KR20200004942A - 허브추출물을 유효성분으로 하는 간기능보호용 조성물 및 이를 함유하는 음료 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 허브추출물을 유효성분으로 하는 간기능 보호용 조성물 및 이를 함유하는 음료에 관한 것이다. 간기능 보호용 조성물은 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류 추출물 및 영양소로 구성된다. 상기에서 허브류는 히비스커스추출물, 밀크시슬추출물, 타라곤추출물 및 마저럼추출물 중에서, 한약류는 비수리추출물, 고량강추출물, 풀솜대추출물, 트리블러스추출물, 매실추출물, 울금추출물, 산겨릅나무추출물, 오미자농축액, 백년초추출물 중에서, 생약류는 엉겅퀴추출물, 모시잎, 아스파라거스추출물, 헛개나무열매추출물, 녹차추출물 중에서, 영양소는 발효홍삼농축액, 칡농축액, 자몽농축액, 배즙 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 그밖에 음료는 상기의 간기능 보호용 조성물에 물, 비타민C, 구연산, 비타민B Complex 및 당류 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다.
Description
본 발명은 허브추출물을 유효성분으로 하는 간기능 보호용 조성물 및 이를 함유하는 음료에 관한 것이다. 보다 상세하게는 간기능 보호에 효과가 좋은 간기능 보호용 조성물은 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류 추출물 및 영양소로 구성된다. 상기에서 허브류는 히비스커스추출물, 밀크시슬추출물, 타라곤추출물 및 마저럼추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 한약류는 비수리추출물, 고량강추출물, 풀솜대추출물, 트리블러스추출물, 매실추출물, 울금추출물, 산겨릅나무추출물, 오미자농축액, 백년초추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 생약류는 엉겅퀴추출물, 모시잎, 아스파라거스추출물, 헛개나무열매추출물, 녹차추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 영양소는 발효홍삼농축액, 칡농축액, 자몽농축액, 배즙 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 그밖에 음료는 상기의 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류추출물 및 영양소로 구성된 간기능 보호용 조성물에 물, 비타민C, 구연산, 비타민B Complex 및 당류 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다.
우리나라 국민의 평균수명은 증가되고 있으나, 스트레스로 인한 음주량 증가로 인해 남성의 알콜성 간기능에 대한 관심이 높아지고 있다. 알코올은 과량섭취로 인하여 갈증, 피로감, 기억상실, 소화불량, 구토, 비타민 결핍 등의 숙취현상 등의 부작용이 나타나고 그 용량과 횟수에 따라 알코올 중독에 걸릴 위험성도 증가한다. 특히 한국의 알코올 소비는 세계 최고의 수준이며 과다한 알코올의 섭취는 신체의 거의 모든 장기에 영향을 미쳐 간질환, 위염, 췌장염, 대사증후군 등의 많은 질환을 일으키는 것으로 보고되고 있다. 따라서 간기능을 보호하기 위한 노력이 이루어지고 있는 실정으로 그 중에서도 화학합성 의약품 보다는 천연물에 대한 선호도가 높아지고 있다. 본 발명자들은 이러한 사회적인 변화와 요구에 부응하기 위하여 허브류 중에서 간기능보호에 효과가 좋은 히비스커스추출물, 밀크시슬추출물, 마저럼추출물, 타라곤추출물 성분과, 한약류 중에서 간기능보호에 좋은 비수리추출물, 고량강추출물, 풀솜대추출물, 트리블러스추출물, 매실추출물, 울금추출물, 산겨릅나무(벌나무)추출물, 오미자농축액, 백년초추출물 성분과, 생약류 중에서는 간기능보호에 좋은 엉겅퀴추출물, 모시잎, 아스파라거스추출물, 헛개나무열매추출물, 녹차추출물 성분과, 영양소 중에서 간기능보호에 좋은 비타민C, 구연산, 비타민B Complex 성분을 조성물로 구성하여 본 발명을 완성하기에 이르렀다.
히비스커스(Hibiscus)는 무궁화속은 아욱과에 속하는 속씨식물 속의 하나이다. 폴리페놀을 함유하고 있어서 항암, 항산화제, 신장결석 및 간보호, 당뇨병, 대사증후군 예방, 고혈압 예방에 도움이 된다. 히비스커스는 인체 유효 생리 활성 물질이 함유되어 있어 음용시 노폐물의 배설을 빠르게 배설시키며, 동맥경화, 항암성분, 장염, 기관지염 등에 효과가 뛰어나다. 또한 히비스커스 추출물내 피루브산(pyruvic acid)은 DHA(dihydroxyacetone)과 같이 음용하면 지방분해가 체중감소효과를 가지고 있을 뿐만 아니라 단백질 용해 작용을 지니는 것으로 알려져 있다. 또한 피부 첩포시 단백질을 용해하여 각질을 제거, 피부 재생율을 높인다.
밀크씨슬(Milk thisle,학명; Silybum marianum)은 흰무늬엉겅퀴속의 국화과 두해살이풀로서 지중해 지역 및 북아메리카, 중앙아시아 등지에 분포하며, 잎, 뿌리, 줄기, 씨앗까지 식용 및 약용으로 할 수 있다. 씨에는 플라보노이드 일종인 실리마린이 2~3% 함유(종자 추출/정제 40 ~ 65% 함유)되어 있다. 실리마린은 독소로부터 간을 보호하는 것이 밝혀져 간기능개선과 해독, 피로회복에 효과가 있으며, 간세포 보호, 만성간염, 간경변, 카드뮴중독 간손상 예방, 심장병 예방에 좋다. 유효성분은 실리마린(실리빈, 이소실리빈, 실리크리스틴, 실리디아닌 혼합체이다. 우리나라 식품의약품안전처에서 간개선에 도움을 주는 건강기능식품 기능성 원료로 고시한 품목이다.
마저럼(marjoram; 학명:Origanum majorana)은 꿀풀과의 여러해살이풀로서 키프로스 및 터키가 원산지이다. 향기가 강하며 체내의 독소를 배출하여 몸을 이롭게 하며, 고혈압에도 효과가 좋다. 마저럼 100g당 열량 271kcal, 지방 7g, 탄수화물 61g, 식이섬유 40g, 당류 4.1g, 단백질 13g, 미네랄과 비타민이 소량 함유되어 있다.
타라곤(tarragon)은 사철쑥류로서 French true tarragon으로도 알려져 있는 허브로서 꽃이 피지 않아 열매로 번식이 안되어 가지로만 번식하는 아주 희귀한 식물이다. 6-10월에 수확하는 것이 영양상 좋으며, 잘 마르지 않으므로 냉동 보관하는 것이 풍미유지에 좋다. 타라곤은 식욕 증진, 건위 작용, 소화 불량에 좋으며 체하거나 복부 팽만에 효과가 있다. 타라곤 100g당 열량 295kcal, 지방 7g, 탄수화물 50g, 식이섬유 7g, 단백질 23g, 미네랄과 비타민이 소량 함유되어 있다.
비수리(Chinese lespedeza)는 쌍떡잎식물 장미목 콩과로 전국 각처의 산과 들에서 자라는 여러해살이 초본 혹은 초본성 아관목이다. 한국, 일본, 타이완, 인도, 호주 등지에 분포한다. 생약명으로는 야관문이라 하며 뿌리를 포함한 전초는 약용으로 이용한다. 비수리차는 피곤회복, 원기보충, 향균작용, 혈액순환, 혈당, 눈건강 등에도 좋다고 한다. 그 밖에 해독작용으로 뱀에 물렸을 때뿐만 아니라 기관지염, 천식, 급성 위염, 위궤양, 설사 등 여러 증세에 쓰이는 약초이다.
고량강(Alpinia officinarum)은 생강과에 속하는 다년생 초본인 양강의 뿌리줄기를 말린 것으로 불그스름한 껍질에 속 색깔이 짙은 호박색으로 생강처럼 섬유질이 많다. 맛은 맵고 쓰며 성질은 따뜻하여 남태평양 나라들의 음식은 고량강을 풍부하게 사용한다. 뿌리는 썰어서 살사나 매리네이드에 넣거나, 갈아서 페이스트로 만들어 커리에 넣는다. 신선한 것을 선호하는 편이지만 국물이나 수프의 맛을 낼 때는 말린 고량강을 쓰기도 한다. 위의 소화기능을 증가시켜 위액분비를 촉진하므로 만성위염, 식용부진, 구토, 복통, 식채, 속쓰림방지, 복통, 설사에 효과가 있다. 신장기능 허약, 냉증으로 인한 정력감퇴, 설사, 이질에 효과가 있다. 고량강의 추출물은 용혈성연쇄상구균, 디프테리아균, 폐렴균의 발육을 억제시킨다. 고량강에 열수 또는 저급알콜을 용매로 주출하여 건조시킨 것이 고량강추출물이다.
풀솜대(smilacina japonica)는 백합과 솜대속의 여러해살이 풀로서 한국, 일본, 중국등 동북아시아 산지의 숲속에서 자생하며, 일명 솜대, 솜죽대, 녹약이라고도 한다. 잎은 나물 또는 쌈으로 생식하기도 하며, 풀솜대의 뿌리는 약재로서 강장, 조경, 활혈, 소종, 사지마비, 생리불순, 종기, 타박상등의 효능이 있다. 적용질환으로는 신체허약증, 두통, 풍습으로 인한 통증, 발기력부전, 월경불순, 유선염, 타박상 등에 약용으로 사용한다.
농촌진흥청은 풀솜대 추출물이 몸 속의 활성산소를 없애고 활성산소에 의해 생기는 염증을 줄이는데 효과가 있다고 발표했다.
트리블러스 (Tribulus terrestris L)는 뿌리와 잎에 사포닌 (Saponin)이 함유되어 있고 사포게닌 (Sapogenin)에는 디오스게닌 (Diosgenin), 기토게닌 (Gitogenin), 클로로게닌 (Chlorogenin) 등이 함유되어 있다. 고혈압, 해열, 이뇨, 변비, 간장병, 토혈, 혈변, 생리 불순, 설사 등에 효과적인 것으로 알려져 있다. 트리블러스(Tribulus terrestris L.)는 우리말로 남가새라고도 불리며, 사포닌을 비롯해 다양한 천연성분을 가진 천연 허브로 미국 FDA에서 안전성이 입증된 식품원료이며, 트리블러스 추출물을 마신 남성의 테스토스테론 호르몬 촉진 효과가 최대 수십 배까지 차이가 있고, 홍삼보다 많은 양의 사포닌을 함유하고 있다. 트리블러스에 정제수 또는 저급알콜로 침지시킨 후 여과하여 얻은 트리블러스 추출물을 저온건조 또는 냉동건조하여 분말로 제조한다.
산겨릅나무(Acer tegmentosum Max)는 단풍나무과에 속하는 낙엽활엽 소교목으로 벌나무라고 부르기도 하며, 높이는 10~15 m에 이르며, 중부 이북 표고 500 m이상의 깊은 계곡에 자생하고 국내외에 시베리아 동부, 중국, 만주, 아무르와 우수리 강 유역의 일부 산지에도 분포한다. 산겨릅나무는 간암, 간경화, 백혈병 등에 효과가 있다고 알려져 있으며, 종기나 외상 출혈에 산겨릅나무를 찧어서 환부에 붙이면 지혈 작용을 한다고 하여 중국에서 소종과 외상출혈 치료에 사용한다. 또한, 산겨릅나무는 부작용이 없는 우수한 약재로서 맛이 담백하고 청혈제, 이수제이고 간의 온도를 정상으로 회복시켜주고 수분배설이 잘 되게 하여 부종과 신장염 치료에 효과가 있고, 목부 추출물을 음주시 섭취하면 주독을 예방할 수 있다고 알려져 있다.
백년초(Prickly pear, 손바닥 선인장)는 선인장목에 속하는 다년초로서 남미가 원산지이며, 제주도에서 특용작물로 대량으로 경작되고 있으며, 열매 및 줄기의 에탄올 추출물은 진통 및 소염작용에 의한 위점막 보호효과, 혈당강화효과, 면역증강효과 등의 효능이 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 라디칼 소거 활성, 티로시나제 억제활성, 항알레르기 활성도 있으며, 열매의 70% 메탄올 추출물은 신경손상억제효과가 있다고 알려져 있다. 또한, 백년초의 열매와 줄기는 공복에 갈아 마시면 변비완화, 이뇨작용, 장운동 활성화, 및 식용 증진 등의 효능이 있고, 특히 줄기는 피부질환, 류마티스 및 화상 치료에 효과가 있다. 백년초는 주로 단당류, 다당류(점액질) 성분을 함유하고 이외에 후라보노이드계 성분으로 이소르함네틱(isorhamnetic), 퀘르세틴(quercetin), 캄페롤(kaempferol) 등을 함유한다.
매실(plum, japanese apricot)은 한국, 중국, 일본에서 자생하며 남해안지역에서 대량으로 재배하며 수분 85%, 당분 10%, 유기산 5%로 구성된다. 매실은 알칼리식품으로 웰빙식품, 슈퍼푸드, 파워푸드로 널리 사용된다. 또한 구연산을 포함한 각종 유기산과 비타민 등이 풍부하게 함유된 매실은 피로 회복, 소화력 증진, 해독 작용, 살균 작용, 식중독 예방과 치료효과가 있다. 구연산은 섭취한 음식을 에너지로 바꾸는 대사 작용을 돕고 근육에 쌓인 젖산을 분해해 피로를 풀어주며, 칼슘의 흡수를 촉진하는 역할도 한다. 한편 매실에 함유된 피루브산은 간의 해독 작용을 도와주며, 카테킨산은 장 속의 유해 세균 번식을 억제하고 정장 작용이 뛰어나서 설사와 변비를 치료하는 데 효과가 있다. 또한 매실에 함유된 비타민은 피부미용 효과도 있다.
오미자(Schisandra chinensis)는 오미자과의 낙엽 덩굴식물로서 동북아시아에 자생하며, 열매는 거의 둥글고 8∼9월에 홍색으로 익으며 1∼2개의 종자가 들어 있다. 단맛, 신맛, 쓴맛, 짠맛, 매운맛의 5가지 맛이 난다고 하여 오미자라고 하며 신맛이 강하다. 활성성분은 시잔드린, 고미신, 시트럴, 사과산, 시트르산 등의 성분이 들어 있어 심장을 강하게 하고 혈압을 내리며 면역력을 높여 주어 강장제로 쓴다. 폐 기능을 강하게 하고 진해·거담 작용이 있어서 기침이나 갈증 등을 치료하는 데 도움이 된다. 천식 치료에 효능이 탁월하고, 강장제로 이용되며, 눈을 밝게 해 줄 뿐만 아니라 장을 따뜻하게 해 준다.
울금(Curcuma longaL)은 생강과의 고온 다습성의 다년초로서 아시아, 아프리카, 중남미, 아열대에서 자생하고 있다. 울금의 성분으로 대표적인 크루크민을 시작해 울금에는 1000 종류 이상의 성분이 포함되어 있다. 울금의 덩이뿌리를 약용한 것으로 맛은 맵고 쓰며, 성질은 서늘하다. 급성, 황달, 담석증, 만성 담낭염, 담관염의 치료에 쓰인다. 울금은 간기능 강화, 담즙 분비 촉진 작용, 선어 기생충 아니사키스의 성장을 억제하는 작용, 항암작용의 활성, 요도 결석, 동맥 경화에 유효, 항암작용의 활성, 종양에 대해서 증식을 억누르는 활성, 담관에 있는 담즙을 배출하는 작용, 염증이나 궤양을 고치는 작용, 강심 작용이 있어 약재로 쓰인다. 식용으로는 주로 카레의 원료로 사용되며, 염료나 착색료에 이용되기도 한다.
엉겅퀴(Korean thistle)는 쌍떡잎식물 초롱꽃목 국화과의 여러해살이풀로서 한국·일본·중국 북동부 및 우수리에 분포한다. 잎이 좁고 녹색이며 가시가 다소 많다. 전통적으로 엉겅퀴 뿌리를 약재로 널리 이용하며, 식물체 전체를 나물로 요리해 먹기도 한다. 엉겅퀴 뿌리즙은 하혈을 할 때 마시면 멈추게 하는 효과가 즉시 나타날 정도로 약성이 뛰어나며, 대개 잎이나 뿌리를 말려서 지혈제로 사용하거나, 생 뿌리를 그대로 술로 담기도 한다. 엉겅퀴는 잎으로 된장국을 끓여먹거나, 튀김, 무침, 볶음, 데치기 등 어떤 방법으로 조리해도 맛있는 음식 재료이다.
모시잎은 쐐기풀과(Urticaceae)에 속하는 다년생 풀로서 단단한 뿌리를 지니고 있으며 모시를 삼는 줄기에는 잔털이 많이 나 있으며, 떡과 부각에 이용하는 잎은 어긋나고 잎 끝이 꼬리처럼 길고 잎 가장자리에는 깻잎처럼 톱니들이 고르게 나 있다. 모시잎의 뿌리는 지혈, 상처 해독, 이뇨 효과가 있다. 칼슘와 철분 및 아미노산이 풍부해 콜라겐 생성 효과, 피부미용 효과, 골다공증, 퇴행성 관절염 예방 효과, 항산화작용, 모세혈관 강화 및 루틴의 성분 등이 약리작용을 통해 혈액을 정화시켜 준다. 그 밖에 모시잎은 식품으로서 찹쌀풀을 발라서 건조시킨 후 기름에 튀긴 반찬 재료 또는 모시잎송편으로 사용된다.
아스파라거스(asparagus)는 백합과 다년생 식물로서 암수 딴 그루이다. 아스파라거스에는 아스파라긴산과 아스파르트산을 비롯해 비타민 C, B1, B2, 칼슘, 인, 칼륨, 섬유질이 풍부하여 변비 예방, 체중 조절에 좋다. 아스파라거스에 열수 또는 에탄올을 가해 추출하여 사용한다.
헛개나무(학명 Hovenia dulcis)는 갈매나무목 쌍떡잎식물로서 한국, 일본, 중국에 분포되어 자생하며 지구자나무라고도 한다. 열매가 익을 무렵이면 과경이 굵어져서 울퉁불퉁하게 된다. 은은한 향기가 있고, 단맛이 있어 먹을 수 있으며 음식맛을 한결 돋운다. 생즙은 술독을 풀고 구역질을 멎게 한다고 한다. 헛개나무 열매에 열수 또는 에탄올을 가해 추출하여 사용한다.
발효홍삼농축액은 인삼(Panax ginseng C. A. Meyer; 오갈피나무과 Araliaceae)의 뿌리를 쪄서 말린 것이다. 홍삼은 백삼과 유사한 성분을 가지고 있지만 특별히 인삼을 쪄서 말리는 과정에서 배당체가 아세틸렌(acetylene)화되어 글리세롤(glycerol) 배당체를 가지고 있고 파낙시놀(Panaxynol), 파낙시트리올(panaxytriol) 및 지방산 등을 함유하고 있으며, 백삼과 함께 강장, 보정 및 진정약으로 사용되고 있다. 홍삼에 10배수의 정제수와 적량의 유산균배양액을 첨가한 후 35℃에서 48~240시간 발효하고 살균, 여과하여 얻은 발효홍삼액을 저온감압 농축한다.
칡농축액(kudzu vine)은 쌍떡잎식물 장미목 콩과의 덩굴식물로서 산기슭의 양지에서 자라는데 적당한 습기와 땅속이 깊은 곳에서 잘 자라며 줄기의 길이는 20m이상 뻗쳐있다. 추위에도 강하지만 염분이 많은 바닷가에서도 잘 자란다. 칡은 자양강장제 등 건강식품으로 이용되기도 하였다. 한방에서는 뿌리를 갈근(葛根)이라는 약재로 쓰는데, 발한·해열 등의 효과가 있다. 약용으로 술독, 간 질환, 고혈압에 효능이 있고, 뿌리의 녹말은 녹두가루와 섞어서 갈분국수를 만들어 식용하였고, 죽이나 묵으로 만들어 먹기도 한다. 뿌리를 삶은 물은 칡차로 이용하기도 한다.
자몽(Grapefruit)은 감귤속(Citrus)에 속하는 자몽의 열매이고 약간 신맛이 나고 큰 오렌지같이 생긴 노란 과일이다. 원산지는 서인도제도의 자메이카로 여겨지며, 즙이 풍부하며 맛은 신맛, 단맛이 있으며 쓴맛도 조금 섞여 있다. 비타민C가 많이 들어 있으며, 감기예방, 피로회복, 숙취에 좋다.
배즙(Pear Juice)은 배를 갈거나 압착하여 얻은 즙으로 소화가 잘 되어 음용 하거나 요리에 첨가하는 등 널리 사용된다. 배는 폐를 보호해주고, 기침을 억제해 감기와 기관지 질환, 가래에 효과가 있다고 적혀있다. 배즙은 기호에 따라 도라지, 생강, 인삼 등을 같이 갈아서 마시기도 한다.
녹차(카테킨)는 보성녹차 100g을 구입하여 비타민C가 풍부하게 함유되어 있으며, 녹차 중의 폴리페놀류는 항암작용, 혈중 콜레스테롤 저하작용, 혈관신생억제 작용 및 혈당 저하 효과 등이 있는 것으로 알려져 있다. 또한 녹차는 열량이 지닌 성분이 거의 없고 지방 축적 억제작용이 있어서 다이어트 효과가 있다.
비타민C는 인체에서 항바이러스제이고 면역력을 높여 주며, 혈관을 깨끗하게 만들고 면역력을 높인다고 알려져 있다. 또한 피부의 기저막을 형성해 피부를 좋게 하는 효과도 있다. 시중에서 비타민C는 아스콜빈산을 구입(네이처퓨어코리아(주))하여 사용한다.
구연산(Citric acid, C6H8O7)은 하이드록시기(-OH)를 가지는 다염기 카복실산의 하나이다. 레몬이나 귤 등, 신맛이 있는 과일 중에 유리해서 존재하고 있다. 칼슘이온의 포착제이고 나트륨염은 항혈액응고제로서 사용된다. TCA 회로를 구성하는 한 요소로 시트르산은 고등동물의 물질대사에서 중요한 구실을 하며, 체내의 칼슘흡수를 촉진시키는 작용을 한다. 구연산은 음료, 식품, 의약품에 사용되며, 칼슘이온 포착용 혈액응고저지제로 사용된다.
비타민B Complex는 (주)비타민하우스 제품을 구입하여 사용한다.
당류(sugars)는 허브류와 생약류에서 유래하는 거북한 맛을 마스킹하기 위하여 소량을 사용할 수 있다. 포도당, 설탕, 당알콜(솔비톨, 자일리톨) 중에서 선택하여 사용할 수 있다.
한국특허등록번호 10-0663086(숙취제거 및 간기능 보호 발효유 제조방법)은 원료유에 알콜 및 알데히드 분해 유산균, 유당 분해 유산균 및 유리아미노산 생성 유산균을 공배양시키는 것이다. 상기 알콜 및 알데히드 분해 유산균이 락토바실러스 헬베티쿠스 NLRI703, 유당분해 유산균이 스트렙토코코스 써모필루스 NLRI704, 상기 유리아미노산 생성 유산균이 락토바실러스플란타룸 NLRI705인 것을 특징으로 하는 발효유 제조방법 및 이에 의해 제조된 발효유를 제공한다. 한국특허등록번호 10-1854606(간 손상 억제 및 간 기능 보호 효과를 갖는 건강기능식품 및 이의 제조방법)은 삼백초 3.0-4.0 중량부, 민들레 1.5- 2.5 중량부, 생강 1.5-2.5 중량부, 엉겅퀴 0.5-1.0 중량부, 함초 0.5-1.0 중량부 및 감초 0.5-1.0 중량부를 포함하는 간 손상 억제 및 간 기능 보호용 태명청 함유 건강기능식품 및 물100 중량부를 기준으로 생강 2.0-4.0 중량부, 마카 1.5-2.5 중량부, 옥수수 1.0-2.0 중량부, 마테잎 1.0-2.0 중량부, 및 녹차잎 1.0-2.0 중량부를 포함하고, 대나무잎 또는 현호색 중 하나 이상을 1.0-2.0 중량부를 포함하는 비만 억제용 태명청 함유 건강기능식품에 관한 것이다. 한국특허등록번호 10-1245191(간 기능 보호 및 개선용 미나리발효액 및 그 제조방법)은 미나리를 수세하여 준비하는 단계, 세척 및 살균된 옹기에 상기 미나리와 침출제로서의 흑설탕 또는 올리고당을 1:5 ~ 5:1의 비율(중량비)로 혼합하여 넣는 단계,15~25℃에서 10~14개월 동안 자연발효시키는 발효단계를 포함하는 간 기능 보호 및 개선용 미나리 발효액의 제조방법이다. 한국특허공개번호 10-2015-0127807(효소 처리 콩나물 추출물을 함유하는 간질환 치료 및 예방용 약학 조성물, 및 간보호용 건강기능식품)은 효소 처리 콩나물 추출물은 콩나물을 효소 처리와 동시에 실온에서 추출함으로써 통상의 콩나물 추출물이나 콩나물즙에 비하여 아스파라긴이 현저히 많이 추출되고, 동시에 HepG2 세포에서 과산화수소에 의한 간손상 억제 활성이 뛰어나다. 한국특허등록번호 10-1124364(간세포 보호 기능성 국화차 조성물)는 국화차 추출물의 Superoxide dismutase 활성, DPPH라디컬 소거능, 총 페놀함량, Comet assay를 이용한 DNA 손상보호 효과 및 간세포 손상보호 효과를 측정한 결과 간기능 보호 효과가 뛰어남을 개시하였다. 한국특허등록번호 10-1773318(멀꿀 열매 추출물을 유효성분으로 포함하는 알콜성 간 손상에 대한 간 보호 기능을 갖는 건강기능성 식품조성물)은 멀꿀 열매 조추출물 또는 비극성가용추출물을 유효성분으로 포함하는 본 발명의 건강 기능성 식품조성물은 인체에 부작용이 없으면서 알콜성간 손상에 대한 간 보호 기능이 뛰어나기 때문에 천연물인 멀꿀 열매 조추출물을 유효성분으로 한다. 한국특허공개번호 10-2013-0102305(간 보호 및 간 기능 개선용 조성물 및 이를 포함하는 기능성 식품)는 밀크씨슬 추출물, S-아데노실 메티오닌, 및 알라닌, 아스파르트산, 글루탐산, 글리신,프롤린, 아르기닌, 시스테인, 티로신 및 세린으로 이루어진 군으로부터 선태된 단독 또는 이들의 혼합물인 비필수 아미노산을 포함한다. 한국특허등록번호 10-0201432 갈근과 감초를 주성분으로 하는 간기능 보호 건강식품)는 흑대두와 녹두가 함유된 갈근·감초 세절편에 적소두 생즙 20∼40 중량부를 혼합하여 암실에서 10∼14 시간 흡입시키고 일광에서 10∼15 시간 건조시켜 제조함을 특징으로 하는 간기능 보호 효과가 뚜렷한 갈근·감초를 주성분으로 하는 건강식품에 관한 것이다.그러나 이들 종래기술은 본 발명과 기술적구성이 다른 것이다.
간은 체내의 각종 대사작용, 해독, 분해, 합성 및 분비를 담당하는 중요한 장기로서, 인체의 방어 기능과 독성물질의 해독 기능을 하므로 위험에 노출되어 손상될 가능성이 높다. 간은 재생능력이 우수하여 손상되더라도 쉽게 정상으로 회복되지만, 지속적으로 손상될 경우에는 간 조직의 일부가 완전히 파괴되고 간 기능도 저하되어 간 손상이 만성화되면 간섬유화, 간경화 또는 간암으로 진행되면 사망에 이르게 된다. 따라서 간 손상이 만성화되기 전에 이러한 간 손상을 예방 및 치료하는 것이 매우 중요하지만, 임상적으로 만족할 만한 간의 예방과 치료를 위한 약제와 조성물이 제공되지 못하고 있는 실정이다.
본 발명은 간에 부담을 주지 않으면서도 간 손상을 예방할 수 있고, 용이하게 섭취할 수 있는 간기능 보호용 조성물을 제공하는데 있다. 간기능 보호용 조성물은 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류 추출물 및 영양소로 구성된다. 상기에서 허브류는 히비스커스추출물, 밀크시슬추출물, 타라곤추출물 및 마저럼추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 한약류는 비수리추출물, 고량강추출물, 풀솜대추출물, 트리블러스추출물, 매실추출물, 울금추출물, 산겨릅나무추출물, 오미자농축액, 백년초추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 생약류는 엉겅퀴추출물, 모시잎, 아스파라거스추출물, 헛개나무열매추출물, 녹차추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 영양소는 발효홍삼농축액, 칡농축액, 자몽농축액, 배즙 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 그밖에 음료는 상기의 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류추출물 및 영양소로 구성된 간기능 보호용 조성물에 물, 비타민C, 구연산, 비타민B Complex 및 당류 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다.
본 발명의 간기능보호용 조성물은 세포, 동물, 사람을 대상으로 시험하여 간기능보호에 우수하다는 것을 확인할 수 있다. 따라서 간기능보호용 식품, 약품, 음료 등으로 개발하여 공급하면 좋을 것으로 판단된다.
도 1은 본 발명 조성물에 대한 처리농도와 시간에 따른 대식세포의 활성능을 나타낸 것이다.
도 2는 본 발명 조성물에 대한 처리농도와 시간에 따른 간암세포의 활성능을 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명 조성물의 설치류 투여 농도별 혈중 알코올 잔류량 개선 효과를 나타내는 것이다.
도 4는 본 발명 조성물을 투여시, 농도별 간 세포에서 알코올 분해에 관여하는 효소인 ADH와ALDH의 mRNA 발현 증가에 관한 것이다.
도 5는 본 발명 조성물을 투여시 농도별 간세포 보호 효과에 대한 과염성 간세포, 이분엽 간세포, 간세포 종대 및 쿠퍼세포활성에 대한 조직병리학적 관찰결과를 4단계로 (0, 1, 2 및 3) 구분하여 평가한 것이다.
도 6은 본 발명 조성물을 투여하였을 때 농도별 신장에 미치는 영향에 대해 보우만 주머니 증식 및 변성, 혈관사이 세포 증식, 사구체옆세포 증식 (방사구체세포 증식), 신세뇨관 변성 및 유리질 물질 출현 정도에 대한 조직병리학적 관찰결과를 4단계로(0, 1, 2 및 3) 구분하여 평가한 것이다.
도 2는 본 발명 조성물에 대한 처리농도와 시간에 따른 간암세포의 활성능을 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명 조성물의 설치류 투여 농도별 혈중 알코올 잔류량 개선 효과를 나타내는 것이다.
도 4는 본 발명 조성물을 투여시, 농도별 간 세포에서 알코올 분해에 관여하는 효소인 ADH와ALDH의 mRNA 발현 증가에 관한 것이다.
도 5는 본 발명 조성물을 투여시 농도별 간세포 보호 효과에 대한 과염성 간세포, 이분엽 간세포, 간세포 종대 및 쿠퍼세포활성에 대한 조직병리학적 관찰결과를 4단계로 (0, 1, 2 및 3) 구분하여 평가한 것이다.
도 6은 본 발명 조성물을 투여하였을 때 농도별 신장에 미치는 영향에 대해 보우만 주머니 증식 및 변성, 혈관사이 세포 증식, 사구체옆세포 증식 (방사구체세포 증식), 신세뇨관 변성 및 유리질 물질 출현 정도에 대한 조직병리학적 관찰결과를 4단계로(0, 1, 2 및 3) 구분하여 평가한 것이다.
본 발명은 허브추출물을 유효성분으로 하는 간기능 보호용 조성물 및 이를 함유하는 음료에 관한 것이다. 간기능 보호용 조성물은 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류 추출물 및 영양소로 구성된다. 상기에서 허브류는 히비스커스추출물, 밀크시슬추출물, 타라곤추출물 및 마저럼추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 한약류는 비수리추출물, 고량강추출물, 풀솜대추출물, 트리블러스추출물, 매실추출물, 울금추출물, 산겨릅나무추출물, 오미자농축액, 백년초추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 생약류는 엉겅퀴추출물, 모시잎, 아스파라거스추출물, 헛개나무열매추출물, 녹차추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 영양소는 발효홍삼농축액, 칡농축액, 자몽농축액, 배즙 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다. 그밖에 음료는 상기의 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류추출물 및 영양소로 구성된 간기능 보호용 조성물에 물, 비타민C, 구연산, 비타민B Complex 및 당류 중에서 하나 또는 둘이상을 포함한다.
<제조예 1>; 허브류 추출물의 제조
본 발명에 사용하는 허브류 추출물 중에서 히비스커스추출물, 밀크시슬추출물, 타라곤추출물 및 마저럼추출물은 당업계에 공지된 통상의 온도와 압력의 조건하에서, 용매를 사용하여 각각의 추출물을 제조하였다. 용매는 열수 또는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 각각의 추출물을 얻을 수 있다. 그러나 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올 수용액 또는 열수를 사용하는 것이 좋다.
<제조예 1-1>: 히비스커스 추출물의 제조
히비스커스 꽃분말 1kg을 70%(v/v) 에탄올 용액에서 6일 동안 침지시키고, 원심분리하여 슬러리를 제거한 다음, 상등액을 5~10μm 마이크로필터로 여과하였다. 상기의 여과액을 진공 감압 농축기를 이용하여 80℃에서 농축하여 수분을 증발시킨 후, 히비스커스 추출물을 얻었다.
<제조예 1-2>: 밀크시슬 추출물의 제조
탈지시킨 밀크씨슬 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 밀크시슬 추출물을 얻었다.
<제조예 1-3>: 타라곤 추출물의 제조
건조된 타라곤 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 밀크시슬 추출물을 얻었다.
<제조예 1-4>: 마저럼 추출물의 제조
건조된 마저럼 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 밀크시슬 추출물을 얻었다.
<제조예 2>; 생약류 추출물의 제조
본 발명에 사용하는 생약류 추출물 중에서 비수리추출물, 고량강추출물, 풀솜대추출물, 트리블러스추출물, 매실추출물, 울금추출물, 산겨릅나무추출물, 오미자농축액, 백년초추출물, 비파추출물 및 차전자추출물을 얻었다.
은 당업계에 공지된 통상의 온도와 압력의 조건하에서, 용매를 사용하여 각각의 추출물을 제조하였다. 용매는 열수 또는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 각각의 추출물을 얻을 수 있다. 그러나 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올 수용액 또는 열수를 사용하는 것이 좋다.
<제조예 2-1>: 비수리 추출물의 제조
건조한 비수리 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 비수리 추출물을 얻었다.
<제조예 2-2>: 고량강 추출물의 제조
건조한 고량강 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 고량강 추출물을 얻었다.
<제조예 2-3>: 풀솜대 추출물의 제조
건조한 풀솜대 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 풀솜대 추출물을 얻었다.
<제조예 2-4>: 트리블러스 추출물의 제조
건조한 트리블러스 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 트리블러스 추출물을 얻었다.
<제조예 2-5>: 매실 추출물의 제조
매실 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 매실 추출물을 얻었다.
<제조예 2-6>: 울금 추출물의 제조
건조한 울금 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 울금 추출물을 얻었다.
<제조예 2-7>: 산겨릅나무 추출물의 제조
건조한 산겨릅나무 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 산겨릅나무 추출물을 얻었다.
<제조예 2-8>: 오미자 추출물의 제조
건조한 오미자 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 오미자 추출물을 얻었다.
<제조예 2-9>: 백년초 추출물의 제조
건조한 백년초 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 백년초 추출물을 얻었다.
<제조예 3>: 생약류추출물
본 발명에 사용하는 생약류추출물의 엉겅퀴추출물, 모싯잎추출물, 아스파라거스추출물 헛개나무추출물 및 녹차추출물은 당업계에 공지된 통상의 온도와 압력의 조건하에서, 용매를 사용하여 각각의 추출물을 제조하였다. 용매는 열수 또는 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 클로로포름, 부틸 아세테이트, 1,3-부틸렌글리콜 및 이들의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 1종 이상의 용매를 사용하여 각각의 추출물을 얻을 수 있다. 그러나 바람직하게는 70%(v/v) 에탄올 수용액 또는 열수를 사용하는 것이 좋다.
<제조예 3-1>: 엉겅퀴추출물
건조한 엉겅퀴 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 엉겅퀴 추출물을 얻었다.
<제조예 3-2>: 모시잎추출물
건조한 모시잎 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 모시잎 추출물을 얻었다.
<제조예 3-3>: 아스파라거스추출물
건조한 아스파라거스 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 아스파라거스 추출물을 얻었다.
<제조예 3-4>: 헛개나무열매추출물
건조한 헛개나무 분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 헛개나무 추출물을 얻었다.
<제조예 3-5>: 녹차추출물
건조한 녹차분말 1kg을 제조예 1-1과 동일한 방법으로 추출 및 농축하여 녹차 추출물을 얻었다.
<제조예 4>; 영양소
발효홍삼농축액은 영신홍삼(금산)을 구입하였고, 칡농축액은 지리산생칡즙을 구입하였고, 자몽농축액은 흥국자몽농축액을 구입하였고, 배즙은 나주배즙을 구입하여 사용하였다.
<제조예 5>: 음료
음료는 상기의 간기능보호용 조성물인 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류추출물에 물 및 영양소를 적당량 포함한다. 비타민C는 네이처퓨어코리아(주) 제품을 구입하였고, 구연산은 신원무역상사 제품을 구입하였고, 비타민B Complex는 비타민하우스 제품을 구입하였고, 당류는 CJ제품을 구입하여 사용하였다.
<실시예 1-8>
간기능 보호용 조성물은 허브류추출물 70∼80 중량부, 한약류추출물 20∼30 중량부 및 생약류추출물 10∼15 중량부로 구성된다. 음료는 물 85∼95 중량부 및 영양소 5∼15 중량부로 구성된다.
| 구 분 | 실시예1 | 실시예2 | 실시예3 | 실시예4 | 실시예5 | 실시예6 | 실시예7 | 실시예8 | 비교예 | |
| 허브류 | 히비스커스 | 40 | 45 | 40 | 40 | 35 | 35 | 30 | 30 | - |
| 밀크시슬 | 20 | 15 | 18 | 20 | 20 | 21 | 23 | 25 | - | |
| 타라곤 | 10 | 10 | 10 | 5 | 15 | 15 | 10 | 15 | - | |
| 마저럼 | 5 | 7 | 10 | 15 | 20 | 10 | 20 | 15 | - | |
| 한약류 | 비수리 | 1 | 1 | 2 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 20 |
| 고량강 | 1 | 1 | 1 | 2 | 1 | 1 | 1 | 1 | 20 | |
| 풀솜대 | 1 | 1 | 1 | 1 | 2 | 1 | 1 | 1 | 10 | |
| 트리블러스 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 2 | 1 | 1 | 10 | |
| 매실 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 2 | 1 | 5 | |
| 울금 | 1 | 2 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 5 | |
| 산겨릅나무 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 2 | 5 | |
| 오미자 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 5 | |
| 백년초 | 2 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 1 | 5 | |
| 생약류 | 엉겅퀴 | 2 | 2 | 1 | 2 | 5 | 1 | 2 | - | 2 |
| 모시잎 | 3 | 1 | 1 | 3 | 3 | 4 | - | 1 | 2 | |
| 아스파라거스 | 3 | 2 | 5 | 5 | 2 | 4 | 2 | 2 | 2 | |
| 헛개나무열매 | 2 | 3 | 3 | - | - | - | 3 | 2 | 2 | |
| 녹차 | 5 | 5 | 2 | - | - | - | - | - | 2 | |
| 계 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | 100 | |
상기의 실시예 1 내지 8의 배합비와 같이 만든 조성물의 간기능보호활성을 측정하기 위하여 혈중 알코올 농도 감소 효과 확인하기로 하였다.
<실험예 1>: 혈중 알코올 농도 측정
실험동물은 5주령 생쥐(sprague dawley rat) 100수를 이용하고, 상기의 실시예 1 내지 8의 조성물에 대하여 비교예(대조군)에 각각 1g/kg 10수, 3 g/kg 투여군 10수로 처치하였다. 실험동물은 정제수 및 상기 실시예 1-8 및 비교예 조성물을 경구 투여하기 전 12시간 동안 사료를 금식시켰으나, 물은 충분히 공급하였다. 그 후, 220마리 모든 SD 랫드(Rat)에 30% 에탄올 20 ㎖를 위장에 투여한 다음, 10분 후, 표 2와 같이 각각의 조성물 1g/kg, 3 g/kg을 SD Rat에 투여하였다. 투여 60, 120, 180, 360분 후, 각 미정맥에서 채혈하여 혈청을 분리한 후, 중크로산염(dichromate) 반응을 이용해 580 nm에서 흡광도를 측정하는 정량분석법(colorimetric determination)으로 혈중 잔여 알코올 농도를 측정하였으며 그 결과는 다음의 표 2와 같다.
상기의 결과로부터 본 발명의 실시예 1 내지 8의 허브류, 한약류, 생약류로 구성된 조성물의 알콜 분해 능력은 비교예(대조군)에 비하여 50% 이상의 알콜 분해 능력이 우수함을 보여주고 있다.
<실험예 2>: 세포 활성능 시험
(1) 대식세포 세포주의 세포 활성능 시험
대식세포 세포주 (Raw264.7)와 간암세포 세포주 (Huh-7)에 대해 실시예 8의 조성물을 15.625, 62.5, 125, 250, 500 및 1000 μg/㎖ 농도로 처리한 후 MTT formazan (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-tetrazolimbromide)를 이용해 세포 활성능 시험을 하였다. 대식세포(도 1)와 간암세포(도 2)를 96well에 각 각 2×102 cell/well로 계수하여 실시예 8의 조성물을 상기의 농도로 처리해 배양한 후, 24시간과 72시간 후 MTT 용액을 추가하여 형성된 비수용성의 포르마잔 (formazan)을 디메틸술폭시드 (dimethyl sulfoxide) 용액으로 용해시킨 후 포르마잔의 용해 정도를 595nm에서 흡광도를 (O.D.) 측정하여 상대적인 세포 활성능(%)으로 평가하였다. 도 1에서 대식세포 세포주인 Raw264.7에 실시예 8의 조성물을 15.625, 62.5, 125, 250, 500 및 1000 ㎍/㎖의 농도를 처리한 후 각각 24시간과 72시간째에 OD595nm에서 흡광도를 측정해 세포 활성능을 관찰한 결과 (A) 24시간에서는 1000 ㎍/㎖ 처리 군을 제외하고는 무처리한 대조군과 비교시, 실시예 8의 조성물에 농도 의존적으로 세포활성능이 증가하는 것으로 관찰되었다. (B) 72시간에서는 실시예 8의 조성물 1000 ㎍/㎖ 처리군을 제외하고는 Raw264.7 cell의 세포 활성 증가 (세포 증식)에 영향을 미치는 것으로 관찰되었다.
(2) 간암세포주의 활성능 평가
도 2에서 보는 바와 같이 간암세포주인 Huh7에 대한 실시예 8의 조성물의 세포활성에 미치는 영향 평가 결과 시험물질 처리 (C) 24시간에서는 대체로실시예 8의 조성물에 농도 의존적으로 세포 활성능이 증가하는 것으로 관찰되었으며, (D) 72시간에서는 실시예 8의 조성물에 농도 의존적인 증가는 아니지만, 대조군에 비해 대체로 세포활성능이 높은 것으로 관찰되었다.
| Group | Treatment |
| Control(n=8) | 40%에탄올 10mg/kg LP+tap water(10ml/kg)P.O |
| T1(n=8) | 40%에탄올 10mg/kg LP+AGF-203(3000mg/10ml/kg)P.O |
| T2(n=8) | 40%에탄올 10mg/kg LP+AGF-203(1500mg/10ml/kg)P.O |
| T3(n=8) | 40%에탄올 10mg/kg LP+AGF-203(500mg/10ml/kg)P.O |
| T4(n=8) | 40%에탄올 10mg/kg LP+AGF-203(250mg/10ml/kg)P.O |
<실험예 3>: 혈중 알코올 농도 개선효과 검정
상기 실험예 1과 같은 방법으로 알코올과 실시예의 조성물을 SD rat에 투여한 후 10, 60, 180, 360분과 24시간 때에 미정맥에서 채혈하여 혈청을 분리한 후, 중크롬산염 반응을 이용해 580nm에서 흡광도를 측정하는 정량분석법으로 혈중 잔여 알코올 농도를 측정하고 그 결과를 도 3으로 나타내었다. 대조군과 실시예의 조성물 투여 농도 3000 mg/kg(T1), 1500 mg/kg(T2), 500 mg/kg(T3) 및 250 mg/kg(T4)에서 60분에 혈중 알콜농도는 최고농도를 나타다가 이후 점차 낮아지는 것으로 관찰되었다. 실시예의 조성물 투여 그룹 중 저농도의 250mg/kg를 투여한 T4 군을 제외하고 모든 시험군에서 알코올 투여 60분에 대조군에 비해서 혈중 알코올 농도가 감소하였다. 그리고, 60분 이후 측정 시간에 있어서도 대체로 실시예 조성물 투여군에서 알코올 농도가 감소한 것으로 관찰되었다. 실시예 8의 조성물 투여 농도 500mg/kg와 1500mg/kg가 혈중 알코올 농도 감소에 가장 효과적인 것으로 판단된다.
<실험예 4>: 실시예 8의 조성물에 의한 알코올 분해증가에 미치는 영향 검정
상기 실험 3에서와 같은 방법으로 실시하고 24시간후 혈중 알코올 농도 변화 관찰을 위한 혈액을 채취 한 후, 동물을 희생시키고 각 동물로부터 간 조직을 채취하여 조직병리학적 분석을 위해서 간 조직을 10% 포르말린을 고정하고, 일부는 간 세포에서 ADH와 ALDH의 발현량 변화 분석을 위한 RT-PCR 시험용으로 70℃ 냉동 보관하였다. 이러한 냉동 간 샘플을 이용한 RT-PCR 시험에 대한 결과를 아래 도 4에 나타내었다. 실시예의 조성물 투여 후 간 세포의 알코올 분해 효소인 ADH와 ALDH의 mRNA 발현 증가는 도 4에서 얻은 결과와 일치하게 500mg/kg 농도로 투여한 실시예8의 조성물 투여 시 간 효소가 높게 관찰되었다. ADH는 대조군에 비해서 약 20%, ALDH는 약 38% 증가하는 양상을 나타내었다. 이러한 결과는 두 효소의 mRNA 증가가 도 4에서와 같이 혈중 알코올 농도를 낮추는데 영향을 미친 것을 나타낸다.
<실험예 4>: 실시예의 조성물에 의한 간기능 개선효과 검정
상기 실험예 2와 같은 방법으로 알코올과 실시예의 조성물을 SD rat에 투여한 후 10, 60, 180, 360분과 24시간 때에 미정맥에서 채혈하여 혈청을 분리한 후, 혈액생화학 검사를 실시하여 AST (asparate transaminase), ALT (alanine transaminase), 콜레스테롤 및 중성지방에 대한 혈청 농도를 측정하였고 그 결과는 아래와 같이 나타냈다. 간 기능 평가 관련 혈액생화학 검사 결과는 AST와 ALT의 경우 알코올 투여 후 360min까지 대조군과 실시예의 조성물 투여군 모두에서 시간이 경과함에 따라 AST의 증가를 나타내었으며, 24h에서는 대조군의 AST는 감소했으나, 실시예8의 조성물 투여군은 지속적으로 높은 값을 나타내는 것으로 관찰되었다. 콜레스테롤의 경우 대조군과 실시예의 조성물 투여군을 비교했을 때, 모든 측정 시간에서 대조군이 실시예의 조성물 투여군에 비해서 다소 높은 경향을 나타내는 것으로 관찰되었다. Triglyceride의 측정에서는 혈중 알코올 농도가 높게 관찰되는 (10~60분) 초기에는 대조군에 비해서 실시예8의 조성물 투여군은 대체로 TG 농도가 낮게 관찰되고, 이후 혈중 알코올 농도 감소와 함께 TG 농도도 실시예8의 조성물 투여군과 대조군은 비슷한 수준을 나타내는 것으로 관찰되었다.
<실험예 5>: 실시예의 조성물을 이용한 간 조직병리학적 실험
상기 실험예 2에서와 같은 방법으로 알코올과 실시예8의 조성물을 SD rat에 투여한 후 24시간 때에 동물을 희생시켜 복강을 개복하여 각 동물로부터 간 조직을 적출하고, 10% 중성포르말린에 고정한 후 통상적인 조직처리 과정을 거쳐 파라핀 포매를 통해 슬라이드를 제작하였다. 조직병리학적 관찰을 위해 각 슬라이드에 대해 헤마톡실린 에오진 (hematoxylin-eosin) 염색을 실시한 후 광학현미경에서 관찰하였다. 실험 결과 실시예의 조성물 투여 최고 농도 3000mg/kg는 단회 투여는 생체 내에서 간에 독작용을 나타내지 않았다. 그리고 실시예의 조성물 투여 농도 1500mg/kg (T2)와 500mg/kg (T1)는 알콜에 의한 간세포 변성(hyperchromatic epatocyte, binuclear hpc, activation of Kupffer cell 및 swelling of hpc)에 대한 방어 효과를 나타내었다. 또한 알코올과 실시예의 조성물이 간 조직에 미치는 영향을 평가하기 위해서 급성 세포 손상에서 나타나는 과염성 간세포 (hyperchromatic hpc), 이분엽핵 간세포 (binucleated hpc), 간세포 종대 (swelling of hpc) 및 쿠퍼세포 활성 (별큰포식세포 활성, activation of Kupffer cell) 출현 정도를 0에서 4 단계로 구분하여 점수를 매겨 그룹간의 차이로 나타내었다. 실험 결과 조직병리학적 관찰결과에 대한 4단계 (0, 1, 2 및 3) 평가 결과 대조군은 1.1을 실시예8의 조성물 투여군은 모두 0.7보다 작은 값을 나타내어 간 보호 효과가 있는 것으로 관찰되었고, 새싹보리 추출물 투여군 중 500 mg/kg (T3)가 0.5로 가장 낮은 값을 나타내어 간 보호에 가장 효과적인 것으로 관찰되었다.
<실험예 6>: 실시예의 조성물을 이용한 신장 조직병리학적 실험
상기 실험예 2에서와 같은 방법으로 알코올과 실시예8의 조성물을 SD rat에 투여한 후 24시간 때에 동물을 희생시켜 복강을 개복하여 각 동물로부터 신장 조직을 적출하고, 10% 중성포르말린에 고정한 후 통상적인 조직처리과정을 거쳐 파라핀 포매를 통해 슬라이드를 제작하였다. 조직병리학적 관찰을 위해 헤마톡실린 에오진 염색을 실시하여 광학현미경에서 관찰하였다. 알코올과 새싹보리 추출물이 신장 조직에 미치는 영향을 평가하기 위해서 보우만 주머니 증식 및 변성, 혈관사이 세포 증식, 사구체옆세포 증식(방사구체세포 증식), 신세뇨관 변성 및 유리질 물질 출현 정도를 0에서 4 단계로 구분하여 점수를 매겨 그룹간의 차이로 나타내었다 (도 6). 대조군과 새싹보리 추출물 투여군 모두에서 신세뇨관 변성 소견이 두드러지게 관찰되며, 이와 함께 세뇨관 내에 유리질 물질의 형성도 관찰되었다. 특히, 실시예8의 조성물 투여군인 T1 (3000mg/kg)와 T2 (1500mg/kg) 그룹은 신세뇨관 변성과 유리질 물질 형성 정도가 대조군에 비해서 높은 경향을 나타내었으며, T3 (500mg/kg)와 T4 (250mg/kg) 투여군에서는 대조군에 비해서 낮은 경향을 나타내었다. 이러한 신세뇨관 변성과 유리질 물질 형성 정도는 전체적인 신장 조직에 대한 평가 결과와 (도 6) 유사한 경향을 나타내었다. 하지만, 보우만 주머니 증식 및 변성, 혈관사이 세포 증식 및 사구체옆세포 증식에 대한 평가에서는 대조군에 비해서 실시예8의 조성물을 고농도 투여군 T1과 T2에서 대조군에 비해서 각 각 2배 그리고 3배 많은 손상 정도를 나타내는 것으로 관찰되었다.
<시험예 1>: 간기능보호용 조성물 및 음료의 배합비
상기의 실시예 1 내지 8에서 나타난 바와 같이 혈중 알콜농도 분해능력이 우수한 배합비는 허브류추출물의 함량이 높은 실시예 6 내지 8로 밝혀져 간기능보호용 음료의 배합비에는 실시예 8의 조성물로 정하여 음료의 배합비에 적용하였다. 비교예에 사용된 조성물은 실시예의 비교예와 동일하다.
<시험예 2>: 본 발명의 간기능보호용 음료의 알콜대사 평가
본 발명의 실시예 8의 조성물로 배합비 1 내지 8과 같이 농축액과 영양소를 혼합하여 음료를 만들었다. 알콜대사에 이상이 없는 건강한 20∼40대 남자 10명을 피험자로 선정하여 각각 30분간 양주(에탄올 40 %) 100cc를 시음시킨 다음 배합비별 간기능보호용 음료를 마시게 하여 60분 동안 에탄올 제거 효과를 측정한 후, 다음의 표 5에 나타냈다.
| 구 분 | 배합비1 | 배합비2 | 배합비3 | 배합비4 | 배합비5 | 배합비6 | 배합비7 | 배합비8 | 비교예 |
| 10분 | 0.061 | 0.063 | 0.062 | 0.055 | 0.054 | 0.053 | 0.047 | 0.045 | 1.412 |
| 20분 | 0.049 | 0.047 | 0.046 | 0.044 | 0.043 | 0.042 | 0.043 | 0.042 | 1.353 |
| 30분 | 0.045 | 0.044 | 0.046 | 0.043 | 0.042 | 0.041 | 0.039 | 0.037 | 1.325 |
| 40분 | 0.039 | 0.037 | 0.036 | 0.035 | 0.034 | 0.033 | 0.032 | 0.031 | 1.289 |
| 50분 | 0.035 | 0.034 | 0.033 | 0.032 | 0.031 | 0.029 | 0.028 | 0.027 | 1.246 |
| 60분 | 0.027 | 0.023 | 0.022 | 0.021 | 0.019 | 0.017 | 0.016 | 0.015 | 1.212 |
상기의 결과로부터 간기능보호용 음료의 배합비에서 조성물의 첨가량이 많아 질수록 농도 의존적으로 숙취해소 효과가 좋아지는 것을 알 수 있다.
<시험예 3>: 간기능 개선용 음료 조성물의 간기능 임상 실험
본 실험예에서는 본 발명의 간기능 개선용 음료 조성물의 간기능 임상 실험을 실시하고자 하였다. 시험예 2의 배합비 8과 같이 만들어진 간기능개선용 음료를 간기능에 이상이 있는 35~50세의 남성 환자 50명에게 1일 200 ㎖씩 3회, 60일간 복용시킨 후, 섭취 전후의 간기능 관련 지수인 GPT, GOT, γ-GTP를 측정하였다. 그 결과는 하기 표 6과 같다. 일반적으로 GPT, GOT, γ-GTP의 정상범위는 각각 5~40, 10~40, 0~60이다.
| 구 분 | 섭취전 | 1개월후 | 2개월후 | 3개월후 |
| GPT(U/L) | 121 | 45 | 26 | 18 |
| GOT(U/L) | 83 | 38 | 23 | 19 |
| γ-GTP(U/L) | 98 | 68 | 36 | 29 |
본 발명의 간기능개선용 음료 조성물은 간기능 이상 환자의 간기능 지수를 현저히 저하시킴을 확인할 수 있다. 상기와 같은 결과로부터 본 발명의 음료 조성물은 간기능 개선 및 간 질환 예방 효과가 있음을 확인할 수 있다.
<시험예 4>: 관능검사
시험예 1의 간기능보호용 조성물을 포함하는 음료의 배합비에 따라 제조한 음료의 관능검사를 실시하였다. 관능검사는 술을 마시는 20대, 30대, 40대 성인 남녀 10명을 패널로 선정한 후 본 발명의 음료를 4℃에서 냉장한 다음 패널에게 제공하여 5점척도법(4점이상; 아주우수, 3점이상; 우수, 3점미만; 보통) 맛, 기호도, 향을 3회 반복하여 그 결과를 다음의 표 7에 나타냈다.
| 비고 | 실시예1 | 실시예2 | 실시예3 | 실시예4 | 실시예5 | 실시예6 | 실시예7 | 실시예8 | 비교예 |
| 맛 | 4.2 | 4.2 | 4.3 | 4.3 | 4.4 | 4.4 | 4.5 | 4.6 | 3.8 |
| 기호도 | 4.2 | 4.3 | 4.3 | 4.4 | 4.4 | 4.5 | 4.5 | 4.5 | 3.7 |
| 향 | 4.1 | 4.1 | 4.2 | 4.2 | 4.3 | 4.3 | 4.4 | 4.4 | 3.6 |
상기의 결과로부터 본 발명의 간기능보호용 음료조성물은 맛, 기호도 및 향이 비교예에 비하여 우수하다는 것을 알 수 있다.
<적용예>
본 발명의 간기능보호용 조성물은 세포, 동물, 사람을 대상으로 시험하여 간기능보호에 우수하다는 것을 확인할 수 있다. 또한 상기의 여러 가지 시험예를 통하여 간기능 보호에 효과적임을 알고 다음과 같이 간기능보호용 음료 배합비를 완성하였다.
| 원재료 | 배합비율(%) |
| 히비스커스 | 2 |
| 밀크시슬 | 2 |
| 발효홍삼농축액 | 0.2 |
| 울금 | 0.1 |
| 오미자 | 0.1 |
| 매실 | 0.1 |
| 백년초 | 0.1 |
| L-시스틴 | 1 |
| 타우린 | 1 |
| 효소처리아르기닌 | 0 |
| 비타민 B복합(B2/B6) | 1 |
| 프락토올리고당 | 2 |
| 정제수 | 90.4 |
| 계 | 100 |
상기의 표 7에서 사용된 허브류, 한약류, 생약류 및 영양소는 원부재료의 가격이나 수급 상황에 따라서 다양한 배합비로 만들어질 수 있다.
본 발명의 허브추출물을 유효성분으로 포함하는 간기능보호용 조성물은 세포, 동물, 사람을 대상으로 시험하여 간기능보호에 우수하다는 것을 확인할 수 있다. 따라서 산업상 이용가능성이 있다고 판단된다.
Claims (6)
- 허브류추출물, 한약류추출물, 생약류추출물 및 영양소를 유효성분으로 하는 간기능 보호용 조성물
- 제 1항에 있어서, 허브류추출물은 히비스커스추출물, 밀크시슬추출물, 타라곤추출물 및 마저럼추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함하는 간기능 보호용 조성물
- 제 1항에 있어서, 한약류는 비수리추출물, 고량강추출물, 풀솜대추출물, 트리블러스추출물, 매실추출물, 울금추출물, 산겨릅나무추출물, 오미자농축액, 백년초추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함하는 간기능 보호용 조성물
- 제 1항에 있어서, 생약류는 엉겅퀴추출물, 모시잎추출물, 아스파라거스추출물, 헛개나무열매추출물 및 녹차추출물 중에서 하나 또는 둘이상을 포함하는 간기능 보호용 조성물
- 제 1항에 있어서, 영양소는 발효홍삼농축액, 칡농축액, 자몽농축액, 배즙 중에서 하나 또는 둘이상을 포함하는 간기능 보호용 조성물
- 상기 제 1항 내지 제 5항중 어느 한 항의 간기능 보호용 조성물에, 물, 비타민C, 구연산, 비타민B Complex 및 당류 중에서 선택되는 하나 이상을 더 포함하는 간기능보호용 음료
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| PE0902 | Notice of grounds for rejection |
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