KR20130113430A

KR20130113430A - 신경 연결의 발달 장애에 대한 ｅｒｋ 억제제

Info

Publication number: KR20130113430A
Application number: KR1020137005737A
Authority: KR
Inventors: 마크 에이. 스미스; 마이클 스네이프
Original assignee: 케이스 웨스턴 리저브 유니버시티
Priority date: 2010-08-05
Filing date: 2011-08-05
Publication date: 2013-10-15
Also published as: EP2600862B1; CA2807510A1; AU2011285611A1; WO2012019113A2; CN103221043A; EP2600862A2; AU2011285611B2; WO2012019113A3; EP2600862A4; ES2575995T3; US20150141380A1; CN103221043B

Abstract

본 발명은 ERK 이상과 관련하여 취약 X염색체 증후군 또는 자폐 스펙트럼 장애를 갖는 것으로 의심되거나 상기 장애를 가질 위험이 있는 대상체를 치료하는 방법에 관한 것으로 상기 방법은 신경 연결의 비정상을 방지하는 적어도 하나의 ERK 억제 화합물, 상기 억제제로 대사되는 이의 프로드럭(prodrug), 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염을 치료학적으로 유효한 양으로 대상체에 투여하는 것을 포함한다.

Description

신경 연결의 발달 장애에 대한 ＥＲＫ 억제제 {INHIBITORS OF ERK FOR DEVELOPMENTAL DISORDERS OF NEURONAL CONNECTIVITY}

본 출원은 2010년 8월 5일에 출원된 U.S.S.N. 61/370,854 및 2010년 10월 21일에 출원된 U.S.S.N. 61/405,369에 우선권의 이익을 주장한다. 상기 출원 모두는 참조에 의해 이의 전체가 본원에 혼입된다.

본 발명은 유년기에 개시되는 질병으로서 신경연결이 손상되어 나타나는 정상적인 뇌 발달과 인지기능이 손상되는 질환의 치료에 관한 것이다.

취약 X염색체 증후군(Fragile X Syndrome)과 자폐증 같은 발달장애는 유년기 초기에 개시되며, 일생 동안 지속 되고, 뇌 기능이 손상되는 특징이 있다. 질병에 걸린 사람은 정상 뇌 기능에 관련되는 복합적인 능력에 영향을 받는다. 예를 들어, 취약 X염색체 증후군과 자폐증 모두에서 인지, 감각인식, 사회행동, 의사소통, 운동능력이 영향받을 수 있다. 이런 조건은 정상적인 뇌 발달의 실패로부터 발생하고 뇌 구조의 총체적인 손상보다는 극미의 해부적인 수준에서 발생하는 문제이다.

취약 X염색체 증후군은 유전적으로 심각한 신경손상을 받아서 지능적으로 장애가 다양한 정도로 나타나고 다양한 정신적인 증상을 보인다. 이 질병은 주로 FRM1 유전자의 전사 침묵(transcriptional silencing)에 의해 나타나고(Verkerk et al. Cell vol 65 1991 pp 905-914), 기능적으로 대체 가능한 단일유전자 질환을 일으킨다(Hagerman West J Med vol 166 1997 pp 129-137). 취약 X염색체 증후군은 유전적인 지능장애의 가장 큰 단일원인이다. 취약 X염색체 증후군에 대한 승인 받은 치료가 없다. 그러므로 이런 질병의 근본이 되는 병리학을 다루는 새로운 치료방법이 의학적으로 필요하다.

자폐증은 자폐 스펙트럼 장애를 설명하는 용어로서 전반적 발달장애인 자폐성 장애, 아스퍼거 장애와 비전형성 전반적 발달장애(PDD-NOS)로 알려져 있다. 이런 상태들이 정신질환치료의 진단과 통계적 책자(DSM-IV)와 질병과 관련 문제들에 대한 국제적인 분류(ICD-10)에 따르면 진단 특징으로 인지되고 있다(Tidmarsh and Volkmar Can J Psychiatry vol. 48 2003 pp 517-525). 자폐성 스펙트럼 장애는 대략 150명 중 한 명에게 영향을 미친다(Autism and Developmental Disabilities Monitoring Network Surveillance Year 2002 Principal Investigators; Centers for Disease Control and Prevention, MMWR Surveill Summ. Vol. 56 2007 pp 12-28).

현재 자폐 스펙트럼 장애의 핵심 증후에 대한 치료방법은 없다. 두 가지 비전형적인 정신병 치료제인 리스페달(RISPERDAL)과 아빌리파이(ABILIFY)가 미국에서 어린이와 어른에 대한 자폐성 장애의 과민성에 대한 치료로 승인받았다. 자폐 스펙트럼 장애에 대한 모든 주증상에 대한 임상적인 효과를 보이는 치료제에 대해 이용 가능한 잘 조절된 자료가 없다. 그러므로 자폐 스펙트럼 장애의 근본적인 병리학을 다루는 새로운 치료제가 의학적으로 필요하다.

발명의 요약

본 발명은 ERK 이상과 관련하여 취약 X염색체 증후군 또는 자폐 스펙트럼 장애를 갖는 것으로 의심되거나 상기 장애를 가질 위험이 있는 대상체를 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 방법은 신경 연결의 비정상을 방지하는 적어도 하나의 ERK 억제 화합물, 상기 억제제로 대사되는 이의 프로드럭(prodrug), 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염을 치료학적으로 유효한 양으로 대상체에 투여하는 것을 포함한다. 특정 관점에서, 상기 화합물은 MEK, ERK의 억제제이거나 ERK의 활성의 하류 부문(down-stream) 효과를 억제한다.

다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)설파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카복사마이드, 2-[(2-플루오르-4-요오도페닐)아미노]-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카복사마이드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카복사마이드, 2-[(2-클로로-4-요오도페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자마이드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-히드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)설파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴, 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-히드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-퓨린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군에서 선택된다.

또한 다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)설파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카복사마이드, 2-[(2-플루오르-4-요오도페닐)아미노]-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카복사마이드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카복사마이드, 2-[(2-클로로-4-요오도페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자마이드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-히드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온 및 (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)설파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐] 프로프-2-엔니트릴으로 이루어진 군에서 선택되는 MEK 억제제이다.

다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-히드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-퓨린-6-일]아미노}벤조산으로 구성되는 군에서 선택되는 ERK 억제제이다.

다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 하나 이상의 이의 입체이성체 형태일 수 있다. ERK를 억제하는 화합물은 자폐 스펙트럼 장애를 치료하는데 사용되는 적어도 하나 이상의 치료제와 조합으로 투여될 수 있다. 상기 치료제는 항우울제, 항정신병제, 자극제 및 기타 약물로 이루어진 군에서 선택된다. 하나 이상의 부가적인 치료제가 리스페리돈(risperidone), 아리피프라졸(aripiprazole), 시탈로프람(citalopram), 에스시탈로프람(escitalopram), 서트랄린(sertraline), 메틸페니데이트(metylphenidate), 아토목세틴(atomoxetine), 메만틴(memantine), 미노사이클린(minocycline)으로 이루어진 군에서 선택된다.

또한 다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 정제, 트로키, 로젠지, 수층과 유층의 현탁액, 분산 가능한 분말, 과립, 유제, 경질캡슐, 연질캡슐, 시럽, 엘릭서제로 이루어진 군에서 선택되는 약학적으로 허용되는 형태로 제공될 수 있다. 상기 ERK를 억제하는 화합물은 대상체에게 별도, 동시, 순차 또는 지속적으로 방출되도록 제형화 될 수 있다.

다른 관점에서, 상기 자폐 스펙트럼 장애는 자폐성 장애, 아스퍼거 장애, 비전형성 전반적 발달장애(PDD-NOS) 또는 ERK 기능이 비정상적인 환자의 부분집합으로부터 선택된다.

본 발명은 또한 ERK의 비정상과 연관되는 취약 X염색체 증후군(Fragile X Syndrome) 또는 자폐 스펙트럼 장애의 치료를 위한 약물의 제조에 있어서 신경연결의 비정상을 방지하기 위한 ERK 억제 화합물 단독 또는 조합, 상기 화합물로 대사되는 이의 프로드럭(prodrug) 또는 약제학적으로 허용 가능한 이의 염의 용도에 관한 것이다.

특정 관점에서, 상기 화합물은 MEK, ERK의 억제제이거나 ERK의 활성의 하류 부문(down-stream) 효과를 억제한다.

다른 관점에서, ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)설파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카복사마이드, 2-[(2-플루오르-4-요오도페닐)아미노]-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카복사마이드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카복사마이드, 2-[(2-클로로-4-요오도페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤즈아미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-히드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)설파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴, 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-히드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-퓨린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군에서 선택된다.

또한 다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)설파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카복사마이드, 2-[(2-플루오르-4-요오도페닐)아미노]-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카복사마이드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카복사마이드, 2-[(2-클로로-4-요오도페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤즈아미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-히드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온 및 (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)설파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐] 프로프-2-엔니트릴으로 이루어진 군에서 선택되는 MEK 억제제이다.

다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-히드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-퓨린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군에서 선택되는 ERK 억제제이다.

다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 하나 이상의 이의 입체이성체 형태일 수 있다. 상기 약물은 상기 ERK를 억제하는 화합물과 조합으로 사용되는 자폐 스펙트럼 장애를 치료하는데 사용되는 적어도 하나 이상의 치료제일 수 있다. 상기 치료제는 항우울제, 항정신병제, 자극제 및 기타 약물로 이루어진 군에서 선택된다. 하나 이상의 부가적인 치료제가 리스페리돈, 아리피프라졸, 시탈로프람, 에스시틸로프람, 서트랄린, 메틸페니데이트, 아토목세틴, 메만틴, 미노사이클린으로 구성되는 군에서 선택된다.

또한 다른 관점에서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 정제, 트로키, 로젠지, 수층과 유층의 현탁액, 분산 가능한 분말, 과립, 유제, 경질캡슐, 연질캡슐, 시럽, 엘릭서제로 이루어진 군에서 선택되는 약제학적으로 허용 가능한 형태로 제공될 수 있다. 상기 ERK를 억제하는 화합물은 대상체에게 별도, 동시, 순차 또는 지속적으로 방출되도록 제형화 될 수 있다.

도 1은 신경의 가소성 및 연결, 수지상 형태(dendritic morphology) 및 뇌의 기능과 관련된 세포 내 MAPK 경로를 도시한다.
도 2는 해마 부분에 pERK 국재화를 나타내는 이미지를 도시한다. FXS의 경우에 신경 핵과 세포질에서 pERK가 가장 높은 수준으로 발견되었다. CA1/CA2 부위의 대표적인 부분은 FXR의 9세(A), 21세(B) 경우를 나타낸다. 모든 대조군은 해마에서 pERK의 정상수준을 포함하고 있다(20세,C). 삽입된 C도면은 67세 대조군에서 피라미드 신경(pyramidal neuron)의 극히 적은 수에서 과립공포변성(granulovascular degeneration)을 보여주며, 이러한 변화는 정상적인 노화에 따라 계속된다. FXTAS의 71세 경우는 FXS와 비교하여 신경의 pERK(D)가 상대적으로 낮다. 눈금 선= 50 μm
도 3은 4개의 FXS 케이스, 4개의 FXTAS 및 7세에 대응하는 대조군에서 면역블롯(immunoblot)(A)과 ERK와 인-ERK(p-ERK)의 정량분석(B와 C)을 보여주는 차트를 도시한다. 상기 차트는 비록 상대적인 ERK 수준(ERK/Actin)이 현저하게 바뀌지 않았지만(B), 상대적인 p-EPK 수준(B), 상대적인 ERK 수준(C), 상대적인 p-EPK/ERK의 비(D)가 FXS와 FXTAS 뇌 샘플 모두에서 현저하게 증가하였음을 보여준다. 모든 샘플은 또한 액틴(actin)을 감지하기 위해 항체로 면역블롯팅되었다. (*p < 0.05, student-t-test).
도 4는 자폐 스펙트럼 장애를 가진 경우와 신경학적으로 정상인 뇌에서 인-ERK 및 관련된 단백질의 발현을 설명한다. 현미경 사진은 인산기가 붙은 항체를 사용하여 라벨링된 인산화된 단백질 및 발색체로 디아미노벤지딘의 면역조직화학적 염색을 보여준다. 조직은 피질이다. 자폐 환자는 9세와 11세 이였고 자폐증으로 진단받았다. 첫번째 줄은 pERK를 염색한 정상군(A)과 자폐증 환자군(B)의 조직을 보여준다. 두번째 줄은 pMEK를 염색한 정상군(C)과 자폐증 환자군(D)의 조직을 보여준다. 세번째 줄은 pMSK2를 염색한 정상군(E)과 자폐증 환자군(F)의 조직을 보여준다.
도 5는 Tween80 비히클 처리한 대조군과 비교하여, 취약 X염색체 증후군의 fmr1 유전자를 결손하여 형질변환한 마우스 모델에서 자폐성 발작에 대한 SL327(400 mg.kg.^-1 IP)의 효과를 보여주는 차트를 도시한다. 군당 10마리 동물로부터의 데이터이다. SLP327을 처리한 경우 완전하게 모든 경련 활동을 억제한 반면에, 처치하지 않은 동물의 대략 70%에서 소리에 기인하는 발작을 보였다. 경련 개시에 대한 잠복기(초)는 또한 처치한 군에서 현저하게 감소하였다. 처치한 마우스는 어떤 경련활동도 보이지 않았기 때문에 이들의 잠재점수는 청력 자극의 최대전체시간인 240초로 보고되었다. 테스트 이후 생존 확률 또한 SLP327 처리에 따라 25%에서 100%로 증가하였다.
도 6은 경련에 대한 잠복기에 대한 MPEP와 페릴릴 알코올의 효과를 나타내는 차트를 도시한다. 데이터는 평균± SEM을 나타낸다. 별표(*p<0.05)는 각각의 비히클에 비교하여 중요한 차이점을 나타낸다.
도 7은 호흡정지에 대한 잠복기에 대한 MPEP와 페릴릴 알코올의 효과를 나타내는 차트를 도시한다. 데이터는 평균± SEM을 나타낸다. 별표(*p<0.05)는 각각의 비히클에 비교하여 중요한 차이점을 나타낸다.
도 8은 평균 발작 점수에 대한 MPEP와 페릴릴 알코올 효과를 도시한다. 데이터는 평균± SEM을 나타낸다. 별표(*p<0.05)는 각각의 비히클에 비교하여 중요한 차이점을 나타낸다.

발명의 설명

본원에서 특별한 언급이 없는 한, 모든 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 통상의 기술자에 의해 보편적으로 이해되는 바와 동일한 의미로 사용되었다. 이하의 정의는 본원 발명을 설명하기 위한 명세서와 청구항에 사용된 용어를 명확히 하기 위해 제공된다.

본원에 사용된 "하나" 와 "하나의"는 하나 또는 하나 이상(최소 하나)임을 나타내는 문법적 목적을 나타내기 위해 사용되었다. 예를 들면, "하나의 요소"의 의미는 하나의 요소 또는 하나 이상의 요소을 의미한다.

"포함한다", "포함", "갖는" 및 "가지다"는 추가적인 요소를 포함할 수 있는 포괄적인, 개방형 의미로 사용된다. 본원에 사용되는 용어 "이와 같은" 및 "예를 들어"는 범위를 제한하지 않고 오로지 설명하는 목적으로만 사용되었다. "포함하는" 및 "포함하지만 이에 제한되지 않는"은 서로 대체하여 사용할 수 있다.

본원에서 사용된 용어 "또는"은 문맥에서 명확하게 다른 것으로 지칭하지 않는 한, "및/또는"을 의미하는 것으로 이해되어야 한다.

본원 발명의 화합물의 일부 구조는 비대칭 탄소 원자(키랄)를 포함한다. 달리 지칭하지 않는 한, 비대칭 구조로 인해 생기는 이성질체는 본 발명의 범위내에 포함되는 것으로 이해된다. 이러한 이성질체는 전통적인 분리기술과 입체화학적 조절 합성법을 통하여 실질적으로 순수한 형태로 얻을 수 있다. 본원 발명의 화합물은 입체이성질체 형태로 존재할 수 있고, 따라서 각각의 입체이성질체에 따라 화합물이 생성되거나 혼합물의 형태로 생성될 수 있다.

"이성질화"는 동일한 분자식을 가지고 있으나 성질, 원자 결합 시퀀스 또는 원자들의 공간 배열이 다른 화합물을 의미한다. 원자들의 공간 배열이 상이한 이성질체를 "입체 이성질체"라 한다. 서로 거울상이 아닌 입체 이성질체를 " 부분입체 이성질체"라 하고, 서로 포개지지 않는 비대칭 거울상을 가지는 입체 이성질체를 "거울상 이성질체" 또는 때로는 광학 이성질체라 한다. 네 개의 서로 다른 치환기와 결합하는 탄소원자를 "키랄 중심"이라 한다.

"키랄 이성질체"는 최소 하나 이상의 키랄 중심을 가지는 화합물을 의미한다. 이는 반대의 키랄성을 가지는 두 개의 거울상 형태를 가지고, 각각의 거울상 이성질체로 존재하거나 거울상 이성질체의 혼합물로서 존재할 수 있다. 반대의 키랄성을 가지는 각각의 거울상 이성질체를 동일한 양으로 혼합한 것을 "라세미 혼합물"이라 한다. 하나 이상의 키랄 중심을 가지는 화합물은 2n-1개의 거울상 이성질체 쌍을 가지고, 여기에서 n은 키랄 중심의 개수이다. 하나 이상의 키랄 중심을 가지는 화합물은 각각 부분입체 이성질체로 존재하거나, 부분입체 이성질체의 혼합물로 존재할 수 있고, 이를 "부분입체 이성질체 혼합물"이라 한다. 하나의 키랄 중심이 존재하는 경우, 입체 이성질체는 절대 배열(R 또는 S)로 나타낼 수 있다. 절대배열은 키랄 중심에 붙어있는 치환기들의 공간상 배열을 의미하는 것이다. 고려 대상이 되는 키랄 중심에 붙어있는 치환기들은 칸, 인골드 및 프레로그의 '순서 규칙'에 따라 분류된다. (Cahn et al, Angew. Chem. Inter. Edit. 1966, 5, 385; errata 511; Cahn et al., Angew. Chem. 1966, 78, 413; Cahn and Ingold, J Chem. Soc. 1951 (London), 612; Cahn et al., Experientia 1956, 12, 81; Cahn, J., Chem. Educ. 1964, 41, 116).

"기하학적 이성질체"는 이중결합에 대해 제한된 회전을 가지는 부분입체 이성질체를 말한다. 이들의 배열은 칸-인골드-프레로그 규칙에 따라 분자의 이중결합을 기준으로 해당 그룹이 동일면에 있거나 반대면에 있는지를 나타내도록 접두사 시스 및 트랜스, 또는 Z 및 E를 사용하여 명명한다.

나아가, 본원에 개시된 화학식 및 기타 화합물은 이의 모든 아트로픽 이성질체를 포함한다. "아트로픽 이성질체"는 입체 이성질체의 일종으로, 두 개의 이성질체의 원자가 공간상에서 다른 배열을 이루는 것을 지칭힌다. 아트로픽 이성질체는 중심 결합에 대해 큰 치환기들이 회전장애를 유발하여 회전이 제한되는 이성질체를 의미한다. 이러한 아트로픽 이성질체는 전형적으로 혼합물로 존재하지만, 최근의 크로마토그래피 기술 발전으로 인해 두 개의 아트로픽 이성질체 혼합물을 분리하는 것이 가능해졌다.

본원에서 사용된, 용어 "취약 X 염색체 증후군"은 비정상적으로 기능하는 FMR1유전자에 의해 유발되는 장애로, 인구의 약 1/4000의 빈도를 가진다.

본원에서 사용된, 용어 "자폐 스펙트럼 장애"는 정신의학적 또는 신경의학적 장애로 신경계의 장애를 유발할 수 있다. 예를 들면, 자폐장애, 아스퍼거 증후군 및 비전형성 전반적 발달장애(PDD-NOS)가 있다. 자폐 스펙트럼 장애의 빈도는 일반 대중을 기준으로 1/150로 추정되고, 미국에는 180만 명의 환자가 있으며 유럽에는 3백만 명 이상의 환자가 있는 바, 본원 발명이 도움이 될 것이다.

본원에서 사용된, 용어 "환자" 및 "대상체"는 임의의 동물도 포함하며, 특정한 치료를 받는 대상인 사람 및 사람 이외의 동물(설치류, 절지동물류, 곤충, 어류(예. 지브라피쉬), 사람 이외의 영장류, 양류, 소류, 반추류, 토끼류, 돼지류, 염소류, 말류, 개류, 고양이류, 조류 등을 포함하나, 이에 제한되는 것은 아니다. 일반적으로 용어 "환자" 및 "대상체"는 인간 대상체와 관련하여 상호대체되어 사용될 수 있다.

본원에서 사용된, 용어 "조절하다"는 생물학적 활성 분자의 생물학적 활성을 변경하는 것을 의미한다. 조절은 활성을 증가 또는 감소시킬 수 있고, 결합 특성을 바꿀 수 있거나, 생물학적 활성 분자의 생물학적, 기능적 또는 면역학적 성질을 변화시킬 수 있다.

본원에서 사용된, 용어 "인 비트로"는 인공적인 환경을 의미하고, 인공적인 환경에서 일어나는 과정이나 반응을 의미한다. 인비트로 환경은 시험관와 세포 배양으로 구성되나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본원에서 사용된, 용어 "인 비보"는 자연적인 환경(동물 또는 세포)를 의미하고, 자연적인 환경에서 일어나는 과정이나 반응을 의미한다.

본원에서 사용된, 용어 "시험 화합물"은 약효를 가지는 임의의 화합물을 의미하고, 이와 같은 화합물은 신체의 장애, 질병을 치료하거나 예방하는 데 사용될 수 있다. 시험 화합물은 잘 알려진 화합물과 잠재적인 약효를 가지는 화합물 모두를 포함할 수 있다. 시험 화합물은 본원 발명의 스크리닝 방법을 사용하여 스크리닝함으로써 약효를 결정할 수 있다. "알려진 치료 화합물"은 치료 또는 예방에 효과적이라고 공지된(동물 실험을 통한 또는 인간에게 투여하기 전인) 치료 화합물을 의미한다.

용어 "치료하는"은 기술분야에 인식된 것(art-recognized)으로, 예를 들어 이의 진행을 방해하는 것과 같이 대상체에서 질환, 장애 또는 상태를 억제하는 것; 및 예를 들어 질환, 질병 및/또는 상태의 퇴행을 야기하는 것과 같이 질환, 장애 또는 상태를 경감시키는 것을 포함한다. 질환 또는 상태의 치료는 병리생리학적으로 효과가 없다고 하더라도, 특정 질환 또는 상태의 적어도 하나의 증상을 개선하는 것을 포함한다.

용어 "예방"은 기술분야에 인식된 것으로, 질환, 장애 및/또는 상태에 이미 해당하나 아직 진단되지는 않은, 대상체에게 발생하는 질환, 장애 또는 상태를 중단시키는 것을 포함한다. 질환과 관련된 상태를 예방하는 것은 질환 진단 이후 및 상태의 진단 이전에 상기 상태가 발생하는 것을 중지시키는 것을 포함한다.

본원에서 사용된, 증후군의 "감소" 는 증후군의 강도 또는 빈도를 완화하는 것 또는 증후군을 제거하는 것을 의미한다.

본원에서 사용된, 대상체에게 약을 "투여"하는 것은 자가-투여를 포함한 직접투여 및 간접투여를 모두 포함하고, 약을 처방하는 행위도 포함한다. 본원에서 사용되었듯이, 예를 들어 의사가 환자에게 약물을 자가-투여 방법을 알려주는 것 및/또는 환자에게 처방전을 제공하는 것을 환자에게 약을 투여하는 것이라고 지칭한다.

본원에서 사용된, 질환의 "징후"는 상기 질환을 가진 대상체에서 증상, 표시, 해부학적 상태, 생리학적 상태 또는 특성 보고를 나타낸다.

본원에서 사용된, 약물 또는 시약의 "치료적 유효량"은 질환 또는 상태를 가지는 대상체에게 투여할 때 목적하는 치료 효과(예 ; 대상체에서 질환 또는 상태의 하나 또는 그 이상의 징후의 경감, 개선, 완화 또는 제거를 나타내는) 약물 또는 시약의 양을 의미한다. 약을 한번 복용하는 것으로 완전한 치료효과가 반드시 나타나지 않고, 일련의 약을 복용한 후에야 치료 효과가 나타날 것이다. 그러므로 치료적 유효량은 한 번 또는 그 이상으로 약물을 투여할 수 있다.

본원에서 사용된, 약물의 "예방적 유효량"은 대상체에게 약물을 투여할 때 예방 효과(예; 질병 또는 증후군의 예방, 발병 지연, 재발 지연 또는 질병 또는 증후군의 발병 감소, 재발 감소)를 낼 수 있는 약물의 양을 의미한다. 약을 한번 복용하는 것으로 반드시 완전한 예방효과가 나타나지 않고, 일련의 약을 복용한 후에야 예방 효과가 나타날 것이다. 그러므로 예방적 유효량만큼 투여하려면 한 번 또는 그 이상으로 약물을 투여할 수 있다.

"비경구 투여"는 기술분야에 인식된 것으로, 주입과 같은 경관투어 및 국소투여를 포함한다. 또한, 제한 없이 정맥, 근육 내, 흉막 내, 혈관 내, 심막 내, 동맥 내, 척수관, 관절 내, 안와 내, 심장 내, 피내(皮內), 복강 내, 경기관, 피하, 표피, 관절 내, 피막, 지주막 하, 척수 내 및 줄기 내 주입 및 투입을 포함한다.

본원에 사용된, "전신 투여", "전신으로 투여된", "말초 투여" 및 "말초로 투여된" 동물의 시스템에 도입되어 대사 및 기타 유사과정을 겪도록 피하 투여와 같이, 중추 신경 시스템에 직접 투여하는 것 이외에, 화합물, 약물 또는 기타 물질을 투여하는 것을 의미한다.

"약제학적 조성물"은 대상체에게 투여하기 위해 적당한 형태로서, 개시된 화합물을 포함하는 제제형이다. 바람직한 양태에서, 약제학적 조성물은 대량 또는 단위 제형으로 제공된다. 단위 제형은 예를 들어, 캡슐, 정맥주사 백, 태블릿, 에어로졸 인헤일러의 한번의 펌프 또는 바이알의 형태를 포함하는 임의의 다양한 형태든 가능하다. 조성물의 단위 용량의 활성 성분(예 ; 개시된 화합물의 화학식 또는 이의 염)의 용량은 효과적인 양이고, 관련된 특정 치료에 따라 그 양은 변한다. 이 분야의 통상의 기술자는 대상체의 나이 및 상태에 따라 정해진 용량범위의 통상적인 변경이 필요하다는 것을 이해할 것이다. 복용량은 투여경로에 따라서도 달라질 수 있다. 경구, 폐, 직장 내, 비경구, 경피, 피하, 정맥, 근육 내, 복강 내 및 비강 내 투여 등과 같은 다양한 방법이 고려된다. 본원 발명의 화합물의 국부 투여 또는 경피 투여를 위한 투여형태는 파우더, 스프레이, 연고, 페이스트, 크림, 로션, 젤, 액체, 패치 및 흡입제가 있다. 바람직한 양태에서, 활성 화합물은 약제학적으로 허용가능한 담체, 방부제, 완충용액 또는 필요하다면 추진제와 함께 살균 조건에서 혼합된다.

"플래쉬 투여"는 급속히 분산되는 투여 형태인의 화합물 제형을 의미한다.

용어 "즉시 방출"은 비교적 짧은 시간에 제형으로부터 화합물이 방출되는 것을 말하는데, 통상적으로 약 60분 이내를 말한다. "조절된 방출"은 지연 방출, 연장 방출 및 펄스형 방출을 의미한다. 용어 "펄스형 방출"은 투여형태로부터 약물이 연속적으로 방출되는 것을 의미한다. "지연 방출" 또는 "연장 방출"은 장기적인 기간 동안 제형으로부터 화합물이 계속적으로 방출되는 것을 의미한다.

"약제학적으로 허용되는"은 기술분야에 인식된 것으로, 특정 양태에서, 상기 용어는 타당한 판단의 범위 내에서 제형이 인체 및 동물의 조직에 접촉하여 사용하기에 적합하고, 맹독성, 자극, 알레르기 반응 또는 기타 문제 또는 합병증 없이 적당한 이익/위험 비율을 갖는 조성물, 중합체 및 기타 물질 및/또는 투여 형태를 포함한다.

"약제학적으로 허용가능한 담체"는 기술분야에 인식된 것으로, 예를 들어 액체 또는 고체 충진제, 희석제, 부형제, 용매 또는 캡슐화 물질과 같은 약제학적으로 허용되는 물질, 조성물 또는 비히클을 포함한다. 이는 몸의 일기관 또는 부분으로부터 다른 몸의 기관 또는 다른 부분으로 임의의 대상 조성물을 운반 또는 수송하는데 관여한다. 각 담체는 반드시 환자에게 해를 주지 않고 대상 조성물의 다른 성분과 양립할 수 있다는 의미에서 "허용가능"해야 한다. 특정 양태에서, 약제학적으로 허용가능한 담체는 비발열성이다. 약제학적으로 허용가능한 담체로서 이용되는 몇 가지 물질을 예로 들면 : (1) 락토오스, 글루코오스 및 수크로스와 같은 당; (2) 옥수수 전분 및 감자 전분 같은 전분; (3) 소듐 카르복시메틸 셀룰로오스, 에틸 셀룰로오스, 셀룰로오스 아세테이트와 같은 셀룰로오스 및 이의 유도체; (4) 분말 트래거캔스; (5) 맥아; (6) 젤라틴; (7) 탈크(talc); (8) 코코아버터 및 좌제 왁스 같은 부형제; (9) 땅콩 기름, 목화씨 기름, 해바라기씨 기름, 참깨 기름, 올리브 기름, 옥수수 기름 및 콩 기름 같은 기름; (10) 프로필렌 글리콜과 같은 글리콜; (11) 글리세린, 소르비톨, 만니톨 및 폴리에틸렌 글리콜과 같은 폴리올; (12) 에틸 올레산 및 에틸 라우린산과 같은 에스터; (13) 아가; (14) 마그네슘 하이드록사이드 및 알루미늄 하이드록사이드와 같은 버퍼; (15) 알긴산; (16) 무-발열원 물; (17) 등장액; (18) 링거액; (19) 에틸 알콜; (20) 인산염 완충용액; 및 (21) 제약 처방약품에 사용되는 그 밖의 허용가능한 비-독성 물질.

본원 발명의 화합물은 나아가 염을 형성할 수 있다. 염의 모든 형태 또한 본원 발명에 속한다.

화합물의 "약제학적으로 허용가능한 염"은 약제학적으로 허용가능하고 목적하는 모 화합물의 약리학적 활성을 지닌 염을 의미한다. 예를 들어, 염은 산 부가염일 수 있다. 일 양태에서, 산 부가염은 염화수소산 염이다. 약제학적으로 허용가능한 염은 염기 또는 산 잔기를 포함하는 모 화합물로부터 전통적인 화학합성 방법에 의해 합성될 수 있다. 일반적으로 이러한 염들은 물, 유기용매 또는 물과 유기용매가 섞인 용매상에서 적당한 산 또는 염기와 해당 화학당량의 화합물이 가지는 유리산 또는 유리염기 형태와 반응함으로써 합성된다. 일반적으로 비-수용성 매질로 에테르, 에틸 아세테이트, 에탄올, 아이소프로판올 또는 아세토나이트릴이 이용된다. Remington's Pharmaceutical Sciences 18판에서 상기 염들을 정리하였다. (Mack Publishing Company, 1990). 예를 들어, 본원발명의 상기 염은 본 발명의 지방족 아민 함유, 하이드록시 아민 함유 및 이민 함유 화합물의 염화수소 염 및 아세테이트 염을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

약제학적으로 허용가능한 염에 대한 모든 언급은 본원에서 정의한 바와 같이, 상기 동일한 염의 용매 첨가 형태(용매화물) 또는 결정 형태(다형)를 포함하는 것으로 이해되어야 한다.

또한, 본원에서 설명되는 화합물은 약제학적으로 허용가능한 프로드럭와 같이 프로드럭 형태로 합성될 수 있다. 용어 "프로-드럭" 및 "프로드럭"는 상호교환되어 사용할 수 있고, 인 비보상에서 활성 모약물을 방출하는 임의의 화합물에서나 사용될 수 있다. 프로드럭은 약제의 수많은 특징(예 ; 용해도,생물학적 이용가능성, 제조 등)을 향상시킨다고 알려져왔기 때문에, 본원 발명의 화합물은 프로드럭 형태로 제공될 수 있다. 그러므로, 본원발명은 청구항의 화합물의 프로드럭, 이의 전달 방법 및 이를 포함하는 조성물을 포함하고자 한다. "프로드럭"는 대상체에게 투여될 때, 인비보상에서의 본원발명의 활성 모약물을 방출하는 임의의 공유 결합 담체를 포함하도록 의도된다. 기능기를 수정하면서 제조되는 본원발명의 프로드럭은 통상적인 조작에 의해서나 인 비보상에서 모 화합물도 잘려지도록 화합물에 존재하는 기능기를 변형함으로써 제조된다. 프로드럭은 본 발명의 화합물의 하이드록시, 아미노, 설프히드릴, 카르복시 또는 카르보닐 기가 인 비보상에서 절단되어 유리 하이드록실 기, 유리 아미노, 유리 설프히드릴, 유리 카복실 또는 유리 카보닐기를 형성하는 임의의 기에 결합된 화합물을 포함한다.

프로드럭의 예는 에스터(예 ; 아세테이트, 다이알킬아미노아세테이트, 포름산, 인산염, 황산염 및 벤조산 유도체); 및 하이드록시 기능기 그룹의 카르바민산(예 ; N,N-다이메틸아미노카르보닐), 카르복실 기능기 그룹의 에스터 그룹(예 ; 에틸 에스터, 모르폴리노에탄올), N-아실 유도체(예 ; N-아세틸) N-마니히 염기, 시프 염기 및 화학식1의 화합물과 같은 아미노 기능기, 옥심, 아세탈, 케탈 및 케톤과 알테하이드 기능기의 엔올 에스터의 엔아미논을 포함하지만, 이에 제한되는 것은 아니다(Bundegaard, H. "Design of Prodrugs" p1-92, Elesevier, New York-Oxford, 1985).

시약을 "~와 조합하여"또는 "~와 함께" 투약하는 것은 병행 투여(한 달간 격일로 투여하는 것과 같이 일정 기간 이상 환자에게 두 시약을 투여하는 것), 공동 투여 (동 시간에 즉시 두 시약을 투여하는 것, 예 ; 수 분에서 몇 시간 이내에 다른 시약을 투여하는 것), 및 공동처방 (시약을 혼합하거나 경구 또는 비경구 투여에 적당한 하나의 제제로 혼합하는 것)을 의미한다..

본원 발명은 비정상적인 ERK와 관련된 취약 X 염색체 증후군 또는 자폐 스펙트럼 장애를 가지고 있는 것으로 의심되거나 해당 질병에 대한 위험성을 가지는 대상체를 치료하는 조성물과 치료 방법에 관한 것이다.

자폐증과 취약 X 염색체 증후군의 생물학적 특징은 매우 유사하고, 종합적인 증상이 겹쳐진다. 이는 두 질병의 뉴런 구조를 현미경 조사 수준에서 관찰하여 알 수 있다. 취약 X 염색체 증후군에서는 뉴런과정의 미세구조가 변한다. 즉, 취약 X 염색체 증후군에서는 수상돌기 척추밀도가 증가한다. 또한, 자폐증을 앓는 몇몇 대상체의 뉴런과정의 미세구조도 변하였다. 비특이적인 장애의 경우를 일단 제외하면, 수상돌기 척추밀도는 자폐증을 앓는 몇몇 대상체에게서만 증가하였다. 수상돌기 척추밀도의 증가는 증상이 악화됨에 따라 현저해진다.

수상돌기의 척추밀도는 뉴런간의 시냅스 연결 수를 반영하고, 그 수는 변경될 수 있다. 뇌 기능의 장애는 취약 X염색체 증후군과 자폐증에서 관찰되었고, 이는 돌기 척추밀도의 변화가 매개하는 뉴런 연결 가소성의 조절 장애로 인한 것이다. BDNF와 같은 신경 영양 요인은 자폐증에서 증가하고, 이는 잠재적으로 돌기 척추밀도를 증가시킨다. 취약 X염색체 증후군에서는 FRMP의 결여로 LTD에 실패하였고, 척주 밀도에서 시냅스 연접 유도 또는 적당한 감소유도에 실패하였다. 그러므로 척추 밀도 증가의 부적당한 감소 또는 척추 밀도 감소의 실패로 인해 뇌 기능 장애인 자폐증과 취약 X 염색체 증후군일 발생함을 알 수 있다.

척추 밀도의 유도는 세포외 신호조절 인산화효소(ERK)의 활성화에 의존한다. ERK의 유도는 전사 인자의 활성화의 개시 및 LTP의 유지에 있어서의 단백질의 합성 및 수상돌기의 발생을 위해 필요하다. Fig. 1은 이러한 기능 및 신경 가소성 및 연결성과 관련하여 ERK의 활성의 기초가 되는 세포 내 신호 경로를 나타낸다.

ERK의 기능은 취약 X염색체 증후군에 있어 연구되었다. 취약 X염색체 증후군의 형질전환마우스(fmr1 KO 마우스) 모델로부터의 신경 및 말초 조직, 및 FXS 환자들로부터의 말초조직을 사용한 다수의 연구들은 ERK 인산화에 대하여 조사하였다. Hou 등 (Hou, Antion, Hu 등, Neuron. Vol. 51 2006 pp 441-454)은 컨트롤(control) 동물들에 있어서 대사형 글루탐산 (mGluR) 수용체 자극 이후에 나타난 ERK의 인산화는 존재하지 않음을 나타냈다. 이러한 자극 유도된 ERK 인산화의 부재는, fmr1 KO 마우스로부터의 외피 시냅토뉴로솜에서의 자극 유도 ERK 인산화의 부재를 보고한 Kim 등 (Kim SH, Markham JA, Weiler IJ, Greenough WT. Proc Natl Acad Sci U S A. Vol. 105 2008 pp 4429-4434)에 의해서 반복되었다. 실제로, 이 연구에서, mGluR 매개된 자극은, 포스파타아제의 부적절한 활성화에 의해 매개되어, ERK의 지속적인 탈인산화를 유도하였다. 이러한 fmr1 KO 마우스 뇌에서의 ERK 인산화의 결핍된 유도는, fmr1 KO 마우스 및 FXS 환자들로부터의 말초 조직에서 자극된 ERK 인산화가 악화되었음을 보고한 Weng 등 (Weng N, Weiler IJ, Sumis A, Berry-Kravis E, Greenough WT. Am J Med Genet B Neuropsychiatr Genet. Vol. 147B 2008 pp 1253-1257)에 의해 반복 및 확장되었다. 결국, 이러한 데이터는 취약 X염색체 증후군에 있어 인산화된 ERK의 수준이 감소되었음을 시사한다.

ERK 인산화가 취약 X염색체 증후군에 있어 감소될 것이라는 점에 대한 상기 예측은 이러한 증상을 갖는 환자들의 뇌 조직에 대해서는 시험되지 않았다. 따라서, 인산화된 ERK 수준에 대하여 FXS 및 FXTAS 환자의 사후의 사람 뇌조직을 검사하였다. 놀랍게도, 면역조직화학염색을 사용하여 시각화 하였을 때, 인산화된 ERK 수준은 증가하였다 (Fig. 2). 이러한 발견을 확인하기 위하여 웨스턴블럿 분석이 사용되었다 (Fig. 3). 취약 X염색체 증후군 및 자폐증은 주증상 및 일부 케이스 신경의 수지상 조직에 있어서 중첩되는 것으로 나타나므로, 자폐증 뇌 또한 검사하였다 (Fig. 4). 척추 밀도의 증가의 부적절한 유도가 발생한 이러한 장애 모델에 의해 예측되는 바와 같이, 자폐증에 있어서도 ERK 수준이 증가하였다.

실시예에 나타난 데이터는, 취약 X염색체 증후군의 뇌 및 적어도 자폐증을 가진 환자들의 부분집합에서 ERK 활성이 비정상적으로 증가하였음을 나타낸다. 더 나아가, 이러한 ERK 활성의 비정상적인 증가는, FMRP의 감소 및 카데린에서의 유전적 다형성과 같은 질병 유발 인자, 및 사이토카인 및 뉴로트로핀 수준을 증가시키는 환경 인자가 척추 밀도의 비정상적 변화로 해석되는, 뉴런 내에서의 최종 일반 경로이다. 대체된 척추 밀도는 결국 대체된 신경 가소성을 야기하고, 따라서 뇌 기능의 방해를 야기한다.

과다한, 향상된, 또는 비정상으로 높은 ERK 활성의 억제는 취약 X염색체 증후군 및 자폐증의 일부 케이스의 증상을 역전시킨다는 것이 밝혀졌다. 예로서, fmr1 KO 마우스에서 상기 억제의 효과가 조사되었다. 취약 X염색체 증후군의 소아 케이스에서와 같이, 유년 fmr1 KO 마우스는 간질 성향을 보였다. 간질의 성향은 자폐증에 있어서도 일반적이다. 따라서 컨트롤 비히클 용액 또는 화합물 SL327 중 어느 것에 의한 치료의 존재 하에 fmr1 KO 마우스에 있어 청원발작 활성이 조사되었다. SL327은 MEK의 강력하고 선택적인 억제제이다. MEK는 ERK의 상류활성인자이므로, SL327에 의한 억제는 ERK 활성을 감소시킬 것이다. SL327은, fmr1 KO 마우스의 청원발작의 발현을 현저하게 길항시켰고, 예를 들어 이 화합물의 투여에 의해 발작 작용이 완전히 예방되었다.

이론에 부합할 것이라는 기대 없이, 직접적 또는 그의 상류 또는 하류 제어 성분에 의한 ERK의 억제는, 취약 X염색체 증후군 및 자폐증에 있어서, 유전적 비정상성, 또는 유전적 비정상성 및 환경적 자극의 상호작용에 의해 야기된 신경의 가소성의 비정상적인 규제를 예방할 것으로 생각되었다. 따라서, 신경 ERK 기능의 조절은, 자폐증 및 취약 X염색체 증후군에서의 정확한 기능을 회복시키고, 따라서 이들 장애의 증상을 감소시키기 위해 사용될 수 있다. 이들 유형의 장애의 치료는 취약 X염색체 증후군 또는 자폐증에서 나타나는 ERK 기능의 증가를 비활성화시키는 것일 수 있다.

따라서 본 출원은, ERK의 비정상성과 수반된 취약 X염색체 증후군 및 자폐 범주성 장애의 위험이 있거나 의심되는 대상체를, 약제학적으로 유효한 양의 신경의 연결성의 비정상성을 예방하는 ERK 억제 화합물, 또는 대사에 의해 상기 화합물 또는 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 구성하는 이의 프로드럭을 투여하여 치료하는 조성물 및 방법에 관련된 것이다. ERK 억제 화합물은 ERK를 포함하는 신호 경로에 작용하고 신경 연결성의 비정상성을 예방하는 모든 화합물을 포함할 수 있다.

본 출원의 일부 실시예에서는, ERK 억제 화합물은 MEK의 억제제와 같이 MEK를 통해 작용하는 MAPK의 간접적 억제제를 포함할 수 있다. MEK의 억제제의 예는, MEK의 억제제인 (Clark 등, Clin Canc Res 9 2003 pp 4494-4505), 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온 (PD98059) (Romerio 및 Zella FASEB J. Vol. 16 2002 pp.1680-1682), (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)설파닐]메틸리덴}부탄디니트릴 (U0126) (Duncia 등, Bioorg Med Chem Lett. Vol. 8 1998 pp. 2839-2844), 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오로-N-(2-히드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카복스아마이드 (AZD6244 (ARRY-142886)) (Yeh 등, Clin Cancer Res vol. 13 2007 pp 1576-1583), 2-[(2-플루오로-4-아이도페닐)아미노]-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카복스아마이드 (또는 2-(4-클로로-2-플루오로-아닐리노)-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카복스아마이드) AZD8330 (ARRY-424704) (Chung 등, Clin Cancer Res. Vol. 15 2009 pp 3050-3057), 2-[(2-클로로-4-아이도페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오로벤즈아마이드(CI-1040) (LoRusso 등, (2005) J Clin Oncol vol. 23 2005 pp 5281-5293), (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-히드록시-3-메톡시벤질)디히드로퓨란-2(3H)-온 (악티게닌) (Jang 등, J.Neurosci.Res. vol 68 2002 pp 233-240), (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)설파닐]-2-[2-(트리플루오로메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴 (SL327) (Wang 등, J.Pharmacol.Exp.Ther. vol. 304 2003 pp 172-178), 및 페릴릴 알콜 또는 [(4S)-4-(프로프-1-엔-2-일)시클로헥스-1-엔-1-일]메탄올을 포함할 수 있다.

MEK의 억제제의 추가적인 예는, U0125(1,4-디아미노-2,3-디시아노-1,4-비스(페닐티오)부타디엔), PD 0325901, AS703026, ARRY-438162, GDC-0973, GSK1120212, RO4987655, RDEA119, TAK-733, E6201, CI-1040 , PD 318088, PD 0316684, PD 0188563, PD 169842, PD 0335676, PD 0184264, PD184352, ARRY-509, AR-00241389, GC63, G8935, 이소티아졸, LL,Z-1640, 하이포더마이신, L-783,277, 10-Z-히메니알디신, RO-09-2210, 87-250940, XL-518, AR119, AS-701173, AS-701255, 360770-54-3, NAMI-A , 6-(4-브로모-2-클로로-페닐아미노)-7-플루오로-3 (테트라히드로-피란-2-일메틸)-3H-벤조이미다졸-5 카복실산 (2-히드록시-에톡시)-아마이드, 1 -[6-(4-브로모-2-클로로-페닐아미노)-7-플루오로-3 메틸-3H-벤조이미다졸-5-일]-2-히드록시-에타논, 6-(4-브로모-2-클로로-페닐아미노)-7-플루오로-3 메틸-3H-벤조이미다졸-5-카복실산 (2-히드록시-1,1 -디메틸-에톡시)-아마이드, 6-(4-브로모-2-클로로-페닐아미노)-7-플루오로-3 (테트라히드로-퓨란-2-일메틸)-3H-벤조이미다졸-5-카복실산 (2-히드록시-에톡시)-아마이드, 6-(4-브로모-2-플루오로-페닐아미노)-7-플루오로-3 메틸-3H-벤조이미다졸-5-카복실산 (2-히드록시-에톡시)-아마이드 및 6-(2,4-디클로로-페닐아미노)-7-플루오로-3-메틸 3H-벤조이미다졸-5-카복실산 (2-히드록시에톡시)-아마이드, 6-(4-브로모-2-클로로-페닐아미노)-7-플루오로-3 메틸-3H-벤조이미다졸-5-카복실산 (2-히드록시-에톡시)-아마이드, 이하에서는 MEK 억제제 1이라 하는; 2-[(2-플루오로-4-아이도페닐)아미노]-N-(2-히드록시에톡시)-l,5-디메틸-6-옥소-l,6-디히드로피리딘-3-카복스아마이드; 이하에서는 MEK 억제제 2라 하는; 4-(4-브로모-2-플루오로페닐아미노)-N-(2-히드록시에톡시)-l,5-디메틸-6-옥소-l,6-디히드로피리다진-3 카복스아마이드 4-(4-브로모-2-플루오로페닐아미노)-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리다진-3-카복스아마이드, 6-(4-브로모-2-클로로-페닐아미노)-7-플루오로-3-메틸-3H-벤조이미다졸-5-카복실산 (2-히드록시-에톡시)-아마이드, 2-(2-플루오로-4-아이도페닐아미노)-N-(2-히드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디히드로피리딘-3-카복스아마이드, 2-{[3-({4-[(5-{2-[(3 플루오로페닐)아미노]-2-옥소에틸}-1H-피라졸-3-일)아미노]퀴나졸린-7-일}옥시)프로필] (에틸)아미노}에틸 디히드로겐 포스페이트 및 이의 약제학적으로 허용가능한 염을 포함할 수 있다.

MEK의 억제제의 또 다른 예들은 미국 특허 번호 7,517,994, 7,732,616, 7,893,065, 6,147,107, 6,319,955, 7,528,166, 6,063,383, 6,703,420, 6,972,298, 7,169,816, 6,696,440, 7,235,537, 7,425,637, 5,525,625, 6,150,401, 6,346,282, 6,949,558, 6,573,044, 및 6,512,010에 개시되어 있으며, 이들은 모두 그 전체로서 참조 문헌으로서 본원에 혼입되어 있다.

다른 실시예에서, ERK 억제 화합물은 ERK의 억제제를 포함할 수 있다. ERK의 억제제의 예는 히페리신 (Romerio 및 Zella FASEB J. Vol. 16 2002 pp.1680-1682), 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움 (FR 180204) ((Ohori 등, Biochem Biophys Res Commun. Vol. 336 2005 pp. 357-363), N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오로메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루오로제틴 (Valjent 등, Eur J Neurosci. Vol. 19 2004 pp. 1826-183) 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-히드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-퓨린-6-yl]아미노}벤조산 (푸르발라놀) (Knockaer 등, Oncogene. Vol. 21 2002 pp 6413-6424)을 포함할 수 있다.

ERK 억제제의 다른 예는 PD173074, SC1 (플루리포틴), GW5074, BAY 43-9006, AG 99, CAY10561, ISIS 5132, 아피게닌, SP600125, SU4984, SB203580, PD169316, 및/또는 ERK 활성 억제 펩타이드, AG1478, 3-시아노-4-(페녹시아닐노)퀴놀린 (위드-어스트(Wyeth-Ayerst) 화합물 14와 같은), MEK1의 아미노-말단 13에 상응하는 펩타이드를 포함한다. ERK의 또 다른 실시예는, 그 전체로 본원에 혼입되어 있는 미국 특허 번호 6,495,582에 개시된 것과 같은, 피라졸 조성물 및 이소옥사졸 조성물을 포함한다. 사용될 수 있는 ERK 억제제의 또 다른 실시예는 미국 특허 공개 2003/0060469 (Ludwig S. 등,); 미국 특허 공개 2004/0048861 (Bemis G. 등,); 및 미국 특허 공개 2004/0082631 (Hale M. 등,)에 개시된 것, 일본 특허 공개공보 (Tokkai) 번호 2005-330265에 개시된 ERK 억제제, 5-아이도튜베르시딘 (4-아미노-5-아이도-7-(β-D-리보퓨라녹실)피롤로[2,3-d]-피리미딘), 3-(2-아미노에틸)-5-[(4-에톡시페닐)메틸렌]-2,4-티아졸리딘디온을 포함하며, 이는 그 전체가 참조로서 혼입되어 있다.

ERK의 또 다른 억제제는 미국 특허 번호 7,517,994, 7,732,616, 7,893,065, 6,147,107, 6,319,955, 7,528,166, 6,063,383, 6,703,420, 6,972,298, 7,169,816, 6,696,440, 7,235,537, 7,425,637, 5,525,625, 6,150,401, 6,346,282, 6,949,558, 6,573,044, 및 6,512,010에 개시되어 있으며, 이는 모두 그 전체가 본원에 참조로서 혼입되어 있다.

상기 열거된 치료약 또는 그의 약제학적으로 허용가능한 염 또는 그의 유도체는, 희석제, 충전제, 염, 완충제, 안정제, 용해제, 등과 같은 적합한 약제학적으로 허용가능한 담체와 함께, 약제학적 제형으로 제조될 수 있다. 상기 제형은 pH, 삼투성, 맛, 점성, 멸균율, 친유성, 용해성 등과 같은 조건을 조절하기 위한 다른 약제학적으로 허용가능한 부형제를 포함할 수 있다.

적합한 제형은, 지속적 방출 및 지연된 방출 제형을 포함하는, 예를 들어, 정제, 캡슐, 파우더, 분산가능 입자, 카시에(cachet) 및 좌약과 같은 고체 제형을 포함한다.

파우더 및 정제는 일반적으로 약 5% 내지 약 70%의 유효 성분을 포함할 것이다. 적합한 고체 담체 및 부형제는 일반적으로 당업계에 알려져 있으며, 이는 예를 들어, 마그네슘 카보네이트, 마그네슘 스테아레이트, 타크, 당, 락토스, 등을 포함한다. 정제, 파우더, 카시에 및 캡슐은 모두 경구 투약에 적합한 제형이다.

액체 제형은 용액, 현탁액 및 에멀젼을 포함한다. 액체 제제는 정맥내, 대뇌내, 복강내, 비경구 또는 근육내 주사 또는 인퓨젼(infusion)으로 투여될 수 있다. 멸균된 주사가능한 제제는 비독성, 약학적으로 허용가능한 희석제 또는 용제 내의 유효 약물의 멸균 용액 또는 현탁액을 포함할 수 있다. 희석제 또는 용제는 멸균수, Ringer 용액 및 등장 식염 용액 등을 포함할 수 있다. 액체 제형은 또한 비강내 투여를 위한 용액 또는 분무액을 포함한다.

흡입을 위한 에어로졸 제제는 액체 및 파우더 형태의 고체를 포함할 수 있고, 이는 비활성 압축 가스와 같은 약제학적으로 허용가능한 담체와 결합될 수 있다.

크림, 로션, 에어로졸 및/또한 에멀전을 포함한 경피투여를 위한 제제 또한 포함된다. 이들 제형은 당업계에 일반적으로 알려진 매트릭스 또는 저장기(reservoir) 유형의 경피 패치에 포함될 수 있다.

약제학적 제제는, 약제학적 제형의 표준 과정에 따라, 편리하게 단위 투약형으로 제조될 수 있다. 단위 투약량 당 유효 화합물의 양은 상기 유효 화합물의 성질 및 의도하는 투약 체제에 따라 달라질 수 있다. 일반적으로 이는 0.1 mg 내지 1000 mg의 범위 내일 것이다.

ERK 억제 화합물은 단독으로, 즉, 단일 요법으로, 또는 하나 이상의 자폐 범주성 장애의 치료를 위해 허가되어 또는 오프 라벨로 현재 사용되는 화합물과 함께, 보조 요법으로 사용될 수 있다. ERK 억제 화합물과 함께 사용될 수 있는 하나 이상의 현재 사용되는 화합물은 항-우울제, 항-정신병제, 각성제 또는 다른 약물로 이루어지는 군으로부터 선택될 수 있고, 바람직하게는 리스페리돈(RISPERDAL), 아리피프라졸(ABILIFY), 시탈로프람 (CELEXA), 에스시탈로프람 (LEXAPRO), 세르트랄린(ZOLOFT), 메틸페니데이트(RITALIN), 아토목세틴(STRATTEA), 메만틴memantine (NAMENDA) 또는 미노사이클린(MINOCIN)으로부터 선택된다.

ERK 억제 화합물은 취약 X염색체 증후군 또는 자폐 범주성 장애를 치료하기 위한 약물의 제조에서 사용될 수 있다. 본원에 개시된 약물은 하나 이상의 목표하는 ERK 억제 화합물(들)의 전구약 및/또는 상기 언급된 보조 약물을 포함할 수 있다.

치료적 사용에 있어, 유효 화합물은 경구로, 직장으로, 비경구적으로 또는 흡입으로 (폐를 통한 투약) 투여될 수 있다. 특히 소아 및 청소년들에 대한 투여에 있어서는 경구 투여가 바람직하다. 따라서, 본원에 개시된 약물은 그러한 투여 방법을 위한 공지된 모든 약제학적 조성물의 형태를 가질 수 있다. 상기 조성물은 본원 용법에 따른 약물에 포함된 유효성분의 제어된 방출, 예를 들어 신속한, 확장된 또는 지속된 방출이 이루어지도록 당해 분야의 숙련된 기술자에게 알려진 방법으로 제조될 수 있다.

ERK 억제 화합물이 보조 요법으로 또는 다른 약물과의 복합 용법으로 제공될 경우, ERK 억제 화합물 및 기타 약물은 별개의 제형으로 혼입되거나 단일의 제형으로 제조될 수 있다. 별개로 혹은 복합 제형으로 제조되었던 간에, 환자의 신체에 각각의 약물의 동시의, 순차적인 또는 확장된 방출을 도모하는 것이 좋을 수 있다. 따라서, 단일의 제형은 당업계에 알려진 어떠한 전형적인 제조 방법에 의해 상기 유효 성분의 제어된 방출을 위해 제조될 것이고, 별개의 제형은 순차적인, 즉, 시차를 둔 투약 체제에 따라 투여될 수 있다. 또한, 상기 약물이 그 유효 화합물로 MAPK 억제 화합물 만을 포함한다고 하더라도, 그럼에도 불구하고, 역시 당업계에 공지된 전형적인 제조 방법에 따라, 환자에게로의 제어된 방출을 위한 약물을 제조할 것이 바람직할 수 있다.

이러한 조성물에 사용되기에 적합한 약제학적으로 허용가능한 담체는 당업계에 잘 알려져 있다. 본원에 사용된 약물은 약 0.1 내지 약 99 중량%의 유효 화합물을 포함할 수 있고, 전형적으로 다른 환자 유형 및/또는 목표하는 투약 체제에 따른 다른 약물의 세기에 대하여 표준화된 유효 수준에 따라 제조된 유효 화합물의 비율을 포함할 수 있다.

상기 약물은 일반적으로 단위 제형으로 제조될 수 있다. 단위 제형은 상기 하나 이상의 유효 성분을 약 0.1 내지 약 1000 mg 포함한다. 이들 약물의 상기 제조에 사용되는 부형제는 이러한 목적을 위해 당업계에 알려진 표준화된 부형제일 수 있다. 적합한 투여 량은 당업계의 숙련된 기술자에게 알려진 어떠한 적합한 방법에 의해 정해질 수 있다. 그러나, 어떠한 특정 환자에 대한 특수한 투여 량은 사용된 특수한 화합물의 활성, 나이, 체중, 일반적 건강, 성별, 식이요법, 투여 시간, 투여 경로, 배설 속도, 약물 조합 및 치료받는 질병의 심각성을 포함하는 다양한 요소에 따라 달라진다는 것이 이해된다.

편리하게, ERK 억제 화합물 단독으로 혹은 다른 약믈과 조합되던 간에, 본원에 개시된 약물은, 상기 약물, 및 하나 이상의 자폐 범주성 장애 및, 바람직하게는 자폐 장애, 아스페러거 증후군 또는 달리 특정되지 않은 전반적 발달 장애, 또는 취약 X염색체 증후군의 치료를 위해 사용되는 것이라는 지시를 포함하는 키트의 형태로 제공된다. 상기 약물이 ERK 억제 화합물 및 별개의 제형으로 하나 이상의 추가적인 약물을 포함할 경우, 상기 지시는 사용될 투여 체제의 상세를 제공한다.

상기 발명은 다음의 실시예에 의해 더 설명되나, 이는 청구항의 범위를 제한하는 것은 아니다.

실시예 1

최근 동물 연구들은 ERK 인산화(phosphorylation)의 불완전한 제어가 FXS에서 병리학적으로 중요하다고 제시한다. 본 실시예에서, Fmr1 KO 마우스의 거동에서 MEK 억제제의 효과를 테스트하였고, ERK 인산화에서 MEK의 역할을 확인하였다. 그러나, 세포내 신호생성 경로의 제어는 종 및 조직에 따라 상이할 수 있기 때문에, FXS 및 FXTAS 환자들의 뇌 조직에서 ERK 인산화가 비정상적인지를 판단하는 것이 중요하다. 중요한 병리학적 표식들을 밝히고, FXS의 치료 표적 개발에 이 과정의 잠재적 중요성을 감안하면, 이는 인간의 뇌 조직에서 변경된 ERK 인산화의 첫 시험이다.

방법들

조직

분자 테스트(표 1)로 확진된 9, 20, 22, 23, 62 및 86세의 취약 X 염색체 증후군(Fragile X syndrome) 환자들에서 인간 ERK 경로들의 조사를 실시하였다. 70, 72 및 81세의 FMR1 유전자의 불완전돌연변이(premutation) 대상체들도 또한 이용하였다(표 1). 자폐증의 경우, 9 및 11 세의 소아들도 이용하였다. 백질 및 해마의 뉴우런 및 신경교에서 분석을 실시하였다.

취약 X 염색체 증후군 및 FXTAS 증례들

진단	연령	고정됨	동결됨	성별
대조군	8		예	남
대조군	9	예		여
대조군	14		예	남
대조군	21	예		남
대조군	32	예		여
대조군	42		예	남
대조군	65		예	여
대조군	68	예		남
대조군	74		예	남
대조군	75		예	여
대조군	81		예	남

FXS	10	예	예	남
FXS	22	예		남
FXS	23	예	예	남
FXS	63	예	예	남
FXS	86		예	남
불완전돌연변이	70		예	남
불완전돌연변이	72	예	예	남
불완전돌연변이	81		예	남

본 실시예를 위하여, Maryland 대학의 발달 장애들을 위한 NICHD 뇌 및 조직 은행으로부터 구한 4가지 증례의 Fragile X 및 1가지 증례의 FXTAS로부터 해마 부위들을 포함하는 뇌 조직의 포르말린 고정된 시료들을 구하였다. 추가로, 동시에 동일한 출처로부터 나이가 일치하는 시료들을 구하였다. 조직을 파라핀에 묻어두고, 면역조직화학 평가를 위하여 6μm 단편들을 절단하였다. 4가지 증례의 FXS 및 3 가지 증례의 FXTAS 로부터 동결된 정면 피질 시료들과 나이가 일치된 대조군 시료들 또한 Maryland 대학에서 제공하였다. 대조군 개체들의 추가 피질 조직은 승인된 IRB 프로토콜을 이용하여 University Hospitals of Cleveland로부터 구하였다. 표 1은 본 연구에 이용된 시료들에 대한 상세한 정보를 제공한다.

퍼옥시다제-항-퍼옥시다제 방법을 이용하여 파라핀에 묻어둔 절단편에 대하여 면역조직화학 연구들을 실시하였다(Sternberger et al Proc Natl Acad Sci U S A. Vol . 82 1985 pp 4274-4276). 우선 크실렌의 2차례 교환을 통하여 절단편들로부터 파라핀을 제거하였고, 그 다음 100% 내지 50% 에탄올의 일련의 등급 에탄올 용액을 통하여 재수화시켰다. 이 절단편들은 30분간 3% H₂O₂ 용액에서 항온처리하여, 임의의 내생 퍼옥시다제 활성을 감소시킨다. 끝으로, Tris 완충된 염수(50mM Tris, 150 mM NaCl, pH=7.6)에 둔다. TBS 내 10%의 정상 염소 혈청(NGS)에서 30분간 항온처리 후, 1차 항체를 16시간 동안 적용한다. 1% NGS에서 헹군 후, 후속적으로 10% NGS에서 10분간 둔 후, 염소 항-마우스 또는 염소 항-토끼 2차 항체를 30분간 적용한다. 상기와 같이 헹군 후, 마우스 또는 토끼 퍼옥시다제-항-퍼옥시다제 복합체를 1 시간 동안 적용한다. Tris 완충액 (50mM Tris, pH7.6)의 착색 병에서 슬라이드를 2X 헹구고, 그리고 3'-3'-디아미노벤지딘 (Dako)으로 발달시킨다. 착색 후, 이 절단편들을 Tris에서 헹구고, 에탄올 내지 크실렌을 통하여 탈수시키고, Permount에 얹는다.

웨스턴 블랏 분석(Western blot)을 위하여, 동결된 피질 시료들로부터 회백질은 프로테아제 억제제 칵테일(Sigma) 및 PMSF (1 mM)의 추가와 함께 1×세포 용해 완충액 (Cell Signaling)에서 균질화시켰다. BCA 분석 (Pierce)을 이용하여 총 균질물(homogenate)의 단백질 농도를 측정하였다. 10% 겔을 이용한 폴리아크릴아미드 겔 전기용동은 웰당 30 μg의 단백질을 이용하여 실시하였고, 그리고 단백질들은 Immobilon (Millipore)으로 이동시켰다. 10% 분유에서 차단시킨 후, 1차 항체들을 4℃에서 16시간 동안 적용하였고, 그 다음 0.1% Tween-20 (Sigma)와 함께 TBS에서 5회 헹구었다. 퍼옥시다제 라벨된 2차 항체들을 실온에서 1시간 동안 적용하였고, 이전과 같이 TBS-Tween에서 블랏들을 헹구고, 그리고 강화된 화학적발광(Millipore)으로 발달시키고, 필름(BioExpress)에 노출시켰다. 전체 ERK (Cell signaling)에 대항하는 항체들과 이중 인산화된 ERK 42/44 (Cell Signaling)를 이용하였다. 부하 대조군으로 액틴을 이용하였다.

약물 연구들

fmr1 녹아웃(knockout) 수컷 마우스를 기르고, 21일령 시점에서 테스트하였다. 모든 마우스는 환경에 순응시키고, 검사하였고, 취급하였고, 그리고 적합한 건강 및 적합성을 확보하고, 조작과 관련된 비-특정 스트레스를 최소화시키기 위하여 연구 시작 전에 체중을 측정하였다. 연구 과정 동안, 12/12(시간)의 명/암 주기를 유지시켰다. 실온은 20℃ 내지 23℃이며 그리고 상대 습도는 대략 50%로 유지시켰다. 연구 과정 동안 먹이 및 물은 임의로 제공하였다. 각 마우스는 치료군에 무작위로 할당하였다. 밝은 주기(light phase) 동안 동물 테스트를 실시하였다. SL327 (Sigma Aldrich, 400 mg/kg)를 5% Tween 80 및 염수에 용해시키고, 테스트 30분 전 10 ml/kg의 용량으로 i.p. 투여하였다. 마우스를 Plexiglas 챔버에 개별적으로 배치시키고, 2분간 125 dB 소리에 노출시킨 후, 이어서 1분간 무음에, 그리고 그 다음 2분간은 소리에 노출시킨 후 15초간 조사하였다. 마우스들의 반응, 잠복기 및 발작 강도에 근거하여 점수를 매겼다:

0: 무반응

1: 광란의 날뜀(wild running and jumping)

2. 간대 발작(clonic seizures)

3: 강직-간대 발작(clonic-tonic seizures)

4: 강직성 발작(tonic seizures)

5: 호흡정지(respiratory arrest)

무반응 동물은 240초의 잠복 점수를 받는다.

결과들

뇌에서, FXS 및 FXTAS의 증례들에서 pERK의 특이적인 핵 국소화가 나타났다. 백질 및 회백질 모두에서 신경교 세포 및 뉴우런 세포들은 pERK 면역반응성을 나타내었고, 신경교 착색이 우세하였다. 돌연변이 증례에서 다양한 수의 pERK-양성 구조를 볼 수 있었지만, 그럼에도 불구하고 나이가 일치되는 대조군 경우에서 pERK를 거의 탐지하지 못하였다(도 2). FXTAS로 진단을 받은 더 나이든 증례중 일부에서, 약간의 피라미드형 뉴우런은 알츠하이머 질환에서 일반적인 뚜렷한 과립공포 변성(granulovacuolar degeneration)을 가지고 있었고, 이는 치매가 없는 나이든 개체들의 일부 뉴우런에서 공통적이었다(도 2, 삽입부분).

더욱이, 웨스턴 블랏 분석에서 대조군 증례와 돌연변이를 가진 증례 사이에 전체 Erk1/2는 차이가 없음을 보여주었다(도 3). 그러나, 포스포-p44/42 Erk1/2는 FXS 증례에서 상당히 축적되었음을 보여준 반면, 나이가 일치된 어린 대조군들은 나타내지 않았다(도 2B). FXTAS의 경우, 일부 증례에서-p44/42 Erk1/2의 수준이 증가되었으며, 뿐만 아니라 돌연변이 없는 나이든 개체들중 일부에서도 나타났다. 대조군들에서 후자의 변화는 나이든 대조군 개체들에 존재하는 AD-유사 병리의 발달과 관련이 있을 수 있다. 특이적 단백질 밴드의 정량화는 FXS (p<0.0001) 및 FXTAS (p<0.0001) 증례에서 상당히 더 높은 수준의 포스포-p44/42 Erk1/2를 보여주었다(도 2).

SL327 치료는 임의의 소리에 기인된 발작 활성을 제거하였다(도 5a). 발작 개시까지 잠복기에서 SL327의 효과는 도 5b에 나타낸다. ANOVA 분석결과 상당한 치료 효과를 나타났다. SL327은 그 매개체에 비해 잠복기를 상당히 연장시켰다. SL327은 치료 동안 모든 마우스에서 발작을 완전하게 제거하였기 때문에, 240초의 잠복기가 주어졌다. 생존율에서 SL327의 효과는 도 5c에 나타낸다. SL327을 투여받은 모든 마우스는 생존하였다. 평균 발작 등급에서 SL327의 효과는 도 5d에 나타낸다. SL327로 치료받은 마우스는 매개체로 치료받은 마우스보다 상당히 더 낮은 발작 점수를 나타내었다. 발작(점수 2, 3, 및 4) 및 호흡 정지(점수 5)가 없는 것에 추가하여, SL327로 치료를 받은 마우스는 또한 광란의 날뜀(점수 1)을 보이지 않았다. 따라서, 테스트 기간 동안 모든 마우스는 점수 0을 받았다.

실시예 2

본 실시예는 FMRI 녹아웃 마우스에서 소리에 기인한 발작 테스트에서 페릴릴 알코올(perillyl alcohol)의 잼재적인 항경련성 성질을 보여준다.

참고 화합물 MPEP, mGluR₅ 수용체 길항제, 및 페릴릴 알코올 (25 및 50 mg/kg)은 소리에 기인한 발작들 및 호흡 정지의 개시를 상당히 지연시켰고, 그리고 전반적인 발작 점수를 떨어뜨렸다.

재료 및 방법들

동물들

FMRI 녹아웃 수컷 마우스를 PsychoGenies에서 길렀고, 그리고 21일령 시점에서 테스트하였다. 모든 마우스는 환경에 순응시키고, 검사하였고, 취급하였고, 그리고 적합한 건강 및 적합성을 확보하고, 조작과 관련된 비-특정 스트레스를 최소화시키기 위하여 연구 시작 전에 체중을 측정하였다. 연구 과정 동안, 12/12(시간) 명/암 주기를 유지시켰다. 실온은 20℃ 내지 23℃이며, 상대 습도는 대략 50%로 유지시켰다. 연구 과정 동안 먹이 및 물은 임의로 제공하였다. 각 마우스는 치료군에 무작위로 배정하였다. 밝은 주기(light cycle phase) 동안 동물 테스트를 실시하였다.

약물들

다음의 화합물들을 이용하였다. 모든 화합물들은 10ml/kg의 용량으로 i.p.로 투여하였다:

● MPEP HCI (TRC , Lot10B /95104; 30 mg/kg)를 멸균 주사용 염수에 용해시켰고, 테스트 30분 전 투여하였다.

● 페릴릴 알코올 (Sigma Aldrich , Lot n/a; 25 및 50 mg/kg)을 콩기름에 용해시켰고, 테스트 60분 전 투여하였다.

● 사전치료 또는 테스트 동안 임상적 징후 또는 독성은 관찰되지 않았다.

방법들: 소리에 기인한 발작들

마우스들은 21일령 시점에서 테스트하였고, 테스트 30분 전, 매개체 또는 테스트 화합물로 사전 치료하였다. 마우스를 Plexiglas 챔버에 개별적으로 배치시키고, 2분간 125 dB 소리에 노출시키고, 이어서 1분간 무음에, 그리고 그 다음 2분간은 소리에 노출시킨 후, 15초간 조사하였다. 마우스들의 반응, 잠복기 및 발작 강도에 근거하여 점수를 매겼다:

0: 무반응

1: 광란의 날뜀(wild running and jumping)

2. 간대 발작(clonic seizures)

3: 강직-간대 발작(clonic-tonic seizures)

4: 강직성 발작(tonic seizures)

5: 호흡정지(respiratory arrest)

무반응 동물은 240초의 잠복 점수가 주어졌다.

통계학적 분석

데이터는 분산 분석(ANOVA)과 적합한 경우 Fisher 테스트와 함께 post-hoc 비교로 분석하였다. p<0.05 인 경우 효과는 유의한 것으로 생각되었다. 데이터는 평균 ± 평균의 표준 오차로 나타낸다.

결과들

발작까지 잠복기

도 6에는 발작 개시까지 잠복기 상에서 MPEP 및 페릴릴 알코올의 효과를 나타낸다. ANOVA 분석 결과 유의한 치료 효과를 나타냈다. Post hoc 분석에서 각 매개체에 비해 MPEP 및 페릴릴 알코올 (25 및 50 mg/kg)은 발작까지의 잠복기간을 증가시켰다.

호흡 정지까지의 잠복기

도 7은 호흡 정지(그리고 후속적으로 사망)까지의 잠복기에 MPEP 및 페릴릴 알코올의 효과를 나타낸다. ANOVA 분석 결과 유의한 치료 효과를 나타냈다. Post hoc 분석에서 각 매개체에 비해 MPEP 및 페릴릴 알코올 (25 및 50 mg/kg)은 호흡정지까지의 잠복기간을 증가시켰다. MPEP (30mg/kg)로 치료받은 마우스는 테스트 동안 호흡 곤란을 나타내지 않았고, 따라서 모두 240 초의 잠복기가 주어졌다.

평균 발작 점수

도 8은 평균 발작 점수에 대한 MPEP 및 페릴릴 알코올의 효과를 나타낸다. ANOVA 분석 결과 유의한 치료 효과를 나타냈다. Post hoc 분석에서 매개체에 비해, MPEP 및 페릴릴 알코올 (25 및 50 mg/kg)은 발작 점수를 상당히 감소시켰다.

본 발명은 바람직한 구체예들을 참고하여 상세히 나타내고 설명하였지만, 당분야 숙련자들은 첨부된 청구범위에 의해 포괄되는 본 발명의 영역을 벗어나지 않고 형태 및 세부 사항들에서 다양한 변화가 있을 수 있음을 인지할 것이다. 전술한 명세서상에서 언급된 모든 특허들, 공보들 그리고 참고자료는 참조함으로써 그 전문이 본원에 포함된다.

Claims

ERK의 비정상과 연관된 취약 X 염색체 증후군(Fragile X syndrome) 또는 자폐 스펙트럼 장애(autism spectrum disorder)를 가질 위험에 처한 또는 가진 것으로 의심되는 대상체를 치료하는 방법에 있어서,
상기 방법은 신경 연결에서 비정상을 방지하는 적어도 하나의 ERK를 억제하는 화합물 또는 이 화합물이 형성되도록 대사가능한 이의 프로드럭, 또는 약제학적으로 허용가능한 이의 염의 치료적으로 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 화합물은 MEK 또는 ERK의 억제제이고, 또는 ERK의 활성화의 하류 효과들을 없애는, 방법.
청구항 2에 있어서, 상기 MEK 또는 ERK 억제제는 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부타디엔니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴, 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, 및 (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴으로 이루어진 군으로부터 선택된 MEK 억제제인, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된 ERK의 억제제인, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 이의 하나 이상의 입체이성질체(stereoisomers) 형태인, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물을, 자폐성 스펙트럼 장애의 치료에 이용되는 최소한 하나 이상의 치료제와 조합하여 투여하는 것을 더 포함하며, 이때 상기 치료제는 항우울제, 항정신병제, 흥분제, 및 기타 약물들로 이루어진 군에서 선택된, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 하나 이상의 추가 치료제들은 리스페리돈(risperidone), 아리피프라졸(aripiprazole), 시탈로프람(citalopram), 에스시탈로프람(escitalopram), 세르트랄린, 메틸페니데이트(methylphenidate), 아토목세틴(atomoxetine), 메만틴(memantine) 및 미노시클린(minocycline)으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 정제, 트로키제(troches), 당의정(lozenges), 수성 및 유성 현탁액, 분산가능한 분말 및 과립, 유제, 경질 및 연질 캡슐, 시럽 및 엘릭시르(elixirs)로 이루어진 군으로부터 선택된 약제학적으로 허용가능한 형태로 제공되는, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 대상체에게 별도로, 동시에, 연속적으로, 및 연장된 방출용으로 제형화되는, 방법.
청구항 1에 있어서, 상기 자폐성 스펙트럼 장애는 자폐성 장애(autistic disorder), 아스퍼거 증후군(Asperger Syndrome) 또는 비전형성 전반적 발달장애(Pervasive Developmental Disorder Not Otherwise Specified) 또는 ERK 기능이 비정상인 이들 환자들의 일부로부터 선택된, 방법.
ERK의 비정상과 연관된 자폐 스펙트럼 장애를 가질 위험에 처한 또는 가진 것으로 의심되는 대상체를 치료하는 방법에 있어서, 상기 방법은 신경 연결에서 비정상을 방지하는 적어도 하나의 ERK 억제하는 화합물 또는 이 화합물이 형성되도록 대사가능한 이의 프로드럭, 또는 약제학적으로 허용가능한 이의 염의 치료적으로 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
청구항 12에 있어서, 상기 화합물은 MEK 또는 ERK의 억제제이고, 또는 ERK의 활성화의 하류 효과들을 없애는, 방법.
청구항 12에 있어서, 상기 MEK 또는 ERK 억제제는 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴, 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
청구항 12에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, 및 (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴로 이루어진 군으로부터 선택된 MEK의 억제제인, 방법.
청구항 12에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된 ERK의 억제제인, 방법.
청구항 12에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 이의 하나 이상의 입체이성질체 형태인, 방법.
청구항 12에 있어서, 자폐성 스펙트럼 장애의 치료에 이용되는 최소한 하나 이상의 치료제와 ERK를 억제하는 화합물을 조합하여 투여하는 것을 더 포함하며, 이때 치료제는 항우울제, 항정신병제, 흥분제, 및 기타 약물들로 이루어진 군에서 선택된, 방법.
청구항 12에 있어서, 하나 이상의 추가 치료제들은 리스페리돈, 아리피프라졸, 시탈로프람, 에스시탈로프람, 세르트랄린, 메틸페니데이트, 아토목세틴, 메만틴 그리고 미노시클린으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
청구항 12에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 정제, 트로키제, 당의정, 수성 및 유성 현탁액, 분산가능한 분말 및 과립, 유제, 경질 및 연질 캡슐, 시럽 및 엘릭시르로 이루어진 군으로부터 선택된 약제학적으로 허용가능한 형태로 제공되는, 방법.
청구항 12에 있어서, ERK를 억제하는 이 화합은 대상체에게 별도로, 동시에, 연속적으로, 및 연장된 방출용으로 제형화되는, 방법.
청구항 12에 있어서, 자폐성 스펙트럼 장애는 자폐성 장애, 아스퍼거 증후군 또는 비전형성 전반적 발달장애 또는 ERK 기능이 비정상인 이들 환자들의 일부로부터 선택된, 방법.
취약 X 염색체 증후군에 걸릴 위험에 처하거나, 그 증후군을 가진 것으로 의심되는 대상체의 치료 방법에 있어서, 상기 방법은 신경 연결에서 비정상을 방지하는 적어도 하나의 ERK를 억제하는 화합물 또는 이 화합물이 형성되도록 대사가능한 이의 프로드럭, 또는 약제학적으로 허용가능한 이의 염의 치료적으로 유효량을 대상체에게 투여하는 것을 포함하는, 방법.
청구항 23에 있어서, 상기 화합물은 MEK 또는 ERK의 억제제이고, 또는 ERK의 활성화의 하류 효과들을 없애는, 방법.
청구항 24에 있어서, 상기 MEK 또는 ERK 억제제는 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴, 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된, 방법.
청구항 24에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, 및 (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴로 이루어진 군으로부터 선택된 MEK의 억제제인, 방법.
청구항 24에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된 ERK의 억제제인, 방법.
청구항 24에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 이의 하나 이상의 입체이성질체 형태인, 방법.
청구항 24에 있어서, 상기 ERK 억제하는 화합물은 정제, 트로키제, 당의정, 수성 및 유성 현탁액, 분산가능한 분말 및 과립, 유제, 경질 및 연질 캡슐, 시럽 및 엘릭시르로 이루어진 군으로부터 선택된 약제학적으로 허용가능한 형태로 제공되는, 방법.
청구항 24에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 대상체에게 별도로, 동시에, 연속적으로, 및 연장된 방출용으로 제형화되는, 방법.
ERK의 비정성과 연관된 취약 X 염색체 증후군 또는 자폐 스펙트럼 장애 치료용 약물의 제조에 있어서, 신경 연결에서 비정상을 방지하는 적어도 하나의 ERK를 억제하는 화합물들; 또는 이 화합물이 형성되도록 대사가능한 이의 프로드럭들; 또는 약제학적으로 허용가능한 이의 염의 단독 또는 조합의 용도.
청구항 31에 있어서, 상기 화합물은 MEK 또는 ERK의 억제제이고, 또는 ERK의 활성화의 하류 효과들을 없애는, 용도.
청구항 31에 있어서, 상기 MEK 또는 ERK 억제제는 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부타디엔니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴, 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된, 용도.
청구항 31에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 2-(2-아미노-3-메톡시페닐)-4H-크로멘-4-온, (2Z,3Z)-비스{아미노[(2-아미노페닐)술파닐]메틸리덴}부탄디니트릴, 5-[(4-브로모-2-클로로페닐)아미노]-4-플루오르-N-(2-하이드록시에톡시)-1-메틸-1H-벤즈이미다졸-6-카르복사미드, 2-[(2-플루오르-4-요오드페닐)아미노]-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-1,6-디하이드로피리딘-3-카르복사미드, 2-(4-클로로-2-플루오르-아닐리노)-N-(2-하이드록시에톡시)-1,5-디메틸-6-옥소-피리딘-3-카르복사미드, 2-[(2-클로로-4-요오드페닐)아미노]-N-(사이클로프로필메톡시)-3,4-디플루오르벤자미드, (3R,4R)-4-(3,4-디메톡시벤질)-3-(4-하이드록시-3-메톡시벤질)디하이드로퓨란-2(3H)-온, 및 (2Z)-3-아미노-3-[(4-아미노페닐)술파닐]-2-[2-(트리플루오르메틸)페닐]프로프-2-엔니트릴로 이루어진 군으로부터 선택된 MEK의 억제제인, 용도.
청구항 31에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 히페리신, 3-(3-아미노-2H-피라졸로[3,4-c]피리다진-5-일)-2-페닐-3H-피라졸로[1,5-a]피리딘-8-이움, N-메틸-3-페닐-3-[4-(트리플루오르메틸)페녹시]프로판-1-아민 플루옥세틴, 및 2-클로로-4-{[2-{[(2R)-1-하이드록시-3-메틸부탄-2-일]아미노}-9-(프로판-2-일)-9H-푸린-6-일]아미노}벤조산으로 이루어진 군으로부터 선택된 ERK의 억제제인, 용도.
청구항 31 내지 35에 있어서, 상기 ERK를 억제하는 화합물은 이의 하나 이상의 입체이성질체 형태인, 용도.
청구항 31 내지 36에 있어서, 상기 약물은 적어도 하나의 항우울제, 항정신병제, 흥분제, 및 기타 약물들과 조합된 ERK를 억제하는 화합물 또는 이의 프로드럭을 포함하는, 용도.
청구항 37에 있어서, 상기 약물은 적어도 하나의 리스페리돈, 아리피프라졸, 시탈로프람, 에스시탈로프람, 세르트랄린, 메틸페니데이트, 아토목세틴, 메만틴 또는 미노시클린과 복합된 ERK를 억제하는 화합물을 포함하는, 용도.
청구항 31 내지 37에 있어서, 상기 약물은 정제, 트로키제, 당의정, 수성 및 유성 현탁액, 분산가능한 분말 및 과립, 유제, 경질 및 연질 캡슐, 시럽 및 엘릭시르로 이루어진 군으로부터 선택된 약제학적으로 허용가능한 형태인, 용도.
청구항 31 내지 38에 있어서, 상기 약물은 대상체에게 별도로, 동시에, 연속적으로, 및 연장된 방출용으로 제형화되는, 용도.
청구항 31 내지 40에 있어서, 상기 자폐성 스펙트럼 장애는 자폐성 장애, 아스퍼거 증후군 또는 비전형성 전반적 발달장애 또는 ERK 기능이 비정상인 이들 환자들의 일부로부터 선택된, 용도.