KR20080065662A

KR20080065662A - Ｘａ 인자 억제제의 신규한 약제학적 염 및 다형체

Info

Publication number: KR20080065662A
Application number: KR1020087011799A
Authority: KR
Inventors: 크레이그 그랜트; 제임스 피 캔터; 그레이미 랑랜즈
Original assignee: 밀레니엄 파머슈티컬스 인코퍼레이티드
Priority date: 2005-11-08
Filing date: 2006-11-07
Publication date: 2008-07-14
Also published as: AU2006311544B2; TWI443088B; AR106960A2; AR056787A1; EP1948608B1; US20190046510A1; CN102336702B; AU2006311544A1; US20130064806A1; NZ592533A; US7598276B2; IL190524A; ATE549317T1; BRPI0618362A2; TW200736221A; CA2627086C; CN102336702A; CN101304971A; US20140288028A1; IL190524A0

Abstract

본 발명은 포유류 Xa 인자에 대항하는 활성을 지닌 화학식 I 의 화합물 및 산을 포함하는 염에 대해 개시한다. 본 발명은 또한 화학식 I 의 화합물의 제조 방법에 관한 것이다.

Description

Ｘａ 인자 억제제의 신규한 약제학적 염 및 다형체{NOVEL PHARMACEUTICAL SALTS AND POLYMORPHS OF A FACTOR XA INHIBITOR}

관련 출원과의 상호 참조

본 출원은 35 U.S.C.§119(e)하에서, 본원에서 그 전체가 참조인용된, 2005년 11월 8일에 출원한 미국 가출원 일련번호 제 60/735,224 호에 의해 이익을 주장한다.

배경기술

기술분야

본 발명은 신규한 Xa 인자 억제제의 염, 그의 다형체(polymorph) 및 Xa 인자 억제제를 제조하는 방법에 관한 것이다.

기술의 설명

출혈을 조절하는 것, 지혈은 수술적 수단 또는 혈관 수축 및 응고의 생리학적 특성에 의해서 발생한다. 본 발명은 특히 혈액 응고, 및 이것이 상해, 염증, 질환, 선천성 기형, 기능 장애, 또는 기타 붕괴 후에 포유류의 순환의 무결성을 유지하는 것을 보조하는 방법에 관한 것이다. 혈소판 및 혈액 응고 모두가 지혈의 복구 및 혈전 질환에 관여하고 있지만, 응고 캐스캐이드의 특정한 구성요소가 혈전 질환 및 지혈의 주요한 사건인 혈소판 응집 및 피브린 침착과 연관된 과정 의 증폭 및 촉진에 우선적인 책임이 있다.

응괴 형성은 피브리노겐의, 상해 후의 지혈을 복원하기 위해 네트워크로 중합되는 피브린으로의 전환에 관여한다. 혈전 질환에서의 잠혈 혈관에서 유사한 과정이 일어난다. 피브리노겐의 피브린으로의 전환은 혈액 응고 캐스캐이드의 일련 반응의 최종 생성물인 트롬빈에 의해 촉진된다. 트롬빈은 또한 혈소판을 활성화하는 핵심 요소이며, 이에 따라, 동맥 및 정맥 양자 모두의 혈류의 조건에 따라 혈전증에 기여한다. 상기 원인으로 인해, 트롬빈의 효율적인 조절이 혈전증의 효율적인 조절로 이어질 수 있다는 주장이 있어왔다. 최근에 사용된 몇몇의 항응고제군(즉, 비분절 헤파린, 저분자량 헤파린, 유사-헤파린 화합물, 펜타사카라이드 및 와파린)은 트롬빈에 직접 또는 간접적으로 영향을 미친다. 트롬빈 활성의 직접 또는 간접적인 억제도 또한 임상 개발에서 다양한 항응고제의 초점이 되어왔다(Eriksson 및 Quinlan의 논평, Drugs 11:1411-1429, 2006).

트롬빈의 전구체인 프로트롬빈은 Xa 인자에 의해 활성화 효소로 전환된다. 조직 인자/VIIa 인자 매개 Xa 인자 생성의 국소화된 활성은 IXa 인자/VIIIa 인자 복합체에 의해 증폭되고, 활성화된 혈소판 위의 프로트롬빈분해효소 집합체를 도모한다. 프로트롬빈분해효소 복합체의 한 부분으로서, Xa 인자는 맥관계에서 지속적인 트롬빈 형성의 원인이 되는 유일한 효소이다. Xa 인자는 그것의 전구체인 X 인자의 활성화된 형태로, 세린 단백질분해효소이고, 칼슘 이온 결합, 감마 카르복시글루탐산(GLA)-함유, 비타민 K 의존성 및 혈액 응고 인자의 한 요소이다. 피브리노겐 및 PAR 수용체(단백질분해효소 활성화 수용체, Coughlin, J. Thrombosis Haemostais 3: 1800-1814, 2005)를 포함하는 다양한 단백질 기질에 작용하는 트롬빈과는 다르게, Xa 인자는 단일한 생리학적 기질, 즉 프로트롬빈을 갖는 것으로 보인다. Xa 인자 한 분자가 1000개 분자를 초과하는 트롬빈을 생성할 수 있기 때문에(Mann, 등, J. Thrombosis . Haemostasis 1: 1504-1514, 2003), 트롬빈 형성을 간접적으로 억제하는 방법으로서 Xa 인자를 직접적으로 억제하는 것이 효율적인 항응고 전략이 될 수 있다. 상기 주장은 트롬빈 합성에서 프로트롬빈분해효소가 핵심적인 역할을 하며, 프로트롬빈분해효소의 억제가 혈소판 응집 및 응고 경로 전체에 명백하게 영향을 미칠 것이라는 것에 기반한 것이다.

VIIa 인자, IXa 인자 또는 Xa 인자와 같은 활성화된 단백질분해효소에 대해서, 그들 독자적으로는 불량한 단백질 분해 활성을 지닌다. 그러나, 보조인자-의존성, 막-결합 복합체 내부로 되는 그들의 집합체는 이들의 촉매 효율을 상당히 향상시킨다. 상기 효과는 효율성이 10⁵만큼 증가하는 Xa 인자에서 가장 두드러진다(Mann, 등, Blood 76(1):1-16,1990). 혈액 내에 존재하는 효소원의 더 높은 농도(프로트롬빈 1.4 μM 대 Xa 인자 150 nM) 및 활성 역동학 때문에, 항응고 효과를 달성하기 위해 트롬빈보다 더 적은 양의 Xa 인자를 억제해야 한다. 트롬빈과 비교할 때 치료 타겟으로서의 Xa 인자의 우월성에 대한 가설의 간접적인 증거는 또한 깊은 정맥 혈전증의 예방에 관한 임상학적 실험에서 찾을 수 있다. 항트롬빈 III 의존성 Xa 인자 억제제인 폰다파리녹스(fondaparinux)는 에녹사파린(enoxaparin)(트롬빈과 Xa 인자 모두를 억제하는 저분자량 헤파린)보다 뛰어나다 는 것이 4번의 정형외과 수술에 의해서 증명되었다(Turpie, 등, Archives Internal Medicine 162(16):1833-1840, 2002). 그러므로, Xa 인자를 선택적으로 억제하는 화합물이 체외 진단약으로서 또는 특정한 혈전 장애의 치료용 투여에 유용할 수 있다는 것이 제안되었다(예를 들어, WO 94/13693 참조).

몇몇의 Xa 인자 억제제는 흡혈 생물에서 유래한 폴리펩타이드임과 동시에, 거대 폴리펩타이드-타입 억제제가 아닌 화합물로 보고되었다. 추가적인 Xa 인자 억제제는 아미디노 치환기를 갖는 질소 함유 헤테로시클릭 화합물과 같은 작은 분자의 유기 화합물을 포함하며, 여기서, 상기 화합물의 두 개의 작용기는 Xa 인자의 두 개의 활성 부위에서 Xa 인자에 결합할 수 있다. 예를 들어, WO 98/28269에서는 말단 아미디노(-C(=NH)-NH₂)기를 갖는 피라졸 화합물을 개시하며; WO 97/21437은 직쇄 또는 분지쇄인 알킬렌 -C(=O)- 또는 다리 원자단 -S(=O)₂-을 통해 나프틸 기에 연결된 염기성 라디칼로 치환된 벤즈이미다졸 화합물을 개시하고; WO 99/10316은 카복스아마이드알킬렌아미노 다리를 통해 3-아미디노페닐기에 연결된 4-페닐-N-알킬아미디노-피페리딘 및 4-페녹시-N-알킬아미디노-피페리딘기를 갖는 화합물을 개시하며; EP 798295는 치환되거나 또는 치환되지 않은 설폰아마이드 또는 카복스아마이드 다리 원자단을 통해 아미디노나프틸기에 연결된 4-페녹시-N-알킬아미디노-피페리딘기를 갖는 화합물을 개시한다.

추가적으로 알려진 Xa 인자 억제제는 아마이드 연결체를 통해 연결된 페닐-아미디노, 페닐, 및 할로-페닐을 포함하는 구조를 갖는 것들을 포함한다(미국 특허 제 6,844,367 B1 호). 기타의 Xa 인자 억제제는 할로-페닐을 할로-피리딜로 교환하였다(미국 특허 제 6,376,515 B2 호 및 제 6,835,739 B2 호 참조). 미국 특허 제 6,376,515 B2 호는, 실시예 206에 동정했고 미국 특허 제 6,835,739 B2 호에 또한 실시예 206으로 개시했고, 본원에서 화학식 I 의 화합물로 동정한 특정한 Xa 인자 억제제 화합물을 개시한다. 화학식 I 의 화합물은 다음 구조로 나타낸다:

Xa 인자의 선택적인 억제제를 개발하는 추가적인 연구는 상기 화합물의 특정한 염이 유리-염기성 화합물 그 자신 또는 기타 염보다 더 나은 열적 및 가수분해 안정성을 나타내며, 그와 함께 말레에이트 염이 가장 뛰어난 안정성을 갖는다는 것이 관찰되는 놀라운 발견을 이끌어냈다.

발명의 개요

하나의 구현예에서, 본 발명은 하기 화학식 I 의 화합물, 및 염산, 젖산, 말레산(maleic acid), 페녹시아세트산, 프로피온산, 숙신산, 아디프산, 아스코르브산, 캄파산(camphoric acid), 글루콘산, 인산, 타르타르산, 시트르산, 메탄 설폰 산, 푸마르산, 글리콜산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 겐티스산 및 벤젠설폰산으로 이루어진 군으로부터 선택된 산을 포함하는 염에 관한 것이다.

바람직한 구현예에서, 산은 염산, 젖산, 말레산, 페녹시아세트산, 프로피온산, 숙신산, 아디프산, 아스코르브산, 캄파산, 글루콘산, 인산, 타르타르산, 시트르산 및 메탄설폰산으로 이루어진 군으로부터 선택된 것이다.

또 다른 바람직한 구현예에서, 산은 염산, 젖산, 말레산, 페녹시아세트산, 프로피온산 및 숙신산으로 이루어진 군으로부터 선택된 것이다. 하나의 구현예에서, 염은 말레에이트 염 또는 프로피오네이트 염이다. 화학식 I 화합물의 말레에이트 염을 화학식 I 화합물의 하나 또는 그 이상의 질소 원자를 양자화하여 생성할 수 있다는 것이 예상된다. 하나의 구현예에서, 화학식 I의 아미디노 질소(=NH)는 양자화되어, 염을 형성한다(=NH₂ ⁺).

하나의 바람직한 구현예에서, 화학식 I 화합물의 말레에이트 염은 하기 화학식 II 로 나타낸다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 결정성 다형체 형태를 지닌 화학식 II 의 염을 제시한다. 바람직한 구현예에서, 결정성 다형체 형태는 하기의 대략적인 특징적 피크의 위치 중 4개 이상, 더욱 바람직하게는 8개를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 나타낸다: 2θ에서 4.9, 9.7, 13.8, 14.1, 15.2, 17.6, 18.5, 20.8, 21.6, 22.7, 24.1, 26.3, 26.8°이다. 나아가, 또 다른 구현예에서, X선 분말 회절 패턴은 2θ에서 4.9, 9.7, 11.8, 13.8, 14.1, 15.2, 17.6, 18.5, 19.9, 20.8, 21.6, 22.7, 24.1, 25.0, 26.3, 26.8°의 대략적인 특징적 피크의 위치를 갖는다. 본 발명에서는 대략적인 특징적 피크가 2θ에서 약 ±0.2°이하의 편차를 가질 것으로 예상된다. 게다가, 또 다른 구현예에서, X선 분말 회절 패턴은 도 1 에 나타낸 X선 분말 회절 패턴과 유사하다. 기타의 구현예에서, 본 발명은 도 2 에 나타낸 시차 주사 열량계 패턴과 근사한 시차 주사 열량계 패턴을 나타내는 결정성 다형체 형태를 갖는 화학식 II 의 염을 제시한다. 상기의 화학식 II 염의 결정성 다형체는 임상 연구에 적합한 상기 화합물의 재현가능한 형태를 제시한다.

추가적인 구현예에서, 본 발명은 약제학적으로 허용가능한 담체 및 화학식 I 의 화합물, 화학식 I 화합물의 말레에이트 염, 화학식 II 의 염, 또는 결정성 다형체 형태를 지닌 화학식 II 의 염을 포함하는 치료학상 유효량의 염을 포함하는, 포유류의 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상을 예방 또는 치료하는 약제학적 조성물에 대해 제시한다. 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 정제 형태이다. 나아가, 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 캡슐 형태이다. 더 나아가, 또 다른 구현예에서, 약제학적 조성물은 로젠지(lozenge) 형태이다. 기타의 구현예에서, 약제학적 조성물은, 주입, 주사, 또는 경피성 전달에 적합한 형태이다.

몇몇의 구현예에서, 본 발명은 화학식 I 의 화합물, 화학식 I 화합물의 말레에이트 염, 화학식 II 의 염 또는 결정성 다형체를 갖는 화학식 II 의 염을 포함하는 치료학상 유효량의 염을 포유류에 투여하는 방법을 포함하는, 포유류의 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상을 예방 또는 치료하는 방법을 제시한다. 또 다른 구현예에서, 증상은 급성관상동맥증후군, 심근경색증, 불안정형 협심증, 불응성 협심증, 혈전용해 치료 후 또는 관상동맥 형성술 후 발생되는 폐쇄성 관상동맥혈전증, 혈전증에 의해 매개된 뇌혈관 증후군, 색전성 뇌졸중, 혈전성 뇌졸중, 일과성 허혈발작, 정맥 혈전증, 심부정맥 혈전증, 폐색전증, 응고장애, 파종성 혈관내 응고, 혈전성 혈소판 감소성 자반증, 폐색성 혈전 혈관염, 헤파린-유도 저혈소판증 관련 혈전성 질환, 체외 순환 관련 혈전성 합병증, 기구조작 관련 혈전성 질환, 및 보철 장치 부착 관련 혈전성 질환으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 화학식 I 의 화합물, 화학식 I 화합물의 말 레에이트 염, 화학식 II 의 염 또는 결정성 다형체를 갖는 화학식 II 의 염을 포함하는 염과 혈액 샘플을 접촉시키는 단계를 포함하는 혈액 샘플의 응고를 억제하는 방법을 제시한다.

추가적인 구현예에서, 본 발명은 LiN(CH₃)₂를 하기 화학식 III 의 화합물 또는 그의 염과 화학식 I 의 화합물 형성 조건에서 접촉시키는 것을 포함하는 화학식 I 의 화합물을 제조하는 방법을 제시한다.

몇몇의 구현예에서, 조건은 친핵성 첨가 조건이고, 비(非)극성, 비(非)양자성 용매의 사용을 포함한다. 기타 몇몇의 구현예에서 용매는 테트라하이드로푸란, 디에틸에테르, 디메톡시메탄, 디옥산, 헥산, 메틸 tert-부틸 에테르, 헵탄 및 시클로헥산으로 이루어진 군으로부터 선택된 것이다. 몇몇의 구현예에서, 화학식 III 의 화합물의 염은 HCl 염이다.

몇몇의 구현예에서, 본 발명은 화학식 I 의 화합물을 제조하는 방법을 제시하며, 여기서 이 방법은 10 ℃ 미만의 온도에서 수행한다.

추가의 구현예에서, 본 발명은 화학식 I 의 화합물을 제조하는 방법을 제시 하며, 여기서, 화학식 I 을 지닌 화합물은 50 % 이상의 수율로 제공된다. 또 다른 구현예에서, 화학식 I 을 지닌 화합물은 65 % 이상의 수율로 제공된다. 게다가 또 다른 구현예에서, 화학식 I 을 지닌 화합물은 75 % 이상의 수율로 제공된다.

또 다른 구현예에서, 본 발명은 그램 스케일 또는 킬로그램 스케일로 화학식 I 의 화합물을 제조하는 방법을 제시한다.

도면의 간단한 설명

도 1A 및 1B는 화학식 II(말레에이트 염) 형태의 X선 분말 회절(XRPD)을 제시한다. 도 1A는 실측한 회절 패턴을 나타내는 반면, 도 1B는 계산한 회절 패턴을 보여준다.

도 2A 및 2B는 각각 화학식 II 말레에이트 염의 시차 주사 열량계(DSC) 및 열질량 분석(TGA) 자료를 나타낸다.

도 3은 화학식 II의 말레에이트 염의 질량 흡습(GVS) 자료를 나타낸다.

도 4는 이용된 넘버링 방식을 나타낸 결정성 구조 자료로부터 화학식 II 의 말레에이트 염 분자의 두 가지 모습을 나타낸다. 비(非)수소 원자의 이방성 원자의 변위 타원체는 50 %의 확률 수준으로 나타난다. 수소 원자는 임의의 작은 반경으로 개시한다.

발명의 상세한 설명

미국 특허 제 6,376,515 B2 호에서 논한 바와 같이, 화학식 I 의 화합물은 강력한 Xa 인자 억제제이다. 그러나, 화학식 I 의 화합물은 최적의 용해도 또 는 결정화도를 나타내지 않았다. 화학식 I 화합물의 아세테이트 염의 제제는 양호한 결정화도를 보였지만, 양호한 열적 및 가수분해 안정성을 보유하지 않았다. 놀랍고도 예측하지 못했지만, 예로서 하기를 포함하는 특정한 염은 양호한 결정화도와 열적 및 가수분해 안정성을 나타내는 것으로 밝혀졌다; HCl 염, 락테이트, 말레에이트, 페녹시아세테이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 아디페이트, 아스코르베이트, 캄포레이트, 글루코네이트, 포스페이트, 타르타르레이트, 시트레이트, 메실레이트, 푸마레이트, 글리콜레이트, 나프탈렌-1,5-디술포네이트, 겐티세이트 및 벤젠 설포네이트.

특히, 화학식 II 의 말레에이트 염은 뛰어난 결정화도, 열적 및 가수분해 안정성 및 순도를 나타낸다. 본 발명의 화학식 II 말레에이트 염은 포유류의 바람직하지 않은 혈전증 치료에 유용하다.

I. 정의

본원에서 사용된 바와 같이, "다형체"라는 용어는 또 다른 결정형과 구별되지만, 동일한 화학식을 공유하는 물질의 결정형을 의미한다.

"치료법" 또는 "치료"라는 용어는 포유류와 같은 대상의 질환 또는 장애의 임의의 치료법을 의미하고, 다음을 포함한다:

질환 또는 장애를 예방 또는 보호하는 것, 즉, 임상적 징후가 진행하지 않도록 하는 것;

질환 또는 장애를 억제하는 것, 즉, 임상적 징후의 진행을 정지시키거나 억제하는 것; 및/또는

질환 또는 장애를 완화하는 것, 즉, 임상적 징후를 퇴행시키는 것.

본원에서 사용된 바와 같이 "예방"이라는 용어는 그것을 필요로 하는 환자를 예방치료하는 것을 의미한다. 예방치료는 병으로 고통받을 위험에 처한 대상체에게 치료제의 적절한 복용량을 제공하여, 그에 따라 실질적으로 병의 발생을 피함으로써 달성될 수 있다.

결정적으로 반응을 유발하는 사건 또는 그 사건들이 공지되어 있지 않을 수 있거나, 잠복기일 수 있거나, 또는 환자가 사건이나 사건들의 발병 이후 상당 기간까지 확인하지 못하기 때문에, "예방"과 "억제"를 구별하는 것이 항상 가능한 일은 아니라는 것이 인간용 의약의 당업자에게는 자명할 것이다. 그러므로, 본원에서 사용된 것과 같이 "예방요법"이라는 용어는 본원에서 정의된 "예방" 및 "억제" 모두를 포괄하는 "치료법"의 한 요소로 이해된다. "보호"라는 용어는, 본원에서 사용한 바와 같이, "예방요법"을 포함하는 것으로 한다.

"치료학상 유효량" 이라는 용어는 통상적으로 약제학적인 조성물로서 전달되는 본 발명에서의 염의 양으로, 본원에서 정의된 것처럼, 상기 치료법이 필요한 대상체에 주입했을 때, 그것이 치료법에 영향을 줄 만큼 충분한 것을 의미한다. 치료학상 유효량은 치료받는 대상체 및 질환의 증상, 대상체의 중량 및 연령, 질환 증상의 중증도, 선택된 특정한 화합물, 후속하는 용량 요법, 투여의 시기, 투여의 방법 등에 따라서 달라질 것이며, 이들 모두는 당업자에 의해서 용이하게 결정될 수 있다.

본원에서 사용된 바와 같이, "증상"이라는 용어는 본 발명의 화합물, 염, 조 성물 및 방법이 대응하여 사용되고 있는 질환의 상태를 의미한다.

본원에서 사용된 바와 같이, "혈액 샘플"은 대상체로부터 얻어낸 전혈, 또는 혈장 또는 혈청을 포함하는 임의의 혈액 부분을 의미한다.

II . 다형체 화합물

본 발명의 하나의 구현예는 화학식 I 의 화합물을 포함하는 염이다. 당업자는 화학식 I 유리 염기의 기타 염 역시 본 발명에서 유용하다는 것을 인식할 수 있을 것이다. 상기의 기타 염들은 염산, 젖산, 말레산, 페녹시아세트산, 프로피온산, 숙신산, 아디프산, 아스코르브산, 캄파산, 글루콘산, 인산, 타르타르산, 시트르산, 메탄설폰산, 푸마르산, 글리콜산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 겐티스산 및 벤젠설폰산과 같이, 그러나 이에 한정되지 않는, 필수적인 열적 및 가수분해 안정성을 제공하는 무기 또는 유기산을 이용하여 제조한다. 하나의 구현예에서, 화학식 II 의 말레에이트 염은 하기와 같이 나타낸다:

화학식 II 의 염과 같은 본 발명의 염은 몇몇의 다른 결정형을 취할 수 있다. 단일 화합물이 여러 결정형 중 하나를 취할 수 있는 능력을 다형이라 칭한 다. 주어진 화합물의 결정성 다형체는 동일한 원자가 동일한 방법으로 상호 결합되어 있는 점에서 그 화합물의 기타 임의의 결정성 다형체와 화학적으로 동일하지만, 그의 결정형은 다르다. 동일 화합물의 상이한 결정형은 안정성, 용해도, 용융점, 체밀도, 유동성, 생체 내 이용성 등과 같은 하나 이상의 물리적 성질에 영향을 줄 수 있다.

다형체는 그의 결정형 구조(X선 회절 패턴), 그의 열적 물성(DSC 및 TGA에 의해서 측정됨), 안정성, 용해도 등에 의해서 특정될 수 있다. X선 회절 패턴은 특징적인 피크 ±0.2°2θ로 나타낸다. 하나의 화학식 II 염의 다형체는 도 1A 및 1B 에 나타낸 X선 회절 패턴, 도 2A 및 2B 에 나타낸 DSC/TGA 자료 및 도 3에 나타낸 흡습 자료 또는 상기 특징 두 개 또는 전체의 조합으로서 특정된다. 당업자는 기타의 화학식 II 염의 다형체 역시 본 발명에서 유용하다는 것을 인식할 수 있을 것이다.

III . 약제학적 조성물

본 발명의 약제학적 조성물은 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상에 의해 고통받는 대상체를 예방시키거나 또는 치료하는 데에 사용될 수 있다. 본 발명의 약제학적 조성물은 약제학적으로 허용가능한 담체 및 화학식 I 의 화합물, 화학식 I 화합물의 말레에이트 염, 화학식 II 의 염, 또는 결정성 다형체 형태를 갖는 화학식 II 의 염을 포함하는 치료학상 유효량의 염을 포함한다.

A. 약제학적으로 허용가능한 담체

본 발명 염의 진단학적 적용은 통상적으로 용액 또는 현탁물과 같은 제형물 을 이용한다.

혈전 장애의 관리에 있어서 본 발명의 염은 정제, 캡슐, 로젠지 또는 구강 투여를 위한 엘릭시르(elixirs), 좌약, 멸균용액 또는 현탁물 또는 주입가능한 투여 등과 같은 조성물 내에 사용될 수 있거나, 성형품 내 혼입될 수 있다. 치료가 필요한 대상체(통상적으로 포유류 대상체)에 최적의 효능을 제공할 본 발명의 화합물을 적절한 용량으로 투여할 수 있다. 투여의 용량 및 방법은 대상체마다 달라질 것이고, 치료받는 포유류의 종류, 그것의 성별, 체중, 식이, 현재 복용약물, 총체적인 임상학적 증상, 이용된 특정한 염, 이러한 염들이 이용된 특정한 용도, 및 의학계의 당업자가 인지할 수 있는 기타 요소에 좌우될 것이다.

본 발명에서 유용한 캡슐은 Stroud 등, 미국 특허 제 5,735,105 호에 기재된 것과 같이 통상적이고 공지된 캡슐화 기술로 제조할 수 있다. 캡슐은 통상적으로 적절한 용량의 활성제를 함유하는 약제학적인 용액 조성물이 캡슐에 들어맞도록 충분한 지름 및 길이를 갖는 실린더 모양의 빈 껍질이다. 캡슐의 외부는 가소화제, 수분, 젤라틴, 개질된 전분, 고무, 카라니긴 및 그들의 혼합물을 포함할 수 있다. 당업자는 어떠한 조성물이 적합한지 인지할 수 있다.

활성제에 추가하여, 본 발명에서 유용한 정제는 충전제, 결합제, 압축제, 윤활제, 붕해제, 착색제, 물, 탈크 및 당업자에 의해 인지되는 기타 요소를 포함할 수 있다. 정제는 바람직한 방출 프로파일을 파악하기 위해서 다층을 갖거나 또는 중심부에 단일층을 가져 균질할 수 있다. 몇몇의 예에서, 본 발명의 정제는 예를 들어, 장용성 코팅으로 코팅될 수 있다. 당업자는 본 발명의 정제에 기타 의 부형제가 유용하다는 것을 인지할 수 있다.

본 발명에서 유용한 로젠지는 적절한 양의 활성제뿐만 아니라, 임의의 충전제, 결합제, 붕해제, 용매, 가용화제, 감미료, 착색제 및 당업자가 필요하다고 인식하는 기타 임의의 성분을 포함한다. 본 발명의 로젠지는 대상체의 구강에 접촉하면 용해되고 활성제를 방출하도록 되어 있다. 당업자는 본 발명에서 기타의 전달 방법이 유용하다는 것을 인지할 수 있다.

본 발명의 염의 제형물은 생리학적으로 허용가능한 담체, 부형제, 안정화제 등과 함께 요구되는 정도의 순도를 갖는 염을 혼합하여 저장 또는 투여를 위해 제조하며, 서방형 또는 지속 방출(timed-release)형 제형물로 제공될 수 있다. 치료 용도를 위한 허용가능한 담체 또는 희석제는 약제학적 분야에서는 익히 공지되어 있으며, 예를 들어, Remington의 문헌[Pharmaceutical Science, Mack Publishing Co.,(A.R. Gennaro Ed. 1895)]에 기재되어 있다. 이러한 물질은 이용된 용량 및 농도에서 수용자에게 무독성이고, 포스페이트, 시트레이트, 아세테이트 및 기타 유기산 염, 아스코르브산과 같은 항산화제, 폴리아르기닌과 같은 저분자량(약 10개 미만 잔기)의 펩타이드, 세럼 알부민, 젤라틴, 또는 면역글로블린과 같은 단백질, 폴리비닐피롤리디논과 같은 친수성 중합체, 글리신, 글루탐산, 아르파르트산, 또는 아르기닌과 같은 아미노산, 셀룰로오스를 포함하는 모노사카라이드, 디사카라이드 및 기타 탄수화물 또는 그의 유도체, 글루코오스, 만노스 또는 덱스트린, EDTA와 같은 킬레이트제, 만니톨 또는 소르비톨과 같은 당알콜, 나트륨과 같은 반대이온, 및/또는 Tween, Plurinics 또는 폴리에틸렌글리콜과 같은 비이 온성 계면활성제와 같은 버퍼를 포함한다.

치료적 투여로 사용되는 본 발명 염의 투약 제형은 멸균성이어야 한다. 멸균성은 0.2 마이크론 막과 같은 멸균성 막을 통해 여과하거나, 또는 기타의 통상적인 방법에 의해 용이하게 성취될 수 있다. 제형물은 통상적으로 동결건조 형태 또는 수용액의 형태로 저장될 것이다. 본 발명의 제제 pH는 통상적으로 3 내지 11이고, 더 바람직하게는 5 내지 9이며, 가장 바람직하게는 7 내지 8이다. 앞서 언급한 특정한 부형제, 담체 또는 안정화제의 사용이 시클릭 폴리펩타이드 염의 형성을 초래한다는 점은 자명할 것이다. 투여의 바람직한 루트는 주사이지만, 정맥투여(일시 및/또는 주입), 피하투여, 근육투여, 대장 내 투여, 직장 내 투여, 비강 투여 또는 복막 내 투여, 좌약, 이식된 펠렛 또는 소형 실린더, 에어로졸, 구강 복용 제형물(예컨대, 정제, 캡슐 및 로젠지)과 같이 이용된 다양한 복용형태, 및 연고, 물약 및 피부 패치와 같은 국소용 제형물과 같은 기타의 투여 방법도 기대된다. 본 발명의 멸균물은 바람직하게는 생분해성 중합체 또는 합성 실리콘, 예를 들어, 실라스틱(Silastic), 실리콘 고무 또는 시판되고 있는 기타의 중합체와 같은 비활성 물질을 이용할 수 있는 이식체와 같은 성형품 내부로 혼입된다.

본 발명의 염은 또한 소형 단일상 소포체, 대형 단일상 소포체 및 다중상 소포체와 같은 리포솜 전달 시스템의 형태로 투여될 수 있다. 리포솜은 콜레스테롤, 스테아릴아민, 또는 포스파티딜콜린과 같은 다양한 지질로부터 형성될 수 있다.

본 발명의 염은 또한 염 분자가 결합된 항체, 항체 단편, 성장 인자, 호르몬, 또는 기타 표적부를 사용해서 전달될 수도 있다. 본 발명의 염은 또한 표적지향성 약물 담체로서, 적합한 중합체와 결합할 수도 있다. 이러한 중합체는 폴리비닐피롤리디논, 피란 공중합체, 폴리하이드록시-프로필-메타크릴아마이드-페놀, 폴리하이드록시에틸-아스파트아마이드-페놀 또는 팔미토일 잔기로 치환한 폴리에틸렌옥사이드-폴리리신을 포함할 수 있다. 나아가, 본 발명의 염은 방출이 조절되는 약제를 얻어내는데 유용한 생체분해성 중합체 군, 예를 들어, 폴리락트산, 폴리글리콜산, 폴리락트산 및 폴리글리콜산의 공중합체, 폴리엡실론 카프로락톤, 폴리하이드록시 부티르산, 폴리오르토에스테르, 폴리아세탈, 폴리디하이드로피란, 폴리시아노아크릴레이트 및 하이드로겔의 가교결합된 또는 양친매성(amphipathic) 블록 공중합체와 결합할 수 있다. 중합체 및 반투과성 중합체 매트릭스는 판막, 스텐트, 튜빙(tubing), 인공 보철물 등과 같은 성형품으로 형성될 수 있다.

B. 투여

통상적으로, 허용된 약제학적 임상 요구에 따라, 약 0.5 내지 500 mg의 본 발명의 염, 또는 본 발명의 염들의 혼합물은 생리학적으로 허용가능한 비히클, 담체, 부형제, 결합제, 보존제, 안정화제, 염료, 향료 등과 함께 배합된다. 상기 조성물의 활성 성분의 양은 지정된 범위 내에서 적절한 용량이 수득된 것이다.

통상적인 용량은 약 0.001 mg/kg 내지 약 1000 mg/kg, 바람직하게는 약 0.01 mg/kg 내지 약 100 mg/kg, 더 바람직하게는 약 0.10 mg/kg 내지 약 20 mg/kg의 범 위에 있는 것으로 인식된다. 본 발명의 화합물은 하루에 한 번 또는 여러 번 투여될 수 있고, 기타의 투여 방법 또한 유용할 수 있다.

IV . 방법

A. 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 질환 증상의 예방 및 치료

본 발명의 염은 포유류에 화학식 I 화합물의 염, 화학식 I의 화합물의 말레에이트 염, 화학식 II 의 염, 또는 결정성 다형체 형태를 갖는 화학식 II 염의 치료학상 유효량을 투여함으로써, 포유류의 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상의 예방 또는 치료에 사용될 수 있다. 상기 염은 단독 또는 약제학적으로 허용가능한 부형제와 결합하여, 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상의 발병을 예방하기 위해 사용될 수 있다. 예방치료법은 병의 위험이 있는 환자에게 감소된 의학적 치료법 및 이와 연관된 정신적 및 육체적 비용뿐만 아니라 환자 치료의 연장을 방지함으로써 직접적인 금전적 절감과 같은 실질적 이점을 가질 수 있다. 발병을 예방할 만큼 그 증상이 충분히 일찍 발견되지 않은 환자의 경우, 본 발명의 염은 단독으로 또는 약제학적으로 허용가능한 부형제와 함께 사용하여 증상을 치료할 수 있다.

본 발명의 바람직한 염은, 응고 파라미터, 혈소판 및 혈소판의 기능의 종래 기준에 미치는 허용가능한 효과로 혈전 형성을 억제하는 기능 및 적합한 안정도를 나타내는 동안에, 그들의 용도와 관련된 허용가능한 정도의 출혈 합병증을 특징으로 한다. 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상은 동맥 및 정맥 혈관계를 수반하는 증상을 포함한다.

관상 동맥 혈관계에 있어서, 비정상적인 혈전 형성은 급성 심근 경색증, 및 불안정 협심증의 주원인인 확립 죽상경화반의 파열을 특징으로 하며 또한, 이뿐만 아니라, 혈전 용해술 또는 경피적 관동맥 혈관 재건법(PTCA) 모두에 의해 발병하는 폐색성 관상 동맥 혈전증 형성을 특징으로 한다.

정맥 혈관계에 있어서, 비정상적인 혈전 형성은, 영향받는 말단 부위로의 혈류량 감소 및 폐색전증의 소인을 야기하는 정맥 혈관계에서의 혈전 형성으로 자주 고통받는, 하지 또는 말단 부분에 대수술을 받고 있는 환자에게서 나타난다. 비정상적인 혈전 형성은 나아가 패혈증성 쇼크, 특정한 바이러스성 감염 및 암이 나타날 때, 양 혈관계에서 통상적으로 나타나는 파종성 혈관 내 응고장애를 특성화하며, 이는 응고 인자 및 전신 응고의 빠른 소비가 일어나, 치명적인 혈전 형성이 미세혈관에서부터 발생하여 광범위한 장기 부전까지 이어지는 것을 야기하는 증세이다.

본원에서 개시된 것과 같이 선택되고 사용된 본 발명의 염은 (a) 심근경색증, 불안정형 협심증, 불응성 협심증, 혈전용해 치료 후 또는 관상동맥 형성술 후발생되는 폐쇄성 관상동맥혈전증을 포함하는 임의의 혈전에 의해서 매개된 급성관상동맥질환의 치료법, (b) 색전성 뇌졸중, 혈전성 뇌졸중 또는 일과성 허혈발작을 포함하는 임의의 혈전증에 의해 매개된 뇌혈관 증후군의 치료법, (c) 자연 발생적으로 또는 악성종양, 수술 또는 트라우마의 환경에서 발생하는 심부정맥 혈전증 또는 폐색전증을 포함하는 정맥 혈관계에서 발병하는 임의의 혈전 질환의 치료법, (d) 파종성 혈관내 응고(패혈증성 쇼크 또는 기타의 감염, 수술, 임신, 트라우마, 또는 악성종양의 원인, 및 다발성 장기 부전의 연관 여부 포함), 혈전성 혈소판 감소성 자반증, 폐색성 혈전 혈관염 또는 헤파린-유도 저혈소판증 관련 혈전성 질환을 포함하는 임의의 응고 장애의 치료법, (e) 체외 순환 관련 혈전성 합병증(예를 들어, 신장 투석, 심폐 바이패스, 또는 기타의 산화 과정, 혈장분리반출술)의 치료법, (f) 기구조작 관련 혈전성 합병증(예를 들어, 심장 또는 기타 혈관 내 도관법, 대동맥 내 풍선 펌프, 관상 동맥 스텐트 또는 심장 판막)의 치료법 및 (g) 보철 장치 부착과 관련된 혈전성 합병증의 치료법과 같이 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상을 예방 또는 치료하는데 유용하다고 여겨진다.

따라서, 포유류의 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 증상을 치료하는 방법은 본 발명 염의 치료학상 유효량을 포유류에 투여하는 것을 포함한다. 본 발명의 염을 사용하여 치료 가능하다고 여겨지는 질환 상태에는, 급성관상동맥증후군, 심근경색증, 불안정형 협심증, 불응성 협심증, 혈전용해 치료 후 또는 관상동맥 형성술 후 발생되는 폐쇄성 관상동맥혈전증, 혈전증에 의해 매개된 뇌혈관 증후군, 색전성 뇌졸중, 혈전성 뇌졸중, 일과성 허혈발작, 정맥 혈전증, 심부정맥 혈전증, 폐색전증, 응고장애, 파종성 혈관 내 응고, 혈전성 혈소판 감소성 자반증, 폐색성 혈전 혈관염, 헤파린-유도 저혈소판증 관련 혈전성 질환, 체외 순환 관련 혈전성 합병증, 기구조작 관련 혈전성 질환, 보철 장치 부착 관련 혈전성 질환, 혈전 용해술 또는 관상 동맥 확장술에 의해 발병하는 폐색성 관상 동맥 혈전 형성, 정맥 혈관계에서의 혈전 형성, 응고 인자의 급격히 소비되는 증상 및 미세혈관 도처에 치명적인 혈전이 형성되어 광범위한 장기부전을 초래하는 전신응고, 출혈성 뇌졸중, 신장 투석, 혈액 산화 및 심장 도관 삽입을 포함하지만, 여기에 한정되지는 않는다.

화학식 I 화합물의 말레에이트 염 또는 화학식 II 의 염은 저장 전혈의 응고를 방지하기 위해, 그리고 실험 또는 저장을 위한 기타 생체 샘플의 응고를 방지하기 위한 경우처럼, 혈액응고 억제가 필요한 경우에도 역시 사용될 수 있다. 이에 따라, 본 발명의 응고 억제제는 저장된 전혈 및 혈장 응고 인자를 함유하거나 함유하는 것으로 여겨지는 임의의 매질 및 혈액 응고가 억제될 필요가 있는 곳에 첨가하거나 접촉될 수 있다(예를 들어, 포유류의 혈액을 혈관이식편, 스텐트, 정형외과적 보철장치, 심장 보철 장치 및 체외순환 시스템으로 이루어진 군으로부터 선택된 기재와 접촉시키는 경우).

인간의 치료법으로 유용한 것과 더불어, 상기의 염들은 포유류, 설치류 등을 포함하는 반려동물, 이색동물, 및 가축동물의 수의학적 치료에도 유용한 것으로 여겨진다. 더 바람직한 동물에는 말, 개 및 고양이가 포함된다.

B. 투여

통상적으로 치료용 액상 제형물은, 예를 들어, 정맥 주사 수액 주머니 또는 피하 주사침으로 구멍을 뚫을 수 있는 스토퍼(stopper)를 갖는 약병과 같이 멸균의 엑세스 포트(access pot)를 갖는 주머니에 둔다.

치료학상 유효량은 생체 내 또는 생체 외 방법으로 결정될 수 있다. 본 발명의 각각의 특정한 염에 대해서 최적의 복용 요구량을 측정하기 위해서 개별 측정할 수 있다. 치료학상 유효량의 범위는 투여의 경로, 치료의 목적 및 환자의 증상에 영향을 받을 것이다. 피하 주사침에 의한 주사에 있어서, 투여량이 체액 내로 전달된다고 추정할 수 있다. 투여의 기타 경로에 있어서, 흡수 효율은 약학에서 널리 공지된 방법으로 각각의 화합물을 독립적으로 측정해야한다. 이에 따라, 치료사는 최적의 치료 효과를 수득하기 위해 필요에 따라 용량을 적정하고, 투여의 경로를 변화시킬 필요가 있다. 효율적인 용량 정도의 측정, 즉 목적한 결과를 얻기 위해 필요한 용량의 정도는 당업자에 의해 용이하게 측정될 수 있다. 통상적으로, 염의 적용은 더 낮은 용량 정도에서 시작해, 목적한 효과가 달성될 때까지 용량 정도를 상승시킨다.

정제, 캡슐, 로젠지 등으로 혼입될 수 있는 통상적인 보조약(adjuvant)은 아카시아, 옥수수 전분 또는 젤라틴과 같은 결합제 및 미세결정성 셀룰로오스와 같은 부형제, 옥수수 전분 또는 알긴산과 같은 붕해제, 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제, 수크로스 또는 락토오스와 같은 감미료, 또는 향미제이다. 투약형태가 캡슐인 경우, 상기 물질에 추가하여 물, 식염수, 또는 유지와 같은 액상 담체를 포함할 수 있다. 다양한 종류의 기타 물질들은 투약 단위의 물리적 형태의 코팅 또는 개질제로 사용될 수 있다. 주사를 위한 무균성 조성물은 통상적인 약제학적 방법에 따라 제형될 수 있다. 예를 들어, 오일과 같은 비히클 또는 에틸 올레이트와 같은 합성 지방 비히클 또는 리포솜에서 활성 화합물의 용해 또는 현탁이 바람직할 수 있다. 버퍼, 보존제, 산화방지제 등은 허용가능한 약제학적인 방법에 따라서 혼입될 수 있다.

C. 병용 요법

본 발명의 염은 또한 다른 치료제 또는 진단약 시약과 병용될 수 있다. 특정한 바람직한 구현예에서, 본 발명의 염은 일반적으로 허용되는 임상에 따라서 상기 증상에 통상적으로 처방되는 항응고제, 혈전용해제 또는 혈소판 응집 억제제, 조직 플라즈미노젠 활성 인자, 우로키나제, 프로우로키나제, 스트렙토키나제, 헤파린, 아스피린 또는 와피린을 포함하는 기타 항혈전제와 같은 다른 화합물과 함께 보조 투여될 수 있다. 본 발명의 염은 성공적인 혈전용해치료 후의 재폐색의 방지 및/또는 재관류되는 시간 단축을 위해 시너지적 방법으로 작용할 수 있다. 상기 염은 또한 사용되는 혈전용해제의 용량 감소가 가능하고, 이에 따라 잠재적인 출혈 부작용을 최소화할 수 있다. 본 발명의 염은 일반적으로 영장류, 인간, 양, 말, 소, 돼지, 개, 고양이, 쥐 및 생쥐와 같은 포유류의 생체 내에서 이용될 수 있고, 또는 체외에서도 이용될 수 있다.

D. 화합물의 제조

1. 화학식 I 화합물의 말레에이트 염

화학식 I 화합물은 HCl 염, 락테이트, 말레에이트, 페녹시아세테이트, 프로피오네이트, 숙시네이트, 아디페이트, 아스코르베이트, 캄포레이트, 글루코네이트, 포스페이트, 타르타르레이트, 시트레이트, 메실레이트, 푸마레이트, 글리콜레이트, 나프탈렌-1,5-디설포네이트, 겐티세이트 및 벤젠 설포네이트를 포함하지만, 이에 한정되지 않는 다양한 무기 및 유기산의 염으로 전환될 수 있다. 당업자는 기타 산이 본 발명에서 화학식 I 화합물을 포함하는 유용한 염을 만드는데 사용될 수 있다는 것을 알 수 있을 것이다. 또한, 본 발명의 염이 본 발명의 기타 염으 로 쉽게 전환가능하다는 것도 고려된다.

염의 열적 및 가수분해 안정성을 평가하기 위해서, 당업자에게 공지된 시험이 수행된다. 상기 시험은 하기 실시예 4에서 더욱 자세하게 설명하고 있다.

몇몇의 방법들은 상기에 개시한 염의 제조에 유용하며, 당업자에게 공지되어 있다. 예를 들어, 염이 불용되는 용매 또는 용매 혼합물, 또는 물이 증발, 증류, 또는 냉각 건조로 제거된 후의 물과 같은 용매 중, 목적하는 산 1 몰당량 이상과의 화학식 I 화합물의 반응이 있다. 대안적으로는, 화학식 I 화합물을 이온 교환 수지를 통과시켜 목적하는 염을 생성시킬 수 있거나 또는 동일한 일반적인 공정을 이용하여 생성물의 하나의 염 형태를 또 다른 형태로 전환시킬 수 있다.

화학식 I 의 화합물은 하기에 설명된 공정에 따라 제조하였다. 화학식 I 화합물의 말레에이트 염은 그의 뛰어난 결정화도, 열적 및 가수분해 안정성, 및 높은 순도 때문에 선택했다.

2. 화학식 I

화학식 I 의 화합물은, 그램 스케일(< 1kg) 또는 킬로그램 스케일(> 1kg)하에서 임의의 몇몇의 상이한 방법에 따라 제조될 수 있다. 그램-스케일 방법은 하기 실시예 2에서 설명한다. 또 다른 그램-스케일 방법은 본원에 참조로 삽입된 미국 특허 제 6,844,367B1 호, 참조로, 실시예 266에 설명되어 있다.

대안적으로, 화학식 I 의 화합물은 실시예 2에서 설명한 절차를 이용하여 킬로그램 스케일로 제조될 수 있다. 화학식 I 의 디메틸 아미딘의 형성에는 시아노기에 탈양성자화된 아민으로 친핵성 공격을 하는 것이 포함되며, 여기서 탈양성 자화된 아민은 2차 아민 및 알킬 리튬으로부터 형성된다. 본원에서 이용된 바와 같이, "알킬" 이라는 용어는 탄소수 1 내지 8의 하이드로카빌 라디칼을 지칭한다. 당업자는 탈양성자화된 아민이 기타 방법을 통해서 제조될 수 있다는 것과 화학식 I 의 아미딘 작용기의 형성이 다양한 기타의 방법으로 제조될 수 있다는 것을 인지할 것이다.

상기 개시한 것과 같이, 본 발명 방법에 유용한 용매는 테트라하이드로푸란(THF), 디에틸 에테르, 디메톡시메탄, 디옥산, 헥산, 메틸 tert-부틸 에테르, 헵탄, 및 시클로헥산과 같은 비극성, 비양자성 용매이다. 나아가, 탈양성자화된 아민의 형성은 10 ℃ 미만의 온도에서 수행될 수 있다. 화학식 I 의 화합물을 형성하기 위한 아민의 친핵성 첨가 또한 10 ℃ 미만의 온도에서 수행될 수 있다. 당업자는 본 발명의 방법이 다양한 기타 용매, 시약 및 반응 온도에서 수행될 수 있다는 것을 인지할 것이다.

화학식 I 의 화합물은 본 발명의 방법을 이용하여 50 % 초과의 수율로 제조될 수 있다. 몇몇의 예에서는, 화학식 I 의 화합물은 65 % 초과의 수율로 제조될 수 있다. 기타의 예에서는, 화학식 I 의 화합물은 75 % 초과의 수율로 제조될 수 있다.

나아가, 그램-스케일로 화학식 I 화합물을 제조하는 본 발명의 방법은 킬로그램-스케일에 이용된 공정과 유사하지만, 반응의 스케일이 3400 % 초과로 상승한다. 게다가, 몇몇의 단계에서, 감소된 양의 과잉반응물을 사용하면 상승된 수율이 수득 된다. 당업자는 화학식 I 의 화합물이 그램 및 킬로그램 스케일에서 기타 화학적 방법론을 통해서 제조될 수 있다는 것을 알 수 있을 것이다.

V. 실시예

달리 진술하지 않는 이상, 명세서 전반에 사용된 약어는 하기의 의미가 있다.

Å = 옹스트롬

A% = 전체 면적 비율

aq.= 수성

cm = 센티미터

d = 이중선

DSC = 시차 주사 열량

EDTA = 에틸렌디아민테트라아세트산

eq. = 당량

EtOH = 에탄올

g = 그램

HPLC = 고성능 액체 크로마토그래피

hr = 시간

Hz = 헤르츠

IR = 적외선

J = 짝지음 상수

kg = 킬로그램

kV = 킬로볼트

L = 리터

LOD = 검출 한계

M = 몰

m = 다중선

mA = 밀리 암페어

Me = 메틸

MeO = 메톡시

MeOH = 메탄올

mg = 밀리그램

min. = 분

mL = 밀리리터

mm = 밀리미터

MTBE = 메틸 tert-부틸 에테르

N = 노말

nM = 나노 몰

NMR = 핵자기공명

s = 단일선

TDS = 총용존고형물

TGA = 열무게 분석법

THF = 테트라하이드로푸란

μM = 마이크로 몰

실시예 1: 화학식 II 의 결정성 다형체 염의 제조

그램 스케일 제조

응축기를 구비한 1500 mL 3목 둥근 바닥 플라스크에 화학식 I 의 유리 염기 화합물(25 g; 1 당량)을 채웠고, 9:1 EtOH/물(500 mL)을 교반하면서 첨가했다. 생성된 슬러리를 70 ℃까지 가열했다. 말레산(12.77 g; 2 당량)을 용액(9:1 EtOH/물 100 mL)으로 적가했고, 50 mL가 첨가된 후에, 용액은 눈에 띌 정도로 깨끗해졌다. 말레산 용액의 완전한 첨가시에, 온도를 5분간 80 ℃에서 유지했다. 상기 용기를 천천히 45 ℃까지 식히고, 그리고 나서 MTBE 400 mL를 첨가했다. 용액을 12시간 동안 교반했다. 결과 침전물을 여과했고, 진공 하에서 건조했다. 화학식 II 의 염을 45 % 수율(14.2 g)로 회수했다.

킬로 그램 스케일 제조

화학식 I 의 화합물(24.6 kg)을 760 L GLMS 반응기(반응기 A)에 채웠다. 말레산(12.7 Kg, 2.0 당량), 에탄올(445 Kg, 18.1 부(part)) 및 높은 순도의 물(140 Kg, 5.7 부)을 첨가했다. 반응 혼합물을 22 ℃(19 내지 25℃)로 조절했고, 그 온도에서 약 1시간 동안 교반했고, 그리고 나서 폴리싱 필터를 통해 조절된 780 L Hastelloy 반응기(반응기 B)로 이동시켰다. 반응기 B로 반응기 A 펌프 및 라인은 폴리싱 필터를 통해서 추가적인 에탄올(약 45 Kg)을 이용해 린스해냈다. 여과액을 진공 하에서 따뜻한 글리콜조(glycol bath)(반응기 자켓을 가열하기 위함)의 최대 온도인 45 ℃에서 약 140 L(5.7 부 부피)가 남을 때까지 농축했다. 반응기 B의 내용물을 공정 중 NMR로 샘플링했는데, 에탄올:화학식 II의 몰 비율이 26으로 나타났다. 높은 순도의 물(49 Kg, 2.0 부)을 반응기 B에 채웠고, 농축을 진공하에서 포트 부피가 약 140 L(5.7 부 부피)가 달성될 때까지 계속했다. 공정 중 NMR에서 에탄올:화학식 II 의 염의 몰비가 14로 나타났다. 높은 순도의 물(49 Kg, 2.0 부)을 다시 반응기 B에 채웠고, 농축을 진공하에서 포트 부피가 약 140 L가 수득될 때까지 계속했다. 공정 중 NMR에서 에탄올:화학식 II 의 염의 몰비가 5로 나타났다. 반응기 B 내용물의 온도는 22 ℃(19 내지 25℃)로 조절했고 슬러리의 형성을 시각적으로 확인했다. 반응 혼합물을 22 ℃(19 내지 25 ℃)에서 약 2시간 동안 교반했고, 그리고 나서 F-53 여과포를 끼운 30'' 원심분리기에서 여과했다. 30'' 원심분리기로 반응기 B의 펌프 및 라인을 높은 순도의 물(각각 약 30 Kg) 두 부분을 가진 폴리싱 필터를 통해서 린스해냈다. 필터 케이크를 공정 중 HPLC로 샘플링했는데, 생성물의 순도는 99.1 A%, 가장 큰 불순물은 0.26 A%였으며, 이에 따라 재결정화는 불필요했다. 필터 케이크(33.1 Kg)를 진공 하에서 따뜻한 글리콜조(반응기 자켓을 가열하기 위함)의 최대 온도인 40 ℃에서 건조했다. 약 30.5 시간 후에, 공정 중 LOD 분석에서 용매 함량이 0 %로 나타났다. 건조 생성물을 배출했고(26.4 Kg), 2-8 ℃에서 저장했다. 최종 생성물의 수율은 85 %로(예상치 50-80 %) 예상치보다 약간 더 높았다.

화학식 II 의 염은 실시예 4에서 개시한 기술을 이용하는 것을 특징으로 한다. 화학식 II 염의 X선 회절 패턴은 도 1에 나타냈고, 하기의 대략적인 피크 위치를 특징으로 한다: 4.9, 9.7, 11.8, 13.8, 14.1, 15.2, 17.6, 18.5, 19.9, 20.8, 21.6, 22.7, 24.1, 25.0, 26.3, 26.8°2θ. 시차 주사 열량계(DSC, 도 2A 참조)를 이용하여, 197 내지 201 ℃의 용융점을 측정했다. 이에 더하여, 열무게 분석법(TGA, 도 2B의 패턴 참조)을 통해서 화학식 II 염의 100 ℃에서의 중량 손실을 0.62 %로 측정했다. 화학식 II 염의 흡습은 가역적이며, 0.1 내지 3 %의 흡습도를 나타냈다(도 3). 화학식 II 염의 순도는 HPLC에 의해 측정된 가수분해된 아미딘 함량의 존재 하에서 측정하였고, 순도는 99 % 초과로 나타났다.

실시예 2: 화학식 I 화합물의 제조

그램 스케일 제조

THF(4.67 kg, 10.3 부) 중 화학식 F 화합물의 슬러리(455 g, 1.0 당량)를 제조하였고, 10 ℃ 미만으로 조절했다. 리튬 디메틸 아마이드는 하기와 같이 제 조했다; 헥실리튬(2.3 N/헥산, 2.45 L, 5.5 당량)을 디메틸아민 용액(2 N/THF, 2.8 L, 5.5 당량)에 10 ℃미만을 유지하면서 첨가했다. 리튬 디메틸 아마이드 용액을 포트 온도를 10 ℃미만으로 유지한 화학식 F 화합물을 함유하는 슬러리에 채워넣었다. 반응 과정은 공정 중 HPLC로 모니터링했고, 여기서 화학식 F의 양은 1.0 A% 미만으로 나타났다. 탈이온수(6.6 kg, 14.51 부) 중 NaHCO₃(490 g, 1.1 부, 5.7 당량) 및 Na₂CO₃(490 g, 1.1 부, 4.5 당량)의 버퍼 용액을 제조했고, 상기 반응 혼합물을 5 ℃미만으로 유지한 상기의 수용액으로 옮겼다. 침전되어 나온 생성물 및 얻어진 슬러리를 12시간에 걸쳐 20 ℃로 조절했다. 고체를 여과했고, 얻어진 습윤 케이크(wet cake)는 탈이온수 3.5 kg(7.7 부)로 워시했다. 고체는 거친 프리트 유리 벤치 여과지(coarse frit glass bench filter)로 여과했고, 차가운(0-5 ℃) 무수 에탄올(628g, 1.4 부)로 린스해냈다. 생성물을 30-35 ℃에서 건조했다. 건조 생성물을 458 g(73 % 수율)으로 수득했다.

킬로그램 스케일 제조

THF(251 Kg, 8.0 부) 중 화학식 F 화합물의 슬러리(31.5 Kg, 1.0 당량)는 780 L Hastelloy 반응기(반응기 A)에서 제조했고, 0 ℃(-3 내지 3 ℃)로 조절했다. THF 중 2 M 디메틸아민(161.0 Kg, 5.0 당량) 및 THF(63 Kg, 2 부)를 1900 L GLMS 반응기(반응기 B)에 채워넣고, 최대의 교반으로 0 ℃(-3 내지 3 ℃)로 조절했다. 헥실리튬(2.3 M, 97.2 Kg, 4.5 당량)을 천천히 반응기 B로 채워넣는 동안 최대 온도 10 ℃를 유지했다. 반응기 B로 펌프 및 라인을 THF(3.2 Kg)으로 린 스해냈다. 반응기 B 내용물은 0 ℃(-3 내지 3 ℃)로 조절했고, 그리고 나서 반응기 A의 온도를 10 ℃이하로 유지하면서 반응기 A로 옮겼다. 반응기 B의 펌프 및 라인을 THF(31.4 Kg, 1.0 부)로 린스해냈다. 반응기 A의 내용물을 0 ℃(-3 내지 3 ℃)로 조절했고, 상기 온도에서 반응의 완료가 HPLC(1-2 시간)에 의해 확인될 때까지 교반했다. 약 1시간 동안의 교반 후에, 공정 중 HPLC 분석에서 0 A%의 출발물질이 남아있다는 것이 나타났다(공정 중 기준: 최대 1 A%). 반응기 A의 내용물은 -5℃(-8 내지 -3℃)로 조절했다. 공정 중 물로 반응기 B의 클리닝을 수행했다. 두 가지의 선행하여 제조된 수용액[물(236 Kg, 7.5 부) 중 NaHCO₃(35.0 Kg, 1.1 부) 및 물(236 Kg, 7.5 부) 중 Na₂CO₃(35.0 Kg, 1.1 부)]을 반응기 B에 채웠고, -3 ℃(0 내지 -6 ℃)로 조절했다. 반응기 A의 내용물을 절연라인을 통해서 반응기 B로 옮겼고, 반응기 B의 온도를 -8 ℃에서 최대 5 ℃로 유지했다. 반응기 A의 펌프 및 라인을 냉[-5 ℃(-8 내지 -3 ℃)] THF(31.4Kg, 1.0부)로 린스해냈다. 반응기 B의 내용물을 22 ℃(19 내지 25 ℃)로 조절했고, 약 3시간 동안 교반했다. 슬러리 형성을 시각적으로 확인했고, 반응기 B의 내용물은 F-16 여과포를 끼운 30'' 원심분리기에서 여과했다. 반응기 B의 펌프 및 라인은 F-16 여과포를 끼운 30'' 원심 분리기에서 식수(63 Kg, 2 부)로 린스해냈다. 습윤 필터 케이크(66.5 Kg)를 반응기 B로 다시 옮겼고, 22 ℃(19-25 ℃)에서 약 1시간 동안 식수(1005 Kg, 32 부) 중 슬러리 워시(slurry wash)에 넣었다. 생성물을 30'' 원심분리기(공정 중 세정 및 F-53 여과포를 끼운 후)로 여과했고, 반 응기 B의 라인 및 펌프를 식수(63 Kg, 2 부)로 린스해냈다. 세정수를 TDS 실험을 위해 샘플링했고, 0.46 %로 나타났다. 반응기 B 펌프, 라인 및 습윤 필터 케이크를 차가운[0℃(-3 내지 3 ℃)] 에탄올(44 Kg, 1.39 부)로 추가로 린스해냈다. 습윤 필터 케이크를 진공 하에서, 수조(water bath)(반응기 자켓을 가열하기 위함)의 최대 온도인 35 ℃에서 건조했다. 공정 중 LOD는 약 24시간의 건조 후에 0 %였고, 생성물은 76.7 %(24.8 Kg)의 수율로 배출됐다. HPLC는 98 %의 순도를 나타냈고, 이와 함께 염소를 제외한 불순물은 1.14 %로 나타났다.

실시예3 : 화학식 F 화합물의 제조

제 1단계. 2-니트로-N-(5- 클로로 -피리딘-2-일)-5- 메톡시 - 벤즈아마이드(C)의 합성

5-메톡시-2-니트로벤조산(A) (25.0 Kg, 1.0 당량), 2-아미노-5-클로로피리딘(B)(16.3 Kg, 1.0 당량) 및 아세토니트릴(87.5 Kg, 3.5 부)을 380 L GLMS 반응기에 채워넣었다. 반응 혼합물을 22 ℃(19 내지 25 ℃)로 조절했고, 무수 피리딘(30.0 Kg, 3.0 당량)을 첨가했다. 펌프 및 라인을 아세토니트릴(22.5 Kg, 0.9 부)로 린스했고, 반응기 내용물을 19-22 ℃로 조절했다. 옥시염화인(23.3 Kg, 1.20 당량)을 계량펌프를 통해서 반응기의 내용물에 채워넣고, 그동안 온도를 25 ℃(22-28 ℃)로 유지했다. 계량펌프 및 라인은 아세토니트릴(12.5 Kg, 0.5 부)로 린스했고, 그동안 온도를 25 ℃(22-28 ℃)로 유지했다. 반응 혼합물은 약 1/3의 POCl₃를 첨가하고 나면, 일반적으로 슬러리에서 투명용액으로 변한다. 상기 첨가의 결과로, 이는 혼탁해졌다. 완전한 첨가 후에, 반응 혼합물을 25 ℃(22-28 ℃)에서 HPLC 분석으로 반응의 완료가 확인되는 시간인, 약 1시간 동안 교반했다. 용액을 15 ℃(12-18 ℃)로 냉각했고, 식수(156.3 Kg, 6.25 부)를 천천히 채웠으며, 그동안 반응 온도를 12 내지 30 ℃로 유지했다. 그리고 나서, 반응 혼합물을 22 ℃(19 내지 25 ℃)로 조절했고, 발열이 멈출 때까지 약 5시간 동안 교반했다. 슬러리의 형성을 시각적으로 확인했고, 반응기의 내용물은 F-19 여과포를 끼운 가압 너체에서 여과했다. 반응기, 펌프 및 라인은 식수 두 부분으로(각각 62.5 Kg, 2.5 부) 가압 너체(nutsche)에서 워시했다. 여과액은 pH가 7이었다. 생성물(41.8 Kg)을 진공하에서 수조(반응기 자켓을 가열하기 위함)의 최대 온도인 50 ℃에서 건조했다. 약 12시간 후에, 공정 중 LOD 분석에서 용매 함량이 0.72 %로 나타났다. 건조 생성물(C)는 88.2 %의 수율로 배출됐고(34.4 Kg), HPLC에 의해 순도가 99.1 %로 나타났다.

제 2단계. 2-아미노-N-(5- 클로로 -피리딘-2-일)-5- 메톡시 - 벤즈아마이드(D)의 합성

780 L Hastelloy 반응기에 화합물 C(33 Kg, 1.0 당량), 5 % 백금 탄소(황화됨, 0.33 Kg, 0.010 부) 및 디클로로메탄(578 Kg, 17.5 부)을 채워넣었다. 교반을 시작했고, 반응기의 내용물을 22 ℃(19 내지 25 ℃)로 조절했다. 반응기는 약 30 psi 수소로 가압했고, 반응 혼합물을 28 ℃(25-31 ℃)로 온화하게 가열했다. 반응기 내용물의 수소화를 약 30 psi 하, 28 ℃(25 내지 31 ℃; 최대 31 ℃)에서 반응이 HPLC에 의해 완료될 때까지 수행했다. 16.5시간 후에, 반응은 출발물질(0.472 A%)이 사라진 것을 확인한 후에 완료된 것으로 생각했다. 반응기의 내용물은 백금 촉매를 제거하기 위해서 8'' 스파클러(sparkler) 여과기에서 제조한 조절된 셀라이트 패드(celite pad)(20-55 Kg 디클로로메탄으로 조절된 0.2-0.5 Kg 셀라이트)를 통해 순환시켰다. 반응기 및 셀라이트 베드(celite bed)를 두 부분의 디클로로메탄(각각 83 Kg, 2.5 부)으로 린스해냈다. 여과액을 570 L GLMS 반응기로 옮겼고, 대기압 하에서 약 132 L(4 부 부피)로 농축했다. 에탄올(69 Kg, 2.1 부)을 채우고, 대기압 하에서 약 99 L(3 부 부피)로 농축을 계속했다. 공정 중 NMR에서 디클로로메탄 함량은 39 %로 나타났다. 에탄올(69 Kg, 2.1 부)을 다시 채웠고, 약 99 L(3 부 부피)로 농축을 다시 계속했다. 공정 중 NMR에서 디클로로메탄 함량은 5 %로 나타났다. 그리고 나서 반응 혼합물 을 3 ℃(0 내지 6 ℃)로 조절했고, 약 1시간 동안 교반했으며, 얻어진 슬러리를 F-19 여과포를 끼운 자켓 가압 너체(jacketed pressure nutsche)에서 여과했다. 반응기, 펌프 및 라인을 차가운[3 ℃(0-6 ℃)] 에탄올(26 Kg, 0.8 부)로 린스해냈다. 습윤 필터 케이크(36.6 Kg)를 진공 중 40-50 ℃에서 건조했고, 이 때 수조(반응기 자켓을 가열하기 위함)의 최대 온도는 50 ℃였다. 12.5시간 후의 LOD 분석에서 용매 함량이 0.1%로 나타났다. 건조 생성물(D)은 89.5 %의 수율로 배출됐다(26.4 Kg). HPLC에서 순도는 98.4 A%로, 염소를 제외한 불순물은 0.083 %으로 나타났다.

제 3단계. N-(5- 클로로 -피리딘-2-일)-2-(4- 시아노 - 벤조일 -아미노)-5- 메톡시 -벤즈아마이드 하이드로클로라이드(F)의 합성

780 L Hastelloy 반응기에 4-시아노벤조일 클로라이드(E)(17.2 Kg, 1.1 당량) 및 THF(92 Kg, 3.5 부)를 채워넣었다. 반응기 내용물을 모든 고체가 용해될 때까지 22 ℃(19 내지 25 ℃)에서 교반했다. 얻어진 용액을 더 낮은 수납기로 이동시켰고, 반응기는 THF(26 Kg, 1부)로 린스해냈다. 화합물 D(26.4 Kg, 1 당량), THF(396 Kg, 15 부) 및 피리딘(2.90 Kg, 0.4 당량)을 깨끗한 반응기에 채워넣었다. 펌프 및 라인을 THF(34 Kg, 1.3 부)로 린스해냈다. 계량 펌프를 통해서 4-시아노벤조일 클로라이드/THF 용액을 반응기에 채웠고, 온도를 30 ℃ 이하로 유지했고, THF(약 10 Kg)로 린스해냈다. 얻어낸 황색 슬러리를 22 ℃(19 내지 25 ℃)에서 약 2시간 동안 교반했다. 2시간 후에 행한 공정 중 HPLC에서 화학식 D의 화합물의 함량은 반응의 완료를 나타내는 0 %로 나타났다. 슬러리를 F-19 여과포를 끼운 가압 너체에서 여과했다. 반응기, 펌프, 라인 및 습윤 케이크를 3부분의 에탄올(각각 약 15 Kg)로 린스해냈다. 습윤 필터 케이크가 배출됐고(65.4 Kg), 22 ℃(19 내지 25 ℃)에서 약 1시간 동안 에탄올(317 Kg, 12 부)에서의 슬러리 워시를 위해서 반응기로 다시 옮겼다. 슬러리를 가압 너체상으로 여과했고, 반응기, 펌프, 라인 및 습윤 필터 케이크를 두 부분의 에탄올(각각 약 15 Kg)로 린스해냈다. 습윤 필터 케이크를 진공 하에서, 따뜻한 글리콜조(반응기 자켓을 가열하기 위함)의 최대 온도인 40 ℃에서 건조했다. 14.5시간의 건조 후에, LOD는 0.75 %였다. 건조한 물질을 분쇄(스크린 0.125'')하여 31.8 Kg의 생성물을 수득했고, 이는 진공 하에서 추가로 10.5시간 동안 건조했다. 건조 후의 LOD는 1.8 %였고, 생성물은 74.8 %의 수율(예측치 60-90 %)로 배출됐다(31.5 Kg). HPLC는 100 %의 순도를 나타냈다.

실시예 4: 솔트 스크린( salt screen )

제 1의 스크린

10 %(수성) THF 혼합물 3 mL 중 유리 염기 20 mg에 에탄올 1 mL 중 1.1 당량의 산을 첨가했다. 혼합물을 2시간 동안 진탕한 후, 침전을 유도하기 위해서 tert-부틸 메틸 에테르 2 mL를 첨가했고, 추가로 2시간 동안 진탕했다. 그리고 나서 샘플을 여과했고, 건조했으며, 그 후에 그들의 순도, 결정화도 및 안정성을 판정하기 위해서 분석했다. 결과는 하기 표 1에 나타냈고, 실험한 산을 나열했다.

표 1

제 2의 스크린

몇몇의 염 형태에 대한 제 2의 평가는 하기에 개시된 방법으로 수행했고, 그 데이터는 표 5 및 도 1A, 1B, 2A, 2B 및 3에 요약했다.

시차 주사 열량계( DSC )

DSC 데이터는 50 포지션의 오토샘플러를 구비한 TA instrument Q1000으로 수집했다. 에너지 및 온도의 측정 기준은 인듐(indium)이었다. 샘플을 10 ℃/분의 비율로 25 내지 350 ℃에서 가열했다. 30 mL/분에서의 질소 퍼지(purge)를 샘플 전반에서 유지했다. 다른 언급이 없는 한, 1 내지 3 mg의 샘플을 사용했고, 모든 샘플은 알루미늄 팬(pan)에서 밀폐되도록 밀봉시켜 담아두었다.

열무게 분석기( TGA )

TGA 결과는 TA instrument Q500 TGA상에서, 니켈/알루멜 및 10 ℃/분으로 스캔 속도로 보정시켜 수집했다. 60 mL/분에서의 질소 퍼지를 샘플 전반에서 유지했다. 통상적으로 샘플의 10-20 mg을 미리 중량을 잰 백금 도가니(pre-tared platinum crucible)에 부하했다.

XRPD(X선 분말 회절 )

X선 분말 회절 패턴은 CuK

방사(40 kV, 40 mA), θ-θ 각도기, 자동 발산계와 수용 슬릿(receiving slit), 그래파이트 2차 모노클로매터(graphite secondary monochromator) 및 섬광 측정기를 이용하여 Siemens D5000 회절장치에서 수집했다. 상기 기기는 인증된 커런덤 기준(Corundum standard)(NIST 1976)을 이용하여 성능을 확인했다.

주위 조건 하에서 실험할 샘플을 분말을 사용해서 평판형 표본(flat plate specimens)으로 제조했다. 샘플 약 35 mg은 캐비티 컷(cavity cut)안의 광택나는 제로-백그라운드(510) 실리콘 웨이퍼(zero-background silicon wafer)안으로 서서히 채워진다. 샘플은 분석 중에 그 자신의 평면 위에서 회전했다. 상세한 데이터 모음은 하기 표 2의 방법으로 제시되어 있다.

표 2

XRPD 방법
각의 범위	3°- 40°2θ
스텝 크기	0.02°2θ
계수시간	6초/스텝
발산 슬릿	V20
산란방지 슬릿	V20

회절 데이터는 K

₂구성요소를 EVA(평가 소프트웨어)를 이용하여 탈거한 후에, CuK

₁(λ=1.5406Å)를 이용하여 나타냈고, 분말 패턴은 WIN-INDEX를 이용하여 ITO 방법으로 나타냈으며, 원격자 정수는 WIN-METRIC을 이용해서 분석했다.

단결정 XRD (X선 회절 분석기)

Oxford Cryosystems Cryostream 냉각 장치를 구비한 Bruker AXS 1K SMART CCD 회절장치로 데이터를 수집했다. SHELXS 또는 SHELXD 프로그램을 이용해서 구조를 밝혔고, Bruker AXS SHELXTL 조의 한 부분인 SHELXL 프로그램으로 분석했다. 달리 언급되지 않는 한, 탄소에 부착된 수소 원자를 기하학적으로 배치했고, 라이딩(riding) 등방성 변위 파라메터로 분석하게 했다. 헤테로원자에 부착된 수소 원자는 차분 푸리에 합성에서 발견됐고, 등방성 변위 파라메터로 자유롭게 분석했다.

중량 측정 증기 흡수( GVS ) 연구

CFRSorp 소프트웨어를 실행시킨 Hiden IGASorp 흡습 분석기에서 모든 샘플을 분석했다. 샘플 크기는 통상적으로 10 mg이었다. 수분흡착탈착등온선 측정방법을 하기에 약술한 것과 같이(2개의 스캔이 하나의 온전한 사이클 형성) 행했다. 모든 샘플을 전형적인 실내 습도 및 온도(40 %RH, 25 ℃)에서 부하/비부하했다. 모든 샘플을 XRPD 후 GVS 분석으로 분석했다. 표준 등온선 측정은 25 ℃, 0-90 %RH 범위에서 10 %RH 간격으로 수행했다. 화학식 II 의 염은 뛰어난 수분 안정성을 나타냈다.

용해도

충분한 염을 용매(물) 0.25 mL 중 현탁시켜 염의 모(parent) 유리 형태의 최대 최종 농도가 10 mg/mL 이상으로 나오도록 함으로써 용해도를 측정했다. 현탁액은 25 ℃에서 24시간 동안 평형화시킨 후, pH를 확인하고 유리 섬유 C 96 웰 플레이트를 통해 여과했다. 그리고 나서, 여과액을 101x로 희석했다. 약 0.1 mg/mL에서 DMSO 중 용해된 표준물에 대해서 HPLC로 정량했다. 상이한 부피의 표준, 희석 및 희석하지 않은 시험물을 주입했다. 용해도는 표준물 주입시 최대 피크에서와 동일한 체류시간에 나타난 피크 면적을 적분해서 계산했다. 필터 플레이트에 충분한 고체가 있는 경우, XRPD는 보통 상 변화, 수화물 형성, 무정형화, 결정화 등을 위해 확인했다.

아세테이트 염은 10 mg/mL 이상의 용해도를 나타냈으나, 말레에이트 염은 약 2.05 mg/mL 내지 약 2.27 mg/mL의 용해도를 나타냈다.

pKa 측정

이는 D-PAS이 부착된 Sirius GlpKa 기기로 수행했다. 수 중 UV 및 25℃의 메탄올 및 물 혼합물에서의 전위차로 측정했다. 적정 매질은 0.15M KCl로 조절된 이온 강도였다. 메탄올 및 물 혼합물에서 나타난 값은 Yasuda-Shedlovsky 외삽법(extrapolation)을 통해 0 % 공용매(co-solvent)로 정정했다. 데이터를 Refinement Pro 소프트웨어 버젼 1.0을 이용하여 분석했다. pKa 값의 예측은 ACD pKa 예측 소프트웨어 버젼 8.08을 이용했다. 화학식 II 염의 데이터는 하기 표 3에 나타냈다.

표 3

LogP 측정

이는 Log P, Log P_ion 및 Log D 값을 나타내기 위해, 옥타놀:ISA 물의 세가지 비율을 이용하여 Sirius GlpKa 기기에서 전위차 적정으로 했다. 데이터를 Refinement Pro 소프트웨어 버젼 1.0로 분석했다. LogP의 예측은 ACD 버젼 8.08 및 Syracuse KNOWWIN 버젼 1.67 소프트웨어를 이용했다. 말레에이트 염의 데이터는 하기 표 4에 나타낸다.

표 4

Karl Fisher 수분 측정

Hydranal Coulomat AG 시약 및 아르곤 퍼지를 이용한 Mettler Toledo DL39 Coulometer에서 수분 함량을 측정했다. 수분의 침입을 막기 위해서 밀봉부재(suba seal)에 연결된 백금 TGA 팬(pan)에서 무게를 잰 고체로서, 샘플을 용기에 넣었다. 적정 당 약 10 mg의 샘플을 이용했고, 각각의 분석은 2번씩 행했다.

안정도

안정도의 측정으로서, 샘플을 57 ℃에서 75 %의 실내 습도에 적용한 후, 가수분해한 아미딘 함량을 HPLC(Aglient HP1100)(체류시간 34분)로 측정했다. 샘플의 용매는 메탄올이고, 0.1 % 트리플루오로아세트산의 이동상 개질제를 이용했다. 데이터는 3,6 및 10일 후에 수집했으며, 단, 프로피오네이트의 데이터는 0,3 및 8일에 수집했다. 주요 피크에 대한 백분율로 나타낸 산 가수분해 생성물의 퍼센트로, 표 5에 결과를 나타냈다. 모든 기타 불순물 피크는 상기 계산에서 고려하지 않았다.

표 5

화학식 II 염의 결정 데이터

모든 실험은 Oxford Cryosystems Cryostream 냉각 장치를 갖춘 Bruker-Nonius Kappa CCD 회절분석기에서 수행한다. 구조는 통상적으로 SIR-97 또는 SHELXS-97로 밝혀지고, SHELXL-97로 분석했다. 달리 서술하지 않는 한, 수소 원자를 기하학적으로 배치하고, 등방성 변위 파라메터로 분석하게 했다. 하기의 표(표 6 및 표 7)는 화학식 II 염의 결정 데이터 및 구조 분석을 제공한다.

표 6

표 7

상기 발명은 이해의 명확성을 위해서 예시 및 실시예의 방법으로 상세하게 개시되었으나, 당업자가 첨부된 청구항의 범위 내에서 특정한 변화 및 변형을 실시할 수 있다는 것을 알 수 있을 것이다. 더 나아가, 본원에서 제공된 각각의 참고자료는, 각각의 참고자료가 개별적으로 참조인용되는 바와 동일한 정도로 그 전체가 참조인용된다.

Claims

하기 화학식 I 화합물, 및 염산, 젖산, 말레산, 페녹시아세트산, 프로피온산, 숙신산, 아디프산, 아스코르브산, 캄파산, 글루콘산, 인산, 타르타르산, 시트르산, 메탄설폰산, 푸마르산, 글리콜산, 나프탈렌-1,5-디설폰산, 겐티산 및 벤젠셀폰산으로 이루어진 군으로부터 선택된 산을 포함하는 염:

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제 1 항에 있어서, 산은 염산, 젖산, 말레산, 페녹시아세트산, 프로피온산, 숙신산, 아디프산, 아스코르브산, 캄파산, 글루콘산, 인산, 타르타르산, 시트르산 및 메탄설폰산으로 이루어진 군으로부터 선택된 염.
제 1 항에 있어서, 산은 염산, 젖산, 말레산, 페녹시아세트산, 프로피온산 및 숙신산으로 이루어진 군으로부터 선택된 염.
제 1 항에 있어서, 산은 말레산인 염.
제 1 항에 있어서, 산은 프로피온산인 염.
제 4 항에 있어서, 하기 화학식 II 로 나타낸 염.
제 6 항에 있어서, 결정성 다형체 형태를 갖는 염.
제 7 항에 있어서, 4.9, 9.7, 13.8, 14.1, 15.2, 17.6, 18.5, 20.8, 21.6, 22.7, 24.1, 26.3, 26.8°2θ에서 선택된 네 가지 이상의 대략적인 특징적 피크 위치를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 지닌 염.
제 7 항에 있어서, 4.9, 9.7, 11.8, 13.8, 14.1, 15.2, 17.6, 18.5, 19.9, 20.8, 21.6, 22.7, 24.1, 25.0, 26.3, 26.8°2θ에서 선택된 여덟 가지 이상의 대략적인 특징적 피크 위치를 갖는 X선 분말 회절 패턴을 지닌 염.
제 7 항에 있어서, 도 1에 나타낸 X선 분말 회절 패턴과 유사한 X선 분말 회절 패턴을 갖는 염.
제 7 항에 있어서, 도 2에 나타낸 시차 주사 열량 패턴과 유사한 시차 주사 열량을 갖는 염.
약제학적으로 허용가능한 담체 및 제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 항의 염의 치료학상 유효량을 포함하는, 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 포유류의 증상을 예방 또는 치료하기 위한 약제학적인 조성물.
제 12 항에 있어서, 정제 형태의 약제학적 조성물.
제 12 항에 있어서, 캡슐 형태의 약제학적 조성물.
제 12 항에 있어서, 로젠지 형태의 약제학적 조성물.
제 12 항에 있어서, 주입, 주사 또는 경피성 전달에 적합한 형태의 약제학적 조성물.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 항의 염의 치료학상 유효량을 상기 포유류에 투여하는 것을 포함하는, 바람직하지 않은 혈전증을 특징으로 하는 포유류의 증상을 예방 또는 치료하는 방법.
제 17 항에 있어서, 증상은 급성관상동맥증후군, 심근경색증, 불안정형 협심증, 불응성 협심증, 혈전용해 치료 후 또는 관상동맥 형성술 후 발생되는 폐쇄성 관상동맥혈전증, 혈전증에 의해 매개된 뇌혈관 증후군, 색전성 뇌졸중, 혈전성 뇌졸중, 일과성 허혈발작, 정맥 혈전증, 심부정맥 혈전증, 폐색전증, 응고장애, 파종성 혈관내 응고, 혈전성 혈소판 감소성 자반증, 폐색성 혈전 혈관염, 헤파린-유도저혈소판증 관련 혈전성 질환, 체외 순환 관련 혈전성 합병증, 기구조작 관련 혈전성 질환, 및 보철 장치 부착 관련 혈전성 질환으로 이루어진 군으로부터 선택된 일원인 방법.
제 1 항 내지 제 11 항 중 어느 항의 상기 염과 혈액 샘플을 접촉하는 단계를 포함하는, 혈액 샘플의 응고를 억제하는 방법.
LiN(CH₃)₂를 하기 화학식 III 의 화합물 또는 그의 염과 화학식 I 의 화합물 을 형성하는 조건 하에서 접촉시키는 것을 포함하는,

하기 화학식 I 의 화합물을 제조하는 방법:
제 20 항에 있어서, 화학식 III 의 화합물의 염은 HCl 염인 방법.
제 20 항에 있어서, 조건이 비극성, 비양자성 용매를 사용하는 것을 포함하는 방법.
제 22 항에 있어서, 용매는 테트라하이드로푸란, 디에틸 에테르, 디메톡시메탄, 디옥산, 헥산, 메틸 tert-부틸 에테르, 헵탄 및 시클로헥산으로 이루어진 군으로부터 선택된 일원인 방법.
제 20 항에 있어서, 조건이 10 ℃ 미만의 온도에서 방법을 수행하는 것을 포함하는 방법.
제 20 항에 있어서, 화학식 I 의 화합물은 50 %이상의 수율로 제공되는 방법.
제 20 항에 있어서, 화학식 I 의 화합물은 65 %이상의 수율로 제공되는 방법.
제 20 항에 있어서, 화학식 I 의 화합물은 75 %이상의 수율로 제공되는 방법.
제 20 항에 있어서, 화학식 I 의 화합물이 그램 스케일 또는 킬로그램 스케일로 제조되는 방법.