KR102390820B1

KR102390820B1 - Composition for prevention or treatment of atopic dermatitis and inflammatory skin diseases comprising complex extracts of a mulberry tree as active ingredient

Info

Publication number: KR102390820B1
Application number: KR1020210024099A
Authority: KR
Inventors: 이한봉
Original assignee: (주)천사섬글로컬 농업회사법인; 이한봉
Priority date: 2021-02-23
Filing date: 2021-02-23
Publication date: 2022-04-26

Abstract

The present invention is a composition for preventing or treating atopic dermatitis and inflammatory skin diseases, containing, as an active ingredient, a complex extract of Cudrania tricuspidata including a distilled extract of Cudrania tricuspidata, ethanol-extracted powder of Cudrania tricuspidata leaves, and ethanol-extracted powder of Cudrania tricuspidata branches. More specifically, the composition of the present invention is prepared by the following steps: obtaining a liquefied extract of Cudrania tricuspidata; aging the obtained liquefied extract of Cudrania tricuspidata for 6 to 60 months, followed by separating and extracting a middle liquid to obtain an undiluted solution of a Cudrania tricuspidata extract; and distilling and extracting the obtained undiluted solution of the Cudrania tricuspidata extract at a temperature of 70 to 120℃ to obtain the distilled extract of the Cudrania tricuspidata. The present invention relates to the composition for preventing or treating atopic dermatitis and inflammatory skin diseases, containing, as an active ingredient, the complex extract of Cudrania tricuspidata which is safe for the human body and is effective in preventing or treating atopic dermatitis and inflammatory skin diseases.

Description

Composition for prevention or treatment of atopic dermatitis and inflammatory skin diseases comprising complex extracts of a mulberry tree as active ingredient

본 발명은 꾸지뽕나무 증류추출액, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말을 포함하는 꾸지뽕 복합추출물을 유효성분으로 포함하여, 아토피 및 피부염 예방 또는 치료를 목적으로 하는 용도로 매우 유용하게 활용될 수 있는 꾸지뽕 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물에 관한 것이다.The present invention is very useful for the purpose of preventing or treating atopic dermatitis and dermatitis, including a Cuji mulberry distillation extract, a Cuji mulberry complex extract including an ethanol extract powder of Cudrania leaves and an ethanol extract powder of Cudrania branches as an active ingredient. It relates to a composition for preventing or treating atopic dermatitis and atopic dermatitis comprising the cujippong complex extract that can be used as an active ingredient.

피부의 가장 중요한 기능 중 하나는 장벽으로서의 보호기능이다. 외부 환경에 직접 노출되는 피부는 체액의 손실을 막고 유해한 환경으로부터 신체를 보호하는 가장 중요한 일차 방어선이다. 또한, 독성 물질이나 미생물, 물리적인 자극이나 자외선에 대한 장벽기능을 수행한다. 그러나 이러한 피부장벽기능이 피부 외· 내부의 다양한 자극들을 받게 되면, 피부장벽이 손상되어 피부가 건조해지거나 피부에 염증반응을 일으키게 된다. 아울러 이때 발생되는 초기 염증반응을 효과적으로 제어하지 못하면 심한 피부염으로 악화될 수 있다.One of the most important functions of the skin is its protective function as a barrier. The skin that is directly exposed to the external environment is the most important first line of defense to prevent the loss of body fluids and protect the body from harmful environments. In addition, it performs a barrier function against toxic substances, microorganisms, physical stimuli, or ultraviolet rays. However, when the skin barrier function receives various external and internal stimuli, the skin barrier is damaged and the skin becomes dry or causes an inflammatory reaction in the skin. In addition, if the initial inflammatory reaction that occurs at this time is not effectively controlled, severe dermatitis may worsen.

일반적으로 아토피성 피부염(atopic dermatitis)은 천식과 알레르기성 질환의 발달 전에 발생하는 만성적인 염증질환이다. 이러한 염증 반응에는 다양한 생화학적 현상이 관여하는데, 특히 산화질소 합성효소(nitric oxide synthase, NOS)와 다양한 프로스타글란딘(prostaglandins) E2의 생합성과 관련되는 사이클로옥시제나제(cyclooxygenase, COX)가 염증 반응의 중요한 매개체로 알려져 있다.In general, atopic dermatitis is a chronic inflammatory disease that occurs before the development of asthma and allergic diseases. Various biochemical phenomena are involved in this inflammatory response, and in particular, cyclooxygenase (COX), which is involved in the biosynthesis of nitric oxide synthase (NOS) and various prostaglandins E2, plays an important role in the inflammatory response. known as a medium.

NOS는 세 가지 이성질체가 존재하는데, 칼슘이나 카모듈린 의존성인 eNOS(내피성 NOS)와 nNOS(신경성 NOS), 그리고 LPS(lipopolysaccharide)와 같은 세균의 내독소나 IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-8, IL-12과 같은 여러 염증성 사이토카인에 의해 유도되는 iNOS(유도성 NOS)가 있으며, L-아르기닌(L-arginine)으로부터 산화질소(NO)를 생성한다. eNOS나 nNOS에 의해 생성되는 NO는 혈압 조절 작용, 신경 전달 작용, 학습, 기억 등과 관련된 다양한 생리 반응을 수행함으로써 인체의 항상성 유지에 중요한 역할을 하지만, iNOS에 의해 생성되는 NO는 관절염, 패혈증, 조직이식거부반응, 자가면역질환, 신경세포의 사멸 등 다양한 염증성 질환에 관여하는 것으로 알려져 있다(Moncade S et al, Pharmacol Rev, 1991, 43, 109; Nature Medicine, 2001, 7, 1138; Mu, M M, J Endotoxic Res 7, p341, 2001).There are three isomers of NOS. Calcium or carmodulin-dependent eNOS (endothelial NOS) and nNOS (neurogenic NOS), and bacterial endotoxins such as LPS (lipopolysaccharide), IL-1β, TNF-α, IL There is iNOS (inducible NOS) that is induced by several inflammatory cytokines such as -6, IL-8, and IL-12, and produces nitric oxide (NO) from L-arginine. NO produced by eNOS or nNOS plays an important role in maintaining body homeostasis by performing various physiological reactions related to blood pressure regulation, neurotransmission, learning, and memory. It is known to be involved in various inflammatory diseases such as transplant rejection, autoimmune disease, and neuronal death (Moncade S et al, Pharmacol Rev, 1991, 43, 109; Nature Medicine, 2001, 7, 1138; Mu, M M, J Endotoxic Res 7, p341, 2001).

따라서 NO, PGE2, 염증성 사이토카인 등의 생성 억제제는 아토피 피부 질환 치료제로서 활용될 수 있다.Therefore, inhibitors of the production of NO, PGE2, inflammatory cytokines, etc. can be used as therapeutic agents for atopic skin diseases.

또한, 아토피성 피부염은 케모카인의 농도, 양적변화나 활성 정도에 따라 그 증상에 차이가 있으며, Th2 타입의 림프구가 병변부(lesionalskin)로 침입하는 현상을 말하기도 한다. 아토피성 피부염은 면역학적 요인에 의해 각질형성세포의 증식이 비정상적으로 일어나는 현상이라고도 할 수 있는데, 각질형성세포를 IFN-γ(interferon-γ)나 TNF-α(tumornecrosis factor-α)에 노출시키면 TARC, MDC, CTACK 등의 케모카인이 비정상적으로 발현하는 것을 확인할 수 있다. 이러한 현상은 염증반응이 일어나면서 단핵구/T세포(monocytes/T cells)가 피부로 침투되는 현상이 증가되기 때문이다. 또한, 아토피성 피부염의 대부분을 차지하는 외인성 아토피 피부염은 IgE와 연관된 면역 기전에 의해 발생되는데 특정 알레르겐(allergen)에 대한 즉시형 면역 반응보다는 T세포 이상에 의한 지연성 면역 반응이 관여한다는 보고들이 많다. 또한, 요즘은 B세포로 부터 IgE의 생성을 유도하는 IL-4 등 Th2관련 사이토카인(cytokine)들이 아토피의 원인이라고 보고되고 있다(JS Kang et al, Ihhibition of atopic dermatitis by topical application of silymarin in NC/Nga mice Int Immunopharm (2008) 8:1475-1480)In addition, the symptoms of atopic dermatitis are different depending on the concentration, quantitative change, or activity level of chemokines, and it is also referred to as a phenomenon in which Th2-type lymphocytes invade into the lesionalskin. Atopic dermatitis can also be said to be a phenomenon in which the proliferation of keratinocytes occurs abnormally due to immunological factors. When keratinocytes are exposed to IFN-γ (interferon-γ) or TNF-α (tumornecrosis factor-α), TARC , it can be confirmed that chemokines such as MDC and CTACK are abnormally expressed. This phenomenon is because an inflammatory reaction occurs and the penetration of monocytes/T cells into the skin increases. In addition, exogenous atopic dermatitis, which accounts for most of atopic dermatitis, is caused by an immune mechanism related to IgE, and there are many reports that a delayed immune response caused by T cell abnormality is involved rather than an immediate immune response to a specific allergen. In addition, these days, Th2-related cytokines such as IL-4, which induce the production of IgE from B cells, are reported to be the cause of atopy (JS Kang et al, Ihhibition of atopic dermatitis by topical application of silymarin in NC). /Nga mice Int Immunopharm (2008) 8:1475-1480)

한편, 염증(inflammation)이란 외부 감염원(박테리아, 곰팡이, 바이러스, 다양한 종류의 알레르기 유발물질)의 침입에 의하여 형성되는 농양의 병리적 상태를 뜻한다. 구체적으로, 외부 세균이 특정 조직에 침입하여 증식을 하게 되면 생체의 백혈구가 이를 인지하여 증식된 외부 세균을 활발히 공격하게 되는데, 이 과정 중 발생되는 백혈구의 사해가 균에 의하여 침입받은 조직에 축적됨과 동시에 백혈구에 의하여 사멸된 침입균의 세포 파괴물이 침입받은 조직 내로 융해되어 농양이 형성된다. 염증에 의한 농양의 치료는 소염작용을 통하여 촉진될 수 있는데, 소염작용이란 항균제를 이용하여 침입균의 증식을 억제하거나 농양 중에 축적된 이물질들을 탐식하는 대식세포(macrophage)를 활성화하여 상기 이물질들을 소화 및 배설하는 대식세포의 기능을 항진시키는 등의 염증 치료 촉진작용이다.On the other hand, inflammation refers to a pathological condition of an abscess formed by invasion of external infectious agents (bacteria, fungi, viruses, and various types of allergens). Specifically, when external bacteria invade and proliferate in a specific tissue, the white blood cells of the living body recognize this and actively attack the proliferated external bacteria. At the same time, the cell debris of the invading bacteria killed by the white blood cells melts into the invaded tissue to form an abscess. The treatment of abscesses caused by inflammation can be promoted through anti-inflammatory action, which means using an antibacterial agent to suppress the growth of invading bacteria or activate macrophages that phagocytose the foreign substances accumulated during the abscess to digest the foreign substances. and promoting the treatment of inflammation, such as enhancing the function of excreted macrophages.

일반적으로 염증반응은 생체의 세포나 조직에 기질적 변화를 가져오는 침습으로 인한 손상을 수복 및 재생하기 위한 생체방어 반응과정이고, 이 반응과정에는 국소의 혈관, 체액의 각종 조직세포 및 면역세포 등이 작용한다. 정상적으로 외부 침입균에 의하여 유도되는 염증반응은 생체를 보호하기 위한 방어 시스템인 반면, 비정상적으로 과도한 염증반응이 유도되면 다양한 질환들이 나타나게 되는데, 이러한 질환들을 염증 질환이라 한다. 상기 염증 질환은 외부자극에 의하여 활성화된 표적세포로부터 분비되는 다양한 염증 매개물질이 염증을 증폭 및 지속시켜 인체의 생명을 위협하는 질환으로서 급성염증, 류마티스관절염과 같은 관절 내에서의 질환, 건선 등의 형태로 나타나는 피부질환 및 기관지 천식 등의 알레르기성 염증질환 등을 포함한다.In general, the inflammatory reaction is a biological defense reaction process for repairing and regenerating damage caused by invasion that causes organic changes in cells or tissues of the living body. This works. The inflammatory response normally induced by external invading bacteria is a defense system to protect the living body, whereas when an abnormally excessive inflammatory response is induced, various diseases appear. These diseases are called inflammatory diseases. The inflammatory disease is a disease in which various inflammatory mediators secreted from target cells activated by external stimuli amplify and sustain inflammation, thereby threatening the life of the human body. It includes skin diseases that appear in the form of allergic inflammatory diseases such as bronchial asthma.

염증을 유도하는 사이토카인과 매개체들은 핵의 요소에 의해 조절된다. 그 예로 NF-κB(nuclear factorkappa B)는 Rel 유전자계(Rel gene family)의 핵단백질로서 7가지가 있고, 세포질에서는 IκB(inhibitory kappa B)와 결합되어 불활성인 형태로 존재하나, 유해산소(reactive oxygen), TNF-α(tumor necrosis factor α) 과 같은 케모카인(chemokines) 및 LPS와 같은 다양한 자극에 의해 IκB 키나제가 활성화된 후 인산화 과정을 통해 IκB가 떨어져 나가게 된다. p50과 p65의 헤테로다이머(heterodimer)로 구성된 NF-κB는 활성화 된 후, 핵으로 이동하여 염증반응을 유도하는 유전자(종양괴사인자나 사이클로옥사이드 합성효소) 발현을 촉진시키는 것으로 알려져 있다.Inflammatory cytokines and mediators are regulated by nuclear factors. For example, NF-κB (nuclear factorkappa B) is a nuclear protein of the Rel gene family, and there are 7 types of it. oxygen), chemokines such as TNF-α (tumor necrosis factor α), and various stimuli such as LPS activate IκB kinase, and then IκB is released through phosphorylation. NF-κB, which is composed of heterodimers of p50 and p65, is known to promote expression of genes (tumor necrosis factor or cyclooxide synthetase) that move to the nucleus and induce inflammatory responses after activation.

현재 아토피성 피부염을 포함한 피부염증을 위한 치료제로는 스테로이드 제제, 국소 면역억제제, 국소 항생제 및 항히스타민 등이 사용되고 있으나, 상기 약물제제를 장기적으로 사용하는 경우 살이트는 팽창선조, 피부위축, 모세혈관 확장, 스테로이드성 여드름, 다모증, 자반 등의 부작용이 일어날 수 있다. 특히 스테로이드제를 광범위한 부위에 바르면 피부를 통해 약제가 전신적으로 흡수되어 소아의 경우 성장을 방해할 수 있고, 성인은 골다공증과 같은 전신적인 부작용이 발생할 수 있다. Currently, steroid preparations, topical immunosuppressants, topical antibiotics and antihistamines are used as therapeutic agents for skin inflammation including atopic dermatitis. Side effects such as steroid acne, hirsutism, and purpura may occur. In particular, when steroids are applied to a wide area, the drug is systemically absorbed through the skin, which can impede growth in children and systemic side effects such as osteoporosis in adults.

따라서 아토피 및 피부염에 예방 또는 치료 효과가 있으면서도 천연물질로부터 유래되어 부작용이 없이 인체에 안전한 새로운 개념의 아토피 및 피부염의 예방 또는 치료용 조성물의 개발이 필요한 실정이다.Therefore, there is a need to develop a composition for preventing or treating atopic dermatitis and atopic dermatitis of a new concept that is safe for the human body without side effects because it is derived from natural substances while having a preventive or therapeutic effect on atopic dermatitis and atopic dermatitis.

한편, 꾸지뽕나무(Cudrania tricuspidata)는 뽕나무과 꾸지뽕나무속에 속하는 갈잎작은키 나무로, 우리나라 황해도 이남 중남부의 산기슭이나 들판에서 자란다. 꾸지뽕나무는 일반 뽕나무와 달리 긴 가시가 달려있고, 잎의가장자리가 밋밋하며, 잎을 자르면 우유같은 흰액이 나오며, 열매에서도 같은 액이 나오는 것이 특징이다. 꾸지뽕나무는 플라노이드, 가바, 루틴, 아스파라긴산등 생리활성 물질을 함유하고 있으며, 항암, 진통, 항균, 어혈제거, 당뇨, 고혈압, 뇌출혈, 생리통, 냉증 완화, 소염 등의 효능이 있다고 알려져 있다.On the other hand, Cudrania tricuspidata is a small deciduous tree belonging to the genus Cudrania tricuspidata, and grows at the foot of a mountain or field in south central Hwanghae, South Korea. Unlike general mulberry trees, Cudrania mulberry has long thorns, the edges of the leaves are flat, and when the leaves are cut, a milky white liquid comes out, and the same liquid comes out from the fruit. Cuji mulberry contains physiologically active substances such as planoids, GABA, rutin, and aspartic acid, and is known to have anti-cancer, analgesic, antibacterial, blood stasis, diabetes, high blood pressure, cerebral hemorrhage, menstrual pain, relief from poor circulation, and anti-inflammatory properties.

우리나라는 예로부터 이러한 꾸지뽕 나무가 산야(山野)에 산재되어 있을 뿐만 아니라, 양잠업을 할 때 누에에게 뽕잎을 안정되게 공급할 수 있도록 할 목적으로 꾸지뽕나무를 재배해오고 있다. 상기와 같이 재배되어지는 꾸지뽕나무는 뽕잎의 대량 양산을 위하여 해마다 가지치기를 하게 되는데, 상기와 같이 베어낸 꾸지뽕나무는 상기한 바와 같이 생약효능이 우수함에도 불구하고, 목질(木質)이 연하고, 그 양이 대단히 많아 그 처리에 어려움을 겪고 있는 실정이다.In Korea, these mulberry trees have been scattered in mountains and fields since ancient times, and they have been cultivated for the purpose of stably supplying mulberry leaves to silkworms during sericulture. The Cudrania mulberry grown as described above is pruned every year for mass production of mulberry leaves. Although the Cucurbita mulberry tree cut as described above has excellent herbal efficacy as described above, the wood quality is soft, The amount is so large that it is difficult to process it.

대한민국 특허등록 제10-1651064호Korean Patent Registration No. 10-1651064 대한민국 특허등록 제10-2117520호Korean Patent Registration No. 10-2117520

JS Kang et al, Ihhibition of atopic dermatitis by topical application of silymarin in NC/Nga mice Int Immunopharm (2008) 8:1475-1480JS Kang et al, Ihhibition of atopic dermatitis by topical application of silymarin in NC/Nga mice Int Immunopharm (2008) 8:1475-1480

본 발명은 상술한 문제점을 해결하기 위해 안출된 것으로서, 본 발명의 일 구현예는 꾸지뽕 복합추출물을 유효성분으로 포함하여, 인체에 안전하면서도 아토피 및 피부염에 대한 예방 또는 치료 효과가 우수한 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물을 제공하고자 하는 것이다.The present invention has been devised to solve the above-described problems, and an embodiment of the present invention contains cujippong complex extract as an active ingredient, which is safe for the human body and has excellent preventive or therapeutic effects for atopic dermatitis and dermatitis. Prevention of atopic dermatitis and dermatitis Or to provide a composition for treatment.

본 발명이 해결하고자 하는 다양한 과제들은 이상에서 언급한 과제들에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당업자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.Various problems to be solved by the present invention are not limited to the above-mentioned problems, and other problems not mentioned will be clearly understood by those skilled in the art from the following description.

본 발명의 일 구현예는 꾸지뽕나무 증류추출액, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말을 포함하여 이루어진 꾸지뽕 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물로서,One embodiment of the present invention is a composition for preventing or treating atopic dermatitis and atopic dermatitis comprising a Cuji mulberry complex extract comprising as an active ingredient a Cuji mulberry distillate extract, an ethanol extract powder of Cudrania leaves and an ethanol extract powder of Cudrania branches,

상기 꾸지뽕나무 증류추출액은 꾸지뽕나무가 수납되는 뽕기름 추출기의 가열용기를 간접가열하여, 상기 꾸지뽕나무로부터 빠져나와 증발하는 수증기를 얻고, 상기 수증기를 냉각 및 응축시켜, 꾸지뽕나무 액화추출물을 수득하는 단계; 상기 수득된 꾸지뽕나무 액화추출물을 6 내지 60 개월 동안 숙성한 후, 중등액을 분리추출하여 꾸지뽕나무 추출물 원액을 수득하는 단계; 및 상기 수득된 꾸지뽕나무 추출물 원액을 70 내지 120 ℃의 온도에서 증류 추출하여 꾸지뽕나무 증류추출액을 수득하는 단계;를 포함하는 방법으로 준비되는 것이고; The Cuji mulberry distillation extract indirectly heats the heating vessel of the mulberry oil extractor in which the Cudrania mulberry is accommodated, to obtain water vapor that escapes from the Cudrania and evaporates, and cooling and condensing the water vapor to obtain a Cuji mulberry liquefied extract ; After aging the obtained Cuji mulberry liquefied extract for 6 to 60 months, separating and extracting the intermediate solution to obtain a cucurbita mulberry extract stock solution; And distilling the obtained Cuji mulberry extract stock solution at a temperature of 70 to 120 ℃ to obtain a distillation extract of Cuji mulberry tree; it will be prepared by a method comprising;

상기 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말은 꾸지뽕나무 잎을 파쇄하는 단계; 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 잎을 70 중량% 농도의 에탄올 1L당 200 내지 600 g의 비율로 혼합하고, 20 내지 30 ℃의 온도에서 70 내지 90 시간 동안 정치시킨 후, 여과하여 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 수득하는 단계; 및 상기 수득된 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 35 내지 45 ℃의 온도에서 회전감압 농축하여 에탄올을 제거한 후, - 55 내지 65 ℃의 온도에서 동결건조하여, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말을 수득하는 단계;를 포함하는 방법으로 준비되는 것이고; The ethanol extract powder of the Cuji mulberry leaf is crushing the Cuji mulberry leaf; The crushed Curcuma leaves are mixed at a ratio of 200 to 600 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, and left still at a temperature of 20 to 30 ° C. for 70 to 90 hours, followed by filtration to obtain an ethanol extract of Cudrania leaves. obtaining; And after removing the ethanol by rotary vacuum concentration of the obtained ethanol extract of Cuji mulberry leaves at a temperature of 35 to 45 ° C., and freeze-drying at a temperature of -55 to 65 ° C. to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry leaves. It is prepared in a way that includes;

상기 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말은 꾸지뽕나무 가지를 파쇄하는 단계; 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 가지를 70 중량% 농도의 에탄올 1L당 200 내지 600 g의 비율로 혼합하고, 20 내지 30 ℃의 온도에서 70 내지 90 시간 동안 정치시킨 후, 여과하여 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 수득하는 단계; 및 상기 수득된 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 35 내지 45 ℃의 온도에서 회전감압 농축하여 에탄올을 제거한 후, - 55 내지 65 ℃의 온도에서 동결건조하여, 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말을 수득하는 단계;를 포함하는 방법으로 준비되는 것인 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.The ethanol extract powder of the Cuji mulberry branch is crushing the Cuji mulberry branch; The crushed Curcuma branch is mixed in a ratio of 200 to 600 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, left still at a temperature of 20 to 30 ℃ for 70 to 90 hours, and filtered to obtain an ethanol extract of Cuji mulberry branch obtaining; And after removing the ethanol by rotary vacuum concentration of the obtained ethanol extract of Cuji mulberry branch at a temperature of 35 to 45 ° C., and freeze-drying at a temperature of -55 to 65 ° C. to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry branch. It provides a composition for preventing or treating atopic dermatitis and dermatitis, which is prepared by a method comprising a.

상기 꾸지뽕나무 증류추출액은 상기 수득된 꾸지뽕나무 추출물 원액을 70 내지 120 ℃의 온도에서 증류 추출하여 꾸지뽕나무 증류추출액을 수득하는 단계를 4회 반복하여, 준비된 꾸지뽕나무 4차 증류추출액인 것이고;The Cuji mulberry distillation extract is obtained by distilling the obtained Cuji mulberry extract stock solution at a temperature of 70 to 120 ° C. and repeating the step of obtaining a Cuji mulberry distillation extract 4 times, which is the prepared Cuji mulberry quaternary distillation extract;

상기 꾸지뽕 복합추출물은 꾸지뽕나무 4차 증류추출액, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말이 2: 1: 1의 중량비율로 혼합되는 것일 수 있다.The Cuji mulberry complex extract may be a mixture of the quaternary distillation extract of Cuji mulberry, ethanol extract powder of Cuji mulberry leaf and ethanol extract powder of Cuji mulberry branch in a weight ratio of 2: 1: 1.

상기 꾸지뽕나무 증류추출액은 HPLC(Hitachi 社, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) 분석 결과, 0.5 내지 0.15 중량%의 구아이아콜을 함유하는 것일 수 있다.The Cuji mulberry distillation extract may contain 0.5 to 0.15% by weight of guaiacol as a result of HPLC (Hitachi Corporation, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) analysis.

상기 뽕기름 추출기는 꾸지뽕나무가 수납되는 수납부(17)가 서로 다른 두께를 가지는 스테인레스 두장이 겹쳐져 내벽(12a)과 외벽(12)을 이루는 이중의 몸체(11)구조로써, 외벽(12)으로 도포형성된 황토벽(13)으로부터 발생되는 원적외선이 수납부(17)에 수납된 꾸지뽕나무에 쪼여질 수 있도록 하는 원적외선조사구멍(14) 다수가 내벽(12a)과 외벽(12)을 관통하여 형성되어 있고, 하부에는 꾸지뽕나무로부터 추출되는 뽕기름만이 통과하여 뽕기름 저장용기(30)로 회수되도록 하는 거름망(16)이 설치되어 있는 뽕기름추출로(15)가 형성되어 있으며, 상부의 플랜지(18)에는 뚜껑(20)을 고정시키는 고정핀(19)이 설치되어 있는 가열용기(10)와;The mulberry oil extractor has a double body 11 structure in which two stainless steel sheets having different thicknesses are overlapped to form an inner wall 12a and an outer wall 12 in which the receiving part 17 in which the mulberry tree is accommodated, the outer wall 12 A plurality of far-infrared irradiation holes 14 through which far-infrared rays generated from the applied-formed loess wall 13 can be irradiated to the mulberry tree housed in the receiving unit 17 are formed through the inner wall 12a and the outer wall 12, , a mulberry oil extraction path 15 is formed in the lower part with a sieve 16 installed so that only the mulberry oil extracted from the mulberry tree passes through and is recovered to the mulberry oil storage container 30, and the upper flange 18 ) is a heating vessel 10 having a fixing pin 19 for fixing the lid 20 is installed;

상기 가열용기(10)의 상부 플랜지(18)에 힌지축을 매개로 설치되어 있는 고정핀(19)이 끼워지는 고정홈(21a)이 플랜지(21)에 형성되어 있고, 가열용기(10)의 내부온도가 일정온도 이상일 때 개방되는 안전콕크(22)가 설치되어 있으며, 가열용기(10)의 내부온도를 감지하는 온도감지봉(23)이 설치되어 있는 뚜껑(20)과;A fixing groove 21a into which a fixing pin 19 installed via a hinge shaft is fitted to the upper flange 18 of the heating vessel 10 is formed in the flange 21, and the inside of the heating vessel 10 is A lid 20 having a safety cock 22 that opens when the temperature is above a certain temperature is installed, and a temperature sensing rod 23 for detecting the internal temperature of the heating vessel 10 is installed;

상기 가열용기(10)의 몸체(11)하부로 형성되어 있는 뽕기름추출로(15)에 나사식 체결되고, 꾸지뽕나무로부터 추출되어 진 수분에 의해 발생한 가열용기(10)내의 수증기가 기온차에 의해 결로되어질 수 있도록 냉각수펌프(31)에 의해 펌핑되는 냉각수가 순환되어지는 냉각수순환공간(32)을 갖는 이중의 구조이며, 추출된 뽕기름의 수거가 가능하도록 하는 배출구(33)에 배출밸브(34)가 설치되어 있는 뽕기름저장용기(30)와;It is screw-fastened to the mulberry oil extraction path 15 formed under the body 11 of the heating vessel 10, and the water vapor in the heating vessel 10 generated by the moisture extracted from the mulberry tree is generated by the temperature difference. It has a double structure having a cooling water circulation space 32 in which the cooling water pumped by the cooling water pump 31 is circulated to be condensed, and a discharge valve 34 at the discharge port 33 that enables the collection of the extracted mulberry oil. ) and a mulberry oil storage container 30 is installed;

플레이트(41) 상부에 열손실을 최소화할 수 있도록 내화단열벽돌(42)이 조적(組積)되어지되, 상기 가열용기(10)의 안착이 가능한 공간(43)을 갖도록 조적(組積)되고, 상기 내화단열벽돌(42) 내면을 따라 발열히터(44)가 설치되어 있으며, 상기 발열히터(44)의 발열온도를 감지하는 고열온도감지봉(45)이 설치되어 있고, 상기 내화단열벽돌(42)이 스텐커버(46)에 감싸여서 된 기체(40)와;To minimize heat loss on the upper plate 41, a fire-resisting insulating brick 42 is built, and the heating vessel 10 is built to have a space 43 where it can be seated. , a heating heater 44 is installed along the inner surface of the fire-resisting insulation brick 42, and a high-temperature temperature sensing rod 45 for sensing the heating temperature of the heating heater 44 is installed, and the fire insulation brick ( 42) and the body 40 is wrapped in the stainless cover 46;

상기 가열용기의 내부온도감지봉(23) 및 고열온도감지봉(45) 그리고 발열히터(44)를 제어하는 콘트롤박스(50)를 포함하는 것일 수 있다.It may include a control box 50 for controlling the internal temperature sensing rod 23 and the high temperature sensing rod 45 of the heating vessel and the heating heater 44 .

또한, 본 발명의 다른 일 구현예는 상기 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물을 포함하는 피부외용제를 제공한다.In addition, another embodiment of the present invention provides an external preparation for skin comprising the composition for preventing or treating atopic dermatitis and dermatitis.

또한, 본 발명의 또 다른 일 구현예는 상기 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물을 포함하는 화장료를 제공한다.In addition, another embodiment of the present invention provides a cosmetic comprising the composition for preventing or treating atopic dermatitis and atopic dermatitis.

본 발명의 일 구현예에 따른 꾸지뽕 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물에 따르면, 염증 반응의 중요한 매개체로 알려진 산화질소 합성효소(nitric oxide synthase, NOS) 단백질의 발현을 획기적으로 낮추어, 산화질소(NO) 및 프로스타글란딘(prostaglandins) E2의 생성을 억제할 수 있는 효과가 있다. 또한, IL-4, TNF-α 등의 염증성 사이토카인의 농도를 낮추어 혈액내 IgE의 생성을 매우 억제할 수 있는 효과가 있다. 또한, 면역 교란 물질인 2,4-디니트로클로로벤젠(2,4-dinitrochlorobenzene; DNCB)으로 아토피성 피부염을 유발한 실험동물에 도포되었을 때 홍반(erythema), 출혈(hemorrhage), 건조(dryness), 흉터(scarring), 태선화(lichenification), 짓무름(erosin) 등의 아토피 및 피부염 증상을 완화시키는 활성이 있다. According to the composition for the prevention or treatment of atopic dermatitis and dermatitis comprising the cucurbita complex extract according to an embodiment of the present invention as an active ingredient, the expression of nitric oxide synthase (NOS) protein, which is known as an important mediator of the inflammatory response Remarkably lowered, there is an effect that can inhibit the production of nitric oxide (NO) and prostaglandins (prostaglandins) E2. In addition, by lowering the concentration of inflammatory cytokines such as IL-4 and TNF-α, there is an effect that can greatly inhibit the production of IgE in the blood. In addition, when applied to experimental animals that induced atopic dermatitis with 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB), an immune-disrupting substance, erythema, hemorrhage, and dryness occurred. , scarring (scarring), lichenification (lichenification), it has an activity to relieve atopic and dermatitis symptoms such as erosin.

따라서 이러한 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물을 피부에 직접 도포함으로써, 약학적으로 매우 유용하게 활용될 수 있다. 특히, 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 피부외용제 및 화장료로 매우 유용하게 활용될 수 있다. Therefore, by directly applying the composition for the prevention or treatment of atopic dermatitis and dermatitis to the skin, it can be very usefully pharmaceutically. In particular, it can be very usefully used as an external preparation for skin and cosmetics for the prevention or treatment of atopic dermatitis and dermatitis.

도 1은 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 단면구성도.
도 2는 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 가열용기 몸체에 꾸지뽕나무를 넣기 위해 뚜껑을 개방하는 초기 상태의 예시도.
도 3은 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 가열용기 몸체에 꾸지뽕나무를 넣을 수 있도록 뚜껑을 개방한 상태의 예시도.
도 4는 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 가열용기 몸체에 꾸지뽕나무를 넣은 상태의 예시도.
도 5는 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 가열용기 몸체에 뚜껑을 위치시켜 고정핀을 고정홈에 위치 고정시키는 초기 상태의 예시도.
도 6은 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 가열용기 몸체 고정핀의 조임너트를 조여 뚜껑을 장착완료한 상태의 예시도.
도 7은 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 가열용기에 발열히터로부터 열이 가해져 꾸지뽕나무로부터 뽕기름이 추출되는 과정의 예시도.
도 8은 본 발명에 의한 뽕기름 추출기의 가열용기에 발열히터로부터 열이 가해져 꾸지뽕나무로부터 추출된 뽕기름이 뽕기름저장용기로 유입된 상태의 예시도.
도 9는 본 발명의 제조예 1에서 제조된 꾸지뽕나무 1차 증류추출액의 HPLC 분석결과 그래프.
도 10은 본 발명의 제조예 2에서 제조된 꾸지뽕나무 4차 증류추출액의 HPLC 분석결과 그래프.
도 11은 RAW 264.7 세포에 대한 꾸지뽕 복합추출물의 농도에 따른 독성 평가결과 그래프.
도 12는 RAW 264.7 세포에서 iNOS 단백질 발현 억제 평가에 대한 웨스턴 블롯 결과 이미지.
도 13은 RAW 264.7 세포에서 산화질소(NO) 생성 억제 평가에 대한 결과 그래프.
도 14는 RAW 264.7 세포에서 프로스타글란딘(prostaglandins) E2 생성 억제 평가에 대한 결과 그래프.
도 15는 DNCB용액을 도포한 실험동물에 대한 피부 손상 정도 결과를 나타낸 그래프.
도 16은 Hematoxylin & eosin(H&E) 염색한 피부 표피의 광학현미경 이미지.
도 17은 toluidine blue 염색한 피부 조직의 광학현미경 이미지.
도 18은 DNCB용액을 도포한 실험동물에 대한 혈청 IgE의 발현양을 비교하여 나타낸 그래프.
도 19는 DNCB용액을 도포한 실험동물의 Th2세포에 의한 IL-4의 농도 변화를 나타낸 그래프.
도 20은 DNCB용액을 도포한 실험동물의 Th1세포에 의한 TNF-α의 농도 변화를 나타낸 그래프.1 is a cross-sectional view of a mulberry oil extractor according to the present invention.
Figure 2 is an exemplary view of an initial state of opening the lid to put the mulberry mulberry tree in the heating container body of the mulberry oil extractor according to the present invention.
Figure 3 is an exemplary view of a state in which the lid is opened so that the mulberry tree can be put in the heating container body of the mulberry oil extractor according to the present invention.
Figure 4 is an exemplary view of a state in which Cuji mulberry is put in the body of the heating container of the mulberry oil extractor according to the present invention.
Figure 5 is an exemplary view of an initial state of positioning the lid on the heating vessel body of the mulberry oil extractor according to the present invention to fix the fixing pin in the fixing groove.
Figure 6 is an exemplary view of a state in which the lid is installed by tightening the tightening nut of the fixing pin of the heating vessel body of the mulberry oil extractor according to the present invention.
7 is an exemplary view of a process in which mulberry oil is extracted from Cuji mulberry tree by applying heat from an exothermic heater to the heating vessel of the mulberry oil extractor according to the present invention.
Figure 8 is an exemplary view of a state in which the mulberry oil extracted from the Curcuma mulberry tree is introduced into the mulberry oil storage container by applying heat from the exothermic heater to the heating container of the mulberry oil extractor according to the present invention.
Figure 9 is a graph of HPLC analysis results of the primary distillation extract of Cudrania mulberry prepared in Preparation Example 1 of the present invention.
Figure 10 is a graph of the HPLC analysis result of the quaternary distillation extract of Cuji mulberry prepared in Preparation Example 2 of the present invention.
11 is a graph of the toxicity evaluation results according to the concentration of kkujippong complex extract for RAW 264.7 cells.
12 is a western blot image for the evaluation of iNOS protein expression inhibition in RAW 264.7 cells.
13 is a graph of results for evaluation of inhibition of nitric oxide (NO) production in RAW 264.7 cells.
14 is a graph of the results of evaluation of inhibition of prostaglandins E2 production in RAW 264.7 cells.
15 is a graph showing the results of the degree of skin damage to the experimental animals to which the DNCB solution was applied.
16 is an optical microscope image of the skin epidermis stained with Hematoxylin & eosin (H&E).
17 is an optical microscope image of skin tissue stained with toluidine blue.
18 is a graph showing a comparison of the expression level of serum IgE in the experimental animals to which the DNCB solution was applied.
19 is a graph showing changes in the concentration of IL-4 by Th2 cells of experimental animals coated with DNCB solution.
20 is a graph showing the change in the concentration of TNF-α by Th1 cells of the experimental animals coated with the DNCB solution.

이하, 본 발명의 구현예를 상세히 설명하기로 한다. 다만, 이는 예시로서 제시되는 것으로, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않으며 본 발명은 후술할 청구범위의 범주에 의해 정의될 뿐이다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described in detail. However, this is provided as an example, and the present invention is not limited thereto, and the present invention is only defined by the scope of the claims to be described later.

이러한 본 발명의 일 구현예에 따른 꾸지뽕 복합추출물을 유효성분으로 포함하는 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물에 따르면, 염증 반응의 중요한 매개체로 알려진 산화질소 합성효소(nitric oxide synthase, NOS) 단백질의 발현을 획기적으로 낮추어, 산화질소(NO) 및 프로스타글란딘(prostaglandins) E2의 생성을 억제할 수 있는 효과가 있다. 또한, IL-4, TNF-α 등의 염증성 사이토카인의 농도를 낮추어 혈액내 IgE의 생성을 매우 억제할 수 있는 효과가 있다. 또한, 면역 교란 물질인 2,4-디니트로클로로벤젠(2,4-dinitrochlorobenzene; DNCB)으로 아토피성 피부염을 유발한 실험동물에 도포되었을 때 홍반(erythema), 출혈(hemorrhage), 건조(dryness), 흉터(scarring), 태선화(lichenification), 짓무름(erosin) 등의 아토피 및 피부염 증상을 완화시키는 활성이 있다. According to the composition for the prevention or treatment of atopic dermatitis and dermatitis comprising the kkujippong complex extract according to an embodiment of the present invention as an active ingredient, the expression of nitric oxide synthase (NOS) protein, which is known as an important mediator of the inflammatory response It has the effect of suppressing the production of nitric oxide (NO) and prostaglandins E2 by dramatically lowering the In addition, by lowering the concentration of inflammatory cytokines such as IL-4 and TNF-α, there is an effect that can greatly inhibit the production of IgE in the blood. In addition, when applied to experimental animals that induced atopic dermatitis with 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB), an immune-disrupting substance, erythema, hemorrhage, and dryness occurred. , scarring (scarring), lichenification (lichenification), it has an activity to relieve atopic and dermatitis symptoms such as erosin.

보다 구체적으로 상기 꾸지뽕나무 증류추출액은 꾸지뽕나무가 수납되는 뽕기름 추출기의 가열용기를 간접가열하여, 상기 꾸지뽕나무로부터 빠져나와 증발하는 수증기를 얻고, 상기 수증기를 냉각 및 응축시켜, 꾸지뽕나무 액화추출물을 수득하는 단계; 상기 수득된 꾸지뽕나무 액화추출물을 6 내지 60 개월 동안 숙성한 후, 중등액을 분리추출하여 꾸지뽕나무 추출물 원액을 수득하는 단계; 및 상기 수득된 꾸지뽕나무 추출물 원액을 70 내지 120 ℃의 온도에서 증류 추출하여 꾸지뽕나무 증류추출액을 수득하는 단계;를 포함하는 방법으로 준비되는 것을 바람직하게 사용할 수 있다.More specifically, the Cuji mulberry distillation extract indirectly heats the heating vessel of the mulberry oil extractor in which the Cudrania mulberry is accommodated to obtain water vapor that escapes from the Cuji mulberry and evaporates, and cools and condenses the water vapor to obtain a Cuji mulberry liquefied extract obtaining; After aging the obtained Cuji mulberry liquefied extract for 6 to 60 months, separating and extracting the intermediate solution to obtain a cucurbita mulberry extract stock solution; And distilling the obtained Cuji mulberry extract stock solution at a temperature of 70 to 120 ℃ to obtain a distillation extract of Cudrania mulberry; what is prepared by a method comprising a can be preferably used.

상기 수납되는 꾸지뽕나무는 평균 직경이 7 cm를 초과하는 통나무 뿐만 아니라, 꾸지뽕 나무의 잎, 전초, 및 평균 직경이 7 cm 이하의 줄기를 갖는 목질(木質)이 연한 꾸지뽕 나무가지를 포함할 수 있다.The housed Cuji mulberry tree may include not only logs having an average diameter of more than 7 cm, but also leaves, outposts, and branches of Curcuma trees having soft woody (woody) branches having an average diameter of 7 cm or less. .

또한, 상기 뽕기름 추출기는 꾸지뽕나무가 수납되는 수납부(17)가 서로 다른 두께를 가지는 스테인레스 두장이 겹쳐져 내벽(12a)과 외벽(12)을 이루는 이중의 몸체(11)구조로써, 외벽(12)으로 도포형성된 황토벽(13)으로부터 발생되는 원적외선이 수납부(17)에 수납된 꾸지뽕나무에 쪼여질 수 있도록 하는 원적외선조사구멍(14) 다수가 내벽(12a)과 외벽(12)을 관통하여 형성되어 있고, 하부에는 꾸지뽕나무로부터 추출되는 뽕기름만이 통과하여 뽕기름 저장용기(30)로 회수되도록 하는 거름망(16)이 설치되어 있는 뽕기름추출로(15)가 형성되어 있으며, 상부의 플랜지(18)에는 뚜껑(20)을 고정시키는 고정핀(19)이 설치되어 있는 가열용기(10)와;In addition, the mulberry oil extractor has a dual body 11 structure in which two stainless steel sheets having different thicknesses are overlapped to form an inner wall 12a and an outer wall 12 in which the receiving portion 17 in which the mulberry tree is accommodated, the outer wall 12 ), a plurality of far-infrared irradiation holes 14 that allow the far-infrared rays generated from the loess wall 13 coated with the loess wall 13 to be irradiated to the mulberry tree housed in the receiving unit 17 are formed through the inner wall 12a and the outer wall 12 The mulberry oil extraction path 15 is formed in the lower part with a sieve 16 installed so that only the mulberry oil extracted from the mulberry tree passes through and is recovered to the mulberry oil storage container 30, and the upper flange (18) the heating vessel 10 is provided with a fixing pin 19 for fixing the lid 20 and;

이러한 뽕기름 추출기는 도 1 내지 도 8에서 도시한 바와 같은 뽕기름 추출기를 사용할 수 있다.Such a mulberry oil extractor may use a mulberry oil extractor as shown in FIGS. 1 to 8 .

이하, 상기 뽕기름 추출기에 대하여 보다 구체적으로 설명한다.Hereinafter, the mulberry oil extractor will be described in more detail.

상기 뽕기름 추출기는 꾸지뽕나무가 수납되는 가열용기(10)와, 상기 가열용기(10)의 상부로 덮여지는 뚜껑(20)과, 상기 가열용기(10)의 하부 뽕기름추출로(15)에 나사식 체결되는 뽕기름저장용기(30)와, 상기 가열용기(10)를 감싸는 기체(40)를 포함한다.The mulberry oil extractor includes a heating vessel 10 in which Cuji mulberry is accommodated, a lid 20 covered with an upper portion of the heating vessel 10, and a lower mulberry oil extraction furnace 15 of the heating vessel 10. It includes a mulberry oil storage container 30 that is screw-fastened, and a gas 40 surrounding the heating container 10 .

상기 가열용기(10)는, 꾸지뽕나무가 수납되는 수납부(17)가 서로 다른 두께를 가지는 스테인레스 두장이 겹쳐져 내벽(12a)과 외벽(12)을 이루는 이중의 몸체(11)구조를 갖는다.The heating container 10 has a double body 11 structure in which two stainless steel sheets having different thicknesses are overlapped with each other to form an inner wall 12a and an outer wall 12 in which the accommodating part 17 in which the mulberry tree is accommodated is overlapped.

상기 몸체(11)의 외벽(12)에는 황토벽(13)이 도포 형성되어 있고, 상기 외벽(12)으로 도포형성된 황토벽(13)으로부터 발생 되는 원적외선이 수납부(17)에 수납된 꾸지뽕나무에 쪼여질 수 있도록 하는 원적외선조사구멍(14) 다수가 내벽(12a)과 외벽(12)을 관통하여 형성되어 있다. An ocher wall 13 is coated on the outer wall 12 of the body 11, and far-infrared rays generated from the loess wall 13 coated with the outer wall 12 are shoved into the mulberry tree housed in the receiving unit 17. A plurality of far-infrared irradiation holes 14 to be filtered are formed through the inner wall 12a and the outer wall 12 .

상기 몸체(11)하부에는 꾸지뽕나무로부터 추출되는 뽕기름만이 통과하여 뽕기름저장용기(30)로 회수되도록 하는 거름망(16)이 설치되어 있는 뽕기름추출로(15)가 형성되어 있는 것이다.In the lower part of the body 11, a mulberry oil extraction path 15 is formed in which a sieve 16 is installed so that only the mulberry oil extracted from the mulberry tree passes through and is recovered to the mulberry oil storage container 30.

상기 몸체 상부의 플랜지(18)에는 뚜껑(20)을 고정시키는 고정핀(19)이 설치되어 있다.A fixing pin 19 for fixing the lid 20 is installed on the flange 18 of the upper part of the body.

상기 황토벽(13)은 그 두께가 5 내지 20 ㎝의 두께를 갖고 형성될 수 있다.The loess wall 13 may be formed to have a thickness of 5 to 20 cm.

상기 가열용기(10)의 몸체(11) 상부로 설치되는 뚜껑(20)은 몸체(11)의 상부로 형성된 플랜지(18)에 설치된 고정핀(19)이 끼워지는 고정홈(21a)이 플랜지(21)에 형성되어 있다.The lid 20 installed on the upper portion of the body 11 of the heating vessel 10 has a fixing groove 21a into which the fixing pin 19 installed on the flange 18 formed on the upper portion of the body 11 is fitted. 21) is formed.

더불어 가열용기(10)의 내부온도가 일정온도 이상일 때 개방되는 안전콕크(22)가 설치되어 있고, 가열용기(10)의 내부온도를 감지하는 온도감지봉(23)이 설치되어 있다.In addition, a safety cock 22 that is opened when the internal temperature of the heating vessel 10 is above a certain temperature is installed, and a temperature sensing rod 23 for sensing the internal temperature of the heating vessel 10 is installed.

상기 안전콕(22)은 가열용기(10)의 내부 온도가 500 ℃를 초과할 때 개방되어 가열용기 내부의 압력이 지나치게 높아지는 것을 방지하게 된다.The safety cock 22 is opened when the internal temperature of the heating vessel 10 exceeds 500 ℃ to prevent the pressure inside the heating vessel from becoming too high.

상기 가열용기(10)의 수납부(17)내의 온도는 최대 500 ℃의 열을 갖도록 가열되는 것이 바람직하다.It is preferable that the temperature in the accommodating part 17 of the heating vessel 10 be heated to have a maximum heat of 500°C.

상기 가열용기(10)의 몸체(11) 하부로 형성된 뽕기름추출로(15)에 나사식 체결되는 뽕기름저장용기(30)는, 뽕기름추출로(15)에 나사식 체결된다.The mulberry oil storage container 30 screwed to the mulberry oil extraction path 15 formed in the lower portion of the body 11 of the heating vessel 10 is screwed to the mulberry oil extraction path 15 .

상기 뽕기름저장용기(30)는 꾸지뽕나무로부터 추출되어 진 수분에 의해 발생한 가열용기(10)내의 수증기가 기온차에 의해 결로되어질 수 있도록 냉각수펌프(31)에 의해 펌핑되는 냉각수가 순환되어지는 냉각수순환공간(32)을 갖는 이중의 구조이다.The mulberry oil storage container 30 is a cooling water circulation in which the cooling water pumped by the cooling water pump 31 is circulated so that the water vapor in the heating vessel 10 generated by the moisture extracted from the mulberry tree can be condensed by the temperature difference. It is a double structure with a space (32).

상기 뽕기름저장용기(30)의 하부에는 추출된 뽕기름의 수거가 가능하도록 하는 배출구(33)가 형성되어 있고, 상기 배출구(33)에는 배출밸브(34)가 설치되어 있다.An outlet 33 is formed at a lower portion of the mulberry oil storage container 30 to enable collection of the extracted mulberry oil, and a discharge valve 34 is installed at the outlet 33 .

상기 가열용기(10)가 안착 되는 기체(40)는 플레이트(41) 상부에 내화단열벽돌(42)이 조적(組積)되어지되, 상기 가열용기(10)의 안착이 가능한 공간(43)을 갖도록 조적(組積)되고, 상기 내화단열벽돌(42) 내면을 따라 발열히터(44)가 설치되어 있으며, 상기 발열히터(44)의 발열온도를 감지하는 고열온도감지봉(45)이 설치되어 있고, 상기 내화단열벽돌(42)이 스텐커버(46)에 감싸여서 형성된 것이다.In the gas 40 on which the heating vessel 10 is seated, a fire-resisting insulating brick 42 is built on an upper plate 41, and a space 43 in which the heating vessel 10 can be seated is formed. A heating heater 44 is installed along the inner surface of the fire-resistant insulating brick 42, and a high-temperature temperature sensing rod 45 for sensing the heating temperature of the heating heater 44 is installed. There, the fire-resisting insulating brick 42 is formed by being wrapped in the stainless cover 46.

상기 기체(40)의 내화단열벽돌(42) 내측으로 설치된 발열히터(44)는 그 발열온도가 900℃까지 발열하며, 상기 발열온도에 의해 가열용기(10)의 내부 온도가 500 ℃내외까지 원하는 온도에서 유지할 수 있게 된다.The heat-generating heater 44 installed inside the fire-resisting insulating brick 42 of the gas 40 heats up to 900 ° C. temperature can be maintained.

상기 기체(40)의 발열히터(44)와 뚜껑(20)의 내부온도감지봉(23) 및 고열온도감지봉(45)은 콘트롤박스(50)의 제어수단에 의해 제어되어 진다.The heating heater 44 of the gas 40 and the internal temperature sensing rod 23 and the high temperature sensing rod 45 of the lid 20 are controlled by the control means of the control box 50 .

상기 가열용기(10)와 뚜껑(20)의 사이에는 기밀을 유지할 수 있도록 하는 카본패킹(60)이 개재되어 있을 수 있다.A carbon packing 60 may be interposed between the heating vessel 10 and the lid 20 to maintain airtightness.

전술한 구성으로 이루어진 본 발명의 뽕기름 추출기를 이용하여 뽕기름을 추출할 때에는 도 2 내지 도 3에서와 같이 가열용기(10)의 상부로 장착된 뚜껑(20)을 분리해 낸다.When extracting mulberry oil using the mulberry oil extractor of the present invention configured as described above, the lid 20 mounted on the upper portion of the heating vessel 10 is removed as shown in FIGS. 2 to 3 .

상기 뚜껑(20)을 가열용기(10)로부터 분리해낼 때에는 몸체(11)의 상부 플랜지(18)에 힌지축(도면에서 특정부호로 표시하지 않았음)을 매개로 설치된 고정핀(19)의 조임너트(18a)를 풀어 고정핀(19)이 뚜껑(20)의 플랜지(21)의 고정홈(21a)으로부터 느슨하게 한 후, 도 2에서와 같이 젖혀 줌으로써, 뚜껑(20)의 분리가 이루어진다.(도 3 참조)When the lid 20 is separated from the heating vessel 10, the fixing pin 19 installed on the upper flange 18 of the body 11 via a hinge shaft (not indicated by a specific symbol in the drawing) is tightened. After loosening the nut 18a, the fixing pin 19 is loosened from the fixing groove 21a of the flange 21 of the lid 20, and then turned over as in FIG. 2, whereby the lid 20 is separated. ( see Fig. 3)

상기와 같이 가열용기(10)로부터 뚜껑(20)을 분리해낸 상태에서 도 4에서와 같이 짧게 자른 꾸지뽕나무를 몸체(11)의 수납부(17)에 가득 채운다.In the state in which the lid 20 is separated from the heating container 10 as described above, the short cut mulberry tree is filled in the receiving part 17 of the body 11 as shown in FIG. 4 .

수납부(17)에 꾸지뽕나무가 가득 채워진 상태에서 가열용기(10)의 몸체(11)에 뚜껑(20)을 위치시켜 장착하게 되는데, 뚜껑(20)을 장착할 때에는 플랜지(21)에 형성된 고정홈(21a)이 고정핀(19)에 위치하도록 한 상태에서 도 5에서와 같이 고정핀(19)을 세운다.The lid 20 is positioned and mounted on the body 11 of the heating container 10 in a state where the receiving part 17 is filled with cucurbita, and when the lid 20 is mounted, the fixing formed on the flange 21 In a state where the groove 21a is positioned on the fixing pin 19, the fixing pin 19 is erected as shown in FIG. 5 .

이 후 도 6에서와 같이 조임너트(19a)를 조여 뚜껑(20) 가열용기(10)의 몸체(11) 상부의 플랜지(18)에 뚜껑(20)의 플랜지(21)가 압압 밀착되어 진다.Thereafter, the flange 21 of the lid 20 is pressed into tight contact with the flange 18 of the upper body 11 of the heating vessel 10 of the lid 20 by tightening the tightening nut 19a as shown in FIG. 6 .

이때 카본패킹(60)에 의해 기밀성이 우수해질 수 있다.At this time, airtightness may be improved by the carbon packing 60 .

상기한 바와 같이 가열용기(10)의 몸체(11) 수납부(17)에 꾸지뽕나무가 채워지고, 뚜껑(20)이 장착되어진 상태에서 콘트롤박스(50)의 운전버튼(특정부호로 표시하지 않았음)을 조작한다.As described above, the operation button (not indicated by a specific code) of the control box 50 in a state in which the body 11 accommodating part 17 of the heating container 10 is filled with cucurbita, and the lid 20 is mounted. um) is operated.

상기 콘트롤박스(50)의 운전버튼 조작에 의해 발열하는 발열히터(44)의 열이 몸체(11)를 구성하는 황토벽(13)과 외벽(12) 및 내벽(12a)을 전도되어 수납부(17) 수납된 꾸지뽕나무를 가열하게 된다.The heat of the heating heater 44, which generates heat by operation of the operation button of the control box 50, is conducted to the loess wall 13, the outer wall 12, and the inner wall 12a constituting the body 11, so that the receiving part 17 ) The stored Cudrania is heated.

상기 발열히터(44)로부터 발열된 열은 공간(43)을 거쳐 전도됨으로써, 간접적인 열에 의한 꾸지뽕나무가 탄화되는 것이다.The heat generated from the heating heater 44 is conducted through the space 43, so that the mulberry tree is carbonized by indirect heat.

상기 발열히터(44)의 열이 몸체(11)의 수납부(17)로 수납된 꾸지뽕나무에 가해지면 꾸지뽕나무의 수분이 빠져나오면서 증발하게 된다.When the heat of the heating heater 44 is applied to the cucurbita tree accommodated in the receiving part 17 of the body 11, the moisture of the cucurbita tree escapes and evaporates.

상기와 같이 꾸지뽕나무로부터 빠져나와 증발하는 수증기는 가열용기(10)의 몸체(11) 하부로 형성된 뽕기름추출로(15)에 나사결합됨과 동시에 냉각수순환공간(32)으로 냉각수가 냉각수펌프(31)에 의해 순환되는 뽕기름저장용기(30) 내의 기온 차이에 의해 상기 뽕기름저장용기와 이웃하는 수증기가 응결되어 뽕기름으로 변하게 된다.(도 7 참조)As described above, the water vapor evaporating from the mulberry tree is screwed into the mulberry oil extraction path 15 formed under the body 11 of the heating vessel 10 and, at the same time, the cooling water is transferred to the cooling water circulation space 32 by the cooling water pump 31 ), due to the temperature difference in the mulberry oil storage container 30 circulated by the mulberry oil storage container, the water vapor adjacent to the mulberry oil storage container is condensed and turned into mulberry oil (see FIG. 7).

상기와 같이 변한 뽕기름은 뽕기름추출로(15) 상에 설치된 거름망(16)을 통과하여 순수 뽕기름만이 뽕기름저장용기(30)에 유입되어 진다.(도 8 참조)The mulberry oil changed as described above passes through the sieve 16 installed on the mulberry oil extraction path 15, and only pure mulberry oil is introduced into the mulberry oil storage container 30 (see FIG. 8).

상기와 같이 발열히터(44)의 열에 의해 가열되어 수분이 증발되고, 탄화되는 꾸지뽕나무는 발열히터(44)의 열이 직접 가열용기(10)로 전해지기보다는 공간(43)을 거쳐 간접적으로 전해짐에 따라 꾸지뽕나무가 급속하게 탄화되어지지 않고 서서히 탄화되어 양질의 탄화물(숯)을 얻을 수가 있게 되는 것이다.As described above, in the mulberry tree that is heated by the heat of the heating heater 44 to evaporate moisture, and carbonized, the heat from the heating heater 44 is indirectly transmitted through the space 43 rather than directly transmitted to the heating vessel 10. As a result, Curcuma mulberry is not carbonized rapidly, but is carbonized slowly to obtain high-quality carbide (charcoal).

아울러, 상기 가열용기(10)의 몸체(11)를 이루는 외벽(12)과 내벽(12a)에 의해 일어진 몸체(11)에는 원적외선방사구멍(14)이 다수 형성되어 있어 황토벽(13)으로부터 방출되는 원적외선이 꾸지뽕나무에 쪼여져 뽕기름과 탄화물(숯)에서 나타나는 타르냄새를 정화시킴과 더불어 종래와 같이 발열원인 왕겨 등을 태울 때 발생하는 연기의 혼입이 전혀 없어 생산된 탄화물(숯)과 뽕기름으로부터 타르냄새가 현저하게 줄어들게 된다.In addition, a plurality of far-infrared radiation holes 14 are formed in the body 11 raised by the outer wall 12 and the inner wall 12a constituting the body 11 of the heating vessel 10, and are emitted from the loess wall 13 In addition to purifying the tar smell that appears from mulberry oil and char (charcoal) when the far-infrared rays emitted from the mulberry tree are irradiated, carbides (charcoal) and mulberry produced because there is no mixing of smoke generated when burning rice husk, which is a heat source, as in the past. The odor of tar from the oil is significantly reduced.

상기 뽕기름저장용기(30)로 뽕기름이 유입되면, 배출구(33)에 설치된 배출밸브(34)를 열어 용기(병)에 담아 포장하게 된다.When the mulberry oil flows into the mulberry oil storage container 30, the discharge valve 34 installed at the outlet 33 is opened, and the container (bottle) is placed and packaged.

한편, 가열용기(10)의 몸체(11) 수납부의 탄화물(숯)은 뚜껑(20)을 열어 수거하여서 단위 포장을 통해 고기를 구울 때 사용하는 숯으로 출하 판매하게 되는 것이다.On the other hand, the carbide (charcoal) of the body 11 receiving part of the heating container 10 is collected by opening the lid 20 and shipped and sold as charcoal used for grilling meat through unit packaging.

상기 탄화물(숯)을 꺼낸 후, 꾸지뽕나무를 재차 수납하여 전술한 방법에 의해 뽕기름과 탄화물(숯)을 생산할 수 있다.After taking out the carbide (charcoal), it is possible to produce mulberry oil and carbide (charcoal) by the above-described method by re-accommodating the mulberry tree.

상기한 뽕기름 추출기를 이용함으로써, 본 발명의 일 구현예에 따른 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물은 매우 높은 수율로 생산성이 향상되고, 청결하게 얻을 수 있게 되었다.By using the above-described mulberry oil extractor, the composition for preventing or treating atopic dermatitis and dermatitis according to an embodiment of the present invention has improved productivity and can be obtained cleanly with a very high yield.

또한, 상기 꾸지뽕나무 액화추출물을 수득하는 단계;는 상기 가열용기를 200 내지 500 ℃의 온도로 간접가열하여, 상기 꾸지뽕나무로부터 빠져나와 증발하는 수증기를 얻고, 상기 수증기를 0 내지 10 ℃의 온도로 냉각 및 응축시킴으로써 수행될 수 있다. 보다 구체적으로, 상기 간접가열은 200 내지 300 ℃의 온도에서 20 내지 30 분 동안 가열하는 단계 및 400 내지 500 ℃의 온도에서 10 내지 20 분 동안 가열하는 단계를 2 내지 5회 반복하는 펄스형식의 간접가열로 수행되어, 유효성분을 더욱 효율적으로 얻을 수 있다. 이로써 상기한 본 발명의 효과를 더욱 개선할 수 있는 효과가 있다.In addition, the step of obtaining the mulberry liquefied extract; is by indirectly heating the heating vessel to a temperature of 200 to 500 ℃, to obtain water vapor that escapes from the Cuji mulberry and evaporates, and the water vapor to a temperature of 0 to 10 ℃ It can be carried out by cooling and condensing. More specifically, the indirect heating is a pulse-type indirect heating step of heating at a temperature of 200 to 300 ℃ for 20 to 30 minutes and heating at a temperature of 400 to 500 ℃ for 10 to 20 minutes 2 to 5 times repeating It is carried out by heating, so that the active ingredient can be obtained more efficiently. Thereby, there is an effect that can further improve the effect of the present invention described above.

또한, 상기 수득된 꾸지뽕나무 액화추출물을 6 내지 60 개월 동안 숙성한 후, 중등액을 분리추출하여 꾸지뽕나무 추출물 원액을 수득하는 단계;에서는 유해한 저비점성분 및 난분리 불순물을 분리하고, 중등액만을 분리추출하는 것으로서, 상기 분리추출은 당분야에서 일반적으로 사용하는 방법으로 수행될 수 있다.In addition, the obtained Cuji mulberry liquefied extract is aged for 6 to 60 months, and then the intermediate liquid is separated and extracted to obtain a Cuji mulberry extract undiluted solution; In the step of separating harmful low-boiling components and egg separation impurities, only the middle liquid is separated As for extraction, the separation extraction may be performed by a method generally used in the art.

또한, 상기 수득된 꾸지뽕나무 추출물 원액을 70 내지 120 ℃의 온도에서 증류 추출하여 꾸지뽕나무 증류추출액을 수득하는 단계;는 2회 이상 반복 수행하는 것이 바람직하다. 특히, 상기 꾸지뽕나무 증류추출액을 수득하는 단계를 4회 반복하여, 준비된 꾸지뽕나무 4차 증류추출액인 것을 사용하는 것이 더욱 바람직하다.In addition, the step of distilling and extracting the obtained Cuji mulberry extract stock solution at a temperature of 70 to 120 ℃ to obtain a distillation extract of Cuji mulberry; is preferably performed twice or more repeatedly. In particular, it is more preferable to repeat the step of obtaining the distillation extract of Cuji mulberry four times, and use the prepared quaternary distillate extract of Cudrania.

이러한 상기 꾸지뽕나무 증류추출액은 HPLC(Hitachi 社, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) 분석 결과, 0.5 내지 0.15 중량%의 구아이아콜을 함유하는 것일 수 있다.As a result of the HPLC (Hitachi Co., UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) analysis, the Cuji mulberry distillate extract may contain 0.5 to 0.15% by weight of guaiacol.

한편, 상기 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말은 꾸지뽕나무 잎을 파쇄하는 단계; 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 잎을 70 중량% 농도의 에탄올 1L당 200 내지 600 g의 비율로 혼합하고, 20 내지 30 ℃의 온도에서 70 내지 90 시간 동안 정치시킨 후, 여과하여 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 수득하는 단계; 및 상기 수득된 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 35 내지 45 ℃의 온도에서 회전감압 농축하여 에탄올을 제거한 후, - 55 내지 65 ℃의 온도에서 동결건조하여, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말을 수득하는 단계;를 포함하는 방법으로 준비되는 것을 바람직하게 사용할 수 있다.On the other hand, the ethanol extract powder of the Cuji mulberry leaf is crushing the Cuji mulberry leaf; The crushed Curcuma leaves are mixed at a ratio of 200 to 600 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, and left still at a temperature of 20 to 30 ° C. for 70 to 90 hours, followed by filtration to obtain an ethanol extract of Cudrania leaves. obtaining; And after removing the ethanol by rotary vacuum concentration of the obtained ethanol extract of Cuji mulberry leaves at a temperature of 35 to 45 ° C., and freeze-drying at a temperature of -55 to 65 ° C. to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry leaves. What is prepared by a method containing ; can be preferably used.

또한, 상기 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말은 꾸지뽕나무 가지를 파쇄하는 단계; 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 가지를 70 중량% 농도의 에탄올 1L당 200 내지 600 g의 비율로 혼합하고, 20 내지 30 ℃의 온도에서 70 내지 90 시간 동안 정치시킨 후, 여과하여 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 수득하는 단계; 및 상기 수득된 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 35 내지 45 ℃의 온도에서 회전감압 농축하여 에탄올을 제거한 후, - 55 내지 65 ℃의 온도에서 동결건조하여, 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말을 수득하는 단계;를 포함하는 방법으로 준비되는 것을 바람직하게 사용할 수 있다.In addition, the ethanol extract powder of the Cuji mulberry branch is crushing the Cuji mulberry branch; The crushed Curcuma branch is mixed in a ratio of 200 to 600 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, left still at a temperature of 20 to 30 ℃ for 70 to 90 hours, and filtered to obtain an ethanol extract of Cuji mulberry branch obtaining; And after removing the ethanol by rotary vacuum concentration of the obtained ethanol extract of Cuji mulberry branch at a temperature of 35 to 45 ° C., and freeze-drying at a temperature of -55 to 65 ° C. to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry branch. What is prepared by a method containing ; can be preferably used.

상기 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 수득하는 단계; 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 수득하는 단계;에서 상기 70 중량% 농도의 에탄올에는 상기 70 중량% 농도의 에탄올 100 중량부에 대하여, 꾸지뽕나무 증류추출액 1 내지 15 중량부를 더 포함할 수 있다. 이로써, 상기한 본 발명의 효과를 더욱 개선할 수 있는 효과가 있다.Obtaining an ethanol extract of the leaves of Cudrania mulberry; And obtaining an ethanol extract of cucurbita branches; in the ethanol of the 70% by weight concentration, based on 100 parts by weight of the ethanol of the 70% by weight concentration, 1 to 15 parts by weight of the Curcuma distillate extract may be further included. Thereby, there is an effect that can further improve the effect of the present invention described above.

상기 꾸지뽕 복합추출물은 꾸지뽕나무 4차 증류추출액, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말이 2: 1: 1의 중량비율로 혼합되어 상기한 본 발명의 효과를 더욱 개선할 수 있는 효과가 있다.The cucurbita complex extract is a quaternary distillation extract of cucurbita, ethanol extract powder of cucurbita leaves, and ethanol extract powder of cucurbita branch in a weight ratio of 2: 1: 1 to further improve the effect of the present invention. there is an effect

상기 피부외용제는 연고제, 크림제, 로션제, 액제, 드레싱제, 패취제, 수포제, 테이프제, 연무제, 외용산제 또는 스프레이제인 것일 수 있다.The external preparation for skin may be an ointment, a cream, a lotion, a liquid, a dressing, a patch, a blister, a tape, a mist, an external acid, or a spray.

상기 피부외용제는 본 발명의 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 피부용 외용제에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 피부 과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. The external preparation for skin is a fatty substance, organic solvent, solubilizer, thickening agent and gelling agent, emollient, antioxidant, suspending agent, stabilizer, foaming agent, and fragrance in addition to the composition for preventing or treating atopic dermatitis and dermatitis of the present invention. , surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic actives, lipid vesicles or for the skin It may contain adjuvants commonly used in the field of dermatology, such as any other ingredients commonly used in external preparations.

또한, 상기 성분들은 피부 과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입될 수 있다. 상기 피부외용제에 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물의 투여량은 0.0001 내지 100 ㎎/㎏이고, 바람직하게는 0.001 내지 10 ㎎/㎏이며, 이에 제한되는 것은 아니다. 투여량은 특정 환자의 체중, 연령, 성별, 건강상태, 투여기간, 제거율, 질환의 중증도 등에 따라 변화될 수 있다.In addition, the above ingredients may be introduced in an amount generally used in the field of dermatology. The dosage of the composition for the prevention or treatment of atopic dermatitis and dermatitis in the external preparation for skin is 0.0001 to 100 mg/kg, preferably 0.001 to 10 mg/kg, but is not limited thereto. The dosage may be changed according to the weight, age, sex, health status, administration period, clearance rate, severity of disease, etc. of a specific patient.

상기 화장료는 크림, 스킨, 로션, 에센스, 유액, 젤, 립스틱, 클렌징 폼, 클렌징 크림, 클렌징 워터, 분무제, 샴푸, 린스, 트리트먼트, 바디클렌져, 비누, 팩, 마사지제, 페이스파우더, 콤팩트, 파운데이션, 투웨이케이크 또는 메이크업베이스인 것일 수 있다.The cosmetics include cream, skin, lotion, essence, emulsion, gel, lipstick, cleansing foam, cleansing cream, cleansing water, spray, shampoo, conditioner, treatment, body cleanser, soap, pack, massage agent, face powder, compact, It may be a foundation, a two-way cake, or a makeup base.

상기 화장료는 본 발명의 아토피 및 피부염 예방 또는 치료용 조성물에 추가로 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다.In addition to the composition for preventing or treating atopic dermatitis and atopic dermatitis of the present invention, the cosmetic includes a fatty substance, an organic solvent, a solubilizer, a thickening agent and a gelling agent, an emollient, an antioxidant, a suspending agent, a stabilizer, a foaming agent, a fragrance, Surfactants, water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blockers, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, lipid vesicles or cosmetics It may contain adjuvants commonly used in the cosmetic field, such as any other commonly used ingredients.

이상, 본 발명의 바람직한 실시예를 들어 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 상기 실시예에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 기술적 사상의 범위 내에서 해당 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의하여 여러 가지 변형이 가능하다.As mentioned above, although preferred embodiments of the present invention have been described in detail, the present invention is not limited to the above embodiments, and various modifications can be made by those skilled in the art within the scope of the technical spirit of the present invention. This is possible.

<제조예 1><Production Example 1>

꾸지뽕나무 1차 증류추출액의 제조Preparation of primary distillation extract of Cudrania mulberry tree

평균 직경이 약 10 cm 이상인 통나무 100 중량부, 꾸지뽕 나무의 잎 25 중량부, 및 평균 직경이 7 cm 이하의 줄기를 갖는 목질(木質)이 연한 꾸지뽕 나무가지 25 중량부를 혼합한 꾸지뽕나무를 준비하였다.100 parts by weight of a log having an average diameter of about 10 cm or more, 25 parts by weight of leaves of a mulberry tree, and 25 parts by weight of a soft mulberry branch having a stem with an average diameter of 7 cm or less was prepared. .

도 1에 도시된 뽕기름 추출기를 이용하여, 꾸지뽕나무 추출물을 추출하였다. 보다 구체적으로, 상기 준비된 꾸지뽕나무를 세척하여 뽕기름 추출기의 수납부(17)에 안치하고 수납부(17)의 내부 온도를 약 250 ℃의 온도에서 20 분 동안 가열하는 단계 및 480 ℃의 온도에서 10 분 동안 가열하는 단계를 반복하는 펄스형식의 간접가열 방식으로 3시간 동안 가열한 후, 5 ℃의 냉각수로 냉각함으로써, 꾸지뽕나무 액화추출물을 수득하였다.Using the mulberry oil extractor shown in Figure 1, the Cuji mulberry extract was extracted. More specifically, washing the prepared mulberry tree, placing it in the receiving unit 17 of the mulberry oil extractor, and heating the internal temperature of the receiving unit 17 at a temperature of about 250 ° C. for 20 minutes and at a temperature of 480 ° C. After heating for 3 hours in a pulse-type indirect heating method that repeats the heating step for 10 minutes, by cooling with cooling water at 5 ° C., a liquefied extract of mulberry tree was obtained.

상기 수득된 꾸지뽕나무 액화추출물은 24 개월 동안 숙성하여, 유해한 저비점성분 및 난분리 불순물을 상분리시켰다. 상기 상분리된 꾸지뽕나무 액화추출물로부터 중등액만을 분리추출하여 꾸지뽕나무 추출물 원액을 수득하였다.The obtained Cuji mulberry liquefied extract was aged for 24 months to phase-separate harmful low-boiling components and egg separation impurities. From the phase-separated Cuji mulberry liquefied extract, only the intermediate solution was separated and extracted to obtain a cucurbita mulberry extract stock solution.

상기 수득된 꾸지뽕나무 추출물 원액을 75 ℃의 온도에서 증류 추출하여 꾸지뽕나무 1차 증류추출액을 수득하였다.The obtained Cuji mulberry extract stock solution was distilled and extracted at a temperature of 75 ℃ to obtain a first distillation extract of Cuji mulberry tree.

이러한 상기 꾸지뽕나무 1차 증류추출액에 대하여, HPLC(Hitachi 社, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) 분석을 수행하였다. 이때, 컬럼은 CAPCELL PAK C18, UG120 column (5 μm, 150 × 46 mm, Shiseido)을 사용하였다. 이동상은 정제수(용매 A)와 acetonitrile(용매 B)을 3:1 비율로 혼합하여 사용하였다. 시료 주입량은 20 μℓ이었고, UV 275 m에서 측정하였다.HPLC (Hitachi, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) analysis was performed with respect to the first distillate extract of Cudrania mulberry tree. In this case, CAPCELL PAK C18, UG120 column (5 μm, 150 × 46 mm, Shiseido) was used as the column. The mobile phase was used by mixing purified water (solvent A) and acetonitrile (solvent B) in a 3:1 ratio. The sample injection amount was 20 μL, and it was measured at UV 275 m.

상기 HPLC 분석결과, 상기 꾸지뽕나무 1차 증류추출액은 0.13 중량%의 구아이아콜을 함유하는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 상기 꾸지뽕나무 1차 증류추출액이 구아이아콜을 함유하는 것을 확인할 수 있는 HPLC 분석결과 그래프를 도 9에 나타내었다.As a result of the HPLC analysis, it was confirmed that the first distillation extract of Cuji mulberry contains 0.13% by weight of guaiacol. In addition, the HPLC analysis result graph that can confirm that the first distillation extract of Cudrania contains guaiacol is shown in FIG. 9 .

꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말의 제조Preparation of ethanol extract powder of Cudrania leaves

꾸지뽕나무 잎을 평균직경이 약 1 cm 이하가 되도록 파쇄한 후, 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 잎을 70 중량% 농도의 에탄올 1L당 400 g의 비율로 혼합하고, 25 ℃의 온도에서 80 시간 동안 정치시킨 후, 여과지(Whatman NO 2, England)를 사용하여 여과함으로써 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 수득하였다.After crushing the mulberry leaves to have an average diameter of about 1 cm or less, the crushed mulberry leaves were mixed at a ratio of 400 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, and left at a temperature of 25 ℃ for 80 hours. Then, by filtration using filter paper (Whatman NO 2, England) to obtain an ethanol extract of mulberry leaves.

상기 수득된 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 40 ℃의 온도에서 회전감압 농축하여 에탄올을 제거한 후, -60℃의 온도에서 동결건조하여, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말을 수득하였다.The obtained ethanol extract of Cuji mulberry leaves was concentrated under rotational pressure at a temperature of 40 ℃ to remove ethanol, and then freeze-dried at a temperature of -60 ℃ to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry leaves.

꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말의 제조Preparation of Ethanol Extract Powder of Cudrania Branch

꾸지뽕나무 가지를 평균직경이 약 1 cm 이하가 되도록 파쇄한 후, 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 가지를 70 중량% 농도의 에탄올 1L당 450 g의 비율로 혼합하고, 25 ℃의 온도에서 72 시간 동안 정치시킨 후, 여과지(Whatman NO 2, England)를 사용하여 여과함으로써 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 수득하였다.After crushing the mulberry branches to have an average diameter of about 1 cm or less, the crushed mulberry branches are mixed at a ratio of 450 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, and left at a temperature of 25 ° C. for 72 hours. Then, by filtration using filter paper (Whatman NO 2, England) to obtain an ethanol extract of mulberry branch.

상기 수득된 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 40 ℃의 온도에서 회전감압 농축하여 에탄올을 제거한 후, -60℃의 온도에서 동결건조하여, 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말을 수득하였다.The obtained ethanol extract of Cuji mulberry branch was concentrated under rotational pressure at a temperature of 40 ℃ to remove ethanol, and then freeze-dried at a temperature of -60 ℃ to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry branch.

<제조예 2><Preparation Example 2>

꾸지뽕나무 4차 증류추출액의 제조Preparation of quaternary distillate extract of Cudrania mulberry

상기 수득된 꾸지뽕나무 추출물 원액을 75 ℃의 온도에서 증류 추출하여 꾸지뽕나무 1차 증류추출액을 수득한 후, 상기 수득된 꾸지뽕나무 1차 증류추출액을 75 ℃의 온도에서 2번째 증류 추출하여 꾸지뽕나무 2차 증류추출액을 수득한 후, 상기 수득된 꾸지뽕나무 2차 증류추출액을 75 ℃의 온도에서 3번째 증류 추출하여 꾸지뽕나무 3차 증류추출액을 수득한 후, 상기 수득된 꾸지뽕나무 3차 증류추출액을 75 ℃의 온도에서 4번째 증류 추출하여 꾸지뽕나무 4차 증류추출액을 수득하였다.After distilling the obtained Cuji mulberry extract stock solution at a temperature of 75 ℃ to obtain a first distillation extract of Cuji mulberry, the obtained Curcuma mulberry first distillation extract is subjected to a second distillation extraction at a temperature of 75 ℃ to extract Cuji mulberry 2 After obtaining the tea distillation extract, the obtained Cuji mulberry secondary distillation extract was subjected to a third distillation extraction at a temperature of 75 ° C. to obtain the Cuji mulberry tertiary distillation extract, and then the obtained Cuji mulberry tertiary distillation extract was 75 The fourth distillation extraction was performed at a temperature of ℃ to obtain a fourth distillation extract of Cudrania mulberry.

이러한 상기 꾸지뽕나무 4차 증류추출액에 대하여, HPLC(Hitachi 社, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) 분석을 수행하였다. 이때, 컬럼은 CAPCELL PAK C18, UG120 column (5 μm, 150 × 46 mm, Shiseido)을 사용하였다. 이동상은 정제수(용매 A)와 acetonitrile(용매 B)을 3:1 비율로 혼합하여 사용하였다. 시료 주입량은 20 μℓ이었고, UV 275 m에서 측정하였다.HPLC (Hitachi Corporation, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) analysis was performed on the quaternary distillate extract of Cudrania mulberry. In this case, CAPCELL PAK C18, UG120 column (5 μm, 150 × 46 mm, Shiseido) was used as the column. The mobile phase was used by mixing purified water (solvent A) and acetonitrile (solvent B) in a 3:1 ratio. The sample injection amount was 20 μL, and it was measured at UV 275 m.

상기 HPLC 분석결과, 상기 꾸지뽕나무 4차 증류추출액은 0.06 중량%의 구아이아콜을 함유하는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 상기 꾸지뽕나무 4차 증류추출액이 구아이아콜을 함유하는 것을 확인할 수 있는 HPLC 분석결과 그래프를 도 10에 나타내었다.As a result of the HPLC analysis, it was confirmed that the quaternary distillation extract of Cuji mulberry contains 0.06% by weight of guaiacol. In addition, the graph of the HPLC analysis result confirming that the quaternary distillation extract of Cudrania contains guaiacol is shown in FIG. 10 .

상기 제조예 1에서 사용한 것과 동일한 것을 사용하였다.The same one used in Preparation Example 1 was used.

<제조예 3><Production Example 3>

상기 제조예 2에서 사용한 것과 동일한 것을 사용하였다.The same one used in Preparation Example 2 was used.

꾸지뽕나무 잎을 평균직경이 약 1 cm 이하가 되도록 파쇄한 후, 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 잎을 70 중량% 농도의 에탄올 100 중량부 및 꾸지뽕나무 4차 증류추출액 7 중량부의 혼합 추출용액 1L당 380 g의 비율로 혼합하고, 25 ℃의 온도에서 80 시간 동안 정치시킨 후, 여과지(Whatman NO 2, England)를 사용하여 여과함으로써 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출액을 수득하였다.After crushing the Curcuma leaves to have an average diameter of about 1 cm or less, the crushed Curcuma leaves are mixed with 100 parts by weight of ethanol at a concentration of 70% by weight and 7 parts by weight of the Quaternary Distilled Extract of Cudrania 380 g per 1L of the extraction solution. After mixing in a ratio of 25 ℃, after standing for 80 hours at a temperature of 25 ℃, filtered using a filter paper (Whatman NO 2, England) to obtain an ethanol extract of mulberry leaves.

꾸지뽕나무 가지를 평균직경이 약 1 cm 이하가 되도록 파쇄한 후, 상기 파쇄된 꾸지뽕나무 가지를 70 중량% 농도의 에탄올 100 중량부 및 꾸지뽕나무 4차 증류추출액 7 중량부의 혼합 추출용액 1L당 430 g의 비율로 혼합하고, 25 ℃의 온도에서 72 시간 동안 정치시킨 후, 여과지(Whatman NO 2, England)를 사용하여 여과함으로써 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출액을 수득하였다.After crushing the cucurbita branches to have an average diameter of about 1 cm or less, 100 parts by weight of ethanol at a concentration of 70% by weight of the crushed cucurbita branches and 7 parts by weight of 7 parts by weight of the quaternary distillation extract of cucurbita 430 g per 1 L After mixing in a ratio of 25 ℃, after standing for 72 hours at a temperature of 25 ℃, filtered using a filter paper (Whatman NO 2, England) to obtain an ethanol extract of mulberry branch.

<실시예 1><Example 1>

상기 제조예 1에서 제조된 꾸지뽕나무 1차 증류추출액, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말이 1: 1: 1의 중량비율로 혼합한 꾸지뽕 복합추출물을 제조하였다.Cuji mulberry primary distillation extract prepared in Preparation Example 1, ethanol extract powder of Cuji mulberry leaf and ethanol extract powder of Cuji mulberry branch prepared in Preparation Example 1 were mixed in a weight ratio of 1: 1: 1 to prepare a Cuji mulberry complex extract.

<실시예 2><Example 2>

상기 제조예 2에서 제조된 꾸지뽕나무 4차 증류추출액, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말이 2: 1: 1의 중량비율로 혼합한 꾸지뽕 복합추출물을 제조하였다.Cuji mulberry quaternary distillation extract prepared in Preparation Example 2, ethanol extract powder of Cuji mulberry leaf, and ethanol extract powder of Cuji mulberry branch were mixed in a weight ratio of 2: 1: 1 to prepare a Cuji mulberry complex extract.

<실시예 3><Example 3>

상기 제조예 3에서 제조된 꾸지뽕나무 4차 증류추출액, 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말 및 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말이 2: 1: 1의 중량비율로 혼합한 꾸지뽕 복합추출물을 제조하였다.Cuji mulberry quaternary distillation extract prepared in Preparation Example 3, ethanol extract powder of Cuji mulberry leaf, and ethanol extract powder of Cuji mulberry branch were mixed at a weight ratio of 2: 1: 1 to prepare a Cuji mulberry complex extract.

<비교예 1><Comparative Example 1>

상기 제조예 1에서 제조된 꾸지뽕나무 1차 증류추출액을 비교용 추출물로 사용하였다.The primary distillation extract of Cuji mulberry prepared in Preparation Example 1 was used as a comparative extract.

<비교예 2><Comparative Example 2>

상기 제조예 1에서 제조된 꾸지뽕나무 잎의 에탄올 추출분말을 비교용 추출물로 사용하였다.The ethanol extract powder of Cuji mulberry leaves prepared in Preparation Example 1 was used as a comparative extract.

<비교예 3><Comparative Example 3>

상기 제조예 1에서 제조된 꾸지뽕나무 가지의 에탄올 추출분말을 비교용 추출물로 사용하였다.The ethanol extract powder of Cuji mulberry branch prepared in Preparation Example 1 was used as a comparative extract.

<시험예 1> 세포독성 평가 <Test Example 1> Cytotoxicity evaluation

마우스의 대식세포주(murine macrophage cell line)인 RAW 264.7 세포주를 사용하였다. 세포주는 10% 소태아혈청(fetal bovine serum), 100 units/mL 페니실린, 100 μg/mL 스트렙토마이신(streptomycin)을 함유한 Dulbecco's modified eagles medium(Gibco, USA) 완전배지에, 1 × 10⁴ cells/웰를 접종한 후 37℃ CO₂ 배양기에서 배양하였다. 이후 모든 실험예에서 사용한 세포주는 위와 동일한 과정으로 배양되었음을 밝혀둔다.A RAW 264.7 cell line, a murine macrophage cell line, was used. The cell line is 1 × 10 ⁴ cells/in Dulbecco's modified eagles medium (Gibco, USA) complete medium containing 10% fetal bovine serum, 100 units/mL penicillin, and 100 μg/mL streptomycin. After inoculation, the wells were incubated at 37° C. CO ₂ incubator. Thereafter, it is revealed that the cell lines used in all experimental examples were cultured in the same manner as above.

MTT 검정법(methylthiazol tetrazolium bromide)을 통해 상기 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물의 세포독성을 평가하였다. MTT 검정법은 살아있는 세포의 미토콘드리아에 있는 탈수소효소에 의해 생성된 보라색 결정을 DMSO(dimethyl sulfoxide)로 녹여서 발색시켜 그 흡광도를 측정하는 방법이다. 웰당 MTT 용액(50 μg/ml)을 100 μl씩 넣어 37℃, 5% CO₂ 항온기에서 4시간 반응시킨 후 배지는 제거하고 DMSO를 각각의 웰에 첨가하여, 5분간 plate shaker에서 보라색 결정을 용해시킨 다음 ELISA reader(Techan, Germany) 570 nm에서 흡광도를 측정하였고, 그 결과를 도 11에 나타내었다.The cytotoxicity of the kkujippong complex extract prepared in Example 2 was evaluated through the MTT assay (methylthiazol tetrazolium bromide). MTT assay is a method of measuring the absorbance of purple crystals generated by dehydrogenase in mitochondria of living cells by dissolving them in DMSO (dimethyl sulfoxide) to develop color. Add 100 μl of MTT solution (50 μg/ml) per well and incubate at 37° C., 5% CO ₂ in an incubator for 4 hours, then remove the medium and add DMSO to each well to dissolve purple crystals on a plate shaker for 5 minutes Then, the absorbance was measured at 570 nm with an ELISA reader (Techan, Germany), and the results are shown in FIG. 11 .

도 11에서 확인할 수 있는 바와 같이, 상기 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 0.13 중량% 농도까지는 세포 생존율이 모두 100% 이상으로 확인되었다. 통상적으로 특정 조성물을 처리하였을시 세포 생존율이 60% 이상이면 세포 독성이 없는 것으로 판단한다. 따라서 상기 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 0.5 중량% 농도까지 세포독성이 없다는 결론을 도출할 수 있었다.As can be seen in Figure 11, the kkujippong complex extract prepared in Example 2 was confirmed to have a cell viability of 100% or more up to a concentration of 0.13% by weight. In general, if the cell viability is 60% or more when a specific composition is treated, it is determined that there is no cytotoxicity. Therefore, it was possible to conclude that the kkujippong complex extract prepared in Example 2 had no cytotoxicity up to a concentration of 0.5% by weight.

<시험예 2> iNOS의 단백질 발현 억제 평가 <Test Example 2> Evaluation of iNOS protein expression inhibition

LPS(1 μg/ml)로 유도된 RAW 264.7 세포에서, 염증을 유발하는 전구염증매개 효소인 iNOS의 단백질 발현에 대한 상기 실시예 및 비교예에서 준비된 추출물들(0.13 중량% 농도로 희석)의 영향을 웨스턴 블롯(Western blot)을 통하여 관찰하였고, 그 결과를 도 12에 나타내었다.Effects of extracts prepared in Examples and Comparative Examples (diluted to a concentration of 0.13% by weight) on protein expression of iNOS, a pro-inflammatory mediating enzyme that induces inflammation, in RAW 264.7 cells induced with LPS (1 μg/ml) was observed through Western blot, and the results are shown in FIG. 12 .

도 12에서 확인할 수 있는 바와 같이, 상기 실시예 1 및 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 비교예 1 내지 3에서 준비된 비교용 추출물과 비교하여, 우수한 iNOS의 단백질 발현 억제 효과를 갖는 것을 확인할 수 있었다.As can be seen in Figure 12, the kkujippong complex extract prepared in Examples 1 and 2 compared with the comparative extract prepared in Comparative Examples 1 to 3, it was confirmed that it has an excellent iNOS protein expression inhibitory effect.

<시험예 3> 산화질소(NO) 생성 억제 평가 <Test Example 3> Nitric oxide (NO) production inhibition evaluation

각 RAW 264.7 대식세포를 1×10⁶ cells/mL의 농도로 분취하고 37℃ CO₂ 배양기에서 4시간 동안 배양한 후, LPS(1 μg/ml) 및 상기 실시예 및 비교예에서 준비된 추출물들(0.13 중량% 농도로 희석)을 처리하여 24시간 동안 배양하였다. 배양 종료 후 배양 상등액 중의 아질산염(nitrite, NO의 안정한 수화합물)의 농도를 Griess assay 방법(Griess P, Chem Ber 12:426-428, 1897)으로 측정하였다. 즉 NaNO₂를 표준물질로 하고 그리스 시약(Griess reagent, 0.5% sulfanilyamide, 0.05% N-(1-naphthyl) ethylene diamine dihydrochloride/2.5% H₃PO₄)을 이용하여 540 nm에서 시료의 흡광도를 측정하였고, 그 결과를 도 13에 나타내었다.Each RAW 264.7 macrophage was aliquoted at a concentration of 1×10 ⁶ cells/mL and incubated for 4 hours at 37° C. CO ₂ in an incubator, LPS (1 μg/ml) and extracts prepared in Examples and Comparative Examples ( diluted to a concentration of 0.13 wt%) and cultured for 24 hours. After completion of the culture, the concentration of nitrite (nitrite, a stable aqueous compound of NO) in the culture supernatant was measured by the Griess assay method (Griess P, Chem Ber 12:426-428, 1897). That is, the absorbance of the sample was measured at 540 nm using NaNO ₂ as a standard material and a grease reagent (Griess reagent, 0.5% sulfanilyamide, 0.05% N-(1-naphthyl) ethylene diamine dihydrochloride/2.5% H ₃ PO ₄ ). , the results are shown in FIG. 13 .

도 13에서 확인할 수 있는 바와 같이, 상기 실시예 1 내지 3에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 비교예 1 내지 3에서 준비된 비교용 추출물과 비교하여, 우수한 산화질소(NO) 생성 억제 효과를 갖는 것을 확인할 수 있었다.As can be seen in Figure 13, the kkujippong complex extract prepared in Examples 1 to 3 compared with the comparative extract prepared in Comparative Examples 1 to 3, it was confirmed that it has an excellent nitric oxide (NO) production inhibitory effect. .

<시험예 4> 프로스타글란딘(prostaglandins) E2 생성 억제 평가 <Test Example 4> Prostaglandins (prostaglandins) E2 production inhibition evaluation

RAW 264.7 대식세포를 계대 배양한 후, 24 웰 플레이트에 1 X 10⁵ cells/mL씩 넣고 5% CO₂ 항온항습기에서 24시간 동안 배양하였다. 이후 배지를 제거하고 LPS(1 μg/ml) 및 상기 실시예 및 비교예에서 준비된 추출물들(0.13 중량% 농도로 희석)을 처리하여 상기 배양과 동일 조건에서 배양하였다. 배양 종료 후 배양배지를 원심분리(12,000rpm, 3 min)하여 배양 상등액을 얻고, 이를 효소면역분석법(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay, ELISA)을 이용하여 정량함으로써 프로스타글란딘 억제 효과를 평가하였다. 그 결과는 도 14에 나타내었다.After subculture of RAW 264.7 macrophages, 1 X 10 ⁵ cells/mL each was put in a 24-well plate, and incubated for 24 hours in a 5% CO ₂ thermostat. After removing the medium, LPS (1 μg/ml) and the extracts prepared in Examples and Comparative Examples (diluted to a concentration of 0.13 wt%) were treated and cultured under the same conditions as the culture. After completion of the culture, the culture medium was centrifuged (12,000 rpm, 3 min) to obtain a culture supernatant, and the prostaglandin inhibitory effect was evaluated by quantifying it using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The results are shown in FIG. 14 .

도 14에서 확인할 수 있는 바와 같이, 상기 실시예 1 내지 3에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 비교예 1 내지 3에서 준비된 비교용 추출물과 비교하여, 우수한 프로스타글란딘(prostaglandins) E2 생성 억제 효과를 갖는 것을 확인할 수 있었다.As can be seen in Figure 14, the kkujippong complex extract prepared in Examples 1 to 3 compared with the comparative extract prepared in Comparative Examples 1 to 3, it was confirmed that it has an excellent prostaglandins (prostaglandins) E2 production inhibitory effect. .

<시험예 5> DNCB에 의해 유도된 전신 아토피성 피부염에 미치는 영향 평가 <Test Example 5> Evaluation of the effect on systemic atopic dermatitis induced by DNCB

실험동물 준비laboratory animal preparation

4주령의 male Balb/c 마우스(Daehan biolink, Korea)를 구입하여 1주일 동안 적응 및 순화 후 실험에 사용하였다. 사육실의 온도는 22±2℃, 습도 50±5%로 유지하였으며, 광주기와 암주기는 12시간으로 하였다.A 4-week-old male Balb/c mouse (Daehan biolink, Korea) was purchased and used for the experiment after adaptation and acclimatization for 1 week. The temperature of the breeding room was maintained at 22±2℃ and humidity of 50±5%, and the photoperiod and dark cycle were 12 hours.

아토피성 피부염의 유도 및 시료 처리Induction and sample processing of atopic dermatitis

Balb/c 마우스를 제모하고 마우스의 양쪽 귀를 수술용 테이프로 벗긴 후 1% 2,4-dinitrochlorobenzene(DNCB, Sigma,USA)를 acetone과 olive oil 혼합액(3:1 부피비)으로 희석하여 200 μL씩 상기 제모 부위에 3주간 9회 초기 도포하였다. 1차 면역반응을 유발한지 5일 후, 0.5%로 희석한 DNCB 용액과 상기 실시예 2 및 비교예 1에서 준비된 추출물(0.13 중량% 농도로 희석)을 격일로 14일 동안 도포하였다. 이때, 시료 투여 기간에도 계속해서 DNCB를 격일로 도포하여 자연치유를 억제하였다. 한편, 양성대조군으로는 Dexamethasone을 0.1%의 농도로 증류수에 희석하여 피부에 도포하였다.After depilating the Balb/c mouse and removing both ears of the mouse with surgical tape, dilute 1% 2,4-dinitrochlorobenzene (DNCB, Sigma, USA) with acetone and olive oil mixture (3:1 volume ratio) to 200 μL each. It was initially applied 9 times for 3 weeks to the hair removal site. Five days after induction of the primary immune response, the DNCB solution diluted to 0.5% and the extracts prepared in Example 2 and Comparative Example 1 (diluted to a concentration of 0.13 wt%) were applied every other day for 14 days. At this time, natural healing was suppressed by continuously applying DNCB every other day during the sample administration period. On the other hand, as a positive control group, dexamethasone was diluted in distilled water to a concentration of 0.1% and applied to the skin.

시험 결과Test result

가. 피부 손상 정도 측정go. Measurement of skin damage

임상적 육안 평가법을 이용하여 실험동물의 피부 손상 정도(Clinical skin severity score)를 측정하였다. DNCB용액을 도포하면 실험동물은 홍반/색소침착, 부종, 출혈, 삼출/진물, 찰상, 태선화, 각질/피부건조 등이 일어나는데, 이 항목을 없음(0), 경증(1), 중증(2), 고증(3), 최고증(4)으로 나누어 채점하였다. 그 결과는 도 15과 같았다.The clinical skin severity score of the experimental animals was measured using a clinical visual evaluation method. When DNCB solution is applied, erythema/pigmentation, edema, bleeding, exudation/exudation, abrasions, lichenification, keratin/dry skin, etc. occur in experimental animals. None (0), mild (1), severe (2) , the highest test (3), and the highest test (4) were scored. The result was as shown in FIG. 15 .

도 15에서 확인할 수 있는 바와 같이, 상기 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 비교예 1에서 준비된 비교용 추출물과 비교하여, 아토피성 피부염의 증상이 현저하게 감소되는 것을 육안으로 관찰할 수 있었다. 특히, 상기 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 양성대조군인 Dexamethasone과 비교해도 아토피성 피부염의 증상이 현저하게 감소되는 것을 육안으로 관찰할 수 있었다.As can be seen in Figure 15, the kkujippong complex extract prepared in Example 2 was visually observed that the symptoms of atopic dermatitis were significantly reduced compared to the comparative extract prepared in Comparative Example 1. In particular, the kkujippong complex extract prepared in Example 2 was able to visually observe that the symptoms of atopic dermatitis were significantly reduced compared to Dexamethasone, a positive control.

나. Hematoxylin & eosin(H&E) 염색me. Hematoxylin & eosin (H&E) staining

실험을 위해 희생한 실험동물의 귀 및 등 피부를 채취하여 4% formaldehyde용액에 넣고 고정하였으며, 파라핀 포매과정을 거쳐 4μm의 두께로 박절하여 block을 만들었다. 그리고 이에 염증을 일으키는 epidermis, dermis를 확인할 수 있는 Hematoxylin & Eosin 염색을 실시하였고, 광학현미경(Leica, Germany)을 이용하여 이를 촬영하였다. 그리고 그 결과를 도 16에 나타내었다.The ear and back skins of the animals sacrificed for the experiment were collected, put in a 4% formaldehyde solution, and fixed. After the paraffin embedding process, they were sectioned to a thickness of 4 μm to make a block. Hematoxylin & Eosin staining was performed to confirm the epidermis and dermis causing inflammation, and this was photographed using an optical microscope (Leica, Germany). And the results are shown in FIG. 16 .

도 16에서 확인할 수 있는 바와 같이, 정상군(Normal)은 표피가 매우 얇지만 DNCB로 아토피성 피부염이 유발된 군에서는 표피와 진피가 두꺼워져 있음을 확인할 수 있었다. DNCB로 인해 각화과다증 (hyperkeratosis)과 염증성 세포의 침윤이 관찰되었고 세포괴사를 동반한 세포외 유출(exocytosis)과 과과립증 (hyperglanulosis)이 발생함을 관찰할 수 있었다. 이와 비교하여, 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 양성대조군인 Dexamethasone과 함께, DNCB로 인한 피부 손상이 감소된 것을 확인할 수 있었다.As can be seen in FIG. 16 , the epidermis of the normal group was very thin, but the epidermis and dermis were thickened in the group induced by atopic dermatitis with DNCB. Due to DNCB, hyperkeratosis and inflammatory cell infiltration were observed, and exocytosis and hyperglanulosis accompanied by apoptosis were observed. In comparison, it was confirmed that the cujippong complex extract prepared in Example 2 was reduced in skin damage due to DNCB, together with Dexamethasone as a positive control.

다. toluidine blue 염색all. toluidine blue staining

실험을 위해 희생한 실험동물의 귀 및 등 피부를 채취하여 4% formaldehyde용액에 넣고 고정하였으며, 파라핀 포매과정을 거쳐 4μm의 두께로 박절하여 block을 만들었다. 그리고 이를 toluidine blue O solution에 담가 조직내 비만세포(mast cell) 부위를 염색하였고, 광학현미경(Leica, Germany)을 이용하여 이를 촬영하였다. 그리고 그 결과를 도 17에 나타내었다.The ear and back skins of the animals sacrificed for the experiment were collected, put in a 4% formaldehyde solution, and fixed. After the paraffin embedding process, they were sectioned to a thickness of 4 μm to make a block. Then, it was immersed in toluidine blue O solution to stain the mast cell area in the tissue, and it was photographed using an optical microscope (Leica, Germany). And the results are shown in FIG. 17 .

도 17에서 확인할 수 있는 바와 같이, DNCB로 아토피성 피부염이 유발된 군에서는 dermis주변에 비만세포가 많이 침윤되어 정상군(Normal)에 비해 그 수가 약 5배 증가함을 확인할 수 있었다. 피부에 아토피성 피부염이 유발되었을 때 비만세포가 침윤되어 분비된 TNF-α 등이 각질 형성세포의 NF-κB를 활성화시켜 피부의 각질을 두껍게 형성하기 때문인 것으로 판단되었다. As can be seen in FIG. 17 , in the group induced with atopic dermatitis with DNCB, a lot of mast cells infiltrated around the dermis, and it was confirmed that the number increased about 5 times compared to the normal group (Normal). When atopic dermatitis was induced in the skin, it was determined that TNF-α secreted by infiltrating mast cells activates NF-κB of keratinocytes to form thick keratin of the skin.

이와 비교하여, 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 양성대조군인 Dexamethasone과 함께, 비만세포의 침윤이 현저하게 감소된 것을 확인할 수 있었다.In comparison, the kkujippong complex extract prepared in Example 2 together with Dexamethasone as a positive control, it was confirmed that the infiltration of mast cells was significantly reduced.

라. 혈중 IgE 농도la. blood IgE concentration

실험이 끝난 뒤 실험동물의 복부 대정맥으로부터 혈액을 채취 후 혈청이 잘 분리되도록 상온에 30분 동안 방치하였다. 그후, 3,000rpm에서 10분간 원심분리하여 얻은 혈청으로 Mouse IgE ELISA kit(BD Biosciences, San Jose, CA, USA)를 사용하여 혈청 중의 총 IgE의 발현양을 측정하였다. 그리고 그 결과를 도 18에 나타내었다.After the experiment was over, blood was collected from the abdominal vena cava of the experimental animals and left at room temperature for 30 minutes to separate the serum well. Thereafter, the serum obtained by centrifugation at 3,000 rpm for 10 minutes was used to measure the expression level of total IgE in the serum using a Mouse IgE ELISA kit (BD Biosciences, San Jose, CA, USA). And the results are shown in FIG. 18 .

도 18에서 확인할 수 있는 바와 같이, DNCB로 아토피성 피부염이 유발된 군에서 혈청 IgE 농도는 현저하게 증가한 것을 확인할 수 있었다. 이는 알러지 반응과 관련한 면역글로불린으로 아토피 유발로 인하여 증가한 면역반응으로 인하여 수치가 증가한 것으로 판단된다. As can be seen in FIG. 18 , it was confirmed that the serum IgE concentration was significantly increased in the group induced with atopic dermatitis with DNCB. This is an immunoglobulin related to an allergic reaction, and it is judged that the level is increased due to the increased immune response due to the induction of atopy.

또한, 상기 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 비교예 1에서 준비된 비교용 추출물과 비교하여, 혈청 내 총 IgE 생성이 유의하게 감소된 것을 확인할 수 있었다. 이로써, 혈청 내 총 IgE의 농도 수치가 감소하여 아토피를 억제할 수 있을 것으로 기대된다.In addition, it was confirmed that the kkujippong complex extract prepared in Example 2 was significantly reduced in total IgE production in serum, as compared to the comparative extract prepared in Comparative Example 1. Accordingly, it is expected that atopy can be suppressed by reducing the concentration level of total IgE in the serum.

마. 염증성 사이토카인(IL-4 및 TNF-α)의 생성 억제 활성 평가mind. Evaluation of the production inhibitory activity of inflammatory cytokines (IL-4 and TNF-α)

실험이 끝난 뒤 실험동물의 비장림프구에서 세포를 분리하여 DNCB로 48 시간 동안 자극시킨 후, IL-4 및 TNF-α의 농도를 측정하였다. 그리고 그 결과를 도 19 및 도 20에 나타내었다.After the end of the experiment, cells were separated from the splenic lymphocytes of the experimental animals and stimulated with DNCB for 48 hours, and then the concentrations of IL-4 and TNF-α were measured. And the results are shown in FIGS. 19 and 20 .

도 19 및 도 20에서 확인할 수 있는 바와 같이, DNCB로 아토피성 피부염이 유발된 군에서 Th2세포에 의한 IL-4와 Th1세포에 의한 TNF-α의 농도가 모두 증가한 것을 확인할 수 있었다. 이러한 동물모델에서 보이는 아토피피부염의 병기는 사람의 경우로 유추할 경우 급성병기와 만성병기가 혼재한 병기라고 추측할 수 있다.As can be seen in FIGS. 19 and 20 , it was confirmed that the concentrations of IL-4 by Th2 cells and TNF-α by Th1 cells were both increased in the group induced with atopic dermatitis with DNCB. If the stage of atopic dermatitis seen in these animal models is inferred to be the case of humans, it can be inferred that the acute stage and the chronic stage are mixed.

그러나 상기 실시예 2에서 준비된 꾸지뽕 복합추출물은 비교예 1에서 준비된 비교용 추출물과 비교하여, Th2세포에 의한 IL-4와 Th1세포에 의한 TNF-α의 농도가 거의 정상수준으로 감소된 것을 확인할 수 있었다. However, the kkujippong complex extract prepared in Example 2 was compared to the comparative extract prepared in Comparative Example 1, it can be confirmed that the concentration of IL-4 by Th2 cells and TNF-α by Th1 cells is reduced to an almost normal level. there was.

이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명이 속하는 기술 분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예는 모두 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가개념으로부터 도출되는 모두 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.As described above, those skilled in the art to which the present invention pertains will be able to understand that the present invention may be implemented in other specific forms without changing the technical spirit or essential characteristics thereof. Therefore, it should be understood that all of the embodiments described above are illustrative and not restrictive. The scope of the present invention should be construed as being included in the scope of the present invention, rather than the above detailed description, all changes or modifications derived from the meaning and scope of the claims to be described later and their equivalent concepts.

10 : 가열용기 11 : 몸체
12 : 외벽 12a : 내벽
13 : 황토벽 14 : 원적외선조사구멍
15 : 뽕기름추출구 16 : 거름망
17 : 수납부 18,21 : 플랜지
19 : 고정핀 19a : 조임너트
20 : 뚜껑 21a : 고정홈
22 : 안저콕크 23 : 내부온도감지봉
30 : 뽕기름저장용기 31 : 냉각수펌프
32 : 냉각수순환공간 33 : 배출구
34 : 배출밸브 40 : 기체
41 : 플레이트 42 : 내화단열벽돌
43 : 공간 44 : 발열히터
45 : 고열온도감지봉 46 : 스텐커버
50 : 콘트롤박스 60 : 카본패킹10: heating vessel 11: body
12: outer wall 12a: inner wall
13: loess wall 14: far-infrared irradiation hole
15: mulberry oil outlet 16: strainer
17: accommodating part 18, 21: flange
19: fixing pin 19a: tightening nut
20: lid 21a: fixing groove
22: fundus cock 23: internal temperature sensing rod
30: mulberry oil storage container 31: cooling water pump
32: cooling water circulation space 33: outlet
34: discharge valve 40: gas
41: plate 42: fire insulation brick
43: space 44: heating heater
45: high temperature temperature sensing rod 46: stainless cover
50: control box 60: carbon packing

Claims

Atopic and dermatitis prevention or treatment composition comprising, as an active ingredient, a Curcuma mulberry distillate extract, an ethanol extract powder of Curcuma mulberry leaves, and an ethanol extract powder of Cudrania branches, as an active ingredient, at a concentration of 0.13 to 0.5% by weight. ,
The Cuji mulberry distillation extract is indirectly heating the heating vessel of the mulberry oil extractor in which the Cucurbita tree is accommodated, to obtain water vapor that escapes from the Cudrania and evaporates, and cooling and condensing the water vapor to obtain a liquefied extract of Cudrania. ; After aging the obtained Cuji mulberry liquefied extract for 6 to 60 months, separating and extracting the intermediate solution to obtain a cucurbita mulberry extract stock solution; And distilling the obtained Cuji mulberry extract stock solution at a temperature of 70 to 120 ℃ to obtain a distillation extract of Cuji mulberry tree; it will be prepared by a method comprising; The ethanol extract powder of the Cuji mulberry leaf is crushing the Cuji mulberry leaf; The crushed Curcuma leaves are mixed at a ratio of 200 to 600 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, and left still at a temperature of 20 to 30 ° C. for 70 to 90 hours, followed by filtration to obtain an ethanol extract of Cudrania leaves. obtaining; And after removing the ethanol by rotary vacuum concentration of the obtained ethanol extract of Cuji mulberry leaves at a temperature of 35 to 45 ° C., and freeze-drying at a temperature of -55 to 65 ° C. to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry leaves. It is prepared in a way that includes; The ethanol extract powder of the Cuji mulberry branch is crushing the Cuji mulberry branch; The crushed Curcuma branch is mixed in a ratio of 200 to 600 g per 1 L of ethanol having a concentration of 70% by weight, left still at a temperature of 20 to 30 ℃ for 70 to 90 hours, and filtered to obtain an ethanol extract of Cuji mulberry branch obtaining; And after removing the ethanol by rotary vacuum concentration of the obtained ethanol extract of Cuji mulberry branch at a temperature of 35 to 45 ° C., and freeze-drying at a temperature of -55 to 65 ° C. to obtain an ethanol extract powder of Cuji mulberry branch. It is prepared in a way that includes;
The indirect heating is a pulse-type indirect heating in which the steps of heating at a temperature of 200 to 300 ° C for 20 to 30 minutes and heating at a temperature of 400 to 500 ° C for 10 to 20 minutes are repeated 2 to 5 times. will;
The distillation extract of mulberry tree is HPLC (Hitachi Corporation, UV/VIS Detector L-2420, Autosampler L-2200, Column oven L-2350) analysis result, containing 0.06 to 0.15% by weight of guaiacol;
The Cuji mulberry distillation extract is obtained by distilling and extracting the obtained Cuji mulberry extract undiluted solution at a temperature of 70 to 120 ° C. and repeating the step of obtaining a Cuji mulberry distillation extract 4 times, which is the prepared Cuji mulberry quaternary distillation extract;
The Cuji mulberry complex extract is a quaternary distillation extract of Cuji mulberry tree, ethanol extract powder of Cuji mulberry leaf and ethanol extract powder of Cuji mulberry branch are mixed in a weight ratio of 2: 1: 1;
Obtaining an ethanol extract of the leaves of Cudrania mulberry; and obtaining an ethanol extract of Cuji mulberry branch; in the 70% by weight concentration of ethanol, based on 100 parts by weight of the 70% by weight concentration of ethanol, 1 to 15 parts by weight of the quaternary distillation extract of Cudrania is further included;
Used for skin application;
further improving the effects of inhibiting iNOS protein expression, inhibiting nitric oxide (NO) production, and inhibiting prostaglandin E2 production;
According to skin application, the degree of skin damage of systemic atopic dermatitis induced by DNCB is further improved, and the production inhibitory activity of IL-4 and TNF-α, which are inflammatory cytokines, is more excellent. Prevention of atopic dermatitis or therapeutic composition.

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According to claim 1,
The mulberry oil extractor has a double body 11 structure in which two stainless steel sheets having different thicknesses are overlapped to form an inner wall 12a and an outer wall 12 in which the receiving part 17 in which the mulberry tree is accommodated, the outer wall 12 A plurality of far-infrared irradiation holes 14 through which far-infrared rays generated from the applied-formed loess wall 13 can be irradiated to the mulberry tree housed in the receiving unit 17 are formed through the inner wall 12a and the outer wall 12, , a mulberry oil extraction path 15 is formed in the lower part with a sieve 16 installed so that only the mulberry oil extracted from the mulberry tree passes through and is recovered to the mulberry oil storage container 30, and the upper flange 18 ) is a heating vessel 10 having a fixing pin 19 for fixing the lid 20 is installed;
A fixing groove 21a into which a fixing pin 19 installed via a hinge shaft is fitted to the upper flange 18 of the heating vessel 10 is formed in the flange 21, and the inside of the heating vessel 10 is A lid 20 having a safety cock 22 that opens when the temperature is above a certain temperature is installed, and a temperature sensing rod 23 for detecting the internal temperature of the heating vessel 10 is installed;
It is screw-fastened to the mulberry oil extraction path 15 formed under the body 11 of the heating vessel 10, and the water vapor in the heating vessel 10 generated by the moisture extracted from the mulberry tree is generated by the temperature difference. It has a double structure having a cooling water circulation space 32 in which the cooling water pumped by the cooling water pump 31 is circulated to be condensed, and a discharge valve 34 at the discharge port 33 that enables the collection of the extracted mulberry oil. ) and a mulberry oil storage container 30 is installed;
To minimize heat loss on the upper plate 41, a fire-resisting insulating brick 42 is built, and the heating vessel 10 is built to have a space 43 where it can be seated. , a heating heater 44 is installed along the inner surface of the fire-resisting insulation brick 42, and a high-temperature temperature sensing rod 45 for sensing the heating temperature of the heating heater 44 is installed, and the fire insulation brick ( 42) and the body 40 is wrapped in the stainless cover 46;
Atopic and dermatitis prevention or treatment composition comprising a control box (50) for controlling the internal temperature sensing rod (23) and high temperature sensing rod (45) of the heating container and the heating heater (44).

[Claim 5] An external preparation for the treatment of atopic dermatitis and atopic dermatitis, comprising the composition for preventing or treating atopic dermatitis and dermatitis according to any one of claims 1 and 4.

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