KR101239711B1 - Manufacturing process of lentinus edodes culture - Google Patents

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KR101239711B1 KR1020120001855A KR20120001855A KR101239711B1 KR 101239711 B1 KR101239711 B1 KR 101239711B1 KR 1020120001855 A KR1020120001855 A KR 1020120001855A KR 20120001855 A KR20120001855 A KR 20120001855A KR 101239711 B1 KR101239711 B1 KR 101239711B1
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Abstract

PURPOSE: A manufacturing method of Lentinus edodes culture material is provided to bottle a solid medium in a wide-mouth bottle, inject liquid fungus, culture the fungus, take the solid medium out of the bottle, put the medium into a bag, and culture the medium. CONSTITUTION: A manufacturing method of Lentinus edodes culture material comprises the following steps: (A) Manufacturing a solid fungus by mixing 100 wt% of sawdust and 10-40 wt% of rice bran and adding 150-250 wt% of water; (B) putting the solid fungus in a wide-mouth bottle, sterilizing and cooling the same at 100-135 deg.C. for 2-3 hours in a sterilizing room; (C) injecting 5-15 wt% of Lentinus edodes culture medium into the solid fungus based on 100 wt% of sawdust, and culturing the medium at 15-25 deg.C. for 40-55 days under a dark condition; and (D) taking the cultured material out of the wide-mouth bottle, putting the cultured material into a porous bag, and bottle-culturing the cultured material at 15-25 deg.C. for 45-60 days. The Lentinus edodes culture medium comprises: 100 wt% of water, 2-5 wt% of sugar, 0.2-0.5 wt% of yeast extract, 0.03-0.1 wt% of KH2PO4, 0.03-0.1 wt% of MgSO4.7H2O, and 0.05-0.2 wt% of KNO3. 10-20 wt% of wheat bran per 100 wt% of sawdust is additionally added to the solid fungus of step (A). 5-10 wt% of cotton seed hull per 100 wt% of sawdust is additionally added to the solid fungus of step (A). The humidity for putting the culture material in the porous bag in step (D) is 1-60%.

Description

표고버섯 배양물 제조방법 {Manufacturing Process of Lentinus edodes Culture}Method of manufacturing shiitake mushroom culture {Manufacturing Process of Lentinus edodes Culture}

본 발명은 표고버섯 (Lentinus edodes) 배양물 제조방법에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 고체배지를 광구병에 입병하고 액체종균을 접종 및 배양한 후 상기 고체배지를 탈병하고 다시 봉지에 입봉하여 배양하는 것을 특징으로 하는 표고버섯 배양물 제조방법에 관한 것이다.The present invention mushroom shiitake ( Lentinus edodes ) relates to a method for producing a culture. Specifically, the present invention relates to a method for producing shiitake mushroom culture, characterized in that the solid medium is bottled into a photocatalyst, inoculated and cultured with a liquid spawn, and then the bottle is incubated and cultured again in a bag.

표고버섯은 담자균류 주름버섯목 느타리과의 버섯으로, 봄과 가을 2 회에 걸쳐 참나무류·밤나무·서어나무 등 활엽수의 마른 나무에 발생한다. 버섯갓 지름 4 내지 10 cm이고 처음에 반구 모양이지만 점차 펴져서 편평해진다. 갓 표면은 다갈색이고 흑갈색의 가는 솜털처럼 생긴 비늘조각으로 덮여 있으며 때로는 터져서 흰 살이 보이기도 한다. 원목에 의한 인공재배가 이루어지며 한국·일본·중국·타이완 등지에 분포한다. Shiitake mushroom is a fungus of the genus Pleurotus eryngii Ottoaceae, which occurs in dry trees of broad-leaved trees such as oaks, chestnuts, and roe trees in spring and autumn. Mushroom shade 4-10 cm in diameter, initially hemispherical, but gradually flattened. The surface of the shade is dark brown and covered with dark brown thin fluffy scaly pieces, sometimes bursting to show white flesh. Artificial cultivation is performed by wood and is distributed in Korea, Japan, China and Taiwan.

표고버섯의 효능에 대하여는 중국에서 예로부터 많이 연구되었는데, 표고버섯에는 에리다데민이라는 물질이 있어서 이것이 핏속의 콜레스테롤치를 내린다고 한다. 또, 혈압을 낮추는 작용도 있기 때문에 고혈압이나 동맥경화의 예방에 알맞다. 에리다데민은 마른버섯을 물에 우려낼 때 녹아 나오므로 즙액은 버리지 않고 이용하는 것이 좋다. 또한, 비타민 B1과 B2도 풍부하다. 표고버섯의 감칠맛은 구아닐산으로 핵산계 조미료의 성분이다. 향기는 렌치오닌에 의한다. 이 밖에 표고버섯에는 비타민 D의 효과를 가지는 에르고스테롤이 많이 함유되어 있어 체내에서 자외선을 받으면 비타민 D로 변한다. 한편, 식물체에는 존재하지 않는 것으로 알려져 있던 비타민 B12가 표고 속에 많다는 것도 밝혀졌다. 약 600년 전 중국 명나라 때 오서(吳瑞)라는 사람은 표고의 효능을 “풍치혈파기익(風治血破氣益)”이라 하였다. 이것을 현대적으로 풀어보면, 표고버섯의 포자에는 요즘 병으로서 독감이나 암에 속하는 풍을 다스리는 성분이 있다는 것이다. 그리고 여러 채소요리에 표고버섯을 넣으면 고기 이상으로 맛이 좋아진다. 이것은 가장 강력한 감칠맛 성분인 구아닐산을 함유하고 있기 때문이다.Shiitake mushrooms have been studied for a long time in China. Shiitake mushrooms have a substance called eridadamine, which lowers cholesterol levels in blood. In addition, the blood pressure lowering action is also suitable for the prevention of high blood pressure and arteriosclerosis. Eridademin dissolves dried mushrooms in water, so use the juice without throwing it away. It is also rich in vitamins B1 and B2. Shiitake mushroom's rich flavor is guanylic acid and is a component of nucleic acid seasoning. The fragrance is based on wrenches. In addition, shiitake mushrooms contain a lot of ergosterol, which has the effect of vitamin D, and when the body receives ultraviolet rays, it turns into vitamin D. On the other hand, it was also found that vitamin B12, which was not known to exist in plants, is present in the altitude. About 600 years ago, during the Ming Dynasty, a man named Wu Xi called the effect of shiitake feng shui. To solve this modernly, the spores of shiitake mushrooms have an ingredient that controls the flu and cancer winds these days. And when you put shiitake mushrooms in various vegetable dishes, it tastes better than meat. This is because it contains guanylic acid, which is the strongest rich ingredient.

한편, 버섯의 배양시 액체종균을 사용하면 고체종균에 비해 고체배지에 골고루 스며들어 넓은 영역의 배지를 활용할 수 있으므로 생장효율이 높다고 알려져 있다. 그러나, 표고버섯 재배시 액체종균을 접종하면 고체배지 전체에 균사가 완전히 퍼지기 전에 다른 균에 의해 오염되는 비율이 높고, 생산되는 표고버섯의 양도 훨씬 적은 문제점이 있다. 이 때문에 표고버섯의 경우에는 생산량이 절반에도 못 미치고 적응기간도 훨씬 긴 고체종균이 아직까지 사용되고 있는 실정이다.On the other hand, the use of liquid spawn in the cultivation of mushrooms is known to have high growth efficiency because the medium can be utilized evenly in the solid medium compared to the solid spawn. However, inoculating liquid seed when cultivating shiitake mushrooms has a problem of high contamination rate by other bacteria before the mycelia are completely spread throughout the solid medium, and the amount of shiitake mushrooms produced is much less. For this reason, in the case of shiitake mushrooms, less than half the production and even longer adaptation period, solid spawn is still used.

KR 2011-0037447 농업회사법인 하나바이오텍(주) 2011.04.13.KR 2011-0037447 Hana Biotech Co., Ltd., agricultural company 2011.04.13. KR 1988-0005854 김원홍 1988.07.21).KR 1988-0005854 Kim Won Hong 1988.07.21).

본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하기 위하여 안출된 것으로서, 고체배지를 광구병에 입병하고 액체종균을 접종 및 배양한 후 상기 고체배지를 탈병하고 다시 봉지에 입봉하여 배양하는 것을 특징으로 하는 표고버섯 배양물 제조방법을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.The present invention has been made in order to solve the problems described above, after entering the solid medium into the bulb, inoculated and incubated with the liquid spawn, the disease is characterized by culturing by desalting and encapsulating the solid medium again. It is an object to provide a method for producing a culture.

본 발명의 표고버섯 배양물 제조방법은 상술한 바와 같은 목적을 달성하기 위하여, Shiitake mushroom culture method of the present invention to achieve the object as described above,

(A) 톱밥 100 중량부 및 미강 10 내지 40 중량부를 혼합하고, 물 150 내지 250 중량부를 첨가하여 고체배지를 제조하는 단계, (A) mixing 100 parts by weight of sawdust and 10 to 40 parts by weight of rice bran, and adding 150 to 250 parts by weight of water to prepare a solid medium,

(B) 상기 고체배지를 광구병에 넣고 100 내지 135 ℃에서 2 내지 3 시간 동안 살균하고 멸균실에서 냉각시키는 단계, (B) sterilizing the solid medium in a photosphere bottle for 2 to 3 hours at 100 to 135 ℃ and cooling in a sterilization chamber,

(C) 멸균실에서 상기 톱밥 100 중량부를 기준으로 버섯 배양액 5 내지 15 중량부를 상기 고체배지에 접종하고 15 내지 25 ℃에서 40 내지 55 일 동안 암배양하는 단계, 및 (C) inoculating 5 to 15 parts by weight of the mushroom culture based on 100 parts by weight of the sawdust in a sterilization chamber to the solid medium and cancer culture at 15 to 25 ℃ for 40 to 55 days, and

(D) 상기 암배양된 배양물을 상기 광구병에서 꺼낸 후 다공성 봉지에 다시 넣고 15 내지 25 ℃에서 45 내지 60 일 동안 명배양하는 단계(D) taking the cultured cultured cultures from the photocatalysts and putting them back into a porous bag for bright culture at 15 to 25 ° C. for 45 to 60 days

를 포함하는 것을 특징으로 한다.Characterized in that it comprises a.

또한, 본 발명의 표고버섯 배양물 제조방법은 상기 단계 (A)의 고체배지에 톱밥 100 중량부 당 밀기울 10 내지 20 중량부를 추가로 포함할 수 있다.In addition, the shiitake mushroom culture method of the present invention may further comprise 10 to 20 parts by weight of bran per 100 parts by weight of sawdust in the solid medium of the step (A).

또한, 본 발명의 표고버섯 배양물 제조방법은 상기 단계 (A)의 고체배지에 톱밥 100 중량부 당 면실피 (cotton seed hull) 5 내지 10 중량부를 추가로 포함할 수 있다.In addition, the shiitake mushroom culture method of the present invention may further comprise 5 to 10 parts by weight of cotton seed hull per 100 parts by weight of sawdust in the solid medium of the step (A).

또한, 상기 단계 (C)의 버섯 배양액은 In addition, the mushroom culture of step (C)

물 100 중량부, 100 parts by weight of water,

설탕 2 내지 5 중량부, 2 to 5 parts by weight of sugar,

대두박 또는 효모추출물 0.2 내지 0.5 중량부, 0.2 to 0.5 parts by weight of soybean meal or yeast extract,

KH2PO4 0.03 내지 0.1 중량부, 0.03 to 0.1 parts by weight of KH 2 PO 4 ,

MgSO4·7H2O 0.03 내지 0.1 중량부, 및 0.03 to 0.1 part by weight of MgSO 4 7H 2 O, and

KNO3 0.05 내지 0.2 중량부KNO 3 0.05 to 0.2 part by weight

를 포함한 액상배지에 표고버섯 종균을 배양한 것이 바람직하다.It is preferable to culture the shiitake mushroom spawn in a liquid medium containing.

또한, 상기 단계 (C)의 버섯 배양액은 상기 고체배지에 접종하기 전에 종균 검사를 거치는 것이 바람직하다.In addition, the mushroom culture solution of the step (C) is preferably subjected to a seed test before inoculating the solid medium.

또한, 본 발명의 표고버섯 배양물 제조방법은 상기 단계 (D)에서 암배양된 배양물을 다공성 봉지에 다시 넣을 때의 습도가 1 내지 60 %인 것이 바람직하다.In addition, the shiitake mushroom culture method of the present invention preferably has a humidity of 1 to 60% when the cultured cultured in the step (D) back to the porous bag.

또한, 본 발명의 표고버섯 배양물 제조방법은 상기 단계 (D)에서 암배양된 배양물을 다공성 봉지에 다시 넣을 때의 온도가 10 내지 20 ℃인 것이 바람직하다.In addition, the shiitake mushroom culture method of the present invention preferably has a temperature of 10 to 20 ℃ when the culture cultured back in the porous bag in step (D).

또한, 상기 단계 (D)의 명배양은 그 조도가 150 내지 400 Lux인 것이 바람직하다.In addition, the light culture of the step (D) is preferably roughness of 150 to 400 Lux.

또한, 상기 단계 (D)의 명배양시 습도는 50 내지 70 %인 것이 바람직하다.In addition, the humidity in the bright culture of the step (D) is preferably 50 to 70%.

또한, 상기 톱밥은 참나무 톱밥인 것이 바람직하다.In addition, the sawdust is preferably oak sawdust.

본 발명의 표고버섯 배양물 제조방법은 종래 고체배지를 바로 봉지에 넣는 입봉단계 전에 광구병에 넣는 입병단계를 포함함으로써 살균이 완벽하게 진행될 수 있는 장점이 있다. 이는 입병 및 입봉에 소요되는 작업시간을 단축시키는 효과는 물론, 잡균에 의한 오염 발생율을 현저히 낮추는 효과가 있다. 이러한 오염 저하효과는 완벽한 살균에 기한 것도 있지만 광구병 안에서 이미 표고버섯 균사가 충분히 생장하였으므로, 고체배지 배양 초기에 표고버섯이 우점종을 형성하여 잡균의 생장을 충분히 억제할 수 있기 때문이다.Shiitake mushroom culture method of the present invention has the advantage that the sterilization can be carried out perfectly by including the step of placing the mouthpiece in the mouth before the step of placing the conventional solid medium directly into the bag. This has the effect of shortening the working time required for the admission and sealing, as well as the effect of significantly lowering the contamination rate by various bacteria. This pollution reduction effect is limited to perfect sterilization, but because the shiitake mushroom mycelium has already grown enough in the mad cow disease, shiitake mushrooms can form a dominant species at the beginning of solid medium culture, which can sufficiently suppress the growth of various bacteria.

또한 본 발명은 이처럼 고체배지 내에 균사가 이미 충분히 생장된 상태로 제공되므로 본 발명의 고체배지를 구입하여 표고버섯을 배양하고자 하는 농가 입장에서 총 배양일수가 단축되는 효과가 있다. 구체적으로, 종래 고체종균을 접종하여 배양하는 경우에는 고체배지 전체에 균사가 완전히 퍼지는 데 3 내지 4 개월이 소요되어 이 기간 중에는 표고버섯을 수확할 수 없었으나, 본 발명처럼 액체종균을 접종하는 경우 고체배지 전체에 균사가 완전히 퍼지는 데 1 내지 2 주만 소요되어 생산성이 월등히 향상된다.In addition, the present invention is provided with a mycelium already grown enough in the solid medium as described above has the effect of shortening the total culture days from the standpoint of farmers to purchase the solid medium of the present invention to cultivate shiitake mushrooms. Specifically, when inoculating the conventional solid spawn takes 3 to 4 months to completely spread the mycelium throughout the solid medium, shiitake mushrooms could not be harvested during this period, but inoculated with liquid spawn as in the present invention. It takes only one to two weeks for the mycelia to spread throughout the solid medium, which greatly improves productivity.

본 발명은 또한 고체배지 하나 당 최소 11 내지 최대 17 회까지 상업생산이 가능하여, 종래 고체종균 접종방식의 최대 6 회 상업생산에 비해 그 효율이 현저히 상승하였다. 이는 앞서 설명한 완벽한 살균, 표고버섯의 우점종 지위 확보, 액체종균의 효율성 외에도 일차 입병한 고체배지를 탈병하고 뒤섞어 줌으로써 고체배지 내부에 충분한 산소를 공급할 수 있고, 이러한 산소 공급으로 인해 표고버섯의 생장이 활발해지기 때문인 것으로 판단된다.The present invention is also capable of commercial production of at least 11 to 17 times per solid medium, the efficiency is significantly increased compared to the commercial production of up to six times the conventional solid seed inoculation method. In addition to the perfect sterilization, securing the predominant species status of shiitake mushrooms, and the efficiency of liquid spawn, it is possible to supply enough oxygen to the inside of the solid medium by de-bleaching and mixing the firstly introduced solid medium. It seems to be because of losing.

도 1은 고체배지 재료를 혼합하는 단계를 촬영한 사진이다.
도 2는 고체배지를 광구병에 넣는 입병단계를 촬영한 사진이다.
도 3은 광구병을 살균 및 냉각하는 단계를 촬영한 사진이다.
도 4는 광구병에 액체종균을 접종하는 단계를 촬영한 사진이다.
도 5는 광구병에서 배양하는 단계를 촬영한 사진이다.
도 6은 광구병으로부터 고체배지를 꺼내는 탈병단계를 촬영한 사진이다.
도 7은 고체배지를 봉지에 넣는 입봉단계를 촬영한 사진이다.
도 8은 봉지에서 배양하는 단계를 촬영한 사진이다.
도 9는 배양이 완료되어 분양을 기다리는 배지를 촬영한 사진이다.
1 is a photograph taken the step of mixing the solid medium material.
Figure 2 is a photograph of the admission step of placing a solid medium in the photosphere bottle.
Figure 3 is a photograph of the step of sterilizing and cooling the bulb bottle.
Figure 4 is a photograph of the step of inoculating liquid seed spawns.
Figure 5 is a photograph of the step of culturing in a mad mouth disease.
Figure 6 is a photograph taken of the demineralization step to take out the solid medium from the bulb mouth.
Figure 7 is a photograph of the encapsulation step of placing a solid medium in the bag.
8 is a photograph of the step of culturing in a bag.
Figure 9 is a photograph of the culture medium is completed and waiting for pre-sale.

이하, 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 또한, 하기의 설명에서는 구체적인 구성요소 등과 같은 많은 특정사항들이 설명되어 있는데, 이는 본 발명의 보다 전반적인 이해를 돕기 위해서 제공된 것일 뿐 이러한 특정 사항들 없이도 본 발명이 실시될 수 있음은 이 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게는 자명하다 할 것이다. 그리고, 본 발명을 설명함에 있어서, 관련된 공지 기능 혹은 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우 그 상세한 설명을 생략한다.Hereinafter, preferred embodiments of the present invention will be described in detail. In the following description, numerous specific details, such as specific elements, are set forth in order to provide a thorough understanding of the present invention, and it is to be understood that the present invention may be practiced without these specific details, It will be obvious to those who have knowledge of. In the following description of the present invention, a detailed description of known functions and configurations incorporated herein will be omitted when it may make the subject matter of the present invention rather unclear.

본 발명의 표고버섯 배양물 제조방법은 먼저 톱밥 100 중량부 및 미강 10 내지 40 중량부를 혼합하고, 물 150 내지 250 중량부를 첨가하여 고체배지를 제조하는 단계로부터 시작된다. 여기서, 상기 톱밥은 특히 참나무 톱밥인 것이 표고버섯 재배에 바람직하다. 그리고, 상기 고체배지에 톱밥 100 중량부 당 밀기울 10 내지 20 중량부를 추가로 포함하는 것이 더욱 바람직하고, 이에 더하여 면실피 (cotton seed hull) 5 내지 10 중량부를 추가로 포함할 수도 있다.The method of producing shiitake mushroom culture of the present invention first starts by mixing 100 parts by weight of sawdust and 10 to 40 parts by weight of rice bran, and adding 150 to 250 parts by weight of water to prepare a solid medium. Here, the sawdust is particularly preferably oak mushroom cultivation oak sawdust. The solid medium may further include 10 to 20 parts by weight of bran per 100 parts by weight of sawdust, and may further include 5 to 10 parts by weight of cotton seed hull.

이렇게 제조된 고체배지는 표고버섯 종규을 접종하기 전에 먼저 살균단계를 거쳐야 하는데, 본 발명에서는 상기 고체배지를 광구병에 넣고 100 내지 135 ℃에서 2 내지 3 시간 동안 살균함으로써 살균효과를 최대한으로 높였다. 이렇게 살균된 고체배지는 멸균실에서 상온으로 냉각시켰다.The solid medium prepared in this way must first undergo a sterilization step before inoculating shiitake mushroom seed. In the present invention, the solid medium is placed in a photosphere bottle and sterilized at 100 to 135 ° C. for 2 to 3 hours to maximize the sterilization effect. This sterilized solid medium was cooled to room temperature in the sterilization chamber.

이와 별도로 본 발명의 고체배지에는 종래 고체종균을 접종하는 대신 액체종균을 접종하는 것을 특징으로 한다. 일반적으로 액체종균은 고체종균에 비해 고체배지에 골고루 스며들어 표고버섯이 넓은 영역의 배지를 활용할 수 있으므로 생장효율이 높다고 알려져 있다. 그러나, 표고버섯 재배시 액체종균을 접종하면 고체배지 전체에 균사가 완전히 퍼지기 전에 다른 균에 의해 오염되는 비율이 높고, 생산되는 표고버섯의 양도 훨씬 적은 것으로 나타났다. 이는 액체배지 중의 영양성분으로 인해 고체배지에서 다른 균이 먼저 생장하여, 표고버섯이 우점종 지위를 상실하고 그 결과 다른 균과 경쟁 하에 생장함에 따라 효율이 떨어지게 된 것이다.Separately, the solid medium of the present invention is characterized by inoculating liquid seed instead of inoculating solid seed. In general, the liquid spawn is known to have high growth efficiency because the spawn mushroom can be used in a wider area than the solid spawn because the shiitake mushroom can utilize a medium in a wide area. However, the inoculation of liquid spawn during shiitake mushroom cultivation showed that the rate of contamination by other bacteria was high, and the amount of shiitake mushrooms produced was much lower before the mycelia were completely spread throughout the solid medium. This is due to the nutrients in the liquid medium, other bacteria grow in the solid medium first, the shiitake mushroom loses the status of dominant species, and as a result, the efficiency is reduced as it grows in competition with other bacteria.

그러나, 본 발명은 고체배지는 봉지에 담기기 전에 먼저 광구병에 담겨 완벽한 살균과정을 거침으로써 잡균의 오염 가능성을 현저히 낮추고, 그 결과 표고버섯만 단독으로 생장하는 것이 가능해졌다.However, the present invention significantly lowers the possibility of contamination of various bacteria by solid sterilization process by first placing in a bottle, before the solid medium is put into a bag, as a result it is possible to grow only shiitake mushrooms alone.

구체적으로, 본 발명에서 액체종균의 제조방법은 먼저 원균의 수득단계로부터 시작된다. 페트리디쉬에 PDA (Potato dextrose agar)를 담아 평판배지를 제조한 후, 갓의 직경이 2 내지 7 cm인 표고버섯을 평균 모서리길이 1 내지 7 mm가 되도록 자르고, 그 절편을 무균상태에서 상기 평판배지에 이식한다. 조직이 이식된 페트리디쉬를 20 내지 25 ℃에서 10 내지 15 일 동안 배양한 후, 생장된 표고버섯 균사를 평판배지와 함께 평균 변길이 5 내지 10 mm가 되도록 잘라, 새로운 PDA 평판배지에 옮겨 배양하고, 이 과정을 1 내지 2 회 더 반복하여, 표고버섯 원균을 수득한다.Specifically, the method of producing a liquid seed in the present invention first starts from the step of obtaining the progeny. After preparing a plate medium containing PDA (Potato dextrose agar) in a petri dish, cut shiitake mushrooms having a diameter of 2 to 7 cm to have an average corner length of 1 to 7 mm, and the sections were aseptically plated. Transplant to. After culturing the Petri dish transplanted with tissue for 10 to 15 days at 20 to 25 ℃, cut the grown shiitake mycelium with a plate medium so that the average length is 5 to 10 mm, transferred to a new PDA plate medium and cultured , Repeat this process 1 to 2 more times to obtain shiitake mushroom bacteria.

그리고, 물 100 중량부에 설탕 2 내지 5 중량부, 대두박 또는 효모추출물 0.2 내지 0.5 중량부, KH2PO4 0.03 내지 0.1 중량부, MgSO4·7H2O 0.03 내지 0.1 중량부, 및 KNO3 0.05 내지 0.2 중량부를 혼합하여 액체배지를 제조하고 이를 살균한 후, 무균상태에서 냉각한 다음 플라스크 또는 링거병에 담고, 상기 평판배지와 함께 수득한 평균 변길이 5 내지 10 mm의 원균 절편 2 내지 5 개를 접종하고, 20 내지 25 ℃의 진탕기에서 20 내지 25 일 동안 배양한다. 이를 다시 스케일업하여 탱크에서 액체종균을 대량 배양한다. 이러한 탱크 배양시 공기주입을 충분히 하기 위해 5 내지 30 % 가압하는 것이 바람직하다.2 to 5 parts by weight of sugar, 0.2 to 0.5 parts by weight of soybean meal or yeast extract, 0.03 to 0.1 parts by weight of KH 2 PO 4, 0.03 to 0.1 parts by weight of MgSO 4 .7H 2 O, and KNO 3 0.05 to 100 parts by weight of water. To 0.2 part by weight to prepare a liquid medium and sterilize it, and then cooled in aseptic state and put in a flask or Ringer's bottle, 2 to 5 pieces of prokaryotic fragment with an average length of 5 to 10 mm obtained with the plate medium Inoculated and incubated for 20 to 25 days in a shaker at 20 to 25 ℃. Scale it up again and incubate the liquid spawn in the tank. In this tank culture, it is preferable to pressurize 5 to 30% to sufficiently inflate air.

탱크 배양 18 내지 23 일 경에 현미경으로 배양액을 검사하여 세균이 존재하는지, 종균의 클램프 상태는 적당한지 검사하는 것이 바람직하다.It is preferable to inspect the culture solution under a microscope at about 18 to 23 days of tank culture to see if bacteria are present and whether the clamp state of the seed is appropriate.

이렇게 제조된 액체종균, 즉 버섯 배양액을 멸균실에서 상기 톱밥 100 중량부를 기준으로 5 내지 15 중량부 만큼 상기 광구병 내의 고체배지에 접종하고 15 내지 25 ℃에서 40 내지 55 일 동안 암배양한다. 이러한 암배양시 배양이 진행됨에 따라 배양실 내 이산화탄소 농도가 높아지는데 1000 내지 3000 ppm을 초과하지 않도록 관리하는 것이 바람직하다.The liquid spawn prepared in this way, that is, the mushroom culture solution is inoculated into the solid medium in the bulb mouth bottle by 5 to 15 parts by weight based on 100 parts by weight of the sawdust in a sterilization chamber and cultured at 15 to 25 ° C. for 40 to 55 days. As the culture proceeds during such cancer culture, it is preferable to manage the carbon dioxide concentration in the culture chamber so that it does not exceed 1000 to 3000 ppm.

이러한 암배양된 배양물, 즉 고체배지와 표고버섯 균사 혼합물을 상기 광구병에서 꺼내고 뒤섞은 후 다공성 봉지에 다시 넣고 15 내지 25 ℃에서 45 내지 60 일 동안 명배양한다. 이렇게 고체배지를 한번 뒤섞어 줌으로써 배지 중에 산소가 충분히 공급되고 이를 통해 이후 명배양에서 산소로 인한 제한 없이 균체가 활발하게 생장할 수 있게 된다.These cultured cultures, that is, the solid medium and shiitake mycelium mixture is removed from the photosphere bottle, mixed and put back into the porous bag and incubated for 45 to 60 days at 15 to 25 ℃. By mixing the solid medium once, sufficient oxygen is supplied to the medium, and through this, cells can be actively grown without restriction due to oxygen in bright culture.

여기서 암배양된 배양물을 다공성 봉지에 다시 넣을 때의 습도가 1 내지 60 %인 것이 바람직한데, 습도가 60 %를 초과하면 잡균에 의한 오염이 발생할 가능성이 높아진다. 그리고, 온도 역시 10 내지 20 ℃인 것이 래그타임 (lag time) 없이 표고버섯을 생장시키는 데 바람직하다. 또한, 상기 명배양의 조도는 150 내지 400 Lux인 것이 바람직하고, 명배양시 습도는 50 내지 70 %인 것이 바람직하다. 아울러, 암배양과 마찬가지로 배양이 진행됨에 따라 배양실 내 이산화탄소 농도가 높아지는데 1000 내지 3000 ppm을 초과하지 않도록 관리하는 것이 바람직하다.
In this case, when the cultured cultured cancer is returned to the porous bag, the humidity is preferably 1 to 60%. If the humidity exceeds 60%, the possibility of contamination by various bacteria is increased. And, the temperature is also 10 to 20 ℃ is preferable for growing shiitake mushrooms without lag time (lag time). In addition, the light intensity of the light culture is preferably 150 to 400 Lux, the humidity of the light culture is preferably 50 to 70%. In addition, it is preferable to manage not to exceed 1000 to 3000 ppm when the carbon dioxide concentration in the culture chamber increases as the culture proceeds as in the case of cancer culture.

이하, 본 발명의 실시예에 대하여 설명한다.Hereinafter, embodiments of the present invention will be described.

실시예Example

실시예Example - 조직 분리 -Tissue separation

페트리디쉬에 PDA (Potato dextrose agar)를 담아 평판배지를 제조한 후, 갓의 직경이 5 cm인 표고버섯을 평균 모서리길이 5 mm가 되도록 자르고, 그 절편을 무균상태에서 상기 평판배지에 이식했다. 조직이 이식된 페트리디쉬를 25 ℃에서 12 일 동안 배양한 후, 생장된 표고버섯 균사를 평판배지와 함께 평균 변길이 7 mm가 되도록 잘라, 새로운 PDA 평판배지에 옮겨 배양하고, 이 과정을 1 회 더 반복하여, 표고버섯 원균을 수득하였다.After preparing a plate medium containing PDA (Potato dextrose agar) in Petri dishes, shiitake mushrooms having a diameter of 5 cm were cut to have an average edge length of 5 mm, and the sections were transplanted to the plate medium under aseptic conditions. After incubating the petri dish with tissues for 12 days at 25 ° C, cut the grown shiitake mushroom mycelium along with the plate medium to an average length of 7 mm, transfer it to a new PDA plate medium, and incubate this process once. It was repeated further to obtain shiitake progeny.

실시예Example - 액상 배양 (1) -Liquid culture (1)

1 l 용기에 증류수 500 ml, 설탕 17 g, 대두박 2 g, KH2PO4 0.4 g, MgSO4·7H2O 0.4 g, KNO3 0.6 g을 첨가, 혼합하여 액상 배지를 제조하고, 이를 오토클레이브(120 ℃)에서 1 시간 동안 살균한 후, 무균상태에서 냉각 후 상기 평판배지와 함께 수득한 평균 변길이 7 mm의 원균 절편 4 개를 접종하고, 25 ℃의 진탕기에서 25 일 동안 배양하였다.500 ml of distilled water, 17 g of sugar, 2 g of soybean meal, 0.4 g of KH 2 PO 4, 0.4 g of MgSO 4 · 7H 2 O, 0.6 g of KNO 3 were added and mixed in a 1 l container to prepare a liquid medium, which was then autoclaved. After sterilization at (120 ° C.) for 1 hour, 4 cells of 7 mm in average length obtained with the plate medium were inoculated after cooling under aseptic conditions, and incubated in a shaker at 25 ° C. for 25 days.

실시예Example - 액상 배양 (2) -Liquid culture (2)

1000 l 탱크에 증류수 500 l, 설탕 17 kg, 대두박 2 kg, KH2PO4 400 g, MgSO4·7H2O 400 g, KNO3 600 g을 첨가, 혼합하여 액상 배지를 제조하고, 이를 120 ℃에서 2 시간 동안 살균한 후, 무균상태에서 냉각 후 상기 수득한 표고버섯 배양액 500 ml를 접종하고, 25 ℃에서 25 일 동안 배양하였다.500 l of distilled water, 17 kg of sugar, 2 kg of soybean meal, 400 g of KH 2 PO 4, 400 g of MgSO 4 · 7H 2 O, 600 g of KNO 3 were added and mixed in a 1000 l tank to prepare a liquid medium, which was 120 ° C. After sterilization for 2 hours at, inoculated with 500 ml of the shiitake mushroom culture obtained after cooling in a sterile state, and incubated for 25 days at 25 ℃.

실시예Example -  - 암배양Cancer culture

참나무 톱밥 10 kg, 미강 1.5 kg, 밀기울 1.5 kg 비율로 배합하고, 상기 배합물에 물 20 kg을 첨가한 후, 광구병에 700 g 씩 넣은 다음, 120 ℃에서 100 분 동안 살균한 후 냉각시켜, 고체배지를 제조하였다. 멸균실에서 상기 광구병 하나의 고체배지에 표고버섯 배양액 20 cc를 접종하고, 20 ℃에서 45 일 동안 암배양시켰다.10 kg of oak sawdust, 1.5 kg of rice bran, 1.5 kg of bran, and 20 kg of water were added to the blend, and then 700 g each of the bulbs, sterilized at 120 ℃ for 100 minutes and cooled, Medium was prepared. In a sterile chamber, 20 cc of shiitake mushroom culture was inoculated into one solid medium of the photosphere bottle, and cancer-cultured at 20 ° C. for 45 days.

실시예Example -  - 명배양Culture

표고버섯 균사와 고체배지가 혼합된 상기 표고버섯 배양물을 상기 광구병으로부터 꺼낸 후 뒤섞은 다음, 이를 다시 통공이 70 개 형성된 봉지에 넣고, 20 ℃에서 50 일 동안 명배양시켰다.The shiitake mushroom culture, which was mixed with shiitake mycelium and a solid medium, was taken out of the bulb, and then mixed. Then, the shiitake mushroom culture was placed in a bag formed with 70 through holes, and brightly incubated at 20 ° C. for 50 days.

이렇게 배양한 본 발명의 표고버섯 배양물은 고체배지 전체에 균사가 완전히 퍼지는 데 1 내지 2 주만이 소요되며, 하나의 고체배지에서 최소 11 회 내지 최대 17 회까지 상업배양이 가능함을 확인하였다.The shiitake mushroom culture of the present invention incubated in this way takes only 1 to 2 weeks to completely spread the mycelium throughout the solid medium, it was confirmed that commercial culture is possible at least 11 to 17 times in one solid medium.

비교예Comparative example 1:  One: 고체종균Solid spawn 배양 culture

페트리디쉬에 PDA를 담아 평판배지를 제조한 후, 갓의 직경이 5 cm인 표고버섯을 평균 모서리길이 5 mm가 되도록 자르고, 그 절편을 무균상태에서 상기 평판배지에 이식했다. 조직이 이식된 페트리디쉬를 25℃에서 12 일 동안 배양한 후, 생장된 표고버섯 균사를 평판배지와 함께 평균 변길이 7 mm가 되도록 잘라, 새로운 PDA 평판배지에 옮겨 배양하고, 이 과정을 1 회 더 반복하여, 표고버섯 원균을 수득하였다.After preparing a plate medium containing PDA in Petri dishes, shiitake mushrooms having a diameter of 5 cm were cut to have an average edge length of 5 mm, and the sections were transplanted to the plate medium under aseptic conditions. After culturing the Petri dishes with tissues for 12 days at 25 ° C, cut the grown shiitake mycelium with plate media to an average length of 7 mm, transfer them to new PDA plate media, and incubate this process once. It was repeated further and the shiitake progeny were obtained.

그리고, 참나무 톱밥 10 kg, 미강 1.5 kg, 밀기울 1.5 kg 비율로 배합하고, 상기 배합물에 물 20 kg을 첨가한 후, 120 ℃에서 100 분 동안 살균한 후 냉각시켜 고체배지를 제조하였다. 멸균실에서 통공이 70 개 형성된 봉지에 상기 고체배지를 넣고 상기 평판배지와 함께 수득한 평균 변길이 7 mm의 표고버섯 원균 절편 4 개를 접종하고, 20 ℃에서 70 일 동안 명배양시켰다.Then, 10 kg of oak sawdust, 1.5 kg of rice bran, and 1.5 kg of bran were added, and 20 kg of water was added to the blend, followed by sterilization at 120 ° C. for 100 minutes, followed by cooling to prepare a solid medium. The solid medium was placed in a bag formed with 70 through holes in a sterilization chamber and inoculated with 4 pieces of shiitake fungus fragments having an average length of 7 mm obtained with the plate medium, and brightly cultured at 20 ° C. for 70 days.

이렇게 배양한 표고버섯 배양물은 고체배지 전체에 균사가 완전히 퍼지는 데 3 내지 4 개월이 소요되며, 하나의 고체배지에서 최대 6 회까지만 상업배양이 가능함을 확인하였다.Shiitake culture cultured in this way it takes 3 to 4 months to completely spread the mycelia throughout the solid medium, it was confirmed that commercial culture is possible only up to six times in one solid medium.

비교예Comparative example 2:  2: 액체종균Liquid spawn 배양 culture

페트리디쉬에 PDA (Potato dextrose agar)를 담아 평판배지를 제조한 후, 갓의 직경이 5 cm인 표고버섯을 평균 모서리길이 5 mm가 되도록 자르고, 그 절편을 무균상태에서 상기 평판배지에 이식했다. 조직이 이식된 페트리디쉬를 25℃에서 12 일 동안 배양한 후, 생장된 표고버섯 균사를 평판배지와 함께 평균 변길이 7 mm가 되도록 잘라, 새로운 PDA 평판배지에 옮겨 배양하고, 이 과정을 1 회 더 반복하여, 표고버섯 원균을 수득하였다.After preparing a plate medium containing PDA (Potato dextrose agar) in Petri dishes, shiitake mushrooms having a diameter of 5 cm were cut to have an average edge length of 5 mm, and the sections were transplanted to the plate medium under aseptic conditions. After culturing the Petri dishes with tissues for 12 days at 25 ° C, cut the grown shiitake mycelium with plate media to an average length of 7 mm, transfer them to new PDA plate media, and incubate this process once. It was repeated further and the shiitake progeny were obtained.

1 l 용기에 증류수 500 ml, 설탕 17 g, 대두박 2 g, KH2PO4 0.4 g, MgSO4·7H2O 0.4 g, KNO3 0.6 g을 첨가, 혼합하여 액상 배지를 제조하고, 이를 오토클레이브(120 ℃)에서 1 시간 동안 살균한 후, 무균상태에서 냉각 후 상기 평판배지와 함께 수득한 평균 변길이 7 mm의 원균 절편 4 개를 접종하고, 25 ℃의 진탕기에서 25 일 동안 배양하였다.500 ml of distilled water, 17 g of sugar, 2 g of soybean meal, 0.4 g of KH 2 PO 4, 0.4 g of MgSO 4 · 7H 2 O, 0.6 g of KNO 3 were added and mixed in a 1 l container to prepare a liquid medium, which was then autoclaved. After sterilization at (120 ° C.) for 1 hour, 4 cells of 7 mm in average length obtained with the plate medium were inoculated after cooling under aseptic conditions, and incubated in a shaker at 25 ° C. for 25 days.

참나무 톱밥 10 kg, 미강 1.5 kg, 밀기울 1.5 kg 비율로 배합하고, 상기 배합물에 물 20 kg을 첨가한 후, 120 ℃에서 100 분 동안 살균한 후 냉각시켜 고체배지를 제조하였다. 멸균실에서 통공이 70 개 형성된 봉지에 상기 고체배지를 넣고 상기 표고버섯 배양액 100 cc를 접종하고, 20 ℃에서 70 일 동안 명배양시켰다.10 kg of oak sawdust, 1.5 kg of rice bran, and 1.5 kg of bran were added, and 20 kg of water was added to the blend, followed by sterilization at 120 ° C. for 100 minutes, followed by cooling to prepare a solid medium. The solid medium was placed in a bag formed with 70 through holes in a sterilization chamber, inoculated with 100 cc of shiitake mushroom culture, and incubated at 20 ° C. for 70 days.

이렇게 배양한 표고버섯 배양물은 고체배지 전체에 균사가 완전히 퍼지기 전에 다른 균에 의해 오염되는 비율이 절반이 넘고, 하나의 고체배지에서 생산되는 표고버섯의 양이 본 발명의 실시예의 10 %에도 미치지 못함을 확인하였다.
The culture of shiitake mushrooms is more than half contaminated by other bacteria before the mycelia are completely spread throughout the solid medium, and the amount of shiitake mushrooms produced in one solid medium is less than 10% of the embodiment of the present invention. It was confirmed that no.

이상에서는 본 발명의 바람직한 실시예에 대해서 설명하였으나, 본 발명은 상술한 특정의 실시예에 한정되지 아니하며, 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 본원 발명의 요지를 벗어남이 없이 다양한 변형 실시가 가능함은 물론이다. 따라서, 본 발명의 범위는 위의 실시예에 국한해서 해석되어서는 안되며, 후술하는 특허청구범위 뿐만 아니라 이 특허청구범위와 균등한 것들에 의해 정해져야 할 것이다.
While the present invention has been described in connection with what is presently considered to be practical exemplary embodiments, it is to be understood that the invention is not limited to the disclosed embodiments, but, on the contrary, Of course it is possible. Accordingly, the scope of the present invention should not be construed as being limited to the above-described embodiments, but should be determined by equivalents to the appended claims, as well as the following claims.

Claims (5)

(A) 톱밥 100 중량부 및 미강 10 내지 40 중량부를 혼합하고, 물 150 내지 250 중량부를 첨가하여 고체배지를 제조하는 단계,
(B) 상기 고체배지를 광구병에 넣고 100 내지 135 ℃에서 2 내지 3 시간 동안 살균하고 멸균실에서 냉각시키는 단계,
(C) 멸균실에서 상기 톱밥 100 중량부를 기준으로 버섯 배양액 5 내지 15 중량부를 상기 고체배지에 접종하고 15 내지 25 ℃에서 40 내지 55 일 동안 암배양하는 단계, 및
(D) 상기 암배양된 배양물을 상기 광구병에서 꺼낸 후 다공성 봉지에 다시 넣고 15 내지 25 ℃에서 45 내지 60 일 동안 명배양하는 단계
를 포함하고,
상기 단계 (C)의 버섯 배양액은
물 100 중량부,
설탕 2 내지 5 중량부,
대두박 또는 효모추출물 0.2 내지 0.5 중량부,
KH2PO4 0.03 내지 0.1 중량부,
MgSO4·7H2O 0.03 내지 0.1 중량부, 및
KNO3 0.05 내지 0.2 중량부
를 포함한 액상배지에 표고버섯 종균을 배양한 것을 특징으로 하는 표고버섯 배양물 제조방법.
(A) mixing 100 parts by weight of sawdust and 10 to 40 parts by weight of rice bran, and adding 150 to 250 parts by weight of water to prepare a solid medium,
(B) sterilizing the solid medium in a photosphere bottle for 2 to 3 hours at 100 to 135 ℃ and cooling in a sterilization chamber,
(C) inoculating 5 to 15 parts by weight of the mushroom culture based on 100 parts by weight of the sawdust in a sterilization chamber to the solid medium and cancer culture at 15 to 25 ℃ for 40 to 55 days, and
(D) taking the cultured cultured cultures from the photocatalysts and putting them back into a porous bag for bright culture at 15 to 25 ° C. for 45 to 60 days
Including,
Mushroom culture of step (C) is
100 parts by weight of water,
2 to 5 parts by weight of sugar,
0.2 to 0.5 parts by weight of soybean meal or yeast extract,
0.03 to 0.1 parts by weight of KH 2 PO 4 ,
0.03 to 0.1 part by weight of MgSO 4 7H 2 O, and
KNO 3 0.05 to 0.2 part by weight
Shiitake mushroom culture method comprising culturing shiitake spawn seed in a liquid medium containing a.
청구항 1에 있어서,
상기 단계 (A)의 고체배지에 톱밥 100 중량부 당 밀기울 10 내지 20 중량부를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 표고버섯 배양물 제조방법.
The method according to claim 1,
Shiitake mushroom culture method, characterized in that it further comprises 10 to 20 parts by weight of bran per 100 parts by weight of sawdust in the solid medium of step (A).
청구항 1에 있어서,
상기 단계 (A)의 고체배지에 톱밥 100 중량부 당 면실피 (cotton seed hull) 5 내지 10 중량부를 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 표고버섯 배양물 제조방법.
The method according to claim 1,
Shiitake mushroom culture method, characterized in that it further comprises 5 to 10 parts by weight of cotton seed hull per 100 parts by weight of sawdust in the solid medium of step (A).
삭제delete 청구항 1에 있어서,
상기 단계 (D)에서 암배양된 배양물을 다공성 봉지에 다시 넣을 때의 습도는 1 내지 60 %인 것을 특징으로 하는 표고버섯 배양물 제조방법.
The method according to claim 1,
Shiitake culture method of producing a culture, characterized in that the humidity of the culture cultured in the step (D) back to the porous bag 1 to 60%.
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