상기한 본 발명의 목적을 달성하기 위한 일 구성으로는 여드름 악화의 주 원인균으로 작용하는 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)에 대해 뛰어난 항균 작용을 가지며, 장기간 사용하여도 안전성이 높은 물질을 남실(Persicaria tinctoria H.GROSS)로 부터 추출하여 사용하는 것으로, 상기 남실 추출물이 건조 중량 기준으로 0.001 중량% ~ 20.0 중량%로 함유되며, 여기에 통상적으로 부가될 수 있는 화장료 조성물이 부가되는 여드름의 예방 및 개선에 유효한 효과를 갖는 화장료 조성물을 제공함을 특징으로 한다.
상기와 같이 본 발명의 주요 구성성분인 남실은 일반적으로 쪽이라 불리는 여뀌과의 한해살이풀인데, 여뀌를 닮은 쪽이란 뜻으로 요람이라고도 하며 쪽의 줄기와 잎을 청대라고 한다. 중국이 원산지인 남실은 염료 자원으로 들여와 농가에서 재배하고 있다. 높이는 50~60cm이며 줄기는 붉은 빛이 도는 자주색이다. 8~9월에 붉은 꽃이 피며 수상화서를 이루는데 원줄기 끝에 빽빽히 달린다. 열매는 9~10월에 익는데 수과는 꽃덮이로 둘러싸여 있고 길이는 2mm 정도로 흑갈색이다. 예로부터 남실의 잎은 남빛 색소인 인디고가 들어 있어 염료로 쓰였으며 청대는 눈썹을 그리는 화장품인 미묵으로도 사용됐다. 남실은 청열해독 작용이 우수하여 열을 떨어뜨리고 소화, 해독, 억균 작용이 있어 소화 장애나 모든 약물의 중독에 해독제로 쓰이거나 만성 습진, 접촉성 피부염 등을 다스리는데 이용되어 왔다.
또한, 본 발명의 남실은 오래 전부터 한방에서 사용해 오던 약재로서 체내 섭취의 경우에도 인체에 대한 안정성이 확인되어 있으며 피부 및 점막에 대한 자극도 거의 없는, 안전성이 우수한 식물이다.
한국 특개 2000-6570호에는 생쪽의 에틸 아세테이트 가용성분을 함유한 생리활성 추출물이 개시되어 있다. 그러나, 이들 에틸 아세테이트 추출물이 여드름의 원인균인 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)의 억제와 같은 항균 효과에 대한 언급은 전혀 없다.
본 발명에 따른 여드름예방 및 치료용 조성물에서 남실 추출물의 함량은 건조 중량 기준으로 0.001 중량% ~ 20.0 중량%를 함유하며, 바람직하기로는 0.005 중량% ~ 10.0 중량%를 함유한다. 만일 0.005 중량% 이하로 사용하게 되면 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)에 대한 항균력이 다소 미흡할 가능성 이 있고 10.0 중량% 이상을 사용할 경우, 조성물의 제조와 장기간의 안정성 확보에 어려움이 있다. 또한, 0.005 중량% 이하의 농도에서는 항산화력이 낮아 피지 성분의 과산화 억제 효과를 기대하기 어려우므로 본 피부용 조성물의 효능이 반감되게 된다.
상기와 같이 본 발명의 남실 추출물 함유 피부용 조성물은 액상, 크림상, 페이스트상 또는 고형상 등 어떠한 형상에도 적용 가능하여 크림, 로션, 스킨로션, 팩, 화운데이션, 메이크업베이스 뿐만 아니라 비누, 훼이셜폼, 바디크렌져와 같은 세안, 세정료 및 샴푸, 린스와 같은 모발용 제품에도 응용 가능하며, 필요에 따라 본 발명의 효과를 저해하지 않는 범위 내에서 피부 외용제에 일반적으로 사용하는 성분, 예를 들면 수성 성분, 유성 성분, 계면활성제, 보습제, 점증제, 방부제, 향료, 색소 등과 함께 배합하는 것이 가능하다.
또한 기존의 여드름 치료제에 사용되어 온 벤조일퍼록사이드, 테트라사이클린, 에리스로마이신, 트리클로산 등의 항균제나 안드로겐제, 스테로이드제 등의 호르몬류, 레티노이드 등의 비타민 A 유도체와 병용하는 것도 가능하다.
본 발명의 다른 구성에 따르면, 본 발명의 남실 추출물은
a) 건조된 남실을 분말화하는 단계;
b) 분말화된 남실을 용매로 추출하는 단계;
c) 추출 여액을 여과하는 단계;
d) 여액을 감압 증류하여 농축하는 단계; 및
e) 농축된 여액을 동결 건조하여 다시 분말로 만드는 단계를 포함하는 방법 으로 제조됨을 특징으로 한다.
본 발명의 또 다른 구성에 따르면, 상기에서 추출 단계에 사용되는 용매는 정제수, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 이소프로판올, 부탄올, 아세톤, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 메틸아세테이트, 에틸아세테이트, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄으로 이루어진 군으로부터 1종 이상 선택된다.
특히, 상기 추출용매중 정제수, 메탄올, 에탄올, 아세톤, 글리세롤, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜 등의 극성 용매를 사용함이 바람직하다. 이러한 추출용액을 사용하여 수득한 남실 추출물은 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)에 대해 강력한 항균 효과를 보이며, 항산화력이 우수하여 피지 성분의 과산화 및 각화 현상을 완화할 수 있다. 한편, 헥산, 디에틸에테르, 디클로로메탄 등의 비극성 용매를 사용하여 획득한 남실 추출물의 경우에도 프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)에 대한 항균력 및 항산화 효과가 나타나지만 극성 용매에 의한 추출물에 비해 상대적으로 낮은 편이며, 용해도 및 유화의 용이성이 떨어져 피부용 조성물 제조시 어려움이 예상되어 바람직하지 못하다.
이하의 본 발명을 실시예 및 비교예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며 본 발명이 이들에 의하여 한정되는 것은 아니다.
실시예 1
남실의 활성성분 추출
남실(건조 생약재)를 파쇄하여 분말화한 것 100g에 메탄올(80%) 1000ml를 가하여 상온에서 1주일간 침적하여 2회 반복 추출, 여과한 후, 그 여과액을 감압 증류하여 농축하고 다시 동결 건조하여 18.6g의 분말을 얻었다.
시험예 1
항균 활성의 측정
96-웰 마이크로플레이트를 이용한 브로쓰 희석법(broth dilution method)에 의해 항균력을 측정한다. 96-웰 마이크로플레이트의 각각의 웰에 가열 멸균한 브레인하트 인퓨전 브로쓰 배지(BHI broth)를 주입한 후, 추출물 시료를 2배씩 단계 희석한다. 모든 웰에 시험균 현탁액을 주입한 후, 37℃에서 혐기 상태로 배양한다. 3~4일간 배양한 후, 알라머 블루(alamar blue) 용액을 각 웰에 분주하여 1시간 정도 배양한 후, 발색 상태를 관찰하여 청색에서 분홍색으로의 색 변화 일어나지 않은 농도를 MIC 값으로 결정한다.
프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)균에 대한 항균 활성
시 료 |
MIC(ppm) |
ATCC 6919 |
남실 추출물 |
10 ~ 30 |
트리클로산(Triclosan) |
20 ~ 40 |
살리실산(Salicylic acid) |
2000 |
상기 표에서 보는 바와 같이 남실 추출물은 종래 여드름 치료에 유효 성분으로서 사용되어 오던 벤조일퍼록사이드에 비해 매우 우수한 항균력을 나타낼 뿐만 아니라, 광범위한 항균력을 가진다고 알려져 있는 트리클로산과 비교해도 대등또는 우수한 효과를 보였다. 따라서 본 발명의 남실 추출물을 여드름 예방 및 개선 목적으로 피부용 조성물에 배합할 경우, 우수한 예방 및 치유 효과를 나타낼 것으로 예상된다.
시험예 2
항산화 효과의 측정
추출물 시료를 에탄올에 적정한 농도로 용해한 후, 단계 희석을 통하여 다양한 농도의 시료 용액을 제조한다. 각각의 시료 용액을 50㎕ 씩 96-웰 마이크로플레이트의 각 웰에 가한 후, 다시 20mM 농도로 에탄올에 녹인 DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl) 용액 100㎕ 를 추가한다. 일정하게 정해진 시간에 따라 흡광도의 변화를 517nm에서 측정한다. 30분 동안 반응을 수행하여 초기 흡광도의 50%를 나타내는 시료의 농도를 SC50의 수치로 나타내고, 이를 이용하여 항산화 효과를 평가한다.
DPPH 라디칼 소거 활성을 통한 항산화 효과
시 료 |
SC50 (517nm. ppm) |
남실 추출물 |
132.7 |
BHT(butylene hydroxy toluene) |
243.3 |
상기 표에서와 같이 남실 추출물은 항산화제로서 통상 사용해 오던 BHT에 비해 현격하게 우수한 항산화 효과를 가지고 있는 것으로 나타났다. 이상의 결과로부터 남실 추출물을 피부용 조성물에 배합하여 사용할 때, 지질 성분의 과산화 및 각질화 현상의 억제를 기대할 수 있을 뿐만 아니라 피부에 대한 안전성 및 조성물의 상 안정성 향상에도 이점이 있을 것으로 예상된다.
시험예 3
남실 추출물 함유 조성물의 항균력 평가
본 발명에 의한 남실 함유 조성물의 항균 효과를 평가하기 위하여 표 3과 같은 조성으로 실시예 2 및 비교예 1의 세안 비누를 제조하여 페이퍼-디스크(Paper-disk)법을 이용하였다. 각각의 조성물을 10% 용액으로 희석한 후, 이 용액에 페이퍼-디스크(지름8mm)를 동일한 시간 동안 담갔다가 꺼내어 시험균이 접종된 한천배지 위에 얹어 놓고 배양하였다. 1~2일간 배양한 후, 페이퍼-디스크 주위에 발육 저지대의 형성 유무와 그 크기를 측정함으로써 조성물의 항균 효과를 정성적으로 판정하였으며, 그 결과를 표 4에 나타냈다.
효과 측정용 세안 비누의 조성 (중량 %)
성 분 명 |
실시예 2 |
비교예 1 |
야자유 지방산 |
2.0 |
2.0 |
글리세린 |
0.5 |
0.5 |
이산화티탄 |
0.3 |
0.3 |
EDTA-2Na |
0.1 |
0.1 |
향 료 |
적량 |
적량 |
색 소 |
적량 |
적량 |
남실 추출물 |
1.0 |
- |
비누칩(베이스) |
잔량 |
잔량 |
합 계 |
100 |
100 |
프로피오니박테리움 아크네스(propionibacterium acnes)균에 대한 항균 활성
시 료 |
발육 저지대(growth inhibition zone)의 지름(mm) |
|
ATCC 6919 |
실시예 1 (10% 용액) |
16 |
비교예 1 (10% 용액) |
저지대 형성 안됨 |
본 발명의 남실 추출물을 함유한 세안 비누의 희석 용액에 대한 항균 효과를 평가한 결과, 상기 [표 4]와 같이 매우 우수한 효과를 나타냈다. 이러한 결과에 따라 본 발명의 남실 추출물을 함유한 피부용 조성물 즉, 세안용 비누의 여드름에 대한 예방 및 치료 효과를 기대할 수 있다.
시험예 4
여드름 치료 효과의 평가
본 발명에 의한 남실 함유 조성물의 여드름 예방 및 개선에 관한 임상 효과를 평가하기 위하여 표 6과 같은 조성으로 실시예 3 및 비교예 2의 스킨 로션을 제조하여 여드름 보유자를 대상으로 실험하였다. 즉, 여드름 증상을 가지고 있는 20대 여성 40명을 대상으로 표 6의 조성을 갖는 스킨 로션을 매일 2회, 3주간 사용하면서 여드름의 상태를 표 5의 기준에 따라 분류하고 육안 및 사진 촬영에 의한 비교를 통해 판정하여, 그 결과를 표 7에 나타냈다.
등 급 |
피부 상태 |
0 |
정상 |
1 |
염증이 없는 작은 수의 면포 |
2 |
염증이 없는 중간 정도의 면포 |
3 |
염증성 구진의 면포 |
4 |
작은 결절 및 염증성 면포 |
5 |
구진성 결절 |
6 |
중간 정도의 염증성 결절 |
7 |
많은 수의 염증성 결절 |
8 |
심한 결절성 면포 |
9 |
심한 낭포 및 염증성 결절 |
※ 임상 실험 대상자의 여드름에 대한 피부 상태가 실험 개시 시점과 비교하여 3등급 이상의 감소를 나타내면 우수, 1~2 등급의 감소를 보이면 양호, 등급의 차이가 없으면 효과 없음, 등급이 증가하면 악화로 판정하였다.
효과 측정용 스킨 로션의 조성 (중량 %)
성 분 명 |
실시예 3 |
비교예 2 |
에탄올 |
5.0 |
2.0 |
글리세린 |
3.0 |
0.5 |
1,3-부틸렌글리콜 |
3.0 |
0.3 |
폴리옥시에틸렌알킬에테르 |
0.5 |
0.1 |
향 료 |
적량 |
적량 |
남실 추출물 |
1.0 |
- |
정제수 |
잔량 |
잔량 |
합 계 |
100 |
100 |
여드름 치료 효과의 평가
구 분 |
등급 판정 |
계 |
우 수 |
양 호 |
효과 없음 |
악 화 |
실시예 2 |
14(70%) |
5(30%) |
1(5%) |
- |
20(100%) |
비교예 2 |
- |
2(10%) |
15(75%) |
3(15%) |
20(100%) |
본 발명에 따른 조성물의 여드름 예방 및 개선 효과는 상기 표 7에 나타난 바와 같이 매우 우수한 효과를 가지고 있는 것으로 판명되었다.
실시예4-8
이하, 본 발명의 실시예 1에 따라 수득한 남실 추출물을 함유하는 각종 형태의 화장료 조성물의 조성을 나타내면 다음 표 8-12와 같다.
크림 (중량 %)
스테아린산 |
8.0 |
글리세린 |
5.0 |
스쿠알렌 |
5.0 |
프로필렌글리콜 |
3.0 |
자기유화형 모노스테아린산 글리세린 |
2.5 |
모노스테아린산 폴리옥시에틸렌 소르비탄(20 E.O.) |
1.5 |
바세린 |
1.5 |
향료 |
적량 |
방부제 |
적량 |
남실 추출물 |
1.0 |
정제수 |
잔량 |
합계 |
100 |
로션 (중량 %)
유동파라핀 |
5.0 |
글리세린 |
3.0 |
스쿠알렌 |
3.0 |
프로필렌글리콜 |
3.0 |
바세린 |
2.0 |
에탄올 |
2.0 |
모노스테아린산 폴리옥시에틸렌 소르비탄(20 E.O.) |
1.5 |
트리에탄올아민 |
0.5 |
향료 |
적량 |
방부제 |
적량 |
남실 추출물 |
1.0 |
정제수 |
잔량 |
합계 |
100 |
액상 파운데이션 (중량 %)
이산화티탄 |
8.0 |
미리스틴산 이소프로필 |
5.0 |
탈크 파우더 |
5.0 |
액상 라놀린 |
3.0 |
유동파라핀 |
3.0 |
글리세린 |
3.0 |
벤토나이트 |
0.5 |
세토스테아릴 알코올 |
0.5 |
카르복시메틸셀룰로오스나트륨 |
0.3 |
착색 안료 |
적량 |
향료 |
적량 |
방부제 |
적량 |
남실 추출물 |
1.0 |
정제수 |
잔량 |
합계 |
100 |
에센스 (중량 %)
솔비톨 |
8.0 |
폴리옥시에틸렌글리콜 1500 |
6.0 |
에탄올 |
5.0 |
글리세린 |
3.0 |
1,3-부틸렌글리콜 |
3.0 |
폴리옥시에틸렌 올레일 알코올 에테르 |
1.0 |
올리브유 |
0.3 |
히아루론산 |
0.2 |
향료 |
적량 |
방부제 |
적량 |
남실 추출물 |
1.0 |
정제수 |
잔량 |
합계 |
100 |
클렌징 폼 (중량 %)
미리스틴산 |
15.0 |
스테아린산 |
12.0 |
수산화칼륨 |
5.0 |
글리세린 |
3.0 |
1,3-부틸렌글리콜 |
3.0 |
모노스테아린산 폴리옥시에틸렌 소르비탄(20 E.O.) |
2.0 |
EDTA-2Na |
0.1 |
색소 |
적량 |
향료 |
적량 |
방부제 |
적량 |
남실 추출물 |
1.0 |
정제수 |
잔량 |
합계 |
100 |