KR20040101301A

KR20040101301A - 국소 피부 사용 및 치료용 제제

Info

Publication number: KR20040101301A
Application number: KR10-2004-7014277A
Authority: KR
Inventors: 보트리차드알; 게버트마크에스; 클릭켄팔크리스티안; 마조이사벨; 토마스사비에르장-폴
Original assignee: 다우 코닝 코포레이션; 제넨코 인터내셔널, 인코포레이티드
Priority date: 2002-03-11
Filing date: 2003-03-11
Publication date: 2004-12-02
Also published as: CN1646145A; AU2003265225A8; WO2003101404A3; JP4880899B2; AU2003265225A1; EP1487462A2; CA2478871C; CA2478871A1; WO2003101404A2; JP2005528425A; US20030180281A1; EP1487462A4; CN100496611C

Abstract

본 발명은 활성제 방출용 국소 제제 및 국소 제제의 제조 및 사용 방법에 관한 것이다. 제제는 외부 상 내에 분산된 내부 상을 가질 수 있다. 내부 상은 친수성 담체 및 활성제일 수 있다. 외부 상은 실리콘 매트릭스일 수 있다. 연구자 또는 다른 독자가 기술적인 설명의 주제를 신속하게 확인하도록 하는 요약서를 필요로 하는 규정에 부합되도록 본 요약서가 제공됨을 강조한다. 이는 청구의 범위의 범위 또는 의미를 해석하거나 제한하는 데에 사용되지 않는다는 이해와 함께 제출한다.

Description

국소 피부 사용 및 치료용 제제{Preparations for topical skin use and treatment}

본 발명은 일반적으로 국소 피부 치료용 제제에 관한 것이며, 특히 활성제의 서방출을 제공하는 실리콘 매트릭스 및 친수성 담체를 포함하는 제제에 관한 것이다.

실리콘은 알킬실록산 또는 오가노실록산 화학을 기본으로 하는 화합물이며, 약제학적 적용에서 부형제 및 가공 조제로서 사용된 폴리디메틸실록산 물질을 포함한다. 이들 물질 중의 어떤 것은 약전 화합물의 위치를 획득하였다. 서방성 약물 시스템에서, 특히 특정한 특성의 연합이 제품 디자인의 요건, 즉 생물학적 적합성 및 다양성에 부합되는 데에 중요한 적용에서 이러한 실리콘 화합물의 용도는 당해 분야에 공지되어 있다. 이식, 삽입, 점액접착성, 경피 및 국소 형태를 포함하여 신규한 오래 지속되는 약물 전달 적용은 실리콘의 독특한 고유 특성에 의존한다. 이러한 전달 시스템은 표적 부위에 생물학적으로 적합한 역학을 갖는 활성 분자를 서방출시키며, 부작용(예: 피크 용량, 낮은 승낙도, 및 전통적인 경구 및 비경구 투약에서 일반적으로 관찰되는 약물 분해)을 방지한다.

경피 약물 전달 시스템은 7일까지 피부에 손상을 입히지 않고 접착되는 접착성 패치를 함유하는 약물로 이루어진다. 패치 디자인은 활성제의 방출을 억제하며, 다음에 전신 활성을 위한 순환계에 의해 유기체를 통해 운반된다. 진입 지점으로서 피부를 사용하여, 접착성 깁스 또는 박막 형성 및 실재 물질(예: 크림 또는 겔)로 이루어진 국소 형태는 국소 치료(근육 또는 피부 질환)에 사용된다. 그러나 이들 경피 약물 전달 시스템은 국소 드레싱 적용(예: 상처 드레싱 및 연고)에 혼입되지 않으며, 여기에서 실리콘 매트릭스 내에 분산된 생화학적 제제는 피부 또는 상처에 방출되어 치유를 촉진시킨다.

따라서, 실리콘의 유리한 특성을 이용하며 활성제의 서방출을 제공할 수 있는 제제가 해당 분야에서 계속 필요하다.

본 발명은 실리콘 매트릭스, 친수성 담체, 및 제제로부터의 방출을 위한 하나 이상의 활성제를 포함하는 국소 제제를 제공함으로써 이러한 요구에 부합된다. 활성제는 단백질, 특히 효소(예: 하이드롤라제 및 글루코스 옥시다제)일 수 있다. 실리콘 매트릭스는 고분자량 폴리디메틸실록산, 느슨하게 또는 약하게 가교결합된 실리콘 탄성중합체, 가교결합된 실리콘 탄성중합체, 예를 들면, 겔(무충전 탄성중합체), 실리카 보강된 고무 또는 포움(여기서, 가교결합은 부가 및 축합 경화 시스템을 사용하여 달성된다), 실리콘 감압성 접착제 및 실리콘-유기 공중합체(예: 실리콘 폴리아미드)를 포함할 수 있다. 제제를 사용하여 드레싱, 연고 등을 생성시킬 수 있다.

본 발명의 한 측면에 따라서, 제제는 손상된 조직을 포함하여 피부 위에 적용될 수 있는 박막 드레싱을 포함할 수 있다. 본 발명의 다른 측면에 따라서, 제제는 패치 드레싱을 포함한다. 본 발명의 또다른 측면에 따라서, 제제는 전개 붕대 드레싱을 포함한다.

본 발명의 다른 측면에 따라서, 제제는 연고를 포함한다. 박막, 패치, 전개 붕대 및 연고는 모두 피부에, 외과적 절개부, 상처 또는 다른 피부 병소, 마찰, 긁힘, 할큄 또는 다른 손상 조직에 적용할 수 있다. 제제는 액체에 폐색성일 수 있으며, 피부 표면으로부터 감염을 유발하는 미생물의 차단에 효과적이다. 한 양태에서, 활성제(예: 프로테아제)는 효소 죽은조직제거술, 혈병 형성 및 혈병 제거 뿐만 아니라 동일 반응계내 과산화물 및/또는 과산 생성를 위해 상처 부위에서 제제로부터 방출되어 상이한 단계에서 상처 치유를 촉진시킬 수 있다.

바람직한 양태에서, 국소 제제는 실리콘 매트릭스 전체를 통해 분산되는 활성제를 함유하는 친수성 담체의 혼합물을 포함한다. 실리콘 매트릭스와의 혼합물은 본 발명의 이러한 양태의 국소 제제를 형성한다. 친수성 담체는, 예를 들어, 수용성 또는 친수성 성분{예: 폴리비닐 알코올("PVA") 또는 폴리비닐피롤리돈("PVP")}과 혼합될 수 있는, 프로필렌 글리콜의 용액이다. 친수성 담체 및 활성제 혼합물은 유액 또는 분산액인 내부 상을 형성할 수 있으며, 이러한 내부 상은 실리콘 매트릭스(외부 상) 내에 배치된다. 결국, 실리콘계 계면활성제를 첨가하여 내부 상을 매우 작은 소적으로 분산 또는 유화시키고 활성제의 방출을 증진시킬 수 있다.

따라서, 본 발명의 특징은 피부에 활성제의 서방출을 제공하는 데에 유용한 국소 제제를 제공하는 것이다. 본 발명의 이러한 및 다른 특징 및 잇점은 본 발명의 다음 상세한 설명으로부터 명백해질 것이다.

본 발명의 바람직한 양태의 다음 상세한 설명은 다음 도면과 함께 읽는 경우, 가장 잘 이해할 수 있다:

도 1은 본 발명의 양태에 따른 제제로부터 프로테아제의 서방출의 도표이다.

도 2A 및 2B는 본 발명의 양태에 따른 제제로부터 프로테아제 및 리파제의 방출/전달을 나타내는 도표이다.

도 3A 내지 3C는 다양한 양의 친수성 성분을 갖는 제제로부터 프로테아제의 방출을 나타내는 도표이다.

도 4는 다양한 실리콘 매트릭스를 갖는 제제로부터 프로테아제의 방출 비율을 나타내는 도표이다.

도 5는 다양한 패치 두께를 갖는 제제로부터 프로테아제의 방출 비율을 나타내는 도표이다.

도 6은 본 발명의 양태에 따른 연고 제형으로부터 프로테아제의 방출을 나타내는 도표이다.

도 7은 본 발명의 양태에 따른 제제에서 프로테아제의 안정성을 나타내는 도표이다.

도 8은 본 발명의 다른 양태에 따른 제제에서 프로테아제의 안정성을 나타내는 도표이다.

도 9는 본 발명의 또다른 양태에 따른 제제에서 프로테아제의 안정성을 나타내는 도표이다.

도 10은 본 발명의 양태에 따른 제제에서 프로테아제의 안정성을 나타내는도표이다.

본 발명의 한 측면에 따라서, 실리콘 매트릭스가 혼입되는 국소 제제가 제공된다. 제제는 실리콘 매트릭스로부터 활성제의 서방출을 효과적으로 제공한다. 활성제는 친수성 담체와 배합되어 실리콘 매트릭스 내에 분산된 혼합물을 형성한다. 활성제는 실리콘 매트릭스 내에서 안정하게 유지되며, 매트릭스로부터 조절가능하고 자유롭게 방출된다.

본 발명의 양태를 정의하고 기술하기 위해서, 다음 용어는 이후에 나타나는 정의에 일치하는 것으로 이해한다.

활성제는 단백질, 특히 효소를 언급하는 것으로 이해한다.

계면활성제는 현탁 매질에 첨가되어 불혼화성 액체(들) 및 빈번하게 콜로이드 크기를 갖는 극미세 고체 입자의 균질한 최대 분리를 촉진시키는 계면활성제를 언급하는 것으로 이해한다. 계면활성제는 액체 분산 매질에 불혼화성 액체, 소적 또는 미세한 고체 입자의 습윤, 효과적 분포 및 입자 응집에 대한 안정화를 촉진시킨다. 계면활성제는 일반적으로 입자 표면의 완전한 표면 피복을 제공하기에 충분한 양으로 분산 매질에 첨가한다.

드레싱은 피부, 상처 조직, 또는 분비물을 흡수하기 위한 질병 조직에 직접 적용, 외상으로부터 조직의 보호, 조직으로 약제의 투여, 환경으로부터 조직의 보호에 적합하여 출혈을 중지시키고 촉촉한 환경을 유지시키거나 제공하고, 또한 이들이 병행되는, 다양한 종류의 덮개를 언급하는 것으로 이해된다. 예를 들어, 드레싱은 막, 패치, 붕대, 겔 등의 형태로 존재할 수 있다.

유액은 제2 액체 상 내에서 한 액체 상의 일시적 또는 영구적 분산을 언급하는 것으로 이해한다. 일반적으로 액체 중의 하나는 물 또는 수용액이며, 다른 것은 오일 또는 다른 수-불혼화성 액체이다. 제2 액체는 일반적으로 연속적 또는 외부 상으로서 언급된다. 유액은 추가로, 간단한 유액(여기에서, 분산된 액체 또는 내부 상은 간단한 균질 액체이다), 또는 보다 복잡한 유액{여기에서, 분산된 액체 상은 액체 또는 고체 상의 불균질 배합물(예: 이중 유액 또는 다중 유액)이다}으로 분류할 수 있다.

친수성 담체는 활성제에 대한 용매로서 작용하는 본 발명 제제의 상의 하나 이상의 성분을 언급하는 것으로 이해된다. 친수성 담체는 본 발명의 양태에 사용된 실리콘 매트릭스로부터 활성제의 방출을 보조한다.

친수성 성분은 본 발명의 양태에서 친수성 담체 및 활성제의 혼합물에 첨가된 하나 이상의 성분을 언급하는 것으로 이해된다. 친수성 성분은 본 발명의 양태에서 사용된 실리콘 매트릭스로부터 활성제의 방출을 보조할 수 있다.

단백질은 천연, 합성 및 조작된 효소(예: 옥시도리덕타제, 트랜스퍼라제, 이소머라제, 리가제, 하이드롤라제); 항체; 폴리펩타이드; 펩타이드; 호르몬; 시토킨; 성장 인자; 및 다른 생물학적 조절제를 언급하는 것으로 이해된다.

연고는 피부, 상처 조직 및 질병 조직에와 같이 외부 적용하기에 적합한 반고체 제제를 언급하는 것으로 이해된다.

본 발명에 따라서, 제제는 피부, 상처 조직 및 질병 조직에 적용할 수 있는 다양한 국소 드레싱에 사용할 수 있다. 국소 드레싱은 활성제가 아래 피부, 상처조직 및 질병 조직으로 방출 및 적용되게 한다. 추가로, 제제를 사용하여 연고를 생성시킬 수 있고, 연고는 활성제가 아래 피부, 상처 조직 또는 질병 조직으로 방출 및 적용되게 한다.

바람직한 양태에 따라서, 외부 또는 연속 상 내에서 내부 또는 비혼화성 분산된 상을 포함하는 제제가 제공된다. 외부 상은 일반적으로 실리콘 매트릭스를 포함하며, 내부 상은 일반적으로 하나 이상의 활성제를 함유하는 친수성 담체를 포함한다. 추가로, 내부 상은 추가로 적합한 친수성 성분을 포함할 수 있다. 내부 및 외부 상은 본 발명의 제제를 생성시키기에 적합한 방식으로 혼합할 수 있다. 예를 들어, 고전단 믹서를 사용하여 본 발명의 제제의 생성에서 내부 및 외부 상을 혼합할 수 있다. 추가로, 내부 및 외부 상은 손으로 혼합할 수 있다. 내부 상의 소적 크기는 변할 수 있다. 예를 들어, 소적 크기는 약 0.1 내지 약 2000㎛, 약 0.1 내지 약 1000㎛, 약 0.1 내지 약 500㎛, 약 0.1 내지 약 200㎛ 또는 약 0.1 내지 약 100㎛일 수 있다.

내부 상은 하나 이상의 활성제를 함유하는 적합한 친수성 담체를 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 한 양태에서, 친수성 담체는 승온에서 액체이며, 적합한 용매에 용해된 고체 물질(예: 소르비톨, 만니톨, 락토스, 염화나트륨 및 시트르산)을 사용할 수도 있다. 예를 들어, 활성제는 프로필렌 글리콜(PPG), 폴리에틸렌 글리콜, 폴록사머, 글리세린, 알코올, 다가 알코올, 물 또는 다른 적합한 친수성 담체의 용액에 함유될 수 있다.

내부 상은 추가로 수용성 및 친수성 성분을 포함할 수 있다. 친수성 성분은일반적으로 활성제용 용매로서 사용되지 않는다. 친수성 성분은 실리콘 매트릭스로부터 활성제의 방출 비율을 증진시킬 수 있으며, 폴리비닐 알코올(PVA 또는 PVOH)(예: Mowiol®3-83; 제조원: Clariant Corporation, Charlotte, N.C.) 또는 폴리비닐 피롤리돈(PVP), 예를 들어, Luviskol®K-30( 제조원: BASF Corporation, Mount Olive, N.J.)을 포함할 수 있다. 내부 상 용액은 약 35중량% 이하의 PVA 수용액 또는 약 50중량% 이하의 PVP 수용액을 포함할 수 있다. 본 발명에 따른 한 양태에서, 친수성 성분은 또한 물에 희석된 수-증점제, 예를 들어, 셀룰로스 유도체(예: 카복시메틸 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 나트륨카복시메틸 셀룰로스, 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이드록시프로필메틸 셀룰로스), 폴리아크릴산, 알기네이트 유도체, 키토산 유도체, 젤라틴, 펙틴, 폴리에틸렌 글리콜, 프로필렌 글리콜, 글리세롤 및 다른 적합한 친수성 분자 및 거대분자일 수 있으며, 여기에서 활성제는 가용성이거나 가용성이 아닐 수 있다. 이러한 분자는 친수성 거대분자를 포함한다.

특정한 이론에 구애받으려 하지 않는다면, 친수성 성분은 실리콘 매트릭스 내에 구멍, 틈, 균열 또는 열구를 형성할 수 있으며, 이는 활성제의 방출을 용이하게 한다고 고려된다. 내부 상의 형성에서 친수성 담체에 증가된 양의 PVA 또는 PVP의 첨가에 의해 방출되는 활성제의 비율을 증가시킬 수 있다. 또한, 내부 상에서 친수성 담체의 양의 증가에 의해 방출되는 활성제의 비율을 증가시킬 수 있다.

추가로, 부형제를 사용하여 활성제를 안정화시키거나 상용화시킬 뿐만 아니라 실리콘 매트릭스로부터 이의 방출을 보조할 수 있다. 본 발명과 함께 사용하기 위한 실리콘 부형제는 실리콘 폴리에테르, 실리콘 유체, 디메티콘, 디메티콘 코폴리올, 디메티콘올, 실리콘 알킬 왁스, 실리콘 폴리아미드 등을 포함할 수 있다. 다른 가능한 부형제는 다음을 포함하지만, 이로 제한되지는 않는다: 친수성 유기물질, 예를 들어, (다)당류 유도체, 아크릴레이트 유도체, PVA 유도체, 글리콜, 글리세롤, 글리세라이드 유도체, 프로필렌 글리콜(PPG), 폴리에틸렌 글리콜, 폴록사머, 글리세린, 알코올, 셀룰로스 유도체, 폴리아크릴산, 알기네이트 유도체, 키토산 유도체, 젤라틴, 펙틴 및 다가 알코올.

본 발명의 실리콘 매트릭스는 이의 기술이 본 발명과 함께 사용하기 위한 고분자량 폴리디메틸실록산을 교시하기 위해서 본원에 참조로 인용되는 EP 제966972 A1호, WO 01/19190 A1 및 WO 200122923에 기술된 바와 같은, 고분자량 폴리디메틸실록산(12,500cSt 내지 검 타입 물질)으로 이루어질 수 있다.

실리콘 매트릭스는 느슨하게 또는 약간 가교결합된 실리콘 탄성중합체, 예를 들어, Dow Corning® 9040 SILICONE ELASTOMER BLEND(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)으로 이루어질 수 있다. 느슨하게 또는 약간 가교결합된 실리콘 탄성중합체는 휘발성 실리콘 용매(D5)에 배치된 느슨하게 가교결합된 폴리디메릴실록산을 기술하는 다음 미국 특허에 기술되어 있으며, 이의 기술은 본원에서 참조로 인용된다: 미국 특허 제6,200,581호, 제6,238,657호, 제6,177,071호, 제6,168,782호 및 제6,207,717호. 휘발성 실리콘 용매가 증발하면서, 약간 또는 느슨하게 가교결합된 실리콘 탄성중합체는 페이스트-유사 조도로부터 탄성중합체 실리콘 겔로 증점된다.

실리콘 매트릭스는 또한, 본 발명과 함께 사용하기 위한 실리콘 겔을 교시하기 위해서 본원에 참조로 인용되는 미국 특허 제5,145,937호 및 제4,991,574호 및 EP 제0955347호에 기술된 바와 같은 무충전 탄성중합체로 이루어질 수 있으며, 예를 들어, Dow Corning® 7-9800 SSA KIT(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)이다.

실리콘 매트릭스는 또한, 이의 기술이 본 발명과 함께 사용하기 위한 실리콘 포움을 교시하기 위해서 본원에 참조로 인용되는 EP 제0425164호, EP 제0506241호 및 미국 특허 제5,010,115호에 기술된 바와 같은 세포형 탄성중합체(무충전 또는 실리카로 보강됨)로 이루어질 수 있으며, 예를 들어, Dow Corning® 7-0192 FOAM PART A 및 PART B(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)이다. 또한, 실리콘 매트릭스는 부가 경화물(겔과 유사하지만, 실리카로 보강됨) 또는 축합 경화물과 같은 실리콘 고무로 이루어질 수 있으며, 예를 들어, Dow Corning® 7-5300 FILM-IN-PLACE COATING 또는 Dow Corning® 7-FC4210 FILM FORMING BASE AND CURE AGENT(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)이다.

최종적으로, 실리콘 매트릭스는 용매계이거나 고온 용융될 수 있는 실리콘 감압성 접착제(실리콘 PSA)(예: 실리콘 중합체 중의 실리케이트 수지)로 이루어질 수 있으며, 예를 들어, 이의 기술이 본 발명과 함께 사용하기 위한 실리콘 PSA를 교시하기 위해서 본원에 참조로 인용되는 미국 특허 제2,736,721호, 제2,814,601호, 제2,857,356호, 제3,528,940호 및 제6,337,086호에 기술된 것이다. 예를 들어, Dow Corning® PSA 7-4402(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)를 사용할 수 있다.

본 발명의 실리콘 매트릭스는 추가로 실리콘계 계면활성제, 예를 들어, Dow Corning® 9011 SILICONE ELASTOMER BLEND(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)를 포함할 수 있으며, 이는 친수성 담체 및 활성제의 소적으로의 분산 또는 유화를 용이하게 하고, 이들 소적이 큰 소적으로 응집되는 것을 방지한다. 예를 들어, 내부 상의 소적은, 실리콘계 계면활성제를 사용하는 경우, 약 0.1 내지 500 im일 수 있다. 실리콘계 계면활성제는 또한 사용하여 본 발명의 국소 드레싱의 형성에서 안정한 유액을 생성시킬 수 있다. 또한, 본 발명의 외부 상은 실리콘 매트릭스, 예를 들어, 휘발성 실리콘(즉, D5(Dow Corning® 245 유체), MDM(Dow Corning® 200 유체 1 cSt)), 또는 유기 용매(즉, 헵탄 또는 에틸 아세테이트)를 전달하기 위한 희석제를 포함할 수 있다.

본 발명의 활성제는 일반적으로 단백질(예: 효소)이며, 이는 친수성 담체로 혼입된다. 활성제는 친수성일 수 있다. 드레싱에 혼입하기에 적합한 효소는 어떠한 효소(들)라도 될 수 있다. 효소는 시판되는 유형, 개선된 유형, 재조합 유형, 원형, 자연에서 발견되지 않는 변형 및 이들의 혼합물을 포함하지만, 이로 제한되지는 않는다. 예를 들어, 적합한 효소는 하이드롤라제, 큐티나제, 옥시다제, 트랜스퍼라제, 리덕타제, 헤미셀룰라제, 에스테라제, 이소머라제, 펙티나제, 락타제, 퍼옥시다제, 락카제, 카탈라제 및 이들의 혼합물을 포함한다. 하이드롤라제는 프로테아제(세균, 진균, 산, 중성 또는 알칼리성), 아밀라제(알파 또는 베타), 리파제, 만나나제, 셀룰라제, 콜라게나제 및 이들의 혼합물을 포함하지만, 이로 제한되지는 않는다.

본 발명의 제제에 포함되기에 적합하게 고려될 수 있는　리파제　효소는 영국　특허 제1,372,034호에 기술된, 슈도모나스 족의 미생물, 예를 들어, 슈도모나스 스투체리(Pseudomonas stutzeri) ATCC 19.154; 미국 특허 제5,389,536호에 기술된 슈도모나스 멘도키나(Pseudomonas mendocina); 및 미국 특허 제5,153,135호에 기술된 슈도모나스 슈도알칼리게네스(Pseudomonas pseudoalcaligenes)에 의해 생성된 것을 포함한다. 리파제는 추가로 미생물 슈도모나스 플루오레센스(Pseudomonas fluoroscens) IAM 1057에 의해 생성된, 리파제의 항체와 양성 면역학적 교차 반응을 나타내는 것을 포함한다. 이 리파제는 상품명 리파제 P "Amano"로 수득가능하다(제조원: Amano Pharmaceutical Co. Ltd., Nagoya, Japan). 리파제는 M1 Lipase® 및 Lipomax®(제조원: Gist-Brocades NV, Delft, Netherlands) 및 Lipolase®(제조원: Novozymes A/S, Bagsvaerd, Denmark)를 포함한다. 리파제는 일반적으로 실리콘 매트릭스의 약 0.0001 내지 약 2중량%의 활성 효소 수준으로 또는 약 0.001 내지 약 20mg/g으로 실리콘 매트릭스에 혼입된다.

프로테아제는 일반적으로 단백질 또는 펩타이드의 펩타이드 결합을 분리시키는 데에 작용하는 카보닐 하이드롤라제이다. 본원에서 사용된 "프로테아제"는 천연 프로테아제 또는 재조합 프로테아제를 의미한다. 천연 프로테아제는 알파-아미노아실펩타이드 하이드롤라제, 펩티딜아미노산 하이드롤라제, 아실아미노 하이드롤라제, 세린 카복시펩티다제, 메탈로카복시펩티다제, 티올프로테이나제, 카복실프로테이나제 및 메탈로프로테이나제를 포함한다. 세린, 메탈로, 티올 및 산 프로테아제 뿐만 아니라 엔도 및 엑소-프로테아제가 포함된다.

프로테아제는 동물, 식물 또는 미생물 기원의 것일 수 있다. 예를 들어, 프로테아제는 세균 기원의 세린 단백질분해 효소일 수 있다. 정제된 또는 비정제 형태의 효소를 사용할 수 있다. 화학적으로 또는 유전적으로 개질된 돌연변이체에 의해 생성된 프로테아제 효소는, 밀접한 구조적 효소 변이체이므로, 규정에 의해 포함된다. 바실루스(Bacillus), 특히 서브틸라제(subtilase), 예를 들어, 바실루스 서브틸리스(Bacillus subtilis), 바실루스 렌투스(Bacillus lentus), 바실루스 아밀로리퀘파시엔스(Bacillus amyloliquefaciens) 및/또는 바실루스 리케니포르미스(Bacillus licheniformis)로부터 수득된 세균 세린 단백질분해 효소가 프로테아제 효소로 특히 바람직하다. 본 발명의 조성물에 포함하기 위해 고려될 수 있는 적합한 상업적 단백질분해 효소는 Alcalase®, Esperase®, Durazym®, Everlase®, Kannase®, Relase®, Savinase®, Maxatase®, Maxacal® 및 Maxapem® 15(단백질 조작된 Maxacal); Purafect®, Properase®(단백질 조작된 Purafect) 및 서브틸리신 BPN 및 BPN'를 포함한다.

프로테아제 효소는 또한, 자연에서 밝혀지지 않은 아미노산 서열을 갖는 프로테아제 변이체를 포함하며, 이는 자연에서 밝혀지지 않은 상이한 아미노산 서열을 치환시킴으로써 전구체 프로테아제로부터 유도되고, 이는 미국 재특허 제34,606호; 미국 특허 제5,700,676호; 제5,972,682호 및/또는 제6,482,628호(이들은 본원에서 참조로 이의 전체가 인용된다)에 기술된 바와 같이, 바실루스 아밀로리퀘파시엔스 서브틸리신의 넘버링에 따라서 +76, +87, +99, +101, +103, +104, +107, +123, +27, +105, +109, +126, +128, +135, +156, +166, +195, +197, +204, +206,+210, +216, +217, +218, +222, +260, +265 및/또는 +274로 이루어진 그룹으로부터 선택된 것과 동일한 위치와 동일한 프로테아제에서 특정 위치에서 아미노산 잔기를 상이한 아미노산으로 치환시킴으로써 전구체 프로테아제로부터 유도된다.

예시적 프로테아제 변이체는 미국 재특허 제34,606호에 기술된 바와 같이, 바실루스 렌투스로부터 유도된 서브틸리스 변이체를 포함하며, 이후에는 프로테아제 A로 언급된다. 다른 적합한 프로테아제는 미국 특허 제5,700,676호에 기술된 바와 같이, 바실루스 아밀로리퀘파시엔스로부터 유도된 Y217L 변이체이며, 이후에는 프로테아제 B로 언급된다. 또한, 본원에서 프로테아제 C 및 프로테아제 D라 명명하는 것이 적합하다: 프로테아제 C는 미국 특허 제6,482,628호에 기술된, 변이된 세균 세린 단백질분해 효소이며, 프로테아제 D는 미국 특허 제5,972,682호에 기술된, 변이된 세균 세린 단백질분해 효소이다.

본 발명의 수행에 유용한 다른 프로테아제는 Savinase®, Esperase®, Maxacal®, Purafect®, BPN', 프로테아제 A, 프로테아제 B, 프로테아제 C, 프로테아제 D 및 이들의 혼합물로 이루어진 그룹으로부터 선택할 수 있다. 프로테아제 효소는 일반적으로 본 발명의 제제에, 실리콘 매트릭스의 약 0.01 내지 약 0.5중량%, 또는 약 0.1 내지 약 10.0mg/g, 바람직하게는 약 0.1 내지 약 5.0mg/g의 수준으로 존재한다.

당해 분야의 전문가는 본 발명은 상기 효소로 제한되지 않음을 이해한다. 추가로, 당해 분야의 전문가는 하나 이상의 활성제가 본 발명의 국소 제제에 사용될 수 있음을 이해한다.

활성제는 다양한 작용을 수행할 수 있다. 예를 들어, 매트릭스는 괴사 조직 및 일반적 상처 청정, 혈병 형성 및 혈병 제거 효소의 국소 제거를 위한 프로테아제 및 다른 효소 죽은조직제거 제제, 과산화물, 과산, 활성화 산소 종, 및 자체 멸균, 항감염 및 치유의 촉진을 위한 항-부착 촉매성 길항제를 생성하는 제제, 및 피부 치료제 등을 방출할 수 있다.

본 발명에 따른 제제는 적당량의 성분을 포함할 수 있다. 예를 들어, 외부 상은 국소 제제의 약 50.000 내지 약 99.999%를 구성할 수 있다. 내부 상은 약 0.001 내지 약 2.000%의 활성제 및 약 0.001 내지 약 49.999%의 친수성 담체를 포함할 수 있다. 계면활성제를 제제에 첨가하는 경우, 계면활성제는 제제의 약 0.001 내지 약 60.000%, 더욱 일반적으로는 약 0.100 내지 약 50.000%를 구성할 수 있다. 친수성 성분을 첨가하는 경우, 친수성 성분은 제제의 약 0.001 내지 약 50.000%를 구성할 수 있으며, 친수성 성분은 더욱 일반적으로는 국소 제제의 약 5.000% 내지 약 40.000%를 구성할 수 있다. 다른 양태에서, 친수성 성분은 제제의 약 10.000 내지 약 35.000%를 구성할 수 있다. 또다른 양태에서, 친수성 성분은 제제의 약 15.000 내지 약 35.000%를 구성할 수 있다.

본 발명에 따른 제제는 활성제를 친수성 성분 용액과 함께 함유하는 친수성 담체 용액(예: 프로필렌 글리콜 용액)을 회전 믹서 상에서 약 30rpm으로 약 15분 동안 혼합함에 의해 내부 상을 제조함으로써 생성시킬 수 있다. 외부 상의 성분(예: 실리콘 매트릭스 및 실리콘계 계면활성제)을 예비 혼합하여 균질한 혼합물을 수득한다.

내부 상 및 외부 상을 둘 다 개별적으로 제조한 후, 유화 또는 분산의 기계적 작업을 수행할 수 있다. 바람직하게는, 내부 상을 외부 상에 첨가하고, 고전단 실험실 믹서, 즉 정방형 구멍 고전단 스크린을 갖는 Silverson L4R(제조원: Silverson Machines, Inc., East Longmeadow, MA)을 사용하여 격렬하게 교반시킨다. 이러한 고전단 혼합에 의해 약 0.1 내지 50㎛, 약 0.1 내지 10㎛ 및 약 0.1 내지 5㎛의 직경을 갖고 매우 좁은 크기 분포를 갖는 소적을 생성한다. 혼합물의 교반은 약 5400rpm으로 약 90초동안 수행할 수 있다. 다음에, 수득된 혼합물은 적당한 용기로 옮겨 경화시킬 수 있다. 용기는 사이징하고/거나 성형시켜 목적하는 패치를 제공할 수 있다.

또는, 드레싱은 수동 혼합하여 제조할 수 있다. 본 발명의 다른 양태에 따라서, 내부 및 외부 상은 위에 기술된 바와 같이 제조하고, 내부 상은 외부 상에 첨가한다. 다음에, 혼합물을 작은 주걱을 사용하여 순환 동작을 적용함으로써 약 30초동안 용기에서 격렬하게 교반시켜 드레싱을 생성시킨다. 내부 및 외부 상의 수동 혼합에 의해 약 10 내지 약 1000㎛의 직경을 갖는 내부 상 소적을 생성할 수 있다.

본 발명의 제제는 피부에 적용하기 전에 막으로 캐스팅시키거나 피부에 직접 적용할 수 있으며, 여기에서 이들은 동일 반응계내에서 중합된다. "전개" 막은 피부에 적용하는 경우에 중합되며, 본 발명에 따라서 튜브, 낭, 롤, 스프레이, 패치, 붕대 등으로부터 크림 또는 연고로서 전달될 수 있다. 막은 부가 경화물(겔과 유사하지만, 실리카로 보강됨) 또는 축합 경화물과 같은 실리콘 고무, 예를 들어,Dow Corning® 7-5300 FILM-IN-PLACE COATING(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)을 외부 상으로 혼입시킴으로써 생성시킬 수 있다. 내부 상과 혼합시에, 수득된 유액은 경화시키고, "전개" 막, 패치 또는 붕대를 제공하며, 이는 피부에 적용하는 경우, 중합되며 활성제(예: 프로테아제)를 효과적으로 방출한다. 유액은 기재 위로 전개되어 목적하는 두께를 수득할 수 있다. 당해 분야의 전문가는 본 발명의 드레싱을 적합한 방법에 의해 제조할 수 있으며, 제조 방법은 본원에 기술된 것으로 제한되지 않음을 이해한다.

본 발명에 따른 연고는 실리콘 탄성중합체(예: Dow Corning® 9041 SILICONE ELASTOMER BLEND) 및 실리콘 계면활성제(예: Dow Corning® 5200 FORMULATION AID)(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)와 함께 교반시켜 외부 상을 형성시킴으로써 생성시킬 수 있다. 내부 상은 활성제 용액 및 친수성 담체(예: PVA)를 함께 혼합시켜 제조할 수 있다. 내부 상은 내부 상을 일정하게 교반시키면서 외부 상으로 서서히 첨가하여 외부 상으로 혼입시킬 수 있다.

당해 분야의 전문가는 본 발명의 제제가 주어진 적용에 대해 활성제의 방출 비율을 최적화하도록 제조할 수 있다. 예를 들어, 실리콘 매트릭스는 활성제 방출의 증가 또는 감소 비율을 제공하도록 선택할 수 있다. 활성제 방출의 비율은 친수성 성분(예: PVA 및 PVP)을 실리콘 매트릭스에 첨가하여 증가시킬 수 있다. 유사하게, 증가량의 친수성 담체를 첨가하여 활성제 방출의 비율을 증가시킬 수 있으며, 예를 들어, 약 50중량% 이하의 친수성 담체를 사용하여 제제를 생성시킬 수 있다. 또는, 실리콘 매트릭스는 활성제 방출의 비율을 증가시키도록 선택할 수 있다. 예를 들어, 낮은 가교결합 밀도를 갖는 실리콘 매트릭스는 높은 가교결합 밀도를 갖는 실리콘 매트릭스보다 빠른 활성제 방출 속도를 제공한다.

또한, 드레싱 패치의 두께를 변화시켜 활성제 방출 비율에 영향을 줄 수 있다. 패치의 두께는 하향 조절하여 활성제 방출 비율을 증가시킬 수 있다. 추가로, 드레싱은 공기에 더욱 폐색성이도록 제조할 수 있다. 드레싱의 폐색성이 증가하면서, 활성제의 방출 비율은 증가할 수 있다.

유사하게, 상처 베드의 파라미터는 증가 또는 감소되는 활성제 방출 비율을 유발할 수 있다. 예를 들어, 상처 베드에서 수분의 양이 증가하면, 활성제 방출 비율은 또한 증가할 수 있다. 또는, 상처 베드의 온도가 증가하면, 활성제 방출 비율은 증가할 수 있다. 따라서, 제제의 다양한 파라미터는 상처 베드 및 드레싱 또는 연고 조건의 주어진 세트에 대해 목적하는 방출 비율로 활성제를 최적으로 전달하도록 선택할 수 있다.

일반적으로, 제제는 주어진 시간동안 상당한 비율의 활성제 활성을 상실하지 않으면서 저장할 수 있는 드레싱 또는 연고를 제공해야 한다. 예를 들어, 드레싱 또는 연고는 실온에서 6개월 이하의 기간동안 유효 비율 이상의 활성을 상실하지 않으면서 안정할 수 있다.

본 발명을 더욱 용이하게 이해하기 위해서, 다음 실시예를 참조하며, 이는 본 발명을 예시하려는 것이지, 이의 범위를 제한하려는 것은 아니다.

실시예 1

제1 실험을 수행하여 실리콘 매트릭스로부터 프로테아제의 서방성을 평가하였다. 느슨하게 또는 약간 가교결합된 실리콘 탄성중합체 조성물(Dow Corning® 9040) 및 실리콘계 계면활성제(Dow Corning® 9011)(둘 다 Dow Corning Corporation(Midland, MI)에서 시판됨)를 사용하여 Dow Corning® 9040 및 Dow Corning® 9040/9011 실리콘 탄성중합체 제형을 형성시켰다. 비 렌투스, 프로필렌 글리콜에 용해된 원액으로부터 유도된 1.1mg/ml 프로테아제 A를 양 쪽 Dow Corning® 조성물에 첨가하였다. 원액의 5ml 샘플을 20g의 9040 제형에 및 20g의 9040/9011 제형에 첨가하며, 이는 10g의 9040 제형 및 10g의 9011 제형을 포함한다. 효소 원액 대신에 9040 및 9040/9011 및 물을 포함하는 대조를 제조하였다. 또한, 실리콘 매트릭스의 성분이 프로테아제를 억제하는가를 측정하기 위해서, 동량의 Dow Corning® 9040 및 9040/9011 효소 제형을 갖는 추가 샘플, 및 프로테아제가 유리된, 물을 포함하는 대조를 제조하였다. 이들 억제 대조는 이러한 프로테아제-유리 샘플로부터 분취액을 취하고, 효소 제형 샘플로부터 동량의 분취액에 이를 첨가함으로써 제조하여 프로테아제 활성의 억제에 대해 관찰하였다. 다음에, 샘플 물질을 후드에서 2주동안 공기 건조시켰다.

Dow Corning® 9040/9011 제형을 박막으로 건조시키고, Dow Corning® 9040 조성물을 케이크로 건조시킨다. 샘플을 문헌에 기술된 바와 같이, 프로테아제에 대한 표준 분석을 사용하여 N-석시닐-L-Ala-L-Ala-L-Pro-L-Phe-p-니트로아닐리드(SAAPFpNA)를 사용하여 분석하였다(pH 6.5, 25℃)[참조: Delmer, E.G., et al. (1979) Anal. Biochem. 94, 316-320; Achtstetter, Arch. Biochem. Biophys207:445-54(1981)]. 분석에 의해 방출된 프로테아제를 mAb/분 단위로 410nm에서 Hewlett Packard 8451A 다이오드 분석 분광광도계를 사용하여 측정하였다. 본 첫 실시예의 결과는 다음 표 1에 나타내었다:

프로테아제의 방출

시간(시간)	1	2	3	5
9040 + 프로테아제	3.21	3.58	3.71	4.04
9040(억제)	2.95	3.24	3.33	4.04
9040/9011 + 프로테아제	0.995	0.175	0.205	0.294
9040/9011(억제)	0.912	0.163	0.197	0.256
9040/물 대조	0.000	0.000	0.000	0.000
9040/9011 물 대조	0.000	0.000	0.000	0.000

* 나타낸 단위는 방출된 프로테아제의 mAb/분이다.

이들 데이터는 실리콘 매트릭스로부터 프로테아제의 유효 방출을 5시간에 걸쳐 나타낸다. 데이터는 2주 이상 건조하게 저장된 물질로부터의 것이다. 프로테아제-유리 실리콘 제형의 대조 및 억제 대조를 프로테아제를 함유하는 실리콘 제형과 동일한 용량으로 및 동일한 기간동안 항온처리하였다. 억제 샘플은 효소 제형의 프로테아제 활성보다 낮은 프로테아제 활성의 완전히 일정한 값을 나타낸다. 결과는 약간 몇몇 억제 화합물이 추가 제형을 효소 샘플에 첨가하는 경우에 나타날 수 있음을 지시한다.

실시예 2

실리콘 매트릭스로부터 프로테아제의 서방성을 평가하는 다른 실험을 수행하였다. 폴리에틸렌 글리콜 원액에서 0.81mg/ml 프로테아제 A의 0.5ml 분취액을 작은 폴리프로필렌 칭량 보트로 옮겼다. 다음에, 5.0ml의 실리콘 고무 조성물(Dow Corning® 7-5300; 제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI)을 프로테아제 용액에 첨가하고, 이를 첨가하는 15초 내에 혼합하였다. Dow Corning® 7-5300 조성물은 "전개" 막, 패치 또는 붕대로서의 용도를 가짐을 고려한다. 다음에, 혼합물을 30분동안 경화시켰다. 경화시킨 후, 혼합물을 1.0ml의 증류수를 사용하여 3회 세척하였다. 각각의 세척물은 분취액에 대해 SAAPFpNA 분석을 사용하여 위에 언급된 바와 같이 분석하고, 세척물 중의 효소의 양을 측정하였다. 다음에, 조성물을 이의 측면 상에서 15분동안 건조시킨 후, 추가로 15분동안 평평하게 놓는다. 최종적으로, 5.0ml의 증류수를 칭량 보트에 첨가하고, 수초동안 부드럽게 와동시켰다. 200㎕의 분취액을 시점 0에 취하였다. 칭량 보트를 계속해서 와동시키고, 200㎕를 1시간마다 취하였다.

본 실험의 결과는 도 1에 보고되어 있다. 9%의 프로테아제 활성이 세척물에서 회복되고, 3.8% 프로테아제가 실리콘 매트릭스로부터 4시간에 걸쳐 방출되었다.

Dow Corning® 7-5300 실리콘 고무 조성물은 리파제 방출에 대해, 피. 멘도키나로부터 유도된 리파제를 사용하여, 위에서 직접 기술된 방법에 의해 추가로 검사하였다. mAbs/분 단위로 본 실험의 결과는 다음 표 2에 기재되어 있다:

리파제 방출

시간(시간)	0	1	2	3	6.5	9
리파제 활성	0.0268	0.0264	0.0387	0.0476	0.0624	0.0787
% 전체	0.073	0.073	1.06	1.3	1.71	2.16

18%의 리파제 활성이 세척물에서 회복되고, 2.2% 리파제가 9시간에 걸쳐 방출되었다.

도 2A는 프로테아제 A의 방출/전달을 나타내고, 도 2B는 Dow Corning® 7-5300 실리콘 고무 용액으로부터 리파제의 방출/전달을 나타낸다. 도면은 실리콘 매트릭스로부터 첨가된 효소의 약 2 내지 4%의 시간에 걸친 선형 방출을 나타낸다.

실시예 3

실리콘 매트릭스로부터 프로테아제 A의 서방성에 대한 친수성 첨가제의 효과를 평가하는 또다른 실험을 수행하였다. 먼저, 시험 드레싱 또는 특히, 프로테아제를 함유하는 패치를 작은 페트리 접시(약 3cm의 직경)에 캐스팅시켜 패치의 총량이 일정하고(약 2g) 패치 중의 효소의 농도가 또한 일정하도록 하였다(패치 g당 약 0.6mg의 제제). 패치는 느슨하게 또는 약간 가교결합된 실리콘 탄성중합체 조성물(Dow Corning® 9040) 및 실리콘계 계면활성제(Dow Corning® 9011)로 이루어지며, 이들은 둘 다 Dow Corning Corporation(Midland, MI)으로부터 시판된다. 또한, Dow Corning® 7-5300(실리콘 고무 조성물)을 또한 시험하였다. 추가로, 제형은 다양한 양의 PVA, 높은 프로필렌 글리콜 수준에서 PVA, 또는 교반에 의해 첨가된 PVP를 함유한다.

효소 방출은 두가지 방법을 사용하여 평가하였다. 제1 방법에서, 패치를 세척하여 패치의 표면에 나타날 수 있고 패치 표면에 매우 근접한 효소를 제거하였다. 약 1ml의 용해 완충액(pH 5.4에서 10mM 트리스, 10mM 염화칼슘 및 0.005% Tween 80)를 페트리 접시에 시험 패치의 상부에서 첨가하였다. 다음에, 완충액을20초동안 와동시키고, 완충액을 분석하기 위해 에펜도르프(Eppendorf) 튜브로 경사시켰다. 세척 단계를 3회 반복하고, 효소 활성은 각각의 세척물에 대해 측정하였다. 결과를 요약하여 세척 과정 동안에 방출된 효소의 총량을 제공하였다. 효소의 이 양은 시점 0에서 도 3A 내지 3C에 포함되었다.

대체 방법은 세척 단계를 포함하지 않는다. 약 5ml의 용해 완충액을 시험 패치의 상부에 피펫팅하고, 페트리 접시를 뚜껑으로 덮어 증발을 없앴다. 다음에, 시험 패치 및 용해 완충액을 함유하는 페트리 접시를 약 75rpm으로 타원형 믹서 상에서 와동시키고, 용해 완충액의 10㎕ 분취액을 효소 활성을 분석하기 위해 1시간 증분으로 제거하였다. 분취액을 검정 완충액(pH 8.6에서 100mM 트리스 및 0.005% Tween 80)를 함유하는 큐벳으로 직접 피펫팅하고, 효소 활성은 자외선/가시광선 분광계 상에서 측정하고, 용해 완충액 중의 효소의 농도는 mg/ml로 제공한다.

도 3A는 다양한 양의 PVP 및 높은 PG(프로필렌 글리콜) 함량을 갖는 Dow Corning® 9040/9011 실리콘 매트릭스로부터 효소의 방출을 나타낸다. 도 3A에서 보여지는 바와 같이, 실리콘 매트릭스에 다량의 친수성 PVA의 첨가는 효소의 방출 비율을 증가시킨다. 유사하게, 도 3B는 다양한 PVA 수준에서 Dow Corning® 7-5300 제형으로부터 방출된 프로테아제 A의 비율을 나타낸다. 그래프로부터 볼 수 있는 바와 같이, 방출 비율은 PVA의 양이 증가하면서 증가한다. 도 3C는 다양한 양의 PVP를 갖는 Dow Corning® 9040/9011 실리콘 매트릭스로부터 효소의 방출을 나타낸다. 도 3C에서 보여지는 바와 같이, 실리콘 매트릭스에 친수성 PVP의 첨가는 효소의 방출 비율을 증가시킨다.

실시예 4

실리콘 매트릭스로부터 프로테아제 B의 서방성에 대한 실리콘 매트릭스의 효과를 평가하는 실험을 수행하였다. 먼저, 시험 드레싱 또는 특히, 프로테아제를 함유하는 패치를 작은 페트리 접시(약 3cm의 직경)에 캐스팅시켜 패치의 총량이 일정하고(약 2g) 패치 중의 효소의 농도가 또한 일정하도록 하였다(패치 g당 약 0.6mg의 제제). 패치는 느슨하게 또는 약간 가교결합된 실리콘 탄성중합체 조성물(Dow Corning® 9040) 및 실리콘계 계면활성제(Dow Corning® 9011)로 이루어지며, 이들은 둘 다 Dow Corning Corporation(Midland, MI)으로부터 시판된다. 또는, 패치는 Dow Corning® PSA 7-4402 감압성 접착제 또는 Dow Corning® 7-FC-4210 세포형 탄성중합체로 이루어지며, 이들은 둘 다 Dow Corning Corporation(Midland, MI)으로부터 구입가능하다. 추가로, 제형은 0% 또는 20%의 PVA를 함유한다.

효소 방출은 두가지 방법을 사용하여 평가하였다. 제1 방법에서, 패치를 세척하여 패치의 표면에 나타날 수 있고 패치 표면에 매우 근접한 효소를 제거하였다. 약 1ml의 용해 완충액(pH 5.4에서 10mM 트리스, 10mM 염화칼슘 및 0.005% Tween 80)을 페트리 접시에 시험 패치의 상부에서 첨가하였다. 다음에, 완충액을 20초동안 와동시키고, 완충액을 분석하기 위해 에펜도르프 튜브로 경사시켰다. 세척 단계를 3회 반복하고, 효소 활성은 각각의 세척물에 대해 측정하였다. 결과를 요약하여 세척 과정 동안에 방출된 효소의 총량을 제공하였다. 효소의 이 양은 시점 0에서 도 4에 포함되었다.

도 4는 이러한 효소 방출 연구의 결과를 나타낸다. 그래프로부터 알 수 있는 바와 같이, PSA 7-4402 매트릭스는 최대 방출 비율을 나타낸다. 효소의 방출 비율은 실리콘 매트릭스의 가교결합 밀도에 의해 영향을 받는다.

실시예 5

효소 방출 비율에 대한 패치 두께의 효과를 관찰하는 실험을 수행하였다. 프로테아제 B, 7-5300 실리콘 및 다른 성분(예: PVA)을 함유하는 시험 제형을 유화시켰다. 제형은 Mylar® 시트에 Blade Applicator(UV Process Supply, Inc., Chicago)를 사용하여 전개시켰다. 적용된 도막의 두께는 날 및 Mylar® 시트 사이의 틈을 조정함으로써 조절하였다. 도막은 각각 13 및 25 im으로 적용하였다. 도막을 완전히 건조 또는 경화시킨 후, 25mm 직경의 시험 디스크를 Mylar® 시트로부터 절단하였다. 도막의 최종 건조 두께는 디지털 도막 두께 게이지(Elcometer, Manchester, UK)를 사용하여 측정하였다. 시험 샘플 디스크의 최종 건조 중량을또한 측정하여 효소 유효하중을 정확히 알도록 하였다. Mylar®만의 중량 및 두께를 측정하고 Mylar® 상의 샘플의 것으로부터 공제하여 샘플만의 중량 및 두께를 수득하였다.

효소 방출 연구는 Franz 확산 셀(제조원: Amie Systems, Riegelsville, PA)을 사용하여 수행하였다. 시험 샘플을 확산 셀의 상부에 놓고, 셀을 37℃에서 예열된 13.7ml의 용해 완충액(pH 5.5에서 10mM MES 및 10mM 염화나트륨 및 0.005% Tween 80)으로 충전시켰다. 조심하여 확산 셀 내부의 기포를 제거하였다. 셀의 교반 속도는 50rpm으로 예비 설정하였다. 0.1ml의 샘플 분취액을 확산 셀로부터 정규 시간 간격으로 회수하고, 효소 활성에 대해 분석하여 활성 효소 농도를 mg/ml의 단위로 제공한다. 방출된 효소의 비율을 또한 계산하였다.

도 5를 참고하여 알 수 있는 바와 같이, 방출 비율은 패치 두께에 반비례하는 것으로 밝혀졌다. 따라서, 효소의 100% 방출이 가장 얇은 패치로부터 달성되었다.

실시예 6

연고 제형으로부터 프로테아제의 방출을 연구하는 실험을 수행하였다. 시험 연고 제형은 실리콘 탄성중합체 Dow Corning 9041 및 실리콘 계면활성제 Dow Corning 5200 제형 보조제(둘 다 Dow Corning Corporation(Midland, MI)으로부터 구입가능함)를 함유하는 외부 상을 제조함으로써 제조하였다. 프로테아제 B 원액을 함유하는 내부 상을 제조하였다. 추가로, 0 또는 20%의 40% PVA 용액을 함유하는 내부 상을 제조하였다. 프로테아제 B 원액은 활성 효소, 포름산나트륨, 염화칼슘, 물 및 PG를 함유한다. 내부 상 및 외부 상은 기계적 교반기를 사용하여 혼합하였다. 연고는 연고 g당 약 3mg의 효소를 함유한다.

연고 제형을 제조한 후, 이의 방출 비율은 핸슨(Hanson) 연고 셀(Hanson, Chatworth, CA)을 사용하여 측정함으로써 제형의 안정성을 측정하였다. 약 0.5g의 연고를 연고 투여 부위에서 연고 셀에 놓는다. 0.45 im HT Tuffry n® 막(제조원: Pall Corp., Ann Arbor, MI)을 연고 투여부의 상부에 놓고, 연고 셀을 밀폐되도록 밀봉하였다. 다음에, 연고 셀을 연고 셀 플라스크에 놓고, 플라스크를 25ml의 pH 5.5 완충액(10mM MES, 10mM 염화칼슘, 0.005% Tween)으로 충전시키고, 연고 셀을 완충액에 담근다. 시험은 30℃에서 수행하고, 완충액을 일정하게 50rpm으로 패들을 사용하여 교반시켰다. 10분, 1시간, 2시간, 4시간, 8시간, 16시간 및 24시간 후, 0.5ml 분취액을 자동 샘플선별기로 회수한다. 효소 활성은 자외선/가시광선 분광계 상에서 측정하여 용해 완충액 중의 효소의 농도를 mg/ml로 제공한다. 용해 시험은 6개의 복제물에 대해 수행하고, 평균 양을 보고한다.

도 6을 참조하여, PVA 용액을 첨가함으로써 효소가 24시간에 걸쳐 연고로부터 일부 방출되도록 한다. 도 6으로부터, 연고가 사용되어 피부를 국소 치료할 수 있는 제제를 제공함이 명백하다.

실시예 7

실온에서 저장된 무수 패치 내에서 효소의 안정성을 측정하는 안정성 연구를수행하였다. 상기 실시예에 보고된, 최초 방출 데이터에 상당하는 저장 후에 효소의 방출은 효소가 저장 동안에 안정하게 유지됨을 지시한다. 무수 패치는 0 내지 6개월 범위의 기간동안 저장하고, 효소 방출은 적당한 시점에서 측정하였다. 프로테아제 A, 9040/9011 실리콘 및 다른 성분을 함유하는 시험 제형을 유화시켰다. 시험 제형은 3.1250g 건조 중량의 DC-9040 실리콘, 3.2500g 건조 중량 DC-9011 실리콘 계면활성제, 2.5mg/g 프로테아제 A 및 4.2000g 건조 중량 PVA로 이루어진다. 제형은 Mylar® 시트에 Blade Applicator(UV Process Supply, Inc., Chicago)를 사용하여 전개시켰다. 적용된 도막의 두께는 날 및 Mylar® 시트 사이의 틈을 조정함으로써 조절하였다. 도막을 완전히 건조 또는 경화시킨 후, 25mm 직경의 시험 디스크를 Mylar® 시트로부터 절단하였다. 도막의 최종 건조 두께는 디지털 도막 두께 게이지(Elcometer, Manchester, UK)를 사용하여 측정하고, 샘플은 두께가 약 100 im이다. 시험 샘플 디스크의 최종 건조 중량을 또한 측정하여 효소 유효하중을 정확히 알도록 한다. Mylar®만의 중량 및 두께를 측정하고 Mylar® 상에서 샘플의 것으로부터 공제하여 샘플만의 중량 및 두께를 수득하였다.

50% 프로필렌 글리콜 중의 프로테아제 A 원액(pH 5.5로 400ppm 염화칼슘을 함유하는 50% 포름산나트륨 완충액)을 포함하는 대조를 제조하였다. 대조는 실온에서 저장하고, 보유된 효소 활성은 여러 시점에서 시험하였다. 프로테아제 A 효소는 대조 용액 중에서 안정한 것으로 기대된다.

효소 방출 연구는 자동 샘플선별 부속장치 및 소량 용해 키트가 장치된 핸슨(Hanson, Chatworth, CA) 용해 시험기를 사용하여 수행하였다. 시험 샘플을 고무시멘트를 사용하여 샘플과 동일한 직경(25mm)의 3/16" 두께 유리 디스크로 고정시켰다. 다음에, 샘플을 시험 샘플 측면이 위로 향하는 용해 용기에 부하하였다. 25ml의 용해 완충액(pH 5.5로 10mM MES, 10mM 염화나트륨 및 0.005% Tween 80)를 각각의 샘플의 상부에 붓고, 자동 샘플선별기 튜브와 함께 교반 패들을 즉시 완충액으로 하강시켰다. 용해 용기에 뚜껑을 하여 증발을 최소화시키고, 교반은 50rpm으로 개시시켰다. 자동 샘플선별기는 계획된 시점에서 0.5ml 또는 1ml 분취액을 회수하고, 이들 샘플을 위에 언급된 SAAPFpNA 프로테아제 검정을 사용하여 효소 활성에 대해 분석하여 활성 효소 농도를 mg/ml로 제공한다. 특정한 경우에, 전체 단백질은 또한, 280nm에서 흡광도를 측정하고 적당한 흡광 계수를 적용하여 각각의 시점에서 측정하였다.

도 7을 참고하여, 0, 1, 3 및 6개월동안 저장된 9040/9011 무수 패치로부터 프로테아제 A의 효소 안정성을 나타낸다. 데이터 점들은 각각의 시점동안 평균 6개의 복제물로부터의 것이다. 활성의 손실은 실리콘 패치에서보다 대조 용액에서 더욱 크다. 따라서, 실리콘 패치는 효소를 저장하고, 계속해서 방출하는 더욱 안정한 수단을 제공한다.

실시예 8

실온에서 저장된 PSA 7-4402를 갖는 무수 패치 내에서 효소의 안정성을 측정하는 안정성 연구를 수행하였다. 상기 실시예에 보고된, 최초 방출 데이터에 상당하는 저장 후에 효소의 방출은 효소가 저장 동안에 안정하게 유지됨을 지시한다.무수 패치는 0 내지 6개월 범위의 기간동안 저장하고, 효소 방출은 적당한 시점에서 측정하였다. 프로테아제 B, PSA 7-4402 실리콘 및 다른 성분을 함유하는 시험 제형을 유화시켰다. 시험 제형은 33.7500 건조 중량의 PSA 7-4402 실리콘, 2.3500g 건조 중량의 DC 193 유체(제조원: Dow Corning Corporation, Midland, MI), 3.8612mg/g 프로테아제 B 및 9.4100g 건조 중량의 PVA로 이루어진다. 제형은 Mylar® 시트에 Blade Applicator(UV Process Supply, Inc., Chicago)를 사용하여 전개시켰다. 적용된 도막의 두께는 날 및 Mylar® 시트 사이의 틈을 조정함으로써 조절하였다. 도막을 완전히 건조 또는 경화시킨 후, 25mm 직경의 시험 디스크를 Mylar® 시트로부터 절단하였다. 도막의 최종 건조 두께는 디지털 도막 두께 게이지(Elcometer, Manchester, UK)를 사용하여 측정하면, 샘플은 약 100 im 두께이다. 시험 샘플 디스크의 최종 건조 중량을 또한 측정하여, 효소 유효하중을 정확히 알도록 하였다. Mylar®만의 중량 및 두께를 측정하고, Mylar® 상에서 샘플의 것으로부터 공제하여 샘플만의 중량 및 두께를 수득하였다.

50% 프로필렌 글리콜 중의 프로테아제 B 원액(pH 5.5로 400ppm 염화칼슘을 함유하는 50% 포름산나트륨 완충액)을 포함하는 대조를 제조하였다. 대조는 실온에서 저장하고, 보유된 효소 활성은 여러 시점에서 시험하였다. 프로테아제 B 효소는 대조 용액 중에서 안정한 것으로 기대된다.

효소 방출 연구는 자동 샘플선별 부속장치 및 소량 용해 키트가 장치된 핸슨(Hanson, Chatworth, CA) 용해 시험기를 사용하여 수행하였다. 시험 샘플을 고무 시멘트를 사용하여 샘플과 동일한 직경(25mm)의 3/16" 두께 유리 디스크로 고정시킨다. 다음에, 샘플을 시험 샘플 측면이 위로 향하는 용해 용기에 부하하였다. 25ml의 용해 완충액(pH 5.5로 10mM MES, 10mM 염화나트륨 및 0.005% Tween 80)을 각각의 샘플의 상부에 붓고, 자동 샘플선별기 튜브와 함께 교반 패들을 즉시 완충액으로 하강시켰다. 용해 용기에 뚜껑을 하여 증발을 최소화시키고, 교반은 50rpm으로 개시시켰다. 자동 샘플선별기는 계획된 시점에서 0.5ml 또는 1ml 분취액을 회수하고, 이들 샘플을 위에 언급된 SAAPFpNA 프로테아제 검정을 사용하여 효소 활성에 대해 분석하여 활성 효소 농도를 mg/ml로 제공한다. 특정한 경우에, 전체 단백질은 또한, 280nm에서 흡광도를 측정하고 적당한 흡광 계수를 적용하여 각각의 시점에서 측정하였다.

도 8을 참고하여, 0, 1, 3 및 6개월동안 저장된 PSA 7-4402 무수 패치로부터 프로테아제 B의 효소 안정성을 나타낸다. 데이터 점들은 각각의 시점동안 평균 6개의 복제물로부터의 것이다. 실리콘 패치는 효소를 저장하고, 계속해서 방출하는 안정한 수단을 제공한다. 그러나 방출된 프로테아제 B의 비율은 프로테아제 B 대조 용액에 보유된 활성의 비율보다 낮다.

실시예 9

실온에서 저장된 PSA 7-4401을 갖는 무수 패치 내에서 효소의 안정성을 측정하는 안정성 연구를 수행하였다. 상기 실시예에 보고된, 최초 방출 데이터에 상당하는 저장 후에 효소의 방출은 효소가 저장 동안에 안정하게 유지됨을 지시한다. 무수 패치는 0 내지 3개월 범위의 기간동안 저장하고, 효소 방출은 적당한 시점에서 측정하였다. 프로테아제 B, PSA 7-4401 실리콘 및 다른 성분을 함유하는 시험 제형을 유화시켰다. 시험 제형은 33.9088 건조 중량의 PSA 7-4401 실리콘, 2.3500g 건조 중량의 DC 193 유체, 3.8723mg/g 프로테아제 B 및 9.6170g 건조 중량의 PVA로 이루어진다. 제형은 Mylar® 시트에 Blade Applicator(UV Process Supply, Inc., Chicago)를 사용하여 전개시켰다. 적용된 도막의 두께는 날 및 Mylar® 시트 사이의 틈을 조정함으로써 조절하였다. 도막을 완전히 건조 또는 경화시킨 후, 25mm 직경의 시험 디스크를 Mylar® 시트로부터 절단하였다. 도막의 최종 건조 두께는 디지털 도막 두께 게이지(Elcometer, Manchester, UK)를 사용하여 측정하면, 샘플은 약 100 im 두께이다. 시험 샘플 디스크의 최종 건조 중량을 또한 측정하여, 효소 유효하중을 정확히 알도록 하였다. Mylar®만의 중량 및 두께를 측정하고, Mylar® 상에서 샘플의 것으로부터 공제하여 샘플만의 중량 및 두께를 수득하였다.

50% 프로필렌 글리콜 중의 프로테아제 B 원액(pH 5.5로 400ppm 염화칼슘을 함유하는 50% 포름산나트륨 완충액)을 포함하는 대조를 제조하였다. 대조는 실온에서 저장하고, 보유된 효소 활성은 여러 시점에서 시험하였다.

효소 방출 연구는 자동 샘플선별 부속장치 및 소량 용해 키트가 장치된 핸슨(Hanson, Chatworth, CA) 용해 시험기를 사용하여 수행하였다. 시험 샘플을 고무 시멘트를 사용하여 샘플과 동일한 직경(25mm)의 3/16" 두께 유리 디스크로 고정시켰다. 다음에, 샘플을 시험 샘플 측면이 위로 향하는 용해 용기에 부하하였다. 25ml의 용해 완충액(pH 5.5로 10mM MES, 10mM 염화나트륨 및 0.005% Tween 80)을각각의 샘플의 상부에 붓고, 자동 샘플선별기 튜브와 함께 교반 패들을 즉시 완충액으로 하강시켰다. 용해 용기에 뚜껑을 하여 증발을 최소화시키고, 교반은 50rpm으로 개시시켰다. 자동 샘플선별기는 계획된 시점에서 0.5ml 또는 1ml 분취액을 회수하고, 이들 샘플을 위에 언급된 SAAPFpNA 프로테아제 검정을 사용하여 효소 활성에 대해 분석하여 활성 효소 농도를 mg/ml로 제공한다. 특정한 경우에, 전체 단백질은 또한, 280nm에서 흡광도를 측정하고 적당한 흡광 계수를 적용하여 각각의 시점에서 측정하였다.

도 9를 참고하여, 0, 1, 3 및 6개월동안 저장된 PSA 7-4401 무수 패치로부터 방출된 프로테아제 B의 효소 안정성을 나타낸다. 데이터 점들은 각각의 시점동안 평균 6개의 복제물로부터의 것이다. 실리콘 패치는 효소를 저장하고, 계속해서 방출하는 안정한 수단을 제공한다. 그러나 방출된 프로테아제 B의 비율은 프로테아제 B 대조 용액에 보유된 활성의 비율보다 낮다.

실시예 10

실온에서 저장된 7-FC 4210을 갖는 무수 패치 내에서 효소의 안정성을 측정하는 안정성 연구를 수행하였다. 상기 실시예에 보고된, 최초 방출 데이터에 상당하는 저장 후에 효소의 방출은 효소가 저장 동안에 안정하게 유지됨을 지시한다. 무수 패치는 0 내지 1개월 범위의 기간동안 저장하고, 효소 방출은 적당한 시점에서 측정하였다. 프로테아제 B, 7-FC 4210 기재 및 경화제 실리콘 및 다른 성분을 함유하는 시험 제형을 유화시켰다. 시험 제형은 36.0000g 건조 중량의 7-FC 4210기재 실리콘, 7.2000g 건조 중량의 7-FC 4210 경화제, 4.08000g 건조 중량의 DC 225 디메티콘 유체(Dow Corning Corporation(Midland, MI)으로부터 구입가능함), 4.2006mg/g 프로테아제 B 및 12.2880g 건조 중량 PVA로 이루어진다. 제형은 Mylar® 시트에 Blade Applicator(UV Process Supply, Inc., Chicago)를 사용하여 전개시켰다. 적용된 도막의 두께는 날 및 Mylar® 시트 사이의 틈을 조정함으로써 조절하였다. 도막을 완전히 건조 또는 경화시킨 후, 25mm 직경의 시험 디스크를 Mylar® 시트로부터 절단하였다. 도막의 최종 건조 두께는 디지털 도막 두께 게이지(Elcometer, Manchester, UK)를 사용하여 측정하면, 샘플은 약 100 im 두께이다. 시험 샘플 디스크의 최종 건조 중량을 또한 측정하여, 효소 유효하중을 정확히 알도록 하였다. Mylar®만의 중량 및 두께를 측정하고, Mylar® 상에서 샘플의 것으로부터 공제하여 샘플만의 중량 및 두께를 수득하였다.

50% 프로필렌 글리콜 중의 프로테아제 B 원액(pH 5.5로 400ppm 염화칼슘을 함유하는 50% 포름산나트륨 완충액)을 포함하는 대조를 제조하였다. 대조는 실온에서 저장하고, 보유된 효소 활성은 여러 시점에서 시험한다.

효소 방출 연구는 자동 샘플선별 부속장치 및 소량 용해 키트가 장치된 핸슨(Hanson, Chatworth, CA) 용해 시험기를 사용하여 수행하였다. 시험 샘플을 고무 시멘트를 사용하여 샘플과 동일한 직경(25mm)의 3/16" 두께 유리 디스크로 고정시켰다. 다음에, 샘플을 시험 샘플 측면이 위로 향하는 용해 용기에 부하하였다. 25ml의 용해 완충액(pH 5.5로 10mM MES, 10mM 염화나트륨 및 0.005% Tween 80)를 각각의 샘플의 상부에 붓고, 자동 샘플선별기 튜브와 함께 교반 패들을 즉시 완충액으로 하강시켰다. 용해 용기에 뚜껑을 하여 증발을 최소화시키고, 교반은 50rpm으로 개시시켰다. 자동 샘플선별기는 계획된 시점에서 0.5ml 또는 1ml 분취액을 회수하고, 이들 샘플을 위에 언급된 SAAPFpNA 프로테아제 검정을 사용하여 효소 활성에 대해 분석하여 활성 효소 농도를 mg/ml로 제공한다. 특정한 경우에, 전체 단백질은 또한, 280nm에서 흡광도를 측정하고 적당한 흡광 계수를 적용하여 각각의 시점에서 측정하였다.

도 10을 참고하여, 0 및 1개월동안 저장된 7-FC 4210 무수 패치로부터 방출된 프로테아제 B의 효소 안정성을 나타낸다. 데이터 점들은 각각의 시점동안 평균 6개의 복제물로부터의 것이다. 실리콘 패치는 효소를 저장하고, 계속해서 방출하는 안정한 수단을 제공한다. 그러나 방출된 프로테아제 B의 비율은 프로테아제 B 대조 용액에 보유된 활성의 비율보다 낮다.

실시예 11

폐기된 딱지를 죽은조직제거술에 적합한 효소의 효능을 시험하기 위한 시험관내 모델로서 사용하였다. 딱지는 상처 또는 괴저로부터 탈락된 사멸 조직이다. 효소는 외과용 메스 또는 다른 예리한 외과용 기구를 사용하는 예리한 죽은조직제거술을 제한하거나 예리한 죽은조직제거술을 위한 편의에 이용되지 않는 환자에 대한 상처의 예리한 죽은조직제거술의 대안을 제공한다. 폐기된 딱지는 사람의 당뇨 환자에게 발생하는 발 궤양의 예리한 죽은조직제거술로부터 수득되었다.

두개의 큰 조각의 딱지는 죽은조직제거술과 동일한 날에 수득하고, 두 조각으로 분리하였디. 두 조각은 각각 추가로, 3개의 단편으로 세분하였다. 3 X 3의 미세한 메쉬 거즈 패드를 6개의 페트리 접시 각각에 놓고, 접시를 칭량하였다. 딱지의 단편을 각각의 거즈 패드에 놓고, 페트리 접시를 다시 칭량하였다. 딱지의 건조 중량은 페트리 접시, 거즈 및 딱지의 중량으로부터 페트리 접시 및 거즈의 중량을 공제하여 수득하였다. 20ml의 시판되는 인산염 완충 식염수(PBS)를 각각의 페트리 접시에 첨가하였다. 6개의 페트리 접시 중의 두개는 두개의 최초 딱지 조각 각각으로부터 PBS 및 딱지 샘플만 갖는 대조이다. 6개의 페트리 접시 중의 다음 두개에서 PBS는 250㎍/클로스트리듐 히스톨리티쿰(Clostridium histolyticum)(Sigma)으로부터 단백질분해 콜라게나제 효소의 20ml PBS를 함유한다. 마지막 두개의 페트리 접시에서 PBS 용액은 각각 250㎍/프로테아제 B 서브틸리신 효소의 20ml PBS(Genencor International, Inc.)를 함유한다.

다음에, 딱지를 갖는 거즈 패드는 48시간동안 PBS 용액에 침지된 채로 유지되었다. 48시간 후, 샘플을 검사하고, 두번째 20ml 용량의 PBS를 각각의 페트리 접시에 첨가하며, 이는 4개의 효소 샘플 페트리 접시 각각에 동일한 250㎍/20ml PBS 효소 샘플을 포함한다. 침지된 지 추가로 48시간 후, 각각의 페트리 접시로부터 딱지를 새로운 페트리 접시의 새로운 3 X 3 거즈 패드로 옮겼다. 페트리 접시를 칭량하였다.

표 3은 6개 샘플의 중량에서 변화를 나타낸다. 샘플은 모두, 딱지가 액체를 흡수함에 따라 팽윤되므로, 아마도 96시간의 끝에는 더욱 무겁다. 콜라게나제 샘플은 아마도 딱지의 분해에 기인하여 낮은 중량%로 수득된다. 프로테아제 샘플은또한, 아마도 딱지의 분해에 기인하여 낮은 중량%로 수득된다.

딱지 중량의 변화

샘플	출발 중량	종결 중량	차이	% 변화
블랭크 1	1.3g	1.9g	0.6g	50%
블랭크 2	0.6g	1.0g	0.4g	66%
콜라게나제 1	1.0g	1.4g	0.4g	40%
콜라게나제 2	2.2	2.7	0.5	23%
프로테아제 B 1	2.0	2.1	0.1	5%
프로테아제 B 2	1.5	1.7	0.2	13%

딱지의 구조적 완전성의 변화는 96시간에 육안으로 관찰하고, 분해를 확인한다. 프로테아제로 처리된 샘플에서, 딱지는 약간 아교상으로 되며, 특정한 경우에, PBS로 세척하는 경우, 딱지는 완전히 붕해된다. 대조 및 콜라게나제 딱지 처리된 샘플은 아교상으로 되지 않으며, PBS로 세척하는 경우, 붕해되지 않는다.

당해 분야의 전문가에게, 명세서에 기술된 것으로 제한되지 않음을 고려해야 하는, 본 발명의 범위를 이탈하지 않으면서 다양하게 변화시킬 수 있음은 명백하다.

Claims

하나 이상의 친수성 담체 및 하나 이상의 활성제를 포함하는 내부 상, 및 실리콘 매트릭스를 포함하는 외부 상을 포함하며, 내부 상이 외부 상 내에 분산된 국소 제제.
제1항에 있어서, 하나 이상의 활성제가 친수성이고, 하나 이상의 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 방출될 수 있는 국소 제제.
제1항에 있어서, 내부 상이 외부 상 내에 분산된 소적을 포함하고, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 2000 im인 국소 제제.
제3항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 1000 im인 국소 제제.
제3항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 500 im인 국소 제제.
제3항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 200 im인 국소 제제.
제3항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 100 im인 국소 제제.
제3항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 50 im인 국소 제제.
제3항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 10 im인 국소 제제.
제3항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 5 im인 국소 제제.
제1항에 있어서, 하나 이상의 친수성 담체가 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 폴록사머, 글리세린, 알코올, 다가 알코올, 물 및 이들의 배합물로부터 선택되는 국소 제제.
제1항에 있어서, 하나 이상의 친수성 담체가 폴리프로필렌 글리콜을 포함하는 국소 제제.
제1항에 있어서, 하나 이상의 친수성 담체가 국소 제제의 약 50중량% 이하를 구성하는 국소 제제.
제1항에 있어서, 하나 이상의 활성제가 하이드롤라제, 큐티나제, 옥시다제, 트랜스퍼라제, 리덕타제, 헤미셀룰라제, 에스테라제, 이소머라제, 펙티나제, 락타제, 퍼옥시다제, 락카제, 카탈라제, 폴리펩타이드, 항체, 펩타이드, 호르몬, 시토킨, 성장 인자 및 이들의 배합물로부터 선택된 하나 이상의 효소를 포함하는 국소제제.
제1항에 있어서, 하나 이상의 활성제가 하나 이상의 하이드롤라제 효소를 포함하는 국소 제제.
제15항에 있어서, 하이드롤라제 효소가 리파제 및 프로테아제로부터 선택되는 국소 제제.
제16항에 있어서, 프로테아제가 서브틸리신 프로테아제를 포함하는 국소 제제.
제16항에 있어서, 프로테아제가 프로테아제 A 또는 프로테아제 B를 포함하는 국소 제제.
제15항에 있어서, 하이드롤라제 효소가 리파제를 포함하고, 리파제가 실리콘 매트릭스의 약 0.0001 내지 약 0.2중량%를 구성하는 국소 제제.
제15항에 있어서, 하이드롤라제 효소가 프로테아제를 포함하고, 프로테아제 농도가 국소 제제의 약 0.1 내지 약 5.0 mg/g인 국소 제제.
제1항에 있어서, 내부 상이 하나 이상의 친수성 성분을 추가로 포함하는 국소 제제.
제21항에 있어서, 하나 이상의 친수성 성분이 폴리비닐 알코올, 폴리비닐 피롤리돈 및 이들의 배합물로부터 선택되는 국소 제제.
제22항에 있어서, 하나 이상의 친수성 성분이 내부 상의 약 50중량% 이하를 구성하는 국소 제제.
제22항에 있어서, 하나 이상의 친수성 성분이 내부 상의 약 35중량% 이하를 구성하는 국소 제제.
제21항에 있어서, 하나 이상의 친수성 성분이 국소 제제의 약 5 내지 약 40중량%를 구성하는 국소 제제.
제21항에 있어서, 하나 이상의 친수성 성분이 국소 제제의 약 10 내지 약 35중량%를 구성하는 국소 제제.
제21항에 있어서, 하나 이상의 친수성 성분이 국소 제제의 약 15 내지 약 35중량%를 구성하는 국소 제제.
제21항에 있어서, 하나 이상의 친수성 성분이 수-증점제를 포함하는 국소 제제.
제1항에 있어서, 실리콘 매트릭스가 고분자량 폴리디메틸실록산, 느슨하게 또는 약간 가교결합된 실리콘 탄성중합체, 무충전 탄성중합체, 세포형 탄성중합체, 실리콘 고무, 실리콘 감압성 접착제 및 이들의 배합물로부터 선택되는 국소 제제.
제1항에 있어서, 외부 상이 실리콘계 계면활성제를 추가로 포함하는 국소 제제.
제1항에 있어서, 내부 상 및 외부 상이, 국소 제제가 국소 드레싱을 포함하도록 선택되고, 국소 드레싱이 패치를 포함하는 국소 제제.
제31항에 있어서, 패치가 약 25 im 이하의 두께인 국소 제제.
제31항에 있어서, 외부 상이 느슨하게 또는 약간 가교결합된 실리콘 탄성중합체를 포함하는 국소 제제.
제33항에 있어서, 내부 상이 프로필렌 글리콜 및 프로테아제를 포함하는 국소 제제.
제34항에 있어서, 내부 상이 폴리비닐 알코올 및 폴리비닐 프로필렌으로부터 선택된 친수성 성분을 추가로 포함하는 국소 제제.
제1항에 있어서, 내부 상 및 외부 상이, 국소 제제가 국소 드레싱을 포함하도록 선택되고, 국소 드레싱이 전개 막을 포함하는 국소 제제.
제36항에 있어서, 외부 상이 실리콘 고무를 포함하는 국소 제제.
제1항에 있어서, 내부 상 및 외부 상이, 국소 제제가 연고를 포함하도록 선택되는 국소 제제.
제38항에 있어서, 외부 상이 하나 이상의 실리콘 탄성중합체 및 하나 이상의 실리콘 계면활성제를 포함하는 국소 제제.
제39항에 있어서, 내부 상이 활성제 및 프로필렌 글리콜을 포함하는 국소 제제.
제40항에 있어서, 내부 상이 폴리비닐 알코올을 추가로 포함하는 국소 제제.
하나 이상의 친수성 담체 및 하나 이상의 활성제를 포함하는 내부 상을 제조하고;

실리콘 매트릭스를 포함하는 외부 상을 제조하고;

내부 상을 외부 상 내에 분산시켜 국소 제제를 생성시킴을 포함하는, 국소 제제의 생성방법.
제42항에 있어서, 분산 단계가 내부 상 및 외부 상을 손으로 함께 교반시킴을 포함하는 방법.
제42항에 있어서, 분산 단계가 내부 상 및 외부 상을 고전단 믹서를 사용하여 함께 혼합함을 포함하는 방법.
제42항에 있어서, 국소 제제를 패치로 캐스팅하는 단계를 추가로 포함하는 방법.
제42항에 있어서, 내부 상이 외부 상 내에 분산된 소적을 형성하도록 분산 단계가 수행되는 방법.
제46항에 있어서, 소적의 크기가 약 0.1 내지 약 2000 im인 방법.
제46항에 있어서, 소적의 크기가 약 0.1 내지 약 1000 im인 방법.
제46항에 있어서, 소적의 크기가 약 0.1 내지 약 500 im인 방법.
제46항에 있어서, 소적의 크기가 약 0.1 내지 약 200 im인 방법.
제46항에 있어서, 소적의 크기가 약 0.1 내지 약 100 im인 방법.
제46항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 50 im인 방법.
제46항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 10 im인 방법.
제46항에 있어서, 소적의 직경이 약 0.1 내지 약 5 im인 방법.
하나 이상의 친수성 담체 및 하나 이상의 활성제를 포함하는 내부 상 및 실리콘 매트릭스를 포함하는 외부 상을 포함하며, 내부 상이 외부 상 내에 분산된 국소 제제를 제공하고;

국소 제제를 환자의 피부와 접촉하게 놓아서 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 환자의 피부에 국소 방출되도록 함을 포함하여, 활성제를 국소에 제공하는 방법.
제55항에 있어서, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 방출시에 괴사 조직을 제거할 수 있도록 활성제가 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 방출시에 환자의 피부 상의 상처를 청정시킬 수 있도록 활성제가 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 방출시에 환자의 피부 상의 상처를 자체-멸균시킬 수 있도록 활성제가 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 방출시에 환자의 피부에 항-감염 특성을 제공할 수 있도록 활성제가 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 방출시에 환자의 피부 상의 상처 치유를 촉진할 수 있도록 활성제가 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 실리콘 매트릭스로부터 활성제 방출의 목적하는 비율을 제공하기에 적합한 가교결합 밀도를 갖도록 실리콘 매트릭스가 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 내부 상이 친수성 성분을 추가로 포함하고, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 목적하는 비율로 방출되도록 친수성 성분이 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 국소 제제가 특정 두께를 갖는 패치를 포함하고, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 목적하는 비율로 방출되도록 패치의 두께가 선택되는 방법.
제55항에 있어서, 국소 제제가 공기에 대한 폐색성을 갖고, 활성제가 실리콘 매트릭스로부터 목적하는 비율로 방출되도록 국소 제제의 공기에 대한 폐색성이 선택되는 방법.