KR20230157397A - 인플루엔자 백신 - Google Patents
인플루엔자 백신 Download PDFInfo
- Publication number
- KR20230157397A KR20230157397A KR1020237034602A KR20237034602A KR20230157397A KR 20230157397 A KR20230157397 A KR 20230157397A KR 1020237034602 A KR1020237034602 A KR 1020237034602A KR 20237034602 A KR20237034602 A KR 20237034602A KR 20230157397 A KR20230157397 A KR 20230157397A
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- virus
- vaccine
- influenza
- children
- elderly
- Prior art date
Links
- 229960003971 influenza vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 25
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims abstract description 33
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 28
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 claims abstract description 28
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 27
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 27
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims abstract description 18
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 claims description 30
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 12
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 claims description 9
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 8
- 241000197306 H1N1 subtype Species 0.000 claims description 5
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 5
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 5
- 241000252870 H3N2 subtype Species 0.000 claims description 4
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 abstract description 56
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 abstract description 9
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 42
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 28
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 16
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 15
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 14
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 13
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 10
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 10
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 241000701076 Macacine alphaherpesvirus 1 Species 0.000 description 6
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 6
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 6
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 6
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 5
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 210000002850 nasal mucosa Anatomy 0.000 description 5
- 101710154606 Hemagglutinin Proteins 0.000 description 4
- 101710093908 Outer capsid protein VP4 Proteins 0.000 description 4
- 101710135467 Outer capsid protein sigma-1 Proteins 0.000 description 4
- 101710176177 Protein A56 Proteins 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 4
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 4
- 239000000185 hemagglutinin Substances 0.000 description 4
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 241000712431 Influenza A virus Species 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 230000005965 immune activity Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 3
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 3
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 3
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000713196 Influenza B virus Species 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L barium sulfate Chemical compound [Ba+2].[O-]S([O-])(=O)=O TZCXTZWJZNENPQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000005352 clarification Methods 0.000 description 2
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 230000005934 immune activation Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 2
- 230000004719 natural immunity Effects 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 1
- 208000032274 Encephalopathy Diseases 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 101100153387 Homo sapiens TLR7 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000669402 Homo sapiens Toll-like receptor 7 Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000831652 Salinivibrio sharmensis Species 0.000 description 1
- 101150033086 TLR7 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100039390 Toll-like receptor 7 Human genes 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000003149 assay kit Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 159000000009 barium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229960000074 biopharmaceutical Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 229940028617 conventional vaccine Drugs 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000012447 hatching Effects 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 229940031551 inactivated vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000000937 inactivator Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 210000002050 maxilla Anatomy 0.000 description 1
- 229940031346 monovalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
- A61K39/145—Orthomyxoviridae, e.g. influenza virus
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/12—Viral antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
- A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/51—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising whole cells, viruses or DNA/RNA
- A61K2039/525—Virus
- A61K2039/5252—Virus inactivated (killed)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/57—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2
- A61K2039/575—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the type of response, e.g. Th1, Th2 humoral response
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16111—Influenzavirus A, i.e. influenza A virus
- C12N2760/16161—Methods of inactivation or attenuation
- C12N2760/16163—Methods of inactivation or attenuation by chemical treatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
- C12N2760/16234—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2760/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses negative-sense
- C12N2760/00011—Details
- C12N2760/16011—Orthomyxoviridae
- C12N2760/16211—Influenzavirus B, i.e. influenza B virus
- C12N2760/16261—Methods of inactivation or attenuation
- C12N2760/16263—Methods of inactivation or attenuation by chemical treatment
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Immunology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
소아나 고령자에 있어서 높은 면역원성을 갖고, 종래의 스플리트 백신에 비해 유효성이 높은 인플루엔자 백신을 제공한다. 소아 및/또는 고령자에게 투여되는 인플루엔자 백신 조성물로서, 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 불활성화 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는, 조성물.
Description
본 발명은, 소아 혹은 고령자에 대한 유효성이 높은 인플루엔자 백신에 관한 것이다.
인간의 인플루엔자 바이러스는 오르토믹소바이러스속의 단일가닥 RNA 바이러스로, 내부 항원의 항원성에 따라 A 형, B 형 및 C 형으로 분류된다. 이 중 겨울철을 중심으로 매년 큰 유행을 일으키는 것은 A 형 및 B 형이며, 일본에 있어서도 연간 추정 약 1,000만명 이상이 이환 (罹患) 되는 것이 알려져 있다. 이처럼 매년 큰 유행을 일으키는 인플루엔자 바이러스의 예방에 가장 유효한 수단이 백신이다. 일본의 인플루엔자 백신은, 1957 년에 유행한 아시아 감기를 계기로 도입되어, 당시에는 정제한 인플루엔자 바이러스를 불활성화 처리한 불활성화 전입자 백신이었다. 그러나, 그 후 발열 등의 부반응 저감을 위해, 디에틸에테르나 계면 활성제 처리로 바이러스 입자를 해열 (解裂) 하여, 지질 성분을 제외한 스플리트 백신이 승인되어, 현재는 세계적으로 스플리트 백신이 널리 보급되어 있다.
그러나, 스플리트 백신은, 소아나 고령자와 같은 면역 응답이 약한 연령층에서는 특히 면역원성이 낮은 것이 알려져 있다. 그 때문에, 계절성 인플루엔자 바이러스의 감염의 약 절반수는 소아이며, 빈도는 적지만 소아에서는 다른 연령층에 비해 인플루엔자 뇌증의 발증 리스크가 높고, 고령자에서는 감염 증상이 중증화를 보이기 쉬워, 사망의 리스크가 높다. 그 때문에, 이미 구미에서는 약독 (弱毒) 생경비 백신, 아쥬반트 제제 및 고역가 백신과 같은, 소아나 고령자용의 유효성이 높은 인플루엔자 백신이 승인되어 있다.
고령자의 면역 응답이 약한 이유의 하나로서, 고령자에 있어서의 자연 면역의 저하를 들 수 있다. 특히, 탐식 세포에 있어서의 Toll 유사 수용체 (TLRs) 는, 자연 면역과 획득 면역을 연결하는 중요한 역할을 담당하지만 (비특허문헌 1), 고령자의 매크로파지에서는 TLRs 의 발현이 현저하게 저하되고, 그 때문에 항원 특이적인 반응인 획득 면역 응답도 저하되는 것을 알 수 있다 (비특허문헌 2). 또한, 기왕력이 없고, 백신 접종력도 적은 소아에서는, 보다 강한 기초 면역을 촉진시킬 필요가 있고, 그를 위해서는 TLR7 을 통한 형질 세포형 수상 세포의 강한 활성화가 필요하다 (비특허문헌 3).
Vasselon T, Detmers PA. Toll receptors : a central element in innate immune responses. Infect Immun. 2002 Mar ; 70(3) : 1033-41.
Renshaw M, Rockwell J, Engleman C, Gewirtz A, Katz J, Sambhara S. Cutting edge : impaired Toll-like receptor expression and function in aging. J Immunol. 2002 Nov 1 ; 169(9) : 4697-701.
Akira S. Innate immunity and adjuvants. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2011 Oct 12 ; 366(1579) : 2748-55.
본 발명은, 소아나 고령자에 있어서 높은 면역원성을 갖고, 종래의 스플리트 백신에 비해 유효성이 높은 인플루엔자 백신을 제공하는 것에 관한 것이다.
본원 발명자들은 예의 연구한 결과, 인플루엔자 바이러스의 불활성화 처리에 베타 프로피오락톤을 사용함으로써, 종래의 포르말린 처리에 비해 자연 면역 활성을 높게 유지한 불활성화 전입자 백신을 조제할 수 있고, 당해 백신이 소아 및 고령자의 모델 동물에 있어서, 이미 승인된 스플리트 백신보다 높은 면역원성을 갖고 있는 것을 알아내었다. 그리고, 당해 베타 프로피오락톤 처리한 불활성화 전입자 백신에서는, 바이러스가 증식하는 비강 점막에 바이러스 특이적인 항체를 유도할 수 있어, 소아 및 고령자의 모델 동물에 있어서 스플리트 백신에 대해 유의하게 높은 항체 유도가 확인되었다.
따라서, 본 발명은 이하의 1) ∼ 6) 에 관한 것이다.
1) 소아 및/또는 고령자에게 투여되는 인플루엔자 백신 조성물로서, 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 불활성화 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는, 조성물.
2) 바이러스 항원이 A/H1N1 아형 및 A/H3N2 아형으로 이루어지는 A 형 인플루엔자 바이러스주, 그리고 B/Victoria 계통 및 B/Yamagata 계통으로 이루어지는 B 형 인플루엔자 바이러스주를 포함하는, 1) 에 기재된 조성물.
3) 아쥬반트를 함유하지 않는, 1) 또는 2) 에 기재된 조성물.
4) 피하 투여되는, 1) ∼ 3) 중 어느 하나에 기재된 조성물.
5) 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 불활성화 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는 조성물을 소아 또는 고령자에게 투여하는, 면역 방법.
6) 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 불활성화 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는 조성물을 소아 또는 고령자에게 투여하는, 인플루엔자의 예방 방법.
본 발명에 의하면, 면역 응답이 약한 소아 및/또는 고령자에 대해 이미 승인된 스플리트 백신보다 높은 유효성을 나타내는 인플루엔자 백신이 제공된다. 본 발명의 인플루엔자 백신 조성물은, 소아 및 고령자에게 있어서, 혈청 및 비강 점막의 어느 것에 있어서나 높은 항체 유도를 촉진시키는 점에서, 감염이나 중증화의 리스크가 높은 소아 및 고령자에 있어서, 바이러스 감염의 방어 활성을 높이는 것이 가능해져, 부가가치가 높은 인플루엔자 예방약을 만들어 냄으로써 의약품 산업에 크게 공헌할 수 있다.
도 1 은, 불활성화 처리에 의한 인플루엔자 백신의 자연 면역 활성의 영향. BPL : 베타 프로피오락톤.
도 2a 는, 백신의 피하 투여에 의한 21 일 후의 혈청에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 IgG 역가.
도 2b 는, 백신의 피하 투여에 의한 21 일 후의 혈청에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 IgG 역가.
도 3a 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 IgG 역가.
도 3b 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 IgG 역가.
도 4a 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 중화 항체가.
도 4b 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 중화 항체가.
도 5a 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 비강 세정액에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 IgG 역가.
도 5b 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 비강 세정액에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 IgG 역가.
도 2a 는, 백신의 피하 투여에 의한 21 일 후의 혈청에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 IgG 역가.
도 2b 는, 백신의 피하 투여에 의한 21 일 후의 혈청에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 IgG 역가.
도 3a 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 IgG 역가.
도 3b 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 IgG 역가.
도 4a 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 중화 항체가.
도 4b 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 혈청에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 중화 항체가.
도 5a 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 비강 세정액에 있어서의 A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 IgG 역가.
도 5b 는, 백신의 피하 투여에 의한 42 일 후의 비강 세정액에 있어서의 B/Phuket/3073/2013 주에 대한 IgG 역가.
이하에 본 발명의 바람직한 실시형태에 대해 상세하게 설명한다. 단, 본 발명은 이하의 실시형태에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 인플루엔자 백신 조성물에 있어서의 바이러스 항원은, 베타 (β) 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 인플루엔자 바이러스 전입자이다.
본 발명에 있어서, 「인플루엔자 바이러스」란, A 형 인플루엔자 바이러스 혹은 B 형 인플루엔자 바이러스, 또는 그 양자를 나타낸다. 또한, 인플루엔자 바이러스는, 현재 알려져 있는 모든 아형, 및 장래 단리 및 동정되는 아형도 포함한다.
본 발명의 바이러스 항원은, 적어도 A 형 인플루엔자 바이러스 또는 B 형 인플루엔자 바이러스 중 어느 하나를 함유한다. 즉, 본 발명의 인플루엔자 백신은, A 형 인플루엔자 바이러스 또는 B 형 인플루엔자 바이러스 중 일방의 바이러스 항원을 함유하는 단가 백신이어도 되고, 그것들을 양방 함유하고 있는 다가 백신이어도 된다.
바이러스 항원으로는, 바람직하게는 A/H1N1 아형 및/또는 A/H3N2 아형으로 이루어지는 A 형 인플루엔자 바이러스주와, B/Victoria 계통 및/또는 B/Yamagata 계통 B 형 인플루엔자 바이러스주를 함유하는 것을 들 수 있고, 보다 바람직하게는 A 형을 2 주 (A/H1N1 아형 및 A/H3N2 아형), B 형을 2 주 (B/Victoria 계통 및 B/Yamagata 계통) 를 함유하는 것을 들 수 있다.
인플루엔자 바이러스 전입자는, 발육 계란 혹은 배양 세포를 사용한 방법에 의해 조제할 수 있다.
발육 계란에 의한 조제 방법은, 예를 들면, 바이러스주를 부화 계란에 접종하여 배양한 후, 바이러스 부유액을 청징화, 농축, 정제하여, 바이러스 입자를 함유하는 바이러스액을 얻는 방법이다. 또한, 배양 세포에 의한 조제 방법은, 예를 들면, 바이러스주를 배양 세포에 접종하여 배양한 후, 상기의 발육 계란법과 동일하게 배양 상청으로부터 바이러스 입자를 함유하는 바이러스액을 얻는 방법이다.
여기서, 배양은, 인플루엔자 바이러스주를 접종하여, 30 ∼ 37 ℃ 에서 1 ∼ 7 일 정도, 바람직하게는 33 ∼ 35 ℃ 에서 2 일간 정도 실시된다. 배양 종료 후, 바이러스 부유액 (감염 요막강액 혹은 감염 세포 배양 상청) 이 회수되고, 청징화를 위해, 원심 분리 또는 여과가 실시된다. 이어서, 농축을 위해, 바륨염 흡착 용출 반응이나 한외 여과가 실시된다. 바이러스 정제는, 자당 밀도 구배 원심 분리 등의 초원심 분리나 액체 크로마토그래피 등의 수단을 사용하여 실시할 수 있다.
배양 세포란 인플루엔자 바이러스가 증식성을 나타내는 세포이면 특별히 한정되지 않고, 예를 들면, MDCK (Madin-Darby Canine Kidney), Vero, Caco-2, PER.C6, EB66 및 바이러스가 침입에 사용하는 리셉터를 고발현하도록 재조합한 이들 세포를 들 수 있다.
이렇게 하여 얻어진 인플루엔자 바이러스 전입자는, 베타 프로피오락톤에 의해 불활성화 처리된다.
즉, 본 발명에 있어서는, 종래의 포름알데히드를 사용한 불활성화 처리 (포르말린 처리) 대신에, 베타 프로피오락톤에 의한 불활성화 처리가 실시된다.
베타 프로피오락톤은, 많은 백신의 조제에 있어서 바이러스 불활성화를 위해 널리 사용되는 모노알킬화제이다.
베타 프로피오락톤에 의한 불활성화 처리는, 발육 계란 또는 배양 세포에서 배양하여, 회수된 인플루엔자 바이러스 부유액을 청징화, 농축 또는 정제하는 어떠한 시기에 실시된다.
베타 프로피오락톤 처리로는, 배양 후에 회수된 바이러스액에, 종농도로 0.0125 ∼ 0.1 vol％, 바람직하게는 0.025 ∼ 0.075 vol％, 보다 바람직하게는 0.05 vol％ 가 되도록 β-프로피오락톤을 첨가하고, 2 ∼ 8 ℃ 에서 18 시간 이상, 바람직하게는 20 시간 이상, 보다 바람직하게는 24 시간 이상, 또한 50 시간 이하, 바람직하게는 30 시간 이하로 반응시키는 방법을 들 수 있다.
보다 바람직한 양태로서, 예를 들면 2 ∼ 8 ℃, 0.05 ％ 로 24 시간 처리하는 것을 들 수 있다.
후술하는 실시예에 나타내는 바와 같이, 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리한 불활성화 전바이러스 입자를 항원으로 하는 인플루엔자 백신이, 종래의 포르말린 처리에 의해 조제한 불활성화 전입자 인플루엔자 백신에 비해 자연 면역 부활화능이 높아, 이것을 소아 및 고령자의 모델 동물에게 투여함으로써, 1 회 및 2 회 투여 후의 혈청에 있어서, 기존의 스플리트 백신에 비해 유의하게 높은 항체 유도를 나타낸다. 또한, 2 회 투여 후에는, 비강 점막에 있어서도 당해 백신은 높은 바이러스 특이적 IgG 의 유도를 나타내며, 소아의 모델 동물에서는 A 형 및 B 형의 어느 바이러스에 대해서도 스플리트 백신보다 유의하게 높고, 고령자의 모델 동물에서도 B 형의 바이러스에서 기존의 백신보다 유의하게 높은 항체 유도를 나타낸다.
따라서, 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 인플루엔자 바이러스 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는 조성물은, 소아 및/또는 고령자에게 투여한 경우에, 높은 자연 면역 부활화능을 발휘하는 인플루엔자 백신으로서 유용하다. 또한, 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 인플루엔자 바이러스 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는 조성물의 소아 및/또는 고령자에 대한 투여는, 당해 소아 및/또는 고령자에게 인플루엔자 바이러스에 대해 항체를 유도하기 위한 면역 방법으로서, 또한 인플루엔자의 예방 방법으로서 유용하다.
또한, 자연 면역 부활화능은, TLR 활성화능에 의해 평가할 수 있고, 예를 들면, 후술하는 실시예에서 기재하는 바와 같이, TLR7 유전자와 분비형 알칼리 포스파타아제 (SEAP) 유전자를 조합한 RAW264.7 세포에, 인플루엔자 항원을 노출시켰을 때의 배양 상청 중의 SEAP 활성 (RLU 값 : Relative Light Unit) 을 측정함으로써 실시할 수 있다.
본 발명의 인플루엔자 백신 조성물의 바이러스 항원은, 예를 들어, 후술하는 실시예에서 나타내는 바와 같이 재조합 RAW264.7 세포를 사용하여 측정된 RLU 값이 50 이상인 것이 바람직하고, 60 이상인 것이 보다 바람직하다.
본 발명의 인플루엔자 백신 조성물은, 상기 인플루엔자 항원 외에, 적절히 약학적으로 허용될 수 있는 담체를 함유하여, 소정의 형태로 제제화될 수 있다.
여기서 담체로는, 백신의 제조에 통상적으로 사용되는 담체를 들 수 있으며, 구체적으로는 완충제, 유화제, 보존제 (예를 들어, 티메로살), 등장화제, pH 조정제, 점조제, 불활성화제 (예를 들어, 포르말린), 아쥬반트 혹은 면역 자극제 등이 예시된다. 아쥬반트란, 항원과 함께 투여함으로써, 당해 항원에 대한 면역 응답을 증강시키는 물질이지만, 본 발명의 백신 조성물은, 상기와 같이 백신 항원 자체가 높은 항체 유도능을 갖는 점에서, 아쥬반트의 첨가를 반드시 필요로 하지는 않고, 아쥬반트를 함유하지 않는 조성물로 할 수 있다.
이러한 인플루엔자 백신 조성물은, 고형, 반고형 또는 액체 형태로, 의도하는 투여 경로에 적합하도록 적당히 제제화된다. 적당한 투여 경로로는, 예를 들면, 근육내, 경피, 피하, 피내, 비강내, 설하, 경구 등을 들 수 있지만, 바람직하게는 피하 투여이다. 근육내, 경피, 피하, 피내 등의 주사 투여 제제로는, 예를 들어, 액제, 에멀젼제, 수용성 또는 소수성의 현탁제나, 액체를 첨가하여 용해 혹은 현탁시켜 사용하는 건조 분말의 제형을 들 수 있다.
상기 인플루엔자 백신 조성물에 있어서의 인플루엔자 항원의 함유량은, 1 투여 단위에, 헤마글루티닌량으로서 바이러스 1 주당 7.5 μg 이상, 즉 7.5 μgHA/주 이상이고, 바람직하게는 9 ∼ 21 μgHA/주, 보다 바람직하게는 15 μgHA/주를 함유한다. 또한, 헤마글루티닌 함량은, 일원 방사 면역 확산 시험법 등의, WHO 나 나라의 기준으로 정해진 시험법으로 측정함으로써 얻어지는 값이다. 또한, 백신에 함유되는 항원량은 바이러스의 종류 또는 투여 대상에 따라서 적절히 변경해도 된다.
본 발명의 인플루엔자 백신 조성물의 투여 대상은, 소아 및/또는 고령자이다. 본 발명에 있어서, 소아란, 0 세 이상 15 세 미만의 인간, 바람직하게는 3 세 이상 12 세 미만을 의미하고, 고령자란, 바람직하게는 50 세 이상의 인간이며, 보다 바람직하게는 55 세 이상이고, 더욱 바람직하게는 60 세 이상이다.
본 발명의 인플루엔자 백신 조성물의 투여 횟수는, 적어도 1 회이지만, 유효성의 관점에서 적어도 2 회가 바람직하다. 추가적인 투여를 때로는 추가 면역이라고 하며, 이것에 의해, 보다 효과가 높은 감염 방어 효과를 나타낼 수 있다. 추가 면역의 간격은, 적어도 1 주일이 권장되며, 1 ∼ 4 주간의 간격이 바람직하다.
실시예
이하, 본 발명을 실시예에 의해 구체적으로 설명하지만, 본 발명은 이들에 전혀 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
불활성화 처리에 의한 자연 면역 부활화능에 대한 영향 평가
12 일령의 발육 계란의 장뇨막강 내에 B/Phuket/3073/2013 주의 바이러스를 접종하여, 3 일간 배양 후에 장뇨액을 채취하였다. 채취한 장뇨액을 필터 여과로 청징화한 후, 황산바륨염에 흡착시키고, 12 ％ 시트르산나트륨 용액으로 용출하여 인플루엔자 바이러스를 회수하였다. 회수한 바이러스는, 추가로 한외 여과로 6.7 mM 인산 완충 생리 식염액 (pH 7.2) 으로 치환하고, 버퍼 치환 후에 자당 밀도 구배 원심으로 인플루엔자 바이러스를 함유하는 획분을 회수함으로써 정제하였다. 얻어진 바이러스액을 정제 인플루엔자 바이러스액으로 하였다.
정제 인플루엔자 바이러스액에 종농도 0.05 ％ 가 되도록 불활성화제인 베타 프로피오락톤 (BPL) 을 첨가하여, 4 ℃, 24 시간의 반응에 의해 인플루엔자 바이러스의 감염성을 불활성화시키고, 이 불활성화 반응 후에 한외 여과 (MWCO : 100,000) 로 버퍼를 6.7 mM 인산 완충 생리 식염액 (pH 7.2) 으로 치환하여, 이것을 β-프로피오락톤 처리 불활성화 전입자 백신으로 하였다.
또, 정제 인플루엔자 바이러스액을 단백 농도가 200 μg/mL 가 되도록 조정하고, 거기에 10 ％ 중성 완충 포르말린액 (후지 필름 와코 순약, 포름알데히드 함량 : 3.8 ∼ 4.1 ％) 을 포르말린이 종농도로, 0.01 또는 0.02 ％ 가 되도록 첨가하여, 4 ℃ 에서 14 일간의 반응을 실시하였다. 반응 후, 종농도로 10 mM 이 되도록 글리신을 첨가하여 포름알데히드의 반응을 정지시키고, 그것을 4 ℃, 1,000,000×g 으로 4 시간 원심분리하였다. 원심 분리 후에 상청을 폐기하고, 얻어진 바이러스의 펠릿을 6.7 mM 인산 완충 생리 식염액 (pH 7.2) 으로 현탁하여, 이것을 포름알데히드 처리 불활성화 전입자 백신으로 하였다.
1.5×106 세포의 NBP2-26261 (Novus biologicals 사 : NFκB 의 전사 응답 서열의 하류에 분비형 알칼리 포스파타아제 (SEAP) 유전자를 조합한 재조합 RAW264.7 세포로, TLR5 를 제외한 그 밖의 모든 TLR 을 발현하고 있다) 에 대하여, 각종 불활성화 처리 백신을 총 단백량으로서 10 μg 첨가하고, 37 ℃, 5 ％ CO2 조건하에 24 시간 배양하였다. 배양 후, 상청을 회수하고, 상청의 알칼리포스파타아제 활성을 SEAP Reporter Assay Kit (상품명, Cayman 사) 로 측정하였다. 이 측정값 (RLU : Relative Light Unit) 이 TLR 을 개재한 자연 면역 활성의 지표가 되기 때문에, 각 불활성화 처리 조건으로 조제한 백신의 자연 면역 활성화능은, 본 측정값으로 비교하였다.
측정값의 비교는 도 1 에 나타내는 바와 같으며, 바이러스의 불활성화 처리 조건으로서 일반적인 0.02 ％ 포르말린의 4 ℃ 에서 14 일간의 반응에서는, 명확한 자연 면역 부활화능의 저하가 확인되었다. 또한, 0.01 ％ 포르말린 처리에 있어서도, 0.02 ％ 보다는 높지만 베타 프로피오락톤 처리와 비교하면 자연 면역 부활화능은 낮은 값을 나타내었다. 따라서, 1971 년 이전에 유통되고 있던 포르말린으로 불활성화된 불활성화 전입자 백신과 비교하여, 베타 프로피오락톤 처리 불활성화 전입자 백신은 높은 자연 면역 부활화능을 가지고 있는 것이 나타났다.
실시예 2
마우스 모델에서의 소아 및 고령자에 있어서의 면역원성 평가
실시예 1 과 동일하게 하여, A/H1N1 아형 (A/Singapore/GP1908/2015 주) 및 B/Yamagata 계통 (B/Phuket/3073/2013 주) 의 β-프로피오락톤 처리 불활성화 전입자 백신을 조제하고, 각 주의 헤마글루티닌이 0.2 mL 당 15 μgHA 가 되도록 1 w/w％ 자당 함유 6.7 mM 인산 완충 생리 식염액 (pH 7.2) 으로 조정하여, 불활성화 전입자 백신으로 하였다. 또, 스플리트 백신에 대해서는, 인플루엔자 HA 백신의 원액을 사용하여, 동일하게 각 주의 헤마글루티닌이 0.2 mL 당 15 μgHA 가 되도록 1 w/w％ 자당 함유 6.7 mM 인산 완충 생리 식염액 (pH 7.2) 으로 조정하였다.
상기와 같이 조제한 투여액 (표 1) 을 1, 3, 6, 12 및 18 개월령의 수컷 C57BL/6 마우스 (찰스리버사) 에 1 마리당 3 주 간격으로 2 회 피하 투여하였다. 1 회 투여 21 일 후 (Day21), 꼬리 정맥으로부터 부분 채혈을 실시하고, 2 회째 투여 21 일 후 (Day42) 에 마취하에서 전채혈을 실시하였다. 채취한 혈액은 원심 분리에 의해 혈청을 제조하고, 각종 항체가 측정에 제공하였다.
또, Day42 의 전채혈 후, 상악의 인후측으로부터 피펫맨을 꽂아 넣고, 0.175 ％ BSA 및 프로테아제 인히비터 (Thermo Fisher Scientific 사) 를 함유하는 D-PBS 를 흘려 넣어, 외비공으로부터 회수한 용액을 비강 세정액으로 하였다. 이 비강 세정액에 대해서도 바이러스 특이적 IgG 역가 측정에 제공하였다.
1, 3, 6, 12 및 18 개월령의 C57BL/6 마우스는, 1 개월령이 미성숙 개체 (인간에서 12 세에 상당), 3 및 6 개월령이 성숙 개체 (인간에서 20 ∼ 30 세에 상당), 12 개월령이 중년 개체 (인간의 42 세에 상당), 18 개월령이 노년 개체 (인간의 56 세에 상당) 인 것이 알려져 있다 (찰스리버사 기술 정보, 연구에 사용되는 노령 C57BL/6J 마우스, https://www.crj.co.jp/cms/crj/pdf/product/rm/brochure/White_Paper_B6-Aged.pdf). 따라서, 1 개월령이 소아, 18 개월령이 고령자의 모델 동물이 된다.
이들 모델 동물의 설정이 인플루엔자 백신의 면역원성에 있어서도 적절한 것을 확인하기 위해서, 이미 승인된 스플리트 백신 (S.V.) 의 항체 유도를 1 ∼ 18 개월령의 마우스로 비교하면, 1 회 투여 후의 혈청의 바이러스 특이적 IgG 역가는 도 2A (A 형 바이러스) 및 도 2B (B 형 바이러스) 에 나타내는 바와 같이, 어느 주에 대해서도 성숙 개체인 3 개월령이 가장 높은 항체가이고, 1 개월령 및 18 개월령은 3 개월령에 비해 항체 유도가 낮은 결과가 되었다. 또한, 2 회 투여 후의 바이러스 특이적 IgG 역가 (도 3a (A 형 바이러스) 및 도 3b (B 형 바이러스)) 및 중화 항체가 (도 4a (A 형 바이러스) 및 도 4b (B 형 바이러스)) 의 결과는, 모두 1 회 투여 후의 바이러스 특이적 IgG 역가의 결과와 마찬가지로, 항체가의 피크인 3 개월령에 비해, 1 개월령 및 18 개월령의 마우스에서는 항체 유도가 낮은 것을 알 수 있었다. 따라서, 인간과 마찬가지로 소아의 모델인 1 개월령의 마우스나 고령자의 모델인 18 개월령의 마우스에서는, 항체 유도의 저하가 확인되어, 인플루엔자 백신의 면역원성에 있어서도 이들 모델은 적절한 것으로 생각되었다.
이들 모델에서의 면역원성 시험의 결과로서, 1 회 투여 후의 혈청의 바이러스 특이적 IgG 역가는 (도 2a (A 형 바이러스) 및 도 2b (B 형 바이러스)), 어느 바이러스주에 대해서도 1 개월령 및 18 개월령의 마우스에서는, 스플리트 백신 투여군 (S.V.) 에 비해 불활성화 전입자 백신 투여군 (W.V.) 의 항체 유도가 유의하게 높은 것을 알 수 있었다. 또한, 2 회째 투여 후의 혈청의 바이러스 특이적 IgG 역가도, 1 회 투여 후의 결과와 마찬가지로 불활성화 전입자 백신 투여군 (W.V.) 에서 유의하게 높은 항체가를 나타내었다 (도 3a (A 형 바이러스) 및 도 3b (B 형 바이러스)). 2 회째 투여 후의 혈청에 대해서는, 중화 항체가도 측정하고 있으며, 도 4a (A 형 바이러스) 및 도 4b (B 형 바이러스) 에 나타내는 바와 같이, 1 개월령 및 18 개월령의 마우스에 있어서 불활성화 전입자 백신 투여군 (W.V.) 쪽이 유의하게 높은 항체 유도를 나타내었다.
또한, 2 회 투여 후의 Day42 에서는, 비강 세정액을 회수하여, 인플루엔자 바이러스가 감염되는 비강 점막에서의 항체 유도를 평가하였다. 도 5a 에는, A/Singapore/GP1908/2015 주에 대한 비강의 바이러스 특이적 IgG 역가를 나타내는데, 1 개월령의 마우스에서는 스플리트 백신 투여군 (S.V.) 에 비해, 불활성화 전입자 백신 투여군 (W.V.) 에서는 유의하게 높은 항체 유도를 나타내었다. 그러나, 18 개월령에서는, 어느 백신의 투여에서도 항체가는 동일한 정도였다. 도 5b 에는, B/Phuket/3073/2013 주에 대한 비강의 바이러스 특이적 IgG 역가를 나타내고 있으며, 1 개월령 및 18 개월령의 마우스 모두에 있어서, 스플리트 백신 투여군 (S.V.) 에 비해 불활성화 전입자 백신 투여군 (W.V.) 에서는 유의하게 높은 항체가가 확인되었다.
상기 결과로부터, 소아 및 고령자의 모델 동물에 있어서, 혈청의 항체 유도는 불활성화 전입자 백신에서 이미 승인된 스플리트 백신에 비해 유의하게 높은 항체 유도가 확인되었다. 또한, 바이러스 감염의 장소인 비강 점막의 항체 유도는, 소아의 모델 동물에서는, 본 실시예에서 평가한 A 형 및 B 형 바이러스의 모두에 대해서 불활성화 전입자 백신 투여군 (W.V.) 에서 스플리트 백신 투여군 (S.V.) 보다 유의하게 높으며, 고령자의 모델 동물에서는, A 형 바이러스는 동일한 정도이지만, B 형 바이러스에서는 불활성화 전입자 백신에서 유의하게 높은 항체 유도를 나타내었다. 즉, 소아 및 고령자의 어느 모델 동물에서도 면역원성의 유의한 향상이 나타나, 베타 프로피오락톤 처리 불활성화 전입자 백신은 이미 승인된 스플리트 백신보다 높은 유효성을 나타내는 것으로 생각된다.
Claims (6)
- 소아 및/또는 고령자에게 투여되는 인플루엔자 백신 조성물로서, 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 불활성화 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는, 조성물.
- 제 1 항에 있어서,
바이러스 항원이 A/H1N1 아형 및 A/H3N2 아형으로 이루어지는 A 형 인플루엔자 바이러스주, 그리고 B/Victoria 계통 및 B/Yamagata 계통으로 이루어지는 B 형 인플루엔자 바이러스주를 포함하는, 조성물. - 제 1 항 또는 제 2 항에 있어서,
아쥬반트를 함유하지 않는, 조성물. - 제 1 항 내지 제 3 항 중 어느 한 항에 있어서,
피하 투여되는, 조성물. - 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 불활성화 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는 조성물을 소아 또는 고령자에게 투여하는, 면역 방법.
- 베타 프로피오락톤으로 불활성화 처리된 불활성화 전입자를 바이러스 항원으로서 함유하는 조성물을 소아 또는 고령자에게 투여하는, 인플루엔자의 예방 방법.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JPJP-P-2021-057975 | 2021-03-30 | ||
| JP2021057975 | 2021-03-30 | ||
| PCT/JP2022/015638 WO2022210763A1 (ja) | 2021-03-30 | 2022-03-29 | インフルエンザワクチン |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20230157397A true KR20230157397A (ko) | 2023-11-16 |
Family
ID=83456399
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020237034602A KR20230157397A (ko) | 2021-03-30 | 2022-03-29 | 인플루엔자 백신 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20240156943A1 (ko) |
| EP (1) | EP4316515A1 (ko) |
| JP (1) | JPWO2022210763A1 (ko) |
| KR (1) | KR20230157397A (ko) |
| CN (1) | CN117098552A (ko) |
| AU (1) | AU2022251654A1 (ko) |
| WO (1) | WO2022210763A1 (ko) |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP7475828B2 (ja) * | 2019-09-03 | 2024-04-30 | デンカ株式会社 | 鼻腔にウイルス特異的抗体を誘導可能な季節性インフルエンザワクチン |
-
2022
- 2022-03-29 WO PCT/JP2022/015638 patent/WO2022210763A1/ja active Application Filing
- 2022-03-29 CN CN202280025416.1A patent/CN117098552A/zh active Pending
- 2022-03-29 JP JP2023511410A patent/JPWO2022210763A1/ja active Pending
- 2022-03-29 KR KR1020237034602A patent/KR20230157397A/ko active Search and Examination
- 2022-03-29 US US18/284,350 patent/US20240156943A1/en active Pending
- 2022-03-29 EP EP22780974.6A patent/EP4316515A1/en active Pending
- 2022-03-29 AU AU2022251654A patent/AU2022251654A1/en active Pending
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Akira S. Innate immunity and adjuvants. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2011 Oct 12 ; 366(1579) : 2748-55. |
| Renshaw M, Rockwell J, Engleman C, Gewirtz A, Katz J, Sambhara S. Cutting edge : impaired Toll-like receptor expression and function in aging. J Immunol. 2002 Nov 1 ; 169(9) : 4697-701. |
| Vasselon T, Detmers PA. Toll receptors : a central element in innate immune responses. Infect Immun. 2002 Mar ; 70(3) : 1033-41. |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO2022210763A1 (ja) | 2022-10-06 |
| CN117098552A (zh) | 2023-11-21 |
| EP4316515A1 (en) | 2024-02-07 |
| JPWO2022210763A1 (ko) | 2022-10-06 |
| AU2022251654A1 (en) | 2023-10-12 |
| US20240156943A1 (en) | 2024-05-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6372223B1 (en) | Influenza virus vaccine composition | |
| Pica et al. | NS1-truncated live attenuated virus vaccine provides robust protection to aged mice from viral challenge | |
| Couch et al. | Improvement of inactivated influenza virus vaccines | |
| JP2003510291A (ja) | 新規組成物 | |
| JP2007051157A (ja) | プロテオソーム・インフルエンザ・ワクチン | |
| US10881723B2 (en) | Vaccine containing immobilized virus particles | |
| Keitel et al. | Cold recombinant influenza B/Texas/1/84 vaccine virus (CRB 87): attenuation, immunogenicity, and efficacy against homotypic challenge | |
| JP2011524372A (ja) | インフルエンザワクチン接種のための新規ペプチドアジュバント | |
| CS203080B2 (en) | Method of preparing the imping agent against the influenza,containing the weakened h3 n2 strain of inflenza virus | |
| US7601500B2 (en) | Prime-boost vaccine for the protection of equines against viral infection | |
| KR20230157397A (ko) | 인플루엔자 백신 | |
| JP7475828B2 (ja) | 鼻腔にウイルス特異的抗体を誘導可能な季節性インフルエンザワクチン | |
| US11890338B2 (en) | Inactivated whole-virus influenza vaccine and method for preparing same | |
| JP4889175B2 (ja) | 感染性因子に対する免疫応答を刺激するための組成物および方法 | |
| WO2021172418A1 (ja) | 不活化インフルエンザワクチンの製造方法及びそのワクチン組成物 | |
| Fenters et al. | Enhanced immunogenicity in mice of a purified, tween-ether-treated influenza vaccine | |
| McLaren et al. | Immunity to influenza in ferrets: XII. Immunization of ferrets with TNBP-split influenza virus vaccine | |
| Zhilova et al. | Some problems of modern influenza prophylaxis with live vaccine | |
| JP2023515829A (ja) | 小児対象のための高用量インフルエンザワクチン | |
| US20150174236A1 (en) | Viral vaccine and process for preparing the same | |
| Willis | The Effect of Maternal Antibodies on Anti-viral Immunity in Infant Mice | |
| KR20230157398A (ko) | 경비 투여 인플루엔자 백신 | |
| WO2023047419A1 (en) | A vaccine for coronavirus and influenza virus, and method for preparation thereof |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination |