KR102149254B1 - Pharnaceutical composition for prevention or treatment of diabetes comprising the mixed extract of vegetable natural products having the effect on removal of swelling and health functional food for prevention or improvement of diabetes comprising the same - Google Patents

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Abstract

본 발명은 붓기 제거, 면역력 강화, 신진대사 증강 활성이 우수한 식물성 천연물의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병(diabetes)의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합물의 열수 추출물 또는 이로부터 추가로 수득되는 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 베타-아밀라아제(β-amylase) 및 알파-글루코시다아제(α-glucosidase) 저해 활성을 통한 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것이다. 본 발명의 항당뇨 조성물의 유효성분으로서의 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 총 폴리페놀, 총 플라보노이드 함량이 매우 높은 반면, 총 당 및 환원당 함량이 매우 낮으면서, 베타-아밀라아제 및 알파-글루코시다아제 저해 활성을 통한 항당뇨 활성을 나타낸다. 또한, 본 발명의 유효성분은 인간 적혈구에 대한 용혈 활성을 전혀 나타내지 않고, 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성 조건 및 혈장 내에서도 베타-아밀라아제 및 알파-글루코시다아제 저해 활성의 손실이 나타나지 않으므로, 이를 추출액, 분말, 환, 정 등의 상시 복용이 가능한 형태로 조제할 수 있어 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다. The present invention relates to a pharmaceutical composition and health functional food for preventing or treating/improving diabetes (diabetes) containing as an active ingredient a mixed extract of a vegetable natural product having excellent swelling removal, immunity strengthening, and metabolism enhancing activity, and more detailed For example, beta-amylase (β-) containing as an active ingredient a hot water extract of a mixture of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger, or an ethanol extract further obtained therefrom. amylase) and alpha-glucosidase (α-glucosidase) through the inhibitory activity of the prevention or treatment / improvement of diabetes pharmaceutical composition and health functional food. Mixed extracts of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger as active ingredients of the antidiabetic composition of the present invention, as demonstrated through the examples of the present specification, total poly While the phenol and total flavonoid content is very high, the total sugar and reducing sugar content is very low, and it exhibits antidiabetic activity through beta-amylase and alpha-glucosidase inhibitory activity. In addition, the active ingredient of the present invention does not exhibit any hemolytic activity against human red blood cells, has excellent thermal stability, and does not show loss of beta-amylase and alpha-glucosidase inhibitory activity even in acidic conditions of pH 2 and plasma, It is a very useful invention in the pharmaceutical industry and the food industry because it can be prepared in a form that can be taken at any time such as extract, powder, pills, and tablets.

Description

붓기 제거에 효과가 있는 식물성 천연물의 혼합 추출물을 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품{PHARNACEUTICAL COMPOSITION FOR PREVENTION OR TREATMENT OF DIABETES COMPRISING THE MIXED EXTRACT OF VEGETABLE NATURAL PRODUCTS HAVING THE EFFECT ON REMOVAL OF SWELLING AND HEALTH FUNCTIONAL FOOD FOR PREVENTION OR IMPROVEMENT OF DIABETES COMPRISING THE SAME}Pharmaceutical compositions and health functional foods for preventing or treating diabetes containing mixed extracts of plant-based natural products that are effective in removing swelling. SWELLING AND HEALTH FUNCTIONAL FOOD FOR PREVENTION OR IMPROVEMENT OF DIABETES COMPRISING THE SAME}

본 발명은 붓기 제거, 면역력 강화, 신진대사 증강 활성이 우수한 식물성 천연물의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병(diabetes)의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것으로서, 보다 상세하게는, 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합물의 열수 추출물 또는 이로부터 추가로 수득되는 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 베타-아밀라아제(β-amylase) 및 알파-글루코시다아제(α-glucosidase) 저해 활성을 통한 당뇨병의 예방 또는 치료/개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품에 관한 것이다.The present invention relates to a pharmaceutical composition and health functional food for preventing or treating/improving diabetes (diabetes) containing as an active ingredient a mixed extract of a vegetable natural product having excellent swelling removal, immunity strengthening, and metabolism enhancing activity, and more detailed For example, beta-amylase (β-) containing as an active ingredient a hot water extract of a mixture of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger, or an ethanol extract further obtained therefrom. amylase) and alpha-glucosidase (α-glucosidase) through the inhibitory activity of the prevention or treatment / improvement of diabetes pharmaceutical composition and health functional food.

현대인에게 가장 흔한 질병 중 하나인 당뇨병은 인슐린(insulin)의 분비량이 부족하거나 인슐린이 정상적인 기능을 수행하지 않는 등을 원인으로 하는 대사 질환의 일종으로서 혈중 포도당 농도가 높은 것이 특징이며, 고혈당으로 인하여 여러 증상 및 징후를 일으킨다. Diabetes, one of the most common diseases in modern people, is a type of metabolic disease caused by insufficient secretion of insulin or the inability of insulin to perform its normal function, and is characterized by high blood glucose concentration. Causes symptoms and signs.

당뇨병은 제1형과 제2형으로 구분되는데, 제1형 당뇨병은 유전적 영향에 의해 인슐린을 전혀 생산하지 못하는 것이 원인이 되어 발생하며, 제2형 당뇨병은 인슐린 기능이 떨어져 인슐린 저항성(insulin resistance)이 원인으로 알려져 있다. 특히, 제2형 당뇨병은 식생활의 서구화에 따른 고열량, 고지방, 고단백의 식단, 운동부족, 스트레스 등 환경적인 요인이 크게 작용하는 것으로 알려져 있다. Diabetes is divided into type 1 and type 2. Type 1 diabetes is caused by the inability to produce insulin at all due to genetic effects, and type 2 diabetes is caused by poor insulin function and insulin resistance. ) Is known as the cause. In particular, type 2 diabetes is known to be largely affected by environmental factors such as high calorie, high fat, high protein diet, lack of exercise, and stress due to westernization of diet.

당뇨병의 치료를 위해서는 제1형 당뇨병의 경우에는 인슐린 주사가 필수적이며, 제2형 당뇨병의 경우에는 생활 습관 교정 및 약물 치료가 필요하며, 대표적으로 인슐린 분비 촉진제(예, 레파글리나이드, 미티글이나이드) 및 소장에서의 탄수화물 흡수 지연제[글루코바이: 성분명-아카보즈(acarbose), 베이슨: 성분명-보글리보스(voglibose)] 등이 이용되고 있다.For the treatment of diabetes, insulin injection is essential in the case of type 1 diabetes, and lifestyle correction and drug treatment are necessary in the case of type 2 diabetes. Representative insulin secretion stimulators (e.g., repaglinide, mitigl) Nide) and a delaying agent for carbohydrate absorption in the small intestine (glucobi: ingredient name-acarbose, bason: ingredient name-voglibose), and the like are used.

한편, 사회의 고도화, 식문화의 인스턴트화 등에 따라 다양한 만성질환이 증가되고 있으며, 의약품보다는 안전성이 확인된 천연 약용작물을 이용한 질병 예방 및 개선에 많은 연구가 집중되고 있다. Meanwhile, a variety of chronic diseases are increasing due to the advancement of society and instant food culture, and a lot of research is focused on disease prevention and improvement using natural medicinal crops whose safety has been confirmed rather than pharmaceuticals.

예컨대, 미나리(Oenanthe javanica (Blume) DC.)는 쌍떡잎식물 산형화목 미나리과의 여러해살이풀로 한방에서는 수근, 수영이라 부르면, 동의보감에서는 갈증을 풀어주고, 머리를 맑게 하며, 주독을 제거하고 황달, 부인병, 음주 후의 두통 및 구토에 효과적이라고 기록되어 있다. 또한, 최근 연구에서는 간 기능개선, 해독작용, 중금속 배출 등의 효능이 알려져 있다. For example, Buttercup ( Oenanthe javanica (Blume) DC.) is a dicotyledonous plant, a perennial plant of the Aperaceae family. In oriental medicine, it is called carpuncle and swimming. In Donguibogam, it quenchs thirst, clears the head, removes alcohol poisoning, jaundice, and women's diseases. , It is recorded that it is effective for headache and vomiting after drinking. In addition, in recent studies, the effects of improving liver function, detoxification, and releasing heavy metals are known.

우엉(Arctium lappa)은 쌍떡잎 식물 초롱꽃목 국화과의 두해살이 식물로서, 원산지는 유럽이며, 시베리아, 만주, 한국 등에 널리 분포한다. 국내에서는 경남을 중심으로 대량 재배되고 있으며, 특유의 향과 씹는 맛이 좋아 어린 순을 삶아 먹거나 뿌리를 먹는 근채류이다. 통상 생으로 먹지 않고 소금에 절이거나, 식초에 데치거나, 또는 간장에 졸여 식용한다. 한방에서는 그 뿌리를 우방근, 열매를 우방자, 줄기를 악실경이라 부르며, 그 용도를 엄격히 구분하고 있다. 식용으로 주로 이용되는 우엉 지하부는 점성이 있고 쓴맛을 가져 주로 간장에 졸여 식용하며, 이눌린, 비타민 B1, 아세트산, 아르크티제닌, 베타-카로텐, 부티릭산, 커피산, 클로로겐산, 코스틱산, 이소바레익산, 로릭산, 리그닌, 미리스트산, 프로피오닉산, 시토스테롤, 스티그마스테롤 및 구리, 크롬, 망간, 인, 셀렌, 규소, 아연 등 다량의 미네랄을 포함하는 것으로 알려져 있다. 따라서, 우엉은 항산화, 독소제거, 암세포 성장억제, 혈당조절 및 체중 감량에 탁월한 것으로 알려져 있다. Burdock ( Arctium lappa ) is a dicotyledonous plant, a biennial plant of the Asteraceae family, and its origin is Europe, and is widely distributed in Siberia, Manchuria, and Korea. In Korea, it is cultivated mainly in Gyeongnam, and it is a root vegetable that is boiled or eaten by roots because of its characteristic aroma and chewy taste. It is usually not eaten raw, but is salted, boiled in vinegar, or boiled in soy sauce for consumption. In oriental medicine, the root is called woobanggeun, the fruit is called woobangja, and the stem is called Aksilkyung, and its uses are strictly classified. The burdock basement, which is mainly used for food, has a viscous and bitter taste, so it is mainly boiled in soy sauce and edible.Inulin, vitamin B1, acetic acid, arctigenin, beta-carotene, butyric acid, coffee acid, chlorogenic acid, caustic acid, isovare It is known to contain a large amount of minerals such as ic acid, lauric acid, lignin, myristic acid, propionic acid, sitosterol, stigmasterol and copper, chromium, manganese, phosphorus, selenium, silicon, and zinc. Therefore, burdock is known to be excellent in antioxidant, toxin removal, cancer cell growth inhibition, blood sugar control and weight loss.

호박(Cucurbita moschata)은 박과의 덩굴성 한해살이풀로 열대 및 남아메리카가 원산이나 국내에서도 널리 재배하고 있다. 성숙 호박은 다량의 비타민 A와 비타민 B 및 C를 함유하여 비타민 원으로서 매우 중요하며, 베타 카로틴을 함유하여 노화방지에 도움을 주며, 다량의 식이섬유 함유로 장 건강 및 변비개선에 도움을 나타낸다. Pumpkin ( Cucurbita moschata ) is a vine-like annual plant of the gourd family, native to tropical and South America, but is widely cultivated in Korea. Mature pumpkin contains a large amount of vitamins A and vitamins B and C, so it is very important as a source of vitamins. It contains beta carotene to help prevent aging, and it contains a large amount of dietary fiber to help improve intestinal health and constipation.

질경이 잎(leaf of Plantago asiatica L.)은 질경이과(Plantaginaceae)의 여러해살이풀로서 잎이 질기다하여 질경이라고 불리며, 잎 및 씨껍질(차전자피)을 식용 및 약용으로 이용하고 있다. 한방에서는 이뇨, 설사완화, 방광염, 요로염 등에 사용하며, 간기능 활성화 기능이 있다고 알려져 있다. The leaf of Plantago asiatica L. is a perennial plant of the Plantago asiatica family. It is called plantain because of its tough leaves, and leaves and seed barks (Psyllium husk) are used for edible and medicinal purposes. In oriental medicine, it is used for diuresis, diarrhea, cystitis, urinary tract, etc., and is known to have a function of activating liver function.

팥(Phaseolus radiatus L.)은 장미목 콩과의 한해살이 식물로서 한국, 중국, 일본 등의 동북아시아에서 주로 재배되며, 국내에서는 콩 다음으로 수요가 많은 두류이다. 팥알은 그 형태와 구조는 콩과 비슷하나, 적색 광택을 나타내며 콩과는 달리 중앙에 흰색 띠를 가지는 특징이 있으며, 8~9%의 수분, 68%의 탄수화물 및 20%의 단백질을 함유하고 있어 영양적으로 매우 우수하다. 특히, 팥은 비타민 B1을 포함한 각종 비타민, 칼륨, 칼슘, 인 등의 미네랄 및 쌀에 부족한 라이신을 다량 함유하고 있어 각기병 및 피로회복에 효과가 있으며, 아미노산 부족을 해소하여 단백질 생산에 도움을 주며, 탄수화물 대사 촉진의 유익한 기능을 나타내어 영양보충용 식품소재로 이용되고 있다. 팥은 두류 중에서도 특이하게 세포벽 외부의 열 응고성 단백질을 가지며, 이들이 가열시 우선적으로 열 변성되므로 풀처럼 되지 않고 앙금이 만들어질 수 있는 특이한 구조를 가지고 있어, 주로 팥죽, 팥 앙금, 양갱, 빙과 제조용으로 이용되어 왔으며, 최근에는 팥 음료 및 팥을 이용한 장류 발효식품 등의 다양한 가공식품으로 개발되고 있다. 한방에서는 팥을 적소두로 불리며 설사, 이질, 수종, 비만을 치료하는 데 사용되고 있으며, 팥 삶은 물을 민간에서는 이뇨 및 배변 촉진작용을 통한 붓기 제거용 및 다이어트 음료로 애용하여 왔다.Red beans ( Phaseolus radiatus L.) is an annual plant of the rosewood leguminous family and is cultivated mainly in Northeast Asia such as Korea, China, and Japan, and is the second most demanded bean in Korea after beans. Red beans are similar in shape and structure to beans, but have a red luster and, unlike beans, have a white band in the center, and contain 8-9% moisture, 68% carbohydrates, and 20% protein. Very good nutritionally. In particular, red beans contain a large amount of various vitamins including vitamin B1, minerals such as potassium, calcium, and phosphorus, and lysine, which is insufficient in rice, so it is effective in recovering from beriberi disease and fatigue, and helping protein production by resolving amino acid shortages. It has a beneficial function of promoting carbohydrate metabolism and is used as a food material for nutritional supplementation. Red beans have a heat-coagulant protein outside the cell wall uniquely among beans, and since they are preferentially thermally denatured when heated, they do not become like grass and have a peculiar structure in which sediments can be made.Mainly used for making red bean porridge, red bean sediment, yokan, and frozen dessert. It has been used as, and in recent years, it has been developed as a variety of processed foods such as red bean beverages and fermented paste foods using red beans. In oriental medicine, red beans are called Jeoksodu and are used to treat diarrhea, dysentery, swelling, and obesity. Boiled red beans have been used habitually as a diet drink and for removing swelling through diuresis and facilitation in the private sector.

검정콩(Glycine max (L.) Merr)은 흑두, 서리태, 블랙빈(black beans) 등으로 불리며, 다량의 단백질, 비타민과 이소플라본과 같은 노화억제, 시스테인과 같은 탈모방지 성분이 확인되어 있다. 또한, 검정콩은 시력 증진, 해독 작용 및 소갈(消渴) 치료에 사용되어 왔으며, '약콩'이라 불릴 만큼 한국의 전통 식문화에 중요한 기능성 소재로 자리 잡고 있다. 최근 연구결과, 탈모예방, 부종 제거에 효과적임이 알려져 있다.Black beans ( Glycine max (L.) Merr) are called black beans, seoritae, black beans, etc., and have a large amount of protein, vitamins and aging inhibitors such as isoflavones, and hair loss prevention ingredients such as cysteine. In addition, black beans have been used for vision enhancement, detoxification, and treatment of sogal (消渴), and they are positioned as important functional materials in traditional Korean food culture as they are called'Yak beans'. As a result of recent research, it is known that it is effective in preventing hair loss and removing edema.

대추(Zizyphus jujuba)는 갈매나무과의 대추나무의 열매로 목밀, 조, 홍조라고 불리며, 국내 관혼상제의 필수적인 과실로 과육에는 주로 당분이 들어 있으며, 점액질·능금산·주석산 등도 들어 있다. 씨에는 베툴린·베투릭산·지방 등이 포함되어 있다. 대추는 생으로 식용할 뿐만 아니라, 건조하여 과자 제조, 요리 및 약용으로 사용한다. 또한, 가공하여 대추술, 대추차, 대추식초, 대추죽 등으로도 활용되며, 특히 한방에서는 이뇨·강장제 및 건위진정·완화제, 폐렴, 기관지염 및 기침 등을 치료 완화하는 데 사용되고 있다. Jujube ( Zizyphus jujuba ) is the fruit of the jujube tree of the buckthorn family and is called wood wheat, millet, and hongjo. It is an essential fruit for domestic ceremonial occasions. The flesh mainly contains sugar, and also contains mucilage, neunggeumsan, and juseoksan. Seeds contain betulin, beturic acid, and fat. Jujube is not only edible raw, but also dried and used for confectionery, cooking, and medicinal purposes. In addition, it is processed and used as jujube liquor, jujube tea, jujube vinegar, jujube porridge, etc., especially in oriental medicine, it is used to treat and relieve diuresis, tonic and soothing and reliever, pneumonia, bronchitis, and cough.

생강(Zingiber officinale)은 생강과(Zingiberaceae)의 아열대, 열대산 다년생 초본식물의 하나로서, 지하부 근경은 특이한 맛과 향을 가지고 있어, 국내에서는 마늘, 고추와 함께 3대 향신료로 이용되고 있다. 생강은 그대로 식품으로 이용되기도 하며, 김치, 젓갈, 과자류 등의 다양한 식품산업에 양념으로도 이용되고 있다. 또한, 건조한 생강(건강 또는 건조분말), 올레오레진(생강 함유지), 생강 정유 등의 제품 형태로 가공되어 식의약 소재 및 화장품 소재로 이용되기도 한다(김선희 2013. 한양대학교 박사논문). 실제 생강은 본초강목에 백사(백가지 질병)를 방지한다고 기술될 만큼 다양한 생리활성이 알려져 있으며, 한방에서는 건위약 및 소화불량, 구토, 진통에 효과가 우수하다고 알려져 있다. 생강의 생약명은 [건강]이며, 일반인은 [새앙]으로도 많이 부른다. 고려시대에는 왕의 하사품으로 사용될 만큼 진기하였으며, 인도의 고대의학서적 [아유르데바]에는 '신이 내린 치료제'로 소개되어 있다. Ginger ( Zingiber officinale ) is one of the subtropical and tropical perennial herbaceous plants of the Zingiberaceae family, and the basement rhizome has a peculiar taste and aroma, and is used as a three major spice along with garlic and red pepper in Korea. Ginger is also used as a food, and it is also used as a seasoning in various food industries such as kimchi, salted fish, and confectionery. In addition, it is processed into products such as dry ginger (healthy or dry powder), oleoresin (ginger-containing paper), and essential ginger oil, and is used as a food material and cosmetic material (Seonhee Kim 2013, Ph.D. thesis at Hanyang University). In fact, ginger is known to have various physiological activities that are described as preventing white sand (hundred diseases) in the herbaceous gangmok, and in oriental medicine, it is known that it has excellent effects on dry placebo, indigestion, vomiting, and pain. The herbal name of ginger is [Health], and the general public often calls it [Saeang]. In the Goryeo Dynasty, it was novel enough to be used as a royal tribute, and it is introduced as a'remedy from God' in the ancient medical book of India [Ayurdeva].

상술한 식물성 천연물의 단일 소재의 항당뇨 활성과 관련된 연구로는 "양파, 사과, 미나리, 양배추가 당뇨 환자의 혈당조절에 미치는 효과" (송미경, 2012, 경기대학교 석사논문), "우엉 뿌리 에탄올 추출물이 Streptozotocin으로 유발된 당뇨 흰쥐의 항산화에 미치는 영향" (김옥경, 2016, 한국유화학회지, 33, 435-440), "호박 분말 첨가식이가 당뇨쥐의 성장과 지질 산화에 미치는 영향" (이경순 외, 2003. 한국영양학회 학술대회 308), "Streptozotocin-유도 당뇨모델을 이용한 쥐눈이콩 분말의 혈당강하 및 인슐린 감수성의 효과" (이대훈 외, 한국식품영양과학회지, 2004, 33, 1618-1625), "대추과육과 잎의 발효추출물이 고지혈증과 당뇨에 미치는 효과" (최윤희, 2009, 원광대학교 박사논문), 및 "당뇨 마우스의 여러 장기에 쇼가올이 미치는 영향" (최혜윤, 2017. 경북대학교 석사논문) 등이 알려져 있으며, 관련 특허로는 대한민국 등록특허 제10-0194375호 "호박 추출물을 유효성분으로 하는 생약함유 건강보조식품의 제조방법", 등록특허 제10-1190624호 "검정콩 껍질로부터 추출한 안토시아닌을 함유하는 당뇨 예방 및 치료용 약학조성물" 등이 알려져 있다. Studies related to the antidiabetic activity of a single plant-based natural product include "Effects of Onion, Apple, Water Parsley, and Cabbage on Blood Sugar Control in Diabetic Patients" (Song Mi-kyung, 2012, Master's Thesis at Gyeonggi University), "Burdock Root Ethanol Extract Effect of this Streptozotocin-Induced Diabetic Rat on Antioxidation" (Ok-Kyung Kim, 2016, Journal of the Korean Oil Chemists, 33, 435-440), "Effect of Dietary Pumpkin Powder on Growth and Lipid Oxidation in Diabetic Rats" (Kyung-soon Lee et al., 2003. The Korean Nutrition Society Conference 308), "Effects of Lowering Blood Glucose and Insulin Sensitivity of Rat Eye Bean Powder Using Streptozotocin-Induced Diabetes Model" (Daehoon Lee et al., Journal of the Korean Society of Food Science and Nutrition, 2004, 33, 1618-1625), " The Effect of Fermented Extracts of Jujube Pulp and Leaves on Hyperlipidemia and Diabetes" (Yoonhee Choi, 2009, Ph.D. thesis at Wonkwang University), and "The effect of shogaol on various organs of diabetic mice" (Hyeyoon Choi, 2017. Master's thesis at Kyungpook National University) ), and the like, and related patents include Korean Patent No. 10-0194375, "Method for manufacturing health supplement foods containing herbal medicines using pumpkin extract as an active ingredient", and Patent No. 10-1190624 "Anthocyanin extracted from the skin of black beans. A pharmaceutical composition for preventing and treating diabetes containing" and the like are known.

또한, 다양한 천연물의 복합 조성물을 대상으로 하는 추출물로는 대한민국 등록특허 제10-1536974호 "여주, 산수유, 오미자 및 대추의 혼합 추출물을 함유하는 당뇨 예방 및 개선용 조성물", 등록특허 제10-0956278호 "복합생약 추출물을 유효성분으로 하는 당뇨병 또는 당뇨 합병증의 치료 또는 예방용 조성물", 등록특허 제10-1001705호에 팥, 찰흑미 및 찰보리쌀을 포함하여 이루어지거나, 흑태, 할맥, 현미 및 찹쌀로 구성된 "비만, 고지혈증 및 당뇨의 예방 및 개선용 조성물"이 개시되어 있으며, 공개특허 제10-2002-0094179호에 천초, 숙지황, 생강, 산수유, 산약, 목단피, 맥문동, 천화분, 택사, 백복령, 황련, 검정콩 등의 분말을 포함하는 "당뇨병용 건강 보조제" 및 공개특허 제10-2006-0025914호에 동충하초, 토사자, 맥문동, 지모, 숙지황, 선퇴, 구척, 자황기, 적소두, 산약, 단삼 및 하수오로 구성된 "복합 생약 추출물(배당수)을 포함하는 당뇨병 예방 및 치료용 조성물" 등이 알려져 있다. In addition, as an extract targeting a complex composition of various natural substances, Korean Patent Registration No. 10-1536974 "A composition for preventing and improving diabetes containing a mixed extract of Yeoju, Cornus, Schisandra chinensis", Registered Patent No. 10-0956278 No. "Composition for the treatment or prevention of diabetes or diabetic complications using a complex herbal extract as an active ingredient", consisting of red beans, sticky black rice and sticky barley rice in Registration Patent No. 10-1001705, or with black tae, halmac, brown rice and glutinous rice Consisting "composition for the prevention and improvement of obesity, hyperlipidemia and diabetes" is disclosed, and in Korean Patent Publication No. 10-2002-0094179, Cheoncho, Sukjihwang, Ginger, Cornus, Sanyak, Mokdanpi, Maekmundong, Cheonhwabun, Taeksa, Baekbokryeong, Hwangnyeon , "Health Supplements for Diabetes" containing powders such as black beans, and Korean Patent Publication No. 10-2006-0025914, Cordyceps, Tosaja, Maekmundong, Jimo, Sukjihwang, Seontoe, Gucheok, Jahwanggi, Red Soybean, Sanyak, Dansam and Sesuoro A composition for preventing and treating diabetes comprising "a complex herbal extract (divided number)" is known.

그러나, 현재까지 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대두 및 생강을 포함하는 식물성 천연물을 각각 동일 중량비로 하여 조제되는 추출물의 관능성 및 항당뇨 활성에 관한 특허나 연구는 알려진 바가 없다.However, until now, there are no patents or studies on the organoleptic and antidiabetic activity of extracts prepared using natural vegetable products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, soybeans, and ginger at the same weight ratio. .

KRKR 10-153697410-1536974 BB KRKR 10-095627810-0956278 BB KRKR 10-2006-002591410-2006-0025914 AA KRKR 10-2002-009417910-2002-0094179 AA

이경순 외, 2003, 호박 분말 첨가식이가 당뇨쥐의 성장과 지질 산화에 미치는 영향, 한국영양학회 학술대회, 308 Lee, Gyeong-soon et al., 2003, Effect of Pumpkin Powder-Added Diet on Growth and Lipid Oxidation in Diabetic Rats, Korean Nutrition Society Conference, 308 송미경, 2012, 양파,사과,미나리,양배추가 당뇨 환자의 혈당조절에 미치는 효과, 경기대학교 석사논문 Mikyung Song, 2012, Effect of Onion, Apple, Parsley, Cabbage on Blood Glucose Control in Diabetic Patients, Master Thesis, Kyunggi University

본 발명은 상기와 같은 종래 기술의 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 본 발명에서 해결하고자 하는 과제는 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대두 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물을 포함하는 당뇨병의 예방 또는 치료 및 개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품을 제공하고자 하는 것이다.The present invention was devised to solve the problems of the prior art as described above, and the problem to be solved in the present invention is a mixed extract of vegetable natural substances including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, soybeans and ginger It is intended to provide a pharmaceutical composition and health functional food for the prevention or treatment and improvement of diabetes, including.

상기와 같은 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.In order to solve the above problems, the present invention is a pharmaceutical for the prevention or treatment of diabetes containing as an active ingredient a mixed extract of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger The composition is provided.

본 발명의 약학적 조성물의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the pharmaceutical composition of the present invention is preferably obtained by extraction with hot water.

본 발명의 약학적 조성물의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출한 후, 에탄올로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the pharmaceutical composition of the present invention is preferably obtained by extracting with hot water and then with ethanol.

또한, 본 발명은 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a health functional food for preventing or improving diabetes, containing a mixed extract of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger as an active ingredient.

본 발명의 건강 기능 식품의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the health functional food of the present invention is preferably obtained by extracting with hot water.

본 발명의 건강 기능 식품의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출한 후, 에탄올로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the health functional food of the present invention is preferably obtained by extracting with hot water and then with ethanol.

본 발명의 항당뇨 조성물의 유효성분으로서의 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물은, 본 명세서의 실시예를 통해 증명된 바와 같이, 총 폴리페놀, 총 플라보노이드 함량이 매우 높은 반면, 총 당 및 환원당 함량이 매우 낮으면서, 베타-아밀라아제 및 알파-글루코시다아제 저해 활성을 통한 항당뇨 활성을 나타낸다. 또한, 본 발명의 유효성분은 인간 적혈구에 대한 용혈 활성을 전혀 나타내지 않고, 열 안정성이 우수하고, pH 2의 산성 조건 및 혈장 내에서도 베타-아밀라아제 및 알파-글루코시다아제 저해 활성의 손실이 나타나지 않으므로, 이를 추출액, 분말, 환, 정 등의 상시 복용이 가능한 형태로 조제할 수 있어 제약 산업 및 식품 산업상 매우 유용한 발명인 것이다. Mixed extracts of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger as active ingredients of the antidiabetic composition of the present invention, as demonstrated through the examples of the present specification, total poly While the phenol and total flavonoid content is very high, the total sugar and reducing sugar content is very low, and it shows antidiabetic activity through beta-amylase and alpha-glucosidase inhibitory activity. In addition, the active ingredient of the present invention does not exhibit any hemolytic activity against human red blood cells, has excellent thermal stability, and does not show loss of beta-amylase and alpha-glucosidase inhibitory activity even in acidic conditions of pH 2 and plasma, It is a very useful invention in the pharmaceutical industry and the food industry because it can be prepared in a form that can be taken at any time such as extract, powder, pills, and tablets.

도 1은 본 발명의 (가) 추출물 분말 및 (나) 10% 수용액의 상등액을 나타낸 것이고,
도 2a 및 도 2b는 본 발명의 추출물의 β-amylase 및 α-glucosidase 저해도를 나타낸 것으로서, 1: 활성 대조구(acarbose, 0.5mg/ml), 2: 본 발명의 열수 추출물(0.5mg/ml), 3: 본 발명의 에탄올 추출물(0.5mg/ml), 4: 본 발명의 실시예 1에 기재된 시판 제품 1(0.5mg/ml), 5: 본 발명의 실시예 1에 기재된 시판 제품 2(0.5mg/ml)를 각각 나타낸다.
1 shows the supernatant of the present invention (a) extract powder and (b) 10% aqueous solution,
2A and 2B show the degree of inhibition of β-amylase and α-glucosidase of the extract of the present invention, 1: active control (acarbose, 0.5mg/ml), 2: hot water extract of the present invention (0.5mg/ml) , 3: ethanol extract of the present invention (0.5 mg/ml), 4: commercial product 1 (0.5 mg/ml) described in Example 1 of the present invention, 5: commercial product 2 (0.5 mg/ml) described in Example 1 of the present invention mg/ml) respectively.

이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail.

본 발명의 발명자들은 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강의 혼합물을 대상으로 항당뇨 활성을 검정하기 위하여, 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 각각 동일 중량비로 첨가한 후, 가수하고, 고온에서 16시간 이상 추출하여 추출액을 조제하고, 이를 분무 건조시켜 분말상의 추출물을 조제하였으며, 이의 관능성 및 항당뇨 활성을 평가하여 상기 추출물이 관능성과 항당뇨 활성이 우수함을 확인하였다. 상기 추출물은 인간 적혈구에 대해 용혈 활성은 전혀 나타내지 않으면서도, 열 안정성과 산 안정성이 우수한 특징을 가짐을 확인함으로써 상기 추출물을 당뇨병의 예방 또는 치료 및 개선용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품으로 활용하고자 하였다. In order to test the antidiabetic activity of a mixture of parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger, the inventors of the present invention include parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, dates and ginger. Each was added in the same weight ratio, watered, extracted at high temperature for 16 hours or more to prepare an extract, and spray-dried to prepare a powdery extract, and the organoleptic and antidiabetic activity were evaluated to obtain the extract. It was confirmed that the antidiabetic activity was excellent. The extract was to be used as a pharmaceutical composition and health functional food for preventing or treating diabetes and improving diabetes by confirming that the extract does not exhibit any hemolytic activity on human red blood cells, but has excellent thermal stability and acid stability. .

구체적으로, 본 발명자들은 민간에서 다양한 생리 활성이 있다고 알려진 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 이용하여 항당뇨 조성물로 개발하기 위하여, 상기 7종의 식용 또는 약용의 식물성 천연물을 각각 동일 중량비로 혼합하고, 여기에 15배 중량비를 가수한 후, 100℃의 고온에서 16시간 이상 추출하여 추출액을 조제하고, 이를 분무건조하여 본 발명의 추출물을 조제하였다. 상기 추출물은 우수한 관능성과 항당뇨 활성을 나타냄을 확인하였으며, 1mg/ml 농도에서도 인간 적혈구에 대한 용혈활성을 전혀 나타내지 않아 급성 독성을 유발하지 않음을 확인하였다. Specifically, the present inventors use parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger, which are known to have various physiological activities in the private sector, to develop an antidiabetic composition, the 7 kinds of edible or medicinal vegetable Each natural product was mixed at the same weight ratio, added a 15-fold weight ratio thereto, and extracted at a high temperature of 100° C. for 16 hours or longer to prepare an extract, which was spray-dried to prepare the extract of the present invention. It was confirmed that the extract exhibited excellent organoleptic and antidiabetic activity, and did not show any hemolytic activity against human red blood cells even at a concentration of 1mg/ml, and thus did not induce acute toxicity.

따라서, 본 발명은 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.Accordingly, the present invention provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of diabetes containing a mixed extract of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger as an active ingredient.

본 발명의 약학적 조성물의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the pharmaceutical composition of the present invention is preferably obtained by extraction with hot water.

본 발명의 약학적 조성물의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출한 후, 에탄올로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the pharmaceutical composition of the present invention is preferably obtained by extracting with hot water and then with ethanol.

또한, 본 발명은 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품을 제공한다.In addition, the present invention provides a health functional food for preventing or improving diabetes, containing a mixed extract of vegetable natural products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger as an active ingredient.

본 발명의 건강 기능 식품의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the health functional food of the present invention is preferably obtained by extracting with hot water.

본 발명의 건강 기능 식품의 유효성분으로서의 상기 혼합 추출물은 열수로 추출한 후, 에탄올로 추출하여 수득되는 것이 바람직하다.The mixed extract as an active ingredient of the health functional food of the present invention is preferably obtained by extracting with hot water and then with ethanol.

이하에서는, 본 발명의 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물의 혼합 추출물의 제조 방법 및 효능 실험 등을 보다 구체적으로 설명한다.Hereinafter, a method for preparing a mixed extract of natural vegetable products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger according to the present invention will be described in more detail.

본 발명의 발명자들은, 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 정선, 세척된 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 세절하는 단계: 세절된 상기 7종 천연물을 100℃에서 16시간 이상 밀폐 조건에서 가열처리하여 추출하는 단계; 이후 열수 추출액으로부터 추출물을 조제하는 단계; 상기 조성물의 관능성 및 항당뇨 활성 평가 및 활성 물질의 안정성 평가 단계의 실험들을 수행하였다.The inventors of the present invention, in order to achieve the object of the present invention, the step of slicing selected, washed parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger: 100° C. Extracting by heat treatment in a sealed condition for at least 16 hours; Then preparing an extract from the hot water extract; Experiments in the steps of evaluating the functional and antidiabetic activity of the composition and the stability of the active substance were performed.

상기 7종의 천연물은 동일 중량으로 혼합될 수 있으며, 열수 추출액은 감압건조 및 동결건조, 또는 분무건조 등과 같은 통상적인 분말화 과정을 거쳐 분말 형태의 추출물로 제조될 수 있다. 또한, 상기 열수 추출액으로부터 조제된 분말상의 추출물은 추가적으로 에탄올로 추출하여 에탄올 추출물을 수득할 수도 있다. The seven kinds of natural products may be mixed at the same weight, and the hot water extract may be prepared as an extract in powder form through a conventional powdering process such as vacuum drying, freeze drying, or spray drying. In addition, the powdery extract prepared from the hot water extract may be additionally extracted with ethanol to obtain an ethanol extract.

또한, 본 발명의 추출물은 혈장 내의 다양한 분해효소에 분해되지 않으며, 100℃의 열처리와 pH 2의 인체 위 내의 pH에서도 활성을 유지한다.In addition, the extract of the present invention is not decomposed by various degrading enzymes in plasma, and maintains activity even at a heat treatment of 100° C. and a pH in the stomach of the human body at pH 2.

본 발명의 추출물은, 강력한 β-amylase 및 α-glucosidase에 대한 전분분해효소 저해활성을 나타내어, 제1형 당뇨병, 제2형 당뇨병 또는 당뇨병성 망막증, 당뇨병성 신증 등과 같은 당뇨 합병증의 예방 및 치료/개선과 관련되는 약학적 조성물 및 건강 기능 식품의 소재로 사용될 수 있다.The extract of the present invention exhibits potent β-amylase and α-glucosidase inhibitory activity against starch degrading enzymes, and thus prevents and treats diabetic complications such as type 1 diabetes, type 2 diabetes or diabetic retinopathy, diabetic nephropathy, etc. It can be used as a material for pharmaceutical compositions and health functional foods related to improvement.

본 발명의 유효 성분을 포함하는 약학적 조성물은 각각의 사용 목적에 맞게 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁제, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구 제형, 멸균 주사용액의 주사제 등 다양한 형태로 제형화하여 사용할 수 있으며, 경구 투여하거나 정맥 내, 복강 내, 피하, 직장, 국소 투여 등을 포함한 다양한 경로를 통해 투여될 수 있다.Pharmaceutical compositions containing the active ingredients of the present invention are oral formulations such as powders, granules, tablets, capsules, suspensions, emulsions, syrups, aerosols, etc., according to a conventional method for each purpose of use, and injections of sterile injectable solutions It may be formulated and used in various forms such as, and may be administered orally or administered through various routes including intravenous, intraperitoneal, subcutaneous, rectal, and topical administration.

이러한 약학적 조성물에는 추가적으로 담체, 부형제 또는 희석제 등이 더 포함될 수 있으며, 포함될 수 있는 적합한 담체, 부형제 또는 희석제의 예로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리쓰리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 비정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유 등을 들 수 있다. 또한, 본 발명의 약학적 조성물은 충전제, 항응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 더 포함할 수도 있다.Such pharmaceutical compositions may further include a carrier, excipient, or diluent, and examples of suitable carriers, excipients or diluents that may be included include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, Starch, gum acacia, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose, methyl cellulose, amorphous cellulose, polyvinyl pyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate and mineral oil And the like. In addition, the pharmaceutical composition of the present invention may further include a filler, an anti-aggregating agent, a lubricant, a wetting agent, a fragrance, an emulsifying agent, a preservative, and the like.

바람직한 구체예로서, 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형 제제는 상기 약학적 조성물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 탄산칼슘, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 혼합하여 제형화한다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 등과 같은 윤활제가 사용될 수도 있다.In a preferred embodiment, solid formulations for oral administration include tablets, pills, powders, granules, capsules, and the like, and such solid formulations include at least one excipient, such as starch, calcium carbonate, and the like, in the pharmaceutical composition. It is formulated by mixing sucrose, lactose, gelatin, and the like. Further, in addition to simple excipients, lubricants such as magnesium stearate and talc may be used.

바람직한 구체예로서, 경구용 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 예시될 수 있으며, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면, 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.As a preferred embodiment, as a liquid formulation for oral use, a suspension, a liquid formulation, an emulsion, a syrup, and the like may be exemplified, and various excipients other than water and liquid paraffin, which are commonly used simple diluents, such as wetting agents, sweetening agents, Fragrances, preservatives, etc. may be included.

바람직한 구체예로서, 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액제, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조제, 좌제 등을 예시할 수 있다. 비수성용제, 현탁제에는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 포함될 수 있다. 주사제에는 용해제, 등장화제, 현탁화제, 유화제, 안정화제, 방부제 등과 같은 종래의 첨가제가 포함될 수 있다.As a preferred embodiment, the preparation for parenteral administration may include a sterile aqueous solution, a non-aqueous solvent, a suspension, an emulsion, a lyophilized agent, a suppository, and the like. Non-aqueous solvents and suspensions may include propylene glycol, polyethylene glycol, vegetable oils such as olive oil, and injectable esters such as ethyloleate. Injectables may contain conventional additives such as solubilizing agents, isotonic agents, suspending agents, emulsifying agents, stabilizing agents, and preservatives.

본 발명의 유효 성분은 약제학적으로 유효한 양으로 투여한다. 본 발명에서, "약제학적으로 유효한 양"은 의학적 치료에 적용 가능한 합리적인 수혜/위험 비율로 질환을 치료하기에 충분한 양을 의미하며, 유효 용량 수준은 환자의 질환의 종류, 중증도, 약물의 활성, 약물에 대한 민감도, 투여 시간, 투여 경로 및 배출 비율, 치료 기간, 동시 사용되는 약물을 포함한 요소 및 기타 의학 분야에 잘 알려진 요소에 따라 결정될 수 있다. 본 발명의 약학적 조성물은 개별 치료제로 투여하거나 다른 치료제와 병용하여 투여될 수 있고, 종래의 치료제와 순차적으로 또는 동시에 투여될 수 있으며, 단일 또는 다중 투여될 수 있다. 상기한 요소들을 모두 고려하여 부작용 없이 최소한의 양으로 최대 효과를 얻을 수 있는 양을 투여하는 것이 중요하며, 이는 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.The active ingredient of the present invention is administered in a pharmaceutically effective amount. In the present invention, "pharmaceutically effective amount" refers to an amount sufficient to treat a disease at a reasonable benefit/risk ratio applicable to medical treatment, and the effective dose level is the type of disease, severity, drug activity, Sensitivity to drugs, time of administration, route of administration and rate of excretion, duration of treatment, factors including drugs used concurrently, and other factors well known in the medical field. The pharmaceutical composition of the present invention may be administered as an individual therapeutic agent or administered in combination with other therapeutic agents, may be administered sequentially or simultaneously with a conventional therapeutic agent, and may be administered single or multiple. It is important to administer an amount capable of obtaining the maximum effect in a minimum amount without side effects in consideration of all the above factors, and this can be easily determined by a person skilled in the art.

바람직한 구체예로서, 본 발명의 약학적 조성물에서 유효성분의 유효량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으며, 일반적으로는 체중 ㎏ 당 1 내지 5,000mg, 바람직하게는 100 내지 3,000mg을 매일 또는 격일 투여하거나 1일 1 내지 3회로 나누어 투여할 수 있다. 그러나, 투여 경로, 질병의 중증도, 성별, 체중, 연령 등에 따라서 증감될 수 있으므로 상기 투여량이 어떠한 방법으로도 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.As a preferred embodiment, the effective amount of the active ingredient in the pharmaceutical composition of the present invention may vary depending on the age, sex, and body weight of the patient, and generally 1 to 5,000 mg, preferably 100 to 3,000 mg per kilogram of body weight daily Alternatively, it may be administered every other day or divided into 1 to 3 times a day. However, since it may increase or decrease depending on the route of administration, the severity of the disease, sex, weight, age, etc., the dosage amount is not limited by any method.

본 발명의 약학적 조성물은 다양한 경로를 통하여 대상에 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관 내(intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.The pharmaceutical composition of the present invention can be administered to a subject through various routes. All modes of administration can be expected and may be administered by, for example, oral, rectal or intravenous, intramuscular, subcutaneous, intrauterine dural or intracerebroventricular injection.

본 발명에서 "투여"는 임의의 적절한 방법으로 환자에게 소정의 물질을 제공하는 것을 의미하며, 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 일반적인 모든 경로를 통하여 경구 또는 비경구 투여될 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 유효성분을 표적 세포로 전달할 수 있는 임의의 장치를 이용해 투여될 수도 있다.In the present invention, "administration" means providing a predetermined substance to a patient by any suitable method, and the route of administration of the pharmaceutical composition of the present invention is oral or parenteral through all general routes as long as it can reach the target tissue. It can be administered orally. In addition, the composition of the present invention may be administered using any device capable of delivering an active ingredient to target cells.

본 발명에서 "대상"은, 특별히 한정되는 것은 아니지만, 예를 들어, 인간, 원숭이, 소, 말, 양, 돼지, 닭, 칠면조, 메추라기, 고양이, 개, 마우스, 쥐, 토끼 또는 기니아 피그를 포함하고, 바람직하게는 포유류, 보다 바람직하게는 인간을 의미한다.In the present invention, the "object" is not particularly limited, but includes, for example, human, monkey, cow, horse, sheep, pig, chicken, turkey, quail, cat, dog, mouse, mouse, rabbit, or guinea pig And, preferably, a mammal, more preferably a human.

또한, 본 발명의 건강 기능 식품은 혈전증의 예방 또는 개선에 효과적인 식품 및 음료 등에 다양하게 이용될 수 있다. 본 발명의 유효성분을 포함하는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 보조 식품류 등이 있고, 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 형태로 사용할 수 있다.In addition, the health functional food of the present invention can be variously used for foods and beverages effective in preventing or improving thrombosis. Foods containing the active ingredient of the present invention include, for example, various foods, beverages, gum, tea, vitamin complexes, health supplements, and the like, and may be used in the form of powders, granules, tablets, capsules or beverages. .

본 발명의 유효성분은 일반적으로 전체 식품 중량의 0.01 내지 50중량%로 가할 수 있으며, 건강음료 조성물은 100ml를 기준으로 0.02 내지 50g, 바람직하게는 0.3 내지 10g의 비율로 가할 수 있다.In general, the active ingredient of the present invention may be added in an amount of 0.01 to 50% by weight of the total food weight, and the health beverage composition may be added in an amount of 0.02 to 50g, preferably 0.3 to 10g, based on 100ml.

본 발명의 건강 기능 식품은 지시된 비율로 필수 성분으로서 상기 화합물을 함유하는 것 외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조 첨가제, 예컨대, 천연 탄수화물 및 다양한 향미제 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.The health functional food of the present invention may contain the compound as an essential component in the indicated ratio as an additional component, as well as food supplementary additives acceptable for food, such as natural carbohydrates and various flavoring agents.

상기 천연 탄수화물의 예로는 포도당, 과당 등의 단당류, 말토오스, 수크로오스 등의 이당류 및 덱스트린, 시클로덱스트린 등의 다당류와 같은 통상적인 당 및 자일리톨, 소르비톨, 에리쓰리톨 등의 당알코올이 있다. Examples of the natural carbohydrates include monosaccharides such as glucose and fructose, disaccharides such as maltose and sucrose, and conventional sugars such as polysaccharides such as dextrin and cyclodextrin, and sugar alcohols such as xylitol, sorbitol, and erythritol.

상기 향미제로는 타우마틴; 레바우디오시드 A 또는 글리시르히진과 같은 스테비아 등의 천연 향미제 및 사카린, 아스파르탐 등의 합성 향미제를 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 건강 기능 식품 100ml당 일반적으로 약 1 내지 20g, 바람직하게는 약 5 내지 12g을 사용한다. 상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물, 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수도 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 본 발명의 유효성분 100중량부 당 0.01 내지 약 20중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.Taumatin as the flavoring agent; Natural flavoring agents such as stevia such as rebaudioside A or glysirhizin, and synthetic flavoring agents such as saccharin and aspartame may be used. The ratio of the natural carbohydrate is generally about 1 to 20 g, preferably about 5 to 12 g per 100 ml of the health functional food of the present invention. In addition to the above, the health functional food of the present invention includes various nutrients, vitamins, minerals, synthetic flavoring agents and natural flavoring agents, and other flavoring agents, coloring agents and thickeners, pectic acid and salts thereof, alginic acid and salts thereof, organic acids, protective colloids. It may contain thickeners, pH adjusters, stabilizers, preservatives, glycerin, alcohols, carbonation agents used in carbonated beverages, and the like. In addition, the health functional food of the present invention may contain pulp for the production of natural fruit juices, fruit juice drinks, and vegetable drinks. These components may be used independently or in combination. The proportion of these additives is generally selected from 0.01 to about 20 parts by weight per 100 parts by weight of the active ingredient of the present invention.

이하에서는 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. 하기 실시예는 본 발명의 바람직한 일 구체예일 뿐이며, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예의 범위로 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail through examples. The following examples are only one preferred specific example of the present invention, and the scope of the present invention is not limited to the scope of the following examples.

[실시예][Example]

실시예 1: 추출물의 조제 및 관능성 평가 Example 1: Preparation and sensory evaluation of extract

안전성이 확보된 천연 식용 또는 약용 혼합 추출물을 이용한 항산화 조성물을 개발하기 위하여, 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 각각 구입한 후, 이물질을 제거하고, 선별한 후, 세절하고, 상기 7종 천연물을 각각 동일 중량비로 첨가한 후, 이의 15배 중량비를 가수하고, 이를 밀폐 조건, 100℃에서 16시간 이상 열수 추출하였다. 이때, 14시간 이하로 열수 추출때까지는 질경이 잎 등의 섬유소 분해가 나타나지 않아 제대로 추출이 이루어지지 않았으며, 특유의 풋내가 나타나 관능성이 낮았다. 따라서, 16시간 이상 추출시 추출물은 충분한 열수 추출과 관능성 향상이 매우 증대된다. 한편, 상기 혼합 추출물은 상품명 '라온차'라는 명칭으로 공지되어 있는 제품의 원료 추출물이다.In order to develop an antioxidant composition using natural edible or medicinal mixed extracts with secured safety, parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujubes and ginger were purchased, respectively, and then foreign substances were removed and selected. After slicing and adding the 7 kinds of natural products at the same weight ratio, respectively, 15 times the weight ratio thereof was added, and hot water extraction was performed at 100°C for 16 hours or more under sealed conditions. At this time, until extraction with hot water for less than 14 hours, the extraction was not performed properly because the decomposition of fibrin such as plantain leaves did not appear, and a characteristic green smell appeared, resulting in low sensory properties. Therefore, when extracted for more than 16 hours, the extract is highly enhanced with sufficient hot water extraction and sensory improvement. On the other hand, the mixed extract is a raw material extract of a product known under the brand name'Raon Tea'.

본 발명의 추출물의 특성을 비교하기 위하여, 약용 또는 식용 천연물의 혼합 추출물로 제조된 기존 시판 제품 2종(시판 제품 1: 정진 농업회사법인의 '목애' 제품으로서 조청, 배, 도라지, 오미자를 함유, 시판 제품 2: (주)메가바이오숲의 '공미' 제품으로서 진피, 대나무잎, 황기, 복령, 창출, 소맥, 계지, 연자육, 노근, 지황, 창출 및 옥수수 수염을 함유)과 본 발명의 추출물의 이화학적 특성 및 색차 분석을 수행하고, 그 결과는 표 1에 나타내었다. 또한, 본 발명의 추출물 분말 및 10% 수용액 상등액을 도 1에 나타내었다. 이때, 색차 분석은 Hunter Color Difference meter(Super color SP-80 Colormeter, Tokyo Denshoku Co., Japan)를 이용하여 측정하였으며, 명도(백색 100 ~ 0 검정색), 적색도(적색 100 ~ -80 녹색), 황색도(황색 70 ~ -80 검정색)를 측정하였다. 이때, 표준백판의 색도는 L값이 92.44, a값이 -0.06, b값이 1.35로 기준을 정하였으며, 시료당 3회 측정하여 평균값을 구하여 나타내었고 색차(△E)는 다음의 식을 이용하여 계산하였다.In order to compare the characteristics of the extracts of the present invention, two kinds of existing commercially available products manufactured from mixed extracts of medicinal or edible natural substances (commercial product 1:'Mokae' of Jeongjin Agricultural Corporation, containing Jocheong, pear, bellflower, and Schisandra chinensis. , Commercial product 2:'Gongmi' product of Mega Bio Forest Co., Ltd., containing dermis, bamboo leaves, Astragalus, Bokryeong, Jeonju, wheat, Gyeji, Yeonjayuk, Nogeun, Rehmannia, Jinju and corn beard) and extracts of the present invention Physicochemical properties and color difference analysis were performed, and the results are shown in Table 1. In addition, the extract powder and the 10% aqueous solution supernatant of the present invention are shown in FIG. At this time, color difference analysis was measured using a Hunter Color Difference meter (Super color SP-80 Colormeter, Tokyo Denshoku Co., Japan), and brightness (white 100 to 0 black), redness (red 100 to -80 green), Yellowness (yellow 70 ~ -80 black) was measured. At this time, the chromaticity of the standard white plate was set as 92.44 for L value, -0.06 for a value, and 1.35 for b value, and the average value was calculated by measuring three times per sample, and the color difference (△E) was calculated using the following equation. And calculated.

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[표 1] 추출물의 이화학적 특성 및 색차 분석[Table 1] Physicochemical properties and color difference analysis of extract

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표 1에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 추출물의 경우, 95% 이상의 매우 높은 brix를 나타내었으며, pH는 기존 시판 제품 2와 유사한 4.9로 나타났다. 그러나, 산도는 상대적으로 낮은 0.8을 나타내어 쉽게 음용할 수 있음을 알 수 있었다. 상기의 기존 제품과 본 발명의 추출물을 9.5 brix로 조정한 후 관능성을 평가한 결과는 표 2에 나타내었다. 이때, 관능 평가는 식품영양학 전공의 전문가 10명 및 20대 소비자 40명을 대상으로 맛, 향 및 전체적 선호도로 구분하여 7점 척도법으로 평가하였다. As shown in Table 1, in the case of the extract of the present invention, it exhibited a very high brix of 95% or more, and the pH was 4.9 similar to that of the existing commercial product 2. However, it can be seen that the acidity is relatively low, 0.8, so it can be easily consumed. Table 2 shows the results of functional evaluation after adjusting the existing product and the extract of the present invention to 9.5 brix. At this time, the sensory evaluation was evaluated on a 7-point scale by dividing into taste, aroma, and overall preference targeting 10 experts in food and nutrition majors and 40 consumers in their twenties.

[표 2] 추출물의 관능성 평가[Table 2] Sensory evaluation of extract

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표 2에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 추출물은 기존 천연물 복합 추출물인 시판 제품 1에 비해1.36점 이상의 전체적 선호도 상승이 확인되었으며, 맛, 향, 목넘김, 입안 잔류감 모두에서 증가된 관능성을 확인하였다. 또한, 본 발명의 추출물은 낮은 산도로 인해 자극도가 낮으면서 당도가 낮아, 지속적인 음용이 용이하리라 판단된다. As shown in Table 2, the extract of the present invention was found to have an overall preference increase of 1.36 points or more compared to the conventional natural compound extract, commercial product 1, and increased sensory properties in all of taste, aroma, throat and mouth residual. . In addition, the extract of the present invention has low irritation and low sugar content due to low acidity, and it is determined that continuous drinking is easy.

실시예 2: 추출물의 성분 분석 Example 2: Analysis of the components of the extract

실시예 1에서 제조된 본 발명의 추출물의 성분 분석으로 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총 당 및 환원당 함량을 측정하였다. 총 폴리페놀 함량은 추출 검액 400μl에 50μl의 Folin-ciocalteau, 100μl의 Na2CO3 포화용액을 넣고, 실온에서 1시간 방치한 후, 725nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총 플라보노이드 함량은 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고, 여과한 추출 검액 400μl에 90% diethylene glycol 4ml를 첨가하고 다시 1N NaOH 40μl를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 환원당은 DNS법으로, 총 당은 phenol-sulfuric acid법을 이용하여 정량하였다. 시료 대조구로는 유사한 천연물 복합 추출물 시판 농축 스틱제품 2종을 사용하였고, 본 발명의 추출물은 분말을 10% 용액으로 제조하여 사용하였다. The content of total polyphenols, total flavonoids, total sugars and reducing sugars was measured by component analysis of the extract of the present invention prepared in Example 1. For the total polyphenol content, 50 μl of Folin-ciocalteau and 100 μl of Na 2 CO 3 saturated solution were added to 400 μl of the extraction sample solution, and allowed to stand at room temperature for 1 hour, and the absorbance was measured at 725 nm. Tannic acid was used as a standard reagent. For the total flavonoid content, each sample was extracted with methanol for 18 hours, 4 ml of 90% diethylene glycol was added to 400 μl of the filtered extraction sample solution, 40 μl of 1N NaOH was added, and the absorbance was measured at 420 nm after 1 hour reaction at 37°C. Rutin was used as a standard reagent. Reducing sugar was quantified by DNS method and total sugar was quantified by phenol-sulfuric acid method. As a sample control, two kinds of commercially available concentrated stick products of similar natural compound extract were used, and the extract of the present invention was used by preparing a powder of 10% solution.

[표 3] 추출물의 성분 분석 결과[Table 3] Results of component analysis of extract

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그 결과, 표 3에 나타낸 바와 같이, 본 발명의 추출물은 총 폴리페놀 함량은 2.10mg/g, 총 플라보노이드 함량은 0.915mg/g으로 나타났으며, 총당 및 환원당 함량은 각각 47.1mg/g 및 8.2mg/g으로 나타났다. 폴리페놀 함량의 경우, 기존 시판 제품 2와 비교하면 68% 수준이나, 시판 제품 1과 비교시는 1.78배 높은 양을 나타내었다. 그러나, 총 플라보노이드 함량은 기존 제품의 4.9~35.2배 높았으며, 총당 및 환원당 함량은 각각 9~20% 및 2.5~7.6%를 포함하고 있었다. 따라서, 기존 시판 제품들과 비교시 본 발명의 추출물은 높은 플라보노이드 함량과 낮은 당 함량을 가진 것이 특징이었다. As a result, as shown in Table 3, the total polyphenol content of the extract of the present invention was 2.10mg/g, the total flavonoid content was 0.915mg/g, and the total sugar and reducing sugar contents were 47.1mg/g and 8.2, respectively. It appeared in mg/g. In the case of the polyphenol content, compared to the existing commercial product 2, the level was 68%, but compared to the commercial product 1, the amount was 1.78 times higher. However, the total flavonoid content was 4.9-35.2 times higher than that of the existing product, and the total sugar and reducing sugar content contained 9-20% and 2.5-7.6%, respectively. Therefore, compared with existing commercial products, the extract of the present invention was characterized by having a high flavonoid content and a low sugar content.

실시예 3: 추출물의 항당뇨 평가 Example 3: Antidiabetic evaluation of extract

실시예 1에서 조제된 본 발명의 추출물의 항당뇨 활성을 β-amylase 저해 활성 및 α-glucosidase 저해 활성으로 평가하였으며, 그 결과를 표 4 및 도 2a 및 도 2b에 나타내었다. The antidiabetic activity of the extract of the present invention prepared in Example 1 was evaluated as β-amylase inhibitory activity and α-glucosidase inhibitory activity, and the results are shown in Table 4 and FIGS. 2A and 2B.

먼저, β-amylase(4-alpha-D-glucan maltohydrolase) 저해활성은 시료 2.5μL와 50mM phosphate buffer(pH 6.8)로 희석한 β-amylase(0.25U/mL) 25μL를 혼합하여 37℃에서 10분간 1차 반응한 후, 0.5% soluble starch(Samchun Chemicals Co., Korea) 25μL를 가하여 37℃에서 10분간 2차 반응한 후 100℃에서 5분간 가열하여 반응을 정지시켰으며, 반응액에 150μL의 DNS(3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., st. Louis, USA) 용액을 가하여 100℃에서 5분간 가열하여 발색한 후 상온에서 방냉하였다. 발색액은 540nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다. First, β-amylase (4-alpha-D-glucan maltohydrolase) inhibitory activity was obtained by mixing 2.5 μL of sample and 25 μL of β-amylase (0.25 U/mL) diluted with 50 mM phosphate buffer (pH 6.8) at 37°C for 10 minutes. After the first reaction, 25 μL of 0.5% soluble starch (Samchun Chemicals Co., Korea) was added and the second reaction was performed at 37°C for 10 minutes, and then the reaction was stopped by heating at 100°C for 5 minutes, and 150 μL of DNS in the reaction solution (3,5-dinitrosalicylic acid, Sigma Co., st. Louis, USA) solution was added, heated at 100° C. for 5 minutes to develop color, and then allowed to cool at room temperature. The color developing solution was calculated by measuring the absorbance at 540 nm.

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한편, α-glucosidase 저해활성은 pNPG(p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA)를 이용하여 평가하였으며, 시료 2.5μl와 50mM Sodium acetate buffer(pH 5.6)로 희석한 α-glucosidase(0.25U/ml) 25μl를 혼합하여 37℃에서 10분간 1차 반응하고, 1mM pNPG 용액 25μl를 가하여 60℃에서 10분간 2차 반응하였다. 이후, 1M NaOH 25μl를 가하여 반응을 정지시키고, 405nm에서 흡광도를 측정하여 저해율을 계산하였다. On the other hand, α-glucosidase inhibitory activity was evaluated using pNPG (p-nitrophenol glucoside; Sigma Co., USA), and α-glucosidase (0.25 U/ml) diluted with 2.5 μl of sample and 50 mM sodium acetate buffer (pH 5.6). ) 25 μl of the mixture was first reacted at 37° C. for 10 minutes, and 25 μl of a 1 mM pNPG solution was added, followed by a second reaction at 60° C. for 10 minutes. Thereafter, 25 μl of 1M NaOH was added to stop the reaction, and the inhibition rate was calculated by measuring the absorbance at 405 nm.

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[표 4] 추출물의 항당뇨 활성[Table 4] Antidiabetic activity of extract

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그 결과, 표 4에 나타난 바와 같이, 임상에서 사용하는 항당뇨제인 acarbose는 0.5mg/ml 농도에서 β-amylase 및 α-glucosidase를 각각 55.5% 및 69.7% 저해하여 임상 사용의 근거를 확인하였다. 본 발명의 추출물에서도 0.5mg/ml 농도에서 β-amylase 및 α-glucosidase를 각각 12.7% 및 8.9% 저해하여 매우 강력한 전분 분해 저해활성을 나타내었다. 특히, 본 발명의 열수 추출물의 분말을 다시 에탄올로 추출한 경우, 0.5mg/ml 농도에서 β-amylase 및 α-glucosidase를 각각 25.8% 및 15.8% 저해하여 매우 강력한 항당뇨 활성을 나타내었다. 반면, 시판 천연물 복합 추출물 제품들은 동일 농도에서 항당뇨 활성이 전혀 나타나지 않았다. As a result, as shown in Table 4, acarbose, an antidiabetic drug used in clinical practice, inhibited β-amylase and α-glucosidase by 55.5% and 69.7%, respectively, at a concentration of 0.5 mg/ml, confirming the basis for clinical use. The extract of the present invention also inhibited β-amylase and α-glucosidase by 12.7% and 8.9% at a concentration of 0.5mg/ml, respectively, showing very strong starch degradation inhibitory activity. In particular, when the powder of the hot water extract of the present invention was extracted again with ethanol, β-amylase and α-glucosidase were inhibited by 25.8% and 15.8%, respectively, at a concentration of 0.5mg/ml, showing very strong antidiabetic activity. On the other hand, commercially available natural product complex extract products did not show any antidiabetic activity at the same concentration.

실시예 4: 추출물의 인간 적혈구 용혈 활성 평가Example 4: Evaluation of human red blood cell hemolytic activity of extract

본 발명의 추출물의 원료인 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강은 과거부터 식용 및 약용으로 사용되어 온 바, 그 추출물은 별도의 특이한 독성은 없을 것으로 판단된다. 본 발명의 추출물의 잠재적 급성 독성을 평가하기 위해 인간 적혈구 용혈 활성을 평가하였으며, 그 결과는 표 5에 나타내었다. 이때, 용혈 활성은 기존의 보고(정인창, 손호용, 2014년, Korean J. Microbiol. Biotechnol. 42: 285~292)에 준해 평가하였으며, 간단하게는 PBS로 3회 수세한 인간 적혈구 100μl를 96-well microplate에 가하고 다양한 농도의 시료용액 100μl를 가한 다음 37℃에서 30분간 반응시켰으며, 이후 반응액을 10분간 원심분리(1,500rpm)하여 상등액 100μl를 새로운 microtiter plate로 옮긴 후 용혈에 따른 헤모글로빈 유출 정도를 414nm에서 측정하였다. 시료의 용매 대조구로는 DMSO(2%)를 사용하였으며, 적혈구 용혈을 위한 실험 대조구로는 Triton X-100(1mg/ml)를 사용하였다. 용혈 활성은 다음의 수식을 이용하여 계산하였다.Parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger, which are the raw materials of the extract of the present invention, have been used for edible and medicinal purposes since the past, and the extract is judged to have no specific toxicity. In order to evaluate the potential acute toxicity of the extract of the present invention, the hemolytic activity of human red blood cells was evaluated, and the results are shown in Table 5. At this time, the hemolytic activity was evaluated according to the previous report (In-Chang Jung, Ho-Yong Son, 2014, Korean J. Microbiol. Biotechnol. 42: 285~292), and simply 100 μl of human red blood cells washed three times with PBS was measured in 96-well. After adding 100 μl of sample solution of various concentrations to the microplate, the reaction was carried out at 37°C for 30 minutes.After that, the reaction solution was centrifuged for 10 minutes (1,500 rpm), and 100 μl of the supernatant was transferred to a new microtiter plate, and the degree of hemoglobin leakage due to hemolysis was measured. It was measured at 414 nm. DMSO (2%) was used as a solvent control for the sample, and Triton X-100 (1 mg/ml) was used as an experimental control for hemolysis of red blood cells. Hemolytic activity was calculated using the following formula.

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[표 5] 추출물의 인간 적혈구 용혈 활성[Table 5] Hemolytic activity of human red blood cells of the extract

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먼저, 대조구로 사용된 DMSO와 증류수는 적혈구 용혈 활성이 없었으며, Triton X-100은 1mg/ml 농도에서 적혈구를 100% 용혈시킴을 확인하였다. 항진균제 및 항암제로 사용되고 있는 엠포테라신 비의 경우, 0.025mg/ml 농도에서도 85.3%의 강력한 용혈 활성이 나타났다. 한편, 본 발명의 추출물 및 시판 천연물 복합 추출물인 시판 제품 1과 시판 제품 2의 경우, 모두 용혈활성이 나타나지 않았다. 따라서, 본 발명의 추출물은 별도의 급성 독성 유발의 문제점을 나타내지 않으리라 판단된다. First, it was confirmed that DMSO and distilled water used as control cells had no red blood cell hemolytic activity, and Triton X-100 hemolytic 100% red blood cells at a concentration of 1 mg/ml. In the case of the empoteracin ratio, which is used as an antifungal and anticancer agent, a strong hemolytic activity of 85.3% was observed even at a concentration of 0.025mg/ml. On the other hand, in the case of the commercial product 1 and the commercial product 2, which are the extract of the present invention and the commercial natural product complex extract, neither hemolytic activity appeared. Therefore, it is determined that the extract of the present invention will not exhibit a separate problem of causing acute toxicity.

실시예 5: 추출물의 혈장, 산 및 열 안정성 평가 Example 5: Plasma, acid and thermal stability evaluation of extract

상기 실시예 1에서 조제된 본 발명의 추출물을 대상으로 항산화 활성에 대한 혈장 안정성, 열 안정성 및 산 안정성을 확인하였다. 상기 추출물은 100 ℃에서 1시간 열 처리, pH 2(0.01M HCl)에서의 1시간 처리, 혈장에서 1시간 처리시에도 DPPH 음이온 및 ABTS 양이온에 대한 소거능의 심각한 감소가 나타나지 않아 높은 안정성을 나타내었다. 따라서, 본 발명의 추출물은 소화 흡수 과정 및 식품 제조 과정 중 우수한 항산화 활성을 유지할 것으로 예상된다.Plasma stability, thermal stability, and acid stability for antioxidant activity were confirmed for the extract of the present invention prepared in Example 1 above. The extract exhibited high stability because there was no significant decrease in scavenging ability for DPPH anions and ABTS cations even after 1 hour heat treatment at 100 °C, 1 hour treatment at pH 2 (0.01M HCl), and 1 hour treatment in plasma. . Therefore, the extract of the present invention is expected to maintain excellent antioxidant activity during digestion and absorption process and food manufacturing process.

Claims (4)

미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물을 열수로 추출한 후, 에탄올로 추출하여 수득되는 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 당뇨병의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.A pharmaceutical composition for preventing or treating diabetes containing as an active ingredient a mixed extract obtained by extracting natural vegetable products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger with hot water, and then extracted with ethanol . 삭제delete 삭제delete 미나리, 우엉, 호박, 질경이 잎, 팥, 검정콩, 대추 및 생강을 포함하는 식물성 천연물을 열수로 추출한 후, 에탄올로 추출하여 수득되는 혼합 추출물을 포함하는 당뇨병의 예방 또는 개선용 건강 기능 식품.A health functional food for preventing or improving diabetes, comprising a mixed extract obtained by extracting natural vegetable products including parsley, burdock, pumpkin, plantain leaves, red beans, black beans, jujube and ginger with hot water, and then extracted with ethanol.
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