KR950005988A - 곤충세포를 이용한 인간 적혈구 성장촉진인자의 제조 - Google Patents
곤충세포를 이용한 인간 적혈구 성장촉진인자의 제조 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 유전공학적인 방법에 의해 곤충세포에서 인간 적혈구 촉진인자를 제조하는 것에 관한 것으로서, 더 상세하게는 곤충세포내에서 EPO의 대량 발현 및 유전자 조작의 편의를 위하여 인위적으로 설계하고 합성한 EPO 유전자, 이를 포함하는 발현벡터, 이 발현벡터로 형질 전환된 숙주세포 및 이를 이용하여 곤충세포를 형질전환시켜 전환된 세포로부터 EPO 단백질을 제조하는 방법에 관한 것이다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 효모가 선호하는 아미노산 코돈으로 설계된 EPO 유전자의 뉴쿨레오티드 서열 및 아미노산 서열을 나타낸 것이고,
제2도는 EPO 유전자상의 올리고머 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8의 위치를 나타낸 것이고,
제3도는 M13 벡터로의 클로닝 고정을 도식화한 것이고,
제4도는 EPO를 곤충세포에서 발현시켜 세포외로 분비하는 시스템을 만들기 위해 설계한 EPO의 프라이머들을 나타낸 것이고,
제5도는 EPO 유전자의 집합 전략 및 발현벡터의 제조과정을 나타낸 것이고,
제6도는 EPO 유전자를 함유하는 재조합 베큘로바이러스를 곤충세포에 감염시켜 EPO 단백질의 발현을 유도시킨 후 웨스턴블롯팅에 의해 확인한 결과를 나타낸 것이다.
Claims (10)
- 하기 뉴클레오티드 서열을 포함하는 인간 적혈구 성장촉진인자 유전자.
- 제1항의 인간 적혈구 성장 촉진인자 유전자를 포함하는 벡터.
- 제2항에 있어서, 재조합 배큘로바이러스 클로닝 벡터.
- 제3항에 있어서, pVL 1393 L-EPO인 클로닝 벡터.
- 제2항에 있어서, 재조합 베큘로바이러스 발현벡터.
- 제5항에 있어서, 야생형 베큘로바이러스 DNA의 폴리히드린 유전자를 인간 적혈구 성장촉진인자 유전자로 치환시킨 발현벡터.
- 제6항에 있어서, 제3항 또는 제4항의 클로닝 벡터를 야생형 베큘로바이러스 DNA와 함께 곤충세포에 공형질 감염시켜 제조된 발현벡터.
- 제5항 내지 제7항 중의 어느 한 항의 발현벡터를 포함하는 제조합 베큘로바이러스.
- 제8항에 있어서, BVLUC-EPO(ATCC VR 2421)인 베큘로바이러스.
- 제8항 또는 제9항의 재조합 베큘로바이러스로 곤충세포를 감염시켜 배양함을 포함하는 인간 적혈구 성장촉진인자 단백질의 제조방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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KR100294083B1 KR100294083B1 (ko) | 2001-09-17 |
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KR1019930016865A KR100294083B1 (ko) | 1993-08-27 | 1993-08-27 | 곤충세포를이용한인간적혈구성장촉진인자의제조 |
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KR (1) | KR100294083B1 (ko) |
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- 1993-08-27 KR KR1019930016865A patent/KR100294083B1/ko not_active IP Right Cessation
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