KR20140118945A - Anti-obesity composition comprising oriental herbal extracts and fractions - Google Patents

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KR20140118945A
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신순식
윤미정
최재수
박선동
정양삼
윤기현
이희영
이혜림
홍연희
최정현
박동민
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동의대학교 산학협력단
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Abstract

The present invention relates to a composition comprising a fraction obtained by extracting or fractionating, with an organic solvent, an extract of a composition including Ephedra sinica, Thallus aminariae, and Radix et rhizoma as an active ingredient for preventing and treating obesity. The composition has no in-vivo toxicity and has effects of weight loss and body fat reduction, thereby can be used as a medicine for preventing and treating the obesity and a functional health food for preventing and alleviating the obesity.

Description

한약재의 추출물과 분획물을 포함하는 항비만 조성물 {Anti-obesity composition comprising oriental herbal extracts and fractions}The present invention relates to an anti-obesity composition comprising oriental herbal extracts and fractions,

본 발명은 마황, 곤포, 대황을 포함하는 조성물의 추출물을 유기용매로 추출 또는 분획하여 얻어진 분획물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for the prevention and treatment of obesity, which comprises as an active ingredient a fraction obtained by extracting or fractionating an extract of a composition comprising mahwang, wrapping, and rhubarb with an organic solvent.

최근 경제성장과 생활방식의 변화에 따라 식습관에도 많은 변화가 있다. 특히, 바쁜 현대인들은 패스트푸드 등의 고열량 식이와 적은 운동량으로 인하여 체중 과다 및 비만이 증가하고 있다. 체중 과다는 체질량 지수 (BMI, 체중을 키의 제곱으로 나눈 비만 척도)가 25 이상 30 미만을 의미하며, 비만은 체질량 지수가 30 이상일 때 해당된다.Recent changes in diet and eating habits have been accompanied by changes in economic growth and lifestyle. Especially, busy modern people are overweight and obese because of high calorie diet such as fast food and low exercise amount. Overweight refers to body mass index (BMI, obesity index divided by the square of body weight) between 25 and 30, and obesity is associated with body mass index> 30.

미국 성인의 3분의 2는 체중 과다이거나 비만이며, 체중 과다는 혈압과 콜레스테롤 수치를 높여 심장 질환 등의 각종 성인병의 발병률을 증가시킨다. 비만이 여러 가지 질병에 미치는 영향은 매우 심각하여 전 세계 당뇨병 환자의 80 %, 심장질환의 21 %가 비만이 원인인 것으로 알려져 있다. 이외에도 자궁암, 신장암, 유방암 등 각종 암도 비만과 직·간접적으로 연관되어 있으며 비만이나 과체중의 경우 수면무호흡증, 골관절염, 담석증 등의 발병률도 정상인보다 높다 (Stein CJ, Colditz GA. The epidemic of obesity. J Clin Endocrinol Metab 2004; 89: 2522-2525. ; Kopelman PG. Obesity as a medical problem. Nature 2000 Apr 6; 404(6778): 635-43.). Two-thirds of US adults are overweight or obese, and overweight increases blood pressure and cholesterol levels, increasing the incidence of various adult diseases, including heart disease. The effects of obesity on various diseases are so severe that it is known that 80% of diabetics worldwide and 21% of heart disease are caused by obesity. In addition, the incidence of cervical cancer, kidney cancer, breast cancer, such as various types of cancer are obesity and associated, directly or indirectly, and the case of obese or overweight sleep apnea, osteoarthritis, gallstones also higher than normal (Stein CJ, Colditz GA. The epidemic of obesity. J Clin Endocrinol Metab 2004; 89: 2522-2525; Kopelman PG, Obesity as a medical problem, Nature 2000 Apr 6; 404 (6778): 635-43.).

비만은 한 가지 원인으로 발생하는 질병이 아니라 유전적, 환경-사회적, 정신적인 여러 가지 요인들이 복합적으로 작용하여 발생하기 때문에 어느 한 가지 방법으로 치료하기는 어렵다. 현재 비만을 치료하기 위한 방법은 식사요법, 운동요법, 행동요법 등 생활 습관을 교정하는 방법과 약물치료 및 수술적 치료로 나눌 수 있다. 약물이나 수술적 치료에 앞 생활습관을 교정하기 위한 적극적인 노력이 선행되어야 하지만, 생활습관을 교정하는 일이 쉽지 않을 뿐 아니라 생활습관 교정만으로 감소시킬 수 있는 체중은 한계가 있다. 따라서 많은 경우에 생활습관 교정과 함께 약물치료가 필요하다.It is difficult to treat obesity in any one way because it is caused by a combination of various factors such as genetic, environmental, social, and mental factors, rather than a disease caused by one cause. Current methods of treating obesity include diet, exercise, and behavioral therapy, as well as methods of correcting lifestyle, drug therapy, and surgical treatment. Although aggressive efforts should be made to correct lifestyle habits before medication or surgical treatment, it is not easy to correct lifestyle habits, and there is a limit to the weight that can be reduced by lifestyle correction alone. Therefore, in many cases, lifestyle correction and medication are necessary.

이러한 비만의 약물 치료를 위해 매년 많은 항비만 제제들이 개발되고 있지만 현재 사용 가능한 비만 치료 약물은 많지 않으며, 대부분 소화나 식욕을 억제시키는 제제에 국한되어 있다. 소화나 식욕을 조절하는 제제의 경우, 습관성 때문에 향정신성 약물로 분류되며, 소화억제제는 설사, 변비 등의 부작용을 나타낸다. 2010년까지 미국 FDA가 장기사용을 승인한 대표적 비만치료 약물은 노르에피네프린 (norepinephrine)과 세로토닌 (serotonin)의 재흡수를 억제하는 작용을 가진 시부트라민 (sibutramine; Reductil)과 췌장 및 소화기계에서 분비되는 리파제 (lipase)를 억제하여 효과를 나타내는 오르리스타트 (orlistat; Xenical)가 있었다 (Yanovski SZ, Yanovski JA. Obesity. N Engl J Med 2002; 346: 591-602.).Although many anti-obesity agents are being developed every year for the treatment of obesity, there are not many obesity agents available at present, and most of them are limited to digestive or appetite-suppressing agents. In the case of digestive or appetite control agents, they are classified as psychotropic drugs because of habit, and digestion inhibitors show side effects such as diarrhea and constipation. By 2010, the US FDA approved long-term obesity treatment drugs include sibutramine (Reductil), which suppresses the reuptake of norepinephrine and serotonin, and lipase, which is secreted by the pancreas and digestive system (orlistat; Xenical), which has the effect of inhibiting lipase (Yanovski SZ, Yanovski JA, Obesity, N Engl J Med 2002; 346: 591-602).

그러나 시부트라민 (Sibutramine)은 혈압상승, 불면증, 구강건조, 어지러움 등의 부작용이 흔하고, 심근경색과 뇌졸중 등 심혈관계 증상이 나타날 위험이 있어 2010년 10월 미국 및 국내에서 퇴출되었다. 또한 오르리스타트 (Orlistat)의 경우에는 설사, 지방변, 분실금 등의 부작용이 흔하고 한국인과 같이 서양인에 비해 지방섭취가 적은 경우에는 약물의 효과가 뚜렷하지 않아 사용이 제한되고 있다 (김상만. Orlistat에 대한 연구. 대한비만학회지 1998; 7(4): 287-92.). However, sibutramine has been withdrawn in the US and Korea in October 2010 due to the risk of cardiovascular events such as myocardial infarction and stroke, which are common with side effects such as elevated blood pressure, insomnia, dry mouth, and dizziness. In addition, Orlistat has been reported to have side effects such as diarrhea, fatty liver, loss of gold, etc. In the case of low fat intake compared to Westerners, the effect of the drug is not clear and its use is limited (Kim, Journal of Obesity, 1998; 7 (4): 287-92.).

따라서, 아직까지 비만 억제 효과가 좋고 장기 복용의 안전성이 확인된 비만 치료 약물이 아직은 존재하지 않기 때문에 이를 대체할 만한 비만 예방 및 치료제가 요구되는 실정이다. Therefore, there is not yet a drug for obesity which has a good effect of suppressing obesity and has been confirmed to be safe for long-term use. Therefore, there is a need for a preventive and therapeutic agent for obesity.

한편, 마황 (麻黃, Herba Ephedrae)은 발한(發汗)과 해열진통작용, 평천(平喘)과 진해거담(鎭咳祛痰) 작용, 혈압 상승과 강하의 이중조절작용, 이뇨작용, 신장기능쇠약 개선작용, 소염작용, 알레르기 개선작용이 있는 것으로 알려져 있으며, 감기와 상부 호흡기계 감염, 폐렴, 기관지염, 기관지천식, 백일해, 저혈압, 심장질병, 피부점막질병, 신장염과 부종, 관절근육질병, 설사에 사용된다. 또한 마황탕 (麻黃湯)의 구성약물로서, 태양병 (太陽病)의 감기에 걸려 두통이 있고, 발열하나 바람기를 싫어하고 땀이 나지 않을 때 사용되고, 발열에 동반되는 관절통, 요통, 관절류머티즘의 급성기 및 천식에 사용된다 (王本祥 主編. 現代中藥藥理與臨床. 天津: 天津科技飜譯出版公司, 2004, ISBN 7-5433-1801-6, 1448-1460. ; 王浴生·鄧文龍·薛春生 主編. 中藥藥理與應用 (第2版). 北京: 人民衛生出版社, 2000, ISBN 7-117-03057-7/R. 3058, 1105-1119.).Herba Ephedrae is an anti-inflammatory and antipyretic analgesic effect, which acts as a dual action of hypertension and hypertension, hypertension and elevation of blood pressure, diuretic action, It has been known to have anti-inflammatory, anti-inflammatory and anti-allergic properties, and is known to have anti-inflammatory properties such as cold and upper respiratory infections, pneumonia, bronchitis, bronchial asthma, pertussis, hypotension, heart disease, mucocutaneous disease, nephritis and edema, . In addition, as a constituent drug of mah-hong-tang, it is used when there is a headache due to a cold of sunbath (solar disease), fever, but it does not like to breathe and does not sweat, and arthralgia accompanied by fever, back pain, acute period of rheumatism It is used for asthma (王 本 祥 主 編. 现代 中药 药理 與 clinical. 天津: 天津 科技 飜 譯 Publishing Co., 2004, ISBN 7-5433-1801-6, 1448-1460 .; 王 浴 生, 武 文 龍 · ュ 春春生 主 編. 中 薬 药理 应用(Second Edition), Beijing: People's Health Publications, 2000, ISBN 7-117-03057-7 / R. 3058, 1105-1119.).

곤포 (昆布, Thallus Laminariae seu Eckloniae)는 갑상선기능 개선작용, 혈압강하작용, 항응고작용, 강심작용, 지질개선작용, 동맥경화 예방 및 억제작용, 항암작용이 있으며, 갑상선종, 고혈압증, 당뇨병, 뇌혈관병, 유행성출혈열, 백내장, 건해 (乾咳, 마른기침)에 사용된다 (王本祥 主編. 現代中藥藥理與臨床. 天津: 天津科技飜譯出版公司, 2004, ISBN 7-5433-1801-6, 910-914. ; 王浴生·鄧文龍·薛春生 主編. 中藥藥理與應用 (第2版). 北京: 人民衛生出版社, 2000, ISBN 7-117-03057-7/R. 3058, 684-688.).Thallus Laminariae seu Eckloniae is a medicinal herb that has a thyroid function improving action, a hypotensive action, an anticoagulant action, a cardiovascular action, a lipid improvement action, a prevention and inhibition action of arteriosclerosis, an anticancer action, a thyroid gland, hypertension, diabetes, It is used for diseases, epidemic hemorrhagic fever, cataracts, dry cough (dry cough, dry cough) (Wang Xiang Xiang, Hyundai Xicheng Pharmaceuticals and Clinics, Tianjin: Tianjin Science and Technology Publishing Co., 2004, ISBN 7-5433-1801-6, 910-914. ; 王 浴 生, 武 文 龍 · 春春生 主 編. 中药 药理 应用 (2nd edition), Beijing: People's health publication, 2000, ISBN 7-117-03057-7 / R. 3058, 684-688.).

대황 (大黃, Radix et Rhizoma Rhei)은 사하 (瀉下) 작용, 간 보호작용, 췌장액 분비 촉진작용, 담즙분비 촉진작용, 항균(抗菌) 작용, 항바이러스 작용, 해열과 소염작용, 혈압강하와 지질대사 개선작용, 지혈작용, 면역기능의 이중조절 작용이 있으며, 급성감염성 고열과 변비, 유행성출혈열, 급성장폐색, 각종 급성농약중독, 급성췌장염 고열, 급성담낭염, 상부 소화기계 출혈, 만성 신부전, 급성출혈 괴사성 장염, 당뇨병성 신장병, 소화불량과 변비, 만성 위염과 소화성 궤양, 고지혈증, 임신고혈압증에 사용된다 (王本祥 主編. 現代中藥藥理與臨床. 天津: 天津科技飜譯出版公司, 2004, ISBN 7-5433-1801-6, 115-123. ; 王浴生·鄧文龍·薛春生 主編. 中藥藥理與應用 (第2版). 北京: 人民衛生出版社, 2000, ISBN 7-117-03057-7/R. 3058, 70-80.).Radix et Rhizoma Rhei is an antioxidant that is used for the treatment of diarrhea, liver protection, pancreatic secretion, bile secretion, antimicrobial action, antiviral action, antipyretic and anti-inflammatory action, There is a double regulatory action of metabolism improvement, hemostasis, and immune function. Acute infectious fever and constipation, epidemic hemorrhagic fever, rapid growth obstruction, various acute pesticide poisoning, acute pancreatitis high fever, acute cholecystitis, upper gastrointestinal bleeding, It is used for necrotizing enterocolitis, diabetic nephropathy, dyspepsia and constipation, chronic gastritis and peptic ulcer, hyperlipidemia, pregnancy hypertension (王 本 祥 主 編. 现代 中药 药理 與 clinical. 天津: 天津 科技 飜 譯 clinic, 2004, ISBN 7-5433 Beijing, People's Health Publishing Company, 2000, ISBN 7-117-03057-7 / R. 3058, No. 1, pp. -1801-6, 115-123. 70-80.).

본 발명자는 이전 연구 결과를 통해 마황, 곤포 및 대황은 각각 그 자체로서도 약간의 비만 억제 효과를 가지고 있으나, 마황, 곤포 및 대황이 일정 비율로 혼합된 경우에 각각의 물질이 상승적으로 작용하여 각각의 경우보다 우수하게 비만 억제 효과를 가지고 있음을 밝혀냈다. 또한, 상기 곤포는 상승적 작용 외에 마황 및 대황의 가지고 있는 부작용, 예를 들어 마황의 주성분인 에페드린 (ephedrine) 알칼로이드 (alkaloid)에 의한 부작용 또는 대황의 주성분인 세노사이드 (senoside)에 의한 부작용을 최소화한다. 이 때 마황, 곤포 및 대황을 포함하는 조성물은 마황, 곤포 및 대황을 10% 내지 50% : 20% 내지 50% : 20% 내지 50%의 중량비를 포함할 때 각각의 생약성분이 갖는 유효용량과 부작용 등을 고려하여 최적의 효과를 가지고 있음을 밝혀냈다 (등록특허:10-0888068). The inventors of the present invention have found that, in the previous studies, mahwang, baguette and rhubarb are each slightly effective in suppressing obesity, but when the mahwang, wrapping and rhubarb are mixed at a certain ratio, the respective substances act synergistically, , Which is a more effective inhibitor of obesity. In addition to the synergistic action, the bale minimizes adverse effects of the ephedrine and rhubarb, such as ephedrine alkaloid, which is a major component of epidrine, or adenosine, which is a major component of rhubarb . Wherein the composition comprising mahwang, bales and rhubarb has a weight ratio of 10% to 50%: 20% to 50%: 20% to 50% of mahwang, Side effects and the like (Patent Registration No. 10-0888068).

상기한 바와 같이 비만치료를 위해 개발된 약물들의 한계점으로 인해 비만 억제 효과는 높고, 부작용이 적은 새로운 작용기전을 가진 약물의 개발이 절실히 요구되므로, 이에 본 발명자들은 한약제제가 그 대안이 될 수 있을 것으로 생각하고 연구를 하였다. 마황, 곤포 및 대황을 포함하는 조성물을 이용한 연구를 계속 한 결과 상기 조성물의 에탄올 추출물의 분획물이 열수추출물에 비해 1/5의 저 용량에서 간 독성이 없으면서도 체중 증가 방지 등 비만 억제에 현저하게 효과적임을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다. As described above, due to the limitations of the drugs developed for the treatment of obesity, it is urgently required to develop a drug having a new mechanism of action with a high inhibitory effect on obesity and a low side effect. Therefore, I thought and studied. As a result of continuing the research using a composition comprising mahwang, wrapped and rhubarb, the fraction of the ethanol extract of the composition was remarkably effective at inhibiting obesity such as prevention of weight gain while not having liver toxicity at a low dose of 1/5 as compared with the hot-water extract The present invention has been completed.

본 발명의 목적은 마황, 곤포 및 대황을 포함하는 조성물 (GGEx18)의 에탄올 추출물을 유기용매로 추출 또는 분획하여 얻어진 분획물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 치료용 조성물을 제공하고자 한다. It is an object of the present invention to provide a composition for the prevention and treatment of obesity which comprises as an active ingredient a fraction obtained by extracting or fractionating an ethanol extract of a composition (GGEx18) comprising mahwang, wrapped and rhubarb with an organic solvent.

본 발명의 다른 하나의 목적은 마황, 곤포 및 대황을 포함하는 조성물 (GGEx18)의 에탄올 추출물을 유기용매로 추출 또는 분획하여 얻어진 분획물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 개선을 위한 건강기능식품을 제공하고자 한다. Another object of the present invention is to provide a health functional food for prevention and improvement of obesity comprising an effective component of a fraction obtained by extracting or fractionating an ethanol extract of a composition (GGEx18) containing mahwang, .

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 마황, 곤포 및 대황을 원료 생약의 중량기준으로 10% 내지 50% : 20% 내지 50% : 20% 내지 50%의 중량비로 배합되는 것을 특징으로 하는 조성물인 경신강지환18 (GGEx18)을 탄소수 1 내지 4의 알코올로 추출한 후 유기용매로 추출 또는 분획하여 얻어진 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention relates to a composition comprising a composition comprising 10% to 50%: 20% to 50%: 20% to 50% by weight of a raw material herb, A pharmaceutical composition for the prevention and treatment of obesity comprising an extract obtained by extracting Kang Ji-Hwang 18 (GGEx18) with an alcohol having 1 to 4 carbon atoms and then extracting or fractionating with an organic solvent as an active ingredient.

또한 상기 조성물과 함께 약제학적으로 허용되는 담체 등을 포함하는 비만 예방 및 치료용 약학적 조성물 및 식품학적으로 허용되는 식품보조첨가물을 포함한 비만 예방 및 개선용 건강기능식품을 제공한다. Also provided is a pharmaceutical composition for prevention and treatment of obesity including a pharmaceutically acceptable carrier together with the above composition, and a health functional food for preventing and improving obesity including food acceptable food additive additives.

본 발명의 조성물은 생체 내 독성이나 부작용이 없고 안전성이 우수하며 체중 감소 및 체내 지방 감소 효과가 뛰어나 비만 예방 및 치료를 위한 의약품 및 비만 예방 및 개선을 위한 건강기능식품으로 사용할 수 있다. The composition of the present invention has no toxicity or side effects in vivo, is excellent in safety, and is excellent in the effect of reducing body weight and reducing body fat. Thus, it can be used as a medicine for prevention and treatment of obesity and a health functional food for prevention and improvement of obesity.

도 1은 마황, 곤포, 대황을 포함하는 조성물의 분리도 이다.
도 2는 실험기간 동안 동물모델에서 체중 변화량 추이를 관찰한 그림이다.
도 3은 실험기간 동안 동물모델에서 체중 증가량을 관찰한 그림이다.
도 4는 마우스 식이 효율의 변화량을 나타낸 그림이다.
도 5는 마우스 지방 조직의 무게를 관찰한 그림이다.
도 6은 마우스 지방 조직을 헤마토실린-에오신 염색한 후 관찰한 그림이다.
도 7은 도 6의 마우스 지방 조직 내의 지방세포의 크기를 비교한 그림이다.
도 8은 마우스 간 조직을 헤마토실린-에오신 염색한 후 관찰한 그림이다.
도 9는 마우스 간 조직 내의 손상도를 비교한 그림이다.
도 10은 마우스 혈청 내 AST 및 ALT의 농도를 비교한 그림이다.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a separation diagram of a composition comprising mahwang, wrapping, and rhubarb.
FIG. 2 is a graph showing changes in body weight change in an animal model during the experimental period.
FIG. 3 is a graph showing weight gain observed in an animal model during an experimental period. FIG.
FIG. 4 is a graph showing a change in the efficiency of the mouse diet. FIG.
FIG. 5 is a view showing the weight of mouse adipose tissue. FIG.
FIG. 6 is a photograph of mouse adipose tissue after hematocylin-eosin staining. FIG.
FIG. 7 is a graph comparing sizes of adipocytes in the mouse adipose tissue of FIG. 6. FIG.
Fig. 8 is a photograph of mouse liver tissue stained with hematocylin-eosin staining. Fig.
FIG. 9 is a graph comparing damage levels in mouse liver tissue. FIG.
10 is a graph comparing the concentrations of AST and ALT in mouse serum.

이하, 본 발명에 대하여 보다 상세히 설명한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail.

본 발명에서 사용되는 기술 용어 및 과학 용어에 있어서 다른 정의가 없다면, 이 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 통상적으로 이해하고 있는 의미를 갖는 것으로 해석될 수 있다.The technical terms and scientific terms used in the present invention can be construed as meaning ordinary meanings understood by those of ordinary skill in the art without departing from the scope of the present invention.

이하, 본 발명에서는 마황, 곤포 및 대황을 10% 내지 50% : 20% 내지 50% : 20% 내지 50%의 중량비로 구성된 조성물을 경신강지환18 (GGEx18)이라 명명하겠다. In the present invention, a composition comprising 10% to 50% of 20% to 50% of 20% to 50% of mahwang, wrapping and rhubarb is referred to as Gyeongsanggang Jangjwan 18 (GGEx18).

본 발명에 따르는 조성물은 하기와 같이 수득될 수 있다. GGEx18를 분쇄하고 냉각기를 부착한 삼각플라스크에 담아 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매를 이용하여 추출한다. 보다 바람직하게는 70 % 에탄올을 이용한다. 추출방법은 실온에서 함침하거나 가온할 수 있으며, 보다 바람직하게는 2 시간 동안 열수추출 (1.5 L × 6)한다. 상기 추출액을 여과하고, 회전 진공 증발기를 사용하여 농축한다. 상기 에탄올 농축액을 다이클로로메탄, 에틸아세테이트, 부탄올로 순차적으로 분획하고 황산나트륨으로 처리하고 여과하는 방식으로 각 분획물을 농축하여, 다이클로로메탄 분획물 (CF), 에틸아세테이트 분획물 (EF), 에틸아세테이트 분획시 에틸아세테이트와 물층을 제외한 중간물 (IF), 부탄올 분획물 (BF), 물 분획물 (HF)을 수득한다. The composition according to the present invention can be obtained as follows. GGEx18 is pulverized and placed in an Erlenmeyer flask equipped with a condenser and extracted with a solvent selected from water, a lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, or a mixed solvent thereof. More preferably, 70% ethanol is used. The extraction method can be impregnated or warmed at room temperature, more preferably by hot water extraction (1.5 L x 6) for 2 hours. The extract is filtered and concentrated using a rotary vacuum evaporator. The ethanol concentrate was successively fractionated with dichloromethane, ethyl acetate and butanol, and then treated with sodium sulfate and filtered to concentrate each fraction. The dichloromethane fraction (CF), ethyl acetate fraction (EF) and ethyl acetate fraction (IF), butanol fraction (BF) and water fraction (HF) except ethyl acetate and water layer are obtained.

본 발명의 조성물은 GGEx18의 에탄올 추출물로부터 유기용매로 분획한 분획물과 함께 비만 예방 및 치료 효과를 갖는 공지의 유효성분을 1 종 이상 포함할 수 있다. The composition of the present invention may contain one or more known active ingredients having an effect of preventing and treating obesity together with a fraction obtained by fractionating an ethanol extract of GGEx18 with an organic solvent.

본 발명은 약학적 조성물의 제조에 통상적으로 사용하는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더 포함하여 약학적 조성물로 제공될 수 있다. The present invention may be provided as a pharmaceutical composition further comprising suitable carriers, excipients and diluents conventionally used in the production of pharmaceutical compositions.

본 발명의 조성물은 임상 투여 시에 경구 또는 비경구로 투여가 가능하며 일반적인 의약품 제제의 형태로 사용될 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔 (witepsol), 마크로골, 트윈 (tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.The composition of the present invention can be administered orally or parenterally at the time of clinical administration and can be used in the form of a general pharmaceutical preparation. In the case of formulation, a diluent or excipient such as a filler, an extender, a binder, a wetting agent, a disintegrating agent and a surfactant is usually used. Solid preparations for oral administration are prepared by mixing tablets, pills, powders, granules and capsules. In addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate talc are also used. Liquid preparations for oral administration include suspensions, solutions, emulsions and syrups. Various excipients such as wetting agents, sweeteners, fragrances and preservatives may be included in addition to water and liquid paraffin, which are commonly used simple diluents. have. Formulations for parenteral administration include sterile aqueous solutions, non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, freeze-dried preparations and suppositories. Examples of the non-aqueous solvent and the suspending agent include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oil such as olive oil, injectable ester such as ethyl oleate, and the like. As the base of the suppository, witepsol, macrogol, tween 61, cacao paper, laurin, glycerol and gelatin can be used.

투약 단위는, 예를 들면 개별 투약량의 1, 2, 3 또는 4 배를 포함하거나 또는 1/2, 1/3 또는 1/4 배를 포함할 수 있다. 개별 투약량은 바람직하게는 유효 약물이 1 회에 투여되는 양을 포함하며, 이는 통상 1 일 투여량의 전부, 1/2, 2/3 또는 1/4 배에 해당한다. 본 발명의 조성물의 유효용량은 100 내지 300 mg/kg이고, 바람직하게는 140 내지 270 mg/kg이며, 하루 1 내지 6 회 투여될 수 있다.The dosage unit may, for example, comprise 1, 2, 3 or 4 times the individual dose or may comprise 1/2, 1/3 or 1/4 times the individual dose. The individual dosages preferably include the amount in which the active drug is administered in one dose, which usually corresponds to the full, half, 2/3 or 1/4 times the daily dose. The effective dose of the composition of the present invention is 100 to 300 mg / kg, preferably 140 to 270 mg / kg, and 1 to 6 times a day ≪ / RTI >

본 발명의 조성물은 비만 예방 및 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.The composition of the present invention can be used alone or in combination with methods using surgery, radiation therapy, hormone therapy, chemotherapy, and biological response modifiers for prevention and treatment of obesity.

본 발명의 조성물은 비만 예방 및 개선을 목적으로 하는 건강기능식품에 첨가될 수 있다. 본 발명의 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조 시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15중량 % 이하, 바람직하게는 10 중량 % 이하의 양으로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.The composition of the present invention can be added to a health functional food for the purpose of prevention and improvement of obesity. When the composition of the present invention is used as a food additive, the composition can be added as it is or can be used together with other food or food ingredients, and can be suitably used according to a conventional method. The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to the intended use (prevention, health or therapeutic treatment). In general, the composition of the present invention is added in an amount of not more than 15% by weight, preferably not more than 10% by weight based on the raw material, in the production of food or beverage. However, in the case of long-term intake for the purpose of health and hygiene or for the purpose of controlling health, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount exceeding the above range.

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소시지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.There is no particular limitation on the kind of the food. Examples of foods to which the above substances can be added include dairy products including meats, sausages, breads, chocolates, candies, snacks, confectionery, pizza, ramen noodles, gums, ice cream, soups, drinks, tea, Alcoholic beverages, and vitamin complexes, all of which include health foods in a conventional sense.

본 발명의 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 포함할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 ml 당 일반적으로 약 0.01 내지 0.4 g, 바람직하게는 약 0.02 내지 0.03 g 이다.The health beverage composition of the present invention may contain various flavors or natural carbohydrates as an additional ingredient such as ordinary beverages. Such natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and natural sweeteners such as dextrin and cyclodextrin, synthetic sweeteners such as saccharine and aspartame, and the like . The ratio of the natural carbohydrate is generally about 0.01 to 0.4 g, preferably about 0.02 to 0.03 g per 100 ml of the composition of the present invention.

상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 포함할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일주스, 과일주스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 포함할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부 당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
In addition to the above, the composition of the present invention may further contain various nutrients, vitamins, electrolytes, flavors, colorants, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloid thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, A carbonating agent used in a carbonated beverage, and the like. In addition, the composition of the present invention may comprise flesh for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks and vegetable drinks. These components may be used independently or in combination. Although the ratio of such additives is not critical, it is generally selected in the range of 0.01 to 0.1 parts by weight per 100 parts by weight of the composition of the present invention.

이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예 및 실험예 및 제조예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예 및 실험예 및 제조예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예 및 실험예 및 제조예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다.
Hereinafter, preferred embodiments, experimental examples and production examples are provided to facilitate understanding of the present invention. However, the following Examples, Experimental Examples and Preparation Examples are provided only for the purpose of easier understanding of the present invention, and the present invention is not limited by the Examples, Experimental Examples and Preparation Examples.

실시예 1 : 실험 물질의 제조 Example 1: Preparation of experimental material

① 경신강지환18 (GGEx18)의 조성약물은 화림제약 (Busan, South Korea)에서 구입 (조성비: 마황 40%, 곤포 40%, 대황 20%)하고, 동의대학교 한의과대학 방제학교실에서 정선한 뒤 분말하였다.① The composition of Gyeongsin Kang Ji-Hwan 18 (GGEx18) was purchased from Busan, South Korea (Composition ratio: 40% for mahwang, 40% for packing, 20% for rhubarb) .

② 분쇄한 GGEx18 1 kg을 냉각기를 부착한 삼각플라스크에 담고 70 % 에탄올 (EtOH)을 1.5 L 넣은 후 2시간 동안 열수추출하였다 (1.5 L × 6).② 1 kg of ground GGEx18 was placed in a Erlenmeyer flask equipped with a cooler, and 1.5 L of 70% ethanol (EtOH) was added, followed by hot extraction (1.5 L × 6) for 2 hours.

③ 추출액을 여과하고, 회전진공증발기를 사용하여 농축하였다.(3) The extract was filtered and concentrated using a rotary vacuum evaporator.

④ 70 % 에탄올 농축액 (306.48 g)을 물 (H2O)로 녹이고 분액깔때기에 부은 후, 다이클로로메탄 (CH2Cl2)를 넣어 흔든 다음 평형화 시켰다 (나머지 70 % EtOH 농축액은 보관).④ The 70% ethanol concentrate (306.48 g) was dissolved in water (H 2 O), poured into a separatory funnel, shaken with dichloromethane (CH 2 Cl 2 ) and equilibrated (the remaining 70% EtOH concentrate was stored).

⑤ 다이클로로메탄 층 (하층)은 모아서 황산 나트륨으로 처리한 다음 여과하여 농축하고, 에틸아세테이트 (EtOAc)를 물 층에 넣어 흔든 다음 평형화시켰다.(5) The dichloromethane layer (lower layer) was collected, treated with sodium sulfate, filtered and concentrated, and ethyl acetate (EtOAc) was added to the water layer and then equilibrated.

⑥ 에틸아세테이트 층 (상층)은 모아서 황산 나트륨으로 처리한 다음 여과하여 농축하고, 부탄올 (BuOH)를 물 층에 넣어 흔든 다음 평형화시켰다.(6) The ethyl acetate layer (upper layer) was collected, treated with sodium sulfate, filtered and concentrated, and butanol (BuOH) was added to the water layer and then shaken and equilibrated.

⑦ 부탄올 층 (상층)과 물 층 (하층)을 각각 따로 모아 황산 나트륨으로 처리한 다음 여과하고 농축하여 48.71 g과 194.4 g을 얻었다 (도 1).⑦ Butanol layer (upper layer) and water layer (lower layer) were separately collected and treated with sodium sulfate, followed by filtration and concentration to obtain 48.71 g and 194.4 g (FIG. 1).

도 1에 나타낸 대로 클로로메탄 분획물(CF), 에틸아세테이트 분획물(EF), 에틸아세테이트 분획 시 에틸아세테이트와 물층을 제외한 중간물(IF), 부탄올 분획물(BF), 물 분획물(HF)을 얻어 실험에 사용하였다. (IF), butanol fraction (BF) and water fraction (HF) except ethyl acetate and water layer in the fractionation of ethyl acetate were obtained as shown in FIG. 1 Respectively.

양성 대조 물질로서 종전 발명 물질인 GGEx18을 물 (GG18) 또는 에탄올 (EGG18)로 열수추출 (1.5L씩 6번, 2시간) 한 후 농축하여 얻은 조성물을 실험에 사용하였다.
As a positive control substance, a composition obtained by concentrating GGEx18, which is a conventional invention substance, with hot water extraction (GG18) or ethanol (EGG18) (1.5 L each for 6 times and 2 hours) was used in the experiment.

실험예 1. 항 비만 효과를 확인하기 위한 동물실험 설계 Experimental Example 1. Animal experiment design for confirming anti-obesity effect

실험예1-1. 실험동물 준비Experimental Example 1-1. Preparation of experimental animals

공시동물로서는 코아텍 (Gyeonggi province, South Korea)에서 공급한 8주령의 C57BL/6N 수컷 마우스를 사용하였다. 각 군당 8마리를 체중범위에 따른 무작위법에 의하여 군 분리를 실시하고, 이를 실험에 사용하였다. 사육환경은 온도 21±2 ℃, 습도 55±5 %, 환기 횟수 15~17 회/hour, 조도 150~300 lux, 그리고 조명은 12시간 명암 (점등: 06:00, 소등: 18:00)으로 조정하여 실험기간 동안 일정하게 SPF (specific pathogen free) 상태로 유지하였다. 고형사료 (Harlan, USA)와 물은 자유 급이와 급수를 시켰다.
As a public animal, 8-week-old C57BL / 6N male mice supplied from Goyonggi province, South Korea were used. Eight groups per group were randomly divided into groups according to body weight range and used for the experiment. The incubation environment was 21 ± 2 ℃ for temperature, 55 ± 5% for humidity, 15 ~ 17 times / hour for ventilation, 150 ~ 300 lux for illumination and 12 hours for light (light: 06:00, light: 18:00) And maintained in a SPF (specific pathogen free) state during the experiment. Solid feed (Harlan, USA) and water were fed free and watered.

실험예1-2. 실험군 및 투여방법Experimental Example 1-2. Experimental group and administration method

군당 8마리 수컷 (male)을 공시하였으며, 각 분획물은 50 mg/kg의 용량으로, 전체 추출물은 250 mg/kg의 용량으로 9 주간 고지방 사료에 혼합하여 투여하였다. 비만 발생 여부를 확인하기 위하여 음성대조군 (normal group)인 C57BL/6N 군은 일반사료 (low fat)를 주어 사육하였으며 고지방 사료 (high fat)군 중 대조군 (control group)에는 어느 약물도 투약하지 않았다 (표1). Eight male males were randomly assigned to receive a 50 mg / kg dose for each fraction and a 250 mg / kg dose for 9 weeks. To determine whether obesity has occurred, C57BL / 6N group, a normal control group, was fed with low fat diet and did not take any medication in the control group of high fat diet Table 1).

GroupGroup TreatmentTreatment NumberNumber SexSex NormalNormal Low fatLow fat 88 malemale High fat + extract or fraction (㎎/㎏ BW)High fat + extract or fraction (mg / kg BW) ControlControl 00 88 malemale CFCF 5050 88 malemale EFEF 5050 88 malemale IFIF 5050 88 malemale BFBF 5050 88 malemale HFHF 5050 88 malemale EGGEx18EGGEx18 250250 88 malemale GGEx18GGEx18 250250 88 malemale

실험예 2. 체중에 대한 효과 Experimental Example 2. Effects on body weight

실험예 2-1. 체중 증가에 대한 효과Experimental Example 2-1. Effect on weight gain

9 주간의 실험 기간 동안 주 2 회 체중을 측정하여 체중 증가에 대한 효과를 확인하였다. The body weight was measured twice a week during the 9 - week experimental period to confirm the effect on body weight gain.

도 2 및 도 3에서 보는 바와 같이, 고지방사료 대조군에서 일반사료 대조군에 비해 약 40 % 체중이 증가하였다. 이에 반해 경신강지환의 열수추출물을 250 mg/kg 로 투여한 군에서는 고지방사료 대조군에 비해 약 -23.18% 체중 증가를 보였으며, BF 군은 -37.14%, CF 군은 -27.32 %, EF군은 -30.24%, IF 군은 -26.74%, HF 군은 -17.52 % 체중 증가를 보여, 상기 조성물이 체중 증가를 억제하는 효과가 있음을 확인할 수 있었다. 특히 분획물 투여군의 경우 종전 발명인 열수추출물에 비해 1/5의 용량임에도 불구하고 더 우수한 체중 증가 억제 효과를 보여 비만 예방 및 치료제로서 작용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
As shown in FIG. 2 and FIG. 3, in the high fat feed control group, the body weight was increased by about 40% as compared with the general feed control group. On the contrary, in the group treated with 250 mg / kg of hydrothermal extract of Kang Shin Jang, the weight gain was about -23.18%, -37.14% in the BF group, -27.32% in the CF group, 30.24%, -26.74% in the IF group, -17.52% in the HF group, and it was confirmed that the composition had an effect of suppressing weight gain. Particularly, in the case of the fraction-administered group, it was confirmed that it could act as a preventive and therapeutic agent for obesity because it had a better effect of inhibiting weight gain, even though it was 1/5 of the capacity of the hot-water extract of the present invention.

실험예 2-2. 식이효율에 미치는 효과Experimental Example 2-2. Effect on diet efficiency

실험 물질이 식욕과 관련이 있는지를 알아보기 위하여 체중은 매주 2회, 사료섭취량은 매주 1회 9주 동안 측정하였고, 이를 근거로 하여 식이효율을 계산하였다.To determine whether the test substances were related to appetite, body weight was measured twice a week, feed intake was measured once a week for 9 weeks, and the dietary efficiency was calculated.

식이효율은 아래의 공식에 대입시켜 최종 체중증가량을 총 사료섭취량으로 나누어 산출하고 통계 분석하였다.Dietary efficiency was calculated by dividing the final weight gain by the total feed intake by substituting into the formula below.

식이효율 (feeding efficiency ratio: FER%) = 체중증가량 (g)/사료섭취량 (g)×100Feed efficiency ratio (FER%) = weight gain (g) / feed intake (g) × 100

식이효율의 공식에서 의미하는 바와 같이 사료를 섭취하는 양이 많음에도 불구하고 체중의 증가가 적다는 것은 비만조절효과가 있는 것으로 생각할 수 있다. 따라서 식이효율은 비만을 나타내는 하나의 척도로 사용할 수 있고, 식이효율의 수치가 적을수록 비만조절효과가 있다고 할 수 있다.As indicated by the formula of diet efficiency, the low body weight gain despite the high intake of diets may be considered to have an obesity modulating effect. Therefore, dietary efficiency can be used as a measure of obesity, and the lower the dietary efficiency, the more effective it is to control obesity.

도 4에서 보는 바와 같이, 일반사료 대조군에 비해 고지방사료 대조군에서 약 50.68% 식이효율 수치가 높게 나타났으며, 이를 통해 고지방사료에 의한 비만이 발생하였음을 확인할 수 있었다. 이에 반해 종전 발명인 경신강지환의 열수추출물을 250 mg/kg로 투여한 GG18군에서는 고지방사료 대조군에 비해 식이효율이 22.76 % 낮게 나타났으며, 분획물인 BF군은 34.22 %, CF 군은 26.24 %, EF 군은 25.08 %, IF군은 23.08 %, HF군은 14.18 % 낮게 나타나 비만 조절 효과를 확인할 수 있었다. 특히 분획물 투여군의 경우 종전 발명인 열수추출물에 비해 1/5의 용량임에도 불구하고 더 낮은 식이효율 수치를 보여 비만 예방 및 치료제로서 작용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
As shown in FIG. 4, about 50.68% of the dietary efficiency was higher in the high-fat feed control group than in the general feed control group, and it was confirmed that the high fat diets resulted in obesity. In contrast, in the GG18 group treated with 250 mg / kg of hydrothermal extract of the former inventor, Kang Ji-hwan Kang Ji-hwan, the dietary efficiency was 22.76% lower than that of the high fat feed control group. In the fraction BF group, 34.22%, CF group 26.24% 25.08% in group, 23.08% in IF group and 14.18% in HF group. Particularly, in the case of the fraction-administered group, it was confirmed that even though it is 1/5 of the capacity of the hot-water extract of the present invention, the fraction has a lower dietary efficiency than that of the hot-water extract of the present invention.

실험예 3. 지방 조직 무게 변화 측정Experimental Example 3. Measurement of change in fat tissue weight

상기 실험예 2의 마우스들을 채혈 후에 부검하여 생식기 주변 백색지방조직 (EAT), 후복벽 주변 백색지방조직 (RAT), 사타구니 주변 피하지방조직 (IAT), 갈색 지방조직 (BAT)의 무게를 측정하였다. The mice of Experimental Example 2 were slaughtered and then weighed to measure the peripheral white adipose tissue (EAT), the white adipose tissue around the abdominal wall (RAT), the inguinal subcutaneous adipose tissue (IAT) and the brown adipose tissue (BAT) .

도 5에서 보는 바와 같이, 일반사료 대조군에 비해 고지방사료 대조군에서 네 가지 지방 조직의 무게가 모두 통계적으로 유의하게 증가하여 비만이 발생하였음을 확인할 수 있었다. 이에 반해 종전 발명인 경신강지환의 열수추출물을 250 mg/kg로 투여한 GG18군 및 분획물인 BF군, CF 군, EF 군, IF군, HF군에서 고지방사료 대조군에 비해 통계적으로 유의하게 EAT, RAT, IAT, BAT의 무게가 모두 감소한 것을 확인할 수 있었다. 특히 분획물 투여군의 경우 종전 발명인 열수추출물에 비해 1/5의 용량임에도 불구하고 더 낮은 지방 조직 무게를 보여 비만 예방 및 치료제로서 작용할 수 있음을 확인할 수 있었다.
As shown in FIG. 5, the weight of four adipose tissues was significantly increased in the high-fat feed control group compared with the general feed control group, indicating that obesity occurred. On the contrary, EAT, RAT, and BMI were significantly higher in GG18 group and BF group, CF group, EF group, IF group, and HF group treated with 250 mg / kg of hydrothermal extract of the former invention, IAT and BAT weight were all decreased. Particularly, in the case of the fraction-administered group, the weight of the fat tissue was lower than that of the hot-water extract of the present invention, which was 1/5 of the conventional hot-water extract.

실험예 4. 지방 조직의 조직학적 검경Experimental Example 4. Histopathological examination of adipose tissue

상기 실험예 2의 마우스에서 분리한 지방 조직을 10% 인산 완충 포르말린 (phosphate-buffered formalin)에서 하루 이상 고정하며 12시간 이상 흐르는 물에서 포르말린을 세척한 후 60 % 에탄올에서 1시간, 70 % 에탄올 에서 1시간, 80% 에탄올에서 1시간, 90 % 에탄올에서 1시간, 95 % 에탄올에서 1시간, 100 % 에탄올에서 1시간씩 단계적으로 탈수시켰다. 자일렌 (Xylen)에 1시간씩 3번의 투명과정 후 파라핀에 1시간씩 2번 침투과정을 실시하였다. 포매과정 (embedding)을 거쳐 약 3 ㎛의 두께로 박절 (section)하여 슬라이드 위에 지방 조직을 얹고 건조시킨 후 헤마토실린-에오신 (hematoxylin-eosin, H&E)염색을 하였다. 슬라이드의 물기를 없애고 마운팅 용액 (Sigma, MO, USA)을 떨어뜨려 영구보존 할 수 있도록 하였다. 조직의 사진촬영과 지방세포의 수 및 크기분석은 image analysis system (Image Pro-Plus, MD, USA)을 이용하였다.The fatty tissue isolated from the mouse of Experimental Example 2 was fixed in 10% phosphate-buffered formalin for one day. The formalin was washed with water for 12 hours or more, and then washed with 60% ethanol for 1 hour and 70% 1 hour, 1 hour in 80% ethanol, 1 hour in 90% ethanol, 1 hour in 95% ethanol, and 1 hour in 100% ethanol. Xylen was permeabilized three times per hour for 1 hour and then infiltrated 2 times for 1 hour to paraffin. After embedding, the slices were sectioned to a thickness of about 3 쨉 m. Fat tissues were laid on the slides and dried, followed by hematoxylin-eosin (H & E) staining. The slide was drained and the mounting solution (Sigma, MO, USA) was dropped to allow permanent preservation. Photographs of the tissues and the number and size of adipocytes were analyzed using an image analysis system (Image Pro-Plus, MD, USA).

도 6 및 도 7에서 보는 바와 같이, 일반사료 대조군에 비해 고지방식이 사료 대조군의 지방 세포의 크기가 통계적으로 유의하게 커진 것 (137% 증가)을 확인할 수 있다. 이에 반해 분획물 투여군의 경우 BF군은 -37 %, CF군은 -37 %, EF 군은 -30 %, IF군은 -41 %로 나타나 고지방사료 대조군에 비해 통계적으로 유의하게 지방세포의 크기가 작아진 것을 확인할 수 있다. 특히 종전 발명인 열수추출물 투여군 (-25 %)에 비해 더 작아진 것으로, 분획물 투여군이 1/5의 저 용량에도 불구하고 더 뛰어난 비만 억제 효과가 있음을 확인하였다.
As shown in FIGS. 6 and 7, it can be seen that the size of the fat cells of the high-fat diet control group was significantly increased (137%) as compared with that of the general diet control group. In contrast, in the fraction-treated group, the fat cells were statistically significantly smaller than those in the high-fat feed control group in the BF group, -37%, -30%, and -41% I can confirm that it is gone. In particular, it was found that the fraction-treated group had a better anti-obesity effect even at a low dose of 1/5 compared to the hot-water extract administered group (-25%).

실험예 5. 간 조직의 조직학적 검경Experimental Example 5: Histopathological examination of liver tissue

실험예 3과 같은 방식으로 간 조직을 처리하여 간 조직내 지방 함량을 관찰하였다. 도8 및 도 9에서 보는 바와 같이, 고지방사료 대조군의 경우 간 조직내 지방함량이 일반 사료 대조군에 비해 약 600 % 증가한 것으로 나타나, 간의 지방성이 심화되었음을 확인할 수 있었다. 반면, 분획물 투여군의 경우 BF군은 -86 %, CF 군은 -86 %, EF 군은 86 %, IF 군은 -86 %, HF 군은 -86 %로 나타나, 분획물 투여에 의해 간내 지방 축적이 효과적으로 억제된 것을 확인할 수 있었다.
The liver tissue was treated in the same manner as in Experimental Example 3 to observe the fat content in liver tissue. As shown in FIG. 8 and FIG. 9, in the case of the high fat feed control group, the fat content in the liver tissue was increased by about 600% as compared with that in the general feed control group. On the other hand, in the fraction-treated group, -86% in the BF group, -86% in the CF group, 86% in the EF group, -86% in the IF group, and -86% It can be confirmed that it is effectively suppressed.

실험예 6. 간 기능에 미치는 영향Experimental Example 6: Effect on liver function

마우스의 혈액에 대한 생화학 분석을 위하여, 마우스 혈액 채취는 마우스를 12 시간 절식시킨 후 디에틸 에테르 (diethyl ether)로 마취한 다음 개복하여 복대정맥에서 혈액 1㎖을 채취하여 고속원심분리기 (Micro 12, Hanil, Korea)를 이용하여 5000 rpm에서 10 분간 원심분리하여 혈장 분리 후 -70 ℃에 보관하고, 혈액생화학분석기 (Selectra 2, Vitalab, Netherlands)를 사용하여 asparate aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT)의 혈중 농도를 각각 측정하였다.For the purpose of biochemical analysis of mouse blood, mice were fasted for 12 hours and then anesthetized with diethyl ether. Then, 1 ml of blood was collected from the abdominal vein and centrifuged in a high speed centrifuge (Micro 12, (AST) and alanine aminotransferase (ALT) were measured using a blood biochemical analyzer (Selectra 2, Vitalab, Netherlands) after centrifugation at 5,000 rpm for 10 minutes. Were measured.

AST와 ALT는 간 이상을 확인할 수 있는 지표로, 상기 효소의 증가는 간에 손상이 있음을 나타낸다. AST and ALT are indicators of hepatic abnormality, and the increase of the enzyme indicates that there is liver damage.

도 10에서 보는 바와 같이 AST의 경우 모든 그룹에서 통계적으로 유의한 증감은 보이지 않았으며, ALT의 경우 일반사료 대조군에 비해 고지방사료 대조군에서 수치가 증가한대 반해, 경신강지환의 전체 추출물 및 분획물 투여군에서는 통계적으로 유의한 감소 수치를 보였다. 이를 통해 경신강지환의 전체 추출물 및 분획물이 간 조직에 손상을 입히지 않으면서 비만 치료 효능을 나타냄을 확인하였다.
As shown in FIG. 10, there was no statistically significant increase or decrease in AST in all groups. The ALT increased in the high-fat diet control group compared to the general diet control group, whereas the total extract and fraction administration group , Respectively. The results showed that total extracts and fractions of Kyeongsin Kang Ji - hwan showed the therapeutic effect of obesity without damaging liver tissue.

실험예 7. 지표 성분 분석Experimental Example 7:

각각의 분획물에 대하여 지표성분인 에페드린과 센노사이드 A의 함량비를 분석한 결과이다 (표 2). For each fraction, the ratio of ependrine to sennoside A was analyzed (Table 2).

에페드린결과Ephedrine results 센노사이드A 결과Sennoside A result HF : 0.26%HF: 0.26% HF: 0.07%HF: 0.07% BF : 4.06%BF: 4.06% BF:0.16%BF: 0.16% IF  : 1.0%IF: 1.0% IF:0.14%IF: 0.14% EF : 0.71%EF: 0.71% EF: 3.33%EF: 3.33% CF : 0.91%CF: 0.91% CF: 0.1%CF: 0.1% EGG18 : 1.30%EGG18: 1.30% EGG18:0.48%EGG18: 0.48% GG18 : 0.81%GG18: 0.81% GG18:0.02%GG18: 0.02%

이하 본 발명의 상기 조성물을 포함하는 약학적 조성물 및 건강기능식품의 제제예를 설명하나, 본 발명은 이를 한정하고자 함이 아닌 단지 구체적으로 설명하고자 함이다.
Hereinafter, a pharmaceutical composition containing the composition of the present invention and an example of a preparation of a health functional food will be described, but the present invention is not intended to be limited thereto but is specifically described.

제제예 1. 산제의 제조Preparation Example 1. Preparation of powder

경신강지환의 분획물 2 gFraction of Kangshin Kang Ji Hwan 2 g

유당 100 mgLactose 100 mg

탈크 10 mgTalc 10 mg

상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조한다.
The above components are mixed and filled in airtight bags to prepare powders.

제제예 2. 정제의 제조Formulation Example 2. Preparation of tablets

경신강지환의 분획물 100 mg100 mg of the fractions of Kangshin Kang Ji Hwan

옥수수전분 100 mgCorn starch 100 mg

유당 100 mgLactose 100 mg

스테아린산 마그네슘 2 mgMagnesium stearate 2 mg

상기의 성분들을 혼합한 후 통상의 정제의 제조방법에 따라서 타정하여 정제를 제조한다.
After mixing the above components, tablets are prepared by tableting according to the usual preparation method of tablets.

제제예 3. 캅셀제의 제조Formulation Example 3. Preparation of capsules

경신강지환의 분획물 100 mg100 mg of the fractions of Kangshin Kang Ji Hwan

결정성 셀룰로오스 3 mgCrystalline cellulose 3 mg

락토오스 14.8 mgLactose 14.8 mg

마그네슘 스테아레이트 0.2 mgMagnesium stearate 0.2 mg

통상의 캡슐제 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합하고 젤라틴 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조한다.
The above components are mixed according to a conventional capsule preparation method and filled in gelatin capsules to prepare capsules.

제제예 4. 주사제의 제조Formulation Example 4. Preparation of injection

경신강지환의 분획물 100 mg100 mg of the fractions of Kangshin Kang Ji Hwan

만니톨 180 mg180 mg mannitol

주사용 멸균 증류수 2974 mgSterile sterilized water for injection 2974 mg

Na2HPO4·2H2O 26 mgNa 2 HPO 4 .2H 2 O 26 mg

통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플당 (2 ml) 상기의 성분 함량으로 제조한다.
(2 ml) per 1 ampoule in accordance with the usual injection preparation method.

제제예 5. 액제의 제조Formulation Example 5. Preparation of a liquid preparation

경신강지환의 분획물 100 mg100 mg of the fractions of Kangshin Kang Ji Hwan

이성화당 10 g10 g per isomer

만니톨 5 g5 g mannitol

정제수 적량Purified water quantity

통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합한 다음 정제수를 가하여 전체를 정제수를 가하여 전체 100 ml로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조한다.
Each component was added and dissolved in purified water according to the usual liquid preparation method, and the lemon flavor was added in an appropriate amount. Then, the above components were mixed, and purified water was added thereto. The whole was added with purified water to adjust the total volume to 100 ml, And sterilized to prepare a liquid preparation.

제제예 6. 건강식품의 제조Formulation Example 6. Preparation of Healthy Foods

경신강지환의 분획물 1 g1 g of fraction of Kangshin Kang Ji Hwan

비타민 혼합물 적량Vitamin mixture quantity

비타민 A 아세테이트 70 μg Vitamin A acetate 70 μg

비타민 E 1.0 mgVitamin E 1.0 mg

비타민 B1 0.13 mgVitamin B1 0.13 mg

비타민 B2 0.15 mg0.15 mg of vitamin B2

비타민 B6 0.5 mgVitamin B6 0.5 mg

비타민 B12 0.2 μg Vitamin B12 0.2 μg

비타민 C 10 mgVitamin C 10 mg

비오틴 10 μg Biotin 10 μg

니코틴산아미드 1.7 mgNicotinic acid amide 1.7 mg

엽산 50 μg Folic acid 50 μg

판토텐산 칼슘 0.5 mgCalcium pantothenate 0.5 mg

무기질 혼합물 적량Mineral mixture quantity

황산제1철 1.75 mg1.75 mg of ferrous sulfate

산화아연 0.82 mg0.82 mg of zinc oxide

탄산마그네슘 25.3 mgMagnesium carbonate 25.3 mg

제1인산칼륨 15 mgPotassium monophosphate 15 mg

제2인산칼슘 55 mgSecondary calcium phosphate 55 mg

구연산칼륨 90 mgPotassium citrate 90 mg

탄산칼슘 100 mgCalcium carbonate 100 mg

염화마그네슘 24.8 mgMagnesium chloride 24.8 mg

상기의 비타민 및 미네랄 혼합물의 조성비는 비교적 건강식품에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만, 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하며, 통상의 건강식품 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 과립을 제조하고, 통상의 방법에 따라 건강식품 조성물 제조에 사용할 수 있다.
Although the composition ratio of the above-mentioned vitamin and mineral mixture is comparatively mixed with a composition suitable for health food as a preferred embodiment, the compounding ratio may be arbitrarily modified, and the above ingredients are mixed according to a conventional method for producing healthy foods , Granules can be prepared and used in the manufacture of health food compositions according to conventional methods.

제제예 7. 건강음료의 제조Formulation Example 7. Preparation of health drink

경신강지환의 분획물 1 g1 g of fraction of Kangshin Kang Ji Hwan

비타민 C 15 gVitamin C 15 g

비타민 E(분말) 100 gVitamin E (powder) 100 g

젖산철 19.75 g19.75 g of ferrous lactate

산화아연 3.5 g3.5 g of zinc oxide

니코틴산아미드 3.5 gNicotinic acid amide 3.5 g

비타민 A 0.2 gVitamin A 0.2 g

비타민 B1 0.25 gVitamin B1 0.25 g

비타민 B2 0.3gVitamin B2 0.3g

물 정량Water quantification

통상의 건강음료 제조방법에 따라 상기의 성분을 혼합한 다음, 약 1시간 동안 85 ℃에서 교반 가열한 후, 만들어진 용액을 여과하여 멸균된 2 l 용기에 취득하여 밀봉 멸균한 뒤 냉장 보관한 다음 본 발명의 건강음료 조성물 제조에 사용한다.The above components were mixed according to a conventional health drink manufacturing method, and the mixture was stirred and heated at 85 DEG C for about 1 hour. The solution thus prepared was filtered and sterilized in a sterilized 2 liter container, It is used in the production of the health beverage composition of the invention.

상기 조성비는 비교적 기호음료에 적합한 성분을 바람직한 실시예로 혼합 조성하였지만 수요계층이나, 수요국가, 사용용도 등 지역적, 민족적 기호도에 따라서 그 배합비를 임의로 변형 실시하여도 무방하다.Although the compositional ratio is relatively mixed with a component suitable for a favorite drink, it is also possible to arbitrarily modify the compounding ratio according to the regional or national preference such as the demand class, the demanding country, and the use purpose.

Claims (4)

마황, 곤포 및 대황을 원료 생약의 중량기준으로 10% 내지 50% : 20% 내지 50% : 20% 내지 50%의 중량비로 배합하여 제조한 경신강지환18 (GGEx18)을 50 % 내지 80 % 농도의 에탄올로 추출 및 농축한 후, 이를 다이클로로메탄, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물 순으로 계통 분리하여 얻어진 분획물;을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물.(GGEx18) prepared by blending 10% to 50%: 20% to 50%: 20% to 50% by weight of a raw material, A fraction obtained by extracting and concentrating the extract with ethanol and then separating the extract into dichloromethane, ethyl acetate, butanol and water in order; and a pharmaceutical composition for preventing and treating obesity. 제1항에 있어서, 상기 분획물은 부탄올 분획물인 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.2. The pharmaceutical composition according to claim 1, wherein the fraction is a butanol fraction. 마황, 곤포 및 대황을 원료 생약의 중량기준으로 10% 내지 50% : 20% 내지 50% : 20% 내지 50%의 중량비로 배합하여 제조한 경신강지환18 (GGEx18)을 50 % 내지 80 % 농도의 에탄올로 추출 및 농축한 후, 이를 다이클로로메탄, 에틸아세테이트, 부탄올 및 물 순으로 계통 분리하여 얻어진 분획물;을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 개선용 건강기능식품.(GGEx18) prepared by blending 10% to 50%: 20% to 50%: 20% to 50% by weight of a raw material, Extracting and concentrating the extract with ethanol, fractionating the extract with dichloromethane, ethyl acetate, butanol and water in order; and a health functional food for preventing and improving obesity. 제3항에 있어서, 상기 분획물은 부탄올 분획물인 것을 특징으로 하는 건강기능식품.
4. The health functional food according to claim 3, wherein the fraction is butanol fraction.
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