KR100664558B1 - Amphiphilic copolymer having multi functional group and preparation method thereof - Google Patents

Amphiphilic copolymer having multi functional group and preparation method thereof Download PDF

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KR100664558B1
KR100664558B1 KR20050043027A KR20050043027A KR100664558B1 KR 100664558 B1 KR100664558 B1 KR 100664558B1 KR 20050043027 A KR20050043027 A KR 20050043027A KR 20050043027 A KR20050043027 A KR 20050043027A KR 100664558 B1 KR100664558 B1 KR 100664558B1
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고동현
박기동
배진우
이정식
이준우
이중석
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박기동
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Abstract

본 발명은 다관능성 양친매성 고분자 공중합체 및 이의 제조방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체 및 이의 제조방법에 관한 것이다. The present invention relates to a multi-functional amphipathic polymer and copolymer thereof, as relates to a process for the preparation, and more particularly, multi-functional amphipathic polymer copolymer and a method comprising a biodegradable polymer.
본 발명의 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린을 결합한 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체는 소수성 약물을 탑재한 미셀형태로 제조시 지속적인 약물 방출 효과를 얻을 수 있다. Multi-functional containing the biodegradable polymer of the present invention amphiphilic multifunctional combination of heparin to the polymer copolymer amphipathic polymer heparin conjugate to obtain a constant drug release effect of the preparation in the form of micelles with the hydrophobic drug.
테트로닉, 카프로락톤, 헤파린, 공중합체, 접합체, 미셀, 약물, 성장 인자 Tetronic, caprolactone, heparin, copolymers, conjugates, micelles, drugs, growth factors

Description

다관능성 양친매성 고분자 공중합체 및 이의 제조방법{AMPHIPHILIC COPOLYMER HAVING MULTI FUNCTIONAL GROUP AND PREPARATION METHOD THEREOF} Multi-functional amphipathic polymer copolymer and a method {AMPHIPHILIC COPOLYMER HAVING MULTI FUNCTIONAL GROUP AND PREPARATION METHOD THEREOF}

도 1는 본 발명의 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체의 개념도이다. Figure 1 Tetronic of the present invention is a conceptual diagram of a heparin conjugate-caprolactone.

도 2은 용매 증발법을 나타낸 개념도이다. Figure 2 is a conceptual diagram showing the solvent evaporation method.

도 3는 본 발명의 약물이 탑재된 테트로닉-카프로락톤 공중합체 미셀의 개념도이다. Figure 3 is a Tetronic drug is mounted of the present invention is a conceptual diagram of a caprolactone copolymer micelles.

도 4는 본 발명의 성장인자가 결합된 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체 미셀의 개념도이다. Figure 4 is a Tetronic combination of growth factors of the present invention is a conceptual diagram of a heparin conjugate micelle-caprolactone.

도 5은 본 발명의 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체 미셀의 개념도이다. Figure 5 is equipped with a drug of the present invention, growth factor is combined Tetronic-a conceptual diagram of a heparin conjugate micelle-caprolactone.

도 6은 실시예 1의 테트로닉-카프로락톤 공중합체의 NMR 분석결과이다. Figure 6 is the first embodiment of the Tetronic-NMR analysis result of the caprolactone copolymer.

도 7은 실시예 1 및 실시예 2의 테트로닉-카프로락톤 공중합체과 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체의 IR분석 결과이다. 7 is a first and second embodiments of Tetronic-caprolactone air hapchegwa Tetronic-caprolactone-IR analysis results of a heparin conjugate.

도 8는 실시예 2의 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체의 NMR 분석결과이다. Figure 8 is a second embodiment of Tetronic-caprolactone-NMR analysis results of a heparin conjugate.

도 9은 테트로닉-카프로락톤 공중합체의 임계미셀 농도 분석 결과이다. Figure 9 is a Tetronic-caprolactone is the critical micelle concentration analysis of the lactone copolymer.

도 10은 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체의 임계미셀 농도 분석 결과이다. Figure 10 Tetronic-caprolactone-critical micelle concentration is a result of the analysis of the heparin conjugate.

도 11는 테트로닉, 테트로닉-카프로락톤 접합체, 테트로닉-카프로락톤-헤파린 미셀의 약물 방출 실험 결과이다. Figure 11 is a Tetronic, Tetronic-caprolactone conjugate, Tetronic-caprolactone - a drug release results of heparin micelles.

도 12는 테트로닉-카프로락톤-헤파린 미셀의 성장인자 방출 실험 결과이다. Figure 12 Tetronic-caprolactone - a growth factor release results of heparin micelles.

본 발명은 지속적인 약물 방출과 약효를 얻을 수 있는 미셀의 기초를 이루는 공중합체, 이의 미셀 및 이들의 제조방법에 관한 것으로, 특히 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 공중합체 및 이의 제조방법, 헤파린이 결합된 형태의 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 공중합체 및 이의 제조방법과 이들의 미셀 및 이의 제조방법에 관한 것이다. The invention continuous drug release and drug copolymer underlying the micelles can be obtained, its micelle and relates to methods for their preparation, in particular a multi-functional copolymer comprises a biodegradable polymer and a method, heparin is coupled the form of a biodegradable multi-functional copolymers containing the polymer and a method thereof, and relates to micelles and methods for their preparation.

종래의 약물 전달체로서 응용이 가능하고 미셀(micelle)을 제조할 수 있는 양친매성 고분자로, 하기 화학식 1의 테트로닉(Tetronic ® )이 잘 알려져 있다. As the amphipathic polymer application is available as a conventional drug delivery system and capable of producing a micelle (micelle), to Tetronic (Tetronic ®) of formula (I) it is well known.

(화학식 1) (I)

Figure 112005026893546-pat00001

이 고분자는 중앙에 네 개의 팔을 가진 에틸렌 디아민(ethylene diamine)과 소수성 사슬인 폴리프로필렌 옥사이드(PPO; Polypropylene Oxide)로 이루어져 있 고, 곁가지에는 친수성 사슬인 폴리에틸렌 옥사이드(PEO; Polyethylene Oxide)로 이루어진 멀티 기능기를 가진 플로닉(Pluronic 계열)의 polymer이다. A polymer of ethylene diamine (ethylene diamine) and a hydrophobic chain of polypropylene oxide with four arms in the center; and consists of a (PPO Polypropylene Oxide), side chain is a polyethylene oxide hydrophilic chain; multi consisting of (PEO Polyethylene Oxide) a polymer of peulronik (Pluronic type) having a functional group. 이러한 소수성/친수성 균형은 계면 활성제로써 일정한 농도 이상(CMC, Critical Micelle Concentration)의 수용액상에서 자발적으로 미셀(micelle)의 형태를 가지게 할 뿐 아니라 농도가 20 중량% 이상이 되면 일정한 온도(LCST, Lower Critical Solution Temperature)에서 상전이 거동을 보이는 특성을 갖는다. The hydrophobic / hydrophilic balance is above a certain level as a surfactant, a constant temperature as well as to have the form of spontaneous micelle (micelle) in an aqueous solution when the concentration is more than 20% by weight of (CMC, Critical Micelle Concentration) (LCST, Lower Critical It has a property showing the phase transition behavior in Solution Temperature). 이러한 소수성/친수성 비율은 다양하게 조절할 수 있으며 비율에 따라 다른 물성과 상전이 거동, CMC를 갖는다. The hydrophobicity / hydrophilicity ratio of a wide range of adjustment, and other physical properties and the phase transition behavior depending on the rate, and has a CMC. 특히 연구에서 사용되는 Tetronic 1307은 소수성/친수성 비율이 FDA에서 생체 내의 안정성을 승인을 받은 F127이라는 플로닉(pluronic)과 유사하다. In particular, Tetronic 1307 used in the study is similar to peulronik (pluronic) of F127 approved by the FDA in stability in vivo hydrophobic / hydrophilic ratio.

그러나 이러한 폴리프로필렌 옥사이드를 소수성 사슬로 가지고 있는 테트로닉/플로닉(tetronic/pluronic) 계열의 고분자 미셀은 안정성이 약하다는 문제점을 지적받아 왔다. However, these poly Tetronic / peulronik (tetronic / pluronic) polymeric micelles in series with the propylene oxide with a hydrophobic chain has been pointed out a problem that stability is weak.

한편, 종래의 약물에 있어서 소수성 약물은 그 자체를 운반체에 높은 효율로 담기게 하기 어려우며, 방출도 즉시 이루어져 약물 투입에 대한 치료 등에 상당한 문제를 제공한다. On the other hand, in the conventional drug is a hydrophobic drug provides a significant problem such as the treatment of that it is difficult to hold the self-vehicle with high efficiency in the emission is also made up In immediate drug.

또 다른 한편으로, 헤파린(heparin)은 생체 활성화 분자(bioactive molecule)로 알려져 있으며, 생체 조직이나 세포의 분화에 직접적인 신호를 주는 성장인자와 결합하는 특성을 가지고 있어 주위 조직의 상처치유나 회복을 도와주고, 헤파린 자체가 ECM(Extra Cellular Matrix)의 성분이기 때문에 고분자의 생체 친화력을 높여준다고 알려져 있다. Yet on the other hand, heparin (heparin) are biological active and known as the molecule (bioactive molecule), it has characteristics that in combination with a growth factor to a direct signal to the differentiation of biological tissue or cells, to help wound healing and restoration of the surrounding tissue to give, as the heparin itself a component of (Extra Cellular Matrix) ECM has been said to improve the bio-affinity of the polymer. 또한 성장인자는 헤파린과 결합하면서 생리적 으로 안정한 형태로 변하는 것으로 알려져 있고 이후 세포의 수용체와 결합하여 분화와 증식을 유도하는 신호를 전달하게 된다. In addition, growth factors is combined with the receptor on the cell after binding with heparin is known to be a physiological change in a stable form by passing the signal to induce differentiation and proliferation.

이러한 특성을 이용, 지지체나 미립구 형태의 약물 전달체에 헤파린을 도입하여 성장인자를 전달하는 연구는 보고 되고 있으나 미셀을 이용하여 헤파린과 성장인자를 전달하는 연구는 보고된 바 없다. Study passing is used, the introduction of heparin to the drug delivery system of the support or form microspheres for growth factors such characteristics have not been reported studies and reported, but by using a micellar delivery of heparin and a growth factor. 종래의 기술을 이용한 방법들은 헤파린의 활성을 나타내는데 중요한 역할을 하는 카르복실기(carboxyl group)와 설폰산기(sulfonic acid group)를 화학결합에 이용하거나, 화학결합을 이용하지 않는 경우에도 일정한 담체에 물리적으로 함유시키기 때문에 활성부분이 가려져 생리활성이 크게 저하되는 문제점이 있다. Method using the conventional techniques are contained in a physical constant carrier, even when using a carboxyl group (carboxyl group) and a sulfonic acid group (sulfonic acid group) plays an important role to represent the activity of heparin in a chemical bond, or which does not use a chemical bond veiled the active part there is a problem in that the physiologically active greatly reduced because it. 또한 종래의 기술을 이용하는 경우 전달체를 제조하는 과정에서 생리활성물질의 손실이 일어나는 경우가 많다. In addition, in many cases the loss of the physiologically active substance takes place in the process of manufacturing the delivery system when using conventional techniques.

종래의 성장인자 방출 시스템의 경우 조직공학에 응용되어 다공성 생분해성 지지체나 젤 지지체의 효과를 극대화하기 위하여 성장인자와 세포를 함께 응용하게 되는데, 이때 염증반응에 의한 부작용이 발현되어 이를 해결하기 위한 소수성 약물의 도입이 필요하다. There is the application with the growth factors and cell to the case of the conventional growth factor release system is applied to tissue engineering to maximize the effect of the porous biodegradable support, or a gel substrate, wherein is the expression of side effect by inflammation hydrophobic to address this the introduction of the drug is needed.

따라서 헤파린의 생리활성을 저하시키지 않고 헤파린을 약물 전달 고분자에 결합시켜, 성장인자를 안정하게 전달하며 소수성 약물을 함유하는 새로운 형태의 약물 전달체의 개발이 필요하다. Thus it was without decreasing the physiological activity of the heparin binding heparin to the drug delivery polymers, passing a steady stream of growth factor and it is necessary to develop a new drug delivery system of the type containing a hydrophobic drug.

본 발명은 상기 종래기술의 문제점을 고려하여, 체내 흡수가 잘 안되는 소수성 약물을 체내에 잘 전달할 수 있는 약물 전달체로서, 극히 안정한 고분자 미셀 및 그의 제조방법을 제공하는 것이다. The present invention is to provide the above with the conventional consideration of the problems of the art, the absorbent body as well a drug delivery system that can deliver a hydrophobic drug should not well into the body, extremely stable polymeric micelles and a process for producing the same.

본 발명의 다른 목적은 상기 고분자 미셀의 기본 물질인 고분자 또는 접합체 및 이들의 제조방법을 제공하는 것이다. It is another object of the invention to provide a base material or a polymer conjugates and methods for their preparation of the polymer micelles.

본 발명의 또 다른 목적은 헤파린 결합 단백질들과 헤파린의 전기적 결합을 유도하여 본래의 소수성 약물을 전달함과 동시에 친수성인 성장인자를 체내에 안정적으로 전달할 수 있게 하기 위하여 생리활성을 저하시키지 않고 헤파린을 결합시킨 접합체 및 이의 제조방법을 제공하는 것이다. A further object of the present invention is a heparin without lowering the physiological activity in order at the same time as transmission of the original hydrophobic drugs to induce the electrical coupling of the heparin binding protein and the heparin to be able to deliver a stable hydrophilic growth factors in vivo to provide a bond that conjugates and their preparation.

본 발명은 상기 목적을 달성하기 위하여, For the invention to achieve the above object,

본 발명은 The invention

생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체를 제공한다. Multi-functional containing a biodegradable polymer to provide the amphipathic polymer copolymer.

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

(a) 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 제1소수성 블록 단량체, 폴리(프로필렌옥사이드)로 구성되는 제2소수성 블록 단량체 및 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록 단량체를 혼합하는 단계; (A) mixing the hydrophilic block monomer consisting of a poly (ester) a biodegradable polymer in a first hydrophobic block monomers, poly (propylene oxide), a second hydrophobic block monomer and poly (ethylene oxide) consisting of consisting of; 또는 or

폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 소수성 블록 단량체와 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록 단량체를 혼합하는 단계; Mixing the hydrophilic monomer block consisting of a poly-biodegradable polymer of hydrophobic monomer and a block of poly (ethylene oxide) consisting of (ester); And

(b) 상기 혼합물을 110 내지 180℃의 온도 및 6 내지 20시간 동안 중합하는 단계 (B) the polymerization temperature and for 6 to 20 hours of the mixture 110 to 180 ℃

를 포함하는 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 제조방법을 제공한다. The multi-functional containing the biodegradable polymer containing provides a method for producing the amphipathic high molecular copolymer.

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

소수성 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체 미셀(micelle)을 제공한다. Containing the biodegradable polymer is a hydrophobic drug with a multi-functional provides an amphipathic polymer copolymer micelle (micelle).

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

(a) 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여서 미셀(micelle)을 형성시키는 단계; (A) a biodegradable polymer comprising a polyfunctional contain amphipathic added at a concentration above the critical micelle concentration (critical micelle concentration) a high-molecular copolymer of distilled water and dissolved to form a micelle (micelle); And

(b) 상기 미셀에 소수성 약물 용액을 투입하는 단계 (B) the input of a hydrophobic drug in the micelle solution

를 포함하는 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체 미셀(micelle) 제조방법을 제공한다. The multi-functional containing the biodegradable polymer with the drug containing provides amphipathic polymer copolymer micelle (micelle) method.

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate)를 제공한다. Multi-functional, including a biodegradable polymer with a polyfunctional heparin is bonded to the amphipathic polymer copolymer provides an amphipathic polymer heparin conjugate (conjugate).

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

(a) 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 다관능기를 활성화시키는 단계; (A) the step of multi-functional, including a biodegradable polymer activate the functional groups of the amphipathic polymer copolymer; And

(b) 상기 활성화된 다관능성 양친매성 고분자 중합체의 다관능기에 헤파린을 결합시키는 단계 (B) coupling the heparin to the functional group of the activated multi-functional amphipathic polymer

를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체 제조방법을 제공한다. Polyfunctional containing provides a method of producing an amphiphilic polymer heparin conjugate.

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate)에 소수성 약물이 탑재된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체 미셀(micelle)을 제공한다. Multi-functional polymer comprising a biodegradable amphipathic polymer is coupled to the multi-functional heparin copolymer amphipathic a polyfunctional hydrophobic drug with a polymer heparin conjugate (conjugate) it provides an amphipathic polymer heparin conjugate micelles (micelle).

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

(a) 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여서 미셀(micelle)을 형성시키는 단계; (A) a biodegradable polymer comprising a polyfunctional contain amphipathic added at a concentration above the critical micelle concentration (critical micelle concentration) the heparin polymer conjugate in distilled water and dissolved to form a micelle (micelle); And

(b) 상기 미셀에 소수성 약물 용액을 투입하는 단계를 포함하는 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체 미셀(micelle) 제조방법을 제공한다. (B) multi-functional containing the hydrophobic drug solution step of the biodegradable polymer with the drug containing to inject the micelles provides a method for producing an amphipathic high molecular heparin conjugate micelles (micelle).

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate)에 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle)을 제공한다. Functional multi-containing biodegradable polymer amphiphilic polymer with the polyfunctional heparin is bonded to the copolymer amphipathic multi with a growth factor binds to high molecular heparin conjugate (conjugate) likely provide the amphiphilic polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle) do.

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 양친매성 헤파린 접합체(conjugate)에 소수성 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle)을 제공 한다. Multi-functional amphipathic polymer copolymer amphiphilic heparin conjugate (conjugate) the heparin is bonded to the hydrophobic drug is mounted the growth factor is combined multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle) containing a biodegradable polymer It provides.

또한 본 발명은 In another aspect, the present invention

(a) 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여서 미셀(micelle)을 형성시키는 단계; (A) a biodegradable polymer comprising a polyfunctional contain amphipathic added at a concentration above the critical micelle concentration (critical micelle concentration) the heparin polymer conjugate in distilled water and dissolved to form a micelle (micelle); And

(b) 상기 (a)단계의 미셀에 소수성 약물 용액을 투입하고 성장 인자를 투입하여 배양하는 단계 (B) In the step of hydrophobic drug solution in the micelles of step (a) and cultured In the growth factor

를 포함하는 소수성 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle) 제조방법을 제공한다. With the hydrophobic drug containing and the growth factor is a multifunctional coupling provides a method for producing an amphipathic high molecular heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle).

또한 본 발명은 상기에서 언급한 여러 가지 타입의 미셀을 포함하는 주입형 생체재료, 세포, 또는 약물 전달체를 제공한다. In another aspect, the present invention provides an injection mold biomaterial, cells, or a drug delivery system comprising a number of types of micelles mentioned above.

이하 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. Will now be described in detail the invention.

본 발명자들은 카프로락톤 등과 같은 생분해성 고분자를 테트로닉 등과 같은 다관능기를 갖는 다관능성 고분자와 공중합시키거나 또는 폴리에틸렌 옥사이드(PEO)를 폴리락타이드 등과 같이 다관능기를 갖는 생분해성 고분자와 공중합시킨 결과, 고분자 체인의 소수성을 높여서 수용액 상에서 생성되는 미셀의 안정성을 증진시키고, 흡수가 어려운 소수성 약물의 전달체로서 고분자와 약물의 소수성 상호작용을 돕는다는 것을 알게 되어 본 발명을 완성하였다. Result of the present inventors have copolymerized with a biodegradable polymer having the functional group, such as the biodegradable polymer a poly-lactide to the polyfunctional polymer copolymerizable with either or polyethylene oxide (PEO) having a functional group such as Tetronic such as caprolactone, It has been discovered that promotes the stability of the micelles produced in an aqueous solution by increasing the hydrophobicity of the polymer chain, and help the hydrophobic interaction of the polymer and drug as a carrier of the hard hydrophobic drug absorption and completed the present invention.

본 발명은 종래의 양친매성을 갖는 고분자가 미셀 상에서 비교적 약물의 탑재 효율이 낮고 약물 방출시간이 짧다는 것을 개선하기 위하여 생분해성 고분자를 다관능기를 갖는 고분자 말단에 도입시키거나 혹은 폴리에틸렌 옥사이드(PEO)를 다관능기를 갖는 생분해성 고분자 말단에 도입시켜 새로운 공중합체를 제조한 것이다. The invention as to introduce to the polymer terminal with the functional groups of the biodegradable polymer in order to improve that the polymer has a conventional amphiphilic low and with the efficiency of the relatively drug on the micelles of drug release time is short, or or polyethylene oxide (PEO) by introducing it in a biodegradable polymer having a terminal functional group will prepare a new copolymer. 이 공중합체는 종래의 양친매성을 갖는 고분자에 비하여 저농도에서 미셀을 형성하며 소수성 부분이 많아 더 안정한 미셀을 만든다. The copolymers forming micelles at low concentrations compared to polymers with a conventional amphipathic and makes a more stable micelle is more hydrophobic portion. 또한 약물 전달체로서의 기능이 우수하며, 말단의 다관능기(하이드록실기)를 이용하여 생리활성물질들을 다양하게 그리고 종래의 양친매성을 갖는 고분자에 비하여 많이 공유결합 할 수 있어 또 다른 고분자인 헤파린을 손쉽게 공유결합시켜 추가적인 접합체(conjugate)를 제조할 수 있다. Also it is excellent in function as a drug delivery system, a variety of physiologically active substances using the functional group (hydroxyl group) of the terminal and can be more covalent than the polymer with conventional amphipathic easily another polymer, heparin covalent bond may be prepared by the additional conjugate (conjugate).

본 발명의 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 결합체는 생분해성 고분자가 포함된 다관능기를 갖는 다관능성 양친매성 고분자에 헤파린이 결합된 형태이다. Multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate of the present invention is a heparin bonded to the multi-functional amphipathic polymer having the functional group containing the biodegradable polymer form. 그 개념도를 도 1에 나타내었다. Their conceptual diagram is shown in Fig.

본 발명에 따른 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 결합체는 생분해성 고분자를 포함하는 다수 개의 관능기를 갖는 다관능성 양친매성 고분자를 제조한 후 각 관능기에 헤파린을 화학적으로 결합시킨 것이다. Multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate according to the present invention is combined with heparin in each functional group chemically after preparing a multi-functional amphipathic polymer having a plurality of functional groups containing a biodegradable polymer. 생분해성 고분자가 포함된 다관능기를 갖는 다관능성 양친매성 고분자는 기존의 다관능성 양친매성 고분자에 생분해성 고분자를 결합시키거나, 생분해성 고분자를 소수성 블록으로 하여 이에 다른 소수성 블록, 친수성 블록을 결합시켜 제조하는 방법이 사용될 수 있으며, 여기서 다관능성 양친매성 고분자는 모두 다수 개의 관능기를 가지고 있다. The multi-multi-functional amphipathic polymer having a functional group containing a biodegradable polymer is combined with other hydrophobic block, the hydrophilic block to couple a biodegradable polymer in conventional multi-functional amphipathic polymer, or by a biodegradable polymer with a hydrophobic block this and a method of manufacturing may be used, wherein the multi-functional amphipathic polymer all have a plurality of functional groups.

상기 생분해성 고분자로는 폴리락타이드, 폴리(ε-카프로락톤), 폴리(락타이드-co-글리코리드), 폴리(락타이드-co-ε-카프로락톤), 폴리(ε-카프로락톤-co-글 리코리드), 폴리(ε-카프로락톤-co-글리코리드-co-락타이드) 등이 바람직하다. The biodegradable polymer is a polylactide, poly (ε- caprolactone), poly (lactide glycolate -co- lead), poly (lactide -co-ε- caprolactone), poly (ε- caprolactone -co -like article Rico lead), poly (ε- caprolactone -co- glycoside lead -co- lactide) is preferred.

또한 다관능성 양친매성 고분자는 3개 이상의 관능기를 갖는 것이 바람직하고, 3개 내지 8개의 관능기를 갖는 스타형 고분자형이 더욱 바람직하고, 또한 친수성 블록과 소수성 블록을 갖는 블록공중합체 형태인 것도 바람직하다. It is also preferred that it is preferable, and 3 to 8 functional groups, and the star-shaped polymer having a more desirable, the addition block copolymer type having a hydrophilic block and a hydrophobic block having three or more functional groups is an amphipathic polymer polyfunctional . 이때, 다관능성 양친매성 고분자는 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 제1소수성 블록, 폴리(프로필렌옥사이드)로 구성되는 제2소수성 블록 및 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록을 포함하는 블록공중합체 형태가 바람직하고, 구체적으로는 하기 화학식 2의 구조를 가지는 것이 가장 바람직하다. At this time, the multi-functional amphipathic polymer comprising a hydrophilic block consisting of a poly-biodegradable polymer in the first hydrophobic block consisting of (esters), poly (propylene oxide), a second hydrophobic block and a poly (ethylene oxide) consisting of a block copolymer form are preferred, and specifically, to be most desirable to have the structure of formula (2). 또한, 다관능성 양친매성 고분자는 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 소수성 블록과 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록을 포함하는 블록공중합체인 것도 바람직하고, 그 예로 하기 화학식 3 내지 6의 구조를 가지는 것을 들 수 있다. In addition, the multi-functional amphipathic polymer is preferable that the block copolymer comprising a hydrophilic block consisting of a poly (ester) the biodegradable polymer of the hydrophobic block and the poly (ethylene oxide) consisting of, and to Examples of Formula 3 to 6 It includes those having the structure. 이때 다관능성 양친매성 고분자의 분자량 및 친수성/소수성 비는 다양하게 조절될 수 있다. The multifunctional molecular weight and the hydrophilic / hydrophobic ratio of the functional amphipathic polymer may be variously adjusted.

Figure 112005026893546-pat00002

Figure 112005026893546-pat00003

Figure 112005026893546-pat00004

Figure 112005026893546-pat00005

Figure 112005026893546-pat00006

(상기 화학식 2 내지 6에서, (In the formula 2 to 6,

a는 중합도로서 61 내지 62의 값을 갖고, a has a value of 61 to 62 as the degree of polymerization,

b는 중합도로서 19 내지 20의 값을 갖고, b has a value of 19 to 20 as the degree of polymerization,

c는 중합도로서 3 내지 21의 값을 갖고, c has a value of from 3 to 21 as the degree of polymerization,

d는 중합도로서 10 내지 235의 값을 갖고, d has a value of from 10 to 235 as the degree of polymerization,

e는 중합도로서 25 내지 562의 값을 갖고, e has a value of 25 to 562 as the degree of polymerization,

f는 중합도로서 10 내지 518의 값을 갖고, f has a value of from 10 to 518 as the degree of polymerization,

g는 중합도로서 12 내지 869의 값을 갖고, g has a value of from 12 to 869 as the degree of polymerization,

h는 중합도로서 16 내지 465의 값을 갖고, h has a value of 16 to 465 as the degree of polymerization,

i는 중합도로서 20 내지 375의 값을 갖고, i has a value of from 20 to 375 as the degree of polymerization,

j는 중합도로서 16 내지 438의 값을 갖고, j has a value of 16 to 438 as the degree of polymerization,

k는 중합도로서 20 내지 736의 값을 갖는다.) k has a value of from 20 to 736 as the degree of polymerization.)

상기 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체 제조방법은 (a) 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 제1소수성 블록 단량체, 폴리(프로필렌옥사이드)로 구성되는 제2소수성 블록 단량체 및 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록 단량체를 혼합하는 단계; The biodegradable polymer of polyfunctional includes the method for producing the amphipathic high molecular copolymer (a) a poly second hydrophobic block monomer consisting of (ester) as a biodegradable polymer in a first hydrophobic block monomers, poly (propylene oxide) consisting of mixing the hydrophilic monomer block and consisting of a poly (ethylene oxide); 또는 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 소수성 블록 단량체와 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록 단량체를 혼합하는 단계; Or mixing a hydrophilic monomer block consisting of a poly-biodegradable polymer of hydrophobic monomer and a block of poly (ethylene oxide) consisting of (ester); 및 (b) 상기 혼합물을 110 내지 180℃의 온도 및 6 내지 20시간 동안 중합하는 방법이다. And (b) a method of polymerization for 6 to 20 hours and the temperature of the mixture is from 110 to 180 ℃.

상기 제조방법 중 (a) 단계에 주석계 옥토에이트(Stannous octoate)가 첨가될 수 있으며, 주석계 옥토에이트는 고리열림 중합(ring opening polymerization) 방법으로 고분자 말단 하이드록실기로부터 생분해성 고분자 모노머를 중합시키거나 혹은 에틸렌 글라이콜 모노머를 중합시켜, 다관능성 양친매성 고분자 공중합체(copolymer)를 얻는다. Can be the addition of tin-octoate (Stannous octoate) to (a) step of the above method, the tin-octoate is the polymerization of the biodegradable polymer monomers from the polymer terminal hydroxyl group in a way ring opening polymerization (ring opening polymerization) or reduce or by polymerizing ethylene glycol monomers, thereby obtaining a multi-functional amphipathic polymer copolymer (copolymer). 주석계 옥토에이트의 투입량은 생분해성 고분자 단량체 1몰에 대하여 1x10 -5 내지 5x10 -2 몰로 투입되는 것이 바람직하다. Loading of tin-octoate is preferably added 1x10 -5 to 5x10 -2 mol per 1 mol of the biodegradable polymer monomer. 이와 같이 제조된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체(copolymer)는 임계미셀 농도 이상으로 물에 가하여 수중에 분산시킬 경우 손쉽게 자발적으로 미셀을 형성한다. The thus prepared multi-functional amphipathic polymer copolymer (copolymer) is added to the water above the critical micelle concentration when dispersed in water easily forms micelles spontaneously.

또한 소수성 약물이 탑재된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체 미셀은 다관능기를 갖는 생분해성 다관능성 양친매성 고분자 공중합체(copolymer)를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여서 미셀(micelle)을 형성시킨 후, 이 미셀에 소수성 약물 용액을 투입하는 방법으로 제조할 수 있다. In addition, multifunctional the hydrophobic substance with functional amphipathic polymer copolymer micelles are added to a biodegradable multi-functional amphipathic density polymer copolymer (copolymer) in distilled water above the critical micelle concentration (critical micelle concentration) having a functional group and dissolving the micelles ( after forming a micelle), it can be produced by the method to inject a solution of a hydrophobic drug in the micelle.

상기 미셀에 소수성 약물을 용액 상으로 가하면 약물이 미셀의 소수성 중앙부분에 끼어 들어가게 되어 약물이 탑재된다. Applying a hydrophobic drug in the micelle with the drug solution is held stuck in the hydrophobic center of the micelle with the drug is. 약물을 미셀로 투입시키는 방법으로는 도 2에 나타낸 용매 증발법(solvent evaporation method)을 이용하는 것이 바람직하고, 또한 소수성 약물 용액 용매에 있어서 그 용매는 메탄올, 에탄올 등이 바람직하다. In the method of the drug in the micelles is the solvent evaporation method as shown in Figure 2 is preferred to use the (solvent evaporation method), and also in the hydrophobic drug solvent solution the solvent is preferably methanol, ethanol or the like. 이 미셀은 소수성 약물에 대하여 상당히 높은 탑재효율을 나타내며, 방출거동도 서서히 지속적으로 나타낸다. The micelles shows a significantly higher efficiency with respect to the hydrophobic drug, release behavior also gradually continually expressed by. 이 미셀의 크기는 187 내지 188 ㎚가 바람직하다. The size of the micelles is 187 to 188 ㎚ preferred.

미셀에 탑재될 수 있는 소수성 약물로는 물에 대한 용해도가 10 ㎎/㎖ 이하 인 난용성 약물 중 파클리탁셀, 케토코나졸, 이트라코나졸, 사이클로 스포린, 시사프라이드, 아세트아미노펜, 아스피린, 아세틸살리실산, 인도메타신, 나프로센, 와파린, 파파베린, 티오아벤 다졸, 미코나졸, 시나리진, 독소루비신, 오메프라졸, 콜레칼시페롤, 멜팔란, 니페디핀, 디곡신, 벤조산 트립토판, 타이로신, 페닐알라닌, 아즈트레오남, 이부프로펜, 펜옥시메틸페니실린, 탈리도마이드, 메틸테스토스테론, 프로클로르페라진, 히드로코티손, 디데옥시퓨린 뉴클레오사이드, 비타민 D2, 술폰아미드, 술포닐우레아, 파라아미노벤조산, 멜라토닌, 벤질페니실린, 클로람뷰실, 디아제핀, 디기톡신, 히드로코티손 뷰레이트, 메트로니다졸 벤조산염, 톨부타마이드, 프로스타 글란딘, Of a hydrophobic drug that can be mounted on the micelles I solubility in water of 10 ㎎ / ㎖ or less soluble drugs of paclitaxel, ketoconazole, itraconazole, cycloalkyl cyclosporine, cisapride, acetaminophen, aspirin, acetylsalicylic acid, indomethacin, or pro sen, warfarin, papaverine, thio ahben imidazole, miconazole, or when lysine, doxorubicin, omeprazole, cholecalciferol, melphalan, nifedipine, digoxin, benzoic acid tryptophan, tyrosine, phenylalanine, Aztreonam, ibuprofen, phenoxymethyl penicillin, thalidomide, methyl testosterone, Pro chlor Blow Jin, hydrochloride cortisone, dideoxy purine nucleoside, vitamin D2, sulfonamide, sulfonyl urea, para-aminobenzoic acid, melatonin, benzyl penicillin, chlorambucil byusil, diazepine, digi toxin , cortisone dihydro view rate, metronidazole benzoate, tolyl butanone polyimide, prostaglandins, 루드로코티손, 그리세오풀빈, 미코나졸 질산염, 류코트라이엔 비포 억제제, 프로프라놀롤, 테오필린, 플러비 프로펜, 벤조산 나트륨, 벤조산, 리보플라빈, 벤조디아제핀, 페노바비탈, 글리뷰라이드, 설파이아진, 설파에틸티아디아졸, 디클로페낙 나트륨, 피니로인, 히오리다진히드로클로라이드, 브로피리민, 히드로클로로티아지드, 플로코나졸, 항생제, 소염 진통제, 마취제, 호르몬류, 고혈압 치료제, 당뇨병 치료제, 고지질증 치료제, 항바이러스제, 파킨슨병 치료제, 치매 치료제, 항 구토제, 면역 억제제, 궤양 치료제, 변비 치료제, 항 말라리아제 등이 바람직하다. By Ruud cortisone, so Seo pulbin, miconazole nitrate, flow KOTRA two yen Before inhibitor, propranolol, theophylline, Doppler ratio of propene, sodium benzoate, benzoic acid, riboflavin, benzodiazepine, phenobarbital, articles review fluoride, seolpayi triazine, sulfamic ethyl-thiadiazole , diclofenac sodium, Fini in the, great duck chopped hydrochloride, bromo flutes min, hydrochlorothiazide thiazides, flow to Kona sol, antibiotics, anti-inflammatory analgesics, anesthetics, hormones, anti-hypertensive agent, an antidiabetic agent, notice vaginosis agents, antiviral agents, such as Parkinson's disease therapeutic agents, dementia, anti-emetic, an immunosuppressant, a therapeutic agent ulcer, constipation therapeutic agent, wherein malrariahje preferred.

본 발명의 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체의 예로는 테트로닉-카프로락톤-헤파린(tetronic-polycaprolactone-heparin) 접합체(conjugate)가 가장 바람직하며, 이러한 접합체는 테트로닉-카프로락톤 공중합체의 하이드록실기 말단을 카르복실기로 개질한 후, 생리활성물질인 헤파린을 테트로닉-카프로락톤의 말단에 공유 결합시켜 제조할 수 있다. Multi Examples of functional amphipathic polymer heparin conjugate of the present invention are Tetronic-caprolactone-heparin (tetronic-polycaprolactone-heparin) conjugate (conjugate) is, and most preferably, such conjugates are Tetronic-caprolactone hydroxyl group of the lactone copolymer after modifying the terminal to the carboxyl group, of the biomolecule heparin Tetronic - by covalent bonding at the ends of caprolactone it can be prepared. 헤파린이 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체의 개념도를 도 1에 나타내었다. The heparin binding polyfunctional was also shown in a conceptual diagram of a first amphiphilic polymer heparin conjugate.

이 접합체는 소수성의 생분해성 고분자를 이용하여 고분자를 제조한 후 헤파린을 각 관능기에 화학적으로 결합시킨 것으로, 이 때 고분자의 분자량 및 친수성/소수성 비는 다양하게 조절될 수 있으며 헤파린의 관능기 중 아민기(amine group)와 하이드록실기(hydroxyl group)를 이용하여 고분자와의 결합체를 형성한다. The conjugate is to be combined with heparin and then producing a polymer using the hydrophobicity of the biodegradable polymer chemically to each functional group, at this time may be the molecular weight and the hydrophilic / hydrophobic ratio of the polymer is variously controlled, and an amine of the functional groups of the heparin group using (amine group) and hydroxyl group (hydroxyl group) to form a conjugate with a polymer. 즉, 본 발명의 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체는 셋 이상의 가지를 가지는 고분자의 말단에 헤파린이 공유결합되어 제조되는 것으로, 미셀로 제조될 때 소수성인 생분해성 고분자를 포함시켜 소수성 약물 탑재 시에 그 효율성을 높여주고 약물의 흡수 및 지속적 방출을 도와줄 수 있도록 조절한다. That is, Tetronic of the present invention - caprolactone-by heparin conjugate comprises a hydrophobic biodegradable polymer when being heparin is covalently bonded to manufacture a terminal of a polymer having three or more branches, made of a micelle when mounted hydrophobic drug give increase its effectiveness and adjust them to help the absorption and sustained release of the drug. 또한 헤파린을 고분자 말단에 화학결합 함으로써 헤파린과 결합 특성을 갖는 생리활성 물질을 효과적으로 전달할 수 있는 전달체가 된다. In addition, the delivery system is that heparin can deliver a physiologically active substance having binding properties and heparin by chemically bonded to the polymer terminal effectively. 또한 이러한 다관능성 고분자 가지의 수만큼 증가된 기능기의 수에 따라 결합되는 헤파린의 양은 증가하며 이에 따라 향상된 생리활성을 갖는 고분자 미셀이 제조된다. Further increasing the amount of heparin that is coupled with the number of functional groups increases as the number of these kinds of multi-functional polymer, and whereby the polymer micelles having improved bioactive depending is prepared.

상기 헤파린은 헤파린, 재조합 헤파린(recombinant heparin), 헤파린 유도체(heparin derivative) 및 헤파린 유사체(heparin analogue)로 이루어진 군으로부터 1 종 이상 선택되는 것이 바람직하다. The heparin is preferably at least one selected from the group consisting of heparin, recombinant heparin (recombinant heparin), heparin derivatives (heparin derivative) and heparin analogs (heparin analogue).

상기 헤파린이 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체의 제조방법을 보다 상세히 설명하면, (a) 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 다관능기를 활성화시키는 단계; Step of the heparin when combined multifunctional described in more detail a method for producing an amphipathic high molecular heparin conjugates, (a) multi-functional, including a biodegradable polymer activate the functional groups of the amphipathic polymer copolymer; 및 (b) 상기 활성화된 다관능성 양친매성 고분자 중합체의 다관능기에 헤파린을 결합시키는 단계로 나눌 수 있다. And (b) it can be divided by coupling the heparin to the functional group of the activated multi-functional amphipathic polymer.

헤파린 결합방법으로는 공유 결합 (covalent bonding), 이온성 결합(ionic bonding), 비이온성 결합(nonionic bonding), 물리적인 흡착 (physical absorption), 또는 물리적인 혼합(physical blending)방법이 가능하고, 특히 공유결합은 하이드록실기(hydroxyl group), 카르복실기(carboxyl group), 아민기(amine group), 티올기(thiol group), 아지드기(azide group) 반응기를 이용한 공유결합이 바람직하다. Heparin-binding method, a covalent bond (covalent bonding), ionic bonding (ionic bonding), a non-ionic bond (nonionic bonding), physical adsorption (physical absorption), or physical mixing (physical blending) method is possible, in particular, covalent bond is a covalent bond with a hydroxyl group (hydroxyl group), a carboxyl group (carboxyl group), an amine group (amine group), thiol group (thiol group), azido group (azide group) reactor is preferred. 또한 공유결합은 그 형태에 따라 아미드 결합(amide bond); In addition, a covalent bond is an amide bond, depending on its type (amide bond); 우레탄 결합(urethane bone)과 같은 비분해성 결합(non-degradable bond); Non-cleavable linkage such as urethane linkage (urethane bone) (non-degradable bond); 및 에스테르 결합(ester bond), 안하이드라이드(anhydride bond)과 같은 분해성 결합(degradable bond)의 형태로 분류할 수 있다. And it can be classified in the form of an ester bond (ester bond), cleavable linkage (degradable bond) such as anhydride (anhydride bond).

이와 같이 제조된 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체(다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체)는 수중에 분산시킬 경우 임계미셀 농도 이상으로 가하면 손쉽게 자발적으로 미셀을 형성한다. Thus prepared Tetronic-caprolactone-heparin conjugate (multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate) when dispersed in water easily Applying less than the critical micelle concentration to form micelles spontaneously.

이러한 테트로닉-카프로락톤-헤파린 접합체 미셀에 성장인자가 결합될 수도 있다. The Tetronic-caprolactone - can be a growth factor bound to heparin conjugate micelles. 그 방법을 상세히 설명하면, 테트로닉-카프로락톤-헤파린(tetronic-polycaprolactone-heparin) 접합체(conjugate)를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고, 녹여서 미셀(micelle)을 형성시킨 후 상기 미셀에 성장인자를 투입하고 배양하여 헤파린과 성장인자를 결합시키는 단계로 제조가능하다. Is described the method in detail, Tetronic-caprolactone-heparin In a (tetronic-polycaprolactone-heparin) conjugate concentrations above the critical micelle concentration (critical micelle concentration) in distilled water, the (conjugate), and were melted and form micelles (micelle) then charged into the growth factor to the culture and micelles can be produced by coupling the heparin and growth factor.

또한, 이 미셀에 소수성 약물을 용액상으로 가하면 약물이 미셀의 소수성 중 앙부분에 끼어 들어가게 되어 약물이 탑재된다. Further, the drug is mounted Applying a hydrophobic drug in the micelle in the solution is held drug is interrupted in the center portion of the hydrophobicity of the micelle. 약물을 미셀 내부로 투입시키는 방법은 도 2에 나타낸 용매 증발법(solvent evaporation method)을 이용하는 것이 바람직하다. In the method of the drug into the micelles, it is preferable to use a solvent evaporation method (solvent evaporation method) shown in Fig. 이 미셀은 소수성 약물에 대하여 상당히 높은 탑재효율을 나타내며, 방출거동도 서서히 지속적으로 나타낸다. The micelles shows a significantly higher efficiency with respect to the hydrophobic drug, release behavior also gradually continually expressed by.

상기 소수성 약물로는 물에 대한 용해도가 10 ㎎/㎖ 이하인 난용성 약물 중 파클리탁셀, 케토코나졸, 이트라코나졸, 사이클로 스포린, 시사프라이드, 아세트아미노펜, 아스피린, 아세틸살리실산, 인도메타신, 나프로센, 와파린, 파파베린, 티오아벤 다졸, 미코나졸, 시나리진, 독소루비신, 오메프라졸, 콜레칼시페롤, 멜팔란, 니페디핀, 디곡신, 벤조산 트립토판, 타이로신, 페닐알라닌, 아즈트레오남, 이부프로펜, 펜옥시메틸페니실린, 탈리도마이드, 메틸테스토스테론, 프로클로르페라진, 히드로코티손, 디데옥시퓨린 뉴클레오사이드, 비타민 D2, 술폰아미드, 술포닐우레아, 파라아미노벤조산, 멜라토닌, 벤질페니실린, 클로람뷰실, 디아제핀, 디기톡신, 히드로코티손 뷰레이트, 메트로니다졸 벤조산염, 톨부타마이드, 프로스타 글란딘, 플루드로코티손, 그 To the hydrophobic drug is paclitaxel of solubility in water 10 ㎎ / ㎖ or less poorly soluble drugs, ketoconazole, itraconazole, cycloalkyl cyclosporine, cisapride, acetaminophen, aspirin, acetylsalicylic acid, indomethacin, or pro sen, warfarin, Papa papaverine, thio ahben imidazole, miconazole, or when lysine, doxorubicin, omeprazole, cholecalciferol, melphalan, nifedipine, digoxin, benzoic acid tryptophan, tyrosine, phenylalanine, Aztreonam, ibuprofen, phenoxy methyl penicillin, thalidomide, methyl testosterone , Pro chlor Blow Jin, hydrochloride cortisone, dideoxy purine nucleoside, vitamin D2, sulfonamide, sulfonyl urea, para-aminobenzoic acid, melatonin, benzyl penicillin, chlorambucil byusil, diazepine, digi toxin, hydrochloride cortisone view rate, metronidazole benzoate, tolyl butanone polyimide, prostaglandins, cortisone to Flood, and 세오풀빈, 미코나졸 질산염, 류코트라이엔 비포 억제제, 프로프라놀롤, 테오필린, 플러비 프로펜, 벤조산 나트륨, 벤조산, 리보플라빈, 벤조디아제핀, 페노바비탈, 글리뷰라이드, 설파이아진, 설파에틸티아디아졸, 디클로페낙 나트륨, 피니로인, 히오리다진히드로클로라이드, 브로피리민, 히드로클로로티아지드, 플로코나졸, 항생제, 소염 진통제, 마취제, 호르몬류, 고혈압 치료제, 당뇨병 치료제, 고지질증 치료제, 항바이러스제, 파킨슨병 치료제, 치매 치료제, 항 구토제, 면역 억제제, 궤양 치료제, 변비 치료제, 항 말라리아제 등이 바람직하 다. Seo pulbin, miconazole nitrate, flow KOTRA two yen Before inhibitor, propranolol, theophylline, Doppler ratio of propene, sodium benzoate, benzoic acid, riboflavin, benzodiazepine, phenobarbital, articles review fluoride, seolpayi triazine, sulfamic ethyl-thiadiazole, diclofenac sodium, Fini loin, great duck chopped hydrochloride, bromo flutes min, hydrochlorothiazide thiazides, flow to Kona sol, antibiotics, anti-inflammatory analgesics, anesthetics, hormones, anti-hypertensive agent, an antidiabetic agent, notice vaginosis agents, antiviral agents, Parkinson's disease agent, Alzheimer's the therapeutic agent, an anti-emetic, an immunosuppressant, a therapeutic agent ulcer, constipation agents, and the like, wherein malrariahje preferred.

또한 이처럼 소수성 약물이 탑재된 미셀에 성장인자를 추가로 첨가하면 성장인자가 생분해성 고분자인 헤파린과 결합하여 높은 성장인자의 탑재효율을 나타내며 방출거동도 서서히 지속적으로 나타낼 수 있다. Thus, also when the hydrophobic drug is further added to the growth factor to a growth factor with micelles in combination with a biodegradable polymer with heparin shows a high efficiency of growth factor release behavior it may be gradually continuously expressed. 상기 성장인자로는 섬유아세포성장인자(bFGF), VEGF, TGF-1을 포함하는 헤파린 결합 성장인자(HBGF, heparin binding growth factor); The growth factors include fibroblast growth factor (bFGF), VEGF, heparin binding growth factors, including TGF-1 (HBGF, heparin binding growth factor); Fibronectin, selectin, vitronetin을 포함하는 헤파린 결합 단백질; Heparin-binding proteins comprising the Fibronectin, selectin, vitronetin; PF-4, IL-8을 포함하는 헤파린 결합 케모카인(Chemokines); Heparin-binding chemokines (Chemokines) comprising a PF-4, IL-8; 보바인 세륨 알부민(BSA), 라이소자임(Lysozyme), 알파-락탈부민(a-lactalbumin), 인슐린(Insulin), 엘-클루타민(l-glutamine)을 포함하는 각종 펩타이드, 혈장 단백질, 효소, 호르몬 등이 바람직하다. Bordj cerium albumin (BSA), lysozyme (Lysozyme), alpha-Fractal prefecture (a-lactalbumin), insulin (Insulin), El-Inclusion vitamin various peptides, blood plasma proteins comprising (l-glutamine), enzymes, hormones, etc. it is preferred.

본 발명의 다관능기를 갖는 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체 미셀은 종래의 미셀을 형성하는 계면활성제형 고분자와는 달리 말단의 작용기에 헤파린을 도입하였으며, 다관능기를 가지고 있음으로 인하여 헤파린과 결합될 수 있는 많은 기회를 가지게 된다. Pluripotent multi having a functional group amphipathic polymer heparin conjugate micelles of the present invention, unlike a surfactant-type polymer to form a conventional micelles introduced heparin to the functional group of the terminal, and due to that have a functional group can be combined with heparin many opportunities to be had. 그에 따른 헤파린의 결합량 증가에 의해 주입형 생체재료에 필수적인 생체적합성이 향상되고, 또한 헤파린과 특이적으로 결합가능한 단백질들을 미셀의 외부에 안정하게 함유가 가능하여 종래의 단일약물 탑재 미셀보다 세포 재생 및 약물 전달에 효과적으로 응용될 수 있다는 장점을 가지고 있다. Therefore it according has been essential improved biocompatibility to the implant type biomaterial by a bonding amount increase of heparin, and heparin and specific to the combinable cells play than micelles with a conventional single-drug to contain a possible stably to the outside of the micelle protein and in drug delivery it has the advantage that it can be applied effectively.

이러한 헤파린이 결합된 접합체가 약물 전달체 등으로 응용되기 위해서는 생리활성을 가지는 헤파린 함량이 적어도 0.44 ㎍/㎍ 이상이 되어야 한다. In order for such heparin binding conjugate it is applied as a drug carrier, etc. The content of the heparin having a physiological activity must be at least 0.44 ㎍ / ㎍ above.

이상 설명한 본 발명의 다관능성 양친매성 고분자 공중합체(copolymer), 다 관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체 및 이들의 미셀을 이용하여 아래 상술할 세가지 대표적인 타입의 형태로 응용이 가능하다. This application is possible with the above-described multi-functional amphipathic polymer copolymer (copolymer), multi-functional amphipathic polymer and heparin conjugate form of three exemplary types described above to below using these micelles of the present invention.

첫째는 도 3의 개념도와 같이 다관능성 양친매성 고분자 공중합체를 수용액 상에서 소수성 약물과 함께 분산시켜 미셀(micelle)의 소수성 부분에는 약이 함유되고, 친수성 부분은 미셀(micelle)이 나노 크기로 물에 잘 분산되게 도와주어 흡수력을 증진시켜 주는 시스템이다. First, the water to multifunctional amphiphilic hydrophobic part, and contains a drug, a hydrophilic portion of the micelles (micelle) The nano-sized micelles (micelle) was dispersed with a hydrophobic drug in an aqueous solution of a polymer copolymer, such as the concept of Figure 3 given help to be well dispersed by a system that promotes absorption. 또한 미셀(micelle)의 코어(core)와 약물(drug)의 소수성/소수성 인력(interaction)으로 인하여 약물이 효과적으로 운반체에 담기면서 서서히 방출되는 시스템을 구현할 수 있다. It may also implement a core (core) and a drug (drug) hydrophobic / hydrophobic due to the force (interaction) system is a drug that is slowly released while Add to effective carrier of the micelle (micelle). 이것은 흡수에 문제가 있는 소수성 약물의 흡수를 돕고 약물의 손실을 최소화하여 지속적인 약물의 효과를 얻을 수 있다. This can achieve the effect of continuous medication to help with the absorption of hydrophobic drugs is a problem with minimal loss of drug absorption.

둘째는 도 4의 개념도와 같이 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체를 상기 다관능성 양친매성 고분자 공중합체와 같은 방법으로 물에 분산시키는데, 이때는 소수성 약물을 넣어주는 것이 아니라 성장인자 (Growth Factor)를 같이 넣어 주어 미셀(micelle)의 헤파린(heparin) 부위(part)에 성장인자가 결합(binding) 되어 있는 형태이다. The second is also a multifunctional amphiphilic polymer heparin conjugate as in the conceptual diagram of the four multi-functional for dispersing in water in the same way as the amphipathic polymer copolymer, that case not to put the hydrophobic drug into such a growth factor (Growth Factor) given the form of the heparin (heparin) region (part) of the micelle (micelle) the growth factor is combined (binding). 이것은 상처의 치유나 조직의 회복이 필요한 부위에 주사기를 이용, 주입(injection)하여 쉽게 응용될 수 있으며, 현재 사용되고 있는 스케폴드(scaffold)나 하이드로겔(hydrogel)과 같이 병행하여 사용되면 세포의 성장이나 분화를 증진시켜 줄 수 있을 것이다. This use of the syringe to the area that requires restoration of healing and tissue wounds, injection (injection) to easily be applied, and growth when used in combination, as currently used scaffold (scaffold) or hydrogel (hydrogel) in the cell to promote and differentiation will be able to give. 스케폴드(scaffold)와 하이드로겔(hydrogel)은 현재 회손된 조직에 채워져서 조직이 회복될 때까지 세포가 자랄 공간과 환경을 제공해 주는 장치(device)로 사용되고 있다. Scaffold (scaffold) and hydrogel (hydrogel) is used as a device (device) to grow the cells which provide the space and the environment until it is so filled with the current hoeson tissue recovery organization.

셋째는 도 5의 개념도와 같이 상기 두 번째 응용과 같이 미셀(micelle)을 제조할 때, 첫 번째 응용기술을 도입하는 것이다. Third, to introduce a first applied technology when preparing the micelles (micelle) such as the second application, as a conceptual diagram of FIG. 즉, 쉘(shell)부분에는 성장인자가 헤파린(heparin)과 결합한 상태이고, 코어(core)부분에는 조직의 염증이나 통증을 완화시켜주는 소수성 약물을 탑재한 더욱 향상된 시스템으로, 안정하게 세포재생 및 약물 전달에 효과적으로 응용될 수 있는 형태이다. That is, the shell (shell) and the portions in the state that the growth factor in combination with heparin (heparin), the core further improved system with a hydrophobic drug that was there alleviate inflammation or pain in the tissue (core) part, stable cell renewal and is a form of drug delivery can be applied effectively.

이하 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다. The present invention will be described in more detail through the following examples. 단, 실시예는 본 발명의 바람직한 일 실시예일 뿐 본 발명의 내용이 하기한 실시예에 한정되는 것은 아니다. However, the embodiment is not limited to the embodiments of this disclosure, this as an example a preferred embodiment of the invention.

실시예 1 Example 1

(테트로닉-카프로락톤(tetronic-polycaprolactone) 공중합체(copolymer)의 제조) (Tetronic-caprolactone (polycaprolactone-tetronic) Preparation of the copolymer (copolymer))

앰플에 카프로락톤(ε-caproclactone), 테트로닉(tetronic) 고분자, 주석계 옥토에이트(stannous octoate)를 함께 넣은 후, 60℃의 반응조에서 질소충전과 감압을 반복하여 내부의 수분과 공기를 완전히 제거한 후, 유리 앰플의 입구를 토치로 봉하였다. Caprolactone into ampoules (ε-caproclactone), Tetronic (tetronic) polymers, tin-octoate (stannous octoate) and then placed together, and repeating the nitrogen charge and a reduced pressure in a 60 ℃ tank completely remove the internal water and air was then torch sealed inlet of the glass ampoule.

이렇게 봉해진 앰플을 110℃의 반응조에서 20시간 동안 반응시켜 Tetronic-PCL 공중합체를 제조하였다. The thus sealed ampoules were reacted in the reactor of 110 ℃ for 20 hours, to manufacture the Tetronic-PCL copolymer. 반응이 종료된 후 앰플 안에 있는 결과물을 클로로포름에 녹인 다음 여과를 통해 불순물을 제거하였다. After the reaction was completed to remove the impurities through the filtered resultant is dissolved in chloroform in the ampoule. 제조된 공중합체 용액을 디에틸 에테르(Diethyl ether)에 투입하여 침전시킨 후, 여과를 통해 공중합체 (tetronic-PCL)를 얻어내고, 감압 건조기 내에서 상온에서 60시간 동안 건조시켜 잔여 용매를 제거하였다. Was precipitated by introducing the prepared copolymer solution in diethyl ether (Diethyl ether), out it obtained a copolymer (tetronic-PCL) via the filtration and in a vacuum drier and dried at room temperature for 60 hours to remove residual solvent .

실시예 2 Example 2

(테트로닉-카프로락톤-헤파린(tetronic-polycaprolactone-heparin) 접합체(conjugate)의 제조) (Tetronic-caprolactone-heparin (tetronic-polycaprolactone-heparin) Preparation of the conjugate (conjugate))

1단계 : 카복실기 개질 처리(Carboxylated Tetronic-PCL의 제조) Step 1: carboxyl-modifying treatment (Carboxylated Preparation of Tetronic-PCL)

디옥산(Dioxane) 용매에 Tetronic-PCL를 녹인 후, 석시닉 안하이드라이드(Succinic anhydride), DMAP (Dimethylaminopyridine), TEA (Triethylamine)를 각각 Dioxane 용매에 녹인 다음 순서대로 첨가하여, 30℃, 질소분위기하에서 24시간동안 반응을 진행시켰다. Dioxane (Dioxane) was dissolved Tetronic-PCL in a solvent, succinyl Nick anhydride (Succinic anhydride), DMAP (Dimethylaminopyridine), was added in the following order: dissolving an TEA (Triethylamine) in each Dioxane solvent, 30 ℃, nitrogen under the reaction was allowed to proceed for 24 hours. 반응진행 후에는 회전식 증발기를 이용하여 용매를 적당량 날린 후, 클로로포름에 녹이고 여과하여 불순물을 제거하였다. After the reaction progress was removed after the shot amount of the solvent using a rotary evaporator, and the impurity was filtered off and dissolved in chloroform. 제조된 공중합체 용액은 디에틸 에테르(Diethyl ether)에 투입하여 침전시킨 후 여과하고, 감압 건조기 내에서 60시간 동안 건조시켜 잔여 용매를 제거하여 분말상의 Carboxylated Tetronic-PCL 공중합체를 얻을 수 있었다. The copolymer solution is prepared of diethyl ether and then precipitated by introducing the (Diethyl ether) was filtered, dried in a vacuum dryer for 60 hours to remove the residual solvent can be obtained a powdery Carboxylated Tetronic-PCL copolymer.

2단계 : Tetronic-PCL과 헤파린(heparin)의 결합 Step 2: Tetronic-PCL combination of heparin (heparin)

0.05M MES(2-(3-morpholino)ethanesulfonic acid) 버퍼(buffer)를 제조하여 pH 5.6에서 반응을 진행하였다. To prepare a 0.05M MES (2- (3-morpholino) ethanesulfonic acid) buffer (buffer) was in progress the reaction at pH 5.6. 상기에서 제조된 Carboxylated Tetronic-PCL를 먼저 MES 버퍼(buffer)에 녹인 후, EDC(1-ethyl-3-(-3-dimethyl aminopropyl)carbodiimide)와 NHS (N-hydroxylsuccinimide)를 15분 간격으로 첨가하였다. Was dissolved in a Carboxylated Tetronic-PCL first MES buffer (buffer) prepared above, EDC (1-ethyl-3 - 3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide - () was added and NHS (N-hydroxylsuccinimide) every 15 minutes . 헤파린을 MES 버퍼(buffer)에 녹여서 첨가한 후 30℃에서 24시간 동안 반 응을 진행하였다. After the addition of heparin is dissolved in MES buffer (buffer) at 30 ℃ for 24 hours to proceed the reaction. 반응이 종료되면 공중합체 용액을 투석막(투석제한분자량 15000)에 담고 72시간 동안 증류수를 흘려주면서 미반응 물질과 잔여 화학물질을 제거하였다. When the reaction is completed contains the copolymer solution in a dialysis membrane (molecular weight 15,000 dialysis limitation) while flowing distilled water for 72 hours to remove unreacted material and the residual chemicals. 마지막으로 동결건조를 통하여 테트로닉-카프로락톤-헤파린(tetronic-polycaprolactone-heparin;Tetronic-PCL-heparin) 접합체를 얻었다. Caprolactone-heparin (tetronic-polycaprolactone-heparin; Tetronic-PCL-heparin) last Tetronic via lyophilization to obtain a joined body.

실시예 3 Example 3

(폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드 공중합체(Polyethylene oxide-Polylactide, PEO-PLA copolymer)의 제조) (Polyethylene oxide-poly producing a lactide copolymer (Polyethylene oxide-Polylactide, PEO-PLA copolymer))

건조된 삼구 둥근바닥플라스크에 8가 폴리에틸렌옥사이드(미국 shearwater社) 2g과 락타이드 5g, 및 옥토산 제일주석(stannous octoate) 0.3g을 80ml의 톨루엔(toluene)에 첨가하여 용해시켰다. 8. The polyethylene oxide in a dried three-necked round bottom flask (US shearwater 社) 2g and lactide 5g, loam and foremost tin (stannous octoate) 0.3g was dissolved by the addition of toluene (toluene) in 80ml. 상기 반응용액에 컨덴서를 연결한 후 질소를 충전하여 질소분위기로 만든 다음 섭씨 110℃의 반응조에서 60시간 동안 반응시켰다. Charge the after connecting the condenser to the reaction solution, nitrogen made with a nitrogen atmosphere, and then was reacted for 60 hours in a reaction tank of 110 ° C ℃. 반응 종료 후 상기 반응 용액을 클로로포름(CHCl 3 )에 녹인 다음 여과를 통해 불순물을 제거하였다. After completion of the reaction to remove the impurities through the following filtration was dissolved in the reaction solution, chloroform (CHCl 3). 상기 반응 용액을 디에틸에테르(Diethylether)에 침전시킨 후, 공극 0.2㎛의 막으로 여과를 통해 반응물을 얻었다. After precipitation of the reaction solution in diethyl ether (Diethylether), to obtain a reaction product by filtration of the air gap 0.2㎛ film. 위의 과정을 두 번 반복한 후, 상온에서 60시간 동안 진공 건조시켜 잔여 용매를 제거하여 8 개의 관능기를 갖는 폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드 공중합체를 얻었다. After repeating the above procedure twice, and vacuum dried for 60 hours at room temperature to remove any residual solvent (ethylene oxide) having a functional group of 8 - to obtain a polylactide copolymer.

실시예 4 Example 4

(폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드-헤파린 접합체 (PEO-PLA-Heparin conjugate)의 제조) (Polyethylene oxide-poly lactide-Preparation of heparin conjugate (PLA-PEO-Heparin conjugate))

1단계 : 카복실기 개질 처리(Carboxylated PEO-PLA의 제조) Step 1: carboxyl-modifying treatment (Carboxylated Preparation of PEO-PLA)

250ml 둥근바닥플라스크를 질소분위기로 준비한 다음 다이옥산(dioxane) 용매 150ml를 넣고, 상기 실시예 3로부터 얻은 8가 폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드 공중합체 10g을 용해시켰다. Prepared 250ml round bottom flask with a nitrogen atmosphere and then into a dioxane (dioxane) solvent 150ml, 8 obtained from Example 3 (ethylene oxide) - to dissolve the polylactide copolymers 10g. 30분 동안 교반하여 완전히 용해시킨 후 숙신산무수물(Succinicanhydride) 0.500g, 디메틸아미노피리딘(Dimethylaminopyridine, DMAP) 0.488g, 트리에틸아민(Triethylamine, TEA) 0.406g이 각각 용해된 다이옥산 용액을 다시 첨가하였다. 30 min. Stirring and was completely dissolved after the addition of succinic anhydride (Succinicanhydride) 0.500g, dimethylaminopyridine (Dimethylaminopyridine, DMAP) 0.488g, triethylamine (Triethylamine, TEA) 0.406g The solution was respectively dissolved again in dioxane for. 질소분위기를 유지하며 섭씨 30℃의 반응조에서 24시간동안 반응시켰다. Maintaining a nitrogen atmosphere, and reaction was carried out for 24 hours in a reaction vessel of 30 ° C ℃. 반응 종료 후, 회전식 증발기를 이용하여 용매를 적당량 날린 후클로로포름에 녹이고 여과하여 불순물을 제거하였다. After the completion of the reaction, using a rotary evaporator, the shot amount of the solvent to remove impurities by filtration and dissolved in chloroform. 상기 반응 용액을 디에틸에테르(Diethylether)에 침전시킨 후 공극 0.2㎛의 막으로 여과한 다음 상기 과정을 두 번 반복하였다. After precipitation of the reaction solution in diethyl ether (Diethylether) was filtered into the pore 0.2㎛ film was then repeating the process two times. 감압 건조기 내에서 60시간 동안 상온 진공건조시켜 잔여 용매를 제거하여 말단이 카르복실기로 개질된 8가 폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드 공중합체를 얻었다. To within a vacuum dryer for 60 hours at room temperature and dried in vacuum to remove the remaining solvent and the terminal 8 is modified to a carboxyl group of polyethylene oxide - to obtain a polylactide copolymer.

증류수 1000ml에 2-(3-모르포리노)에탄술폰산 (2-(3-morpholino)ethanesulfonic acid, MES) 4.88g을 용해시켜 0.05 MES 완충용액을 제조하였다. Dissolving the 2- (3-morpholino) ethanesulfonic acid (2- (3-morpholino) ethanesulfonic acid, MES) 4.88g 1000ml of distilled water to prepare a 0.05 MES buffer solution. 상기 카르복실화된 8가 폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드 공중합체 5g을 50ml의 MES 완충용액에 가하여 완전히 용해시켰다. Wherein the carboxylated polyethylene oxide 8 - completely dissolved was added to polylactide copolymer 5g in MES buffer solution of 50ml. 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 (1-ethyl-3-(-3-dimethyl aminopropyl)carbodiimide, EDC) 0.312g와 N-하이드록시숙신이미드 (N- hydroxylsuccinimide, NHS) 0.094g을 15분 간격으로 첨가하여 폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드 공중합체의 말단(카르복실기)를 활성화하였다. 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (1-ethyl-3 - (- 3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide, EDC) 0.312g with N- hydroxy succinimide (N- hydroxylsuccinimide, NHS) by the addition of 0.094g of 15 minutes the polyethylene oxide were enable terminal (carboxyl group) of a polylactide copolymer.

2단계 : PEO-PLA와 헤파린(heparin)의 결합 Step 2: The combination of PLA-PEO and heparin (heparin)

상기 실시예 3의 1단계로부터 얻은 활성화 용액을 헤파린 9.6g이 녹아있는 MES 완충용액 150ml에 5분간에 걸쳐 적하하면서 혼합한 후 질소 분위기 하 섭씨 30℃에서 24시간 동안 반응을 진행하였다. After the activation solution from step 1 of Example 3 was mixed dropwise over a period of 5 minutes in the MES buffer solution, 150ml dissolved 9.6g heparin was carried out for reaction for 24 hours in a nitrogen atmosphere at 30 ° C ℃. 반응이 진행된 후 상기 결합체 용액을 투석막(투석제한분자량 15000)에 담고 72시간동안 증류수를 흘려주어 분자량이 낮은 미반응 물질과 잔여 화학물질을 제거하였다. After the reaction was conducted to remove the dialysis membrane and the solution containing the conjugate (dialysis limit molecular weight 15,000) it was given under flowing distilled water for 72 hours in a low molecular weight, unreacted material and the residual chemicals. 이로부터 얻어진 용액을 동결건조기 내에서 잔여 수분을 제거하여 흰색의 스펀지상의 8가 폴리에틸렌옥사이드-폴리락타이드-헤파린 결합체를 얻었다. The solution obtained therefrom by removing the residual water in the freeze-dryer is 8 on the white sponge polyethylene oxide-poly lactide-heparin conjugate was obtained.

실시예 5 Example 5

(폴리락타이드-폴리에틸렌옥사이드 공중합체(Polylatide-Polyethylene oxide, PLA-PEO copolymer)의 제조) (Polylactide-Preparation of polyethylene oxide copolymer (Polylatide-Polyethylene oxide, PLA-PEO copolymer))

1단계 : 4가 폴리락타이드의 합성 Step 1: 4 The synthesis of polylactide

건조된 앰플에 락타이드(L-Lactide) 10g과 펜타에리쓰리톨(pentaerythritol) 0.236g를 넣었다. Pentaerythritol (pentaerythritol) to lactide (L-Lactide) 10g and penta the dried ampoules were placed 0.236g. 이후 톨루엔 5ml에 옥토산 제일주석(stannous octoate) 1.406g을 녹인 다음, 이 중 1ml를 취하여 앰플에 첨가하였다. After the acid was dissolved in toluene stannous loam 5ml (stannous octoate) 1.406g taking the following, of which 1ml was added to the ampoule. 상기 앰플을 섭씨 60℃의 반응조에서 30분 동안 질소충전과 감압을 반복하여 내부의 수분과 공기를 완전히 제거한 후, 앰플의 입구를 봉하였다. After the ampule by the repeated charging and nitrogen pressure for 30 minutes in a reaction vessel of 60 ° C ℃ completely remove the internal water and air, and the rod entrance of the ampoule. 이렇게 봉해진 앰플을 섭씨 130℃의 반응조에서 10 시간 동안 반응시켰다. The thus sealed ampule in the reaction tank of 130 ℃ Celsius, the reaction was carried out for 10 hours. 반응이 종료된 후 앰플을 파괴하고, 클로로포름에 녹인 다음 여과를 통해 불순물을 제거하였다. After the reaction was completed destroy the ampoule, which was then filtered to remove impurities from the dissolved in chloroform. 상기 반응 용액을 디에틸에테르(Diethylether)에 침전시킨 후 공극 0.2㎛의 막으로 여과를 통해 반응물을 얻었다. After precipitation of the reaction solution in diethyl ether (Diethylether) to give the reaction product by filtration of the air gap 0.2㎛ film. 위의 과정을 두 번 반복한 후 상온에서 60시간 동안 진공 건조시켜 잔여 용매를 제거하고 백색의 분말상을 갖는 4가 폴리락타이드를 얻었다. After repeating the above procedure twice and vacuum dried for 60 hours at room temperature to remove the remaining solvent and 4 to obtain a polylactide having a powdery white.

2단계 : 폴리에틸렌옥사이드 말단의 카르복실화 Step 2: carboxylated polyethylene oxide terminal

250ml 둥근바닥플라스크를 질소분위기로 준비한 다음 다이옥산(dioxane) 용매 150ml를 넣고, 선형의 폴리에틸렌옥사이드 40g을 30분 동안 교반하여 완전히 용해됨을 확인한 후, 숙신산무수물(Succinicanhydride) 1.922g, 디메틸아미노피리딘(Dimethylaminopyridine, DMAP) 1.954g, 트리에틸아민(Triethylamine, TEA) 1.62g이 각각 용해된 다이옥산 용액을 다시 첨가하였다. Prepared 250ml round bottom flask with a nitrogen atmosphere and then into a dioxane (dioxane) solvent, 150ml, then by a linear polyethylene oxide 40g stirred for 30 minutes, confirming that the complete dissolution, succinic anhydride (Succinicanhydride) 1.922g, dimethylaminopyridine (Dimethylaminopyridine, DMAP) 1.954g, triethylamine (triethylamine, TEA) 1.62g were again added to each dissolved in dioxane solution. 질소분위기를 유지하며 섭씨 30℃의 반응조에서 24시간 동안 반응시켰다. Maintaining a nitrogen atmosphere, and reaction was carried out for 24 hours in a reaction vessel of 30 ° C ℃. 반응 종료 후 회전식 증발기를 이용하여 용매를 적당량 날린 후, 클로로포름에 녹이고 여과하여 불순물을 제거하였다. After the shot after completion of the reaction by using a rotary evaporator to an appropriate amount of solvent, and filtered to remove impurities dissolved in chloroform. 상기 반응 용액을 디에틸에테르(Diethylether)에 침전시킨 후 공극 0.2㎛의 막으로 여과한 다음 상기 과정을 두 번 반복하였다. After precipitation of the reaction solution in diethyl ether (Diethylether) was filtered into the pore 0.2㎛ film was then repeating the process two times. 감압 건조기 내에서 60시간 동안 상온 진공 건조시켜 잔여 용매를 제거하여 말단이 카르복실기로 개질된 선형의 폴리에틸렌옥사이드 중합체를 얻었다. Vacuum at room temperature in a vacuum drier for 60 hours and dried to remove residual solvent to obtain a terminal-modified linear polyethylene oxide polymer to the carboxyl group.

3단계 : 4가 폴리락타이드-폴리에틸렌옥사이드 공중합체의 제조 Step 3: 4 polylactide - Preparation of polyethylene oxide copolymer

상기 실시예 5의 2단계로부터 얻은 카르복실로 개질된 선형의 폴리에틸렌옥사이드 30.8g을 메틸렌클로라이드(methylene chloride, MC) 100ml에 넣고 교반을 통해 완전히 용해시킨 후 N,N-디싸이클로헥실카보디이미드(N,N- dicyclohexylcarbodiimide, DCC) 1.246g, 디메틸아미노피리딘(Dimethylaminopyridine, DMAP) 0.148g을 각각 메틸렌클로라이드에 녹여 첨가하였다. Then put the carboxylic linear 30.8g of polyethylene oxide modified with from step 2 in Example 5 in methylene chloride (methylene chloride, MC) 100ml complete dissolution over a stirred N, N- di-cyclo-hexyl Dorsett carbodiimide ( the N, N- dicyclohexylcarbodiimide, DCC) 1.246g, dimethylaminopyridine (dimethylaminopyridine, DMAP) 0.148g were each added and dissolved in methylene chloride. 상기 실시예 5의 1단계로부터 얻은 4가의 폴리락타이드 20g을 메틸렌클로라이드 100ml에 완전히 용해시킨 후 상기 혼합 용액에 1시간에 걸쳐 천천히 적하하여 혼합하였다. After complete dissolution of the tetravalent polylactide 20g obtained from Step 1 of Example 5 in methylene chloride 100ml were mixed and slowly added dropwise over 1 hour to the mixture. 반응이 진행됨에 따라 서서히 디싸이클로헥실카보디유리아(dicyclohexylcarbodiurea, DCU)가 생성되어 침전되었다. As the reaction proceeds slowly di-cyclo-hexyl Dorsett body urea is precipitated out is generated (dicyclohexylcarbodiurea, DCU). 24시간 동안 질소 분위기 하에서 반응을 진행한 후 공극 0.2㎛의 막으로 여과하여 부산물을 제거하였다. After proceeding the reaction under a nitrogen atmosphere for 24 hours to remove the by-product by filtration in the pores 0.2㎛ film. 상기 반응 용액을 디에틸에테르(Diethylether)에 침전시킨 후 여과한 다음 상기 과정을 두 번 반복하였다. After precipitation of the reaction solution in diethyl ether (Diethylether) which was then repeat the above procedure, double-filtered. 감압 건조기 내에서 60시간 동안 상온 진공 건조시켜 잔여 용매를 제거하여 4가 폴리락타이드 말단에 선형의 폴리에틸렌옥사이드가 결합된 형태의 4가 폴리락타이드-폴리에틸렌옥사이드 공중합체를 얻었다. To obtain a polyethylene oxide copolymer to within a vacuum dryer for 60 hours at room temperature and dried in vacuum to remove residual solvent 4 is a linear polylactide of polyethylene oxide 4, of the bound form at the terminal polylactide.

실시예 6 Example 6

(폴리락타이드-폴리에틸렌옥사이드-헤파린 접합체(PLA-PEO-Heparin conjugate)의 제조) (Polylactide-polyethylene oxide - Preparation of heparin conjugate (PLA-PEO-Heparin conjugate))

1단계 : 카복실기 개질 처리(Carboxylated PLA-PEO의 제조) Step 1: carboxyl-modifying treatment (Carboxylated Preparation of PLA-PEO)

증류수 1000ml에 2-(3-모포리노)에탄술폰산 (2-(3-morpholino)ethanesulfonic acid, MES) 4.88g을 녹여 0.05 MES 완충용액을 제조하였다. In 1000ml of distilled water by dissolving 2- (3-blanket Reno) ethanesulfonic acid (2- (3-morpholino) ethanesulfonic acid, MES) 4.88g was prepared in 0.05 MES buffer solution. 상기 실시예 5로부터 얻은 4가 폴리락타이드-폴리에틸렌옥사이드 공중합체 5g을 50ml의 MES 완충용액에 가하여 완전히 용해시켰다. 4 is obtained from Example 5, polylactide-polyethylene oxide was added to and completely dissolved copolymer 5g in MES buffer solution of 50ml. 1-에틸-3-(3-디메틸아미노프로필)-카보디이미드 하이드로클로라이드 (1-ethyl-3-(-3-dimethyl aminopropyl)carbodiimide, EDC) 0.156g와 N-하이드록시숙신이미드 (N-hydroxylsuccinimide, NHS) 0.047g을 15분 간격으로 첨가하여 테트로닉 ® -폴리락타이드 공중합체의 말단을 활성화하였다. 1-ethyl-3- (3-dimethylaminopropyl) carbodiimide hydrochloride (1-ethyl-3 - (- 3-dimethyl aminopropyl) carbodiimide, EDC) 0.156g with N- hydroxy succinimide (N- hydroxylsuccinimide, by the addition of NHS) 0.047g 15 min Tetronic ® - it was enable terminal of polylactide copolymer.

2단계 : PLA-PEO와 헤파린(heparin)의 결합 Step 2: The combination of PLA-PEO and heparin (heparin)

상기 실시예 6의 1단계에서 제조된 활성화 용액을 헤파린 4.8g이 녹아있는 MES 완충용액 150ml에 5분간에 걸쳐 적하하면서 혼합한 후 질소 분위기 하 섭씨 30℃에서 24시간 동안 반응을 진행하였다. After the activated solution prepared in Step 1 in Example 6 was mixed with 4.8g of heparin is added dropwise over a period of 5 minutes in the MES buffer solution was dissolved in 150ml proceed the reaction for 24 hours in a nitrogen atmosphere at 30 ° C ℃. 반응 종료 후 상기 결합체 용액을 투석막(투석제한분자량 15000)에 담고 72시간 동안 증류수를 흘려주어 분자량이 낮은 미반응 물질과 잔여 화학물질을 제거하였다. After completion of the reaction to remove the dialysis membrane and the solution containing the conjugate (dialysis limit molecular weight 15,000) it was given under flowing distilled water for 72 hours in a low molecular weight, unreacted material and the residual chemicals. 이로부터 얻어진 용액을 동결건조기 내에서 잔여 수분을 제거하여 흰색의 스펀지상의 4가 폴리락타이드-폴리에틸렌옥사이드-헤파린 결합체를 얻었다. The solution obtained therefrom to remove the residual water in the freeze-dryer by the four on the white sponge polylactide-polyethylene oxide - to obtain a heparin conjugate.

실시예 7 Example 7

(소수성 약물(indomethacin)이 탑재된 테트로닉-카프로락톤(tetronic-polycaprolactone) 공중합체(copolymer)의 미셀(micelle)의 제조) (A hydrophobic drug (indomethacin) is equipped with the Tetronic-caprolactone (polycaprolactone-tetronic) Preparation of micelle (micelle) of the copolymer (copolymer))

고분자 미셀의 제조는 도 2에 나타낸 용매 증발법을 따랐다. Preparation of polymeric micelle is followed solvent evaporation method shown in FIG.

실시예 1에서 제조된 Tetronic-PCL 공중합체를 임계 미셀 농도(Critical Micelle Concentration; CMC) 이상의 농도로 증류수에 녹여서 고분자 사슬의 소수성 힘에 의해서 자발적으로 수용액 상에서 미셀을 형성하게 하였다. Example 1 a Tetronic-PCL copolymer produced at the critical micelle concentration; dissolved in distilled water to a concentration of at least (Critical Micelle Concentration CMC) was the formation of micelles on a voluntary basis by an aqueous solution to the hydrophobic power of the polymer chain.

상기 CMC는 파이렌 (Pyrene)이라는 형광물질을 아세톤에 녹여서 일정량을 여 러 개의 유리병에 똑같이 넣고 아세톤을 증발시켜 준 다음 여기에 3차 증류수에 농도별로 다양하게 녹인 Tetronic-PCL 공중합체를 넣고 형광 분석(Fluorescence spectroscopy)을 하여 파악하였다. The CMC is pyrene (Pyrene) of the fluorescent material is dissolved in acetone dollars over a certain amount of the same into a glass bottle, insert the Tetronic-PCL copolymers variously dissolved at different concentrations in the distilled water in the following here gave Evaporation of the acetone fluorescence It was identified by the analysis (Fluorescence spectroscopy). 즉, 일정 농도에서 미셀이 형성되면 형광 산란이 급격히 증가하여 분석되는 것이다. That is, if the micelle formation at a concentration will be analyzed by the fluorescence scattering increases rapidly. 테트로닉 고분자의 임계 미셀 농도는 0.02g/l 내지 0.03g/l 이였으며, 테트로닉-폴리카프로락톤 공중합체는 0.02g/l 내지 0.03g/l이 확인되었다. Te threshold of tronic polymeric micelle concentration 0.02g / l to 0.03g / l is and that, Tetronic-polycaprolactone copolymer was viewed 0.02g / l to 0.03g / l. 이 결과는 도 9에 테트로닉 고분자와 비교하여 나타내었다. The results are shown as compared to the Tetronic polymers in Fig. 도 9에 나타난 바와 같이, 두 가지 경우 모두 낮은 농도에서 안정된 미셀을 형성함을 확인할 수 있었다. As shown in Figure 9, in both cases it was confirmed that the formation of stable micelles at low concentrations.

상기 미셀 용액에 소수성 약물인 IMC를 메탄올에 녹여서 투입하여 미셀의 소수성 중앙부분에 메탄올과 함께 약물이 끼어 들어가도록 하였다. The micelle solution was added by dissolving a hydrophobic drug, IMC in methanol was interrupted so that the drug into methanol with the hydrophobic center of the micelle.

회전식 증발장치로 메탄올을 증발시켜서 고분자 미셀의 중앙부분에 IMC(indomethacin)를 탑재시켰다. Evaporation of the methanol with a rotary evaporator was equipped with a IMC (indomethacin) at the center portion of the polymeric micelles.

미셀내부에 탑제되지 않은 약물을 제거하기 위해 원심분리 장치를 이용 1000rpm으로 10분 처리해주고 아래에 가라앉은 IMC를 제외한 용액을 취하였다. Removing non tapje drug inside the micelle by using the centrifugal separator was 1000rpm for 10 bun haejugo takes a solution other than the IMC to drift down to the bottom. 미셀을 안정화시키기 위해서 초음파(sonication)를 30분 동안 쐬어주고 마지막으로 이것을 48시간 동안 동결건조 하여 소수성 약물을 탑제한 미셀을 제조하였다. Giving ssoeeo ultrasound (sonication) to stabilize micelles for 30 minutes to prepare a freeze-dried for the last 48 hours it tapje hydrophobic drug micelles.

Indomethacin(IMC)는 하기 화학식 7로 나타내며, 관절염 소염진통제로 많이 사용되며, 연구용 약물로도 널리 사용되고 있다. Indomethacin (IMC) is to represent by the following formula (7), are widely used in arthritis, NSAIDs, it is also widely used as research drug.

Figure 112005026893546-pat00007

상기 미셀은 Tetronic-PCL 공중합체를 0.1 g을 100 ㎖의 3차 증류수에 녹여 2 중량%의 수용액을 제조한 후 동적광산란(Dynamic light scattering, DLS) 분석 방법을 이용하여 수용액 상에서의 크기를 확인하였다. The micelles were using the Tetronic-PCL copolymer 0.1 g of then preparing an aqueous solution of 2% by weight is dissolved in the distilled water of 100 ㎖ dynamic light scattering (Dynamic light scattering, DLS) analysis confirmed the size of the aqueous solution . 테트로닉-폴리카프로락톤 공중합체의 미셀 구조의 지름은 24 ㎚ 내지 25 ㎚이었으며, 소수성의 약물을 함유할 경우 미셀 구조의 크기가 증가하는 것을 확인하였으며 그 크기는 테트로닉-폴리카프로락톤 공중합체의 경우 187 nm 내지 188 nm이었다. Tetronic - was polycaprolactone diameter of the micelle structure is 24 ㎚ to 25 ㎚ of the copolymer, if containing the hydrophobic drug it was found that the size of the micelle structure increases the size of Tetronic-of polycaprolactone copolymer If it was 187 nm to 188 nm.

실시예 8 Example 8

(섬유모세포 성장인자와 결합된 테트로닉-카프로락톤-헤파린(tetronic-polycaprolactone-heparin) 접합체(conjugate) 미셀의 제조) (Fibroblast growth factor in combination with Tetronic-caprolactone-heparin (tetronic-polycaprolactone-heparin) conjugate (conjugate) Preparation of the micelles)

상기 실시예 2에서 제조된 다관능성 고분자-헤파린 결합체(테트로닉-카프로락톤-헤파린(tetronic-polycaprolactone-heparin) 접합체(conjugate))를 2중량%의 농도(임계 미셀 농도 이상)로 50㎖ 수용액에 녹여서 미셀 용액을 제조하였다. 50㎖ the aqueous solution to the concentration (the critical micelle concentration or more) of 2% by weight in Example 2. The multi-functional polymer prepared in-heparin conjugates (heparin (tetronic-polycaprolactone-heparin) conjugate (conjugate) Tetronic-caprolactone) dissolved to prepare a micelle solution.

상기 CMC는 파이렌 (Pyrene)이라는 형광물질을 아세톤에 녹여서 일정량을 여러 개의 유리병에 똑같이 넣고 아세톤을 증발시켜 준 다음 여기에 3차 증류수에 농도별로 다양하게 녹인 Tetronic-PCL-헤파린 결합체를 넣고 형광 분석(Fluorescence spectroscopy)을 하여 파악하였다. The CMC is pyrene (Pyrene) of the fluorescent material and the mixture is dissolved in a quantity of acetone equal to the number of vials dissolved vary at different concentrations in the distilled water in the following here gave Evaporation of the acetone into the Tetronic-PCL- heparin conjugate fluorescence It was identified by the analysis (Fluorescence spectroscopy). 즉, 일정 농도에서 미셀이 형성되면 형광 산란 이 급격히 증가하여 분석되는 것이다. That is, if the micelle formation at a concentration will be analyzed by the fluorescence scattering increases rapidly. 테트로닉 고분자의 임계 미셀 농도는 0.02g/l 내지 0.03g/l 이였으며, 테트로닉-폴리카프로락톤-헤파린 결합체는 0.10g/l 내지 0.11g/l이 확인되었다. Te threshold of tronic polymeric micelle concentration 0.02g / l to 0.03g / l is and that, Tetronic-polycaprolactone-heparin conjugate was confirmed that the 0.10g / l to 0.11g / l. 이 결과는 도 10에 테트로닉 고분자와 비교하여 나타내었다. The results are shown as compared to the Tetronic polymers in Fig.

상기 미셀 용액에 헤파린과 결합하는 성질을 갖고 있는 섬유모세포 성장인자(basic-Fibroblast Growth Factor, bFGF)를 400ng/㎖를 넣어주고 24시간 동안 21℃에서 배양하여 헤파린과 성장인자가 결합하도록 하였다. Said to have the property of binding to heparin and to put the micelle solution fibroblast growth factor (basic-Fibroblast Growth Factor, bFGF) to 400ng / ㎖ by incubation at 21 ℃ for 24 hours to couple the heparin and growth factor.

결합하지 않은 잔여 성장인자를 제거하기 위해서 10중량%의 진한 폴리에틸렌옥사이드(Poly ethylene oxide, PEO) 1㎖를 넣어주어 상대적으로 용해도가 낮아진 성장인자가 미세한 고체로 떨어지게 되도록 하였다(salting-out salt effect). Was allowed to fall into a given 10% of concentrated (ethylene oxide) (Poly ethylene oxide, PEO) of the weight 1㎖ a relatively lower solubility of a growth factor to the fine solid in order to remove residual growth factors do not bind (salting-out effect salt) .

이 용액을 원심분리(1000rpm, 10분) 해주고, 상층액을 취하여 초음파를 30분 동안 쐬어 준 다음 48시간 동안 동결건조하여 다관능성 고분자-헤파린 미셀을 제조하였다. This solution was centrifuged (1000rpm, 10 minutes) haejugo, taking the supernatant and freeze for 48 hours gave ssoeeo for 30 minutes, ultrasonic drying polyfunctional polymer-heparin micelle was prepared.

상기 bFGF (basic fibroblast growth factor, FGF-2)는 분자량이 15000 정도 되는 성장인자(Growth factor; GF)로, 특정 세포가 잘 성장하고 분화가 가능하도록 신호를 주는 단백질이며, 섬유모세포(Fibroblast) 뿐만 아니라 다른 여러 종류의 세포에도 그 효과를 보이는 것으로 알려져 있다. The bFGF (basic fibroblast growth factor, FGF-2) is a growth factor which is approximately 15,000 molecular weight; a (Growth factor GF), as a protein to a signal specific cells grow well and to be able to be differentiated, fibroblasts (Fibroblast) as it is known to exhibit the effect on other types of cells. 특히 헤파린이 여러 가지 많은 단백질들과 특이적인 결합을 할 수 있다는 것은 이미 많이 알려진 사실이며, 헤파린과 bFGF와의 특이적인 결합이 가능하며, 헤파린과 결합되어 존재하는 bFGF는 그 반감기 또한 길어질 수 있다고 알려져 있다. In particular, it is in fact already known much that heparin can be a specific binding with many different proteins, can be specific binding between heparin and bFGF and, bFGF existing combined with heparin is known to be lengthy Also, the half-life .

상기 미셀은 다관능성 고분자 - 헤파린 결합체 0.1g을 100㎖의 3차 증류수에 녹여 2중량%의 수용액을 제조한 후 동적광산란 분석(Dynamic light scattering, DLS) 방법을 이용하여 수용액 상에서의 크기를 확인하였다. The micelles are multi-functional polymer was confirmed that the size of the aqueous solution using a dynamic light scattering analysis (Dynamic light scattering, DLS) method after preparing an aqueous solution of 2 weight% by dissolving 0.1g heparin conjugate in the distilled water of 100㎖ .

다관능성 고분자 - 헤파린 결합체는 113㎚ 내지 114㎚의 지름을 가지고 있음이 확인되었다. Multifunctional polymer-heparin conjugate was confirmed that with a diameter of 113㎚ to 114㎚. 소수성의 약물을 함유할 경우 미셀 구조의 크기가 증가하는 것을 확인하였으며 그 크기는 테트로닉-폴리카프로락톤-헤파린 결합체의 경우 210nm 내지 211nm로 확인되었다. When containing the hydrophobicity of the drug it was confirmed that the size of the micelle structure is increased in size Tetronic - polycaprolactone - for heparin conjugate was found to be 210nm to 211nm. 또한 헤파린과 결합특성을 가지고 있는 섬유모세포 성장인자를 미셀에 결합시켰을 경우 테트로닉-폴리카프로락톤-헤파린 결합체의 크기가 192nm 내지 193nm로 증가하였다. In addition, if sikyeoteul combining fibroblast growth factor with a heparin-binding properties and the micelle Tetronic - polycaprolactone - the size of the heparin conjugate had increased to 192nm to 193nm.

실시예 9 Example 9

(소수성 약물이 탑제되고 성장인자와 결합된 Tetronic-PCL-Heparin 미셀의 제조 -이중약물전달) (Preparation of Tetronic-PCL micelles Heparin-binding substance is a hydrophobic tapje and growth factor-dual drug delivery)

상기 실시예 2에서 제조된 다관능성 고분자-헤파린 결합체(테트로닉-카프로락톤-헤파린(tetronic-polycaprolactone-heparin) 접합체(conjugate))를 2중량%의 농도로 50㎖ 수용액에 녹인 후, 고분자 사슬의 소수성 힘에 의해서 자발적으로 수용액 상에서 미셀을 형성하게 하였다. Example 2 The multi-functional polymer prepared in-heparin conjugate (Tetronic-caprolactone-heparin (tetronic-polycaprolactone-heparin) conjugate (conjugate)) was dissolved in an aqueous solution 50㎖ at a concentration of 2% by weight, of the polymer chain spontaneous micelle in aqueous solution as by hydrophobic forces were formed.

이 용액에 소수성 약물인 IMC를 메탄올에 녹여서 투입하여 미셀의 소수성 중앙부분에 메탄올과 함께 약물이 끼어 들어가도록 하였다. The hydrophobic center of the micelle and the hydrophobic drug is dissolved In the IMC in methanol To this solution was added to the drug into interrupted with methanol.

회전식 증발장치로 메탄올을 증발시켜서 고분자 미셀의 중앙부분에 IMC(indomethacin)를 탑재시켰다. Evaporation of the methanol with a rotary evaporator was equipped with a IMC (indomethacin) at the center portion of the polymeric micelles.

미셀내부에 탑제되지 않은 약물을 제거하기 위해 원심분리 장치를 이용 1000 rpm으로 10 분 처리해주고 아래에 가라앉은 IMC를 제외한 용액을 취하였다. To remove non-tapje drug inside the micelles for 10 minutes using the centrifugal separator to 1000 rpm and the solution was taken except haejugo IMC drift down below.

헤파린과 결합하는 성질을 갖고 있는 섬유모세포 성장인자(basic-Fibroblast Growth Factor, bFGF)를 400ng/㎖를 넣어주고 24시간 동안 21℃에서 배양하여 헤파린과 성장인자가 결합하도록 하였다. Fibers that have the property of binding heparin to put the cell growth factors (basic-Fibroblast Growth Factor, bFGF) to 400ng / ㎖ by incubation at 21 ℃ for 24 hours to couple the heparin and growth factor.

결합하지 않은 잔여 성장인자를 제거하기 위해서 10중량%의 진한 폴리에틸렌옥사이드(Poly ethylene oxide, PEO) 1㎖를 넣어주어 상대적으로 용해도가 낮아진 성장인자가 미세한 고체로 떨어지게 되도록 하였다(salting-out salt effect). Was allowed to fall into a given 10% of concentrated (ethylene oxide) (Poly ethylene oxide, PEO) of the weight 1㎖ a relatively lower solubility of a growth factor to the fine solid in order to remove residual growth factors do not bind (salting-out effect salt) .

이 용액을 원심분리(1000rpm, 10분) 해주고, 상층액을 취하여 초음파를 30분 동안 쐬어 준 다음 48시간 동안 동결건조하여 소수성 약물과 성장인자를 함유한 다관능성 고분자-헤파린 미셀을 제조하였다. This solution was centrifuged (1000rpm, 10 minutes) haejugo, the supernatant was taken for 30 minutes ultrasonic ssoeeo gave 48 hours lyophilized to a multi-functional polymer containing a hydrophobic drug and growth factors, while for-heparin micelle was prepared.

상기 실시예 8에서와 마찬가지로, 고분자-헤파린 미셀의 임계 미셀 농도를 확인한 결과, 도 10에 나타난 바와 같이, 다관능성 고분자-헤파린의 경우에도 낮은 농도에서 안정된 미셀을 형성함을 확인할 수 있었다. As in Example 8, the polymer was found to form a stable micelle in low concentrations in the case of heparin-checking the critical micelle concentration of the micelle heparin result, as shown in Figure 10, the multi-functional polymer.

실시예 10 Example 10

(테트로닉-PCL 공중합체의 구조 및 분자량 분석) (Structure and molecular weight analysis of Tetronic -PCL copolymer)

실시예 1에서 얻은 공중합체는 테트로닉(tetronic)과 PCL 모두 CHCl 3 에 녹기 때문에 세 가지 고분자를 CDCl 3 에 녹여 NMR(Bruker AMX-5)를 통하여 피크를 분석하여 도 6에 나타내었다. Example copolymer obtained in 1 is shown three polymer melt due to the Tetronic (tetronic) and PCL both CHCl 3 in Figure 6 to analyze the peak through NMR (Bruker AMX-5) is dissolved in CDCl 3. 3.6ppm과 1.1ppm에서 Tetronic의 -CH 2 -, -CH 3 의 특성피크 가, 1.2ppm, 1.6ppm, 2.2ppm, 및 4.1ppm에서 PCL의 -CH 2 - 피크가 나옴을 확인하였다. A, characteristic peaks of -CH 3, -CH 2 of the PCL at 1.2ppm, 1.6ppm, 2.2ppm, and 4.1ppm - - -CH 2 of Tetronic at 3.6ppm and 1.1ppm was confirmed that a peak is watering.

또한 실시예 1과 2에서 얻은 공중합체의 IR(Niolet Magma-IR 5)분석 결과는 도 7에 나타내었다. In addition, in Example 1, IR (IR Niolet Magma-5) analysis of the copolymer was determined in two are shown in Fig.

또한 상기에서 얻은 공중합체를 겔투과 크로마토그래피(GPC)를 통하여 얻은 분자량 분석 결과는 하기 표 1과 같다. Also is shown in Table I. Molecular weight analysis the copolymers obtained through the gel permeation chromatography (GPC) obtained above.

(표 1) (Table 1)

Tetronic Mn Tetronic Mn Tetronic-PCL Mn (NMR) Tetronic-PCL Mn (NMR) Tetronic-PCL Mn (GPC) Tetronic-PCL Mn (GPC) Tetronic-PCL Mw (GPC) Tetronic-PCL Mw (GPC) Tetronic-PCL PD Tetronic-PCL PD Unit ratio PEO:PPO:PCL Unit ratio PEO: PPO: PCL
18000 18000 19136 19136 20300 20300 20280 20280 0.99 0.99 248 : 80 : 20 248: 80: 20

테트로닉-폴리카프로락톤 공중합체는 중량평균 분자량이 21,000 내지 22,000이며, 여러 개의 가지 중 하나의 가지는 상기 화학식 2의 반복 단위를 가진다. Tetronic-polycaprolactone copolymer is 21,000 to about 22,000 weight average molecular weight, and has a repeating unit of the general formula (2) having one of several kinds.

실시예 11 Example 11

(테트로닉-PCL-헤파린 접합체의 구조와 도입된 헤파린의 정량 및 활성 분석) (Quantitative analysis and activity of the heparin introduced to the structure of Tetronic -PCL- heparin conjugate)

상기에서 얻은 공중합체는 헤파린이 녹는 용매가 물과 포름아미드 뿐이므로 비교를 위해 모두 D2O에 녹여 NMR 피크를 확인하여 도 9에 나타내었다. Copolymers obtained above are shown in Figure 9 to determine the NMR peak and dissolved in D2O for comparison because both heparin and the solvent is only water soluble formamide. 헤파린은 복잡한 다당류의 구조적 특성상 결합된 특이 피크는 다른 피크에 묻혀서 사라지지만, 전체적으로 확인해 보았을 때 Tetronic, PCL와 헤파린의 특성 피크 2.0ppm, 2.8ppm, 3.1ppm, 4.1ppm 및 4.2ppm가 나오고 있음을 알 수 있었다. Heparin complex structural nature of the specific peak coupling of the polysaccharide but disappear buried in another peak, seen that the Tetronic, characteristics of PCL and heparin peak 2.0ppm, 2.8ppm, 3.1ppm, 4.1ppm and 4.2ppm come out when viewed as a whole confirm could.

또한 실시예 2에서 얻은 공중합체의 NMR분석 결과는 도 8에 나타내었다. In addition, NMR analysis of the copolymer obtained in Example 2 are shown in Fig.

테트로닉-카프로락톤-헤파린 결합체는 카프로락톤과 헤파린의 카르보닐 그룹 이 각각 적외선분광분석 스펙트럼의 1750cm -1 과 1690cm -1 에서 특이적으로 나타났으며, 헤파린의 하이드록시기는 3500cm -1 에서 테트로닉과 폴리카프로락톤의 CH 결합은 2850cm -1 에서 흡수파장이 확인되었다. Tetronic-caprolactone-heparin conjugate was shown specifically in the caprolactone and the carbonyl group, each infrared spectroscopy spectrum of the heparin 1750cm -1 and 1690cm -1, hydroxyl groups of heparin Tetronic at 3500cm -1 and the CH bond of polycaprolactone is the absorption wavelength was observed at 2850cm -1.

상기에서 얻은 테트로닉-카프로락톤-헤파린 결합체에 결합되어 있는 헤파린의 정량은 하기와 같이 실시하였다. Caprolactone - - Tetronic obtained in the amount of heparin which is bound to heparin conjugates was carried out as follows.

0.02중량%의 염화나트륨 수용액에 염산을 첨가하여 0.01N HCl 용액을 제조한 다음, 상기 제조용액 500㎖에 톨루이딘 블루(Toluidine Blue) 25mg을 첨가하고 교반을 통해 0.005중량% 톨루이딘 블루 용액을 제조하였다. Hydrochloric acid was added to 0.02% by weight aqueous solution of sodium chloride to prepare a solution of 0.01N HCl was added, and then, toluidine blue (Toluidine Blue) 25mg to the prepared solution and 500㎖ through stirring to prepare a 0.005% toluidine blue solution. 헤파린을 0.02중량%의 염화나트륨 수용액에 녹여 각각 0.01㎍/㎖, 0.05㎍/㎖, 0.1㎍/㎖, 0.5㎍/㎖, 1㎍/㎖, 1.5㎍/㎖, 2㎍/㎖, 2.5㎍/㎖, 3㎍/㎖, 4㎍/㎖, 5㎍/㎖ 및 6㎍/㎖ 용액 2㎖씩을 제조하여 헤파린 표준용액을 준비하였다. 0.01㎍ / ㎖ heparin respectively were dissolved in an aqueous solution of sodium chloride of 0.02% by weight, 0.05㎍ / ㎖, 0.1㎍ / ㎖, 0.5㎍ / ㎖, 1㎍ / ㎖, 1.5㎍ / ㎖, 2㎍ / ㎖, 2.5㎍ / ㎖ , prepared ssikeul 3㎍ / ㎖, 4㎍ / ㎖, 5㎍ / ㎖ and 6㎍ / ㎖ 2㎖ solution was prepared heparin standard. 상기 다관능성 고분자 - 헤파린 결합체 20㎍을 2㎖의 염화나트륨 수용액에 용해시켜 시료 용액을 제조하였다. The polyfunctional polymer-heparin conjugate 20㎍ by dissolving sodium chloride solution 2㎖ prepare a sample solution. 각각의 헤파린 표준 용액과 시료 용액에 상기 제조한 톨루이딘 블루 용액 500㎕을 첨가한 후 살짝 교반을 하여 헤파린-톨루이딘 블루 복합체가 이루어지도록 한 다음 n-헥산을 각각 3㎖씩 첨가하여 강하게 흔들어 주었다. Was strongly shaken by a toluidine blue composite is to occur, and then each is added in a 3㎖ n- hexane-stirring gently after addition of each of the standard heparin solution and the above prepared solution of toluidine blue 500㎕ the sample solution of heparin. 기포가 생긴 층이 안정화 되도록 1분 동안 방치한 다음 아래의 수용액 층에서 각각 200㎕씩 뽑아 자외선 분광기를 통해 630㎚ 파장에서 흡광도를 분석하였다. It was allowed to stand for one minute so that the stabilization layer is caused air bubbles and then was analyzed for absorbance at a wavelength 630㎚ pulled respectively by 200㎕ in the aqueous layer below through ultraviolet spectroscopy. 앞서 준비한 헤파린 표준 용액의 흡광도와 제조된 테트로닉-폴리카프로락톤-헤파린 결합체의 흡광도를 비교 분석하여 헤파린의 함량이 0.44㎍/㎍로 높은 양의 헤파린이 도입되었음을 확인하였다. It was confirmed that the comparative analysis of the amount of heparin introduced into the high amount of heparin to 0.44㎍ / ㎍ by the absorbance of the heparin conjugate - prepared in advance with a heparin absorbance Tetronic Preparation of Standard Solution - polycaprolactone.

또한 상기에서 얻은 테트로닉-카프로락톤-헤파린 결합체에 결합되어 있는 헤파린의 활성 측정을 하기와 같이 실시하였다. Also Tetronic obtained above were performed as to the activity measurement of heparin bonded to the heparin conjugate-caprolactone.

3차 증류수에 헤파린을 녹여 각각 2㎍/㎖, 1㎍/㎖, 0.5㎍/㎖, 0.1㎍/㎖, 0.05㎍/㎖, 0.01㎍/㎖, 0.005㎍/㎖의 헤파린 표준 용액을 준비하였다. Dissolving the heparin in the distilled water were each prepared heparin standard solution of 2㎍ / ㎖, 1㎍ / ㎖, 0.5㎍ / ㎖, 0.1㎍ / ㎖, 0.05㎍ / ㎖, 0.01㎍ / ㎖, 0.005㎍ / ㎖. 테트로닉-폴리카프로락톤-헤파린 결합체는 1㎍/㎖의 농도로 준비하였다. Tetronic-polycaprolactone-heparin conjugate was prepared at a concentration of 1㎍ / ㎖. 각각의 헤파린 용액을 먼저 시험관에 넣은 후 미리 37℃로 예열해 놓은 Citracted standard plasma 100㎕와 PathromtinㄾSL 100㎕을 첨가하였다. Each of the heparin solution was first added to standard plasma after Citracted 100㎕ place by pre-heating in advance 37 ℃ and Pathromtin SL ㄾ 100㎕ placed in a test tube. 37℃ 하에서 0.025 M의 염화칼슘 용액을 100㎕ 첨가함과 동시에 시간을 재기 시작하여 응고 분석기 (coagulation analyzer, SYSMEX CA50)를 통하여 혈액이 응고되는 시간을 측정하였다. By the calcium chloride solution of 0.025 M starts recovering the time and at the same time 100㎕ added coagulation analyzer time blood coagulation through the (coagulation analyzer, CA50 SYSMEX) under 37 ℃ was measured. 앞서 준비한 헤파린 표준 용액의 응고 시간과 테트로닉-폴리카프로락톤-헤파린 결합체의 흡광도를 비교하여 헤파린의 고유한 항혈전 특성이 결합되지 않은 헤파린에 비해 얼마나 나타나는 지를 확인함으로써 결합된 헤파린의 활성을 분석한 결과 43.56% 이상의 높은 헤파린 활성을 보임을 확인하였다. Analysis of the activity of the binding heparin as compared to the absorbance of the heparin conjugate by checking how appear compared to heparin have unique antithrombotic properties of heparin unbound - prepared in advance coagulation time and Tetronic of heparin standard solution - Polycaprolactone results confirmed that show at least 43.56% higher heparin activity. 이는 종래의 헤파린 함유 고분자에 비해 많은 양의 헤파린이 도입됨과 동시에 더 높은 활성을 가지고 있음을 알 수 있었다. It was found that at the same time as a large amount of heparin introduced compared to conventional heparin-containing polymer has a higher activity.

실시예 12 Example 12

(미셀 내의 소수성 약물 탑제 효율 분석) (Hydrophobic drug tapje Efficiency in micelles)

에탄올/테트라 하이드로 퓨란 (Tetra hydrofuran, THF) 1:1 용액에 인도메타신을 각각 0.15mg/ml, 0.1mg/ml, 0.03mg/ml, 0.025mg/ml, 0.02mg/ml, 0.015mg/ml, 0.01mg/ml의 농도로 녹인 표준 용액을 준비하여 UV 스펙트럼(Ultra Visable spectrophotometer, UV-1601PC, SHIMADZU)의 319nm에서 분석하였다. Ethanol / tetrahydrofuran (Tetra hydrofuran, THF) 1: indomethacin, each put on the first solution 0.15mg / ml, 0.1mg / ml, 0.03mg / ml, 0.025mg / ml, 0.02mg / ml, 0.015mg / ml, prepare a standard solution of a concentration of 0.01mg / ml and analyzed at 319nm in UV spectrum (Ultra Visable spectrophotometer, UV-1601PC, SHIMADZU).

상기 실시예 7과 실시예 9에서 제조된 각각의 미셀을 에탄올/테트라 하이드로 퓨란 1:1 용액에 녹여 미셀 내부의 약물을 녹인 다음 주사 여과기로 여과하여 불순물을 제거한 후 마찬가지로 UV 스펙트럼으로 분석한 후 상기에서 분석한 표준용액과 비교하여 미셀 내부에 탑제된 인도메타신을 정량하였다. Example 7 and Examples have respectively the micelles prepared from 9 ethanol / tetrahydrofuran 1: After analyzing Likewise 1 dissolved within the micelle drug is dissolved in the solution, remove the following impurities by filtering the scan filter to the UV spectrum the and compared to the standard solution it was quantitatively analyzed in the indomethacin tapje put inside the micelles.

그 결과는 하기 표 2와 같으며, 소수성의 생분해성 고분자를 결합시키지 않았을 경우 보다 탑제 효율이 7 내지 8% 증가하였다. The results are the same as Table 2, tapje efficiency than did not combine the hydrophobicity of the biodegradable polymer is increased from 7 to 8%.

(표 2) (Table 2)

구분 division Tetronic 고분자 Tetronic polymers Tetronic-PCL 공중합체 Tetronic-PCL copolymer Tetronic-PCL -heparin 결합체 Tetronic-PCL -heparin combination
DLE(drug loading efficiency, %) DLE (drug loading efficiency,%) 22.2 22.2 30.7 30.7 30.9 30.9

실시예 13 Example 13

(미셀 내의 소수성 약물의 방출 실험) (Release experiment of the hydrophobic drug in the micelles)

약물이 탑제된 각각의 고분자 미셀(테트로닉 고분자(비교예), 테트로닉-PCL 공중합체(실시예 7), 및 테트로닉-PCL-헤파린(실시예 9)) 2중량%를 PBS 2㎖에 녹인 후, 분자량 50kDa의 투석막에 넣고 깨끗한 PBS 48㎖이 담겨 있는 용기에 넣는다. Each of the polymeric micelles of the drug is tapje (Tetronic polymer (comparative example), Tetronic -PCL copolymer (Example 7), and Tetronic -PCL- heparin (Example 9)) 2% by weight in PBS 2㎖ It was dissolved, placed in a container placed in a dialysis membrane with a molecular weight of 50kDa contained clean 48㎖ PBS. 37℃, 50 rpm에서 보관하면서 약물과 섞여 있는 PBS 1㎖을 각각 30분 후, 1시간 후, 2시간 후, 3시간 후, 4시간 후, 6시간 후, 10시간 후, 25시간 후, 51시간 후, 110시간 후, 125시간 후, 140시간 후에 채취해 동결 건조하였다. 37 ℃, 50 rpm 30 minutes each in PBS 1㎖ was stored mixed with the drug after, after one hour, after two hours, after 3 hours, 4 hours, 6 hours, 10 hours, after 25 hours, 51 hours, after 110 hours, 125 hours, and freeze-dried to collected after 140 hours. 상기 채취한 시료를 에탄올/THF에 녹여 상기 명시된 UV 스펙트럼을 통해 정량하였다. The collected samples was quantified through the specified UV spectrum is dissolved in ethanol / THF. 그 결과는 도 11에 나타내었다. The result is shown in Fig.

초기에 약물전달에서 주로 나타나는 터짐효과(burst effect, 약물이 초기에 많이 방출되는 현상)가 크지 않았다. Fires effects mainly appear in the drug delivery in the early (burst effect, phenomenon of drug is released initially lot) was not great.

폴리카프로락톤이 존재하는 미셀은 약물의 탑제가 많고 고분자 사슬이 길어질수록 미셀이 커지기 때문에 표면에 묻어 있는 약의 양도 많이 지게 된다. Micelles which the polycaprolactone there is a lot of drug tapje The longer the polymer chains becomes much about the amount of adhering to the surface it becomes large due to the micelles. 그래서 초기에는 테트로닉 보다 그 유도체들이 방출양이 많아지다가 하루정도가 지나게 되면 외부의 약들이 다 빠져나오고 미셀 안에 탑제된 약이 나오게 되는데 테트로닉이 폴리카프로락톤이 존재하는 유도체보다 약을 더 빨리 방출하는 것으로 확인되었다. So initially when more Tetronic its derivatives are bangchulyang a lot jidaga day about the pass outside of medicine that is out of the approximately tapje in micellar there is out out of Tetronic faster releasing weaker than derivatives that polycaprolactone exist it was confirmed that. 이는 폴리카프로락톤과 소수성 약과 소수성/소수성 결합 때문으로 약은 4일정도 서서히 방출되었다. This is a polycaprolactone and a hydrophobic drug and the hydrophobic / hydrophobic binding because drug was released gradually four days.

실시예 14 Example 14

(성장인자 결합효율) (Growth factor binding efficiency)

상기 실시예 8과 실시예 9에서 제조된 다관능성 고분자-헤파린 미셀을 PBS에 녹여 2중량% 용액을 제조한 후, bFGF 정량 키트(Quantikine Human FGF Basic Immunoassay, R&D System)를 이용하여 흡광도를 측정하여 헤파린이 결합되지 않는 샘플과 비교하여 헤파린에 의한 bFGF의 도입 정도를 확인하였다. Example 8 as in the multi-functional polymer prepared in Example 9 dissolved heparin micelles in PBS was prepared with 2 wt.% Solution, by using a bFGF quantitation kit (Quantikine Human FGF Basic Immunoassay, R & D System) to measure the absorbance compared with samples of heparin is not binding was confirmed that the introduction of the bFGF degree by the heparin. 이 bFGF의 결합효율을 하기 표 3에 나타내었다. To the coupling efficiency of the bFGF it is shown in Table 3 below.

(표 3) (Table 3)

구분 division Tetronic 고분자 Tetronic polymers Tetronic-PCL 공중합체 Tetronic-PCL copolymer Tetronic-PCL -heparin 결합체 Tetronic-PCL -heparin combination
DLE(drug loading efficiency, %) DLE (drug loading efficiency,%) 39.75 39.75 37.51 37.51 70.47 70.47

대조군에 비하여 헤파린이 결합된 테트로닉-폴리카프로락톤-헤파린 결합체가 두 배 정도의 bFGF에 대한 탑재 효율을 가짐을 확인하였다. The heparin binding compared with control Tetronic-polycaprolactone was confirmed that the heparin conjugate has a mount efficiency for bFGF of about two times. 이는 종래의 성장인자 운반체에 비해 월등히 높은 결과이다. This is much higher than for conventional growth factor carrier.

실시예 15 Example 15

(미셀에 결합된 성장 인자의 방출 실험) (Experimental release of the growth factor binding to micelles)

성장인자가 결합된 고분자 미셀 테트로닉-PCL-헤파린(실시예 8과 실시예 9)) 2중량%를 PBS 1㎖에 녹인 후, 분자량 50kDa의 투석막에 넣고 깨끗한 PBS 49㎖이 담겨 있는 용기에 넣는다. Growth factor is bonded polymeric micelle Tetronic -PCL- heparin (Example 8 and Example 9)) and then 2% by weight was dissolved in PBS 1㎖, placed in a container placed in a dialysis membrane with a molecular weight of 50kDa contained clean PBS 49㎖ . 37℃, 100rpm에서 보관하면서 약물과 섞여 있는 PBS 5㎖을 각각 하루 후, 이틀 후, 4일 후, 일주일 후, 2주일 후, 3주일 후, 한 달 후, 5주일 후, 6주일 후에 채취해 동결 건조하였다. 37 ℃, it was stored at 100rpm day after the PBS 5㎖ mixed with the drug, respectively, after two days, harvested after four days, then a week, then two weeks, then three weeks, a month later, after five weeks, six weeks after freeze-dried. 상기 채취한 시료를 깨끗한 PBS 1 ㎖에 녹여 상기 명시된 bFGF 정량 키트(Quantikine Human FGF Basic Immunoassay, R&D System)을 통해 정량하였다. It was determined through the specified bFGF quantitation kit (Quantikine Human FGF Basic Immunoassay, R & D System) dissolving the collected samples in clean PBS 1 ㎖. 그 결과는 도 12에 나타내었다. The result is shown in Fig.

초기에 약물전달에서 주로 나타나는 터짐효과(burst effect, 약물이 초기에 많이 방출되는 현상)가 없었다. There was no rupture effects mainly appear early in the drug delivery (burst effect, phenomenon of drug is released initially much).

헤파린이 존재하는 미셀은 성장인자와 이온성 결합을 많이 하고 있는데 확산과 재분배 효과로 인해 6주 동안의 긴 시간 동안 일정한 방출 속도를 가지면서 서서히 방출되었다. Micelles of heparin present are growth factors and ionic There are a lot of bonds while having a constant release rate over a long time of 6 weeks due to diffusion and redistribution effect was released slowly. 이 결과는 종래의 성장인자 혹은 단백질 운반체에 비해 상당히 장기간이다. The result is a significantly long period of time compared with the conventional growth factor or protein carrier.

본 발명의 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중중합체와 그의 헤파린 접합체는 안정적인 약물 전달체로의 미셀로 전환될 수 있으며, 그 약물은 높은 탑재효율로 지속적으로 방출할 수 있으며, 성장인자가 높은 탑재효율로 탑재될 수 있어서 생체조직 재생과 약물 치료의 동시 효과를 얻을 수 있다. Multi-functional amphipathic polymer public polymer and its heparin conjugate comprising the biodegradable polymer of the present invention can be converted into a micelle of a stable drug delivery system, the drug can be continuously released in a high mounting efficiency, a growth factor to be able to be mounted at a high efficiency can be obtained with the simultaneous effect of the living body tissue with the drug treatment.

Claims (33)

  1. 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 있어서, Multi-functional, including a biodegradable polymer according to the amphipathic polymer copolymer,
    상기 다관능성 양친매성 고분자 공중합체는, The multi-functional amphipathic polymer copolymer,
    폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 제1소수성 블록, 폴리(프로필렌옥사이드)로 구성되는 제2소수성 블록 및 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록을 포함하는 블록 공중합체 또는 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 소수성 블록과 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록을 포함하는 블록 공중합체이고, Poly biodegradable consisting of (ester) polymer in the first hydrophobic block, the block comprising a hydrophilic block consisting of a poly (propylene oxide), a second hydrophobic block and a poly (ethylene oxide) consisting of a copolymer or a poly (ester) a block copolymer comprising a hydrophilic block made of a biodegradable polymer and a hydrophobic block poly (ethylene oxide) consisting of,
    3 개 이상의 관능기를 갖는 것을 특징으로 하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체. Multi-functional amphipathic polymer copolymer comprising the three or more functional groups.
  2. 삭제 delete
  3. 삭제 delete
  4. 제1항에 있어서, According to claim 1,
    상기 다관능성 양친매성 고분자 공중합체는, The multi-functional amphipathic polymer copolymer,
    3 개 내지 8 개의 관능기를 갖는 스타형 고분자인 것을 특징으로 하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체. Multi-functional amphipathic polymer copolymer in that the star-shaped polymer having three to eight functional group, characterized.
  5. 제1항에 있어서, According to claim 1,
    상기 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체는, Multi-functional amphipathic polymer copolymer comprising the biodegradable polymer,
    하기 화학식 2 내지 6으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체: To multi-functional amphipathic polymer copolymer being selected from the group consisting of Formula 2-6:
    [화학식 2] [Formula 2]
    Figure 112005026893546-pat00008
    [화학식 3] [Formula 3]
    Figure 112005026893546-pat00009
    [화학식 4] [Formula 4]
    Figure 112005026893546-pat00010
    [화학식 5] [Formula 5]
    Figure 112005026893546-pat00011
    [화학식 6] [Chemical Formula 6]
    Figure 112005026893546-pat00012
    (상기 화학식 2 내지 6에서, (In the formula 2 to 6,
    a는 중합도로서 61 내지 62의 값을 갖고, a has a value of 61 to 62 as the degree of polymerization,
    b는 중합도로서 19 내지 20의 값을 갖고, b has a value of 19 to 20 as the degree of polymerization,
    c는 중합도로서 3 내지 21의 값을 갖고, c has a value of from 3 to 21 as the degree of polymerization,
    d는 중합도로서 10 내지 235의 값을 갖고, d has a value of from 10 to 235 as the degree of polymerization,
    e는 중합도로서 25 내지 562의 값을 갖고, e has a value of 25 to 562 as the degree of polymerization,
    f는 중합도로서 10 내지 518의 값을 갖고, f has a value of from 10 to 518 as the degree of polymerization,
    g는 중합도로서 12 내지 869의 값을 갖고, g has a value of from 12 to 869 as the degree of polymerization,
    h는 중합도로서 16 내지 465의 값을 갖고, h has a value of 16 to 465 as the degree of polymerization,
    i는 중합도로서 20 내지 375의 값을 갖고, i has a value of from 20 to 375 as the degree of polymerization,
    j는 중합도로서 16 내지 438의 값을 갖고, j has a value of 16 to 438 as the degree of polymerization,
    k는 중합도로서 20 내지 736의 값을 갖는다.) k has a value of from 20 to 736 as the degree of polymerization.)
  6. 제1항에 있어서, According to claim 1,
    상기 생분해성 고분자는, The biodegradable polymer,
    폴리락타이드, 폴리(ε-카프로락톤), 폴리(락타이드-co-글리코리드), 폴리(락타이드-co-ε-카프로락톤), 폴리(ε-카프로락톤-co-글리코리드) 및 폴리(ε-카프로락톤-co-글리코리드-co-락타이드)로 이루어진 폴리에스터군과 더불어 폴리카보네이트군, 폴리오쏘에스터군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체. Polylactide, poly (ε- caprolactone), poly (lactide glycolate -co- lead), poly (lactide -co-ε- caprolactone), poly (ε- caprolactone -co- glycoside lead) and poly (ε- caprolactone -co- glycoside lead -co- lactide) poly with polyester group consisting of carbonate group, saws poliomyelitis polyfunctional amphipathic polymer copolymer, characterized in that is selected from ester groups.
  7. 제1항에 있어서, According to claim 1,
    상기 공중합체는 폴리락타이드와 폴리에틸렌옥사이드의 공중합체인 것을 특징으로 하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체. The copolymer multifunctional amphipathic polymer copolymer, characterized in that a copolymer of polylactide and a polyethylene oxide.
  8. (a) 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 제1소수성 블록 단량체, 폴리(프로필렌옥사이드)로 구성되는 제2소수성 블록 단량체 및 폴리(에틸렌옥사이 드)로 구성되는 친수성 블록 단량체를 혼합하는 단계; (A) mixing the hydrophilic block monomer consisting of a poly (ester) a biodegradable polymer in a first hydrophobic block monomer, poly second hydrophobic block monomer and poly consisting of (propylene oxide) consisting of (ethylene oksayi DE) .; 또는 or
    폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 소수성 블록 단량체와 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록 단량체를 혼합하는 단계; Mixing the hydrophilic monomer block consisting of a poly-biodegradable polymer of hydrophobic monomer and a block of poly (ethylene oxide) consisting of (ester); And
    (b) 상기 혼합물을 110 내지 180℃의 온도 및 6 내지 20시간 동안 중합하는 단계 (B) the polymerization temperature and for 6 to 20 hours of the mixture 110 to 180 ℃
    를 포함하는 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 제조방법. The method of the multi-functional amphipathic polymer copolymer including a biodegradable polymer comprising a.
  9. 제8항에 있어서, The method of claim 8,
    상기 (a)단계는 주석계 옥토에이트(stannous octoate)가 투입되며, 그 투입량은 생분해성 고분자 단량체 1몰에 대하여 1x10 -5 내지 5x10 -2 몰로 투입되는 것을 특징으로 하는 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 제조방법. The step (a) is a tin-octoate (stannous octoate) input, the input is a multi-containing a biodegradable polymer characterized in that the input 1x10 -5 to 5x10 -2 mol per 1 mol of the biodegradable polymer monomer functional process for producing an amphipathic high molecular copolymer.
  10. 소수성 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 미셀(micelle)에 있어서, Containing the biodegradable polymer is a hydrophobic drug with a multi-functional in the micelle (micelle) of the amphipathic polymer copolymer,
    상기 다관능성 양친매성 고분자 공중합체는, The multi-functional amphipathic polymer copolymer,
    폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 제1소수성 블록, 폴리(프로필렌옥사이드)로 구성되는 제2소수성 블록 및 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록을 포함하는 블록 공중합체 또는 폴리(에스테르)로 구성되는 생분해성 고분자인 소수성 블록과 폴리(에틸렌옥사이드)로 구성되는 친수성 블록을 포함하는 블록 공중합체이고, Poly biodegradable consisting of (ester) polymer in the first hydrophobic block, the block comprising a hydrophilic block consisting of a poly (propylene oxide), a second hydrophobic block and a poly (ethylene oxide) consisting of a copolymer or a poly (ester) a block copolymer comprising a hydrophilic block made of a biodegradable polymer and a hydrophobic block poly (ethylene oxide) consisting of,
    3 개 이상의 관능기를 갖는 것을 특징으로 하는 소수성 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 미셀(micelle). The multi-functional containing the hydrophobic drug is a biodegradable polymer with which is characterized by having three or more functional groups of the amphipathic polymer copolymer micelle (micelle).
  11. 제10항에 있어서, 11. The method of claim 10,
    상기 소수성 약물은 물에 대한 용해도가 10 ㎎/㎖ 이하인 난용성 약물 중 파 클리탁셀, 케토코나졸, 이트라코나졸, 사이클로 스포린, 시사프라이드, 아세트아미노펜, 아스피린, 아세틸살리실산, 인도메타신, 나프로센, 와파린, 파파베린, 티오아벤 다졸, 미코나졸, 시나리진, 독소루비신, 오메프라졸, 콜레칼시페롤, 멜팔란, 니페디핀, 디곡신, 벤조산 트립토판, 타이로신, 페닐알라닌, 아즈트레오남, 이부프로펜, 펜옥시메틸페니실린, 탈리도마이드, 메틸테스토스테론, 프로클로르페라진, 히드로코티손, 디데옥시퓨린 뉴클레오사이드, 비타민 D2, 술폰아미드, 술포닐우레아, 파라아미노벤조산, 멜라토닌, 벤질페니실린, 클로람뷰실, 디아제핀, 디기톡신, 히드로코티손 뷰레이트, 메트로니다졸 벤조산염, 톨부타마이드, 프로스타 글란딘, 플루드로코티손, 그리 Wherein the hydrophobic drug is in a solubility of 10 ㎎ / ㎖ or less poorly soluble drugs to water wave Cleveland paclitaxel, ketoconazole, itraconazole, cycloalkyl cyclosporine, cisapride, acetaminophen, aspirin, acetylsalicylic acid, indomethacin, or pro sen, warfarin, papaverine, thio ahben imidazole, miconazole, or when lysine, doxorubicin, omeprazole, cholecalciferol, melphalan, nifedipine, digoxin, benzoic acid tryptophan, tyrosine, phenylalanine, Aztreonam, ibuprofen, phenoxy methyl penicillin, thalidomide, methyl testosterone, Pro chlor Blow Jin, hydrochloride cortisone, dideoxy purine nucleoside, vitamin D2, sulfonamide, sulfonyl urea, para-aminobenzoic acid, melatonin, benzyl penicillin, chlorambucil byusil, diazepine, digi toxin, hydrochloride cortisone view rate , metronidazole benzoate as, tolyl butanone polyimide, prostaglandins, Flood cortisone, so 세오풀빈, 미코나졸 질산염, 류코트라이엔 비포 억제제, 프로프라놀롤, 테오필린, 플러비 프로펜, 벤조산 나트륨, 벤조산, 리보플라빈, 벤조디아제핀, 페노바비탈, 글리뷰라이드, 설파이아진, 설파에틸티아디아졸, 디클로페낙 나트륨, 피니로인, 히오리다진히드로클로라이드, 브로피리민, 히드로클로로티아지드, 플로코나졸, 항생제, 소염 진통제, 마취제, 호르몬류, 고혈압 치료제, 당뇨병 치료제, 고지질증 치료제, 항바이러스제, 파킨슨병 치료제, 치매 치료제, 항 구토제, 면역 억제제, 궤양 치료제, 변비 치료제 및 항 말라리아제로 사용되는 난용성 약물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 소수성 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 미셀(micelle). Seo pulbin, miconazole nitrate, flow KOTRA two yen Before inhibitor, propranolol, theophylline, Doppler ratio of propene, sodium benzoate, benzoic acid, riboflavin, benzodiazepine, phenobarbital, articles review fluoride, seolpayi triazine, sulfamic ethyl-thiadiazole, diclofenac sodium, Fini loin, great duck chopped hydrochloride, bromo flutes min, hydrochlorothiazide thiazides, flow to Kona sol, antibiotics, anti-inflammatory analgesics, anesthetics, hormones, anti-hypertensive agent, an antidiabetic agent, notice vaginosis agents, antiviral agents, Parkinson's disease agent, Alzheimer's agents, anti-emetic, immunosuppressive agents, ulcer therapeutic agents, constipation treatment and anti-I used malaria zero-functional multi containing the hydrophobic drug is a biodegradable polymer with which being selected from the group consisting of a poorly soluble drug amphipathic polymer Aerial Michel (micelle) of the polymer.
  12. (a) 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여 서 미셀(micelle)을 형성시키는 단계; (A) a biodegradable polymer comprising a multifunctional stand amphipathic In a concentration of at least the air critical micelle concentration (critical micelle concentration) a high molecular polymer to distilled water and dissolved to form a micelle (micelle); And
    (b) 상기 미셀에 소수성 약물 용액을 투입하는 단계 (B) the input of a hydrophobic drug in the micelle solution
    를 포함하는 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 미셀(micelle) 제조방법. Containing the biodegradable polymer with the drug containing multi-functional micelles of amphipathic polymer copolymer (micelle) method.
  13. 제12항에 있어서, 13. The method of claim 12,
    상기 (b)단계의 소수성 약물 용액의 투입은 용매 증발법에 의해 실시되는 것을 특징으로 하는 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 미셀(micelle) 제조방법. Michel (micelle) The method of (b) injection of a hydrophobic drug solution in step is multi-functional containing a biodegradable polymer characterized in that the carried out by the solvent evaporation method amphipathic polymer copolymer.
  14. 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 양친매성 헤파린 접합체(conjugate). Multi-functional, including a biodegradable polymer with a heparin binding to an amphipathic polymer copolymer amphiphilic heparin conjugate (conjugate).
  15. 제14항에서, In claim 14,
    상기 헤파린은, The Heparin,
    헤파린, 재조합 헤파린(recombinant heparin), 헤파린 유도체(heparin derivative) 및 헤파린 유사체(heparin analogue)로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 양친매성 헤파린 접합체. Heparin, recombinant heparin (recombinant heparin), heparin derivatives (heparin derivative) and heparin analogs amphiphilic heparin conjugate according to claim, selected from the group consisting of (heparin analogue).
  16. (a) 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체의 다관 능기를 활성화시키는 단계; (A) multi-functional, including a biodegradable polymer shell and an activating ability of amphipathic polymer copolymer; And
    (b) 상기 활성화된 다관능성 양친매성 고분자 중합체의 다관능기에 헤파린을 결합시키는 단계 (B) coupling the heparin to the functional group of the activated multi-functional amphipathic polymer
    를 포함하는 양친매성 헤파린 접합체 제조방법. Amphiphilic heparin conjugates method comprising a.
  17. 제16항에 있어서, 17. The method of claim 16,
    상기 (b) 단계의 헤파린 결합 방법은 Heparin-binding method of the step (b) is
    공유 결합 (covalent bonding), 이온성 결합(ionic bonding), 비이온성 결합(nonionic bonding), 물리적인 흡착 (physical absorption), 또는 물리적인 혼합(physical blending)방법인 것을 특징으로 하는 양친매성 헤파린 접합체 제조방법. Covalent bonding (covalent bonding), producing an ionic bond (ionic bonding), a non-ionic bond (nonionic bonding), physical adsorption (physical absorption), or amphiphilic heparin conjugates, characterized in that the physical mixing (physical blending) method, Way.
  18. 제17항에 있어서, 18. The method of claim 17,
    상기 공유결합은 The covalent bond is
    하이드록실기(hydroxyl group), 카르복실기(carboxyl group), 아민기(amine group), 티올기(thiol group) 및 아지드기(azide group)로 이루어진 군으로부터 선택되는 반응기를 이용한 공유결합인 것을 특징으로 하는 양친매성 헤파린 접합체 제조방법. Characterized in that the hydroxyl group (hydroxyl group), a carboxyl group (carboxyl group), an amine group (amine group), thiol group (thiol group) and the azide group of a covalent bond using a reactor selected from the group consisting of: (azide group) amphiphilic heparin conjugates manufacturing method.
  19. 제17항에 있어서, 18. The method of claim 17,
    상기 공유결합은 The covalent bond is
    아미드 결합(amide bond); The amide bond (amide bond); 우레탄 결합(urethane bone)과 같은 비분해성 결합(non-degradable bond); Non-cleavable linkage such as urethane linkage (urethane bone) (non-degradable bond); 및 에스테르 결합(ester bond), 안하이드라이드(anhydride bond)과 같은 분해성 결합(degradable bond)으로 이루어진 군으로부터 선택되는 공유결합인 것을 특징으로 하는 양친매성 헤파린 접합체 제조방법. And ester bond (ester bond), anhydride amphiphilic heparin conjugate method, characterized in that the covalent bond is selected from the group consisting of cleavable linkage (degradable bond), such as (anhydride bond).
  20. 제16항에 있어서, 17. The method of claim 16,
    상기 접합체 내의 헤파린 함유량이 적어도 0.44 ㎍/㎍인 것을 특징으로 하는 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 제조방법. The biodegradable polymer includes a multi-functional, characterized in that the heparin content of at least 0.44 ㎍ / ㎍ in the conjugate amphipathic polymer heparin conjugate (conjugate) method.
  21. 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 양친매성 헤파린 접합체(conjugate)에 소수성 약물이 탑재된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체의 미셀(micelle). Michel (micelle) of the biodegradable polymer multi-functional amphipathic polymer copolymer a multi-functional heparin binding the hydrophobic drug with the amphiphilic heparin conjugate (conjugate) in the amphiphilic polymer heparin conjugate comprising a.
  22. 제21항에 있어서, 22. The method of claim 21,
    상기 소수성 약물은 물에 대한 용해도가 10 ㎎/㎖ 이하인 난용성 약물 중 파클리탁셀, 케토코나졸, 이트라코나졸, 사이클로 스포린, 시사프라이드, 아세트아미노펜, 아스피린, 아세틸살리실산, 인도메타신, 나프로센, 와파린, 파파베린, 티오아벤 다졸, 미코나졸, 시나리진, 독소루비신, 오메프라졸, 콜레칼시페롤, 멜팔란, 니페디핀, 디곡신, 벤조산 트립토판, 타이로신, 페닐알라닌, 아즈트레오남, 이부프 로펜, 펜옥시메틸페니실린, 탈리도마이드, 메틸테스토스테론, 프로클로르페라진, 히드로코티손, 디데옥시퓨린 뉴클레오사이드, 비타민 D2, 술폰아미드, 술포닐우레아, 파라아미노벤조산, 멜라토닌, 벤질페니실린, 클로람뷰실, 디아제핀, 디기톡신, 히드로코티손 뷰레이트, 메트로니다졸 벤조산염, 톨부타마이드, 프로스타 글란딘, 플루드로코티손, 그리 Wherein the hydrophobic drug has a solubility in water 10 ㎎ / ㎖ paclitaxel of less poorly soluble drugs, ketoconazole, itraconazole, cycloalkyl cyclosporine, cisapride, acetaminophen, aspirin, acetylsalicylic acid, indomethacin, or pro sen, warfarin, papaverine , thio ahben imidazole, miconazole, or when lysine, doxorubicin, omeprazole, cholecalciferol, melphalan, nifedipine, digoxin, benzoic acid tryptophan, tyrosine, phenylalanine, Aztreonam, chin program ropen, phenoxy methyl penicillin, thalidomide, methyl testosterone, Pro chlor Blow Jin, hydrochloride cortisone, dideoxy purine nucleoside, vitamin D2, sulfonamide, sulfonyl urea, para-aminobenzoic acid, melatonin, benzyl penicillin, chlorambucil byusil, diazepine, digi toxin, hydrochloride cortisone view rate , metronidazole benzoate as, tolyl butanone polyimide, prostaglandins, Flood cortisone, so 세오풀빈, 미코나졸 질산염, 류코트라이엔 비포 억제제, 프로프라놀롤, 테오필린, 플러비 프로펜, 벤조산 나트륨, 벤조산, 리보플라빈, 벤조디아제핀, 페노바비탈, 글리뷰라이드, 설파이아진, 설파에틸티아디아졸, 디클로페낙 나트륨, 피니로인, 히오리다진히드로클로라이드, 브로피리민, 히드로클로로티아지드, 플로코나졸, 항생제, 소염 진통제, 마취제, 호르몬류, 고혈압 치료제, 당뇨병 치료제, 고지질증 치료제, 항바이러스제, 파킨슨병 치료제, 치매 치료제, 항 구토제, 면역 억제제, 궤양 치료제, 변비 치료제 또는 항 말라리아제로 사용되는 난용성 약물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 소수성 약물이 탑재된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체의 미셀(micelle). Seo pulbin, miconazole nitrate, flow KOTRA two yen Before inhibitor, propranolol, theophylline, Doppler ratio of propene, sodium benzoate, benzoic acid, riboflavin, benzodiazepine, phenobarbital, articles review fluoride, seolpayi triazine, sulfamic ethyl-thiadiazole, diclofenac sodium, Fini loin, great duck chopped hydrochloride, bromo flutes min, hydrochlorothiazide thiazides, flow to Kona sol, antibiotics, anti-inflammatory analgesics, anesthetics, hormones, anti-hypertensive agent, an antidiabetic agent, notice vaginosis agents, antiviral agents, Parkinson's disease agent, Alzheimer's agents, anti-emetic, immunosuppressive agents, ulcer therapeutic agents, constipation therapeutic agent or anti-I used malaria zero-functional poly-a hydrophobic substance, characterized in that selected from the group consisting of a poorly soluble drug with amphiphilic micelles of high molecular heparin conjugate (micelle) .
  23. (a) 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여서 미셀(micelle)을 형성시키는 단계; (A) a biodegradable polymer comprising a polyfunctional contain amphipathic added at a concentration above the critical micelle concentration (critical micelle concentration) the heparin polymer conjugate in distilled water and dissolved to form a micelle (micelle); And
    (b) 상기 미셀에 소수성 약물 용액을 투입하는 단계를 포함하는 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체의 미셀(micelle) 제조방법. (B) micelles (micelle) of the multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate comprising the biodegradable polymer with the drug comprising a hydrophobic drug introduced in the micellar solution method.
  24. 제23항에 있어서, 24. The method of claim 23,
    상기 (b)단계의 소수성 약물 용액의 투입은 용매 증발법에 의해 실시되는 것을 특징으로 하는 약물이 탑재된 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체의 미셀(micelle) 제조방법. In the hydrophobic drug solution of the step (b) is a multi-functional containing the biodegradable polymer with the drug, characterized in that is carried by the solvent evaporation process method amphipathic micelle (micelle) of the polymer heparin conjugate.
  25. 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 양친매성 헤파린 접합체(conjugate)에 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle). The biodegradable multi-functional polymer comprising a growth factor bound to heparin amphiphilic conjugate (conjugate) of the heparin binding to an amphipathic polymer copolymer multifunctional amphiphilic polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle).
  26. 제25항에 있어서, 26. The method of claim 25,
    상기 성장인자는 섬유아세포성장인자(bFGF), VEGF, TGF-1을 포함하는 헤파린 결합 성장인자(HBGF, heparin binding growth factor); The growth factor is fibroblast growth factor (bFGF), VEGF, heparin binding growth factors, including TGF-1 (HBGF, heparin binding growth factor);
    Fibronectin, selectin, vitronetin을 포함하는 헤파린 결합 단백질; Heparin-binding proteins comprising the Fibronectin, selectin, vitronetin;
    PF-4, IL-8을 포함하는 헤파린 결합 케모카인(Chemokines); Heparin-binding chemokines (Chemokines) comprising a PF-4, IL-8;
    보바인 세륨 알부민(BSA), 라이소자임(Lysozyme), 알파-락탈부민(a-lactalbumin), 인슐린(Insulin), 엘-클루타민(l-glutamine)을 포함하는 각종 펩타이드, 혈장 단백질, 효소 및 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle). Into various peptides, blood plasma proteins, enzymes and hormones, including inclusion glutamate (l-glutamine) - Bordj cerium albumin (BSA), lysozyme (Lysozyme), alpha-Fractal prefecture (a-lactalbumin), insulin (Insulin), El the multi-functional growth factor is coupled, it characterized in that it is selected from the group consisting of amphiphilic polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle).
  27. (a) 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate)를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여서 미셀(micelle)을 형성시키는 단계; (A) a biodegradable polymer comprising a polyfunctional contains the amphipathic polymer heparin conjugate (conjugate) In a concentration of at least the critical micelle concentration (critical micelle concentration) and dissolved in distilled water to form micelles (micelle); And
    (b) 상기 미셀에 성장 인자를 투입하고 배양하여 헤파린과 성장인자를 결합시키는 단계 (B) coupling the heparin and growth factors by introducing a growth factor and incubated with the micelles
    를 포함하는 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle) 제조방법. The growth factor is combined multifunctional amphiphilic polymer heparin conjugate comprising the (conjugate) micelles (micelle) method.
  28. 생분해성 고분자를 포함하는 다관능성 양친매성 고분자 공중합체에 헤파린이 결합된 양친매성 헤파린 접합체(conjugate)에 소수성 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle). Multi-functional amphipathic polymer copolymer amphiphilic heparin conjugate (conjugate) the heparin is bonded to the hydrophobic drug is mounted the growth factor is combined multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle) containing a biodegradable polymer .
  29. 제28항에 있어서, 29. The method of claim 28,
    상기 소수성 약물은 물에 대한 용해도가 10 ㎎/㎖ 이하인 난용성 약물 중 파클리탁셀, 케토코나졸, 이트라코나졸, 사이클로 스포린, 시사프라이드, 아세트아미노펜, 아스피린, 아세틸살리실산, 인도메타신, 나프로센, 와파린, 파파베린, 티오아벤 다졸, 미코나졸, 시나리진, 독소루비신, 오메프라졸, 콜레칼시페롤, 멜팔란, 니페디핀, 디곡신, 벤조산 트립토판, 타이로신, 페닐알라닌, 아즈트레오남, 이부프로펜, 펜옥시메틸페니실린, 탈리도마이드, 메틸테스토스테론, 프로클로르페라진, 히드로코티손, 디데옥시퓨린 뉴클레오사이드, 비타민 D2, 술폰아미드, 술포닐우레 아, 파라아미노벤조산, 멜라토닌, 벤질페니실린, 클로람뷰실, 디아제핀, 디기톡신, 히드로코티손 뷰레이트, 메트로니다졸 벤조산염, 톨부타마이드, 프로스타 글란딘, 플루드로코티손, 그리 Wherein the hydrophobic drug has a solubility in water 10 ㎎ / ㎖ paclitaxel of less poorly soluble drugs, ketoconazole, itraconazole, cycloalkyl cyclosporine, cisapride, acetaminophen, aspirin, acetylsalicylic acid, indomethacin, or pro sen, warfarin, papaverine , thio ahben imidazole, miconazole, or when lysine, doxorubicin, omeprazole, cholecalciferol, melphalan, nifedipine, digoxin, benzoic acid tryptophan, tyrosine, phenylalanine, Aztreonam, ibuprofen, phenoxy methyl penicillin, thalidomide, methyl testosterone, Pro chlor Blow Jin, hydrochloride cortisone, dideoxy purine nucleoside, vitamin D2, sulfonamide, sulfonyl urea, para-aminobenzoic acid, melatonin, benzyl penicillin, chlorambucil byusil, diazepine, digi toxin, hydrochloride cortisone view rate, metronidazole benzoate, tolyl butanone polyimide, prostaglandins, cortisone to Flood, so 세오풀빈, 미코나졸 질산염, 류코트라이엔 비포 억제제, 프로프라놀롤, 테오필린, 플러비 프로펜, 벤조산 나트륨, 벤조산, 리보플라빈, 벤조디아제핀, 페노바비탈, 글리뷰라이드, 설파이아진, 설파에틸티아디아졸, 디클로페낙 나트륨, 피니로인, 히오리다진히드로클로라이드, 브로피리민, 히드로클로로티아지드, 플로코나졸, 항생제, 소염 진통제, 마취제, 호르몬류, 고혈압 치료제, 당뇨병 치료제, 고지질증 치료제, 항바이러스제, 파킨슨병 치료제, 치매 치료제, 항 구토제, 면역 억제제, 궤양 치료제, 변비 치료제 또는 항 말라리아제로 사용되는 난용성 약물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 소수성 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle). Seo pulbin, miconazole nitrate, flow KOTRA two yen Before inhibitor, propranolol, theophylline, Doppler ratio of propene, sodium benzoate, benzoic acid, riboflavin, benzodiazepine, phenobarbital, articles review fluoride, seolpayi triazine, sulfamic ethyl-thiadiazole, diclofenac sodium, Fini loin, great duck chopped hydrochloride, bromo flutes min, hydrochlorothiazide thiazides, flow to Kona sol, antibiotics, anti-inflammatory analgesics, anesthetics, hormones, anti-hypertensive agent, an antidiabetic agent, notice vaginosis agents, antiviral agents, Parkinson's disease agent, Alzheimer's agents, anti-emetic, immunosuppressive agents, ulcer therapeutic agents, constipation therapeutic agent or anti-I used malarial agent is a hydrophobic drug, characterized in that selected from the group consisting of a poorly soluble drug and with the growth factor is combined multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle).
  30. 제28항에 있어서, 29. The method of claim 28,
    상기 성장인자가 섬유아세포성장인자(bFGF), VEGF, TGF-1을 포함하는 헤파린 결합 성장인자(HBGF, heparin binding growth factor); The growth factor is fibroblast growth factor (bFGF), VEGF, heparin binding growth factors, including TGF-1 (HBGF, heparin binding growth factor);
    Fibronectin, selectin, vitronetin을 포함하는 헤파린 결합 단백질; Heparin-binding proteins comprising the Fibronectin, selectin, vitronetin;
    PF-4, IL-8을 포함하는 헤파린 결합 케모카인(Chemokines); Heparin-binding chemokines (Chemokines) comprising a PF-4, IL-8;
    보바인 세륨 알부민(BSA), 라이소자임(Lysozyme), 알파-락탈부민(a-lactalbumin), 인슐린(Insulin), 엘-클루타민(l-glutamine)을 포함하는 각종 펩타이드, 혈장 단백 질, 효소 및 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택된 것을 특징으로 하는 소수성 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle). Bordj cerium albumin (BSA), lysozyme (Lysozyme), alpha-Fractal prefecture (a-lactalbumin), insulin (Insulin), El-Inclusion vitamin various peptides, including (l-glutamine), plasma proteins, enzymes and hormones hydrophobic drug is a growth factor is combined with multi-functional, it characterized in that it is selected from the group consisting of amphiphilic polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle).
  31. (a) 생분해성 고분자가 포함된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체를 증류수에 임계미셀 농도(critical micelle concentration) 이상의 농도로 투입하고 녹여서 미셀(micelle)을 형성시키는 단계; (A) a biodegradable polymer comprising a polyfunctional contain amphipathic added at a concentration above the critical micelle concentration (critical micelle concentration) the heparin polymer conjugate in distilled water and dissolved to form a micelle (micelle); And
    (b) 상기 (a)단계의 미셀에 소수성 약물 용액을 투입하고 성장 인자를 투입하여 배양하는 단계 (B) In the step of hydrophobic drug solution in the micelles of step (a) and cultured In the growth factor
    를 포함하는 소수성 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle) 제조방법. Hydrophobic drug is a growth factor is combined with multi-functional amphipathic polymer heparin conjugate (conjugate) comprising a micelle (micelle) method.
  32. 제31항에 있어서, 32. The method of claim 31,
    상기 (b)단계의 소수성 약물 용액의 투입은 용매 증발법에 의해 실시되는 것을 특징으로 하는 소수성 약물이 탑재되고 성장인자가 결합된 다관능성 양친매성 고분자 헤파린 접합체(conjugate) 미셀(micelle) 제조방법. In the hydrophobic drug in step (b) the solution is a hydrophobic drug, characterized in that is carried by a solvent evaporation process is mounted growth factor is a combined multi-functional amphipathic method for producing a polymer heparin conjugate (conjugate) micelles (micelle).
  33. 제10항, 제21항, 제25항 또는 제28항 기재의 미셀을 포함하는 주입형 생체재료, 세포, 또는 약물 전달체. Claim 10, claim 21, claim 25 or injection-type biological material containing micelles of 28, wherein the substrate, a cell, or a drug delivery system.
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