KR20250135468A - 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다. 본 발명은 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 특정 비율로 혼합할 때에 여성갱년기 호르몬 변화로 인한 우울, 불안 행동 및 홍조 증상을 개선하고, 뇌조직 면역조직화학 염색 결과 CRF 발현을 감소시키는 효과가 있으며, 호르몬과 관계없이 작용하므로 부작용을 최소화하고 안전하게 섭취할 수 있다는 이점이 있다.

Description

호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물{A Pharmaceutical Composition For Preventing, Improving Or Treating Female Menopausal Disorders Comprising Hops Extract And Saffron Extract}

본 발명은 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.

갱년기란 내분비 증후군의 일종으로 난소기능의 전반적이고 점진적인 노화로 인한 여성호르몬, 즉 에스트로겐의 감소로 인해 생리적 기능 및 성기능이 감소 내지 소실되는 과도기를 말한다. 이러한 갱년기의 증상으로는 안면홍조, 빈맥, 발한 또는 두통과 같은 혈관성 변화에 의한 증상이 있고, 근육통, 관절통 및 요통과 같은 근골격계 변화에 의한 증상이 있으며, 빈뇨 또는 요실금과 같은 비뇨생식기 변화에 의한 증상이 있고, 기억력 감퇴, 우울증, 집중력 감퇴 및 현기증과 같은 뇌신경계 변화에 의한 증상이 있으며, 이 외에도 시력감퇴 및 피부와 모발이 변화되는 증상들이 발생되며, 호르몬 변화로 인한 골다공증이나 심혈관계 질환 등 여성의 건강에 치명적인 질환이 발생할 수 있다.

따라서 중년 여성들의 신체적, 정신적 건강 및 삶의 질을 개선하기 위하여 갱년기 증상을 개선할 수 있는 치료제의 개발이 요구되었으며, 이러한 갱년기 증상의 개선을 위해 호르몬 대체요법 및 비스테로이드계 제제 등의 약물들이 개발된 바 있다. 그러나 이들 약물의 경우 대부분이 두통 및 체중증가 등의 부작용이 있는 것으로 알려져 있으며, 특히, 에스트로겐 대체요법의 경우에도 인위적으로 체내에 호르몬을 투여하는 것이기 때문에 이에 대한 거부반응과 함께 자궁출혈, 뇌졸중, 심장발작, 유방암 및 자궁암의 발생 위험이 증가할 수 있는 것으로 알려져 있다.

따라서 이와 같은 문제점들 때문에 식품이나 첨가물의 형태로 섭취하는 자연적인 방법으로 에스트로겐 요법을 대체하고자 하는 관심이 높아지고 있으며, 부작용이 없으면서도 갱년기의 증상을 완화하는 효과가 우수한 새로운 갱년기 증상 치료제의 개발이 요구되고 있는 실정이다(특허문헌 1).

호프(Hops, Humulus lupulus L.)는 유럽, 호주 및 북미 등지에서 자생하는 덩굴줄기 식물로서, 호프 추출물에 존재하는 여러 화합물들은 항암, 항산화, 미백 등 다양한 생리활성을 나타내는 것으로 알려져 있다. 호프 추출물은 8-프레닐나린제닌(8-prenylnaringenin)을 비롯한 이소잔토휴몰(isoxanthohumol) 등의 화합물이 유효성분으로 알려져 있다. 다만 상기 호프는 동물 안전성 시험에서 과량 섭취 시 쥐의 자궁 무게가 증가해, 복용량의 한계가 있다는 문제가 있고, 관능 상 특유의 이취가 강하고 떫은 맛이 매우 강하다고 알려져 있다.

샤프란(Saffron)은 붓꽃과에 속하는 식물인 사프란 크로커스(saffron crocus, 학명: Crocus sativus) 꽃의 암술대를 건조시켜 만든 향신료이다. 암술대는 3개이며 이 부분을 말려서, 요리할 때 조미료로 쓰거나 염료로 쓴다. 지중해와 동양에서는 쌀, 생선요리, 빵요리 등에 색을 내고 맛을 가하는데 쓰였으며, 고대 인도에서는 암술머리를 증류하여 황금색의 수용성 직물 염료를 얻어 왕가복장의 염색에 써온 것으로 알려져 있다. 또한, 그리스와 로마에서는 집회장, 궁정, 극장, 욕실 등에 향수로 사용하였다.

본 발명자들은 여성갱년기 증상의 개선에 적용할 수 있는 생약 후보군을 검토하였으며, 호프와 샤프란을 소정의 비율로 조합하여 여성갱년기 동물모델에 투여하였을 때 갱년기 동물모델의 불안 관련 행동 변화, 홍조 개선, 뇌조직 면역조직화학 염색 결과 코르티코트로핀 방출 인자(Corticotrophin Releasing Factor, CRF) 발현 감소 등의 효과가 있을 뿐만 아니라, 동물모델의 자궁무게에는 변화가 없어 호르몬과 관계없이 작용하는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

대한민국 등록특허공보 제10-2073016호

여성갱년기 증상을 개선시키고자 종래에 적용되어 왔던 호르몬 요법을 대체할 수 있는 생약 유래의 여성갱년기 증상 완화 효과를 나타내는 물질을 제공하는 것이다.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.

아울러, 본 발명은 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 증상의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물을 제공한다.

본 발명은 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 특정 비율로 혼합할 때에 여성갱년기 호르몬 변화로 인한 우울, 불안 행동 및 홍조 증상이 개선되고, 우울증 환자에서 과활성이 나타나는 신경 펩티드인 CRF 발현을 감소시키는 효과가 있으며, 호르몬과 관계없이 작용하므로 부작용을 최소화하고 안전하게 섭취할 수 있다는 이점이 있다.

도 1은 십자미로실험에서 본 발명의 실시예 및 비교예의 조성물을 투여한 군의 열려있는 공간의 출입횟수, 머무름 시간을 측정한 결과를 나타낸다.
도 2는 십자미로실험에서 본 발명의 실시예 및 비교예의 조성물을 투여한 군의 닫혀있는 공간의 머무름 시간을 측정한 결과를 나타낸다.
도 3은 구속스트레스 부하 후 본 발명의 실시예 및 비교예의 조성물을 투여한 군의 꼬리온도 측정 결과를 나타낸다.
도 4는 구속스트레스 부하 후 본 발명의 실시예 및 비교예의 조성물을 투여한 군의 뇌조직 면역조직화학 염색 결과를 보여준다.
도 5는 본 발명의 실시예 및 비교예의 조성물을 투여한 동물모델의 자궁 비중을 평가한 결과를 나타낸다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

1. 호프 추출물 및 샤프란 추출물의 제조

본 발명에서 호프(Hops, Humuli Strobilus)는 뽕나무과(Moraceae)에 속하는 덩굴식물인 호프(Humulus lupulus L.)의 잘 익은 구과를 의미하며, 본 발명에서 호프 추출물은 호프의 순, 꽃, 꽃봉오리 또는 열매로부터 얻은 추출물을 포함할 수 있다.

본 발명에서 샤프란(Saffron)은 붓꽃과에 속하는 식물인 사프란 크로커스(saffron crocus, 학명: Crocus sativus) 꽃의 암술대를 건조시켜 만든 향신료를 의미하며, 본 발명에서 샤프란 추출물은 사프란 크로커스의 순, 꽃, 꽃봉오리 또는 열매로부터 얻은 추출물을 포함할 수 있다.

본 발명에서 일컫는 "추출물"은 원료로부터 임의의 방법으로 추출된 물질을 의미하며, 이렇게 추출된 추출액, 이로부터 얻을 수 있는 농축액, 상기 농축액의 건조물 및 분말을 제한 없이 모두 포함하는 의미로 사용된다.

상기 추출물은 원료 또는 이의 건조물로부터 추출하여 얻을 수 있으며, 상기 추출물의 원료는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.

상기 추출물을 원료로부터 추출하여 수득할 때, 추출 방법으로는 용매 추출법, 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등 종래 알려진 통상적인 추출 방법을 모두 사용할 수 있으며, 바람직하게는 용매 추출법이나 환류 추출법을 이용함으로써 제조할 수 있다. 상기 추출 과정은 수회 반복할 수 있으며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 단계를 추가적으로 거칠 수 있다. 구체적으로, 수득한 추출물을 감압 농축하여 농축액을 얻고, 상기 농축액을 동결건조시킨 후 분쇄기를 이용하여 고농도의 추출 분말을 제조할 수 있다. 추출물은 추출물을 추가적으로 분획하여 얻은 분획물도 포함한다.

상기 추출물은 물, 유기용매, 초임계 유체 또는 이들의 혼합물을 추출용매로 하여 추출될 수 있다. 상기 유기용매는 알코올, 바람직하게는 C1-C4의 저급 알코올, 헥산(n-헥산), 에테르, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 부틸렌글리콜, 에틸아세테이트, 메틸아세테이트, 디클로로메탄, 클로로포름, 에틸아세테이트, 벤젠 및 이들의 혼합용매로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있고, 바람직하게는 에탄올일 수 있다. 물 및 유기용매의 혼합물을 추출 용매로 사용하는 경우, 물 및 유기용매의 혼합물은 바람직하게는 물 및 C1-C4의 저급 알코올의 혼합물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 물 및 에탄올의 혼합물일 수 있다.

상기 물 및 에탄올의 혼합물은 50%(v/v) 내지 95%(v/v) 에탄올 수용액, 예컨대 55%(v/v) 내지 90%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있고, 바람직하게는 60%(v/v) 내지 85%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 65%(v/v) 내지 85%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있고, 보다 더 바람직하게는 75%(v/v) 내지 85%(v/v) 에탄올 수용액일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 상기 물 및 에탄올의 혼합물이 하한값 미만의 농도일 경우에는 추출물을 제조하더라도 여성갱년기 증상에 관여하는 호르몬 또는 단백질의 발현을 조절할 수 없어서 여성갱년기 증상들을 완화시킬 수 없다. 물 및 에탄올의 혼합물이 상한값을 초과하는 농도일 경우에는 호프 추출물과 샤프란 추출물을 혼합하여 처리하여도 여성갱년기 증상이 개선되지 않는다.

예를 들면, 호프 추출시 초임계 유체 추출법으로 추출을 수행할 수 있으며, 초임계 유체로 임계점이 상온에 가깝고 무독성·불연성이면서 가격이 매우 저렴한 이산화탄소를 이용할 수 있다. 고순도로 추출물을 수득하기 위해 초임계 유체에 공용매를 부가하여 추출을 수행할 수 있다. 공용매로는 에탄올, 메탄올 등의 저급 알코올 또는 노르말 헥산, 에틸아세테이트 등을 사용할 수 있는데, 바람직하게는 저급 알코올, 특히 에탄올을 사용하는 것이 가장 바람직하다. 호프 추출물의 여성갱년기 장애의 예방 또는 치료 효과를 높이기 위해서 초임계 유체 추출 조건을 조절할 수 있다.

예를 들면, 초임계 유체로 추출시 온도는 40℃ 내지 100℃일 수 있고, 바람직하게는 50℃ 내지 90℃일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 60℃ 내지 80℃일 수 있으나, 이에 한정하지 않는다. 추출시 온도가 적정범위를 벗어나면, 추출물의 수율이 감소하고, 생산비용의 증가하여 제품의 원가가 높아지는 단점이 있다.

초임계 유체로 추출시 추출 시간은 0.5시간 내지 10시간일 수 있고, 바람직하게는 1시간 내지 9시간일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 2시간 내지 8시간 또는 2시간 내지 5시간일 수 있으나, 이에 한정하지 않는다.

초임계 추출시 압력을 10Mpa 내지 50Mpa로 유지할 수 있고, 바람직하게는 15Mpa 내지 45Mpa로 유지할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 10Mpa 내지 40Mpa 또는 25Mpa 내지 35Mpa로 유지할 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다.

또한, 호프에 상기 초임계 유체의 공급속도는 2㎏/min 내지 20㎏/min, 또는 5㎏/min 내지 15㎏/min, 또는 7㎏/min 내지 12㎏/min일 수 있으나, 이에 특별히 제한되지 않는다.

예를 들면, 샤프란 추출시 용매 추출법으로 추출을 수행할 수 있으며, 추출용매로는 물을 사용할 수 있다. 샤프란 추출시 용매 첨가량은 생약 중량 1㎏ 대비 5 내지 20배수일 수 있고, 바람직하게는 7 내지 18배수일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 9 내지 16배수일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 샤프란 추출은 15℃ 내지 80℃에서 실시될 수 있고, 바람직하게는 15℃ 내지 70℃에서 실시될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 30℃ 내지 65℃에서 실시될 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다. 샤프란 추출은 4시간 내지 20시간 동안 실시될 수 있고, 바람직하게는 4시간 내지 16시간 동안 실시될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 4시간 내지 12시간 동안 실시될 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 샤프란 추출은 1회 내지 8회 실시될 수 있고, 바람직하게는 1회 내지 6회 실시될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 1회 내지 5회 실시될 수 있으나, 이에 한정하지 않으며, 추출물은 각 추출에서 얻어진 단독 추출물 또는 각 추출에서 얻어진 추출물들의 혼합 추출물일 수 있다. 추출 조건 중 추출시 첨가되는 용매의 양, 온도 및 시간이 하한값 미만이거나, 추출 횟수가 상한값을 초과하여 실시될 경우에는 샤프란 추출물의 여성 갱년기 증상 개선 효과가 저하될 수 있다.

호프 추출물 및 샤프란 추출물은 호프와 샤프란의 혼합물을 추출할 수도 있고, 호프 추출물과 샤프란 추출물을 혼합할 수도 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

상기 추출물은 여성갱년기 장애 개선 효과를 높이기 위해서 추가로 통상의 분획 공정을 수행하여 분획물을 수득한 것일 수도 있다. 예를 들면, 본 발명에 따른 분획물을 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외 여과막을 통과시켜 얻은 분획물, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등으로 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 활성 분획물도 본 발명의 분획물에 포함된다. 여러 성분이 혼합되어 있는 분획물을 농도구배 컬럼 크로마토그래피 등을 통하여 활성 성분의 성질에 따라 분리하여서 보다 여성갱년기 장애 개선 효과가 높은 특정 활성 분획물을 제조할 수 있다.

상기 컬럼 크로마토그래피는 실리카겔, 세파덱스, LH-20, ODS 겔, RP-18, 폴리아미드, 도요펄(Toyopearl) 및 XAD 수지로 이루어진 군으로부터 선택된 충진제를 이용하는 컬럼 크로마토그래피를 수행하여 활성 분획물을 분리 및 정제할 수 있고, 컬럼 크로마토그래피는 필요에 따라 적절한 충진제를 선택하여 수차례 실시할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 상기 크로마토그래피를 사용함에 있어 용출 용매, 용출 속도 및 용출 시간은 본 기술 분야에서 일반적으로 사용하는 용매, 속도 또는 시간을 적용할 수 있다.

2. 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 조성물의 용도

본 발명의 다른 측면은 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 조성물의 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료 용도; 여성갱년기 증상의 예방 또는 개선 용도;를 포함할 수 있다.

상기 여성갱년기 장애는 중년의 여성에서 나타나는 정신적 병태, 신체적 병태 및 성적 병태로 이루어지는 군으로부터 선택되는 어느 하나일 수 있다.

상기 정신적 병태는 우울증, 기분 변화, 신경과민, 불안, 과민, 집중력 저하, 인지 능력 저하, 공간 지각력의 감소 및 기억 저하로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다.

상기 신체적 병태는 피로증, 현기증, 열감, 홍조, 발한, 지방 과다, 근력 감소, 뼈 질환, 수면 장애, 체모의 감소, 내장 지방 증가, 근육량 감소, 근력 감소, 골밀도 감소, 동맥경화 증가 및 경동맥 혈관 두께 증가, 인슐린 저항성 증가, 무기력, 체력 또는 지구력 감퇴, 피부 변화 및 관절 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다.

상기 성적 병태는 감소된 성욕, 질 건조증, 성교 시 통증로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 병태를 포함하는 것일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다.

또한, 여성갱년기 장애는 에스트로겐의 감소에 의해서 나타나는 정신적, 신체적 및 병적 병태들일 수 있다.

본 발명에서 용어 "예방"은 조성물을 대상체에 투여하여 해당 질병 또는 부정적 상태를 억제시키거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 용어 "치료"는 조성물을 대상체에 투여하여 기발병된 해당 질병 또는 부정적 상태의 증세를 호전시키는 모든 행위일 수 있다.

본 발명에서 용어 "개선"은 증세의 호전, 억제, 또는 지연을 포함하는 모든 행위를 의미하는 것으로, 상기 예방 또는 치료와 혼용되어서 사용될 수 있다.

상기 조성물은 조성물 총 중량에 대하여 0.00001 중량% 내지 80 중량%, 예를 들면, 0.00001 중량% 내지 60 중량%, 0.00001 중량% 내지 40 중량%, 0.00001 중량% 내지 30 중량%, 0.00001 중량% 내지 20 중량%, 0.00001 중량% 내지 10 중량%, 0.00001 중량% 내지 5 중량%, 0.05 중량% 내지 60 중량%, 0.05 중량% 내지 40 중량%, 0.05 중량% 내지 30 중량%, 0.05 중량% 내지 20 중량%, 0.05 중량% 내지 10 중량%, 0.05 중량% 내지 5 중량%, 0.1 중량% 내지 60 중량%, 0.1 중량% 내지 40 중량%, 0.1 중량% 내지 30 중량%, 0.1 중량% 내지 20 중량%, 0.1 중량% 내지 10 중량%, 또는 0.1 중량% 내지 5 중량%의 호프 추출물 및 샤프란 추출물의 복합물을 포함할 수 있다.

상기 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 조성물은 약학적 조성물, 식품 조성물, 건강기능식품 조성물일 수 있다. 상기 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 조성물이 약학적 조성물인 경우 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료용 조성물일 수 있고, 상기 조성물이 식품 또는 건강기능식품 조성물인 경우 이는 여성갱년기 증상의 예방 또는 개선용 조성물일 수 있다.

상기 샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 100중량부 내지 600중량부로 포함될 수 있고, 바람직하게는 상기 샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 150중량부 내지 500중량부로 포함될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 상기 샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 200중량부 내지 400중량부로 포함될 수 있고, 보다 더 바람직하게는 상기 샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 250중량부 내지 350중량부로 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않는다. 호프와 샤프란의 혼합물 제조시에도 위의 비율에 따라 제조될 수 있다. 샤프란 추출물이 하한값 미만으로 포함될 경우에는 호프 추출물과 샤프란 추출물을 혼합하더라도 여성갱년기 장애를 개선하는 효과가 낮다. 또한, 샤프란 추출물을 상한값을 초과하여 포함할 경우에는 호프 추출물과 샤프란 추출물을 혼합하더라도 상승 효과가 낮아지는 문제점이 있다.

상기 약학적 조성물은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있는 방법에 따라, 약학적으로 허용되는 담체 및/또는 부형제를 이용하여 제제화함으로써 단위 용량 형태로 제조되거나 또는 다용량 용기 내에 내입시켜 제조되는 것일 수 있다. 이 때, 제형은 오일 또는 수성 매질 중의 용액, 현탁액 또는 유화액 형태이거나 엑스제, 분말제, 과립제, 정제, 캅셀제 또는 젤(예컨대, 하이드로젤) 형태일 수도 있으며, 분산제 또는 안정화제를 추가적으로 포함할 수 있다.

또한, 상기 약학적 조성물이 포함하는 상기 호프 추출물 및 샤프란 추출물은 콜로이드 현탁액, 분말, 식염수, 지질, 리포좀, 미소구체(microspheres), 또는 나노 구형입자와 같은 약학적으로 허용될 수 있는 담체에 운반될 수 있다. 이들은 운반 수단과 복합체를 형성하거나 관련될 수 있고, 지질, 리포좀, 미세입자, 금, 나노입자, 폴리머, 축합 반응제, 다당류, 폴리아미노산, 덴드리머, 사포닌, 흡착 증진 물질 또는 지방산과 같은 당업계에 공지된 운반 시스템을 사용하여 생체 내 운반될 수 있다.

이 외에도, 약학적으로 허용되는 담체는 제제시 통상적으로 이용되는 락토오스, 덱스트로스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아, 고무, 인산칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세 결정성 셀룰로스, 폴리비닐 피로리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필 히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘 및 미네랄 오일 등을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. 또한, 상기 성분들 이외에 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 추가로 포함할 수 있다. 적합한 약학적으로 허용되는 담체 및 제제는 레밍턴의 약학적 과학(Remington's Pharmaceutical Sciences, 19th ed., 1995)에 상세히 기재되어 있다.

상기 약학적 조성물은 임상 투여시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 즉, 본 발명의 약학적 조성물은 실제 임상 투여시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될 수 있는데, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 생약 추출물 또는 생약 발효물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스 또는 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제된다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제, 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤, 젤라틴 등이 사용될 수 있다.

상기 약학적 조성물은 여성갱년기 장애의 예방 또는 치료의 예방 또는 개선을 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선치료, 호르몬치료, 화학치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.

상기 약학적 조성물에 포함되는 유효성분의 농도는 치료 목적, 환자의 상태, 필요기간 등을 고려하여 결정할 수 있으며 특정 범위의 농도로 한정되지 않는다. 본 발명의 약학적 조성물은 약학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에 있어서 "약학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 상기 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나, 다른 여성갱년기 장애의 치료제와 병용하여 투여될 수 있고 종래의 치료제와는 동시에, 별도로, 또는 순차적으로 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기 요소들을 모두 고려하여 부작용없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

구체적으로 본 발명의 약학적 조성물의 유효량은 환자의 연령, 성별, 상태, 체중, 체내에 활성 성분의 흡수도, 불활성율, 배설 속도, 질병 종류, 병용되는 약물에 따라 달라질 수 있으며, 투여 경로, 비만의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라 증감될 수 있으며, 일례로 1일당 환자 체중 1㎏ 당 약 0.0001㎍ 내지 500㎎, 예컨대 0.01㎍ 내지 100㎎ 투여할 수 있다. 또한, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간 간격으로 1일 수회, 예컨대 하루 2회 내지 3회 분할 투여될 수 있다.

또한, 상기 식품 조성물에서, 상기 식품은 먹을 수 있는 원재료 및 가공물질을 모두 포함하는 것으로서, 여러 가지 소화될 수 있는 영양소를 함유하는 것을 의미한다.

상기 식품 조성물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 식품 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품성분과 함께 사용할 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류에 특별한 제한은 없다. 상기 식품 조성물을 첨가할 수 있는 식품은 프로바이오틱스 제제일 수 있으며, 예컨대 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차 드링크제, 알콜 음료, 비타민 복합제 및 발효 식품 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.

또한, 상기 식품 조성물은 식품, 특히 기능성 식품으로 제조될 수 있다. 상기 기능성 식품은 식품 제조 시에 통상적으로 첨가되는 성분을 포함하며, 예를 들어, 단백질, 탄수화물, 지방, 영양소 및 조미제를 포함한다. 예컨대, 드링크제로 제조되는 경우에는 유효성분 이외에 천연 탄수화물 또는 향미제를 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 모노사카라이드(예컨대, 글루코오스, 프럭토오스 등), 디사카라이드(예컨대, 말토스, 수크로오스 등), 올리고당, 폴리사카라이드(예컨대, 덱스트린, 시클로덱스트린 등) 또는 당알코올(예컨대, 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등)인 것이 바람직하다. 상기 향미제는 천연 향미제(예컨대, 타우마틴, 스테비아 추출물 등)와 합성 향미제(예컨대, 사카린, 아스파르탐 등)를 이용할 수 있다.

상기 건강기능식품 조성물에서, 건강기능식품은 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용한 식품으로서, 인체의 정상적인 기능을 유지하거나 생리기능 활성화를 통하여 건강을 유지하고 개선할 수 있는 기능성을 가진 식품을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 건강기능식품에 관한 법률상의 건강기능식품에 해당한다. 상기 호프 추출물 및 샤프란 추출물은 갱년기 호르몬 변화에 따른 우울, 불안, 홍조 증상을 개선하고, 뇌조직 면역조직화학 염색 결과 CRF 발현 감소 등의 변화를 나타내므로 상기 호프 추출물 및 샤프란 추출물은 인간 또는 인간을 제외한 동물의 여성갱년기 증상을 예방하거나 개선하는 기능을 가진 기능성 원료로서 건강기능식품에 유효성분으로 포함될 수 있다.

상기 건강기능식품 조성물은 정제, 과립제, 연질캅셀제, 경질캅셀제, 시럽, 음료수, 환, 연조엑스제, 중탕액 등의 제형으로 제조될 수 있다. 보다 구체적으로, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 정제, 과립제, 연질캅셀제, 경질캅셀제, 시럽, 음료수, 환, 연조엑스제, 건조엑스제, 추출중탕액 등의 제형으로 제조될 수 있다. 또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 각각의 제형에 상기 기재한 성분들 이외에 건강기능식품의 제조에 통상적으로 첨가되는 성분, 예컨대 부형제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제, 향료, 색소, 방부제 등을 더 포함할 수 있다. 이러한 상기 첨가되는 성분의 비율은 크게 중요하진 않지만 상기 건강기능식품 조성물 100 중량부에 대하여, 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

본 발명의 한 실시예에서는 호프 추출물 및 샤프란 추출물의 혼합물을 샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 호프 추출물을 150중량부 내지 500중량부로 포함시키고(제조예 1의 2:1, 3:1 또는 4:1 비율을 포함함), 이 혼합물을 여성갱년기 동물 모델에 투여한 경우, 여성갱년기 증상과 관련된 우울 또는 불안 행동(도 1 및 도 2) 및 홍조가 개선되고(도 3), 뇌조직 CRF 발현 감소를 나타내는(도 4) 한편, 자궁무게에는 변화가 없어 호르몬과 관계없이 작용함(도 5)을 확인하였다.

이하, 본 발명을 제조예 및 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 제조예, 실험예, 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

실시예

<제조예 1> 호프 추출물의 제조

호프(Humulus lupulus L.)의 암꽃을 분쇄하여 초임계 유체로서 이산화탄소 및 공용매로서 75-85%의 에탄올로 추출한 다음, 여과, 농축, 건조 과정을 거쳐 호프 분말을 수득하였다.

<제조예 2> 샤프란 추출물의 제조

샤프란 크로커스(Crocus sativus)의 암술 부위에 물을 가하고 70℃ 이하 온도에서 추출한 다음, 농축 및 건조과정을 거쳐 샤프란 분말을 수득하였다.

<제조예 3> 호프 추출물 및 샤프란 추출물의 혼합물의 제조

제조예 1 및 제조예 2에서 얻어진 단독 추출물을 비율을 다르게 하여서 제조하였다. 3종류의 혼합물을 제조하였으며, 호프:샤프란의 비율을 2:1(20:10), 3:1(30:10), 4:1(40:10)로 하였다.

<실시예 1> 여성갱년기 개선 효능 확인

<1-1> 실험군의 구성

실험에 사용된 동물은 ㈜새론바이오에서 SD 암컷 랫드(7주령)을 공급받아 1주일간 순화시켜 사용하였으며, 물과 사료는 자유롭게 섭취하도록 하였고, 온도(23±2℃), 습도(55±10%) 및 명암 주기(12시간)는 자동으로 조절되도록 하였다.

제조된 단일 및 복합물의 여성갱년기 증상에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 랫드의 양측 난소를 절제하여 여성의 폐경을 모방한 갱년기 증상 유발 모델을 확립하였다. 이소플루란 마취 후, 유발대조군(OVX) 및 실험군은 양쪽 난소를 절제하여 제거 했으며, 정상대조군(Sham)은 모의수술만 실시한 후 1주간 회복기를 두었다. 회복 후, 체중을 측정하여 군 분리를 실시하고, 14일간 1일 1회 호프, 샤프란 추출물 및 복합물을 각각 경구용 존데를 이용하여 표 1과 같이 각각의 동물에 ㎏/bw의 양만큼 경구투여 하였다.

구속스트레스는 14일 동안 매일 아침 8시 30분경 랫드를 동물실에서 실험실로 옮긴 다음, 9시부터 2시간 동안 설치류용 홀더에 고정하여 결박하는 방법으로 유발하였다.

No.	Label	군 분리	마리수	시료 투여량
1	Sham	대조군(모의수술)	8	-
2	OVX	난소절제군	8	-
3	Hop	호프 투여군	8	150 mg/㎏
4	Shaffron	샤프론 투여군	8	150 mg/㎏
5	2:1	호프, 샤프론 2:1 복합물 투여군	8	150 mg/㎏
6	3:1	호프, 샤프론 3:1 복합물 투여군	8	150 mg/㎏
7	4:1	호프, 샤프론 4:1 복합물 투여군	8	150 mg/㎏

<실험예 2> 십자미로 실험

십자 미로시험은 검정색의 아크릴로 제작된 상승된 십자미로(Elevated Plus-Maze)를 이용하여 실험동물의 불안 정도를 측정하는 실험방법으로, 랫드는 미로의 중앙에서 열린 공간 쪽으로 머리를 향하게 하여 살며시 내려놓은 다음 미로를 자유롭게 탐색하도록 하여 수행하였다. 이때, 행동은 5분간 관찰하며, 랫드가 열려있는 공간과 닫혀있는 공간에 머문 시간, 각 공간의 출입 횟수 등을 EthoVision 프로그램(Noldus Information Technology, Wageningen, Netherlands)으로 각각 측정하였고, 열려있는 공간 출입 횟수, 머무름 시간을 도 1에 나타내고, 닫혀있는 공간에 머문 시간을 도 2에 나타냈다.

상기 결과로부터, 난소절제 및 구속스트레스를 유발한 대조군의 경우 십자미로의 열려있는 공간에서 머문 시간이 감소한 것을 확인할 수 있고, 호프, 샤프란의 복합물(2:1, 3:1, 4:1) 투여군에서 모두 머무름 횟수가 유의적으로 증가하고, 단일 추출물 투여군에 비해 머무름 시간이 증가하므로 항불안 활성 상승 효과가 있음을 확인할 수 있다.

또한, 난소절제 및 구속스트레스를 유발한 대조군의 경우 십자미로의 닫혀있는 공간에서 머무름 시간이 증가한 것을 확인할 수 있고, 호프, 샤프란의 복합물(2:1, 3:1, 4:1) 투여군에서 모두 머무름 시간이 유의적으로 감소하므로 항불안 활성 상승 효과가 있음을 확인할 수 있다.

<실험예 3> 꼬리피부온도 측정

구속스트레스 부하 후, 여성갱년기의 주요 증상 중 하나인 안면홍조개선 효과와 관련된 동물실험 마커로서 설치류의 주요 열방출 부위인 꼬리 피부 온도를 측정하였다. 투여 8주 후 실험동물의 각 꼬리 피부 온도를 적외선온도계(Bioseb, USA)로 측정하였고 그 결과를 도 3에 나타냈다.

상기 결과로부터, 난소절제 및 구속스트레스를 유발한 대조군의 경우 꼬리 온도가 증가한 것을 확인할 수 있고, 호프, 샤프란의 복합물(2:1, 3:1, 4:1) 투여군에서 모두 꼬리피부온도의 상승이 억제되며, 단일 추출출에 비해 우수한 효과를 나타내는 것을 확인할 수 있다.

<실험예 4> 뇌조직 면역조직화학 염색 결과

실험 종료 후, 마취된 실험동물에 PBS와 4% PFA를 이용해 심장관류를 수행한 후, 뇌조직을 분리하여 실험에 사용하였다. 분리한 뇌조직은 30 ㎛ 두께로 박절하여 절편을 만든 후, 토끼 항-CRF(Bioss, USA)를 이용하여 24시간 동안 반응 시킨 다음, PBS로 수세하고 염소 항-토끼 2차 항체(Vector laboratory, USA), ABC(Vector laboratory, USA)와 순차적으로 2시간 동안 반응시켰다. 이후 PBS로 수세하고 DAB에 반응시켜 조직을 슬라이스에 건조시킨 후 각 군마다 동일한 뇌의 부위를 현미경으로 관찰하여 염색된 세포 수를 측정하였다.

상기 결과로부터, 대조군의 경우 우울증 환자에서 과활성이 나타나는 뇌조직 CRF 발현이 증가한 것을 확인할 수 있고, 호프, 샤프란의 복합물(2:1, 3:1, 4:1) 투여군에서 단일 추출출 투여군 대비 CRF 발현이 감소되므로 항우울 또는 항스트레스 신경활성에 대한 상승작용이 있음을 확인할 수 있다.

<실험예 5> 호르몬 활성 평가

난소를 제거하면 여성호르몬 부족에 의한 자궁 위축현상이 발생하여 자궁이 무게가 줄어들며, 호르몬 또는 호르몬 유사활성이 있는 물질의 작용 시 자궁의 무게가 증가한다. 실험 종료 후, 마취된 실험동물의 자궁을 분리하여 무게를 측정하였다.

호프 및 샤프란 추출물의 혼합물 투여에 따른 자궁 비중의 변화를 확인하기 위해 자궁 비중(자궁무게(g)/체중(g)*100)을 평가하였고, 그 결과를 도 5에 나타냈다.

상기 결과로부터, 호프 및 샤프란 추출물의 혼합물(2:1, 3:1, 4:1) 투여군의 경우 자궁 비중이 난소절제군에 비해 변화가 없으므로 호르몬 활성에 영향이 없음을 확인할 수 있다.

<제조예 4> 약학적 제제의 제조

<4-1> 산제의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 2g

유당 1g

상기의 성분을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.

<4-2> 정제의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 100㎎

옥수수전분 100㎎

유당 100㎎

스테아린산 마그네슘 2㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 정제의 제조 방법에 따라서 타정하여 정제를 제조하였다.

<4-3> 캡슐제의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 100㎎

옥수수전분 100㎎

유당 100㎎

스테아린산 마그네슘 2㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라서 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.

<4-4> 환의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 1g

유당 1.5g

글리세린 1g

자일리톨 0.5g

상기의 성분을 혼합한 후, 통상의 방법에 따라 1환 당 4g이 되도록 제조하였다.

<4-5> 과립의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 150㎎

대두추출물 50㎎

포도당 200㎎

전분 600㎎

상기의 성분을 혼합한 후, 30% 에탄올 100㎎을 첨가하여 섭씨 60℃에서 건조하여 과립을 형성한 후 포에 충진하였다.

<제조예 5> 건강식품의 제조

<5-1> 밀가루 식품의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 0.5-5.0 중량부를 밀가루에 첨가하고, 이 혼합물을 이용하여 빵, 케이크, 쿠키, 크래커 및 면류를 제조하였다.

<5-2> 스프 및 육즙(gravies)의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 0.1-5.0 중량부를 스프 및 육즙에 첨가하여 건강 증진용 육가공 제품, 면류의 수프 및 육즙을 제조하였다.

<5-3> 그라운드 비프(ground beef)의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 10 중량부를 그라운드 비프에 첨가하여 건강 증진용 그라운드 비프를 제조하였다.

<5-4> 유제품(dairy products)의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 5-10 중량부를 우유에 첨가하고, 상기 우유를 이용하여 버터 및 아이스크림과 같은 다양한 유제품을 제조하였다.

<5-5> 선식의 제조

현미, 보리, 찹쌀, 율무를 공지의 방법으로 알파화시켜 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.

검정콩, 검정깨, 들깨도 공지의 방법으로 쪄서 건조시킨 것을 배전한 후 분쇄기로 입도 60 메쉬의 분말로 제조하였다.

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물을 진공 농축기에서 감압농축하고, 분무, 열풍건조기로 건조하여 얻은 건조물을 분쇄기로 입도 60 메쉬로 분쇄하여 건조분말을 얻었다.

상기에서 제조한 곡물류, 종실류 및 본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물을 다음의 비율로 배합하여 제조하였다.

곡물류(현미 30 중량부, 율무 15 중량부, 보리 20 중량부), 종실류(들깨 7 중량부, 검정콩 8 중량부, 검정깨 7 중량부), 본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물(3 중량부), 영지(0.5 중량부), 지황(0.5 중량부)

<제조예 6> 음료의 제조

<6-1> 건강음료의 제조

액상과당(0.5%), 올리고당(2%), 설탕(2%), 식염(0.5%), 물(75%)과 같은 부재료와 본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 5g을 균질하게 배합하여 순간 살균을 한 후 이를 유리병, 패트병 등 소포장 용기에 포장하여 제조하였다.

<6-2> 야채 주스의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 5g을 토마토 또는 당근 주스 1,000 ㎖에 가하여 야채 주스를 제조하였다.

<6-3> 과일 주스의 제조

본 발명의 호프 추출물과 샤프란 추출물의 혼합물 1g을 사과 또는 포도 주스 1,000 ㎖ 에 가하여 과일 주스를 제조하였다.

Claims (16)

1. 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 장애의 예방, 개선 또는 치료용 약학 조성물.
2. 청구항 1에 있어서,
   샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 100중량부 내지 600중량부로 포함되는 조성물.
3. 청구항 1에 있어서,
   샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 150중량부 내지 500중량부로 포함되는 조성물.
4. 청구항 1에 있어서,
   샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 200중량부 내지 400중량부로 포함되는 조성물.
5. 청구항 1에 있어서,
   상기 호프 추출물 및 샤프란 추출물은 각각 추출용매로 물, 에탄올, 이산화탄소, 또는 이들의 혼합물을 가하여 수득되는 것인 조성물.
6. 청구항 1에 있어서,
   상기 호프 추출물은 호프의 꽃 부위를 초임계 추출법에 의해 추출한 것인 조성물.
7. 청구항 1에 있어서,
   상기 샤프란 추출물은 샤프란의 암술 부위를 용매 추출법에 의해 추출한 것인 조성물.
8. 청구항 1에 있어서,
   상기 조성물은 홍조 개선, 항불안, 항스트레스 또는 항우울 효과를 나타내는 조성물.
9. 호프 추출물 및 샤프란 추출물을 포함하는 여성갱년기 증상의 예방 또는 개선용 건강기능식품 조성물.
10. 청구항 9에 있어서,
    샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 100중량부 내지 600중량부로 포함되는 조성물.
11. 청구항 9에 있어서,
    샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 150중량부 내지 500중량부로 포함되는 조성물.
12. 청구항 9에 있어서,
    샤프란 추출물 100중량부에 대해서, 상기 호프 추출물은 200중량부 내지 400중량부로 포함되는 조성물.
13. 청구항 9에 있어서,
    상기 호프 추출물 및 샤프란 추출물은 각각 추출용매로 물, 에탄올, 이산화탄소, 또는 이들의 혼합물을 가하여 수득되는 것인 조성물.
14. 청구항 9에 있어서,
    상기 호프 추출물은 호프의 꽃 부위를 초임계 추출 방법에 의해 추출한 것인 조성물.
15. 청구항 9에 있어서,
    상기 샤프란 추출물은 샤프란의 암술 부위를 용매 추출법에 의해 추출한 것인 조성물.
16. 청구항 9에 있어서,
    상기 조성물은 홍조 개선, 항불안, 항스트레스 또는 항우울 효과를 나타내는 조성물.