KR20120026308A - Cosmetic composition comprising algae stem cell extract as active ingredient - Google Patents

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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition containing seaweed stem cell extract is provided to ensure antioxidation, cell proliferation, collagen synthesis and skin moisturizing. CONSTITUTION: A cosmetic composition for improving skin condition contains 0.00001-50 wt% of seaweed stem cell extract as an active ingredient. The seaweed includes Hizikia fusiformis, Undaria pinnatifida, Laminaria japonica, Eisenia bicyclis, Sargassum confusum, Gelidium amansii, Porphyra tenera, Porphyra yezoensis, Undaria pinnatifida, Enteromorpha, or Codium fragile. The stem cells are pluripotent stem cells or multipotent stem cells.

Description

해조류 줄기세포 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물{Cosmetic Composition Comprising algae stem cell extract as active ingredient}Cosmetic composition containing algae stem cell extract as an active ingredient {Cosmetic Composition Comprising algae stem cell extract as active ingredient}

본 발명은 해조류 줄기세포 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.
The present invention relates to a cosmetic composition containing seaweed stem cell extract as an active ingredient.

피부는 인체 표면에서 외부 자극으로부터 인체를 보호하고 체온조절, 감각, 분비, 배설, 비타민D형성 등의 다양한 기능을 수행하는 중요한 기관이다. 하지만 나이가 들어가면서 이러한 피부의 기능이 저하되고 주름이 증가하며 피부이완, 노인성 색소침착, 피부탄력저하, 피부각질화, 피부 광택저하 등의 현상이 나타나게 된다. 또한, 이러한 피부노화는 강한자외선, 스트레스, 공해, 냉난방기 사용과 같은 외부 환경적인 요인으로 인해 더욱 가속화되며 아토피성피부염을 포함한 다양한 피부질환과 피부손상을 야기하게 된다.
Skin is an important organ that protects the body from external stimuli on its surface and performs various functions such as thermoregulation, sensation, secretion, excretion, and vitamin D formation. However, as the skin ages, the function of the skin decreases, wrinkles increase, skin relaxation, senile pigmentation, skin elasticity, skin exfoliation, and skin glossiness appear. In addition, the skin aging is further accelerated by external environmental factors such as strong ultraviolet rays, stress, pollution, air conditioning and use of air conditioners and causes various skin diseases and skin damage, including atopic dermatitis.

피부는 표피와 진피 및 피하조직으로 이루어져 있으며 피지선, 모발, 한선 등의 부속기로 이루어져 있다. 이중 노화 및 피부손상회복과 직접적인 관련이 있는 것은 표피와 진피이다. The skin is composed of epidermis, dermis and subcutaneous tissue, and it is composed of appendages such as sebaceous gland, hair and Hanseon. The epidermis and dermis are directly related to aging and skin damage recovery.

표피는 세포분열을 통하여 새로운 각질세포를 형성하며 노화된 각질을 피부에서 탈락시켜 건강한 피부를 유지시키며 천연보습인자가 있어 피부를 유연하고 탄력 있는 상태로 유지시켜준다. The epidermis forms new keratinocytes through cell division, removes the aged keratin from the skin to maintain healthy skin, and the natural moisturizing factor keeps the skin supple and elastic.

진피는 표피 기저층과 연결되어 있으며 표피두께의 10-40배로 실질적인 피부라 할 수 있다. 진피는 표피에 영양을 공급하며 외부손상으로부터 몸을 보호하고 체온조절, 감각수용, 표피와 상호작용을 통한 피부재생기능을 하며 피부 수분함량의 60%를 보유하고 있다. 진피에는 콜라겐과 엘라스틴 및 기질을 만드는 섬유아세포가 주종을 이루고 있으며 콜라겐과 엘라스틴은 피부의 탄력적 균형유지와 피부윤기 및 긴장도를 유지하는 중요한 역할을 한다.
The dermis is connected to the basement layer of the epidermis and is 10-40 times the thickness of the epidermis. The dermis nourishes the epidermis, protects the body from external damage, regulates body temperature, senses, and regenerates the skin through interaction with the epidermis and holds 60% of the skin's moisture content. The dermis is predominantly composed of collagen, elastin and matrix-forming fibroblasts. Collagen and elastin play an important role in maintaining the elastic balance of the skin and maintaining skin radiance and tension.

일반적인 피부의 노화는 표피와 진피의 기능이 저하되어 나타나게 되는데 특히, 표피의 수분감소, 각질세포탈락지연과 진피의 콜라겐 및 엘라스틴감소로 나타나게 된다. 이에 더하여, 호흡 및 외부자극으로부터 생성된 프리라디칼에 의한 세포막 산화도 피부노화를 촉진시킨다. 따라서 피부노화방지를 위해서는 보습작용과 섬유아세포활성촉진, 콜라겐생성촉진 및 콜라겐분해효소억제, 항산화작용 등이 필요하다.
In general, aging of the skin is caused by a decrease in the function of the epidermis and the dermis. In particular, it appears as a decrease in the epidermis, delayed exfoliation of keratinocytes and a decrease in the collagen and elastin of the dermis. In addition, cell membrane oxidation by free radicals generated from respiration and external stimuli also promotes skin aging. Therefore, in order to prevent skin aging, it is necessary to moisturize, promote fibroblast activity, promote collagen production, inhibit collagenase, and antioxidant activity.

이러한 피부노화방지 및 피부손상억제, 피부재생촉진을 위한 다양한 생리학적 연구와 화장료에 대한 연구가 이루어져 주름개선 및 탄력개선효과가 있는 레티놀과 레티노익산 등의 레티노이드와 표피층의 각질탈락을 촉진하는 효과가 있는 아데노신 등이 개발되었다. 하지만 이들 모두 피부에 자극을 나타내며 안정성이 떨어져 쉽게 산화되거나 변질되는 문제점이 있어 보다 피부에 안전하고 화장료로서 안정한 성분에 대한 필요성이 대두 되어왔다.
Various physiological studies and cosmetic researches for preventing skin aging, preventing skin damage, promoting skin regeneration, and research on cosmetics have been carried out to promote exfoliation of retinoids and epidermal layers such as retinol and retinoic acid, which have wrinkle and elasticity improvement effects. Adenosine and the like have been developed. However, all of them show irritation to the skin and have a problem in that they are easily oxidized or deteriorated due to poor stability. Therefore, there has been a need for a safer skin and a stable ingredient as a cosmetic.

한편, 줄기세포는 미분화된 세포로써 개체를 구성하는 세포나 조직의 근간이 되는 세포며 자가생산할 수 있고 환경에 따라 특정한 기능을 지닌 세포로 분화할 수 있는 다분화 능력을 갖는 세포이다. 줄기세포는 그 분화능에 따라서 전능성 줄기세포, 다기능성 줄기세포, 중복성 줄기세포 등으로 나누어지며 전능성 줄기세포는 하나의 완전한 개체로 발생할 수 있는 세포이며 다기능성 줄기세포는 개체가 될 수는 없지만 다양한 기관으로 분화할 수 있는 줄기세포이고 중복성 줄기세포는 한 계통으로만 분화할 수 있는 줄기세포이다.
On the other hand, stem cells are undifferentiated cells and cells that are the basis of cells or tissues that make up an individual, and are capable of self-producing and have a multi-differentiation ability to differentiate into cells having specific functions according to the environment. Stem cells are divided into pluripotent stem cells, multifunctional stem cells, and redundant stem cells according to their differentiation capacity. Pluripotent stem cells are cells that can develop into a single complete individual, and multifunctional stem cells cannot be individual but various organs Stem cells that can differentiate into and redundant stem cells are stem cells that can differentiate into only one line.

줄기세포는 다양한 성장인자를 생산하여 세포의 분화와 분열을 촉진하는 것으로 알려져 있다. 피부에 존재하는 줄기세포는 표피 기저층에 2~7% 정도 존재하며 피부의 손상 시 세포분열을 촉진하는 재생에 관여한다. 하지만 노화에 의해 미분화된 줄기세포의 수와 기능이 줄어들게 되고 피부의 재생력을 상실하게 된다.
Stem cells are known to promote the differentiation and division of cells by producing a variety of growth factors. Stem cells present in the skin are present in the basement layer of the epidermis 2-7% and is involved in regeneration that promotes cell division in case of skin damage. However, due to aging, the number and function of undifferentiated stem cells is reduced, and the regeneration of skin is lost.

최근 줄기세포를 이용한 화장료에 대한 관심이 높아지고 있으며 이에 대한 연구도 늘어나고 있다. 예를 들면 지방유래 줄기세포 배양액을 함유하는 화장료조성물(대한민국 공개특허 10-2010-0036389)과 지방조직유래 다분화능 줄기세포 배양물 및 그 추출 단백질을 함유한 화장료조성물(대한민국 공개특허 10-2010-0008763)등이 개발되었다. 하지만 이러한 동물성 특히, 인체 줄기세포를 이용한 화장료는 감염과 같은 안전성 미확보와 인체줄기세포 사용에 대한 부정적 인식으로 인한 문제점이 제기되고 있다.
Recently, interest in cosmetics using stem cells is increasing, and research on this is increasing. For example, a cosmetic composition containing adipose derived stem cell culture solution (Korea Patent Publication No. 10-2010-0036389) and a cosmetic composition containing adipose tissue-derived multipotent stem cell culture and its extracted protein (Korea Patent Publication No. 10-2010- 0008763). However, such animal, in particular, cosmetics using human stem cells has been raised problems due to the lack of safety, such as infection and negative recognition of the use of human stem cells.

이러한 동물성 줄기세포의 문제점을 줄이기 위하여 식물줄기세포에 대한 연구도 계속되어 녹두 줄기세포 배양산물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물(대한민국 공개특허 10-2010-0080370)과 사과 줄기세포를 이용한 피부노화 방지용 화장료 조성물(대한민국 공개특허 10-2009-0108812), 아주가 랩탄스 줄기세포를 이용한 항노화용 화장료 조성물(대한민국 공개특허 10-2009-0104223) 등이 개발되었다. 하지만 해조류 줄기세포를 이용한 화장료에 대해서는 연구된바 없다.
In order to reduce the problems of animal stem cells, research on plant stem cells is continued, and a cosmetic composition (Korean Patent Publication No. 10-2010-0080370) containing mung bean stem cell culture products as an active ingredient and apple stem cells are used for preventing skin aging. Cosmetic compositions (Korean Patent Publication No. 10-2009-0108812), Azuga anti-aging cosmetic composition using the raptans stem cells (Korean Patent Publication No. 10-2009-0104223) and the like have been developed. However, no cosmetics using algae stem cells have been studied.

따라서 본 발명자들은 해조류의 줄기세포로부터 피부개선 화장료로서 적합한 성분을 찾기 위하여 다양한 해조류를 검색한 결과 참김의 줄기세포 추출물이 항산화활성, 세포증식효과, 콜라겐 합성효과 및 콜라겐분해효소 활성억제효과가 뛰어나 피부 노화방지 효과를 가지며 이를 함유한 화장료 조성물은 우수한 보습효과와 피부진정효과를 가지는 것을 발견하였다. Therefore, the present inventors searched various seaweeds to find a suitable ingredient for skin improvement cosmetics from the stem cells of algae, and as a result, the stem cell extract of sesame seed has excellent antioxidative activity, cell proliferation effect, collagen synthesis effect and collagenase activity inhibitory effect. It has been found that the cosmetic composition containing the anti-aging effect has an excellent moisturizing effect and skin soothing effect.

또한 본 발명의 화장료는 천연물로써 자극이 없어 피부에 안전할 뿐만 아니라 화장료로서의 안정성도 우수한 것을 발견하였다.
In addition, the cosmetics of the present invention was found to be safe for the skin as well as excellent stability as a natural product because there is no irritation.

본 명세서 전체에 걸쳐 다수의 논문 및 특허문헌이 참조되고 그 인용이 표시되어 있다. 인용된 논문 및 특허문헌의 개시 내용은 그 전체로서 본 명세서에 참조로 삽입되어 본 발명이 속하는 기술 분야의 수준 및 본 발명의 내용이 보다 명확하게 설명된다.
Numerous papers and patent documents are referenced and cited throughout this specification. The disclosures of cited papers and patent documents are incorporated herein by reference in their entirety, and the level of the technical field to which the present invention belongs and the contents of the present invention are more clearly explained.

본 발명자들은 해조류의 줄기세포로부터 피부개선 화장료로서 적합한 성분을 찾기 위하여 노력하였고 그 결과 해조류인 참김의 줄기세포 추출물이 항산화활성, 세포증식효과, 콜라겐 합성효과 및 콜라겐분해효소 활성억제효과를 가짐으로써 피부 재생 및 노화방지효과가 뛰어나며 이를 함유한 화장료 조성물은 우수한 보습효과와 피부진정효과를 가지는 것을 발견하였다. The present inventors endeavored to find a suitable ingredient for skin improvement cosmetics from the stem cells of algae, and as a result, the stem cell extract of seaweed, Sesame seaweed, has antioxidative activity, cell proliferation effect, collagen synthesis effect and collagenase activity inhibitory effect. Excellent regeneration and anti-aging effect and the cosmetic composition containing it was found to have excellent moisturizing effect and skin soothing effect.

또한, 본 발명의 화장료는 천연물로써 자극이 없어 피부에 안전할 뿐만 아니라 화장료로서의 안정성도 우수한 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하게 되었다. In addition, the cosmetic of the present invention has been completed by confirming that the natural product has no irritation and is not only safe for the skin but also excellent in cosmetic stability.

따라서 본 발명의 목적은 해조류인 참김의 줄기세포 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부상태 개선용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
Therefore, an object of the present invention is to provide a cosmetic composition for improving skin condition containing stem cell extract of seaweed sesame as an active ingredient.

본 발명의 다른 목적 및 이점은 하기 발명의 상세한 설명, 청구범위 및 도면에 의해 보다 명확하게 된다.
Other objects and advantages of the present invention will become apparent from the following detailed description, claims and drawings.

본 발명은 해조류 줄기세포 추출물이 함유된 피부상태 개선용 화장료 조성물을 제공한다.The present invention provides a cosmetic composition for improving skin condition containing algae stem cell extract.

본 발명자들은 해조류의 줄기세포로부터 피부개선 화장료로서 적합한 성분을 찾기 위하여 예의 연구 노력하였다. 그 결과 상술한 장점을 가지는 참김의 줄기세포 추출물이 함유된 화장료 조성물을 완성하였으며, 줄기세포 추출물이 항산화활성, 세포증식효과, 콜라겐 합성효과 및 콜라겐분해효소 활성억제효과를 가짐으로써 피부 재생 및 노화방지효과가 뛰어나며, 이를 함유한 화장료 조성물은 우수한 보습효과와 피부진정효과를 나타낸다는 것을 확인하였다.
The present inventors earnestly researched to find a suitable component as a skin improvement cosmetics from the stem cells of seaweed. As a result, the cosmetic composition containing the stem cell extract of sesame seed having the above-mentioned advantages was completed, and the stem cell extract had antioxidant activity, cell proliferation effect, collagen synthesis effect, and collagenase activity inhibitory effect, thereby preventing skin regeneration and aging. Excellent effect, it was confirmed that the cosmetic composition containing it exhibits an excellent moisturizing effect and soothing effect.

본 발명의 일 양태에 따르면 본 발명은 해조류 줄기세포 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부상태 개선용 화장료 조성물을 제공한다.According to one aspect of the invention the present invention provides a cosmetic composition for improving the skin condition containing the algae stem cell extract as an active ingredient.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명에서 사용되는 해조류에는 바람직하게는 톳(Hizikia fusiformis), 미역(Undaria pinnatifida), 다시마(Laminaria japonica), 대황(Eisenia bicyclis), 모자반(Sargassum confusum), 우뭇가사리(Gelidium amansii), 참김(Porphyra tenera), 돌김(Porphyra yezoensis), 파래김(Undaria pinnatifida), 파래(Enteromorpha) 및 청각(Codium fragile) 등을 사용할 수 있으며, 보다 바람직하게는 참김(Porphyra tenera), 돌김(Porphyra yezoensis), 파래김(Undaria pinnatifida)을 사용할 수 있으며, 가장 바람직하게는 참김(Porphyra tenera)을 사용할 수 있다.
According to a preferred embodiment of the present invention, the seaweeds used in the present invention are preferably Hizikia fusiformis , seaweed ( Undaria pinnatifida ), kelp ( Laminaria japonica ), rhubarb ( Eisenia bicyclis ), Sarbansum ( Sagassum confusum ) ( Gelidium amansii ), sesame ( Porphyra tenera ), sesame ( Porphyra yezoensis ), green seaweed ( Undaria pinnatifida ), green seaweed (Enteromorpha) and hearing ( Codium fragile ) can be used, more preferably sesame seed ( Porphyra tenera ), Porphyra yezoensis , Undaria pinnatifida may be used, and most preferably Porphyra tenera may be used.

본 발명에서 이용되는 해조류의 줄기세포는 바람직하게는 전능성 줄기세포, 다기능성 줄기세포 및 중복성 줄기세포를 사용할 수 있으며, 가장 바람직하게는 전능성 줄기세포를 사용할 수 있다. Stem cells of the algae used in the present invention may preferably be used as omnipotent stem cells, multifunctional stem cells and redundant stem cells, and most preferably can be used as omnipotent stem cells.

본 발명의 일 실시예로서 참김(Porphyra tenera)은 홍조식물 보라털과 김속의 해조류로써 참김의 줄기세포는 참김의 사상체인 콘츄셀리스(chochucelis)로 사람의 수정란처럼 하나의 개체로 분화할 수 있는 전능성을 가진다. 참김 줄기세포는 해수를 포함하는 액체 배지 상에서 배양할 수 있으며, 배양시 광조건 및 배양액의 조성 변화로 하나의 완전한 개체로 분화시킬 수 있다.
As an embodiment of the present invention, the sesame seed (Porphyra tenera) is a seaweed algae of red algae plant and purple seaweed, and the stem cells of sesame seaweed are chochucelis, a filamentous body of sesame seed, and are omnipotent to differentiate into one individual like human fertilized egg. Has Sesame stem cells can be cultured on a liquid medium containing seawater, and can be differentiated into one complete individual due to changes in light conditions and composition of the culture medium.

상기 해조류 줄기세포를 액체상에서 배양할 경우 바람직하게는 광생물반응기(photobioreactor)를 이용할 수 있다. When culturing the algae stem cells in a liquid phase, preferably a photobioreactor may be used.

광생물 반응기는 미세조류 배양장치로서, 통상적으로 이것을 광생물반응기 (Photobioreactor) 라고 지칭한다. 미세조류 배양 장치는 광합성을 하는 미세조류의 특징처럼, 광에너지의 효과적인 사용을 위해 투명한 재질의 유리, 플라스틱, 비닐형태의 주머니, 연못형태로 반응기의 부피당 표면적을 넓게 하여, 많은 광에너지를 흡수 미세조류가 사용할 수 있도록 설계되어 있다.
The photobioreactor is a microalgae culturing apparatus, commonly referred to as a photobioreactor. Microalgae culturing device, like the characteristics of microalgae that photosynthesis, absorbs a lot of light energy by widening the surface area per volume of the reactor in the form of glass, plastic, vinyl bags, ponds, etc. It is designed for use by birds.

상기에서 배양된 줄기세포를 이후 추출하는 과정을 거치는데, 본 발명의 해조류 줄기세포 추출물은 해조류의 줄기세포를 기존의 공지된 방법을 이용하여 추출할 수 있으며, 이러한 공지된 방법에는 화학적 방법(예를 들면 에탄올과 같은 용매)을 이용한 추출과 물리적 방법(예를 들면 초음파, 압착)을 이용한 추출을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
After the process of extracting the stem cells cultured in the above, the algae stem cell extract of the present invention can be extracted by using a known method of the stem cells of algae, such a known method in the chemical method (eg For example, extraction using a solvent such as ethanol) and extraction using a physical method (for example, ultrasonic or compression) may be used, but are not limited thereto.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명인 해조류 줄기세포 추출물을 유효성분으로 함유한 화장료 조성물에서, 해조류 줄기세포 추출물은 바람직하게는 0.00001 중량% 내지 50 중량%로 함유하고, 보다 바람직하게는 1 중량% 내지 20 중량%로 함유하며, 보다 더 바람직하게는 3 중량% 내지 8 중량%로 함유하며, 가장 바람직하게는 5 중량%를 함유한다. 해조류 줄기세포 추출물이 0.00001 중량% 이하로 함유 시에는 그 효과가 미미하고 50 중량%이상으로 함유시에는 그 효과가 크게 증가하지 않는다.
According to a preferred embodiment of the present invention, in the cosmetic composition containing the seaweed stem cell extract of the present invention as an active ingredient, the seaweed stem cell extract is preferably contained in 0.00001% to 50% by weight, more preferably 1% by weight % To 20% by weight, even more preferably 3% to 8% by weight, most preferably 5% by weight. When the seaweed stem cell extract is contained in 0.00001% by weight or less, the effect is insignificant, and when contained in more than 50% by weight, the effect does not increase significantly.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 해조류 줄기세포 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to seaweed stem cells as active ingredients, and include conventional auxiliaries such as stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavors, and carriers. Include.

본 발명의 피부보호용 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition for protecting the skin of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactants- Containing cleansing, oils, powder foundations, emulsion foundations, wax foundations, sprays and the like, but is not limited thereto. More specifically, it can be manufactured in the form of a soft lotion, a nutritional lotion, a nutritional cream, a massage cream, an essence, an eye cream, a cleansing cream, a cleansing foam, a cleansing water, a pack, a spray or a powder.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oils, vegetable oils, waxes, paraffins, starches, trachants, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc oxide may be used as carrier components. Can be.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.In the case where the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. Especially, in the case of a spray, a mixture of chlorofluorohydrocarbons, propane / Propane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or an emulsion, a solvent, a dissolving agent or an emulsifying agent is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid carrier diluents such as water, ethanol or propylene glycol, suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystals Soluble cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.
When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, an isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide. Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.

본 발명의 피부상태개선효과는 항산화활성, 세포활성증진효과, 콜라겐 합성효과 및 콜라겐분해효소 활성억제효과와 보습 및 피부진정효과를 의미하나, 이에 제한되는 것은 아니다.
Skin condition improvement effect of the present invention means antioxidant activity, cell activity promoting effect, collagen synthesis effect and collagenase activity inhibitory effect and moisturizing and skin soothing effect, but is not limited thereto.

본 발명의 특징 및 이점을 요약하면 다음과 같다:The features and advantages of the present invention are summarized as follows:

(ⅰ) 본 발명은 해조류 줄기세포 추출물을 유효성분으로 하여 피부상태 개선용 화장료 조성물을 제공한다.(Iii) The present invention provides a cosmetic composition for improving skin condition using the algae stem cell extract as an active ingredient.

(ⅱ) 본 발명의 해조류 줄기세포 추출물 및 이를 유효성분으로 함유하는 화장료는 항산화활성, 세포증식효과, 콜라겐 합성효과 및 콜라겐분해효소 활성억제효과가 뛰어나며 우수한 보습효과와 피부진정효과를 가진다.(Ii) The seaweed stem cell extract of the present invention and the cosmetic containing it as an active ingredient are excellent in antioxidant activity, cell proliferation effect, collagen synthesis effect and collagenase activity inhibitory effect, has an excellent moisturizing effect and skin soothing effect.

(ⅲ) 또한, 본 발명의 피부상태 개선효과를 가지는 화장료는 해조류의 줄기세포로부터 얻은 유효성분을 함유하여 피부에 안전하며 화장료로서의 안정성도 우수한 이점이 있다.
(Iii) In addition, the cosmetics having an effect of improving the skin condition of the present invention contains an active ingredient obtained from stem cells of algae, which is safe for the skin and has an excellent stability as a cosmetic.

도 1은 참김 줄기세포 추출물의 콜라겐 합성 증가율을 나타낸다.
도 2는 참김 줄기세포 추출물의 콜라겐분해효소(MMP-1) 활성(%)를 나타낸다.
도 3은 참김 줄기세포 추출물이 함유된 영양로션의 보습도를 나타낸다.
도 4는 참김 줄기세포 추출물이 함유된 영양로션의 보습개선율을 나타낸다.
도 5는 참김 줄기세포 추출물의 피부진정효과를 확인한 사진이다.
Figure 1 shows the collagen synthesis increase rate of sesame seed stem cell extract.
Figure 2 shows the collagenase (MMP-1) activity (%) of sesame stem cell extract.
Figure 3 shows the moisturizing nutrient lotion containing sesame seed stem cell extract.
Figure 4 shows the moisturizing improvement rate of nutrient lotion containing sesame seed stem cell extract.
5 is a photograph confirming the skin soothing effect of sesame stem cell extract.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명 하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. It is to be understood that both the foregoing general description and the following detailed description are exemplary and explanatory only and are not to be construed as limiting the scope of the present invention. It will be self-evident.

제조예 1: 참김 줄기세포 추출물(제조예1) 및 참김 추출물(비교제조예 1)의 제조Preparation Example 1: Preparation of sesame seed stem cell extract (Preparation Example 1) and sesame seed extract (Comparative Preparation Example 1)

제조예 1에 사용된 참김 줄기세포(전능성 줄기세포)는 전라남도해양바이오연구원 분양받아 20℃, 800 Lux의 광생물반응기(photobioreactor, 본사 자체 제작)에서 30일간 배양한 후 0.2 mm 와트만 여과지(No. 5A Watman paper)에 여과하여 배지를 모두 제거하고 증류수로 세척한 배양세포 500 g을 4-8℃에서 압착 추출한 액 20 g을 최종 추출하였다. Sesame seed stem cells (almighty stem cells) used in Preparation Example 1 were distributed by Jeollanam-do Marine Bio Research Institute and incubated in a photobioreactor (manufactured by the company) at 20 ° C and 800 Lux for 30 days, followed by 0.2 mm Whatman filter paper (No 5 g of Watman paper was removed to remove all of the medium and 20 g of the cultured 500 g of the cultured cells washed with distilled water at 4-8 ° C.

비교제조예 1은 진도 인근의 해안에서 양식한 참김 500 g을 증류수에 세척하고 상기 제조예 1에서 서술한 방법으로 참김 추출물을 제조하였다.
In Comparative Preparation Example 1, 500 g of sesame seed cultured on the shore near Jindo was washed in distilled water, and sesame seed extract was prepared by the method described in Preparation Example 1.

제조예 2: 참김 줄기세포 추출물을 함유하는 영양로션의 제조Preparation Example 2 Preparation of Nutritional Lotion Containing Sesame Stem Cell Extract

하기 표 1에 기재된 성분 및 조성으로, 상기 제조예 1에서 제조한 참김 줄기세포 추출물을 각각 1.0, 3.0, 5.0 중량%로 함유하는 영양 로션(실시예 1 내지 3) 및 이를 함유하지 않는 통상적인 로션(비교실시예 1)과 상기 비교제조예 1에서 제조한 참김 추출물을 함유하는 로션(각각 비교실시예 2)을 제조하였다.The nutritional lotion (Examples 1 to 3) containing 1.0, 3.0, and 5.0% by weight of the sesame seed stem cell extract prepared in Preparation Example 1, respectively, according to the ingredients and compositions shown in Table 1 below, and a conventional lotion without the same (Comparative Example 1) and a lotion (each Comparative Example 2) containing sesame seed extract prepared in Comparative Preparation Example 1 were prepared.

구체적인 제조방법은 다음과 같다:Specific manufacturing methods are as follows:

당업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 따라, 성분 10, 11, 13 및 16을 차례로 넣고 80℃로 승온하여 용해시키고, 성분 2 내지 9와 성분 12를 넣어 용해시켰다. 이후, 50℃로 냉각하고 성분 14 내지 15를 넣어 혼합한 후 실온으로 냉각시키고, 본 발명의 성분 1을 넣어 영양로션을 완성하였다. According to the method conventionally used in the art, components 10, 11, 13, and 16 were sequentially added and dissolved by heating to 80 ° C, and components 2 to 9 and 12 were dissolved. Thereafter, the mixture was cooled to 50 ° C., ingredients 14 to 15 were mixed, cooled to room temperature, and the ingredients 1 of the present invention were added to complete the nutrition lotion.

동일한 방법으로 제조예 1 을 첨가하지 않은 비교실시예 1 및 제조예 1 대신 성분 17를 첨가하여 비교실시예 2를 제조하였다.Comparative Example 2 was prepared by adding component 17 instead of Comparative Example 1 and Preparation Example 1, in which Example 1 was not added.

번호number 원 료Raw material 비교실시예1Comparative Example 1 비교실시예 2Comparative Example 2 실시예1Example 1 실시예 2Example 2 실시예 3Example 3 1One 제조예 1Preparation Example 1 -- -- 1.01.0 3.03.0 5.05.0 22 밀납Beeswax 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 33 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 44 솔비탄 세스퀴올레이트Solbitan Sesquioleate 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 2.02.0 55 유동 파라핀Liquid paraffin 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 66 소르비탄 스테아레이트Sorbitan stearate 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 77 친유형 모노스테아린산 글리세린Lipophilic Monostearic Acid Glycerin 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 88 스테아린산Stearic acid 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 1.01.0 99 글리세릴스테아레이트/피이지-400 스테아레이트Glyceryl Stearate / Pig-400 Stearate 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 1010 프로필렌글리콜Propylene glycol 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 1111 카르복시폴리머Carboxy Polymer 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 4.04.0 1212 트리에탄올아민Triethanolamine 0.30.3 0.30.3 0.30.3 0.30.3 0.30.3 1313 방부제antiseptic 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 5.05.0 1414 색소Pigment 3.03.0 3.03.0 3.03.0 3.03.0 3.03.0 1515 향료Spices 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 0.50.5 1616 정제수Purified water 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 잔량Balance 1717 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 -- 3.03.0

단위: 중량%Unit: weight%

실험예Experimental Example 1:  One: 참김Patience 줄기세포 추출물의 항산화 효과 확인 Antioxidant Effect of Stem Cell Extracts

상기 제조예 1에서 제조한 참김 줄기세포 추출물에 대하여 DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl, Sigma)법을 이용한 전자공여능(전자공여능은 자유 라디칼에 대한 전자를 공여하여 산화억제력을 나타내는 척도로 DPPH에 대한 전자공여능이 크면 높은 항산화활성 및 활성산소를 비롯한 다른 라디칼에 대한 소거작용을 기대할 수 있음)을 측정하여 항산화 효과를 확인하였다. 상기 제조예 1의 참김 줄기세포 추출물과 비교제조예 1의 참김 추출물을 하기 표 1와 같이 희석하여 사용하고, 당업계에서 일반적으로 사용하는 항산화제인 아스코브산(ascorbic acid)을 0.1%로 희석한 액과 자유 라디칼 소거능을 비교하였다. Electron donating ability (electron donating ability using DPPH (2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl, Sigma) method for the sesame seed stem cell extract prepared in Preparation Example 1 as a measure of oxidation inhibition by donating electrons to free radicals If the electron donating ability to DPPH is large, high antioxidant activity and scavenging action against other radicals including active oxygen can be expected). The sesame seed stem cell extract of Preparation Example 1 and the sesame seed extract of Comparative Preparation Example 1 were used as shown in Table 1 below, diluted with 0.1% ascorbic acid, an antioxidant commonly used in the art. Liquid and free radical scavenging ability were compared.

참김 줄기세포 추출물Sesame Stem Cell Extract 참김 추출물Sesame Extract 0.1%0.1% -- 1.0%1.0% -- 0.1%0.1% -- 1.0%1.0%

0.2 mM DPPH 에탄올 용액 1 ㎖에 상기 표 2의 참김 줄기세포 추출물 희석액을 각각 2 ㎖ 첨가하고 실온에서 10초간 잘 혼합한 후 37℃에서 30분간 반응시켰다. 그리고 517 nm에서 UV/VIS 분광광도계(UV/VIS Spectrophotometer, Humacoperation , Korea)를 이용하여 흡광도를 측정하고 하기 수학식 1에 따라서 계산한 전자공여능을 하기 표 3과 도 1에 나타내었다. 2 ml of the sesame stem cell extract dilution of Table 2 was added to 1 ml of 0.2 mM DPPH ethanol solution, and the mixture was mixed well at room temperature for 10 seconds and then reacted at 37 ° C. for 30 minutes. And the absorbance was measured using a UV / VIS spectrophotometer (UV / VIS Spectrophotometer, Humacoperation, Korea) at 517 nm and the electron donating ability calculated according to the following Equation 1 is shown in Table 3 and FIG.

Figure pat00001
Figure pat00001

자유라디칼 소거능(%)Free radical scavenging ability (%) 아스코르브산Ascorbic acid 제조예 1
(0.1%)
Production Example 1
(0.1%)
제조예 1
(1.0%)
Production Example 1
(1.0%)
비교 제조예 1
(0.1%)
Comparative Production Example 1
(0.1%)
비교 제조예 1
(1.0%)
Comparative Production Example 1
(1.0%)
88%88% 87%87% 95%95% 71%71% 80%80%

상기 표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 참김 줄기세포 추출물 희석액은 매우 높은 전자공여능을 나타내어 비교제조예 1의 일반 참김추출물보다 우수한 효과를 나타내었다. 또한, 참김 줄기세포 추출물은 동일농도일 때 강력한 항산화제인 아스코르브산과 유사한 전자공여능을 나타내어 강력한 항산화 효과가 있음을 확인하였다.
As shown in Table 3, the sesame stem cell extract diluent of the present invention exhibited a very high electron donating ability, showing an excellent effect than the general sesame extract of Comparative Preparation Example 1. In addition, sesame seed stem cell extract showed a strong antioxidant effect by showing an electron donating ability similar to ascorbic acid, a powerful antioxidant at the same concentration.

실험예Experimental Example 2:  2: 참김Patience 줄기세포 추출물의 세포증식효과 확인 Confirmation of Cell Proliferation Effect of Stem Cell Extract

상기 제조예 1에서 제조한 참김 줄기세포 추출물에 대하여 세포배양을 이용한 세포 증식 효과를 측정하였다. 세포 증식 시험은 문헌(Mosmann T. et al. Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival: Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays, J. Immunol. Meth., 65:55-63(1983))에 기재된 방법에 따라 실험하였다. 세포 증식 및 독성 시험에 사용한 배지는 10% FBS(fetal bovine serum, Gibco)를 포함하는 DMEM(Dulbeco"s Modified Eagle"s Medium, Gibco)에 인간 섬유모세포 세포주(KCLB, CCD-986)를 24-웰 플레이트에 1X104 세포/㎖의 수로 접종하여 사용하였다. 접종 24시간 후 FBS가 첨가되지 않은 배지로 교체하고 상기 제조예1의 참김 줄기세포 추출물을 농도별로 첨가한 후 3일간 37℃, 5% CO2 배양기(incubator)에 배양하였으며, 대조군은 배양액만 넣어주었다. 배양이 끝난 후 MTT[3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide, Dojindo Laboratories ZY903)용액 1 ㎖/웰 씩 첨가한 후 37℃, CO2 배양기에서 4시간 후, 배지를 제거하고 여기에 DMSO(dimethylsulfoxide, Sigma D 4540)를 200 ㎕씩 첨가한 뒤 550 nm에서 흡광도를 측정하여 하기 수학식 2의 계산식에 따라 세포 증식율을 계산하여 하기 표 4에 나타내었다.The cell proliferation effect using cell culture was measured for the sesame stem cell extract prepared in Preparation Example 1. Cell proliferation tests are described in Mosmann T. et al. Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival : Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays, J. Immunol. Meth., 65: 55-63 (1983)). The medium used for cell proliferation and toxicity test was a human fibroblast cell line (KCLB, CCD-986) in Dulbeco's Modified Eagle's Medium, Gibco (DMEM) containing 10% FBS (fetal bovine serum, Gibco). The well plates were used inoculated with 1 × 10 4 cells / ml of water. After 24 hours of inoculation, the medium was replaced with no FBS, and the sesame stem cell extract of Preparation Example 1 was added at different concentrations, followed by 3 days of 37 ° C. and 5% CO 2. The culture was carried out in an incubator, and only the control medium was added to the control group. After incubation, 1 ml / well of MTT [3- (4,5-Dimethylthiazol-2-yl) -2,5-Diphenyltetrazolium Bromide, Dojindo Laboratories ZY903) solution was added, and after 4 hours at 37 ° C. in a CO 2 incubator. After removing the medium and adding 200 μl of DMSO (dimethylsulfoxide, Sigma D 4540) to each, and measuring absorbance at 550 nm, the cell proliferation rate was calculated according to the following Equation 2 and shown in Table 4 below.

Figure pat00002
Figure pat00002

추출물 농도(%)Extract concentration (%) 세포 증식율(%)Cell proliferation rate (%) 제조예 1Preparation Example 1 비교 제조예 1Comparative Production Example 1 0 (대조군)0 (control) 100100 100100 0.010.01 100100 100100 0.030.03 108108 105105 0.050.05 114.13114.13 110110 0.10.1 120120 102102 0.150.15 121121 98.698.6 0.30.3 131131 95.295.2

상기 표 4에서는 세포 성장 최적 조건에서의 세포 증식(대조군)을 100%로 하였을 때, 본 발명의 제조예 1의 참김 줄기세포 추출물은 세포증식능이 있음을 알 수 있으며 비교제조예 1의 일반 참김 추출물이 0.15% 이상에서 세포독성을 나타냄에 대해 본 발명의 참김 줄기세포 추출물은 독성이 없고 처리농도가 높을수록 세포 증식력도 높아짐을 확인할 수 있었다.
In Table 4, when the cell proliferation (control) at the optimum conditions for cell growth is 100%, the sesame stem cell extract of Preparation Example 1 of the present invention can be seen that the cell proliferation ability and the general sesame extract of Comparative Preparation Example 1 It can be confirmed that the sesame stem cell extract of the present invention has no toxicity and exhibits cytotoxicity at 0.15% or more, and the higher the treatment concentration, the higher the cell proliferation ability.

실험예Experimental Example 4:  4: 참김Patience 줄기세포 추출물의 콜라겐 합성 증진효과 확인 Confirmation of Collagen Synthesis Enhancement Effect of Stem Cell Extracts

상기 제조예 1의 참김 줄기세포 추출물의 콜라겐 합성 증진효과를 알아보기 위해 24-웰 플레이트에 인간 섬유모세포 세포주(KCLB, CCD-986)를 5× 104개가 되도록 접종한 후 37℃, 5% CO2 하에서 24시간 배양한 후 0.05% FBS가 들어있는 배지로 교환하고 제조예 1과 비교제조예 1을 세포독성이 나타나지 않는 0.1% 농도로 처리하여 48시간 배양하고 배양한 각 배지를 수집하여 마이크로플레이트-웰(microplate well)에 넣고 타입-Ⅰ프로콜라겐 Kit(Takara, Japan)를 이용하여 콜라겐 양을 측정하였다.In order to examine the collagen synthesis enhancement effect of the sesame seed stem cell extract of Preparation Example 1 inoculated to 5 × 10 4 human fibroblast cell line (KCLB, CCD-986) in a 24-well plate 37 ℃, 5% CO After 24 hours of incubation at 2 and exchanged with a medium containing 0.05% FBS, and treated with Preparation Example 1 and Comparative Preparation Example 1 at a concentration of 0.1% that does not show cytotoxicity, and cultured for 48 hours and collected each culture medium microplate The amount of collagen was measured in a well (microplate well) using a Type-I procollagen Kit (Takara, Japan).

생합성 증가율은 하기 수학식 3에 따라 계산하고 표 5에 나타내었다.    Biosynthesis growth rate is calculated according to the following equation 3 and shown in Table 5.

Figure pat00003
Figure pat00003

콜라겐 합성 증가율(%)Collagen Synthesis Growth Rate (%) 아스코르브산Ascorbic acid 제조예 1Preparation Example 1 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 48%48% 50%50% 37%37%

시험결과 본 발명의 참김 줄기세포 추출물은 50%의 콜라겐 합성 증진 효과를 나타내었으며 일반 참김 추출물보다 높은 콜라겐 합성 증진 효과를 나타내었다(도1). 또한, 본 발명의 참김 줄기세포 추출물은 우수한 콜라겐 합성 증진효과를 가지는 것으로 알려진 아스코르브산과 유사한 증진효과를 나타냄으로써 매우 우수한 콜라겐 합성 증진효과가 있음을 알 수 있다.
Test results showed that the sesame stem cell extract of the present invention showed a collagen synthesis promoting effect of 50% and higher collagen synthesis promoting effect than the normal sesame extract (Fig. 1). In addition, it can be seen that the sesame seed stem cell extract of the present invention has a very good collagen synthesis promoting effect by showing an enhancement effect similar to ascorbic acid known to have an excellent collagen synthesis promoting effect.

실험예 5: 참김 줄기세포 추출물의 콜라겐 분해효소활성 억제효과Experimental Example 5: Inhibitory Effect of Sesame Stem Cell Extract on Collagen Degrading Enzyme Activity

상기 제조예 1의 참김 줄기세포 추출물의 콜라겐 합성 증진효과를 알아보기 위해 24-웰 플레이트에 인간 섬유모세포 세포주(KCLB, CCD-986)를 5× 104개가 되도록 접종한 후 37℃, 5% CO2 하에서 24시간 배양한 후 0.05% FBS가 들어있는 배지로 교환하고 제조예 1과 비교제조예 1을 세포독성을 나타내지 않는 0.1% 농도로 처리하여 48시간 배양하고 배양한 각 배지를 수집하여 마이크로플레이트-웰에 넣고 MMP-1 표준액(Takara Bio Inc. Japan)와 정량용 완충액(Takara Bio Inc. Japan)을 넣은 후 상온에서 2시간 배양하였다. 배양 후 세척용 완충액으로 세척하고, 퍼옥시다제 컨쥬게이트 용액(peroxidase conjugate solution, Takara Bio Inc. Japan)을 넣어 반응시키고 PBS로 세척하였다. 세척 후 TMB 기질(3,3´,5,5´-tetramethylbenzidine, Takara Bio Inc. Japan)를 넣고 상온에서 30분간 반응시킨 후 1 M 황산을 넣어 450 nm에서 흡광도를 측정하였다. In order to examine the collagen synthesis enhancement effect of the sesame seed stem cell extract of Preparation Example 1 inoculated to 5 × 10 4 human fibroblast cell line (KCLB, CCD-986) in a 24-well plate 37 ℃, 5% CO After 24 hours of incubation under 2 , exchanged with a medium containing 0.05% FBS, and treated with Preparation Example 1 and Comparative Example 1 at a concentration of 0.1% which does not exhibit cytotoxicity. In a well, MMP-1 standard solution (Takara Bio Inc. Japan) and a quantitative buffer solution (Takara Bio Inc. Japan) were added and incubated at room temperature for 2 hours. After incubation, the cells were washed with a washing buffer, peroxidase conjugate solution (Peroxidase conjugate solution, Takara Bio Inc. Japan) was added and reacted and washed with PBS. After washing, TMB substrate (3,3 ', 5,5'-tetramethylbenzidine, Takara Bio Inc. Japan) was added and reacted at room temperature for 30 minutes, and then 1M sulfuric acid was added to measure absorbance at 450 nm.

시험결과 본 발명의 참김 줄기세포는 콜라겐분해효소인 MMP-1의 활성을 억제하는 것으로 나타났으며 일반 참김 추출물보다 우수한 효과를 나타내었고, 그 결과는 표 6와 같았다. 또한, 동일 농도에서 뛰어난 콜라겐분해효소 억제효과를 가진다고 알려진 asiaticoside와 유사한 효과를 나타내어 매우 높은 콜라겝분해효소 활성 억제능을 가진다고 판단된다. Test results showed that the sesame stem cells of the present invention inhibit the activity of the collagenase MMP-1 and showed a superior effect than the normal sesame extract, the results are shown in Table 6. In addition, at the same concentration, it showed an effect similar to that of asiaticoside, which is known to have an excellent inhibitor of collagenase.

시료 (0.1%)Sample (0.1%) 콜라겐분해효소(MMP-1) 활성(%)Collagenase (MMP-1) activity (%) 음성 대조군(시료 무처리)Negative Control (No Sample) 100100 양성 대조군(asiaticoside)Positive control (asiaticoside) 8080 제조예 1Preparation Example 1 8686 비교제조예 1Comparative Preparation Example 1 9292

실험예Experimental Example 6:  6: 참김Patience 줄기세포 추출물을 함유하는 로션의 피부에 대한 보습효과 및 피부에 대한 안전성 시험, 화장료 성상 안정성 시험 Moisturizing effect on the skin of the lotion containing the stem cell extract, safety test on the skin, cosmetic property stability test

실험예Experimental Example 6-1: 피부에 대한 보습효과  6-1: Moisturizing effect on skin

상기 표 1의 실시예 1 내지 3 및 비교실시예 1내지 2의 영양로션을 인체에 적용하여 보습효과를 측정하였다. 피시험자에게 상기 실시예 1내지 3과 배교실시예1 내지 2를 도포한 후 수분측정기(Corneometer, CK electronics, Germany)를 이용하여 보습력을 측정하였다. 구체적인 측정방법은 총 10명의 피시험자의 시험부위를 세정하고, 30분 대기 후 측정한 값을 베이스라인으로 하고, 시료를 도포한 후 30분, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간 경과 후 보습도 및 보습유지도을 확인하여 표 7과 도 3에 나타내었고, 하기 수학식 4에 따라 보습개선율을 구하여 표 8과 도 4에 나타내었다.Moisturizing effect was measured by applying the nutrition lotions of Examples 1 to 3 and Comparative Examples 1 to 2 of Table 1 to the human body. After applying the Examples 1 to 3 and Apostasy Examples 1 to 2 to the test subjects, the moisturizing power was measured using a moisture meter (Corneometer, CK electronics, Germany). The specific measurement method is to clean the test site of 10 subjects, wait 30 minutes, and use the measured value as the baseline. After 30 minutes, 1 hour, 2 hours, 4 hours, and 8 hours after application of the sample, The moisturizing degree and the moisturizing induction map were confirmed and shown in Table 7 and FIG. 3, and the moisturizing improvement rate was obtained according to Equation 4 shown in Table 8 and FIG. 4.

보습력Moisturizing BaseBase 30분30 minutes 1시간1 hours 2시간2 hours 4시간4 hours 8시간8 hours 실시예1Example 1 31.3 31.3 51.0 51.0 52.7 52.7 48.0 48.0 47.0 47.0 46.8 46.8 실시예2Example 2 31.5 31.5 52.3 52.3 53.2 53.2 53.5 53.5 49.9 49.9 48.2 48.2 실시예3Example 3 32.0 32.0 50.3 50.3 54.2 54.2 53.5 53.5 49.9 49.9 51.2 51.2 비교실시예1Comparative Example 1 28.6 28.6 35.1 35.1 38.3 38.3 38.5 38.5 36.4 36.4 36.2 36.2 비교실시예2Comparative Example 2 30.3 30.3 50.4 50.4 51.7 51.7 49.1 49.1 44.1 44.1 42.8 42.8

Figure pat00004
Figure pat00004

보습개선율Moisturizing improvement rate 30분30 minutes 1시간1 hours 2시간2 hours 4시간4 hours 8시간8 hours 실시예1Example 1 62.9 62.9 68.4 68.4 53.4 53.4 50.2 50.2 49.5 49.5 실시예2Example 2 66.0 66.0 68.9 68.9 69.8 69.8 58.4 58.4 53.0 53.0 실시예3Example 3 57.2 57.2 69.4 69.4 67.2 67.2 55.9 55.9 60.0 60.0 비교실시예1Comparative Example 1 22.7 22.7 33.9 33.9 34.6 34.6 27.3 27.3 26.6 26.6 비교실시예2Comparative Example 2 66.366.3 70.6 70.6 62.0 62.0 45.5 45.5 41.3 41.3

시험결과 본 발명의 참김 줄기세포 추출물을 함유하는 실시예 1내지 3은 비교 실시예1 내지 2에 대하여 높은 보습도과 보습 유지도를 나타냄을 알 수 있었으며, 함유 농도가 높아질수록 보습 유지도가 높아짐을 알 수 있었다. 또한, 실시예 1내지 3은 8시간 경과 후에도 49% 이상의 높은 보습 개선율을 유지하여 매우 우수한 보습력을 나타냄을 알 수 있었다.
As a result, it can be seen that Examples 1 to 3 containing the sesame stem cell extract of the present invention exhibited high moisturizing and moisturizing retention with respect to Comparative Examples 1 and 2, and the higher the concentration, the higher the moisturizing retention. Could know. In addition, it can be seen that Examples 1 to 3 maintain very high moisturizing improvement rate of 49% or more after 8 hours, and show very good moisturizing power.

실험예Experimental Example 6-2:  6-2: 피부진정효과Soothing effect

피부자극에 과민반응을 보인 적이 없으며, 현재 피부병 내지 피부 알러지 증상이 없는 건강한 성인 남녀 실험자 10명의 팔 하박부에 폐쇄 첩포하여 48시간 경과 후 피부 자극 유무를 판정하였다. 피부반응은 국제접촉피부염연구회(ICDRG, International Contact Dermatitis Research Group)의 규정에 따라 판정하였고, 시험물질은 제조예 1, 비교제조예 1, 로 실시하였다. There was no hypersensitivity reaction to skin irritation, and 10 adult healthy men and women without skin disease or skin allergy symptoms were closed with a closed patch on the lower forearm of the arm to determine skin irritation after 48 hours. The skin reaction was determined according to the regulations of the International Contact Dermatitis Research Group (ICDRG), and the test substance was prepared in Preparation Example 1 and Comparative Preparation Example 1.

그 결과를 하기 표 9에 나타냈으며, 이를 증명할 수 있는 구체적인 사진을 도 5로 나타내었다. The results are shown in Table 9 below, and the specific pictures capable of proving this are shown in FIG. 5.

표 9와 도 5에서 알 수 있듯이 제조예 1과 비교제조예 1의 참김줄기세포추출물은 피부 자극완화효과가 있는 것으로 나타났으며, 이와 같은 결과로부터 피부 자극에 대한 진정 효과가 있음을 알 수 있었다. As can be seen from Table 9 and FIG. 5, the sesame stem cell extract of Preparation Example 1 and Comparative Preparation Example 1 was found to have a skin irritation-releasing effect, and from these results, it was found that there was a calming effect on skin irritation. .

번호number 구분division 피부자극도
(48시간)
Skin irritation
(48 hours)
1One SLS(대조군)SLS (Control) 33 22 SLS+비교 제조예 1SLS + Comparative Production Example 1 22 33 SLS+제조예 1SLS + Production Example 1 00

0: 자극 없음 1: 최소 자극 2: 약한 자극(홍반) 3: 심한 자극(홍반, 부종) 0: No irritation 1: Minimal irritation 2: Mild irritation (erythema) 3: Severe irritation (erythema, edema)

실험예Experimental Example 6-3:  6-3: 화장료에In cosmetics 대한 안정성 시험 For stability test

본 발명의 참김 줄기세포 추출물을 1 내지 5% 함유시킨 실시예 1 내지 3과 추출물을 함유하지 않는 무첨가 화장료인 비교실시예 1, 일반 참김 추출물을 함유시킨 비교실시예 2에 대하여 화장품으로서 보존 안정성을 평가하기 위하여 3개월간 온도별 변화에 따른 성상 안정성을 조사하고 그 결과를 표 10에 나타내었다.Preservation stability as cosmetics for Examples 1 to 3 containing 1 to 5% of sesame stem cell extract of the present invention and Comparative Example 1 containing no extract, and Comparative Example 2 containing a general sesame extract In order to evaluate the properties of the properties according to the change of temperature for 3 months, the results are shown in Table 10.

구분division 실시예1Example 1 실시예2Example 2 실시예3Example 3 비교실시예1Comparative Example 1 비교실시예2Comparative Example 2 -5℃-5 1주일, 1개월, 3개월1 week, 1 month, 3 months ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ 4℃4 ℃ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ 실온Room temperature ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎◎◎◎◎ ◎◎○◎◎ ○ 45℃45 ° C ◎◎○◎◎ ○ ◎◎○◎◎ ○ ◎◎○◎◎ ○ ◎◎○◎◎ ○ ◎○× ◎ ○ × ◎ : 아주양호 ○ : 양호 × : 변색, 변취, 상분리 ◎: Very good ○: Good ×: Discoloration, odor, phase separation

화장료 성상 안정성을 평가한 결과 일반 참김 추출물을 함유하는 비교실시예 2는 45℃에서 3개월 이상 보관 시 상분리 및 변색을 나타내어 화장료로 안정하지 못한 반면 본 발명의 실시예 1 내지 3과 비교실시예1은 변색, 변취 및 상분리가 없어 화장료로 안정함을 확인하였다.
As a result of evaluating the stability of cosmetic properties, Comparative Example 2 containing general sesame extract showed phase separation and discoloration when stored at 45 ° C. for at least 3 months, whereas it was not stable as a cosmetic, whereas Comparative Example 1 of Examples 1 to 3 of the present invention. It was confirmed that it is stable as a cosmetic because there is no discoloration, odor and phase separation.

Claims (8)

해조류 줄기세포 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부상태 개선용 화장료 조성물.
Cosmetic composition for improving skin condition containing algae stem cell extract as an active ingredient.
제 1 항에 있어서, 상기 해조류는 톳(Hizikia fusiformis), 미역(Undaria pinnatifida), 다시마(Laminaria japonica), 대황(Eisenia bicyclis), 모자반(Sargassum confusum), 우뭇가사리(Gelidium amansii), 참김(Porphyra tenera), 돌김(Porphyra yezoensis), 파래김(Undaria pinnatifida), 파래(Enteromorpha) 및 청각(Codium fragile)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method of claim 1, wherein the seaweed is Hizikia fusiformis ), seaweed ( Undaria pinnatifida ), Laminaria japonica ), Rhubarb ( Eisenia bicyclis , Sargassum confusum ), Gelidium amansii ), sesame ( Porphyra tenera), Seaweed (Porphyra yezoensis), Parlay Kim (Undaria pinnatifida), green laver (Enteromorpha) and hearing (Codium fragile ) cosmetic composition, characterized in that it is selected from the group consisting of.
제 2 항에 있어서, 상기 해조류는 참김(Porphyra tenera), 돌김(Porphyra yezoensis) 및 파래김(Undaria pinnatifida)으로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The method according to claim 2, wherein the seaweed is Porphyra tenera), Seaweed (Porphyra yezoensis ) and blue seaweed ( Undaria pinnatifida ) cosmetic composition characterized in that it is selected from the group consisting of.
제 3 항에 있어서, 상기 해조류는 참김(Porphyra tenera)인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The cosmetic composition according to claim 3, wherein the seaweed is Porphyra tenera .
제 1 항에 있어서, 상기 줄기세포는 전능성 줄기세포 및 다능성 줄기세포로 구성된 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
According to claim 1, wherein the stem cells cosmetic composition, characterized in that selected from the group consisting of pluripotent stem cells and pluripotent stem cells.
제 1 항에 있어서, 상기 해조류의 줄기세포는 광생물반응기로 배양한 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The cosmetic composition according to claim 1, wherein the algae stem cells are cultured with a photobioreactor.
제 1 항에 있어서, 상기 피부상태 개선용은 피부노화방지용, 피부주름방지용, 피부보습용인 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.
The cosmetic composition according to claim 1, wherein the skin condition improvement is for preventing skin aging, for preventing wrinkles, and for moisturizing the skin.
제 1 항 내지 제 7 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 해조류 줄기세포 추출물이 0.00001 내지 50 중량% 포함되는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물.The cosmetic composition according to any one of claims 1 to 7, wherein the seaweed stem cell extract is contained in 0.00001 to 50% by weight.
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