KR20020086336A - 항암효과를 가지는 부추추출물 및 항암 활성성분의 추출방법 - Google Patents

항암효과를 가지는 부추추출물 및 항암 활성성분의 추출방법 Download PDF

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Abstract

본 발명은 부추 착즙액과 부추 착즙액의 에틸아세테이트 추출물의 항암효과에 관한 것으로 간암 세포인 SK-Hep-1, Hep-3과 구강상피암 세포인 SCC-15, 신장암 세포인 A-498, 대장암 세포인 WiDr, 위암 세포인 MKN-45 등 여러 종류의 암세포에 대하여 항암효과를 나타내는 것으로 특징지워지며, 본 추출물과 추출물의 유효성분들은 항암제 및 항암효과를 가지는 기능성 식품 또는 식품 첨가물로 이용될 수 있다.

Description

항암효과를 가지는 부추추출물 및 항암 활성성분의 추출방법 {Leek extract having anticancer activity and the extraction method of active substance}
환경의 악화와 노년인구의 증가로 세계 암 발생률이 매년 5%이상 증가하고 있으며, 1997년 암을 원인으로 한 사망자가 600만 명으로 세계 사망률의 12%에 달했다. 국내에서도 매년 10만 명의 암환자가 새롭게 발생하고 5만 여명이 매년 사망하고 있으며, 암환자 증가율도 10%에 이르고 있다. 1999년 국립암센터의 통계에 따르면 환자는 12만 명으로서 남자는 위암(24%), 간암(16%), 폐암(16%), 대장암(10%)의 순서이며, 여자는 위암(16%), 자궁경부암(12%), 유방암(15%), 대장암(10%)의 순서로 암 환자가 발생했다.
이러한 암의 치료를 위해서는 외과적 수술요법, 화학요법, 생물요법, 방사선요법 등이 이용되고 있다. 화학요법은 흔히 말하는 약물요법으로서 핵산 알킬화제, 대사 길항제, 천연물, 호르몬제 등의 합성된 화학물질을 이용한 것이며, 생물요법은 우리 몸이 원래 가지고 있는 면역 기능을 회복시키거나 증진시켜 암세포의 활동력을 약화시킴으로써 암의 진행을 막는 것으로서, 사이토카인, 면역요법제, 유전자 치료제, 암백신, 신생혈관형성 억제제 등이 있다. 현재까지는 이러한 방법들을 단독 혹은 병용하여 치료에 응용하고 있으나 부작용, 약제내성, 재발 등으로 완벽한 치료법이 없는 상태이다.
지금까지 항암제 연구는 암세포처럼 세포분열이 왕성한 조직에 대한 세포독성을 근거로 하여 행하여지기 때문에 세포분열이 빠른 피부, 점막, 골수 같은 정상조직 세포에도 독성을 나타내게 된다. 따라서 효과적인 항암제 개발을 위해서는 암세포에만 특이적으로 작용하고 정상세포에 대해서는 독성이 적은 항암 활성물질의 탐색이 이루어져야 한다. 현재 식물과 미생물 등에서 추출한 항암물질에 대한 연구가 많이 진행되고 있으나, 이들 대부분이 미생물의 2차 대사산물이거나 생약재에서 추출된 물질에 관한 연구가 주를 이루고 있다.
그러나 항암물질의 독성문제 해결을 위해서는 미생물이나 생약 식물보다는 우리가 일상생활에서 흔히 섭취하고 있고, 수세기 동안 그 안정성이 입증된 식용작물을 이용한다면 그 안정성은 매우 높다고 할 수 있다. 이 점에 착안하여 본 발명자들은 우리가 흔히 섭취하고 있는 식용작물 중에서 항암 효과가 있는 작물을 탐색하던 중 부추 추출물이 강력한 항암 효능을 나타내는 것을 발견하였다.
부추(Allium tuberosumRottler)는 백합과의 다년생 초본으로 한국, 중국, 일본 등 동북아시아에서 주로 재배되고 있다. 부추는 영양학적으로 단백질, 지방, 당질, 회분, 비타민 A, 철분 등의 함량이 높으며, 양질의 식이 섬유소원이다. 예로부터 한방에서는 부추가 강장제, 건위제, 해독제, 화상 치료제로 쓰였고 중국 약물 사전에 의하면 부추가 통증, 설사를 멈추게 하며 해독, 천식에 효과가 있다고 한다. 뿐만 아니라 부추는 항혈전효과와-carotene, chlorophyll, 비타민 C 등에 의한 강력한 항산화 효과를 나타낸다고 알려져 있다. 부추는 마늘과 유사한 함황 작물로서 마늘의 생리활성물질에 관해서는 많은 연구가 이루어져 있으나 부추에 관한 연구는 많이 진행되지 않고 있으며 특히 항암효능과 관련된 연구보고는 없는 실정이다.
따라서 본 발명은 이러한 부추 추출물이 간암세포, 위암세포, 대장암세포, 신장암세포, 구강암세포 등을 사멸시키는 효과가 있음을 발견하고 강력한 항암물질로 사용할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 항암효과를 가지는 부추 추출물 및 그 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.
도 1은 각종 암세포에 대한 부추 추출물의 농도별 세포성장 억제효과를 MTT assay 방법으로 조사한 사진이다.
본 발명은 부추 착즙액과 부추 착즙액의 에틸아세테이트 추출물의 항암효과에 관한 것으로 간암 세포주인 SK-Hep-1, Hep-3과 구강상피암 세포인 SCC-15, 신장암세포인 A-498, 대장암 세포인 WiDr, 위암 세포인 MKN-45 등 여러 종류의 암세포에 대하여 세포독성을 유발하여 항암효과를 나타내는 것으로 특징지워진다.
이하 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 부추를 수세하여 자연 탈수 시킨 후 마쇄하고 압착 여과하여 부추 착즙액을 얻은 후 이 착즙액을 다시 원심분리하여 부유물질을 제거하고 상등액을 0.45 ㎛ 여과필터로 여과하여 항암효과를 나타내는 무균상태의 부추 착즙액을 제공한다.
또한 본 발명은 상기 과정으로 제조된 부추 착즙액의 유기용매 추출분획을 감압증류하여 얻은 항암효과를 나타내는 부추 유기용매 추출물을 제공한다. 이 때 유기용매로는 에틸아세테이트가 가장 바람직하다.
이하에서는 본 발명을 실시예에 의하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 설명하기 위하여 제시되는 것이며, 본 발명의 범위를 제한하기 위한 것은 아니다.
실시예 1. 암세포 성장 억제효과
암세포에 대한 부추 추출물의 세포독성을 측정하기 위해서 MTT assay를 실시하였다. 각각의 세포를 well당 5 ×103cells/180㎕의 농도로 96 well plate에 분주 후 부추 추출물을 20㎕씩 첨가하여 37℃, 5% CO2incubator에서 96시간 배양하였다. 96시간 배양 후, 5㎎/㎖의 MTT용액을 각 well에 5㎕씩 첨가하여 37℃, 5% CO2incubator에서 4시간 배양하고 20% SDS solution 50㎕를 처리하여 24시간동안 발색을 유도시킨 후 ELISA microplate reader(ELx800:Bio-tec, USA)를 이용하여 540nm에서 발색의 정도를 측정하였다. 세포독성도는 다음의 식에 의하여 계산하였고, 각 세포별 배양배지는 표 1.에 나타내었다.
각 세포별 배양 배지의 종류
Cell Line KCLB No. Histopathology Culture Media
A498 30044 Kidney carcinoma DMEM+10%FBS
SK-Hep-1 30052 Liver adenocarcinoma DMEM+10%FBS
WiDr 10218 Colon adenocarcinoma DMEM+10%FBS
MKN-45 80103 Stomach adenocarcinoma RPMI1640+10%FBS
각종 암세포에 대한 세포성장 억제효과를 조사한 결과 표 2.에서와 같이 원액에서 모든 암세포에 대해 84%이상의 세포성장 저해효과가 있는 것으로 나타났다. 신장암 세포인 A498은 86.9%, 간암 세포인 SK-Hep-1은 88.9%, 대장암 세포인 WiDr은 89.9% 그리고 위암 세포인 MKN-45는 83.5%의 세포 독성도를 나타내었다. 특히 대장암 및 위암세포의 경우 원액을 10배희석하여도 세포 독성도가 각각 80.3%와 82.6%로 나타나 이 두 세포에 대해서는 아주 강한 세포성장 억제효과가 있는 것으로 나타났다.
각 처리농도별 암세포의 세포 독성도 (%)
구분 A498(신장암) SK-Hep1(간암) WiDr(대장암) MKN-45(위암)
원액 86.9 88.9 89.9 83.5
10배 희석액 33.3 45.0 80.3 82.6
100배 희석액 3.0 10.7 0 12.7
본 발명의 부추 착즙액과 부추 유기용매 추출물은 신장암, 간암, 대장암, 위암 등 여러 종류의 암세포에 대해 강한 독성을 나타내므로 항암제 및 항암 효능을 가지는 기능성 식품 또는 식품 첨가물로 이용될 수 있으며, 이 물질은 우리가 흔히 섭취하고 있는 일상 식용작물에서 추출된 물질이므로 그 안정성이 매우 높다고 할 수 있다.

Claims (5)

  1. 부추를 마쇄하고 여과하여 얻은 항암효과를 가지는 부추 착즙액
  2. 제 1항에 있어서, 상기과정에 더하여 다시 유기용매로 추출하여 얻은 항암효과를 가지는 부추 추출물
  3. 제 2항에 있어서 바람직하게는 유기용매로 에틸아세테이트를 사용하여 얻은 것을 특징으로 하는 추출물
  4. 부추 착즙액 및 부추 추출물의 유효성분을 이용한 항암효과를 가지는 약학적 조성물
  5. 부추 착즙액 및 부추 추출물의 유효성분을 이용한 항암효과를 가지는 기능성 식품 및 식품 첨가물
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