KR20240010399A - 천연 추출물을 함유하는 콜라겐 파편 재흡수 증진용 조성물 - Google Patents

천연 추출물을 함유하는 콜라겐 파편 재흡수 증진용 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 천연 추출물을 함유하는 콜라겐 파편 재흡수 증진용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 천연 추출물의 콜라겐 파편 재흡수를 통해 주름, 탄력 및 보습 개선할 수 있는 조성물, 특히 화장료 조성물 또는 건강 기능 식품 조성물에 관한 것이다.

Description

천연 추출물을 함유하는 콜라겐 파편 재흡수 증진용 조성물{Composition for enhancing resorption of collagen fragments containing natural extracts}
본 발명은 천연 추출물을 함유하는 콜라겐 파편 재흡수 증진용 조성물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 천연 추출물의 콜라겐 파편 재흡수를 통해 주름, 탄력, 또는 보습을 개선할 수 있는 조성물, 특히 화장료 조성물 또는 건강 기능 식품 조성물에 관한 것이다.
피부는 인체에서 가장 큰 조직이다(비특허문헌 8). 피부는 근육과 다른 장기를 보호하는 중요한 역할을 하며 외부 병원균이 체내로 침투하는 것을 막는 장벽 역할도 한다. 피부는 표피, 진피, 피하층의 세 가지 층으로 구성되어 있다(비특허문헌 9). 표피는 피부의 가장 바깥쪽에 있는 얇은 층이다. 표피에 있는 세포의 대부분은 각질 세포이다. 각질 세포는 기저층이라고 불리는 표피의 가장 깊은 층에 위치하며 천천히 표피 표면으로 이동하여 피부 표면에 도달하면 서서히 떨어져 나가면서 아래쪽에서 밀려 올라온 새로운 세포로 대체된다. 또한 표피에는 DNA 손상 등 유해한 영향을 미치는 자외선을 차단하는 멜라닌 세포와 외부 물질을 감지하고 감염으로부터 인체를 방어하는 랑게르한스 세포(Langerhans cells)가 있다. 진피는 표피 바로 아래에 위치한 두꺼운 층이다. 진피는 피부에 유연성과 근력을 제공하는 콜라겐 섬유와 탄력 조직으로 구성되어 있으며 신경세포, 땀샘, 피지선, 모낭 및 혈관을 포함한다. 피부 가장 안쪽에는 피하층이 있으며, 피하층에는 지방 세포가 존재하여 더위와 추위로부터 신체를 보호하고 에너지를 저장한다. 피하층의 두께는 신체 부위에 따라 크게 다르다 (비특허문헌 4).
콜라겐은 피부와 뼈를 포함하여 신체 전체에 분포하는 인체 결합 조직의 주성분인 단백질이다(비특허문헌 10). 글리신, 프롤린, 히드록시프롤린이 반복적으로 나타나는 구조를 가지고 있다(비특허문헌 5). 콜라겐의 기본 구성 단위는 약 1000개의 아미노산으로 이루어진 알파사슬이며, 알파사슬 세 가닥이 모여 삼중나선을 형성하고, 삼중나선 사이에 가교가 이루어지면서 콜라겐이 형성된다(비특허문헌 10). 콜라겐은 피부의 약 75%를 구성하며 피부 탄력과 보습을 담당하고 있다(비특허문헌 3, 비특허문헌 7). 콜라겐은 체내에서 분해와 합성이 균형을 이루면서 유지되는 것으로 보고되고 있으며(비특허문헌 6), 노화나 자외선 조사로 인해 콜라겐 분해는 증가하고 합성은 감소하여 피부 탄력이 감소하고 주름이 증가하는 것으로 보고되고 있다(비특허문헌 3).
시중의 이너 뷰티(Inner Beauty) 기능성식품 동향을 살펴보면 녹용 유래 저분자 콜라겐의 제조방법(특허문헌 1) 및 피부 개선용 조성물 및 이를 포함하는 건강식품(특허문헌 2) 등이 보고되어 있고, 콜라겐 분자량을 낮춤으로써 흡수를 높이려는 시도가 경쟁적으로 이루어지고 있지만, 노화나 자외선에 의해 분해된 콜라겐 파편을 세포 속으로 재흡수시켜 콜라겐 재합성의 재료로 사용하고자 하는 시도는 보이지 않았다.
또한, 화장품 동향을 살펴보면 레몬밤, 페퍼민트 및 콜라겐을 포함하는 주름 개선용 화장료 조성물 (특허문헌 3) 및 로열제리 및/또는 홍차를 포함하는 멜라닌 생성 억제용 화장료 조성물(특허문헌 4) 등이 보고 되어있지만, 상기 문헌들은 콜라겐 증진 효능에 대한 연구가 진행되지 않았다.
따라서 본 발명에서는 콜라겐 파편의 세포 내 수송을 활성화시키는 소재를 발굴하여, 콜라겐 또는 로열제리와 함께 복합물로 적용하여 시너지한 피부 개선 효능을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
특허문헌 1: 10-2022-0156317 A 특허문헌 2: 10-2018-0085198 A 특허문헌 3: 10-2017-0076977 A 특허문헌 4: 10-2128312 B1
비특허문헌 1: Anter, E., Thomas, S. R., Schulz, E., Shapira, O. M., Vita, J. A., Keaney Jr., J. F. (2004). Activation of endothelial nitric-oxide synthase by the p38 MAPK in response to black tea polyphenols. The Journal of biological chemistry, 279(45), 46637-46643. doi: 10.1074/jbc.M405547200. 비특허문헌 2: Bhattacharya, U., Halder, B., Mukhopadhyay, S. Giri, A. K. (2009). Role of oxidation-triggered activation of JNK and p38 MAPK in black tea polyphenols induced apoptotic death of A375 cells. Cancer science, 100(10), 1971-1978. doi: 10.1111/j.1349-7006.2009.01251.x. 비특허문헌 3: Bianchi, F. M., Angelinetta, C., Rizzi, G., Pratic, A., Villa, R. (2022). Evaluation of the Efficacy of a Hydrolyzed Collagen Supplement for Improving Skin Moisturization, Smoothness, and Wrinkles. The Journal of clinical aesthetic dermatology, 15(3), 48-52. PMID: 35342502, PMCID: PMC8944283. 비특허문헌 4: Gibney, M. A., Arce, C. H., Byron, K. J., Hirsch, L. J. (2010). Skin and subcutaneous adipose layer thickness in adults with diabetes at sites used for insulin injections: implications for needle length recommendations. Current medical research opinion, 26(6), 1519-1530. doi: 10.1185/03007995.2010.481203. 비특허문헌 5: Li, P., & Wu, G. (2018). Roles of dietary glycine, proline, and hydroxyproline in collagen synthesis and animal growth. Amino acids, 50(1), 29-38. doi: 10.1007/s00726-017-2490-6. 비특허문헌 6: McKleroy, W., Lee, T., Atabai, K. (2013). Always cleave up your mess: targeting collagen degradation to treat tissue fibrosis. American journal of physiology. Lung cellular and molecular physiology, 304(11), L709-21. doi: 10.1152/ajplung.00418.2012. 비특허문헌 7: Pyun, H., Kim, M., Park, J., Sakai, Y., Numata, N., Shin, J., Shin, H., Kim, D., Hwang, J. (2012). Effects of Collagen Tripeptide Supplement on Photoaging and Epidermal Skin Barrier in UVB-exposed Hairless Mice. Preventive nutrition and food science, 17(4), 245-253. doi: 10.3746/pnf.2012.17.4.245. 비특허문헌 8: Roudsari, M. R., Karimi, R., Sohrabvandi, S., Mortazavian, A. M. (2015). Health effects of probiotics on the skin. Critical reviews in food science and nutrition, 55(9), 1219-1240. doi: 10.1080/10408398.2012.680078. 비특허문헌 9: Shimojo, Y., Nishimura, T., Hazama, H., Ozawa, T., Awazu, K. (2020). Measurement of absorption and reduced scattering coefficients in Asian human epidermis, dermis, and subcutaneous fat tissues in the 400- to 1100-nm wavelength range for optical penetration depth and energy deposition analysis. Journal of biomedical optics, 25(4), 1-14. doi: 10.1117/1.JBO.25.4.045002. 비특허문헌 10: Shoulders, M. D., & Raines, R. T. (2009). Collagen structure and stability. Annual review of biochemistry, 78, 929-958. doi: 10.1146/annurev.biochem.77.032207.120833. 비특허문헌 11: Tanaka, T., Miyata, Y., Tamaya, K., Kusano, R., Matsuo, Y., Tamaru, S., Tanaka, K., Matsui, T., Maeda, M., Kouno, I. (2009). Increase of theaflavin gallates and thearubigins by acceleration of catechin oxidation in a new fermented tea product obtained by the tea-rolling processing of loquat (Eriobotrya japonica ) and green tea leaves. Journal of agricultural and food chemistry, 57(13), 5816-5822. doi: 10.1021/jf900963p.
본 발명의 발명자들은 불활성화된 콜라겐 파편을 세포 속으로 재흡수를 유도하여 새로운 콜라겐 합성을 촉진하는 천연 추출물을 발굴함으로써, 이 천연 추출물이 피부의 주름, 탄력 및 보습 개선 효과가 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.
이에, 본 발명의 목적은 콜라겐 파편을 재흡수하고 콜라겐 재합성을 촉진할 수 있는 천연 추출물을 함유하는 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물을 제공하는데 있다.
상기 과제를 해결하기 위한 수단으로서, 본 발명에 따른 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물을 보다 상세하게 설명한다.
본 발명은 콜라겐; 및 레몬밤, 홍차, 페퍼민트 및 차즈기로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 1가지 이상의 성분을 포함하는 천연추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 조성물은 로열제리를 더 포함할 수 있다.
본 발명에서 상기 콜라겐은 전체 조성물 기준으로 10 내지 99.98 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명에서 상기 천연추출물은 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 10 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명에서 상기 로열제리는 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 10 중량%로 포함될 수 있다.
이에 제한되지는 않지만, 본 발명에서 상기 로열제리는 분말 형태인 것을 사용할 수 있다.
본 발명은 또한 로열제리; 및 레몬밤, 홍차, 페퍼민트 및 차즈기를 포함하는 천연추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 천연추출물은 전체 조성물 기준으로 10 내지 99.99 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명에서 상기 로열제리는 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 10 중량%로 포함될 수 있다.
본 발명의 조성물은 피부 주름, 탄력 및 보습 개선을 위한 화장료 또는 식품 제조에 사용할 수 있다.
본 발명의 피부 개선용 조성물은 불활성화된 콜라겐 파편을 세포 속으로 재흡수시켜 콜라겐 재합성을 촉진함으로써 피부의 주름, 탄력, 보습 효과를 나타낼 수 있다.
이하, 본 발명의 구성을 구체적으로 설명한다.
본 명세서에서, 용어 "주름 개선 효과"라 함은 피부에 주름이 생성되는 것을 억제 또는 저해하거나, 이미 생성된 주름을 완화시키는 것을 말한다.
본 명세서에서, 용어 "탄력 개선 효과"라 함은 피부가 처지거나 늘어지는 정도를 완하시켜주는 것을 의미한다. 또한, 상기 탄력은 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부의 탄력성을 유지시켜 주는 것을 말한다.
본 명세서에서, 용어 "보습 개선 효과"라 함은 피부의 수분이 감소되는 것을 저해 또는 억제하거나 피부의 수분 함유량을 증가시켜 피부 표면을 매끄럽게 하며, 윤기를 부여하는 것을 말한다. 또는 수분 손실(수분 증발) 등을 적절히 조절하여 생체의 항상성을 유지하는 것을 의미한다.
본 명세서에서, 용어 "개선"은 유효성분을 포함하는 조성물의 투여로 인해 앞서 언급한 여러 가지 피부 상태가 호전 또는 이롭게 변경되는 모든 행위를 의미한다.
본 명세서에서, 용어 "피부"는 동물의 체표를 덮는 조직을 의미하는 것으로, 얼굴 또는 바디 등의 체표를 덮는 조직뿐만 아니라 두피와 모발을 포함하는 최광의의 개념이다.
본 발명은 콜라겐; 및 레몬밤, 홍차, 페퍼민트 및 차즈기로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 1가지 이상의 성분을 포함하는 천연추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 상기 조성물은 로열제리를 더 포함할 수 있다.
본 발명에서 상기 콜라겐은 동물성 콜라겐, 식물성 유사 콜라겐, 또는 유전자 재조합 콜라겐을 사용할 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 콜라겐은 전체 조성물 기준으로 5 내지 99.98 중량%로 포함될 수 있으며, 예를 들어 5 내지 30 중량%, 30 내지 50 중량%, 50 내지 70 중량%, 또는 70 내지 99.99 중량%로 포함될 수 있다. 바람직하게는 5 내지 75 중량%로 포함하는 것이 피부 주름, 탄력 및 보습 개선에 유리하다. 상기 범위가 5 중량% 미만에서는 피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선 효과가 미비하였다.
본 발명에서 상기 천연추출물은 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함 될 수 있으며, 예를 들어 0.01 내지 0.1 중량%, 0.1 내지 10 중량%, 10 내지 50 중량%, 또는 50 내지 90 중량%로 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.1 내지 10 중량%로 포함하는 것이 피부 주름, 탄력 및 보습 개선에 유리하다. 상기 범위가 0.01 중량% 미만에서는 피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선 효과가 미비하였고, 90 중량%를 초과하는 경우에는 제제 안정성이 나쁘고 경제적으로 비효율적이다.
본 발명에서 상기 레몬밤(lemon balm)은 꿀풀과 여러해살이풀로 Melissa 속(genus)에 속하는 식물이며, 구체적으로 Melissa officinalis로 일컬어질 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 홍차는 차나무(Camellia Sinensis)의 잎을 발효 및 건조시킨 후 산화 처리한 것을 일컬을 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 차즈기는 꿀풀과(Labiatae)에 속한 식물이며, 구체적으로 Perilla frutescens var. acuta Kudo의 잎, 차조기, 소엽, 또는 자소엽으로 일컬어질 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 페퍼민트(peppermint)는 꿀풀과 박하속에 속하는 식물이며, Mentha piperita로 일컬어질 수 있으나, 이에 국한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 로열제리는 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함될 수 있으며, 예를 들어 0.01 내지 0.1 중량%, 0.1 내지 10 중량%, 10 내지 50 중량%, 또는 50 내지 90 중량%로 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.1 내지 10 중량%로 포함하는 것이 피부 주름, 탄력 및 보습 개선에 유리하다. 상기 범위가 0.01 중량% 미만에서는 피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선 효과가 미비하였고, 90 중량%를 초과하는 경우에는 제제 안정성이 나쁘고 경제적으로 비효율적이다.
이에 특별히 제한되지는 않지만, 본 발명에서 상기 로열제리는 분말 형태인 것을 사용할 수 있다. 로열제리 원물은 불용성 성분인 밀납이 다량 함유되어 있기 때문에, 로열제리 원물을 추출하여 사용하는 경우 1) 추출 과정에서 불용분의 영향으로 수율이 저하되고, 2) 액상의 형태인 추출물 형태로 유지 시 쉽게 상분리가 발생하는 등 안정성에 문제가 있다. 따라서, 추출 과정 없이 로열제리 원물을 동결건조한 후 분말 형태로 제조하여 유효성분의 수율 저감 없이 그대로 이용 가능하다.
피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선 성분이 실제 인체 적용 시 우수한 효과를 발휘하기 위해서는 저농도에서 고활성을 나타내고, 피부를 투과하거나 섭취되어 흡수되는 능력이 우수하고, 조성물, 소화기관, 또는 피부 상에서 활성 성분이 안정하게 유지되고, 화장료 또는 식품 등으로의 제조가 용이하며, 또한 인체에 안전하여야 한다.
이러한 측면에서, 콜라겐 및 천연추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 조성물은 상기 유효성분을 모두 포함하지 않거나, 콜라겐만을 포함하는 예시에 비해 우수한 콜라겐 파편 재흡수율 및 합성 증진 효과를 나타내어 피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선을 위한 화장료 또는 식품 제조를 위한 조성물로 사용할 수 있다.
본 발명은 또한 로열제리; 및 레몬밤, 홍차, 페퍼민트 및 차즈기를 포함하는 천연추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명에서 상기 천연추출물은 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함될 수 있으며, 예를 들어 0.01 내지 0.1 중량%, 0.1 내지 10 중량%, 10 내지 50 중량%, 또는 10 내지 90 중량%로 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 포함하는 것이 피부 주름, 탄력 및 보습 개선에 유리하다. 상기 범위가 0.01 중량% 미만에서는 피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선 효과가 미비하였고, 90 중량%를 초과하는 경우에는 제제 안정성이 나쁘고 경제적으로 비효율적이다.
본 발명에서 상기 로열제리는 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함될 수 있으며, 예를 들어 0.01 내지 0.1 중량%, 0.1 내지 10 중량%, 10 내지 50 중량%, 또는 10 내지 90 중량%로 포함될 수 있다. 바람직하게는 0.01 내지 10 중량%로 포함하는 것이 피부 주름, 탄력 및 보습 개선에 유리하다. 상기 범위가 0.01 중량% 미만에서는 피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선 효과가 미비하였고, 90 중량%를 초과하는 경우에는 제제 안정성이 나쁘고 경제적으로 비효율적이다.
본 발명의 조성물은 일 실시양태로 피부 주름, 탄력 및 보습 개선을 위한 화장료 제조에 사용할 수 있다.
상기 조성물을 화장료로 사용하는 경우, 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 또한 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다.
상기 조성물이 피부 외용제 제형으로 제공될 경우, 이에 제한되는 것은 아니나, 연고, 패취, 겔, 크림 또는 분무제와 같은 제형을 가질 수 있다.
본 발명의 조성물은 일 실시양태로 피부 주름, 탄력 및 보습 개선을 위한 식품 제조에 사용할 수 있다.
상기 식품 제형은 상기 혼합 성분을 음료, 차류, 향신료, 껌, 과자류 등의 식품 소재에 첨가하거나, 캡슐화, 분말화, 현탁액 등으로 제조한 식품을 의미한다.
상기 식품 제형은 일상적으로 섭취하는 것이 가능하기 때문에 높은 피부 탄력 증진, 주름 개선 및 보습 개선 효과를 기대할 수 있어 매우 유용하다.
상기 혼합 성분을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 혼합 성분을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합 양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 상기 혼합 성분은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
식품 제형이 음료인 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 수크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알코올이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 g 내지 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 g 내지 0.03 g이다.
상기 외에 식품 제형은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 식품 제형은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예. 피부 개선용 조성물 제조
제조예1. 로열제리 분말 제조
먼저, 로열제리 원물을 -20℃에서 얼렸다. 다음으로, 상기 얼린 로열제리를 수분함량이 5% 이하가 되도록 동결건조하였다. 이어서, 동결건조된 로열제리를 분쇄하여 분말화하여 로열제리 분말을 제조하였다.
제조예2. 콜라겐 제조
먼저, 콜라겐 원물을 산 또는 효소으로 가수분해하였다. 다음으로, 상기 가수분해된 콜라겐을 탈염한 후 정제하였다. 이어서 정제된 콜라겐을 살균하였다. 다음으로, 상기 살균된 콜라겐을 건조하여 콜라겐을 제조하였다.
제조예3. 천연추출물 제조
먼저, 천연물(레몬밤 홍차, 페퍼민트 또는 차즈기) 원물을 세척한 후 건조하였다. 다음으로, 건조된 원물을 믹서기로 분쇄하여 고운 가루가 될 때까지 분말화하였다. 이어서, 상기 분말화된 원물 중량의 10배수에 해당하는 물을 가한 후 80 내지 100℃로 10 내지 60분간 가온하였다. 다음으로, 가온이 완료되면 추출물을 200mesh 체로 여과하였다. 이어서, 상기 여과액을 30Brix 이상이 될 때까지 60℃에서 감압농축하여 천연추출물을 제조하였다.
실시예. 피부 개선용 조성물 제조
하기 표 1과 같은 성분 조합으로 피부 개선용 조성물을 제조하였다.
구분 천연추출물 소재명 콜라겐 유무 로열제리 유무
실시예1 - - O
실시예2 레몬밤 - -
실시예3 홍차 - -
실시예4 차즈기 - -
실시예5 페퍼민트 - -
실시예6 - O -
실시예7 레몬밤 O -
실시예8 홍차 O -
실시예9 차즈기 O -
실시예10 페퍼민트 O -
실시예11 - O O
실시예12 레몬밤 O O
실시예13 홍차 O O
실시예14 차즈기 O O
실시예15 페퍼민트 O O
실험예1. 콜라겐 파편 재흡수 증진 효과
본 발명에 따른 천연추출물 또는 로열제리의 콜라겐 파편 재흡수 증진 효과를 확인하기 위하여 실험을 수행하였다. 인간 피부 상피세포를 우태아혈청이 10% 비율로 첨가된 DMEM 배지에 넣고 24 well plate에 깐 후 하루동안 배양하고, 우태아혈청이 첨가되지 않은 DMEM 배지로 교체하였다. 다시 하루동안 배양한 후 우태아혈청이 첨가되지 않은 DMEM 배지에 천연추출물 또는 로열제리를 10 ug/ml 농도로 희석하여 세포에 처리한 후 하루동안 배양하였다. 하루 후 E-64d protease inhibitor를 20 uM 농도로 1시간동안 처리하고, oregon green 488로 표지된 젤라틴을 2.5 uM 농도로 2시간동안 처리하였다. 그 후 세포를 PBS로 1회 세척하고 0.4% trypan blue solution을 넣고 5분간 둔 후 다시 PBS로 2회 세척하고, lysis buffer를 넣고 5분간 shaking하여 세포를 모두 용해시킨 후 cell lysate를 바닥이 투명한 검은 96 well plate로 옮겨서 excitation 490nm, emission 520nm에서 형광을 측정하여 콜라겐 파편 재흡수를 측정하였다. Oregon green 488로 표지된 gelatin이 세포 안으로 흡수되면 형광이 증가되는 원리를 이용하여 시료를 처리한 군에서 무처리대조군(비교예1)에 대비하여 oregon green 488로 표지된 젤라틴이 세포 안으로 더 많이 들어갔는지를 확인하였다. 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.
구분 콜라겐 파편 재흡수율(% of 무처리대조군)
비교예1
(무처리대조군)		 100.00 ± 9.58
실시예1 121.06 ± 9.88
실시예2 140.53 ± 5.17
실시예3 152.07 ± 8.70
실시예4 138.86 ± 10.06
실시예5 151.72 ± 5.51
상기 결과와 같이, 무처리대조군(비교예1)에 비해 실시예들의 콜라겐 파편 재흡수율이 로열제리에서 21.06%, 레몬밤 추출물에서 40.53%, 홍차 추출물에서 52.07%, 차즈기 추출물에서 38.86%, 페퍼민트 추출물에서 51.72% 증가된 것을 확인하였다.
실험예 2. 콜라겐 합성 증진 효과
본 발명에 따른 콜라겐 및 천연추출물 또는 로열제리를 포함하는 조성물의 콜라겐 합성 증진 효과를 확인하기 위하여 실험을 수행하였다. 인간 피부 상피세포를 우태아혈청이 10% 비율로 첨가된 DMEM 배지에 넣고 24 well plate에 깐 후 하루동안 배양하였다. 하루 후 우태아혈청이 첨가되지 않은 DMEM 배지에 각 조성물이 10 μg/ml 농도가 되도록 희석하여 세포에 처리하여 하루동안 배양하였다. 그리고 같은 날, col1A1 capture antibody를 immunoplate에 well 당 100 μl씩 넣고 상온에 정치하였다. 하루 후 immunoplate의 col1A1 capture antibody를 제거하고 plate를 wash buffer로 3회 washing한 후, 1X reagent diluent 2를 well 당 200 μl씩 넣고 1시간동안 상온에 정치한 후 그 사이에 세포 배양액을 취하고, 콜라겐 표준 용액을 31.25 ~ 2000 pg/ml로 희석하였다. 1시간 후 1X reagent diluent 2를 제거하고 plate를 wash buffer로 3회 washing한 후, 방금 준비한 세포 배양액과 콜라겐 표준 용액을 well 당 100 μl씩 넣고 2시간동안 300rpm으로 shaking하였다. 2시간 후 세포 배양액과 콜라겐 표준 용액을 제거하고 plate를 wash buffer로 3회 washing한 후, col1A1 detection antibody를 well 당 100 μl씩 넣고 2시간동안 300rpm으로 shaking하였다. 2시간 후 col1A1 detection antibody를 제거하고 plate를 wash buffer로 3회 washing한 후, 1X streptavidin-HRP를 well 당 100 μl씩 넣고 차광하여 20분동안 300rpm으로 shaking하였다. 20분 후 1X streptavidin-HRP를 제거하고 plate를 wash buffer로 3회 washing한 후, 발색성 기질을 well 당 100 μl씩 넣고 차광하여 300rpm으로 shaking하였다. 중간에 immunoplate를 관찰하면서 색이 파랗게 바뀌면 반응 중지 용액을 well 당 50 μl씩 넣고 노란색으로 변할 때까지 내용물을 잘 섞은 후 450 nm, 570 nm에서 흡광도를 측정하여 세포 배양액에 함유된 콜라겐 농도를 측정하였다. 세포 배양액에 함유된 콜라겐 농도가 높을수록 450 nm에서의 흡광도가 증가되는 원리를 이용하여 시료를 처리한 군에서 무처리대조군에 대비하여 콜라겐 농도가 증가하였는지 확인하였다. 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.
구분 콜라겐 합성율(% of 무처리대조군)
실시예6 100.00 ± 6.26
실시예7 117.43 ± 2.30
실시예8 110.96 ± 5.52
실시예9 109.80 ± 4.61
실시예10 106.03 ± 9.98
실시예11 109.25 ± 3.88
실시예12 157.21 ± 5.45
실시예13 133.74 ± 2.53
실시예14 129.12 ± 8.89
실시예15 152.05 ± 6.21
상기 결과와 같이, 무처리대조군에 비해 콜라겐 단독으로는 콜라겐 합성을 늘리지 못 하였으나, 콜라겐에 레몬밤, 홍차, 차즈기, 페퍼민트 중 1개의 소재를 추가하여 처리하였을 때는 콜라겐 합성이 각각 17.43%, 10.96%, 9.80%, 6.03% 증가하였다. 또한 여기에 로열제리를 추가로 첨가하였을 경우 로열제리가 없을 때에 비해서 콜라겐 합성이 시너지하게 증가하였다. 로열제리 단독으로는 콜라겐 합성을 9.25% 증가시키는데 그쳤으나, 레몬밤, 홍차, 차즈기, 페퍼민트 중 1개의 소재가 추가되었을 경우에 각각 콜라겐 합성이 39.78%, 22.78%, 19.32%, 46.02% 증가하여 로열제리에 레몬밤, 홍차, 차즈기, 페퍼민트 중 1개의 소재가 추가될 경우 콜라겐 합성이 시너지하게 증가함을 확인하였다.
실험예 3. 보습 효과
본 발명에 따른 콜라겐 및 레몬밤 또는 레몬밤 및 로열제리를 포함하는 조성물의 보습 증진 효과를 확인하기 위하여 실험을 수행하였다. 사전 설문을 통해 피부 건조, 주름, 탄력 문제를 크게 느낀다고 응답한 50대 여성 26명을 모집하였다. 26명을 7명, 6명, 7명, 6명 네 그룹으로 나눠서 한 그룹에게는 콜라겐을, 한 그룹에게는 레몬밤을, 한 그룹에게는 콜라겐과 레몬밤 복합물을, 또 한 그룹에게는 콜라겐, 레몬밤, 그리고 로열제리 복합물을 제공하였다. 각 그룹의 평균 나이는 각각 52.4세, 53.5세, 54.9세, 54.3세였다. 실험을 시작하는 시점에 corneometer로 피부 수분량을 측정하였고, 8주간 제공한 조성물을 섭취하게 한 후 섭취를 마치는 시점에 다시 corneometer로 피부 수분량을 측정하여, 각 그룹의 섭취 전후의 평균 피부 수분량(AU: Arbitary Unit)을 비교하였고, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.
구분 섭취 전 피부 수분량(AU) 섭취 후 피부 수분량(AU)
콜라겐 44.4 45.67
레몬밤 42.79 43.38
콜라겐+레몬밤 41.29 43.13
콜라겐+레몬밤+로열제리 41.1 45.21
상기 결과와 같이, 콜라겐만 제공받은 그룹의 피부 수분량은 섭취 전 44.4 AU에서 섭취 후 45.67 AU로 2.63% 증가하였고, 레몬밤만 제공받은 그룹의 피부 수분량은 섭취 전 42.79 AU에서 섭취 후 43.38 AU로 1.38% 증가하는데 그쳤으나, 콜라겐과 레몬밤을 함께 제공받은 그룹의 피부 수분량은 섭취 전 41.29 AU에서 섭취 후 43.13 AU로 4.69% 증가하여, 콜라겐만 제공받은 그룹과 레몬밤을 제공받은 그룹보다 피부 수분 증가율이 각각 1.78배, 3.40배 증가하였다. 그리고 콜라겐, 레몬밤과 함께 로열제리까지 같이 제공받은 그룹의 피부 수분량은 섭취 전 41.1 AU에서 섭취 후 45.21 AU로 10.91% 증가하여, 콜라겐만 제공받은 그룹, 레몬밤만 제공받은 그룹, 콜라겐과 레몬밤을 제공받은 그룹에 비해서 각각 피부 수분 증가율이 4.15배, 7.91배, 2.33배 증가하였다. 이를 통해 콜라겐, 레몬밤, 로열제리를 함께 복용할 경우, 그렇지 않을 때보다 시너지하게 피부 수분량이 증가함을 확인하였다.

Claims (10)

  1. 콜라겐; 및
    레몬밤, 홍차, 페퍼민트 및 차즈기로 이루어지는 그룹으로부터 선택되는 1가지 이상의 성분을 포함하는 천연추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  2. 제 1항에 있어서,
    상기 콜라겐은 전체 조성물 기준으로 5 내지 99.98 중량%로 포함되는, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  3. 제 1항에 있어서,
    상기 천연추출물은 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함되는, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  4. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 로열제리를 더 포함하는 것인, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  5. 제4항에 있어서,
    상기 로열제리는 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함되는, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  6. 제4항에 있어서,
    상기 로열제리는 분말 형태인 것인, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  7. 로열제리; 및
    레몬밤, 홍차, 페퍼민트 및 차즈기를 포함하는 천연추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  8. 제 7항에 있어서,
    상기 로열제리는 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함되는, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 천연추출물은 전체 조성물 기준으로 0.01 내지 90 중량%로 포함되는, 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
  10. 제 1항 내지 제9 항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 조성물을 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 의약, 화장료, 식품 또는 피부 외용제 제조를 위한 것인 피부 탄력, 주름 또는 보습 개선용 조성물.
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