KR101450296B1 - 땅콩에서 레스베라트롤의 함량을 증가시키는 방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 생리활성 효능이 탁월한 건강기능성분으로 최근 각광받고 있는 레스베라트롤을 땅콩에서 증폭시키는 방법을 제공하기 위한 것이다.
이를 위해 본 발명에 따른, 땅콩에서 레스베라트롤의 함량을 증가시키는 방법은, 햇빛이 차단된 암실에서 투수성(透水性) 망배지 판에 땅콩 종자를 파종하고, 시설 내 발아조건을 내부온도 25~30℃, 습도 85% 이상 유지하면서 3~4시간 간격으로 3분 동안 살수를 실시하되, 살수액에 발아 촉진 및 탈피용 미량원소를 투입하여 땅콩을 발아시키는 것을 특징으로 한다.
새싹땅콩, 레스베라트롤, 피토알렉신, 생리활성

Description

땅콩에서 레스베라트롤의 함량을 증가시키는 방법 {A METHOD OF INCREASING RESVERATROL IN PEANUTS}
본 발명은 땅콩에서 레스베라트롤(Resveratrol)의 함량을 증가시키는 방법에 관한 것이다.
레스베라트롤은 식물체가 외부로부터의 물리적 자극이나 곰팡이의 침입에 대항해서 만들어내는 방어물질인 피토알렉신(phytoalexin)의 일종으로서, 포도, 오디, 땅콩 등에 들어있으며, 특히 적포도주에 다량 함유되어 있다고 알려져 있다. 그러나, 최근에는, 땅콩뿌리가 적포도주에 비해 레스베라트롤의 함량이 수십 배에서 수백 배 이상 더 함유되어 있다는 것이 대만국립자이대학 분자생물화학과의 연구진에 의해 밝혀진 바 있다.
레스베라트롤은 항암작용, 항혈전작용, 항산화작용, 심혈관계질환의 발병 억제 및 수명 연장 등의 효과를 나타낸다고 보고되어 있다. 특히 레스베라트롤은 최근 여성호르몬 에스트로겐 유사작용이 있는 피토에스트로겐(phytoestrogen) 화합물로 밝혀지면서 갱년기 이후 여성의 심장병, 골다공증, 치매증 및 여러 갱년기 증상을 억제해주는 생리활성물질로서 새로이 각광을 받고 있다.
본 발명은 이와 같이 생리활성 효능이 탁월한 건강기능성분으로 최근 각광받고 있는 레스베라트롤을 땅콩에서 증폭시키는 방법을 제공하기 위한 것이다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따른, 땅콩에서 레스베라트롤의 함량을 증가시키는 방법은, 발아한 새싹땅콩에 곰팡이균을 가하여 처리하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 바람직한 실시예에 따르면 땅콩이 발아하여 뿌리가 생성되고 배축이 발생한 이후에 백색곰팡이, 누룩곰팡이, 푸른곰팡이를 포함하는 곰팡이균을 살수액에 투입하여 상기 새싹땅콩에 살수하는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 바람직한 실시예에 따르면 상기 새싹땅콩을 파종한 날로부터 7~11일째 수확하여 생체 상태에서 분쇄한 후, 푸른곰팡이, 누룩곰팡이를 포함하는 발효균주를 분쇄한 새싹땅콩에 혼합하여 24~48시간 발효시키는 것을 특징으로 한다.
또한, 본 발명의 다른 바람직한 실시예에 따르면 상기 새싹땅콩을 파종한 날로부터 7~11일째 수확하여 건조시킨 후 분쇄한 다음, 푸른곰팡이, 누룩곰팡이를 포함하는 발효균주를 분쇄한 새싹땅콩에 가하여 발효시키는 것을 특징으로 한다.
본 발명은 땅콩에서 레스베라트롤의 함량을 증가시키는 방법을 제공함으로써, 레스베라트롤을 유효성분으로 하는 기능성 식품 및 의약품용 조성물의 생산을 촉진하는 효과가 있다.
특히, 레스베라트롤의 효과인 항암, 항산화, 심장병 예방, 혈액응고 방지, 수명연장 등의 효과를 기대할 수 있다.
또한, 본 발명은 땅콩의 소비를 촉진시켜 땅콩 재배농가의 수익 증진에 기여하는 효과가 있다.
이하에서 실시예를 통하여 본 발명을 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 구체적으로 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 권리범위를 제한하는 것이 아님은 당업자에게 있어서 명백한 사실이다. 즉, 본 발명의 단순한 변형 내지 변경은 당업자에 의하여 용이하게 실시될 수 있으며, 이러한 변형이나 변경은 모두 본 발명의 영역에 포함되는 것으로 볼 수 있다.
<실시예 1>
a) 땅콩 발아
햇빛이 차단된 암실에서 투수성(透水性) 망배지 판에 땅콩 종자를 파종하고, 시설 내 발아조건을 내부온도 25~30℃, 습도 85% 이상 유지하면서 3~4시간 간격으로 3분 동안 살수를 실시하였다. 이 때 발아에 도움 되는 철, 망간, 아연, 구리, 코발트 및 몰리브덴, 붕소 등의 미량 원소를 넣어 살수하였다. 또한 미량원소만을 넣을 경우 땅콩 껍질이 발아시 탈피되지 않아 뿌리는 생성되더라도 싹으로 성장하 지 않으므로, 이를 해결하기 위해 미네랄과 발아촉진제를 넣어 살수하였다. 발아촉진제로는 지베렐린0.01g/l과 옥신0.01g/l을 혼합하여 사용하였다.
b) 새싹땅콩 건조
재배한지 7~11일째 되는 새싹땅콩을 수확하여 뿌리와 배축을 분리한 다음 각각 건조시켰다. 건조방법에는 열 건조, 열풍 건조, 진공 건조, 동결 건조, 진공 동결 건조 등 제한이 없으나, 본 실시예에서는 동결건조방법을 이용하였다.
c) 새싹땅콩 분쇄
건조된 뿌리부분의 새싹땅콩과 배축부분의 새싹땅콩을 각각 1~3mm이내의 크기로 분쇄하였다.
d) 레스베라트롤 추출
레스베라트롤은 Adrian 등의 방법을 변형하여 추출하였다. 증류주는 원액으로 분석하였다. 뿌리부분의 새싹땅콩과 배축부분의 새싹땅콩을 각각 분석하였다. 분쇄된 시료 1g에 80% 메탄올(v/v) 용액을 10ml 가하여 현탁시킨 후, 초음파 처리기(Branson 5210, Branson Ultrasonics Coporation, Danbury, CT, USA)로 10분간 처리하여 추출하였다. 추출물을 함유한 용액을 10,000×g에서 15분간 원심분리한 후 상등액을 취하고 Sep-pak C18(Waters, Milford. MA, USA)을 이용하여 용출하였 다.
e) 레스베라트롤 함량 분석
상기 용출액을 40℃ 이하에서 감압증발하여 200㎕ 메탄올에 녹여 HPLC에 주입하였다. 표준물질은 Sigma chemical Co.의 resveratrol(St Lousi, MO, USA)를 이용하였다. 시료를 추출하는 동안 트랜스형 레스베라트롤이 시스형으로 변환하는 것을 방지하기 위하여 빛을 차단하여 실시하였다.
<실시예 2>
a) 땅콩 발아
실시예 1과 동일하되, 다만 뿌리가 생성되고 배축이 발생하는 3일째부터 수확할 때까지 새싹땅콩에, 정제된 곰팡이 진균이 물 10,000ℓ에 5g 비율로 혼합된 물을 하루 한차례 3분간 살수하였다. 곰팡이 양이 과하거나 땅콩을 파종하고 나서 뿌리가 생성되고 배축이 발생되기 전부터 곰팡이 혼합액을 살수하면 땅콩 또는 땅콩나물이 부패하게 되어 상품가치가 떨어지게 된다. 본 발명자의 오랜 실험과 경험에 따르면 파종한 날로부터 3일째 되는 날부터 정제된 곰팡이 진균이 물 10,000ℓ에 5g 비율로 혼합된 물을 하루 한차례 3분간 살수하는 것이 부패가 일어나지 않으면서 레스베라트롤의 함량을 가장 높일 수 있으므로 바람직하다. 곰팡이 종류로는 재배시 자연 발생하는 백색곰팡이나 발효균주인 누룩곰팡이, 푸른곰팡이가 적당하다.
b) 새싹땅콩 건조
실시예 1과 동일하다.
c) 새싹땅콩 분쇄
실시예 1과 동일하다.
d) 레스베라트롤 추출
실시예 1과 동일하다.
e) 레스베라트롤 함량 분석
실시예 1과 동일하다.
<실시예3>
a) 땅콩을 발아시키는 단계
실시예 2와 동일하다.
b) 새싹땅콩 분쇄
재배한지 7일 ~ 11일째 되는 새싹땅콩을 수확하여 뿌리와 배축을 분리한 다음 이를 각각 분쇄하였다. 뿌리부분의 새싹땅콩 분쇄물과 배축부분의 새싹땅콩 분 쇄물 각각에 푸른곰팡이, 누룩곰팡이와 같은 발효균주를 혼합하여 24~48시간 발효시켰다. 분쇄한 새싹땅콩과 발효균주의 비율은 질량비로 10 : 0.1 이 적합하며, 새싹땅콩과 발효균주의 혼합시 새싹땅콩의 3/10 질량부에 해당하는 수분을 공급한다.
발효시간을 24~48시간으로 한 이유는 이 정도의 시간을 발효하면 균주가 새싹땅콩의 분말에 상당량 접근이 되어 레스베라트롤의 증식에 관여하고 휴지기 상태가 되어 더 이상 레스베라트롤의 증가에 관여하지 않기 때문이다.
c) 레스베라트롤 추출
실시예 1과 동일하되, 발효시킨 새싹땅콩은 발효과정에서 알코올이 생성되어 이미 알코올을 함유하고 있으므로 추출시 사용되는 혼합용매에서 알코올 함량이 실시예 1에 비해 다소 적은 것이 바람직하다. 본 실험에서는 65% 메탄올(v/v)을 사용하였다.
d) 레스베라트롤 함량 분석
실시예 1과 동일하다.
<실시예 4>
a) 땅콩 발아
실시예 2와 동일하다.
b) 새싹땅콩 건조
실시예 1과 동일하다.
c) 새싹땅콩 분쇄
실시예 1과 동일하다.
d) 발효균주 투입
분쇄된 새싹땅콩 분말에 푸른 곰팡이, 누룩 곰팡이와 같은 발효균주를 섞어 반죽하였다.
분쇄한 새싹땅콩과 발효균주의 비율을 질량비 기준 10 : 0.1로 하였으며, 새싹땅콩과 발효균주의 혼합시 새싹땅콩의 3/10 질량부에 해당하는 수분을 공급하였다.
e) 발효균주가 혼합된 새싹땅콩 분말반죽의 고형화
발효균주가 혼합된 새싹땅콩 분말반죽을 고형틀에서 일정크기로 뭉친 후, 30~50℃, 바람직하기로는 35~38℃의 서늘한 암실에서 건조시키면서 24~48시간 동안 발효시켜, 레스베라트롤의 함량을 증가시켰다.
발효균주는 호기성의 성징이 전혀 없지는 않으나 혐기성이기 때문에 반죽을 뭉쳐서 발효시키는 것이 바람직하다. 이때 반죽의 크기는 1kg~200g, 바람직하기로 는 400g이 적당하다.
f) 고형체의 분쇄
위에서 만들어진 고형체를 재 분쇄하였다.
g) 레스베라트롤 추출
실시예 3과 동일하다.
h) 레스베라트롤 함량 분석
실시예 1과 동일하다.
<실험예>
각 실시예에 따른 레스베라트롤 함량을 분석한 결과는 다음 표와 같다.
뿌리부분 배축부분
실시예 1 43.41㎍/g 6.78㎍/g
실시예 2 54.13㎍/g 7.14㎍/g
실시예 3 73.47㎍/g 6.89㎍/g
실시예 4 80.79㎍/g 7.56㎍/g
참고로, 땅콩의 레스베라트롤 함량은 약 0.02~0.4㎍/g인 것으로 알려져 있다.
상기 결과로부터 땅콩의 레스베라트롤은 땅콩에 비해 새싹땅콩에 다량 함유되어 있고, 새싹땅콩에 곰팡이를 가하여 처리할 경우 그 함량이 더 증가됨을 알 수 있다. 또한 레스베라트롤은 새싹땅콩의 뿌리에 가장 많이 함유되어 있음을 알 수 있다.
특히, 땅콩에서의 레스베라트롤 함량은 재배 중에 가해진 환경인자(곰팡이)에 의해서도 증가하지만, 수확하여 생체 상태로 또는 건조시킨 상태로 분쇄한 후 곰팡이를 가하여 발효시키는 과정을 통해서도 상당량 증가함을 알 수 있다.

Claims (4)

  1. 삭제
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  3. 땅콩종자를 파종한 날로부터 뿌리가 생성되고 배축이 발생하는 3일째부터, 정제된 곰팡이 진균이 물 10,000ℓ에 5g 비율로 혼합된 물을 하루 한차례 3분간 살수하여 재배한 새싹땅콩을, 파종한 날로부터 7~11일째 수확하여 생체 상태에서 분쇄한 후, 푸른곰팡이, 누룩곰팡이를 포함하는 발효균주를 분쇄한 새싹땅콩에 가하여 24~48시간 발효시키는 것을 특징으로 하는, 땅콩에서 레스베라트롤의 함량을 증가시키는 방법.
  4. 땅콩종자를 파종한 날로부터 뿌리가 생성되고 배축이 발생하는 3일째부터, 정제된 곰팡이 진균이 물 10,000ℓ에 5g 비율로 혼합된 물을 하루 한차례 3분간 살수하여 재배한 새싹땅콩을, 파종한 날로부터 7~11일째 수확하여 건조시킨 후 분쇄한 다음, 푸른곰팡이, 누룩곰팡이를 포함하는 발효균주를 분쇄한 새싹땅콩에 가하여 24~48시간 발효시키는 것을 특징으로 하는, 땅콩에서 레스베라트롤의 함량을 증가시키는 방법.
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