KR20120037967A - 피라졸 유도체, 그의 제조법 및 그의 치료 용도 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 하기 화학식 I의 피라졸 유도체에 관한 것이다. 본 발명은 또한 상기 화합물의 제조 방법 및 그의 치료 용도에 관한 것이다.
<화학식 I>
상기 식에서, X는 염소 또는 플루오린을 나타낸다.
<화학식 I>
상기 식에서, X는 염소 또는 플루오린을 나타낸다.
Description
본 발명은 피라졸 유도체, 그의 제조법 및 그의 치료 용도에 관한 것이다.
더욱 특히, 제1 측면에 따라, 본 발명은 단백질, 특히 키나제의 활성 조절을 통해 항암 활성을 갖는 신규한 특정의 치환된 피라졸에 관한 것이다.
단백질 키나제는 단백질의 특정 잔기, 예컨대 티로신, 세린 또는 트레오닌 잔기의 히드록실기의 인산화를 촉매하는 효소 패밀리이다. 이러한 인산화는 단백질의 기능을 크게 조절할 수 있으므로, 단백질 키나제는 매우 다양한 세포 과정, 특히 대사, 세포 증식, 세포 분화, 세포 이동 또는 세포 생존을 조절하는 데 중요한 역할을 수행한다. 단백질 키나제의 활성이 관여하는 다양한 세포 기능 중에서, 특정 과정은 암 질환 및 또한 기타 질환의 치료에 유용한 표적이다.
따라서, 본 발명의 목적 중 하나는 특히 키나제에 대한 작용에 의해 항암 활성을 갖는 조성물을 제시하는 것이다. 활성의 조절이 요구되는 키나제 중에서 KDR, Tie2, VEGFR-1 (FLT1), VEGFR-3 (FLT4), PDGFR 및 FGFR을 언급할 수 있다. 키나제 KDR 및/또는 Tie2가 바람직하다.
하기 화학식 I에 상응하는 화합물은 WO 08/065282 하에 공개된 특허 출원으로부터 공지되어 있다.
<화학식 I>
상기 식에서,
1) A 및 Ar은 아릴, 헤테로아릴, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되고;
2) L은 NH-CO-NH 및 O-CO-NH로 이루어진 군으로부터 선택되고;
3) R1은 H, R6, COR6, SO2R6으로 이루어진 군으로부터 선택되고, 여기서 R6은 H, OR7, NR8R9, 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 치환된 헤테로시클릴, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로부터 선택되고, R7은 H, 페닐 및 알킬로부터 선택되고, R8 및 R9는 H, 알킬, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 치환된 헤테로시클릴, 아릴, 치환된 아릴, 헤테로아릴 및 치환된 헤테로아릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택되거나, 또는 대안적으로 R8 및 R9는 함께 연결되어 O, S 및 N으로부터 선택된 0 내지 3개의 헤테로원자를 함유하는 포화 5 내지 8원 고리를 형성하고;
4) X는 O 및 NH로 이루어진 군으로부터 선택되고;
5) R3은 H, 알킬, 치환된 알킬, 시클로알킬, 치환된 시클로알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
6) R4a는 H 및 (C1-C4)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
7) R4b는 H 및 (C1-C4)알킬로 이루어진 군으로부터 선택되고;
8) R5는 H, 할로겐, R10, CN, O(R10), OC(O)(R10), OC(O)N(R10)(R11), OS(O2)(R10), N(R10)(R11), N=C(R10)(R11), N(R10)C(O)(R11), N(R10)C(O)O(R11), N(R12)C(O)N(R10)(R11), N(R12)C(S)N(R10)(R11), N(R10)S(O2)(R11), C(O)(R10), C(O)O(R10), C(O)N(R10)(R11), C(=N(R11))(R10), C(=N(OR11))(R10), S(R10), S(O)(R10), S(O2)(R10), S(O2)O(R10), S(O2)N(R10)(R11)로 이루어진 군으로부터 선택되고; 여기서 각각의 R10, R11, R12는 H, 알킬, 알킬렌, 알키닐, 아릴, 헤테로아릴, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 치환된 알킬, 치환된 알킬렌, 치환된 알키닐, 치환된 아릴, 치환된 헤테로아릴, 치환된 시클로알킬, 치환된 헤테로시클릴로 이루어진 군으로부터 독립적으로 선택된다.
이 특허에서, 바람직하게는 X는 O이고, R3은 메틸이고, R4a 및 R4b는 H이고, L은 NHCONH이고, A는 페닐이고, Ar은 페닐이지만, 이 출원에서는 Ar의 치환 및 약동학에서의 그의 효과를 기재하는 실시예가 없다.
본 발명의 한 대상은 하기 화학식 I에 상응하는 상기 출원에 포함되는 두 화합물이다.
<화학식 I>
상기 식에서, X는 Cl 또는 F를 나타낸다.
화학식 I의 화합물은 염기 형태 또는 산 부가염 형태로 존재할 수 있다. 이러한 부가염은 본 발명의 일부이다.
하기 나타낸 두 가지 호변이성질체 형태의 화합물이 본 발명에 포함된다:
이들 염은 제약상 허용되는 산을 이용하여 제조할 수 있으나, 예를 들어 화학식 I의 화합물의 정제 또는 단리에 사용되는 다른 산의 염도 또한 본 발명의 일부이다. 사용될 수 있는 염 중에서 특히 히드로클로라이드를 언급할 수 있다.
화학식 I의 화합물은 또한 수화물 또는 용매화물의 형태, 즉 하나 이상의 물분자 또는 용매와의 회합물 또는 조합물의 형태로 존재할 수 있다. 상기 수화물 및 용매화물은 또한 본 발명의 일부이다.
본 발명의 대상인 화학식 I의 화합물 중, 특히 하기 화합물들이 언급될 수 있다:
- 4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드 및 그의 히드로클로라이드;
- 4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드 및 그의 히드로클로라이드.
본 발명에 따르면, 화학식 I의 화합물은 하기 방법에 따라 제조될 수 있다.
하기 반응식에서, 출발 화합물 및 반응물은, 그의 제조 방법이 기재되어 있지 않은 경우에 상업적으로 입수가능하거나, 문헌에 기재되어 있거나, 또는 다르게는 문헌에 기재된 방법 또는 당업자에게 공지된 방법에 따라 제조할 수 있다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명의 또 다른 대상은 하기 화학식의 화합물들이다.
및
상기 식에서, X는 F 또는 Cl을 나타낸다.
이들 화합물은 화학식 I의 화합물의 합성 중간체로서 사용된다.
하기 실시예는 본 발명에 따른 화합물의 제조를 기재한다. 이들 실시예는 제한적인 것이 아니며, 단지 본 발명을 예시하기 위해 제공되는 것이다.
<실시예>
실시예의 합성을 위한 과정
실시예 1
4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드 히드로클로라이드
50 mL의 에탄올 중 1.64 g (3.48 mmol)의 4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드의 현탁액을 주위 온도에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 이어서, 디에틸 에테르 중 염산의 용액 (1 N) 35 ml (35 mmol)를 적가하였다. 반응 매질이 투명한 용액이 되었다. 주위 온도에서 10 시간 동안 교반한 후, 용매를 감압하에 회전식 증발기를 이용하여 증발시켰다. 수득한 잔류물을 50 mL의 디에틸 에테르 중에서 30 분 동안 교반하였다.
여과하고 오븐에서 건조시킨 후, 1.8 g의 4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드 히드로클로라이드를 연황색 결정의 형태로 수득하였다.
4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드
400 mL의 톨루엔 중 5.9 g (9.5 mmol)의 4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드) 및 4.5 g (24 mmol)의 파라-톨루엔술폰산의 용액을 2 시간 동안 환류하에 가열하였다. 정치시킨 후, 톨루엔 용액을 황색 검으로부터 분리하였다. 상기 검을 150 mL의 메탄올 및 500 mL의 에틸 아세테이트로 희석하였다. 이어서, 500 mL의 물을 첨가하였다. 다음, 용액을 냉각시킨 후, 100 mL의 수산화칼륨 수용액 (10 N)으로 염기성화시켰다. 정치시킨 후, 수성 상을 400 mL의 에틸 아세테이트 및 100 mL의 메탄올의 용액으로 추출하였다. 유기 상을 다시 조합하고, 100 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 감압하에 농축시켜, 연황색 고체를 수득하였고, 이를 디클로로메탄/메탄올/아세토니트릴의 80/10/10 (부피) 용액으로 용리시키는 200 g의 실리카 상에서 정제하여, 1.77 g의 4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드를 백색 고체의 형태로 수득하였다.
4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)
300 mL의 테트라히드로푸란 중 10 g (32 mmol)의 4-아미노-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드) 히드로클로라이드 및 5.9 ml (35.2 mmol)의 디이소프로필에틸아민의 용액을 주위 온도에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 3.85 g (35 mmol)의 황산마그네슘 및 12.70 g (35.2 mmol)의 1-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-플루오로-5-포르밀페닐)우레아를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 환류 하에 14 시간 동안 가열하였다. 이어서, 혼합물을 25℃로 냉각시킨 다음, 10.08 g (160 mmol)의 나트륨 시아노보로하이드라이드를 천천히 첨가하였다. 주위 온도에서 12 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시켰다. 수득한 검을 300 mL의 물 및 500 mL의 수산화나트륨 수용액 (1N)과 함께 교반하였다. 이 현탁액을 1L의 디클로로메탄과 함께 30 분 동안 교반하였다. 번호 3 소결 유리를 통해 여과한 후, 수득한 고체를 2 x 500 mL의 물로 세정한 다음, 40℃에서 진공 하에 오븐에서 건조시켰다. 이어서, 고체를 고온에서 800 mL의 메탄올로부터 재결정화하여, 8.3 g의 4-{3-[3-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)를 백색 분말의 형태로 수득하였다.
1-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-플루오로-5-포르밀페닐)우레아
600 mL의 테트라히드로푸란 중 33.15 g (92.68 mmol)의 1-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-시아노-5-플루오로페닐)우레아의 용액을 -10℃에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 다음, 톨루엔 중 20％ 농도의 디이소부틸알루미늄 히드라이드의 용액 230 mL를 규칙적인 "적하" 작용으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 12 시간 동안 교반하였다. 다음, 추가의 80 mL의 디이소부틸알루미늄 히드라이드를 -10℃에서 첨가하였다. 주위 온도에서 14 시간 동안 교반한 후, 반응 매질을 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시켜, 점성 오일을 수득하였고, 여기에 500 g의 얼음 및 100 mL의 100％ 아세트산을 교반하면서 천천히 첨가하였다. 수득한 현탁액을 여과하였다. 이어서, 고체를 2 x 800 mL의 에틸 아세테이트로 희석하고, 유기 용액을 600 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 여과하고, 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시키고, 40℃에서 진공 하에 오븐에서 건조시켜, 29.57 g의 1-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-플루오로-5-포르밀페닐)우레아를 연황색 분말의 형태로 수득하였다.
1-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-시아노-5-플루오로페닐)우레아
150 mL의 테트라히드로푸란 중 15 g (110.2 mmol)의 5-플루오로-3-시아노아닐린의 용액을 주위 온도에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 다음, 17.5 ml (121.22 mmol)의 2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐이소시아네이트를 첨가하였다. 반응 매질을 3 시간 동안 환류하에 가열한 다음, 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시켰다. 수득한 고체 잔류물을 60 mL의 에틸 아세테이트 중에서 고온에서 재결정화하여, 33.25 g의 1-(2-클로로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-시아노-5-플루오로페닐)우레아를 백색 고체의 형태로 수득하였다.
5-플루오로-3-시아노아닐린은 시판용 제품이다.
4-아미노-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)히드로클로라이드
340 mL의 에탄올 중 6.12 g (20 mmol)의 4-니트로-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)의 현탁액을 주위 온도에서 교반하였다. 다음, 15.8 g (70 mmol)의 염화주석 이수화물을 5 분에 걸쳐 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 14 시간 동안 교반한 다음, 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시켰다. 수득한 잔류물을 330 mL의 탄산수소나트륨 포화 수용액 및 300 mL의 디클로로메탄으로 세척하였다. 정치시킨 후, 유기 상을 2 x 150 mL의 디클로로메탄으로 추출하였다. 유기 상을 다시 합하고, 150 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 회전식 증발기를 이용하여 농축시킨 후, 4.57 g의 4-아미노-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드) 히드로클로라이드를 보라색 고체의 형태로 수득하였다.
4-니트로-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)
50 mL의 디메틸포름아미드 중 14.65 g (76.4 mmol)의 1-(3-디메틸아미노프로필)-3-에틸카르보디이미드 이수화물 및 10.32 g (76.4 mmol)의 1-히드록시벤조트리아졸의 용액을 주위 온도에서 교반하였다. 11.7 g (70.03 mmol)의 2,4-디메톡시벤질아민을 첨가한 다음, 10.2 g의 4-니트로-3-피라졸 카르복실산을 소량씩 첨가하였다. 주위 온도에서 16 시간 동안 교반한 후, 반응 매질을 500 mL의 물에 부었다. 현탁액을 여과한 다음, 2 x 250 mL의 물로 세척하였다. 수득한 고체를 40℃에서 진공 하에 오븐에서 건조시켜, 18.58 g의 4-니트로-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)를 백색 고체의 형태로 수득하였다.
4-니트로-3-피라졸카르복실산은 시판용 제품이다.
실시예 2
4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드 히드로클로라이드
40 mL의 에탄올 중 1.85 g (0.40 mmol)의 4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드의 현탁액을 주위 온도에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 이어서, 디에틸 에테르 중 염산의 용액 (1 N) 20 ml (40 mmol)를 적가하였다. 반응 매질이 투명한 용액이 되었다. 주위 온도에서 12 시간 동안 교반한 후, 용매를 감압하에 회전식 증발기를 이용하여 건조시켰다. 수득한 잔류물을 200 mL의 디에틸 에테르 중에서 30 분 동안 교반하였다.
여과하고 오븐에서 건조시킨 후, 1.75 g의 4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드 히드로클로라이드를 연황색 결정의 형태로 수득하였다.
4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드
600 mL의 톨루엔 중 22.3 g (36.89 mmol)의 4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드) 및 17.54 g (92.22 mmol)의 파라-톨루엔술폰산의 용액을 환류 하에 14 시간 동안 가열하였다. 정치시킨 후, 톨루엔 용액을 황색 검으로부터 분리하였다. 상기 검을 280 mL의 물 및 100 mL의 수산화나트륨 (10 N) 중에서 2 시간 동안 교반하였다. 현탁액을 여과하였다. 수득한 고체를 3 x 350 mL의 물로 세정한 다음, 건조시켜, 크림색 고체를 수득하였고, 이를 디클로로메탄/메탄올/아세토니트릴의 95/2.5/2.5 (부피) 용액으로 용리시키는 350 g의 실리카 상에서 정제하여, 3.85 g의 4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-카르복스아미드를 백색 고체의 형태로 수득하였다.
4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)
360 mL의 테트라히드로푸란 중 11.40 g (36.45 mmol)의 4-아미노-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드) 히드로클로라이드 및 6.65 ml (40.09 mmol)의 디이소프로필에틸아민의 용액을 주위 온도에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 4.35 g (36.45 mmol)의 황산마그네슘 및 13.80 g (35.2 mmol)의 1-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-플루오로-5-포르밀페닐)우레아를 첨가하였다. 이어서, 반응 혼합물을 환류 하에 14 시간 동안 가열하였다. 이어서, 혼합물을 25℃로 냉각시킨 다음, 11.46 g (182.25 mmol)의 나트륨 시아노보로하이드라이드를 천천히 첨기하였다. 주위 온도에서 72 시간 동안 교반한 후, 혼합물을 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시켰다. 수득한 검을 400 mL의 물 및 500 mL의 수산화나트륨 용액 (1N)과 함께 교반하였다. 이 현탁액을 1 시간 동안 교반한 다음, 번호 3 소결 유리를 통해 여과하고, 수득한 고체를 3 x 500 mL의 물로 세정한 다음, 40℃에서 진공 하에 오븐에서 건조시켜, 22.45 g의 4-{3-[3-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)우레이도]-5-플루오로벤질아미노}-1H-피라졸-3-(2,4-디메톡시벤질아미드)를 분홍색 고체의 형태로 수득하였다.
1-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-플루오로-5-포르밀페닐)우레아
150 mL의 테트라히드로푸란 중 11.90 g (34.87 mmol)의 1-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-시아노-5-플루오로페닐)우레아의 용액을 -2℃에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 다음, 헥산 중 20％ 농도의 디이소부틸알루미늄 히드라이드의 용액 86 mL를 규칙적인 "적가" 작용으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 주위 온도에서 12 시간 동안 교반하였다. 다음, 추가의 60 mL의 디이소부틸알루미늄 히드라이드를 -2℃에서 첨가하였다. 주위 온도에서 3 시간 동안 교반한 후, 반응 매질을 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시켜, 점성 오일을 수득하였고, 여기에 500 g의 얼음 및 300 mL의 100％ 아세트산을 교반하면서 천천히 첨가하였다. 수득한 현탁액을 여과하였다. 수득한 고체를 4 x 150 mL의 물로 세척하고, 원심분리하고, 40℃에서 진공 하에 오븐에서 건조시켜, 13.95 g의 1-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-플루오로-5-포르밀페닐)우레아를 연황색 고체의 형태로 수득하였다.
1-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-시아노-5-플루오로페닐)우레아
90 mL의 테트라히드로푸란 중 6.15 g (45.18 mmol)의 5-플루오로-3-시아노아닐린의 용액을 주위 온도에서 아르곤 분위기하에 교반하였다. 이어서, 4.3 ml (36.14 mmol)의 디포스겐을 30 ml (135.54 mmol)의 트리에틸아민에 적가하였다. 반응 혼합물을 3 시간 동안 환류시킨 후, 10 mL의 테트라히드로푸란 중 7.10 g (39.64 mmol)의 4-아미노-3-플루오로트리플루오로메틸벤젠의 용액을 천천히 첨가하였다. 환류를 추가 2 시간 동안 유지시켰다. 이어서, 매질을 100 mL의 물 중에서 교반한 다음, 100 mL의 에틸 아세테이트로 추출하였다. 유기 상을 100 mL의 포화 염화나트륨 용액으로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시키고, 회전식 증발기를 이용하여 농축에 의해 건조시켰다. 수득한 고체 잔류물을 90 mL의 아세토니트릴 중에서 고온에서 재결정화하여, 10.35 g의 1-(2-플루오로-4-트리플루오로메틸페닐)-3-(3-시아노-5-플루오로페닐)우레아를 크림색 고체의 형태로 수득하였다.
본 발명의 생성물은 키나제에 의해 촉매되는 하나 이상의 반응의 억제제로서 유용하다. KDR 및/또는 Tie2는 본 발명의 생성물이 억제제로서 특히 유용할 키나제이다.
이들 키나제를 선택한 이유를 아래에 제시한다:
KDR
VEGF-R2 (혈관 내피 성장 인자 수용체 2)로도 공지된 KDR (키나제 삽입 도메인 수용체)은 내피 세포에서 주로 발현된다. 이 수용체는 혈관신생촉진 성장 인자 VEGF에 결합하여, 그의 세포내 키나제 도메인의 활성화를 통해 신호 전달 매개자로서 작용한다. VEGF-R2의 키나제 활성의 직접적인 억제에 의해 외인성 VEGF (혈관 내피 성장 인자)의 존재 하에 혈관신생 현상을 감소시키는 것이 가능하다 (문헌 [Strawn et al., Cancer Research, 1996, vol. 56, p.3540-3545]). 이 과정은 특히 VEGF-R2 돌연변이체를 이용하여 입증되었다 (문헌 [Millauer et al., Cancer Research, 1996, vol. 56, p.1615-1620]). VEGF-R2 수용체는 성인에서 VEGF의 혈관신생 활성과 연관된 것 외에는 다른 기능을 갖지 않는 것으로 보인다. 이러한 동적 혈관신생 과정에서의 중심적 역할 외에도, 최근의 결과는 VEGF의 발현이 화학요법 및 방사선요법 이후 종양 세포의 생존에 기여한다는 것을 제시하여, KDR 억제제와 다른 작용제와의 잠재적인 상승작용을 강조한다 (문헌 [Lee et al., Cancer Research, 2000, vol. 60, p.5565-5570]).
Tie2
Tie-2 (TEK)는 티로신 키나제 수용체 패밀리의 구성원이며, 내피 세포에 특이적이다. Tie2는 티로신 키나제 활성을 갖는 첫 번째 수용체이며, 그에 대해 수용체의 자가인산화 및 세포 신호전달을 자극하는 효능제 (안지오포이에틴 1 또는 Ang1) (문헌 [S. Davis et al. (1996) Cell 87, 1161-1169]) 및 길항제 (안지오포이에틴 2 또는 Ang2) (문헌 [P.C. Maisonpierre et al. (1997) Science 277, 55-60]) 둘 다가 공지되어 있다. 안지오포이에틴 1은 신생혈관신생의 최종 단계에서 VEGF와 상승작용 효과를 가질 수 있다 (문헌 [Asahara T., Circ. Res. (1998) 233-240]). Tie2 또는 Ang1 발현의 녹-아웃 실험 및 트랜스제닉 조작은 혈관형성 결함을 나타내는 동물을 초래한다 (문헌 [D.J. Dumont et al. (1994) Genes Dev. 8, 1897-1909] 및 [C. Suri (1996) Cell 87, 1171-1180]). Ang1이 그의 수용체에 결합하면, Tie2의 키나제 도메인의 자가인산화가 일어나는데, 이는 신혈관형성, 및 또한 혈관주위세포 및 평활근 세포의 동원 및 이들과 혈관의 상호작용에 필수적이며, 이러한 현상은 새로 형성된 혈관의 성숙 및 안정에 기여한다 (문헌 [P.C. Maisonpierre et al. (1997) Science 277, 55-60]). 문헌 [Lin et al. (1997) J. Clin. Invest. 100, 8: 2072-2078] 및 [Lin P. (1998) PNAS 95, 8829-8834]는 아데노바이러스 감염, 또는 흑색종 및 유방 종양 이종이식의 모델 내로의 Tie-2의 세포외 도메인 (Tek) 주입시, 종양 성장 및 혈관형성의 억제, 및 또한 폐 전이의 감소를 나타내었다.
하기와 같은 이유로, Tie2 억제제는 신생혈관형성 또는 혈관신생이 부적합하게 일어나는 상황에서, 즉 일반적인 암에서 뿐만 아니라 특정 암에서, 예컨대 카포시 육종 또는 영아 혈관종, 류마티스 관절염, 골관절염 및/또는 관련 통증, 장의 염증성 질환, 예컨대 출혈성 직장결장염 또는 크론병, 안구 병리상태, 예컨대 연령-관련 황반 변성, 당뇨병 망막증, 만성 염증 및 건선에 사용할 수 있다.
혈관신생은 기존에 존재하는 혈관으로부터 새로운 모세혈관을 생성하는 과정이다. 종양 성장에 필수적인 종양성 혈관신생 (새로운 혈관의 형성)은 또한 전이성 파종의 필수적인 요소 중 하나이다 (문헌 [Oncogene. 2003 May 19; 22(20):3172-9]; [Nat. Med. 1995 Jan; 1(1):27-31]).
이러한 신생혈관형성은 암 세포 및 기질 세포에 의해 분비되는 혈관신생 인자의 영향 하의 내피 세포의 이동에 이은 증식 및 분화로부터 기인한다 (문헌 [Recent Prog. Horm. Res. 2000; 55:15-35; 35-6]).
안지오포이에틴 1/Tie2 수용체 시스템은 주위내피 세포를 동원함으로써 혈관을 성숙시키는데 주요한 역할을 하여 혈관을 안정화시킨다 (문헌 [Cell. 1996 Dec. 27; 87(7): 1161-9], [Recent Prog. Horm. Res. 2004; 59:51-71]). 따라서, Tie-2 수용체의 세포외 도메인의 가용성 재조합 형태 (exTek)의 투여가 뮤린 종양 모델에서의 종양 혈관신생, 및 또한 전이성 성장을 억제하는 것으로 확인되었다 (문헌 [Pengnian Lin, Jake A. Buxton, Ann Acheson, Czeslaw Radziejewski, Peter C. Maisonpierre, George D. Yancopoulos, Keith M. Channon, Laura P. Hale, Mark W. Dewhirst, Samuel E. George and Kevin G. Peters, Proc. Natl Acad. Sci. USA. 1998 Jul 21; 95(15): 8829-34]; [Cecilia Melani, Antonella Stoppacciaro, Chiara Foroni, Federica Felicetti, Alessandra Care and Mario P. Colombo, Cancer Immunol Immunother. 2004 Jul; 53(7): 600-8]). 배양 중인 내피 세포에서, Tie-2의 자극은, 세포 증식 및 이동에 관여하는 PI3 키나제 경로 및 p42/p44 경로; 및 전염증성 활성에 관여하는 PAF 합성 경로를 활성화시킨다 (문헌 [Cell Signal. 2006 Apr 14; ahead of print]). Tie2의 자극은 Akt 경로를 자극하고, 세포 생존에서 그의 중요성이 공지된 전환 경로인 아폽토시스를 억제한다 (문헌 [Laura M DeBusk, Dennis E Hallahan, Pengnian Charles Lin, Exp. Cell Res. 2004 Aug. 1; 298(1): 167-77]).
exTek (Tie2의 가용성 수용체)의 첨가는 매트리겔 상에서 내피 세포 유사세관의 형성을 억제한다 (문헌 [Cecilia Melani, Antonella Stoppacciaro, Chiara Foroni, Federica Felicetti, Alessandra Care and Mario P. Colombo, Cancer Immunol Immunother. 2004 Jul; 53(7): 600-8]). 이러한 연구는 Tie-2/안지오포이에틴 시스템이 성인 조직에서 혈관뢰 형성의 제1 단계 동안 필수적이며, Tie-2 수용체의 한 기능은 혈관 형성 동안 내피 세포 생존을 증가시키는 것임을 제시하였다. 또한, 안지오포이에틴-1은 전이성 성장에 대한 바람직한 접근 경로인 림프 내피 세포 증식 및 또한 림프관신생 (새로운 림프 혈관의 발생)을 자극한다 (문헌 [Tohru Morisada, Yuichi Oike, Yoshihiro Yamada, Takashi Urano, Masaki Akao, Yoshiaki, Kubota, Hiromitsu Maekawa, Yoshishige Kimura, Masako Ohmura, Takeshi Miyamoto, Shiro Nozawa, Gou Young Koh, Kari Alitalo and Toshio Suda, Blood. 2005 Jun 15; 105(12): 4649-56]).
혈관신생에서 소정의 역할을 하는 효소 중에서 PDGFRβ (문헌 [Guzman and Laurence H. Hurley, Univ. of Arizona, Molecular Cloning of the Human PDGFR-beta Promoter and Targeting the G-Quadruplex-Forming Region to Control Gene Expression; Biomedical Drug Discovery, Genomics/Gentics, Therapeutic]), FGFR1 (문헌 [Somaia Elbauomy Elsheikh, Andrew R Green,1 Maryou BK Lambros, Nicholas C Turner, Matthew J Grainge,3 Des Powe,1 Ian O Ellis, and Jorge S Reis-Filho, FGFR1 amplification in breast carcinomas: a chromogenic in situ hybridization analysis]); FLT1 (문헌 [Shibuya M (2007), "Vascular endothelial growth factor receptor-1 (VEGFR-1/Flt-1): a dual regulator for angiogenesis", Angiogenesis, 9 (4): 225-30; discussion 231]), 및 VEGFR3 (문헌 [Tamela, T. et al., Blocking VEGFR-3 suppresses angiogenic sprouting and vascular network formation, Nature 454, 656-660 (20058)])을 또한 언급할 수 있다
혈관신생 과정은 또한 수많은 고형 종양의 진행에서 주된 역할을 담당한다. 또한, 전이의 발생 가능성은 원발성 종양의 혈관형성이 증가함에 따라 매우 크게 증가하는 것으로 나타났다 (문헌 [Br. J. Cancer. 2002 May 20; 86(10): 1566-77]).
또한, 백혈병 및 림프종에서 전-혈관신생 작용제의 잠재적 역할이 보다 최근에 입증되었다. 구체적으로, 이러한 병리상태에서의 세포 클론은 면역계에 의해 자연적으로 파괴될 수 있거나, 또는 세포의 생존 및 이어서 그의 증식을 증진시키는 혈관신생 표현형으로 전환될 수 있는 것으로 일반적으로 보고되었다. 표현형의 이러한 변화는 혈관신생 인자의 과다발현, 특히 대식세포 및/또는 세포외 매트릭스로부터의 이러한 인자의 동원에 의해 유도된다 (문헌 [Thomas DA, Giles FJ, Cortes J, Albitar M, Kantarjian HM., Acta Haematol., (2001), vol. 207, pp. 106-190]).
골수의 혈관신생 과정과 CML (만성 골수단구성 백혈병)의 "골수외 질환" 사이에 상관관계가 존재한다. 다수의 연구는 혈관신생의 억제가 이러한 병리상태에서 최적 치료를 나타낼 수 있음을 입증하였다 (문헌 [Leuk. Res. 2006 Jan; 30(1): 54-9; Histol. Histopathol. 2004 Oct.; 19(4): 1245-60]). 또한, Tie2/안지오포이에틴 시스템의 활성화가 다발성 골수종을 앓고 있는 환자의 경우 골수에서 혈관신생의 진행에 관여한다는 것이 강력하게 제시되었다 (문헌 [Blood, 2003 Jul 15; 102(2): 638-45]).
화합물의 활성 측정 - 실험 프로토콜
1. KDR
화합물의 억제 효과를 섬광 기술 (기본 플래쉬 플레이트 유형의 96-웰 플레이트)을 통해 기질 인산화의 시험관내 시험으로 측정하였다.
인간 KDR 효소의 세포질 도메인 (잔기 790 내지 1356)을 pFastBac 바큘로바이러스 발현 벡터에서 GST 융합 형태로 클로닝하였다. 단백질을 SF21 세포에서 발현시키고, 정제하고, 자가인산화에 의해 활성화시켰다. 기질은 GST 융합 단백질의 형태로 발현 및 정제된 PLCγ의 잔기 658 내지 850으로 구성되었다.
KDR 키나제 활성은 완충제 20 mM MOPS, 10 mM MgCl2, 10 mM MnCl2, 1 mM DTT, pH = 7.4 중에서 측정하였다. 화합물을 먼저 100％ DMSO로 희석한 다음, 30％ DMSO/70％ 완충제 중 10X 용액으로서 제조하였다. 10 ㎕의 10X 용액을 침착시킨 다음, 4℃에서 150 ng (1.6 pmol)의 KDR 효소를 함유하는 70 ㎕의 완충제를 침착시켰다. 2 ㎍ (41 pmol)의 PLCγ 기질, 0.5 μCi의 γ33P[ATP] 및 2 μM의 저온의 ATP를 함유하는 20 ㎕의 용액의 첨가에 의해 반응이 개시되었다. 플레이트를 교반하였다. 37℃에서 30 분 동안 인큐베이션한 후, 인큐베이션 완충제를 제거하고, 웰을 300 ㎕의 PBS로 3회 세척하였다. 각각의 웰에서의 방사능을 트리룩스-베타왈락(Trilux-βWallac) 방사능 카운터를 이용하여 측정하였다.
백그라운드 노이즈는 효소 및 화합물의 부재 하에 ATP (방사선 표지되고 저온임) 및 기질을 함유하는 4개의 상이한 웰에서 방사능을 측정함으로써 결정하였다. 대조군 활성을 모든 시약을 함유하나 화합물은 부재하는 4개의 상이한 웰에서 측정하였다.
본 발명의 화합물에 의한 KDR 활성의 억제를 화합물 부재 하에 측정한 대조군 활성에 대한 억제 백분율로 나타내었다.
2. Tie2
화합물의 억제 효과를 섬광 기술 (기본 플래쉬 플레이트 유형의 96-웰 플레이트)을 통해 기질 인산화의 시험관내 시험으로 측정하였다.
세포내 도메인 774-1124의 아미노산에 상응하는 인간 Tie2의 코딩 서열을 pFastBacGT 바큘로바이러스 발현 벡터에 GST 융합 단백질의 형태로 도입시켰다. GST-Tie2를 정제하고, 자가인산화에 의해 활성화시켰다. 기질은 GST 융합 단백질의 형태로 발현 및 정제된 PLCγ의 잔기 658 내지 850으로 구성되었다.
Tie2의 키나제 활성은 완충제 10 mM MgCl2, 10 mM MnCl2 및 1 mM DTT를 함유하는 MOPS 20 mM pH 7.4 완충제 중에서 측정하였다. 화합물을 먼저 100％ DMSO로 희석한 다음, 30％ DMSO/70％ 완충제 중 10X 용액으로서 제조하였다. 10 ㎕의 10X 용액을 침착시킨 다음, 4℃에서 100 ng (1.5 pmol)의 Tie2 효소를 함유하는 70 ㎕의 완충제를 침착시켰다. 2 ㎍ (41 pmol)의 PLCγ 기질, 0.5 μCi의 γ33P[ATP] 및 2 μM의 저온의 ATP를 함유하는 20 ㎕의 용액의 첨가에 의해 반응이 개시되었다. 플레이트를 교반하였다. 37℃에서 30 분 동안 인큐베이션한 후, 인큐베이션 완충제를 제거하고, 웰을 300 ㎕의 PBS로 3회 세척하였다. 각각의 웰에서의 방사능을 트리룩스-베타왈락 방사능 카운터를 이용하여 측정하였다.
백그라운드 노이즈는 효소 및 화합물의 부재 하에 ATP (방사선 표지되고 저온임) 및 기질을 함유하는 4개의 상이한 웰에서 방사능을 측정함으로써 결정하였다. 대조군 활성을 모든 시약을 함유하나 화합물은 부재하는 4개의 상이한 웰에서 측정하였다.
Tie2 활성의 억제를 계산하고, 화합물 부재 하에 측정한 대조군 활성에 대한 억제 백분율로 나타내었다.
3. PFCγ 기질의 존재 하에 FLT1 키나제 인산화 활성을 방사성 표지에 의해 측정함으로써 분자의 스크리닝
FLT1의 키나제 활성을 웰당 13 nM의 FLT1 효소를 함유하는 70 ㎕의 키나제 완충제로 구성된 반응 혼합물을 이용하여 Tie2의 억제와 유사한 방식으로 측정하였다.
FLT1 활성의 억제를 계산하고, 화합물 부재 하에 측정한 대조군 활성에 대한 억제 백분율로 나타내었다.
분자의 각 농도에 상응하는 억제 백분율을 다음과 같이 계산하였다:
억제율％ = (처리된 웰의 평균 CPM - 대조군 웰의 평균 CPM) / (비처리된 웰의 CPM - 대조군의 평균 CPM) x 100.
4. PLCγ 기질의 존재 하에 PDGFR 키나제 인산화 활성을 방사성 표지에 의해 측정함으로써 분자의 스크리닝
본 시험은 13 nM의 Flt1 대신에 16 nM의 PDGFR 효소를 사용하여 FLT1 효소에 대해 수행된 것과 유사한 방식으로 수행하였고, 96-웰 플레이트에서 18 ㎕의 GST-PDGFR 효소를 4 mg/ml (80％의 순도)로 혼합하였다 (배치 VLT802).
5. PLCγ 기질의 존재 하에 FGFR 키나제 인산화 활성을 방사성 표지에 의해 측정함으로써 분자의 스크리닝
본 시험은 13 nM의 Flt1 대신에 27 nM의 FGFR 효소를 사용하여 FLT1 효소에 대해 수행된 것과 유사한 방식으로 수행하였고, 96-웰 플레이트에서 18 ㎕의 GST-FGFR 효소를 1.1 mg/ml (100％의 순도)로 혼합하였다 (배치 JCE3666).
결과:
본 발명의 실시예의 화합물은 일반적으로 KDR 및/또는 TIE2에 대해 0.1 nM 내지 2 μM, 바람직하게는 0.1 nM 내지 500 nM, 및 보다 바람직하게는 0.1 nM 내지 50 nM인, 키나제 활성의 50％를 억제하는 농도를 가졌다. 하기 표 1으로부터의 값은 설명을 위해 제공되었다.
본 발명에 따른 화합물에 대해 그들의 간 청소율을 측정가능하게 하는 약리 시험을 수행하였다.
인간 간세포를 이용하여 화합물의 고유 청소율의 평가: 실험 프로토콜.
NB: 인간 간 세포에 대한 하기 기재된 시험관내 시험을 이용하여, 중요한 약동학 파라미터: 주어진 화합물을 인간에게 투여하는 경우 상기 화합물의 간에 의한 대사를 예상하였다.
배양 조건:
인간 간세포 (IVT로부터: 인 비트로 테크놀로지스, 인크.(In Vitro Technologies, inc., 미국 매릴랜드주 볼티모어)로부터의 IVT-TLN-180608)의 동결보존된 제제 및 인간 간세포 (바이오프레딕(Biopredic)으로부터: HEP200239)의 새로운 제제의 인큐베이션은 48 콜라겐-코팅된 웰을 포함하는 플레이트에서 수행하였다.
실험 조건:
역학은 10 μM 케토코나졸 (CYP3A4 억제제)의 부재 또는 존재 하에 배양 배지에 최종 농도 5 μM의 화합물을 첨가함으로써 개시하였다. 인큐베이션 부피는 100 ㎕이었고, 인큐베이션 시간은 0-24 시간 (표준 역학 시점: 0 - 0.5 - 1 - 2 - 4 - 6 - 8 - 24 시간)이었다.
역학은 내부 표준으로서 코르티코스테론과 함께 아세토니트릴/물의 첨가에 의해 종료시켰다. 세포를 분리한 다음, 용해시켰다. 세포내 및 세포외 배지를 다시 합하고 동결시켜 (-20℃), LC-MS/MS 분석할 때까지 저장하였다.
LC-MS/MS 분석 방법:
합한 세포외 및 세포내 배지를 해동시키고, 초음파 작용에 적용하고, 볼텍스에 의해 진탕시키고, 3000 g에서 20 분 동안 원심분리하였다. 상청액을 주입하고, LC-MS/MS에 의해 분석하였다.
데이터 가공 및 "분류"
ㆍ 최대 초기 시험관내 속도를 P450 시토크롬의 특정한 대사물에 대해 계산하고, nmol/시간/106 세포로 표현하였다.
V = [T (n)에서의 농도 - T (n-1)에서의 농도] /[T (n) - T (n-1)]
고유 청소율을 측정하고, ml/시간/106 세포로 표현하였다.
Clint = 용량/AUC0-24 h
용량 = T (0)에서의 양 (nmol/106 세포)
AUC0-24 h: 볼루스 유형의 정맥내 주사를 모델링하는 비-구획 분석을 이용하여 윈논린(WinNonlin)에 의해 계산됨
고유 청소율의 분류는 다음과 같이 정의되었다:
Clint < 0.040 ml.h-1.10-6 세포: 중간 고유 청소율
0.040 < Clint < 0.120 ml.h-1.10-6 세포: 낮은 고유 청소율
Clint > 0.040 ml.h-1.10-6 세포: 높은 고유 청소율
공여자에 대한 인구통계학적 정보:
동결보존된 인간 간세포의 제조:
IVT로부터: ㆍ IVT, TLN 군: 남성, 백인, 25살
새로운 인간 간세포의 제조:
바이오프레딕으로부터: ㆍ HEP200239: 여성, 미지, 58살
이 시험에서, 실시예 1에 기재된 화합물의 고유 청소율 값은 0.057 ml/시간/106 세포 (낮은 개인간 변동성을 가지며 중간으로 분류된 값)이었다.
실시예 2에 기재된 화합물의 고유 청소율 값은 0.055 ml/h/106 세포 (낮은 개인간 변동성을 가지며 중간으로 분류된 값)이었다.
결장 종양에 대한 본 발명의 화합물의 생체내 활성 측정으로 이루어지는 다른 시험을 수행하였다.
결장 종양에 대한 본 발명의 화합물의 이 활성은 B16 흑색종에 대해 연구하였다. 비교를 위해, 출원 WO 08/065282의 실시예 19로부터의 생성물을 시험하였다.
생성물의 유효성은 다양한 기준에 의해 생체내에서 측정될 수 있고, 종양 억제의 백분율 ％T/C에 의해 측정하는 것이 가능하며, 이는 처리 제12일 또는 제13일에 처리군의 종양의 평균 중량 (T)과 대조군의 종양의 평균 중량 (C) 사이의 비를 나타낸다. 생성물은 T/C 비가 42％ 미만인 경우 활성인 것으로 간주되고, 생성물은 T/C가 10％ 미만인 경우 높은 항종양 활성을 갖는 것이다 (문헌 [Corbett TH et al., Cancer Research, 42, 1707-1715 (1982]).
화합물의 유효성을 입증하기 위해, log10 세포 사멸을 측정하는 것 또한 가능하며, 이는 하기 식에 따라 측정된다:
여기서, T-C는 처리군의 종양 (T) 및 대조군의 종양 (C)이 소정의 값 (예를 들어 750 mg)에 도달한 평균 시간 (일)인 종양 성장 지연을 나타내며, Td는 대조군 동물에서 종양 부피가 배가되는데 필요한 시간 (일)을 나타낸다 (문헌 [T.H. Corbett et al., Cancer, 40, 2660.2680 (1977)]; [F.M. Schabel et al., Cancer Drug Development, Part B, Methods in Cancer Research, 17, 3-51, New York, Academic Press Inc. (1979)]). 생성물은 log10 세포 사멸이 0.7 이상일 경우 활성인 것으로 간주된다. 생성물은 log10 세포 사멸이 2.8 초과일 경우 매우 활성인 것으로 간주된다.
고형 종양에 대한 화합물의 유효성은 하기 방식으로 실험에 의해 측정될 수 있다:
실험에 적용되는 동물, 일반적으로 C57BL/6 암컷 마우스에게 제0일에 30 내지 60 mg의 B16 (참고 종양) 인간 종양 단편을 피하로 양쪽에 이식하였다. 종양을 보유한 동물을 다양한 처리군 및 대조군으로 적용하기 전에 무작위화하였다. 본 발명의 종양의 처리의 경우, 처리는 초기 단계인 이식 3 내지 4일 후에 시작하였다. 화합물로 처리한 동물은 대략 20 g의 체중을 가졌다. 종양을 보유한 동물은 또한 부형제 단독으로 동일하게 처리하여, 종양에 대한 화학요법의 실제 효과로부터 부형제의 독성 효과를 분리할 수 있었다. 화합물의 투여는 1일 2회 투여에 따라 표에 나타낸 용량으로 및 표에 나타낸 부형제와 함께 경구로 수행하였다. 이들 투여는 연구에 따라 종양 이식후 제8일 내지 제11일에 걸쳐 수행하였다.
종양이 대략 2 g에 도달할 때까지 또는 종양이 2 g에 도달하기 전인 경우 동물이 사망할 때까지 종양을 매주 2회 또는 3회 측정하였다. 동물을 희생시킬 때 부검하였다.
항종양 활성은 기록된 다양한 파라미터에 따라 결정되었다.
예로서, 하기 표는 그의 최적 용량으로 이용된 본 발명의 화합물에 의해서 수득된 결과를 제공하였다.
따라서, 본 발명의 한 대상은 화학식 I의 화합물 또는 그와 제약상 허용되는 산과의 부가염을 포함하는 의약이다.
본 발명의 또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 암의 치료에서 의약으로서 사용하기 위한 화학식 I에 상응하는 화합물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 화합물은 의약, 특히 혈관신생을 억제하는 의약의 제조에 사용될 수 있다.
이러한 의약은 특히 암성 종양, 특히 고형 종양의 치료에서 그의 치료 용도를 갖는다.
본 발명의 또 다른 측면에 따르면, 본 발명은 본 발명에 따른 화합물을 활성 성분으로서 함유하는 제약 조성물에 관한 것이다. 이들 제약 조성물은 유효 용량의 하나 이상의 본 발명에 따른 화합물 또는 상기 화합물의 제약상 허용되는 염, 및 또한 하나 이상의 제약상 허용되는 부형제를 함유한다.
상기 부형제는 당업자에게 공지된 통상적인 부형제로부터 제약 형태 및 원하는 투여 방식에 따라 선택된다.
경구, 설하, 피하, 근육내, 정맥내, 국소, 국부, 기관내, 비내, 경피 또는 직장 투여를 위한 본 발명의 제약 조성물에 있어서, 상기 화학식 I의 활성 성분 또는 그의 염은 상기 장애 또는 질환의 치료를 위해 동물 및 인간에게 표준 제약 부형제와의 혼합물로서 단위 투여 형태로 투여될 수 있다.
적절한 단위 투여 형태는 경구 형태, 예컨대 정제, 연질 또는 경질 겔 캡슐, 분말, 과립 및 경구 용액 또는 현탁액, 및 설하 또는 협측 투여 형태, 및 경피, 피하, 근육내 또는 정맥내 투여 형태를 포함한다.
예로서, 정제 형태의 본 발명에 따른 화합물의 단위 투여 형태는 하기 성분을 포함할 수 있다.
본 발명에 따른 화합물 50.0 mg
만니톨 223.75 mg
크로스카르멜로스 나트륨 6.0 mg
옥수수 전분 15.0 mg
히드록시프로필 메틸 셀룰로스 2.25 mg
스테아르산마그네슘 3.0 mg
경구로 제공되는 경우에, 하루에 투여되는 활성 성분의 용량은 1회 이상의 섭취로 1200 mg/kg에 달할 수 있다.
더 높거나 더 낮은 투여량이 적절한 특별한 경우가 있을 수 있고, 이러한 투여량이 본 발명의 내용에서 벗어나는 것은 아니다. 통상적인 관례에 따라, 각 환자를 위해 적절한 투여량은 투여 방법, 및 상기 환자의 체중 및 반응에 따라 전문의가 결정한다.
본 발명의 또 다른 측면에 따라, 본 발명은 또한 환자에게 본 발명에 따른 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염의 유효 용량을 투여하는 것을 포함하는, 상기 나타낸 병리상태의 치료 방법에 관한 것이다.
Claims (9)
- 염기 형태 또는 산 부가염 형태의 하기 화학식 I에 상응하는 화합물.
<화학식 I>
상기 식에서, X는 염소 또는 플루오린을 나타낸다. - 제1항에 있어서, X가 염소를 나타내는 것을 특징으로 하는, 염기 형태 또는 산 부가염 형태의 화학식 I의 화합물.
- 디이소프로필에틸아민의 존재 하에 불활성 매질 중에서 화합물을 화합물
과 반응시킨 다음, 제2 단계에서 아민을 파라-톨루엔술폰산에 의해 탈보호시키는 것을 특징으로 하는, 제1항 또는 제2항에 따른 화학식 I의 화합물의 제조 방법.
- 제3항에 있어서, 불활성 매질이 비극성 비양성자성 매질, 바람직하게는 테트라히드로푸란인 것을 특징으로 하는 방법.
- 하기 화학식의 화합물.
상기 식에서, X는 염소 또는 플루오린을 나타낸다. - 하기 화학식의 화합물.
상기 식에서, X는 염소 또는 플루오린을 나타낸다. - 제1항 또는 제2항에 따른 화학식 I의 화합물 또는 상기 화합물과 제약상 허용되는 산의 부가염을 포함하는 것을 특징으로 하는 의약.
- 제1항 또는 제2항에 따른 화학식 I의 화합물, 또는 상기 화합물의 제약상 허용되는 염, 및 또한 하나 이상의 제약상 허용되는 부형제를 포함하는 것을 특징으로 하는 제약 조성물.
- 제1항 또는 제2항에 있어서, 암의 치료를 위한 의약으로서 사용하기 위한 화학식 I에 상응하는 화합물.
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