KR20110089432A - 고체 약학 제제의 부형제로서의 표면 활성 단백질인 하이드로포빈 - Google Patents

고체 약학 제제의 부형제로서의 표면 활성 단백질인 하이드로포빈 Download PDF

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프란츠 코프만
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귀도 모이러
위르겐 엑크
고든 브래들리
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Abstract

본 발명은 약학 기술에서의 적용을 위해, 구체적으로 생약 용도를 위한 부형제로서 표면 활성 하이드로포빈의 용도에 관한 것이다. 본 발명은 생약형의 약학 특성을 개질시키기 위해 생약 조성물에 하이드로포빈을 혼합하거나 또는 약학 제형의 표면을 하이드로포빈 함유액으로 처리하는 방법을 제공한다. 본 발명의 바람직한 구체예에서, 하이드로포빈은 약학 조성물의 특성을 개선시키기 위해, 예를 들어 지연된 약물 방출성을 획득하기 위해 생약형의 내붕해성을 증가시키거나 또는 계면활성제로서 작용하도록 사용된다. 부형제로서 표면 활성 단백질을 이용하여 개질되는 생약형은 캡슐, 정제, 환약, 미립자, 소포체, 및 좌제이지만, 추가의 생약형도 고려한다. 본 발명의 목적을 위해 사용되는 표면 활성 단백질은 개별 천연 공급원으로부터 단리되거나 또는 재조합 기술 및 적절한 숙주에서의 발현을 통해 제조될 수 있다.

Description

고체 약학 제제의 부형제로서의 표면 활성 단백질인 하이드로포빈{HYDROPHOBINS AS SURFACE ACTIVE PROTEINS AS EXCIPIENTS IN SOLID PHARMACEUTICAL FORMULATIONS}
본 발명은 약학 조성물의 제제(formulation)를 위한 부형제로서, 하이드로포빈, 바람직하게는 진균 하이드로포빈에서 선택된 표면 활성 단백질의 용도에 관한 것이다. 본 발명의 주요 목적 중 하나는 유리한 방식으로 약물의 안정성 및 방출 특징을 조정하기 위한 생약 적용분야에서 표면 활성 단백질의 용도이다. 본 발명에 따른 표면 활성 단백질의 용도는 생약 조성물에 표면 활성 단백질을 혼합하거나, 또는 약학 제형을 코팅하거나 또는 매트릭스에 도입하거나 또는 매트릭스를 형성시키는 것에 의한 제제이다.
생약형(galenic form)의 최적화는 적절한 약학 특성 예컨대 최적 약물 방출성 및 환자에 대한 편의성을 획득하기 위한 의약의 제제에서 중요한 역할을 한다. 약학 조성물의 제조를 위해 흔히 캡슐(Capsulae medicinales)이 사용된다. 캡슐의 외피는 대개 생중합체 예컨대 젤라틴, 전분 또는 다른 약학적으로 불활성인 물질 예컨대 거대분자 물질의 건조겔로 구성된다. 캡슐은 생체내 생리 조건 하에서 가용성, 소화성 또는 투과성이다. 수많은 유리한 특성 때문에 캡슐은 흔히 고체, 반고체 또는 액체 약물을 제제화하는데 사용된다: (a) 심지어 민감하고 기술적으로 문제가 되는 약학 조성물을 제제화할 수 있다, (b) 약물이 환경적 위험(빛, 공기, 수분)으로부터 보호된다, (c) 유효 기간 및 품질 수명이 증가된다, (d) 특히 액체 약물의 고용량 신뢰도, (e) 최적의, 보장되는 약물 방출성(지속 방출 효과가 있거나 또는 없이), (f) 중성적인 맛과 향으로 편리하게 적용, (g) 충분한 용인성, (h) 높은 약물 안정성을 의미하는 형상, 색상 및 각인에 의한 명백한 식별성. 경구용 캡슐 사용의 문제는 위와 장을 통해 통과하는 동안의 제어된 방출성이다. 상이한 정도의 위산에 대한 내성을 셀룰로스 아세테이트 프탈레이트, 히드록시프로필 메틸 셀룰로스 프탈레이트 또는 아크릴 수지 바니시로 코팅하여 획득할 수 있다.
약물의 경구 투여를 위한 다른 생약형은 정제의 제제에 대해 내붕해성을 갖는 매트릭스를 사용한 것이다. 매트릭스는, 예를 들어, US 6,238,698에 개시된 바와 같이, 매트릭스층, 및 이 매트릭스층의 내붕해성을 증가시키는 부형제층을 포함하여, 몇개의 층을 포함하는, 예를 들어 정제용 셀룰로스 에테르 또는 가교 아밀로스로 구성된다. US 5,407,686은 복수층으로 구성된 정제의 제조를 위한 조성물을 개시하고 있으며, 상기 복수층 중 하나는 가용성 중합체 및 가소제를 포함하는 필름 코팅이다. 추가의 생약형 예컨대 미세과립, 미셀 또는 소포체가 개시되어 있으며, 이들 중 일부는 내분해성 또는 지속 방출성이 높다고 보고되어 있다.
신규 부형제로서 본 발명의 표면 활성 단백질의 사용은 예를 들어, 매트릭스 정제, 에어로졸, 현탁액 또는 액체 의약의 제조에서 이들 생약형의 개선에 상당히 기여할 수 있다.
US 5,538,738은 데포 물질 또는 지연 시스템을 개질시키기 위해 제형(dosage form)에 히드록시카르복실산을 혼합하여 의약 또는 생물학적 물질의 지속 방출을 제공하는 시스템을 기술하고 있다. WO 99/042086은 지질 물질을 주성분으로하는 흡수 촉진제를 포함하는 장기간 방출성 생약형을 제안하고 있다. US 4,859,469는 합성 중합체 및 약학적으로 허용되는 보강제로 구성된 미세다공막으로 코팅된 미세과립을 포함하는 신규한 생약형을 개시한다.
상기의 어떠한 특허도 약학 제형의 제조시 표면 활성 부형제로서, 예를 들어 하이드로포빈, 카프린, 컬린 또는 라테린 등과 같은 표면 활성 단백질의 용도를 기술하고 있지 않다. 따라서, 본 발명은, 다시 말해 상기 약술한 바와 같은 다양한 생약 용도를 위해, 이로운 내산성 및 장기간 방출 특성을 중합체에 부여하는 수단을 제공한다. 약학 용도를 위한 중합체 또는 중합체의 코팅을 제조하는 방법에서 표면 활성 단백질의 혼합을 포함한다. 가장 탁월한 장점은, 주로 장에서의 약물 방출이 지시되거나 또는 심지어 장에서 제어 방출을 원하는 경우, 본 발명에 따른 생약형의 약물이 위를 통과할 수 있다는 것이다.
표면 활성제는 이러한 물질이 분산된 입자의 표면 상에 흡착될 때 계면의 화학적 특성 및 물리적 특성을 변화시킬 수 있다. 양친매성 표면 활성제는 소수성 부분과 친수성 부분으로 구성된다. 소수성 부분은 비극성 표면 상에 흡착되거나 또는 비극성층에 의해 유인되는 반면 친수성 부분은 극성 표면 또는 층으로 유인된다. 이러한 표면 활성제는 따라서, 친수성 표면을 소수성으로 만들고 소수성 표면을 친수성으로 만드는데 사용될 수 있다.
일정 표면 활성제는 임의의 친수성-소수성 계면에서 양친매성막으로 자가 회합될 수 있다. 이러한 자가 회합은 (생)중합체의 특성을 상당히 개선시킬 수 있다. 액체/물 계면에서, 표면 활성제는 물의 표면 장력을 감소시켜 결과적으로 수액적의 접촉각이 변화된다. 이러한 매개변수는 표면 활성제의 활성을 측정하는데 사용될 수 있다. 표면 활성제의 사용은 예를 들어, 캡슐, 환약, 정제, 미세과립 및 좌제의 효능 및 제조에서의 생약형의 개선에 상당히 기여할 수 있다.
천연 유래의 일부 단백질이 표면 활성제로서 작용한다. 표면 활성 단백질은 이에 제한되는 것은 아니고 하이드로포빈, 채플린, 컬린 또는 라테린을 포함한다.
하이드로포빈은 크기가 약 10 kDa인 소형의, 시스테인-풍부한 진균 표면 활성 단백질로서, 친수성-소수성 표면 또는 계면에서 고도의 불용성 양친매성층으로 자가 회합된다. 이들은 사상 진균, 예를 들어 스키조필럼 코뮨(Schizophyllum commune) 또는 트리코데마 리세이(Trichoderma reesei)의 특징이고 진균의 기생(aerial) 구조물의 표면 상에서 구조 단백질로서 발견되었고, 소수성 코팅은 극한 환경 조건에 대해 사상진균의 분생자를 보호하고 습윤 및 탈수 둘 모두에 대한 보호 역할을 갖는 것으로 제안되었다. 2 클래스의 하이드로포빈은 수용성 및 수치요법을 기준으로 구별되었다. 하이드로포빈은 천연 공급원으로부터 단리될 수 있지만, 화학 및/또는 생명공학적 제조 방법을 통해 합성되는 천연적으로 발생되지 않는 하이드로포빈도 가능하다. 표면 개질, 즉 습윤성 및 섬유아세포의 성장 강화를 이루기 위해 조작된 SC3의 용도가 문헌 [Scholtmeijer, K. et al. (Surface modifications created by using engineered hydrophobins, Appl. Environ. Microbiol. 2002, 68(3): 1367-73)]에 기술되어 있다.
EP1254158은 하이드로포빈으로 표면을 코팅하는 일반적인 방법을 기술하고 있다. WO96/41882는 소수성 표면을 친수성으로 만들기 위해, 친수성 기재의 내수성을 개선시키기 위해, 그리고 수중유 에멀션 또는 유중수 에멀션을 제조하기 위해, 유화제, 증점제 또는 표면 활성 물질로서 하이드로포빈의 용도를 제안하고 있다.
또한 약학 용도, 예컨대 연고나 크림의 제조, 및 미용 용도, 예컨대 피부 보호 또는 모발 샴푸 또는 모발 컨디셔너 등으로서의 용도도 제안되었다(US2003/217419). 미용 용도는 또한 WO 06/136607에도 제안되었는데 여기서 케라틴 또는 점막이나 치아에 대한 하이드로포빈의 결합성을 활용하여, 예를 들어, 하이드로포빈과의 접합체 또는 조성물 형태의, 미용 이펙터 분자를, 원하는 작용 부위(모발, 손톱, 피부 등)로 향하게 하였다. 하이드로포빈 유사 코팅을 이용하여 표면에 목적 화합물(예를 들어, 효소, 항체, 핵산)을 결합시키는 방법이 WO04/00880에 기술되어 있다.
그러나, 종래에 따른 하이드로포빈의 용도는 대부분 하이드로포빈 함유액을 코팅하여 표면 특성을 개실시키는 것에 관련된 것이다. 상기 언급한 유화제 및 증점제로서 제공하는 것 이외에, 생약학에서의 부형제로서 하이드로포빈 또는 다른 표면 활성 단백질의 용도는 지금껏 기술된 적이 없다.
발명의 요약
본 발명은 약학 기술, 특히 생약학에서의 부형제로서 표면 활성 단백질을 사용하는 방법을 제공한다. 본 발명의 바람직한 일 구체예에서는, 생체내 약물 방출 특성을 조정하기 위한 약학 조성물의 제제용 생약 부형제로서 하이드로포빈을 사용한다. 하이드로포빈은, 방출 동역학의 조정이 이루어지도록, 약학적으로 사용되는 중합체 및 화합물에 혼합되어, 매트릭스에 도입/매트릭스의 형성을 통해 또는 생약형의 코팅에 의해 사용될 수 있다. 특히 바람직한 것은, 예를 들어, 산성 위액에 대한 생약형의 내산성을 증가시키고 장의 알칼리 환경에서 약물의 지속 방출을 가능하게하는, 하이드로포빈-함유 생약형의 pH-의존적 효능이다. 본 발명에 따른 방법으로 처리하려는 제형(pharmaceutical form)은 경구용 또는 다른 투여 경로(예를 들어, 직장용)로 지정될 수 있다. 본 발명에 따른 생약형의 예는 캡슐, 환약, 정제, 매트릭스 정제, 미세과립 및 좌제이지만, 이들에 제한되는 것은 아니다.
상기 상세히 언급한 본 발명의 바람직한 구체예의 목적을 위해 사용되는 클래스 I 하이드로포빈은 상이한 pH의 환경에 대해 개별적인 특성을 보인다(도 4 참조). 이는 당분야의 숙련가가, 유리한 방식으로 조정하려는 생약형에 적합한 하이드로포빈을 선택할 수 있게 한다. 예로서, 하이드로포빈 TT1은 염기성 환경에 캡슐이 더욱 내염기성이 되도록 하여, 약물 방출이 지연성인 좌제의 제조에 이용할 수 있다(도 3c 참조).
하이드로포빈은, 내붕해성이 높은 생약형 또는 ㅔㅈ제화된 약물의 지속 방출성을 갖는 상이한 생약형을 제조시에 부형제로서 이용할 수 있다: 캡슐 또는 좌제는 예를 들어, 젤라틴, 전분, 알기네이트 또는 임의의 다른 약학적으로 허용되는 중합체로 구성될 수 있고; 약물 조성물의 미세과립은 예를 들어, 메타크릴레이트산 메틸에스테르로 이루어진 미세다공막으로 코팅될 수 있으며; 미셀, 정제 또는 환약은 예를 들어 아밀라제로 이루어질 수 있고, 한 층(예를 들어, 부형제층)이 내붕해성인, 상이한 층으로 구성될 수 있다.
도 1: 하이드로포빈 SC3 또는 물로 분무하여 코팅되고 지시 염료가 충전된 젤라틴 캡슐로부터의 확산 및/또는 누출 결과를 도시한 도면이다. 캡슐을 펩신 존재(B) 또는 부재(A) 하에 pH 1.0인 물에 침수시킨다. 캡슐로부터의 브로모페놀 블루의 방출을 비색 평가법에 의해 물의 발광성으로서 측정하고 항온반응 시간에 대해 그래프화하였다. 하이드로포빈 코팅은 캡슐에 대해 산성 환경에 대한 내성을 부여한다.
도 2: pH 1.0(A), 또는 pH 1.0이고 0.4 U/mL 펩신이 존재(B)하는, 각각 하이드로포빈 SC3 또는 BSA(대조군)를 함유하는 알기네이트 용액에 침수시켜 코팅되고 지시 염료가 충전된 젤라틴 캡슐로부터의 확산 및/또는 누출 결과를 도시한 도면이다. 도 1에 기술한 바와 같이 평가하였다.
도 3: 산성(A, 위 모방), 중성(B) 또는 염기성(C, 장 모방) 환경에서, 각각 하이드로포빈 SC3, TT1, POH3 또는 BSA를 함유하는 알기네이트 용액에 침수시켜 코팅되고 지시 염료가 충전된 젤라틴 캡슐로부터의 확산 및/또는 누출 결과를 도시한 도면이다. 도 1에 기술한 바와 같이 평가하였다.
도 4: 순수와 비교하여 폴리프로필렌 평판(Borealis HC115MO) 상에서 1 중량% 단백질 용액의 수접촉각의 상대적 변화율로서, 하이드로포빈의 높은 양친매성을 검증한 도면이다.
도 5: A: 10 내지 120분 동안 pH 1.0의 산성 용액 중에서 정제의 용해 결과를 도시한 도면이다. 정제는 하이드로포빈 HFB2 또는 SC3 또는 TT1 또는 POH3 또는, 대조군으로서 BSA를 함유하는 알기네이트 용액에 침수시켜 미리 코팅하였다. 하이드로포빈, 특히 SC3를 이용한 코팅이 정제의 용해를 상당히 지연시켰다. B: 젤라틴 필름(좌) 및 하이드로포빈 함유 젤라틴 필름(우)을 물, 0.1 N aq. HCl, 및 펩신 함유 0.1 N HCl과 접촉시켰다(동일 시간 동안); 하이드로포빈 함유 막은 명백하게 느려진 용해율을 보였다.
본 발명의 방법은 개선된 생약형 및 투여성을 제공하기 위해 인간 및/또는 동물에서 적용하려는, 미생물 기원의 표면 활성 단백질-즉, 하이드로포빈-의 사용을 통해 설명된다. 개선된 생약형은, 무엇보다도, 제제화된 약학 조성물에 위액에 대한 내성을 부여할 수 있고, 생체내 지속 방출성을 제공하며, 정제와 캡슐의 용해 동역학을 조정하여, 활성제의 생체이용률을 강력하게 증가시킬 수 있다.
표면 활성 단백질은 소수성과 친수성 둘 모두를 보유하는, 양친매성이다. 따라서, 이러한 부류의 천연 발생 화합물은 "천연 계면활성제"라고 불린다. 양친매성은 양쪽성과 동의어이다.
양친매성 단백질은 고체 물질의 표면 상에 물리적으로 흡착되어, 처리되는 표면의 습윤성에 따라 배향되는 소수성과 친수성 둘 모두를 보유하는 표면을 형성시킬 수 있다.
표면이 소수성이면, 코팅의 소수성 측면은 코팅되는 소수성 표면과 접촉하고, 코팅의 외면은 친수성이어서, 코팅되는 표면의 수습윤성이 증가된다.
기재 상에서 단백질의 표면 활성 특성은 수중유 에멀션 및 물과의 접촉각의 특징규명법인, 계면 장력 측정법으로 평가할 수 있다. 본 발명에서 유용한 양친매성 단백질은 소수성 표면(예를 들어, Teflon® 표면 또는 폴리올레핀 표면) 상에서 수접촉각(WCA)을 강력하게 감소시키는 것을 특징으로 한다. 구체적으로, 본 발명에 유용한 양친매성 단백질의 1 중량% 수용액 또는 수분산액은 대체로 순수에 대해 관찰되는 접촉각보다 20 °이상, 바람직하게는 30 °이상, 보다 바람직하게는 40 °이상, 가장 바람직하게는 45 °이상, 일부 특정 경우에는 50 °이상(도 4 참조; 모든 WCA 측정법, 및 언급한 데이타는, 정접촉각 세실 드롭법에 따름) 만큼 낮은, 폴리프로필렌 표면(구체적으로: PP 단독중합체형 HC115MO, Borealis, 용융 유동율 = 4.0 g/10 분 [230℃/2.16 kg]) 상에서의 접촉각을 보인다. 본 발명에서 표면 활성 단백질로서 사용하기에 바람직한 것은 하이드로포빈, 예컨대 클래스 I 또는 클래스 II의 하이드로포빈이다. 본 발명에 유용한 하이드로포빈은 그 공급원과 특성이 대체로 알려져 있고(상기 언급된 특허 공보 참조), 그중에서도 WO 96/41882(1 페이지, 14째줄에서 7 페이지, 20째줄, 및 실시예 1 내지 5); WO 03/10331(1 페이지, 4째줄 내지 5 페이지, 20째줄); 또는 WO 06/103230(3 페이지, 단락 6 내지 12 페이지, 아래에서 3번째줄)에 기술되어 있으며, 언급한 특정 부분은 참조하여 본원에 포함시킨다.
"하이드로포빈" 및 이의 제조는 알려져 있으며, 본 발명의 실시에 적합한 하이드로포빈은, 예를 들어, WO 06/103230에 기술된 것들이다. 이의 단편 또는 유도체를 사용하는 것도 가능하다. 개질된 하이드로포빈을 사용하는 것도 역시 가능하며, 예를 들어, 몇몇 동일하거나 또는 상이한 구조를 서로(에를 들어, 이량체 또는 삼량체로서) 및/또는 하이드로포빈에 천연 발생적으로 존재하지 않는 1 이상의 적절한 폴리펩티드 서열과 결합시킨다. 천연 발생 하이드로포빈은 적절한 방법에 의해 천연 공급원으로부터 단리될 수 있다(예를 들어, [Woeten et. al., Eur. J. Cell Biol.. 63, 122-129 (1994)], 또는 WO 96/41882 참조). 하이드로포빈의 제조는 또한 핵산 서열, 특히 본 발명의 하이드로포빈을 코딩하는 DNA 서열을, 핵산 서열의 유전자 발현에 의해 원하는 단백질을 생산하는 숙주 유기체에 삽입시키는, 유전자 조직법에 의해 수행될 수도 있다. 유전자 발현은 이종성 또는 동종성 숙주 균주에서 수행할 수 있다. 대체로, 이러한 방법은 공지이며, 상응하는 내용은, 예를 들어, WO　06/082251에서 확인할 수 있다.
본 발명에 따른 처리에 사용되는 조성물은, 1 이상의 하이드로포빈 및 수성 용매, 예를 들어 물 또는 물과 혼화성 용매의 혼합물인 용매를 포함한다.
개질된 중합체를 제조하기 위해 본 발명에 따라 하이드로포빈을 사용하기 위해, 하이드로포빈은 용매 무함유 형태로 사용될 수 있으며, 바람직하게 이들은 물 또는 임의의 다른 약학적으로 허용되는 용매를 주성분으로하는 제제의 형태로 사용된다. 용매의 혼합물도 사용할 수 있음을 이해한다. 용매의 성질은, 예를 들어, 하이드로포빈, 처리하려는 중합체의 성질 및 이의 용도에 따라 좌우되고, 따라서 당분야의 숙련가가 선택한다.
본 발명에 따라 사용되는 조성물을 제조하기 위해, 바람직하게, 하이드로포빈의 수용액을 사용한다. 적절한 용액은 하이드로포빈(들)의 합성, 단리 및/또는 정제 동안 얻을 수 있다. 다르게, 하이드로포빈은, 예를 들어, 동결 건조에 의해, 먼저 용매 무함유 형태로 단리되고, 제2 단계에서만 제제화되는 것도 가능하다.
본 발명의 실시를 위한 하이드로포빈의 선택은 제한적이지 않다. 하나의 하이드로포빈 또는 다수의 상이한 하이드로포빈이 사용될 수 있다.
제제 중 하이드로포빈의 양은 표면의 성질 및/또는 용도에 따라 당분야의 숙련가가 결정할 수 있다. 흔히, 원하는 효과, 예를 들어 표면 성질의 원하는 변화를 얻기 위해 비교적 소량이면 충분하다. 표면 활성 단백질 농도는 0.01 내지 10.0 mg/mL이 일반적이고, 약 0.2 mg/mL(예를 들어, 0.2 내지 2 mg/mL, 또는 0.5 내지 1 mg/mL)이 특히 바람직하다.
본 발명의 고체 투약형의 예는 정제, 코팅 정제, 캡슐, 과립, 좌제, 임플란트이다. [6]
본 발명의 고체 투약형에 함유될 수 있는, 약물의 약학 성분(API)은 아카르보스, 아세틸살리실산, 알푸조신, 알리스키렌, 암브리센탄, 암로디핀, 아목실린, 아나스트로졸, 아피자반, 아프레피탄트, 아리피프라졸, 아타자나비르, 아테놀롤, 아토목세틴, 아토르바스타틴, 아지트로마이신, 바제독시펜, 베나제프릴, 비칼루타미드, 비사코딜, 부데소니드, 부틸스코폴라민, 칸데사르탄, 카페시타빈, 카르바마제핀, 카리스바메이트, 카르베딜롤, 카소피탄트, 셀레콕십, 세티리진, 클로로퀸, 시나칼세트, 시프로플록사신, 클라부란산, 클로드로네이트, 클로니딘, 클로피도그렐, 시프로테론 아세테이트, 다폭세틴, 다루나비르, 다사티닙, 데페라시록스, 덱스트로메토르판, 디클로페낙, 디에노게스트, 디피리다몰, 도세탁셀, 도네페질, 드로스피레논, 둘록세틴, 에파비렌즈, 엘레트립탄, 에나라프릴, 엔타카폰, 엔테카비르, 엔자스타우린, 엘로티닙, 에소메프라졸, 에스조피클론, 에티닐에스트라디올, 에토리콕십, 에트라비린, 에베롤리스무스, 엑세메스탄, 펙소페나딘, 피나스테리드, 플루옥세틴, 플루티카손, 플루티카손 프로피오네이트, 플루바스타틴, 포르모테롤, 간시클로비르, 제피티닙, 글리메피리드, 히드로코돈, 이반드론산, 이부프로펜, 인디나비르, 이프라트로피움, 이르베사르탄, 라모트리진, 란소프라졸, 라파티닙, 레트로졸, 레보노르제스트렐, 리네졸리드, 리시노프릴, 로사르탄, 마라비록, 멜록시캄, 메트포르민, 메틸페니데이트, 메토프롤롤, 목시덱틴, 미코페놀산, 나프록센, 나테글리니드, 네비라핀, 니코란딜, 니페디핀, 닐로티닙, 올란자핀, 오메프라졸, 올리스타트, 오셀타미비르, 옥살리플라틴, 옥스카르바제핀, 팔리페리돈, 판토프라졸, 파라세타몰, 파록세틴, 피오글리타존, 프라미펙솔, 프라바스타틴, 프레가발린, 케티아핀, 라베프라졸, 랄록시펜, 라미프릴, 레복세틴, 리세드로네이트 나트륨, 리바록사반, 리바스티그민, 리자트립탄, 로시그리타존, 루복시스타우린, 살메테롤, 실데나필 시트레이트, 심바스타틴, 시롤리무스, 시타그립틴, 소라페닙, 수마트립탄, 수니티닙, 수리나반트, 타달라필, 탐술로신, 타펜타돌, 텔비부딘, 텔미사르탄, 터비나핀 히드로클로라이드, 터리플루노미드, 티오트로퓸, 톨테로딘, 토피라메이트, 바비카세린 히드로클로라이드, 발라시클로비르, 발간시클로비르, 발사르탄, 반데타닙, 바르데나필, 바레니클린, 벤라팍신, 빌다그립틴, 보리코나졸, 와파린, 지프라시돈, 졸미트립탄, 졸피뎀을 포함한다.
추가 약물로 아세프로마진, 아목실린, 암피실린, 아프라마이신, 베나제프릴, 베타메타손, 부스코판, 카르프로펜, 세파피린, 클렌부테롤, 클린다마이신, 클록사실린, 사이클로스포린 A, 사이로마진, 데라콕십, 디클로르보스, 디사이클라닐, 디플록사신, 엔로플록사신, 에토돌락, 펜벤다졸, 프라마이세틴, 푸로세미드, 그리세오풀빈, 헤타실린, 하이그로마이신, 이미다클로프리드, 레바미솔, 레보타이로신, 루페누론, 멜록시캄, 밀베마이신 옥심, 모넨신, 목시덱틴, 나라신, 니카르바진, 니텐파이람, 올레안도마이신, 옥스펜다졸, 옥시클로자니드, 파라멕틴, 파로모마이신, 퍼메트린, 페닐부타존, 프라지퀴안텔, 프로카인 벤질페니실린, 프로카인 페니실린, 파이란텔 파모에이트, 스피노사드, 설파디아진, 티아메톡삼, 티아물린, 트리암시놀론, 트리클라벤다졸, 트리메토프림, 타일로신이 포함된다.
보다 구체적으로, 본 발명은 이에 제한되는 것은 아니고, 다음의 구체예들을 포함한다:
1. 생체내, 특히 위 및/또는 장에서 고체 투약형으로부터의 약물 방출 특징을 조정하는 방법으로서, 이 방법은 상기 투약형에 표면 활성 단백질을 도입하거나, 또는 상기 투약형을 표면 활성 단백질로 코팅하는 것을 포함한다.
2. 표면 활성 단백질을 함유하는 것을 특징으로 하는, 고체 투약형을 포함하는 약학 조성물.
3. 생체내, 특히 위 및/또는 장에서 고체 투약형으로부터의 약물 방출 특징을 조정하기 위한 표면 활성 단백질의 용도.
4. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 표면 활성 단백질은 이의 1 중량% 수성 용액 또는 분산액이 폴리프로필렌 표면 상에서의 접촉각을 순수에 대해 20 °또는 그 이상 만큼 감소시키는 것을 특징으로 한다.
5. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 표면 활성 단백질은 하이드로포빈, 예컨대 클래스 II 하이드로포빈 또는 특히 클래스 I 하이드로포빈이다.
6. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 위의 강산 환경 및/또는 장의 알칼리 환경과 생약 투약형(특히 정제, 캡슐) 표면의 계면 특성이 변화된다.
7. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 위의 강산 환경 및/또는 장의 알칼리 환경과 생약 투약형의 활성 성분(들) 또는 1 이상의 부형제의 계면 특성이 변화된다.
8. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 위의 위액 및/또는 장의 알칼리 환경에 의한 화학적 분해로부터 활성 성분(들)을 보호하는 것을 포함한다.
9. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 특히 추가의 계면 활성제 예컨대 결합제, 생중합체, 유동성 보조제, 윤활제, 소화관에서 정제 분해를 확보하는 붕해제; 감미제 또는 향미제; 착색제에서 선택되는, 1 이상의 추가의 약학적으로 허용되는 성분을 더 포함한다.
10. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 고체 투약형은 캡슐, 환약, 정제, 매트릭스 정제, 미세과립 및 좌제에서 선택되는 생약형이다.
11. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 표면 활성 단백질은 생체내, 특히 위 및/또는 장에서, 약물 방출 특징을, 특히 이를 지연시켜, 조정한다.
12. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 고체 투약형은 생체내, 특히 위 및/또는 장에서 약물 방출 특징을 조정하기 위한 표면 활성 단백질을 함유하는 정제 형태로 존재한다.
13. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 고체 투약형은 생체내 특히 위 및/또는 장에서 약물 방출 특징을 조정하기 위해 표면 활성 단백질을 함유하는 다층 정제 형태로 존재한다.
14. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 고체 투약형은 생체내 특히 위 및/또는 장에서 약물 방출 특징을 조정하기 위해 표면 활성 단백질을 함유하는 캡슐 형태로 존재한다.
15. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 고체 투약형은 생체내 특히 위 및/또는 장에서 약물 방출 특징을 조정하기 위해 표면 활성 단백질을 함유하는 다중 캡슐 형태로 존재한다.
16. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 이에 따라 생약형은 생체내 특히 위 및/또는 장에서 화학적 작용 예컨대 가수분해 및 효소 공격을 통해 활성 성분을 방출한다.
17. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도로서, 이에 따라 생약형은 생체내 특히 위 및/또는 장에서 물리적 작용 예컨대 침식 및 확산 작용을 통해 활성 성분을 방출한다.
18. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 이에 따라 생약형은 생체내 특히 위 및/또는 장에서 물리적 및 화학적 작용 둘 모두의 조합을 통해 활성 성분을 방출한다.
19. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 이에 따라 생약형은 위에서 활성 성분(들)을 방출한다.
20. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 이에 따라 생약형은 장에서 활성 성분(들)을 방출한다.
21. 상기 기술된 방법, 조성물 또는 용도에서, 상기 1 내지 20에서 언급한 임의의 특징들이 조합된다.
하이드로포빈-함유 제제는 경우에 따라 당분야에 알려진 추가 성분을 함유할 수 있다(예를 들어, [Lehrbuch der Pharmazeutischen Chemie by Harry Auterhoff, Joachim Knabe and Hans-Dieter Hoetje, 14th Ed. 1999, Wissenschaftliche Verlagsgesellschft mbH Stuttgart [ISBN 3-8047-1645-8], 특히 이의 파트 D); 이러한 성분의 예로는 다른 부형제, 첨가제 및/또는 보강제가 포함된다. 이러한 성분의 예에는, 계면활성제, 예컨대 음이온성, 비이온성, 양쪽성 및/또는 양이온성 계면활성제, 및 (생)중합체, 및/또는 이하에 열거한 성분들이 포함된다.
전분, 당류, 셀룰로스 또는 개질 셀룰로스 예컨대 히드록시프로필 셀룰로스, 락토스, 당알콜 예컨대 자일리톨, 솔비톨 또는 말티톨을 포함하는, 결합제; 결합제는 그 용도에 따라 분류되며, 용액 결합제(용매 예컨대 물, 알콜에 용해됨); 습식 제립법에 사용되는 결합제(예를 들어, 젤라틴, 셀룰로스, 셀룰로스 유도체, 폴리비닐피롤리돈, 전분, 수크로스 및 폴리에틸렌 글리콜 포함); 건식 결합제 예컨대 직접 분말 압착(DC) 처방의 일부로서, 건식 결합제(예를 들어 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 및 폴리에틸렌 글리콜 포함)를 포함한다.
셀룰로스(식물 섬유)막 코팅, 합성 중합체, 쉘락, 옥수수 단백질 제인 또는 다른 다당류, 젤라틴(특히 캡슐용); 약물 방출률을 제어하고 소화관 내 어디에서 약물이 방출될지 결정하기 위한 장 코팅을 포함하는, 코팅.
수분 흡수 촉진제 및 정제 파열 촉진제를 포함하는, 붕해제(습윤시 팽창 및 용해되어 정제가 소화관에서 붕해되어, 흡수를 위해 활성 성분이 방출됨); 예를 들어 전분, 셀룰로스, 가교 폴리비닐 피롤리돈, 나트륨 전분 글리콜레이트, 나트륨 카르복시메틸 셀룰로스메틸셀룰로스가 있다.
충전제/희석제(불활성, 제제의 다른 성분과의 상용성, 비흡습성, 가용성, 조밀성, 바람직하게 무미 또는 상쾌한 맛); 이의 예로는 식물 셀룰로스(특히 정제 또는 경질 젤라틴 캡슐에서 순수 식물 충전제), 이염기성 인산칼륨(특히 정제에서), 식물성 유지(특히 연질 젤라틴 캡슐에서), 락토스, 수크로스, 포도당, 만니톨, 솔비톨, 탄산칼슘, 스테아르산마그네슘이 있다.
이러한 성분의 시판 제품의 예로는 EUDRAGIT®(공급처: EVONIK), Kollicoat® 및 Kollidon®(공급처: BASF) 시리즈로부터의 코팅재 및 제제 보조물이 포함된다.
본 발명에 따라, 물체는, 물체(의 표면)를 하이드로포빈, 또는 1 이상의 하이드로포빈, 1 이상의 용매 및 경우에 따라, 예를 들어 계면활성제 및 (생)중합체에서 선택된 1 이상의 추가 성분(들)을 포함하는 조성물과 접촉시켜 처리된다.
어구 "접촉시켜"는, 예를 들어 하이드로포빈과 물질의 혼합물을 생성시키거나 또는 전체 물품/물체를 제제로 분무하거나 또는 제제에 함침시키는 것에 의한 것을 의미한다. 처리를 수행하는 온도는 대체로 대기 온도이지만, 처리되는 물체의 온도 내성에 따라, 고온 또는 저온, 예를 들어 -5℃∼+40℃의 온도 범위를 적용할 수 있다. 처리 기간은 당분야의 숙련가가 결정하며 약 몇 초 내지 몇 시간일 수 있다. 처리 후, 표면을, 예를 들어 물로 세정하여 과량의 처리액을 제거할 수 있다.
본원에 기술한 바와 같이, 실시예를 통한 본 발명의 예시는 본 발명에 따른 교시를 임의로 제한하려는 것이 아니다. 언급한 예들을 통해, 본 발명에 따라 작용하고 동일한 방식으로 다른 적용 분야에 응용할 수 있는 성분들의 조합을 개시한다. 보다 구체적으로 본 발명은 약학 기술의 다양한 적용 범위, 구체적으로 정제, 환약, 캡슐, 미립자 및 좌제의 지속 방출 또는 pH 의존적 방출 및 조정된 용해 동역학 등과 같이 이로운 방출 특징으로 방출되는 약학 조성물의 생약형에 적용가능하다.
실온(r.t. 또는 RT) 또는 대기 온도는 20-25℃ 범위의 온도를 의미한다; 밤새는 12-16시간 범위의 시간 기간을 의미한다. 달리 언급하지 않으면, 백분율은 중량 기준이고, 온도는 섭씨도(백분도) 기준이다. 실시예 또는 그외에서 사용되는 약어는 다음과 같다:
ACN 아세토니트릴
API 활성 약학 성분
BSA 소 혈청 알부민(Fluka)
IPA 이소프로판올
PO 플레우로투스 오스트레아투스(Pleurotus ostreatus) 유래의 클래스 I 하이드로포빈
RT 실온
SC 스키조필럼 코뮨(Schizophyllum commune) 유래의 클래스 I 하이드로포빈
SDS 나트륨 도데실 설페이트
TR 트리코더마 리세이(Trichoderma reesei) 유래의 클래스 II 하이드로포빈
TT 탈라로마이세스 써모필러스(Talaromyces thermophilus) 유래의 클래스 I 하이드로포빈
U 효소 단위
w/v 전체 부피에 대한 중량 기준 부 또는 백분율(대략적인 밀도 = 1)
w/w 전체 중량에 대한 중량 기준 부 또는 백분율.
일반적인 절차
하이드로포빈의 제조
스키조필럼 코뮨(SC), 플레우로투스 오스트레아투스(PO) 및 탈라로마이세스 써모필러스(TT) 유래의 클래스 I 하이드로포빈, 및 트리코더마 리세이(TR) 유래의 클래스 II 하이드로포빈을 본 발명의 목적을 위해 사용한다.
상기 하이드로포빈의 단백질 서열은 NCBI/유전자 은행: SC: 수탁 번호 P16933; PO: 수탁 번호 CAA76494; TR: 수탁 번호 CAA72636에서 획득한다. 아미노산 서열이 핵산 서열로 번역된다. TT의 발현을 위해, 뉴클레오티드 서열은 NCBI/유전자 은행 수탁 번호 CS390617에서 획득한다. 이.콜라이에 대한 코돈 용법의 최적화 후, cDNA를 합성한다(Sloning BioTechnology, Pucheim, Germany). 하이드로포빈 핵산 서열은 T7-RNA-중합효소 및 6xhis-태그 서열(pET15, Novagen)을 포함하는 pET 벡터에 클로닝하여 발현 숙주 이.콜라이 BL21을 형질전환시킨다.
최적화된 하이드로포빈 cDNA를 포함하는 발현 벡터로 형질전환된 이.콜라이 BL21(DE3)의 발효 배양을, 각각 100 ㎍/mL 암피실린 또는 25 ㎍/mL 카나마이신 존재 하에서, ZYM-5052 배지(25 mM Na2HPO4, 25 mM KH2PO4, 50 mM NH4Cl, 5 mM Na2SO4, 20 mM MgSO4, 5 g/L 글리세롤, 0.5 g/L 포도당, 2 g/L 알파-락토스 1수화물, 5 g/L 효모 추출물, 및 10 g/L NZ-아민(purchased from Sigma))를 이용하여 16시간 동안 10 리터 규모로 수행한다. 생물량을 회수한 후, 침강된 세포를 액체 질소에서 동결시키고 -80℃에 저장한다. 초음파로 침강된 세포의 해동 분취액을 처리한 후, 방출된 봉입체를 30초간 세포 균질물을 비등시켜 가용화시키고, 2시간 동안 600 rpm로 20℃에서 교반하였다. 세포 찌거기는 10분간 원심분리로 침강시켰고 단백질 함유 상등액을 0.22 ㎛의 필터에 통과시켰다. 여과물은 니켈 세파로스(GE Healthcare) 상의 친화성 크로마토그래피를 통해 분리하였고 용리된 분획은 SDS 폴리아크릴아미드 겔 전기영동으로 분석하였다. 하이드로포빈 함유 분획을 축적하고, 이후 하이드로포빈 함유액을 물에 대해, 컷오프가 10 kDa인 막을 이용하여 Slide-A-Lyzer(Pierce)에서 투석하여 탈염시켰다(16시간 동안 3 리터 물에서 30 mL 용리물). 단백질 농도는 BCA 분석법(Pierce)으로 측정하였다. 하이드로포빈 용액을 액체 질소에서 급속 냉동시키고 동결건조하였다. 본 발명의 용도를 위해 200 ㎍/mL 단백질을 함유하는 하이드로포빈 수용액을 사용한다.
지시 염료를 이용한 캡슐의 충전
누출 실험을 셋팅하기 위해, 용적이 0.68 ㎤인 젤라틴 캡슐(Capsulae operculatae Nr. 0, Pharmapol GmbH, D-25578 Daegeling)을 지시 염료 브로모페놀 블루로 충전시켰다. 캡슐을 동일 중량 비율의 만니톨, 탄산수소나트륨, 트리나트륨 시트레이트 데히드로게네이트 및 수용성 브로모페놀 블루로 충전하고 캡슐의 상단과 하단부를 단단히 연결하여 밀봉하였다. 캡슐로부터의 비특이적 누출을 피하기 위해, 연결부를 밀봉하였다.
하이드로포빈을 이용한 캡슐의 코팅
충전 및 밀봉된 캡슐을 수중 200 ㎍/mL SC의 용액으로 시판되는 분무기를 이용해 분무하였다. 대조군 실험을 위해, 캡슐을 0.002% w/v 나트륨 도데실 설페이트(SDS)와 수중 200 ㎍/mL BSA 또는 0.002% w/v SDS를 함유하는 물만으로 분무하였다.
알기네이트 및 하이드로포빈으로 구성된 생중합체를 이용한 캡슐의 코팅
충전 및 밀봉된 캡슐을 10초간 200 ㎍/mL 하이드로포빈을 함유하는 2% w/v 알기네이트(E400) 용액에 침수시켰다. 대조군 실험용으로, 캡슐을 0.002% w/v SDS가 함유된 200 ㎍/mL BSA의 용액에 침수시킨다. 알기네이트의 가교는 0.1 M CaCl2에 후속 침수시켜 수행한다. 이후, 캡슐을 실온에서 건조한다.
방출성의 평가
상이한 표면 처리 후 캡슐로부터 염료의 방출을 검사하기 위해, 위의 산성 환경을 모방하도록 pH 1.0에 상응하는 50 mL의 0.1 M HCl에 캡슐을 침수시킨다. 제2 셋업에서, 0.4 U/mL 펩신을 0.1 M HCl에 부가하여 위액내 전형적인 효소에 대한 내성을 검사한다. 방출 정량화는 함침조내 용액의 상이한 면적을 컴퓨터 보조 광학 평가하여 임의의 발광 단위를 얻어 수행하였다.
정제의 코팅
동종요법 Traumeel®S 정제(Heel GmbH, Baden Baden, Germany)를 코팅 실험용으로 사용한다. 이들 정제는 고도로 가용성이고 락토스 1수화물 및 스테아르산마그네슘을 주성분으로 제제화된다. 정제를 각각 200 ㎍/mL SC, TT, 또는 대조군으로서 BSA를 포함하는 2% 알기네이트 용액에 함침시킨다. 다음으로, 정제를 바로 0.1 M CaCl2 용액에 함침시키고 실온에서 건조한다. 용해 검사를 위해, 정제를 실온에서 50 mL 0.1 M HCl에 함침시킨다.
실시예 1: 하이드로포빈 코팅 존재 또는 부재의 젤라틴 캡슐로부터의 방출
각각 하이드로포빈 또는 대조군으로서 물을 분무하여 코팅된 캡슐로부터의 염료 방출을, 위 조건을 모방한 산성 환경에서 분석한다. 함침조에 함유된 염료의 양을 광학 평가로 측정하여 임의의 발광 단위로 제공한다.
도 1a에 도시한 바와 같이, 하이드로포빈 SC를 이용한 젤라틴 캡슐의 코팅은 관찰 간격 동안(2시간) 산성 환경 하에서 캡슐 내에 염료를 장기간 체류시켰다. 동일하게 이로운 방출 특징이, 위액 조성물을 함침조의 액체에 0.4 U/mL 펩신을 부가하여 모의실험한 경우에 관찰되었다(도 1b).
결과: 도 1에 도시한 분석은 하이드로포빈을 분무한 젤라틴 캡슐의 표면 처리가 지연적인 약물 방출을 획득하기 위한 가능한 용도와 관련하여 유리한 방식으로 이 약학 제형의 특징을 개질시키는데 적합한 방법임을 보여준다.
실시예 2: 하이드로포빈의 혼합물이 존재 또는 부재하고, 알기네이트로 코팅된 젤라틴 캡슐로부터의 방출
상기 기술한 바와 같이 하이드로포빈 SC를 준비하고 젤라틴 캡슐을 지시 염료로 충전한다. 충전되고 밀봉한 캡슐을 200 ㎍/mL 하이드로포빈을 함유하는 2% w/v 알기네이트(E400) 용액에 침수하였다. 대조군 실험용으로, 캡슐을 0.002% w/v SDS를 함유하는 200 ㎍/mL BAS 용액에 침수시킨다.
도 2a에 도시한 분석에서 관찰할 수 있는 바와 같이, 하이드로포빈의 혼합물과 알기네이트로 구성된 중합체로 처리된 캡슐의 산성 조건에 대한 내산성은 표면 처리를 위해 하이드로포빈을 분무한 젤라틴 캡슐의 내산성에 필적한다(도 1a). 도 2b는 알기네이트/하이드로포빈-생중합체로 처리된 캡슐의 지연 방출 특징이, 위액 내 전형적인 효소에 대한 내성을 검사하기 위해 0.1 M HCl(pH 1.0)을 함유하는 함침 조의 액체에 0.4 U/mL 펩신을 부가한 경우에도 실질적으로 동일함을 보여준다. 대조적으로, BSA에 침수된 대조군 캡슐은 펩신없이 함침조에서 관찰되는 것보다 더 빠르게 투과성이 되었다.
결과: 알기네이트의 용액에 하이드로포빈의 혼합은, 캡슐의 침수 이후, 하이드로포빈을 분무하여 획득되는 것(실시예 1)과 유사한 특성이 부여된 중합체 용액을 생성시킨다.
실시예 3: 산성, 중성 및 염기성 환경에서 3종의 상이한 하이드로포빈 및 알기네이트의 혼합물로 구성된 생중합체로 코팅된 젤라틴 캡슐로부터의 방출
3종의 하이드로포빈을 사용하여 알키네이트 코팅된 젤라틴 캡슐의 방출 동역학의 조정이 상이한 하이드로포빈을 이용해 획득되는지 여부를 검사한다. SC는 상기 추가로 기술된 바와 같이 준비한다. 2종의 부가적인 하이드로포빈은 SC에 대해 기술한 바와 유사한 절차로 재조합적으로 생산한다. TT는 탈라로마이세스 써모필러스로부터 유래한 것이고 PO는 플레우로투스 오스트레아투스에서 유래한 것이다. 실시예 1 및 2에 기술한 바와 같이, 캡슐을 지시 염료로 충전하고, 밀봉한 후 각각 SC, TT 또는 PO와 알기네이트의 혼합물에 함침시킨다. 대조군으로서, 알기네이트와 BSA의 혼합물을 사용한다. 모든 단백질(하이드로포빈 및 BSA)은 200 ㎍/mL(w/v) 농도로 사용한다.
위와 장의 환경을 모의하기 위해, 방출 분석용 캡슐을 침수하기 전에 각각 산성(pH 1.0, 도 3a) 또는 염기성(pH 12.0, 도 3c) 조건으로 조정한다. 비교를 위해 중성 pH도 분석한다(도 3b).
결과: 각각의 하이드로포빈은, 개질된 알기네이트로 코팅된 캡슐을 비슷한 방식으로 중성 및 산성 환경에 대해 내성이 되게 하였다. 캡슐의 보전성은 중성 환경보다 산성 환경에서 보다 긴 시간 간격 동안 유지되었다. 대조군 캡슐은 하이드로포빈 처리된 캡슐과 비교하여 보다 빠르게 염료 방출이 개시되는 것으로 나타났다. 강염기성 pH의 함침조에서, 염료 방출 개시는 중성과 산성 환경과 비교하여 모든 캡슐(하이드로포빈 및 대조군)에서 상당히 일찍 관찰된다. 위액에 대한 높은 내성은 특히 SC 및 TT를 이용한 경우에 획득되었다. 도 3c에서 관찰할 수 있는 바와 같이, TT는 다른 하이드로포빈보다 캡슐이 염기성 환경에 대해 보다 더 내성이도록 하였으며, 이는 지연 약물 방출성을 갖는 좌제의 제조에 유용할 수 있다. 모든 3종의 하이드로포빈은 상이한 환경에서 캡슐의 누출 특성을 변화시킨다.
실시예 4: 2종의 상이한 하이드로포빈 및 알기네이트의 혼합물로 구성된 생중합체를 이용한 정제 및 환약의 코팅
Traumeel®S (Heel) 정제를 하이드로포빈으로 코팅하였고, pH 1.0의 산성 환경에 대한 내성을 용해 분석으로 검사한다. Traumeel®S 정제를 각각 200 ㎍/mL의 TT, PO, TR 또는 SC를 함유하는, 2% 알기네이트의 용액에 침수시킨다. 대조군으로서, 200 ㎍/mL BSA 및 0.002% SDS를 함유하는 알기네이트 용액을 사용한다. 단기 침수 이후, 알기네이트 코팅된 정제를 0.1M CaCl2에서 중합시키고 밤새 대기 온도에서 건조시켰다.
용해 검사를 위한 항온반응은 대기 온도에서 0.1M HCl 중에 10 내지 120분간 실시한다. 결과: 하이드로포빈의 혼합물과 알기네이트로 구성된 생중합체로 정제를 코팅하여 약학 조성물의 지속 방출에 대해 이로운 특성을 얻었다. pH 1에서 260분간 항온반응 후, 알기네이트/하이드로포빈 생중합체로 코팅된 정제의 장기간 보전성이 분명하게 관찰되었고, 코팅된 정제의 용해에 대한 내성면에서 클래스 I 하이드로포빈 SC, TT 및 PO가 클래스 II 하이드로포빈 TR보다 우수하다(도 5a).
실시예 5: 하이드로포빈에 의한 매트릭스 형성 및 젤라틴의 높은 안정성
젤라틴(염색된 적색, RUF(Quakenbruek, Germany)에서 구매)을 물 또는 SC-용액(최종 농도 200 ㎍/mL)에 가용화시킨다. 500 ㎕의 가용화된 젤라틴을 6웰 미세평판의 각 웰에 부가한다. 젤라틴을 밤새 50℃에서 건조시킨다. 다음으로, 각각, 500 ㎕의 H2O, 0.1 N HCl 또는 0.1 N HCl과 0.4 U/mL 펩신을 웰에 부가한다. 웰의 광학 평가 결과를 도 5b에 도시하였다.
결과: 하이드로포빈 없이, 젤라틴은 완전하게 용해된 반면, SC3은 젤라틴의 용해를 억제한다. 유사한 결과가 POH3 및 TT1에 대해서도 관찰되었다(결과는 도시하지 않음). 결과는 수중 생중합체 젤라틴의 용해가 강력하게 방해받고 또한 위액을 모방한 환경에서 용해가 감소됨을 보여준다. 하이드로포빈과 젤라틴은 매트릭스 유사 구조를 형성하는 것으로 나타났다(도 5b).
결론:
예를 들어-1 이상의 하이드로포빈의 혼합물과 알기네이트 및/또는 젤라틴으로 구성된 생중합체 또는 하이드로포빈 용액과 표본을 접촉시킨 후, 약학 목적으로 사용되는 이 표본의 보전성을 조사하기 위해 상이한 클래스 I 및 II 하이드로포빈을 사용하였다. 생약 부형제로서 하이드로포빈의 사용에 의해 유리한 방식으로 약학 제형의 특징을 조정할 수 있음이 놀랍게도 본 발명에서 발견되었다. BSA와의 혼합물로서 또는 알기네이트 단독으로 코팅한 것과 비교하여, 본 발명에서 사용되는 클래스 I 하이드로포빈을 표본과 접촉시켜, 약학 제형(예를 들어 캡슐 및 정제)이 위액에 대해 더 강건해졌다. 알기네이트 용액에 하이드로포빈의 혼합은, 캡슐을 침수 후, 분무에 의해 하이드로포빈을 코팅하여 획득되는 것과 유사한 특성을 부여하는 생중합체 용액이 얻어졌고, 표면 처리 및 약학적으로 허용되는 중합체 또는 담체의 개질 둘 모두는 본 발명에 따른 생약 부형제로서 하이드로포빈의 강력한 용도임을 보여주었다. 또한 실시예를 통해서, 상이한 하이드로포빈의 뚜렷한 특징이 산성, 중성 및 염기성 pH 환경에서 발생되어, 적절한 하이드로포빈의 선택에 의해 원하는 약물 방출 특징의 생약형 제조가 가능함을 보여주었다.
따라서 본 발명은 안정성-즉, 내붕해성, 매트릭스 형성, pH 의존성 및 약물 방출 동역학 관점에서 생약형의 조정을 위한 수단을 제공한다. 비제한적인 예에 따라, 본 발명은 약학 조성물의 적용 경로에 따라 신체를 통과하는 동안 약물의 원하는 방출 특징을 획득하기 위한 생약형의 제조를 위한 어플리케이션을 제공한다. 하이드로포빈은 약학적으로 관련된 중합체를 안정화시키거나 또는 예를 들어 개선된 매트릭스 정제의 제조를 위해, 중합성 화합물과의 매트릭스를 생성시키는데 강력하게 사용될 수 있다.

Claims (14)

  1. 생체내, 특히 위 및/또는 장에서의 방출 특징이 조정된 의약의 고체 투약형(application form)을 제조하는 방법으로서, 하이드로포빈에서 선택된 표면 활성 단백질을 상기 투약형에 도입하거나, 또는 상기 투약형을 상기 표면 활성 단백질로 코팅하는 것을 포함하는 제조 방법.
  2. 의약의 고체 투약형을 포함하는 약학 조성물로서, 하이드로포빈에서 선택된 표면 활성 단백질을, 특히 투약형의 외면 상의 코팅부에 함유하거나, 또는 투약형의 외면을 형성하는 매트릭스재에 도입하여 함유하는 것을 특징으로 하는 약학 조성물.
  3. 생체내, 특히 위 및/또는 장에서 고체 투약형으로부터의 약물 방출 특징을 조정하기 위한, 약물 제조에서의 하이드로포빈에서 선택된 표면 활성 단백질의 용도.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 하나의 항에 있어서, 표면 활성 단백질은 이의 1 중량% 수성 용액 또는 분산액이 폴리프로필렌 표면 상의 접촉각을 순수에 대해 20°또는 그 이상 감소시키는 것을 특징으로 하는 제조 방법 또는 약학 조성물 또는 용도.
  5. 제4항에 있어서, 표면 활성 단백질은 클래스 II 하이드로포빈 또는 특히 클래스 I 하이드로포빈인 제조 방법, 약학 조성물 또는 용도.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 하나의 항에 있어서, 고체 투약형은 캡슐, 다중 캡슐, 환약, 정제, 매트릭스 정제, 다층 정제, 코팅 정제, 미세과립, 좌제, 임플란트에서 선택되는 것인 제조 방법, 약학 조성물 또는 용도.
  7. 제6항에 있어서, 고체 투약형은, 표면 활성 단백질을 코팅 형태로 함유하거나, 또는 투약형의 외면을 형성하는 매트릭스에 도입하여 함유하는, 캡슐, 다중 캡슐, 환약, 정제, 매트릭스 정제, 다층 정제, 미세과립 및 좌제에서 선택되는 것인 치료 방법, 약학 조성물 또는 용도.
  8. 제1항 내지 제7항 중 어느 하나의 항에 있어서, 고체 투약형은 특히 추가의 표면 활성제, 결합제, 생중합체, 유동성 보조제, 윤활제, 소화관에서 정제의 분해를 확보하기 위한 붕해제; 감미제; 향미제; 착색제에서 선택되는, 1 이상의 추가의 약학적으로 허용되는 성분을 더 포함하는 것인 치료 방법, 약학 조성물 또는 용도.
  9. 제1항 내지 제8항 중 어느 하나의 항에 있어서, 투약형은 화학적 작용 예컨대 가수분해 및 효소 공격을 통해, 또는 물리적 작용 예컨대 침식 및 확산 작용을 통해, 생체내, 특히 위 및/또는 장에서 활성 성분을 방출하는 것인 치료 방법, 약학 조성물 또는 용도.
  10. 제1항 내지 제9항 중 어느 하나의 항에 있어서, 방출 특징의 조정은 지연 방출을 포함하는 것인 치료 방법 또는 용도.
  11. 장용제로서의, 제1항 내지 제10항 중 어느 하나의 항에 따른 표면 활성 단백질의 용도.
  12. 위의 위액 및/또는 장의 알칼리 환경에 의한 화학적 분해로부터 활성 성분(들)을 보호하기 위한 의약의 고체 투약형의 제조에서의, 특히 제4항 또는 제5항에 정의된 바와 같은 표면 활성 단백질의 용도.
  13. 제1항 내지 제10항 중 어느 하나의 항에 정의된 바와 같은 의약의 고체 투약형을 제조하는 방법으로서, 표면 활성 단백질의 수성 용액 또는 분산액이 최종 고체 투약형의 그램 당 0.001∼1000 ㎍의 양으로, 고체 투약형 상에 코팅되거나 또는 상기 고체 투약형에 도입되는 것인 제조 방법.
  14. 제1항 내지 제10항 또는 제13항 중 어느 하나의 항에 정의된 바와 같은 의약의 고체 투약형을 제조하는 방법으로서, 표면 활성 단백질은, 표면 활성 단백질의 농도가 0.01∼10.0 ㎎/㎖인 수성 용액으로서 코팅되거나 또는 도입되는 것인 제조 방법.
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Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI20095638A0 (fi) * 2009-06-09 2009-06-09 Valtion Teknillinen Hydrofobiineja aktiivisten aineiden dispergointiin
EP2631296A1 (en) 2012-02-22 2013-08-28 Kimmo Koivu A method for hydrophobin production in plants and methods to produce hydrophobin multimers in plants and microbes
EP2724670B1 (en) * 2012-10-26 2015-06-17 Pekka Kankfelt Detecting altered pH levels of rumens
ES2646037T3 (es) 2012-12-28 2017-12-11 Avery Dennison Corporation Composiciones de acabado, sustratos recubiertos y métodos relacionados
EP3080145B1 (en) 2013-12-03 2019-07-17 Teknologian Tutkimuskeskus VTT OY A method for increasing product stability with hydrophobin variants
EP3082428A4 (en) 2013-12-09 2017-08-02 Respira Therapeutics, Inc. Pde5 inhibitor powder formulations and methods relating thereto

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
LU86077A1 (fr) 1985-09-18 1987-04-02 Pharlyse Sa Nouvelles formes galeniques du verapamil,leur fabrication et medicaments contenant ces nouvelles formes galeniques
DE4112464A1 (de) 1991-04-17 1992-10-22 Henkel Kgaa Verbesserte retard-systeme fuer die zeitverzoegerte freigabe medizinischer und/oder biologischer wertstoffe aus einem depot-traegermaterial
US5407686A (en) 1991-11-27 1995-04-18 Sidmak Laboratories, Inc. Sustained release composition for oral administration of active ingredient
WO1996041882A1 (en) 1995-06-12 1996-12-27 Proefstation Voor De Champignoncultuur Hydrophobins from edible fungi, genes, nucleotide sequences and dna-fragments encoding for said hydrophobins, and expression thereof
DE19640062B4 (de) 1996-09-28 2006-04-27 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Orale Zubereitung, enthaltend in einer in wässrigem Medium quellbaren Matrix wenigstens einen pharmazeutischen Wirkstoff
US20070092563A1 (en) 1996-10-01 2007-04-26 Abraxis Bioscience, Inc. Novel formulations of pharmacological agents, methods for the preparation thereof and methods for the use thereof
FR2775188B1 (fr) 1998-02-23 2001-03-09 Lipha Forme galenique a liberation immediate ou liberation prolongee administrable par voie orale comprenant un agent promoteur d'absorption et utilisation de cet agent promoteur d'absorption
EP1178786A4 (en) * 1999-05-21 2006-03-01 American Bioscience Inc PHARMACOLOGICALLY ACTIVE PROTEIN STABILIZING AGENTS; METHODS OF MANUFACTURE AND METHODS OF USE
GB0002660D0 (en) 2000-02-04 2000-03-29 Biomade B V Method of stabilizing a hydrophobin-containing solution and a method of coatinga surface with a hydrophobin
FR2833490B1 (fr) 2001-12-14 2004-12-10 Oreal Utilisition cosmetique d'au moins une hydrophobine pour le traitement des matieres keratiniques et compositions mises en oeuvre
EP1350507A1 (en) 2002-04-04 2003-10-08 Applied NanoSystems B.V. Delivery of a substance to a pre-determinated site
ATE315579T1 (de) 2002-06-21 2006-02-15 Applied Nanosystems Bv Verfahren zur bindung einer verbindung an eine oberfläche
GB0300427D0 (en) 2003-01-09 2003-02-05 Univ Strathclyde Pharmaceutical composition
WO2005068087A2 (en) * 2004-01-16 2005-07-28 Applied Nanosystems B.V. Method for coating an object with hydrophobin at low temperatures
GB0416694D0 (en) 2004-07-27 2004-09-01 Univ Strathclyde Process for preparing microcrystals
US7147912B2 (en) * 2004-08-18 2006-12-12 E. I. Du Pont De Nemours And Company Amphipathic proteinaceous coating on nanoporous polymer
EP1868698A1 (de) 2005-04-01 2007-12-26 Basf Aktiengesellschaft Verwendung von proteinen als demulgatoren
DE102005029704A1 (de) 2005-06-24 2007-01-11 Basf Ag Verwendung von Hydrophobin-Polypeptiden sowie Konjugaten aus Hydrophobin-Polypeptiden mit Wirk-oder Effektstoffen und ihre Herstellung sowie deren Einsatz in der Kosmetik
DE102005033002A1 (de) 2005-07-14 2007-01-18 Basf Ag Wässrige Monomeremulsionen enthaltend Hydrophobin
EP2120894A1 (en) 2006-10-25 2009-11-25 Universidade de Coimbra Oral submicron particle delivery system for proteins and process for its production
CA2687490A1 (en) 2007-05-24 2008-11-27 Basf Se Use of hydrophobins as auxiliaries in the crystallization of solids
CN101842118B (zh) 2007-09-13 2012-08-08 巴斯夫欧洲公司 疏水蛋白多肽作为渗透增强剂的用途
US20110159050A1 (en) 2008-07-11 2011-06-30 Basf Se Amphiphilic proteins as morphology modifiers
FI20095638A0 (fi) * 2009-06-09 2009-06-09 Valtion Teknillinen Hydrofobiineja aktiivisten aineiden dispergointiin

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Publication number Publication date
US20110268792A1 (en) 2011-11-03
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EP2370060A2 (en) 2011-10-05
US8226967B2 (en) 2012-07-24
ZA201104614B (en) 2012-09-26
CA2750421C (en) 2016-10-18
WO2010060811A2 (en) 2010-06-03
CA2750421A1 (en) 2010-06-03

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