, un inhibidor selectivo de c?cloox?genasa-2, un inhibidor de ?nterleuc?na-1 ß, un inhibidor LOX/COX, un inhibidor RANKL y las sales y mezclas farmacéuticamente aceptables de los mismos Una combinación preferida es un compuesto de la presente invención y un bifosfonato orgánico Otra combinación preferida es un compuesto de la presente invención y un modulador de receptor de estrógeno Otra combinación preferida es un compuesto de la presente invención y un modulador de receptor de andrógeno Otra combinación preferida es un compuesto de la presente invención y un agente anabólico de osteoblastos El "bisfosfonato orgánico" incluye, pero no se limita a compuestos de la fórmula química en donde n es un número entero de 0 a 7 y en donde A y X se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H, OH, halógeno, NH2, SH, fenilo, alquilo de 1 a 30 átomos d carbono, cicloalquilo de 3 a 30 átomos de carbono ramificado o una estructura de anillo bicíchca que contiene dos o tres de N, alquilo de 1 a 30 átomos de carbono sustituido, alquilo de 1 a 10 átomos de carbono sustituido con NH2, cicloalquilo de 3 a 10 átomos de carbono ramificado o sustituido con NH2, dialquilo de 1 a 10 átomos de carbono sustituido con NH2, alcoxi de 1 a 10 átomos de carbono, alquilo de 1 a 10 átomos de carbono sustituido con tío, tiofenilo, halofeniltio, alquilo de 1 a 10 átomos de carbono sustituido con fenilo, pindilo, furanilo, pirrolidinilo, imidazolilo, imidazopipdinilo y bencilo de manera tal que tanto A como X no se seleccionan de H u OH cuando n es 0, o A y X se toman junto con el átomo de carbono o los átomos a los cuales están unidos para formar un anillo de 3 a 10 átomos de carbono En la fórmula química anterior, los grupos alquilo pueden ser lineales, ramificados o cíclicos, con la condición de que se seleccionen suficientes átomos para la fórmula química El alquilo de 1 a 30 átomos de carbono sustituido puede incluir una amplia variedad de sustituyentes, cuyos ejemplos no limitantes incluyen aquellos que se seleccionan del grupo que consiste de fenilo, pindilo, furanilo, pirrohdinilo, imidazonilo, NH2, alquilo de 1 a 10 átomos de carbono o dialquilo sustituido con NH2, OH, SH y alcoxi de 1 a 10 átomos de carbono La formula química anterior también se pretende que abarque estructuras complejas carbocíc cas, aromáticas y heteroatomos para los sustituyentes A y/o X, cuyos ejemplos no limitantes incluyen naftilo, quinohlo, isoquinolilo, adamantilo y clorofeniltio Las sales farmacéuticamente aceptables y derivados de los bisfosfonatos también son útiles en la presente Los ejemplos no limitantes de sales incluyen aquellos que se seleccionan del grupo que consiste de metal álcali, metal alcalino amonio y amonio sustituido con mono-, di-, tri- o tetraalquilo de 1 a 10 átomos de carbono Las sales preferidas son aquellas que se seleccionan del grupo que consiste de sodio, potasio, calcio, magnesio y sales de amonio Las mas preferidas son sales de sodio Los ejemplos no limitantes de derivados incluyen aquellos que se seleccionan del grupo que consiste de esteres, hidratos y amidas Debe hacerse notar que los términos "bisfosfonato" y "bisfosfonatos", como se utilizan en la presente, se refieren a los agentes terapéuticos de la presente invención y significa que también abarcan difosfonatos, ácidos bifosfónicos y ácidos difosfónicos así como sales y derivados de estos materiales El uso de una nomenclatura específica con referencia al bisfosfonato o los bisfosfonatos no significa limitar el alcance de la presente invención, a menos que se indique específicamente Debido a la nomenclatura mixta actualmente en uso por aquellos habitualmente expertos en la técnica, la referencia a un peso o porcentaje específico de un compuesto bisfosfonato en la presente invención se basa en una base en peso de acido activo, a menos que se indique de otra manera en la presente Por ejemplo, la frase "aproximadamente 5 mg de inhibición de resorción ósea de bisfosfonato seleccionado del grupo que consiste de alendronato, sales farmacéuticamente aceptable del mismo y mezclas de los mismos en una base en peso de ácido activo alendrónico" significa que la cantidad del compuesto bisfosfonato seleccionada se calcula en base en 5 mg de ácido alendrónico Los ejemplos no limitantes de bisfosfonatos útiles en la presente incluyen los siguientes alendronato, el cual también se conoce como ácido alendronico, ácido 4-am?no-1-h?drox?but?l?den-1 ,1-b?sfosfón?co, alendronato de sodio o alendronato monosodíco trihidratado, trihidrato monosodíco del ácido 4-am?no-1 -h?drox?but?l?den-1 ,1 -b?sfosfón?co El alendronato se describe en las patentes de E U A 4,922,007 para Kieczykowski et al , expedida el 1 de mayo de 1990, 5,019,651 para Kieczykowski et al , expedida el 28 de mayo de 1991 , 5,510,517 para Dauer et al , expedida el 23 de abril de 1996, 5,648,491 para Dauer et al , expedida el 15 de julio de 1997, la totalidad de las cuales se incorporan como referencia en la presente en su totalidad El ácido c?clohept?lam?nomet?len-1 ,1 -b?sfosfón?co, YM 175, Yamanouchi (incadronato, anteriormente conocido como cimadronato) se describe en la patente de E U A 4,970,335 para Isomura et al , expedida el 13 de noviembre de 1990, la cual se incorpora como referencia en la presente en su totalidad El acido 1 ,1-d?cloromet?len-1 ,1-d?fosfón?co (acido clodronico) y la sal disodica (clodronato, Procter and Gamble) se describen en la patente Belga 672,205 (1966) en J Org Chem 32, 411 1 (1967), ambas las cuales se incorporan como referencia en su totalidad en la presente Acido 1 -h?drox?-3-(1-p?rrol?d?n?l)-prop?l?den-1 ,1-b?sfosfón?co (EB- 1053) Acido 1 -h?drox?etan-1 ,1-d?fosfón?co (ácido etidrónico) Acido 1 -h?drox?-3-(N-met?l-N-pent?lam?no)prop?l?den-1 ,1 -bisfosfonico también conocido como BM-210955, Boehpnger-Mannheim (ibandronato), se describe en la patente de E U A No 4,927,814, expedida el 22 de mayo de 1990, la cual se incorpora como referencia en la presente en su totalidad 1 -h?drox?-2-?m?dazo-(1 ,2-a)p?pd?n-3et?l?deno (minodronato) Acido 6-am?no-1 -h?drox?hex?l?den-1 ,1 -b?sfosfón?co (nendronato) Acido 3-(d?met?lam?no)-1 -h?drox?prop?l?den-1 ,1 -b?sfosfón?co (olpadronato) Acido 3-am?no-1 -h?drox?prop?l?den-1 ,1 -b?sfosfón?co (pamidronato) Acido [2-(2-p?pd?n?l)et?l?den]-1 , 1 -bisfosfónico (pindronato) como se describe en la patente de E U A. No. 4,761 ,406, la cual se incorpora en la presente como referencia en su totalidad Acido 1 -h?drox?-2-(3-p?r?d?n?l)-et?l?den-1 ,1 -bisfosfónico (risedronato) ácido (4-clorofen?l)t?ometan-1 ,1-d?sfosfón?co (tiludronato) como se describe en la patente de E U A 4,876,248 para Breliere et al., 24 de octubre de 1989, la cual se incorpora como referencia en la presente en su totalidad Acido 1 -h?drox?-2-(1 H-?m?dazol- -?l)et?l?den-1 ,1 -bisfosfónico (zoledronato) Los ejemplos no limitantes de bisfosfonatos incluyen alendronato, cimadronato, clodronato, etidronato, ibandronato, incadronato, minodronato, nendronato, olpadronato, pamidronato, pipdronato, risedronato, tiludronato y zolendronato y sales y esteres farmacéuticamente aceptables de los mismos Un bisfosfonato particularmente preferido es alendronato, especialmente la sal de sodio, potasio, calcio, magnesio o amonio de ácido alendrónico Los ejemplos del bisfosfonato preferido es una sal de sodio de ácido alendrónico, especialmente una sal de sodio hidratada de ácido alendrónico La sal se puede hidratar con un número completo de moles de agua o números no completos de moles de agua Los ejemplos adicionales del bisfosfonato preferido es una sal de sodio hidratada de ácido alendrónico, especialmente cuando la sal hidratada es alendronato monosodíco tphidratado Se reconoce que las mezclas de dos o mas de los bisfosfonatos activos se pueden utilizar La dosificación precisa del bisfosfonato orgánico variará con el protocolo de dosificación, el bisfosfonato particular que se seleccione, la edad, tamaño, sexo y condición del mamífero o humano, la naturaleza y gravedad del trastorno que va a ser tratado y otros factores relevantes médicos y físicos De esta manera, una cantidad precisa farmacéuticamente eficaz no se puede especificar por adelantado y se puede determinar fácilmente por el médico o el clínico quien realiza los cuidados Las cantidades apropiadas se pueden determinar por experimentación sistemática a partir de modelos animales y estudios clínicos en humanos Generalmente, una cantidad apropiada de bisfosfonato se selecciona para obtener un efecto inhibidor de resorción osea, es decir, una cantidad inhibidora de resorción ósea del bisfosfonato que se administra Para humanos, una dosis oral eficaz de bisfosfonato típicamente es de aproximadamente 1 5 a aproximadamente 6000 µg/kg de peso corporal y de manera preferible aproximadamente 10 a aproximadamente 2000 µg/kg de peso corporal Para el alendronato monosodíco tphidratado, las dosis comunes en humanos las cuales se administran generalmente están en el intervalo de aproximadamente 2 mg/día a aproximadamente 10 mg/día, de manera preferible aproximadamente 5 mg/día a aproximadamente 40 mg/día En los Estados Unidos, las dosificaciones aprobadas actualmente para el alendronato monosodíco tphidratado son de 5 mg/día para evitar osteoporosis, de 10 mg/día para tratar osteoporosis y de 40 mg/día para tratar la enfermedad de Paget En regímenes de dosificación alternativos, el bisfosfonato se puede administrar en intervalos diferentes a diariamente, pro ejemplo, dosificación una vez a la semana, dosificación dos veces a la semana, dosificación cada dos semanas o dosificación dos veces al mes En un régimen de dosificación de una vez a la semana, el alendronato monosodíco trihidratado se administrará en dosificaciones de 35 mg/semana o 70 mg/semana El término "moduladores selectivos de receptor de estrógeno" se refiere a compuestos los cuales interfieren o inhiben la unión de estrógeno al receptor, sin importar el mecanismo Los ejemplos de moduladores de receptor de estrogeno incluyen, pero no se limitan a estrógeno, progestogeno, estradiol, droloxifeno, raloxifeno, lasofoxifeno, TSE-424, tamoxifeno, idoxifeno, LY353381 , LY117081 , toremifeno, fulvestrant, propanoato de 4-[7-(2,2-d?met?l-1 -oxopropox?-4-met?l-2-[4-[2-(1 -p?pepd?n?l)etox?]fen?l]-2H-1 -benzop?ran-3-?l]-fen?l-2,2-d?met?lo, 4,4'-d?h?drox?benzofenon-2,4-d?n?trofen?lh?drazona y SH646 Un "modulador ß de receptor de estrógenos" es un compuesto que agoniza o antagoniza de manera selectiva al receptor ß de estrógenos (ERßagonizante ERß incrementa la trascripción del gen para tpptofano hidrolasa (TPH, la enzima clave en la síntesis de serotonina) vía un evento mediado por ERß Los ejemplos de agonistas de receptor ß de estrógeno se pueden encontrar en la publicación internacional PCT WO 01/82923, la cual se publicó el 08 de noviembre del 2001 y WO 02/41835 la cual se publicó el 20 de mayo del 2002, ambas incorporadas en la presente como referencia en su totalidad El término "moduladores de receptor de andrógeno" se refiere a compuestos que interfieren o inhiben a unión de andrógenos al receptor, sin importar el mecanismo Los ejemplos de moduladores de receptor de andrógeno incluyen finastende y otros inhibidores de 5a-reductasa, nilutamida, flutamida, bicalutamida, harozol y acetato de abiraterona El término "un inhibidor de ATPasa de protón de osteoclasto" se refiere a un inhibidor de la ATPasa de protón la cual se encuentra en la membrana apical de los osteoclastos y se ha informado que juega un papel significativo en el proceso de resorción ósea Esta bomba de protones representa un objetivo atractivo para el diseño de inhibidores de resorción ósea los cuales son potencialmente útiles para el tratamiento y prevención de osteoporosis y enfermedades metabólicas relacionadas Véase C Fariña et al , "Selective inhibitors of the osteoclast vacuolar protón ATPasa as novel bone antiresorptive agents," DDT, 4 163-172 (1999)), la cual se incorpora en la presente como referencia en su totalidad El término "inhibidores de HMG-CoA reductasa" se refiere a inhibidores de 3-hidroxi-3-metilglutahl-CoA reductasa. Los compuestos los cuales tienen actividad inhibidora por HMG-CoA reductasa se pueden identificar fácilmente mediante el uso de análisis bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, véase los análisis descritos o mencionados en la patente de E.U.A. 4,231 ,938 en la columna 6, y WO 84/02131 en las páginas 30-33. Los términos "inhibidor de HMG-CoA reductasa" e "inhibidor de HMG-CoA reductasa" tienen el mismo significado cuando se utilizan en la presente. Los ejemplos de inhibidores de HMG-CoA reductasa que se pueden utilizar incluyen, pero no se limitan a lovastatina (MEVACORMR; véanse las patentes de E.U.A. Nos 4,231 ,938, 4,294,926 y 4,319,039), simvastatina (ZOCORWR; véanse las patentes de E.U.A. Nos. 4,444,784, 4,820,850 y 4,916,239), pravastatina (PRAVACHOLMR; véanse las patentes de E.U.A. Nos. 4,346,227, 4,537,859, 4,410,629, 5,030,447 y 5,180,589), fluvastatina (LESCOLMR; véanse las patentes de E.U.A. Nos. 5,354,772, 4,91 1 ,165 4,929,437, 5, 189, 164, 5,1 18,853, 5,290,946 y 5,356,896), atorvastatina (LIPITORMR; véanse las patentes de E.U.A. Nos. 5,273,995, 4,681 ,893, 5,489,691 y 5,342,952) y cerivastatina (también conocida como rivastatina y BAYCHOLMR; véase la patente de E.U.A. No. 5, 177,080). Las fórmulas estructurales de estos inhibidores de HMG-CoA reductasa adicionales que pueden ser utilizados en los presentes métodos se describe en la página 87 de M. Yalpani, "Cholesterol Lowering Drugs", Chemistry & Industry, pp. 85-89 (5 de febrero de 1996) y en las patentes de E.U.A. Nos. 4,782,084 y 4,885,314. El término inhibidor de HMG-CoA reductasa, como se utiliza en la presente, incluye todas las formas de lactona y de ácido abierto farmacéuticamente aceptables (es decir, cuando el anillo lactona está abierto para formar el ácido libre) así como las formas de sal y éster de los compuestos los cuales tienen actividad inhibidora de HMG-CoA reductasa, y por lo tanto el uso de dichas sales, esteres, formas de ácido abierto 7 lactona se incluyen dentro del alcance de esta invención. Una ilustración de la porción de lactona y su forma correspondiente de ácido abierto se muestra a continuación como estructuras I y II.

Lactona ácido abierto I II En los inhibidores de HMG-CoA reductasa en donde puede existir una forma de ácido abierto, se forman de manera preferible de las formas de sal y éster a partir del ácido abierto y la totalidad de dichas formas incluyen dentro del significado del término "inhibidor de HMG-CoA reductasa", como se utiliza en la presente. Preferiblemente, el inhibidor de HMG-CoA reductasa se selecciona de lovastatina y simvastatina, y de manera más preferible de simvastatina. En la presente, el término "sales farmacéuticamente aceptables" con respecto al inhibidor de HMG-CoA reductasa significará sales no tóxicas de los compuestos utilizados en esta invención los cuales generalmente se preparan al hacer reaccionar el ácido libre con una base orgánica o inorgánica adecuada, particularmente aquellas formadas de cationes tales como sodio, potasio, aluminio, calcio, litio, magnesio, zinc y tetrametilamonío, así como aquellas sales formadas de aminas tales como amoniaco, etilendiamína, N-metilglucamina, lisina, arginina, ornitina, colina, N.N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaina, dietanolamína, procaina, N-bencilfenetilamina, 1 -p-clorbencil-2-pirrolidin-1 '-ilmetilbencimidazol, dietilamina, piperazina y tris(hidroximetil)aminometano. Los ejemplos adicionales de formas de sal de inhibidores de HMG.CoA reductasa pueden incluir, pero no se limitan a acetato, bencensulfonato, benzoato, bicarbonato, bisulfato, bitartrato, borato, bromuro, edetato de calcio, camsilato, carbonato, cloruro, clavulanato, citrato, diclorhidrato, edetato, edisilato, estolato, esilato, fumarato, gluceptato, gluconato, glutamato, glicolilarsanilato, hexilresorcinato, hidrabamina, bromhidrato, clorhidrato, hidroxinaptoato, yoduro, isotionato, lactato, lactobionato, laurato, malato, maleato, mandelato, mesilato, metiisulfato, mucato, napsilato, nitrato, oleato, oxalato, pamaoto, palmitato, pantotenato, fosfato/difosfato, poligalacturonato, salicilato, estereato, subacetato, succinato, tanato, tartrato, teoclato, tosilato, trietiyoduro y valerato. Los derivados de éster de los compuestos inhibidores de HMG.CoA reductasa descritos pueden actuar como profármacos los cuales, cuando se absorben en la corriente sanguínea de una animal homeotérmico, se pueden separar de manera tal que liberan la forma de medicamento y permiten que el medicamento suministre una eficacia terapéutica mejorada. Como se utiliza en lo anterior, los "antagonistas de receptor de integrina" se refiere a compuestos los cuales antagonizan, inhiben o contrarrestan de manera selectiva la unión de un ligando fisiológico a la integrina avß3, a compuestos los cuales antagonizan, inhiben o contrarrestan selectivamente la unión de un ligando fisiológico a la integrina avßs, a compuestos los cuales antagonizan, inhiben o contrarrestan la unión de un ligando fisiológico tanto a la integrina avß3 como a la integrina avßs, y a compuestos los cuales antagonizan, inhiben o contrarrestan la actividad de una o varias integrinas particulares que se expresan en células endoteliales capilares. El término también se refiere a antagonistas de las integrinas avß6, avß8, a-ißi , a2ß? , afi, a6ß? y aeß4. El término también se refiere a antagonistas de cualquier combinación de las integrinas avß3, avß5, avß?, avß8, oti ßi , a2ß? , a5ß?, 6ß? y a6ß4. H.N. Lode y colaboradores en PNAS USA 96: 1591 -1596 (1999) han observado efectos sinergísticos entre el antagonista de integrina antiangionénico av y la proteína de fusión de anticuerpo específico para tumor-citocina (interleucina-2) en la erradicación de metástasis tumorales espontáneas. Estos resultados sugieren que esta combinación tiene potencial para el tratamiento de cáncer y el crecimiento de tumores metastásicos. Los antagonistas del receptor de integrína avß3 inhiben la resorción ósea a través de un mecanismo nuevo distinto de todos los medicamentos disponibles actualmente. Las integrinas son receptores de adhesión transmembranales heterodíméricos que median las interacciones célula-célula y célula-matriz. Las subunidades de integrina a y ß interactúan de manera no covalente y unen ligandos de matriz extracelular de una manera dependiente de cationes divalentes. La integrina más abundante en los osteoclastos es avß3 (> 107/osteoclastos) la cual parece jugar un papel limitador de velocidad en la organización del citoesqueleto importante para el desplazamiento y polarización celulares. El efecto antagonizante de avß3 se selecciona de la inhibición de resorción ósea, inhibición de restenosis, inhibición de degeneración macular, inhibición de artritis e inhibición de cáncer y crecimiento metastásico. El término "un agente anabólico de osteoblastos" se refiere a agentes que se acumulan en hueso, tal como PTH. La administración intermitente de hormona paratiroídea (PTH) o sus fragmentos amino terminales de análogos se ha demostrado que evita, suprime, invierte parcialmente la pérdida ósea y estimula la formación de huesos en animales y humanos. Para una discusión véase D. W. Dempster et al., "Anabolic actions of parathyroid hormone on bone", Endocr Rev 14: 690-709 (1993). Los estudios han demostrado los beneficios clínicos de hormona paratiroidea en estimulación de formación de hueso y por lo tanto incremento de la masa ósea y la fuerza. Los resultados se han reportado por RM Neer et al., en New Eng J Med 344 1434-1441 (2001 ). Además, los fragmentos de proteína relacionada con hormona paratiroidea o los análogos tales como PTHrP-(1 -36) han demostrado potentes efectos anticalciúncos [véase M A Syed et al , "Parathyroíd hormone-related prote?n-(1 -36) stimulates renal tubular calcium reabsorption in normal human volunteers implications for the pathogenesis of humoral hypercalcemia of malignancy", JCEM 86 1525-1531 (2001 )] y también pueden tener potencial como agentes anabólicos para tratar osteoporosis La "vitamina D" incluye, pero no se limita a vitamina D3 (colecalciferol) y vitamina D2 (ergocalciferol) las cuales son percursores biológicamente inactivos que se presentan de manera natural de los metabolitos hidroxilados biológicamente activos de vitamina D 1 a-h?drox? vitamina D, 25-h?drox? vitamina D y 1 a, 25-d?h?drox? vitamina D La vitamina D2 y la vitamina D3 tienen la misma eficacia biológica en humanos Cuando la vitamina D2 o D3 entra a la circulación, se hidroxila por el citocromo P 5o-vitamina D-25-h?drox?lasa para proporcionar 25-h?drox? vitamina D El metabolito de 25-h?drox? vitamina D es biológicamente inerte y es hidroxilado adicionalmente en el pñón por citocromo P450-monoox?genasa, 25 (OH) D-1 -h?drox?lasa para proporcionar 1 ,25-d?h?drox? vitamina D Cuando disminuye el calcio en suero, existe un incremento en la producción de hormona paratiroidea (PTH) lo cual regula la homeostasis de calcio e incrementa las concentraciones plasmáticas de calcio al aumentar la conversión de 25-h?drox? vitamina D a 1 ,25-d?h?drox? vitamina D Se considera que la 1 ,25-d?h?drox? vitamina D es la responsable de los efectos de vitamina D en el metabolismo del calcio y del hueso El metabohto 1 ,25-d?h?drox? es la hormona activa necesaria para mantener la absorción de calcio y la integridad esquelética. La homeostasis de calcio se mantiene por 1 ,25 dihidroxi vitamina D al inducir a las células pluripotenciales monocíticas para que se diferencian en osteoclastos y mantengan el calcio en el intervalo normal, lo que resulta en mineralización ósea por la deposición de hidroxiapatita de calcio en la superficie del hueso, véase Holick, MF, "Vitamin D photobiology, metabolism, and clinical applications," en Endocrinology, 3rd ed., 990-1013 (1995), editado por DeGroot L, et al. No obstante, concentraciones aumentadas de 1a,25-dihidroxi vitamina D3 puede resultar en un incremento en la concentración de calcio en la sangre y en un control anormal de la concentración de calcio por el metabolismo del hueso, lo que resulta en hipercalcemia. La 1a,25-dihidroxi vitamina D3 también regula de manera indirecta la actividad osteoclástica en el metabolismo del hueso y concentraciones elevadas que se puede esperar incrementen la resorción ósea excesiva en osteoporosis. En las modalidades de la presente invención se selecciona una cantidad apropiada de compuesto de vitamina D para proporcionar la nutrición adecuada de vitamina D durante el intervalo de dosificación sin interferir con la capacidad del inhibidor de catepsina K para obtener un efecto inhibidor de resorción ósea. Para las composiciones orales de la presente invención que comprenden un inhibidor de catepsina K y un compuesto de vitamina D, una cantidad de compuesto de vitamina D comprende desde aproximadamente 100 Ul a aproximadamente 60,000 Ul. Los ejemplos no limitantes de una cantidad oral del compuesto de vitamina D en las modalidades de la presente invención incluyen, pero no se limitan a dosificaciones de 2,800 Ul, 5,600 Ul, 7,000 Ul, 8,400 Ul, 1 1 ,200 Ul, 14,000 Ul, 16,800 Ul o 19,600 Ul. Los ejemplos no limitantes de una cantidad oral de vitamina D para dosificación semanal son 2,800 Ul, 5,600 Ul, 7,000 Ul, 8,400 Ul, 1 1 ,200 Ul. Los ejemplos no limitantes de una cantidad oral de vitamina D para dosificación mensual son 1 1 ,200 Ul, 14,000 Ul, 15,400 Ul, 16,800 Ul y 19,600 UL Los "análogos sintéticos de vitamina D" incluyen compuestos que no se encuentran de manera natural que actúan como vitamina D. Los "medicamentos antiinflamatorios no esteroideos" o MAINE inhiben el metabolismo de ácido araquidónico a prostaglandinas proinflamatorias vía ciclooxigenasa (COX)-1 y COX-2. Los ejemplos no limitantes de MAINE incluyen: aspirina, ibuprofeno, naproxeno, diclofenaco, etodolac, fenoporfeno, flubiprofeno, indometacina, ketoprofeno, ketorolaco, meloxicam, nabumetona, oxaprozina, piroxicam, sulindac, tolmetina, diflunisal, meclofenamato y fenilbutazona. Un "inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2" o inhibidor de COX- 2, se refiere a un tipo de medicamento antiinflamatorio no esteroideo (MAINE) que inhibe la coenzima COX-2, lo cual contribuye al dolor y la inflamación en el cuerpo. Los ejemplos no limitantes de inhibidores de COX-2 incluyen: celecoxib, etorícoxib, parecoxib, rofecoxib, valdecoxib y lumiracoxib. Un "inhibidor de interleucina-1 ß" o IL-1 ß, se refiere a inhibidores de IL-1 , el cual es un factor soluble producido por monocitos, macrófagos y otras células las cuales activan linfocitos T y potencia a su respuesta a mitógenos o antígenos. Los ejemplos no limitantes de inhibidores de IL-ß incluyen diacereina y reina. Un "inhibidor LOX/COX" se refiere a un inhibidor en la totalidad de las tres enzimas principales involucradas en la vía del ácido araquidónico -específicamente 5-LOX, COX-1 y COX-2. Un ejemplo no limitante de un inhibidor LOX/COX es licofelona. Un "inhibidor de RANKL" se refiere a un inhibidor de activador de receptor de ligando NF-kB (RANKL), el cual previamente se ha denominado como factor de diferenciación de osteoclastos (ODF), ligando de osteoprotegerina (OPGL) y citocina inducida por activación relacionada con TNF (TRANCE). RANKL es un estimulador clave de la formación y maduración de osteoclastos. Un ejemplo no limitante de inhibidor de RANKL es AMG-162. Si se formula como una dosis fija, dichos productos de combinación utilizan los compuestos de esta invención dentro del intervalo de dosificación descrito en lo siguiente y uno o varios de los otros agentes farmacéuticamente activos dentro de su intervalo de dosificación aprobado. Los compuestos de la presente invención de manera alternativa se pueden utilizar secuencialmente con uno o varios agentes farmacéuticamente aceptables conocidos cuando la formulación por combinación no es apropiada. El término "administración" y variantes de los mismos (por ejemplo "administrar" un compuesto) con referencia a un compuesto de la invención significa introducir el compuesto o un profármaco del compuesto en el sistema del animal en necesidad de tratamiento. Cuando un compuesto de la invención o un profármaco del mismo se proporciona en combinación con uno o más de otros agentes activos (por ejemplo un agente citotóxico, etc.), la "administración" y sus variantes se entiende cada una que incluye introducción concurrente y secuencial del compuesto o profármaco del mismo y otros agentes. La presente invención incluye dentro de su alcance profármacos de los compuestos de esta invención. En general, dichos profármacos serán derivados funcionales de los compuestos de esta invención los cuales se pueden convertir fácilmente in vivo en el compuesto requerido. Los ejemplos no limitantes de profármacos considerados por la presente invención incluyen esteres que se pueden hidrolizar para proporcionar alcoholes de la presente invención; cetonas que se pueden reducir in vivo para proporcionar alcoholes de la presente invención. Se entiende que en algunos casos, la reducción de una cetona se puede producir estereoespecíficamente para proporcionar predominantemente un alcohol diastereoisomérico único. Los ejemplos adicionales de profármacos adecuados, junto con procedimientos convencionales para la selección y preparación de dichos derivados se describen, por ejemplo, en "Design of Prodrugs," ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985, la cual se incorpora como referencia en su totalidad en ia presente. Por lo tanto, los métodos de tratamiento de la presente invención, el término "administrar" abarcará el tratamiento de diversas condiciones descritas con el compuesto que se describe de manera específica o con un compuesto el cual puede no ser descrito de manera específica pero el cual se convierte a un compuesto especificado in vivo después de la administración al paciente. Los metabolitos de estos compuestos incluyen especies activas producidas por introducción de compuestos de esta invención en el ámbito biológico. Como se utiliza en la presente, el término "composición" se pretende que abarque un producto que comprende los ingredientes especificados en las cantidades especificadas, así como cualquier producto el cual resulte, directa o indirectamente, de la combinación de los ingredientes especificados en las cantidades especificadas. El término "cantidad terapéuticamente eficaz" como se utiliza en la presente, significa que la cantidad de compuesto activo o agente farmacéutico que induce la respuesta biológica o medicinal en un tejido, sistema, animal o humano que está siendo analizado por un investigador, veterinario, doctor en medicina u otro miembro de la comunidad médica. Los términos "tratar" o "tratamiento" de una enfermedad, como se utiliza en la presente, incluye: evitar la enfermedad, es decir, provocar que los síntomas clínicos de la enfermedad no se desarrollen en el mamífero que puede estar expuesto o predispuesto a la enfermedad pero aún no ha experimentado o presentado los síntomas de la enfermedad; inhibir la enfermedad, por ejemplo suprimir o reducir el desarrollo de la enfermedad o sus síntomas clínicos; o aliviar la enfermedad, es decir, provocar regresión de la enfermedad o sus síntomas clínicos.

El término "resorción ósea", como se utiliza en la presente, se refiere al proceso por el cual los osteoclastos degradan hueso Los términos "una vez a la semana" y "dosificación una vez a la semana", como se utilizan en la presente, significan que una unidad de dosificación, por ejemplo una dosificación unitaria de inhibidor de catepsina K, se administra una vez a la semana, es decir, una vez durante un período de siete días, preferiblemente el mismo día de cada semana En el régimen de dosificación de una vez a la semana, la dosificación unitaria generalmente se administra aproximadamente cada siete días Un ejemplo no limitante de un régimen de dosificación una vez a la semana puede implicar la administración de una dosificación unitaria del inhibidor de catepsma K cada domingo Se recomienda habitualmente que una dosificación unitaria para administración una vez a la semana no se administre en días consecutivos, sino en un régimen de dosificación una vez a la semana el cual puede incluir un régimen de dosificación en el cual las dosificaciones unitarias se administran en dos d ías consecutivos que se encuentren dentro de dos períodos semanales diferentes Mediante el termino "cada dos semanas" se quiere indicar que la dosificación unitaria del inhibidor de catepsina K se administra una vez durante un periodo de dos semanas, es decir, una vez durante un periodo de catorce días, preferiblemente en el mismo día durante cada uno de los periodos de dos semanas En el régimen de dosificación dos veces a la semana, cada dosificación unitaria generalmente se administra cada catorce días Un ejemplo no limitante de un régimen de dosificación cada dos semanas implica la administración de una dosificación unitaria del inhibidor de catepsina K un domingo si y otro no Se prefiere que la dosificación unitaria no se administre en días consecutivos, pero que el régimen de dosificación cada dos semanes puede incluir un régimen de dosificación en el cual la dosificación unitaria se administre en dos días consecutivos dentro de dos períodos diferentes cada dos semanas Mediante la dosificación "dos veces al mes" se quiere indicar que la dosificación unitaria del inhibidor de catepsina K se administra dos veces, es decir, dos veces, durante un periodo de calendario mensual Con el régimen de dos veces al mes, las dosis preferiblemente se administran en las mismas dos fechas de cada mes En el régimen de dosificación dos veces al mes, cada dosificación unitaria generalmente se administra aproximadamente cada catorce a dieciseis días Un ejemplo no limitante de un régimen de dosificación dos veces al mes puede implicar dosificación en o aproximadamente el primero de mes y en o aproximadamente el quince, es decir, en un punto medio, del mes Se prefiere que las dosificaciones unitarias no se administren en el mismo día o en días consecutivos pero el régimen de dosificación de dos veces al mes puede incluir un régimen de dosificación en el cual las dosificaciones unitarias se administren en dos días consecutivos dentro de un periodo mensual, o en períodos mensuales diferentes El régimen de dos veces al mes se define en la presente como distinto de y que no abarca un régimen de dosificación bisemanal debido a que los dos regímenes tienen periodicidad diferente y resultan en la administración de cantidades diferentes de dosificaciones por períodos de tiempo prolongados. Por ejemplo, durante un período de un año, se administrarán un total de aproximadamente 24 dosificaciones, de acuerdo con el régimen de dos veces al mes (debido a que existen doce meses del calendario en un año), mientras que se administrarán aproximadamente veintiséis dosificaciones de acuerdo con el régimen de dosificación de cada dos semanas (debido a que existen aproximadamente 52 semanas en un año). El término "una vez al mes" se utiliza de acuerdo con el significado aceptado generalmente como una medida de tiempo que abarca aproximadamente cuatro semanas, aproximadamente 30 días o 1/12 de un año del calendario. La presente invención también abarca una composición farmacéutica útil en el tratamiento de osteoporosis u otros trastornos óseos que comprende la administración de una cantidad terapéuticamente eficaz de los compuestos de esta invención, con o sin portadores o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Las composiciones adecuadas de esta invención incluyen soluciones acuosas que comprenden compuestos de esta invención y portadores farmacológicamente aceptables, por ejemplo solución salina a un nivel de pH, por ejemplo 7.4. Las soluciones se pueden introducir en la corriente sanguínea del paciente por inyección en bolo local. Cuando se administra un compuesto de acuerdo con esta invención a un sujeto humano, la dosificación diaria normalmente se determinará por el médico que realice la prescripción con la dosificación la cual varía generalmente de acuerdo con la edad, peso y respuesta del paciente individual así como con la gravedad de los síntomas del paciente. En una aplicación ejemplar, una cantidad adecuada de compuesto se administra a un mamífero que experimenta tratamiento para una condición dependiente de catepsina. Las dosificaciones orales de la presente invención, cuando se utilizan para los efectos indicados, variarán entre aproximadamente 0.01 mg por kg de peso corporal al día (mg/kg/día) hasta aproximadamente 100 mg/kg/día, de manera preferible 0.01 a 10 mg/kg/día y de manera más preferible 0.1 a 5.0 mg/kg/día. Para administración oral, las composiciones preferiblemente se administran en forma de comprimidos que contienen 0.01 , 0.05, 0.1 , 0.5, 1.0, 2.5, 3.5, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0, 25.0, 35.0, 40.0, 50.0, 80.0, 100, 200 y 500 miligramos del ingrediente activo para el ajuste sintomático de la dosificación al paciente que va a ser tratado. Un medicamento típicamente contiene de aproximadamente 0.01 mg a aproximadamente 500 mg del ingrediente activo, de manera preferible de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 100 mg del ingrediente activo. De manera intravenosa, las dosis más preferidas varían de aproximadamente 0.1 a aproximadamente 10 mg/kg/minuto durante una infusión a velocidad constante. Ventajosamente, los compuestos de la presente invención se pueden administrar en una dosis diaria única, o la dosificación diaria total se puede administrar en dosis divididas de dos, tres o cuatro veces al día. Además, los compuestos de la presente invención se pueden administrar de acuerdo con un protocolo continuo que contenga un intervalo de dosificación de una vez a la semana, cada dos semanas, dos veces al mes y una vez al mes Ademas, los compuestos preferidos de la presente invención se pueden administrar en forma intranasal vía uso tópico de vehículos intranasales adecuados o por vía de rutas transdérmicas, utilizando aquellas formas de parches cutáneos transdérmicos bien conocidos por aquellos expertos en la técnica Para aque se administren en forma de un sistema de suministro transdérmico, la administración de dosificación, por supuesto, será continua en vez de intermitente a través del régimen de dosificación Los compuestos de la presente invención se pueden utilizar en combinación con otros agentes útiles para tratar condiciones mediadas por catepsina Los componentes individuales de dichas combinaciones se pueden administrar por separado en tiempos diferentes durante el desarrollo del tratamiento, o se pueden dividir de manera concurrente o en forma de combinación única Por lo tanto, la presente invención debe entenderse que abarca la totalidad de todos los regímenes de tratamiento simultáneo o alternado y el término "administrar" debe interpretarse en consecuencia Se comprenderá que el alcance de las combinaciones de los compuestos de esta invención con otros agentes útiles para tratar condiciones mediadas por catepsina en principio incluyen cualquier combinación con cualquier combinación farmacéutica útil para tratar trastornos relacionados con el funcionamiento de estrogeno Por lo tanto, el alcance de la invención abarca el uso de los compuestos reclamados actualmente en combinación con un segundo agente que se selecciona de un bisfosfonato orgánico, un modulador de receptor de estrógeno, un modulador de receptor de andrógeno, un inhibidor de ATPasa de protón de osteoclastos, un inhibidor de HMG-CoA reductasa, un antagonista receptor de integpna, un agente anabólico de osteoblastos tal como PTH, Vitamina D, un análogo sintético de vitamina D, un medicamento antiinflamatopo no esteroideo, un inhibidor selectivo de c?cloox?genasa-2, un inhibidor de ?nterleuc?na-1 ß, un inhibidor de LOX/COX, un inhibidor de RANKL y las sales farmacéuticamente aceptables y mezclas de los mismos Estos y otros aspectos de la invención serán evidentes a partir de las enseñanzas contenidas en la presente Definiciones Los compuestos de la presente invención pueden tener centros asimétricos, ejes quirales y piranos quirales (como se describe en E L Eliel and S H Wilen, Stereochemistry of Carbón Compounds, John Wiley & Sons, New York, 1994, páginas 1119-1190) y pueden presentarse como racematos, mezclas racémicas y como diastereoisomeros individuales con todos los isómeros postbies y mezclas de los mismos, incluyendo isómeros ópticos, los cuales se incluyen en la presente invención Ademas, los compuestos que se describen en la presente pueden existir como tautómeros y se pretende que estén abarcadas por el alcance de la presente invención ambas formas tautoméricas, aunque se muestra únicamente una estructura tautomépca Por ejemplo, cualquier reivindicación respecto al compuesto A siguiente se entiende que incluye la estructura B tautoménca y viceversa, así como mezclas de los mismos A B Cuando cualquier variable (por ejemplo R1, R2, R3, etc ) se encuentra más de una vez en cualquier constituyente, su definición, cada vez que se presenta, es independiente de cada otra vez que se presente Además, las combinaciones de sustituyentes y variables son permisibles únicamente si tales combinaciones resultan en compuestos estables Las líneas dibujadas en los sistemas de anillos a partir de los sustituyentes indican que la unión indicada se puede unir en cualquiera de los átomos de carbono en el anillo sustituibles Si el sistema de anillo es policíclico, se pretende que el enlace se una a cualquiera de los átomos de carbón adecuados únicamente en el anillo proximal Se entiende que los sustituyentes y los protones de sustitución en los compuestos de la presente invención se pueden seleccionar por una persona habitualmente experta en la técnica para proporcionar compuestos que son químicamente estables y que se pueden sintetizar fácilmente por técnicas conocidas en el arte, así como aquellos métodos establecidos en lo siguiente, a partir de materiales iniciales disponibles con facilidad. Si un sustituyente en sí mismo está sustituido con más de un grupo, se entiende que estos grupos múltiples pueden estar en el mismo carbono o en carbonos diferentes, en la medida en que se obtenga una estructura estable. La frase "opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes" debe entenderse que es equivalente a la frase "opcionalmente sustituido con por lo menos un sustituyente" y en tales casos, la modalidad preferida tendrá de cero a tres sustituyentes. Como se utiliza en la presente, el término "alquilo" se pretende que incluya grupos de hidrocarburos alifáticos saturados tanto ramificados como de cadena lineal que tienen 1 a 10 átomos de carbono, a menos que se especifique de otra manera. Por ejemplo, el término "de 1 a 10 átomos de carbono" como por ejemplo en alquilo de 1 a 10 átomos de carbono" se define que incluye grupos que tienen 1 , 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ó 10 carbonos en una distribución lineal, ramificada o cíclica. Por ejemplo, "alquilo de 1 a 10 átomos de carbono" incluye específicamente metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo, nonilo, decilo, etc. Los términos "cicloalquilo" o "carbociclo" significan anillos cíclicos de alcanos de 3 a 8 átomos de carbono totales, a menos que se indique de otra manera o cualquier número dentro de este intervalo (por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo o cicloctilo) En algunos casos, los sustituyentes se pueden definir con una gama de carbonos que incluyen cero, tal como alquilenoaplo (de 0 a 6 átomos de carbono) Si el aplo se toma como fenilo, esta definición incluirá fenilo a sí mismo asi como -CH2Ph, -CH2CH2Ph, CH(CH3) CH2CH(CH3)Ph, etc Como se utiliza en la presente, el término "aplo" se pretende que signifique cualquier anillo de carbono monocíclico o bicíchco estable de hasta 12 átomos de carbono en cada anillo, en donde por lo menos un anillo es aromático Los ejemplos de tales elementos de arilo incluyen fenilo, naftilo, tetrahidronaftilo, indanilo, bifenilo, fenantplo, antrilo o acenaftilo En casos en donde el sustituyente anlo es bicíclico y un anillo es no aromático, se entiende que la unión es vía el anillo aromático El termino "heteroaplo", como se utiliza en la presente, representa un anillo estable monocichco, bicichco o tpcíclico de hasta 10 átomos de carbono en cada anillo, en donde por lo menos un anillo es aromático y contiene de 1 a 4 heteroátomos que se seleccionan del grupo que consiste de O, N y S Los grupos heteroanlo dentro del alcance de esta definición incluyen, pero no se limitan a benzoimidazolilo, benzofuranilo, benzofurazanilo, benzopirazohlo, benzotnazolilo, benzotiofenilo, benzoxazo lo, carbazolilo, carbohnilo, cino nilo, furanilo, indohnilo, indolilo, indolazinilo, indazolilo, isobenzofuranilo, isoindohlo, isoquinohlo, isotiazo lo, isoxazohlo, naftpindinilo, oxadiazohlo, oxazohlo, oxazo na, isoxazolma, piranilo, pirazinilo, pirazohlo, pindazinilo, pindopiridinilo, pindilo, pinmidinilo, pirrohlo, quinazolinilo, quinolilo, quinoxalinilo, tetrazohlo, tetrazolopindilo, tiadiazolilo, tiazolilo, tienilo, triazo lo, dihidrobenzoimidazohlo, dihidrobenzofuranilo, dihidrobenzotiofenilo, dihidrobenzoxazohlo, dihidroindolilo, dihidroquinohnilo, metilendioxibenceno, benzotiazolilo, benzotienilo, quinohnilo, isoquino nilo, oxazohlo y tetrahidroquinolina En los casos en donde el sustituyente heteroanlo es bicíchco y un anillo es no aromático o no contiene heteroátomos, se entiende que la unión es vía el anillo aromático o vía el anillo que contiene el heteroátomo, respectivamente Si el heteroanlo contiene átomos de nitrógeno, se entiende que los N-óxidos correspondientes de los mismos también están abarcados por esta definición Como se apreciará por un experto en la técnica, los términos "halo" o "halógeno", como se utiliza en la presente, se pretende que incluyan cloro, floro, bromo y yodo El término "ceto" significa carbonilo (C=O) La presente invención también incluye derivados de N-óxido y derivados protegidos de compuestos de fórmula I Por ejemplo, cuando los compuestos de fórmula I contienen un átomo de nitrógeno oxidable, el átomo de nitrógeno se puede convertir a un N-óxido por métodos bien conocidos en la técnica Además, cuando los compuestos de formula I contienen grupos tales como hidroxi, carboxi, tiol o cualquier grupo que contiene uno o varios átomos de nitrógeno, estos grupos pueden estar protegidos con grupos protectores adecuados Una lista exhaustiva de grupos protectores adecuados se puede encontrar en T W Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wtley & Sons, Inc 1981 , cuya descripción se incorpora en la presente como referencia en su totalidad Los derivados protegidos de compuestos de fórmula I se pueden preparar por métodos bien conocidas en la técnica Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención incluyen las sales no tóxicas convencionales de los compuestos de esta invención como ácidos inorgánicos u orgánicos formados Por ejemplo, las sales no tóxicas convencionales incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos tales como clorhídrico, bromhídpco, sulfúrico, sulfamico, fosfórico, nítrico y similares, así como sales preparadas de ácidos orgánicos tales como ácidos acético, propiónico, succínico, ghcóhco, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamoico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetox?benzo?co, fumárico, toluensulfónico, metansulfónico, etandisulfónico, oxálico, isetiónico, trifluoroacetico y similar La preparación de las sales farmacéuticamente aceptables descritas en lo anterior y otras sales farmacéuticamente aceptables típicas se describen de manera más completa por Berg eí al , "Pharmaceuticals Salts," J Pharm Sci , 1977 66 1 -19, incorporada en la presente como referencia Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de esta invención se pueden sintetizar a partir de los compuestos de esta invención los cuales contienen una porción básica o acida por métodos químicos convencionales De manera general, las sales de los compuestos básicos se preparan ya sea por cromatografía de intercambio iónico o al hacer reaccionar la base libre con cantidades estequiométpcas o con un exceso de ácido inorgánico u orgánico formador de sal, deseado en un solvente adecuado o en diversas combinaciones de solventes De manera similar, las sales de los compuestos ácidos se forman por reacciones con la base apropiada inorgánica u orgánica Para propósitos de esta especificación las siguientes abreviaturas tienen los significados indicados i-BuCOCI = cloroformato de isobutilo t-BuMe2S?CI terbutildimetilclorosilano BuLi butil-htio CH CI2 cloruro de metileno CH3CN cianuro de metilo CrO3 cromato DAST trifluoruro de dietilaminoazufre DMF N,N-d?met?lformam?da DMSO = sulfóxido de dimetilo DTT ditiotreitol EDTA ácido etilendiaminotetraacético EtOH etanol KOH = hidróxido de potasio HATU = hexafluorofosfato de 2-(7-aza-1 H-benzotr?azol-1 -?l)-1 , 1 ,3,3-tetramet?luron?o HCl = ácido clorhídrico ácido peryodico MeMgBr bromuro de metilmagnesio MgSO4 = sulfato de magnesio Na2CO3 carbonato de sodio, NaCI cloruro de sodio NH4CI = cloruro de amonio Na2BH4 = borohidruro de sodio PdCI2(dppf) = [1 ,r-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaladio(ll) PG = grupo protector t.a. = temperatura ambiente sat.aq. = acuoso saturado SiO2 = sílice TBAF = fluoruro de tetrabutilamonio THF = tetrahidrofurano CCD = cromatografía en capa delgada (Ts)2O anhídrido p-toluensulfónico Me = metilo Et = etilo Los compuestos novedosos de la presente invención se pueden preparar de acuerdo con los siguientes procedimientos generales utilizando materiales apropiados y se ejemplifican adicionalmente por los siguientes ejemplos específicos. No obstante, los compuestos que se ilustran en los ejemplos no deben considerarse como constitutivos del único género que se considera como la invención Los siguientes ejemplos ilustran adicionalmente detalles para la preparación de los compuestos de la presente invención Aquellos expertos en la técnica comprenderán con facilidad que se pueden utilizar para preparar estos compuestos variaciones conocidas de las condiciones y procedimientos de los siguientes procedimientos de preparación Todas las temperaturas están en grados Celsius, a menos que se indique de otra manera Como se describe en el ejemplo 12 y en el esquema 1 , comenzando con el éster bencílico del ß del ácido N-t-Boc-aspártico disponible comercialmente, se activa el ácido libre vía el método de anhídrido mixto (véase Chen, F M F , Lee, Y, Stemauer, R , Benoiton, N L , Can J Chem 1987, 65, 613-618), para reducción con borohidruro de sodio El alcohol se convierte a un grupo saliente mediante formación de un ciclo in situ al carbamato que se produce mediante calentamiento El éster se trata con un exceso de reactivo de Grignard para producir el alcohol terciario hidrosoluble Este último se trata con DAST para obtener el producto fluorado La hidrólisis del carbamato cíclico y la si lación del alcohol resultante proporciona la amina primaria La amina se forma por separación azeotrópica de las fracciones volátiles. La monohtiacion de 1 ,4-d?bromobenceno proporciona un nucleófilo que reacciona fácilmente con la imina para generar la amina secundaria Se desprotege el alcohol y se oxida para proporcionar el acido La formación de amida estándar proporciona el intermediario bromo versátil ESQUEMA 1 Ester bencílico del ácido N-t-Boc-L-aspártico El bromo que se obtiene el esquema 1 se puede convertir a un boronato éster bajo condiciones de reacción mediadas por paladio, como se muestra en el esquema 2. A su vez, el boronato éster resultante se convierte fácilmente a un producto bíarilo por acoplamiento con un bromuro bajo condiciones mediadas por paladio.

ESQUEMA 2 De manera alternativa, demostramos en el esquema 3 que el bromuro de arilo se puede convertir a un boronato éster bajo catálisis con paladio. Bajo reacción mediada por paladio, este boronato éster se puede acoplar con el bromuro descrito en el esquema 1 para proporcionar un compuesto biarilo.

ESQUEMA 3 Síntesis de N1(1-cianociclopropil)-N2-((1S)-1-(4'-r(1 R)-2,2-difluoro-1- hidroxietilIbifenil^-ill^^^-trifluoroetil -fluoro-L-leucinamida Etapa 1 Preparación de 1 -(4-bromofenil)-2,2-difluoroetanona A una solución fría (-78°C) agitada de 1 ,4-dibromobenceno (86.4 66 mmoles) en 800 ml de tetrahidrofurano se agrega n-butil-litio (228 ml, 1.6 M en hexanos, 366 mmoles). Esto se agita a -78°C durante 30 minutos y a esta suspensión se agrega difluoroacetato de etilo (50 g, 402 mmoles) durante 2 min. Esto se agita a -78°C durante 1 h. La reacción se suspende con 250 ml de ácido clorhídrico 1 N y se permite que se caliente hasta la temperatura ambiente. El medio se diluye con 250 ml de metílterbutiléter y las capas se separan. La fracción orgánica se lava con 100 ml de salmuera, se seca con MgSO y se concentra bajo presión reducida. El residuo se destila bajo vacío para obtener la dífluorocetona como un sólido vitreo blanco.

Etapa 2 Preparación de (1 R)-1 -(4-bromofenil)-2,2-difluoroetanol (Análogos a : Ramachandran, P. V. et al., Tet. Asym. 1994, Vol. 5, No. 6, pp. 1075-86) La cetona prepara en la etapa 1 del ejemplo 1 (2.35 g, 10 mmoles) y R-alpine borano comercial (3.1 g, 12 mmoles) se mezclan juntos a temperatura ambiente y se agitan durante cuatro días con cierta producción de gas. Después de cuatro días, una alícuota para RMN 1H muestra consumo total de la cetona. La reacción se enfría a 0°C para la adición de acetaldehído (168 µl, 3 mmoles). Se retira el baño y se continúa agitando a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se agregan 20 ml de dietiléter seguido por etanolamina (725 µl, 12 mmoles). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante una hora. Se separa el precipitado por filtración y se lava con pentano. El filtrado se concentra bajo presión reducida y se purifica por cromatografía instantánea (90% de hexanos; 10% de acetato de etilo hasta 70% de hexanos; 30% de acetato de etilo) para proporcionar el material deseado como un aceite incoloro. No se verifica en este punto la pureza óptica.

Etapa 3 Preparación de N -(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N -{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1 ,3l2-dioxaborolan-2-íl)fen¡l1etil}-L-leucinamida Se agitan N2-[(1 S)-1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetil]-N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-L-leucinamida de la etapa 9 en el ejemplo 12 (24 g, 53 mmoles), bis(pinacolato)diboro (15.24 g, 60 mmoles) y acetato de potasio (16.2 g, 165 mmoles) en 240 ml de dioxano y nitrógeno se burbujea después a través de una pipeta durante 15 minutos. El complejo de 1 :1 de [1 ,1-bis(difenilfosfino)ferroceno]dícloropaladio (II) con diclorometano (PdCI2dppf.CH2CI2, 2.4 g, 3 mmoles) se agrega y la mezcla de reacción se sumerge en un baño de aceite a 80°C durante 105 minutos bajo una atmósfera de nitrógeno. Una alícuota para RMN 1H muestra el consumo total del bromuro. Se permite que la reacción se enfríe a temperatura ambiente y la mayor parte del solvente se separa bajo presión reducida. El residuo se disuelve en un mínimo de diclorometano y se filtra en una almohadilla de gel de sílice. Dos fracciones se recolectan y se concentran bajo presión reducida para proporcionar los sólidos La fracción menos polar se agita a temperatura ambiente durante la noche en una mezcla de 90% de hexanos, 10% de dietiléter y la fracción más polar se agita a 0°C durante la noche en hexanos Ambas proporcionan un material puro como sólidos blancuzcos Etapa 4 Preparación de N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-N2((1 S)-1 -(4'-r(1 R)-2,2-d?fluoro-1 -h?drox?et?l1b?fen?l-4-?l)-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da Al boronato éster de la etapa 3 del ejemplo 1 (20 g, 40 mmoles) y el bromuro de aplo de la etapa 2 del ejemplo 1 (1 1 4 g, 48 mmoles) se disuelven en 400 ml de dimetilformamida seguido por una solución acuosa de bicarbonato de sodio (60 ml, 120 mmoles) Después se burbujea nitrógeno a través de una pipeta duarnte 15 minutos Se agrega complejo de [1 ,1 -b?s(d?fen?lfosf?no)ferroceno]d?cloropalad?o (II), 1 1 con diclorometano (PdCI2dppf CH2CI2, 2 4 g, 3 mmoles) y la mezcla de reacción se sumerge en un baño de aceite a 80°C durante 16 horas bajo una atmósfera d nitrógeno Se separa la mayor parte de la dimetilformamida bajo un evaporador giratorio a baja presión (45°C, aproximadamente 1 -5 mm Hg) El residuo se disuelve en 400 ml de acetato de etilo y se filtra sobre una almohadilla de Ce te El filtrado se concentra bajo presión reducida El residuo se capta en aproximadamente 1 0 ml de diclorometano y se separa por cromatografía instantánea Las fracciones más puras se reparten (swished) en 100 ml de hexanos a 0°C durante la noche tres veces y se depuran nuevamente (90% de hexanos; 10% de acetato de etilo hasta 45% de hexanos; 55% de acetato de etilo). Después de evaporación de las fracciones volátiles bajo presión reducida el sólido se agita en hexanos durante 2 días. El producto aún contiene 4% de pinacol de manera que el lote se divide en dos. La fracción A se disuelve en un mínimo de alcohol isopropilíco con calentamiento suave. Los hexanos se agregan hasta que la solución es un poco turbia y se permite que se enfríe. Aparecen cristales blancos y la reacción se enfría adícionalmente hasta 0°C durante 15 minutos. Los sólidos se recolectan por filtración para obtener el producto no contaminado con pinacol. La fracción B se agita en 20% de dietiléter; 1 % de acetato de etilo; 79% de hexanos (100 ml) durante 3 horas a temperatura ambiente. Los sólidos se recolectan por filtración y están contaminados con solo aproximadamente 1 % de pinacol, determinado por RMN 1H. se verifica el exceso enantíomérico por AD-RH quiral utilizando 32% de acetonítrilo; 68% de agua; 0.1 % de ácido fórmico; isocrático (24 min del enantioméro y 27 minutos para la molécula deseada). (MH)+ ESI = 528.0.

EJEMPLO 2 Síntesis de N1-(1-cianociclopropil)-N2-((1 S)-1-{4'-r(1S)-1-(4'-r(1S)-2,2-difluoro-1-hidroxietinbifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fl?oro-L-leucina?pnida Etapa 1 Preparación de (1 S)-1 -(4-bromofenil)-2,2-difluoroetanol Se mezclan juntos a temperatura ambiente la cetona preparada en la etapa 1 del ejemplo 1 (2.35 g, 10 mmoles) y S-alpine borano comercial (3.1 g, 12 mmoles) y se agita durante cuatro días con cierta producción de gas. Después de cuatro días, una alícuota para RMN 1H muestra la presencia del material inicial. Se agrega 1 ml adicionales de S-alpine borano y se continúa agitando durante 2 días adicionales. La RMN 1H de una alícuota muestra el consumo total de la cetona. La reacción se enfría a 0°C para la adición de acetaldehído (393 µl, 7 mmoles). Se retira el baño y se continúa agitando a temperatura ambiente durante 30 minutos. Se agregan 20 ml de dietiléter seguido por etanolamina (966 µl, 16 mmoles). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante una hora. El precipitado se separa por filtración y se lava con pentano. El filtrado se concentra bajo presión reducida y se purifica por cromatografía instantánea (90% de hexanos; 10% de acetato de etilo hasta 70% de hexanos; 30% de acetato de etilo) para proporcionar el material deseado como un aceite incolor.

Etapa 2 Preoaraci'n de N1-(1 -cianocicloprop¡l)-N2((1 S)-1 -{4'-f(1 S)-2,2-difluoro-1 -hidroxietinbifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida El boronato éster de la etapa 3 en el ejemplo 1 (200 mg, 0.40 mmoles) y el bromuro de arilo de la etapa 1 en el ejemplo 2 (114 mg, 0.48 mmoles) se trata como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar un sólido blanco. (MH)+ ESI = 528.0.

EJEMPLO 3 Síntesis de N1-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-21212-trifluoro-1-f4'- (2,2l2-trifluoro-1-hidroxietil)bifenil-4-¡netil}-L-leuc¡namida Etapa 1 Preparación de 1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetanol A una solución a temperatura ambiente de 100 mg de 4'-bromo-2,2,2-trifluoroacetofenona comercial en 1.9 ml de metanol se agregan 15 mg de borohidruro de sodio. La mezcla se agita a temperatura ambiente durante la noche. Se agrega agua, se extrae con metilterbutil éter (20 ml, 3 veces), se lava con agua y salmuera. Se seca con sulfato de magnesio y el solvente se separa bajo presión reducida para proporcionar el compuesto del título y se utiliza como tal para la siguiente etapa. RMN 1H del compuesto del título (CDCI3) d (ppm): 7.55 (2H, d), 7.35 (2H, d), 4.92-5.05 (1 H, m), 3.20 (1 H, s).

Etapa 2 Preparación de N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -[4'-(2,2,2-trifluoro-1 -hidroxietil)bifenin-4-illetil}-L-leucinamida Se hace pasar una corriente de nitrógeno a través de una solución de 4 ml de DMF, 150 mg de N1-(1 -cianociclopropíl)-4-fluoro-N2{(1S)-2,2,2-trifluoro-1-[4-(4,4,5,5-tetrametíl-1 ,3,2-d¡oxaborolan-2-il)fen¡l]etil}-L-leucinamida descrita en la etapa 3 del ejemplo 1 , 92 mg de 1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetanol de la etapa 1 en el ejemplo 3 y 750 µl de Na2CO3 2 M, durante 15 minutos, seguido por la adición de complejo de [1 ,1 '- bis(difenilfosfino)-ferroceno]dícloropaladio (II), (1 :1 ) con 12 mg de diclorometano. La mezcla se calienta a 80°C durante 3 horas bajo nitrógeno. La mezcla se enfría hasta la temperatura ambiente, se vierte en 20 g de hielo y 20 ml de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se extrae con acetato de etílo50% en dietiléter (50 ml, 3 veces). Los extractos combinados se lavan con salmuera y se secan con sulfato de magnesio. La separación del solvente proporciona un residuo que se purifica por cromatografía en SiO2 utilizando acetato de etilo y hexanos (20 a 50%) como eluyente, seguido por trituración utilizando dietiléter y hexanos para proporcionar el compuesto del título. RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 8.18 (1 H, s), 7.60-7.70 (4H, m), 7.50-7.55 (1 H, m), 7.33 (1 H, d), 7.28 (1 H, d), 6.40 (1 H, s amplio), 4.38-4.48 (1 H, m)3.56 (1 H, t), 2.67-2.69 (1 H, m), 1.92-2.01 (2H, m), 1.45-1.46 (10H, m), 1 .05-1.1 1 (3H, m), 0.92-0.99 (1 H, m), 0.56-0.60 (2H, m), 0.36-0.38 (2H, m).

EJEMPLO 4 Síntesis de N1-(1-cianociclopropin-4-fluoro-N2-((1S)-2,212-trifluoro-1-(4'- r(1S)-3,3,3-trifluoro-1-hidroxi-1-metilpropil1bifenil-4-il}etil)-L-leucinanpida v N1-(1-cianoc¡clopropil)-4-fluoro-N2-((1S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'-r(1R)-313,3- trifluoro-1-h¡droxi-1-metilpropil1bifenil-4-il)etil)-L-leucinamida Etapa 1 Preparación de 2-(4-bromofen?l)-4,4,4-tr?fluorobutan-2-ol A una solución de 1 ,4-dibromobenceno (2.5 g, 10.6 mmoles) en 50 ml de THF a -78°C se agrega n-BuLi (6 5 ml, 10 4 mmoles, 1.6 M en hexanos) y la mezcla se agita a -78°C durante 15 minutos, después se agrega 4,4,4-tr?fluoro-2-butanona (1 3 g, 10.3 mmoles) Después de agitación adicional durante 15 min, la mezcla se suspende con NH4CI acuoso y se extrae con acetato de etilo La purificación por cromatografía instantánea combinada (columna de 40 g, eluida con hexanos-acetato de etilo (10% -20%) en 20 min, caudal 35 ml/mín y recolectando 18 ml/fracción) proporciona el compuesto del título como un líquido café claro RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm) 7 5 (4H, m), 4 64 (1 H, s), 1 64 (3H, s) Etapa 2 Preparación de N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-tpfluoro-1 -f4'-r(1 S)-3,3,3-tr?fluoro-1-h?drox?-1 -met?lprop?llb?fen?l-4-?l>et?l)-L-leucinamida y N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-tr?fluoro-1 -{4'-[( 1 R)-3,3,3-tpfluoro-1 -h?drox?-1 -met?lprop?l1b?fen?l-4-?l)et?l)-L-leuc?nam?da Se hace pasar una corriente de nitrógeno a través de una solución de 5 ml de DMF, 150 mg de N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-tpfluoro-1 -[4-(4,4,5,5-tetramet?l-1 ,3,2-d?oxaborolan-2-?l)fen?l]et?l}-L-leucinamida descrita en la etapa 3 del ejemplo 1 , 100 mg de 2-(4-bromofen?l)-4,4,4-tpfluorobutan-2-ol de la etapa 1 en el ejemplo 4 y 360 µl de Na2CO3 2 M, durante 15 minutos, seguido por la adición del complejo de [1 ,1 '-b?s(d?fen?lfosf?no)-ferroceno]d?cloropalad?o (II), (1 1 ) con 5 mg de diclorometano La mezcla se calienta a 80°C durante 3 horas bajo nitrógeno La mezcla se enfria a temperatura ambiente, se vierte en 20 g de hielo y 20 ml de una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio, y se extrae con 50% de acetato de etilo en dietiléter (50 ml, 3 veces). Los extractos combinados se lavan con salmuera y se secan con sulfato de magnesio. La separación del solvente proporciona un residuo que se purifica por cromatografía sobre gel de sílice utilizando un sistema de bomba de gradiente automatizada CombiFlash (acetato de etilo/hexano, 20:80 a 50:50 durante 25 minutos) seguido por trituración utilizando dietiléter y hexanos para proporcionar la mezcla de dos diasteroisómeros. Para la separación, una solución de 200 µl de la mezcla de los dos diasteroisómeros (concentración a 50 µg/ml en 33% de 2-propoanol y 67% de hexanos) de N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -[4'-(3,3,3-trifluoro-1 -hídroxi-1 -metilpropil]bifeníl-4-il]etil}-L-leucinamida se inyecta en el equipo Chiracel OD, 250 X 20 mm (OD00C-CK004) utilizando 33% de 2-propanol en hexanos como solventes, el flujo a 6 ml/min y la detección a 260 nm. Después de varias inyecciones se aisla N1-(1 -cianociclopropil)-N2-((1 S)-1 -{4'-[(1 R)-2,2-d¡fluoro-1 -hidrox¡-1 -metiletil]bífen¡l-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida de las fracciones que eluyen primero y N1-(1 -cianociclopropil)-N2-((1 S)-1 -{4'-[1 S)-2,2-difluoro-1 -hidroxi-1 -metiletil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida se aisla de las fracciones que eluyen en segundo lugar. Diasteroisómero que eluye primero: RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 8.19 (1 H, s), 7.74-7.68 (6H, m), 7.57 (2H, d), 4.60 (1 H, s), 4.42-4.36 (1 H, m), 3.57-3.53 (1 H, m), 2.78-2.88 (2H, m), 1 .94-2.00 (2H, m), 1 .73 (3H, s), 1 .49-1 .31 (8H, m), 1 .07-1 .13 (1 H, m), 1 .00-0.90 (1 H, m), NH de la trifluoroetilamina no se observa. (MH)+ APCI = 573.9. La estereoquímica es tentativa. Diasteroisómero que eluye en segundo lugar: RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 8.19 (1 H, s), 7.74-7.68 (6H, m), 7.57 (2H, d), 4.60 (1 H, s), 4.42-4.36 (1 H, m), 3.57-3.53 (1 H, m), 2.78-2.88 (2H, m), 1.94-2.00 (2H, m), 1.73 (3H, s), 1.49-1.31 (8H, m), 1.07-1.13 (1 H, m), 1.00-0.90 (1 H, m), NH de la trifluoroetilamina no se observa. (MH)+ APCI = 574.0. La estereoquímica es tentativa.

EJEMPLO 5 Síntesis de N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-f (1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -f4'- (R)-2,2,2-trifluoro-1-hidroxietil)bifenil-4-illetil)-L-Leucinamida Etapa 1 Preparación de (R)-2,2,2-trifluoro-1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1 ,3,2-dioxaborolan-2-il)fenil1etanol Una suspensión de (R)-1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetanol (2.26 g, 8.86 mmoles), bis(pinacolato)diboro (2.9 g, 11 mmoles) y acetato de potasio (3 g, 30 mmoles) en 80 ml de DMF se burbujea con nitrógeno durante 15 minutos, se agrega complejo de [1 ,1 -b?s(d?fen?lfosf?na)ferroceno]d?cloropalad?o(ll), 1 1 con diclorometano (362 mg, 0 44 mmoles) y se burbujea nuevamente con nitrógeno durante 10 minutos La mezcla de reacción se agita a 85°C durante 2 h, se vierte en hielo y agua y se extrae con acetato de etilo (80 ml, 2 veces) Las capas orgánicas combinadas se lavan con una solución saturada de NaCI, se secan con MgSO y se concentran bajo vacío El residuo se purifica por cromatografía sobre gel de sílice (acetato de etilo/hexano, 5 95 a 20 80 durante 25 minutos, después 20 80 durante 5 minutos) para proporcionar el producto del título RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm) 7 8 (2H, d), 7 55 (2H, d), 5 9 (1 H, OH), 5 2-5 3 (1 H, m), 1 3 (12H, s) Etapa 2 Preparación de N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-tr?fluoro-1 -f4'-(R)-(2,2,2-tpfluoro-1 -h?drox?et?l)b?fen?l-4-?l1et?l)-L-leuc?nam?da El boronato éster de la etapa 1 en el ejemplo 5 (250 mg, 0 83 mmoles) y N2-[(1 S)-1 -(4-bromofen?l)-2,2,2-tr?fluoroet?l]-N1-(1-c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da (374 mg, 0 83 mmoles) de la etapa 9 en el ejemplo 12 se acopla como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar el compuesto del título como un polvo blancuzco RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 8.1-8.2 (1 H, s amplio), 7.75-7.8 (4H, m), 7.7 (2H, m), 7.6 (2H, m), 5.9 (1 H, m), 5.25-5.35 (1 H, m), 4.35 (1 H, m), 3.5-3.6 (1 H, m), 1.9-2.1 (2H, m), 1.2-1.6 (8H, m), 0.9-1.1 (2H, m); NH no observado. (M+H)+ ESI = 545.8.

EJEMPLO 6 Síntesis de N1-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1S)-2,2,2-trifluoro-1-(4'- f212,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(tr¡fluorometil)etinbifenil-4-il>etil)-L- Leucinamida Etapa 1 Preparación de 2-(4-bromofenil)-1 ,1 ,1 ,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol A una solución a -78°C de 4.7 g de dibromobenceno en 100 ml de tetrahidrofurano se agrega N-butil-litio (8 ml; 2.5 M en hexanos) y la mezcla se agita durante 15 minutos. Después se hace pasar a través de la suspensión durante aproximadamente 15 minutos una corriente ligera de hexafluoroacetona. Después se permite que la mezcla reacciones durante 1 hora. Se vierte en hielo y cloruro de amonio diluido y se extrae con acetato de etilo. Se seca la capa orgánica con sulfato de magnesio y se separa el solvente bajo presión reducida utilizando un mínimo de calor. El residuo se hace pasar sobre un lecho corto de SiO2 utilizando acetato de etilo 10%/hexanos 90% como el eluyente para proporcionar el alcohol terciario. RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 7.75-7.8 (4H, s), 7.65 (1 H, OH).

Etapa 2 Preparación de N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -{4'-f2,2,2-trifluoro-1 -hidroxi-1 -(trifluoromet¡l)et¡llbifenil-4-il)etil)-L-leucinamida Se acoplan N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -[4-(4,4,5,5-tetrametil-1 ,3,2-dioxaborolan-2-íl)fenil]etil}-L-leucinamida descrita en la etapa 3 del ejemplo 1 (220 mg, 0.44 mmoles) y el bromuro de la etapa 1 en el ejemplo 6 (323 mg, 1 mmol) como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar el compuesto del título como una espuma. RMN H (CD3COCD3) d (ppm): 8.2 (1 H, s amplio), 7.85-7.95 (4H, m), 7.75-7.8 (2H, d), 7.6 (2H, d), 7.55 (1 H, OH), 4.4 (1 H, m), 3.55 (1 H, m), 2.8-2.9 (1 H, m), 1.9-2.1 (2H, m), 1.4-1.5 (6H, m), 1.3-1.4 (2H, m), 1.1 (1 H, m), 0.95 (1 H, m). (MH)+ ESI = 614.1.

EJEMPLO 7 Síntesis de N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -f4'- (2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-metiletil)bifenil-4-¡netil}-L-leucinamida Etapa 1 Preparación de 2-(4-bromofenil)-1 ,1 ,1-trifluoropan-2-ol Se enfría a -78°C 1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetanona comercial (1 g, 4 mmoles) en 8 ml de dietiléter para la adición de bromuro de metilmagnesio comercial (2.65 ml, 7.9 mmoles, 3M en dietiléter). Se permite que el medio de reacción turbio alcance la temperatura ambiente y se agita durante la noche. Se transfiere la mezcla de reacción a un embudo de separación que contiene 20 ml de ácido clorhídrico 1.2 M. Esta capa acuosa se extrae 3 veces con 30 ml de acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se lavan con salmuera, se secan sobre sulfato de magnesio y se concentran bajo presión reducida. El aceite claro es suficientemente puro para ser utilizado sin purificación adicional.

Etapa 2 Preparación de N1(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -[4'-(2,2,2-trifluoro-1 -hidroxi-1 -metiletil)b¡fen¡l-4-il1etil}-L-leuc¡namida El boronato éster de la etapa 3 en el ejemplo 1 (250 mg) y 150 mg del bromuro de la etapa 1 en el ejemplo 7 se acoplan como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar el compuesto del título como un polvo blanco. (MH)+ ESI = 560.

EJEMPLO 8 Síntesis de N1-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-trifluoro-1-f4'-f1- hidroxi-1-(trifluorometil)propillbifenil-4-il}etil)-L-leucinamida Etapa 1 Preparación de 2-(4-bomofenil)-1 ,1 ,1-trifluorobutan-2-ol A una solución de 1 ,4-dibromobenceno (2.5 g, 10.6 mmoles) en 50 ml de THF a -78°C se agrega n-BuLi (6.5 ml, 10 mmoles; 1.6 M en hexanos) y la mezcla se agita a -78°C durante 15 min. Después se agrega 1 ,1 ,1 -trifluoro-2-butanona (1.3 g, 10 mmoles). Después de agitación adicional durante 15 min la mezcla se suspende con NH4CI acuoso y se extrae con acetato de etilo. La purificación por cromatografía instantánea combinada (40 g de columna; eluida con hexanos-acetato de etilo (10%-20%) en 20 minutos; caudal: 35 ml/min y recolectada 18 ml/fracción) para proporcionar el compuesto del título como un líquido incoloro. RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 7.58 (m, 5H), 5.52 (s, 1 H), 2.28 (m, 1 H), 2.10 (m, 1 H).

Etapa 2 Preparación de N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2,-trifluoro-1 -|4'-f 1 -hidroxi-1 -(trifluorometil)prop¡l1bifenil-4-il}et¡l)-L-leucinam¡da El boronato éster de la etapa 3 en el ejemplo 1 (150 mg) y 100 mg del bromuro de la etapa 1 en el ejemplo 8 se acoplan como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar el compuesto del título como un polvo blanco. (MH)+ ESI = 574 EJEMPLO 9 Síntesis de N -(1-cianociclopropil)-N2-((1 S)-1-{4'-[(1 R)-2,2-difluoro-1- hidroxi-l-metiletinbifenil^-ill-S^^-trifluoroetiD^-fluoro-L-leucinamida y N1-(1-cianociclopropil)-N2-((1S)-1-f4'-r(1S)-2,2-difluoro-1-hidroxi-1- metiletil1bifenil-4-il)-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida Etapa 1 Preparación de 2-(4-bomofenil)-1 ,1 -difluoropropan-2-ol A una solución de 1 -(4-bromofenil)-2,2-difluoroetanona (2.5 g, 10.6 mmoles) en 60 ml de THF se agrega cloruro de metilmagnesio (10 ml, 30 mmoles; 3 M en THF) A 0°C durante -10 min y la mezcla se agita a 0°C durante 1 h. Un minitratamiento muestra que el material inicial permanece y se agrega más cloruro de metilmagnesio (5 ml, 15 mmoles, 3M en THF). Después de agitar adicionalmente durante 15 min, la mezcla se suspende con H2O, se acidifica cuidadosamente con 100 ml de HCl 1 M y se extrae con acetato de etilo. La purificación por cromatografía instantánea combinada (120 g de columna; eluido con hexanos-acetato de etilo (5% - 25%) en 20 min; caudal: 70 ml/min y recolectado por 25 ml/fracción) proporciona el compuesto del título como un líquido incoloro. RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 7.54 (m, 4H), 5.86 (t, 1 H), 5.10 (s, 1 H), 1.64 (s, 3H).

Etapa 2 Preparación de N1-(1-cianociclopropil)-N2-((1 S)-2,2-difluoro-1-hidroxi-1 -metiletil)bifenil-4-¡l1-2,2,2-trifluoroetil}-4-fluoro-L-leucinamida El boronato éster de la etapa 3 en el ejemplo 1 (2.5 g) y 1.6 mg del bromuro de la etapa 1 en el ejemplo 9 se acoplan como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar la mezcla de díastereoisómeros como un polvo blanco.

Etapa 3 Separación de diastereoisómeros La mezcla diastereoisomérica 1 :1 de la etapa 2 en el ejemplo 9 (80 mg) se disuelve en 2 ml de etanol. La mezcla de los compuestos se resuelve en -10 inyecciones (200 µl, 10 veces) con una columna semipreparativa Chiralcel OD (2 cm I.D. x 25 cm) que eluye con 2-propanol 32.5% en hexanos a un caudal de 6 ml/min. Las fracciones rápidas eluyen a 21 -23 min y se acumulan y concentran para proporcioanr N1-(1-cianociclopropil)-N2-((1 S)-1-{4-[(1 R)-2,2-difluoro-1 -hidroxi-1-metiletil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida como un polvo blanco (98% d.e.). La estereoquímica es tentativa. (MH)+ ESI = 542. La fracción lenta eluye a -25 min y se acumula y concentra para proporcionar N1-(1 -cianociclopropil)-N2-((1 S)-2,2-difluoro-1 -hidrox¡-1 -metiletil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida como un polvo blanco (98% d.e.). La estereoquímica es tentativa. (MH)+ ESI = 542.

EJEMPLO 10 Síntesis de N1-(1-cianociclopropil)-N2-((1S)-1-(4'-f(1s)-2,2-difluoro-1- hidroxi-1-(hidroximetil)etinbifenil-4-il}-2,2,2-trifluorometil)-4-fluoro-L- leucinamida Etapa 1 Preparación de 1 -bromo-4-[1 -(difluorometíl)vinil1benceno A polvo de zinc activado (13.3 g, 0.2 moles) en un matraz de 1 I se agregan 200 ml de THF. Se agrega a gotas durante -10 min diyodometano (8.9 ml, 110 mmoles). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min. La mezcla se enfría en un baño de hielo-acetona se agrega durante -15 min una solución de cloruro de estaño (IV) 1 M en CH2CI2 (22.1 ml, 22.1 mmoles) (la punta de la aguja se inserta dentro de la mezcla). La mezcla se agita durante 15 min y se retira el baño de enfriamiento. Se agita la mezcla a temperatura ambiente durante 30 min. Después de enfriar nuevamente con un baño de hielo-acetona se agrega a gotas durante -10 min una solución de 1 -(4-bromofenil)-2,2-difluoroetanona (5.2 g, 22.12 mmoles) en 30 ml de THF. Se retira el baño de enfriamiento y se agita la mezcla a temperatura ambiente durante 30 min La mezcla después se vierte en porciones a una mezcla de bicarbonato de sodio (300 ml, 300 mmoles) y 300 ml de hexanoa a 0°C Después de agitar durante 15 min se filtra la mezcla a través de Celite Se separa la capa orgánica, se lava con salmuera, se seca con Na2SO4 y se concentra La cromatografía sobre gel de sílice y la elución con hexano acetato de etilo (20:1 ) proporciona el compuesto del título como un líquido amarillo claro RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm) 7 60 (d, 2H), 7 50 (d, 2H), 6 70 (t, 1 H), 5 92 (s, 1 H), 5 80 (s, 1 H) Etapa 2 Preparación de (2S)-2-(4-bromofen?l)-3,3-d?fluoropropan-1 ,2-d?ol A un matraz de 250 ml se carga con 7 g de AD-mix-a comercial y se agregan 25 ml de alcohol terbutíhco y 25 ml de H2O La mezcla se agita a temperatura ambiente para proporcionar dos fases claras y las fases bajas presentan una apariencia amarillo-naranja Después de enfriar a 0°C se agregan de una vez 1 -bromo-4-[1 -(d?fluoromet?l)v?n?l]benceno (1 1 g, 4 7 mmoles) y la mezcla se agita a aproximadamente 4°C durante la noche Se obtiene como resultado una mezcla de color amarillo brillante Se mantiene la mezcla a 0°C y se agrega sulfito de sodio sólido (8 g, 64 mmoles) Se calienta la mezcla a temperatura ambiente y se agita durante 30 min Se agregan 50 ml de acetato de etilo y se separa la capa orgánica. Se extrae la capa acuosa con acetato de etilo (10 ml, 2 veces). Los extractos combinados de acetato de etilo se secan con Na2SO y se concentran. La purificación por cromatografía instantánea combinada (columna de 40 g; eluída con hexanos-acetato de etilo (20%-60%) en 25 min; caudal: 35 ml/min y se recolectan 18 ml/fracción) proporciona el compuesto del título como un aceite incoloro. RMN H (CD3COCD3) d (ppm): 7.56 (s, 4H), 6.14 (t, 1 H), 5.00 (s, 1 H), 4.40 (t, 1 H), 4.00 (m, 1 H), 3.80 (m, 1 H).

Etapa 3 Preparación de N1-(1-cianoc¡clopropil)-N2-((1 S)-1 -(4'-[(1 S)-2,2-difluoro-1-hidroxi-1-(h¡drox¡metil)et¡l1bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida El boronato éster de la etapa 3 en el ejemplo 1 (900 mg) y 450 mg del bromuro de la etapa 2 en el ejemplo 10 se acoplan como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar el compuesto del título como un polvo blanco. Se prepara un derivado de monofosfonato de éster (Yves Leblanc, et al. Tetrahedron Asymmetry 2001 , 12, 3063-3066) para medición de pureza óptica (94%, d.e.; Chiralpak AD, 40% de 2-propanol en hexanos, caudal 1 ml/min, tiempo de retención 7.4 min).

RMN H (CD3COCD3) d (ppm): 8.15 (s, 1 H), 7.70 (m, 6H), 7.55 (d, 2H), 6.20 (t, 1 H), 4.92 (s, 1 H), 4.35 (m, 2H), 4.08 (m, 1 H), 3.85 (m, 1 H), 3.52 (m, 1 H), 1.98 (m, 2H), 1.50-1.28 (m, 8H), 1.05 (m, 1 H), 0.90 (m, 1 H).

EJEMPLO 11 Síntesis de N1-(1-cianociclopropil)-N2-((1S)-1-r4'-r(1 R)-2,2-difluoro-1- hidroxi-1-(hidroximetil)etinbifenil-4-il)-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L- leucinamida Etapa 1 Preparación de (2R)-2-(4-bomofenil)-3,3-difluoropropan-1 ,2-diol A un matraz de 250 ml se carga con 7 g de AD-mix-a comercial se agregan 25 ml de t-BuOH y 25 ml de H2O. La mezcla se agita a temperatura ambiente para proporcionar 2 fases claras y las fases bajas presentan una apariencia amarillo-naranja. Después de enfriar a 0°C, se agrega de una vez 1 -bromo-4-[1 -dífluorometil)vinil]benceno (1.1 g, 4.7 mmoles) y la mezcla se agita a aproximadamente 4°C durante la noche. Se obtiene como resultado una mezcla de color amarillo brillante. Se mantiene la mezcla a 0°C y se agrega sulfito de sodio sólido (8 g, 64 mmoles). Se calienta la mezcla a temperatura ambiente y se agita durante 30 min. Se agregan 50 ml de acetato de etilo y se separa la capa orgánica. Se extrae la capa acuosa con acetato de etilo (10 ml, 2 veces). Los extractos combinados de acetato de etilo se secan con Na2SO y se concentran. La purificación por cromatografía combinada (columna de 40 g; eluida con hexanos-acetato de etilo (20%-60%) en 25 min; caudal: 35 ml/min y se recolectan 18 ml/fracción) proporciona el compuesto del título como un aceite incoloro. RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 7.56 (s, 4H), 6.14 (t, 1 H), 5.00 (s, 1 H), 4.40 (t, 1 H), 4.00 (m, 1 H), 3.80 (m, 1 H).

Etapa 2 Preparación de N1-(1 -cianociclopropil)-N2-((1 S)-1 -(4'-r(1 R)-2,2-difluoro-1 -h¡drox¡-1 -(hidroximetil)etil1bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida El boronato éster de la etapa 3 en el ejemplo 1 (1.5 g) y 740 mg del bromuro de la etapa 1 en el ejemplo 11 se acoplan como en la etapa 4 del ejemplo 1 para proporcionar el compuesto del título como un polvo blanco. Se prepara un derivado de éster de mono-fosfonato (Yves Leblanc, et al. Tetrahedron Asymmetry 2001 , 12, 3063-3066) para medición de pureza óptica (94%, d.e.; Chiralpak AD, 40% de 2-propanol en hexanos, caudal 1 ml/min, tiempo de retención 11.1 mín). RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 8.15 (s, 1 H), 7.70 (m, 6H), 7.55 (d, 2H), 6.20 (t, 1 H), 4.92 (s, 1 H), 4.35 (m, 2H), 4.08 (m, 1 H), 3.85 (m, 1 H), 3.52 (m, 1 H), 1.98 (m, 2H), 1.50 - 1.28 (m, 8H), 1.05 (m, 1 H), 0.90 (m, 1 H).

EJEMPLO 12 Síntesis de N2-í(1S)-1-(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroet¡n-N1-(1- cianociclopropil)-4-fluoro-L-leucinamida Etapa 1 Preparación de (3S)-3-[(terbutoxicarbonil)amino1-4-hidroxibutanoato de bencilo Se disuelven 30 g del éster 4-bencílico del ácido N-(terbutoxícarbonil)-L-aspártico en 90 ml de dimetoxietano y se enfría la solución a .5°C. Se agregan 10.32 ml de N-metilmorfolina seguido por una adición lenta de 12.66 ml de cloroformiato de isobutilo de manera que la temperatura de reacción se mantiene por debajo de -10°C. Se deja reposar la mezcla durante 0.5 horas. Los sólidos se filtran rápidamente y se lavan con 90 ml de dimetoxietano. Se enfría el filtrado a -50°C y se agrega lentamente una solución de 4.4 g de borohidruro de sodio en 45 ml de agua de manera que la temperatura de reacción se mantiene entre -30°C y -15°C. Después se agregan 500 ml de agua de manera que la temperatura de la mezcla de reacción se mantiene por debajo de -15°C. Se filtra la suspensión, el sólido se lava con 400 ml de agua y se seca para proporcionar (3S)-3-[(terbutoxicarbonil)amino]-4-hidroxibutanoato de bencilo. RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm): 7.3-7.45 (5H, m), 5.85-5.95 (1 H, NH), 5.15 (2H, s), 3.95-4.1 (2H, m), 3.5-3.7 (2H, m), 2.55-2.75 (2H, m), 1.4 (9H, s).

Etapa 2 Preparación de [(4S)-2-oxo-1 ,3-oxazolidin-4-illacetato de bencilo A una solución de 95.7 g del alcohol de la etapa 1 en 925 ml de dicloroetano se agregan 625 ml de piridina y la mezcla se enfría a 0-5°C. Se agregan 105.7 g de anhídrido p-toluensulfónico anhidro y la mezcla se calienta a temperatura ambiente y se agita durante 1 hora y después se calienta a 90°C durante 2 horas. La mezcla se enfría, se diluye con 1000 ml de diclorometano y se lava con HCl 1 N (600 ml, 3 veces). La capa orgánica se lava con salmuera, se seca con sulfato de sodio y los solventes se separan al vacío. Se purifica el residuo por cromatografía en SiO2 utilizando acetato de etilo y hexanos en una relación 1 1 seguido por acetato de etilo para proporcionar [(4s)-2-oxo-1 ,3-oxazol?d?n-4-?l]acetato de bencilo RMN 1H (CD3COCD3) d (ppm) 7 8 (1 H, NH), 7 3-7 45 (5H, m), 5 05-5 15 (2H, m), 4 4-4 5 (1 H, m), 4 1-4 2 (1 H, m), 4 0-4 05 (1 H, m), 3 6-3 8 (2H, m) Etapa 3 Preparación de (4S)-4-(2-h?drox?-2-met?lprop?l)-1 ,3-oxazol?d?n-2-ona Se agrega bromuro de metilmagnesio (227 ml de solución 3M en dietiléter) a un mezcla de 340 ml de tolueno y 340 ml de THF a -20°C Después se agrega a gotas 170 ml de una solución tibia de THF de 40 g del éster de la etapa 2 manteniendo la temperatura por debajo de -10°C Se deja reposar la mezcla durante 2 horas y después se agrega lentamente a una mezcla de 1000 ml de agua y 200 ml de ácido acético y se agita la mezcla resultante durante 2 horas a temperatura ambiente Se separa la capa acuosa y se extrae la capa orgánica con agua (200 ml, 2 veces) Se extrae el producto de las capas acuosas combinadas utilizando diclorometano y un extractor continuo Se evapora a sequedad el extracto de diclorometano utilizando heptano como cosolvente para separar por destilación azeotrópica el ácido acético El residuo se purifica por cromatografía en S?O2 utilizando etanol y diclorometano (1 30) para proporcionar (4S)-4-(2-h?drox?-2-met?lprop?l)-1 ,3- oxazolidin-2-ona. RMN 1H (CD3COCD3) d 6.1 -6.4 (1 H, NH), 4.45-4.55 (1 H, m); 4.1 -4.2 (1 H, m), 3.95-4.05 (1 H, m), 3.7 (1 H, s), 1.65-1.85 (2H, m), 1.25 (6H, m).

Etapa 4 Preparación de (4S)-4-(2-fluoro-2-metilpropil)-1 ,3-oxazolídin-2-ona Se agregan 100 ml de una solución en diclorometano de 47.8 g del alcohol de la etapa 3 a una solución a -70°C de 48.5 g de trifluoruro de (dietilamino)azufre en 500 ml de diclorometano. Se calienta la mezcla a temperatura ambiente y se agita durante 1 hora. Después se agrega con precaución la mezcla a una mezcla de 0°C de 800 ml de NaHCO3 acuoso saturado. Se separa la capa orgánica y se lava con NaHCO3 acuoso saturado. La fracción acuosa se extrae adicionalmente con 100 ml de diclorometano y las capas combinadas de diclorometano se secan y se concentran. Se purifica el residuo por cromatografía en SiO2 utilizando acetato de etilo y hexanos (1 :5) seguido por acetato de etilo para proporcionar (4S)-4-(2-fluoro-2-metilpropil)-1 ,3-oxazolidin-2-ona. RMN 1H (CD3SOCD3) d 7.6 (1 H, NH), 4.4-4.5 (1 H, m), 3.95-4.05 (1 H, m); 3.9-3.95 (1 H, m), 1 -8-1.95 (2H, m); 1.25-1.4 (6H, 2s).

Etapa 5 Preparación de (2S)-2-am?no-fluoro-4-met?lpentan-1 -ol A una solución de 21.0 g del fluoro derivado de la etapa 4 en 216 ml de alcohol etílico acuoso 90% se agregan 21 9 g de hidróxido de potasio Se calienta la mezcla a reflujo durante 4 horas y se enfría a temperatura ambiente Después se concentra la mezcla y se coevapora con tolueno (300 ml, 3 veces) Se disuelve el residuo en 500 ml de diclorometano y se agita durante 0 5 horas Se filtra la suspensión a través de Cehte y la fracción de Celite se lava con diclorometano (100 ml, 3 veces) Se concentra el filtrado a sequedad para proporcionar (2S)-2-am?no-4-fluoro-4-met?lpentan-1 -ol RMN 1H (CD3OD) d 3 4-3 5 (1 H, m), 3 2-3 3 (1 H, m), 3 0-3 1 (1 H, m), 1 5-1 ,7 (2H, m), 1 35 (3H, s), 1 3 (3H, s) Etapa 6 Preparación de (2S)-1-{[terbut?l(d?met?l)s?l?llox?)-4-fluoro-4-met?lpentan-2-am?na Se disuelven 21 0 g del aminoalcohol de la etapa 5 en 300 ml de diclorometano y se enfría la solución a 0°C Se agregan 0 051 g de 4- (d?met?lam?no)p?r?d?na y 21 g de cloruro de terbutildimetilsililo seguido por 25 ml de tpetilamina Se agita la mezcla a temperatura ambiente durante la noche La mezcla de reacción se vierte lentamente en cloruro de amonio acuoso saturado 0°C y se extrae con diclorometano (300 ml, 3 veces) Se lava la capa orgánica con salmuera, se seca con sulfato de sodio y los solventes se separan al vacio para proporcionar (2S)-1-{[terbut?l(d?met?l)s?l?l]ox?}-4-fluoro-4-met?lpentan-2-am?na RMN 1H (CD3OD) d 3 6-3 65 (1 H, m), 3 4-3 5 (1 H, m), 3 1 -3 2 (1 H, m), 1 6-1 8 (2H, m), 1 35-1 45 (6H, m), 0 93 (9H, s), 0 1 (6H, s) Etapa 7 Preparación de (2S)-1 -{[terbut?l(d?met?l)s?l?l1ox?}-4-fluoro-4-met?l- N-f(1 E(-2,2,2-tr?fluoroet?l?den1pentan-2-am?na A una solución de 31 5 g de la amina de la etapa 6 en 126 ml de benceno se agregan 21 6 ml de tnfluoroacetaldehidometilhemiacetal Se calienta la solución a reflujo durante la noche utilizando una trampa de tipo Dean-Stark para recolectar agua Se enfría la mezcla de reacción a temperatura ambiente y se concentra a sequedad Se purifica el residuo en S?O2 utilizando 4% de acetato de etilo en hexanos para proporcionar (2S)-1 - {[terbut?l(d?met?l)s?l?l]ox?}-4-fluoro-4-met?lpentan-2-am?na RMN 1H (CD3COCD3) d 7 9-7 95 (1 H, m), 3 75-3 85 (1 H, m), 3 7-3 75 (1 H, m), 3 53-3 6 (1 H, m), 1 9-2 0 (2H, m), 1 3-1 4 (6H, m), 0 9 (9H, s), 0 1 (3H, s), 0 05 (3H, s) Etapa 8 Preparación de (2S)-2-(í(1 S)-1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroet¡pamino)-4-fluoro-4-metilpentan-1 -ol A una solución a -75°C de 0.26 g de 1 ,4-dibromobenceno en 4 ml de THF se agrega n-BuLi (0.42 ml de una solución en hexanos 2.5M) y la mezcla se deja reposar durante 20 minutos. Se agregan 0.329 g de la ¡mina de la etapa 7 en 2 ml de THF y la mezcla se deja reposar durante 2 horas. A la mezcla después se le agrega una mezcla de 50 ml de agua, 1 g de NH4CI y hielo triturado. Se extrae con acetato de etilo (25 ml, 2 veces) y las capas combinadas de acetato de etilo se secan y se evapora a sequedad. Se repite el mismo procedimiento a una escala mayor utilizando 1 .2 g de 1 ,4-dibromobenceno, 1 .84 ml de n-BuLi y 1 .38 g de la imina y la mezcla de reacción se trata como se hizo en lo anterior. Los residuos combinados de ambas preparaciones se disuelven en 10 ml de THF y se enfrían a 0°C. Se agrega fluoruro de n-tetrabutilamonio (6 ml de una solución en THF 1 M) y se agita la mezcla a +5°C durante 16 h. La mezcla se vierte en una mezcla de 50 ml de agua, 1 g de cloruro de amonio y hielo triturado y la capa orgánica se separa. La fracción acuosa se extrae adicionalmente con acetato de etilo (15 ml, 2 veces) y las capas orgánicas combinadas se secan y se concentran. El residuo se purifica en SiO2 utilizando acetato de etilo y hexanos (1 :5) para proporcionar (2S)-2-{[(1 S)-1 -(4-bromofenil)-2,2,2-thfluoroetil]amino}-4-fluoro-4-metilpentan-1 -ol.

RMN 1H (CD3COCD3) d 7.65 (2H, m), 7.5 (2H, m), 4.5-4.6 (1 H, m), 3.8 (1 H, m), 3.6 (1 H, m), 3.3-3.4 (1 H, m), 2.85-2.0 (1 H, m), 2.55 (1 H, m), 1.7-1.9 (2H, s), 1.3-1.4 (6H, m).

Etapa 9 Preparación de N2-f(1S)-1-(4-bromofen¡l)-2,2,2-trifluoroetíll-N1-(1-c¡anoc¡clopropil)-4-fluoro-L-leucinam¡da Una suspensión de H5IO6/CrO3 (66 ml de 0.44 M en CHsCN1); se enfría a 0°C y se agrega a gotas una solución del alcohol de la etapa 8 (1.55 g) en 5 ml de CH3CN. La mezcla se agita a 0-5°C durante 3.5 horas. Se vierte en 200 ml de Na2HPO , pH 4, bajo agitación vigorosa y la mezcla se extrae con dietiléter (50 ml, 3 veces). Los extractos etéreos combinados se lavan con agua y salmuera (1 :1 ) seguido por NaHSO3 acuoso diluido y salmuera. La mezcla se seca con sulfato de sodio, se filtra y los solventes se evaporan a sequedad para proporcionar N-[(1 S)-1-(4-bromofenil)-2,2,2-trífluoroetil]-4-fluoro-L-leucina la cual se utiliza como tal en la siguiente etapa. El reactivo oxidante (H5IO6/CrO3) se prepara como se describe en Tetrahedron Letters 39 (1998) 5323-5326 pero utilizando CH3CN grado CLAR (que contiene 0.5% de agua); no se agrega agua.

Se agregan 4.2 ml de diisopropiletilamina a una suspensión a 0°C de 1.5 g del ácido del inciso anterior, 1.18 g de clorhidrato de 1 -amino-1 -ciclopropanocarbonitrilo, 1.94 g de hexafluorofosfato de N'-tetrametiluronio y 5 ml de dimetilformamída y la mezcla se hace reaccionar a temperatura ambiente durante 48 h. Después se vierte en hielo y cloruro de amonio acuoso diluido. La mezcla se extrae con acetato de etilo y éter (1 :1 ), y las capas orgánicas combinadas se lavan con Na2HPO diluido, pH 3, y salmuera. Los solventes se evaporan a sequedad y el residuo se purifica por cromatografía en S¡O2 utilizando acetato de etilo y hexanos (1 :2) para proporcionar N2-[(1S)-1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoretil]-N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-L-leucinamida en un estado de pureza suficiente para la siguiente etapa. RMN 1H (CD3COCD3) d 8.15 (1 H, NH), 7.6 (2H, m), 7.45 (2H, m), 4.35-4.45 (1 H, m), 3.45-3.55 (1 H, m), 1.9-2.1 (2H, m), 1.75-1.85 (1 H, NH), 1.35-1.55 (8H, m), 1.1 -1.15 (1 H, m), 0.95-1.05 (1 H, m).

Composición Farmacéutica Como una modalidad específica de la invención, se formulan 100 g de (1 R,2R)-N-(cianometil)-5,5-difluoro-2-[4'-(metiltio)-1 ,1 '-bifenil-2-iljciclohexanocarboxamida con suficiente lactosa dividida finamente para proporcionar una cantidad total de 580 a 590 mg para llenar una cápsula de gelatina dura de tamaño 0. Los compuestos descritos en la presente solicitud presentan actividad en los siguientes análisis. Además, los compuestos descritos en la presente solicitud tienen un perfil farmacológico aumentado en relación con los compuestos descritos previamente.

Análisis de Catepsina K Se preparan diluciones seriadas (1/3) desde 500 µM hasta 0.0085 µM de compuestos de prueba en sulfóxido de dimetilo (DMSO). Después se agregan 2 µl de DMSO a 50 µl de amortiguador de análisis (MES, 50 mM (pH 5.5); EDTA, 2.5 mM; DTT, 2.5 mM y DMSO, 10%) y 25 µl de catepsina K humana (0.4 nM) en solución amortiguadora de análisis. Las soluciones de análisis se mezclan durante 5-10 segundos en una placa de agitación y se incuban durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se agrega a las soluciones de análisis Z-Leu-Arg-AMC (8 µM) en 25 µl de amortiguador de análisis. La hidrólisis del grupo saliente de coumarina (AMC) es seguida por espectrofluorometría (Ex ? - 355 nm; Em /l = 460 nm) durante 10 minutos. Se calcula el porcentaje de inhibición al ajustar valores experimentales con el modelo matemático estándar para una curva dosis-respuesta.

Análisis para Catepsina L Se preparan diluciones seriadas (1/3) desde 500 µM hasta 0.0085 µM de los compuestos de prueba en sulfóxido de dimetilo (DMSO).

Después se agregan 2 µl de DMSO de cada dilución a 50 µl de amortiguador de análisis (MES, 50 mM (pH 5.5); EDTA, 2.5 mM; DTT, 2.5 mM y DMSO 10%) y 25 µl de catepsina L humana (0.5 nM) en solución amortiguadora de análisis. Las soluciones de análisis se mezclan durante 5-10 segundos en una placa de agitación y se incuban durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se agrega a las soluciones de análisis Z-Leu-Arg-AMC (8 µM) en 25 µl de amortiguador de análisis. La hidrólisis del grupo saliente de coumarina (AMC) es seguido por espectrofluorometría (Ex A = 355 nm; Em /l = 460 nm) durante 10 minutos. Se calcula el porcentaje de inhibición al ajustar valores experimentales con un modelo matemático estándar para una curva dosis-respuesta.

Análisis para Catepsina B Se preparan diluciones seriadas (1/3) desde 500 µM hasta 0.0085 µM de los compuestos de prueba en sulfóxido de dimetilo (DMSO). Después se agregan 2 µl de DMSO de cada dilución a 50 µl de amortiguador de análisis (MES, 50 mM (pH 5.5); EDTA, 2.5 mM; DTT, 2.5 mM y DMSO 10%) y 25 µl de catepsina B humana (4.0 nM) en solución amortiguadora de análisis. Las soluciones de análisis se mezclan durante 5-10 segundos en una placa de agitación y se incuban durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se agrega a las soluciones de análisis Z-Leu-Arg-AMC (8 µM) en 25 µl de amortiguador de análisis. La hidrólisis del grupo saliente de coumarina (AMC) es seguido por espectrofluorometría (Ex ? - 355 nm; EmA = 460 nm) durante 10 minutos. Se calcula el porcentaje de inhibición al ajustar valores experimentales con un modelo matemático estándar para una curva dosis- respuesta.

Análisis para Catepsína S Se preparan diluciones seriadas (1/3) desde 500 µM hasta 0.0085 µM de los compuestos de prueba en sulfóxido de dimetilo (DMSO). Después se agregan 2 µl de DMSO de cada dilución a 50 µl de amortiguador de análisis (MES, 50 mM (pH 5.5); EDTA, 2.5 mM; DTT, 2.5 mM y DMSO 10%) y 25 µl de catepsina S humana (20 nM) en solución amortiguadora de análisis. Las soluciones de análisis se mezclan durante 5-10 segundos en una placa de agitación y se incuban durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se agrega a las soluciones de análisis Z-Leu-Arg-AMC (8 µM) en 25 µl de amortiguador de análisis. La hidrólisis del grupo saliente de coumarina (AMC) es seguido por espectrofluorometría (Ex A = 355 nm; Em l = 460 nm) durante 10 minutos. Se calcula el porcentaje de inhibición al ajustar valores experimentales con un modelo matemático estándar para una curva dosis-respuesta.

Farmacocinética en ratas Farmacocinética en ratas por vía oral (PO) Procedimiento Se alberga a los animales, se les alimenta y se les cuida de acuerdo con Guidelines of the Canadian Council on Animal Care. Se someten a ayuno durante la noche anterior a ratas macho Sprague Dawley (250.400 g) antes de cada estudio de la concentración en sangre PO. Las ratas se colocan en un sujetador, una a la vez, y se fija firmemente la caja. Se obtiene una muestra de sangre en el momento 0 al realizar una pequeña incisión (1 mm o menos) en la punta de la cola. La cola después se agita con un movimiento firme pero suave desde la parte superior a la inferior para extraer la sangre. Se recolectan aproximadamente 0.5 ml de sangre en un tubo Vacutainer heparinizado. Se preparan los compuestos como se requiere, en un volumen de dosificación estándar de 10 ml/kg y se administra oralmente al hacer pasar una aguja de sonda de 3" calibre 16 en el esófago. Las recolecciones de sangre subsecuente se toman de la misma manera que la muestra de sangre en el momento 0, excepto que no hay necesidad de cortar nuevamente la cola. Se limpia la cola con una pieza de gasa y se extrae/agita como se describe en lo anterior en los tubos marcados apropiadamente. Inmediatamente después de la toma de muestras, la sangre se centrifuga, se separa, el plasma se coloca en frascos marcados claramente y se almacena en un congelador hasta que se analizan. Los puntos de tiempo típicos para la determinación de las concentraciones sanguíneas en ratas después de dosificación PO son: 0, 15 min, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 24 h. Después de la extracción de sangre en el punto de tiempo de 4 h se proporciona alimento a las ratas a su albedrío. En todo momento se le proporciona agua durante el estudio.

Vehículos: Se pueden utilizar los siguientes vehículos (con los volúmenes de dosis correspondientes) y la determinación de concentración en sangre en rata, PO. PEG 200/300/400 (0.60% en agua): igual o menor a 10 ml/kg Methocel (0.5% - 1.0% en agua): igual o menor a 10 ml/kg Tween 80 (1-10% en agua): igual o menor a 10 ml/kg Los compuestos para las concentraciones en sangre PO pueden estar en forma de suspensión. Para una mejor homogeneidad, la suspensión se puede colocar en un sonicador durante aproximadamente 5 minutos. Para el análisis se diluyen alícuotas con 1.2 a 1.5 volúmenes de acetonitrilo que opcionalmente contiene un estándar interno y se centrifuga para separar el precipitado proteínico. Se inyecta el sobrenadante directamente en una columna de CLAR C-18 con espectrometría de masas (EM) o absorbancia ultravioleta (UV) o detección por fluorescencia (fluo). La cuantificación se realiza en relación a una curva estándar preparada utilizando muestras de sangre limpias a la que se les ha agregado una cantidad conocida del medicamento en acetonitrilo que opcionalmente contiene un estándar interno. Se agrega el estándar interno que opcionalmente contiene acetonitrilo adicional y una cantidad de 1.2 a 1.5 volúmenes de la cantidad de sangre inicial para que corresponda con lo que se realizó en el caso de las muestras. Se determina la biodisponibilidad (F) al comparar el área bajo la curva (ABC) i.v. versus p.o.

F = ABCpo ? DOSE ? ABCiv DOSEpo ABC = (C1 +C2)*(T2-T1 )/2 en donde C es la concentración medida por EM o UV o Fluo en un tiempo dado T Farmacocinetica intravenosa en ratas Procedimiento Los animales se albergan, se alimentan y se cuidan de acuerdo con Guidelines of the Canadian Council on Animal Care Se utilizan en estos estudios ratas que no se sometieron a ayuno Sprague Dawley macho (325-375 g) El compuesto se prepara como se requiere, en un volumen de dosificación estándar de 1 ml/kg La dosificación de las ratas conscientes para administración intravenosa se realiza por vía la vena yugular utilizando una aguja calibre 25 Esto constituye un tiempo de punto cero La muestra de los 5 min se toma al cortar una pieza (1 -2 mm) de la punta de la cola La cola después se agita con un movimiento firme pero suave desde la parte superior de la cola al extremo para extraer la sangre de la cola Se recolectan aproximadamente 0 5 ml de sangre en un frasco de recolección hepannizado Las tomas subsecuentes se realizan de la misma manera, excepto que no hay necesidad de cortar la cola nuevamente Se limpia la cola con una pieza de gasa y se extrae la sangre, como se describe en lo anterior en tubos marcados apropiados Los puntos de tiempo típicos para determinación de las concentraciones en sangre en rata después de dosificación I V son también 0, 5 min, 15 mm, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h 0, 5 min, 30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h, 24 h Vehículos: Se pueden utilizar los siguientes vehículos en las determinaciones de concentración sanguínea en rata IV: Dextrosa: 1 ml/kg Moleculosol 25%: 1 ml/kg DMSO (sulfóxido de dimetilo): Limitado a 10% del volumen de la dosis hasta 0.1 ml por kilogramo de animal PEG 200: Un máximo de 80% mezclado con 20% de agua estéril - 1 ml/kg Con dextrosa, se puede agregar bicarbonato de sodio si la solución se vuelve turbia. Para el análisis se diluyen las alícuotas con 1.2 a 1.5 volúmenes de acetonitrilo que opcionalmente contiene un estándar interno y se centrifuga para separar el precipitado proteínico. Se inyecta el sobrenadante directamente en una columna C-18 CLAR con detección por espectrometría de masas (EM) o absorbancia ultravioleta (UV) o fluorescencia (Fluo). La cuantificación se realiza en relación a una curva estándar preparado utilizando muestras de sangre limpia a las que se les han agregado cantidades conocidas de medicamento en acetonitrilo que opcionalmente contiene un estándar interno. Se agrega el acetonitrilo adicional que opcionalmente contiene el estándar interno en una cantidad de 1.2 a 1.5 volúmenes de la cantidad de sangre inicial que corresponde con lo que se realiza en el caso de las muestras. Se determina la biodisponibilidad (F) al comparar el área bajo la curva (ABC) i.v. versus p.o.

ABCpo DOSEiv = x x 100% ABCiv DOSEpo ABC = (C1 +C2)*(T2-T1 )/2 en donde C es la concentración medida por EM o UV o Fluo en un tiempo dado T

Claims (8)

1. NOVEDAD DE LA INVENCIÓN REIVINDICACIONES Un compuesto de la fórmula: en donde R1 y R2 se toman juntos con el átomo de carbono al cual están unidos para formar un cicloalquilo de 3 a 4 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con alquilo de 1 a 3 átomos de carbono; R3 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está sustituido con 1 a 4 de fluoro y 1 a 4 de cloro; R4 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está sustituido con 1 a 5 de halo; R5 es hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con 1 a 5 de halo; cada D es independientemente arilo o heteroarilo; R6 es hidrógeno o alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con uno a dos de hidroxilo o dos a seis de halo; R7 es alquilo de 1 a 6 átomos de carbono el cual está opcionalmente sustituido con dos a cinco de halo; n es 2; o una sal, estereoisómeros o derivados N-óxido farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. 2 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque R1 y R2 se toman juntos con el átomo de carbono al cual están unidos para formar ciclopropilo, o una sal, estereoisómero o derivado de N-óxido farmacéuticamente del mismo
3. 3 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado ademas porque D es fenilo, o una sal, estereoisomero o derivado de N-oxido farmacéuticamente aceptable del mismo
4. 4 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 3, caracterizado además porque R5 es hidrógeno y R4 es CF3, o una sal, estereoisómero o derivado N-óxido farmacéuticamente aceptable del mismo
5. 5 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado ademas porque R7 es alquilo de 1 a 3 átomos de carbono sustituido con dos o tres de fluoro, o una sal, estereoisómero o derivado N-óxido farmacéuticamente aceptable del mismo
6. 6 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , caracterizado además porque es N1-(1-c?anoc?cloprop?l)-N2-(1 -{4'-[2,2-d?fluoro-1-h?drox?et?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-{2,2,2-tr?fluoro-1 -[4'-(2,2,2-tr?fluoro-1 -h?drox?et?l]b?fen?l-4-?l]et?l}-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-(2,2,2-tr?fluoro-1 -[4'-[3,3,3-tr?fluoro-1 -h?drox?-1 -met?lprop?l]b?fen?l-4-?l}et?l)-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-(2,2,2-1 -{4-[2,2,2-tr?fluoro-1 -h?drox?-1 -(tr?fluoromet?l)et?l]b?fen?l-4-?l}et?l)-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-(2,2,2-1 -[4'-(2,2,2-tr?fluoro-1 -h?drox?-1 -met?let?l)b?fen?l-4-?l]et?l}-L-leuc?nam?da, Nl-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-(2,2,2-tr?fluoro-1 -{4'-[1 -h?drox?- 1 -(tr?fluoromet?l)prop?l]b?fen?l-4-?l}et?l)-L-leuc?nam?da, N -(1 -c?anoc?cloprop?l)-N2-(1 -{4'-[2,2-d?fluoro-1 -h?drox?-1 -met?let?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-N2-(1 -{4,-[2,2-d?fluoro-1 -h?drox?-1 -(h?drox?met?l)et?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N2-[1 -(4-bromofen?l)-2,2,2-tpfluoroet?l]-N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-L-leucinamida, o una sal, estereoisomeros o un derivado N-oxido farmacéuticamente aceptable del mismo
7. 7 - El compuesto de conformidad con la reivindicación 6, caracterizado ademas porque es N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-N2-((1 S)-1 -{4'-[(1 R)-2,2-d?fluoro-1 -h?drox?et?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N -(1 -c?anoc?cloprop?l)-N2-((1 S)-1 -{4'-[(1 S)-2,2-d?fluoro-1 -h?drox?et?l]b?fen?l-4-?l}-2,2,2-tr?fluoroet?l)-4-fluoro-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-tr?fluoro-1 -[4-(2,2,2-tr?fluoro-1 -h?drox?et?l)b?fen?l-4-?l]et?l}-L-leuc?nam?da, N1-(1 -c?anoc?cloprop?l)-4-fluoro-N2-((1 S)-2,2,2-tr?fluoro-1 -{4'-[(1 S)-3,3,3-tr?fluoro-1 -h?drox?-1 -met?lprop?l]b?fen?l-4-?l}et?l)-L-leuc?nam?da, N1-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1S)-2,2,2-trifluoro-1-{4'-[(1R)-3,3,3-trifluoro-1-hidroxi-1-metilpropil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinamida; N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{(1 S)-2,2,2-trifluoro-1 -f4'-(R)-(2,2,2-trifluoro-1-hidroxietil)bifenil-4-¡l]etil)-L-leuc¡namida; N1-(1-cianocicloprop¡l)-4-fluoro-N2-((1S)-2,2,2-trifluoro-1-{4'- [2,2,2-trifluoro-1-hidroxi-1-(trifluorometil)etil]bifenil-4-¡l}etil)-L-leucinamida; N1-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1S)-2,2,2-trifluoro-1-{4'-(2,2,2-trifluoro-1-hidrox?-1-metiletil)bífenil-4-¡l]etil}-L-leucinamida; N1-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-((1S)-2,2,2-trifluoro-1-{4'-[1-hidroxi-1 -(trífluorometil)propil]bifenil-4-il}etil)-L-leucinamida; N -(1 -cianociclopropil)-N2-((1 S)-1 -{4'-[(1 R)-2,2-difluoro-1 -hidroxi-1-metiletil]bífenil-4-¡l}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N1-(1-cianociclopropíl)-N2-((1S)-1-{4'-[(1S)-2,2-difluoro-1-hidroxi-1-metiletil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N1-(1-cianociclopropil)-N2-((1S)-1-{4'-[(1S)-2,2-difluoro-1-hidroxi- 1-(hidroximetil)etil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N -(1-cíanocicloprop¡l)-N2-((1S)-1-{4'-[(1R)-2,2-difluoro-1-hidroxi-1-(hidroximetil)etil]bifenil-4-il}-2,2,2-trifluoroetil)-4-fluoro-L-leucinamida; N -[(1 S)-1 -(4-bromofenil)-2,2,2-trifluoroetil]-N1-(1 -cianociclopropil)-4-fluoro-L-leucinamida; o una sal, estereoisómeros o derivado N-óxido farmacéuticamente aceptable del mismo.
8. 8.- Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y un portador farmacéuticamente aceptable. 9.- El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 , en la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de: osteoporosis, osteoporosis inducida por glucocorticoide, enfermedad de Paget, recambio óseo aumentado de manera anormal, enfermedad periodontal, pérdida de dientes, fracturas óseas, artritis reumatoide, osteoartritis, osteolisis periprostétíca, osteogénesis imperfecta, aterosclerosis, obesidad, glaucoma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad ósea metastásica, hipercalcemia de cáncer o mieloma múltiple en un mamífero en necesidad del mismo, una cantidad terapéuticamente eficaz y un compuesto de conformidad con la reivindicación 1. 10.- Una composición farmacéutica caracterizada porque comprende un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y otro agente que se selecciona del grupo que consiste de: un bisfosfonato orgánico, un modulador de receptor de estrógeno, un modulador de receptor ß de estrógeno, un modulador de receptor de andrógeno, un inhibidor de ATPasa de protón de osteoclastos, un inhibidor de HMG-CoA reductasa, un antagonista de receptor de integrina o un agente anabólico de osteoblastos, vitamina D, un análogo sintético de vitamina D, un medicamento antiinflamatorio no esteroideo, un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2, un inhibidor de interleucina-1 ß, un inhibidor de LOX/COX, un inhibidor de RANKL y las sales y mezclas farmacéuticamente aceptables de los mismos. 1 1.- El uso de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y otro agente que se selecciona del grupo que consiste de: un bisfosfonato orgánico, un modulador de receptor de estrógeno, un modulador de receptor de andrógeno, un inhibidor de ATPasa de protón de osteoclastos, un inhibidor de HMG-CoA reductasa, un antagonista de receptor de integrina, un agente anabólico de osteoblastos, vitamina D, un análogo sintético de vitamina D, un medicamento antiinflamatorio no esteroideo, un inhibidor selectivo de ciclooxigenasa-2, un inhibidor de interleucina-1 -ß, un inhibidor de LOX/COX, un inhibidor de RANKL y las sales y mezclas farmacéuticamente aceptables de los mismos, en la preparación de un medicamento útil para el tratamiento de: osteoporosis, osteoporosis inducida por glucocorticoides, enfermedad de Paget, recambio óseo aumentado de manera anormal, pérdida de dientes, fracturas óseas, artritis reumatoide, osteoartritis, osteolisis periprostética, osteogénesís imperfecta, aterosclerosis, obesidad, glaucoma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad ósea metastásica, hipercalcemia de cáncer o míeloma múltiple en un mamífero en necesidad del mismo.