KR102178779B1 - Composition for regulating skin hypersensitivity comprising Callophyllis japonica extract - Google Patents
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Abstract
볏붉은잎 추출물을 포함하는 피부과민반응을 조절하기 위한 조성물에 관한 것으로, 일 양상에 따른 볏붉은잎 추출물은 낮은 세포 독성을 나타내고, 인간 비만세포에서 우수한 히스타민 및 β-헥소스아미니다아제 분비 억제 효능을 가지므로, 아토피성 피부염을 포함한 피부 알러지성 질환을 개선 또는 치료하는 화장품, 의약품, 식품 등에 안전하게 사용될 수 있다. It relates to a composition for controlling skin hypersensitivity reactions containing red rice leaf extract, wherein the red rice leaf extract according to one aspect exhibits low cytotoxicity and inhibits secretion of excellent histamine and β-hexosaminidase in human mast cells. Since it has an effect, it can be safely used in cosmetics, medicines, foods, etc. to improve or treat allergic skin diseases including atopic dermatitis.
Description
볏붉은잎 추출물을 포함하는 피부과민반응을 조절하기 위한 조성물에 관한 것이다. It relates to a composition for controlling skin sensitization reactions comprising a red crested leaf extract.
아토피성 피부염(atopic dermatitis)은 만성 피부 염증과 함께 심한 가려움증(pruritus, 소양감)을 동반한다. 긁고 싶은 감정을 불러일으키는 가려움증은 히스타민과 같은 가려움 매개 물질에 의해서 유도되는데, 정상인의 경우 긁으면 그 증상이 쉽게 완화되지만, 아토피 환자의 경우 긁으면 긁을수록 더욱 긁고 싶은 감정이 형성되어 심하게 긁게 된다. 아토피 환자의 이러한 긁는 행동으로 인해서 피부장벽이 붕괴되고 2차 감염을 유발하여 염증이 더욱 악화된다. 아토피 피부염은 일시적으로 완화될 수 있지만, 환경 및 식품 등 자극원에 의해서 재발되어 악화되며, 악화와 완화가 반복되는 현상으로 그 원인은 아직까지 명확하게 알려지지 않았다. 그러므로 아토피성 피부염과 같은 피부질환을 개선하기 위해서는 가려움증을 효과적으로 완화할 수 있는 소재가 필요하다.Atopic dermatitis is accompanied by chronic skin inflammation and severe itching (pruritus). Itching, which arouses the feeling of wanting to scratch, is induced by itching mediating substances such as histamine.In the case of normal people, the symptoms are easily relieved when scratching, but in the case of atopic patients, the more scratched, the more the feeling of wanting to scratch is formed, causing severe scratching. Due to this scratching behavior of atopic patients, the skin barrier collapses and secondary infection is caused, which further exacerbates the inflammation. Atopic dermatitis can be temporarily relieved, but it recurs and worsens due to irritants such as the environment and food, and it is a phenomenon that deterioration and remission are repeated. Therefore, in order to improve skin diseases such as atopic dermatitis, a material that can effectively relieve itching is needed.
인간비만세포 (human mast cells)는 아토피 피부염을 비롯한 대부분의 알레르기성 질환에서 급성 및 만성 염증을 일으키는데 핵심적으로 참여하는 세포로, 인간비만세포에서 분비되는 히스타민과 β-헥소스아미니다아제의 활성은 아토피성 피부염을 일으키는 주요한 인자에 해당한다. 과민성 면역반응에 의하여 비만세포가 활성화되면, 히스타민과 같은 가려움 유발물질(pruritogen)을 분비하게 되고, 이는 피부장벽을 붕괴시키는 원인이 된다. 따라서 부작용을 최소화하고 가려움 매개물질을 억제시킬 수 있는 물질을 발굴한다면, 아토피 피부염을 비롯한 각종 알레르기성 질환을 제어하는데 효과적일 것이다.Human mast cells are cells that play a key role in causing acute and chronic inflammation in most allergic diseases including atopic dermatitis. The activities of histamine and β-hexosaminidase secreted by human mast cells are It is a major factor causing atopic dermatitis. When mast cells are activated by an overactive immune reaction, it secretes pruritogen such as histamine, which causes the skin barrier to collapse. Therefore, if a substance that can minimize side effects and suppress itching mediators is discovered, it will be effective in controlling various allergic diseases including atopic dermatitis.
볏붉은잎 (Callophyllis japonica)은 칼리메니아과에 속하며, 홍조류로 분류되는 해조류 중 하나로 우리나라의 남해안지역에 널리 분포하고 있으며, 우리나라에서 예로부터 식품으로 섭취를 해왔다. 기존에 보고된 바에 의하면 볏붉은잎은 마우스에 대한 방사능 조사에 대하여 보호효과, 항산화 효과, 항균 효과를 가지는 것으로 알려져 있으나 (비특허문헌 1), 볏붉은잎이 아토피성 피부염 등과 관련하여 비만세포에 미치는 효능에 대한 연구는 미미한 실정이다. The red crested leaf ( Callophyllis japonica ) belongs to the Calimenia family, is one of the seaweeds classified as red algae. It is widely distributed in the south coast of Korea, and has been consumed as a food in Korea since ancient times. As previously reported, red crested leaves are known to have protective effects, antioxidant effects, and antibacterial effects against radiation irradiation in mice (Non-Patent Document 1), but red crested leaves are known to protect mast cells in relation to atopic dermatitis. Research on its efficacy is insignificant.
일 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 개선하기 위한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.One aspect is to provide a cosmetic composition for preventing or improving skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
다른 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 치료하기 위한 약학적 조성물을 제공하는 것이다.Another aspect is to provide a pharmaceutical composition for preventing or treating skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
또 다른 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 치료하기 위한 피부외용제 조성물을 제공하는 것이다.Another aspect is to provide a composition for external application for skin for preventing or treating skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
또 다른 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 개선하기 위한 건강기능식품 조성물을 제공하는 것이다.Another aspect is to provide a health functional food composition for preventing or improving skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
일 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 개선하기 위한 화장료 조성물을 제공한다.One aspect provides a cosmetic composition for preventing or improving skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
상기 “볏붉은잎 (Callophyllis japonica)”은 붉은땀띠과(Kallymeniaceae)에 속하며, 홍조류로 분류되는 해조류 중 하나이다. 볏붉은잎은 북태평양 서안, 예를 들어, 우리나라의 남해안 지역에 분포하며 조간대 하부 및 조하대에서 자라는 것일 수 있다. 볏붉은잎의 식물체는 잎 모양을 이루는데, 조그마한 반상근에서 짧은 줄기가 나고 가지가 불규칙하게 갈라지면서 쐐기꼴로 퍼져서 10~20cm 가량 커지는 것일 수 있다. 줄기와 가지는 편평하게 벌어지며 가장자리에 톱니 모양의 돌기가 생기는 것일 수 있다. The "crested red leaf (Callophyllis japonica)" belongs to the Kallymeniaceae family, and is one of the seaweeds classified as red algae. Red crested leaves are distributed in the western coast of the North Pacific Ocean, for example, in the south coast of Korea, and may be grown in the lower intertidal zone and subtidal zone. The plant of the red crested leaves forms a leaf shape, and a short stem is formed from the small half-headed roots, and the branches are irregularly divided and spread in a wedge shape, which may increase by about 10 to 20 cm. Stems and branches are flattened, and there may be serrated projections on the edges.
상기 "볏붉은잎 추출물"은 상기 볏붉은잎 전체, 그 일부분, 또는 이들로부터 유래된 재료로부터 용매에 의하여 추출된 추출물일 수 있다. The "crested red leaf extract" may be an extract extracted with a solvent from the whole, part of, or a material derived therefrom.
일 구체예에 있어서, 상기 추출물은 친수성 용매, 예를 들면, 물, 알코올, 또는 이들의 조합을 용매로 하여 추출된 것일 수 있다. 상기 알콜은 C1 내지 C6의 하나 이상의 -OH기를 갖는 화합물일 수 있다. 상기 알콜은 메탄올, 에탄올, n-프로판올, 이소프로판올, n-부탄올, sec-부탄올, 이소부탄올, tert-부탄올, n-펜탄올, n-헥산올, 또는 이들의 혼합물일 수 있다. 상기 용매는 예를 들면, 물과 알콜의 혼합물, 즉 알콜 수용액일 수 있다. 알콜 수용액의 알콜 농도는 1 내지 99.5 (v/v)%, 예를 들면, 10 내지 99.5 (v/v)%, 1 내지 70(v/v)%, 1 내지 40(v/v)%, 5 내지 25(v/v)%, 7 내지 20(v/v)%, 5 내지 25(v/v)%, 또는 10 내지 20(v/v)%일 수 있다. 상기 알콜 수용액은 에탄올 수용액일 수 있다. In one embodiment, the extract may be extracted using a hydrophilic solvent, such as water, alcohol, or a combination thereof as a solvent. The alcohol may be a compound having one or more -OH groups of C1 to C6. The alcohol may be methanol, ethanol, n-propanol, isopropanol, n-butanol, sec-butanol, isobutanol, tert-butanol, n-pentanol, n-hexanol, or a mixture thereof. The solvent may be, for example, a mixture of water and alcohol, that is, an aqueous alcohol solution. The alcohol concentration of the aqueous alcohol solution is 1 to 99.5 (v/v)%, for example, 10 to 99.5 (v/v)%, 1 to 70 (v/v)%, 1 to 40 (v/v)%, It may be 5 to 25 (v/v)%, 7 to 20 (v/v)%, 5 to 25 (v/v)%, or 10 to 20 (v/v)%. The aqueous alcohol solution may be an aqueous ethanol solution.
상기 추출물은 가온 추출, 가압 추출, 초음파 추출, 열수 추출, 환류 냉각 추출, 아임계 추출, 또는 초임계 추출 등 당해 기술분야에서 통상적인 방법으로 추출된 것일 수 있다.The extract may be extracted by conventional methods in the art, such as warm extraction, pressurized extraction, ultrasonic extraction, hot water extraction, reflux cooling extraction, subcritical extraction, or supercritical extraction.
상기 추출은 4℃ 내지 85℃, 예를 들면, 4℃ 내지 70℃, 4℃ 내지 60℃, 4℃ 내지 50℃, 4℃ 내지 40℃, 4℃ 내지 30℃, 10℃ 내지 85℃, 15℃ 내지 85℃, 20℃ 내지 85℃, 10℃ 내지 50℃, 10℃ 내지 40℃, 10℃ 내지 35℃, 10℃ 내지 30℃, 20℃ 내지 30℃, 또는 실온에서 수행하는 것일 수 있다.The extraction is 4 ℃ to 85 ℃, for example, 4 ℃ to 70 ℃, 4 ℃ to 60 ℃, 4 ℃ to 50 ℃, 4 ℃ to 40 ℃, 4 ℃ to 30 ℃, 10 ℃ to 85 ℃, 15 It may be carried out at ℃ to 85 ℃, 20 ℃ to 85 ℃, 10 ℃ to 50 ℃, 10 ℃ to 40 ℃, 10 ℃ to 35 ℃, 10 ℃ to 30 ℃, 20 ℃ to 30 ℃, or at room temperature.
상기 추출 시간은 선택된 온도 및 추출 방법에 따라 적절하게 선택될 수 있다. 예를 들면, 추출 시간은 1시간 내지 3일, 1시간 내지 2일, 1시간 내지 1일, 1시간 내지 18시간, 1시간 내지 12시간, 3시간 내지 3일, 3시간 내지 2일, 3시간 내지 1일, 3시간 내지 18시간, 3시간 내지 12시간, 6시간 내지 3일, 6시간 내지 2일, 6시간 내지 1일, 6시간 내지 18시간, 6시간 내지 12시간, 또는 6시간 내지 9시간일 수 있다.The extraction time may be appropriately selected according to the selected temperature and extraction method. For example, the extraction time is 1 hour to 3 days, 1 hour to 2 days, 1 hour to 1 day, 1 hour to 18 hours, 1 hour to 12 hours, 3 hours to 3 days, 3 hours to 2 days, 3 Time to 1 day, 3 hours to 18 hours, 3 hours to 12 hours, 6 hours to 3 days, 6 hours to 2 days, 6 hours to 1 day, 6 hours to 18 hours, 6 hours to 12 hours, or 6 hours To 9 hours.
상기 추출은 상기 용매 중에 볏붉은잎 전체, 그 일부분, 또는 이들로부터 유래된 재료를 혼합하고 일정 시간 동안 방치하는 것을 포함할 수 있다. 상기 방치는 적당한 교반을 포함할 수 있다.The extraction may include mixing all of the red rice leaves, a portion thereof, or a material derived therefrom in the solvent and leaving it for a certain time. The standing may include suitable agitation.
상기 추출은 1회 이상, 예를 들면 1 내지 5회, 1 내지 4회, 1 내지 3회, 2 내지 5회, 또는 2 내지 4회 추출되는 것일 수 있고, 각 추출은 동일한 방법으로 수행되거나, 다른 방법으로 수행될 수 있다.The extraction may be one or more times, for example, 1 to 5 times, 1 to 4 times, 1 to 3 times, 2 to 5 times, or 2 to 4 times, and each extraction is performed by the same method, It can be done in different ways.
상기 추출은 식물체 잔사 및 추출액을 여과 등의 알려진 방법에 의하여 분리할 수 있다. 상기 추출은 또한 얻어진 추출액으로부터 감압 농축과 같은 알려진 방법에 의하여 용매를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 상기 추출은 또한 얻어진 추출물을 동결건조와 같은 건조에 의하여 건조 추출물을 제조하는 것을 포함할 수 있다.The extraction may be performed by separating plant residues and extracts by known methods such as filtration. The extraction may also include removing the solvent from the obtained extract by known methods such as vacuum concentration. The extraction may also include preparing a dried extract by drying the obtained extract, such as lyophilization.
상기 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.001 중량% 내지 80 중량%, 예를 들면, 0.01 중량% 내지 60 중량%, 0.01 중량% 내지 40 중량%, 0.01 중량% 내지 30 중량%, 0.01 중량% 내지 20 중량%, 0.01 중량% 내지 10 중량%, 0.01 중량% 내지 5 중량%, 0.05 중량% 내지 60 중량%, 0.05 중량% 내지 40 중량%, 0.05 중량% 내지 30 중량%, 0.05 중량% 내지 20 중량%, 0.05 중량% 내지 10 중량%, 0.05 중량% 내지 5 중량%, 0.1 중량% 내지 60 중량%, 0.1 중량% 내지 40 중량%, 0.1 중량% 내지 30 중량%, 0.1 중량% 내지 20 중량%, 0.1 중량% 내지 10 중량%, 또는 0.1 중량% 내지 5 중량%로 포함될 수 있다.The extract is 0.001% to 80% by weight based on the total weight of the composition, for example, 0.01% to 60% by weight, 0.01% to 40% by weight, 0.01% to 30% by weight, 0.01% to 20% by weight %, 0.01 wt% to 10 wt%, 0.01 wt% to 5 wt%, 0.05 wt% to 60 wt%, 0.05 wt% to 40 wt%, 0.05 wt% to 30 wt%, 0.05 wt% to 20 wt%, 0.05 wt% to 10 wt%, 0.05 wt% to 5 wt%, 0.1 wt% to 60 wt%, 0.1 wt% to 40 wt%, 0.1 wt% to 30 wt%, 0.1 wt% to 20 wt%, 0.1 wt% % To 10% by weight, or 0.1% to 5% by weight.
일 구체예에 따른 조성물은 상기 추출물의 분획물을 유효성분으로서 포함할 수 있다. 상기 "분획물(fraction)"은 상기 볏붉은잎 추출물이 그 일부의 성분으로 나누어진 물질 즉, 분획되어진 물질을 나타낸다. 상기 분획물은 용매 분획화 (fractionation)에 의하여 얻어진 것일 수 있다. 상기 용매 분획화는 볏붉은잎 추출물을 용매와 혼합하고 상기 용매에 존재하는 물질을 분리하는 것일 수 있다. 온도 조건, 압력 조건, 시간, 사용된 용매의 양 또는 농도, 교반 등과 같은 상기 분획화의 조건은 상기한 볏붉은잎 추출물을 제조하는데 사용된 추출에 대하여 설명한 바와 같을 수 있다. 상기 분획화는 1회 이상, 예를 들면, 1 내지 5회 반복될 수 있다. 상기 분획물을 분리하는 것은 여과 등의 알려진 방법에 의하여 이루어질 수 있다. 상기 분획화는 또한 얻어진 분획물으로부터 감압 농축과 같은 알려진 방법에 의하여 용매를 제거하는 것을 포함할 수 있다. 상기 분획화는 또한 얻어진 분획물을 농축 및/또는 건조하는 것을 포함할 수 있다. 상기 농축은 감압 농축일 수 있다. 상기 건조는 감압 건조, 비등 건조, 분무 건조, 상온 건조 또는 동결건조를 포함할 수 있다.The composition according to an embodiment may include a fraction of the extract as an active ingredient. The "fraction" refers to a substance in which the red rice leaf extract is divided into a part thereof, that is, a substance that has been fractionated. The fraction may be obtained by solvent fractionation. The solvent fractionation may include mixing the red rice leaf extract with a solvent and separating a substance present in the solvent. Conditions for the fractionation, such as temperature conditions, pressure conditions, time, amount or concentration of the solvent used, and stirring, may be the same as described for the extraction used to prepare the above-mentioned red rice leaf extract. The fractionation may be repeated one or more times, for example 1 to 5 times. Separating the fraction may be performed by a known method such as filtration. The fractionation may also include removing the solvent from the obtained fraction by known methods such as concentration under reduced pressure. The fractionation may also comprise concentrating and/or drying the obtained fractions. The concentration may be concentrated under reduced pressure. The drying may include vacuum drying, boiling drying, spray drying, room temperature drying, or freeze drying.
용어 “피부 알러지성 질환 (skin allergic disease)”은 알러지성 질환 중 피부에 그 증상이 나타나는 것을 의미할 수 있다. 상기 증상은 급성 또는 만성적으로 나타날 수 있으며, 피부에서 국소적으로 또는 전신적으로 증상이 나타나는 것일 수 있다.The term “skin allergic disease” may mean that symptoms appear on the skin among allergic diseases. The symptoms may be acute or chronic, and may be local or systemic symptoms in the skin.
일 구체예에 있어서, 상기 피부 알러지성 질환은 아토피성 피부염, 알러지성 피부염, 급성 및 만성 피부 염증 질환, 접촉성 피부염, 습진, 및 두드러기로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나일 수 있으며, 이로부터 야기되는 2차적인 질환을 포함하는 것일 수 있다. 예를 들어, 상기 피부 알러지성 질환은 아토피성 피부염일 수 있으며 아토피성 피부염으로부터 야기되는 2차적인 질환을 포함하는 것일 수 있다. 구체적으로, 비정상적인 과민성 면역반응에 의해 비만 세포의 히스타민 또는 β-헥소스아미니다아제 분비량이 과도하게 증가하여 피부 가려움증 또는 피부 염증반응을 유발하고, 악화와 완화가 반복되면서 피부 장벽이 붕괴되며 2차 감염을 유발하는 것일 수 있다. In one embodiment, the skin allergic disease may be any one selected from the group consisting of atopic dermatitis, allergic dermatitis, acute and chronic skin inflammatory diseases, contact dermatitis, eczema, and urticaria, resulting from It may include a secondary disease. For example, the skin allergic disease may be atopic dermatitis and may include a secondary disease resulting from atopic dermatitis. Specifically, the secretion of histamine or β-hexosaminidase in mast cells is excessively increased due to an abnormal hypersensitivity immune reaction, causing skin itching or skin inflammatory reaction, and the skin barrier collapses as the deterioration and remission are repeated. It may be causing an infection.
일 구체예에 있어서, 상기 조성물은 비만세포의 히스타민 분비를 억제하는 것일 수 있다. 예를 들어, 아토피성 피부염과 같은 과민성 면역반응 기작으로 비만세포의 히스타민 분비가 증가되는 것을 억제하는 것일 수 있다. 상기 히스타민은 염증 또는 알러지성 반응과 관련되어 발현되는 물질로, 가려움증의 원인이 되는 물질일 수 있다. In one embodiment, the composition may inhibit the secretion of histamine by mast cells. For example, it may be to suppress an increase in histamine secretion of mast cells due to an overactive immune response mechanism such as atopic dermatitis. The histamine is a substance that is expressed in association with an inflammatory or allergic reaction, and may be a substance that causes itching.
일 구체예에 있어서, 상기 조성물은 β-헥소스아미니다아제 (β-hexosaminidase)의 분비, 발현, 또는 활성을 억제하는 것일 수 있다. 예를 들어, 아토피성 피부염과 같은 과민성 면역반응 기작으로 비만세포의 β-헥소스아미니다아제 분비, 발현, 또는 활성이 증가되는 것을 억제하는 것일 수 있다. 상기 β-헥소스아미니다아제(β-hexosaminidase: β-HEX)는 염증 또는 알러지성 반응과 관련되어 발현되는 물질로, 비만세포의 N-아세틸-β-D-헥소스아미니다아제의 N-아세틸-D-헥소스아민을 가수분해시키는데 관여하는 효소일 수 있다.In one embodiment, the composition may be to inhibit the secretion, expression, or activity of β-hexosaminidase (β-hexosaminidase). For example, it may be to inhibit the increase in the secretion, expression, or activity of β-hexosaminidase in mast cells by a mechanism of an overactive immune response such as atopic dermatitis. The β-hexosaminidase (β-HEX) is a substance expressed in association with inflammation or allergic reactions, and N-acetyl-β-D-hexosaminidase of mast cells It may be an enzyme involved in hydrolyzing acetyl-D-hexosamine.
용어 “예방”은 상기 조성물을 약학적 유효량으로 투여하여 아토피성 피부염 등의 피부 알러지성 질환을 사전에 방지하거나 발생 가능성 또는 발생 빈도를 낮추는 것을 포괄적으로 의미할 수 있다. 예를 들어, 아토피성 피부염 등의 피부 알러지성 질환이 발생할 가능성이 있는 환자 또는 발병한 적이 있는 환자에게서 발병 확률을 낮추거나, 재발 확률을 낮추는 것일 수 있다. 용어 "개선"은 상기 조성물을 약학적 유효량으로 투여하여 아토피성 피부염 등의 피부 알러지성 질환으로 인한 피부 상태를 완화시키는 것을 포괄적으로 의미할 수 있고, 자연 치유에 비하여 단축된 시간에 피부 알러지성 질환의 증상이 완화 또는 치유되는 것을 제공하는 것일 수 있으며, 아토피성 피부염 등의 피부 알러지성 질환으로 인한 한가지 증상 또는 대부분의 증상을 개선시키는 것일 수 있다. 상기 "약학적 유효량"은 질환의 종류, 환자의 연령, 체중, 건강, 성별, 환자의 약물에 대한 민감도, 투여 경로, 투여 방법, 투여 횟수, 치료 기간, 배합, 또는 동시 사용되는 약물 등 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 통상의 기술자에 의해 용이하게 결정될 수 있다. 상기 "유효량"은 개체에게 투여하였을 때, 비만세포의 히스타민 분비를 억제하거나, 상피 조직 비대화를 억제하거나, 피부 병변으로의 비만세포 침윤을 억제하거나, 피부 병변 부위를 감소시키는 양을 의미할 수 있다. 상기 "개체"는 포유동물, 예를 들어, 사람, 소, 말, 돼지, 개, 양, 염소, 또는 고양이일 수 있고, 포유동물에서 유래한 세포, 조직, 기관 등일 수도 있다. The term “prevention” may comprehensively mean that the composition is administered in a pharmaceutically effective amount to prevent skin allergic diseases such as atopic dermatitis in advance, or to reduce the likelihood or frequency of occurrence. For example, it may be to lower the probability of onset or to lower the probability of recurrence in a patient with a possibility of developing a skin allergic disease such as atopic dermatitis or a patient who has had it. The term "improvement" may comprehensively mean alleviating skin conditions caused by skin allergic diseases such as atopic dermatitis by administering the composition in a pharmaceutically effective amount, and skin allergic diseases in a shorter time compared to natural healing. It may be to provide relief or cure of the symptoms of, and may be to improve one symptom or most of the symptoms caused by skin allergic diseases such as atopic dermatitis. The "pharmaceutically effective amount" refers to the type of disease, the patient's age, weight, health, sex, the patient's sensitivity to the drug, the route of administration, the method of administration, the number of administrations, the duration of treatment, the combination, or drugs used simultaneously. It can be easily determined by a person skilled in the art according to factors well known to. When administered to an individual, the "effective amount" may mean an amount that inhibits histamine secretion of mast cells, suppresses epithelial tissue hypertrophy, inhibits mast cell infiltration into a skin lesion, or reduces a skin lesion site. . The "individual" may be a mammal, for example, a human, cow, horse, pig, dog, sheep, goat, or cat, and may be a cell, tissue, organ, etc. derived from a mammal.
상기 “화장료 조성물”은 다양한 형태로 제조될 수 있으며, 일 구체예에 있어서, 상기 조성물은 에멀젼, 로션, 크림(수중유적형, 유중수적형, 다중상), 용액, 현탁액(무수 및 수계), 유탁액, 무수 생성물(오일 및 글리콜계), 페이스트, 젤, 마스크, 팩, 파우더, 비누, 분말 및 스프레이로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나의 제형인 것일 수 있다.The “cosmetic composition” can be prepared in various forms, and in one embodiment, the composition is an emulsion, lotion, cream (oil-in-water type, water-in-oil type, multi-phase), solution, suspension (anhydrous and water-based), It may be any one formulation selected from the group consisting of emulsion, anhydrous product (oil and glycol type), paste, gel, mask, pack, powder, soap, powder, and spray.
상기 화장료 조성물은 화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 "화장품 제제에 있어서 수용가능한 담체"란 화장품 제제에 포함될 수 있는 이미 공지되어 사용되고 있는 화합물 또는 조성물이거나 앞으로 개발될 화합물 또는 조성물로서 피부와의 접촉시 인체가 적응 가능한 이상의 독성, 불안정성 또는 자극성이 없는 것을 말한다. 상기 담체는 본 명세서의 화장료 조성물에 그것의 전체 중량에 대하여 약 1 중량% 내지 약 99.99 중량%, 바람직하게는 조성물의 중량의 약 90 중량% 내지 약 99.99 중량 %로 포함될 수 있다. 상기 담체로서는 알코올, 오일, 계면활성제, 지방산, 실리콘 오일, 습윤제, 보습제, 점성 변형제, 유제, 안정제, 자외선 차단제, 발색제, 향료 등이 예시될 수 있다. The cosmetic composition may further include an acceptable carrier in a cosmetic formulation. The "acceptable carrier in cosmetic formulations" is a compound or composition that is already known and used that can be included in a cosmetic formulation, or is a compound or composition to be developed in the future, which does not have toxicity, instability or irritation beyond which the human body can adapt when in contact with the skin. Say that. The carrier may be included in the cosmetic composition of the present specification in about 1% by weight to about 99.99% by weight, preferably about 90% by weight to about 99.99% by weight, based on the total weight of the cosmetic composition. Examples of the carrier include alcohols, oils, surfactants, fatty acids, silicone oils, wetting agents, moisturizing agents, viscosity modifiers, emulsions, stabilizers, sunscreen agents, color developing agents, fragrances, and the like.
다른 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 치료하기 위한 약학적 조성물을 제공한다. Another aspect provides a pharmaceutical composition for preventing or treating skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
상기 약학적 조성물에 있어서, 볏붉은잎, 볏붉은잎 추출물, 추출물, 추출, 피부 알러지성 질환, 예방에 대해서는 상술한 바와 같다.In the pharmaceutical composition, red crested leaves, red crested leaves extract, extract, extract, skin allergic diseases, and prevention are as described above.
용어 "치료"는 상기 조성물을 약학적 유효량으로 투여하여 아토피성 피부염 등의 피부 알러지성 질환을 개선시키는 것을 포괄적으로 의미할 수 있고, 자연 치유에 비하여 단축된 시간에 피부 알러지성 질환의 증상이 완화 또는 치유되는 것을 제공하는 것일 수 있으며, 아토피성 피부염 등의 피부 알러지성 질환으로 인한 한가지 증상 또는 대부분의 증상을 개선시키는 것일 수 있다. 상기 약학적 유효량 및 유효량에 대해서는 상술한 바와 같다. The term "treatment" may comprehensively mean improving skin allergic diseases such as atopic dermatitis by administering the composition in a pharmaceutically effective amount, and alleviating symptoms of skin allergic diseases in a shorter time compared to natural healing. Or it may be to provide a cure, and may be to improve one symptom or most of the symptoms caused by skin allergic diseases such as atopic dermatitis. The pharmaceutically effective amount and the effective amount are as described above.
상기 "약학적 조성물"은 경구 또는 비경구 투여 제형으로 제형화될 수 있다. 경구 투여 제형은 과립제, 산제, 액제, 정제, 캅셀제, 건조시럽제, 또는 그 조합일 수 있다. 비경구 투여 제형은 주사제, 또는 피부외용제일 수 있다. The "pharmaceutical composition" may be formulated in an oral or parenteral dosage form. The oral dosage form may be a granule, powder, liquid, tablet, capsule, dry syrup, or a combination thereof. The parenteral dosage form may be an injection or an external preparation for skin.
일 구체예에 있어서, 상기 조성물은 약학적으로 허용가능한 담체 또는 부형제를 더 포함하는 것일 수 있다. 상기 "담체 또는 부형제"는 생리학상 상용성인 어떠한 용매, 분산 매질, 코팅, 항박테리아제 및 항진균제, 등장제 및 흡수 지연제 등을 포함할 수 있다. 예를 들어, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아카시아 고무, 인산 칼슘, 알기네이트, 젤라틴, 규산 칼슘, 미세결정성 셀룰로스, 폴리비닐피롤리돈, 셀룰로스, 물, 시럽, 메틸 셀룰로스, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 활석, 스테아르산 마그네슘, 미네랄 오일, 윤활제, 습윤제, 감미제, 향미제, 유화제, 현탁제, 보존제 등을 포함할 수 있다.In one embodiment, the composition may further include a pharmaceutically acceptable carrier or excipient. The "carrier or excipient" may include any physiologically compatible solvent, dispersion medium, coating, antibacterial and antifungal agent, isotonic and absorption delaying agent. For example, lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, starch, gum acacia, calcium phosphate, alginate, gelatin, calcium silicate, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, cellulose, water, syrup, methyl Cellulose, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate, mineral oil, lubricants, wetting agents, sweetening agents, flavoring agents, emulsifying agents, suspending agents, preservatives, and the like.
또 다른 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 치료하기 위한 피부외용제 조성물을 제공한다. Another aspect provides a composition for external application for skin for preventing or treating skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
상기 피부외용제 조성물에 있어서, 볏붉은잎, 볏붉은잎 추출물, 추출물, 추출, 피부 알러지성 질환, 예방 또는 치료에 대해서는 상기한 바와 같다.In the composition for external application for skin, red rice leaves, red rice leaves extract, extract, extract, skin allergic disease, prevention or treatment are as described above.
상기 "피부외용제"는 크림, 겔, 연고, 피부 유화제, 피부 현탁액, 경피전달성 패치, 약물 함유 붕대, 로션, 또는 그 조합일 수 있다. 상기 피부외용제는 통상 화장품이나 의약품 등의 피부외용제에 사용되는 성분, 예를 들면 수성성분, 유성성분, 분말성분, 알코올류, 보습제, 증점제, 자외선흡수제, 미백제, 방부제, 산화방지제, 계면활성제, 향료, 색제, 각종 피부 영양제, 또는 이들의 조합과 필요에 따라서 적절하게 배합될 수 있다. 상기 피부외용제는, 에데트산이나트륨, 에데트산삼나트륨, 시트르산나트륨, 폴리인산나트륨, 메타인산나트륨, 글루콘산 등의 금속봉쇄제, 카페인, 탄닌, 벨라파밀, 감초추출물, 글라블리딘, 칼린의 과실의 열수추출물, 각종생약, 아세트산토코페롤, 글리틸리틴산, 트라넥삼산 및 그 유도체 또는 그 염등의 약제, 비타민 C, 아스코르브산인산마그네슘, 아스코르브산글루코시드, 알부틴, 코지산, 글루코스, 프룩토스, 트레할로스 등의 당류등도 적절하게 배합할 수 있다.The "external preparation for skin" may be a cream, gel, ointment, skin emulsifier, skin suspension, transdermal delivery patch, drug-containing bandage, lotion, or a combination thereof. The above skin external preparations are ingredients commonly used in external preparations for skin such as cosmetics and pharmaceuticals, such as aqueous ingredients, oily ingredients, powder ingredients, alcohols, moisturizers, thickeners, ultraviolet absorbers, whitening agents, preservatives, antioxidants, surfactants, fragrances. , Colorants, various skin nutrients, or combinations thereof and may be appropriately formulated according to need. The external preparations for skin include metal sequestering agents such as disodium edetate, trisodium edetate, sodium citrate, sodium polyphosphate, sodium metaphosphate, and gluconic acid, caffeine, tannin, bellapamil, licorice extract, glavidine, and caline. Hot water extract of fruit, various herbal medicines, drugs such as tocopherol acetate, glytilithic acid, tranexamic acid and derivatives or salts thereof, vitamin C, ascorbic acid magnesium phosphate, ascorbic acid glucoside, arbutin, kojic acid, glucose, fructose, Sugars such as trehalose can also be appropriately blended.
또 다른 양상은 볏붉은잎(Callophyllis japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부 알러지성 질환을 예방 또는 개선하기 위한 건강기능식품 조성물을 제공한다.Another aspect provides a health functional food composition for preventing or improving skin allergic diseases comprising an extract of Callophyllis japonica as an active ingredient.
상기 건강기능식품 조성물에 있어서, 볏붉은잎, 볏붉은잎 추출물, 추출물, 추출, 피부 알러지성 질환, 예방 또는 개선에 대해서는 상기한 바와 같다.In the health functional food composition, red rice leaves, red rice leaves extract, extract, extract, skin allergic disease, prevention or improvement are as described above.
상기 "건강기능식품 조성물"은 볏붉은잎 추출물이 단독 또는 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 사용 목적 (예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 상기 건강기능식품 조성물은 원료에 대하여 15 중량부 이하의 양으로 첨가될 수 있다. 상기 건강기능식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 건강기능식품의 종류 중 음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드, 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 감미제로서는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 또한 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제, 또는 그 조합을 함유할 수 있다. 상기 건강기능식품 조성물은 또한, 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료, 야채 음료의 제조를 위한 과육, 또는 그 조합을 함유할 수 있다. The "health functional food composition" may be used alone or in combination with other foods or food ingredients, and may be appropriately used according to a conventional method. The mixing amount of the active ingredient may be appropriately determined according to the purpose of use (prevention, health or therapeutic treatment). In general, when preparing food or beverage, the health functional food composition may be added in an amount of 15 parts by weight or less based on the raw material. There is no particular limitation on the kind of the health functional food. Among the types of health functional foods, the beverage composition may contain various flavoring agents or natural carbohydrates as an additional component, like a conventional beverage. The natural carbohydrates are monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol. As the sweetener, natural sweeteners such as taumatin and stevia extract, and synthetic sweeteners such as saccharin and aspartame can be used. The health functional food composition may also include nutrients, vitamins, electrolytes, flavoring agents, coloring agents, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloidal thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohol, carbonated beverage It may contain a carbonation agent used for, or a combination thereof. The health functional food composition may also contain natural fruit juice, fruit juice beverage, flesh for the production of vegetable beverages, or a combination thereof.
또 다른 양상은 약학적 유효량의 상기 약학적 조성물을 개체에게 투여하는 단계를 포함하는 개체의 피부 알러지성 질환을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다. Another aspect provides a method of preventing or treating a skin allergic disease in a subject comprising administering to the subject a pharmaceutically effective amount of the pharmaceutical composition.
상기 예방 또는 치료하는 방법에 있어서, 약학적 유효량, 약학적 조성물, 개체, 피부 알러지성 질환, 예방 또는 치료에 대해서는 상술한 바와 같다. In the method of preventing or treating, a pharmaceutically effective amount, a pharmaceutical composition, an individual, a skin allergic disease, and prevention or treatment are as described above.
용어 "투여"는 당업계에 알려진 방법에 의하여 투여될 수 있다. 투여는 예를 들면, 정맥내, 근육내, 경피 (transdermal), 점막, 코안 (intranasal), 기관내 (intratracheal) 또는 피하 투여와 같은 경로로, 임의의 수단에 의하여 개체로 직접적으로 투여될 수 있다. 상기 투여는 전신적으로 또는 국부적으로 투여될 수 있다. 상기 투여는 피부 알러지 질환이 존재하는 부위에 국소적으로 투여하는 것일 수 있다.The term “administration” can be administered by methods known in the art. The administration can be administered directly to the subject by any means, for example by routes such as intravenous, intramuscular, transdermal, mucosal, intranasal, intratracheal or subcutaneous administration. . The administration can be administered systemically or locally. The administration may be topically administered to a site where an allergic skin disease exists.
상기 투여는 볏붉은잎 추출물을 개체당 0.1 mg 내지 1,000 mg, 예를 들면, 0.1 mg 내지 500 mg, 0.1 mg 내지 100 mg, 0.1 mg 내지 50 mg, 0.1 mg 내지 25 mg, 1 mg 내지 1,000 mg, 1 mg 내지 500 mg, 1 mg 내지 100 mg, 1 mg 내지 50 mg, 1 mg 내지 25 mg, 5mg 내지 1,000 mg, 5 mg 내지 500 mg, 5 mg 내지 100 mg, 5 mg 내지 50 mg, 5 mg 내지 25 mg, 10mg 내지 1,000 mg, 10 mg 내지 500 mg, 10 mg 내지 100 mg, 10 mg 내지 50 mg, 또는 10 mg 내지 25 mg을 투여하는 것일 수 있다.The administration is 0.1 mg to 1,000 mg per individual, for example, 0.1 mg to 500 mg, 0.1 mg to 100 mg, 0.1 mg to 50 mg, 0.1 mg to 25 mg, 1 mg to 1,000 mg per individual, 1 mg to 500 mg, 1 mg to 100 mg, 1 mg to 50 mg, 1 mg to 25 mg, 5 mg to 1,000 mg, 5 mg to 500 mg, 5 mg to 100 mg, 5 mg to 50 mg, 5 mg to 25 mg, 10 mg to 1,000 mg, 10 mg to 500 mg, 10 mg to 100 mg, 10 mg to 50 mg, or 10 mg to 25 mg may be administered.
일 양상에 따른 볏붉은잎 추출물은 낮은 세포 독성을 나타내고, 인간 비만세포에서 우수한 히스타민 및 β-헥소스아미니다아제의 분비 또는 활성 억제 효능을 가지므로, 아토피성 피부염을 포함한 피부 알러지성 질환을 개선 또는 치료하는 화장품, 의약품, 식품 등에 안전하게 사용될 수 있다. The red rice leaf extract according to one aspect exhibits low cytotoxicity and has excellent efficacy in inhibiting the secretion or activity of histamine and β-hexosaminidase in human mast cells, thus improving skin allergic diseases including atopic dermatitis. Or, it can be safely used in therapeutic cosmetics, medicines, and foods.
도 1은 볏붉은잎 추출물의 농도에 따른 인간비만세포(HMC-1)의 세포 생존율을 측정한 그래프이다.
도 2는 인간비만세포(HMC-1)를 PMA로 자극하여 히스타민 분비를 유도한 다음 볏붉은잎 추출물을 농도별로 처리한 후 히스타민 분비량을 측정한 그래프이다.
도 3은 인간비만세포(HMC-1)를 PMA로 자극하여 β-헥소스아미니다아제 분비를 유도한 다음 볏붉은잎 추출물을 농도별로 처리한 후 β-헥소스아미니다아제 분비량을 측정한 그래프이다. 1 is a graph measuring the cell viability of human mast cells (HMC-1) according to the concentration of the red rice leaf extract.
FIG. 2 is a graph showing the amount of histamine secreted after the human mast cells (HMC-1) were stimulated with PMA to induce histamine secretion, and then treated with red crest leaf extract by concentration.
Figure 3 is a graph of measuring the amount of secretion of β-hexosaminidase after stimulating human mast cells (HMC-1) with PMA to induce the secretion of β-hexosaminidase, and then treating the red rice leaf extract by concentration to be.
이하 본 발명을 실시예를 통하여 보다 상세하게 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. However, these examples are for illustrative purposes only, and the scope of the present invention is not limited to these examples.
실시예 1. 볏붉은잎(Example 1. Red crested leaves ( Callophyllis japonicaCallophyllis japonica ) 추출물의 제조) Preparation of extract
볏붉은잎(Callophyllis japonica)은 완도에서 겨울에 채집된 것으로, 해수를 제거하기 위하여 담수로 3회 세척을 시행하였다. 세척한 해조류를 90℃ 건조기에서 24시간 동안 건조하여 수분을 제거한 후, 믹서기를 이용하여 가루 상태로 만들었다. 해조류 가루 100 g을 70% 에탄올 900 ml에 넣고 교반하여, 2일째에 3MM 필터용지에 걸러서 해조류 추출물을 수거하였다. 이를 3회 반복하여 총 6일간 추출하였다. 획득한 추출물은 감압농축기를 이용하여 농축한 후 동결건조기를 이용하여 용매를 모두 제거하고 가루 상태의 추출물을 획득하였다. 획득한 추출물은 멸균된 3차 증류수와 에탄올에 녹여 세포실험에 사용하였다.Red crested leaves ( Callophyllis japonica ) were collected in winter in Wando, and washed three times with fresh water to remove seawater. The washed seaweed was dried in a dryer at 90° C. for 24 hours to remove moisture, and then made into a powder state using a blender. 100 g of seaweed powder was added to 900 ml of 70% ethanol, stirred, and filtered on a 3MM filter paper on the second day to collect the seaweed extract. This was repeated 3 times and extracted for a total of 6 days. The obtained extract was concentrated using a vacuum concentrator, and all solvents were removed using a freeze dryer to obtain a powdery extract. The obtained extract was dissolved in sterilized tertiary distilled water and ethanol and used for cell experiments.
실험예 1. 볏붉은잎 추출물의 세포 독성 검사Experimental Example 1. Cytotoxicity test of red rice red leaf extract
볏붉은잎 추출물의 세포 독성을 평가하기 위하여, 인간 비만세포주인 HMC-1 (human mast cells-1; hmc-1)에 볏붉은잎 추출물을 처리한 후 Annexin/PI 염색을 수행하여 유세포 분석기로 세포생존율을 분석하였다. To evaluate the cytotoxicity of the red rice red leaf extract, the human mast cell line HMC-1 (human mast cells-1; hmc-1) was treated with red rice red leaf extract, followed by Annexin/PI staining, and the cells were subjected to flow cytometry. The survival rate was analyzed.
구체적으로, 인간 비만세포주인 HMC-1 세포를 10% 우태아혈청 (fetal bovine serum: FBS), 200IU/ml 페니실린, 및 200g/ml 스트렙토마이신이 첨가된 이스코브 변형된 둘베코 배지(Iscove's Modified Dulbecco's Medium; IMDM)에서 37 ℃, 5% CO2 조건하에서 배양하였다. 25T 플라스크에서 배양하는 인간비만세포(HMC-1)에 볏붉은잎 추출물을 농도별(10-200 ug/ml)로 처리하여 24시간 배양하였다. 24시간 배양 후 세포를 회수하여 PBS를 이용하여 2회 세척하여 남은 배지를 제거하였다. 세척된 세포는 Annexin V Apoptosis Detection Kit I (BD Biosciences)을 이용하여 염색하였다. 염색된 세포는 FC500 (Beckman coulter) 기기를 이용하여 측정한 후, FlowJo V10 (FlowJo, LLC)을 이용하여 분석하였다.Specifically, Iscove's Modified Dulbecco's medium containing 10% fetal bovine serum (FBS), 200IU/ml penicillin, and 200g/ml streptomycin was added to HMC-1 cells, a human mast cell line. Medium; IMDM) at 37° C. and 5% CO 2 . Human mast cells (HMC-1) cultured in a 25T flask were treated with red rice leaf extract at different concentrations (10-200 ug/ml) and cultured for 24 hours. After culturing for 24 hours, the cells were recovered and washed twice with PBS to remove the remaining medium. Washed cells were stained using Annexin V Apoptosis Detection Kit I (BD Biosciences). The stained cells were measured using an FC500 (Beckman coulter) instrument, and then analyzed using FlowJo V10 (FlowJo, LLC).
도 1은 볏붉은잎 추출물의 농도에 따른 인간비만세포(HMC-1)의 세포 생존율을 측정한 그래프이다. 1 is a graph measuring the cell viability of human mast cells (HMC-1) according to the concentration of the red rice leaf extract.
그 결과, 도 1에 나타난 바와 같이, 볏붉은잎 추출물을 처리한 군 모두 인간비만세포에 대하여 세포독성을 나타내지 않음 확인하였다.As a result, as shown in FIG. 1, it was confirmed that neither of the groups treated with the red rice crest leaf extract exhibited cytotoxicity to human mast cells.
실험예 2. 볏붉은잎 추출물의 히스타민 분비 억제 효능 평가Experimental Example 2. Evaluation of Histamine Secretion Inhibition Effect of Red Crested Red Leaf Extract
볏붉은잎 추출물의 항아토피 효과를 확인하기 위하여, HMC-1 세포를 PMA (phorbol 12-myristate 13-acetate; PMA)로 자극하여 히스타민 분비를 유도한 후에 볏붉은잎 추출물을 처리하여 볏붉은잎 추출물의 히스타민 분비 억제 효능을 평가하였다. In order to confirm the anti-atopic effect of the red rice leaf extract, HMC-1 cells were stimulated with PMA (phorbol 12-myristate 13-acetate; PMA) to induce histamine secretion, and then treated with red rice leaf extract. The efficacy of inhibiting histamine secretion was evaluated.
구체적으로, 실험예 1에서 배양된 HMC-1세포에 볏붉은잎 추출물을 2시간 전처리한 후 PMA와 calcium ionophore A23187를 처리하였다. 세포와 배지를 원심분리한 뒤 상층액을 회수하여 Histamine ELISA kit (abcam)를 이용하여 히스타민 분비량을 측정하였다. Specifically, the HMC-1 cells cultured in Experimental Example 1 were pretreated with red rice leaf extract for 2 hours, and then treated with PMA and calcium ionophore A23187. After centrifuging the cells and the medium, the supernatant was collected and the histamine secretion was measured using a Histamine ELISA kit (abcam).
도 2는 인간비만세포(HMC-1)를 PMA로 자극하여 히스타민 분비를 유도한 다음 볏붉은잎 추출물을 농도별로 처리한 후 히스타민 분비량을 측정한 그래프이다. FIG. 2 is a graph showing the amount of histamine secreted after the human mast cells (HMC-1) were stimulated with PMA to induce histamine secretion, and then treated with red crest leaf extract by concentration.
그 결과, 도 2에 나타난 바와 같이, 볏붉은잎 추출물은 PMA에 의해 유도된 히스타민의 분비를 농도의존적으로 감소시킴을 확인하였다. 특히 200 ug/ml의 농도로 볏붉은잎 추출물을 처리한 경우 PMA 단독 처리군과 비교하여 히스타민 분비량이 약 60% 이상 감소되는 것으로 나타났다. 이는 볏붉은잎 추출물이 인간비만세포에서 분비되고 아토피성 피부염을 일으키는 주요 인자인 히스타민 분비를 억제하는 효능이 있어, 아토피성 피부염을 포함하는 다양한 피부 알러지성 질환에 유용하게 사용될 수 있음을 의미한다. As a result, as shown in Figure 2, it was confirmed that the extract of red crested leaves reduced the secretion of histamine induced by PMA in a concentration-dependent manner. In particular, it was found that the amount of histamine secretion was reduced by about 60% or more compared to the group treated with PMA alone when the red rice leaf extract was treated at a concentration of 200 ug/ml. This means that the red crested red leaf extract is secreted by human mast cells and has the effect of inhibiting the secretion of histamine, which is a major factor causing atopic dermatitis, and thus can be usefully used in various skin allergic diseases including atopic dermatitis.
실험예 3. 볏붉은잎 추출물의 β-헥소스아미니다아제(β-hexosaminidase) 분비 억제 효능 평가Experimental Example 3. Evaluation of the inhibitory efficacy of β-hexosaminidase secretion of red rice leaf extract
볏붉은잎 추출물의 항아토피 효과를 확인하기 위하여, HMC-1 세포를 PMA로 자극하여 β-헥소스아미니다아제 분비를 유도한 후에 볏붉은잎 추출물을 처리하여 볏붉은잎 추출물의 β-헥소스아미니다아제 분비 억제 효능을 평가하였다. In order to confirm the anti-atopic effect of red rice leaf extract, β-hexose of red rice leaf extract was treated by stimulating HMC-1 cells with PMA to induce β-hexosaminidase secretion. The efficacy of inhibiting aminidase secretion was evaluated.
구체적으로, 실험예 1에서 배양된 HMC-1세포에 볏붉은잎 추출물을 2시간 전처리한 후 PMA와 calcium ionophore A23187를 처리하였다. 세포와 배지를 원심분리한 뒤 상층액을 회수하여 다음과 같이 β-헥소스아미니다아제의 분비량을 측정하였다. 볏붉은잎 추출물, PMA, Calcium ionophore A23187이 처리된 HMC-1세포의 배양액을 이와 동량의 1mM p-nitrophenyl-N-acetly-β-D-glucosaminide와 1시간 실온에서 반응시킨 후, Na2CO3/NaHCO3를 250 μl 처리하여 ELISA plate reader기로 400 nm에서 흡광도를 측정하였다. Specifically, the HMC-1 cells cultured in Experimental Example 1 were pretreated with red rice leaf extract for 2 hours, and then treated with PMA and calcium ionophore A23187. After centrifuging the cells and the medium, the supernatant was recovered, and the secretion amount of β-hexosaminidase was measured as follows. A culture solution of HMC-1 cells treated with red rice leaf extract, PMA, and calcium ionophore A23187 was reacted with the same amount of 1mM p-nitrophenyl-N-acetly-β-D-glucosaminide at room temperature for 1 hour, and then Na 2 CO 3 /NaHCO 3 was treated with 250 μl and absorbance was measured at 400 nm with an ELISA plate reader.
도 3은 인간비만세포(HMC-1)를 PMA로 자극하여 β-헥소스아미니다아제 분비를 유도한 다음 볏붉은잎 추출물을 농도별로 처리한 후 β-헥소스아미니다아제 분비량을 측정한 그래프이다. Figure 3 is a graph of measuring the amount of secretion of β-hexosaminidase after stimulating human mast cells (HMC-1) with PMA to induce the secretion of β-hexosaminidase, and then treating the red rice leaf extract by concentration to be.
그 결과, 도 3에 나타난 바와 같이, 볏붉은잎 추출물은 PMA에 의해 유도된 β-헥소스아미니다아제 분비를 농도의존적으로 감소시킴을 확인하였다. 특히 200 ug/ml의 농도로 볏붉은잎 추출물을 처리한 경우 PMA 단독 처리군과 비교하여 β-헥소스아미니다아제 분비량이 약 60% 이상 감소되는 것으로 나타났다. 이는 볏붉은잎 추출물이 인간비만세포에서 분비되고 아토피 및 피부염을 일으키는 주요 인자인 β-헥소스아미니다아제 분비를 억제하는 효능이 있어서, 아토피성 피부염을 포함하는 다양한 피부 알러지성 질환에 유용하게 사용될 수 있음을 의미한다. As a result, as shown in FIG. 3, it was confirmed that the extract of red rice leaves reduced the secretion of β-hexosaminidase induced by PMA in a concentration-dependent manner. In particular, it was found that when the red rice leaf extract was treated at a concentration of 200 ug/ml, the amount of β-hexosaminidase secretion was reduced by about 60% or more compared to the group treated with PMA alone. It has the effect of suppressing the secretion of β-hexosaminidase, which is a major factor that causes atopy and dermatitis, and is secreted from human mast cells, so it can be usefully used in various skin allergic diseases including atopic dermatitis. Means you can.
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