KR20110108355A - 새로운 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질의 절단을 유발하는 방법 - Google Patents

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김 니콜라스 그린
틸만 올터스도르프
에카드 웨버
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더 리전트 오브 더 유니버시티 오브 캘리포니아
젠야쿠코교가부시키가이샤
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Abstract

본 발명은, 피험체에서 아밀로이드 전구체 단백질의 약 17 킬로달톤 카복시 말단 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질의 절단을 유발하는 방법으로서, 복소환 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 필요로 하는 피험체에 투여하는 것을 포함하고, 이때 상기 약 17 킬로달톤 단편은 아밀로이드 전구체 단백질의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하는 것인 방법을 제공한다. 또한, 본 발명은, 아밀로이드 전구체 단백질의 약 17 킬로달톤 카복시 말단 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질의 절단을 유발하는 화합물을 동정하기 위한 스크리닝 방법을 제공한다.

Description

새로운 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질의 절단을 유발하는 방법{METHOD OF INDUCING CLEAVAGE OF AMYLOID PRECURSOR PROTEIN TO FORM A NOVEL FRAGMENT}
본 발명은 아밀로이드 전구체 단백질(APP)의 프로세싱의 조절에 관한 것이고, 상세하게는 새로운 단백질 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 것에 관한 것이다.
알츠하이머병(AD)은 제한된 효능을 갖는 대증 요법만이 있는 신경퇴행성 질환이다. APP의 특정 아밀로이드-베타(Aβ) 단편, 특히 Aβ1-40 및 Aβb1-42는 AD의 병인에 연관되어 있다. AD 진행을 개선시키기 위한 접근법으로서 Aβ의 저감이 연구된 바 있다(Barten, D. and C. Albright, Mol. Neurobiol. 37: 171-186 (1998)). 그러나, 현재까지 이 접근법에 기초한 승인된 치료법은 없다.
Aβ에 대한 능동 면역화와 수동 면역화로 AD를 치료하기 위한 시도가 이루어진 바 있다. 이러한 면역화 접근법 중 하나는 이미 인간 임상 시험을 통과하지 못하였다(Holmes, C. et al., Lancet 372: 216-23 (2008)). Aβ 면역요법의 한계는 이것이 이미 형성된 Aβ만을 표적으로 한다는 것일 수 있다. 이것은 새로운 Aβ의 생성을 늦추거나 중단시키지 못하고, 실제로는 심지어 새로운 Aβ의 생성 증가를 촉진할 수도 있다.
AD를 치료하기 위한 다른 시도는, 유해한 Aβ 단편이 생성되기 전에, 알려진 효소가 APP의 프로세싱을 못하게 막는 것을 이용하였다. 이러한 효소 표적은 감마-세크레타제 및 베타-세크레타제이다. 감마-세크레타제 억제제는 유용하지 않은 것으로 입증되었는데, 그 이유는 다수의 이러한 억제제가 다른 감마-세크레타제 기질의 절단에 영향을 미치고 그 결과 독성이 유발될 수 있기 때문이다(Czirr, E. and S. Weggen, Neurodegenerative Dis. 3: 298-302 (2006); Tomita, T., Nauyn-Schmiedegerg's Arch. Pharmacol. 377: 295-300 (2008); Milano, J. et al., Toxicological Sciences 82: 341-358 (2004)).
감마-세크레타제 조절제 역시 유용하지 않은 것으로 입증되었다. 감마-세크레타제 조절제의 예로는 감마-세크레타제의 알로스테릭 조절제인 비스테로이드성 항염증제(NSAID)가 있다. 이러한 화합물은 독성이 아니지만, 임상 시험에 착수된 화합물들은 시험관내 효능이 고 마이크로몰 수준에 불과하여, 충분한 임상적 효과를 발휘하기에는 너무 약하다(Czirr, E. and S. Weggen, Neurodegenerative Dis. 3: 298-304 (2006)). 프로토타입 감마-세크레타제 조절제인 플루리잔(Flurizan)은 최근 임상 3상 시험을 통과하지 못하였다.
게다가, AD 치료에 베타-세크레타제 억제제를 사용한 이전의 시도도 유용하지 않은 것으로 입증되었는데, 왜냐하면, 그 막 위치와 결합된 베타-세크레타제의 대형 결합 포켓이, 유용한 충분한 농도로 혈뇌 장벽을 관통하는 억제제를 디자인해야 하는 과제를 부여하기 때문이다(Barten, D. and C. Albright, Mol. Neurobiol 37: 171-186 (1998); John, V., Curr. Top. Med. Chem. 6: 569-78 (2006); Venugopal, C. et al., CNS & Neurological Disorders - Drug Targets 7: 278-294 (2008)).
따라서, 당해 기술 분야에서는 효과적인 AD 치료법이 요구되고 있다.
본 발명은, APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 데 사용하기 위한 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 제공하며, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함한다:
Figure pct00001
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 바와 같다).
본 발명은 또한 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하는 약 17 kDa의 APP 단편을 제공한다.
본 발명은 또한 APP의 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP를 절단하는 화합물을 스크리닝하는 방법을 제공하며, 이 방법은 (a) APP 또는 이의 단편을 생성하는 세포를 테스트 화합물에 노출시키는 단계 및 (b) 약 17 kDa 단편의 양을 검출하는 단계를 포함하고, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하고, 상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중의 약 17 kDa 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포 중의 약 17 kDa 단편의 양이 증가하는 것은 상기 화합물이 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP를 절단한다는 것을 나타낸다.
본 발명은 또한 APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 데 사용하기 위한 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물이 아닌 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 제공하며, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함한다:
Figure pct00002
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 바와 같다).
도 1a 및 1b는 N2a 세포에 의한 Aβ 생성에 화합물 ST101이 미치는 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 도 1a는 처리 24시간 후 대조군과 비교한 ST101 농도에 따른 세포 배양 배지 중의 Aβ 농도를 보여주는 막대 그래프이다. 도 1b는 대조군과 비교한 ST101 농도에 따른 Aβ 1-42 대 Aβ 1-40의 비를 보여주는 막대 그래프이다.
도 2a, 2b 및 2c는 모리스(Morris) 수중 미로에서의 3xTg-AD 마우스에 대한 ST101의 효과를 보여주는 그래프이다. 도 2a는, 대조군 마우스와 비교한, 7일 간의 훈련 동안의 잠시(초)를 보여주는 선 그래프이다. 도 2b 및 2c는 ST101 처리 마우스와 대조군 마우스에 대해 훈련 후 24시간 및 72시간째 플랫폼 위치에 대한 잠시(초) 및 횡단 횟수를 보여주는 막대 그래프이다.
도 3a 및 3b는 3xTg-AD 마우스로부터 얻은 뇌 조직 중의 Aβ에 대한 ST101의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 도 3a는, 대조군 마우스와 비교한, ST101로 처리된 마우스의 뇌 조직 중의 가용성 Aβ1-40 및 Aβ1-42의 양을 도시한다. 도 3b는, 대조군 마우스와 비교한, ST101로 처리된 마우스의 뇌 조직 중의 불용성 Aβ1-40 및 Aβ1-42(포름산 추출) 양을 도시한다.
도 4는, 미처리(C) 3xTg-AD 마우스와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의, 항체 CT20에 의해 검출된 APP 카복시 말단 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다.
도 5는, 미처리(C) 3xTg-AD 마우스와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의, 항체 CT20에 의해 검출된 APP 및 분해 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다. *는 전장 APP 종을 나타내고, **는 주요 분해 생성물을 나타내며, "액틴"은 단백질 로딩 대조군으로서의 항-베타 액틴 항체를 나타낸다.
도 6은 새로운 APP 카복시 말단 단편을 형성시키는 제안된 아밀로이드 프로세싱 경로를 보여주는 도면이다.
도 7a∼7c는, 미처리(C) 3xTg-AD 마우스와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의, 항체 CT20에 의해 검출된 APP C-말단 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다.
도 8은, 미처리(C) 3xTg-AD 마우스와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의, 항체 1565-1(Epitomics Inc.)에 의해 검출된 C-말단 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다.
다르게 정의하지 않는다면, 본원에서 사용되는 모든 기술 용어와 과학 용어는 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자가 일반적으로 이해하고 있는 것과 동일한 의미를 갖는다.
본 발명은 피험체에서 APP의 약 17 kDa 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 방법을 제공하며, 이 방법은 이를 필요로 하는 피험체에게 하기 일반식 (I)로 표시되는 복소환 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 투여하는 것을 포함하고, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함한다:
Figure pct00003
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 바와 같다).
본 발명은 또한 APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 데 사용하기 위한 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 제공하며, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함한다:
Figure pct00004
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 바와 같다).
일 실시형태에서, 상기 화합물을 이를 필요로 하는 피험체에게 투여하면, 피험체의 체내에 약 17 kDa의 단편이 형성된다.
본 발명은 또한 APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하기 위한 의약의 제조에 사용하기 위한 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭의 용도를 제공하며, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함한다:
Figure pct00005
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 바와 같다).
일 실시형태에서, 일반식 (I)의 복소환 화합물을 투여하면, Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편, 및/또는 APP의 C83 단편 중 하나 이상의 생성이 감소된다.
또 다른 실시형태에서, 일반식 (I)의 복소환 화합물이 투여되는 피험체는 AD를 갖는 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 피험체는 AD를 앓고 있거나 AD로 진단된 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 피험체는 경도 인지 장애를 갖는 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 피험체는 경도 인지 장애를 앓고 있거나 경도 인지 장애로 진단된 피험체이다.
또 다른 실시형태에서, AD를 치료한다. 또 다른 실시형태에서, 경도 인지 장애를 치료한다. 본원에서 사용될 때, "치료"란 병태, 질환 또는 질병의 증상을 개선 또는 다른 방식으로 유익하게 변경하는 임의의 방식을 의미한다.
일 실시형태에서, AD를 예방한다. 또 다른 실시형태에서, 경도 인지 장애를 예방한다. 본원에서 사용될 때 AD 또는 인지 장애를 "예방하는"이란 피험체에서 AD의 하나 이상의 증상이 발생하는 것을 예방하는 것을 의미한다.
본원에서 사용될 때, 특정 약학 조성물의 투여에 의한 특정 질환의 증상의 개선은 그 조성물의 투여에 기인하거나 그와 관련될 수 있는 영속적 또는 일시적, 지속적 또는 순간적인 임의의 경감을 의미한다.
또 다른 실시형태에서, 피험체는, 이 피험체가 AD를 갖는지를 판단하기 위해 스크리닝을 수행하고 있거나 수행했던 피험체이다. 스크리닝은 피험체를 검사함으로써 수행할 수 있다. 대안으로, 스크리닝은 1종 이상의 생물학적 마커를 분석함으로써 수행할 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 피험체는 AD에 대한 소인이 있는 것으로 진단된 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 피험체는, AD 발병의 소인이 있는지를 판단하기 위해 스크리닝을 수행하거나 수행했던 피험체이다. 스크리닝은 피험체를 검사함으로써 수행할 수 있다. 대안으로, 스크리닝은 AD 소인에 대한 1종 이상의 생물학적 마커를 분석함으로써 수행할 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 피험체는 인간 피험체이다.
본 발명은 또한 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하는 단리된 약 17 kDa의 APP 단편을 제공한다.
본 발명은 또한 본 발명의 약 17 kDa 단편을 포함하는 조성물을 제공한다. 또 다른 실시형태에서, 상기 조성물은 또한 세포 배양 용해물 및/또는 배지를 포함한다.
본 발명은 또한 본 발명의 약 17 kDa 단편을 포함하는 용기를 제공한다. 또 다른 실시형태에서, 상기 용기는 마이크로튜브이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 용기는 테스트 튜브이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 용기는 피펫 또는 마이크로피펫이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 용기는 마이크로어레이 장치이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 용기는 마이크로타이터 플레이트이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 용기는 스크리닝 분석 장치의 구성요소이다.
본 발명은 또한 APP의 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP를 절단하는 화합물을 스크리닝하는 방법을 제공하며, 이 방법은 (a) APP 또는 이의 단편을 생성하는 세포를 테스트 화합물에 노출시키는 단계 및 (b) 약 17 kDa 단편의 양을 검출하는 단계를 포함하며, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하고, 상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중의 약 17 kDa 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포 중의 약 17 kDa 단편의 양이 증가하는 것은 이 화합물이 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발한다는 것을 나타낸다.
대안으로, 약 17 kDa 단편의 자유 아미노 말단의 존재를 검출할 수 있거나 또는 17 kDa 단편을 발생시킨 절단에 의해 생성된 APP의 자유 카복시 말단을 검출할 수 있다.
본 발명은 또한 APP의 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP를 절단하는 화합물을 스크리닝하는 방법을 제공하며, 이 방법은 (a) APP 또는 이의 단편을 생성하는 세포를 테스트 화합물에 노출시키는 단계 및 (b) 약 17 kDa 단편의 양을 검출하는 단계를 포함하고, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하고, 상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중에 약 17 kDa 단편이 부재하는 것 비해 상기 화합물에 노출된 세포 중에 약 17 kDa 단편이 존재하는 것은 상기 화합물이 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발한다는 것을 나타낸다.
일 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 (c) 상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편, 또는 APP의 C83 단편의 양에 비해 화합물에 노출된 세포 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편, 또는 APP의 C83 단편 중 하나 이상의 양이 감소되는지 여부를 확인하는 단계를 추가로 포함한다.
일 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 생체내에서 수행한다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 시험관내에서 수행한다. 이러한 실시형태에서, 세포 배양물 중의 약 17 kDa 단편의 존재 또는 양을, 상기 화합물에 노출된 세포 및 상기 화합물에 노출되지 않은 대조군 세포에 대해 측정할 수 있다. 예를 들어, 상기 화합물에 노출되지 않은 세포의 세포 배양물 중의 17 kDa 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포의 세포 배양물 중의 약 17 kDa 단편의 양이 증가하는 것은 상기 화합물이 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP를 절단한다는 것을 나타낸다. 또는, 상기 화합물에 노출되지 않은 세포의 세포 배양물 중에 약 17 kDa 단편이 부재하는 것에 비해 상기 화합물에 노출된 세포의 세포 배양물 중에 약 17 kDa 단편이 존재하는 것은 상기 화합물 상기 화합물이 약 17 kDa 단편이 형성되도록 APP를 절단한다는 것을 나타낸다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 배양 상태의 세포에서 수행된다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 상기 화합물에 노출되지 않은 세포의 세포 배양 배지 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편, 또는 APP의 C83 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포의 세포 배양 용해물 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편, 또는 APP의 C83 단편 중 하나 이상의 양이 감소되는지 여부를 확인하는 단계를 추가로 포함한다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 고효율 방식(high-throughput manner)으로 수행된다. 또 다른 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 자동화된다. 또 다른 실시형태에서, 본 발명의 스크리닝 방법은 컴퓨터 제어된다.
또 다른 실시형태에서, 복수의 배양 세포를 복수의 테스트 화합물에, 예를 들어 마이크로타이터 플레이트의 개별 웰 내의 복수의 테스트 화합물에 개별적으로 노출시킨다. 이러한 실시형태에서는, 다수의 테스트 화합물을 동시에 스크리닝할 수 있다.
상기 테스트 화합물은 용매 중에 용해된 세포 또는 세포주에 제공될 수 있다. 용매의 예로는 DMSO, 물 및/또는 완충제를 들 수 있다. DMSO는 2% 이하의 양으로 사용될 수 있다. 대안으로, DMSO는 1% 이하의 양으로 사용될 수 있다. 이 농도에서 DMSO는 테스트 화합물에 대한 가용화제로서 작용하나 침투제로서 작용하지는 않는다. 세포가 허용하는 용매의 양은, 먼저, 용매의 양이 측정되는 세포 특성에 영향을 미치지 않도록 하기 위해, 다양한 양의 단일 용매를 사용하여 세포 생존도를 측정함으로써 조사해야 한다.
적절한 완충제로는 10% 우태 혈청을 함유하거나 함유하지 않는 세포 증식 배지, 예를 들어 이스코브 배지(Iscove's media)(Invitrogen Corporation)를 들 수 있다. 다른 공지된 세포 인큐베이션 완충제로는 포스페이트, PIPES 또는 HEPES 완충제를 포함한다. 당업자라면 통상적인 실험만으로 다른 적절한 완충제를 찾아낼 수 있다.
APP 또는 이의 단편을 생성하는 세포로는 IMR-32, BV-2, T98G, NT2N 및 N2A 세포를 들 수 있으나 이들에 한정되지 않는다. 또 다른 실시형태에서, 세포는 N2A 세포이다.
또 다른 실시형태에서, APP 또는 이의 단편을 생성하는 세포로는, APP 또는 돌연변이 APP를 코딩하는 핵산이, 예를 들어 형질감염에 의해 도입된 세포를 들 수 있다.
약 17 kDa APP 단편, Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편 및/또는 APP의 C83 단편은 또한, 예를 들어 겔 전기영동을 이용하여 검출할 수 있다. 17 kDa APP 단편, Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편 및/또는 APP의 C83 단편은 또한, 예를 들어 17 kDa 단편의 N-말단에 대한 제1 단일클론 항체 및 예를 들어 17 kDa 단편의 또 다른 영역, 예를 들어 17 kDa 단편의 카복시 말단에 대한 제2 단일클론 항체를 이용하여 샌드위치 ELISA 분석법에 의해 검출할 수 있다.
약 17 kDa APP 단편, Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편 및/또는 APP의 C83 단편은 또한, 예를 들어, 항체의 사전 면역침전을 이용하거나 이용하지 않고 질량 분광분석법을 이용하여 검출할 수 있다.
또 다른 실시형태에서는, 약 17 kDa 단편을 단리한다. 본원에서 사용될 때의 "단리된"이란 용아는 피험체의 뇌로부터 분리된 상태임을 의미한다. 또 다른 실시형태에서, 약 17 kDa 단편은 전기영동 겔 내에 존재한다. 또 다른 실시형태에서, 약 17 kDa 단편은 세포 배양 용해물 또는 배지 중에 존재한다.
APP의 "약 17 kDa 단편"은 APP의 C-말단 서열 및 APP의 아밀로이드-베타 서열을 포함하는 APP의 단편이다. 약 17 kDa 단편은 APP의 C99 단편 또는 APP의 C83 단편은 아니다.
본 발명은 또한 피험체에서 APP의 약 17 kDa 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 방법을 제공하며, 이 방법은 하기 일반식 (I)의 화합물이 아닌 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 투여하는 것을 포함한다:
Figure pct00006
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 것과 같다).
일 실시형태에서, 상기 화합물은 미국 특허 출원 제11/872,408호(US 2008/0103157 A1로서 공개됨); 미국 특허 출원 제11/872,418호(US 2008/0103158 A1로서 공개됨); 미국 특허 제6,635,652호; 미국 특허 제7,141,579호; 및 국제 특허 출원 PCT/JP2007/070962(WO 2008/047951로서 공개됨)(이들 문헌은 각각 그 전체가 참고로 포함됨) 중 어느 하나에 개시된 화합물이 아니다. 또 다른 실시형태에서, 상기 화합물은 스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-인단)이 아니다.
본 발명은 또한, APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 데 사용하기 위한, 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물이 아닌 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 제공하며, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함한다:
Figure pct00007
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 것과 같다).
일 실시형태에서, 하기 일반식 (I)의 화합물이 아닌 화합물을 이를 필요로 하는 피험체에 투여하면, 피험체의 체내에 약 17 kDa의 단편이 형성된다.
본 발명은 또한, APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하기 위한 의약의 제조를 위해 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물이 아닌 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭을 사용하는 용도를 제공하며, 이때 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함한다:
Figure pct00008
(상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 것과 같다).
또 다른 실시형태에서, 일반식 (I)로 표시되는 화합물이 아닌 화합물을 투여하면 Aβ1-42, Aβ1-40, APP의 C99 단편 및/또는 APP의 C83 단편 중 하나 이상의 생성이 감소된다.
또 다른 실시형태에서, 일반식 (I)로 표시되는 복소환 화합물이 투여되는 피험체는 AD를 갖는 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 피험체는 AD를 앓고 있거나 AD로 진단된 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 피험체는 경도 인지 장애를 갖는 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 상기 피험체는 경도 인지 장애를 앓고 있거나 경도 인지 장애로 진단된 피험체이다.
또 다른 실시형태에서, AD를 치료한다. 또 다른 실시형태에서, 경도 인지 장애를 치료한다. 본원에서 사용될 때, "치료"란 병태, 질환 또는 질병의 증상을 개선하거나 다른 방식으로 유익하게 변경하는 임의의 방식을 의미한다.
일 실시형태에서, AD를 예방한다. 또 다른 실시형태에서, 경도 인지 장애를 예방한다. 본원에서 사용될 때 AD 또는 인지 장애를 "예방하는"이란 피험체에서 AD의 하나 이상의 증상이 발생하는 것을 예방하는 것을 의미한다.
본원에서 사용될 때, 특정 약학 조성물의 투여에 의한 특정 질환의 증상의 개선은 그 조성물의 투여에 기인하거나 그와 관련될 수 있는 영속적 또는 일시적, 지속적 또는 순간적인 임의의 경감을 의미한다.
또 다른 실시형태에서, 피험체는, 이 피험체가 AD를 앓고 있는지를 판단하기 위해 스크리닝을 수행하고 있거나 수행했던 피험체이다. 스크리닝은 피험체를 검사함으로써 수행할 수 있다. 대안으로, 스크리닝은 AD의 1종 이상의 생물학적 마커를 분석함으로써 수행할 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 피험체는 AD에 대한 소인이 있는 것으로 진단된 피험체이다. 또 다른 실시형태에서, 피험체는, AD 발병의 소인이 있는지를 판단하기 위해 스크리닝을 수행하고 있거나 수행했던 피험체이다. 스크리닝은 피험체를 검사함으로써 수행할 수 있다. 대안으로, 스크리닝은 AD 소인에 대한 1종 이상의 생물학적 마커를 분석함으로써 수행할 수 있다.
또 다른 실시형태에서, 피험체는 인간 피험체이다.
본 발명의 복소환 화합물은 0.0005 mg/kg(체중) 이상의 유효 경구 투여량으로 투여될 수 있다. 일 실시형태에서, 상기 화합물은 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 35 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 55 mg, 60 mg, 65 mg, 70 mg, 75 mg, 80 mg, 85 mg, 90 mg, 95 mg, 또는 100 mg의 화합물을 함유하는 단위 제형의 일부로서 활성 성분으로서 투여된다.
본 발명에 사용하기 위한 조성물은 활성 성분이 그 의도된 목적을 달성하기에 유효한 양으로 포함된 모든 조성물을 포함한다. 개별 필요량은 달라질 수 있지만, 각각의 성분의 최적 유효량 범위의 결정은 당업자의 기술 범위 내에 있다. 일반적으로, 포유동물(예를 들어 인간)에게는 AD 치료 대상 포유동물의 체중을 기준으로 매일 0.001∼3 mg/kg의 활성 성분, 또는 등가량의 이의 약학적으로 허용되는 염을 경구 투여할 수 있다. 포유동물(예를 들어 인간)에게는 AD 치료 대상 포유동물의 체중을 기준으로 매일 0.001 mg/kg∼3 mg/kg의 활성 성분, 또는 등가량의 이의 약학적으로 허용되는 염을 정맥내 또는 근육내 투여할 수 있다. 이러한 질환을 치료 또는 예방하기 위해 약 0.001 mg/kg∼약 3 mg/kg을 경구 투여할 수 있다. 다른 제제도 투여된다면, 이것은 그 의도된 목적을 달성하기에 유효한 양으로 투여될 수 있다.
단위 경구 용량은 약 0.001 mg∼약 200 mg, 또는 약 0.5 mg∼약 180 mg의 본 발명의 조성물을 포함할 수 있다. 단위 용량은 하나 이상의 정제로서 1일 1회 이상 투여될 수 있으며, 각각의 정제는 약 0.1 mg∼약 90 mg, 편의상 약 10∼180 mg의 조성물 또는 이의 용매화물을 포함한다. 일 실시형태에서, 상기 단위 경구 용량은 10 mg, 20 mg, 30 mg, 40 mg, 50 mg, 60 mg, 70 mg, 80 mg, 90 mg, 100 mg, 110 mg, 120 mg, 130 mg, 140 mg, 150 mg, 160 mg, 170 mg, 또는 180 mg의 화합물일 수 있다.
국소 제제의 경우, 활성 성분이 담체 그램당 약 0.01∼100 mg의 농도로 포함될 수 있다.
활성 성분을 원료 화합물로서 투여하는 것 이외에도, 활성 성분을, 활성 성분을 약학적으로 사용될 수 있는 제제로의 가공을 용이하게 하는 부형제 및 보조제를 포함하는 적절한 약학적으로 허용되는 담체를 함유하는 약학 제제의 일부로서 투여할 수도 있다. 제제, 특히 정제, 당의정 및 캡슐과 같은 경구 투여될 수 있는 제제와 좌제와 같이 직장내 투여될 수 있는 제제뿐만 아니라 주사 또는 경구 투여를 위한 적절한 용액도 약 0.01∼99%, 또는 약 0.25∼75%의 활성 성분을 부형제와 함께 포함할 수 있다.
화학식 (I)의 복소환 화합물은 수화물 또는 약학적으로 허용되는 염으로서의 산 부가염의 형태일 수 있다. 가능한 산 부가염으로는 무기염, 예컨대 하이드로클로라이드, 설페이트, 하이드로브로마이드, 니트레이트 및 포스페이트 염 및 유기산염, 예컨대 아세테이트, 옥살레이트, 프로피오네이트, 글리콜레이트, 락테이트, 피루베이트, 말로네이트, 숙시네이트, 말레에이트, 푸마레이트, 말레이트, 타르트레이트, 시트레이트, 벤조에이트, 신나메이트, 메탄설포네이트, 벤젠설포네이트, p-톨루엔설포네이트 및 살리실레이트 염을 들 수 있다.
산 부가염은, 본 발명의 특정 화합물의 용액을 염산, 브롬화수소산, 푸마르산, 말레산, 숙신산, 아세트산, 시트르산, 락트산, 타르타르산, 탄산, 인산, 황산, 옥살산 등의 약학적으로 허용되는 비독성 산의 용액과 혼합함으로써 형성한다. 염기성 염은 본 발명의 특정 화합물의 용액을 수산화나트륨, 수산화칼륨, 수산화콜린, 탄산나트륨, 트리스, N-메틸-글루카민 등의 약학적으로 허용되는 비독성 염기의 용액과 혼합하여 형성한다.
본 발명의 약학 조성물은 활성 성분의 유익한 효과를 경험할 수 있는 임의의 동물에게 투여될 수 있다. 그러한 동물들 중에서도 특히 인간 및 수의학적 동물 등의 포유동물이 중요하지만, 본 발명이 그러한 동물에 한정되는 것은 아니다.
본 발명의 약학 조성물은 그 의도된 목적을 달성하는 임의의 수단에 의해 투여될 수 있다. 예를 들어, 투여는 비경구, 피하, 정맥내, 근육내, 복강내, 경피, 협측, 척추강내, 두개내, 비내 또는 국소 경로를 통해 이루어질 수 있다. 대안으로 또는 병행하여, 경구 경로에 의한 투여도 이용될 수 있다. 투여량은 수용자의 나이, 건강 및 체중, (이용된다면) 병행 치료의 종류, 치료 빈도 및 원하는 효과의 성질에 따라 달라진다.
본 발명의 약학 제제는 그 자체로 공지된 방법으로, 예를 들어 통상적인 혼합, 과립화, 당의정 제조, 용해 또는 동결 건조 공정을 이용하여 제조한다. 따라서, 경구용 약학 제제는 활성 성분을 고체 부형제와 혼합하고, 경우에 따라, 얻어진 혼합물을 분쇄하고, 원한다면 또는 필요에 따라 적절한 보조제를 첨가한 후 과립의 혼합물을 가공하여 정제 또는 당의정 코어를 얻음으로써 제조할 수 있다.
적절한 부형제로는 특히 충전제, 사카라이드, 예를 들어 락토스 또는 수크로스, 만니톨 또는 솔비톨; 셀룰로스 제제 및/또는 인산칼슘, 예를 들어 인산삼칼슘 또는 인산수소칼슘; 결합제, 예컨대 전분 페이스트, 예를 들어 옥수수 전분, 밀 전분, 쌀 전분, 감자 전분, 젤라틴, 트래거캔스, 메틸 셀룰로스, 하이드록시프로필메틸셀룰로스, 나트륨 카복시메틸셀룰로스 및/또는 폴리비닐 피롤리돈이 있다. 원한다면, 상기에 언급한 전분 및 카복시메틸-전분, 가교결합 폴리비닐 피롤리돈, 아가 또는 알긴산 또는 그 염, 예컨대 알긴산나트륨 등의 붕해제를 첨가할 수 있다. 보조제로는 특히 흐름 조절제 및 윤활제, 예컨대 실리카, 탈크, 스테아르산 또는 그 염, 예컨대 스테아르산마그네슘 또는 스테아르산칼슘, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜을 들 수 있다. 당의정 코어에는, 필요에 따라 위액에 저항성인 적절한 코팅을 제공할 수 있다. 이를 위해, 아라비아 검, 탈크, 폴리비닐 피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 이산화티탄, 래커액 및 적절한 유기 용매 또는 용매 혼합물을 임의로 포함할 수 있는 농축 사카라이드 용액을 사용할 수 있다. 위액 저항성 코팅을 형성하기 위해, 아세틸셀룰로스 프탈레이트 또는 하이드록시프로필메틸-셀룰로스 프탈레이트 등의 적절한 셀룰로스 제제의 용액을 사용한다. 정제 또는 당의정 코팅에, 예를 들어 식별을 위해 또는 활성 성분 용량의 조합을 표시하기 위해 염료 또는 안료를 첨가해도 좋다.
경구적 투여에 사용될 수 있는 다른 약학 제제로는 젤라틴으로 제조된 푸시-핏(push-fit) 캡슐과 젤라틴 및 가소제(예컨대 글리세롤 또는 솔비톨)로 제조된 연질의 밀봉 캡슐을 들 수 있다. 푸시-핏 캡슐은 락토스 등의 충전제, 전분 등의 결합제, 및/또는 탈크 또는 스테아르산마그네슘 등의 윤활제 및 경우에 따라 안정화제와 함께 혼합될 수 있는, 과립 형태의 활성 성분을 포함할 수 있다. 연질 캡슐의 경우, 활성 성분이 지방 오일 또는 유동 파라핀 등의 적절한 액체 중에 용해 또는 현탁될 수 있다. 또한, 안정화제를 첨가할 수 있다.
직장 투여에 사용될 수 있는 가능한 약학 제제로는, 예를 들어 1종 이상의 활성 성분과 좌제 베이스의 조합으로 이루어진 좌제를 들 수 있다. 적절한 좌제 베이스는, 예를 들어 천연 또는 합성 트리글리세리드 또는 파라핀 탄화수소이다. 그 밖에도, 활성 성분과 베이스의 조합으로 이루어진 젤라틴 직장 캡슐을 사용할 수 있다. 가능한 베이스 재료로는, 예를 들어 액체 트리글리세리드, 폴리에틸렌 글리콜 또는 파라핀 탄화수소를 들 수 있다.
비경구 투여에 적합한 제제로는 수용성 형태의 활성 성분의 수용액, 예를 들어 수용성 염 및 알칼리성 용액을 들 수 있다. 또한, 적절한 유성 주사 현탁액으로서의 활성 성분의 현탁액을 투여할 수 있다. 적절한 친유성 용매 또는 비이클로는 지방 오일, 예를 들어 참깨유, 또는 합성 지방산 에스테르, 예를 들어 에틸 올레이트 또는 트리글리세리드 또는 폴리에틸렌 글리콜-400을 들 수 있다. 수성 주사 현탁액은 현탁액의 점도를 증가시키는 물질을 포함해도 좋으며, 그 예로는 나트륨 카복시메틸 셀룰로스, 솔비톨 및/또는 덱스트란을 들 수 있다. 경우에 따라, 현탁액은 또한 안정화제를 포함할 수 있다.
본원에서 사용될 때, 프로드럭이란 생체내에 투여하면 화합물의 생물학적, 약학적 또는 치료 활성 형태로 대사되거나 다른 방식으로 전환되는 화합물이다. 프로드럭을 제조하기 위해, 약학적 활성 화합물을, 활성 화합물이 대사 과정에 의해 재생되도록 변형시킨다. 프로드럭은 약물의 대사적 안정성 또는 수송 특성을 변경하도록, 부작용 또는 독성을 가리도록, 약물의 맛을 좋게 하도록, 또는 약물의 다른 특성 또는 특징을 변경하도록 디자인될 수 있다. 당업자는, 생체내에서의 약력학적 과정 및 약물 대사에 관한 지식에 의해, 약학적 활성 화합물이 알려져 있으면, 그 화합물의 프로드럭을 디자인할 수 있다(예를 들어, 문헌[Nogrady, Medicinal Chemistry: A Biochemical Approach, Oxford University Press, New York, pages 388 392 (1985)] 참조).
또한, 경구 약학 제제가 장용 코팅을 포함하는 활성 성분의 제형도 본 발명의 범위에 포함된다. 본원에서 "장용 코팅"이란 용어는, 산성 매질에서 활성 성분의 용해를 억제하지만 중성 내지 알칼리성 매질에서는 신속히 용해되고 장기간 보존에 대해 우수한 안정성을 갖는, 경구 약학 제형 상에 피복되는 임의의 코팅을 의미하는 것으로 사용된다. 또는, 장용 코팅을 갖는 제형은 장용 코팅과 코어 사이에 수용성 분리막을 포함할 수 있다.
장용 코팅 제형의 코어는 활성 성분을 포함한다. 경우에 따라, 상기 코어는 또한 약학적 첨가제 및/또는 부형제를 포함한다. 분리막은 필름 코팅 용도를 위한 수용성 비활성의 활성 성분 또는 중합체일 수 있다. 분리막은 당업자에게 공지된 임의의 통상적인 코팅 기법에 의해 코어 상에 도포한다. 분리막의 예로는 당, 폴리에틸렌 글리콜, 폴리비닐피롤리돈, 폴리비닐 알코올, 하이드록시프로필 셀룰로스, 폴리비닐 아세탈 디에틸아미노아세테이트 및 하이드록시프로필 메틸셀룰로스를 들 수 있으나 이들에 한정되지 않는다. 장용 코팅은 임의의 통상적인 코팅 기법에 의해 분리막 위에 도포한다. 장용 코팅의 예로는 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 하이드록시프로필 메틸셀룰로스 프탈레이트, 폴리비닐 아세테이트 프탈레이트, 카복시메틸에틸셀룰로스, 메타크릴산과 메타크릴산 메틸 에스테르의 공중합체, Eudragit® 12,5 또는 Eudragit® 100(Rohm Pharma), 수계 분산액, 예컨대 Aquateric®(FMC Corporation), Eudragit® 100-55(Rohm Pharma) 및 Coating CE 5142(BASF)와, Citroflex®(Pfizer) 등의 수용성 가소제를 함유하는 것들을 들 수 있으나 이들에 한정되지 않는다. 최종 제형은 장용 코팅 정제, 캡슐 또는 펠릿이다.
본 발명의 화합물의 프로드럭의 예로는 카복실산 함유 화합물의 단순 에스테르(예를 들어, 당업계에 공지된 방법에 따라 C1-4 알코올과의 축합에 의해 얻은 것); 하이드록시 함유 화합물의 에스테르(예를 들어, C1-4 카복실산, C3-6 디오산 또는 이들의 무수물(예를 들어, 당업계에 공지된 방법에 따른 숙신산 및 푸마르산 무수물)과의 축합에 의해 얻은 것); 아미노 함유 화합물의 이민(예를 들어, 당업계에 공지된 방법에 따라 C1-4 알데히드 또는 케톤과의 축합에 의해 얻은 것); 및 알코올 함유 화합물의 아세탈 및 케탈(예를 들어, 당업계에 공지된 방법에 따른 클로로메틸 메틸 에테르 또는 클로로메틸 에틸 에테르와의 축합에 의해 얻은 것)을 포함한다.
AD의 증상으로는 착란상태, 단기 기억 장애, 주의력 장애, 공간 방향감각 장애, 인성 변화, 언어 장애 및 기분 동요를 포함한다. AD의 증상의 예는 의과학이 계속 발전함에 따라 향후 더 확장될 수 있을 것으로 생각된다. 따라서, "AD의 증상"이란 용어는 본원에 제공된 증상의 예에만 한정되는 것이 아니다.
본원에서 사용될 때, 특정 질환을 치료하기 위한 화합물의 유효량은 그 질환과 관련된 증상을 개선하거나 어떤 방식으로는 감소시키기에 충분한 양이다. 이러한 양은 단일 용량으로 투여될 수도 있고 유효한 투여 계획에 따라 투여될 수 있다. 유효량은 질환을 치유할 수도 있으나, 일반적으로, 질환을 개선하기 위해 투여된다. 일반적으로, 원하는 증상 개선을 위해서는 반복 투여가 필요하다.
일반식 (I)에서, 하기 일반식 (II)을 갖는 구조 단위는 하기 일반식 (III)을 갖는 여러 유형의 구조 단위로부터 선택되는 하나 이상의 구조 단위일 수 있다.
Figure pct00009
Figure pct00010
일반식 (I)에서, Rx는 메틸이거나 존재하지 않는 것이다. 일반식 (I) 및 일반식 (II)에서, R1 및 R2는 각각 수소 원자, 할로겐 원자, 하이드록시 기, 아미노 기, 아세틸아미노 기, 벤질아미노 기, 트리플루오로메틸 기, C1-C6 알킬 기, C1-C6 알콕시 기, C2-C6 알케닐, C3-C8 사이클로알킬, 벤질옥시, CH2-R5(여기서, R5는 페닐(이것은 C1-C6 알킬, 수소 원자 또는 시아노로 치환될 수 있음) 또는 티에닐) 및 -O-(CH2)n-R6(여기서, R6은 비닐 기, C3-C8 사이클로알킬 기, 또는 페닐 기이고, n은 0 또는 1임)로 구성된 군에서 독립적으로 선택되는 하나 이상의 작용기이다.
일반식 (I) 및 일반식 (II)에서, R3 및 R4는 각각 수소 원자, C1-C6 알킬 기, C2-C6 알케닐, C3-C8 사이클로알킬 기, CH2-R5(여기서, R5는 페닐(이것은 C1-C6 알킬, 수소 원자 또는 시아노로 치환될 수 있음); 나프틸 또는 티에닐) 및 -CH(R8)-R7로 구성된 군에서 독립적으로 선택되는 하나 이상의 작용기이다. 대안으로, R3과 R4가 함께 하기 일반식 (IV)의 스피로 고리를 형성한다:
Figure pct00011
R7은 비닐 기; 에티닐 기; C1-C6 알킬 기, C1-C6 알콕시 기, 하이드록시 기, 1개 또는 2개의 할로겐 원자, 디 C1-C6 알킬아미노 기, 시아노 기, 니트로 기, 카복시 기, 또는 페닐 기로 임의로 치환된 페닐; 페네틸 기; 피리딜 기; 티에닐 기; 및 푸릴 기로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 작용기이다. 상기 R8은 수소 원자 또는 C1-C6 알킬 기이다.
또한, 일반식 (IV)에서, 구조 단위 B는 하기 일반식 (V)를 갖는 여러 유형의 구조 단위로부터 선택되는 하나 이상의 구조 단위일 수 있다. 구조 단위 B는 하기 일반식 (V)에서 *로 표시된 위치에서 결합하여 스피로 고리를 형성한다.
Figure pct00012
여기서, R9는 수소 원자, 할로겐 원자, 하이드록시 기, C1-C6 알콕시 기, 시아노 기 및 트리플루오로메틸 기로 구성된 군에서 선택되는 하나 이상의 작용기이다.
일반식 (I)을 갖는 복소환 화합물이 구조 내에 비대칭 탄소 원자를 가질 경우, 비대칭 탄소 원자로부터의 그 이성체와 이들의 혼합물(라세미 변형)이 존재한다. 이러한 경우, 이들 모두가 본원에 기재된 실시형태에서 이용되는 복소환 화합물에 포함된다.
용어 "C1-C6"은 달리 정의하지 않는다면 1∼6개의 탄소 원자를 의미한다. 용어 "C3-C8"은 달리 정의하지 않는다면 3∼8개의 탄소 원자를 의미한다. 용어 "C1-C6 알킬"은 직쇄 또는 분지쇄 알킬 기, 예컨대 메틸, 에틸, n-프로필, 이소프로필, n-부틸, tert-부틸, sec-부틸, n-펜틸 및 n-헥실을 포함한다. 용어 "C1-C6 알콕시"는 직쇄 또는 분지쇄 알콕시 기, 예컨대 메톡시, 에톡시, n-프로폭시, 이소프로폭시, n-부톡시, tert-부톡시, sec-부톡시, n-펜틸옥시 및 n-헥실옥시를 포함한다. 용어 "C3-C8 사이클로알킬"은 사이클로프로필, 사이클로부틸, 사이클로펜틸, 사이클로헥실, 사이클로헵틸 및 사이클로옥틸을 포함한다. 용어 "할로겐 원자"는 불소, 염소, 브롬 및 요오드를 포함한다.
본 발명의 임의의 방법의 또 다른 실시형태에서, 본 발명의 실시에 유용한 복소환 화합물은 하기 화합물로 구성된 군에서 선택된다:
3,3-디메틸이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디프로필이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디부틸이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디알릴이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디알릴-8-벤질옥시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디(2-프로피닐)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-메틸이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-5,7-디메틸이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-하이드록시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-메톡시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-에톡시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-알릴옥시-3,3-디벤질이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-이소프로폭시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-사이클로프로필메틸옥시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-사이클로헵틸옥시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-6-클로로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-6,8-디클로로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-클로로-6-트리플루오로메틸이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-벤질옥시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-아미노-3,3-디벤질이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-아세틸아미노-3,3-디벤질이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디벤질-8-벤질아미노이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(3-클로로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(3-플루오로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-플루오로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(2,4-디클로로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-디메틸아미노벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-메톡시벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-비페닐메틸)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-시아노벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-하이드록시-벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(3-페닐-1-프로필)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(2,4-디플루오로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-니트로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-카복시벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-벤질옥시-3,3-비스(1-페닐에틸)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-벤질옥시-3,3-비스(3-메틸벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-벤질옥시-3,3-비스(4-메틸벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3-벤질-3-(4-플루오로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3-에틸-3(4-플루오로벤질)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-메틸-3,3-비스(3-피리딜메틸)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
8-메틸-3,3-비스(4-피리딜메틸)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(2-티에닐메틸)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(2-푸릴메틸)이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-인단),
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-(2,3)디하이드로펜아렌),
스피로(이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온-5,2'-벤조(f)인단),
스피로(이미다조(1,2-b)티아졸-6(5H)-온-5,2'-인단),
스피로(2-메틸이미다조(1,2-b)티아졸-6(5H)-온-5,2'-벤조(f)인단),
5,5-비스(4-플루오로벤질)이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디벤질이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(4-메틸벤질)이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(4-시아노벤질)이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디벤질-2-메틸이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(4-플루오로벤질)-2-메틸이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디사이클로헥실-2-메틸이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(4-시아노벤질)-2-메틸이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디(2-부테닐)이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디부틸이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디사이클로헥실이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(2-티에닐메틸)이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
스피로(2,3-디하이드로이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온-5,2'-벤조(f)인단),
5,5-디부틸-2,3-디하이드로이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디(2-부테닐)-2,3-디하이드로이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(4-메틸벤질)-2,3-디하이드로이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(2-티에닐메틸)-2,3-디하이드로이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-비스(4-플루오로벤질)-2,3-디하이드로이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
5,5-디벤질-2,3-디하이드로이미다조(2,1-b)티아졸-6(5H)-온,
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-벤조(f)인단),
2-하이드록시-3-(2-나프틸메틸)-이미다조(1,2-a)피리딘,
3-벤질이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
스피로(5,6,7,8-테트라하이드로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-벤조(f)인단),
3,3-디사이클로헥실-5,6,7,8-테트라하이드로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-비스(2-티에닐메틸)-5,6,7,8-테트라하이드로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디부틸-5,6,7,8-테트라하이드로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
3,3-디프로필-5,6,7,8-테트라하이드로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온,
스피로(이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온-3,2'-벤조(f)인단),
3,3-디(2-부테닐)이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온,
3,3-비스(2-티에닐메틸)이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-플루오로벤질)이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온,
3,3-디사이클로헥실이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-시아노벤질)이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온,
3,3-비스(4-메틸벤질)이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온,
4,4-디벤질-1-메틸-5-옥소-4,5-디하이드로이미다졸,
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-(4'-플루오로인단)),
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-(5'-메톡시인단)),
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-(5'-요오도인단)),
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-(4'-시아노인단)),
스피로(이미다조(2,1-a)이소퀴놀린-2(3H)-온-3,2'-인단),
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-((1,2,5-티아디아조)(4,5-c)인단)),
스피로(이미다조(2,1-a)이소퀴놀린-2(3H)-온-3,2'-((1,2,5-티아디아조)(4,5-c)인단)),
스피로(이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온-3,4'-(1-사이클로펜텐)),
스피로(이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온-3,2'-인단),
스피로(이미다조(1,2-a)피리미딘-2(3H)-온-3,2'-((1,2,5-티아디아조)(4,5-c)인단)),
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-(5'-트리플루오로메틸인단)),
스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-벤조(e)인단),
스피로(이미다조(2,1-a)이소퀴놀린-2(3H)-온-3,1'-(3'-사이클로펜텐)),
스피로(8-벤질옥시이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,1'-(3'-사이클로펜텐)),
스피로(7,8,9,10-테트라하이드로이미다조(2,1-a)이소퀴놀린-2(3H)-온-3,1'-사이클로펜탄),
스피로(이미다조(2,1-a)이소퀴놀린-2(3H)-온-3,1'-사이클로펜탄), 및
스피로(5,6,7,8-테트라하이드로이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-인단).
또 다른 실시형태에서, 상기 화합물은 스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-인단)이다.
또 다른 실시형태에서, 본 발명의 방법은 미국 출원 제11/872,408호(US 2008/0103157 A1로서 공개됨); 미국 출원 제11/872,418호(US 2008/0103158 A1로서 공개됨); 미국 특허 제6,635,652호; 미국 특허 제7,141,579호; 및 국제 출원 PCT/JP2007/070962(WO 2008/047951로서 공개됨)에 개시된 화합물 중 임의의 것을 이용하여 실시할 수 있으며, 상기 특허 문헌들은 각각 그 전체를 본원에 참고 인용한다.
ZSET1446으로도 알려진 화합물 ST101은, 급성(단회 투여) 투여 후에도 만성 투여 후에도, AD와 관련된 학습능력 및 기억력의 설치류 모델에서 약리학적 활성을 나타내었다. ST101의 화학명은 스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-인단)이다.
예를 들어, ST101은 노화에 의해 손상된 기억력을 현저히 개선시키고, 글루타메이트 수용체 길항제인 메트암페타민, MK-801 및 무스카린성 길항제인 스코폴아민 등의 화학적 기억상실 유발제에 의해 유발된 기억력 감퇴를 완화시킨다(Yamaguchi Y., et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 317:1079-87 (2006); Ito Y., et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 320: 819-27 (2007)).
실험에 의해, ST101이 아세틸콜린(ACh)의 니코틴 자극 방출을 증강시키고, 대뇌 피질의 세포외 ACh 농도를 증가시키고, 해마 내의 ACh 및 도파민 양자의 세포외 농도를 증가시킨다는 것이 확인되었다. ST101이 그 효과를 발휘하는 모델의 범위는 이러한 프로세스와 관련된 신호 전달 경로(들)의 상류 표적에의 관련 가능성을 시사한다.
ST101은 또한 뇌 조직에 Aβ 유사 침착물이 축적됨에 따라 학습능력 및 기억력에 있어서 노화성 감퇴를 발달시키는 마우스 품종인 노화 촉진 마우스(Senescence Accelerated Mouse 8; SAMP8)에서도 효과를 보였다. SAMP8 마우스는 문헌[Morley, J.E., Biogerontology 3: 57-60 (2002)]에서도 언급되고 있다. ST101은 Aβ 유사 침착물의 축적을 감소시켰고, 또한, 학습능력과 기억력을 개선시켰으며, 이는 ST101의 행동 효과가 Aβ 생성 및/또는 침착의 감소와 연관될 수 있음을 시사한다. US 2008/103158 A1 참조.
본원에서 언급된 모든 특허, 특허 출원 및 간행물은 그 전체가 본원에서 참고로 포함된다.
실시예 1
시험관내 N2a 배양 세포에서의 β 아밀로이드에 대한 ST101의 효과
N2a는 ELISA 분석에 의해 측정 가능한 양의 아밀로이드 펩티드 Aβ1-40 및 Aβ1-42를 생성하는 것으로 알려진 쥐과동물의 신경아세포종 세포주이다. 이러한 형태의 Aβ는 AD 뇌의 병인과 상관성이 있으며, 특히 Aβ1-42는 α7 니코틴성 수용체를 차단하여 직접적인 신경 독성 효과를 유발할 수 있는 능력을 갖는 것으로 상정되고 있다. N2a 세포를 조직 배양 배지에 ST101를 첨가함으로써 24시간 동안 처리하였다. 조직 배양 배지를 수거하여 Aβ의 존재에 대해 ELISA로 분석하였다.
도 1a 및 1b는 N2a 세포에 의한 Aβ 생성에 미치는 화합물 ST101의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 도 1a는 대조군과 비교한 ST101 농도에 따른 세포 배양 배지 중에서의 Aβ 농도를 보여주는 막대 그래프이다. 도 1b는 대조군과 비교한 ST101 농도에 따른 Aβ1-42 대 Aβ1-40의 비를 보여주는 막대 그래프이다. 도 1a 및 도 1b에 도시된 바와 같이, ST101은 Aβ1-40에 큰 영향을 미치지 않고 Aβ1-42를 현저히 감소시켰다(도 1).
실시예 2
모리스 수중 미로에서의 3xTg-AD 마우스에 대한 ST101의 효과
미국 어바인 소재 캘리포니아 대학의 프랑크 라펠러(Frank LaFerla) 박사의 실험실이 알츠하이머 병인과 관련된 3개 돌연변이(βAPPSwe, PS1M146V 및 tauP301L)를 포함하는 트랜스제닉 마우스를 개발하였다(Oddo et al., "Triple-transgenic model of AD with plaques and tangles: intracellular A and synaptic dysfunction, Neuron 39(3):409-21 (2003)). 이들 돌연변이는 α-세크라타제에서 β-세크라타제로 APP 절단을 이동시키고 Aβ1-42 의 생성을 증가시키며, 쌍을 이룬 나선형 필라멘트로의 tau의 응집을 유도한다. 3xTg-AD 마우스는 기억력 관련 행동 기능 감퇴, 플라크 및 신경섬유 덩어리의 발생 및 기억력에 중요한 것으로 여겨지는 활성인 장기 강화 작용에 있어서의 결함을 포함한 시냅스 기능장애와 같은 노화와 관련된 AD의 주된 특징을 발달시킨다(Oddo et al., 2003). 또한, 신경섬유 덩어리 형성 전에 플라크 형성이 발생하여, 인간에 있어서의 AD의 발생과 닮아있다. 3xTg-AD 마우스는 현재까지 개발된 AD의 가장 가까운 동물 모델 중 하나이다.
ST101 투여 및 테스트 방법
약 12월령의 3xTg-AD 마우스를 ST101로 2개월 동안 처리하였다. 5 mg/kg/일의 평균 용량을 음용수로 투여하였다(평균 물 섭취량을 기준으로 계산한 양). 모리스 수중 미로에서의 수행능력 평가로 행동 효과를 테스트하였다. 생화학적 효과는 Aβ 및 APP의 뇌 함량을 ELISA 및 웨스턴 블롯으로 측정함으로써 조사하였다.
행동 효과: 문헌[Roozendaal et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100: 1328-1333 (2003)]로부터 채용한 모리스 수중 미로(MWM)에서의 3xTg-AD 마우스의 수행능력
MWM은 설치류에 대해 공간 기억력(즉, 해마 의존적) 및 단서 학습능력(cued learning)(즉, 해마 비의존적)을 테스트한다. 미로는 불투명한 물이 채워진 원형의 탱크이다. 마우스는 물 속에 들어가, 헤엄쳐서, 수면으로부터 1.5 cm 아래에 잠겨있는 플랫폼을 찾아 그 위로 빠져 나와야 한다. 플랫폼을 찾는 데 걸리는 시간(초)을 기록한다. 마우스는, 계속되는 과제에서 플랫폼을 찾기 위해, 탱크를 포함한 방에서의 시각적 단서에 의존한다. 훈련은 7일 연속 매일 수행하였다.
훈련의 기억력은 마지막 훈련 후 24시간째와 72시간째 2회 평가하였다. 마우스를 플랫폼을 제거한 탱크에서 60초 동안 자유롭게 헤엄치게 하였다. 측정된 파라미터는 (1) 잠시(latency): 이전의 플랫폼 위치에 도달하는 데 걸리는 시간 및 (2) 횡단(cross): 이전의 플랫폼 위치로 헤엄쳐서 간 횟수. 잠시의 감소 및 횡단의 증가는 공간 기억력 및 단서 학습능력이 개선되었음을 나타내는 것이다.
도 2a, 2b 및 2c는 MWM에서의 3xTg-AD 마우스에 대한 ST101의 효과를 보여주는 그래프이다. 도 2a는 대조군과 비교한 훈련 중의 잠시(초)를 보여주는 선 그래프이다. 도 2b 및 2c는 훈련 후 24시간 및 72시간째의 ST101 처리 마우스와 대조군 마우스의 잠시(초)를 보여주는 막대 그래프이다.
도 2a에 도시된 바와 같이, ST101 마우스와 대조군 마우스는 훈련 첫날 유사한 잠시를 보였다. 그러나, ST101 처리 마우스는 계속된 며칠간의 훈련 후 대조군에 비해 잠시에 있어서 더 큰 감소를 보였다. 도 2b 및 2c는 또한 24시간째와 72시간째 모두 기억력 테스트 중에 잠시의 감소와 함께 횡단의 증가를 보였다. 이러한 데이터는, ST101이 인간 AD와 매우 유사한 3xTg-AD 마우스 품종에서 학습능력 및 기억력 성능을 개선시켰음을 확인시켜 준다.
실시예 3
3xTg 마우스-AD로부터 얻은 뇌 조직 중의 Aβ에 대한 ST101의 효과
생화학적 효과: ST101 및 아밀로이드 프로세싱 경로
2개월의 처리 기간 종료 후, 3xTg 마우스를 희생시켜 뇌 조직을 가공하였다. 제1 세트의 분석에서는, 가용성 Aβ1-40 및 Aβ1-42와 불용성 Aβ(포름산 추출 후)를 ELISA로 정량하였다. 가용성 Aβ는 전장 APP로부터 프로세싱되어 방출된 단백질에 해당한다. 불용성 Aβ는 아밀로이드 플라크에 마지막으로 침착된 섬유상 응집체에 해당한다.
도 3a 및 3b는 3xTg 마우스-AD로부터 얻은 뇌 조직 중의 Aβ에 대한 ST101의 효과를 보여주는 막대 그래프이다. 도 3a는 대조군 마우스와 비교한 ST101로 처리된 마우스의 뇌 조직 중의 가용성 Aβ1-40 및 Aβ1-42의 양을 보여준다. 도 3b는, 대조군 마우스와 비교한, ST101 처리 마우스에서의 불용성 Aβ1-40 및 Aβ1-42(포름산 추출)의 양을 보여주는 막대 그래프이다. 패널 A의 ST101 처리군의 마우스 1마리는 분석 실수로 인하여 제외시켰다.
도 3a 및 3b에 도시된 바와 같이, ST101 처리 마우스는 가용성 Aβ1-42 수치를 현저히 감소시켰고 가용성 Aβ1-40 수치를 약간 감소시켰다. 불용성 Aβ는 영향을 받지 않았다. 이러한 결과는, ST101이 Aβ 생성 또는 방출에 영향을 줄 수 있으나, 이미 형성된 불용성 응집체를 가진 Aβ에는 측정 가능한 영향을 주지 않음을 제시한다.
실시예 4
항체 CT20에 의해 검출된 APP C-말단 단편
Aβ 프로세싱/방출 경로의 어느 부분에서 ST101이 활성을 나타내는지를 확인하고자, 같은 마우스로부터 얻은 뇌 추출물에 대한 일련의 웨스턴 블롯 분석을 수행하였다. 이러한 웨스턴 블롯으로 온전한 APP뿐만 아니라 그 번역후 프로세싱 및 후속 분해 생성물을 관찰하였다.
도 4는, 미처리(C) 3xTg 마우스-AD와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의, 항체 CT20에 의해 검출된 APP C-말단 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다.
도 4에 도시된 바와 같이, 항체 CT20(APP의 C-말단에 대한 것)은 C99 및 C83 C-말단 APP 단편의 상당한 감소를 나타내었다. 이들 단편은 각각 β-세크레타제 및 α-세크레타제 절단의 부산물이다. 또한, 분자량 약 17 kDa의 더 긴 새로운 C-말단 단편의 출현이 보여진다(*로 표시됨).
실시예 5
항체 CT20에 의해 검출된 APP 및 분해 단편
도 5는, 미처리(C) 3xTg-AD 마우스와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의, 항체 CT20에 의해 검출된 APP 및 분해 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다. "CT20"은 전장 APP 종을 나타내고, "액틴"은 단백질 로딩 대조군으로서의 항-베타-액틴 항체를 나타낸다.
웨스턴 블롯 분석은 모든 추출물에서 전장의 비프로세싱 APP를 검출하였다(도 5, *). 미세한 밴드 이동이 APP의 추가적인 ST101 유도 변형, 예를 들어, 일부 전장 종의 약간 감소된 분자량(글리코실화, 인산화 또는 다른 번역후 변형에 있어서의 가능한 변경) 및 주요 APP 분해 중간체(약 50 kDa)의 소멸 또는 현저한 감소가 있음을 제시하였다(도 5, **).
실시예 6
대안적인 아밀로이드 프로세싱 경로
도 6은 새로운 APP C-말단 단편을 형성시키는 제안된 아밀로이드 프로세싱 경로를 보여주는 도면이다. 제안된 경로는 도 4의 웨스턴 블롯에 도시된 약 17 kDa의 새로운 단편의 출현을 설명한다. 이 단편은 β-세크레타제 절단 부위의 N-말단 쪽 약 60개 아미노산의 규명되지 않은 부위에서의 절단에 의해 생성된다.
새로운 경로는, α-세크레타제 절단과 β-세크레타제 절단 양자를 먼저 차지하는 것으로 생각되며(이들 절단 부위의 일반적인 생성물(α-세크레타제의 경우 C83, β-세크레타제의 경우 C99)이 크게 감소한 것으로 보아), 따라서, 이들 효소의 표적이 되는 절단 부위는 온전하게 유지된다.
ST101에 의해 유도된 APP 대사의 이같은 변경에는, 임상적 AD의 가까운 모델인 것으로 간주되는 동물 모델에서의 학습능력 및 기억력 과제에서의 현저한 개선이 동반된다. 초기의 비임상 데이터와 관련시켜 판단할 때, ST101은 공지된 작용 기전을 갖는 현재 연구 중인 제제와 시판되는 제제보다 상류에 있는 생리학적 프로세스에서 작용할 수 있는 것으로 보이며, 따라서, 이것은 AD의 새로운 치료법이다.
실시예 7
항체 CT20에 의해 검출된 APP C-말단 단편
약 3월령의 3xTg-AD 마우스를 ST101로 10개월 동안 처리하였다. 5 mg/kg/일 또는 1 mg/kg/일 또는 0.1 mg/kg/일의 평균 용량을 음용수로 투여하였다(평균 물 섭취량을 기준으로 계산한 용량).
도 7a∼7c는, 미처리(C) 3xTg-AD 마우스와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의 항체 CT20에 의해 검출된 APP C-말단 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다.
도 7a∼7c에 도시된 바와 같이, 항체 CT20(APP의 C-말단에 대한 것)은 도 5(**)에서 관찰된 효과와 유사하게 일부 샘플에서 주요 APP 분해 중간체(약 50 kDa)의 소멸 또는 현저한 감소를 나타내었다. 또한, 도 4에서 관찰된 효과와 유사하게 일부 샘플에서 분자량 약 17 kDa의 더 긴 새로운 C-말단 단편이 출현함이 보여진다.
실시예 8
항체 1565-1에 의해 검출된 APP C-말단 단편
약 12월령의 3xTg-AD 마우스를 ST101로 2.5개월 동안 처리하였다. 5 mg/kg/일의 평균 용량을 음용수로 투여하였다(평균 물 섭취량을 기준으로 계산한 용량).
도 8은 미처리(C) 3xTg-AD 마우스와 비교한, ST101 처리(S) 3xTg-AD 마우스의 뇌 속의 항체 1565-1(Epitomics Inc.)에 의해 검출된 C-말단 단편을 보여주는 웨스턴 블롯이다.
도 8에 도시된 바와 같이, 항체 1565-1(APP의 C-말단 근처의 펩티드에 대한 것)은 APP C99 단편의 소멸 또는 현저한 감소를 나타내었다. 분자량 약 17 kDa의 더 긴 C-말단 단편은 검출되지 않았다.
본 발명의 범주와 범위는 전술한 예시적인 임의의 실시형태에 의해 한정되어서는 안 되며, 하기 특허청구범위 및 그 균등범위에 의해서만 한정되어야 한다.

Claims (21)

  1. APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 데 사용하기 위한 것이며, 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하는 것인, 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭:
    Figure pct00013

    (상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 바와 같다).
  2. 제1항에 있어서, 상기 복소환 화합물이 스피로(이미다조(1,2-a)피리딘-2(3H)-온-3,2'-인단)인 용도.
  3. 제1항에 있어서, 상기 복소환 화합물의 사용이 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편 중 하나 이상의 생성을 감소시키는 것인 용도.
  4. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 투여되는 피험체가 알츠하이머병을 갖는 것인 용도.
  5. 제4항에 있어서, 상기 피험체가 알츠하이머병으로 진단된 것인 용도.
  6. 아밀로이드 전구체 단백질의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하는, 단리된 약 17 킬로달톤 아밀로이드 전구체 단백질 단편.
  7. 제6항의 단편을 포함하는 조성물.
  8. 아밀로이드 전구체 단백질의 약 17 킬로달톤 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질을 절단하는 화합물을 스크리닝하는 방법으로서,
    (a) 아밀로이드 전구체 단백질 또는 이의 단편을 생성하는 세포를 테스트 화합물에 노출시키는 단계; 및
    (b) 약 17 킬로달톤 단편의 양을 검출하는 단계
    를 포함하며, 이때 상기 약 17 킬로달톤 단편은 아밀로이드 전구체 단백질의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하고,
    상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중의 약 17 킬로달톤 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포 중의 약 17 킬로달톤 단편의 양이 증가하는 것은 상기 화합물이 약 17 킬로달톤 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질의 절단을 유발한다는 것을 나타내는 것인 스크리닝 방법.
  9. 제8항에 있어서, (c) 상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편 중 하나 이상의 양이 감소되는지 여부를 확인하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  10. 제1항에 있어서, 스크리닝 방법을 시험관내에서 수행하는 것인 방법.
  11. 제8항에 있어서, (c) 상기 화합물에 노출되지 않은 세포의 세포 배양 배지 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포의 세포 배양 용해물 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편 중 하나 이상의 양이 감소되는지 여부를 확인하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  12. 제8항에 있어서, 상기 스크리닝 방법을 고효율 방식으로 수행하는 것인 방법.
  13. APP의 약 17 킬로달톤 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질을 절단하는 화합물을 스크리닝하는 방법으로서,
    (a) 아밀로이드 전구체 단백질 또는 이의 단편을 생성하는 세포를 테스트 화합물에 노출시키는 단계; 및
    (b) 약 17 킬로달톤 단편의 양을 검출하는 단계
    를 포함하며, 이때 상기 약 17 킬로달톤 단편은 아밀로이드 전구체 단백질의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하고,
    상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중에 약 17 킬로달톤 단편이 부재하는 것에 비해 상기 화합물에 노출된 세포 중에 약 17 킬로달톤 단편이 존재하는 것은 상기 화합물이 약 17 킬로달톤 단편이 형성되도록 아밀로이드 전구체 단백질의 절단을 유발한다는 것을 나타내는 것인 스크리닝 방법.
  14. 제13항에 있어서, (c) 상기 화합물에 노출되지 않은 세포 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편 중 하나 이상의 양이 감소되는지 여부를 확인하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  15. 제13항에 있어서, 상기 스크리닝 방법을 시험관내에서 수행하는 것인 방법.
  16. 제13항에 있어서, (c) 상기 화합물에 노출되지 않은 세포의 세포 배양 배지 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편의 양에 비해 상기 화합물에 노출된 세포의 세포 배양 용해물 중의 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편 중 하나 이상의 양이 감소되는지 여부를 확인하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
  17. 제13항에 있어서, 상기 스크리닝 방법을 고효율 방식으로 수행하는 것인 방법.
  18. APP의 약 17 킬로달톤(kDa)의 카복시 말단 단편이 형성되도록 APP의 절단을 유발하는 데 사용하기 위한 것이며, 상기 약 17 kDa 단편은 APP의 카복시 말단 아미노산 서열 및 아밀로이드-베타 아미노산 서열을 포함하는 것인, 하기 일반식 (I)의 복소환 화합물이 아닌 화합물, 또는 이의 약학적으로 허용되는 염, 수화물 또는 프로드럭:

    (상기 식에서, Rx, R1, R2, R3, R4는 각각 본원에 정의된 바와 같다).
  19. 제18항에 있어서, 상기 화합물이 Aβ1-42, Aβ1-40, 아밀로이드 전구체 단백질의 C99 단편, 또는 아밀로이드 전구체 단백질의 C83 단편 중 하나 이상의 생성을 감소시키는 것인 용도.
  20. 제1항에 있어서, 상기 화합물이 투여되는 피험체가 알츠하이머병을 갖는 것인 용도.
  21. 제20항에 있어서, 상기 피험체가 알츠하이머병으로 진단된 것인 용도.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20100256173A1 (en) * 2009-04-02 2010-10-07 Eckard Weber Method of Treating Cognitive Impairment
WO2010120872A2 (en) * 2009-04-14 2010-10-21 Kim Nicholas Green Method of decreasing pro-adam10 secretase and/or beta secretase levels
EP2429522A4 (en) * 2009-05-11 2013-01-09 Univ California METHOD FOR REDUCING THE CONCENTRATION OF UBIQUITINATED PROTEINS
JP2016040542A (ja) * 2014-08-13 2016-03-24 学校法人金沢医科大学 認知症治療薬または認知症治療薬候補物質のスクリーニング方法
AU2022275939A1 (en) * 2021-05-19 2023-11-16 Amyriad Pharma, Inc. Method of treating alzheimer's disease

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE252580T1 (de) * 1999-07-30 2003-11-15 Zenyaku Kogyo Kk Azaindolizinon-derivate und agenzien zur verbesserung der kognitiver fähigkeiten,die dieselben als aktive inhaltstoffe enthalten
US7141579B2 (en) * 2001-01-30 2006-11-28 Zenyaku Kogyo Kabushiki Kaisha Heterocyclic compounds and cerebral function improvers containing the same as the active ingredient
JP2006505272A (ja) * 2002-11-04 2006-02-16 バイオアークティック ニューロサイエンス アーベー βアミロイド前駆体タンパク質の構造およびプロセシングを調節する薬剤の同定のための方法
JP5160764B2 (ja) * 2006-10-13 2013-03-13 全薬工業株式会社 特定の構造の複素環化合物を含む抗鬱剤、脳保護剤、アミロイドβ沈着抑制剤または老化抑制剤
US20090221554A1 (en) * 2008-02-28 2009-09-03 Zenyaku Kogyo Kabushiki Kaisha Method of treating cognitive impairment
US20110223630A1 (en) * 2008-06-12 2011-09-15 Anatoly Nikolaev Method for screening for compounds that inhibit neurodegeneration
US20100256173A1 (en) * 2009-04-02 2010-10-07 Eckard Weber Method of Treating Cognitive Impairment
WO2010120872A2 (en) * 2009-04-14 2010-10-21 Kim Nicholas Green Method of decreasing pro-adam10 secretase and/or beta secretase levels
EP2429522A4 (en) * 2009-05-11 2013-01-09 Univ California METHOD FOR REDUCING THE CONCENTRATION OF UBIQUITINATED PROTEINS

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